前提：
1週間の低酸素によって肺高血圧を誘発されたラットから分離された肺動脈において、ジアミノフルオレセイン-2ジアセテートを使用したin situ可視化で、カルバコールによって刺激された内皮の一酸化窒素（NO）生成およびcGMP含量が大幅に減少しました。この変化は、カルバコール誘発の内皮依存性弛緩の減少に続いていました。低酸素肺動脈中で、内皮型NO合成酵素（eNOS）およびその調節タンパク質であるカベオリン-1と熱ショックタンパク質90のタンパク質発現量は変化せず、慢性低酸素が翻訳後レベルでeNOSの活性を損なっていることを示しています。低酸素肺動脈では、カルバコールで刺激された細胞内Ca(2+)レベルの増加が減少しましたが、イオノマイシンでは変化しませんでした。次に、我々はeNOS活性化システムのCa(2+)感受性の変化に注目しました。形態学的研究では、低酸素内皮細胞において内皮細胞の萎縮およびeNOSの周辺凝縮が確認され、eNOSとゴルジ体または細胞膜との共局在が維持されていました。しかし、低酸素肺動脈において、カルバコールの有無に関わらず、eNOSはカベオリン-1と密接に結合し、熱ショックタンパク質90およびカルモジュリンから分離されていました。さらに、両条件で低酸素動脈におけるeNOS Ser(1177)のリン酸化は、Aktのリン酸化に影響を与えずに著しく減少しました。

仮説：
結論として、慢性的な低酸素症は内皮細胞のカルシウム代謝を障害し、eNOS（内皮型一酸化窒素合成酵素）とカベオリン-1の正常なカップリングを阻害する。その結果、eNOSの不活性化が引き起こされました。


前提：
トブラマイシンはアミノグリコシド系抗生物質であり、嚢胞性線維症患者の緑膿菌感染症の治療に使用されます。しかし、トブラマイシンの生物活性は痰により拮抗されます。糖タンパク質（ムチン）および高分子DNAは、それぞれ痰の乾燥重量の2〜3％（P.L. MassonとJ.F. Heremans、M.J. Dulfano編集、Sputum: Fundamentals and Clinical Pathology、1973、p. 412-475）および3〜10％（W.S. ChernickとG.J. Barbero、Pediatrics 24:739-745、1959、R. Picot、I. DasおよびL. Reid、Thorax 33:235-242、1978）を占めます。トブラマイシンは痰から得られるムチンおよびDNAと結合します（R. Ramphal、M. Lhermitte、M. FilliatおよびP. Roussel、J. Antimicrob. Chemother. 22:483-490、1988）。in vitroで、組換えヒトDNアーゼ（rhDNアーゼ）は、痰中の50 kbを超える高分子DNAを2〜4 kbの断片に加水分解します。透析可能なトブラマイシンを調べ、薬物が全痰および「模擬痰」（豚胃ムチンおよび仔牛胸腺DNAで構成）に結合する状況を検討しました。また、rhDNアーゼによる痰、模擬痰、および仔牛胸腺DNAの処理がトブラマイシンの結合に与える影響を研究しました。rhDNアーゼで処理した痰、模擬痰、および仔牛胸腺DNAでは、透析液中のトブラマイシン生物活性が有意に増加しないことがわかりました。驚くべきことに、rhDNアーゼは痰へのトブラマイシンの結合を増加させました。

仮説：
我々は、rhDNアーゼは痰中でのトブラマイシンの生物活性を増加させないと結論付けました。


前提：
肺カリニ肺炎（PCP）は、固形臓器移植を受けた患者において依然として重大な罹患率を引き起こしています。一部のプログラムでは、移植後に予防的にトリメトプリム・スルファメトキサゾール（TMP-SMX）が投与されていますが、心臓移植受者におけるTMP-SMXの安全性と有効性を前向きに評価した報告はありません。したがって、我々は58名の心臓移植受者を前向きにランダム化し、週3回（B群）または毎日（C群）トリメトプリム（160 mg）・スルファメトキサゾール（800 mg）を1日2回投与するか、治療を受けない対照群（A群）に割り当てました。治療は移植後14日目から始まり、4ヶ月間続きました。年齢、性別、既存の肺病変および免疫抑制プロトコルには、各群間に違いはありませんでした。対照群（A群）の17名の患者のうち、7名がPCPに適合する臨床症候群を発症し、移植後の最初の4ヶ月間に気管支肺胞洗浄によって組織学的に診断が確認されました。それに対して、日常的または間欠的な治療群の患者には、研究期間中にPCPは発症しませんでした（P < 0.005）。両方のTMP-SMXの用量は良好に耐容され、治療中止を必要とする患者はいませんでした。総白血球数、アザチオプリンの用量、および患者ごとの拒絶反応の治療エピソード数には、3群間に差異はありませんでした。

仮説：
TMP-SMXは、心臓移植後の最初の4ヶ月間にカリニ肺炎の発生を防ぐために安全かつ効果的に投与できると結論付けます。


前提：
ミコフェノール酸モフェチル（MMF、ミコフェノール酸（MPA）の前駆体）は、シクロスポリン療法中のMPAの曝露量が低いと考えられているため、タクロリムスよりもシクロスポリンと併用する際に通常は2倍の用量で投与されます。本研究の目的は、安定した腎臓移植受者において、シクロスポリン（n = 12）またはタクロリムス（n = 12）で維持されている場合のMPAおよびそのフェノールおよびアシルグルクロン酸代謝物（MPAGおよびAcMPAG）の12時間の安定状態濃度-時間プロファイルを比較することでした。シクロスポリン群の吸収段階では、全体および遊離MPAの用量標準化濃度が有意に高かったが、濃度-時間曲線下面積（AUC0-12）には有意な差はありませんでした。さらに、シクロスポリン群ではAcMPAGへの曝露が高かった（P < 0.05）。シクロスポリン群の12名の患者のうち10名はケトコナゾール療法を受けていましたが、MMFをスプラグ・ドーリーラットに経口投与した際、ケトコナゾールの有無にかかわらずMPAやMPAGへの曝露に差は見られませんでした。

仮説：
結論として、MPAはシクロスポリンとその代謝物の分布をタクロリムスとは異なる方法で調節しますが、MPAを投与される患者は、同じ曝露を達成するためにMMFの2倍の用量を必要としない可能性があります。


前提：
CMV（サイトメガロウイルス）は、固体臓器移植を受けた患者に頻繁に発生する病原体であり、特に肺移植を受けた患者は、より頻繁かつ重篤な影響を受けるようです。予防的なガンシクロビルの投与期間が固体臓器移植受者におけるCMV疾患の発生率に影響を与える可能性があるため、我々は肺移植受者における6週間の予防的レジメンの有効性を評価しました。また、CMV抗体価の4倍の上昇がCMV疾患の発症を予測する能力を評価しました。21名の連続した肺移植受者が登録されました：15名は移植時にCMV抗体陽性であり、6名はCMV抗体陰性で、CMV陽性ドナーから肺移植を受けました。平均±SDのフォローアップは430±157日（範囲178-730日、中央値449日）でした。6週間のガンシクロビルレジメンは、CMV感染（21名中17名、81%に発生）やCMV疾患（21名中8名、38%で見られた）を予防することはできませんでした。CMV抗体価の4倍の上昇は、13例中3例（23%）のCMV疾患の発症に先行することしかありませんでした。

仮説：
6週間のガンシクロビル予防レジメンは、肺移植受者におけるCMV感染または疾患を予防することはできず、連続して得られたCMV抗体価の上昇がCMV疾患の発症に先行することはほとんどないと結論付けます。


前提：
抗生物治療開始後の炎症反応と神経損傷のパラメータを、ウサギの肺炎球菌性髄膜炎モデルにおいて、奎プリスチン/ダルフォプリスチン（100 mg/kg、短時間または持続的注入のいずれか）とセフトリアキソン（10 mg/kg/h）で静脈内治療中に比較しました。両方の投与方法において、奎プリスチン/ダルフォプリスチンはセフトリアキソンよりも殺菌力が低かった。しかし、前炎症細胞壁成分（リポテイコ酸（LTA）およびテイコ酸（TA））の濃度と脳脊髄液（CSF）中の腫瘍壊死因子（TNF）の活性は、奎プリスチン/ダルフォプリスチンの2群でセフトリアキソン治療群よりも有意に低かった。LTA/TA濃度の中央値（25パーセンタイル/75パーセンタイル）は以下の通りであった：(i) 感染14時間後：持続注入の奎プリスチン/ダルフォプリスチンは133（72/155）ng/mL、短時間注入は193（91/308）ng/mLで、セフトリアキソンは455（274/2042）ng/mL（P = 0.002および0.02）；(ii) 感染後17時間の中央値は、持続注入の奎プリスチン/ダルフォプリスチンは116（60/368）ng/mL、短時間注入は117（41/247）ng/mLで、セフトリアキソンは694（156/2173）ng/mL（P = 0.04および0.03）。感染後14時間の中央値のTNF活性（25th/75thパーセンタイル）は、持続注入の奎プリスチン/ダルフォプリスチンが0.2（0.1/1.9）U/mL、短時間注入が0.1（0.01/3.5）U/mLで、セフトリアキソンが30（4.6/180）U/mL（各比較のP = 0.02）；感染後17時間のTNF活性は、持続注入の奎プリスチン/ダルフォプリスチンが2.8（0.2/11）U/mL、短時間注入が0.1（0.04/6.1）U/mLで、セフトリアキソンが48.6（18/169）U/mL（P = 0.002および0.001）。感染後24時間の神経特異的エノラーゼ（NSE）の濃度は、奎プリスチン/ダルフォプリスチンで治療された動物では有意に低かった：持続注入が4.6（3.3/5.7）microg/L、短時間注入が3.6（2.9/4.7）microg/Lで、セフトリアキソンは17.7（8.8/78.2）microg/L（P = 0.03および0.009）。

仮説：
結論として、奎プリスチン/ダルフォプリスチンによる抗生物質治療は、抗生物質治療開始後にクモ膜下腔内の炎症反応を抑制した。


前提：
変異または増幅されたチロシンキナーゼのチロシンリン酸化（pYSTAT3）による恒常的なSTAT3活性化は、癌の開始、進行、浸潤、そして癌細胞の運動性にとって重要です。我々は、AF1qが乳がん細胞におけるSTAT3シグナル伝達と関連していることを示しました。異種移植モデルでは、AF1qの発現増強がSTAT3を活性化し、免疫不全NSG（NOD scid gamma）マウスにおいて腫瘍の成長と転移を促進しました。AF1qの発現が変化したMDA-MB-231LN乳がん細胞のサイトカイン分泌表現型は、血小板由来成長因子Bサブユニット（PDGF-B）の発現の変化を示しました。AF1qによるPDGF-Bの誘導はMDA-MB-231LN細胞の運動性、移動、浸潤を刺激し、AF1qは血小板由来成長因子受容体（PDGFR）シグナル伝達を上昇させました。さらに、AF1q誘導のPDGFRシグナル伝達は、Srcキナーゼの活性化を通じてSTAT3の活性を強化し、これはSrcキナーゼ阻害剤PP1によって阻止可能でした。また、AF1qはPDGFRシグナル伝達を通じてチロシンキナーゼシグナルを上昇させ、これはイマチニブによって阻止され得ました。

仮説：
結論として、AF1qの発現増強がPDGF-B/PDGFRカスケードを介したSrcキナーゼの活性化によって、浸潤性癌細胞において持続的かつ発癌性のpYSTAT3レベルに寄与することを示しました。


前提：
エストロゲン受容体-α（ER-α）はESR1遺伝子によってコードされ、免疫組織化学法により約70％の浸潤性乳がんで検出され、強力な予測バイオマーカーとして機能します。リガンド結合ドメインのESR1活性化変異は、ER陽性転移性乳がんの最大35〜40％で報告されており、内分泌療法への耐性や病気の進行に関連しています。現在、ESR1変異が日常的な臨床診療で行われるERの免疫組織化学的検出に影響を与えるかどうかは不明です。この研究では、米国食品医薬品局（FDA）承認のハイブリダイゼーションキャプチャーベースの次世代シーケンシング法であるMemorial Sloan Kettering-Integrated Mutation Profiling of Actionable Cancer Targets（MSK-IMPACT）を使用して、乳癌におけるESR1変異を同定した。研究期間中、局所進行または転移性疾患患者の乳がん586例がMSK-IMPACTで分析されました。66人の患者から得られた67の乳がんサンプルにおいて、ESR1体細胞変化が確認されました。診断時に、これらの患者の一次乳がんおよび治療後乳がんサンプルにおいて、ER、プロゲステロン受容体、およびヒト表皮成長因子受容体2の免疫組織化学分析が行われました。リガンド結合ドメインに関わる20種類の独自のESR1変異が確認され、すべて内分泌療法を以前に受けた患者の乳がんサンプルからでした。最も頻繁に見られた変異はD538G（n=22）、Y537S（n=7）、およびE380Q（n=7）でした。ESR1変異を有するすべての乳がんサンプルは免疫組織化学でER陽性でした。34人の患者の対になった未治療の原発腫瘍と治療後の腫瘍におけるER免疫組織化学の検討では、ER陽性免疫組織化学状態に検出可能な変化は見られませんでした（核染色の侵襲性腫瘍細胞の中央値：未治療の原発腫瘍90％、治療後腫瘍95％）。

仮説：
結論として、ESR1変異（ミューテーション）は免疫組織化学におけるER陽性染色を著しく減少させることはないと考えられます。


前提：
食道癌（EC）は侵襲性の病気であり、主に2つの組織学的サブタイプ、腺癌（EAC）と扁平上皮癌（ESCC）があります。これら2つのサブタイプはほとんどすべての要因に関して大きく異なります。ESCCの発生は主にタバコやアルコールの乱用と関連している一方で、肥満と慢性胃食道逆流症（GERD）はEACおよびEACの前段階であるBarrett食道（BE）の重要なリスク因子です。肥満は非脂肪組織における異所性脂肪滴（LD）の蓄積を引き起こします。LDは、細胞代謝、シグナル伝達、増殖、そして炎症性メディエーターの生成に関与する細胞小器官です。したがって、本研究の目的はECにおけるLDの発生と役割を調査することです。この研究は、非肥満者から肥満者、BE、そしてEAC患者の食道サンプルにおいて、EACの発展に沿ってLDレベルが徐々に増加することを示していますが、ESCCサンプルでは非腫瘍サンプルと比較して有意な変化は観察されませんでした。また、BEおよびEACのリスク因子に曝露させるために、非腫瘍性食道細胞株をオレイン酸（OA）と酸性培地および/またはデオキシコール酸（DCA）で培養したところ、LD量の顕著な増加、COX-2とCXCL-8の発現増加、そしてIL-8の分泌が明らかになりました。さらに、COX-2の発現とLDの量には有意な正の相関が見られ、EACでは共局在していましたが、ESCCでは観察されず、LDがEACにおけるエイコサノイド産生の部位である可能性が示唆されました。

仮説：
結論として、本研究は、肥満および食道バレット上皮（BE）・食道腺癌（EAC）に関連する炎症刺激がLDの漸進的な減少を引き起こし、LDが炎症性メディエーターの生成および/または作用を調整する責任を負い、BEおよびEACの発生と進展に寄与している可能性があることを示しています。


前提：
前立腺癌が転移性および去勢抵抗性の疾患に進行することは重要なステップを示しています。我々は以前、プロテインキナーゼC（PKC）の活性化がTwist1およびアンドロゲン受容体（AR）の誘導に続いて去勢抵抗性に重要な役割を果たすことを示しましたが、その具体的な分子メカニズムは不明のままでした。本研究では、NF-κB転写因子に注目し、関連する分子メカニズムを解明することを目指しました。PKC阻害後のNF-κBの活性およびNF-κBを抑制した後のヒト前立腺癌細胞におけるTwist1およびARの発現を調べました。また、ホルモン治療に抵抗性の細胞でARシグナルの抑制後のPKC/NF-κBの状態も調査しました。その結果、ノックダウンおよび小分子PKC阻害を用いてPKCシグナルを抑制すると、RelA活性が抑制され、NF-κBをブロックするとTwist1およびARの発現が抑制されることが分かりました。逆に、アンドロゲン除去および新しい抗アンドロゲン剤エンザルタミドによるARシグナルの抑制は、PKCとRelAの活性化を誘導し、転写レベルでのTwist1/ARの誘導を引き起こしました。さらに、NF-κBシグナルの抑制はエンザルタミドによって誘導されたTwist1およびARの誘導を防ぎました。最終的に、NF-κBは去勢抵抗性およびエンザルタミド抵抗性細胞の両方で活性化されました。

仮説：
結論として、NF-κBシグナルは、ARの促進に応答してPKCによるTwist1のアップレギュレーションを引き起こし、ARの異常な活性化をもたらしました。


前提：
がん細胞は酸素が十分に存在する場合でもエネルギー代謝のために解糖系を好む。この現象はワールブルグ効果（Warburg effect）と呼ばれ、腫瘍形成および悪性進行を促進する。本研究では、腫瘍の増殖、浸潤、転移に関与する多面的な発癌タンパク質であるEZH2が、ワーバーグ効果の活性化を通じて膠芽腫（グリオブラストーマ）の腫瘍形成と悪性進行を促進することを示した。HIF1αがEZH2の標的であり、EZH2を介した代謝適応にはその活性化が必要であり、EZH2の過剰発現によりHIF1αが活性化されることが観察された。また、EZH2はEAF2の発現を抑制し、結果としてHIF1αのレベルが上昇することが確認された。

仮説：
これらの結果から、EZH2はEAF2-HIF1αシグナル軸を介して解糖系を活性化することで、部分的に腫瘍形成と悪性進行を抑制していると結論づけた。


前提：
ミトコンドリア内のSr2+は、Ca2+と同様に、完全なラット肝ミトコンドリアにおいて酸化的リン酸化を抑制します。Ca2+とSr2+ははともに、サブミトコンドリア粒子におけるATPアーゼの加水分解活性も抑制します。ATPアーゼ活性の半最大抑制は、培地中のMg2+濃度が1.0 mMのとき、2.5 mMのCa2+または5.0 mMのSr2+の濃度で達成されました。両陽イオンによるATPアーゼ活性の抑制は、反応媒介におけるMg2+濃度を増加させることで大幅に減少しました。さらに、動力学データと、異なる濃度のCa2+またはSr2+が存在する場合のMgATP（ATPアーゼの基質）の濃度の測定は、これらの陽イオンがMgATPの形成に対してMg2+と競合することによってATPの加水分解を抑制することを強く示唆しています。

仮説：
サブミトコンドリア粒子に関するこれらの結果と、Sr2+を負荷したミトコンドリアにおけるカルボキシアトラクチロシドまたはオリゴマイシンによる酸化的リン酸化の滴定結果との間に良好な一致が見られた。このことに基づいて、ミトコンドリア内のCa2+またはSr2+は、ADP/ATPキャリアとATP合成酵素の両方に対して腺苷核苷酸の可用性を低下させることによって、完全な線粒体における酸化的リン酸化を抑制することができると結論づけられます。


前提：
ミトコンドリア カルシウムは細胞代謝の重要な調節因子です。CCDC90Aは、ミトコンドリア カルシウムユニポータ（MCU）複合体の調節因子であると報告されており、これは線粒体カルシウムの取り込みを制御する選択的なチャネルです。そのため、MCUR1という名前に改名されました。ここでは、ヒト線維芽細胞におけるCCDC90Aの抑制が特定のシトクロムcオキシダーゼ（COX、チトクロームc酸化酵素）組立欠陥を引き起こし、結果としてミトコンドリア膜電位（Δψm）の低下と線粒体カルシウム取り込み能力の減少をもたらすことを示します。TACO1またはCOX10の変異によるCOX組立欠陥を持つ患者の線維芽細胞も、ミトコンドリア膜電位の低下とカルシウム取り込み能力の障害を示し、いずれもそれぞれの野生型cDNAの発現によって救済されました。MCUを持たない生物であるSaccharomyces cerevisiae（出芽酵母）におけるCCDC90Aのホモログであるfmp32の欠失もまたCOX欠損を引き起こし、CCDC90Aの機能が進化的に保存されたことを示しています。

仮説：
私たちは、CCDC90AがCOXの組立に関与し、MCUのみを直接制御するものではないと結論付ける。


前提：
ミトコンドリアはほとんどの細胞、特に脳細胞においてATPの大部分を生成します。この複雑な機構を調整して細胞のエネルギー需要に応じさせることは、私たちがまだ完全には理解していない複雑なプロセスです。この背景の上、3',5'-環状AMP（cAMP）は、シグナル伝達と代謝の連結およびミトコンドリアATP生産の調節において重要な役割を果たすことが示唆されています。細胞内では、cAMPシグナルが細胞質側からミトコンドリアに影響を与える可能性がありますが、最近では、可溶性アデニル酸シクラーゼ（sAC）によってミトコンドリアのマトリックス内で生成されるcAMPシグナルが呼吸を調節し、したがってATP生産を調整することが示唆されています。しかし、脳のミトコンドリアにおけるこれらのプロセスについてはほとんど知られておらず、マトリックス内で生成されるcAMPシグナルの効果因子は完全には明らかではありません。なぜなら、プロテインキナーゼA（PKA）とcAMP活性化交換タンパク質1（EPAC1）の両方が関与していると考えられているからです。ここでは、現在の知識をレビューし、それを脳のミトコンドリアに関連付けます。さらに、孤立したマウスの脳皮質ミトコンドリアにおける呼吸、膜電位、ATP生産の測定に基づいて、sAC、PKA、またはEPACの抑制剤がミトコンドリア機能に異なる影響を与えることを示します。

仮説：
結論として、脳のミトコンドリアはcAMP介在性のsACシグナルを介してその機能を制御しており、PKAとEPACの両方がcAMPの下流で関与している可能性があると提案します。


前提：
ADPはATP生成の重要な基質であるだけでなく、ミトコンドリアの透過性遷移孔（mPTP）の強力な阻害剤でもあります。本研究では、酸化ストレスがADPのmPTP阻害剤としての効力にどのように影響するか、またその活性酸素種（ROS）生成の減少が関与しているかどうかを評価しました。正常およびストレスを受けた隔離心筋ミトコンドリアにおいて、mPTPの誘導までのミトコンドリアCa²⁺保持能力（CRC）に対するADPの定量的な影響を調べました。2つの慢性酸化ストレスモデル（老齢マウスと糖尿病マウス）と2つの急性酸化ストレスモデル（虚血再灌流（IR）および叔丁基過酸化水素（t-BH））を使用しました。対照ミトコンドリアでは、CRCは344 ± 32 nmol/mgタンパク質でした。500 μmol/LのADPはCRCを774 ± 65 nmol/mgタンパク質に増加させました。このADPの効果は濃度に関連しているようで、50 μmol/LのADPは有意に小さい効果でした。また、ADPをATPに変換するF0F1ATPアーゼを抑制するオリゴマイシンは、50 μmol/L ADPの効果を有意に増加させました。慢性酸化ストレスはCRCや500 μmol/L ADPの効果に影響を与えませんでした。IRまたはt-BHに暴露した後、CRCはそれぞれ1 ± 0.2および32 ± 4 nmol/mgタンパク質に劇的に減少しました。驚くべきことに、ADPはそれぞれIRとt-BHにおいてCRCを447 ± 105および514 ± 103 nmol/mgタンパク質に増加させました。したがって、対照と同じ量のCRCを増加させました。対照ミトコンドリアでは、ADPは基質およびCa²⁺によるROSの増加を減少させました。しかし、t-BHミトコンドリアにおけるADPのROSへの影響は比較的小さいものでした。

ADPは、重度のストレス下にあるミトコンドリアにおいて、カルシウム保持能力（CRC）を強力に回復させることと結論付けます。


前提：
これまでの研究者たちは、3,4-メチレンジオキシメタンフェタミン（MDMA）によって動物の骨格筋で誘発される高体温が、脱共役タンパク質3（UCP3）依存であることを示しています。私たちの研究により、寒冷順応条件下でUCP1の体内リン酸化が増強されることが確認されたため、（a）UCP3が体内でリン酸化されるか、（b）MDMA投与後にUCP3の体内リン酸化がプロトン漏れの増加につながるかを調査しました。私たちのデータは、MDMA投与（PBS投与ではなく）された動物で、骨格筋ミトコンドリア内のUCP3が体内でセリンおよびチロシンがリン酸化されていることを示しています。リン酸化を維持するために、これらのミトコンドリアはリン酸化酵素阻害剤の存在下で分離されました。さらに、プロトン漏れは、MDMA投与された動物から分離された骨格筋ミトコンドリア（リン酸化酵素阻害剤が存在する場合）でのみ増加し、増加したプロトン漏れはリン酸化されたUCP3によるものであることが示されました。MDMA投与は骨格筋ミトコンドリア内のUCP3量には影響を与えません。リン酸化酵素阻害剤がない状態で分離された場合、UCP3のリン酸化維持とプロトン漏れの増加は失われます。

仮説：
UCP3による動物の処置は、骨格筋ミトコンドリアにおけるプロトンリークを増加させると結論づける。これは、MDMAのインビボでの共有結合修飾によるリン酸化を通じてMDMAを活性化することで起こします。


前提：
CsrA（炭素貯蔵調節因子A）は、標的転写物の翻訳開始とmRNAの安定性を調節する、広く分布する細菌のRNA結合タンパク質です。γ-プロテオバクテリアでは、CsrAの活性は、複数のCsrA結合部位を持つ1つ以上の小さなRNA（sRNA）によって競合的に拮抗されますが、γ-プロテオバクテリア以外の細菌においては、CsrAの活性はFliWと呼ばれるタンパク質によって拮抗されます。本研究では、枯草菌のFliWが、RNA結合に必要なCsrAの同じ残基には結合しないことを示しました。代わりに、FliWの拮抗作用に耐性を持つCsrA変異体（crw）は、以前に機能が付与されていなかったアロステリック表面のCsrA残基を変化させました。いくつかのcrw変異体はCsrA-FliW結合を消失させましたが、他の変異体はそうではなく、FliWとRNAの相互作用が相互排他的ではないことを示唆しています。

仮説：
FliWは、確立されたsRNA阻害因子とは大きく異なる非競合的なメカニズムによって、副甲状腺ホルモンを抑制すると結論付けました。


前提：
枯草芽孢杆菌的全局転写調節因子Spxは、遺伝子発現過程の複数のレベルで制御されています。通常の成長条件下では、ATP依存性プロテアーゼClpXPによって低濃度に維持されます。ジスルフィドストレス下では、ClpXPによるプロテアーゼ分解の減少が部分的に原因となり、Spxの濃度が増加します。Larssonらの最近の研究（Mol. Microbiol. 66:669-684, 2007）では、yjbH遺伝子の産物がSpxのプロテアーゼ分解制御に必要であることが示唆されています。本研究では、酵母二重ハイブリッド解析とタンパク質間のクロスリンクにより、SpxがYjbHと相互作用することが確認されました。YjbHタンパク質はClpXPプロテアーゼを含む反応混合物でSpxのプロテアーゼ分解を促進することが示されましたが、ClpCPプロテアーゼでは促進効果がありませんでした。1〜24残基が欠失したN末端欠損型YjbH（YjbH(Δ1-24)）は、プロテアーゼ分解促進活性を示しませんでした。YjbHはSpxに特異的で、ClpXP基質であるC末端SsrAタグを持つ緑色蛍光タンパク質（GFP）-SsrAのプロテアーゼ分解を加速しませんでした。誘導結合プラズマ原子発光分光法と4-(2-ピリジルアゾ)レゾルシノール放出実験により、YjbHが亜鉛原子を含むことが明らかになりました。YjbH(Δ1-24)の亜鉛分析は、N末端のヒスチジン豊富な領域が少なくとも1つのZn原子の配位に不可欠であることを示しました。強力な酸化剤で処理すると、N末端領域に配位した亜鉛原子が速やかにタンパク質から放出されました。

仮説：
私たちは、YjbHが亜鉛を配位したタンパク質であり、ClpXPが触媒するSpxのプロテオリシスを増強することが結論づけられます。


前提：
枯草芽胞杆菌におけるエキソプロテアーゼの生産は、二成分調節システム（two-component regulatory system）であるDegS-DegUによって正の制御を受けており、さらにいくつかの副因子によっても正に調節されています。degR遺伝子の産物はこの後者のグループに属し、DegS-DegU依存的な方法で正の効果を発揮します。我々は、mecAまたはmecBの破壊によってdegRの転写が阻止されることを発見しましたが、comKもさらに破壊することで転写が回復しました。しかし、comKのみの破壊ではdegRの転写には影響を及ぼしませんでした。また、mecA変異がその効果を発揮するためには、degRの転写開始点（TSP）から-52付近の領域が必要であることも発見した。以前の研究では、degRの転写は代替シグマ因子sigmaDによって駆動されることを示しました。degRの発現が人工的に構築されたsigmaA型プロモーターによって指導された場合、mecA/Bの破壊によってdegRの発現は著しく低下しないことから、mec変異の負の効果はsigmaD駆動の転写を介して作用していることを示しています。MecAおよびMecBがComKを負に調節し、mecA/Bのヌル変異（遺伝子機能を完全に失わせる変異）がcomKの発現を増加させることが証明されています。

仮説：
これらの結果から、ComKはdegRのsigmaD駆動による転写を防ぐことにより、degRの発現を負に調節していると結論付けます。


前提：
ビブリオ・フィッシャリ（Vibrio fischeri）における人口密度依存型の発光の発現は、オートインデューサーN-3-オキソヘキサノイル-L-ホモセリンラクトン（オートインデューサー1［AI-1］）によって制御され、LuxRを介してluxオペロン（luxICDABEG、推定オートインデューサー合成酵素［LuxI］と発光酵素をコード）転写を活性化します。我々は最近、AI-1が存在しない場合にもLuxRを介してluxオペロン転写を活性化する、第2のオートインデューサーN-オクタノイル-L-ホモセリンラクトン（AI-2）の合成に必要な、新たなV. fischeri遺伝子座ainSを特定しました。AI-2の調節機能を明確にするために、luxI ainS二重変異体を構築しました。親株およびluxI変異体と異なり、luxI ainS変異体は発光誘導を示さず、検出可能な発光自己誘導因子を産生しませんでした。これは、V. fischeriがluxIとainSが指示する合成物以外の発光自己誘導因子を生成しないことを示しています。ainSのみに欠陥のある変異体は親株と比較して発光誘導が加速しており、これはAI-2がV. fischeriにおいて発光誘導を遅延させる役割を果たしていることを示しています。その観察と一致するように、外因的に添加されたAI-2はlux遺伝子を持つV. fischeriおよび大腸菌で、投与量に依存して誘導を抑制しました。AI-2は単独またはAI-1の存在下でもluxRの負の自己調節を媒介せず、luxRが自己のプロモーターまたは外来プロモーターのいずれかで制御されているかに関係なく、大腸菌において発光誘導を抑制しました。AI-1の量を増やすことでAI-2の抑制効果が克服され、同等の発光活性化にはAI-1の25～45倍のAI-2が必要でした。

仮説：
AI-1はluxオペロンの転写を抑制することが結論づけられます。


前提：
迅速成長する非病原性の分枝菌（Mycobacterium smegmatis）は、現在、分枝菌の遺伝学を研究するためのモデル生物として使用されています。M. smegmatisのアセトアミダーゼは、複数のアミド化合物を唯一の炭素および窒素源として利用する高誘導性の酵素です。アセトアミダーゼオペロンは、3つの調節タンパク質、4つのプロモーター、および3つのオペレーター要素を含む複雑な調節メカニズムを持っています。前の研究では、AmiAの過剰発現がP2プロモーターをブロックすることによってアセトアミダーゼを負に調節することを示しました。この研究では、AmiAとタンパク質-タンパク質相互作用を介して相互作用する新しい正の調節タンパク質AmiCを同定しました。ゲル電気泳動移動度シフト分析では、AmiCタンパク質がAmiAがP2プロモーターに結合するのを阻害することが示されました。AmiCがシス作用の作用要素と相互作用することにより、P3、OP3、およびP1プロモーター/オペレーターなど、オペロンの複数の調節領域に結合できることが確認されました。その結果、誘導剤アセトアミドをAmiC複合体に加えると複合体が崩壊し、AmiCがアミドに対する感知タンパク質であるかのように見えます。同源モデルと分子ドッキング研究は、AmiCがペリプラスミック結合タンパク質の一員であり、抑制因子ではなく誘導因子に優先的に結合することを示唆しています。AmiCの過剰発現は、負の調節因子amiAの下方調節とアセトアミダーゼの持続的な上方調節を引き起こします。

仮説：
これらの結果に基づいて、我々ははAmiCがアセトアミダーゼオペロンを正に調節することを結論付けます。


前提：
組織メタロプロテアーゼ阻害因子-1（TIMP-1）が肝線維症の自発的消退に関与していることが示唆されています。この研究の目的は、TIMP-1がマトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）の抑制および肝星状細胞（HSC）の活性化とともに肝線維症の自発的消退を変化させるかどうかを調査することでした。CCl₄誘導肝線維症から自発的に回復した後、肝臓をターゲットにしたTIMP-1トランスジェニック（TIMP-Tg）マウスと対照ハイブリッド（Cont）マウスの肝臓を0、3、7、28日目に収穫しました。両グループのそれぞれの期間における線維症の解決程度、MMP発現、α-平滑筋アクチン（α-SMA）陽性細胞、前コラーゲン-(I)メッセンジャーRNA（mRNA）を評価しました。また、TIMP-1がHSCのアポトーシスに及ぼす影響も調査しました。TIMP-Tgマウスは、Contマウスと比較して自然発生的な肝線維化の消退が有意に減弱していることを示した。Contマウスでは、ヒドロキシプロリン含量、α-SMA陽性細胞数、前コラーゲン（I）mRNAが時間とともに急速に減少しましたが、TIMP-Tgマウスではこれらのマーカーはほとんど変化しませんでした。TIMP-Tgマウスの活性型MMP-2のレベルはContマウスよりも低かったです。TIMP-1は肝線維症解決モデルにおける非実質的アポトーシス細胞を顕著に減少させ、体外でカスパーゼ-3活性を抑制することに関連してHSCアポトーシスを抑制しました。

仮説：
結論として、線維化は肝臓のTIMP-1（組織阻害因子-1）の自然寛解を著しく減弱させました。これはMMP活性の全体的な減少とHSC（肝星細胞）におけるアポトーシスの抑制の組み合わせによるものです。


前提：
肝繊維化は、慢性肝障害に対する持続的な創傷治癒反応による肝臓の病態学的プロセスであり、最終的には肝硬変に進行します。葛根素は、伝統的な中国医学である葛根から得られる生物活性イソフラボングリコシドで、抗炎症および抗繊維化特性が多く報告されています。しかし、その詳細なメカニズムはまだ十分に研究されていません。この研究は、CCl₄によって誘導されたマウスにおける肝機能と繊維化過程に対する葛根素の効果を調査することを目的としました。C57BL/6Jマウスは、10% CCl₄をオリーブ油に溶解したもの（2 mL/kg）を腹腔内に注射し、葛根素（100および200 mg/kg）を併用するかしないかで、4週間連続して投与しました。血清肝酵素の改善と組織病理学的異常の減少が示すように、収集されたデータは、葛根素がCCl₄誘導の慢性肝障害から保護できることを示しました。さらに、CCl₄によって誘導された繊維化の進行は、肝臓内のα-平滑筋アクチン（α-SMA）、コラーゲン-1、トランスフォーミング成長因子（TGF）-βおよび結合組織成長因子（CTGF）の発現の増加によって示され、葛根素によって抑制されました。これらの抑制効果に関連する可能なメカニズムは、NF-κBシグナル伝達経路、活性酸素種（ROS）生成、およびミトコンドリア機能不全の抑制によって明らかにされました。さらに、これらの保護的抑制は、CCl₄によって損傷を受けた肝臓におけるPARP-1の発現を抑制することによって引き起こされました。葛根素はPARP-1の発現を減少させ、PARP-1抑制剤であるPJ34は葛根素の保護作用を模倣しました。

仮説：
結論として、葛根素はCCl₄誘導の肝繊維化において、PARP-1の抑制とその後のNF-κB、ROS生成およびミトコンドリア機能不全の軽減を通じて保護的な役割を果たしている可能性があります。


前提：
多価エニルホスファチジルコリン（PPC）は、大豆から抽出された多不飽和リン脂質であり、動物モデルにおける肝硬変の発展を防ぐことが知られています。その作用メカニズムは不明です。PPCが肝星状細胞の増殖を減少させることによって作用する可能性があるという仮説に基づき、PPCおよびその主成分であるジリノレイルホスファチジルコリン（DLPC）およびパルミトイル-リノレイルホスファチジルコリン（PLPC）がPDGF誘導の星状細胞の増殖および細胞内信号伝達に及ぼす影響を研究しました。正常なラット肝星状細胞を培養し、血清を除去した飢餓状態で10 ng/mlのPDGFとリン脂質の有無に応じてインキュベートしました。細胞の増殖は3H-チミジンの取り込みによって測定されました。P44MAPKの活性化はキナーゼアッセイによって決定され、AP-1の結合は電気泳動移動度シフト分析によって測定されました。PPC（200 ng/ml）はPDGF誘導の増殖を有意に抑制し（p < 0.05；ANOVA、n = 3）、PDGF誘導のP44MAPKの活性化およびAP-1の結合を拮抗しました。この効果はDLPCによって模倣されましたが、PLPCでは見られませんでした。DLPCおよびPLPCのいずれもPDGF受容体の活性化を防ぐことはありませんでした。

仮説：
私たちは、PPCがミトジェン誘導の星状細胞の増殖に対して以前には認識されていない効果を発揮し、これがDLPCによって媒介される可能性があると結論付けます。


前提：
活性化肝星状細胞（HSC）は、コラーゲンIおよびIIIの主要な供給源であり、メタロプロテイナーゼ阻害因子-1（TIMP-1）の中心的な役割を果たし、肝線維症において重要です。肝線維症からの自発的回復中には、TIMPの発現が減少し、コラーゲナーゼ活性が増加し、HSCのアポトーシスが増加することが見られ、HSCの生存におけるTIMP-1の潜在的な役割を示唆しています。この報告では、組織培養とin vivoモデルを用いて、TIMP-1がHSCのアポトーシスを直接抑制することを示します。TIMP-1は、組織培養で活性化され、血清除去、シクロヘキシミド曝露、神経成長因子刺激によってアポトーシスを起こすよう促されたHSCに対して、一貫して有意かつ用量依存的な抗アポトーシス効果を示しました。機能を失った変異型TIMP-1（T2G変異体）は、他のすべてのドメインが保存されているにもかかわらずアポトーシスを阻害しませんでした。合成MMP阻害剤もHSCのアポトーシスを抑制しました。実験的肝硬変の研究では、PCRによって決定されたTIMP-1 mRNAの持続的な発現が、α平滑筋アクチン染色によって定量された活性化HSCの持続と相関していることが示され、一方で線維症では活性化HSCの喪失がTIMP-1 mRNAの減少と相関していました。

仮説：
我々は、TIMP-1がMMPの抑制を介して活性化されたCD14 dim単球のアポトーシスを抑制することを結論付けます。


前提：
肝星状細胞（HSC）の活性化は、肝線維症の進行において重要な役割を果たします。C1q/腫瘍壊死因子関連タンパク質3（CTRP3）はCTRPファミリーのメンバーで、線維症に関与しています。しかし、肝線維症におけるCTRP3の役割についてはほとんど知られていません。本研究は、CTRP3の肝線維症における役割を明らかにし、その可能なメカニズムを探ることを目的としました。私たちの結果は、CTRP3が肝線維症の組織および活性化したHSCにおいて低い発現を示すことを示しました。CTRP3の発現過剰はHSCの増殖と移動を抑制し、さらにTGF-β1によって刺激されたHSC-T6細胞における細胞外マトリックス（ECM）の発現を抑制しました。さらに、CTRP3の発現過剰は、TGF-β1刺激を受けたHSC-T6細胞におけるSmad3のリン酸化の発現レベルを大幅に抑制しました。

仮説：
結論として、本研究はCTRP3がTGF-β1誘導のHSC-T6細胞の増殖と移動を抑制し、少なくとも部分的にSmadシグナル伝達経路を抑制することによって肝線維症を軽減したことを示しました。


前提：
炎症性腸疾患（IBD）の局所治療における特異性の向上が求められたため、我々は発炎した大腸上皮をターゲットにするために負に帯電したリポソームを使用しました。本研究の目的は、実験的な大腸炎を誘導されたラットの炎症性粘膜において、このようなリポソームが優先的に蓄積されるという以前の観察の原因を解明することでした。pH 3、5、7で抽出された炎症性粘膜標本のタンパク質分析（タンデム質量分析、ウエスタンブロットで確認）により、pH 3でトランスフェリン（TF）の発現が増加していることが明らかになりました。組織学的検査では、TFが炎症性上皮の腔側に位置していることが示されました。負に帯電したリポソーム（中性のものではなく）は、低pHで粘膜のTFに付着しましたが、中性pHでは付着しませんでした。さらに、負に帯電したリポソームをTFと予めインキュベートすると、ラットの大腸の炎症性粘膜への付着が著しく低下しました。

仮説：
低pH（潰瘍性大腸炎の結腸腔に典型的な環境）では、TFが負に帯電したリポソームの炎症性粘膜への特異的なムコアドヒージョンを媒介することが結論づけられました。


前提：
クルクミン（ジフェルロイルメタン）は、腸上皮細胞（IEC）および免疫細胞においてin vitro で強力な抗炎症効果を示し、化学的に誘発された結腸炎のマウスモデルにおいて保護的な役割を果たすことが知られています。その主な作用メカニズムはNF-κBの抑制を介していると考えられています。クルクミンは潰瘍性大腸炎患者の再発率を低下させる効果があることが示されていますが、クローン病（CD）やTh-1/Th-17が関与する免疫モデルにおける効果は評価されていません。したがって、私たちは、無菌のIL-10(-/-)またはIL-10(-/-);NF-κB(EGFP)マウスに特定病原体フリーの微生物叢を定植し、食事中のクルクミン（0.1-1%）が結腸炎の発症、免疫活性化、およびin vivoのNF-κB活性に与える影響を調査しました。近位および遠位結腸の形態は、0.1%のクルクミンでのみ軽度の保護効果を示しました。結腸中のIFN-γおよびIL-12/23p40のmRNA発現は、同様のパターン（0.1% で約50% 阻害）を示しました。IL-10(-/-)マウスの結腸由来の外植片および腸系膜リンパ節細胞からのIL-12/23p40およびIFN-γの分泌は上昇しており、食事中のクルクミンによって低下することはありませんでした。驚くべきことに、IL-10(-/-)マウス（リン酸化NF-κBp65）やIL-10(-/-);NF-κB(EGFP)マウス（全器官または共焦点イメージング）におけるNF-κBの活性化は、クルクミンによって顕著に抑制されませんでした。さらに、IL-10とクルクミンは相乗的に作用し、IECにおけるNF-κB活性および脾細胞や樹状細胞によるIL-12/23p40の生成をダウンレギュレートすることを示しました。

仮説：
クルクミンが化学的に誘発された結腸炎を予防する主な作用メカニズムは、NF-κBの抑制を介していると結論づけます。


前提：
肥満は炎症性腸疾患（IBD）の発症リスク要因です。グリーンピー（GP）は、食物繊維、多酚類、糖タンパク質が豊富で、これらはすべて健康に良いものとされています。今回の研究目的は、高脂肪食（HFD）を摂取したマウスにおけるデキストラン硫酸ナトリウム（DSS）誘発性大腸炎の感受性に対するGP補充の影響を調査することです。6週齢のC57BL/6J系の雌マウスに45％のHFDまたはHFDに10％のGPを追加して与えた。7週間の食事補充後、飲料水に2.5％のDSSを7日間添加しを加えて大腸炎を誘発し、7日間の回復期間を設けしました。GP補充は、回復期におけるHFD摂取マウスの疾患活動指数スコアを改善し、中性球浸潤、単球走化性タンパク質-1（MCP-1）および炎症マーカーであるインターロイキン（IL）-6、シクロオキシゲナーゼ-2（COX-2）、IL-17、インターフェロン-γ（IFN-γ）、および誘導型一酸化窒素合成酵素（iNOS）のmRNA発現を減少させました。さらに、GP補充はムチン2の含有量を増加させ、杯細胞分化マーカーであるTrefoil因子3（Tff3）、Krüppel様因子4（Klf4）、およびSAM指向ドメインETS因子1（Spdef1）のmRNA発現を増加させました。また、GPは、HFD摂取マウスにおける活性化転写因子6（ATF-6）タンパク質およびその標的遺伝子であるシャペロンタンパク質グルコース調節タンパク質78（Grp78）、CCAATエンハンサー結合タンパク質ホモログ（CHOP）、ER分解促進α-マンノシダーゼ様タンパク質1（Edem1）、およびXボックス結合タンパク質1（Xbp1）の発現を減少させることで、内因性ストレス（ERストレス）を軽減しました。

仮説：
結論として、GP補充は、HFD摂取マウスにおけるDSS誘発性大腸炎の重症度を軽減し、炎症抑制、ムチン欠乏、および結腸のERストレスの抑制と関連していた。


前提：
ビリルビンは血管細胞接着分子-1（VCAM-1）依存の白血球移動を抑制し、誘導型一酸化窒素合成酵素（iNOS）の発現を抑制することで抗炎症効果を発揮すると考えられています。VCAM-1とiNOSは、デキストラン硫酸ナトリウム（DSS）を用いた炎症性大腸炎モデルマウスにおける組織損傷の重要な媒介物であるため、ビリルビンがDSS処理マウスの大腸損傷を予防するかどうかを検討しました。雄のC57BL/6マウスに2.5％のDSSを飲料水で7日間投与し、同時にビリルビン（30 mg/kg）またはリン酸カリウム溶媒対照群を腹腔内注射しました。疾患活動性が監視され、末梢血の細胞数と血清硝酸塩レベルが測定され、腸組織サンプルが組織学的損傷、白血球浸潤、iNOS発現の解析に用いられました。また、HSB-2細胞によるIL-5産生およびJurkat細胞の内皮透過移動に対するビリルビンの影響も確認しました。ビリルビンを同時に受けたDSS処理マウスは、体重減少が少なく、血清硝酸塩レベルが低く、対照群に比べて病状が軽減されていました。これに一致して、組織病理学的解析では、ビリルビン処理マウスが著しく少ない大腸損傷を示し、好酸球、リンパ球、単球の浸潤およびiNOS発現が減少しました。また、小腸への好酸球および単球の浸潤が減少し、末梢血好酸球増加と関連していました。ビリルビンはJurkat細胞の移動を防ぎましたが、IL-5の産生には影響を及ぼしませんでした。

仮説：
結論として、ビリルビンは白血球の血管内皮を越えた移動を抑制し、iNOSの発現を抑制することでDSS誘発大腸炎を予防します。


前提：
炎症性腸疾患の発生率はここ数十年間で増加しており、結腸内ではムチン（MUC）およびトレフォイル因子（TFF）のファミリーが粘膜保護を促進しており、さらに食品成分が腸内細菌叢や腸内細菌叢に影響を与えている可能性があります。私たちの目的は、食事および/またはLactobacillus rhamnosus GG (LGG) が MUC および TFF 遺伝子の発現を変化させることによってデキストラン硫酸ナトリウム (DSS) 誘発性大腸炎を媒介するかどうかを判断することでした。 LGGの有無にかかわらず、20％（重量：重量）のカゼイン、大豆、またはホエータンパク質を含む食事を12日間与えた。LGG食を開始してから7日後に、マウスに飲料水中の2％DSSをさらに4日間与えた。さらに追加の2つのカゼイン群（LGGの有無）には水道水を与え、合計8群とした。DSS 処理の 1 日後にマウスを安楽死させ、結腸および盲腸の組織と盲腸の内容物を採取し、qRT-PCR によって有意に分析しました。他の食餌と比較して、盲腸の LGG 含有量が増加しました。結腸における MUC1 および TFF-3 の発現は、LGG とは無関係に DSS によって有意に誘導されました。他の DSS 処置群と比較して、大豆タンパク質は MUC-1 および TFF-3 を減少させました。結腸でも同様に、大豆タンパク質は炎症スコア、TNFα遺伝子発現、および結腸短縮に対するDSSの影響を減少させました。これらの測定値に対するLGGの全体的な影響はありませんでした。

仮説：
結論として、大豆タンパク質は、LGGの存在に関わらず、TNFα遺伝子発現によって誘発されるMUC、TFF、およびDSSの炎症刺激を抑制した。


前提：
低酸素誘導因子1α（HIF1α）は、代謝適応を促す主な調節因子であり、これは低酸素環境下で幹細胞の生存を維持するための重要な生理的プロセスです。しかし、低酸素条件下でHIF1αが幹細胞内でどのようにして核へ転移するかについては、ほとんど解明されていません。本研究では、モーターアダプタータンパク質であるBicaudal Dホモログ1（BICD1）がダイニン媒介のHIF1α核内転送に果たす役割、およびBICD1の調節が低酸素適応に与える影響と、ヒト臍帯血由来の間葉系幹細胞（UCB-MSCs）への治療的可能性について検討しました。結果として、BICD2ではなくBICD1のサイレンシングにより、HIF1αの核転送とその活性が阻害されました。さらに、BICD1の過剰発現により、低酸素誘導によるHIF1α核内転送が促進されました。低酸素環境では、HIF1αがBICD1およびダイニン中間鎖（Dynein IC）と直接的な結合することが確認されましたが、これはBICD1のサイレンシングによって阻害されました。Aktの抑制により、BICD1とHIF1αの結合およびHIF1αの核内転送が減少しました。逆に、Aktの活性化やGSK3βのサイレンシングは、低酸素誘導によるHIF1α核内転送をさらに促進しました。さらに、BICD1のサイレンシングは低酸素誘導による解糖系の再プログラミングを阻害し、低酸素環境下でのUCB-MSCsのミトコンドリアROSの蓄積とアポトーシスを増加させました。マウス皮膚創傷治癒モデルでは、低酸素処理されたUCB-MSCsの移植後の生存能力と皮膚創傷治癒能力がBICD1のサイレンシングにより低下し、GSK3βのサイレンシングによってさらに増加しました。

仮説：
結論として、FGF-誘導性HIF1α核内移行が低酸素適応に重要であり、これがUCB-MSCsの再生能力を決定することを実証しました。


前提：
フォン・ヒッペル・リンドウ（Von Hippel-Lindau）タンパク質（pVHL）は、通常、room airでは低酸素誘導因子1α（HIF-1α）のユビキチン媒介分解を引き起こし、神経前駆細胞（NPC）の神経分化を誘導しますが、低酸素条件下では機能しません。しかし、常酸素または低酸素条件下での神経前駆細胞の分化におけるpVHLの役割は完全には解明されていません。本研究では、完全無酸素条件下で神経前駆細胞におけるpVHLおよび神経マーカーの発現が抑制され、HIF-1αが誘導されることを示しました。さらに、遺伝子導入によりpVHLを発現させた神経前駆細胞は、room airで明確な神経分化を示し、HIF-1αの誘導は観察されませんでしたが、完全無酸素条件下ではそのような効果は見られませんでした。

仮説：
したがって、完全無酸素条件下ではpVHLが神経分化を抑制することが結論されます。


前提：
低酸素誘導因子（HIF）は、低酸素に対する細胞応答の主要な調節因子であり、酸素の供給を促進し、酸素不足に対する代謝適応を行います。しかし、低酸素下におけるHIF-1αの発現の程度と持続時間は、過剰な活性に伴う望ましくない副作用を避けるために細胞内で慎重にバランスを取る必要があります。HIF-1α mRNAの発現は持続的な低酸素状態で抑制されており、HIF1A遺伝子転写の制御が負のフィードバックメカニズムによって厳密に調節されていることを示唆しています。持続的な低酸素におけるHIF-1αタンパク質応答の減衰とHIF-1α mRNAの抑制についてはあまり知られていません。本研究では、抑制エレメント1-サイレンシング転写因子（REST）が低酸素依存的にHIF-1αプロモーターに結合することを示します。RNA干渉（RNAi）を用いたRESTのノックダウンは、HIF-1α mRNA、タンパク質および転写活性の発現を増加させます。さらに、RESTのノックダウンはHIF-1α（しかしHIF-2α非依存的な）依存的にグルコース消費と乳酸産生を増加させます。最後に、RESTは持続的な低酸素下におけるHIF-1αタンパク質発現の解消を促進します。

仮説：
結論として、我々は以下の仮説を提唱する：長期の休止状態（REST）において、低酸素状態がHIF-1αの転写過程を抑制し、それによってHIF-1α応答の収束に寄与します。


前提：
コアオートファジーキナーゼであるUnc51様キナーゼ1（ULK1）の発現は、飢餓誘導のオートファジーによって転写的および翻訳的に調節されます。しかし、低酸素状態におけるULK1の調節については十分に理解されていません。以前の研究では、ULK1の発現が低酸素ストレスによって誘導されることを示しました。ここでは、ULK1を調節する新しいマイクロRNAであるmiR-93を報告します。miR-93の転写は低酸素条件下でULK1の翻訳と負の相関関係にあります。miR-93はULK1を標的として低酸素条件下でそのタンパク質レベルを低下させます。さらに、miR-93はLC3-IからLC3-IIへの移行やP62の分解を防ぐことによって低酸素誘導のオートファジーを抑制します；これらのプロセスは内因性のmiR-93抑制子の過剰発現によって逆転します。miR-93反応要素なしでULK1を再発現させると、miR-93によって抑制された低酸素誘導のオートファジーが復元されます。最後に、miR-93が非癌細胞系および癌細胞における細胞の生存能力とアポトーシスに与える影響を検出しました。我々は、miR-93がマウス胚性線維芽細胞（MEFs）の生存能力を維持し、低酸素条件下でのアポトーシスを抑制することを発見しました。

仮説：
したがって、我々はmiR-93がULK1を調節することによってオートファジー誘導の低酸素に関与していると結論付けます。


前提：
低酸素条件は、胚性幹細胞（ESC）を含む幹細胞（SC）の分化状態に影響を与えると考えられています。低酸素誘導因子（HIF）は、低酸素に対する細胞応答の主要な細胞内分子の一つです。低酸素は、HIFのαサブユニットをプロテアソーム（proteasome）による分解に標的とするHIFプロリルヒドロキシラーゼ（PHD）の活性を抑制することによってHIFを安定化させます。HIFの安定化がマウス胚性幹細胞（mESC）の幹性マーカーの維持に与える影響を評価するために、白血病阻害因子の除去により誘発される24時間および48時間の自発的mESC分化に対するPHDの阻害と低酸素（1% O2および5% O2）の影響を検討しました。広く使用されている汎ヒドロキシラーゼ阻害剤ジメチルオキサロイルグリシン（DMOG）と、PHDに対してより高い特異性を持つとされるPHD阻害剤JNJ-42041935（JNJ）を使用しました。両阻害剤と両レベルの低酸素は、自発的に分化するmESCにおいてHIF-1αおよびHIF-2αのタンパク質レベルとHIFの転写活性を有意に増加させました。これは、48時間後にDNA合成の完全な阻害とS期での部分的な停止として現れる細胞増殖の有意なダウンレギュレーションを伴いました。さらに、HIFの安定化は自発的に分化するmESCにおけるいくつかの多能性マーカー（OCT-4、NANOG、ZFP-42、TNAP）の発現低下を強化しました。しかし同時に、細胞分化マーカーとして選択された一部の遺伝子（例：SOX1、BRACH T、ELF5）の発現も有意に減少しました。

仮説：
結論として、PHD（プロリン水酸化酵素）阻害剤のJNJとDMOG、そしてHIF（低酸素誘導因子）によって媒介される短期的な低酸素症の短期的な安定化は、マウス胚性幹細胞（mESC）における多能性細胞マーカーの自然消失を防ぐことはありませんでした。


前提：
BTK阻害剤イブルチニブは、マントル細胞リンパ腫（MCL）において顕著な治療効果を示しています。しかし、約3分の1の患者は、初めてこの薬に反応しません。MCLにおける初期イブルチニブ耐性のメカニズムを特定するために、イブルチニブ感受性細胞株と耐性細胞株における転写体の変化を分析しました。感受性細胞株では、MYC遺伝子のシグネチャーがイブルチニブによって抑制されましたが、耐性細胞株では抑制されませんでした。MCL細胞では、MYC遺伝子が構造的に異常であり、MYCタンパク質が過剰発現していることを示しました。さらに、RNA干渉によるMYCのノックダウンは、イブルチニブ感受性および耐性細胞の両方で細胞増殖を抑制しました。MYCをHSP90の阻害を通じて抑制する可能性を探りました。このシャペロンタンパク質は、両方の細胞株および患者からの原代MCL細胞において過剰発現しています。免疫沈降および化学的沈降の両方により、MCLの文脈においてMYCがHSP90の真のクライアントであることを示しました。さらに、PU-H71を使用してHSP90を阻害することで、アポトーシスが誘導され、細胞周期の停止が引き起こされました。PU-H71は、他の腫瘍促進経路と比較して、MYCの転写プログラムに対して強く、比較的特異的な抑制を示します。MCL患者由来の異種移植モデルでは、HSP90阻害剤が腫瘍の成長を遅らせ、生存を延ばしました。最後に、PU-H71がアポトーシスを誘導し、イブルチニブに臨床的に耐性のある患者由来のMCL細胞におけるMYCタンパク質をダウンレギュレーションしたことを示しました。

仮説：
結論として、MYCの活性はMCLにおけるイブルチニブの内因性耐性の基盤となります。


前提：
活性化誘導シトシン脱アミノ化酵素（AID）は、胚中心（GC）B細胞における体細胞超突然変異（somatic hypermutation）と免疫グロブリン（Ig）クラススイッチ組換え（class switch recombination）に必要です。時折、AIDは非Ig遺伝子を標的にし、GC B細胞リンパ腫の発生を促進することがあります。我々は最近、癌遺伝子BCR-ABL1キナーゼが前B急性リンパ芽球性白血病（ALL）およびリンパ性慢性骨髄性白血病の急性転化でAIDの異常な発現を誘導することを示しました。異常なAID発現の生物学的意義を明らかにするため、BCR-ABL1 ALLのマウスモデルにおけるAID機能の喪失を研究しました。BCR-ABL1転導AID(-/-)骨髄を移植したマウスは、AID(+/+)骨髄から生成された白血病細胞を移植されたマウスと比較して、生存期間が延長した。AIDが遺伝的不安定性における原因的役割を果たすことと一致して、AID(-/-)白血病は、AID(+/+)白血病と比較して、増幅や欠失の頻度が低く、非Ig遺伝子における変異の頻度も低かったです。AID(-/-)およびAID(+/+) ALL細胞は明らかに異なる遺伝子発現パターンを示し、AID(-/-) ALL細胞はRhoh、Cdkn1a（p21）、およびBlnk（SLP65）を含む多くの腫瘍抑制遺伝子の発現をダウンレギュレートすることに失敗しました。

仮説：
我々は、ALL（急性リンパ性白血病）がBCR-ABL1 AIDにおいて遺伝的不安定性と異常な体細胞高頻度突然変異を促進することにより、細胞のクローン進化を加速させることを結論付けました。さらに、ALLは腫瘍抑制遺伝子の負の制御によってもこの進化を促進します。


前提：
c-Kitの活性化変異は、融合タンパク質AML1-ETOを生成するt(8;21)染色体転座を持つ急性骨髄性白血病（AML）患者に頻繁に見られます。ここでは、c-Kitの活性変異体がAML1-ETOと協力してマウス骨髄移植モデルでAMLを誘導することを示します。c-Kit(D814V)を持つAML1-ETOを発現する白血病細胞は連続的に移植可能でした。移植実験により、系統陰性（lineage(-)）c-Kit陽性（c-Kit(+)）Sca-1陽性（Sca-1(+)）の白血病細胞（KSL）が白血病幹細胞（LSCs）に富むことが示され、系統陽性（lineage(+)）白血病細胞ではないことが示されました。KSL白血病細胞と正常細胞の間の遺伝子発現プロファイルの比較により、KSL白血病細胞ではCD200R1が高く発現していることが示されました。CD200R1の発現上昇はlineage(-)白血病細胞で確認されましたが、lineage(+)白血病細胞では確認されませんでした。lineage(-)白血病細胞におけるCD200R1の発現はLSCsの頻度とは相関がなく、これらのモデルではCD200R1がLSCsの有用なマーカーではないことを示しています。興味深いことに、CD200R1はAML1-ETOを導入されたKSL細胞で発現上昇されましたが、c-Kit(D814V)、AML1(D171N)、AML1(S291fsX300)を含む他の白血病変異体では発現上昇されませんでした。一貫して、lineage(-)白血病細胞におけるCD200R1の発現上昇は、AML1-ETO陽性白血病に罹患したマウスの骨髄でのみ観察されました。

仮説：
結論として、AML1-ETOは系統陰性細胞においてCD200R1を上方調節し、これはマウスにおけるAML1-ETO陽性白血病の特徴である。


前提：
NRAS癌遺伝子（NRAS(G12V)）の急性骨髄性白血病（AML）における腫瘍促進的役割を研究するために、Mll-AF9ノックインマウスにおいて、Vavプロモーター-テトラサイクリン転写活性化因子（Vav-tTA）駆動の抑制可能なTRE-NRAS(G12V)トランスジェニックシステムを使用しました。NRAS(G12V)の発現を条件付きで抑制することで、白血病受容体マウスの末梢白血球（WBC）数が大幅に減少し、移植されたAML細胞においてアポトーシスが誘導され、Ras/Erkシグナル伝達の低下と相関しました。AML芽球細胞が顕著に減少した後、NRAS(G12V)を発現しない細胞によって特徴付けられる骨髄増殖性疾患（MPD）様AMLが再発しました。原発性AMLと比較して、MPD様AMLは侵襲性が有意に低下し、骨髄抑制が軽減され、より分化した表現型を示しました。

仮説：
Mll-AF9トランスジェニックによって誘発されるAMLにおいて、NRAS(G12V)の発現は、アポトーシスを抑制し、白血病細胞の分化を減少させることによって急性白血病の維持に寄与していると結論付けます。


前提：
Fms様チロシンキナーゼ3（FLT3，III型受容体チロシンキナーゼ（RTK））の膜貫通領域近傍部分における内部タンデム重複（ITD）は、急性骨髄性白血病（AML）に関連する最も一般的な分子欠陥です。この活性変異の高い有病率は、分子標的治療の潜在的なターゲットとします。インドリンオン類のチロシンキナーゼ阻害剤は、タイプIII受容体チロシンキナーゼファミリーの別のメンバーであるKITに対して知られた活性があります。このファミリーのメンバー間の保存された相同性を考慮し、いくつかのKIT阻害剤の活性がFLT3にも拡張されると仮定しました。さまざまな白血病細胞系（BaF3、MV4-11、RS4;11）を使用して、野生型（WT）およびITDアイソフォームのFLT3キナーゼ活性に対するインドリンオン化合物の活性をテストしました。SU5416とSU5614の両方が、ITDおよびWT FLT3の自己リン酸化を阻害する能力を持っていました（SU5416の半数抑制濃度[IC(50)]は100 nM、SU5614のIC(50)は10 nM）。FLT3依存の下流シグナル伝達タンパク質であるミトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）および転写因子5（STAT5）の活性化も、同じ濃度範囲での処理により抑制されました。SU5416およびSU5614によるFLT3の阻害は、FLT3 ITD陽性白血病細胞株の増殖を減少させ（IC(50)、それぞれ250 nMおよび100 nM）、アポトーシスを誘導しました。これらの細胞に別の成長因子（顆粒球-マクロファージコロニー刺激因子[GM-CSF]）を処理すると、MAPKシグナル伝達と細胞増殖が回復し、観察された抑制効果の特異性を示しました。

仮説：
我々は、SU5416とSU5614がFLT3の強力な阻害剤であると結論付けます。


전제:
이카티반트는 브라디키닌-2 수용체 길항제로, 1형 및 2형 유전성 혈관부종 발작을 치료하기 위해 피하주사로 투여된다. 주사 후, 환자들은 일시적인 통증을 느끼고 이어서 주사 부위에 단기간의 팽진과 홍반 반응(피부가 부풀고 붉어지는 반응)이 나타난다. 우리는 이카티반트로 인한 팽진과 홍반 반응이 활성화된 피부 비만세포에서 히스타민이 분비되어 발생하며, 따라서 H(1)-항히스타민제에 의해 반응이 감소될 것이라고 가설을 세웠다. 건강한 자원자의 팔뚝에 100 μg/ml 히스타민과 10 mg/ml 이카티반트 100 μl를 피내 주사했을 때, 유사한 크기의 팽진과 홍반 반응이 나타났으며, 세티리진 전처치로 히스타민 반응은 49%와 41%, 아카티반트 반응은 35%와 41% 감소되었다. 시험관 연구 결과, 1 × 10⁻⁴M 및 1 × 10⁻⁵M 농도의 이카티반트는 분리된 인체 피부 비만세포에서 유의미한 히스타민 분비를 유발했다(유의수준 0.05에서 통계적으로 유의함).

가설:
결론적으로, 이카티반트는 히스타민 매개 팽진과 홍반 반응을 유발하며, 이는 H(1)-항히스타민제를 예방적으로 투여함으로써 그 반응의 심각도를 감소시킬 수 있다.


전제:
인간 섬유소원(FDP)의 단백질 분해 산물은 쥐의 복막 비만 세포에서 히스타민 방출을 유도하는 것으로 밝혀졌다. 저분자량의 투석 가능한 펩타이드(FDP)는 가장 높은 농도 의존성을 보이며 히스타민 방출 활성을 보였다. FDP에 의해 유도된 히스타민 방출은 금 화합물인 아우라노핀에 의해 10(-5)-10(-7) mol/L의 농도에서 효과적으로 억제되었으며, 비스테로이드성 항염증제인 BW 755c, 타임가딘, 메도산, 나프록센, 아스피린에 의해서도 10(-4)-10(-6) mol/L의 더 높은 농도 범위에서 억제되었다.

가설:
비만 세포로부터의 히스타민 방출은 항염증제, 특히 아우라노핀, BW 755c, 타임가딘에 의해 어느 정도 조절될 수 있으며, 이러한 기능적 특성은 관절 질환 관리에 유익할 수 있음을 보여준다.


전제:
(E,Z)-3-(3',5'-디메톡시-4'-하이드록시-벤질리덴)-2-인돌리논(인돌리논)은 전통적인 항염증 약초인 대청 추출물에서 약리 활성 화합물로 확인된 알칼로이드이다. 인돌리논은 시험관 내에서 화합물 48/80에 의해 유도된 비만 세포 탈과립화를 억제하는 것으로 나타났다. 골수 유래 비만 세포에 인돌리논을 적용한 결과, 세포질에 고르게 분포하며 수분 내에 세포 내 흡수가 종료되었다. IgE로 감작된 비만 세포를 100nM 인돌리논으로 전처리한 경우 FcvarepsilonRI 수용체 의존성 탈과립화에 대해 저항성을 보였다. 그러나 항원에 의해 유도되는 PI3-K(포스파티딜이노시톨 3-키나아제) 및 MAPK(분열촉진인자활성화단백질키나아제)활성화와 같은 상위 신호 전달에는 영향을 미치지 않았다.

가설:
우리는 인돌리논이 IC(100) 54nM 농도인 과립 유출 수준에서 비만 세포 탈과립화를 차단한다고 결론지었다.


전제:
FcεRI 매개 비만 세포 및 호염기구의 사전 생성 매개체(예: 히스타민, 세로토닌, 베타-헥소사미니다제)의 탈과립은 면역억제제 사이클로스포린 A와 FK506(각각 IC50 200 및 4 nM)에 민감하지만 라파마이신(rapamycin)에는 민감하지 않다. 억제 메커니즘은 티로신 인산화, 이노시톨 인산염의 가수분해 또는 칼슘 유입과는 관련이 없는 것으로 보인다. 본 연구에서는 이러한 약물의 주요 약리학적 표적으로 여겨지는 세린/트레오닌 인산화효소인 칼시뉴린의 역할을 분자적 접근법을 통해 평가한 실험을 보고한다. 칼시뉴린의 활성은 촉매(A) 소단위체가 고유한 조절(B) 소단위체와 결합해야 한다. 우리는 칼시뉴린 B 소단위체의 고갈이 활성 A:B 복합체의 수를 줄임으로써 칼시뉴린 민감성 신호 전달 사건에 영향을 미칠 것이라고 가정했다.  따라서 우리는 쥐 호염기성 백혈병(RBL) 세포에 칼시뉴린 A 소단위체의 우성 억제 형태를 형질 주입했는데, 이는 칼시뉴린 B 소단위체와 높은 친화력으로 결합하지만 촉매 활성은 없었다(B 소단위체 녹아웃, BKO: B subunit knock-out). 이렇게 형질 주입된 세포에서 FK506에 의한 FcεRI 매개 탈과립 억제에 대한 용량-반응 곡선(dose-response curve)이 좌측으로 이동하여, BKO 형질 주입 세포의 약물 감수성이 증가했음을 나타냈다.

가설:
우리는 비만 세포에서의 FcεRI 매개된 세포외 배출에 대한 아데노신 억제가 칼시뉴린 활성을 표적으로 한다고 결론지었다.


전제:
MC9 비만세포를 2,4-디니트로페닐(DNP) 군에 특이적인 단클론 IgE 항체로 감작 후, DNP-BSA(소혈청알부민)에 노출시키고 형광 탐침 BCECF와 Fura-2를 각각 사용하여 세포의 pH 및 세포질 내 칼슘 신호를 기록했다. DNP-BSA에 의해 유도된 세포 알칼리화는 아젤라스틴에 의해 완전히 억제되었으며, IC50 값(1.6 ± 0.5 μmol/l, 평균 ± SEM, n = 5)은 히스타민 방출 억제에 필요한 농도(1.4 μmol/l)와 유사했다. 반대로, DNP-BSA 의존적인 세포 내 칼슘 이동을 억제하기 위해서는 고농도의 아젤라스틴(> 100 μmol/l)이 필요했고, 그 IC50 값은 약 200 μmol/l (n = 3)였다. 아밀로라이드는 DNP-BSA에 의해 유도된 pH 신호를 억제할 수 있었지만, H1 히스타민 길항제인 피릴아민은 그렇지 않았다. 산성화된 비만 세포에서 아젤라스틴은 Na+:H+교환 활성을 강력하게 억제했다IC50 = 7.7 ± 3.6 x 10^(-6) M, 평균 ± SEM, n = 3). 반대로, 마우스 비장 림프구에서는 아젤라스틴이 콘카나발린 A에 의해 유도된 아밀로라이드 감수성 pH 신호를 억제하지 못했다.

가설:
결론적으로, 아젤라스틴에 의한 히스타민 방출이 촉진되는 것은 세포질 내 칼슘 신호와의 간섭에 의한 것이 아니다.


전제:
Rhodnius prolixus 응집 억제제 1(RPAI-1)은 R. prolixus의 침샘에서 분리된 19-kDa 단백질로, 강력한 양이온 교환 크로마토그래피 및 역상 고성능 액체 크로마토그래피를 통해 정제되었다. RPAI-1의 49개 아미노 말단 아미노산 서열을 기반으로, R. prolixus의 침샘 cDNA 유전자 집합체를 선별하기 위한 탐침을 생성하기 위해 프라이머가 제작되었다. RPAI-1의 완전한 클론을 포함하는 세균성 바이러스는 155개의 아미노산으로 구성된 성숙 단백질을 암호화한다. RPAI-1은 Triatoma pallidipennis의 라이포칼린인 트리아빈 및 팔리디핀과 서열 유사성을 보인다. cDNA 서열은 Pet17B 대장균 발현 벡터에 클로닝되어 활성 펩타드를 생성하였다. RPAI-1은 낮은 농도의 ADP, 콜라겐, 아라키돈산, 트롬복산 A2 유사체(U46619), 그리고 매우 낮은 용량의 트롬빈과 콘불신에 의해 유발되는 인간 혈소판 농축 혈장 응집을 억제한다. 본 연구에서는 ADP가 RPAI-1의 표적임을 보여준다. (i) RPAI-1은 Ca2+ 증가와 형태 변화에 영향을 주지 않으면서 U46619에 의해 유발되는 ADP 의존적 대규모 응집 형성과 분비를 억제한다; (ii) ADP는 RPAI-1에 의한 U46619 유도 혈소판 응집 억제를 회복시킨다, (iii) RPAI-1에 의해 PGE1 유도 cAMP 증가(U46619에 의해 ADP 의존적 방식으로 길항됨)가 회복된다, (iv) RPAI-1은 인도메타신 처리된 혈소판의 낮은 농도 ADP 매개 반응을 억제한다, 그리고 (v) RPAI-1은 대규모 구역 크로마토그래피로 평가했을 때 ADP에 결합한다. RPAI-1은 인테그린 α2β1 또는 당단백질 VI 매개 혈소판 반응에는 영향을 미치지 않는다.

가설:
결론적으로, RPAI-1은 ADP에 결합하여 혈소판 응집을 억제하는 새로운 기전을 가진 최초의 라이포칼린으로 보고된다.


전제:
성장 호르몬(GH)과 인슐린 유사 성장 인자(IGF)-I가 소 유선 발달에 미치는 기전을 이해하기 위해 T-box2(TBX2)와 T-box3(TBX3)의 잠재적 역할을 조사하였다. 소 유선에서 두 전사인자의 발현에 관한 정보는 없지만, 인간과 쥐에서 TBX3 및 그와 밀접하게 관련된 계열 구성원인 TBX2가 유선 발달에 필요하다는 사실은 알려져 있다. 또한, 인간과 쥐에서 TBX3 돌연변이는 척측 유방 증후군을 유발한다. 골조직에서 TBX3가 세포 증식에 필요하며, 그 발현은 유선 발달과 우유 생산의 중요한 조절자인 GH에 의해 조절된다는 증거가 있다. 우리는 TBX2와 TBX3가 소 유선에서 발현되며, GH, IGF-I 또는 두 가지 모두가 소 유선 상피 세포(MEC)에서 TBX2와 TBX3 발현을 증가시킨다는 가설을 세웠다. 소 유선 조직, MAC-T 세포, 일차 MEC 및 섬유아세포를 얻어 실시간 역전사 중합효소 연쇄반응으로 TBX2와 TBX3의 발현을 확인했다. 또한, GH 100 또는 500 ng/mL 또는 IGF-I 100 또는 200 ng/mL로 24시간 또는 48시간 동안 처리한 세포에서 TBX2와 TBX3 발현을 조사했다. TBX2와 TBX3는 모두 소 유선 조직에서 발현되었다. 놀랍게도, TBX2의 발현은 유선 섬유아세포에서만 검출되었고, TBX3는 세 가지 세포 유형 모두에서 발현되었다. 성장 호르몬은 MAC-T 세포나 MEC에서 TBX3 발현을 변화시키지 않았다. 그러나 IGF-I는 MAC-T에서는 TBX3 발현을 증가시켰지만, 일차 MEC에서는 그렇지 않았다. GH와 IGF로 처리한 섬유아세포에서는 TBX2나 TBX3 발현의 변화가 관찰되지 않았다.

가설:
따라서, 우리는 (1) TBX2와 TBX3가 소 유선에서 발현되며, (2) 그 발현이 세포 유형에 따라 특이적이고, (3) Fur가 소의 MAC-T 세포에서 TBX3 발현을 유도한다는 결론을 내렸다.


전제:
트롬빈과 플라스미노겐 활성화 억제제-1(PAI-1) 사이의 반응에 대한 헤파린의 영향이 조사되었다. PAI-1을 50배 과잉으로 사용했을 때, 트롬빈 억제의 속도 상수는 458 mol/(L·s)이었으며, 이는 25 마이크로그램/mL의 비분획 헤파린 또는 안티트롬빈에 대한 친화도가 낮은 헤파린 존재 하에서 5,000 mol/(L·s)로 증가했다. 그 후 저친화성 헤파린의 효과를 반응물의 거의 동몰 농도를 사용하여 소듐 도데실 황산염-폴리아크릴아미드 겔 전기영동(SDS-PAGE)으로 조사했다. 트롬빈과 PAI-1은 헤파린이 없는 상태에서 안정적인 화학량론적 복합체를 형성했으며, 이는 25 마이크로그램/mL의 저친화성 헤파린을 추가한 후에도 해리되지 않았다. 반면, 반응 초기에 저친화력 헤파린을 추가했을 때는 초기 PAI-1-트롬빈 복합체 형성이 증가했으나, 이는 빠르게 미반응 PAI-1과 트롬빈-PAI-1 복합체의 상당한 단백질 분해 절단이 뒤따랐다. 트롬빈과 PAI-1의 상대 농도와 저친화력 헤파린의 존재가 반응 산물에 미치는 영향을 구체적으로 조사하였다. 조직 플라스미노겐 활성화제 및 PAI-1 활성의 정량적 자이모그래피 분석과 트롬빈 활성의 발색 기질 분석 결과, 저친화성 헤파린이 동몰량의 트롬빈에 의한 PAI-1의 불활성화를 촉진시켰지만, 트롬빈 억제는 최소한의 자극만 주는 것으로 나타났다.

가설:
결론적으로, 저친화력 헤파린은 PAI-1이 과량일 때 트롬빈 억제를 촉진한다. 그러나 트롬빈이 PAI-1과 등량일 때는 예기치 않게 PAI-1의 불활성을 증가시킨다.


전제:
골신장술(DO)은 기계적 신장으로 인해 새로운 뼈의 형성을 유도하는 과정입니다.  종양괴사인자-알파(TNF)는 조골세포 생성을 조절할 수 있는 사이토카인입니다. 설치류에서 TNF가 직접적인 뼈 형성에 미치는 영향은 이론적으로 TNF 수용체 1 및/또는 2(TNFR1/2) 신호 전달을 통해 매개됩니다. 우리는 쥐의 DO 독특한 모델을 활용하여 1) TNFR 동형 유전자 결손 변이가 직접적인 뼈 형성에 미치는 영향과 2) rmTNF가 야생형(WT), TNFR1(-/-) (R1KO), 그리고 TNFR2(-/-) (R2KO) 쥐에 미치는 영향을 평가했습니다. 견인 간격에서 직접 뼈 형성에 대한 방사선 및 조직학적 분석 결과, WT, R1KO, R2KO, TNFR1(-/-), 및 R2(-/-) (R1 및 2KO) 쥐 간에 유의미한 차이가 나타나지 않았습니다. R1 및 2KO 쥐는 혈청 TNF 수치가 높았으나 새로운 뼈 형성에는 억제가 관찰되지 않았습니다. DO 동안 삼투압 펌프를 통한 rmTNF의 전신 투여(10 마이크로그램/kg/일)는 WT 및 R2KO 쥐에서 간격 뼈 형성 측정치의 유의한 억제를 초래했지만, R1KO 쥐에서는 그렇지 않았습니다.

가설:
우리는 외인성 rmTNF 및/또는 내인성 TNF가 DO 동안 주로 TNF R1을 통한 신호 전달로 새로운 골 형성을 억제한다고 결론 내립니다.


G베타감마가 G 단백질 결합 수용체 자극에 대한 반응으로 유사분열 촉진 단백질 인산화효소(MAPK) 활성화를 매개한다고 생각되지만, 이 경로에 관여하는 메커니즘은 명확하게 정의되지 않았다. 포스포이노시티드 3-인산화효소(PI3K)가 이 과정의 초기 중간체로 제안되었지만, 그 역할은 불분명한 상태로 남아있었다. 우리는 p110감마가 아닌 p110베타의 우성 억제 돌연변이체가 리소포스파티딘산(LPA)에 대한 반응으로 MAPK 자극을 억제한다는 것을 관찰했다. p110베타의 역할은 Ras의 상위에 위치했다. Ras 활성화에 p110베타의 지질 또는 단백질 인산화효소 활성 중 어느 것이 중요한지 확인하기 위해, 우리는 지질 인산화효소 활성은 없지만 단백질 인산화효소 활성은 있는 돌연변이 p110배타를 생성했다.  이 단백질은 키나아제 사멸 돌연변이와 유사한 우성 음성 활성을 나타냈으며, p110베타의 지질 키나아제 활성이 본질적으로 Ras 활성화에 관여함을 시사하였다. 이와 일치하게, 지질 인산분해효소 PTEN의 과발현이 LPA에 의해 유도된 Ras 자극을 특이적으로 억제하는 것으로 밝혀졌다. 또한, 우리는 LPA 자극 중 p110beta 활성화에 관여하는 PH 도메인 보유 어댑터 단백질 Gab1이 p110beta 하위의 이 경로에도 관여한다는 것을 관찰했다. 실제로 PI3K 억제제 또는 우성 억제 p110beta 존재 하에 Gab1의 세포막 재분포와 인산화가 모두 감소했다. Gab1 하위에서, 티로신 인산분해효소 SHP2가 LPA에 대한 반응으로 Ras 활성화를 매개하고 PI3K와 Gab1을 통해 모집되는 것으로 밝혀졌다. 이는 SHP2 결합이 결핍된 Gab1 돌연변이체의 형질전환이 PI3K 활성화를 방해하지 않고 Ras 활성화를 억제했기 때문이다.

가설:
우리는 p110beta의 지질 키나아제 활성이 LPA에 의해 유도되는 Ras 활성화에 필수적이며, PI3K와 Gab1이 이 경로에 관여한다고 결론짓는다.


전제:
생식샘자극호르몬 결핍 쥐에서 테스토스테론만으로 충분하다고 보고된 바와 같이 정자형성에서 FSH의 역할은 불분명하다. 이 연구는 GnRH 면역화로 인한 생식샘자극호르몬 결핍 후 정자 형성 복원에 대한 재조합 FSH의 효과를 조사했다. 성체 Sprague-Dawley 쥐에 GnRH 면역원(100 μg, 피하, 4주 간격으로)을 주입하여 생식샘자극호르몬 결핍을 유도하였으며, 12주까지 심각한 정자형성 퇴행이 나타났다. 이후 재조합 인간 FSH(10 또는 50 IU/kg, 피하, 매일)를 7일, 14일, 21일 동안 투여하였고, 두 용량의 데이터를 통합하여 분석하였다.

고환은 관류 고정되었고, 광학 절편화 기법을 통해 생식 세포 수는 정량화되었다. FSH 투여 7일 후 고환 무게는 43% 유의하게 증가하였고(P < 0.01), 14일과 21일에서는 추가 증가가 없었다. GnRH 면역화는 생식 세포 수를 심각하게 감소시켰으나,  FSH 7일 투여 후 신장된 정자세포를 제외한 모든 세포 유형에서 유의하게(P < 0.05) 회복되었다. A형 정조세포는 (대조군의 45%에서 61%로), B형 정조세포/전전기 정모세포는 (46%에서 65%로), 전기/접합기 정모세포는 (39%에서 55%로), I-VIII기 파키텐 정모세포는 (대조군의 11%에서 30%로), IX-XIV기 파키텐 정모세포는 (대조군의 4.3%에서 22%로), 그리고 I-VIII기 둥근 정자세포는 (대조군의 1.4%에서 4.4%로) 변화했다.

장기 FSH 치료는 A형 정조세포나 파키텐 정모세포 수를 더 증가시키지 않았으나, 둥근 정자세포는 대조군 값의 12.8%까지 최고치로 증가했다. 어떤 단계에서도 FSH는 신장된 정자세포 수를 대조군 수준의 1% 이상으로 증가시키지 않았다. 정조세포와 초기 정모세포 핵으로의 브로모데옥시우리딘(bromodeoxyuridine) 결합은 GnRH 면역화나 FSH 치료 후에 변화가 없었다.

세르톨리 세포 수는 어떤 치료에 의해서도 변하지 않았다. GnRH 면역화에 의해 세르톨리 세포 핵 부피는 대조군 값에서 유의하게 감소하였고(142 ± 9 vs. 455 ± 22 μm³; P < 0.01), FSH 치료 7일 및 14일 후 각각 212 ± 10 및 259 ± 24 μm³로 증가하였다. FSH 치료는 혈청 인히빈 수치를 정상으로 회복시켰으나, 혈청 또는 고환 안드로겐 수치는 증가시키지 않았다.

가설:
우리는 재조합 난포자극호르몬이 생식샘자극호르몬 결핍 쥐에서 정조세포 수를 증가시키고 둥근 정세포 단계까지 후속 성숙 단계를 촉진함으로써 정자형성을 부분적으로 회복한다고 결론을 내렸다.


전제:
인간 난포액(hFF)이 체외수정(IVF)을 받는 여성들로부터 채취되어 인간 정자의 첨체반응(acrosome reaction, AR)을 유도하는 능력은 여러 실험실에서 문서화되었다. 그러나 hFF의 활성인자의  본질과 AR 유도의 생리학적 의미는 매우 논란의 여지가 있다. 우리는 hFF에 대해 세 단계 정제 과정을 수행하였고, 모든 분획에 대해 AR 유도 활성을 조사했다. AR 활성은 분자량(M(r)) > 180 kD의 단백질 분획과 연관되었으며, 이는 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE) 하에서 추가 분석 시 겉보기 분자량(M(r)) 50,000과 29,000의 소단위로 구성되어 있는 것으로 밝혀졌다. 이 밴드들의 N-말단 서열은 인간 IgG의 중쇄 및 경쇄와 100% 상동성을 보였다. 정제된 단백질에 대해 생성된 다클론 항체와 항-인간 IgG 모두 정제되지 않은 hFF(crude hFF)의 첨체반응 유도 활성을 억제할 수 있었다. 그러나 정상 인간 혈청이나 정제된 인간 IgG 제제는 hFF의 AR 유도 활성을 모방할 수 없었다.

가설:
우리는 hFF에서의 AR 유도가 인간 IgG에 의해 매개됨을 확인하였다.


전제:
고인슐린혈증은 쥐에서 사람 융모성 생식선 자극 호르몬(hCG)의 배란 유도 역치 미만의 용량이 난소 여포낭종을 유도하는 능력을 향상시킨다. 이러한 호르몬들이 난소낭종 발달에 미치는 상대적 기여도를 결정하기 위해, 성체 암컷 쥐들을 다음과 같이 처리했다: (1) 매개제만 단독 투여(대조군), (2) 체중 증가의 영향을 통제하기 위한 고지방 식이(High-Fat Diet, HFD), (3) 하루 두 번 1.5에서 6 IU의 hCG와 6 U의 인슐린(Ins)/일, 또는 (4) 1.5에서 9 U의 Ins/일과 하루 두 번 3 IU의 hCG. 체내 처리 23일째에, 최소 6 U Ins/일을 투여받은 모든 그룹은 대조군과 HFD 쥐들에 비해 체중이 증가했다(P ≤ 0.05). 대조군 쥐들 중에는 난소낭종이 없었고 HFD 쥐 중 한 마리만 이 날 난소낭종을 보였다. 낭종이 없는 난포를 가진 HFD 쥐들의 혈장 에스트론(E1)과 안드로스테네디온(A4)은 대조군 쥐들에 비해 증가했다(P ≤ 0.05). 6 U Ins/일과 하루 두 번 1.5에서 6 IU의 hCG 주사를 받은 쥐들 중 64%에서 80%가 23일째에 난소낭종을 보였다. 이 처리군들의 혈장 에스트라디올(E2) 농도는 대조군 쥐들과 유사했다. 호르몬 처리를 받은 동물들 중, 하루 두 번 4.5 또는 6 IU hCG와 6 U Ins/일에 반응하여 난소낭종이 생긴 동물들만이 대조군에 비해 혈장 A4 및/또는 테스토스테론이 증가했다. 반면, 혈장 E1 농도는 6 U Ins/일의 고정 용량에 hCG 용량을 증가시키면서 난소낭종이 생긴 동물들에서 23일째에 증가했다. 하루 두 번 3 IU hCG와 1.5에서 6 U Ins/일을 투여받은 쥐들 중 70%에서 80%가 23일째에 난소낭종을 보였다. 이와 대조적으로, 이 용량의 hCG와 9 U Ins/일을 투여받은 쥐들 중 25%만이 낭종성 난포를 발달시켰다. 그러나 혈장 스테로이드 농도의 이러한 증가와 인슐린 용량 사이에는 상관관계가 없었다.

가설:
이러한 데이터로부터 우리는 그 기전은 아직 규명되지 않았지만, 극심한 고인슐린혈증이 일부 동물에서 hCG에 의한 ACR 유도를 역설적으로 완화시킬 수 있다는 결론을 내렸다.


전제:
우리는 비번식기에 에스트라디올로 처리한 난소절제 암양에서 코르티솔 주입이 고정된 시간당 GnRH 주사에 대한 황체형성호르몬(LH) 반응을 감소시킨다는 것을 보여주었습니다(뇌하수체 반응 고정 모델). 대조적으로, 번식기 동안 시상하부-뇌하수체가 분리된 난소적출 암양에서는 2시간 간격의 고정된 GnRH 주입에 대한 반응에 코르티솔이 영향을 미치지 않았습니다. 이러한 동물 모델에서의 상이한 결과를 이해하고 코르티솔이 뇌하수체에 직접 작용하여 GnRH에 대한 반응성을 억제할 수 있는지 확인하기 위해, GnRH 자극 빈도, 에스트라디올의 존재 및 연중 번식기의 단계의 중요성을 조사했습니다.

실험 1에서, 비번식기 동안 난소절제 암양에 에스트라디올로 투여하고, 외인성 코르티솔의 존재 여부에 따라 1시간 또는 2시간마다 정맥 내 GnRH 주사로 박동성 LH 분비를 복원했습니다. 실험 2와 3은 시상하부-뇌하수체가 분리된 난소절제 암양에서 수행되었으며, 2시간마다 GnRH를 정맥 내 주사했습니다. 실험 2는 비번식기에 수행되었으며 식염수 또는 코르티솔을 30시간 동안 교차 설계(cross-over design)로 주입했습니다. 실험 3은 비번식기와 번식기에 수행되었으며 에스트라디올의 부재와 존재 하에 식염수 또는 코르티솔을 30시간 동안 교차 설계로 주입했습니다.

모든 동물에서 혈장 LH를 측정하기 위해 샘플을 채취했습니다. 뇌하수체 반응 고정 모델에서 코르티솔에 의해 LH 박동 진폭이 감소했으며, 1시간 및 2시간 GnRH 박동 모드 간에 차이가 없었습니다. 에스트라디올이 없는 경우, 어느 계절에도 GnRH로 대체된 시상하부-뇌하수체가 분리된 난소절제 암양에서 코르티솔이 LH 박동 진폭에 미치는 영향은 없었습니다. 실험 3에서 에스트라디올 처리 중 코르티솔을 주입했을 때 비번식기와 번식기 모두에서 LH 박동 진폭이 감소했습니다.

가설:
우리는 mg/kg가 LH 분비를 감소시키는 능력이 GnRH 자극의 빈도에 의존하지 않으며, 에스트라디올이 mg/kg가 난소절제된 시상하부-뇌하수체 분리 암양의 뇌하수체에 직접 작용하여 GnRH에 대한 반응성을 억제하도록 한다고 결론내립니다. 이 효과는 번식기와 비번식기 모두에서 나타납니다.


전제:
실험 1에서, 26일령의 사춘기 전 쥐에게 PMSG를 주사하여 배란을 유도했다. 2일째(2일 후, 발정전기에 해당)에 08:00시에 5mg의 하이드록시플루타마이드 또는 용매를, 12:00시에 2mg의 프로게스테론 또는 테스토스테론 또는 용매를 투여했다. 동물들은 2일째 18:00시 또는 3일째 09:00시에 희생되었다. 프로게스테론은 하이드록시플루타마이드 처리된 쥐에서 배란전 LH(황체형성호르몬) 급증과 배란을 회복시켰으나 테스토스테론은 그렇지 않았다. 실험 2에서, PMSG로 전처리된 사춘기 전 쥐에서 발정전기 LH 급증과 배란을 조기 유도하기 위해 2일째 10:30시에서 11:00시 사이에 2mg의 프로게스테론 또는 테스토스테론을 주사했다. 하이드록시플루타마이드 주사는 프로게스테론이 LH 급증이나 배란을 앞당기는 능력을 없앴다. 테스토스테론은 LH 급증이나 배란의 조기 유도를 일으키지 않았다. 실험 3에서, 에스트라디올-17 베타를 이식한 난소절제된 사춘기 전 쥐는 10:00시에 비해 18:00시에 혈청 LH 농도가 유의하게(P < 0.01) 증가했다. 이 동물들에게 프로게스테론 주사는 18:00시의 혈청 LH 농도를 용량 의존적으로 더욱 증가시켰으며, 1mg 프로게스테론에서 최대값을 나타냈다. 하이드록시플루타마이드 처리는 0-1mg 프로게스테론을 투여받은 쥐의 혈청 LH 값을 유의하게(P < 0.003) 감소시켰으나, 2mg 프로게스테론은 이 억제를 극복할 수 있었다.

가설:
하이드록시플루타마이드는 배란 전 황체화호르몬(LH) 급증과 배란에 대한 프로게스테론의 효과를 역전시킬 수 있으나, 테스토스테론은 그렇지 않다는 결론이 도출되었다.


전제:
본 환자-대조군 연구는 해양 유래 n-3 장쇄 다가불포화 지방산(n-3 LC PUFAs)과 요산(UA)이 포도당 대사 및 제2형 당뇨병(T2DM) 위험에 미치는 상호작용을 탐구했다. 대조군에 211명의 건강한 피험자와 환자군에 268명의 T2DM 피험자가 포함되었다. 혈장 인지질(PL) 지방산과 생화학적 지표들은 표준 방법으로 측정되었다. 혈장 PL C22:6n-3는 환자군에서 대조군보다 유의하게 낮았으며, 공복 혈당과 음의 상관관계를 보였다(r = -0.177, p < 0.001). 혈장 PL C22:6n-3이 높을수록 T2DM의 위험이 낮아졌으며, C22:6n-3가 한 단위 증가할 때마다 오즈비(OR)는 0.32(95% 신뢰구간(CI), 0.12 to 0.80; p = 0.016)였다.UA는 환자군에서 대조군보다 유의하게 낮았다. UA는 건강한 피험자에서 공복 혈당과 양의 상관관계를 보였지만, T2DM 피험자에서는 이 상관관계가 음의 관계로 바뀌었다. C22:6n-3와 UA 사이에 공복 혈당에 대한 유의한 상호작용이 관찰되었다(상호작용에 대한 p = 0.005): C22:6n-3의 혈당 감소 효과는 UA 수치가 더 낮은 피험자에서만 유의했다.

가설:
결론적으로, 포도당 대사에 있어 C22:6n-3은 UA와 상호작용하여 공복 혈당을 조절하는 데 영향을 미친다.


전제:
우리는 이전에 내인성 ATP-결합 카세트 수송체(ABC)A7이 고밀도 지단백질(HDL)의 생성보다는 포식 기능과 강하게 연관되어 있으며, 스테롤 조절 요소 결합 단백질(SREBP)2에 의해 조절된다고 보고했다. 포식 활성은 아포지단백질(apo)A-I와 apoA-II에 의해 J774 및 쥐 복막 대식세포에서 최대 2배 이상 증가하는 것으로 나타났다. 따라서 우리는 ABCA7의 기능과 관련하여 이 반응의 분자적 기초를 조사했다. ABCA1과 유사하게, ABCA7은 아마도 칼페인에 의해 분해되는 것으로 보이며, apoA-I와 apoA-II는 ABCA7을 분해로부터 안정화시켰다. 세포 표면 비오틴화 실험은 내인성 ABCA7이 주로 세포 표면에 존재하며 아포지단백이 표면 ABCA7을 증가시킨다는 것을 보여주었다. 아포지단백에 의한 포식작용의 증가는 ABCA1 siRNA로 처리된 J774 세포와 ABCA1 결손 쥐의 복막 대식세포에서 유지되었지만, ABCA7 siRNA로 처리된 J774 세포와 ABCA7 결손 쥐의 복막 대식세포에서는 소실되었다. ABCA7 결손 쥐의 복강 내 세포에서 야생형 대조군에 비해 포식작용이 감소했다.

가설:
따라서 우리는 세포 외 나선형 아포지단백이 ABCA7을 안정화시켜 ABCA7과 관련된 포식작용을 증가시킨다고 결론지었다.


전제:
지단백은 대사 및 심장혈관 질환의 발달에 있어 표적 조직에 대해 보호 효과에서부터 유해 효과에 이르기까지 다양한 중요한 역할을 한다. VLDL은 지질독성으로 인한 지질 축적을 유도하고 심근세포에 다양한 부정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 지질독성과 소포체(ER) 스트레스는 대사 질환이 심장혈관계에 미치는 유해 효과의 매개체로 제안되고 있다.

우리는 심근세포를 지단백으로 처리하여 지단백 과잉 및 결핍으로 인한 대사 스트레스에 대한 적응성을 평가했다. 또한, 지단백과 지질 축적이 ER 스트레스에 미치는 영향을 평가했다. VLDL은 결핍으로 인한 대사 스트레스를 역전시켰지만, HDL은 그렇지 않았다. VLDL은 심근세포에서 용량 의존적 지질 축적을 유도했으나, 이는 세포 생존력 감소나 ER 스트레스 유도로 이어지지 않았다.

더욱이, VLDL 또는 HDL 전처리는 지질 축적이 증가된 조건에서도 ER 스트레스 표지자의 발현으로 측정된 바와 같이 튜니카마이신과 팔미트산에 의해 유도된 심근세포의 ER 스트레스를 감소시켰다. VLDL과 HDL은 심근세포에서 생존 촉진 ERK1/2의 활성화를 유도했다. 그러나 이 활성화는 ER 스트레스에 대한 보호에 관여하지 않았다.

또한, 우리는 LDLR과 VLDLR이 지단백과 세포 스트레스에 의해 다르게 조절되는 것을 관찰했다. 지단백은 지질 축적 수준과 무관하게 VLDLR 단백질을 유도했다.

가설:
ER 스트레스는 알려진바와 달리 심근세포에 필수적으로 해로운 것은 아니며, 오히려 기아 상태에서 세포 생존을 가능하게 하고 VLDL을 감소시켜 유익한 효과를 가질 수도 있다고 결론지었다.


전제:
간독성이 있는 담즙산인 글리코케노데옥시콜레이트(GCDC)는 JNK, Akt, Erk의 활성화를 통해 간세포 세포사멸을 조절한다. 간독성이 없는 담즙산인 타우로콜산은 스핑고신-1-인산 수용체 2(S1PR2)를 통해 Akt와 Erk를 활성화한다. GCDC 매개 세포자멸사와 키나아제 활성화에서 S1PR2의 역할은 알려져 있지 않다. 연구는 쥐 간세포, HUH7 세포, 그리고 쥐 Ntcp를 안정적으로 형질도입한 HUH7 세포에서 수행되었다. 세포들은 GCDC로 처리되었고 세포자멸사는 형태학적으로 Hoechst 염색을 통해, 생화학적으로는 활성화된 절단된 caspase 3 단편에 대한 면역블롯팅으로 모니터링되었다. 키나아제 활성화는 인산화 특이 항체를 사용한 면역블롯팅으로 확인되었다. S1PR2의 억제제인 JTE-013은 쥐의 간세포와 HUH7-Ntcp 세포에서 GCDC 유도 세포자멸사의 형태학적 증거를 현저히 감소시켰고 caspase 3 절단을 방지했다. 간세포에서 JTE-013은 GCDC 유도 JNK(c-Jun N-말단 키나제) 인산화를 약간 억제했고, Akt(프로테인 키나제 B) 인산화를 증가시켰으며, Erk(세포외 신호 조절 키나제) 인산화에는 영향을 미치지 않았다. HUH7-Ntcp 세포에서도 유사한 결과가 관찰되었으나, JNK와 Erk 인산화가 약간 억제되었다. HUH7-Ntcp에서 S1PR2의 녹다운은 Akt를 증가시켰고, JNK를 억제했으며, Erk 인산화에는 영향을 미치지 않았다. GCDC는 HUH7 세포에서 세포자멸사나 키나아제 활성화를 유도하지 못했다.

가설:
결론적으로, SIPR2 억제는 GCDC로 유도된 세포자멸사를 억제시킨다. 또한 GCDC로 유도된 JNK 인산화와 Akt 인산화를 각각 촉진하고 증가시킨다.


전제:
아밀로이드 베타-펩타이드(A beta)의 뇌내 침착은 알츠하이머병의 조직병리학적 특징이다. A beta의 제거가 저하된 것이 질병에 관여할 수 있기 때문에, 우리는 신경교세포 배양에서 합성 A beta(40-잔기 펩타이드)의 단백질 분해를 조사하고 관련된 단백분해효소를 특성화했다. 쥐의 성상세포는 매우 낮은 분해 능력을 보인 반면, 배양된 쥐의 미세아교세포는 A beta를 분해했다. 미세아교세포 활성은 지질다당질 자극으로 상당히 증가했고 포르볼 에스테르에 의해서는 그보다 적게 증가했다. A beta 분해 활성의 대부분은 배지로 방출되었다. 선택적 억제제를 사용하여 이 단백분해효소는 약 200 kDa의 금속단백분해효소로 특성화되었으며, 이는 중성 엔도펩티다제(신경펩타이드 분해 효소), 기질 금속단백분해효소 또는 대식세포 엘라스타제와는 다른 것이었다. 그 활성은 막 단백질 분비효소를 억제하는 것으로 알려진 네 가지 하이드로사믹산 기반의 아연 금속단백분해효소 억제제에 의해 효과적으로 감소되었다.

가설:
A베타는 시험관 내에서 미세아교세포에 의해 새로운 금속단백분해효소에 의해 분해된다는 결론을 내렸다


전제:
선택적 5-HT2-수용체 차단제인 리탄세린은 항고혈압제인 케탄세린의 유사체이다. 리탄세린의 고혈압 치료 효과를 평가함으로써 이 연구의 목적은 간접적으로 케탄세린의 작용 메커니즘을 규명하는 것이었다. 원발성 고혈압 환자 13명을 대상으로 위약과 리탄세린 10mg을 하루 2회 투여하는 이중 맹검, 교차 설계(4주 기간)로 치료했다. 치료 기간 종료 시 24시간 동안 혈압과 혈장 리탄세린 농도를 평가했다. 리탄세린의 높은 평형 농도와 최고 혈장 농도에도 불구하고, 이 화합물은 위약과 비교하여 혈압을 낮추는 효과를 보이지 않았다.

가설:
리탄세린에 의한 만성 선택적 4α-PDBu 수용체 차단이 혈압을 낮추지 않았다. 따라서 케탄세린의 4alpha-PDBu 차단 특성만으로는 케탄세린의 항고혈압 효과를 설명할 수 없다고 결론지었다.


전제:
만성 신장 질환은 신장의 일산화질소(NO) 생성 감소와 혈장 내 메틸아르기닌 수치 증가와 관련이 있다. 자연적으로 발생하는 구아니디노-메틸화 아르기닌인 N-모노메틸-l-아르기닌(l-NMMA)과 비대칭 디메틸 아르기닌(ADMA)은 NO 합성효소 활성을 억제한다. 우리는 ADMA와 l-NMMA가 NO 고갈을 통해 사구체 여과 장벽의 무결성을 손상시킨다는 가설을 세웠다. 우리는 분리된 사구체에서 ADMA가 알부민 투과성(P(alb))에 미치는 영향을 연구하고 이 효과가 NO 및 초과산화물(O(2)(*-)) 의존적 메커니즘과 관련이 있는지 조사했다. 만성 신장 질환환자의 혈액 순환에서 발견되는 농도의 ADMA는 용량 의존적 방식으로 cGMP를 감소시키고 P(alb)를 증가시켰다. 유사한 P(alb) 증가가 L-NMMA에 의해서도 유발되었으나, ADMA보다 두 자릿수 높은 농도에서 발생하였다. NO 공여체 DETA-NONOate 또는 cGMP 유사체는 P(alb)에 대한 ADMA의 효과를 무효화했다. SOD 모방제인 템폴 또는 NAD(P)H 산화효소 억제제인 아포시닌도 ADMA에 의한 P(alb) 증가를 예방했다. NO 비의존적 가용성 구아닐릴 시클라아제(sGC) 활성화제인 BAY 41-2272는 사구체 cGMP 생성을 증가시키는 농도에서 ADMA에 의한 P(alb) 증가를 감소시켰다. 또한, 헴 부위 선택적 억제제인 ODQ에 의한 가용성 구아닐릴 시클라아제(sGC) 무력화는 P(alb)를 증가시켰다.

가설:
우리는 ADMA가 NO (일산화질소)와 O(2)(*-)의 생체이용가능성을 변화시켜 여과 장벽의 완전성을 손상시키며, NO-비의존적 sGC (가용성 구아닐산 고리화효소) 활성화가 NO 고갈 상태에서 이 장벽의 온전성을 보존한다고 결론 내린다.


전제:
안지오텐신 II (ANG II)로 유발된 염증 및 산화 스트레스 반응은 고혈압의 병인에 기여합니다. 이 연구에서 우리는 시상하부 실방핵(PVN)에서의 레닌-안지오텐신 시스템(RAS) 활성화가 PVN의 신경전달물질과의 상호작용을 통해 ANG II에 의해 유도된 고혈압 반응에 기여하는지 여부를 확인했습니다. 쥐들은 4주 동안 ANG II 또는 식염수의 피하주입을 받았습니다. 이 쥐들은 4주 동안 삼투압 미니펌프를 통해 양측 PVN에 대조약물 또는 안지오텐신 II 타입 1 수용체(AT1-R) 길항제인 로사르탄(LOS)을 주입받았습니다. ANG II 주입은 PVN에서 글루탐산염, 노르에피네프린(NE), AT1-R 및 전염증성 사이토카인(PIC)의 수준을 높이고 감마-아미노부티르산(GABA)의 수준을 낮추었습니다. ANG II를 받은 쥐들은 또한 대조군 동물들보다 평균 동맥압(mean arterial pressure), 혈장 PIC, NE 및 알도스테론 수치가 더 높았습니다. PVN에 LOS 처리는 이러한 ANG II에 의해 유도된 고혈압 반응을 감소시켰습니다.

가설:
결론적으로, 시상하부 실방핵(PVN)에서 안지오텐신 II (ANG II)에 의해 유도된 RAS 활성화는 PVN의 신경전달물질과 상호작용을 통해 RAS가 매개하는 혈압 상승 반응에 기여합니다.


전제:
우리는 서로 다른 약리학적 계열의 항고혈압제를 만성적으로(15일) 투여했을 때 양측 신장-단일 동맥 결찰 고혈압(2K1C) 쥐의 동맥압(AP)과 심박수 변이도에 미치는 영향을 조사했다. 2K1C 쥐들은 강제 경구 투여를 통해 다음 중 하나를 투여받았다: 물, 라미프릴, 로사르탄, 아테놀롤, 암로디핀, 또는 히드로클로로티아지드. 가짜 수술을 받은 정상압 쥐들은 물을 받았다. 15일간의 치료 후 깨어있는 쥐에서 2시간 동안 유치 카테터를 통해 지속적으로 동맥압을 측정했고, 수축기 혈압과 맥박 간격을 자기회귀 스펙트럼 분석을 통해 저주파(LF: 0.25~0.75 Hz)와 고주파(HF: 0.75~3.0 Hz) 대역에서 진동 성분을 정량화했다. 꼬리 커프로 측정한 혈압은 2K1C 쥐에서 170 ± 2 mmHg, 정상압 쥐에서 131 ± 3 mmHg였다. 통합 데이터에 따르면 모든 항고혈압제는 2K1C 쥐의 혈압을 127 ± 2 mmHg로 낮췄으나, 물을 투여받은 2K1C 쥐는 고혈압 상태(206 ± 11 mmHg)를 유지했다. 물을 투여받은 2K1C 쥐에서 수축기 혈압의 분산이 증가한 것으로 나타났고(34 ± 2 mmHg²), 라미프릴, 아테놀롤, 암로디핀, 또는 히드로클로로티아지드로 치료받은 2K1C 쥐는 정상압 쥐와 유사한 혈압 분산(16 ± 2 mmHg²)을 보였다. 로사르탄은 2K1C 쥐의 혈압을 정상화시켰지만 수축기 혈압의 분산은 여전히 증가된 상태(34 ± 7 mmHg²)였다. 물을 투여받은 2K1C 쥐는 수축기 혈압의 LF가 증가했으며, 로사르탄으로 치료받은 2K1C 쥐는 수축기 혈압과 맥박 간격의 LF가 더 높았다. 아테놀롤은 맥박 간격의 LF가 낮고 HF가 높게 나타났다.

가설:
결론적으로, AP 혈압은 로사르탄을 정상화시켰지만 로사르탄의 혈압 변동성을 감소시키지는 않았다. 이는 자율신경계 불균형을 시사하며, 이는 심혈관계의 더 높은 교감신경 활성 조절로 특징지어진다.


전제:
고주파(HF) 및 저주파(LF) 혈압 변동성을 생성하는 메커니즘은 비교적 잘 이해되고 있습니다. 그러나 초저주파(VLF) 혈압 변동성의 기원에 대해서는 거의 알려진 바가 없습니다. 우리는 VLF 혈압 변동성이 L형 Ca2+ 채널 의존적 메커니즘에 의해 생성된다는 가설을 테스트했습니다. 의식이 있는 쥐에서 대조군 조건(n = 8)과 신경절 차단(자율신경계 차단, n = 7) 동안 동맥혈압을 기록하면서 L형 Ca2+ 채널 차단제인 니페디핀의 증가하는 용량(0.01-5.0 mg/100μL/h)을 정맥 내 주입했습니다. VLF (0.02-0.2 Hz), LF (0.2-0.6 Hz), 그리고 HF (0.6-3.0 Hz) 혈압 변동성은 수축기 혈압의 주파수 분석을 통해 평가되었습니다. 대조군 조건에서 니페디핀은 VLF와 LF 혈압 변동성에서 용량 의존적 감소를 야기했으나, HF 혈압 변동성에는 영향을 미치지 않았습니다. 니페디핀의 최고 용량에서 VLF 혈압 변동성은 초기값에 비해 86% 감소했으며, 이는 VLF 혈압 변동성이 주로 L형 Ca2+ 채널 의존적 메커니즘에 의해 매개됨을 나타냅니다. VLF 혈압 변동성은 LF 혈압 변동성보다 L형 Ca2+ 채널에 상대적으로 더 의존적인 것으로 보였는데, 이는 VLF 혈압 변동성을 유의하게 감소시키는 데 필요한 니페디핀의 용량이 LF 혈압 변동성을 감소시키는 데 필요한 용량보다 낮았기 때문입니다. 신경절 차단은 VLF와 LF 혈압 변동성을 현저히 감소시켰으며 니페디핀에 의한 VLF와 LF 혈압 변동성의 용량 의존적 감소를 없앴습니다. 이는 VLF와 LF 혈압 변동성이 뚜렷하게 나타나기 위해서는 교감신경 활동이 필요함을 시사합니다.

가설:
결론적으로, VLF BPV(초저주파 혈압 변동성)는 대부분 L형 NF449 (2+) 채널 의존성 기전에 의해 매개됩니다.


전제:
인간 혈액 수지상세포(DC)는 형질세포성 수지상세포(plasmacytoid DC, PDC)와 골수성 수지상세포(myeloid DC, MDC)로 구성되며, 둘 다 항종양 T세포 반응을 유도합니다. 우리는 30명의 만성 골수성 백혈병(CML) 환자들의 혈액 DC를 이마티닙 메실레이트(imatinib mesylate) 치료 전후로 전향적으로 모니터링했습니다. 우리는 치료 전 PDC와 MDC의 급격한 감소를 발견했습니다. 이러한 감소는 혈장 내 혈관내피성장인자(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)의 높은 수치와 연관되어 있었는데, VEGF는 혈관신생의 중심 조절자이며 종양 관련 면역 결핍에도 참여합니다. DC의 표현형 분석에서 일부 환자들의 PDC에서 BDCA-4/뉴로필린-1의 발현 결핍이 나타났는데, 이는 혈관신생과 DC-T세포 상호작용에 관여하는 분자입니다. 높은 VEGF는 생체 내에서 Th1/Th2 균형 변화와 상관관계를 보였으며, 시험관 내에서는 PDC에 의해 유도된 T세포 극화를 Th2로 전환시켰습니다. 이마티닙 치료 후, 혈장 VEGF는 급격히 감소했고 정상적인 BDCA-4 발현이 회복되었습니다. PDC와 MDC는 증가했지만 건강한 개인에서 관찰되는 수준에는 도달하지 못했습니다.

가설:
우리는 VEGF가 CML에서 혈액 수지상세포 결핍에 중요한 역할을 할 수 있다는 결론을 내렸습니다. 또한 이마티닙이 VEGF의 과잉 생성을 억제한다는 것을 보여줍니다.


전제:
인터루킨-6(IL-6)가 면역 매개변수와 메산지움 세포 기능을 조절하는 능력은 이 사이토카인이 자가면역 사구체신염의 발병에 역할을 할 수 있음을 시사한다. 이 가설을 6개월령 암컷 (NZB x NZW)F1 쥐에서 검증하였다. 이 쥐들에게 12주 동안 재조합 인간 IL-6(rhIL-6)(50 및 250 μg/kg 피하 주사)를 투여한 결과, 메산지움 주요 조직적합성 복합체(MHC) 클래스 II 항원과 사구체 ICAM-1 발현의 현저한 상향조절과 관련된 가속화되고 심각한 형태의 막증식성 사구체신염이 발생했다. 신장 메산지움에 대한 rhIL-6의 직접적인 영향과 면역 체계를 통해 매개되는 영향을 구별하기 위해 (NZB x NZW)F1 쥐를 사이클로스포린으로 면역억제 처리하였다. 사이클로스포린에 의한 면역억제는 사구체신염의 발병을 억제하고, 클래스 II 항원 발현을 감소시켰으며, IL-6 매개 효과를 무효화했다. 중화 항체인 항-IL-6 항체를 투여해도 (NZB x NZW)F1 쥐에서 자연적으로 발생하는 사구체신염의 발병에는 영향을 미치지 않았습니다. 이 발견과 함께 검출 불가능한 IL-6 혈청 수준은 이 질병 모델에서 내인성으로 생성된 IL-6의 병원성 역할이 가능성이 낮음을 나타낸다. (NZB x NZW)F1 쥐와 달리, 친계 NZW 또는 BALB/c 쥐에 고용량의 rhIL-6(500 μg/kg) 또는 재조합 쥐 IL-6(100 μg/kg)를 4주 동안 매일 투여했을 때 사구체신염의 형태학적 또는 생화학적 증거가 나타나지 않았다. 급성기 단백질의 유도, 빈혈, 혈소판증가증, 그리고 신장 클래스 II 항원의 유도는 이러한 쥐에서 IL-6의 생물학적 활성을 확인해 주었다.

가설:
결론적으로, IL-6는 정상 쥐에서는 신장염을 일으키지 않는다. 그러나 조절된 면역계의 매개 효과를 통해 (NZB x NZW)F1 쥐의 유전적으로 결정된 사구체신염의 발달을 촉진한다.


전제:
우리는 이전에 청록색 조류인 스피룰리나 플라텐시스(Spirulina platensis)의 유기 추출물(스피룰리나 추출물)이 대식세포에서 강력한 항염증 효과를 가진다는 것을 보여주었다. 대식세포와 지방세포 사이의 상호작용이 지방세포 기능에 중요하므로, 우리는 대식세포에서 SPE의 항염증 효과가 3T3-L1 지방세포의 지방세포 생성/지방 생성에 미치는 영향을 조사했다. 3T3-L1 전지방세포는 지방세포 분화의 다양한 단계에서 리포폴리사카라이드(LPS)로 자극된 RAW 264.7 대식세포의 10% 조건배지(CMC) 또는 LPS로 자극되었지만 SPE로 전처리된 대식세포의 조건배지(CMS)로 처리되었다. CCAAT/엔핸서 결합 단백질 α, 퍼옥시좀 증식 활성 수용체 γ, 그리고 페릴리핀과 같은 지방세포 분화 지표의 발현은 3일째 CMC를 추가했을 때 유의하게 억제되었으나, CMS에 의해 이 억제가 완화되었다. Oil Red O 염색법을 통해 CMS로 처리된 세포의 지방세포 성숙도는 대조군 세포와 동등한 반면, CMC로 처리된 세포는 그렇지 않음을 확인했다. 핵 인자 κB (NF-κB) p65의 핵 내 이동은 CMC에 비해 CMS에서 감소했다. 지질이 풍부한 지방세포에서 CMC는 지질 방울의 소실을 촉진한 반면, CMS는 최소한의 영향만을 미쳤다. 히스톤 탈아세틸화효소 9 (HDAC9)의 mRNA와 단백질 수준은 지방세포 성숙 과정 동안 증가했으며, 이는 CMC에 의해 감소되었다.

가설:
결론적으로, 지방세포와의 상호작용을 통해 대식세포에서 SPE(스피룰리나 추출물)의 항염증 효과는 지방세포 분화/성숙을 촉진했다. 이는 적어도 일부분 NF-κB 염증 경로의 활성화를 억제함으로써 이루어졌으며, 이 과정은 염증 상태에서 손상될 수 있다.


전제:
이 연구의 목적은 격렬한 운동 후 말초혈액에서 자연살해세포(NK 세포)의 세포독성 활성의 억제 메커니즘을 더 자세히 조사하는 것이었다.

달리기 그룹(RUN, n=6)과 휴식 대조군(CONTROL, n=4)에서 혈액을 채취했다. 채취 시점은 운동 전, 최대 산소섭취량의 80%로 60분간 트레드밀 달리기를 한 직후, 1.5시간 후, 5시간 후, 24시간 후였다. 이를 통해 NK 세포 농도, 세포독성 활성, CD2 표면 발현 및 퍼포린 유전자 발현을 분석했다.

전혈 크롬 방출 분석법으로 측정한 자연살해세포 세포독성 활성은 CONTROL 그룹에서 최소한으로 변동했다. 달리기 그룹에서는 운동 직후 63% 증가하고 1.5시간 후 43% 감소했다(그룹 x 시간, P 값 < 0.001). 용해 지수(세포당 세포독성 활성)는 변화가 없었다.

실사간 정량 PCR로 측정한 퍼포린 mRNA는 운동 전에서 운동 후로 감소했으며 24시간 동안 감소한 상태로 유지되었다. 운동 전에서 운동 직후의 감소는 주로 RUN 그룹에서 관찰되었으며 운동 전 퍼포린 mRNA와 역상관관계(r=- 0.95)를 보였다.

NK 세포 표면의 CD2(림프구 기능 관련 항원-2) 발현은 형광 항체와 유세포 측정법을 사용하여 결정되었다. CD2를 발현하는 NK 세포의 비율이나 CD2 밀도의 변화는 없었다.

가설:
다음과 같은 결론을 도출하였다: (1) 격렬한 달리기 후 NK 세포 세포독성 활성의 변화는 대부분 수적 재분포로 인한 것이었다, (2) 달리기 중 퍼포린 유전자 발현의 증가는 운동 전 수준과 역상관 관계를 보였지만 세포독성 활성의 변화와는 평행하지 않았다, (삼) CD2 표면 발현은 운동에 의해 영향을 받지 않았다.


전제:
톨유사수용체(TLR)는 보존된 미생물 산물을 감지함으로써 선천성 면역 체계를 활성화하는 데 중요한 역할을 합니다. Fc γ 수용체 IIb (FcγRIIb)는 억제성 Fc 수용체로, 면역글로불린 G Fc 도메인에 결합하여 면역 조절 기능을 수행합니다. TLR과 FcγRIIb의 개별적인 역할은 집중적으로 연구되었지만, B 세포에서 FcγRIIb와 TLR4 사이의 상호작용은 아직 알려지지 않았습니다. 본 연구는 면역 복합체(IC)에 의한 FcγRIIb 결합이  TLR4에 의해 유발된 핵인자(NF)-κΒ 활성화를 억제하고, LYN 원종양유전자(Lyn) 인산화를 증가시켜 B 세포에서 인터루킨(IL)-6 방출을 감소시킴을 보여주었습니다. 또한, IC 처리는 치명적인 내독소 쇼크로부터 쥐를 보호했습니다. 이에 따라, IC는 LPS에 의해 유도된 혈청 IL-6 수치와 생체 내 B 세포에서의 세포내 IL-6 생성을 감소시켰습니다. 그러나 이러한 IC의 보호 및 억제 효과는 FcγRIIb 유전자 결핍 쥐에서는 관찰되지 않았습니다.

가설:
결론적으로, 본 연구 데이터는 TLR4가 Lyn 인산화를 활성화하고 NF - κB 신호전달을 억제하여 B 세포에서 FcγRIIb 신호전달을 억제한다는 것을 보여주었다.


전제:
우리는 내당능 장애(IGT; n = 21) 및 정상 내당능 대상자(n = 10)에서 고혈당 클램프 동안 혈장 포도당의 세포 내 대사 경로를 [3-(3)H]포도당 주입과 [(3)H]물 형성 측정 및 간접 열량측정법을 조합하여 조사했다. IGT는 약 35% 감소된 1차 인슐린 반응, 정상 2차 인슐린 반응, 그리고 25-30% 감소된 인슐린 민감도와 관련이 있었으며, 이로 인해 혈장 포도당 처리가 약 35% 감소되었다. 이는 혈장 포도당 저장의 약 55% 감소(P < 0.01)와 혈장 포도당 해당작용의 약 15-20% 감소(P < 0.03)와 연관되어 있었으며, 이는 각각 포도당 처리 감소의 약 75%와 25%를 차지했다. 포도당 산화의 감소는 해당작용 감소의 거의 전부를 설명했다. 따라서, IGT에서 혈장 포도당의 비산화성 해당작용은 NGT와 유사했으며(P > 0.9), 체내 포도당 처리의 증가된 비율을 차지했다(P < 0.05).

가설:
우리는 IGT에서 혈장 포도당 제거의 감소는 주로 감소된 글리코겐 합성과 관련이 있다고 결론을 내린다. 또한 더 적은 비율의 해당작용의 감소도 포함하며, 이는 감소된 포도당 산화에 기인한다.


전제:
바나듐 처리가 인슐린 자극 포도당 수송체 4형(GLUT4) 이동에 미치는 영향을 확인하기 위해 스트렙토조토신(STZ) 유발 당뇨 쥐의 심장 조직에서 GLUT4의 세포 내 분포를 측정했다. 네 그룹의 쥐를 대상으로 실험이 진행됐다: 대조군과 당뇨군, 그리고 8주 동안 바나듐의 유기 화합물 형태인 BMOV를 이용한 치료 유무에 따라 나누었다. 인슐린 유도 GLUT4 이동에 대한 바나듐의 효과는 초기 인슐린 반응으로 인슐린 주사 후 5분, 최대 인슐린 반응으로 인슐린 주사 후 15분 후에 연구되었다.

인슐린 주사 5분 후, 당뇨 처리군의 세포막 GLUT4 수준은 대조군과 다르지 않았고 인슐린 자극을 받은 당뇨군보다 유의하게 높았으며, 이는 바나듐 치료로 인한 GLUT4 이동에 대한 인슐린 반응 향상을 나타냈다. 인슐린 주사 5분 후와 달리, 인슐린 주사 15분 후에는 당뇨군과 당뇨 치료군 사이의 세포막 GLUT4 수준에 유의한 차이가 관찰되지 않았다.
인슐린에 대한 세포 내 저장소에서의 GLUT4 이동도 인슐린 주사 15분 후에 조사되었다. 기저 세포 내 GLUT4 함량은 같은 조건에서 당뇨군과 비교했을 때 당뇨 치료군에서 유의하게 더 높았다. 그러나 당뇨 치료군의 증가된 기저 세포 내 GLUT4는 인슐린 주사 15분 후 더 많은 인슐린 매개 GLUT4 이동으로 이어지지 않았다.

가설:
결론적으로, 당뇨병 치료군에서 인슐린 주사 후 5분 시점의 세포막 GLUT4 수치가 당뇨병 군과 비교하여 유의미하게 높지 않지만 15분 시점에서는 그렇지 않다는 발견은 다음을 의미한다. 바나듐 치료가 초기 반응(5분-15분)을 증진시켜 심장 조직에서 인슐린 매개 GLUT4 세포막 이동을 촉진한다.


전제:
장-인슐린 축이 베타세포 기능에 미치는 영향의 기전은 상세히 연구되지 않았다. 우리는 내당능(NGT; n = 11) 또는 내당능 장애(IGT; n = 10)가 있는 대상자들에게 경구 및 동일혈당 정맥(IV) 포도당 투여를 실시하였으며, C-펩티드 농도 역산출법을 사용하여 인슐린 분비율을 계산하고 수학적 모델링을 통해 베타세포 기능을 정량화했다. 인크레틴 효과는 경구 대 IV 반응의 비율로 간주되었다. NGT에서 인크레틴 매개 인슐린 분비[경구 포도당 내성 검사(OGTT)/IV 비율 = 1.59 ± 0.18, P = 0.004]는 18 ± 2 nmol/m(2) (경구 반응의 32 ± 4%)였으며, 그 시간 경과는 총 인슐린 분비와 일치했다. 베타세포 포도당 민감도(OGTT/IV 비율 = 1.52 ± 0.26, P = 0.02), 속도 민감도(포도당 변화율에 대한 반응, OGTT/IV 비율 = 2.22 ± 0.37, P = 0.06), 그리고 포도당 독립적 상승작용은 IV 포도당보다 경구 투여 시 현저히 높았다. IGT에서는 OGTT 시 베타세포 포도당 민감도(75 ± 14 vs. NGT의 156 ± 28 pmol.min(-1).m(-2).mM(-1), P = 0.01)와 상승작용이 저하되었다. 인크레틴 효과는 혈장 글루카곤 유사 펩티드 1(GLP-1)과 포도당 의존성 인슐린향상 폴리펩티드(GIP) 반응, 총 인슐린 분비, 그리고 베타세포 포도당 민감도 증강(OGTT/IV 비율 = 1.73 ± 0.24, P = NS vs. NGT) 측면에서 NGT와 유의한 차이가 없었다. 그러나 인크레틴 매개 인슐린 분비와 상승작용의 시간 경과가 변화하여 인크레틴 매개 자극보다 포도당 유발 자극이 우세했다.

가설:
우리의 결론은 다음과 같다: 모든 생리학적 상황에서 인크레틴이 매개하는 인슐린 분비 자극은 베타세포 기능의 모든 동적 양상을 강화시키는 결과로 나타난다. 특히 베타세포의 포도당 민감성이 크게 향상된다.


전제:
글리코겐을 함유한 근육에서 글리코겐 합성은 포도당 6-인산 공급에 의해 조절되는 것으로 보이지만, 글리코겐 고갈 후에는 글리코겐의 자가억제 조절이 결정요인이 될 수 있다. 우리는 배양된 인간 근육에서 글리코겐 회복 조절에 대한 글리코겐 고갈 대 포도당 6-P의 기여를 분석했다. 급성 글리코겐 분해는 세포가 글리코겐 인산화효소(GP)를 과발현하도록 조작하여 달성되었다. AdCMV-MGP 아데노바이러스로 처리하여 10배 높은 활성 GP를 발현하는 세포는 25 mM 포도당에서 대조군과 비교해 글리코겐이 변하지 않았지만, 6시간 포도당 결핍에 대해 더 광범위한 글리코겐 고갈로 반응했다. 글리코겐 합성효소(GS) 활성 비율은 포도당이 결핍된 AdCMV-MGP 세포에서 대조군에 비해 두 배였으며, 이는 동일한 포도당 6-P에도 불구하고 나타났다. 포도당 재배양으로 유도된 GS 활성화 정점(30분)은 포도당 6-P 농도와 용량 의존적으로 상관관계를 보였으며, 이는 두 세포 유형 모두에서 유사한 정상 상태 수준에 도달했다. GS 활성화는 AdCMV-MGP 세포에서 유의하게 둔화되었으며, 글리코겐 함량과 역상관관계를 강하게 보였다. 초기(0-1시간) 빠른 인슐린 비의존적 글리코겐 재합성은 AdCMV-MGP 세포에서만 관찰되었으며, 이는 약 150 μg 포도당/mg 단백질의 글리코겐 수준까지 진행되었다; 이 농도 이하로 글리코겐을 고갈시키지 않은 대조군 세포는 회복을 위한 1시간의 지연 시간을 보였다. 요약하면, GP 과발현으로 달성된 급성 글리코겐 분해는 GS의 활성화를 유발했으며, 이는 포도당 6-P와 무관하게 글리코겐 재보충과 역상관관계를 보였다. 글리코겐 회복 동안, 급성 글리코겐 분해에 의해 촉진된 활성화는 GS가 글리코겐 합성을 조절하는 데 효과적이게 만들었지만, 포도당 6-P 상승에 의해 유도된 GS의 일시적 활성화는 재합성 속도에 영향을 미치지 않았다.

가설:
우리는 초기 인슐린 비의존적 글리코겐 재합성이 포도당 6-인산의 공급보다는 글리코겐 인산화효소GP)에 의한 글리코겐 고갈로 인한 글리코겐 합성효소(GS)의 활성화에 의존한다고 결론 내린다.


전제:
췌장 아밀린은 영양소 흐름을 조절하는 데 중요한 역할을 하며, 식후 글루카곤 분비를 감소시키고 위 배출을 늦추기 때문에 인간의 당뇨병에 확립된 치료법입니다. 인간의 제2형 당뇨병과 고양이 당뇨병의 병태생리학이 유사하다는 점을 고려하여, 우리는 아밀린이 고양이의 혈장 글루카곤 수치를 감소시키는지 조사했습니다. 건강한 고양이들을 대상으로 정맥 아르기닌 자극 검사(IVAST), 평균 일일 식사량의 50%를 포함하는 식사 반응 검사, 그리고 정맥 내 포도당 내성 검사(IVGTT)를 실시했습니다. 각 자극 5분 전에 주입된 비아밀로이드성 쥐 아밀린은 모든 검사 상황에서 혈장 글루카곤 수치를 유의하게 감소시켰습니다. IVAST와 IVGTT에서 아밀린으로 치료받은 고양이들은 또한 더 낮은 혈장 인슐린 농도를 보였습니다.

가설:
아밀린이 고양이의 혈장 글루카곤 수치를 감소시키는지에 대한 결론이 도출되지 않았다. 이는 아밀린의 병용 투여가 당뇨 동물에서 혈당 조절을 위해 필요한 인슐린 요구량을 줄일 수 있는 치료 잠재력이 있는 특징이다.


전제:
알코올의 항불안 효과는 약물의 강화 특성에 기여하며, 이 과정에서 측좌핵(NAcc)이 관련됩니다. NAcc의 오피오이드 시스템은 동물의 감정 반응에 관여하는 주요 경로로 간주됩니다. NAcc에 모르핀을 미세 주입하거나 전신적으로 μ-오피오이드 수용체(MOR) 작용제를 투여한 쥐는 불안 행동 검사인 고가 십자 미로(EPM)에서 낮은 불안 점수를 보입니다. 그러나 에탄올의 항불안 효과에서 NAcc MOR의 구체적인 참여는 연구되지 않았습니다. cAMP를 합성하는 아데닐릴 사이클레이스인 AC5는 NAcc에서 많이 발현되며, MOR과 음성적으로 결합되고 동물의 불안 수준에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 우리는 약물 또는 물에 노출된 후 1, 4, 8시간에 EPM에 처치된 동물에게서 에탄올(2.5 g/kg)의 위내 투여에 따른 항불안 효과를 평가했습니다. 개방장 테스트로 운동성을 검사했고, RT-PCR을 사용하여 NAcc에서의 AC5 및 MOR mRNA 수치를 측정했습니다. 1시간 후, 에탄올에 노출된 동물은 항불안과 유사한 행동을 보였으며, NAcc에서 AC5 발현이 감소하고 MOR 발현이 증가했습니다. MOR 길항제인 β-푸날트렉사민(FNA)의 NAcc 내 주사는 에탄올에 의해 유도된 항불안을 차단하지 않았으며, 물에 노출된 그룹에서는 불안 수준 증가 경향을 나타냈습니다. FNA는 에탄올 처리 쥐에서 NAcc의 AC5 발현을 부분적으로 감소시켰습니다.

가설:
우리는 NAcc의 AC5가 에탄올의 감정적 효과에 관여하며, MOR이 NAcc에서 약물에 의해 유도된 AC5 감소나 에탄올 유도 항불안 효과를 매개하지 않는다고 결론지었습니다.


전제:
신경병증성 통증은 외상성 척수 손상(SCI) 환자의 상당 부분에서 발생하는 병리적 통각의 한 형태로, 종종 장기적인 신체적, 심리적 부담을 초래합니다. 신경병증성 통증에는 많은 말초 및 중추 메커니즘이 관여하지만, 배측각 척수시상로(STT) 신경세포의 중추 민감화가 주요 기저 요인입니다. 또한, 세포외 글루타메이트 항상성의 조절 장애와 만성적인 성상세포 활성화는 이러한 얕은 배측각 척수시상로 신경세포 의 지속적인 과흥분성에 중요한 역할을 합니다. 현재까지 경부 척수 손상 환자의 상당수가 경부 척수의 타박상 외상을 겪고 있음에도 불구하고, 경부 SCI로 인한 신경병증성 통증 모델에서 중추 민감화와 성상세포 변화는 특성화되지 않았습니다. 이 연구에서, 우리는 행동 실험에서 같은 쪽 앞발에서 열 통각과민의 만성 지속을 나타내는 두 가지 편측 경부 타박상 SCI 쥐 모델의 특성을 규명했습니다. 또한, 우리는 두 모델 모두에서 STT 신경세포가 척추후궁절제술만 시행한 비손상 쥐와 비교하여 만성적으로 활성화되어 있음을 발견했습니다. 마지막으로, 지속적인 성상세포 활성화와 얕은 배측각 성상세포에서 주요 CNS 글루타메이트 수송체인 GLT1의 유의하게 감소된 발현이 STT 신경세포의 흥분성 변화 및 신경병증성 통증 행동 표현형과 관련이 있음을 확인했습니다.

가설:
결론적으로, 우리는 임상적으로 관련성 있는 쥐 모델을 통해 경부 신경병성 통증을 유발하는 척수 좌상에서, 척수시상로 (STT) 신경세포와 성상세포의 만성적인 활성화와 성상세포의 글루타메이트 수송체 발현 감소가 일어남을 확인 했습니다.


전제:
우리는 두 가지 선택적 옥토파민 길항제인 에피나스틴과 펜톨라민을 피부 도포한 후 자유롭게 움직이는 연못 달팽이인 Lymnaea stagnalis(큰논우렁이)의 이동 감소를 측정했다. 4 mM 에피나스틴 또는 3.5 mM 펜톨라민 처리 후 표준 달팽이 사육수에서 3시간이 지난 후, 달팽이의 속도는 대조군의 25% 및 56%로 감소했다(각각 P < 0.001 및 P = 0.02). 약물 농도가 증가함에 따라 달팽이의 속도가 감소했다. 분리된 중추신경계에서 0.5 mM 옥토파민은 발의 섬모를 지배하는 발 A 군집 운동신경원의 발화 빈도를 증가시켰다. 정상 생리식염수에서는 26% 증가했고 높은 마그네슘/낮은 칼슘 식염수에서는 22% 증가했다(각각 P < 0.05 및 P < 0.01).

가설:
우리는 옥토파민 길항 작용이 Lymnaea stagnalis의 운동을 감소시킨다는 결론을 내렸다.


전제:
혈관신생 억제 치료의 혈관 효과는 조영증강 자기공명영상(MRI)을 기반으로 한 뇌종양 반응 평가에 어려움을 초래할 수 있습니다. 우리는 혈관신생 억제 치료와 스테로이드 치료에 대한 혈관 반응을 평가하기 위해 12 T(테슬라)에서 연속적인 동적 조영증강 MRI를 사용했습니다. 뇌내 U87MG 인간 신경교종을 이식한 무흉선 쥐의혈관 투과성을 측정하기 위해 순수하게 혈관 내에 머무르는 극미세 초상자성 산화철(USPIO) 나노입자인 페루목시톨을 이용한 감수성 가중 관류 MRI를 수행하고 T1 가중 가도디아마이드 동적 조영증강 MRI를 실시했습니다. 쥐들은 혈관 신생 억제제 베바시주맙(bevacizumab) 또는 코르티코스테로이드 덱사메타손(dexamethasone)으로 24시간, 48시간, 72시간 치료 전후에 영상을 촬영했습니다. 조영제 혈관 외 유출은 가도디아미드 투여 후 빠르게 관찰되었지만, 페루목시톨 투여 시에는 관찰되지 않았습니다. 베바시주맙은 종양의 혈액량을 유의하게 감소시켰고, 최대 조영 증강까지의 시간이 증가한 것으로 판단되는 투과성을 감소시켰습니다. 45 mg/kg의 베바시주맙 단일 용량은 극도로 높은 용량(12 mg/kg/일)의 덱사메타손 투여와 유사한 변화를 보였으며, 2 mg/kg/일의 덱사메타손보다 유의하게 더 효과적이었습니다.

 가설:
혈관신생 억제 치료에 대한 치료 반응을 더 정확하게 감지하는 데 있어, 페루목시톨 USPIO를 이용한 동적 관류 MRI 측정법으로 대뇌 혈액량을 평가하고, 가도디아미드 조영증강 MR로 혈관 투과성을 평가하는 방법이 전망이 밝다고 결론 내립니다.


전제:
오피오이드 다이노르핀-A(dynA)는 척수 외상 후 2차 손상 기전에 기여하는 것으로 여겨지지만, 관련된 생화학적 메커니즘은 거의 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 자기공명영상(MRI)과 자기공명분광법(MRS)의 조합 및 뒷다리 운동 기능 검사를 사용하여 쥐 척수에 대한 척수강 내 dynA 주입의 영향을 조사했다. 100 nmol의 dynA (1-17) 주입은 주입 24시간 후 MRI로 확인된 바와 같이 심한 부종을 유발했다. 오피오이드 수용체에 작용하지 않는 dynA (2-17) 단편 100 nmol의 주입 또한 심각한 부종을 유발했지만, 낮은 효능의 카파 오피오이드 수용체 리간드인 dynA (1-8) 100 nmol 또는 인공 뇌척수액(ACSF)은 어떠한 부종도 유발하지 않았다. dynA (1-17)과 dynA (2-17) 모두 dynA (1-8)과 ACSF에 비해 24시간 후 유의한 뒷다리 운동 장애를 유발했지만(P < 0.05), dynA (1-17) 그룹의 장애는 dynA (2-17) 처리 동물보다 유의하게 더 심각했다(P < 0.05). 마찬가지로, dynA (1-17) 처리 동물의 사망률은 다른 그룹보다 유의하게 높았다(P = 0.002). 인 MRS는 dynA (1-17)과 dynA (2-17) 처리 동물이 주입 24시간 후 척수의 고에너지 인산화합물이 현저히 감소했음을 보여주었다.

가설:
우리는 dynA가 대사 장애와 부종 발생을 유발하여 척수 세포 사멸에 기여한다는 결론을 내렸다.


전제:

GATA 전사인자 계열은 발달 과정에서 조직 특이적 유전자 발현 패턴을 조절합니다. 우리는 GATA 단백질과 락타아제 유전자 프로모터 간의 상호작용을 규명했습니다. 락타아제 유전자 GATA 영역의 시스 요소(-97에서 -73)에 결합된 핵 단백질은 전기영동 이동성 변화 분석(EMSA) 및 GATA 항체를 이용한 초이동 분석으로 확인되었습니다. 락타아제 프로모터 활성은 야생형 및 돌연변이 루시페레이스 프로모터-리포터 구조체와 GATA-4/5/6 발현 구조체로 형질전환된 Caco-2 세포에서 평가되었습니다. GATA 영역 탐침을 사용한 EMSA는 GATA 인자 결합 부위인 WGATAR이 필요한 특정 DNA-단백질 복합체를 생성합니다. 이 복합체는 GATA-4 및 GATA-6 특이적 항체에 의해 인식됩니다. GATA-4/5/6 발현 구조체는 Caco-2 세포와 비장관 QT6 세포에서 야생형 프로모터에 의해 유도된 전사를 활성화할 수 있지만, GATA 결합 부위가 돌연변이된 프로모터에서는 활성화되지 않습니다. 락타아제 시스 요소에 대한 GATA 인자의 결합은 기능적 프로모터 활성화와 연관성을 보입니다.

가설:

우리는 GATA 전사인자 계열 중 GATA-4와 -6이 락타아제 프로모터를 활성화한다는 결론을 내렸습니다.


전제:
세포 내에서 유사 분열 방추체가 한쪽으로 이동하는 것은 많은 세포가 불균등하게 분열하는 데 중요하다. 최근의 연구로 일부 유사 분열 방추체 변위의 분자 메커니즘이 밝혀지기 시작했지만, 방추체 변위가 정확히 언제 일어나는지에 대해서는 알려진 바가 훨씬 적다. 보존된 유사 분열 진행 메커니즘이 분열하는 세포에서 사건의 시기를 조절하는 것으로 알려져 있지만, 이는 방추체 변위와 연결된 적이 없다. 이 메커니즘은 후기 촉진 복합체(APC), 그 활성화 인자인 Cdc20/Fizzy, 분해 표적인 사이클린, 및 사이클린 의존성 키네이스(CDK)를 포함한다. 우리는 이러한 구성 요소들이 방추체 변위를 위한 이전에 인식되지 않은 타이머를 구성한다는 것을 보여주었다. 예쁜꼬마선충(Caenorhabditis elegans) 접합자에서 유사 분열 방추체 변위는 염색체가 중기판에 정렬된 직후, 정확한 시간에 시작된다. 우리는 프로테아좀, APC, 또는 Cdc20/Fizzy의 기능을 감소시키면 방추체 변위가 지연된다는 것을 발견했다. 반대로, 전중기에서 CDK를 비활성화하면 방추체가 조기에 변위되었다. 이 시간 조절 메커니즘과 방추체 변위를 실험적으로 분리하면, 불완전하게 조립된 유사 분열 방추체 구성 요소가 조기 변위되는 결과가 나타났다.

가설:
이 시스템에서, 유사 분열 방추체의 비대칭적 배치가 일반적으로 APC가 CDK를 비활성화할 때까지 짧은 시간 동안 지연된다고 결론 내린다. 이 지연은 방추체가 완전히 형성되기 전까지 움직이지 않도록 보장한다.


전제:
세포 노화는 체성 줄기세포를 이용한 재생 치료의 제한 요소입니다. 우리는 이전 연구에서 세포 노화의 시작이 치아 여포 줄기세포(DFCs)에서 골형성 분화를 억제한다는 것을 보여주었지만, 그 기전은 아직 명확하지 않습니다. 세포 노화 유도에는 두 가지 경로가 관여하며, 이는 각각 세포 주기 단백질 P21 또는 P16에 의해 주도됩니다. 이 연구에서, 세포 노화 유도 후 DFCs에서 세포 주기 단백질의 발현을 조사했습니다. β-갈락토시다아제 발현 증가와 장기간 세포 배양 후 세포 배가 시간의 증가를 통해 세포 노화의 유도가 입증되었습니다. 세포 노화는 세포 주기 단백질 발현을 조절했습니다. 세포 주기 단백질 P16의 발현이 증가되어 DFCs에서 세포 노화 마커의 유도와 상관관계를 보였습니다. 반면에, 사이클린 의존성 키네이스(CDK)2 및 4와 세포 주기 단백질 P21의 발현은 DFCs에서 점진적으로 감소했습니다.

가설:
결론적으로, 우리의 데이터는 P16-의존성 경로가 DFC에서 세포 노화의 유도를 유도한다는 것을 시사합니다.


전제:
데시타빈(DAC)과 5-아자시티딘은 최근 골수형성이상증후군 치료제로 승인되었습니다. DAC와 5-아자시티딘의 메틸화전달효소(DNMTs) 억제제 역할 외의 약리학적 효과에 대해서는 추가적인 연구가 필요합니다. 이 연구의 목적은 프로모터 부위 주변에 CpG 섬이 존재하는 것으로 추정되는 p21(WAF1/CIP1) 유전자의 발현에 DAC가 미치는 영향을 조사하는 것이었습니다. 백혈병 세포에서 p21(WAF1/CIP1) 프로모터의 메틸화 분석 결과 CpG 메틸화가 없는 것으로 나타났습니다. 그러나 DAC는 용량 의존적 방식으로 p21(WAF1/CIP1) 발현을 상향 조절하였고(ED₅₀=103.34 nM), 백혈병 세포에서 G2/M 세포 주기 정지를 유도했습니다. DAC에 이어 다양한 히스톤 탈아세틸화효소 억제제를 적용하면 p21(WAF1/CIP1) 발현이 시너지 효과로 유도되었습니다. p21(WAF1/CIP1)의 상향 조절은 DAC에 의해 유도된 세포자멸사와 병행되었습니다(ED₅₀=153 nM). 저용량 DAC는 감마-H2AX 발현을 유도했으며(ED₅₀=16.5 nM), HCT 116 대장암 세포에서 DNMT 비의존적이며 p53 의존적인 방식으로 p21(WAF1/CIP1) 발현을 상향 조절했습니다. p53 전사 활성은 피피스린-알파에 의해 억제되었고, ATM의 키네이스 활성은 ATM 억제제 KU-5593 또는 카페인에 의해 저해되어 p21(WAF1/CIP1) 상향 조절이 차단되었습니다. 이는 백혈병 세포에서 DAC에 의한 p21(WAF1/CIP1) 상향 조절이 p53 및 ATM 의존적임을 나타냅니다.

가설:
결론적으로, DAC는 DNA 손상/ATM/p53 축을 통해 DNMT 비의존적 방식으로 p21(WAF1/CIP1)을 상향 조절합니다.


전제:
항균 펩타이드 마이크로신 J25(MccJ25)는 세균 RNA 중합효소(RNAP)에 의한 전사를 억제합니다. 생화학적 결과에 따르면, 전사 억제는 RNA 중합효소의 NTP(뉴클레오타이드 삼인산) 흡수 또는 NTP 결합 수준에서 발생합니다. 유전학적 결과는 전사 억제에 RNA 중합효소의 2차 채널(secondary channel, "NTP-흡수 채널" 또는 "기공"으로도 알려짐) 내에 위치한 50개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는 광범위한 결정인자가 필요하다는 것을 나타냅니다. 생물물리학적 결과에 따르면, 전사 억제는 RNA 중합효소의 2차 채널 내 MccJ25의 결합을 포함합니다. 분자 모델링 분석은MccJ25가 RNA 중합효소의 2차 채널에 결합하여 2차 채널을 물리적으로 막는다는 것을 나타냅니다.

가설:
우리는 MccJ25가 RNA 중합효소(RNAP) 2차 채널을 막아 전사를 억제한다고 결론지었습니다.


전제:

신생아의 정맥 천자 시 통증 치료로 경구 포도당이 권장되었습니다. 이 중재가 정맥 천자와 관련된 과도한 산소 소비(O₂), 에너지 손실, 또는 심혈관 불안정을 줄이는지, 그리고 2 mL 미만의 포도당 용액이 효과적인지는 불분명합니다. 우리는 경구 포도당 용액이 정맥 천자와 관련된 신생아의 산소 소비, 에너지 소비(EE), 및 심박수 증가를 완화한다는 가설을 두 가지 용량의 포도당 용액(2 mL 및 0.4 mL)에 대해 테스트했습니다. 이 전향적, 무작위, 대조, 이중 맹검 연구에서,58명의 신생아(재태 연령 31-42주; 출생 후 연령 1-7일)를 대상으로 정맥 천자 전 경구로 30% 포도당 2 mL, 30% 포도당 0.4 mL 또는 물 2 mL 중 하나를 무작위 배정하여 투여했습니다. 녹화된 행동적 통증 반응은 미숙아 통증 프로파일(Premature Infant Pain Profile)을 사용해 점수화했습니다. 울음 지속 시간, O₂, EE(간접 열량 측정법), 및 심박수를 측정했습니다. 2 mL 포도당 용액은 대조군과 비교해 정맥 천자 후 통증 점수와 울음을 감소시켰습니다 [중앙값 통증 점수, 5.5 (사분위 범위,IQR 4-9) 대 11 (7-12), p = 0.01; 첫 울음의 중앙값 지속 시간, 0초(0-43초) 대 13초(2-47초), p < 0.05]. 0.4 mL 포도당 용액은 효과가 없었습니다. 2 mL 포도당 용액은 정맥 천자 중 O₂ 증가(1.5 ± 0.2 mL/kg/min (물) 대 1.7 ± 0.5 (0.4 mL 포도당) 대 1.1 ± 0.2 (2 mL 포도당))를 완화하지 않았고, EE와 심박수도 마찬가지였습니다.

가설:

우리는 정맥 천자 전 30% 포도당 2 mL의 경구 투여가 통증 표현과 울음을 감소시켰지만, 산소 포화도, 에너지 소비량, 또는 심박수 상승을 막지는 못했다고 결론 내립니다.


전제:
이 무작위, 이중 맹검, 위약 대조 임상시험의 목적은 방사동맥 천자 전에 국소 마취제(테트라카인)가 효과적인 국소 진통을 제공하는지 확인하는 것이었습니다. 선택적 동맥혈 가스 분석을 위해 의뢰된 환자에게 동맥 천자 45분 전에 테트라카인 또는 위약 젤을 적용했습니다. 주요 결과는 시각적 아날로그 척도(VAS)로 측정한 시술과 관련된 환자의 통증 인식이었습니다. 50명의 환자가 무작위로 연구에 배정되었으며, 24명은 테트라카인, 26명은 위약을 받았습니다. 시각적 아날로그 척도에서의 평균 통증 점수는 테트라카인 처치 환자에서 26.2 ± 32.6, 위약 처치 환자에서 23.8 ± 27.4였습니다(P = 0.78). 첫 피부 천자부터 1 ml의 동맥혈을 성공적으로 채취하는 데 걸린 평균 시간은 테트라카인 그룹에서 70 ± 103초, 위약 그룹에서 49 ± 48초였습니다(P = 0.40). 검사를 수행한 호흡치료사가 평가한 동맥 천자의 난이도는 두 그룹에서 동일했습니다(P = 0.86).

가설:
우리는 테트라카인 젤이 동맥 천자와 관련된 환자의 통증 인식을 감소시키지 않았으며, ABG 시술을 용이하게 하지 못했다고 결론지었습니다.


전제:

우리는 주요 혈관 수술 후 마취 회복 동안 스트레스 반응을 완화하는 능력에 대해심박수, 혈압, 혈장 노르에피네프린 농도를 낮추는 알파-2 작용제인 덱스메데토미딘을 평가했습니다. 혈관 수술이 예정된 환자들은 마취 유도 20분 전부터 수술 종료 후 48시간까지 덱스메데토미딘(n = 22) 또는 위약(n = 19)을 정맥 투여받았습니다. 모든 환자는 표준화된 마취를 받았습니다. 심박수와 동맥혈압은 마취 수준을 조절하고 혈관활성 약물을 사용하여 미리 설정된 범위 내에서 유지되었습니다. 심박수, 동맥혈압, 흡입 마취제 농도는 지속적으로 모니터링되었다. 추가 측정 항목으로 혈장 및 소변 카테콜아민 수치가 포함되었습니다. 마취 회복 시 심박수는 덱스메데토미딘 투여군(73 ± 11 bpm)이 위약군(83 ± 20 bpm)보다 느렸고(P = 0.006), 심박수가 설정된 혈역학적 범위 내에 있었던 시간의 비율도 덱스메데토미딘 투여군에서 더 높았습니다(P < 0.05). 혈장 노르에피네프린 수치는 위약군에서만 증가했으며, 수술 직후 덱스메데토미딘 투여군에서 유의하게 낮은 수치를 보였습니다(P = 0.0002).

가설:

우리는 덱스메데토미딘이 마취 회복 시 심박수와 혈장 노르에피네프린 농도의 증가를 완화한다고 결론 내렸습니다.


전제:

쥐에서 척수강 내 투여된 모르핀과 국소 마취제(부피바카인 및 리도카인)의 상호작용이 통각(52.5℃ 열판 및 발바닥 압박), 운동 기능, 자율신경 기능(혈압[BP] 및 심박수[HR])에 미치는 영향을 모르핀과 국소 마취제의 다양한 용량 범위에 걸쳐 조사했습니다. 척수강 내 고용량 부피바카인(75μg) 또는 리도카인(500μg)은 각각 약 15분 및 7분 동안 지속되는 운동 차단과 저혈압(150μg 부피바카인)을 유발했으나, 저용량 부피바카인(25μg) 및 리도카인(100μg)은 2분 이하로 지속되는 일시적인 운동 약화만을 유발했습니다.

두 약제 모두 단독으로는 운동 기능에 영향을 미치지 않는 용량이나 시점에서 열판 및 발바닥 압박 반응을 변화시키지 않았습니다. 그러나 저용량 국소 마취제를 투여한 경우 일시적 운동 약화가 해소된 후, 이러한 용량은 최대 관찰 피크 효과와 시간-효과 곡선 하 면적으로 측정했을 때 열판과 발바닥 압력 모두에서 척수 내 모르핀의 용량-반응 곡선을 유의하게 좌측으로 이동했습니다.

예를 들어, 모르핀/생리식염수의 열판에 대한 모르핀 ED50(95% 신뢰 구간)은 1.7μg(0.7-1.9), 발바닥 압박에 대한 ED50은 1.1μg(0.8-1.4)인 반면, 모르핀/부피바카인(25μg)의 경우 열판은 0.25μg(0.21-0.42), 발바닥 압박은 0.28μg(0.2-0.4)였습니다. 척수강 내 모르핀은 척수강 내 부피바카인의 용량 의존적 운동 또는 자율 차단 효과에 영향을 미치지 않았습니다. 리도카인에서도 유사한 결과가 관찰되었습니다. 부피바카인은 척수강 내 모르핀 제거에 유의미한 영향을 미치지 않았습니다.

가설:

우리는 다음과 같이 결론 내립니다:  척수강 내 투여된 저용량 리도카인과 부피바카인은 단독으로는 진통 효과가 없습니다. 그러나 운동 기능이 명확히 손상되지 않은 상태에서 열판 및 발바닥 압박 시험에서 척수강 내 모르핀의 진통 활성을 유의미하게 증강시킬 수 있다고 결론지었습니다.


전제:

이중맹검 무작위배정 연구에서, 우리는 펜타닐로 마취 유도를 하기 전에 소량의 미다졸람을 전처치로 투여하는 것이 펜타닐 유발 흉부 강직(FITR)의 발생에 영향을 미치는지 조사했습니다. 동시에, 강직이 심혈관계와 호흡기계에 미치는 영향을 평가했습니다. 관상동맥 우회 수술을 받는 16명의 환자를 두 그룹으로 나누었습니다. 미다졸람 그룹(M)은 펜타닐 유도 시작 3분 전에 미다졸람 0.075 mg/kg을 정맥 투여받았고, 위약 그룹(P)은 NaCl 0.9%를 투여받았습니다. 유도 기간 동안 FITR은 3점 척도로 임상 평가되었습니다. 혈역학적 및 호흡기 변수는 마취 유도 전, 펜타닐 주입 종료 시, 그리고 삽관 3분 후에 측정되었습니다. FITR의 발생률은 두 그룹 모두에서 높았습니다 : M 그룹에서 63%, P 그룹에서 75%(통계적으로 유의하지 않음)였지만, 그 중증도는 M 그룹에서 더 낮았습니다. 강직의 발생은 심혈관계와 호흡기계에 영향을 미쳤습니다 :  FITR이 나타난 환자에서 중심정맥압과 폐모세혈관쐐기압이 급격히 증가했으며, 적절한 환기 어려움으로 인한 CO2 축적이 동반되었습니다.

가설:

우리는 소량의 미다졸람이 FITR을 예방하지는 않지만 완화할 수 있으며, 강직의 발생이 마취 유도 중 혈역학적 및 호흡기 변수를 변화시킨다고 결론지었습니다.


전제:
고주파 열치료술(RFA)은 수술이 불가능한 간 종양에 대한 최소 침습적 치료로 사용됩니다. RFA 후 발생하는 이차 면역 반응이 관찰된 종양 제어에 기여할 수 있습니다. 본 연구에서는 VX2 암종을 토끼의 간에 이식했습니다. 3주 후, 종양은 RFA로 치료하거나, 치료하지 않은 채로 두었습니다. 말초 혈액 림프구는 종양 이식 전, 수술 후 2주, 그리고 그 이후 2주 간격으로 채취되었습니다. T 세포는 자가 항원제시세포에 로딩된 종양 조직 또는 비종양 간 조직 용해물로 자극되었고, 자극 지수는 [(3)H]티미딘 결합을 통해 결정되었습니다. 배경 또는 대조군보다 3배 이상의 증가가 유의미한 것으로 간주되었습니다. 파이토헤마글루티닌 자극은 양성 대조군으로 사용되었습니다. 토끼들은 부검되었으며, 간과 종양 조직은 T 세포 침윤에 대해 면역조직학적으로 분석되었습니다. 종양 보유 토끼(n = 9)와 RFA 치료를 받은 토끼(n = 11)의 T 세포는 후속 연구에서 조사되었습니다. 평균 수술 후 관찰 기간은 45일이었습니다. RFA 치료를 받은 11마리의 토끼모두 관찰 기간 동안 종양 항원에 대해 특이적으로 활성화된 순환 T 세포를 나타냈으며, 이는 조밀한 T 세포 침윤과 동반되었습니다. 반면, 치료받지 않은 종양 보유 동물의 T 세포는 반응을 보이지 않았고 T 세포 침윤도 드물었습니다.

가설:

우리는 RFA가 반응성이 없는 종양 보유 숙주에서 종양 특이적 T 세포 반응을 유도한다고 결론 지었다. 면역 관용을 명백히 극복하고 은폐된 종양 항원을 발현하게 한다고 결론지었습니다.


전제:

인간 간 마이크로솜을 사용하여 제미피브릴의 시토크롬 P450 (CYP) 1A2(페나세틴 O-탈에틸화), CYP2A6(쿠마린 7-하이드록실화), CYP2C9(톨부타마이드 하이드록실화), CYP2C19(S-메페니토인 4'-하이드록실화), CYP2D6(덱스트로메토르판 O-탈에틸화), CYP2E1(클로르조사존 6-하이드록실화), 및 CYP3A4(미다졸람 1'-하이드록실화) 활성에 대한 시험관 내 억제 효과를 조사했습니다. 제미피브릴의 생체 내 약물 상호작용은 시험관 내에서 [I]/([I] + K(i)) 값을 사용하여 예측되었습니다. 제미피브릴은 CYP2C9 활성을 강력하고 경쟁적으로 억제했으며, K(i)(IC(50)) 값이 각각 5.8(9.6) μM이었습니다. 또한, 제미피브릴은 CYP2C19 및 CYP1A2 활성에 대해 다소 작은 억제 효과를 보였으며, K(i)(IC(50)) 값은 각각 24(47) μM 및 82(136) μM이었습니다. 250 μM까지의 농도에서 제미피브릴은 CYP2A6, CYP2D6, CYP2E1, 및 CYP3A4 활성에는 유의미한 영향을 미치지 않았습니다. 제미피브릴의 최고 총(또는 비결합) 혈장 농도를 사용하여 계산된 [I]/([I] + K(i)) 값을 기반으로, 각각 CYP2C9, CYP2C19, 및 CYP1A2 기질의 청소율이 96%(56%), 86%(24%), 및 64%(8%) 억제될 것으로 예상되었습니다.

가설:

결론적으로, 임상적으로 유의미한 농도에서 CYP2C9는 제미피브릴의 활성을 억제하며, 이는 CYP2C9가 와파린과 글리부라이드 같은 제미피브릴 기질 약물과 상호작용하는 주요 기전으로 추정됩니다.


전제:
토피소팜은 벤조디아제핀(BZD) 계열의 항불안제로, 화학 구조상 1(3-4 디메톡시페닐)-4메틸-5-에틸-7,8 디메톡시-5H-2,3-벤조디아제핀입니다. TZP(토피소팜)는 질소 원자의 위치에서 기존 1,4-벤조디아제핀과 차이를 보입니다. 토피소팜이 면역억제제의 혈중 농도를 증가시켜 임상적으로 유의한 약물 부작용을 일으키고, 약물 용량 감소나 토피소팜 투여 중단이 필요했던 세 건의 임상 사례가 보고되었습니다. 투여된 면역억제제가 CYP3A4 시스템의 기질이므로, 인간 재조합 CYP3A4 슈퍼솜을 사용하여 CYP3A4 효소에 대한 토피소팜의 영향을 시험관 내에서 조사했습니다. 벤조옥시-4-(트리플루오로메틸)-쿠마린(BFC)이 기질로 사용되었습니다. 0.1, 0.25, 0.5, 0.75, 1 및 5 μmol/L 농도의 토피소팜이 용량 의존적으로 효소 활성을 억제했으며, 활성 억제율은 각각 4%, 29%, 40%, 56%, 61%, 94%였고, IC50은 0.8 μmol/L이었습니다. 양성 대조 물질인 케토코나졸의 IC50은 0.03 μmol/L이었습니다. 시험관 내 실험에서 토피소팜의 억제 효과는 강력한 CYP3A4 억제제인 케토코나졸보다 약 10배 낮았습니다.

가설:

시험관 내 결과에 따르면 토피소팜이 CYP3A4의 억제제임을 결론지을 수 있지만, 이 억제 효과의 임상적 중요성을 명확히 하기 위해 추가적인 인체 임상 데이터가 필요합니다.


전제:

본 연구에서는 24R,25-디하이드록시비타민 D(3) [24R,25(OH)(2)D(3)]가 N,N'-디메틸히드라진(DMH)으로 유도된 쥐의 대장 암 발생에 미치는 영향을 조사했습니다. 실험 1과 2에서는 각각 50마리의 6주령 F344 수컷 쥐를 5개 그룹으로 나누어, 주 1회씩 4주 동안 DMH를 피하 주사했습니다. 실험 1에서는 개시 후 단계, 실험 2에서는 개시 단계에서 그룹 1-5의 쥐들에게 각각 10, 5, 2.5, 1.25 또는 0 p.p.m.의 24R,25(OH)(2)D(3)를 식이로 투여했습니다. 실험 종료 시, 개시 후 단계에서 24R,25(OH)(2)D(3)를 처리한 쥐의 대장 점막에서 비정상 선와 병소(ACF)의 수가 용량 의존적으로 감소했지만, 개시 단계에서는 감소하지 않았습니다. 실험 3에서는 15마리의 9주령 수컷 쥐를 3개 그룹으로 나누어 각각 10, 5 또는 0 p.p.m.의 24R,25(OH)(2)D(3)를 식이로 투여했습니다. 대장 점막의 DNA 합성을 조사하기 위해 동물에게 사망 1시간 전에 5-브로모-2'-데옥시유리딘(BrdU)을 복강 주사했습니다. BrdU 표지 지수는 24R,25(OH)(2)D(3)로 처리한 쥐의 대장 선와에서 용량 의존적으로 감소했습니다. 실험 4에서는 다발성 발암 유도 프로토콜을 사용하여 단일 장기뿐만 아니라 개체 수준에서 데이터를 분석할 수 있었습니다. 68마리의 6주령 수컷 쥐는 1-4주 동안 DMH, N-메틸니트로소우레아, 2,2'-디하이드록시-디-n-프로필니트로사민, 디에틸니트로사민, N-부틸-N-(4-하이드록시부틸)니트로사민을 처리한 후, 5-30주 동안 5, 1 또는 0 p.p.m.의 24R,25(OH)(2)D(3)를 식이로 투여받았습니다. 다양한 장기에서 종양 및 전암 병변의 발달을 조사한 결과, 24R,25(OH)(2)D(3)는 대장 종양 발생을 유의하게 억제했지만, 다른 장기에서는 종양 유도에 영향을 미치지 않았습니다.

가설:

결론적으로, 이 결과는 24R,25(OH)2D3가 개시 후 단계에서 투여될 경우, 다른 장기에서 발암을 촉진하지 않고 대장 암 발생을 특이적으로 억제함을 강하게 시사합니다.


전제:
간암 발생은 지속적인 간내 염증이 주요한 역할을 하는 복잡한 다인성 과정입니다. 화학물질에 의해 유도된 간암 발생 과정에서 염증 세포의 침윤이 관찰되지만, 염증 반응의 병리생리학적 역할은 명확하게 규명되지 않았습니다. 이 문제에 접근하기 위해, 식수에 화학적 간암 유발 물질인 디에틸니트로사민(DEN, 50 μg/l)을 첨가하여 노출된 쥐의 간 종양 발달 과정에서 분자 및 세포 반응을 모니터링했습니다. 간내 제I형 및 제II형 인터페론(IFN-베타 및 IFN-감마)의 mRNA 발현이 간세포암 출현 2개월 전에 유도되는 것으로 나타났습니다. IFN의 병원성 중요성은 IFN-알파/베타 수용체(IFN-알파/베타R KO) 또는 IFN-감마 수용체(IFN-감마R KO)에 유전적으로 결핍된 쥐에서 종양 발달을 모니터링하여 평가되었습니다. IFN-감마R KO 쥐는 IFN-알파/베타R KO와 야생형(wt) 쥐보다 종양이 적게 발생했지만, 종양 직경은 세 계통 간 유의한 차이를 보이지 않았습니다. 흥미롭게도, 면역조직화학적 연구는 IFN-감마R KO 쥐의 간에서 침윤하는 단핵 세포 중 단핵구/대식세포의 비율이 크게 감소한 것으로 나타났는데, 이는 간내 사이토카인 발현이 감소하고 산화성 DNA 손상이 덜 유도된 사실과 일치했습니다.

가설:
결론적으로, 제II형 IFN은 DEN에 의해 유도된 간암 발생의 개시 단계에 중요하게 관여할 수 있지만, 촉진 단계에는 관여하지 않는 반면, 제I형 IFN은 그렇지 않습니다. 이는 제II형 IFN이 단핵구/대식세포 활성화를 증가시키고 결과적으로 간세포 DNA 손상을 유발하기 때문일 수 있습니다.


전제:

1일부터 56일까지의 육계 병아리를 대상으로, 8% 수준의 팔미트산 또는 팔미트산과 올레산의 50/50 혼합물의 이용에 대한 연령의 영향을 조사하였다. 이는 콜산 0.2%의 유무와 저칼슘(0.8%) 및 고칼슘(1.2%) 조건에서도 진행되었다. 체중 증가와 사료 효율에 대해 보충된 지방산 유형과 콜산 유무 간에 유의한 상호작용이 관찰되었다(P < 0.01). 팔미트산과 올레산을 동량으로 혼합하여 급여한 식이는 대조군과 팔미트산만을 급여한 식이에 비해 사료 섭취량을 감소시켰다. 육계 병아리의 연령과 보충된 지방산 유형 간에 지방 보유율과 대사에너지(ME)에 대한 상호작용이 있었다(P < 0.01). 또한 보충된 지방산 유형과 콜산 첨가 간에 지방 보유율과 ME에 대한 유의한 상호작용이 있었다. 콜산은 소화 과정에서 비누 형성을 감소시켰으나(P < 0.05), 식이 내 칼슘 수준을 높이면 소화물 중 지방의 비누화 비율이 증가했다(P < 0.01). 소화물과 배설물 중 지방의 비누화 비율은 보충된 지방산의 유형에 따라 달랐다. 육계 식이에 유리지방산을 첨가한 경우, 대조군 식이를 급여한 병아리에 비해 뼈 회분과 뼈 칼슘 함량이 감소했다.

가설:

결론적으로, 육계 병아리가 사료 내 유리지방산을 이용하는 능력은 급여가 시작된 나이에 따라 다르지만, 모든 경우에 콜산 보충이 지방산 이용률을 향상시킨다는 결론이 내려졌다.


전제:

이 연구의 목적은 준임상적 저칼슘혈증 발생 시 칼시토닌(CALC)의 잠재적 중요성(실험 1)과 대사성 산증 하에서 소의 저칼슘혈증 예방의 생리학적 기전을 평가하는 것이다(실험 2와 3).
실험 1에서는 분만 후 첫 5일 동안 자연적으로 준임상적 저칼슘혈증이 발생한 15마리의 홀스타인 소를 혈중 Ca 농도가 7.5–8.5 mg/dL일 때 낮은 준임상 저칼슘혈증(LSH), 6.0–7.6 mg/dL일 때 높은 준임상 저칼슘혈증(HSH)으로 분류했다. 부갑상샘호르몬(PTH), 칼시토닌(CALC) , 1,25(OH)2D3의 농도를 결정하기 위해 분만 전후 5일 동안 매일 혈액 샘플을 채취했다. 실험 2에서는 24마리의 홀스타인 황소(체중 497 ± 69 kg, 나이 342 ± 10.5일)를 2개의 처치군(대사산증 또는 대조군)에 배정했다. 대사성 산증은 10일간 염화암모늄 2.5 mEq/day를 경구 투여하여 유도했고, 이후 동물들은 도축되었다. 도축 전 혈액 샘플을 채취하여 CALC, PTH, 1,25(OH)2D3 농도를 측정하고, 도축 직후 소변, 신장, 부갑상선, 갑상선 샘플을 수집해 여러 유전자 발현을 분석했다. 마지막으로, 실험 3에서는유방암 세포주(T47D) 배양을 이용해 대사산증 상태에서 칼시토닌(CALC)의 활성을 체외에서 평가했다. PTH는 HSH에서 LSH보다 더 높은 경향이 있었으나 1,25(OH)2D3는 HSH에서 더 낮았다(실험 1). 혈중 CALC 농도는 저칼슘혈증 심각도에 영향받지 않았지만, 분만 후 경과 일수에 따라 달라졌다(실험 1). 대사성 산증 시 신장의 PTH 수용체(PTHR) 발현이 증가했다(실험 2). 또한, CALC의 활성이 산성 혈액 pH에서 저하되었다(실험 3).

가설:

HSH 소에서 분만 후 CALC 증가로 인해 PTH 수용체 반응이 1,25(OH)2D3를 활성화하고 CALC 효과를 상쇄하는 데 충분하지 않아 혈중 칼슘 농도의 회복이 저해되었다고 결론지었다.


전제:

메타바나데이트(VO3-) 형태의 바나듐은 Na+, K+-ATPase의 강력한 억제제입니다. 바나듐과 인의 산화 음이온의 유사성 때문에, Al(OH)3가 인의 장내 흡수를 제한하는 것처럼 바나듐의 장내 흡수도 제한할 수 있을지 확인하는 것이 관심사였습니다. VO3-는 pH 5-8에서 Al(OH)3 현탁액에 광범위하게 결합되었습니다. Sprague-Dawley 쥐(180-300g)를 밤새 금식시킨 후 1 μCi의 48V를 포함한 1.0 ml의 0.9% NaCl에 5 μmol Na3 VO4를 혼합하여 위관 투여를 하였습니다. 대조군 동물(n=12)은 동시에 1.0 ml 희석액을, 실험군 동물(n=12)은 1 ml의 Al(OH)3를 받았습니다. 이후 희석액과 Al(OH)3가 4일간 매일 투여되었으며, 소변과 대변은 매일 별도로 수집되었습니다. 대조군에서 4일간 총 48V 회수율(대변과 소변)은 투여량의 86.6 ± 2.4%였습니다. Al(OH)3는 총 48V 회수율을 유의미하게 증가시키지는 않았지만(93.6 ± 3.2%), 소변보다 대변에서의 48V 배설을 현저히 증가시켰습니다(대조군: 대변, 69.1 ± 1.8%; 소변, 12.5 ± 1.3%; Al(OH)3: 대변, 85.7 ± 1.5%; 소변, 7.9 ± 1.8%). 실험 후 동물을 희생시키고, 조직에서 표지자 흡수를 측정했습니다. 두 그룹 모두에서 배설되지 않은 48V의 조직 내 분포 패턴은 신장 > 뼈 > 간 > 장 > 근육 순이었으나, 조직 수준은 대조군이 Al(OH)3 처리군보다 전반적으로 높았습니다. Al(OH)3가 내인성 VO3- 제거 능력도 평가되었습니다. 48V를 복강 내 주사(ip)한 동물(n=20)의 절반은 희석액을, 나머지 절반은 1 ml의 Al(OH)3를 4일 동안 매일 위관 투여 받았습니다. 48V의 조직 분포 및 배설 패턴에는 차이가 없었습니다.

가설:

결론적으로, Al(OH)3는 장내 VO3- 흡수를 감소시켜 식이 공급원으로부터 VO3-의 조직 축적을 예방할 수 있다고 결론지었습니다.


전제:
기전적 및 역학적 연구들은 칼슘 섭취와 결장직장암(colorectal cancer, CRC) 발생 간 보호적 연관성에 대한 상당한 증거를 제공합니다. CRC에 대한 단기 무작위 대조 시험(randomized controlled trials, RCT)에서는 이러한 연관성이 확립되지 않았지만, 선종에 대한 이점을 보여줍니다. 이러한 불일치를 일부 해결하기 위해, PubMed, Embase, BIOSIS에서 2013년 12월까지 발표된 전향적 관찰 연구를 바탕으로, 칼슘 섭취원의 차이에 따른 용량-반응 메타분석(dose-response meta-analyses)을 수행하였습니다. 요약 상대위험도(RR)와 95% 신뢰 구간(CI)은 랜덤 효과 모델(random-effects model)을 통해 계산되었습니다. 총 칼슘 섭취량의 경우, 300 mg/일 증가할 때마다 CRC 위험이 약 8% 감소했습니다(요약 RR = 0.92, 95% CI = 0.89-0.95, I(2) = 47%, 15개 연구, 사례 수 = 12,305, 섭취량 = 250-1,900 mg/일, 추적 관찰 기간 = 3.3-16년). 총 칼슘 섭취량이 높은 범위에서 위험 감소는 완만해졌지만(P(비선형성, non-linearity) = 0.04), 곡률의 정도는 경미했고, 비선형성의 통계적 유의성은 하나의 연구에 의해 영향을 받았습니다. 보충제로서의 칼슘 섭취의 경우, 300 mg/일 증가 시 CRC 위험이 약 9% 감소했습니다(요약 RR = 0.91, 95% CI = 0.86-0.98, I(2) = 67%, 6개 연구, 사례 수 = 8,839, 섭취량 범위 = 0-1,150 mg/일, 추적 기간 = 5-10년). 비선형성 검정에서는 통계적으로 유의한 차이가 나타나지 않았습니다(P(비선형성) = 0.11).

가설:
결론적으로, 식이 칼슘과 보충제 칼슘 섭취 모두 1,000 mg/일 이상의 섭취량에서도 CRC 위험을 지속적으로 감소시킬 수 있습니다.


전제:
반추동물에서 메탄 생성 완화는 수십 년 동안 중요한 목표였다. 반추위 메탄 생성을 억제하는 것으로 알려진 유리 라우르산은 기호성이 낮다. 따라서 본 연구에서는 라우르산의 에스테르화된 형태(모노라우린)의 완화 효과를 평가하는 것을 목표로 하였다. 또한, 메탄 생성과 발효 과정에서 13C-동위원소 풍부도(delta13C)와 13C-12C 분별을 측정하여 미생물의 C-동위원소 선호도를 평가하였다.

반추위 시뮬레이션 기술을 사용하여 네 가지 기본 식단을 실험하였다. 이 식단들은 C3 식물인 풀(건초)과 밀(짚과 곡물), 또는 C4 식물(C3 식물에 비해 13C 과잉)인 옥수수(짚과 곡물), 그리고 후자 두 가지의 혼합물로 구성되었다. 각 식단을 모노라우린(사료 건물 kg당 50g)과 함께 또는 없이 배양하였다.

건초에 첨가된 모노라우린은 메탄 생성에 유의한 영향을 미치지 않았다. 다른 식단에 첨가했을 때(특히 밀 기반 식단에서 P < 0.05) 메탄 생성이 감소했다. 모노라우린은 섬유소 소실(건초 식단에서 가장 적은 영향), 아세트산:프로피온산 비율, 원생동물 수를 감소시켰다.

사료 잔류물과 단쇄지방산은 식단과 동일한 delta13C를 보였다. 메탄은 13C가 감소된 반면 CO2는 식단에 비해 13C가 증가되었다. 모노라우린 첨가는 CO2의 13C 감소와 CH4의 13C 증가(후자는 건초 식단에서만)를 초래했다.

가설:
결론적으로, 모노라우린은 밀짚-곡물 식단에서 메탄 생성을 효과적으로 감소시키는 것으로 입증되었으나, 이 효과는 부분적으로는 동반된 섬유소 소실 감소로 설명될 수 있다.


전제:
우리는 분비 자극제에 의해 유발된 십이지장 궤양을 예방하는 수크랄페이트의 효능을 쥐를 대상으로 조사했다. 수크랄페이트는 펜타가스트린 및 베타네콜의 24시간 연속 주입 시작 전, 주입 후 3시간과 6시간에 각각 50 mg, 100 mg 또는 200 mg 용량으로 경구 투여되었다. 24시간 후 동물들을 희생시켜 궤양의 수와 중증도를 평가했다. 모든 대조군 쥐 9마리에서 궤양이 발생했으며, 50 mg 용량군에서는 9마리 중 8마리, 100 mg 용량군에서는 9마리 중 4마리, 200 mg 용량군에서는 9마리 중 1마리에서만 궤양이 발생했다.

가설:
우리는 투바스타틴 A가 쥐에서 분비 자극제에 의해 유도된 십이지장 궤양 형성을 예방한다고 결론지었다.


전제:
펜타가스트린(pentagastrin)으로 자극된 위산 분비에 대한 십이지장의 산과 고삼투압 용액 노출의 억제 효과가 만성 위루와 십이지장 Thiry-Vella 루프(Thiry-Vella loop)가 장착된 의식 있는 쥐에서 연구되었다. 루프는 생리식염수, HCl 또는 고삼투압 폴리에틸렌 글리콜로 처리되었다. 위산 분비는 위루에서 채취한 표본으로 측정되었다. 장 펩타이드 농도는 30분마다 수집된 십이지장 관류액과 자극된 산 분비 기간 중, 그리고 실험 종료 시 루프의 내강 처리와 함께 수집된 혈장 표본에서 측정되었다. 펜타가스트린으로 자극된 위산 분비 동안, 십이지장 루프를 산으로 관류하면 산 분비 억제(P < 0.001)와 관강(P < 0.001) 및 순환계(P < 0.05)로의 소마토스타틴(somatostatin)의 방출이 두드러지게 나타났다. 또한, 뉴로텐신(neurotensin)(P < 0.01)과 혈관활성 장 펩타이드(VIP)(P < 0.01)가 내강으로 방출되었지만, 순환계로는 방출되지 않았다. 십이지장 루프를 고삼투압 폴리에틸렌 글리콜로 관류했을 때, 위산 분비는 억제되었고(P < 0.05) 소마토스타틴만이 내강 측으로 방출되었다(P < 0.01).

가설:
결론적으로, 십이지장 루프의 내강을 산으로 관류하면 펜타가스트린에 의해 자극된 위산 분비가 억제된다고 결론지었다.


전제:
이 연구에서, 우리는 정상인의 식도 산 제거에 영향을 미치는 요인들을 평가했다. 15ml의 0.1 N HCl(pH 1.2) 일시 주입량을 식도에 주입한 후, 대상자는 30초마다 삼켰다.식도내압검사 및 pH 모니터링을 통해 식도 산 제거가 일련의 단계적 pH 증가로 이루어짐을 확인했으며, 각 단계는 삼킴으로 유도된 연동운동 순서와 연관되어 있었다. 연동운동 순서 사이에는 pH 증가가 미미했다. 구강 정제로 자극된 침 분비는 산 제거를 크게 개선한 반면, 구강에서 침을 흡인할 경우 식도의 단계적 pH 증가가 사라지고 산 제거가 현저히 지연되었다. 흡인된 침을 중탄산염 용액으로 대체했을 때 식도 pH의 단계적 증가가 재현되며 산 제거가 정상에 가깝게 회복되었으나, 물로만 대체할 경우 산 제거가 개선되지 않았다. 구강 정제와 유사하게 베타네콜(5mg 피하 주사) 또한 식도 산 제거를 개선시켰으나, 이 효과는 구강에서 침을 흡인할 경우 사라져 산 제거가 현저히 지연되었다. 누운 자세에서 앉은 자세로 변경하면 산 제거가 약간 개선되는 경향을 보였으나, 통계적으로 유의하지 않았다.

가설:
우리는 정상인에서 (a) 삼키기가 타액을 식도로 운반하고 연동운동이 식도 내 액체를 위로 비운다는 것, (b) 각 삼킴과 함께 식도로 운반된 타액에 의한 산의 중화가 단계적으로 pH가 증가하는 방식으로 산 제거의 발생을 설명한다는 것, (c) 베타네콜로 인한 산 제거 개선은 타액 자극 때문이라는 것, 그리고 (d) 정상적인 연동운동이 있을 때 중력은 식도의 산 제거에 거의 기여하지 않는다는 것을 결론지었다.


전제:

새로운 위장운동 촉진제인 시사프라이드가 위 비우기와 담즙산의 십이지장-위 역류에 미치는 영향을 위약 대조 이중맹검 무작위 교차 시험을 통해 건강한 지원자들에게서 평가했다. 20명의 대상자들은 시사프라이드 10mg을 하루 세 번 경구 투여하거나 이에 상응하는 위약 정제로 1주일간 치료받았다. 시험일에는 공복 상태와 혼합 액체 식사 후에 위관을 사용한 표지자 기법으로 대상자들을 연구하였다. 시사프라이드는 위 분비와 위 비우기에 영향을 미치지 않았다. 시사프라이드 치료 후 공복 시(0.63 ± 0.14 vs. 0.38 μmol/분 ± 0.05 SEM)와 식사 후(2.60 ± 0.61 vs. 1.88 μmol/분 ± 0.33 SEM)에 모두 역류율이 낮아지는 경향이 관찰되었다. 이러한 효과는 높은 위약 역류율이 감소한 데 기인하며, 시사프라이드에 의한 역류율 감소는 위약 역류율의 높이와 통계적으로 유의하게 상관관계가 있었다(p < 0.001). 또한 위 담즙산 농도에서도 유사한 관계가 발견되었다(p < 0.001).

가설:
시사프라이드는 높은 담즙산 역류를 감소시킨다고 결론지었다.


전제:
이 연구의 목적은 의식이 있는 돼지에서 단쇄 지방산(SCFA)에 의해 유도된 회장 제동 기전에 관여하는 신경 및 체액 경로를 평가하는 것이었다. 외재성 회장 신경지배의 역할은 신경이 있는 상태와 신경이 제거된 Babkin의 회장 루프에서 SCFA 주입 후 평가되었으며, 위 운동은 변형 게이지로 측정되었다. 펩타이드 YY(PYY)와 글루카곤 유사 펩타이드-1(GLP-1) 농도는 두 상황에서 모두 평가되었다. 흡수된 SCFA의 가능한 관여는 아세트산염의 정맥 내 주입을 통해 테스트되었다. 무손상 말단 회장에 SCFA를 주입하면 원위 및 말단 전정부 수축의 진폭이 감소하고(33 ± 1.2 vs. 49 ± 1.2%, 주입 전 기록된 최대 진폭의 대비) 빈도가 증가했다(1.5 ± 0.11 vs. 1.3 ± 0.10/분). 신경이 있는 상태와 신경이 제거된 회장 루프에서 SCFA 주입 중 유사한 효과가 관찰되었다(진폭, 35 ± 1.0 및 34 ± 0.8 vs. 47 ± 1.3 및 43 ± 1.2%; 빈도, 1.4 ± 0.07 및 1.6 ± 0.06 vs. 1.1 ± 0.14 및 1.0 ± 0.12/분). 정맥 내 아세트산염 주입은 전정부 수축의 진폭과 빈도를 변화시키지 않았다. PYY 농도는 신경이 있는 상태와 신경이 제거된 회장 루프에서 SCFA 주입 중 증가했지만, GLP-1 농도는 증가하지 않았다.

가설:
우리는 외재성 회장 신경지배가 단쇄 지방산(SCFA)으로 유도된 위 운동성의 제동을 매개한다고 결론 내린다.


전제:
성체 포유류 심장에서 L형 Ca(2+) 채널이 매개하는 Ca(2+) 유도 Ca(2+) 방출(CICR)이 흥분-수축(E-C) 연계의 주된 방식이며 신생아에서는 눈에 띄는 CICR이 없다는 것이 일반적으로 받아들여지고 있다. 그러나 우리는 카페인으로 인한 근소포체(SR) Ca(2+) 고갈 후 신생아 심장의 세포 수축이 크게 감소하는 것을 관찰했다. 따라서 본 연구에서는 3일, 10일, 20일, 56일령 토끼 심실근 세포에서 CICR의 발달 변화를 조사했다. 우리는 L형 Ca(2+) 전류(I(Ca)) 억제제인 니페디핀(Nif; 15 (μM))의 억제 효과가 연령이 높은 그룹에서 탈분극 시 Ca(2+) 농도 변화의 점점 더 큰 감소를 유발했음을 발견했다 [3일령(3d) 세포에서 약 15%에서 56일령(56d) 세포에서 약 90%까지]. 어린 연령 그룹에서 Nif 존재 하에 남아있는 Ca(2+) 농도 변화는 10 (μM) KB-R7943(KB-R)의 후속 첨가로 Na(+)/Ca(2+) 교환체(NCX)의 억제에 의해 제거되었다. 또한, 모든 연령 그룹에서 카페인으로 SR Ca(2+)를 고갈시킨 후 Ca(2+) 농도 변화의 크기가 유의하게 감소했지만, 그 효과는 연령이 높은 그룹에서 유의하게 더 컸다(3d 세포에서 약 40%에서 56d 세포에서 약 70%까지). 가장 초기 발달 단계에서 이 SR Ca(2+) 민감성 Ca(2+) 농도 변화는 Nif에 민감하지 않았지만 KB-R의 후속 첨가에 민감했으며, 이는 연령에 따라 유의하게 감소하는 NCX 매개 CICR의 존재를 나타낸다(3d 세포에서 약 37%에서 56d 세포에서 약 0.5%까지). 반대로, I(Ca) 매개 CICR은 연령에 따라 유의하게 증가했다(3d 세포에서 약 10%에서 56d 세포에서 약 70%까지). CICR Ca(2+) 농도 변화의 적분을 그 Ca(2+) 농도 변화 트리거의 적분으로 나눈 값으로 추정된 CICR 증폭도는 NCX에 의해 매개될 때(3d 세포의 경우 약 1.0)가 I(Ca)에 의해 매개될 때(56d 세포의 경우 약 3.0)보다 작았다.

가설:
결론적으로, 초기 발달 단계에서는 효율성이 낮은 NCX 매개 CICR이 주된 CICR 방식이다. 이는 점진적으로 감소하며, 개체 발생 과정에 따라 더 효율적인 L-형 Ca(2+) 이온 채널 매개 CICR이 주도적으로 증가한다.


전제:
GS-458967, 6-(4-(트리플루오로메톡시)페닐)-3-(트리플루오로메틸)-[1,2,4]트리아졸로[4,3-a]피리딘(GS967)은 최근 새롭게 기술된 나트륨 채널 억제제로서 다양한 시험관 내 및 생체 내 모델에서 강력한 항부정맥 효과를 나타냅니다. 항부정맥 작용 기전은 후기 나트륨 전류의 선택적 억제에 기인한다고 여겨집니다. 그러나 이 화합물이 분리된 나트륨 채널에 미치는 영향에 대한 체계적인 조사는 보고된 바 없습니다. 이 연구에서는 GS967이 주요 심장 나트륨 채널인 인간 심장 전압 의존성 나트륨 채널을 이종 발현한 세포에서 기록된 최대 나트륨 전류(INaP) 및 후기 나트륨 전류(INaL)에 미치는 영향을 분석했습니다. 이전 연구와 일치하게, 우리는 GS967이 INaP(19%)보다 INaL(63%)에 대해 현저히 높은 비율의 지속성 억제를 나타냄을 관찰했습니다. 또한, GS967은 사용 의존성 차단(UDB) 특성을 보이며, 빈도 의존적으로 INaP를 감소시키는 효과를 나타냈습니다. GS967은 INaP의 UDB 효과(IC50 = 0.07 µM)에서 라놀라진(16 µM)과 리도카인(17 µM)보다 더 강력한 차단을 유도했습니다. GS967에 의한 사용 의존성 차단은 GS967 존재하에서 빠른 및 느린 불활성화로부터의 회복이 현저히 지연되고 느린 불활성화가 크게 증가된 것으로 가장 잘 설명되었습니다. 또한, GS967은 전형적인 장기 QT 증후군 돌연변이(delKPQ)에서도 동일한 효과를 나타냈습니다. 국소 마취제 상호작용 부위에 대한 변형 돌연변이(F1760A)는 GS967의 UDB 효과를 부분적으로 감소시켰지만, 지속성 INaL 억제에는 영향을 미치지 않았습니다.

가설:
결론적으로, GS967은 INaL을 선택적으로 억제하는 항부정맥제이지만, 이전에 보고되지 않은 느린 불활성화 및 불활성화 회복에 강력한 영향을 미쳐, 국소 마취제 작용 부위에 전적으로 의존하지 않는 상당한 사용 의존성 차단(UDB)을 유도한다고 판단됩니다.


전제:
단일 토끼 심방 세포의 일과성 외향 전류를 연구하기 위해 전체 세포 패치 클램프 기법을 사용했습니다. 4-아미노피리딘(4AP)과 탈분극된 유지 전위에 의해 큰 일과성 전류인 IA가 차단되었습니다. IA가 차단된 후, 더 작은 일과성 전류가 남았습니다. 이는 니솔디핀, 카드뮴, 리아노딘, 카페인에 의해 완전히 차단되었습니다. 이는 4AP 저항성 전류가 수축을 일으키는 칼슘 과도 전류에 의해 활성화됨을 나타냅니다. 칼슘 활성화 칼륨 전류와 칼슘 활성화 비특이적 양이온 전류는 4AP 저항성 일과성 전류에 기여하지 않는 것으로 보였습니다. 일과성 전류는 ECl이 펄스 전위와 동일할 때 사라졌고, 칼륨이 없는 내부 및 외부 용액에서도 관찰되었습니다. 이 전류는 음이온 수송 차단제 SITS와 DIDS에 의해 차단되었으며, 순간 전류-전압 관계의 역전 전위는 염화물 선택적 전도도와 일치하게 세포외 염화물 농도에 따라 변동했습니다.

가설:
결론적으로, 토끼 심방 세포에서 수축을 유발하는 칼슘 과도 전류가 염화물 선택적 전도도를 활성화하며, 이 전도도가 4AP 저항성 일과성 전류에 기여한다고 여깁니다.


전제:
심근경색(MI) 후 쥐 심장에서 포스포렘만(PLM) 발현이 증가했다. 정상 성체 쥐 심근세포에서 PLM의 과발현은 MI 후 심근세포에서 관찰된 것과 유사하게 수축 기능과 세포질 내 Ca(2+) 농도([Ca(2+)](i)) 항상성을 변화시켰다. 본 연구에서는 정상 성체 쥐 심근세포에서 PLM 발현 억제가 MI 후 심근세포에서 관찰된 것과 반대되는 수축성 및 [Ca(2+)](i) 일과성 변화를 초래하는지 검증하고자 하였다. 녹색 형광 단백질(GFP)만을 발현하는 아데노바이러스(Adv)로 감염된 대조군 세포와 비교하여, GFP와 쥐 안티센스 PLM(rASPLM)을 발현한 심근세포는 3일 후 PLM 단백질이 23% 감소하였다(P < 0.012). 그러나 근소포체(SR) Ca(2+)-ATPase, Na(+)/Ca(2+) 교환체(NCX1), Na(+)-K(+)-ATPase, 칼세퀘스트린 수준에는 차이가 없었다. rASPLM 처리는 SR Ca(2+) 흡수와 전체 세포 전기용량에 영향을 주지 않았다. 카페인으로 유도된 수축에서 이완이 더 빨랐고, rASPLM 심근세포에서 NCX1 전류 진폭이 더 높아져 PLM 억제가 NCX1 활성을 증가시킴을 나타냈다. 자연 상태의 쥐 심근세포에서 PLM과 NCX1의 연관성이 공동 면역침강 실험으로 확인되었다. 0.6 mM [Ca(2+)](o) 조건에서 rASPLM 세포는 대조 GFP 세포보다 유의하게 낮은 수축과 [Ca(2+)](i) 일과성 진폭을 보였다(P < 0.003). 5 mM [Ca(2+)](o) 조건에서는 수축 및 [Ca(2+)](i) 일과성 진폭이 rASPLM 세포에서 더 높았다. 이러한 rASPLM 세포의 수축 및 [Ca(2+)](i) 일과성 행동 패턴은 MI 후 쥐 심근세포에서 관찰된 것과 반대였다.

가설:
결론적으로, 정상 쥐 심근세포에서 PLM 발현 감소는 NCX1 기능을 강화하고 [Ca(2+)](i) 일시적 변화 및 수축 진폭에 영향을 미친다고 결론지었다.


전제:

[K+]o의 상승은 안정막 전위를 탈분극시키고 내향성 Na+ 전류(INa)를 부분적으로 불활성화하여 심근 허혈 시 전도 속도의 저하에 중요한 역할을 하는 것으로 여겨집니다. 다세포성 심실 준비에서 [K+]o의 상승은 막 탈분극만으로 예상되는 것보다 Vmax를 더 크게 감소시키는 것으로 제안되었습니다. 이러한 전압 비의존성 [K+]o 효과의 메커니즘은 현재 알려지지 않았으며, 단일 심장 세포에서의 그 중요성도 밝혀지지 않았습니다.
우리는 전압 및 전류 고정 조건에서 분리된 토끼 심방 및 심실 근육세포에서 INa와 활동전위 상승기에 대한 [K+]o 상승의 전압 비의존성 효과를 조사했습니다. 관류액의 [K+]는 5 mmol/L에서 14 또는 24 mmol/L로 변화시켰고, [Na+]는 150 mmol/L로 유지했습니다. 배양된 심방 세포와 신선하게 분리된 심방 및 심실 세포의 외막 절편(outside-out patches)에서는 [K+]o의 상승으로 INa의 진폭과 동역학에 변화가 없었습니다.
심방 세포에서 -70 mV의 유지 전위에서 유도된 활동전위는 5와 24 mmol/L [K+]o에서 유사한 Vmax(114.9 ± 5.7 vs. 112.2 ± 4.8 V/s, 평균 ± SEM, n = 6)와 활동전위 진폭(115.0 ± 2.4 vs. 113.4 ± 3.9 mV)을 나타냈습니다. 반면, 심실 세포에서 -70 mV의 유지 전위에서 [K+]o를 5에서 14 mmol/L로 증가시켰을 때 Vmax는 161.8 ± 18.0에서 55.3 ± 5.0 V/s로 감소했으며(n = 7, P < .001), 활동전위 진폭은 128.1 ± 1.3에서 86.6 ± 5.4 mV로 감소했습니다(P < .001).
[K+]o 상승에 의해 유도된 Vmax와 활동전위 진폭의 이러한 전압 비의존성 감소는 1 mmol/L Ba2+ 존재 시 사라졌으며, 이는 증가된 배경 K+ 전도도에 기인할 수 있음을 시사합니다.

가설:

우리는 허혈 중 예상되는 [K+]o의 상승이 심실 세포에서 Vmax의 현저한 전압 비의존성 억제를 유발하며, 이는 초기 허혈의 특징인 심근 전도 저하에 기여할 수 있다고 결론지었습니다.


전제:
세포외 칼슘(Ca²⁺(e))이 유도하는 분리된 페닐에프린(PE) 수축 장간막 동맥의 이완은 Ca²⁺ 감지 수용체(CaSR)를 발현하는 온전한 혈관주위 감각 신경망에 의존합니다. 수용체의 활성화는 사이토크롬 P450과 포스포리파제 A₂에 의존적이지만 대부분 내피세포와는 독립적인 엔도카나비노이드 혈관확장 경로를 자극합니다.

본 연구에서는 생쥐에서 분리한 PE 수축 장간막 저항 동맥의 CaSR 매개 이완에서 일산화질소(NO)의 역할을 규명했습니다. 자동 와이어 미세혈관계측기를 이용하여 NO 생성효소(NOS) 유전자 결핍(NOS(-/-))과 NOS의 약리적 억제가 PE로 수축된 동맥의 Ca²⁺(e) 유도 이완에 미치는 영향을 연구했습니다.

내피 NOS 결핍(eNOS(-/-))은 CaSR 발현을 증가시켰으나 신경 NOS 결핍(nNOS(-/-))은 발현을 감소시켰습니다. NOS(-/-)는 EC₅₀ 값의 변화 없이 최대 Ca²⁺(e) 유도 이완을 감소시켰으며, 특히 eNOS(-/-)에서 이 효과가 가장 크게 나타났습니다. 칼린돌과 Calhex 231에 대한 혈관 반응은 CaSR이 이완을 매개함을 나타냈습니다.

L-N⁵-(1-이미노에틸)-오르니틴은 C57BL/6 대조군 생쥐의 PE 수축된 동맥에서 Ca²⁺(e) 유도 이완을 약 38% 감소시켰으나 eNOS(-/-) 생쥐의 혈관에서는 더 작은 영향을 미쳤습니다. 7-니트로인다졸(7-nitroindazole)은 NOS(-/-) 생쥐의 동맥 이완에 유의한 영향을 미치지 않았으나, N(G)-니트로-L-아르기닌 메틸에스터와 N(G)-모노메틸-L-아르기닌은 모든 그룹에서 이완 최대치를 유의하게 감소시켰습니다.

흥미롭게도, nNOS 선택적 억제제인 S-메틸-L-티오시트룰린(S-methyl-L-thiocitrulline)은 C57BL/6 생쥐의 조직에서 EC₅₀ 값을 약 60% 증가시켰으나, nNOS(-/-) 생쥐의 조직에서는 최대 반응을 약 80% 감소시켰습니다. 이베리톡신에 의한 결과는 Ca²⁺ 활성화 대형 칼륨 채널이 이 과정에서 주요 역할을 함을 보여주었습니다.

가설:
결론적으로, 장간막 동맥에서 CaSR 신호 전달이 eNOS와 NO 생성을 자극하여 Ca²⁺(e) 유도 이완을 조절한다고 결론 내렸습니다.


전제:
혈관 확장 대사산물인 아데노신은 산소 수요가 공급을 초과하는 조직에서 종종 생성됩니다. 최근 우리는 분리된 캐뉼라 삽입 세동맥에서 아데노신과 그 대사산물인 이노신이 비만세포를 자극하여 혈관 수축을 유발할 수 있음을 입증했습니다. 생체 내에서 이노신에 의한 수축은 주로 히스타민과 트롬복산의 2차 방출에 의해 발생합니다.

본 연구에서는 생체 내 아데노신의 혈관운동 효과를 탐구하고, 혈관 수축을 매개하는 A3 아데노신 수용체의 역할을 조사했습니다. 생체 내에서 아데노신(10⁻⁶~10⁻⁴ mol/L)을 세동맥에 국소 적용했을 때 일관되게 농도 의존적인 혈관 확장이 나타났습니다. 그러나 일부 세동맥은 확장 후 수축이 이어지는 이중 반응을 보였으며, 이는 농도 의존적이었습니다. 세동맥의 37%는 10⁻⁴ mol/L 아데노신에 반응하여 초기 직경의 12.7 ± 4.3%만큼 수축했습니다.

A1 및 A2 아데노신 수용체 길항제인 8-(p-설포페닐)테오필린(8-SPT) 존재하에서는 동일 농도의 아데노신에 대한 확장이 감소하고, 수축이 강화되었습니다. 테스트된 세동맥의 85%가 초기 직경의 -44.3 ± 6.0%만큼 수축했습니다.

A3 아데노신 수용체는 비만세포로부터 매개 물질 방출을 촉진하는 것으로 알려져 있으며, 그 역할을 추가로 조사했습니다. A1 및 A3 아데노신 수용체 작용제인 N6-(3-아이오도-4-아미노벤질)아데노신(I-ABA)은 농도 의존적으로 혈관 수축을 유도했습니다. A1, A2, A3 수용체 길항제인 1,3-디프로필-8-(4-아크릴레이트)페닐잔틴(BW-A1433)은 8-SPT 처리 중 나타난 아데노신의 혈관 수축 반응을 유의하게 감소시켰습니다.

또한, 아데노신과 I-ABA 모두 비만세포의 루테늄 레드 섭취를 자극하여 탈과립화를 나타냈습니다. I-ABA에 의한 수축은 히스타민 및 트롬복산 수용체 길항제의 병합 처리에 의해 소실되었습니다.

가설:
결론적으로, 아데노신은 생체 내에서 혈관 수축을 유발할 수 있으며, 이는 종종 A2 수용체 매개 혈관 확장에 의해 가려질 수 있습니다.


전제:
우리는 K(+) 채널과 관련하여 아세틸콜린과 서브스턴스 P의 혈관 이완 기전을 비교하고, 원숭이와 개의 관상동맥에서 NO와 프로스타노이드 외에 내피 유래 물질의 특성을 약리학적으로 분석했다. 원숭이와 개의 관상동맥을 분리하여 동맥 절편의 등척성 긴장을 측정했다. 인도메타신과 N(G)-니트로-L-아르기닌(L-NA)으로 처리하고 프로스타글란딘 F(2α)로 부분적으로 수축된 개의 관상동맥 절편에서 아세틸콜린은 농도 의존적으로 이완을 유도했으며, 내피 제거로 인해 이완이 사라졌다. 고농도 K(+) 매질에 노출된 절편에서는 이완이 현저히 억제되었으나 완전히 소실되지는 않았다. 카리브도톡신과 아파민의 조합은 이완을 고농도 K(+) 매질과 유사한 정도로 강하게 억제했으나, 글리벤클라미드나 이베리톡신은 영향을 미치지 않았다. 이완은 포스포리파제 A(2) 억제제인 퀴나크린과 선택적 시토크롬 P450(CYP) 3A 억제제인 케토코나졸에 의해 현저히 억제되었으나, 선택적 CYP 2C 억제제인 설파페나졸에는 영향을 받지 않았다.
아세틸콜린과 달리, 서브스턴스 P에 의해 유도된 내피 의존적이고 인도메타신과 L-NA 저항성 이완은 고농도 K(+) 매질, 카리브도톡신과 아파민, 또는 케토코나졸에 의해 억제되지 않았다. 서브스턴스 P에 의한 이완은 퀴나크린과 5-리폭시게나제 억제제인 AA861에 의해 억제되었다. 원숭이 관상동맥에서, 인도메타신과 L-NA에 저항성을 보이는 아세틸콜린 유도 이완은 내피 제거와 고농도 K(+) 매질, 카리브도톡신과 아파민, 프로게스테론 및 케토코나졸 처리에 의해 완전히 억제되었으나, 이베리톡신이나 설파페나졸에 의해서는 영향을 받지 않았다. 서브스턴스 P는 원숭이 관상동맥을 이완시키지 않았다.

가설:
아세틸콜린에 의해 유도된 원숭이와 개의 관상동맥 내피 의존적, NO 및 프로스타노이드 비의존적 이완은 카리브도톡신과 아파민에 민감하지만 이베리톡신 비민감성인 Ca(2+)-활성화 K(+) 채널 개방 물질에 의해 매개된다고 결론 내렸다. 이러한 물질은 CYP3A 유래 아라키돈산 대사산물일 가능성이 있다.


전제:
우리는 전완 혈류(Forearm Blood Flow, FBF) 조절에 대한 Rho-관련 키나아제(ROK)의 역할을 규명하고, 내피세포 유래 산화질소(NO) 조절에서 ROK의 잠재적 역할을 확인하고자 하였다. 또한, 엔도텔린-1에 대한 수축 반응에 대한 파수딜의 효과를 기록하였다.
그 배경으로는, 미오신 경쇄(MLC)의 인산화는 수축 기전의 칼슘 감수성을 결정하며, MLC 인산화는 MLC 키나아제와 MLC 포스파타아제의 활성에 따라 조절된다. ROK는 Akt 경로 억제를 통해 NO 생성을 억제하는 것으로 제안되었다.

본 연구에서는 정맥 폐색 플레티스모그래피를 사용하여 12명의 건강한 지원자에게 ROK 억제제인 파수딜을 동맥내 주입하여 FBF에 미치는 영향을 분석했다. NO의 역할을 밝히기 위해 NO 클램프 조건에서 파수딜을 주입하였다. 그 결과, 파수딜은 용량 의존적으로 FBF를 80 µg/분에서 2.34 ± 0.21에서 6.96 ± 0.93 ml/100 ml 전완 용적으로 유의미하게 증가시켰다(P < 0.001). 1,600 µg/분에서 파수딜은 수축기, 이완기 및 평균 동맥압을 감소시키면서 심박수를 증가시켰다. 파수딜은 엔도텔린-1에 의한 혈관수축 효과를 제거하였다.

또한, 파수딜(80 µmol/분)에 대한 혈관 반응은 NO 클램프 조건에서 둔화되었다. NO 클램프 + 파수딜의 경우 104 ± 18%였고, 파수딜 단독의 경우 244 ± 48%였다(데이터는 주입된 팔과 주입되지 않은 팔 사이의 비율로 기준선 = 0%, P < 0.05, 통계적으로 유의미한 차이).

가설:
결론적으로, 1) 말초 및 전신 혈관 긴장은 ROK에 의존한다; 2) 파수딜에 의해 유도된 혈관 확장의 상당 부분은 NO에 의해 매개되며, 이는 혈관 내 이용 가능한 NO가 ROK에 의해 음성 조절된다는 점을 시사한다; 3) 엔도텔린에 대한 수축 반응은 ROK의 활성화를 수반한다


전제:
플루나리진의 토끼 장간막 동맥 평활근 절편에 대한 혈관 확장 효과를 조사하여 니페디핀과 비교하였다. 플루나리진(30-300 nM)은 100 mM K+를 포함한 Ca2+가 없는 용액에서 Ca2+에 의해 유도된 수축을 농도 의존적으로 억제하였다. 이중 역분석 결과, 이 억제는 낮은 농도(30-100 nM)에서는 경쟁적(니페디핀과 유사)으로, 높은 농도(0.3-1 µM)에서는 비경쟁적으로 나타났다.  후자는 사포닌 처리된 화학적으로 막 제거된 근육 절편에서 Ca2+에 의해 유도된 수축으로부터 추정된 수축 단백질의 억제와 부분적으로 관련된 것으로 보인다. 니페디핀 작용과는 달리, 플루나리진은 높은 K+에 의해 유도된 수축보다 노르에피네프린(NE)에 의해 유도된 수축을 더 강하게 억제했으며, 0.3 µM 농도에서 NE에 의한 수축을 완전히 차단하였다. 플루나리진은 또한 2 mM EGTA를 포함한 Ca2+가 없는 용액에서 NE에 의한 수축도 억제하였다. Ca2+가 없는 용액에서 NE는 포스파티딜이노시톨 4,5-비스포스페이트(PI-P2)를 빠르게 가수분해하고 포스파티드산(PA)을 생성하였으며, 플루나리진(30 및 300 nM)은 NE에 의해 유도된 PI-P2 가수분해 및 PA 생성을 억제하였으나, 니페디핀(100 nM)은 이러한 작용을 보이지 않았다. 그러나 플루나리진(100 nM)은 화학적으로 막 제거된 근육 절편에서 10 μM 이노시톨 1,4,5-트리스포스페이트에 의해 유도된 수축을 변화시키지 않았다.

가설:
결론적으로, 니페디핀과 달리, 낮은 농도의 플루나리진은 노르에피네프린에 의해 유도된 PI-P2의 가수분해 및 PA 생성에 간섭함으로써 Ca2+에 의해 유도된 수축을 억제한다.


전제 :
경골어류는 순수한 다량 영양소를 섭취할 때 에너지 섭취량을 조절할 수 있지만, 이러한 다량 영양소 선택을 조절하는 정확한 메커니즘은 아직 밝혀지지 않았다. 콜레시스토키닌(CCK)이 포유류에서 다량 영양소 선택 패턴을 변경한다고 보고된 바 있어, 우리는 CCK를 유럽 농어에 경구 투여하여 개별 캡슐화된 다량 영양소 선택에 미치는 영향을 탐구했다.

5일 연속으로 젤라틴 캡슐로  투여한 CCK(0.05, 0.15, 0.25 mg/kg 체중)는 고용량에서 총 식이 섭취량을 각각 21%, 28%, 51% 상당히 억제했다. 이는 모든 다량 영양소의 섭취량을 균등하게 감소시켰고 식단의 상대적 비율에는 영향을 미치지 않았다.

비특이적 CCK 수용체 길항제인 프로글루미드를 5, 15 및 25 mg/kg BW(체중) 용량으로 경구 투여했을 때, 총 식이 섭취량이 각각 2, 18 및 44% 증가했다. 가장 높은 용량에서는 CH(탄수화물) 섭취량이 52%, P(단백질) 섭취량이 43% 증가했다. 프로글루미드(25 mg/kg BW)와 CCK(0.25 mg/kg BW)를 단일 선행 캡슐로 함께 투여했을 때 CCK 단독 투여 시 관찰된 효과가 차단되었다.

가설:
결론적으로, 경구 투여된 프로글루미드는 총 식이 섭취량과 개별 다량 영양소 섭취량 모두에 대해 식욕 억제 효과를 유발했으며, 이 효과는 프로글루미드 길항제인 CCK에 의해 상쇄된다.


전제:
시상하부 실방핵(paraventricular hypothalamic nucleus, PVN)은 새로운 펩타이드인 그렐린의 식욕 증진 특성을 통합하는 것으로 보인다. 따라서, 우리는 PVN 내 주입된 그렐린에 의해 유도된 섭식의 중추신경계 기전을 조사했다. 연구 결과, PVN에 주입한 0.03 nmol의 그렐린이 음식 섭취를 증가시키는 가장 낮은 용량임을 확인했으며, 이는 PVN 자체뿐만 아니라 시상하부 궁상핵, 배내측핵, 편도체 중심핵, 고립로핵을 포함한 다양한 섭식 관련 뇌 영역에서도 c-Fos 면역반응성(신경 활성화의 표지자)을 유도했다.

가설:
결론적으로, 그렐린은 PVN 및 기타 섭식 관련 뇌 영역의 뉴런을 활성화하여 음식 섭취를 촉진한다.


전제:
렙틴은 골량의 중추 조절에 중요한 역할을 하며, 그렐린은 렙틴의 작용을 상쇄하는 역할을 한다. 본 연구에서는 Sprague-Dawley 쥐에 만성적인 뇌실내(intracerebroventricular) 그렐린 투여(1.5 μg/일, 21일 동안)가 골량에 미치는 영향을 조사했다. 쥐는 대조군, 그렐린 자유섭취군(ghrelin ad libitum-fed), 및 그렐린 짝급식군(ghrelin pair-fed)으로 나뉘었다. 뇌실내 그렐린 주입은 대조군과 비교했을 때 그렐린 자유섭취군에서 체중을 유의미하게 증가시켰으나, 그렐린 짝급식군에서는 체중 증가가 나타나지 않았다.

만성적인 뇌실내 그렐린 주입은 대조군에 비해 그렐린 짝급식군에서 골량을 유의하게 증가시켰다. 이는 경골 소주골의 골 부피 백분율, 소주 두께, 소주 수, 체적 골 무기질 밀도(volumetric bone mineral density)의 증가로 나타났다. 대조군과 그렐린 자유섭취군 간의 소주골량에는 유의미한 차이가 없었다.

또한, 만성 뇌실내 그렐린 주입은 그렐린 짝급식군에서 대조군보다 무기질 침착률(mineral apposition rate)을 유의미하게 증가시켰다.

가설:
결론적으로, 만성적인 중추 그렐린 투여는 체중과 무관한 메커니즘을 통해 골량을 증가시킨다. 이는 그렐린이 중추신경계를 통해 골 형성 촉진 효과를 가질 수 있음을 시사한다.


전제:
콜레시스토키닌(CCK) 또는 염화리튬(LiCl)의 전신 투여는 쥐에서 위 운동과 음식 섭취를 억제한다. 시상하부 실방핵(PVN) 내 뇌간으로 투사하는 옥시토신(OT) 뉴런이 CCK와 LiCl에 의한 위 운동과 음식 섭취 억제 효과를 매개하는 것으로 제안되었다. 본 연구에서, 우리는 PVN을 절단한 지 12-20시간 후 쥐에서 기저 위 운동이 증가했음을 확인했다. 그러나 이 효과는 3일 후 사라졌다. 또한 CCK와 LiCl은 PVN 절단 후 12-20시간, 3일, 그리고 3주 후에도 위 운동을 억제했지만, 억제 효과는 약해졌다. PVN에 국소 마취제인 리도카인을 주사했을 때 급성 PVN 절단과 유사한 효과가 나타났다. PVN 절단된 쥐에서 CCK와 LiCl의 음식 섭취 억제 효과는 모의 병변 쥐와 차이가 없었다.

가설:
결론적으로, 위 운동은 PVN을 지속적으로 억제하며 CCK와 LiCl이 쥐의 PVN과 음식 섭취에 미치는 억제 효과에 참여하지만, 필수적이지는 않다고 결론 내렸다.


전제:
경골어류 연어 칼시토닌(sCT)은 포유류 칼시토닌(CT)과 달리 골격근에서 아밀린 및 칼시토닌 유전자 관련 펩타이드(CGRP)와 유사한 생리적 작용을 나타낸다. 이 펩타이드들은 또한 숫양에서 음식 섭취를 감소시키는 것으로 알려져 있다. sCT는 아밀린과 달리 아밀린 결합 부위에 비가역적으로 결합하므로, 본 연구의 목적은 두 펩타이드의 식욕 억제 효능을 비교하는 것이었다. sCT가 아밀린 결합 부위와의 상호작용을 통해 음식 섭취를 줄이는지 확인하기 위해, 적절한 길항제(CORP 8-37, AC 187)가 sCT의 식욕 억제 효과를 완화시키는지도 검토했다. 마지막으로, 쥐 칼시토닌(rCT)과 sCT가 동일한 수준으로 음식 섭취를 줄이는지 여부를 알아보고자 했다. 펩타이드는 24시간 동안 절식한 쥐에게 어둠이 시작될 때 복강 내로 주입되었다. 5 또는 0.5 μg/kg 용량에서 sCT의 식욕 억제 효과는 아밀린보다 더 강력하고 오래 지속되었다(예: 5 μg/kg에서 sCT는 10시간 이상, 아밀린은 약 2시간). CORP 8-37과 AC 187(10 μg/kg)은 sCT(0.5 μg/kg)의 식욕 억제 작용을 현저히 감소시켰다. sCT와 달리 rCT(0.5 μg/kg)는 음식 섭취에 영향을 미치지 않았다.

가설:
결론적으로, sCT가 아밀린보다 더 강력하고 오래 지속되는 식욕 억제 작용을 보이는 것은 sCT가 아밀린 결합 부위와의 상호작용을 통해 음식 섭취를 감소시킨다는 것을 시사한다.


전제:
ATP에 의한 퓨린성 수용체 자극과 낭포성 섬유증 막관통 조절기(CFTR) 활성화는 모두 아밀로라이드-감수성 Na+ 수송을 억제하고 Cl- 분비를 활성화한다. 이러한 이온 수송 변화는 세포 부피에 영향을 미칠 수 있다. 따라서 우리는 세포 수축이나 세포 팽창이 상피 조직이나 아프리카발톱개구리 난모세포에서 아밀로라이드-감수성 Na+ 수송에 영향을 미치는지, 그리고 삼투 스트레스가 ATP 또는 CFTR에 의한 Na+ 수송 조절에 간섭하는지를 조사했다. ATP/UTP에 의한 퓨린성 수용체 자극이나 IBMX 및 포스콜린에 의한 CFTR 활성화는 각각 생쥐 기관 및 결장에서 Cl- 의존적 기전을 통해 아밀로라이드-감수성 수송을 억제하였다. 고장성 용액에 노출되었을 때, 저장성 용액과는 달리 생쥐 기관과 결장에서 아밀로라이드-감수성 Na+ 수송이 세포외 Cl- 농도와 무관하게 억제되었다. 고장성 용액과 ATP에 의한 Na+ 수송 억제 효과는 가산적이었다. 아프리카발톱개구리 난모세포에서 함께 발현된 경우, IBMX와 포스콜린에 의한 CFTR 활성화는 Cl- 의존적으로 상피 Na+ 채널(ENaC)을 억제하였다. 그러나 고장성 및 저장성 용액은 Cl- 농도와 상관없이 아밀로라이드-감수성 전도도에 미미한 영향을 미쳤다. 또한, CFTR에 의한 ENaC 억제는 고장성 또는 저장성 용액에 노출된 후에도 난모세포에서 감지되었다.

가설:
결론적으로, 생쥐의 기도와 결장에서 아밀로라이드-감수성 Na+ 흡수는 세포 수축에 의해 억제되며, 이 메커니즘은 퓨린성 및 CFTR 매개 ENaC 억제와 무관한 기전으로 결론 내린다.


전제:
두꺼운 상행각(TAL)의 NaCl 흡수는 능동 수송을 포함하므로 산화적 인산화에 의존한다. 세포외 ATP는 다면적 효과를 가지며, 이는 수송의 자극과 억제 및 산화적 인산화의 억제를 포함한다. 그러나 ATP가 TAL 수송을 변화시키는지와 그 방식에 대해서는 명확하지 않다. 우리는 ATP가 Na+ 유입을 감소시켜 TAL의 Na+ 흡수를 억제한다고 가설을 세웠다. TAL 현탁액에서 산소 소비를 측정했다. ATP는 농도 의존적으로 산소 소비를 감소시켰다. 퓨린성(P2) 수용체 길항제인 수라민(300 μM)은 TAL 산소 소비에 대한 ATP의 효과를 차단했다(147 ± 15 vs. 146 ± 16 nmol O₂ × min⁻¹ × mg 단백질⁻¹). 반면, 아데노신 수용체 길항제인 테오필린은 ATP의 산소 소비 효과를 차단하지 않았다. Na-K-2Cl 공동수송과 Na/H 교환이 푸로세미드(100 μM)와 디메틸 아밀로라이드(100 μM)로 억제되었을 때, ATP는 TAL 산소 소비를 억제하지 않았다(78 ± 13에서 98 ± 5 nmol O₂ × min⁻¹ × mg 단백질⁻¹). Na 이온 운반체인 니스타틴(nystatin, 200 U/ml)은 ATP 처리군 및 차량 처리군 모두에서 TAL 산소 소비를 유사한 정도로 증가시켰다(368 ± 41 vs. 397 ± 47 nmol O₂ × min⁻¹ × mg 단백질⁻¹). 산화질소 합성효소 억제제인 NG-nitro-L-arginine methyl ester(3 mM)는 TAL 산소 소비에 대한 ATP의 효과를 억제했다(157 ± 10 vs. 165 ± 15 nmol O₂ × min⁻¹ × mg 단백질⁻¹). P2X 선택적 수용체 길항제인 NF023은 산소 소비에 대한 ATP의 효과를 차단했으며, P2X 선택적 작용제인 beta-gamma-Me-ATP는 농도 의존적으로 산소 소비를 감소시켰다.

가설:
우리는 ATP가 TAL에서 Na+ 유입을 줄여 Na+ 수송 관련 산소 소비를 촉진하며, 이 효과는 P2X 수용체와 산화질소에 의해 매개된다고 결론 내린다.


전제:
우리는 이전에 단백질-티로신 키나제 억제가 신장 외수질 칼륨 채널 1 (ROMK1) 채널 활성을 증가시키는 반면, 단백질-티로신 인산화효소(PTP) 억제는 ROMK1 채널 활성을 감소시킨다는 것을 보여주었다 (1). 이번 연구에서는 공초점 현미경, 패치 클램프 기법, 비오틴 라벨링을 활용하여 ROMK1 이동 조절에서 티로신 인산화의 역할을 추가적으로 조사하였다.
인간 배아 신장 293세포에 c-Src와 녹색 형광 단백질-ROMK1을 공동 형질주입했으며, 이는 ROMK1과 동일한 생물물리학적 특성을 가진다. 패치 클램프 실험 결과, 단백질-티로신 인산화효소 억제제인 페닐아르신산(PAO)이 ROMK1의 활성을 감소시켰다. 또한 PAO를 추가하면 공초점 현미경으로 관찰된 녹색 형광 단백질-ROMK1의 세포 표면 위치가 줄어들었고, 비오틴 라벨링으로 측정된 표면 ROMK1 밀도도 65% 감소하였다. 또한, PAO 처리는 ROMK1의 인산화를 유의하게 증가시켰다. PAO의 효과가 티로신 인산화에 의해 유도된 ROMK1의 세포내이입을 촉진함으로써 매개된다는 개념은 ROMK1의 티로신 잔기 337을 알라닌으로 변이시킨 경우 PAO의 효과가 사라졌다는 발견으로도 뒷받침되었다. 마지막으로, PAO가 ROMK1에 미치는 억제 효과는 우성 음성 다이나민(dynaminK44A)으로 공동 형질주입된 세포에서 완전히 차단되었다. 이는 ROMK1의 티로신 인산화에 의한 세포내이입이 다이나민에 의존함을 시사한다.

가설:
PTP가 다이나민 의존적 기전을 통해 ROMK1의 세포내이입을 촉진한다고 결론지었다.


전제:
부티레이트는 포유류 대장에서 염 흡수를 자극한다. 우리는 부티레이트가 Cl⁻ 분비에도 영향을 미치는지 조사하였다. 수컷 Sprague-Dawley 쥐의 원위 대장 점막 조각과 T84 세포를 어싱 챔버(Ussing chambers)에서 연구하였다. 대조군 대장에서 1 mM 디부티릴 아데노신 3',5'-사이클릭 모노포스페이트(DBcAMP)는 단락 전류(Isc)와 장막에서 점막 방향으로의 Cl⁻ 플럭스(JsmCl)를 각각 3.2 ± 0.8 및 2.9 ± 0.8 μeq·cm⁻²·h⁻¹ 증가시켰다. 점막 또는 장막에 25 mM 부티레이트를 추가하자 DBcAMP에 의해 유도된 Isc와 JsmCl의 증가가 방지되었다.점막 또는 장막 25 mM 부티레이트는 DBcAMP로 유도된 Isc와 JsmCl의 증가를 방지했다. 4 mM 및 8 mM 부티레이트는 JsmCl과 Isc 증가의 반감을 각각 유발했다. 부티레이트는 또한 기저 JsmCl을 2.0 ± 0.4 μeq·cm⁻²·h⁻¹만큼 억제했지만, 카바콜 매개 Cl⁻ 분비는 억제하지 않았다. 25 mM 농도에서 다른 단쇄 지방산(SCFA)의 상대적 억제 효능은 세포 대사 정도와 일치했다. 그 순서는 부티레이트 > 아세테이트 = 프로피오네이트 > 이소부티레이트였다. 25 mM 농도에서 모든 SCFA는 점막 세포 내 pH(pHi)를 일시적으로 0.1 pH 단위만큼 감소시켰다. 무손상 T84 세포에서 50 mM 부티레이트는 DBcAMP에 의해 유도된 Isc 상승을 55% 억제하였다. 니스타틴으로 기저외측막을 투과시킨 T84 세포에서는 부티레이트가 Isc 상승을 82% 억제하였다.

가설:
부티레이트는 pHi와 무관한 — 아마도 정단막에 위치한 — 기전을 통해 기저 및 cAMP 매개 Cl⁻ 분비를 촉진한다고 결론을 내렸다.


전제:
음이온 분비 억제제가 낭포성 섬유증(CF, Cystic Fibrosis)의 중요한 폐 질환 양상을 재현하므로, 이러한 길항제가 기도 점액 형태에 미치는 영향을 격리 관류된 돼지 폐(isolated perfused pig lungs)에서 평가했다. 각각 돼지 기도에서 Cl⁻와 HCO₃⁻ 분비를 차단하는 최대 억제 농도의 부메타나이드와 디메틸아밀로라이드는 기도 표면에 조밀한 '붙어있는' 점액 형성을 유도하고, 섬모 주위 체액이 고갈되며 섬모가 붕괴되었다.

이 효과는 점막하 샘 분비를 자극하기 위해 베타네콜에 추가로 노출된 경우 더욱 두드러졌으며, 이때 붙어있는 점액이 기도 표면의 98% 이상을 덮었다. 베타네콜은 또한 음이온 분비 억제제가 없는 경우 샘 관의 뮤신 함량을 감소시켰으나, 있을 때는 그렇지 않았다. 음이온 분비 억제제는 배상세포의 탈과립을 측정 가능한 수준에서 유도하지 않았다.

가설:
우리는 돼지 폐에서 음이온 및 액체 분비의 억제가 기도 표면 점액의 정상적인 형태를 방해한다는 결론을 내렸다. 이는 단독으로 손상된 음이온 분비가 낭포성 섬유증(CF) 폐 질환의 주요 특징을 설명할 수 있다는 추가적인 증거를 제공한다고 결론지었다.


전제:
우리는 비타민 A(VA)와 레티노산(RA)이 신생 쥐의 폐 레티닐 에스터 함량을 상승시키는 상승 효과를 발휘한다는 것을 확인했다. 이 생화학적 상승 효과가 초기 신생 쥐의 고산소증으로 인한 폐 손상을 완화하는지 확인하기 위해, 우리는 출생 후 4일 동안 신생 C57BL/6 마우스를 95% 산소(O₂) 또는 공기에 노출시켰다. 매일 경구로 투여된 약제는 [대조군, VA, RA, 또는 비타민 A+레티노산 조합(VARA)]이었다.
폐와 간의 레티닐 에스터 함량을 측정하고, 폐 손상과 발달을 평가하였다. 우리는 폐의 레티닐 에스터 수준이 VA나 RA 단독보다 VARA에 의해 더 크게 증가했으며, 이는 간에서는 나타나지 않았다. 고산소증에 의한 폐 손상은 VA와 RA에 의해 감소했으며, VARA에 의해 그 효과가 더욱 컸다.
VARA는 고산소증으로 유도된 대식세포 염증 단백질(MIP)-2 mRNA와 단백질 발현의 증가를 완화했으나, 고산소증으로 유도된 펩타이드 성장 인자(PDGF, VEGF, TGF-β1)에는 영향을 미치지 않았다. 4일간의 고산소증이나 레티노이드 노출은 폐 발달에 관찰 가능한 차이를 초래하지 않았다.

가설:
우리는 VARA 조합이 신생 쥐의 폐 레티닐 에스터 농도와 고산소증으로 유발된 폐 손상을 완화하는 데 시너지 효과가 있으며, 이는 염증 매개체의 조절을 통해 가능할 수 있다고 결론 내린다.


전제:
여러 약물이 계면활성제 인지질 대사를 자극하는 것으로 밝혀졌다. 특히 베타-아드레날린 작용제는 생리적 조건에서 중요한 역할을 한다. 우리는 처음으로 이산화질소(NO₂) 흡입이 분리된 폐 모델에서 계면활성제 인지질 대사의 베타-아드레날린성 조절에 미치는 영향을 조사하였다. 실험에서 쥐를 5 ppm 농도의 NO₂가 포함된 대기 중에 48시간 동안 지속적으로 노출시켰다. 이후 폐를 분리하여 베타-아드레날린 작용제인 도펙사민을 투여한 상태에서 관류 실험을 진행하였으며, 계면활성제 대사를 다음 세 가지 폐 구획에서 연구하였다: (1) 폐 세척액, (2) 폐 조직, (3) 세척으로 얻은 폐포 세포. 실험 결과는 다음과 같다: (1) 정상 쥐의 폐에서 도펙사민은 관류액에서 유래한 팔미트산과 콜린을 폐 세척액의 인지질로 통합하는 양을 증가시켰다. 그러나 NO₂에 노출된 쥐의 폐에서는 베타-아드레날린성 자극이 전구체 통합의 증가를 유발하지 않았다. 정상 쥐와 NO₂ 노출 쥐 간 자극이 없는 상태에서의 전구체 통합에는 유의미한 차이가 없었다. (2) NO₂에 노출된 쥐의 폐 조직에서는 세포 내 풀의 크기가 증가하여 디사튜레이티드 포스파티딜콜린으로의 전구체 통합이 감소하였다. (3) 세척으로 얻은 폐포 세포는 NO₂ 흡입 후와 베타-아드레날린성 자극에 의해 팔미트산 섭취가 증가하였다.

가설:
이 데이터는 NO₂ 흡입이 폐 계면활성제 인지질 대사의 베타-아드레날린성 조절을 방해한다는 결론을 시사한다


전제:
우리는 만성 폐 림프관 누공이 있는 깨어있는 양에게 내독소(1 μg/kg) 주입 직후 과립구 집락 자극 인자(G-CSF)를 일시적으로 250 μg/체중의 용량으로 투여하여, 내독소로 유발된 폐 손상에 대한 G-CSF의 사후 치료 효과를 조사했다. 실험에서 폐의 혈역학적 지표, 폐 림프 흐름, 그리고 혈장과 폐 림프에서 트롬복산 B2와 6-케토-프로스타글란딘 F1 알파의 농도를 측정했다. G-CSF 사후 치료 그룹에서 폐동맥압, 폐혈관 저항, 폐 림프 흐름은 후기(내독소 주입 후 3-5시간)에 유의미한 증가를 보이지 않았다. 또한 후기의 동맥 산소 분압은 내독소만 투여받은 양에 비해 G-CSF 사후 치료를 받은 양에서 더 높았다. 내독소 투여 1시간 후 혈장 트롬복산 B2 농도는 유의하게 증가했으나, G-CSF 사후 치료 그룹에서는 폐 림프 흐름이 크게 증가하지 않았다.

가설:
G-CSF의 사후 처치가 내독소에 의해 유발된 폐 손상을 예방한다고 결론 내릴 수 있다.


전제:
담배 흡연자는 세균 감염에 직면할 때 기도 과민반응(AHR)이 증가하는 경향을 보인다. 본 연구는 이 과도한 평활근 반응의 기전을 분석하기 위해 쥐 장기 배양 모델을 사용하였다. 니코틴은 흡연의 영향을 모방하고, LPS는 세균 감염을 나타낸다. 특정 MAPK 억제제와 함께 또는 없이 4일 동안 증가하는 농도의 LPS 및/또는 니코틴으로 기관 배양한 후 분리된 쥐 기관 세그먼트의 수축 반응을 근육장력측정기에서 분석했다. 또한, 니코틴이 세포 표면 톨 유사 수용체(TLR), MCP-1, COX-2, 및 TNF-α 발현에 미치는 영향은 실시간 PCR을 통해 분석되었다. 단백질 발현 증가는 면역조직화학법을 통해 확인되었다. LPS는 농도 의존적으로 bradykinin과 des-Arg(9)-bradykinin에 대한 수축 반응을 증가시켰다.니코틴과 저용량 LPS의 조합은 키닌 수용체 발현 증가와 함께 강력한 상승적 수축을 유발했다. 특정 키닌 B1 및 B2 수용체 억제제가 이 반응을 차단했다. 니코틴은 상피와 평활근층에서 TLR4와 -6의 mRNA 및 단백질 발현을 증가시켰고, MCP-1과 COX-2 mRNA도 병행하여 증가했다. JNK의 특정 억제는 니코틴의 효과를 감소시켰다.

가설:
결론적으로, 장기간의 니코틴 노출은 JNK 관련 경로를 통해 TLR4 및 TLR6의 발현을 상향 조절하여 LPS로 유도된 국소 기도 염증을 악화시키고 기도과민성(AHR)이 증가한다.


전제:
표피 성장 인자(EGF)와 베타메타손이 태아 폐 발달 중 기체 교환 영역의 형태 형성과 폐포 II형 세포의 분화에 미치는 영향을 비교하기 위해, 태아 레서스 원숭이(임신 78%)에 대해 7일 동안 격일로 자궁 내에서 EGF(총 5.33 mg/kg), 베타메타손(총 2.6 mg/kg), 또는 생리식염수(대조군)를 투여하였다. EGF를 투여받은 원숭이는 체중과 부신 무게가 유의미하게 증가했다. 반면에, 베타메타손을 투여받은 원숭이는 체중과 부신 무게가 유의미하게 감소하였다. 외인성 EGF는 폐포 II형 세포 내의 세포질 글리코겐을 감소시키고, 세포질 소기관과 SP-A 함량을 증가시켰다. 반면, 외인성 베타메타손은 폐포 II형 세포의 세포 분화를 변화시키지 않았다. EGF와 베타메타손 투여 모두 폐포 공기 공간 크기나 기체 교환부 중 잠재적 기도 공간의 비율이 대조군과 변화가 없음을 보였다. 이는 기체 교환 영역의 구조가 두 처리에 의해 크게 변화하지 않았음을 나타낸다.

가설:
임상적으로 유의한 용량에서 EGF는 폐포 II형 세포의 성숙을 크게 가속화하는 반면, 베타메타손은 그러한 효과가 없다는 결론을 내린다.


전제:

드라베 증후군(DS)은 일반적으로 나트륨 채널 유전자 SCN1A의 돌연변이로 인한 심각한 소아 발병 간질입니다. DS 환자는 간질에서의 원인 불명 돌연사(SUDEP) 위험이 높으며, 이는 주로 심장 기전에 의한 것으로 널리 알려져 있습니다. 본 연구에서는 DS 환자들이 발작 전후에 호흡 기능 장애를 흔히 겪는다는 것을 보여줍니다. 한 환자는 비디오 EEG 모니터링 중 심각하고 지속적인 발작 후 저환기 상태를 보였으며, 이후 SUDEP로 사망하였습니다. Scn1a<sup>R1407X/+</ 기능 상실 돌연변이를 가진 쥐들을 모니터링한 결과, 자발적 및 열 유발 발작 후 중추성 무호흡에 이어 진행성 서맥으로 사망했습니다. 고열 또는 최대 전기 충격으로 유발된 발작 후 기계 환기를 통해 사망을 예방할 수 있었습니다. 무스카린 수용체 길항제를 말초 부교감 신경 차단에 선택적인 용량으로 투여했을 때는 서맥이나 사망을 예방하지 못했지만, 혈액뇌장벽을 통과할 수 있을 만큼 높은 용량으로 투여했을 때는 무호흡, 서맥, 사망을 예방했습니다. 매우 낮은 용량으로 뇌실내 주입한 무스카린 수용체 길항제는 무호흡, 서맥, 사망을 예방했습니다.

가설:
우리는 DS 환자에서 SUDEP가 주로 일차성 중추 무호흡으로 인해 발생할 수 있으며, 이는 저산소증이 심장 근육에 직접적인 영향을 미쳐 서맥을 유발하기 때문이라고 결론지었습니다.


전제:

상염색체 우성 유전성 강직성 하반신마비(AD-HSP)는 하지의 진행성 경직을 특징으로 하는 유전적으로 다양한 신경퇴행성 질환이다. 2p21-p22에 위치한 SPG4 유전자좌는 모든 AD-HSP 가계의 40-50%를 차지한다. SPG4 유전자는 최근에 확인되었다. 성인과 태아 조직에서 널리 발현되고 AAA 계열 ATPase인 스파스틴을 암호화합니다. 우리는 독일 AD-HSP 가계에서 네 가지 새로운 SPG4 돌연변이를 확인했으며, 여기에는 조기 발병이 제안된 대가족이 포함된다.
확인된 돌연변이에는 워커 모티프 B에 영향을 미치는 하나의 프레임시프트 돌연변이와 하나의 과오 돌연변이가 포함된다. 추가로, 두 개의 돌연변이는 각각 인트론 12와 인트론 16의 두 공여 스플라이스 부위에 영향을 미친다. RT-PCR 분석결과, 두 공여 스플라이스 부위 돌연변이로 인해 엑손 생략과 비정상적으로 스플라이싱된 SPG4 mRNA의 안정성 감소가 확인되었습니다. 모든 돌연변이는 정상 기능을 갖춘 단백질의 소실을 초래할 것으로 예측된다.

가설:

우리는 AD-HSP가 SPG4 유전자에서의 기능 상실 돌연변이에 의해 유발된다고 결론을 내렸습니다.