전제:
주베르 증후군(JBTS)은 주로 상염색체 열성으로 유전되는 질환으로, 특징적인 중간뇌-후뇌 및 소뇌 기형, 안구운동실행불능증, 불규칙한 호흡, 발달지연, 운동실조를 특징으로 한다. JBTS는 유전적으로 이질적인 섬모병증(ciliopathy)이다. 우리는 프랑스계 캐나다인(FC) 인구에서 JBTS와 관련된 유전적 양상을 규명하고자 하였다. 우리는 35가족의 43명의 FC JBTS 대상자들을 표적 및 엑솜 시퀀싱을 결합하여 연구하였다. 우리는 한 명을 제외한 모든 대상자에서 이전에 JBTS와 관련된 것으로 알려진 유전자들의 병원성(32가족) 또는 잠재적 병원성(2가족) 변이를 확인하였다. 나머지 한 사례에서는 CEP104의 동종접합 스플라이스 부위 돌연변이(c.735+2T>C)를 발견하였다. 흥미롭게도, 우리는 CEP104에 돌연변이가 있는 두 명의 추가적인 프랑스계 캐나다인이 아닌 JBTS 대상자를 확인하였다. 한 대상자는 모계 유전된 무의미돌연변이(nonsense mutation, c.496C>T [p.Arg166*])와 새로 발생한 스플라이스 부위 돌연변이(c.2572-2A>G)를 가지고 있었으며, 다른 대상자는 CEP104의 동종접합 프레임시프트 돌연변이(frameshift mutation, c.1328_1329insT [p.Tyr444fs*3])를 가지고 있었다. 이전 연구들은 CEP104가 섬모발생 동안 어미 중심체에서 일차 섬모의 끝으로 이동함을 보여주었다. 망막색소상피(RPE1) 세포에서 CEP104의 기능 억제는 섬모형성에 심각한 결함을 초래하였다. 이러한 관찰 결과는 CEP104가 어미 중심체를 섬모 기저체로 전환하는 과정을 조절함으로써 섬모 형성 초기에 작용함을 시사한다.

가설:
우리는 프랑스계 캐나다인 JBTS가 CEP104 유전자의 돌연변이에 의해 발생한다고 결론 내렸다.


전제:
RET 유전자의 돌연변이와 다형성은 히르슈스프룽병(HSCR)의 주요 원인입니다. 이론적으로, 유전적으로 결정된 질병의 새로운 증상이 있는 모든 진정한 이형접합 환자는 어느 정도의 유전적 모자이크성을 가진 부모를 두어야 합니다. 그러나 현재까지 HSCR에서 RET 유전자의 유전적 모자이크성은 보고된 바가 없습니다. 이에 우리는 HSCR 환자의 부모에서 RET 유전자의 유전적 모자이크성을 분석하기 위해 RET 유전자에 돌연변이가 있는 가족을 조사했습니다. HSCR 환자와 그 가족 및 부모로부터 채취한 혈액 샘플을 통해 RET 코딩 영역의 시퀀싱을 수행했습니다. 125개의 HSCR 가족 중 RET 돌연변이를 가진 33개 가족을 분석했습니다. 그 결과, 한 가족에서 RET 유전자의 코돈 117/118에 있는 연속된 네 개의 시토신 중 하나가 소실된 프레임시프트 돌연변이(c.352delC)가 확인되었고, 이는 단백질의 프레임시프트 돌연변이(p.Leu118Cysfs*105)를 유발하여 두 형제에게 영향을 미쳤습니다. 증상이 없는 아버지의 혈액 샘플에서 이 돌연변이의 유전적 모자이크성이 발견되었으며, 침과 모근에서 채취한 두 개의 독립적인 샘플에서 추가 확인되었습니다. 피크 높이의 정량화와 정상 및 돌연변이 플라스미드 DNA의 다양한 혼합물과 비교로 이 돌연변이는 초기 배아기 4~8세포 단계에서 발생했을 가능성이 제시되었습니다.

가설:
우리는 환자의 부모에게서 HSCR을 유발한 RET 유전자의 프레임시프트 돌연변이를 확인했습니다.


전제:
마이크로RNA(miRNA)는 표적 mRNA의 번역 억제를 통해 다양한 질병의 진행과 억제에 관여합니다. 따라서 마이크로RNA 생합성의 변화는 여러 질병을 유발합니다. 핵 인자 90(NF90)-NF45 복합체는 miRNA 생합성의 음성 조절자로 알려져 있습니다.
본 연구에서 우리는 성체기에 NF90-NF45 이중 형질전환(dbTg) 쥐가 골격근 위축과 중심핵 근섬유를 발달시킨다는 것을 보여주었습니다.
이어서, 근육 성숙을 촉진하는 miR-133a를 포함한 근원성 miR-133a의 수준이 야생형 쥐에 비해 NF90-NF45 dbTg 쥐의 골격근에서 현저히 감소했음을 발견했습니다. 그러나 pri-miRNA 수준은 NF90-NF45 dbTg 쥐에서 분명히 증가했습니다.
이 결과는 NF90-NF45 복합체가 pri-miRNA 처리 억제를 통해 miRNA 생성을 억제했음을 나타냈습니다. 이 발견은 NF90-NF45가 pri-miRNA에 결합함으로써 pri-miR-133a-1의 처리가 억제되었다는 사실로 뒷받침되었습니다.
마지막으로, 중심핵 근병증의 원인 유전자이자 동시에 miR-133a의 표적인 다이나민 2의 수준이 NF90-NF45 dbTg 마우스의 골격근에서 증가했습니다.

가설:
종합적으로, 우리는 생체 내에서 근육병증 복합체가 근육병증에 의해 유도된 miR-133a 발현 감소를 통해 다이나민 2 발현 증가하면서  중심핵 근병증NF90-NF45 을 유도한다고 결론 내립니다.


전제:
기존의 폐동맥고혈압(PH)은 기능성 승모판 역류(FMR)에 대한 외과적 승모판 수리 후 불량한 예후와 관련이 있습니다. 그러나 MitraClip 치료에 대한 임상적 영향은 아직 불명확합니다. 따라서 이 연구의 목적은 FMR 환자의 MitraClip 치료에 대한 기존 PH의 영향을 평가하는 것이었습니다. FMR이 있고 MitraClip 시술을 받은 연속적인 91명의 환자를 대상으로 연구했습니다. 그들은 폐동맥 수축기 압력을 기준으로 두 그룹으로 나뉘었습니다: PH 그룹(n = 48)과 비PH 그룹(n = 43). PH는 도플러 심장초음파 검사를 사용하여 폐동맥 수축기 압력이 >50 mm Hg인 경우로 정의되었습니다. 시술 성공률(2등급 이하의 승모판 역류 감소로 정의됨)과 30일 사망률은 두 그룹에서 비슷했습니다. 12개월 후, 뉴욕 심장협회 기능 등급(NYHA)은 PH 그룹(2.9%에서 94.3%로)과 비PH 그룹(9.4%에서 96.9%로) 대부분의 환자에서 I 또는 II 등급으로 향상되었습니다. PH 그룹의 평균 폐동맥 수축기 압력은 초기값에서 크게 감소했지만 비PH 그룹보다 여전히 높았습니다(50.8 ± 15.3 대 36.7 ± 11.6 mm Hg, p <0.001). 평균 25.0 ± 16.9개월의 추적 관찰 후, Kaplan-Meier 분석은 PH 그룹에서 모든 원인에 의한 사망률이 유의하게 높음을 보여주었습니다. Cox 회귀 분석에서, 기존 PH는 모든 원인에 의한 사망률의 가장 강력한 예측 인자로 나타났습니다(위험비 3.731, 95% 신뢰구간 1.653에서 8.475, p = 0.002).

가설:
결론적으로, MitraClip 치료는 PH 그룹과 비PH 그룹 모두에서 FMR을 감소시키고 증상을 완화하며 우수한 초기 안전성을 보였습니다.


전제:
라임 심장염의 특성을 보다 명확히 정의하기 위해, 주요 심장 증상이 고도 방실 차단인 라임병 환자를 대상으로 전기생리학적 검사와 심내막 생검을 실시했다. 심장 내 기록에서는 히스 속 상부 차단과 완전한 이탈 기전의 부재가 관찰되었습니다. 갈륨-67 스캔에서는 심근 섭취가 나타났고, 우심실 심내막 생검에서는 활성 림프구성 심근염이 확인되었습니다. 한 생검 표본에서 나선균 유기체와 일치하는 구조가 확인되었습니다.

가설:
갈륨-67 영상으로 제안되고 심내막 생검으로 확인된 바와 같이, 라임병이 활성 심근염을 유발할 수 있다고 결론을 내렸습니다.


전제:
관상동맥질환과 위식도역류질환은 흔히 발생하는 질환이므로 동시에 존재할 수 있지만, 한 질환의 존재가 다른 질환에 영향을 미치는지는 알려져 있지 않다. 우리는 37명의 환자를 대상으로 혈압, 심박수, 12유도 심전도 모니터링을 병행하면서 식도 산 관류 검사를 수행했다. 이 중 25명은 혈관조영술로 확인된 관상동맥질환 환자였고, 12명은 정상 관상동맥을 가진 환자였다. 심근 부하의 지표로 심박수-혈압 곱(rate-pressure product)을 계산했다. 산 관류 중 흉통이 발생한 관상동맥질환 환자에서, 심박수-혈압 곱은 기저치 10.0 ± 1.0 x 10^3 (평균 ± 표준오차)에서 15.2 ± 1.5 x 10^3 (p < 0.001)로 유의하게 증가했으며, 9명 중 3명의 환자에서 동시에 심전도상 심근 허혈의 증거가 나타났다. 또한, 병력상 위식도역류 증상이 거의 없거나 없었던 관상동맥질환 환자 중 64%가 산 관류 검사에서 양성 반응을 보였다. 식도 산 관류 중 통증을 경험한 관상동맥질환 환자의 56%는 이 통증을 평소의 협심증과 구별할 수 없었다.

가설:
결론적으로, 관상동맥질환 환자에서 산 관류(위산의 식도 관류, 그리고 아마도 위식도역류)에 의해 유발된 흉통이 심박수-혈압 곱을 증가시키고, 심근 허혈을 유발할 수 있다고 결론짓는다.


전제:
이 연구는 동시 관상동맥 혈관조영술과 비교하여 정맥 내 에르고노빈 투여 후 비침습적으로 관상동맥 연축을 탐지하는 데 있어 탈륨 영상과 심전도 모니터링의 민감도를 결정하기 위해 수행되었다. 경미한 관상동맥질환과 흉통이 있는 32명의 환자들이 12-리드 심전도 모니터링, 탈륨 영상, 그리고 0.05, 0.1, 0.2, 0.3 mg의 에르고노빈을 5분 간격으로 또는 흉통이 발생할 때까지 투여한 후 관상동맥 조영술을 받았다.

마지막 에르고노빈 투여 1분 후, 2.5 밀리큐리(mCi)의 탈륨-201을 정맥 주사하고, 최종 심전도를 기록하고 반복 관상동맥 조영술을 수행했다. 탈륨 주사 후 10분 이내에 40도와 70도 좌전사위 및 전면 투사에서 영상을 촬영했다. 심전도, 탈륨 연구, 관상동맥 조영상은 맹검으로 판독되었고 결과를 비교했다.

심전도, 혈관조영상, 탈륨 연구는 각각 다음과 같은 경우 양성으로 판독되었다:
- 1 mm 이상의 ST 분절 상승, 하강, 또는 T파 역전
- 50% 이상의 혈관 협착
- 가역적 관류결손(perfusion defect)

5명의 환자는 카테터 유도 연축, 최적화되지 않은 탈륨 연구, 또는 프로토콜 위반으로 인해 분석에서 제외되었다. 분석에 포함된 27명의 환자 중, 6명은 흉통이 있었고, 5명은 혈관 조영술 양성, 5명은 탈륨 연구 양성, 1명은 심전도 양성이었다. 탈륨 대 심전도 모니터링의 민감도는 80% 대 25%였고, 정확도는 92% 대 80%였다.

가설:
결론적으로, 심장 탈륨 영상이 심전도에 비해 정확도의 손실 없이 에르고노빈-유발 관상동맥연축의 비침습적 검출을 크게 향상시킨다.


전제:
24시간 활동 중 모니터링(AM) 동안 발생하는 주요 부정맥(ARS)과 증상(SX)의 상관관계를 어지러움이나 실신으로 의뢰된 환자 그룹에서 조사하였다. 활동과 증상에 대한 충분한 일지를 작성한 25세에서 82세 사이의 연속된 98명의 환자가 포함되었다. 주요 부정맥으로 간주된 것은 심실 및 상심실성 이소성 박동 2, 3, 4등급(Lown 분류), 동방정지 및 차단, 방실차단, 그리고 분당 40회 이하의 동서맥이었다. 모든 환자가 어지러움 및 실신으로 의뢰되었지만, 오직 41명(42%)의 환자만이 기록 기간 동안 증상을 경험했다. 63명(64%)에서 주요 부정맥이 기록되었다. 증상이 있는 그룹과 없는 그룹 간의 부정맥 발생률이나 유형에 통계적으로 유의한 차이는 없었다(χ2 = 1.64). 주요 부정맥과 기록된 증상이 모두 있는 23명 중, 증상과 부정맥이 동시에 발생한 경우는 단 2명에 불과했다.

가설:
24시간 활동 모니터링 중 증상의 존재가 주요 부정맥 발생 가능성을 증가시키지 않는다는 결론을 내렸다.


전제:
인플루엔자로 유발된 천식의 시간 경과를 연구하기 위해, 우리는  경미한 호흡기 증상이 있는 8세에서 12세 사이의 천식 아동 20명을 대상으로 발병 5일 전부터 10일 후까지의 FEV1(1초간 노력성 호기량)을 후향적으로 조사했다. 인플루엔자 감염은 혈청 보체 고정 역가가 최소 4배 이상 상승한 것으로 확인되었다. 20명의 환자 중 15명이 급성기 동안 기준치에서 20퍼센트 이상 FEV1이 감소했다. 잠복기 동안 FEV1이 감소한 한 명을 제외하고, 15명의 환자에서 FEV1은 발병과 함께 감소하기 시작했다. 둘째 날에는 계속해서 감소하여 FEV1 감소의 평균(+/- 표준편차)이 최대치인 30.3 +/- 10.9 %에 도달했다. 셋째 날부터 개선되기 시작하여 발병 후 7일에서 10일 사이에 10%이내 수준으로 회복되었다.

가설:
우리는 인플루엔자로 유발된 천식이 질병 발병 후 첫 2일 동안 계속해서 악화될 수 있으며 회복에는 최소 7일이 필요할 수 있다는 결론을 내린다.


전제:
우리는 기도에서 단백질분해효소 활성화 수용체-2(PAR(2))의 활성화가 동시에 흡입된 항원에 대한 알레르기 감작으로 이어져 PAR(2)가 천식의 병인에 관여함을 보여주었다. 많은 단백질분해효소 활성을 가진 공기 알레르겐이 PAR(2)를 활성화시킨다. 공기 알레르겐에 대한 알레르기 감작에서 PAR(2)의 역할을 연구하기 위해, 우리는 바퀴벌레 단백질에 대한 점막 감작의 쥐 모델을 개발했다. 우리는 세린 단백질분해효소 활성을 가진 자연 알레르겐에 의한 기도에서의 PAR(2) 활성화가 알레르기 감작에 중요한 역할을 한다고 가설을 세웠다. 바퀴벌레 추출물(CE)을 BALB/c 쥐에게 5일 연속으로 비강 내 투여하고(감작 단계) 일주일 후 4일 더 투여했다(유발 단계). 기도과민반응(AHR)과 알레르기성 기도 염증은 마지막 유발 후 평가되었다. PAR(2)의 역할을 연구하기 위해, 감작 단계 동안 CE를 투여 전에 쥐들에게 수용체 차단 항-PAR(2) 항체를 비강 내로 노출시켰다. CE에 대한 점막 노출은 호산구성 알레르기성 기도 염증, AHR, 그리고 바퀴벌레 특이 IgG1을 유도했다. 열 비활성화되거나 대두 트립신 억제제로 처리된 CE는 이러한 효과를 유도하지 못했으며, 이는 단백질분해효소 활성이 중요한 역할을 한다는 것을 나타낸다. 감작 단계 동안 항-PAR(2) 차단 항체를 사용하면 알레르기성 기도 염증이 완전히 억제되고 AHR과 바퀴벌레 특이 IgG1의 생성도 감소했다. CE에 의한 PAR(2) 활성화는 기능적 TLR4가 없는 경우에도 알레르기 감작에 대한 면역보조제 역할을 한다.

가설:
결론적으로, 혈관 인자는 알레르기성 기도 염증의 마우스 모델에서 PAR(2) 의존적인 알레르기성 기도 감작을 유도한다.


전제:
건조한 기침은 ACE 억제제(ACEI) 사용의 가장 흔한 제한 요인이다. ACEI에 의해 기관지 상피 세포에서 생성되는 NO는 염증을 촉진하는 물질이며, 그 생성량이 증가한다. 우리는 무작위 이중 맹검 위약 대조 시험을 통해 NO 합성을 억제하는 철분 보충이 ACEI 사용과 관련된 기침을 감소시킬 수 있다는 가설을 검증하였다. 연구 대상은 ACEI에 의해 기침이 발생한 19명의 환자였다. 2주간의 관찰 기간 후, 이들은 매일 아침 256mg의 황산철 정제를 투여받는 철분군 또는 위약을 투여받는 위약군으로 무작위 배정되었고, 치료 기간은 4주였다. 연구 대상자들은 매일 기침의 심각도를 0에서 4까지 평가하여 기침 일지를 작성하도록 요청받았다. 관찰 기간과 치료 기간의 마지막 주 동안 평균 기침 점수는 철분군에서 각각 3.07±0.70 및 1.69±1.10이었고, 위약군에서는 각각 2.57±0.80 및 2.35±1.22로 나타났다. 철분 보충군에서 기침 점수가 유의미하게 감소했으며(P<0.01), 위약군에서는 그러한 감소가 관찰되지 않았다. 철분군의 3명의 대상자는 거의 완전한 기침 소실을 보였다. 두 그룹 모두에서 실험실 데이터에 유의미한 변화는 관찰되지 않았다.

가설:
결론적으로, 철분 보충은 ACEI 유발 기침을 성공적으로 감소시킨다.


전제:
급성 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 유발 기관지염은 입원 후에도 지속되는 호흡기 증상과 관련이 있는 경우가 많습니다. 현재까지 RSV 유발 기관지염의 증상을 평가하는 데 있어 검증된 객관적 측정 도구는 없습니다. 우리는 급성 RSV 후 증상과 의료 이용과 관련된 기관지염 보호자 일기(BDC)의 신뢰성, 타당성, 반응성을 보고합니다. BCD는 네 가지 증상(주간 기침, 쌕쌕거림, 호흡 곤란, 야간 기침), 의료 이용, 그리고 폐 증상 악화 시 증상 완화제를 측정합니다. 급성 RSV 후 치료를 위한 몬테루카스트 무작위 이중 맹검 위약 대조 연구의 4주 치료 기간 데이터를 활용하여 신뢰성(내적 일관성 및 검사-재검사 신뢰도), 구성 타당도(횡단적 및 종단적 상관관계), 판별 타당도(알려진 집단 분석), 반응성을 평가했습니다. 이 연구의 주요 결과는 무증상 일 비율(SFD)였으며, 이차 결과는 복합 증상 점수(CSS; 주간 기침, 쌕쌕거림, 호흡 곤란의 평균)였습니다. 크론바흐 알파 값이 0.85로, 네 가지 증상이 내적 일관성을 지녀 단일 차원 척도 구조를 지지함을 나타냈습니다. SFD 비율과 CSS에 대한 검사-재검사 신뢰도는 권장 기준인 0.70을 초과했습니다. 횡단적 및 종단적 상관관계는 상당하고 통계적으로 유의미하여 구성 타당도를 입증했습니다. 가설로 제시된 알려진 집단 차이는 예상된 방향으로 통계적으로 유의미했습니다. 반응성 분석에서는 SFD 비율의 중간 효과 크기를 나타냈습니다.

가설:
결론적으로, BCD는 RSV 유발 급성 후 기관지염 증상을 평가하는 유효하고 신뢰할 수 있으며 반응성이 있는 도구로, 중간 효과 크기를 측정하고 치료 반응성을 보여줍니다.


전제:
기도벽 재형성은 천식에서 확립된 병리학적 특징입니다. 그 원인은 명확히 밝혀지지 않았으나, 관련성이 있는 매개체 중 하나로 전환성 성장인자-베타 1(TGF-베타 1)이 제안됩니다. 우리는 임상적으로 안정적인 아토피성 천식 환자와 건강한 대조군의 기관지폐포 세척(BAL)액에서 면역반응성 TGF-베타 1의 농도를 측정했습니다. 또한, 구역성 기관지 유발 모델을 사용하여 알레르겐 노출이 기도 내 TGF-베타 1 방출에 미치는 영향을 조사하였으며, 기관지내 알레르겐 및 위약 생리식염수 투여 후 두 시점에서 BAL을 수행했습니다. TGF-베타 1의 기저 농도는 천식 환자에서 대조군보다 유의미하게 높았습니다.(중앙값 8.0 대 5.5 pg/ml, p = 0.027), 구역성 기관지 유발 후 10분 시점에서는 알레르겐 및 생리식염수 투여 부위에서의 TGF-베타 1 농도에 유의한 차이가 없었지만(31.3 대 25.0 pg/ml, p = 0.78), 24시간 후에는 알레르겐 투여 부위에서 TGF-베타 1 농도가 유의하게 더 높았습니다(46.0 대 21.5 pg/ml, p = 0.017).

가설:
결론적으로, 기도 내 TGF-베타 1의 기저 수치는 아토피성 천식 환자에서 증가되어 있으며, 이러한 수치는 알레르겐 노출에 반응하여 더욱 증가하는 것으로 나타났습니다.


전제:
우리는 이전 연구에서 양에서 지속적인 운동이 시작된 후 폐혈관 저항이 빠르게 감소하고, 이어서 느리고 작은 두 번째 혈관 확장이 발생함을 보여주었습니다. 두 번째 단계는 알파 및 베타 아드레날린 수용체의 활성화에 의해 부분적으로 조절됩니다. 우리는 운동 중 베타 아드레날린 수용체 차단에 의해 유도된 폐혈관 수축에 흡입 일산화질소(NO; 40 ppm)와 정맥 주사한 니트로글리세린이 미치는 영향을 조사했습니다.대응 연구에서, 우리는 8마리의 양을 트레드밀에서 4분 동안 시속 4마일의 일정한 속도로 운동시키고, 베타 수용체 차단(프로프라놀롤, 1 mg 정맥 주사) 상태에서 40 ppm의 흡입 NO 또는 니트로글리세린의 지속 주입(3.2-4.0 μg·kg⁻¹·min⁻¹)과 함께 또는 없이 혈역학적 반응을 측정했습니다.  베타 차단제는 안정 상태 운동(40-240초) 동안 차단되지 않은 상태보다 높은 폐혈관 저항을 초래했다. 두 번째 운동 단계에서의 폐혈관 저항 감소는 베타 차단 상태(13-16%)에서 대조군 운동(26-30%)보다 적었습니다. 흡입 NO와 니트로글리세린은 베타 차단 관련 폐혈관 수축을 대조군 운동 수준으로 되돌렸습니다. 흡입 NO와 정맥 주사한 니트로글리세린은 또한 안정 상태에서 정맥 주사한 페닐에프린에 의해 유도된 폐혈관 수축을 되돌렸습니다.

가설:
결론적으로, 가스 흡입 또는 니트로소 화합물을 통해 전달된 외인성 아피제닌은 양에서 운동 중 알파 수용체 활성화로 인한 폐혈관 수축에 저항하고 이를 완전히 역전시킵니다.


전제:
내인성과 흡입 일산화질소(NO)의 작용 부위가 저산소성 폐혈관수축(HPV) 동안 재확인되었습니다. 21마리의 성체 고양이 폐를 제자리에서 자가혈액으로 구역 3(zone 3) 조건에서 관류했습니다. 모세혈관 압력은 이중 폐쇄 기법(double-occlusion technique)으로 측정되었고, 직경 70-100 마이크론의 세동맥과 세정맥 압력은 서보-널 미세천자 기법(servo-null micropuncture technique)을 사용하여 정상 산소(FiO2 = 0.3)와 저산소(FiO2 = 0.02) 상태에서 측정했습니다. NO 합성효소 억제제인 NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, 10 mg/kg)와 흡입 NO(5-100 ppm)의 효과도 평가되었습니다. 정상산소 상태에서 관류액의 PO2는 187.6 ± 5.3 mmHg였으나 저산소 상태에서는 25.7 ± 1.3 mmHg로 감소했고, 저산소 상태에서 50 ppm NO를 투여한 경우에는 20.8 ± 2.2 mmHg로 더 감소했습니다(p < 0.05, 저산소 상태와 비교). 비처리 폐와 L-NAME 처리된 폐에서 저산소 자극에 따른 폐혈관 압력 감소는 각각 4.8 ± 1.0 cmH2O와 9.1 ± 1.4 cmH2O로 나타났습니다(p < 0.05). L-NAME은 정맥 구간의 저산소성 수축을 유의하게 증가시켰습니다. 호기 NO 농도는 정상산소 상태에서 13 ± 4 ppb였으나 저산소 상태에서 18 ± 4 ppb로 증가했습니다(p < 0.10). 흡입 NO는 용량 의존적으로 폐동맥압과 모세혈관압을 모두 감소시켜 저산소성 폐혈관수축을 완화했습니다. 폐정맥은 동맥보다 흡입 NO에 더 민감하게 반응했습니다. 흡입 NO(50 ppm)는 직경 70에서 100 마이크론 미만의 혈관을 39%(p < 0.05) 확장시켰고, 직경 100 마이크론 이상의 세정맥을 26%(p < 0.05) 확장시켰으나, 직경 100 마이크론 이상의 세동맥은 유의한 확장을 보이지 않았습니다(11%). 흡입 NO는 습중량 대 건조중량의 비율에 유의한 변화를 일으키지 않았습니다.

가설:
결론적으로, 내인성과 흡입 NO는 모두 저산소성 폐혈관수축을 완화하며, 특히 폐정맥의 유의한 확장을 유도합니다.


전제:
서구 국가에서 심장 질환은 임신 중 산모 사망의 주요 원인이다. 기존 심장 질환이 있는 환자에서 임신이 심장에 미치는 영향을 연구하기는 어렵다. 실험 연구가 부족하기 때문에, 우리는 횡행 대동맥 협착(TAC)으로 인한 압력 과부하가 수태 능력, 임신 결과, 그리고 모체의 심장 구조와 기능에 미치는 영향을 쥐에서 조사했다. 4주간의 TAC는 좌심실(LV) 비대와 기능장애를 유발했으며, 현저한 간질 섬유증, 모세혈관 밀도 감소, 그리고 병리학적 심장 유전자 발현을 유도했다. 임신은 TAC 후 LV 기능 악화에 영향을 미치지 않으면서 상대적 LV 및 우심실 무게를 증가시켰다. 놀랍게도, TAC로 인한 상대적 심장 및 폐 무게 증가는 임신에 의해 완화되었으며, 이는 모세혈관 밀도와 A형 나트륨이뇨 펩티드 발현의 정상화 경향을 보였다. 또한, 임신과 TAC의 조합은 심장의 c-Jun 및 STAT1의 인산화를 증가시켰지만, 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 인산화는 감소시켰다. 마지막으로, TAC는 임신 성공률, 임신 기간, 자궁 크기, 새끼 수, 그리고 새끼 체중에 유의한 영향을 미치지 않았다.

가설:
결론적으로, 우리는 임신이 심장 압력 과부하와 관련된 변화를 악화시키기보다는 오히려 병리적 LV 리모델링을 완화하고 폐 울혈을 완화시키며, TAC로 인한 병리적 유전자 발현 변화를 억제함으로써 압력 과부하 상태의 심장에 긍정적인 영향을 미친다는 것을 발견했습니다.


전제:
내인성 산화질소(NO)가 태아의 폐 및 전신 순환의 기저 긴장도를 조절하지만, 동맥관(DA) 긴장도의 조절에 있어 그 역할에 대해서는 거의 알려진 바가 없다. 임신 후기 태아 양의 DA 조직에 대한 면역염색 결과, DA 내피에서 내피 산화질소 합성효소(eNOS)에 대한 강한 염색이 나타났다. DA에서 NO와 구아노신 3',5'-환상 일인산(cGMP) 시스템의 생리학적 역할을 생체 내에서 연구하기 위해, 만성적으로 처치된 임신 후기 태아 양 10마리에서 NOS 억제제인 NG-니트로-L-아르기닌(L-NNA; 30 mg), 구아닐산 고리화효소 억제제인 메틸렌블루(40 mg), 그리고 시클로옥시게나제 억제제인 인도메타신(0.8 mg)의 혈역학적 효과를 측정했다. L-NNA는 주폐동맥(MPA)과 대동맥 압력을 증가시켰지만(기준치 대비 P < 0.05) MPA와 대동맥 사이의 압력 차는 변화시키지 않았다. L-NNA는 DA 유량을 약간 감소시키고 DA를 가로지르는 저항을 약간 증가시켰다. 메틸렌블루는 MPA 압력과 MPA와 대동맥 사이의 압력 차를 0.3 ± 0.2(기준치)에서 7.0 ± 2.7 밀리미터수은주(mmHg)로 증가시켰다(P < 0.05). 인도메타신은 MPA 압력과 MPA와 대동맥 사이의 압력 차를 1.1 ± 0.4(기준치)에서 40분 후 6.3 ± 1.5 mmHg로 증가시켰다(P < 0.05). 인도메타신은 DA 유량을 감소시키고 DA 저항을 증가시켰다.

가설:
결론적으로, eNOS는 태아의 DA 내피 세포에 존재하며, NOS 억제가 생체 내에서 DA의 수축을 유발한다는 결론을 내렸습니다.


전제:
1주일 동안 저산소증으로 유도된 폐고혈압 쥐에서 분리된 폐동맥에서, 카르바콜에 의해 자극된 내피 NO 생성이 디아미노플루오레세인-2 디아세테이트를 사용한 현장 관찰과 cGMP(환상 구아노신 일인산) 함량에서 모두 유의하게 감소했다. 이러한 변화 이후 카르바콜로 유도된 내피 의존성 이완이 감소했다. 내피 NO 합성효소(eNOS)와 그 조절 단백질인 카베올린-1 및 열충격 단백질 90(HSP90)의 단백질 발현은 저산소성 폐동맥에서 변화하지 않았다. 이는 만성 저산소증이 번역 후 수준에서 eNOS 활성을 손상시킨다는 것을 나타낸다.

저산소성 폐동맥에서 카르바콜에 의해 자극된 세포 내 Ca2+ 수준의 증가는 감소했지만 이오노마이신에 의한 증가는 그렇지 않았다. 우리는 다음으로 eNOS 활성화 시스템의 Ca2+ 민감도 변화에 초점을 맞추었다. 형태학적 연구 결과, 저산소성 내피세포의 위축과 eNOS의 세포 가장자리 응축(주변부 농축)이 관찰되었으며, eNOS와 골지체 또는 형질막 사이의 공동 위치는 유지되었다.

그러나 저산소성 폐동맥에서 eNOS는 카르바콜의 유무에 관계없이 카베올린-1과 강하게 결합되었다. 반면, eNOS는 열충격 단백질 90(HSP90) 또는 칼모듈린과는 해리되었다. 또한, 저산소성 폐동맥에서 Akt(단백질 인산화효소 B) 인산화에는 영향을 미치지 않으면서 두 조건 모두에서 eNOS Ser1177(세린 1177) 인산화가 유의하게 감소했다.

가설:
결론적으로, 만성 저산소증은 내피세포의 Ca2+ 대사를 저해하고 eNOS와 caveolin-1 간의 정상적인 연계를 저해하여 eNOS의 비활성화를 초래한다.


전제:
아미노글리코사이드 항생제인 토브라마이신은 낭포성 섬유증 환자의 녹농균 감염 치료에 사용됩니다. 그러나 토브라마이신의  생물학적 활성은 가래에 의해 저해됩니다. 뮤신과 고분자량 DNA는 각각 가래 건조 중량의 2~3%(P. L. Masson 및 J. F. Heremans, 412-475페이지, M. J. Dulfano 편집, Sputum: Fundamentals and Clinical Pathology, 1973) 및 3~10%(W. S. Chernick 및 G. J. Barbero, Pediatrics 24:739-745, 1959, 및 R. Picot, I. Das, 및 L. Reid, Thorax 33:235-242, 1978)를 차지합니다. 토브라마이신은 가래에서 얻은 뮤신과 DNA 모두에 결합합니다(R. Ramphal, M. Lhermitte, M. Filliat, 및 P. Roussel, J. Antimicrob. Chemother. 22:483-490, 1988). 시험관 내에서 재조합 인간 DNase(rhDNase)는 가래 내 50 kb 이상의 고분자량 DNA를 2~4 kb 조각으로 가수분해합니다. 우리는 투석 가능한 토브라마이신을 연구하여 전체 가래와 돼지 위 점액소 및 송아지 흉선 DNA로 구성된 "인공 가래"에 대한 약물 결합을 조사했습니다. 또한 가래, 인공 가래 및 송아지 흉선 DNA에 대한 rhDNase 처리가 토브라마이신 결합에 미치는 영향을 연구했습니다. 우리는 가래, 인공 가래 및 송아지 흉선 DNA에 대한 rhDNase 처리가 투석액 내 토브라마이신의 생체 활성을 크게 증가시키지 않았음을 발견했습니다. 더욱 놀라운 것은, rhDNase에 의해 가래의 토브라마이신 결합이 오히려 증가했다는 점입니다.

가설:
rhDNase는 객담 내 토브라마이신의 생물학적 활성 효과를 증가시키지 않는다고 우리는 결론 내린다.


전제:
폐포자충 폐렴(Pneumocystis carinii pneumonia, PCP)은 계속해서 고형 장기 이식 수혜자들에게 상당한 이환율을 야기하고 있습니다. 일부 프로그램에서는 이식 후 예방적으로 트리메토프림-설파메톡사졸(TMP-SMX)을 투여하지만, 심장 이식 수혜자에서 TMP-SMX의 안전성과 효능에 대한 전향적 평가는 이전에 보고된 바가 없습니다. 따라서 우리는 58명의 심장 이식 수혜자를 전향적으로 무작위 배정하였다. TMP(160 mg)-SMX(800 mg)을 주 3일(B군) 또는 주 7일(C군) 1일 2회 투여하거나 치료를 받지 않도록(A군) 했습니다. 치료는 이식 후 14일부터 시작하여 4개월 동안 지속되었습니다. 연령, 성별, 기존 폐 병리 및 면역억제 프로토콜은 군 간에 차이가 없었습니다. 대조군(A)의 17명 중 7명이 이식 후 첫 4개월 동안 PCP와 호환되는 임상 증후군을 나타냈으며, 기관지폐포 세척술을 통해 조직학적으로 진단이 확인되었습니다. 반면, 매일 또는 간헐적 치료군에서는 연구 기간 동안 PCP가 발생한 환자가 없었습니다(P < 0.005). TMP-SMX의 두 용량 모두 잘 견딜 수 있었으며, 어떤 환자에서도 치료를 중단할 필요가 없었습니다. 총 백혈구 수, 아자티오프린 용량, 환자당 치료된 거부 반응 횟수는 세 군 간에 차이가 없었습니다.

가설:
결론적으로, TMP-SMX는 심장 이식 후 첫 4개월 동안 P. carinii 폐렴의 발생을 예방하기 위해 안전하고 효과적으로 투여될 수 있음을 확인하였습니다.


전제:
마이코페놀레이트 모페틸(MMF)은 마이코페놀산(MPA)의 전구체은 일반적으로 시클로스포린과 함께 사용할 때 타크로리무스와 함께 사용할 때보다 2배 용량으로 투여된다. 이는 시클로스포린 요법 중 MPA 노출이 더 낮다고 믿어지기 때문이다. 이 연구는 안정적인 신장 이식 수혜자에서 시클로스포린(n = 12) 또는 타크로리무스(n = 12)로 유지되는 경우, MPA와 그 페놀 및 아실 글루쿠로나이드 대사체(각각 MPAG 및 AcMPAG)의 12시간 정상 상태 농도-시간 프로파일을 비교하는 것을 목표로 했다. 시클로스포린 그룹의 흡수 단계 동안, 용량 정규화된 농도의 총 MPA와 유리 MPA는 유의하게 높았지만 전체 농도-시간 곡선 아래 면적(AUC0-12)은 유의한 차이가 없었다. 또한, AcMPAG에 대한 노출은 시클로스포린 그룹에서 더 높았다(P < 0.05). 시클로스포린 그룹의 12명 중 10명이 케토코나졸 치료를 받고 있었다; 그러나 케토코나졸 유무와 관계없이 Sprague-Dawley 쥐에게 MMF를 경구 투여했을 때 MPA 또는 MPAG에 대한 노출은 차이가 없었다.

가설:
결론적으로, MPA는 사이클로스포린과 대사산물의 체내 분포를 타크로리무스 투여와는 다르게 조절한다. 그러나 MPA를 투여 받는 환자들은 동등한 약물 노출을 달성하기 위해 MMF의 2배 용량을 필요로 하지 않을 수 있다.


전제:
CMV는 고형 장기 이식 수혜자에게서 자주 발생하는 병원체이며, 폐 이식을 받은 사람들이 더 빈번하고 심각하게 영향을 받는 것으로 보인다. 간시클로비르 예방요법 기간이 고형장기이식 수혜자의 CMV 질환 발생률에 영향을 미칠 수 있기 때문에, 우리는 폐 이식 수혜자에게 6주간의 예방 요법의 효능을 평가했다. 또한 CMV 항체 역가의 4배 상승이 CMV 질환 발생을 예측할 수 있는 능력을 평가했다. 연속된 21명의 폐 이식 수혜자가 등록되었다: 이중 15명은 이식 시 CMV 항체 양성이었고, 6명은 CMV 항체 음성이었으며 CMV 양성 공여자로부터 폐 이식을 받았다. 평균±표준편차 추적 관찰 기간은 430±157일이었다(범위 178-730일, 중앙값 449일). 6주간의 간시클로비르 요법은 CMV 감염(21명 중 17명, 81%에서 발생)이나 CMV 질환(21명 중 8명, 38%에서 관찰됨)을 예방하지 못했다. 또한, CMV 항체 역가의 4배 상승은 CMV 질병의 발생에 앞서 13건 중 3건(23%)에서만 관찰되었다.

가설:
우리는 6주간의 간시클로비르 예방 요법이 폐 이식 수혜자에서 CMV 감염이나 질병을 예방하지 못하며, 연속적으로 얻은 CMV 항체 역가의 상승이 CMV 질병의 발생에 앞서 나타나는 경우는 드물다고 결론 내린다.


전제:
항생제 치료 시작 후의 염증반응과 신경 손상 지표를 퀴누프리스틴/달포프리스틴(100 mg/kg을 단기 또는 지속 주입으로)과 세프트리악손(10 mg/kg/h)의 정맥 투여 동안 비교하였으며, 이는 폐렴연쇄구균(Streptococcus pneumoniae) 수막염 토끼 모델에서 수행되었다. 두 가지 투여 방식 모두에서 퀴누프리스틴/달포프리스틴은 세프트리악손보다 살균력이 낮았다. 그러나 뇌척수액(CSF)의 염증성 세포벽 성분(리포테이코산(LTA)과 테이코산(TA))의 농도와 종양괴사인자(TNF) 활성은 두 퀴누프리스틴/달포프리스틴 그룹에서 세프트리악손 투여 토끼보다 유의하게 낮았다. 중앙값 LTA/TA 농도(25번째/75번째 백분위수)는 다음과 같았다:
(i) 감염 14시간 후: 퀴누프리스틴/달포프리스틴 지속 주입의 경우 133 (72/155) ng/mL, 단기 주입의 경우 193 (91/308) ng/mL, 세프트리악손의 경우 455 (274/2042) ng/mL (각각 P = 0.002 및 0.02)
(ii) 감염 17시간 후: 퀴누프리스틴/달포프리스틴 지속 주입의 경우 116 (60/368) ng/mL, 단기 주입의 경우 117 (41/247) ng/mL, 세프트리악손의 경우 694 (156/2173) ng/mL (각각 P = 0.04 및 0.03).

 감염 14시간 후 중앙값 TNF 활성(25번째/75번째 백분위수)은 퀴누프리스틴/달포프리스틴 지속 주입의 경우 0.2 (0.1/1.9) U/mL, 단기 주입의 경우 0.1 (0.01/3.5) U/mL, 세프트리악손의 경우 30 (4.6/180) U/mL (각 비교에 대해 P = 0.02)였다; 감염 17시간 후 TNF 활성은 2.8 (0.2/11) U/mL (퀴누프리스틴/달포프리스틴 지속 주입) 및 0.1 (0.04/6.1) U/mL (단기 주입), 세프트리악손의 경우 48.6 (18/169) U/mL (P = 0.002 및 0.001)였다. 감염 24시간 후 신경특이에놀라아제(NSE) 농도는 퀴누프리스틴/달포프리스틴 투여 동물에서 유의하게 낮았다: 4.6 (3.3/5.7) μg/L (지속 주입) 및 3.6 (2.9/4.7) μg/L (단기 주입), 세프트리악손 투여

가설:
결론적으로, 퀴누프리스틴/달포프리스틴 항생제를 사용한 치료는 항생제 요법 시작 이후 거미막밑공간 내에서 염증 반응의 완화를 가져왔다.


전제:
돌연변이 또는 증폭된 티로신 키나제에 의한 티로신 인산화로 인한 STAT3의 지속적 활성화(pYSTAT3)는 암 개시, 진행, 침범 및 암종 세포의 운동성에 중요하다. 우리는 AF1q가 유방암 세포에서 STAT3 신호전달과 관련이 있음을 보여주었다. 이종이식 모델에서, AF1q 발현 증가는 STAT3를 활성화시키고 면역결핍 NSG (NOD scid gamma) 쥐에서 종양 성장과 전이를 촉진했다. AF1q 발현이 변경된 MDA-MB-231LN 유방암 세포의 사이토카인 분비 표현형은 혈소판 유래 성장인자 서브유닛 B (PDGF-B) 발현의 변화를 나타냈다. AF1q에 의해 유도된 PDGF-B는 시험관 내에서 MDA-MB-231LN 세포의 운동성, 이동성 및 침범을 자극했으며, AF1q는 혈소판 유래 성장인자 수용체(PDGFR) 신호전달을 상향조절했다. 더 나아가, AF1q에 의해 유도된 PDGFR 신호전달은 Src 키나아제 활성화를 통해 STAT3 활성을 증가시켰으며, 이는 Src 키나아제 억제제 PP1에 의해 차단될 수 있었다. 또한, AF1q는 PDGFR 신호전달을 통해 티로신 키나아제 신호전달을 상향조절했으며, 이는 이마티닙에 의해 억제될 수 있었다.

가설:
결론적으로, 우리는 AF1q 발현 증가가 PDGF-B/PDGFR 경로의 활성화를 통해 Src 키나제를 활성화함으로써 침습성 암세포에서 지속적이고 발암성인 pYSTAT3 수준에 기여한다는 것을 입증했다.


전제:
ESR1에 의해 인코딩되는 에스트로겐 수용체-α (ER-α)는 침습성 유방암의 약 70％에서 면역조직화학법으로 검출되며 강력한 예측 생물표지자 역할을 한다. 리간드 결합 도메인의 ESR1 활성화 돌연변이는 ER 양성 전이성 유방암의 최대 35-40％에서 발견되며, 내분비 치료 저항성 및 질병 진행과 관련이 있다. 현재 ESR1 돌연변이가 임상 진료에서 수행되는 ER의 면역조직화학적 검출에 영향을 미치는지는 여부가 불분명하다.

이 연구에서 유방암의 ESR1 돌연변이는 식품의약국(FDA)이 승인한 혼성화 포획 기반 차세대 염기서열 분석법인 Memorial Sloan Kettering-Integrated Mutation Profiling of Actionable Cancer Targets (MSK-IMPACT)를 활용하여 식별되었다. 연구 기간 동안 국소 진행성 또는 전이성 질환이 있는 환자의 유방암 586건이 MSK-IMPACT를 사용하여 분석되었다. ESR1 체세포 변이는 66명의 환자로부터 67개의 유방암 샘플에서 확인되었다.

진단 시 이들 환자의 원발성 및 치료된 유방암에 대해 에스트로겐 수용체-α, 프로게스테론 수용체 및 인간 표피 성장 인자 수용체 2 (HER2)의 면역조직화학적 분석이 수행되었다. 리간드 결합 도메인과 관련된 20개의 고유한 ESR1 돌연변이가 이전에 내분비 요법으로 치료받은 환자의 유방암 샘플에서 모두 확인되었다. 가장 빈번한 돌연변이는 D538G (아스파르트산에서 글리신으로의 변이, n = 22), Y537S (티로신에서 세린으로의 변이, n = 7) 및 E380Q (글루탐산에서 글루타민으로의 변이, n = 7)이었다.

ESR1 돌연변이가 있는 모든 유방암 샘플은 면역조직화학적으로 ER 양성이었다. 34명의 환자에서 치료되지 않은 원발성 종양과 치료된 종양의 에스트로겐 수용체-α 면역조직화학을 검토한 결과, ER 양성 상태에 유의미한 변화가 없음을 확인했다 (핵 염색을 보이는 침습성 종양 세포의 중앙값 비율: 치료되지 않은 원발성 종양 90％, 치료된 종양 95％).


전제:
식도암(EC)은 악성 질환으로, 두 가지 주요 조직학적 아형인 샘암종(EAC)과 편평세포암종(ESCC)을 나타냅니다. 두 EC 아형은 거의 모든 요인에서 크게 다릅니다. ESCC 발병은 주로 담배와 알코올 남용과 관련이 있는 반면, 비만과 만성 위식도역류병(GERD)은 EAC뿐만 아니라 EAC에 선행하는 장 이형성인 바렛식도(BE)의 중요한 위험 요인입니다. 비만은 비지방 조직에서 이소성 지질 방울(LD) 축적을 유발합니다. LD는 세포 대사, 신호 전달, 증식 및 염증 매개체 생성에 관여하는 세포 소기관입니다.

이 연구의 목적은 EC에서 LD의 발생과 역할을 조사하는 것이었습니다. 연구 결과, 비비만에서 비만 개인, BE 및 EAC 환자의 식도 샘플에서 EAC 발달에 따라 LD 수준이 점진적으로 증가함을 보여주었습니다. 반면, ESCC 샘플에서는 비종양 샘플과 비교했을 때 통계적으로 유의한 변화가 관찰되지 않았습니다.

BE와 EAC 위험 요인 노출을 모방하기 위해, 비종양 식도 세포주를 올레산(OA)과 산성화된 배지 및/또는 디옥시콜린산(DCA)으로 배양했습니다. 그 결과, LD 양뿐만 아니라 COX-2와 CXCL-8 발현, 그리고 IL-8 분비에서 유의미한 증가를 보였습니다. 더불어 COX-2 발현과 LD 양은 유의한 양의 상관관계를 보였으며, EAC에서는 같은 위치에서 발견되었지만 ESCC에서는 그렇지 않았습니다. 이는 LD가 EAC에서 에이코사노이드 생산 장소일 수 있음을 시사합니다.

가설:
결론적으로, 이 연구는 비만과 BE 및 EAC 관련 염증 자극이 지질방울(LD)의 점진적 감소를 초래함을 보여준다. 이러한 LD의 감소는 염증 매개체의 생성과 작용을 조절하는 데 중요한 역할을 할 수 있다. 따라서 이는 BE 및 EAC의 발생 및 진행에 기여할 수 있다.


전제:
전립선암이 전이성 및 거세 불응성 질환으로 진행되는 것은 중요한 단계입니다. 우리는 이전에 단백질 키나제 C (PKC) 활성화 후 Twist1과 안드로겐 수용체 (AR) 유도가 거세 불응성에 중요한 역할을 한다는 것을 보여주었습니다. 하지만 정확한 분자 메커니즘은 여전히 명확하지 않습니다. 이 연구는 NF-κB 전사 인자에 초점을 맞추어 관련 분자 메커니즘을 규명하는 것을 목표로 했습니다.

우리는 PKC 억제 후 NF-κB의 활성과 인간 전립선암 세포에서 NF-κB 억제 후 Twist1과 AR의 발현을 조사했습니다. 또한 호르몬 요법에 저항성을 가진 세포에서 AR 신호 억제 후 PKC/NF-κB의 상태를 조사했습니다.

결과적으로, PKC의 유전자 억제와 소분자 억제제 사용을 통한 PKC 신호 억제는 RelA 활성을 억제했고, NF-κB 차단은 Twist1과 AR 발현을 억제했습니다. 반대로, 안드로겐 고갈과 새로운 항안드로겐 엔잘루타미드에 의한 AR 신호 억제는 PKC와 RelA 활성화를 유도하여 전사체 수준에서 Twist1/AR 유도를 초래했습니다. 더욱이, NF-κB 신호 억제는 엔잘루타미드에 의한 Twist1과 AR 유도를 방지했습니다. 마지막으로, NF-κB는 거세 불응성 및 엔잘루타미드 저항성 세포 모두에서 활성화되었습니다.

가설:
결론적으로, NF-κB 신호전달은 AR 촉진에 반응하여 PKC에 의한 Twist1 상승조절을 매개하며, 결과적으로 AR의 이상 활성화를 초래합니다.


전제:
암세포는 충분한 산소가 있는 상황에서도 에너지 대사에 해당작용을 선호합니다. 이를 워버그 효과(Warburg effect)라고 하며, 이는 종양 발생과 악성 진행을 촉진합니다. 본 연구에서는 종양 증식, 침습, 전이에 관여하는 다기능성 종양 유전 단백질인 EZH2가 워버그 효과를 활성화하여 교모세포종의 종양 발생과 악성 진행을 촉진함을 입증했습니다. 우리는 HIF1α가 EZH2의 표적이며, 그 활성화가 EZH2 매개 대사 적응에 필수적임을 확인하였고, EZH2 과발현 시 HIF1α가 활성화되는 것을 관찰했습니다. EZH2는 EAF2의 발현을 억제하여 HIF1α의 수준을 상승시켰습니다.

가설:
이러한 결과를 통해 우리는 EZH2가 EAF2-HIF1α 신호축을 통해 해당작용을 활성화함으로써 부분적으로 종양 발생과 악성 진행을 촉진한다고 결론을 내립니다.


전제:
미토콘드리아 내의 Sr2+는 Ca2+와 유사하게 온전한 쥐 간 미토콘드리아에서 산화적 인산화(oxidative phosphorylation)를 억제합니다. Ca2+와 Sr2+ 모두 서브미토콘드리아 입자(submitochondrial particles)에서 ATPase의 가수분해 활성도 억제합니다. ATPase 활성의 반감억제는 배지의 Mg2+ 농도가 1.0 mM일 때 2.5 mM Ca2+ 또는 5.0 mM Sr2+ 농도에서 달성되었습니다. 두 양이온에 의한 ATPase 활성 억제는 반응 배지의 Mg2+ 농도를 증가시킴으로써 강하게 감소되었습니다. 또한, 다양한 농도의 Ca2+ 또는 Sr2+ 존재 하에서 ATPase의 기질인 MgATP의 농도를 측정한 결과와 동력학적 데이터는 이들 양이온이 Mg2+와 MgATP 형성을 위해 경쟁하여 ATP 가수분해를 억제함을 강하게 시사합니다.

가설:
Sr2+가 충전된 미토콘드리아에서 카르복시아트락틸로사이드(carboxyatractyloside) 또는 올리고마이신에 의한 산화적 인산화의 적정 결과와 서브미토콘드리아 입자에서 얻은 이러한 결과는 다음과 같다. 미토콘드리아 내 Ca2+ 또는 Sr2+가 ADP/ATP 운반체와 ATP 합성효소에 대한 아데닌 뉴클레오타이드의 가용성을 감소시켜 온전한 미토콘드리아에서 산화적 인산화를 억제한다고 결론지을 수 있습니다.


전제:
미토콘드리아 칼슘은 세포 대사의 중요한 조절자입니다. CCDC90A는 미토콘드리아 칼슘 유니포터(MCU) 복합체의 조절자로 보고되었습니다. MCU는 미토콘드리아 칼슘 섭취를 조절하는 선택적 채널입니다. 이로 인해 CCDC90A는 MCUR1로 이름이 변경되었습니다.

우리의 연구에서, 인간 섬유모세포에서 CCDC90A의 억제가 특정 시토크롬 c 산화효소(COX) 조립 결함을 일으킴을 보여줍니다. 이는 미토콘드리아 막 전위를 감소시키고 미토콘드리아 칼슘 섭취 능력을 감소시킵니다.

TACO1 또는 COX10의 돌연변이로 인한 COX 조립 결함이 있는 환자의 섬유모세포에서도 유사한 결과가 관찰되었습니다. 이 세포들은 미토콘드리아 막 전위 감소와 칼슘 섭취 능력 부전을 보였습니다. 이러한 결함은 각각의 야생형 cDNA의 발현으로 회복되었습니다.

효모(Saccharomyces cerevisiae)에서 CCDC90A의 상동체인 fmp32의 제거 역시 COX 결핍을 일으켰습니다. 이는 MCU가 없는 생물에서도 관찰되었으며, CCDC90A의 기능이 진화적으로 보존되어 있음을 보여줍니다.

가설:
CCDC90A가 COX 조립에 역할을 하며 MCU를 직접적으로 조절하지 않는다고 결론 내린다.


전제:
미토콘드리아는 뇌 세포를 포함한 대부분의 세포에서 ATP(아데노신 삼인산)의 대부분을 생산합니다. 세포의 에너지 요구에 맞춰 이 복잡한 기계를 조절하는 것은 우리가 아직 완전히 이해하지 못한 복잡한 과정입니다. 이러한 맥락에서, 3',5'-고리형 AMP(cAMP)가 신호-대사 결합 연결 및 미토콘드리아 ATP 생산 조절에 중요한 역할을 할 것으로 제안되었습니다. 세포에서 cAMP 신호는 세포질 측면에서 미토콘드리아에 영향을 미칠 수 있지만, 최근에는 수용성 아데닐일 시클라아제(sAC)에 의해 미토콘드리아의 기질 내에서 생성된 cAMP 신호가 호흡과 따라서 ATP 생산을 조절한다고 제안되었습니다. 그러나 이러한 과정에 대한 뇌 미토콘드리아의 정보는 부족하며, 기질 내에서 생성된 cAMP 신호의 효과기는 명확하지 않은데, 이는 단백질 키나제 A(PKA)와 cAMP에 의해 활성화되는 교환 단백질 1(EPAC1)이 모두 관여한다고 제안되었기 때문입니다. 여기서는 현재의 지식을 검토하고 이를 뇌 미토콘드리아와 연관 짓습니다. 또한, 분리된 마우스 대뇌 피질 미토콘드리아에서 호흡, 막전위, ATP 생산 측정을 기반으로 sAC, PKA 또는 EPAC 억제제가 미토콘드리아 기능에 서로 다른 방식으로 영향을 미친다는 것을 보여줍니다.

가설:
결론적으로, 우리는 뇌 미토콘드리아가 cAMP 매개 sAC 신호를 통해 그들의 기능을 조절하며, PKA와 EPAC가 cAMP의 하류에 관여할 수 있다고 시사한다.


전제:
ADP는 ATP 생성을 위한 주요 기질일 뿐만 아니라 미토콘드리아 투과성 전이 기공(mPTP)의 강력한 억제제이기도 합니다. 본 연구에서는 산화 스트레스가 mPTP 억제제로서의 ADP의 효능에 어떤 영향을 미치는지, 그리고 활성산소종(ROS, 반응성 산소 화합물) 생성 감소와 관련이 있는지를 평가했습니다.

우리는 정상 및 스트레스를 받은 분리된 심장 미토콘드리아에서 mPTP 유도까지 ADP가 미토콘드리아 칼슘 보유 능력(CRC)에 미치는 영향을 정량적으로 측정했습니다. 만성 산화 스트레스의 두 가지 모델(노화 및 당뇨 쥐)과 급성 산화 스트레스의 두 가지 모델(허혈 재관류(IR) 및 터트-부틸 하이드로과산화물(t-BH))을 사용했습니다.

대조군 미토콘드리아에서 CRC는 344 ± 32 nmol/mg 단백질이었습니다. 500 μmol/L ADP는 CRC를 774 ± 65 nmol/mg 단백질로 증가시켰습니다. ADP의 이러한 효과는 농도와 관련이 있어 보였으며, 50 μmol/L는 유의하게 작은 효과를 나타냈습니다. 또한, F0F1ATPase에 의한 ADP에서 ATP로의 전환을 억제하는 올리고마이신은 50 μmol/L ADP의 효과를 크게 증가시켰습니다.

만성 산화 스트레스는 CRC나 500 μmol/L ADP의 효과에 영향을 미치지 않았습니다. IR 또는 t-BH 노출 후, CRC는 각각 1 ± 0.2 및 32 ± 4 nmol/mg 단백질로 크게 감소했습니다. 놀랍게도, ADP는 IR과 t-BH에서 CRC를 각각 447 ± 105 및 514 ± 103 nmol/mg 단백질로 증가시켰습니다. 이는 대조군과 동일한 수준으로 CRC를 증가시킨 것입니다.

대조군 미토콘드리아에서 ADP는 기질 유도 및 칼슘 유도 ROS 증가를 모두 감소시켰습니다. 그러나 t-BH 처리된 미토콘드리아에서는 ADP의 ROS에 대한 효과가 상대적으로 작았습니다.
가설:
우리는 ADP가 심각하게 스트레스를 받은 미토콘드리아에서 CRC 용량을 강력하게 회복시킨다고 결론을 내립니다.


전제:
이전 연구자들은 동물의 골격근에서 3,4-메틸렌디옥시메탐페타민(MDMA)으로 유도된 고열이 탈결합 단백질 3(UCP3)에 의존적임을 입증했습니다. 저온 순응 조건에서 UCP1의 생체 내 인산화가 증가한다는 우리의 조사 결과에 비추어, 우리는 (a) UCP3가 생체 내에서 인산화되는지와 (b) UCP3의 생체 내 인산화가 동물에게 MDMA를 투여한 후 양성자 누출 증가로 이어지는지를 조사했습니다. 우리의 데이터는 동물에 대한 MDMA 처리(인산염 완충 생리식염수(PBS) 처리 제외)인산가수분해효소 억제제 존재 하에 분리된 골격근 미토콘드리아에서 UCP3의 생체 내 세린 및 티로신 인산화가 발생합니다. 또한, 양성자 누출은 MDMA 처리된 동물에서 분리된 골격근 미토콘드리아(인산가수분해효소 억제제 존재 하에)에서만 증가하며, 증가된 양성자 누출은 인산화된 UCP3로 인한 것입니다. 골격근 미토콘드리아의 UCP3 양은 MDMA 투여에 영향을 받지 않습니다. UCP3 인산화의 보존과 양성자 누출의 증가는 인산가수분해효소 억제제 없이 골격근 미토콘드리아를 분리할 때 사라집니다.

가설:
UCP3로 처리하는 것이 동물의 골격근 미토콘드리아에서 양성자 누출을 증가시키는데, 이는 생체 내에서 MDMA의 인산화에 의한 공유 결합 변형을 통해 MDMA를 활성화함으로써 이루어진다고 결론 내립니다.


전제:
CsrA(탄소 저장 조절자 A)는 널리 분포된 세균 RNA 결합 단백질로, 표적 전사체의 번역 개시와 mRNA 안정성을 조절합니다. γ-프로테오박테리아에서 CsrA 활성은 다수의 CsrA 결합 부위를 포함하는 하나 이상의 작은 RNA(sRNA)에 의해 경쟁적으로 길항됩니다. 그러나 γ-프로테오박테리아 외의 박테리아에서 CsrA는 FliW라는 단백질에 의해 길항됩니다. 여기서 우리는 고초균(Bacillus subtilis)의 FliW가 RNA 결합에 필요한 CsrA의 동일한 잔기에 결합하지 않는다는 것을 보여줍니다. 대신, FliW 길항 작용에 저항하는 CsrA 돌연변이체(crw)는 이전에 기능이 알려지지 않았던 CsrA의 알로스테릭 표면의 잔기를 변경시켰습니다. 일부 crw 돌연변이체는 CsrA-FliW 결합을 완전히 없앴으나, 다른 돌연변이체는 그렇지 않았습니다. 이는 FliW와 RNA 상호작용이 서로 상호 배타적이지 않음을 시사합니다.

가설:
우리는 FliW 단백질이 잘 확립된 sRNA 억제제와는 크게 다른 비경쟁적 기전을 통해 부갑상샘호르몬(PTH)을 억제한다고 결론 내렸습니다.


전제:
바실러스 서브틸리스의 전역 전사 조절인자 Spx는 유전자 발현 과정의 여러 단계에서 제어됩니다. 정상적인 성장 동안에는 ATP 의존성 단백질 분해효소 ClpXP에 의해 낮은 농도로 유지됩니다. 이황화 스트레스 아래에서는 ClpXP 매개 단백질 분해의 감소로 인해 부분적으로 Spx 농도가 증가합니다. Larsson과 동료들의 최근 연구(Mol. Microbiol. 66:669-684, 2007)에서는 yjbH 유전자의 생성물이 Spx의 단백질 조절 제어에 필요하다고 시사했습니다. 본 연구에서는 효모 이중 잡종 분석과 단백질-단백질 교차결합을 통해 Spx가 YjbH와 상호 작용함을 보여주었습니다. YjbH 단백질은 ClpXP 단백질 분해효소를 포함하는 반응 혼합물에서 Spx의 단백질 분해를 증진시키는 것으로 나타났지만, ClpCP 단백질 분해효소에서는 그렇지 않았습니다. 1-24 잔기가 결실된 YjbH의 N-말단 절단형(YjbH(Delta1-24))은 단백질 분해 촉진 활성을 보이지 않았습니다. YjbH는 Spx에 특이적이며, ClpXP 기질인 녹색 형광 단백질(GFP)-SsrA, ClpXP에 의해 인식되는 C-말단 SsrA 태그가 있는 GFP 유도체의 단백질 분해를 가속화하지 않았습니다. 유도결합플라즈마 원자방출분광법(ICP-AES)과 4-(2-피리딜아조)레조르시놀 방출 실험을 사용하여 YjbH에 아연 원자가 포함되어 있음을 발견했습니다. YjbH(Delta1-24)의 아연 분석 결과, N-말단의 히스티딘이 풍부한 영역이 적어도 하나의 Zn 원자를 배위하는 데 필수적임을 밝혔습니다. N-말단 영역에 의해 배위된 Zn 원자는 강한 산화제 처리 시 단백질에서 빠르게 방출되었습니다.

가설:
YjbH는 아연 배위 단백질이며 ClpXP 촉매 단백질 분해를 통한 Spx의 분해를 촉진한다는 결론을 내린다.


전제:
Bacillus subtilis에서의 세포외 단백질분해효소(exoprotease) 생산은 DegS-DegU라는 이성분 조절 시스템에 의해 양성적으로 조절되며, 추가로 몇 가지 부차적인 요인들에 의해서도 조절된다. degR 유전자의 산물은 후자 그룹에 속하며 DegS-DegU 의존적인 방식으로 양성 효과를 발휘한다. 우리는 degR의 전사가 mecA 또는 mecB의 불활성화에 의해 억제되지만, comK의 추가 불활성화에 의해 회복됨을 발견했다. 그러나 comK만의 불활성화는 degR 전사를 변화시키지 않았다. 또한 mecA 돌연변이가 degR의 전사 시작점을 기준으로 -52 위치 주변의 특정 영역을 필요로 한다는 것을 발견했다. 우리는 이전에 degR의 전사가 대체 시그마 인자(σ)인 sigmaD에 의해 주도된다는 것을 보여주었다. degR 발현이 인위적으로 구성된 sigmaA 유형 프로모터에 의해 유도될 때, mecA/B의 불활성화는 degR 발현의 유의미한 감소를 초래하지 않았으며, 이는 mec 돌연변이의 음성 효과가 sigmaD 주도 전사를 통해 작용함을 나타낸다. MecA와 MecB가 ComK를 음성적으로 조절하며, mecA/B 기능상실 돌연변이가 comK의 발현 증가를 유발한다는 것이 입증되었다.

가설:
결론적으로, ComK는 sigmaD 유도되는 degR 전사를 방지함으로써 degR 발현을 억제적으로 조절한다. 이는 아마도 제어 영역과의 상호작용을 통해 이루어질 것이다.


전제:
Vibrio fischeri에서 개체군 밀도 의존적 발광 발현은 자가유도인자 N-3-옥소헥사노일-L-호모세린 락톤(자가유도인자 1 [AI-1])에 의해 조절되며, 이는 LuxR을 통해 lux 오페론(luxICDABEG, 추정 자가유도인자 합성효소 [LuxI]와 발광 효소를 암호화)의 전사를 활성화한다. 우리는 최근 두 번째 자가유도인자인 N-옥타노일-L-호모세린 락톤(AI-2)의 합성에 필요한 새로운 V. fischeri 유전자 좌위인 ainS를 확인했는데, 이는 LuxR을 통해 AI-1이 없는 상태에서도 lux 오페론 전사를 활성화할 수 있다. AI-2의 조절 역할을 정의하기 위해 luxI ainS 이중 돌연변이주가 구축되었다. 부모 균주와 luxI 돌연변이주와는 대조적으로, luxI ainS 이중 돌연변이주는 발광 유도를 보이지 않았고 검출 가능한 발광 자가유도인자를 생성하지 않았으며, 이는 V. fischeri가 luxI와 ainS에 의해 합성이 지시되는 것 외에는 다른 발광 자가유도인자를 만들지 않음을 보여준다. ainS에만 결함이 있는 돌연변이주는 부모 균주에 비해 가속화된 발광 유도를 보였는데, 이는 V. fischeri에서 AI-2가 발광 유도를 지연시키는 기능을 한다는 것을 나타낸다. 이 관찰과 일치하게, AI-2의 외부 첨가는 V. fischeri와 lux 유전자를 가진 대장균에서 농도 의존적으로 유도를 억제했다. AI-2는 단독으로 또는 AI-1의 존재 하에서 luxR 음성 자가조절을 매개하지 않았으며, luxR이 자체 프로모터나 이종 프로모터에 의해 조절되더라도 대장균에서 발광 유도를 억제했다. AI-1의 양을 증가시키면 AI-2의 억제 효과를 극복했으며, 동일한 수준의 발광 활성화에는 AI-1보다 25~45배 더 많은 AI-2가 필요했다.

가설:
우리는 AI-1이 lux 오페론의 전사를 억제한다는 결론을 내렸다.


전제:
마이코박테리움 스메그마티스(Mycobacterium smegmatis)는 빠르게 성장하는 비병원성 마이코박테리움으로, 현재 마이코박테리움 유전학 연구의 모델 생물로 사용되고 있습니다. M. smegmatis의 아세타미다제(acetamidase)는 마이코박테리아의 고도로 유도 가능한 효소로, 여러 아미드 화합물을 유일한 탄소 및 질소 공급원으로 활용합니다. 아세타미다제 오페론은 복잡한 조절 메커니즘을 가지고 있으며, 여기에는 세 개의 조절 단백질, 네 개의 프로모터, 그리고 세 개의 오퍼레이터 요소가 포함됩니다. 우리의 이전 연구에서, AmiA의 과발현이 P2 프로모터를 차단함으로써 아세타미다제의 음성 조절로 이어진다는 것을 보여주었습니다. 이 연구에서, 우리는 AmiA와 단백질-단백질 상호작용을 통해 상호작용하는 새로운 양성 조절 단백질인 AmiC를 확인했습니다. 젤 이동성 변화 분석(gel mobility shift assay)은 AmiC 단백질이 AmiA가 P2 프로모터에 결합하는 것을 억제한다는 것을 보여주었습니다. AmiC와 시스 작용 요소의 상호작용은 P3, OP3, P1 프로모터/오퍼레이터와 같은 오페론의 여러 조절 영역에 대한 결합 능력을 확인했습니다. 결과적으로, AmiC 복합체에 유도체 아세트아미드를 추가하면 복합체가 분리되어 AmiC가 아미드에 대한 감지 단백질로 보이게 됩니다. 상동성 모델링 및 분자 도킹 연구는 AmiC가 주변질 결합 단백질(periplasmic binding proteins)의 일원으로, 억제제가 아닌 유도체를 선호적으로 결합한다는 것을 시사합니다. AmiC의 과발현은 음성 조절자인 amiA의 하향 조절과 아세타미다제의 지속적인 상향 조절로 이어집니다.

가설:
이러한 결과를 바탕으로, 우리는 AmiC가 아세타미다제 오페론을 양성 조절한다고 결론 내립니다.


전제:
금속단백분해효소 조직 억제제-1(TIMP-1)이 간 섬유증의 자연적 해소에 관여한다고 제안되어 왔다. 이 연구의 목적은 TIMP-1이 기질 금속단백분해효소(MMP) 억제 및 간성 별세포(HSC) 활성화와 연계하여 간 섬유증의 자연적 해소를 변화시키는지 조사하는 것이었다. 간 표적 TIMP-1 형질전환(TIMP-Tg) 쥐와 대조군 잡종(Cont) 쥐의 간을 CCl(4)로 유도된 간 섬유증으로부터 자연회복 후 0, 3, 7, 28일에 수집했다. 섬유증 해소 정도, MMP 발현, 알파-평활근 액틴(α-SMA) 양성 세포, 그리고 간의 프로콜라겐-(I) 메신저 RNA(mRNA) 수준을 두 그룹에서 각 기간에 평가하였다. 또한 HSC 세포사멸에 대한 TIMP-1의 영향을 조사하였다. TIMP-Tg 쥐는 Cont 쥐에 비해 자연적인 간 섬유증 해소가 현저히 감소된 것으로 나타났다. 하이드록시프롤린 함량, α-SMA 양성 세포 수, 프로콜라겐-(I) mRNA가 Cont 쥐에서는 시간이 지남에 따라 급격히 감소한 반면, TIMP-Tg 쥐에서는 이러한 지표들이 거의 변하지 않았다. TIMP-Tg 쥐의 활성형 금속단백분해효소-2(MMP-2) 수준은 Cont 쥐보다 낮았다. TIMP-1은 간 섬유증 해소 모델에서 비실질 세포의 세포사멸을 현저히 감소시켰으며, 시험관 내에서 카스파제-3 활성 억제와 관련된 HSC 세포사멸도 억제하였다.

가설:
결론적으로, TIMP-1은 MMP 활성의 순 감소와 HSC 세포사멸 억제의 결합을 통해 자발적인 간 섬유증 해소를 현저히 저해한다고 결론 내립니다.


전제:
간 섬유증은 만성 간 손상에 대한 지속적인 상처 치유 반응으로 인한 간의 병태생리로, 결국 간경화로 진행됩니다. 전통 중국 의학인 갈근(Pueraria lobata)에서 추출한 생리활성 이소플라본 배당체인 푸에라린은 많은 항염증 및 항섬유화 특성을 가지고 있다고 보고되었습니다. 그러나 자세한 메커니즘은 아직 잘 연구되지 않았습니다. 본 연구는 CCl4로 유도된 쥐에서 푸에라린이 간 기능과 섬유화 과정에 미치는 영향을 조사하는 것을 목표로 했습니다.

C57BL/6J 쥐에게 올리브 오일에 10% CCl4(2mL/kg)를 4주 연속 복막 내 주사했습니다. 이때 푸에라린을 병용 투여(100 및 200mg/kg 복막내 1일 1회)하거나 하지 않았습니다. 개선된 혈청 간 효소와 감소된 조직병리학적 이상에서 나타난 바와 같이, 수집된 데이터는 푸에라린이 CCl4 유도 만성 간 손상으로부터 보호할 수 있음을 보여주었습니다.

또한, 간에서 알파 평활근 액틴(α-평활근 액틴), 콜라겐-1, 변형 성장 인자(TGF)-β 및 결합 조직 성장 인자(CTGF)의 발현 증가로 입증된 CCl4 유도 간 섬유증 발달이 푸에라린에 의해 억제되었습니다. 이러한 억제 효과와 관련된 가능한 메커니즘은 생체 내에서 NF-κB 신호 전달 경로, 활성 산소종(ROS) 생성 및 미토콘드리아 기능이상의 억제를 통해 실현되었습니다.

푸에라린은 CCl4로 손상된 간에서 PARP-1 발현을 감소시킬 수 있고, PARP-1 억제제의 일종인 PJ34가 푸에라린의 보호 작용을 모방했기 때문에, 위에서 언급한 이러한 보호적 억제는 푸에라린으로 인한 PARP-1의 하향 조절에 의해 유도되었습니다.

가설:
결론적으로, 푸에라린은 PARP-1 억제 및 이에 따른 NF-κB, ROS 생성 억제 및 미토콘드리아 기능 장애 완화를 통해 CCl₄로 유도된 간 섬유증에서 보호 역할을 하는 것으로 보입니다.


전제:
대두에서 추출한 다불포화 인지질인 폴리에닐포스파티딜콜린(PPC)은 동물 모델에서 간 경화의 발생을 예방합니다. 그러나 그 작용 기전은 아직 명확히 밝혀지지 않았습니다. PPC가 간성상세포의 증식을 감소시켜 작용할 수 있다는 가설을 바탕으로, 우리는 PPC와 그 주요 성분인 디리놀레오일포스파티딜콜린(DLPC) 및 팔미토일-리놀레오일포스파티딜콜린(PLPC)이 PDGF(혈소판 유래 성장 인자)로 유도된 성상세포 증식과 세포 내 신호 전달에 미치는 영향을 연구했습니다. 조직배양에서 정상 쥐의 간성상세포를 혈청 결핍 상태로 만든 후, 인지질의 존재 또는 부재 하에 10ng/ml의 PDGF와 함께 배양했습니다. 세포 증식은 3H-티미딘 결합 방법으로 측정했습니다. P44MAPK 활성화는 키나아제 분석으로, AP-1 결합은 전기영동 이동도 변화 분석으로 측정했습니다. PPC(200 ng/ml)는 PDGF로 유도된 증식을 유의하게 억제했으며(p < 0.05; ANOVA, n = 3), PDGF로 유도된 P44MAPK 활성화와 AP-1 결합을 억제했습니다. 이 효과는 DLPC에서 나타났지만 PLPC에서는 나타나지 않았습니다. DLPC와 PLPC 모두 PDGF 수용체 활성화를 방지하지 않았습니다.

가설:
우리는 PPC가 이전에 인식되지 않았던 유사분열 유도된 성상세포 증식에 대한 영향을 미친다는 것을 확인했으며, 이는 DLPC에 의해 매개될 수 있다는 것으로 결론 내린다.


전제:
활성화된 간성상세포(HSC)는 콜라겐 I과 III 및 금속단백분해효소 조직억제제-1 (TIMP-1)의 주요 공급원으로서 간 섬유증의 중심이 됩니다. 간 섬유증의 자발적 회복 과정에서 TIMP 발현의 감소, 콜라겐분해효소 활성의 증가, 그리고 HSC의 세포자멸사 증가가 나타나며, 이는 HSC 생존에 있어 TIMP-1의 잠재적 역할을 강조합니다. 본 보고서에서는 조직배양 및 생체내 모델을 사용하여 TIMP-1이 HSC 세포자멸사를 직접 억제함을 보여줍니다. TIMP-1은 조직배양에서 활성화되고 혈청 결핍, 사이클로헥시미드 노출, 신경 성장인자 자극에 의해 세포자멸사를 유도받은 HSC에 대해 일관되고 유의미하며 용량 의존적인 항세포자멸사 효과를 나타냈습니다. 다른 모든 도메인이 보존된 기능이 상실된 변이 TIMP-1(T2G 변이체)은 세포자멸사를 억제하지 않았으며, 이는 세포자멸사 억제가 MMP 억제를 통해 매개됨을 나타냅니다. 합성 MMP 억제제 역시 HSC 세포자멸사를 억제했습니다. 실험적 간경화증 연구에서 PCR로 확인된 TIMP-1 mRNA의 지속적 발현이 알파 평활근 액틴 염색으로 정량화된 활성화된 HSC의 지속성과 상관관계가 있음을 보여주었고, 반면에 섬유증에서는 활성화된 HSC의 감소가 이 TIMP-1 mRNA의 감소와 상관관계가 있음을 보여주었습니다.

가설:
우리는 TIMP-1이 MMP 억제를 통해 활성화된 CD14dim 단핵구의 세포자멸사를 억제한다는 결론을 내렸다.


전제:
간성상세포(HSC)의 활성화는 간 섬유증 발달에 중추적인 역할을 한다. CTRP 계열의 일원인 C1q/종양괴사인자 관련 단백질 3(CTRP3)은 섬유증과 관련이 있다. 그러나 간 섬유증에서 CTRP3의 역할에 대해서는 거의 알려져 있지 않다. 이 연구는 간 섬유증에서의 역할을 규명하고 가능한 메커니즘을 탐구하는 것을 목표로 했다. 우리의 결과는 CTRP3가 간 섬유증 조직과 활성화된 HSCs에서 낮게 발현됨을 보여주었다. CTRP3의 과발현은 HSCs의 증식과 이동을 억제했으며, 형질전환 성장인자-β1(TGF-β1)로 자극된 HSC-T6 세포에서 세포외 기질(ECM)의 발현을 억제했다. 또한, CTRP3 과발현은 TGF-β1로 자극된 HSC-T6 세포에서 Smad3의 인산화 수준을 현저히 억제했다.

가설:
결론적으로, 본 연구는 CTRP3가 TGF-β 1로 유도된 HSC-T6 세포의 증식과 이동을 억제하고, 적어도 부분적으로 Smad 신호전달 경로를 억제함으로써 간 섬유화를 완화시킨다는 것을 보여주었다.


전제:
염증성 장질환(IBD)의 국소 치료에서 개선된 특이성에 대한 필요성으로 인해 우리는 음전하 리포좀(negatively charged liposomes)을 사용하여 염증이 있는 결장 상피를 표적으로 삼았습니다. 본 연구의 목적은 실험적 결장염을 유발한 쥐의 염증 점막에서, 장내 투여 후 이러한 리포좀이 우선적으로 축적되는 원인을 규명하는 것이었습니다. pH 3, 5 및 7에서 추출한 염증 점막 표본의 단백질 분석(탠덤 질량 분석법, 웨스턴 블롯으로 확인됨)에서 pH 3에서 트랜스페린(TF)의 발현 증가가 나타났습니다. 조직학적 검사에서 TF가 염증이 있는 상피의 관강 쪽에 위치한 것으로 나타났습니다. 음전하 리포좀(중성 리포좀은 제외)은 낮은 pH에서 상용 및 점막 TF에 부착되었지만 중성 pH에서는 부착되지 않았습니다. 또한, 음전하 리포좀을 TF와 사전 배양하면 쥐 결장의 염증 점막에 대한 부착이 크게 감소했습니다.

가설:
궤양성 대장염에서 볼 수 있는 결장 내강의 전형적인 낮은 pH 환경에서, TF(조직인자)는 음전하를 띤 리포좀이 염증이 있는 점막에 특이적으로 점막부착(mucoadhesion)되도록 매개한다는 결론이 내려졌다.


전제:
쿠르쿠민(디페룰로일메탄)은 장상피세포(IEC)와 면역세포에서 강력한 항염증 효과를 나타내며, 화학적으로 유도된 대장염의 설치류 모델에서 보호 역할을 보여주는데, 이는 NF-kappaB 억제를 통한 주요 작용 기전으로 추정된다. 궤양성 대장염 환자에서 재발률을 감소시키는 데 효과적임이 입증되었지만, 크론병(CD) 또는 Th-1/Th-17 매개 면역 모델에서 쿠르쿠민의 효과는 평가되지 않았다. 따라서 우리는 특정 병원체 없는 미생물군으로 집락화된 무균(germ-free) IL-10(-/-) 또는 IL-10(-/-);NF-kappaB(EGFP) 마우스에서 대장염 발달, 면역 활성화 및 생체 내 NF-kappaB 활성에 대한 식이 쿠르쿠민(0.1-1%)의 효과를 조사했다. 근위 및 원위 결장의 형태학적 분석 결과, 0.1%에서만 쿠르쿠민의 경미한 보호 효과를 보여주었다. 결장의 IFN-감마와 IL-12/23p40 mRNA 발현은 유사한 패턴을 보였다(0.1%에서 약 50% 억제). 결장 조직 절편과 장간막 림프절 세포에 의한 IL-12/23p40 및 IFN-감마의 분비는 IL-10(-/-) 마우스에서 증가했으며 식이 쿠르쿠민에 의해 감소하지 않았다. 놀랍게도, IL-10(-/-) 마우스(인산화-NF-kappaBp65(phospho-NF-kappaBp65)) 또는 IL-10(-/-);NF-kappaB(EGFP) 마우스(전체 기관 또는 공초점 이미징)에서 NF-kappaB의 활성화는 쿠르쿠민에 의해 눈에 띄게 억제되지 않았다. 또한, 우리는 IL-10과 쿠르쿠민이 상승작용을 통해 IEC에서 NF-kappaB 활성과 비장세포 및 가지돌기세포에 의한 IL-12/23p40 생성을 하향 조절함을 보여준다.

가설:
결론적으로, 쿠르쿠민의 화학적 유도 대장염 예방에 대한 주요 작용 메커니즘은 NF-kappaB 억제를 통한 것임을 시사합니다.


전제:
비만은 염증성 장질환 발병의 위험 인자입니다. 완두콩은 식이섬유, 폴리페놀, 당단백질의 함량이 높아 독특하며, 이들은 모두 건강에 유익한 작용을 합니다. 우리는 고지방식이(HFD)를 섭취한 쥐에게 덱스트란 황산 나트륨(DSS)으로 유도된 결장염에 대한 감수성에 녹색 완두콩(GP) 보충이 미치는 영향을 조사하고자 했습니다. 6주령 C57BL/6J 암컷 쥐에게 45% 고지방식이 또는 10% GP가 보충된 고지방식이를 투여했습니다. 7주간의 식이 보충 후, 식수에 2.5% DSS를 7일간 첨가하여 결장염을 유도한 다음 7일간의 회복 기간을 가졌습니다. GP 보충은 회복 단계에서 고지방식이를 먹인 쥐의 질병 활성도 지수 점수를 개선시켰고, 고지방식이를 먹인 쥐의 호중구 침윤, 단핵구 화학주성 단백질-1(MCP-1)의 mRNA 발현 및 염증 표지자인 인터루킨-6(IL-6), 시클로옥시게나제-2(COX-2), IL-17, 인터페론-γ(IFN-γ), 유도성 산화질소 합성효소(iNOS)를 감소시켰습니다. 또한, GP 보충은 고지방식이를 먹인 쥐의 뮤신 2 함량과 trefoil 인자 3(Tff3), Krüppel-유사 인자 4(Klf4), SAM 포인트 도메인 ETS 인자 1(Spdef1)을 포함한 배상세포(잔세포) 분화 표지자의 mRNA 발현을 증가시켰습니다. 더불어, GP는 고지방식이를 먹인 쥐에서 활성화 전사 인자-6(ATF-6) 단백질과 그의 표적 유전자인 샤페론 단백질 포도당 조절 단백질 78(Grp78), CCAAT-증강 결합 단백질 상동 단백질(CHOP), 소포체(ER) 분해 증진 α-마노시다제 유사 1 단백질(Edem1), X-박스 결합 단백질 1(Xbp1)의 발현 감소로 나타나는 소포체 스트레스를 개선시켰습니다.

가설:
결론적으로, GP 보충제는 HFD를 섭취한 쥐에서 DSS로 유도된 결장염의 심각성을 완화하였으며, 이는 결장에서의 염증 억제, 뮤신 고갈 및 소포체 스트레스(ER) 억제와 관련이 있었다.


전제:
빌리루빈은 혈관세포 부착분자-1(VCAM-1) 의존성 백혈구 이동을 억제하고 유도성 산화질소 합성효소(iNOS)의 발현을 억제함으로써 항염증 효과를 나타내는 것으로 여겨집니다. VCAM-1과 iNOS는 덱스트란 황산나트륨 (DSS) 쥐 염증성 대장염 모델에서 조직 손상의 중요한 매개체이므로, 우리는 빌리루빈이 DSS 처리된 쥐의 대장 손상을 예방하는지 조사했습니다. 수컷 C57BL/6 쥐에게 7일 동안 음용수에 2.5% DSS를 투여하면서 동시에 빌리루빈(30 mg/kg) 또는 인산칼륨 운반체를 복강 내 주사했습니다. 질병 활성을 모니터링하고, 말초혈액 수치와 혈청 질산염 수준을 측정했으며, 장 표본을 조직학적 손상, 백혈구 침윤, iNOS 발현에 대해 분석했습니다. HSB-2 세포의 IL-5 생성과 Jurkat 세포의 내피세포 횡단 이동에 대한 빌리루빈의 영향도 확인했습니다. 빌리루빈을 동시에 투여받은 DSS 처리 쥐들은 체중 감소가 적었고, 혈청 질산염 수치가 낮았으며, 운반체 처리 동물들보다 질병 중증도가 감소했습니다. 이와 일치하게, 조직병리학적 분석은 빌리루빈 처리 쥐들이 호산구, 림프구, 단핵구의 침윤 감소와 iNOS 발현 감소를 포함하여 대장 손상이 현저히 적음을 보여주었습니다. 빌리루빈 투여는 또한 말초혈액 호산구증가증이 상응하게 증가하면서 소장으로의 호산구와 단핵구 침윤이 감소한 것과 연관이 있었습니다. 빌리루빈은 Jurkat 세포의 이동을 막았지만 IL-5 생성은 변화시키지 않았습니다.

가설:
종합하면, 빌리루빈은 혈관 내피를 가로지르는 백혈구세포의 이동을 억제하고 iNOS 발현을 억제함으로써 DSS 유도 대장염을 억제합니다.


전제:
염증성 장질환의 발생률은 최근 수십 년 동안 증가했습니다. 대장 내에서 뮤신(MUC) 및 트레포일 인자(TFF) 계열은 점막 보호를 촉진합니다. 프로바이오틱스 투여는 장 MUC 층에 영향을 미칩니다. 또한 식품 성분은 장내 미생물총에 영향을 미치거나 MUC 장벽에 직접적인 영향을 줄 수 있습니다. 우리의 목표는 식이 요법 또는 Lactobacillus rhamnosus GG (LGG)가 MUC 및 TFF 유전자의 발현을 변화시켜 덱스트란 황산 나트륨(DSS, dextran sodium sulfate) 유발 대장염을 매개하는지 여부를 결정하는 것이었습니다. C57BL/6 쥐에게 20%(중량:중량) 카제인, 대두, 또는 유청 단백질을 함유한 식이를 LGG와 함께 또는 없이 12일 동안 공급했습니다. LGG 식이를 시작한 지 7일 후, 쥐에게 4일 동안 음용수에 2% DSS를 투여했습니다. LGG 유무에 따른 두 개의 추가 카제인 그룹에는 수돗물을 제공하여 총 8개 그룹이 되었습니다. DSS 처리 1일 후 마우스를 희생시키고 대장과 충수 조직 및 충수 내용물을 수집하여 qRT-PCR(정량적 역전사 중합효소 연쇄반응)로 분석했습니다. 유청 단백질은 다른 식이에 비해 충수 내 LGG 함량을 유의하게 증가시켰습니다. 카제인 식이 그룹에서 대장의 MUC1 및 TFF-3 발현은 LGG와 무관하게 DSS에 의해 유의하게 유도되었습니다. 다른 DSS 처리 그룹과 비교하여 대두 단백질은 대장의 MUC-1 및 TFF-3를 감소시켰습니다. 마찬가지로 대두 단백질은 염증 지수, TNFα 유전자 발현 및 대장 단축에 대한 DSS의 영향을 감소시켰습니다. LGG는 이러한 측정값들에 전반적인 영향을 미치지 않았습니다.

가설:
결론적으로, 대두 단백질은 LGG와 무관하게 TNFα 유전자 발현에 의해 유도된 MUC, TFF, 및 DSS의 염증성 자극을 억제하였습니다.


전제:
저산소 유도 인자 1α (HIF1α)는 저산소 상태에서 줄기세포의 생존을 유지하는 데 필수적인 생리적 과정인 대사 적응을 유도하는 주요 조절자입니다. 그러나 저산소 상태에서 줄기세포의 HIF1α가 어떻게 핵으로 전위되는지는 잘 알려져 있지 않습니다. 여기서 우리는 다이네인 매개 HIF1α 핵 전위에서 모터 연결기 단백질 Bicaudal D 상동체 1 (BICD1)의 역할과 BICD1 조절이 저산소 적응에 미치는 영향 및 인간 탯줄혈액 유래 중간엽 줄기세포(UCB-MSCs)에 대한 치료 잠재력을 조사했습니다. 우리의 결과에서, BICD1의 발현 억제는 BICD2와 달리 HIF1α의 핵 전위와 그 활성을 차단했습니다. BICD1의 과발현은 저산소 유도 HIF1α 핵 전위를 더욱 증가시켰습니다. 저산소는 HIF1α와 BICD1, 그리고 다이네인 중간 사슬 (Dynein IC) 간의 직접적인 결합을 자극했으며, 이는 BICD1 발현 억제에 의해 소멸되었습니다. Akt 억제는 BICD1과 HIF1α의 결합 및 HIF1α의 핵 전위를 감소시켰습니다. 반대로, Akt 활성화 또는 GSK3β 발현 억제는 저산소 유도 HIF1α 핵 전위를 더욱 증가시켰습니다. 또한, BICD1 발현 억제는 저산소 유도 해당 과정 재프로그래밍을 없애고 저산소 상태의 UCB-MSCs에서 미토콘드리아 활성산소종 (ROS) 축적과 세포자멸사를 증가시켰습니다. 마우스 피부 상처 치유 모델에서, 저산소 전처리된 UCB-MSCs의 이식된 세포 생존과 피부 상처 치유 능력은 BICD1 발현 억제에 의해 감소되었고 GSK3β 발현 억제에 의해 더욱 증가되었습니다.

가설:
결론적으로, FGF-유도된 HIF1α의 핵 내 이동이 저산소증 적응에 중요하며, 이는 UCB-MSCs의 재생 잠재력을 결정함을 입증하였습니다.


전제:
폰 히펠-린다우 단백질(Von Hippel-Lindau protein, pVHL)은 정상적으로 정상산소 조건에서는 저산소 유도 인자-1알파(HIF-1alpha)의 유비퀴틴 매개 분해를 유발하지만 저산소 조건에서는 그렇지 않으며, 신경 전구세포의 신경세포 분화를 유도한다. 그러나 두 조건 모두에서 신경 전구세포의 분화에 대한 폰 히펠-린다우 단백질의 역할은 완전히 밝혀지지 않았다. 이 연구에서 우리는 무산소 조건에서 신경 전구세포의pVHL이 신경세포 표지자의 발현이 억제되는 반면, HIF-1alpha는 유도됨을 보여준다. 또한, 유전자 전달 후 폰 히펠-린다우 단백질을 발현하는 신경 전구세포는 정상산소 조건에서는 뚜렷한 신경세포 분화를 보이고 HIF-1alpha가 유도되지 않았지만, 무산소 조건에서는 그렇지 않았다.

가설:
따라서, 우리는 pVHL이 저산소 조건에서 신경세포 분화를 억제한다는 결론을 내렸다.


전제:
저산소 유도 인자(HIF)는 산소 공급을 촉진하고 산소 결핍에 대한 대사 적응을 유도하는 세포 반응의 핵심 조절자입니다. 그러나 과도한 활성과 관련된 원치 않는 부작용을 피하기 위해 세포 내 HIF-1α 발현의 정도와 지속 시간은 신중하게 균형을 이루어야 합니다. 장기간의 저산소증에서 HIF-1α mRNA의 발현이 억제되는 것은 HIF1A 유전자 전사가 음성 피드백 메커니즘에 의해 엄격하게 조절됨을 시사합니다. 장기간의 저산소증에서 HIF-1α 단백질 반응의 감소와 HIF-1α mRNA의 억제에 대해서는 알려진 바가 거의 없습니다. 여기서 우리는 억제 요소 1-침묵 전사 인자(REST, 유전자 발현을 억제하는 전사 인자)가 저산소증 의존적 방식으로 HIF-1α 프로모터에 결합한다는 것을 보여줍니다. RNAi를 사용한 REST 발현 억제는 HIF-1α mRNA, 단백질 및 전사 활성의 발현을 증가시킵니다. 또한 REST 발현 억제는 HIF-1α 의존적 방식으로 포도당 소비와 젖산 생성을 증가시킵니다. 마지막으로, REST는 장기간의 저산소증에서 HIF-1α 단백질 발현의 정상화를 촉진합니다.

가설:
결론적으로, 저산소 상태에서 REST가 장기간 지속될 때 HIF-1α 전사를 억제하여 HIF-1α 반응의 완화에 기여한다는 가설을 제시합니다.


전제:
핵심 자가포식 키나제인 Unc51-유사 키나제 1(ULK1)의 발현은 기아 유도 자가포식에 의해 전사적으로 그리고 번역적으로 조절됩니다. 그러나 저산소 상태 동안 ULK1이 어떻게 조절되는지는 잘 이해되지 않았습니다. 이전에 우리는 ULK1 발현이 저산소 스트레스에 의해 유도된다는 것을 보여주었습니다. 여기서 우리는 새로운 ULK1 조절 마이크로RNA인 miR-93에 대해 보고합니다; 이것의 전사는 저산소 상태에서 ULK1의 번역과 음의 상관관계를 가집니다. miR-93은 ULK1을 표적화하며 저산소 상태에서 그 단백질 수준을 감소시킵니다. miR-93은 또한 LC3-I에서 LC3-II로의 전환과 P62 분해를 방지함으로써 저산소 유도 자가포식을 억제합니다. 이러한 과정들은 내인성 miR-93 억제제의 과발현에 의해 역전됩니다. miR-93 반응 요소가 없는 ULK1의 재발현은 miR-93에 의해 억제된 저산소 유도 자가포식을 회복시킵니다. 마지막으로, 우리는 비암세포주와 암세포에서 세포 생존율과 세포자멸사에 대한 miR-93의 효과를 검출했습니다. 우리는 miR-93이 저산소 상태에서 MEF(마우스 배아 섬유아세포)의 생존율을 유지하고 세포자멸사를 억제한다는 것을 발견했습니다.

가설:
따라서 우리는 miR-93이 ULK1을 조절함으로써 저산소증에 의해 유도된 자가포식에 역할을 한다고 결론 내렸다.


전제:
저산소 조건은 배아줄기세포(ESC)를 포함한 줄기세포(SC)의 분화 상태에 영향을 미치는 것으로 제안되고 있다. 저산소 유도 인자(HIF)는 저산소에 대한 세포 반응을 담당하는 주요 주요 세포 내 분자이다. 저산소는 HIF 프롤릴 수산화효소(PHD)의 활성을 억제함으로써 HIF를 안정화시킨다. PHD는 HIF-알파 아단위를 프로테아좀 분해의 표적으로 만드는 역할을 한다. 마우스 배아줄기세포(mESC)의 줄기세포성 특성 유지에 대한 HIF 안정화의 영향을 알아보기 위해, 우리는 PHD 억제와 저산소 조건(1% O2 및 5% O2)이 백혈병 억제 인자 제거로 유발된 자발적 ESC 분화에 미치는 영향을 24시간 및 48시간 동안 조사했습니다. 널리 사용되는 범수산화효소 억제제인 디메틸옥살로일글리신(DMOG)과 PHD에 대해 더 높은 특이성을 가진 것으로 제안된 PHD 억제제 JNJ-42041935 (JNJ)가 사용되었다. 두 억제제와 두 수준의 저산소 모두 자발적으로 분화하는 mESC에서 HIF-1알파와 HIF-2알파 단백질 수준 및 HIF 전사 활성을 유의하게 증가시켰다. 이는 48시간 후 DNA 합성의 완전 억제와 S기의 부분 정지로 나타나는 세포 증식의 유의한 하향 조절을 동반했다. 또한 HIF 안정화는 자발적으로 분화하는 mESC에서 일부 다능성 마커(OCT-4, NANOG, ZFP-42, TNAP)의 발현 감소를 촉진했습니다. 그러나 동시에, 세포 분화 마커로 선택된 일부 유전자(예: SOX1, BRACHYURY, ELF5)의 발현도 유의미하게 감소했다.

가설:
결론적으로, PHD 억제제인 JNJ와 DMOG 및 HIF에 의해 매개된 저산소의 단기 안정화는 mESC에서 다능성 마커의 자발적 손실을 예방하지 못했다.


전제:
BTK 억제제인 이브루티닙은 외투세포림프종(MCL)에서 주목할 만한 치료 효과를 보여주었습니다. 그러나 약 3분의 1의 환자들은 초기 약물 치료에 반응하지 않습니다. MCL에서 일차적 이브루티닙 내성의 기전을 밝히기 위해, 우리는 이브루티닙 감수성 및 내성 세포주에서 이브루티닙 처리에 따른 전사체 변화를 분석했습니다. 우리는 MYC 유전자 서명이 감수성 세포주에서는 이브루티닙에 의해 억제되었지만 내성 세포주에서는 그렇지 않음을 발견했습니다. 우리는 MCL 세포에서 MYC 유전자가 구조적으로 비정상이며 MYC 단백질이 과발현되어 있음을 입증했습니다. 또한, RNA 간섭을 통한 MYC 억제가 이브루티닙 감수성 및 내성 세포 모두에서 세포 성장을 억제했습니다. 우리는 HSP90 억제를 통해 MYC를 억제할 가능성을 탐색했습니다. 이 샤페론 단백질(단백질 접힘을 돕는 단백질)은 세포주와 환자의 일차 MCL 세포 모두에서 과발현되어 있습니다. 우리는 면역침전 및 화학적 침전을 통해 MCL 맥락에서 MYC가 HSP90의 진정한 클라이언트임을 입증했습니다. 더욱이, PU-H71을 사용한 HSP90 억제는 세포자멸사를 유도하고 세포 주기 정지를 일으켰습니다. PU-H71은 또한 다른 종양성 경로와 비교하여 MYC 전사 프로그램을 강력하고 상대적으로 특이적으로 억제합니다. MCL 환자 유래 이종이식 모델에서, HSP90 억제제는 종양 성장을 지연시키고 생존을 연장시킵니다. 마지막으로, 우리는 PU-H71이 임상적으로 이브루티닙에 내성을 보인 환자에서 유래한 MCL 세포에서 세포자멸사를 유도하고 MYC 단백질을 하향 조절함을 보여주었습니다.

가설:
결론적으로, MYC 활성은 MCL에서 이브루티닙에 대한 내재적 저항성의 기초가 됩니다.


전제:
활성화 유도 시티딘 디아미나제(AID)는 종자중심(GC) B 세포에서 체세포 과다돌연변이와 면역글로불린(Ig) 클래스 스위치 재조합에 필요하다. 때때로 AID는 비-Ig 유전자를 표적으로 삼아 GC B-세포 림프종 발생을 촉진할 수 있다. 우리는 최근 종양성 BCR-ABL1 키나아제가 전구 B 급성 림프구성 백혈병(ALL)과 림프구성 만성 골수성 백혈병 급성기에서 AID의 비정상적 발현을 유도한다는 것을 보여주었다. 비정상적 AID 발현의 생물학적 중요성을 규명하기 위해, 우리는 BCR-ABL1 ALL의 생쥐 모델에서 AID 기능 상실을 연구했다. BCR-ABL1로 형질도입된 AID(-/-) 골수를 이식받은 생쥐는 AID(+/+) 골수에서 생성된 백혈병 세포를 이식받은 생쥐에 비해 생존 기간이 연장되었다. 유전적 불안정성에 대한 AID의 인과적 역할과 일치하여, AID(-/-) 백혈병은 AID(+/+) 백혈병에 비해 증폭 및 결실의 빈도가 낮았고, Pax5와 Rhoh를 포함한 비-Ig 유전자의 돌연변이 빈도도 낮았다. AID(-/-) 및 AID(+/+) ALL 세포는 현저히 다른 유전자 발현 양상을 보였으며, AID(-/-) ALL 세포는 Rhoh, Cdkn1a (p21), Blnk (SLP65)를 포함한 여러 종양 억제 유전자의 하향 조절에 실패했다.

가설:
급성 림프구성 ALL이 BCR-ABL1 AID에서 유전적 불안정성과 비정상적인 체세포 과다변이를 증가시키고 종양 억제 유전자를 음성 조절함으로써 클론 진화를 가속화한다고 우리는 결론 내립니다.


전제:
c-Kit의 활성화 돌연변이는 t(8;21) 염색체 전이에 의해 융합 단백질 AML1-ETO가 생성되는 급성 골수성 백혈병(AML) 환자에서 자주 발견됩니다.  여기서 우리는 c-Kit의 활성 돌연변이가 마우스 골수 이식 모델에서 AML1-ETO와 협력하여 AML을 유도한다는 것을 보여줍니다. c-Kit(D814V)와 함께 AML1-ETO를 발현하는 백혈병 세포는 연속적으로 이식이 가능했습니다.

이식 실험 결과, 계통음성(lineage-negative) c-Kit(+)Sca-1(+) (KSL) 백혈병 세포가 백혈병 줄기 세포(LSCs)로 농축되었지만 계통양성(lineage-positive) 백혈병 세포는 그렇지 않았음을 나타냈습니다. KSL 백혈병 세포와 정상 세포 간의 유전자 발현 프로파일 비교를 통해 CD200R1이 KSL 정상 세포에 비해 KSL 백혈병 세포에서 높게 발현된다는 것이 밝혀졌습니다.

CD200R1의 발현 증가는 계통음성 백혈병 세포에서 확인되었지만 계통양성 백혈병 세포에서는 확인되지 않았습니다. 계통음성 백혈병 세포에서 CD200R1의 발현은 LSCs의 빈도와 상관관계가 없었으며, 이는 CD200R1이 이 모델들에서 LSCs의 유용한 표지자가 아님을 나타냅니다.

흥미롭게도 CD200R1은 c-Kit(D814V), AML1(D171N), AML1(S291fsX300)을 포함한 다른 백혈병 유발 돌연변이가 아닌 AML1-ETO로 형질도입된 KSL 세포에서 발현이 증가했습니다. 이와 일치하게, 계통음성 백혈병 세포에서 CD200R1의 발현 증가는 AML1-ETO 양성 백혈병을 앓고 있는 쥐의 골수에서만 관찰되었습니다.

가설:
결론적으로, AML1-ETO는 계통 음성 세포에서 CD200R1을 상향 조절했으며, 이는 마우스에서 AML1-ETO 양성 세포 백혈병의 특징이었다.


전제:
급성 골수성 백혈병(AML)의 맥락에서 NRAS 종양유전자(NRAS(G12V))의 종양 유발 역할을 연구하기 위해, 우리는 AML을 발생시키는 Mll-AF9 녹인 마우스에서 Vav 프로모터-테트라사이클린 트랜스액티베이터(Vav-tTA) 구동 억제 가능한 TRE-NRAS(G12V) 형질전환 유전자 시스템을 사용했다. NRAS(G12V) 발현의 조건부 억제는 백혈병 수용 마우스의 말초 백혈구(WBC) 수치를 크게 감소시켰고, 이식된 AML 세포에서 세포자멸사를 유도했으며 이는 Ras/Erk 신호 전달의 감소와 연관되었다. AML 모세포의 현저한 감소 후, NRAS(G12V)를 발현하지 않는 세포를 특징으로 하는 골수증식성 질환(MPD)과 유사한 AML이 재발했다. 일차 AML과 비교하여, MPD 유사 AML은 현저히 감소된 공격성, 감소된 골수억제, 그리고 더 분화된 표현형을 보였다.

가설:
우리는 Mll-AF9 형질전환 유전자에 의해 유도된 AML에서 NRAS(G12V) 발현이 백혈병 세포의 세포자멸을 억제하고 분화를 감소시켜 급성 백혈병의 유지에 기여한다는 결론을 내렸다.


전제:
Fms 유사 티로신 키나아제 3(FLT3)의 막근접 부위에서의 내부 탠덤 중복(ITD)은 제III형 수용체 티로신 키나아제(RTK)로, 급성 골수성 백혈병(AML)과 관련된 가장 흔한 분자 결함이다. 이 활성화 돌연변이의 높은 유병률로 인해 분자 기반 치료의 잠재적 표적이 된다. 인돌리논계 티로신 키나아제 억제제는 제III형 RTK 계열의 다른 구성원인 KIT에 대한 활성이 알려져 있다. 이 계열 구성원 간의 보존된 유사성을 고려할 때, 우리는 일부 KIT 억제제의 활성이 FLT3까지 확장될 것이라고 가정했다. 우리는 다양한 백혈병 세포주(BaF3, MV 4-11, RS 4;11)를 사용하여 야생형(WT)과 ITD 동형체 모두의 FLT3 키나아제 활성에 대한 인돌리논 화합물의 활성을 시험했다. SU5416과 SU5614 모두 ITD와 WT FLT3의 자가인산화를 억제할 수 있었다(SU5416의 50% 억제 농도[IC(50)], 100 nM; SU5614 IC(50) 10 nM). FLT3 의존적인 하위 신호 단백질 미토겐 활성화 단백질 키나아제(MAPK)와 신호 변환자 및 전사 활성자 5(STAT5)의 활성화도 동일한 농도 범위에서 처리에 의해 억제되었다. SU5416과 SU5614에 의한 FLT3 억제는 FLT3 ITD 양성 백혈병 세포주의 증식 감소(IC(50), 각각 250 nM 및 100 nM)와 세포자멸사 유도를 초래했다. 이러한 세포들을 대체 성장인자인 GM-CSF로 처리하면 MAPK 신호 전달과 세포 증식이 회복되어 관찰된 억제 효과의 특이성을 입증했다.

가설:
결론적으로, SU5416과 SU5614는 FLT3에 대한 강력한 억제제이다.


Premise:
Icatibant, kipingamizi cha kichocheo-2 cha bradykinin, huadministwa kwa njia ya sindano chini ya ngozi kwa matibabu ya mashambulizi ya ugonjwa wa hereditary angioedema aina ya I na II. Baada ya sindano, wagonjwa huhisi maumivu ya muda ikifuatiwa na uvimbe na wekundu kwa muda mfupi katika eneo la sindano. Tulitoa nadharia kuwa uvimbe na wekundu unaosababishwa na icatibant unafuata utoaji wa histamine kutoka kwa seli za mast zilizotumika kwenye ngozi na kwa hivyo ungepunguzwa na kipingamizi cha H(1)-antihistamine. Sindano ya ndani ya ngozi ya mikrolitari 100 ya histamine ya 100 渭g/ml na icatibant ya 10 mg/ml kwenye mikono ya watu wa kujitolea wenye afya ilisababisha uvimbe na wekundu wa ukubwa sawa ambao ulipunguzwa na matibabu ya awali ya cetirizine kwa 49% na 41% (histamine) na 35% na 41% (icatibant). Utafiti katika vitro ulionyesha kuwa icatibant kwa kiwango cha 1 脳 10(-4) na 1 脳 10(-5) M ilisababisha utoaji wa histamine kwa kiwango cha maana (P < 0.05) kutoka kwa seli za mast za binadamu zilizotengwa kutoka kwenye ngozi.

Hypothesis:
Kwa hitimisho, icatibant husababisha mwitikio wa wekundu na kuvimba unaosababishwa na histamine ambao unaweza kupunguzwa ukali wake kwa kutolewa mapema kwa dawa ya kupunguza histamine H(1).


Premise:
Bidhaa zinazotokana na uharibifu wa proteolytic wa fibrinogen ya binadamu (FDP) ziligundulika kusababisha utoaji wa histamine kutoka kwa seli za mast za tumbo la panya. Peptidi ndogo zenye uzito mdogo wa molekuli, zinazoweza kupitishwa kwa dialysis (FDP) zilionyesha shughuli ya juu zaidi ya kutoa histamine inayotegemea kiasi. Utoaji wa histamine unaosababishwa na FDP ulizuiliwa kwa ufanisi na dawa ya dhahabu auranofin katika mkusanyiko wa 10(-5)-10(-7) mol/l na pia na dawa zisizo steroidi za kupunguza uvimbe BW 755c, timegadine, medosan, naproxen, na aspirin katika kiwango cha juu cha mkusanyiko wa 10(-4)-10(-6) mol/l.

Hypothesis:
Imehitimishwa kuwa utoaji wa histamini kutoka kwa seli za mast unaweza kudhibitiwa kwa kiwango fulani na dawa za kupunguza uvimbe, hasa auranofin, BW 755c na timegadine, sifa ya utendaji ambayo inaweza kuwa na manufaa katika usimamizi wa magonjwa ya viungo.


Premise:
(E,Z)-3-(3',5'-Dimethoxy-4'-hydroxy-benzylidene)-2-indolinone (indolinone) ni alkaloid ambayo imetambuliwa kama kisima chenye utendaji wa kifarmakologia katika virutubishi vya mmea wa Isatis tinctoria, ambao kimila unatumiwa kama dawa ya kupunguza uvimbe. Indolinone imeonyeshwa kuzuia compound 48/80 inayosababisha degranulation ya seli za mast in vitro. Matumizi ya indolinone kwenye seli za mast zilizotokana na mfupa ilionyesha kuwa ilisambazwa kwa usawa kwenye cytoplasm na kuwa ufyonzwaji wake katika seli ulikoma ndani ya dakika chache. Matibabu ya awali ya seli za mast zilizohisiwa na IgE kwa indolinone ya 100nM ilifanya ziwe haziathiriwi na degranulation inayotegemea resepita ya FcvarepsilonRI. Hata hivyo, ishara za juu zinazosababishwa na antijeni kama vile uamsho wa PI3-K na MAPK hazikuathiriwa.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba indolinone huzuia degranulesheni ya seli mast katika kiwango cha eksositosi ya chembe zenye IC(100) ya 54nm.


Premise:
Kufunguliwa kwa chembe za vimatibabu vilivyotengezwa awali kutoka kwa seli za mast na basofili (k.m. histamini, serotonini, beta-heksosiaminidesi) kunachochewa na FcepsilonRI na ni nyeti kwa dawa za kudhoofisha kinga cyclosporin A na FK506 (IC50 200 na 4 nM, mtawalia) lakini sio rapamycin. Utaratibu wa kuzuiwa hauonekani kuhusisha fosforilesheni ya tyrosini, hydrolisis ya inositol fosfeti au mtiririko wa kalsiamu. Hapa tunaripoti majaribio yanayotumia mbinu ya kimolekuli kutathmini jukumu la calcineurin, fosfatesi ya serine/threonine inayoaminika kuwa lengo kuu la kifarmakolojia la dawa hizi. Shughuli ya calcineurin inahitaji ushirikiano wa kiini chake kichochezi (A) na kiini chake kidhibiti cha ndani (B). Tulitabiri kuwa matukio ya ishara nyeti kwa calcineurin yapaswa kuathiriwa na upungufu wa viini vya calcineurin B, hivyo kupunguza idadi ya makundi tendaji ya A:B. Kwa hivyo, tulizipenyeza seli za leukemia ya basofili za panya (RBL) na aina ya kizuizi (kinachoshinda kinyume) cha kiini cha calcineurin A, ambacho kinaunganishwa na kiini cha calcineurin B kwa nguvu kubwa lakini hakina shughuli ya kichochezi (kutolewa kwa kiini B, BKO). Katika seli hizi zilizopenyezwa, mchoro wa mwitikio wa dozi kwa kuzuiwa kwa kufunguliwa kwa chembe za vimatibabu kunachochewa na FcepsilonRI na FK506 ulihamishwa kushoto, kuonyesha ongezeko la unyeti wa dawa katika seli zilizopenyezwa na BKO.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba kizuizi cha Adenosine katika utoaji wa FcepsilonRI unaohusiana na exocytosis katika seli za mast kunalenga mahsusi shughuli za calcineurin.


Premise:
Seli za MC9 mast, zilizosensitaizwa na antibodi ya IgE ya monoclonal mahususi kwa kikundi cha 2,4-dinitrophenyl (DNP), ziliwekwa kwenye DNP-BSA na ishara za pH na kalsiamu ya cytosolic zilirekodika kwa kutumia vipima fluorescent BCECF na Fura-2 mtawalia. Ualkalinaizesheni wa seli uliosababishwa na DNP-BSA ulizuiwa kabisa na azelastine kwa IC50 (1.6 +/- 0.5 mumol/l, wastani +/- SEM, n = 5) inayofanana na ile inayohitajika kuzuia utoaji wa histamine (1.4 mumol/l). Kinyume chake, viwango vya juu vya azelastine (> 100 mumol/l) vilihitajika kuzuia usafiri wa kalsiamu ya seli unaotegemea DNP-BSA (IC50 takriban 200 mumol/l, n = 3). Amiloride, lakini sio mpinzani wa histamine H1 pyrilamine, iliweza kuzuia ishara ya pH iliyosababishwa na DNP-BSA. Katika seli za mast zilizoacidifiwa, azelastine kwa nguvu ilizuia shughuli za ubadilishanaji wa Na+:H+ (IC50 = 7.7 +/- 3.6 x 10(-6) M, wastani +/- SEM, n = 3). Kinyume chake, katika limfositi za wengu wa panya, azelastine haikuweza kuzuia ishara ya pH inayohisi amiloride iliyosababishwa na concanavalin A.

Hypothesis:
Kwa kumalizia, uendelezaji wa utoaji wa histamini kutokana na azelastine sio kwa sababu ya kuingilia ishara ya kalsiyamu ya saitosoliki.


Premise:
Kipambanuzi cha mkusanyiko wa Rhodnius prolixus 1 (RPAI-1), protini ya kDa-19 iliyotengwa kutoka tezi ya mate ya R. prolixus, ilisafishwa kwa ubadilishanaji wa kationi imara na kromatografia ya ubora wa juu ya kipindi cha kinyume. Kwa kutegemea mfuatano wa asidi ya amino 49 za kaskazini-mwisho wa RPAI-1, vichocheo vilitengenezwa ili kuzalisha vipima ili kuchuja maktaba ya cDNA ya tezi ya mate ya R. prolixus. Fegi yenye kloni kamili ya RPAI-1 inaweka kodi kwa protini iliyokomaa ya asidi amino 155. RPAI-1 inaonyesha ulinganifu wa mfuatano na triabin na pallidipin, lipocalins kutoka Triatoma pallidipennis. Mfuatano wa cDNA uliingizwa kwenye kivutio cha maonyesho cha Escherichia coli cha Pet17B, kuzalisha peptidi inayotenda kazi. RPAI-1 inazuia mkusanyiko wa plasma tajiri ya chembe za damu nyekundu za binadamu unaochochewa na viwango vya chini vya ADP, kolageni, asidi ya arachidonic, mimetics ya thromboxane A(2) (U46619), na dozi ndogo sana za thrombin na convulxin. Hapa tunaonyesha kuwa ADP ni lengo la RPAI-1 kwa kuwa (i) RPAI-1 inazuia uundaji wa mkusanyiko mkubwa unaotegemea ADP na utoaji unaoanzishwa na U46619, bila kuathiri ongezeko la Ca(2+) na mabadiliko ya umbo; (ii) ADP ilirudisha kuzuia kwa mkusanyiko wa chembe za damu uliosababishwa na U46619 na RPAI-1, (iii) ongezeko la cAMP lililosababishwa na PGE(1) (ambalo linapingwa na U46619 kwa njia inayotegemea ADP) lilirudishwa na RPAI-1, (iv) RPAI-1 inazuia majibu ya viwango vya chini vya ADP kwenye chembe za damu zilizotibiwa kwa indomethacin, na (v) RPAI-1 inaunganishwa na ADP, kama ilivyofanyiwa tathmini kwa kromatografia ya eneo kubwa. RPAI-1 haiathiri majibu ya chembe za damu yanayoendeshwa na integrin alpha(2)beta(1) wala glycoprotein VI.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba RPAI-1 ni lipocalin ya kwanza iliyoelezwa ambayo inazuia mgandamizo wa chembe sahani kupitia utaratibu mpya, kwa kujiunga na ADP.


Premise:
Ili kuongeza uelewa wetu wa taratibu ambazo homoni ya ukuaji (GH) na sababu ya ukuaji inayofanana na insulini (IGF)-I huathiri maendeleo ya tezi ya ziwa ya ng'ombe, majukumu yanayowezekana ya T-box2 (TBX2) na T-box3 (TBX3) yalichunguzwa. Ingawa hakuna taarifa kuhusu utoaji wa yoyote kati ya vigezo vya unukuzi katika tezi ya ziwa ya ng'ombe, inajulikana kwamba TBX3 na mwanafamilia wake wa karibu sana, TBX2, vinahitajika kwa maendeleo ya tezi ya ziwa kwa binadamu na panya. Aidha, mabadiliko ya TBX3 kwa binadamu na panya husababisha dalili ya ulnar mammary. Ushahidi upo kwenye mfupa kwamba TBX3 inahitajika kwa kuzaliana na utoaji wake unadhibitiwa na GH, mdhibiti muhimu wa maendeleo ya tezi ya ziwa na uzalishaji wa maziwa. Tulitoa nadharia kwamba TBX2 na TBX3 zinaonekana katika tezi ya ziwa ya ng'ombe na kwamba GH, IGF-I, au zote huongeza utoaji wa TBX2 na TBX3 katika seli za theliya za tezi ya ziwa ya ng'ombe (MEC). Tishu ya tezi ya ziwa ya ng'ombe, seli za MAC-T, MEC za msingi, na fibroblasti zilipatikana na utoaji wa TBX2 na TBX3 uliamrishwa kwa PCR ya urejeo unukuzi wa wakati halisi. Zaidi ya hayo, utoaji wa TBX2 na TBX3 ulichunguzwa katika seli zilizotibiwa na 100 au 500 ng/mL za GH au 100 au 200 ng/mL za IGF-I kwa saa 24 au 48. TBX2 na TBX3 zote zilionyeshwa katika tishu ya ziwa ya ng'ombe. Kwa kushangaza, utoaji wa TBX2 ulitambuliwa tu katika seli za fibroblasti za ziwa, wakati TBX3 ilionyeshwa katika aina zote 3 za seli. Homoni ya ukuaji haikubadilisha utoaji wa TBX3 katika seli za MAC-T au MEC. Hata hivyo, IGF-I iliongeza utoaji wa TBX3 katika MAC-T, lakini si katika MEC za msingi. Hatukuona mabadiliko katika utoaji wa TBX2 au TBX3 katika fibroblasti zilizotibiwa na GH na IGF.

Hypothesis:
Kwa hiyo, tulihitimisha kwamba (1) TBX2 na TBX3 zinaonyeshwa katika tezi ya maziwa ya ng'ombe, (2) uonyeshaji wao ni maalum kwa aina ya seli, na (3) Fur inachochea uonyeshaji wa TBX3 katika seli za MAC-T.


Premise:
Ushawishi wa heparin kwenye mzunguko kati ya thrombin na kizuizi cha kiamsishaji cha plasminogen-1 (PAI-1) umechunguzwa. Kwa ziada ya mara 50 ya PAI-1, thabiti ya kiwango cha kuzuia thrombin ilikuwa 458 mol/L-1s-1, ambayo iliongezeka hadi 5,000 mol/L-1s-1 kwa uwepo wa heparin isiyogawanywa ya mikrogramu 25/mL au heparin yenye mvuto mdogo kwa antithrombin. Athari za heparin ya mvuto mdogo zilichunguzwa kwa njia ya elektroforesi ya jeli ya sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide, kwa kutumia viwango vya karibu visawazishwavyo vya vitu vinavyotenda kazi. Thrombin na PAI-1 ziliunda muunganiko thabiti wa kistoimiometria katika ukosefu wa heparin, ambao haukutenganishwa baada ya kuongezwa kwa heparin ya mvuto mdogo ya mikrogramu 25/mL. Kinyume na hayo, wakati heparin ya mvuto mdogo ilipoongezwa mwanzoni mwa mzunguko, kulikuwa na ongezeko la awali katika uundaji wa muunganiko wa PAI-1-thrombin, lakini hili lilifuatiwa haraka na ukataji mkubwa wa proteolytic wa PAI-1 isiyotenda kazi na ya muunganiko wa thrombin-PAI-1. Wazo kwamba viwango vya uwiano wa thrombin na PAI-1, na uwepo wa heparin ya mvuto mdogo, zinaweza kuathiri mazao ya mzunguko ulichunguzwa kwa kina. Uchambuzi wa kizymographic wa shughuli za kiamsishaji cha tishu cha plasminogen na PAI-1 na upimaji wa substrate wa chromogenic wa shughuli za thrombin ulionyesha kwamba heparin ya mvuto mdogo ilichochea kutofanya kazi kwa PAI-1 kwa kiasi sawa cha thrombin, lakini ilisababisha tu uchochezi mdogo wa kuzuia thrombin.

Hypothesis:
Imehitimishwa kuwa heparin yenye umashiko-mdogo huongeza kuzuia ya thrombin wakati PAI-1 iko kwa wingi, lakini, kinyume na matarajio, heparin yenye umashiko-mdogo huongeza kuharibika kwa PAI-1 wakati thrombin iko kwa uwiano sawa na PAI-1.


Premise:
Utengenezaji wa mfupa kwa njia ya mvutano (DO) ni mchakato ambao husababisha moja kwa moja uundaji wa mfupa mpya kutokana na mvutano wa kimechanical. Kiini cha nekrosi ya uvimbe-alfa (TNF) ni cytokine ambayo inaweza kurekebisha mchakato wa osteoblastogenesis. Athari za moja kwa moja za TNF kwenye uundaji wa moja kwa moja wa mfupa katika wanyama wamelea zinadhaniwa kupatikana kupitia ishara za kipokezi cha TNF 1 na/au 2 (TNFR1/2). Tulitumia muundo wa kipekee wa DO ya panya kutathmini athari za 1) mabadiliko ya kimsingi ya jeni isiyokuwa na TNFR kwenye uundaji wa moja kwa moja wa mfupa na 2) rmTNF kwenye panya wa kawaida (WT), TNFR1(-/-) (R1KO), na TNR2(-/-) (R2KO). Uchambuzi wa radiolojia na histolojia wa uundaji wa moja kwa moja wa mfupa kwenye pengo la mvutano haukuonyesha tofauti muhimu kati ya panya wa WT, R1KO, R2KO, au TNFR1(-/-) na R2(-/-) (R1 na 2KO). Panya wa R1 na 2KO walikuwa na viwango vya juu vya TNF katika damu lakini hawakuonyesha kuzuiwa kwa uundaji wa mfupa mpya. Utoaji wa mfumo wa rmTNF kwa njia ya pampu ya osmotic wakati wa DO (mikrogramu 10/kg/siku) ulisababisha kuzuia kwa kiasi kikubwa vipimo vya uundaji wa mfupa kwenye pengo kwa panya wa WT na R2KO, lakini si kwa panya wa R1KO.

Hypothesis:
Tunahitimisha kuwa rmTNF ya nje na/au TNF ya ndani hufanya kazi kuzuia uundaji wa mifupa mipya wakati wa DO kwa kutuma ishara hasa kupitia TNF R1.


Premise:
Ingawa Gbetagamma inadhaniwa kuwa kiungo cha uamsho wa kinase ya protini iliyoamsishwa na mitogeni (MAPK) kama jibu kwa mchocheo wa resepita inayounganishwa na protini G, taratibu zinazohusika katika njia hii hazijafafanuliwa kikamilifu. Kinase ya 3-fosfolinositidi (PI3K) imependekezwa kama kiungo cha awali katika mchakato huu, lakini jukumu lake bado halijulikani vizuri. Tumeona kuwa vinasaba fisidi vya p110beta, lakini si vya p110gamma, vilizuia uamsho wa MAPK kama jibu kwa asidi ya lysofosfatidiki (LPA). Jukumu la p110beta lilitambuliwa kuwa juu ya mkondo wa Ras. Ili kubaini ni shughuli ipi kati ya shughuli za kinase ya lipidi au protini za p110beta zilikuwa muhimu kwa uamsho wa Ras, tulizalisha vinasaba fisidi vya p110beta ambavyo havina shughuli ya kinase ya lipidi lakini vina shughuli ya kinase ya protini. Protini hii ilionyesha shughuli ya vinasaba fisidi inayofanana na kinase iliyokufa, ikionyesha kuwa shughuli ya kinase ya lipidi ya p110beta ilikuwa muhimu katika uamsho wa Ras. Kwa kuhusiana na hili, uongezaji wa fosfatase ya lipidi PTEN uligunduliwa kuzuia mahususi uamsho wa Ras uliosababishwa na LPA. Zaidi ya hayo, tumeona kuwa protini inayochukua jukumu la kiunganishi yenye eneo la PH Gab1, ambayo inahusika katika uamsho wa p110beta wakati wa mchocheo wa LPA, pia inahusika katika njia hii chini ya mkondo wa p110beta. Hakika, upya wa usambazaji wa kiwamemba na fosforilisheni wa Gab1 vilipungua kwa uwepo wa vizuizi vya PI3K au p110beta fisidi ya kutawala. Chini ya Gab1, fosfatase ya tyrosini SHP2 ilipatikana kuwa kiungo cha uamsho wa Ras kama jibu kwa LPA na kuajiriwa kupitia PI3K na Gab1, kwa sababu upachikaji wa vinasaba fisidi vya Gab1 visivyo na uwezo wa kufungwa na SHP2 ulizuia uamsho wa Ras bila kuingilia uamsho wa PI3K.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba shughuli ya kinase ya lipidi ya p110beta ni muhimu kwa uamsho wa Ras unaosababishwa na LPA na kwamba PI3K na Gab1 zinahusika katika njia hii.


Premise:
Jukumu la FSH katika mchakato wa spermatogenesis halijulikani vizuri kwani testosteroni pekee imeripotiwa kuwa ya kutosha katika panya mwenye upungufu wa gonadotropin. Utafiti huu ulichunguza athari za FSH iliyotengenezwa kwa njia ya recombinant kwenye urejesho wa spermatogenesis baada ya kuondolewa kwa gonadotropin kupitia chanjo ya GnRH. Panya wazima wa aina ya Sprague-Dawley walipewa chanjo ya GnRH (mikrogramu 100, sc, kila wiki 4) kusababisha upungufu wa gonadotropin, na kufikia wiki 12 kulikuwa na kusinyaa kubwa kwa spermatogenesis. Kisha FSH ya binadamu iliyotengenezwa kwa njia ya recombinant ilitolewa (10 au 50 IU/kg, sc, kila siku) kwa muda wa siku 7, 14, na 21, na takwimu kutoka kwa dozi zote mbili zilichanganywa katika uchambuzi. Korodani zilihifadhiwa kwa njia ya perfusion, na idadi ya seli za uzazi zilihesabiwa kwa kutumia mbinu ya optical disector. Baada ya siku 7 za FSH, uzito wa korodani uliongezeka kwa kiasi kikubwa cha asilimia 43% (P < 0.01), bila ongezeko zaidi katika siku 14 na 21. Chanjo ya GnRH ilipunguza sana idadi ya seli za uzazi, ambazo kisha zilirejeshwa kwa kiasi kikubwa (P < 0.05) katika aina zote za seli, isipokuwa spermatidi zilizochongoka, kwa siku 7 za FSH; spermatogonia aina A (45%-->61% ya udhibiti), spermatogonia aina B/spermatocyte za preleptotene (46%-->65%), spermatocyte za leptotene/zygotene (39%-->55%), spermatocyte za pachytene katika hatua I-VIII (11%-->30% ya udhibiti) na IX-XIV (4.3%-->22% ya udhibiti), na spermatidi duara katika hatua I-VIII (1.4%-->4.4% ya udhibiti). Matibabu ya muda mrefu ya FSH hayakuongeza zaidi idadi ya spermatogonia aina A au spermatocyte za pachytene, ingawa spermatidi duara ziliongezeka hadi kilele cha 12.8% ya thamani ya udhibiti. Katika hatua zote, FSH haikuongeza idadi ya spermatidi zilizochongoka zaidi ya 1% ya kiwango cha udhibiti. Ujumuishaji wa bromode-oxyuridine kwenye nyuklia za spermatogonia na spermatocyte za mapema haukubadilika baada ya chanjo ya GnRH au matibabu ya FSH. Idadi ya seli za Sertoli haikubadilishwa na matibabu yoyote; hata hivyo, kiwango cha nyuklia ya seli za Sertoli kilipungua kwa kiasi kikubwa kutoka kiwango cha udhibiti kwa chanjo ya GnRH (142 +/- 9 dhidi ya 455 +/- 22 mikroni 3; P < 0.01) na kuongezeka baada ya siku 7 na 14 za matibabu ya FSH hadi 212 +/- 10 na 259 +/- 24 mikroni 3, mtawalia. Matibabu ya FSH yalirejesha viwango vya inhibin kwenye kawaida, lakini hayakuongeza viwango vya androgen kwenye damu au korodani.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba FSH rekombinanti hurudisha kwa kiasi spermatogenesis katika panya mwenye upungufu wa gonadotropin kwa kuongeza idadi ya spermatogonia na kukuza hatua za ukomavu zinazofuata hadi katika hatua ya spermatidi duara.


Premise:
Uwezo wa majimaji ya folekulari ya binadamu (hFF), iliyopatikana kutoka kwa wanawake wanaopitia IVF kusababisha mchakato wa akrosomi (AR) katika mbegu za kiume za binadamu umeandikwa na maabara kadhaa. Hata hivyo, asili ya vipengele vinavyofanya kazi katika hFF na maana ya kimaumbile ya uchochezi wa AR ni masuala yanayozua utata mkubwa. Tulitekeleza mpango wa utakasaji wa hatua tatu kwa hFF na vikundi vyote vilichunguzwa kwa shughuli ya kuchochea-AR. Shughuli ya AR ilihusishwa na sehemu ya protini ya M(r) > 180 kD ambayo baada ya uchunguzi zaidi chini ya PAGE ilipatikana kuwa imeundwa na vitengo vidogo vya M(r) 50,000 na 29,000. Mfuatano wa N-terminal wa bendi hizi ulionyesha uhusiano wa 100% na minyororo mizito na nyepesi ya IgG ya binadamu. Antibodi ya poliklonali iliyotengenezwa dhidi ya protini iliyosafishwa na anti-human IgG zote ziliweza kuzuia shughuli ya kuchochea mchakato wa akrosomi katika hFF ghafi. Hata hivyo, wala seramu ya kawaida ya binadamu wala maandalizi yaliyosafishwa ya IgG ya binadamu hayakuweza kuiga shughuli ya kuchochea AR ya hFF.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba uzalishaji wa AR katika hFF unaongozwa na IgG ya binadamu.


Premise:
Hiperinsulinemia huongeza uwezo wa dozi ndogo za hormoni gonadotropini ya korioni ya binadamu (hCG) kusababisha vikovu vya folikuli za ovari katika panya. Ili kubaini mchango wa hormoni hizi katika ukuaji wa vikovu vya ovari, panya wakubwa wa kike walitibiwa kwa ama (1) kifaa cha udhibiti pekee (vikundi vya udhibiti), (2) mlo wenye mafuta mengi (HFD) kudhibiti athari za ongezeko la uzito, (3) 1.5 hadi 6 IU hCG mara mbili kwa siku pamoja na 6 U insulini (Ins)/siku, au (4) 1.5 hadi 9 U Ins/siku pamoja na 3 IU hCG mara mbili kwa siku. Katika siku ya 23 ya matibabu, vikundi vyote vilivyopokea angalau 6 U Ins/siku vilionyesha ongezeko la uzito wa mwili ikilinganishwa na panya wa udhibiti na HFD (P < au = .05). Hakuna panya wa udhibiti na ni panya mmoja tu wa HFD aliyeonyesha vikovu vya ovari siku hiyo. Kiwango cha estrone (E1) na androstenedione (A4) katika plasma kiliongezeka kwa panya wa HFD wenye folikuli zisizo na vikovu ikilinganishwa na panya wa udhibiti (P < au = .05). Kati ya 64% na 80% ya panya waliokuwa wanapokea 6 U Ins/siku pamoja na sindano mara mbili kwa siku za 1.5 hadi 6 IU hCG walionyesha vikovu vya ovari siku ya 23. Viwango vya estradiol (E2) katika plasma kwa vikundi hivi vya matibabu vilikuwa sawa na vile vya panya wa udhibiti. Kati ya wanyama waliotibiwa kwa hormoni, ni wale tu waliokuwa na vikovu vya ovari kwa kujibu sindano mara mbili kwa siku za 4.5 au 6 IU hCG pamoja na 6 U Ins/siku ndio walionyesha kuongezeka kwa A4 na/au testosterone katika plasma ikilinganishwa na panya wa udhibiti. Kinyume na hayo, viwango vya E1 katika plasma viliongezeka siku ya 23 kwa wanyama wenye vikovu vya ovari kutokana na dozi zinazoongezeka za hCG pamoja na dozi maalum ya 6 U Ins/siku. Kati ya 70% na 80% ya panya waliotibiwa mara mbili kwa siku na 3 IU hCG pamoja na dozi ya kila siku ya 1.5 hadi 6 U Ins walionyesha vikovu vya ovari siku ya 23. Kinyume kabisa, ni 25% tu ya panya waliotibiwa kwa dozi hii ya hCG pamoja na 9 U Ins/siku walipata folikuli zenye vikovu. Kati ya steroid zote za plasma zilizopimwa, ni E1 na A4 pekee ndizo ziliongezeka katika vikundi hivi vya matibabu ikilinganishwa na panya wa udhibiti. Hata hivyo, ongezeko hili la viwango vya steroid katika plasma halikuhusiana na dozi ya insulini.

Hypothesis:
Tunahitimisha kutokana na data hizi kwamba, ingawa visababishi bado havijaelezwa, hali kali ya insulini nyingi mno (hyperinsulinemia) ina uwezo wa kipekee wa kupunguza uzalishaji wa ACR unaochochewa na hCG katika baadhi ya wanyama.


Premise:
Tumeonyesha kwamba uchanjaji wa kortisoli ulipunguza mwitikio wa homoni ya luteinizing (LH) kwa sindano za GnRH zilizopeanwa kila saa kwa kondoo walioondolewa ovari na kutibiwa na estradiol wakati wa msimu wa kutokuzaliana (mfano wa pituitary-clamp). Kinyume chake, kortisoli haikuathiri mwitikio kwa sindano za GnRH zisizobadilika kila masaa 2 kwa kondoo walioondolewa ovari na kutenganishwa hypothalamo-pituitary wakati wa msimu wa kuzaliana. Ili kuelewa matokeo tofauti katika mifano hii ya wanyama na kubaini ikiwa kortisoli inaweza kutenda moja kwa moja kwenye pituitary kupunguza mwitikio kwa GnRH, tulichunguza umuhimu wa mzunguko wa msukumo wa GnRH, uwepo wa estradiol na hatua ya msimu wa mzunguko wa mwaka wa kuzaliana. Katika jaribio la 1, wakati wa msimu wa kutokuzaliana, kondoo walioondolewa ovari walitibiwa na estradiol, na uzalishaji wa LH kwa mishituko ulirejeshwa kwa sindano za GnRH kupitia mshipa kila saa au kila masaa 2 katika uwepo au ukosefu wa kortisoli ya nje. Majaribio ya 2 na 3 yalifanywa kwa kondoo walioondolewa ovari na kutenganishwa hypothalamo-pituitary ambapo GnRH ilichomekwa kupitia mshipa kila masaa 2. Jaribio la 2 lilifanywa wakati wa msimu wa kutokuzaliana na maji ya chumvi au kortisoli ilichanjwa kwa masaa 30 katika mpangilio wa kubadilishana. Jaribio la 3 lilifanywa wakati wa msimu wa kutokuzaliana na msimu wa kuzaliana na maji ya chumvi au kortisoli ilichanjwa kwa masaa 30 bila na pamoja na estradiol kwa kutumia mpangilio wa kubadilishana. Sampuli zilichukuliwa kutoka kwa wanyama wote kupima LH kwenye plasma. Ukubwa wa mishituko ya LH ulipunguzwa na kortisoli katika mfano wa pituitary clamp bila tofauti kati ya mishituko ya GnRH ya kila saa na kila masaa 2. Bila estradiol, hakukuwa na athari ya kortisoli kwenye ukubwa wa mishituko ya LH kwa kondoo walioondolewa ovari na kutenganishwa hypothalamo-pituitary waliorejelewa GnRH katika msimu wowote. Ukubwa wa mishituko ya LH ulipunguzwa katika misimu yote miwili katika jaribio la 3 wakati kortisoli ilichanjwa wakati wa matibabu ya estradiol.

Hypothesis:
Tunahitimisha kuwa uwezo wa mg/kg kupunguza utoaji wa LH hautegemei mzunguko wa msukumo wa GnRH na kwamba estradiol huwezesha mg/kg kutenda moja kwa moja kwenye tezi ya pituitari ya kondoo jike walioondolewa ovari na kutenganishwa na hypothalamo-pituitari ili kuzuia uwezekano wa mwitikio kwa GnRH; athari hii hutokea katika msimu wa kuzaliana na pia nje ya msimu wa kuzaliana.


Premise:
Katika Jaribio la 1, PMSG ilidungwa kwa panya wadogo wenye umri wa siku 26 kabla ya kubalehe ili kuchochea utungaji mayai. Mnamo Siku ya 2 (siku 2 baadaye, sawa na siku ya kabla ya joto) walipokea saa 2:00 asubuhi miligramu 5 za hydroxyflutamide au kifaa cha kubeba dawa na saa 6:00 mchana miligramu 2 za progesterone au testosterone au kifaa cha kubeba dawa. Wanyama waliuawa saa 12:00 jioni mnamo Siku ya 2 au saa 3:00 asubuhi mnamo Siku ya 3. Progesterone lakini sio testosterone ilirudisha ongezeko la ghafla la LH kabla ya kutungwa kwa mayai na utungaji wa mayai katika panya waliopewa hydroxyflutamide. Katika Jaribio la 2, miligramu 2 za progesterone au testosterone zilidungwa kati ya saa 4:30 na 5:00 asubuhi mnamo Siku ya 2, ili kuharakisha ongezeko la ghafla la LH wakati wa joto na utungaji wa mayai katika panya wadogo walioandaliwa na PMSG. Udungaji wa hydroxyflutamide uliondoa uwezo wa progesterone wa kuharakisha ongezeko la LH au utungaji wa mayai. Testosterone haikuchochea uharakishaji wa ongezeko la ghafla la LH au utungaji wa mayai. Katika Jaribio la 3, panya wadogo walioondolewa ovari waliowekewa oestradiol-17 beta walionyesha kiwango cha LH katika seramu kilichoongezeka kwa kiasi kikubwa (P chini ya 0.01) saa 12:00 jioni zaidi ya kile kilichoonekana saa 4:00 asubuhi. Udungaji wa progesterone kwa wanyama hawa uliongeza zaidi viwango vya LH katika seramu saa 12:00 jioni, kwa njia inayoongezeka kulingana na kiasi, na viwango vya juu zaidi vilikuwa matokeo ya miligramu 1 ya progesterone. Matibabu ya hydroxyflutamide yalipunguza kwa kiasi kikubwa (P chini ya 0.003) viwango vya LH katika seramu kwa panya waliopokea miligramu 0-1 za progesterone lakini miligramu 2 za progesterone ziliweza kushinda kizuizi hiki.

Hypothesis:
Imehitimishwa kwamba hydroxyflutamide lakini si testosterone inaweza kurekebisha athari za progesterone kwenye ongezeko la ghafla la LH kabla ya kutoka kwa yai na uzazi wa yai.


Premise:
Utafiti wa kesi-udhibiti uliopo ulichunguza mwingiliano kati ya asidi za mafuta zenye minyororo mirefu isiyoshibishwa zinazotokana na baharini n-3 (n-3 LC PUFAs) na asidi ya uric (UA) kwenye metaboli ya glukosi na hatari ya ugonjwa wa kisukari aina ya 2 (T2DM). Watu mia mbili na kumi na mmoja wenye afya katika kundi la udhibiti na watu mia mbili na sitini na nane wenye T2DM katika kundi la kesi walihusishwa. Asidi za mafuta za fosfolipidi za plasma (PL) na vigezo vya kibayokemia viligundulika kwa njia za kawaida. Plasma PL C22:6n-3 ilikuwa chini zaidi kwa kiasi kikubwa katika kundi la kesi kuliko katika kundi la udhibiti, na ilihusiana kinyume na glukosi ya mtu aliyefunga (r = -0.177, p < 0.001). Plasma PL C22:6n-3 ya juu ilihusishwa na hatari ya chini ya T2DM, na OR ilikuwa 0.32 (95% confidence interval (CI), 0.12 hadi 0.80; p = 0.016) kwa kila kiasi cha ongezeko cha C22:6n-3. UA ilikuwa chini zaidi kwa kiasi kikubwa katika kundi la kesi kuliko katika kundi la udhibiti. UA ilihusiana chanya na glukosi ya mtu aliyefunga kwa watu wenye afya, lakini uhusiano huu ukawa hasi kwa watu wenye T2DM. Mwingiliano muhimu ulionekana kati ya C22:6n-3 na UA juu ya glukosi ya mtu aliyefunga (p ya mwingiliano = 0.005): athari ya kupunguza ya C22:6n-3 ilikuwa muhimu tu kwa watu walio na kiwango cha chini cha UA.

Hypothesis:
Kwa hitimisho, metaboli ya glukosi :6n-3 huathiriana na UA ili kudhibiti C22.


Premise:
Hapo awali tulipiga ripoti kwamba kipozaji kinachotokana na ATP-binding cassette (ABC)A7 kinaunganishwa sana na utendaji kazi wa ufagocytosis badala ya uundaji wa lipoprotein yenye uzito wa juu (HDL), ikidhibitiwa na protini ya kipengele cha udhibiti-steroli (SREBP)2. Shughuli ya ufagocytosis ilipatikana kuimarishwa na apolipoproteini (apo)A-I na apoA-II zaidi ya mara mbili ya kiwango cha juu katika J774 na makrofaji ya peritoneal ya panya. Kwa hiyo tulichunguza msingi wa kimolekuli wa athari hii kuhusiana na kazi ya ABCA7. Sawa na ABCA1, ABCA7 iliharibiwa, yamkini na calpain, na apoA-I na apoA-II zilikinga ABCA7 dhidi ya uharibifu. Majaribio ya biotinylation ya uso wa seli yalionyesha kwamba ABCA7 za asili zinapatikana kwa kiasi kikubwa kwenye uso wa seli na kwamba apolipoproteini zinaongeza ABCA7 ya uso. Ongezeko la ufagocytosis kutokana na apolipoproteini liliendelea katika seli za J774 zilizotibiwa na ABCA1 siRNA na katika makrofaji ya peritoneal kutoka kwa panya wasio na ABCA1, lakini ilipunguzwa katika seli za J774 zilizotibiwa na ABCA7 siRNA na katika makrofaji ya peritoneal kutoka kwa panya wasio na ABCA7. Ufagocytosis ulipungua katika seli zilizo kwenye shimo la peritoneal la panya wasio na ABCA7 ikilinganishwa na udhibiti wa panya wa kawaida.

Hypothesis:
Kwa hiyo tulihitimisha kwamba apolipoproteini za helikali za nje ya seli huongeza fagositosi inayohusiana na ABCA7 kwa kustabilisha ABCA7.


Premise:
Lipoproteni zina jukumu muhimu katika ukuaji wa magonjwa ya metaboliki na moyo-mshipa kuanzia athari za kinga hadi athari mbaya kwenye tishu lengwa. VLDL imeonyeshwa kusababisha mkusanyiko wa lipidi zenye sumu na kuleta athari mbalimbali mbaya kwenye seli za myokadi. Usumu wa lipidi na msongo wa endoplasmic reticulum (ER) unapendekezwa kuwa wasuluhishi wa athari za uharibifu za magonjwa ya metaboliki kwenye mfumo wa moyo-mshipa. Tulishughulikia seli za myokadi na lipoproteni ili kutathmini uwezo wa kuhimili wa seli hizi kwa msongo wa metaboliki unaosababishwa na njaa na wingi wa lipoproteni, na kutathmini athari za lipoproteni na mkusanyiko wa lipidi kwenye msongo wa ER. VLDL ilirekebisha msongo wa metaboliki uliosababishwa na njaa, wakati HDL haikufanya hivyo. VLDL ilisababisha mkusanyiko wa lipidi unaotegemea kipimo kwenye seli za myokadi, ambao hata hivyo haukusababisha kupungua kwa uhai wa seli au kuchochea msongo wa ER. Zaidi ya hayo, matibabu ya awali ya VLDL au HDL yalipunguza msongo wa ER katika seli za myokadi uliosababishwa na tunicamycin na asidi ya palmitiki kama ilivyopimwa kwa kujieleza kwa viashiria vya msongo wa ER, hata katika hali za kuongezeka kwa mkusanyiko wa lipidi. VLDL na HDL zilichochea uamsho wa ERK1/2 inayohimili-uhai katika seli za myokadi; hata hivyo, uamsho huu haukuhusika katika kinga dhidi ya msongo wa ER. Pia, tuliona kwamba LDLR na VLDLR zinadhibitiwa tofauti na lipoproteni na msongo wa seli, kwani lipoproteni zilichochea protini ya VLDLR bila kujali kiwango cha mkusanyiko wa lipidi.

Hypothesis:
Tunahitimisha kuwa dhiki ya ER si kwa ghafla hatari kwa seli za myokadi na inaweza hata kuwa na athari nzuri, ikiwezesha seli kuishi chini ya njaa na kupunguza VLDL.


Premise:
Asidi ya nyongo yenye sumu kwa ini glycochenodeoxycholate (GCDC) inaongoza kifo cha seli za ini kupitia uamsishaji wa JNK, Akt, na Erk. Asidi ya nyongo isiyo na sumu kwa ini taurocholate inaaktifisha Akt na Erk kupitia kipokezi cha sphingosine-1-phosphate 2 (S1PR2). Jukumu la S1PR2 katika kifo cha seli kinachosababishwa na GCDC na uamsishaji wa kinase haijulikani. Utafiti ulifanywa katika seli za ini za panya, seli za HUH7, na seli za HUH7 zilizowekwa kimfumo na Ntcp ya panya (HUH7-Ntcp). Seli zilitibiwa na GCDC na apoptosis ilifuatiliwa kimofojia kwa kuweka rangi ya Hoechst na kibaiokemia kwa immunoblotting kwa kipande kilichotenganishwa cha caspase 3. Uamsishaji wa kinase uliamuliwa kwa immunoblotting na antibodi za phospho-mahususi. JTE-013, kizuizi cha S1PR2, kilipunguza kwa kiasi kikubwa ushahidi wa kimofojia wa apoptosis iliyosababishwa na GCDC na kuzuia mgawanyiko wa caspase 3 katika seli za ini za panya na seli za HUH7-Ntcp. Katika seli za ini, JTE-013 ilisimamisha kidogo, iliongeza, na haikuwa na athari kwenye fosforylation ya JNK, Akt, na Erk iliyosababishwa na GCDC, mtawalia. Matokeo sawa yalionekana katika seli za HUH7-Ntcp isipokuwa kwa unyimwaji mdogo wa fosforylation ya JNK na Erk. Kupunguzwa kwa S1PR2 katika HUH7-Ntcp kuliongeza Akt, kuzuia JNK, na haikuwa na athari kwenye fosforylation ya Erk. GCDC ilishindwa kusababisha apoptosis au uamsishaji wa kinase katika seli za HUH7.

Hypothesis:
Kwa kuhitimisha, kuzuia SIPR2 hupunguza apoptosis inayosababishwa na GCDC na huendeleza na kuongeza foforesho ya JNK na Akt inayosababishwa na GCDC, mtawalia.


Premise:
Upositaji wa amyloid beta-peptide (A beta) kwenye ubongo ni tabia ya kihistopatolojia ya ugonjwa wa Alzheimer. Kwa sababu uondoaji duni wa A beta unaweza kuhusika katika ugonjwa huu, tulichunguza uharibifu wa kiproteolisi wa A beta ya kisintesia (peptide yenye amino asidi 40) katika mazao ya seli za glia na tukaelezea protease inayohusika. Ingawa astrocytes za panya zilikuwa na uwezo mdogo sana wa uharibifu, seli za microglia za panya zilizokuzwa zilikata A beta. Shughuli za microglia ziliongezeka kwa kiasi kikubwa baada ya kuchochewa na lipopolysaccharide na kwa kiwango kidogo na phorbol esters. Sehemu kubwa ya shughuli za kuharibu A beta zilitolewa kwenye majimaji. Kwa kutumia vizuizi maalum, protease ilitambuliwa kama metalloprotease ya takriban kDa 200 ambayo ilikuwa tofauti na neutral endopeptidase (enzyme inayoharibu neuropeptide), matrix metalloproteases, au macrophage elastase. Shughuli zake zilipunguzwa kwa ufanisi na vizuizi vinne vya zinc-metalloprotease vilivyotokana na hydroxamic acid ambavyo vimeonyeshwa kuzuia membrane protein secretases (disintegrins).

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba A beta huharibiwa na seli za microglia in vitro kwa metalloprotease mpya.


Premise:
Kipima-kichaguzi cha 5-HT2-reseptah kinachozuia, ritanserin, ni analogi ya dawa ya kupunguza shinikizo la damu ketanserin. Kwa kutathmini athari za kupunguza shinikizo la damu za ritanserin, lengo la uchunguzi huu lilikuwa kuelezea kwa njia isiyo ya moja kwa moja utendaji wa ketanserin. Wagonjwa kumi na watatu wenye shinikizo la damu la kawaida walitibiwa kwa placebo na ritanserin, miligramu 10 mara mbili kwa siku, katika utaratibu wa majaribio ya upofu-mara mbili, mzunguko-tofauti (vipindi vya wiki 4). Mwishoni mwa vipindi vya matibabu, shinikizo la damu pamoja na kiwango cha ritanserin kwenye plasma vilitathminiwa kwa masaa 24. Licha ya hali ya kiwango cha juu cha plasma na kileleo cha ritanserin, dawa hiyo haikupunguza shinikizo la damu ikilinganishwa na placebo.

Hypothesis:
Kwa kuwa kuzuia sugu na kwa uteuzi wa kipokezi cha 4alpha-PDBu kwa njia ya ritanserin hakukushusha shinikizo la damu, inahitimishwa kwamba sifa za kuzuia 4alpha-PDBu za ketanserin pekee haziwezi kuwajibika kwa athari za kupunguza shinikizo la damu za ketanserin.


Premise:
Ugonjwa wa figo wa muda mrefu (CKD) unahusishwa na uzalishaji wa nitric oxide (NO) wa figo uliopungua na viwango vya plasma vya methylarginines vilivyoongezeka. Guanidino-methylated arginines zinazotokea kwa kawaida N-monomethyl-l-arginine (l-NMMA) na asymmetric dimethyl-l-arginine (ADMA) zinazuia shughuli za nitric oxide synthase. Tulihisi kuwa ADMA na l-NMMA zinaathiri utunzaji wa kizuizi cha uchujaji wa glomeruli kupitia upungufu wa NO. Tulichunguza athari ya ADMA kwenye uwezo wa albumin kupenyeza (P(alb)) katika glomeruli zilizotengwa na kuchunguza ikiwa athari hii inahusisha michakato inayotegemea NO na superoxide (O(2)(*)). ADMA katika viwango vinavyopatikana katika mzunguko wa damu kwa wagonjwa wenye CKD ilipunguza cGMP na kuongeza P(alb) kwa njia inayotegemea kipimo. Ongezeko sawa la P(alb) lilisababishwa na l-NMMA lakini katika kiwango cha mara mia mbili zaidi kuliko cha ADMA. Mtoaji wa NO DETA-NONOate au mfanano wa cGMP ulizuia athari ya ADMA kwenye P(alb). Tempol, mwigo wa SOD, au apocynin, kizuizi cha NAD(P)H oxidase, pia zilizuia ongezeko la P(alb) lililosababishwa na ADMA. Kiamsha cha soluble guanylyl cyclase (sGC) kisichotegemea NO BAY 41-2272, katika viwango vinavyoongeza uzalishaji wa cGMP wa glomeruli, kilipunguza ongezeko la P(alb) lililosababishwa na ADMA. Zaidi ya hayo, kuzuia sGC na ODQ, kizuizi cha eneo la heme, kuliongeza P(alb).

Hypothesis:
Tunahitimisha kuwa ADMA inaathiri uadilifu wa kizuizi cha uchujaji kwa kubadilisha upatikanaji-kibayolojia wa NO na O(2)(*-) na kwamba uamsho wa sGC usio-tegemea NO unahifadhi uadilifu wa kizuizi hiki katika hali ya upungufu wa NO.


Premise:
Maitiko ya kichocheo cha Angiotensin II (ANG II) yanayohusiana na uvimbe na msongo wa oksidisheni huchangia katika ugonjwa wa shinikizo la damu. Katika utafiti huu, tulitaka kujua kama uamilishaji wa mfumo wa renin-angiotensin (RAS) katika kiini cha hypothalamic paraventricular (PVN) huchangia katika maitikio ya shinikizo la damu yanayosababishwa na ANG II kupitia mwingiliano na neurotransa mita katika PVN. Panya walipatiwa dawa ya ANG II au maji ya chumvi kwa njia ya mwili kwa wiki 4. Panya hawa walitibiwa kwa wiki 4 kupitia uchochelezaji wa pande mbili za PVN kwa kutumia kichukuzi au losartan (LOS), kipingamizi cha mapokezi ya angiotensin II aina ya 1 (AT1-R), kupitia bomba ndogo la osmotiki. Uchochelezaji wa ANG II ulisababisha viwango vya juu vya glutamate, norepinephrine (NE), AT1-R na cytokine zinazochochea uvimbe (PIC), na kiwango cha chini cha asidi ya gamma-aminobutyric (GABA) katika PVN. Panya waliopokea ANG II pia walikuwa na viwango vya juu vya shinikizo la wastani la ateri, PIC za plasma, NE na aldosterone kuliko wanyama wa udhibiti. Matibabu ya LOS katika PVN yalipunguza maitikio haya ya shinikizo la damu yaliyosababishwa na ANG II.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba uamshaji wa RAS unaosababishwa na ANG II katika PVN huchangia katika mwitikio wa kupanda kwa shinikizo la damu unaoendeshwa na RAS kupitia mwingiliano na neurotransmita katika PVN.


Premise:
Tulichunguza athari ya matumizi ya siku nyingi (siku 15) ya dawa za kupunguza shinikizo la damu, kutoka makundi tofauti ya kifarmakolojia, kwenye shinikizo la mishipa ya damu (AP) na mabadiliko ya kasi ya moyo katika panya wenye shinikizo la juu la damu wa aina ya figo-mbili, kizuizi-kimoja (2K1C). Panya wa 2K1C walipewa kupitia mdomo moja ya yafuatayo: maji, ramipril, losartan, atenolol, amlodipine, au hydrochlorothiazide. Panya wa kawaida waliopata upasuaji wa bandia walipewa maji. Baada ya siku 15 za matibabu, shinikizo la damu lilipimwa kwa mfululizo kutoka katika katheta iliyowekwa kwa panya walio macho kwa kipindi cha saa 2, na shinikizo la sistoli na muda wa mpwito (PI) uliwasilishwa kwa uchambuzi wa spektra ya kiotomatiki wenye vipengele vya mizunguko vikiwa vimepimwa katika bendi za masafa ya chini (LF: 0.25 hadi 0.75 Hz) na masafa ya juu (HF: 0.75 hadi 3.0 Hz). Shinikizo la damu lililopimwa kwa njia ya mkia lilikuwa 170 +/- 2 mm Hg katika panya wa 2K1C na 131 +/- 3 mm Hg katika panya wa kawaida. Data zilizojumuishwa zilionyesha kuwa dawa zote za kupunguza shinikizo la damu zilipunguza shinikizo la damu la panya wa 2K1C hadi 127 +/- 2 mm Hg, wakati panya wa 2K1C waliopewa maji waliendelea kuwa na shinikizo la juu la damu (206 +/- 11 mm Hg). Tofauti ya shinikizo la sistoli ilipatikana kuwa imeongezeka kwa panya wa 2K1C waliopewa maji (34 +/- 2 mm Hg虏), wakati panya wa 2K1C waliotibiwa na ramipril, atenolol, amlodipine, au hydrochlorothiazide walionyesha tofauti ya shinikizo la damu sawa na panya wa kawaida (16 +/- 2 mm Hg虏). Losartan ilifanya shinikizo la damu la panya wa 2K1C kuwa la kawaida lakini tofauti ya shinikizo la sistoli iliendelea kuwa imeongezeka (34 +/- 7 mm Hg虏). Panya wa 2K1C waliopewa maji walikuwa na LF ya shinikizo la sistoli iliyoongezeka, wakati panya wa 2K1C waliotibiwa na losartan walionyesha LF ya juu ya shinikizo la sistoli na PI. Atenolol ilionyesha LF ya chini na HF ya juu ya PI.

Hypothesis:
Kwa ufupisho, AP ilisawazisha losartan lakini haikupunguza utofauti wa losartan, ikiashiria kutokuwa na usawaziko wa autonomiki uliojitokeza kwa uongezekaji wa kiasi cha nguvu za sympathetic katika mfumo wa moyo na mishipa.


Premise:
Mikakati inayozalisha tofauti ya shinikizo la damu ya mzunguko wa juu (HF) na mzunguko wa chini (LF) inafahamika vyema. Hata hivyo, mambo machache yanafahamika kuhusu asili ya tofauti ya shinikizo la damu ya mzunguko wa chini sana (VLF). Tulipima nadharia kwamba VLF BPV inazalishwa na mikakati inayotegemea njia za Ca(2+) aina ya L. Katika panya wenye fahamu, shinikizo la damu kwenye mishipa ilirekodishwa wakati wa hali ya kawaida (n = 8) na uzuiaji wa ganglia (n = 7) huku dozi zinazozidi (0.01-5.0 mg.100 mikro l(-1).h(-1)) za kizuia njia za Ca(2+) aina ya L kinachoitwa nifedipine zilitolewa kwenye mshipa wa damu. VLF (0.02-0.2 Hz), LF (0.2-0.6 Hz), na HF (0.6-3.0 Hz) BPV zilitathminiwa kwa uchambuzi wa spektra wa shinikizo la damu la sistoli. Wakati wa hali ya kawaida, nifedipine ilisababisha kupungua kwa VLF na LF BPV kutegemea dozi, wakati HF BPV haikuathiriwa. Katika dozi ya juu zaidi ya nifedipine, VLF BPV ilipunguzwa kwa 86% ikilinganishwa na msingi, ikionyesha kwamba VLF BPV kwa kiasi kikubwa inasimamiwa na mikakati inayotegemea njia za Ca(2+) aina ya L. VLF BPV ilionekana kutegemea zaidi njia za Ca(2+) aina ya L kuliko LF BPV kwa sababu dozi za chini za nifedipine zilihitajika kupunguza VLF BPV kwa kiasi kikubwa kuliko kupunguza LF BPV. Uzuiaji wa ganglia ulipunguza kwa kiasi kikubwa VLF na LF BPV na kufuta kupungua kwa VLF na LF BPV kulingana na dozi kulikosababishwa na nifedipine, ikiashiria kwamba VLF na LF BPV zinahitaji shughuli ya simpathetic ili kuwa dhahiri.

Hypothesis:
Kwa kuhitimisha, VLF BPV kwa kiwango kikubwa hupatikana kupitia njia zinazotegemea kanali ya L-type NF449 ya ayoni ya kalsiamu (2+).


Premise:
Seli chembe dendritiki za damu ya binadamu (DC) zinajumuisha chembe dendritiki za plasmacytoid (PDC) na chembe dendritiki za myeloid (MDC), ambazo zote huanzisha majibu ya seli-T dhidi ya uvimbe. Tulifuatilia kwa makini chembe dendritiki za damu katika wagonjwa 30 wa leukemia sugu ya myeloid (CML) kabla na baada ya tiba ya imatinib mesylate. Tuligundua kupungua sana kwa PDC na MDC kabla ya matibabu. Upungufu huu ulihusishwa na kiwango cha juu cha kichocheo cha ukuaji wa endothelial ya mishipa ya damu (VEGF) katika plasma, ambao ni mdhibiti muhimu wa angiogenesis na pia hushiriki katika kasoro za kinga zinazohusiana na uvimbe. Uchambuzi wa sifa za DC ulionyesha katika baadhi ya wagonjwa upungufu wa kujieleza kwa BDCA-4/neuropilin-1 kwenye PDC, molekuli inayohusika katika angiogenesis na mwingiliano wa seli-T na DC. Kiwango cha juu cha VEGF kilihusiana na urari ulioharibika wa Th1/Th2 ndani ya mwili na kubadilisha mwelekeo wa seli-T unaochochewa na PDC kuelekea Th2 katika majaribio ya vitro. Wakati wa matibabu ya imatinib, VEGF katika plasma ilipungua haraka na kujieleza kwa kawaida kwa BDCA-4 kulirejeshwa. PDC na MDC ziliongezeka lakini hazikufikia viwango vinavyoonekana katika watu wenye afya.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba VEGF inaweza kuwa mchezaji muhimu katika upungufu wa DC katika damu ya CML na tunaonyesha kwamba imatinib inazuia uzalishaji kupita kiasi wa VEGF.


Premise:
Uwezo wa interleukin-6 (IL-6) kurekebisha vigezo vya kinga na utendaji wa seli za mesangial unaonyesha jukumu la cytokine hii katika maendeleo ya glomerulonephritis ya kinga ya kiotomatiki. Nadharia hii ilipimwa kwa panya wa kike wa (NZB x NZW)F1 wenye umri wa miezi 6 ambao walipewa interleukin-6 ya binadamu iliyotengenezwa upya (rhIL-6) (mikrogramu 50 na 250/kg s.c.) kwa wiki 12, ikichangia kupatikana kwa aina ya haraka na kali ya glomerulonephritis ya membranoproliferative inayohusishwa na uongezaji mkubwa wa antijeni ya daraja la II ya kompleksi kuu ya histocompatibility ya mesangial na onyesho la ICAM-1 ya glomerular. Ili kutofautisha athari za moja kwa moja za rhIL-6 kwenye mesangium ya figo kutoka zile zinazoongozwa kupitia mfumo wa kinga, panya wa (NZB x NZW)F1 walizuiliwa kinga kwa kutumia cyclosporin. Kuzuiliwa kwa kinga kwa cyclosporin kulizuia maendeleo ya glomerulonephritis, kupunguza onyesho la antijeni ya daraja la II, na kubatilisha athari zinazohusishwa na IL-6. Utoaji wa antibodi za kuzuia IL-6 haukuwa na athari yoyote katika maendeleo ya kawaida ya glomerulonephritis katika panya wa (NZB x NZW)F1. Matokeo haya, pamoja na viwango visivyoonekana vya IL-6 kwenye seramu, vinafanya jukumu la kisababishi la IL-6 inayozalishwa ndani katika mfano huu wa ugonjwa liwe si la uwezekano. Kinyume na panya wa (NZB x NZW)F1, panya wa asili wa NZW au BALB/c waliopewa dozi kubwa za rhIL-6 (mikrogramu 500/kg) au IL-6 ya panya iliyotengenezwa upya (mikrogramu 100/kg) kila siku kwa wiki 4 hawakupata ushahidi wa kimaumbile au wa kibiokemia wa glomerulonephritis. Uzalishaji wa protini za awamu kali, anemia, thrombocytosis, na uzalishaji wa antijeni ya daraja la II ya figo ulithibitisha shughuli ya kibiolojia ya IL-6 katika panya hawa.

Hypothesis:
Kwa kuhitimisha, ijapokuwa haina sifa ya kusababisha ugonjwa wa figo kwa panya wa kawaida, IL-6 huongeza kasi ya maendeleo ya glomerulonephritis iliyoamuliwa kimaumbile ya panya wa (NZB x NZW)F1 kupitia athari zinazotokana na mfumo wa kinga uliorekebishwa.


Premise:
Awali tulionyesha kuwa ekstrakti ya kikaboni ya mwani wa bluu-kijani, Spirulina platensis (SPE), ilikuwa na athari kali za kupunguza uvimbe katika makrofegi. Kwa kuwa uhusiano kati ya makrofegi na seli za mafuta (adipositi) ni muhimu kwa kazi za adipositi, tulichunguza mchango wa athari za kupunguza uvimbe za SPE katika makrofegi kwa utengenezaji wa mafuta/lipogenesis katika adipositi za 3T3-L1. Preadipociti za 3T3-L1 zilitibiwa na 10% ya majimaji yaliyotoka katika makrofegi ya RAW 264.7 yaliyochochewa na lipopolisaccharide (LPS) (CMC) au makrofegi yaliyochochewa na LPS, lakini yaliyotibiwa awali na SPE (CMS) katika hatua mbalimbali za ubadilikaji wa adipositi. Uonyeshaji wa viashiria vya ubadilikaji wa adipositi, kama vile CCAAT/enhancer-binding protein 伪, peroxisome proliferator-activated receptor 纬, na perilipin, ulizuiliwa kwa kiasi kikubwa na CMC wakati ilipoongezwa siku ya 3, wakati kuzuiliwa huku kulipunguzwa na CMS. Upakaji wa Oil Red O ulithibitisha kuwa ukomavu wa adipositi katika seli zilizotibiwa na CMS, lakini sio katika seli zilizotibiwa na CMC, ulikuwa sawa na ule wa seli za udhibiti. Usafirishaji wa kiini cha nuclear factor 魏B (NF-魏B) p65 ulipunguzwa na CMS ikilinganishwa na CMC. Katika adipositi zilizojaa mafuta, CMC ilichochea upotevu wa matone ya mafuta, wakati CMS ilikuwa na athari ndogo. Viwango vya mRNA na protini za histone deacetylase 9 viliongezeka wakati wa ukomavu wa adipositi, ambavyo vilipunguzwa na CMC.

Hypothesis:
Kwa ufupisho, kwa kuzungumza-pamoja na seli za mafuta (adipocytes), athari za kuzuia uvimbe za SPE katika makrofaji ziliimarisha ubadilishaji/ukomavu wa seli za mafuta, angalau kwa kiasi, kwa kukandamiza uamshaji wa njia za uvimbe za NF-魏B, ambazo vinginevyo zinaweza kuathirika katika hali za uvimbe.


Premise:
Lengo la utafiti huu lilikuwa kuchunguza zaidi mfumo wa ukandamizaji wa shughuli ya seli asili ya kuua (NK) katika damu ya pembeni baada ya mazoezi makali. Damu ilikusanywa kwa ajili ya uchanganuzi wa kiasi cha seli za NK, shughuli ya kuua, uonyeshaji wa sehemu ya CD2 na uonyeshaji wa jeni ya perforin kutoka kwa wakimbiaji (RUN, n=6) na vikundi vya udhibiti vilivyopumzika (CONTROL, n=4) kabla ya mazoezi, 0, 1.5, 5, na masaa 24 baada ya kukimbia kwa dakika 60 kwenye mashine ya kukimbia kwa kiwango cha 80% cha VO2 peak. Shughuli ya kuua ya seli asili ya kuua, iliyopimwa kwa kutumia kipimo cha kuachilia chromium cha damu nzima, ilibadilika kidogo katika kikundi cha CONTROL na iliongezeka kwa 63% na kupunguka kwa 43% baada ya mazoezi saa 0 na 1.5, mtawalia, katika kikundi cha RUN (kikundi x wakati, P < 0.001). Kiashiria cha kuua (shughuli ya kuua kwa kila seli) hakikubadilika. Perforin mRNA, iliyopimwa kwa kutumia polymerase chain reaction ya wakati halisi ya kiasi (QRT-PCR) ilipungua kutoka kabla hadi baada ya mazoezi na iliendelea kupungua hadi masaa 24. Upungufu kutoka kabla hadi saa 0 baada ya mazoezi ulionekana zaidi katika kikundi cha RUN na ulikuwa na uhusiano wa kinyume (r=- 0.95) na perforin mRNA kabla ya mazoezi. Uonyeshaji wa CD2 (antigen-2 inayohusiana na kazi ya limfositi) kwenye uso wa seli za NK ulitathminiwa kwa kutumia antibodi za kuangaza na cytometry ya mtiririko. Hapakuwa na mabadiliko katika uwiano wa seli za NK zinazoongesha CD2 au msongamano wa CD2.

Hypothesis:
Tunahitimisha kuwa (1) ugawanyaji upya wa idadi ulichangia sehemu kubwa ya mabadiliko katika shughuli ya kushambulia ya seli NK baada ya mbio kali, (2) ongezeko katika kujieleza kwa jeni ya perforin wakati wa mbio lilihusiana kinyume na viwango vya kabla ya mazoezi lakini halikuendana sambamba na mabadiliko katika shughuli ya kushambulia, na (3) kujieleza kwa CD2 kwenye uso wa seli hakukuathiriwa na mazoezi.


Premise:
Vipokea vijibu-vinasaba (TLRs) vina jukumu muhimu katika kuamsha mfumo wa kinga wa asili kwa kuhisi bidhaa za vijidudu zilizohifadhiwa. Kipokea Fc 纬 IIb (Fc纬RIIb), kipokea cha kuzuia cha Fc, hufanya kazi zake za udhibiti wa kinga kwa kujiunga na eneo la Fc la immunoglobulini G. Ingawa majukumu binafsi ya TLRs na Fc纬RIIb yamechunguzwa kwa kina, mazungumzo ya sambamba kati ya Fc纬RIIb na TLR4 kwenye seli B bado hayajulikani. Utafiti wa sasa ulionyesha kuwa mshikamano wa Fc纬RIIb na kompleksi ya kinga (IC) ulipunguza ufaalu wa kipokea cha nyuklia (NF)-魏螔 uliochochewa na TLR4, na kupunguza utoaji wa interleukini (IL)-6 kutoka kwenye seli B, kupitia kuongeza fosforilesheni ya proto-onkojeni LYN (Lyn). Zaidi ya hayo, matibabu ya IC yalilinda panya dhidi ya mshtuko mkali wa endotoksini. Kwa hivyo, IC ilipunguza viwango vya IL-6 katika seramu vilivyochochewa na LPS, pamoja na uzalishaji wa IL-6 ndani ya seli katika seli B in vivo. Hata hivyo, athari hizi za kinga na kuzuia za IC hazikuonekana katika panya wa Fc纬RIIb-/-.

Hypothesis:
Kwa ufupisho, data za sasa zimeonyesha kuwa TLR4 ilizuia ishara za Fc纬RIIb katika seli B kwa kuamsha fosforylation ya Lyn na kwa kuzuia ishara za NF-魏B.


Premise:
Tulichunguza hatima ya metaboli ya ndani ya seli ya glukosi ya plasma wakati wa kibanio cha hyperglycemic kwa watu wenye uvumilivu wa glukosi ulioharibika (IGT; n = 21) na watu wenye uvumilivu wa glukosi wa kawaida (n = 10) kwa kutumia mchanganyiko wa udumlishaji wa [3-(3)H]glukosi pamoja na upimaji wa uundaji wa [(3)H]maji na kalorimetri isiyo ya moja kwa moja. IGT ilihusishwa na majibu ya insulini ya awamu ya kwanza yaliyopungua kwa takriban 35%, majibu ya insulini ya awamu ya pili ya kawaida, na unyeti wa insulini uliopungua kwa 25-30%, hali iliyosababisha utupaji wa glukosi ya plasma kupungua kwa takriban 35%. Hii ilihusiana na uhifadhi wa glukosi ya plasma uliopungua kwa takriban 55% (P < 0.01) na glikolisi ya glukosi ya plasma iliyopungua kwa takriban 15-20% (P < 0.03), hali iliyohesabiwa kwa takriban 75 na 25% ya upungufu wa utupaji wa glukosi, mtawalia. Upungufu wa oksidesheni ya glukosi ulihesabiwa kwa takribani upungufu wote wa glikolisi. Kwa hivyo, glikolisi isiyooksideshenishwa ya glukosi ya plasma katika IGT ilikuwa sawa na ile katika NGT (P > 0.9) na ilihesabiwa kwa uwiano ulioongezeka wa utupaji wa glukosi wa mfumo (P < 0.05).

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba, katika IGT, upunguzaji wa matumizi ya glukosi ya plasma unahusisha hasa upunguzaji wa usanisi wa glaykojeni na kwa kiwango kidogo upunguzaji wa glaykolisisi, ambao unasababishwa na upunguzaji wa oksidesheni ya glukosi.


Premise:
Athari ya matibabu ya vanadium kwenye usafirishaji wa kipokezi cha glukozi aina ya 4 (GLUT4) uliochochewa na insulini ulichunguzwa katika tishu ya moyo ya panya waliosababishwa ugonjwa wa kisukari kwa streptozotocin (STZ) kwa kuamua usambazaji mdogo wa seli wa GLUT4. Vikundi vinne vya panya vilichunguzwa: vikundi vya udhibiti na kisukari, kwa au bila matibabu ya bis(maltolato)oxovanadium(IV) (BMOV, muundo wa kikaboni wa vanadium) kwa wiki 8. Athari ya vanadium kwenye usafirishaji wa GLUT4 uliochochewa na insulini ulichunguzwa baada ya dakika 5 kama mwitikio wa awali wa insulini na baada ya dakika 15 baada ya sindano ya insulini kama mwitikio wa juu zaidi wa insulini. Dakika 5 baada ya sindano ya insulini, kiwango cha GLUT4 cha kiwambo cha plasma katika kikundi cha wagonjwa wa kisukari kilichotibiwa hakikuwa tofauti na vikundi vya udhibiti na kilikuwa juu zaidi kuliko kile cha kikundi cha wagonjwa wa kisukari walichochewa na insulini, ikionyesha kuimarishwa kwa mwitikio wa insulini kwenye usafirishaji wa GLUT4 uliletwa na matibabu ya vanadium. Kinyume na dakika 5 baada ya sindano ya insulini, hakukuwa na tofauti kubwa katika kiwango cha GLUT4 cha kiwambo cha plasma kati ya kikundi cha wagonjwa wa kisukari na kikundi cha wagonjwa wa kisukari waliotibiwa baada ya dakika 15 baada ya sindano ya insulini. Usafirishaji wa GLUT4 kutoka kwenye hifadhi ya ndani ya seli kama mwitikio kwa insulini pia ulichunguzwa dakika 15 baada ya sindano ya insulini. Kiasi cha msingi cha GLUT4 cha ndani ya seli kilikuwa juu zaidi kwa kiasi kikubwa katika kikundi cha wagonjwa wa kisukari waliotibiwa ukilinganisha na kikundi cha wagonjwa wa kisukari chini ya hali hiyo hiyo. Hata hivyo, ongezeko la kiasi cha msingi cha GLUT4 cha ndani ya seli katika kikundi cha wagonjwa wa kisukari waliotibiwa halikupelekea usafirishaji zaidi wa GLUT4 uliosababishwa na insulini dakika 15 baada ya sindano ya insulini.

Hypothesis:
Kwa kuhitimisha, matokeo kwamba GLUT4 ya kiwambo cha plasma katika kundi lililohudumiwa na ugonjwa wa kisukari si ya juu kwa kiasi kikubwa kuliko ile ya kundi lenye ugonjwa wa kisukari katika dakika 5 lakini si katika dakika 15 baada ya sindano ya insulini inaonyesha kuwa matibabu ya vanadium yanaboresha usafirishaji wa GLUT4 unaoendeshwa na insulini katika tishu ya moyo kwa kuimarisha upesi wa mwitikio wake.


Premise:
Vipengele vya jinsi mfumo wa enteroinsular huathiri kazi ya seli-beta havijachunguzwa kwa kina. Tulitoa uongozaji wa glukosi kwa njia ya mdomo na isoglycemic ya mshipa (IV) kwa watu wenye uvumilivu wa glukosi wa kawaida (NGT; n = 11) au uvumilivu wa glukosi ulioharibika (IGT; n = 10), kwa kutumia C-peptide deconvolution kuhesabu viwango vya utoaji wa insulini na mfumo wa kihesabu kukadiria kazi ya seli-beta. Athari ya incretin ilichukuliwa kuwa uwiano wa majibu ya mdomo kwa IV. Katika NGT, utoaji wa insulini unaochochewa na incretin [jaribio la uvumilivu wa glukosi ya mdomo (OGTT)/uwiano wa IV = 1.59 +/- 0.18, P = 0.004] ulifikia 18 +/- 2 nmol/m(2) (32 +/- 4% ya majibu ya mdomo), na wakati wake ulilingana na ule wa utoaji wa jumla wa insulini. Unyeti wa glukosi wa seli-beta (uwiano wa OGTT/IV = 1.52 +/- 0.26, P = 0.02), unyeti wa kiwango (jibu kwa kiwango cha mabadiliko ya glukosi, uwiano wa OGTT/IV = 2.22 +/- 0.37, P = 0.06), na uzidishaji huru-glukosi vilikuwa vya juu sana kwa glukosi ya mdomo kuliko IV. Katika IGT, unyeti wa glukosi wa seli-beta (75 +/- 14 dhidi ya 156 +/- 28 pmol.min(-1).m(-2).mM(-1) ya NGT, P = 0.01) na uzidishaji viliharibika kwenye OGTT. Athari ya incretin haikuwa tofauti sana kutoka NGT kwa majibu ya plasma ya peptidi-1 inayofanana na glucagon na polypeptide inayochochea insulini inayotegemea glukosi, utoaji wa jumla wa insulini, na uboreshaji wa unyeti wa seli-beta kwa glukosi (uwiano wa OGTT/IV = 1.73 +/- 0.24, P = NS dhidi ya NGT). Hata hivyo, wakati wa utoaji wa insulini unaoendeshwa na incretin na uzidishaji ulibadilika, huku kukiwa na ushawishi mkubwa wa uchochezi unaosababishwa na glukosi dhidi ya ule unaosababishwa na incretin.

Hypothesis:
Tunahitimisha kwamba, chini ya hali za kifiziolojia, uchochezi wa utoaji wa insulini unaosababishwa na incretin unatokana na uimarishaji wa vipengele vyote vya kazi za seli-beta, hasa uwezo wa seli-beta kuhisi glukosi.