Premise:
A ti daba pe ohun ìdínà metalloproteinases-1 (TIMP-1) ní ìkópa nínú ìwosàn ara-ẹni tí ìjẹ́ ẹ̀dọ̀. Ète ìwádìí yìí jẹ́ láti wádìí bóyá TIMP-1 yí ìwosànárá tí ìjẹ́ ẹ̀dọ̀ padà ní ìdàpọ̀ pẹ̀lú ìdínà matrix metalloproteinases (MMP) àti ìmúdájú hẹpátíkì stẹ́látè sẹ́lì (HSC). Ẹ̀dọ̀ àwọn ẹranko ẹ̀dọ̀-olóhun TIMP-1 transgenic (TIMP-Tg) àti àwọn ẹranko ìdarí hybrid (Cont) ni a ko jáde ní ọjọ́ 0, 3, 7, àti 28 lẹ́yìn ìwosànárá láti ìjẹ́ ẹ̀dọ̀ tí CCl(4) fà. Ìwọ̀n ìwosàn ìjẹ́, ìhànsí MMP, àwọn sẹ́lì alpha-smooth-muscle actin (alpha-SMA) tó dájú, àti procollagen-(I) messenger RNA (mRNA) nínú ẹ̀dọ̀ ni a díwọ̀n ní àwọn àkókò kọ̀ọ̀kan ní àwọn ẹgbẹ́ méjèèjì. A tún yẹ ipa TIMP-1 lórí ìparẹ́ HSC wò. Àwọn ẹranko TIMP-Tg fi hàn pé ìwosàn ìjẹ́ ẹ̀dọ̀ tí ara-ẹni ní ìdínà tí ó ṣe pàtàkì ní ìfiwèé pẹ̀lú ẹranko Cont. Iye hydroxyproline, iye àwọn sẹ́lì alpha-SMA tó dájú, àti procollagen-(I) mRNA yára dínkù pẹ̀lú àkókò ní àwọn ẹranko Cont, nígbàtí àwọn àmì wọ̀nyí kò yí padà púpọ̀ ní àwọn ẹranko TIMP-Tg. Ìwọ̀n irú ìṣiṣẹ́ metalloproteinases-2 (MMP-2) ní àwọn ẹranko TIMP-Tg kéré ju èyí tí àwọn ẹranko Cont ní lọ. TIMP-1 dínkù àwọn sẹ́lì ìparẹ́ nonparenchyma ní apá pàtàkì nínú àwòṣe ìwosàn ìjẹ́ ẹ̀dọ̀, ó sì tún dínà ìparẹ́ HSC tí ó ní ìbámu pẹ̀lú ìdínà ìṣiṣẹ́ caspase-3 in vitro.

Hypothesis:
Ní ìparí, fíbrósì ṣe dín ìfojúsí ìfaradá ẹ̀dọ̀fóró TIMP-1 kí bẹ́ẹ̀ sí, nípa àpapọ̀ ìdínkù ìṣiṣẹ́ MMP àti ìdínà àfaraparẹ́ nínú àwọn hóró ajohùn dídúró (HSC).


Premise:
Fàìbíróòsì ẹ̀dọ̀, èyí tí jẹ́ ìṣẹ̀lẹ̀ pàtófíṣìọ́lọ́jíìkì ẹ̀dọ̀ nítorí ìwòsàn ọgbẹ́ tó dúró pẹ́ sí ìfarapa ẹ̀dọ̀ tó wà lójú kan, yóò lọ́jọ́ kan di sírósìsì. Puerarin, glúkósídì ìsọfláfónù ní ìṣiṣẹ́-ara tí a rí láti oògùn ìbílẹ̀ Sháínà tí a mọ̀ sí pueraria, ti jẹ́ àkọsílẹ̀ pé ó ní ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn ohun ini tí ó lè takò ìwúwo àti fàìbíróòsì. Síbẹ̀síbẹ̀, àwọn ọ̀nà-ìṣiṣẹ́ pàtàkì kò sí tí a ṣe ìwádìí dáadáa síbẹ̀. Ìwádìí yìí ní àfojúsùn láti ṣe ìwádìí ipa tí puerarin ní lórí ìṣiṣẹ́ ẹ̀dọ̀ àti ìlọsíwájú fàìbíróòsì nínú ẹ̀lẹ́dẹ̀ tí a fi CCl4 mú. Ẹ̀lẹ́dẹ̀ C57BL/6J jẹ́ abẹ́rẹ́ sínú ikùn pẹ̀lú 10% CCl4 nínú òróró ólífù (2mL/kg) pẹ̀lú tàbí láìsí ìfún puerarin papọ̀ (100 àti 200mg/kg abẹ́rẹ́ sínú ikùn lẹ́ẹ̀kan lójúmọ́) fún ọ̀sẹ̀ mẹ́rin ní ìtẹ̀lé ara wọn. Bí ó ti jẹ́ hàn nípasẹ̀ àwọn ẹ̀nsáìmù ẹ̀dọ̀ sírọ̀mù tí ó dára àti àwọn àìṣedéédé hísítòpátólójì tí ó dínkù, dátà tí a kójọ fi hàn pé puerarin lè dáàbòbò lòdì sí ìfarapa ẹ̀dọ̀ ajẹmọ́-CCl4 tó pẹ́. Síwájú sí i, idàgbàsókè fàìbíróòsì tí CCl4 fà, bí ó ti hàn nípasẹ̀ ìfẹ̀súfẹ̀sú tí ń pọ̀ sí i àwọn tísú àlàfo ẹgbẹ́ tútù (α-SMA), kólágẹ̀n-1, fákítà ìdàgbàsókè ìyípadà (TGF)-β àti fákítà ìdàgbàsókè tísú ìsopọ̀ (CTGF) nínú ẹ̀dọ̀, ni puerarin fi dínkù. Àwọn ọ̀nà-ìṣiṣẹ́ tí ó ṣeéṣe tí ó jọmọ́ àwọn ipa ìdínkù wọ̀nyí ni a mọ̀ nípasẹ̀ ìdíwọ́ lórí ọ̀nà ìfihàn NF-κB, ìpèsè àwọn èròjà ọ́síjẹ́nì aláìdúró (ROS) àti àìṣiṣẹ́ mítókóndíríà ní abẹ́lé. Ní àfikún, àwọn ìdáàbòbò ìdíwọ́ tí a dárúkọ lókè ni a ń darí nípasẹ̀ ìdínkù ìfihàn PARP-1 nítorí puerarin nígbà tí puerarin lè dínkù ìfihàn PARP-1 nínú ẹ̀dọ̀ tí CCl4 ti bàjẹ́ àti PJ34, irú olùdíwọ́ PARP-1 kan, tí ó ṣe àfarawé àwòṣe ìdáàbòbò puerarin.

Hypothesis:
Ní ìparí, puerarin ṣe àgbékalẹ̀ ojúṣe ààbò nínú ìfàdojúdì-ẹ̀dọ̀ dídoríbá CCl4 ó ṣeéṣe láti dìbò PARP-1 àti ìdínkù àṣeyọrí NF-κB, ìṣe ROS àti ìléwọ̀n mitochondrial.


Premise:
Polyenylphosphatidylcholine (PPC), èyí tí ó jẹ́ èyíkéyìí ní phospholipid extract láti inú soy beans, ń dínà dídàgbà àìsàn liver cirrhosis nínú àwọn ẹranko tí a fi ṣe àyẹ̀wò. Ọ̀nà tí ó gbà ń ṣiṣẹ́ kò tíì di mímọ̀. Lórí ìdálẹ̀mọ́ pé PPC lè ń ṣiṣẹ́ nípa dídín ẹ̀sọ́ àwọn hepatic stellate cell kù, a ṣe ìwádìí ipa PPC àti àwọn èròjà tí ó wà nínú rẹ̀, dilinoleoylphosphatidylcholine (DLPC) àti palmitoyl-linoleoylphosphatidylcholine (PLPC), lórí ẹ̀sọ́ àwọn stellate cell tí PDGF mú ṣẹlẹ̀ àti ìfihàn àmì nínú àwọn cell. Àwọn hepatic stellate cell aláìlábàwọ́n tí ń bọ́ láti inú eku alábọ́pá nínú ìtọ́jú tissue ní a gbìn láìsí serum, a sì fi 10ng/ml PDGF sínú wọn láìsí tàbí pẹ̀lú phospholipids. A wọn ẹ̀sọ́ cell nípa 3H-thymidine incorporation. A ṣe ìdámọ̀ ìmúṣiṣẹ́pọ̀ P44MAPK nípa kinase assay, àti AP-1 binding nípa electrophoretic mobility shift assay. PPC (200 ng/ml) fi ọ̀pọ̀lọ dínà ẹ̀sọ́ tí PDGF mú ṣẹlẹ̀ (p < 0.05; ANOVA, n = 3) ó sì takò ìmúṣiṣẹ́pọ̀ P44MAPK àti AP-1 binding tí PDGF mú ṣẹlẹ̀. DLPC fàjọ ipa yìí ṣùgbọ́n PLPC kò ṣe bẹ́ẹ̀. Bẹ́ẹ̀ni DLPC tàbí PLPC kò dínà ìmúṣiṣẹ́pọ̀ PDGF receptor.

Hypothesis:
A parí pé PPC ní ipa tí a kò tí ì mọ́ tẹ́lẹ̀ lórí ìdàgbàsókè àwọn hóró stellate tí mitogen mú wá, èyí tí ó lè wáyé nípasẹ̀ DLPC.


Premise:
Àwọn ẹ̀yà àtẹ́gùn onígbàjámọ́ tí a ṣe mímúnára (HSC) jẹ́ pàtàkì sí àìsàn gbíndingbìndin àtẹ́ bí orísun pàtàkì kọ́lágẹ̀ẹ́nì I àti III àti àwọn adálétí mẹ́tálóprotéìnésì-1 (TIMP-1). Lákòókò ìmúláradá fárabalẹ̀ láti àìsàn gbíndingbìndin àtẹ́, ìdínkù wà nínú ìfihàn TIMP, ìdàgbàsókè nínú ìṣe kọ́lágẹ̀nésì, àti ìdàgbàsókè ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀ ti HSC, tí ó ṣàfihàn ipò tí ó ṣeéṣe fún TIMP-1 nínú ìyè HSC. Nínú ìròyìn yìí, a lo ìdáàbòbò àwọn ẹ̀yà irinṣẹ́ àti àwọn àpẹẹrẹ láàyé láti fihàn pé TIMP-1 fihàn dájúdájú ìdènà ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀ HSC. TIMP-1 ṣàfihàn ipa lòdì sí ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀ tí ó dúró, pàtàkì, àti ìyàtọ̀ gẹ́gẹ́ bí iye fún HSC tí a múnára nínú ìdáàbòbò àwọn ẹ̀yà irinṣẹ́ tí a sì rú sókè láti ṣe ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀ nípa àìsí séérọ̀ọ̀mù, tí a fihan sí síklóhẹ́símáìdì, àti ìmúnára ìdàgbàsókè ìwàláàyè. TIMP-1 tí kò ṣiṣẹ́ tí a yípadà (àyípadà T2G) nínú èyí tí gbogbo àwọn apá mìíràn ni a ṣe ààbò kò dènà ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀, tí ó tọ́ka pé ìdènà ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀ ni a ṣe láti ipa ìdènà MMP. Àwọn adálétí MMP tí a dá ṣẹ́dá pẹ̀lú dènà ìparun àìrọ̀tẹ́lẹ̀ HSC. Àwọn ìwádìí ti àìsàn àtẹ́ sírósísì fihàn pé ìfihàn TIMP-1 mRNA tí kò lọ tí a pinnu nípa PCR bá mu pẹ̀lú ìgbàjámọ́ HSC tí a múnára níye nípa àlfá smooth muscle actin àfẹ̀tọ́, nígbà tí nínú àìsàn gbíndingbìndin, ìpàdánù HSC tí a múnára bá mu pẹ̀lú ìdínkù nínú TIMP-1 mRNA.

Hypothesis:
A parí pé TIMP-1 ń dínà ìparun àyípadà àwọn sẹ́ẹ̀lì CD14dim monocyte nípasẹ̀ ìdínà MMP.


Premise:
Ìmúgbadùn àwọn sẹ́ẹ̀lì hepatic stellate (HSCs) ní ipá pàtàkì nínú ìdàgbàsókè àìsàn ẹ̀dọ̀fóró. C1q/tumor necrosis factor-related protein 3 (CTRP3), ọkan lára àwọn CTRPs, jẹ́ èyí tí ó ní ipa nínú ìkólẹ̀ ẹ̀dọ̀fóró. Síbẹ̀síbẹ̀, kò sí ìmọ̀ púpọ̀ nípa ipò CTRP3 nínú àìsàn ẹ̀dọ̀fóró ẹ̀dọ̀. Ìwádìí yìí ní àfojúsùn láti dá ipò rẹ̀ ní ìdákejì nínú àìsàn ẹ̀dọ̀fóró ẹ̀dọ̀ àti láti ṣe ìwádìí àwọn ọ̀nà tí ó ṣeéṣe. Àwọn èsì wa fihàn pé CTRP3 jẹ́ èyí tí a fẹ̀sùn kékeré nínú àwọn ìṣù ẹ̀dọ̀fóró ẹ̀dọ̀ àti àwọn HSCs tí a ti mú gbadùn. Ìmúgbadùn àfojúrí CTRP3 dínà ìgbàdùn àti ìgbéra àwọn HSCs, bákannáà ó dínà ìfẹ̀sùn àwọn extracellular matrix (ECM) nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì HSC-T6 tí a tì múgbadùn nípa transforming growth factor-β1 (TGF-β1). Síwájú síi, ìmúgbadùn àfojúrí CTRP3 dínà púpọ̀ àwọn ìpele ìfẹ̀sùn phosphorylation ti Smad3 nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì HSC-T6 tí a ti múgbadùn nípa TGF-β1.

Hypothesis:
Ní ìgúnlẹ̀, ẹ̀kọ́ ọlọ́wọ́ yìí fi hàn pé CTRP3 ń dí ìtànkálẹ̀ àti ìṣísẹ̀ àwọn àwọn hóró HSC-T6 tí a rú nípa TGF-β 1, ó sì ń dín ìfa ẹ̀dọ̀fóró ẹ̀dọ̀ kù, ní apá kan, nípa dídí ọ̀nà àbájáde ìfihàn Smad.


Premise:
Àìní ìtọ́sí tí ó dára nínú ìtọ́jú àrùn ọ̀nà jẹun tí ó ń fa wíwú (IBD) ló mú wa lo àwọn àpò kékeré onínọ́ èyí olórùn omi alágbára òdì láti fi dojúkọ ára oniwú tí ń bá ìfun ṣàkóbá. Ìdí fún ìwádìí yìí ni láti fi ṣàlàyé ìdí ìwòye wa tẹ́lẹ̀ rí pé irú àwọn àpò kékeré onínọ̀ báyìí kó jọ̀ ní àyíká ara tí ó wú sórí nínú àwọn eku tí a fún àrùn wíwú ìfun, lẹ́yìn ìfúnni nínú ọ̀nà jẹun. Ìṣàtúpalẹ̀ purotéènì (spectrometry ẹgbàa-meji, tí a ṣàmúdájú nípa Western blot) ti àwọn àyẹ̀wò ara oniwú, tí a yọ ní ìsọdọ̀rọ̀ pH 3, 5 àti 7, fihàn àfikún ìfihàn transferrin (TF) ní pH 3. Àyẹ̀wò histological fi hàn pé TF náà wà ní ẹ̀gbẹ́ ọ̀nà jẹun ti ára tí o wú. Àwọn àpò kékeré onínọ̀ olórùn omi alágbára òdì (ṣùgbọ́n kìí ṣe àwọn aláìlóorùn omi) fàra mọ́ bí TF ọjà àti TF ara oniwú ní pH tí ó kéré, ṣùgbọ́n kìí ṣe ní pH aláìlóorùn. Síbẹ̀síbẹ̀, ìdáraṣẹ́gbẹ́ àti ìfipamọ́ àwọn àpò kékeré onínọ̀ olórùn omi alágbára òdì pẹ̀lú TF dín ìfaramọ́ wọn sí ara oniwú eku ní ìfun tó wú kù gidigidi.

Hypothesis:
A parí pé, ní ipele pH tí ó kéré, èyí tí ó wá ní ihò kólónù nínú ààrùn kíkọ́ àjẹsára tí ńṣe àwọn ìṣàn kólónù, TF ń pèsè ìfaragbamọ́ pàtàkì fún àwọn lípósómù tí ó ní ìdágbére àìdára sí àwọn ìṣàn tí ó ní ìkọ́lẹ̀.


Premise:
Curcumin (diferulolylmethane) fihan awọn ipa ti o jinlẹ-ti o dinku ifarapa ninu awọn sẹẹli iha ikun (IEC) ati ninu awọn sẹẹli ajeji in vitro ati pe o fihan ipa idaabobo ninu awọn awoṣe eku ti colitis ti a fa nipasẹ kemikali, pẹlu ọna iṣe akọkọ ti a funaarọ nipasẹ idiwọ NF-kappaB. Bi o tilẹ jẹ pe a ti fi han bi o ti ṣe ni ipa ni idinku osuwọn atunfarapadanu ninu awọn alaisan ulcerative colitis, idogba Curcumin ninu arun Crohn (CD) tabi ninu awọn awoṣe ajeji Th-1/Th-17 ti CD ko ti ni iṣiro. Nitorina, a ṣe iwadii awọn ipa ounjẹ curcumin (0.1-1%) lori idagbasoke colitis, imudide ajeji, ati iṣẹ NF-kappaB in vivo ninu awọn eku germ-free IL-10(-/-) tabi IL-10(-/-);NF-kappaB(EGFP) ti a gbe pẹlu microflora ti o ni asọtẹlẹ pataki. Ẹkọ iha colon iwaju ati ẹhin fihan ipa idaabobo diẹ ti curcumin nikan ni 0.1%. Ifihan mRNA IFN-gamma ati IL-12/23p40 colon tẹle awoṣe kanna (idiwọ to fẹrẹ to 50% ni 0.1%). Ifisijade IL-12/23p40 ati IFN-gamma nipasẹ awọn fidipọ colon ati awọn sẹẹli egbe lymph node funbale ga ninu awọn eku IL-10(-/-) ati pe ko dinku nipasẹ curcumin ninu ounjẹ. Ni iyanu, imudide NF-kappaB ninu awọn eku IL-10(-/-) (phospho-NF-kappaBp65) tabi ninu awọn eku IL-10(-/-);NF-kappaB(EGFP) (ẹya ara gbogbo tabi aworan confocal) ko ni idiwọ to ṣe akiyesi nipasẹ curcumin. Pelupelu, a fi han pe IL-10 ati curcumin ṣiṣẹ ni ijọpọ lati dinku iṣẹ NF-kappaB ninu IEC ati iṣelọpọ IL-12/23p40 nipasẹ awọn splenocytes ati awọn sẹẹli dendritic.

Hypothesis:
A parí pẹ̀lú ìmọ̀ràn pé ọ̀nà pàtàkì tí curcumin fi ń ṣiṣẹ́ láti dínà àìsàn ìfun tí a fi àwọn ọ̀jẹ́ kemikali fa ni nípa dídí ìṣiṣẹ́ NF-kappaB lọ́wọ́.


Premise:
Ọpọlọpọ aápọnjù jẹ́ àwọn ìdí ewu fún ìdàgbàsókè ààrùn ẹ̀gbẹ́ ìnira ìfun. Pẹa nítorí àjọ̀ṣepọ̀ rẹ̀ tó ga nípa àfikún oúnjẹ igi, polyphenolics, àti glycoproteins, gbogbo èyí tí a mọ̀ tó jẹ́ àǹfààní ilera. A ní èrò láti ṣàwárí ipa àfikún ewé pẹa (GP) lórí àyíká ìṣeṣí oúnjẹ tó ní ọ̀rá púpọ̀ (HFD)-tí a fún ẹranko àwòkọ́ àti dextran sulfate sodium (DSS)-tí ó fa colitis. Àwọn ẹranko abo C57BL/6J tí wọ́n jẹ́ ọsẹ mẹ́fà ni a fún ní 45% HFD tàbí HFD tí a fún pẹ̀lú 10% GP. Lẹ́yìn ọ̀sẹ méje àfikún oúnjẹ, colitis ni a fa nípa fífi 2.5% DSS sínú omi mímu fún ọjọ́ méje tí a tẹ̀lé pẹ̀lú àkókò ìdápadà ọjọ́ méje. Àfikún GP ṣe ìtọ́jú àlàfo ìdíwọ̀n ààrùn ní àwọn ẹranko tí a fún ní HFD ní ìgbà ìdápadà, ó sì dín ìwọlé neutrophil kù, ìfihàn mRNA ti monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) àti àwọn àmì ìṣokùnfà interleukin (IL)-6, cyclooxygenase-2 (COX-2), IL-17, interferon-γ (IFN-γ), àti inducible nitric oxide synthase (iNOS) ní àwọn ẹranko tí a fún ní HFD. Síwájú sí i, àfikún GP mú mucin 2 pọ̀ àti ìfihàn mRNA ti àwọn àmì ìyàtọ̀ yàrá goblet tó ní Trefoil factor 3 (Tff3), Krüppel-like factor 4 (Klf4), àti SAM pointed domain ETS factor 1 (Spdef1) ní àwọn ẹranko tí a fún ní HFD. Ní àfikún, GP ṣe ìtọ́jú endoplasmic reticulum (ER) stress bí àmì ìdínkù ìfihàn Activating transcription factor-6 (ATF-6) protein àti àwọn àfojúsùn ẹ̀kọ́ rẹ̀ chaperone protein glucose-regulated protein 78 (Grp78), the CCAAT-enhancer-binding protein homologous protein (CHOP), the ER degradation-enhancing α-mannosidase-like 1 protein (Edem1), àti the X-box binding protein 1 (Xbp1) ní àwọn ẹranko tí a fún ní HFD.

Hypothesis:
Ní ìparí, àfikún GP dín ẹfẹ́ colitis tí DSS fà lórí àwọn ẹranko tí a bọ́ pẹ̀lú HFD, èyí tí o ní àṣeyọrí pẹ̀lú ìdínkù àìsàn ìwọ́kúrò, ìdínà mucin, àti ER stress nínú ìfun.


Premise:
A rò pé Bílírúbìn ní ipa tí ó ń dènà ìfarahàn àìsàn nípa dídènà ìgbékalẹ̀ àwọn hóró aláìsàn tí ó dá lórí vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) àti nípa fífisílẹ̀ ìfihàn inducible nitric oxide synthase (iNOS). Bí VCAM-1 àti iNOS ti jẹ́ olùgbèrú pàtàkì ti ìpalára àwọn ìhà ara nínú àwòṣe dextran sodium sulfate (DSS) ẹranko elélùú fún ìkọjú ìfàsẹ́yìn ìfun, a ṣàyẹ̀wò bóyá bílírúbìn dènà ìpalára ìfun nínú àwọn ẹlẹ́lùú tí a ti fún ní DSS. Àwọn ẹlẹ́lùú akọ C57BL/6 gba 2.5% DSS nínú omi mímu fún ọjọ́ méje, lẹ́gbẹ̀ẹ́ tí wọ́n ń gba àwọn abẹ́rẹ́ intraperitoneal ti bílírúbìn (30 mg/kg) tàbí ọ̀yà potassium phosphate. A ṣàkíyèsí àwọn ìṣẹ̀lẹ̀ àìsàn náà, a ṣe ìdáwó iye àwọn hóró ẹ̀jẹ̀ àti iye serum nitrate, a sì ṣe àtúpalẹ̀ àwọn àyẹ̀wò ifun fún ìpalára histological, ìgbékalẹ̀ àwọn hóró aláìsàn, àti ìfihàn iNOS. A tún mojútó ipa ti bílírúbìn lórí ìpèsè IL-5 láti ọwọ́ àwọn hóró HSB-2 àti lórí ìgbékalẹ̀ àwọn hóró Jurkat láti inú àwọn hóró endothelial. Àwọn ẹlẹ́lùú tí a fún ní DSS tí ó gba bílírúbìn ní àkókò kannáà pàdánù kéré ní ìwọ̀n ara, ní iye serum nitrate tí ó dín mọ́, ó sì tún fi àìlera tí kò bá burú hàn ju àwọn ẹranko tí a fún ní ọ̀yà lọ. Ní ìbámu, àwọn àtúpalẹ̀ histopathological fi hàn pé àwọn ẹlẹ́lùú tí a ti fún ní bílírúbìn fi ìpalára ìfun tí ó dín mọ́ hàn, pẹ̀lú ìdínkù nínú ìgbékalẹ̀ àwọn eosinophils, lymphocytes, àti monocytes, àti ìfihàn iNOS tí ó dínkù. Ìfúnni bílírúbìn tún wà ní àṣepọ̀ pẹ̀lú ìdínkù ìgbékalẹ̀ eosinophil àti monocyte sínú ifun kékeré, pẹ̀lú ìlọsókè tí ó bá mu ní eosinophilia ẹ̀jẹ̀ agbègbè. Bílírúbìn dènà ìgbékalẹ̀ Jurkat ṣùgbọ́n kò yí ìpèsè IL-5 padà.

Hypothesis:
Ní ìgúnlẹ̀, bilirubin ṣe ìdènà sí ààrùn ìfun tí DSS fà nípa dídí ìgbéyọ àwọn hóró funfun ẹ̀jẹ̀ láti kọjá inú ìmọ̀lára àwọn iṣán ẹ̀jẹ̀ àti nípa fífisílẹ̀ ìfihàn iNOS.


Premise:
Iye àwọn àìsàn ààrùn inú tó ńleégbè ti pọ̀si ní àwọn ẹ̀wádùn tó kọjá. Nínú ìfun, àwọn ẹ̀bí mucins (MUC) àti àwọn ìdáwọ́lé trefoil (TFF) ń mú ààbò àwọ̀n ara inú rọrùn. Lílò àwọn probiotic ní ipa lórí ìpele MUC nínú ìfun. Síwájú sí i, àwọn ẹ̀yà oúnjẹ lè ní ipa lórí àwọn kò-aláyè inú tàbí ní ipa tààrà lórí ààbò MUC. Àfojúsùn wa ni láti mọ bóyá jíjẹ oúnjẹ àti/tàbí Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) yóò dásí colitis tí dextran sodium sulfate (DSS) fà nípa yíyí ìhànsó àwọn gẹ́nì MUC àti TFF padà. Wọ́n fún àwọn eku C57BL/6 ní oúnjẹ tó ní 20% (ìwọ̀n:ìwọ̀n) protein casein, soy, tàbí whey pẹ̀lú tàbí láìsí LGG fún ọjọ́ 12. Ọjọ́ méje lẹ́yìn bíbẹ̀rẹ̀ oúnjẹ LGG, wọ́n fún àwọn eku náà ní 2% DSS nínú omi mímu fún ọjọ́ 4. Àwọn ẹgbẹ́ casein méjì àfikún pẹ̀lú tàbí láìsí LGG ni wọ́n fún ní omi rọ̀bì, tí ó jẹ́ àpapọ̀ ẹgbẹ́ mẹ́jọ. Ọjọ́ kan lẹ́yìn ìtọ́jú DSS, wọ́n pa àwọn eku náà, wọ́n sì kó àwọn ìwẹ̀ ìfun àti cecum àti àwọn ohun inú cecum, wọ́n sì túnwò wọn pẹ̀lú qRT-PCR. Protein whey mú àwọn àkóónú LGG cecal pọ̀si ní pataki ju àwọn oúnjẹ míràn lọ. Ní àwọn ẹgbẹ́ oúnjẹ casein, ìhànsó MUC1 àti TFF-3 nínú ìfun ni DSS rú sókè ní patakì láìgbọ́ràn sí LGG. Ní àfiwé pẹ̀lú àwọn ẹgbẹ́ míràn tí a tọ́jú pẹ̀lú DSS, protein soy dín iye MUC-1 àti TFF-3 nínú ìfun kù. Bákannáà, protein soy dín ipa tí DSS ní lórí àwọn àmì ààrùn, ìhànsó gẹ́nì TNFα, àti ìsẹ́ ìfun kù. Kò sí ipa gbogbogbòò tí LGG ní lórí àwọn òdíwọ̀n wọ̀nyí.

Hypothesis:
Ní ìgúnlẹ́, purotini soya din ìfihàn jẹ́nì TNFα kù - olùgbaniṣiṣẹ́ ìgbógunti àìsàn fún MUC, TFF, àti DSS láìsí ìgbẹ́kẹ̀lé lórí LGG.


Premise:
Hypoxia inducible factor 1α (HIF1α) jẹ́ olùdarí pàtàkì tí ó ń yọrí sí ìyípadà metabolic, èyí tí ó jẹ́ ìgbésẹ̀ physiology pàtàkì láti ṣe ìtọ́jú ààbò àwọn hóró ìgbà àbí lábẹ́ hypoxia. Bíótilẹ̀jẹ́pẹ́, a kò mọ̀ dáadáa bí HIF1α ṣe ń lọ sínú nucleus nínú àwọn hóró ìgbà àbí lábẹ́ hypoxia. Níbí, a ṣe ìwádìí ipa tí ẹ̀rọ àwọn ọmọ motor Bicaudal D homolog 1 (BICD1) ń kó nínú ìmúdàsípò HIF1α sínú nucleus tí dynein ń ṣakóso àti ipa tí ìdarí BICD1 ní lórí ìyípadà sí hypoxia àti agbára ìtọ́jú rẹ̀ lórí àwọn human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells (UCB-MSCs). Nínú àwọn èsì wa, pípa BICD1 tí kì í ṣe BICD2 sílẹ̀ mú kí HIF1α má lọ sínú nucleus àti iṣẹ́ rẹ̀. Àṣeyọrí BICD1 mú kí HIF1α tó wọ inú nucleus lábẹ́ hypoxia túbọ̀ pọ̀ sí i. Hypoxia gbé àwọn ìsopọ̀ tààrà láàrin HIF1α àti BICD1 àti agbedemeji ẹ̀wọ́n tí dynein (Dynein IC), èyí tí pípa BICD1 sílẹ̀ pa run. Ìdíwọ́ Akt dín ìsopọ̀ BICD1 sí HIF1α àti lílọ HIF1α sí inú nucleus kù. Ní ọ̀tọ́, ìgbóríle Akt tàbí pípa GSK3β sílẹ̀ túbọ̀ gbé hypoxia-induced HIF1α nuclear translocation ga. Síwájú síi, pípa BICD1 sílẹ̀ pa ìyípadà glycolytic tí hypoxia gbé dìde run, ó sì mú kí iye ROS mitochondrial àti ìparẹ́ pọ̀ sí i nínú UCB-MSCs lábẹ́ hypoxia. Nínú àwòṣe ìwòsàn ojú ara aláàbọ̀ eku, ààbò àwọn hóró tí a fi sí ara àti agbára ìwòsàn ojú ara aláàbọ̀ tí UCB-MSCs tí a ti múrasílẹ̀ pẹ̀lú hypoxia ní ìdín kù nípa pípa BICD1 sílẹ̀, ó sì túbọ̀ pọ̀ sí i nípa pípa GSK3β sílẹ̀.

Hypothesis:
Ní ìparí, a fi hàn pé ìgbésọ́ ojúnúkọ́ HIF1 α tí FGF -mú wá jẹ́ pàtàkì fún ìbágbépọ̀ ní àárín àìtó afẹ́fẹ́, èyí tí ó ṣe ìpinnu agbára ìtúnṣe ti awọn UCB-MSCs.


Premise:
Àkànṣe purotííìnì Von Hippel-Lindau (pVHL) máa ń ṣiṣẹ́ láti fa ìdíbàjẹ́ ubiquitin-atẹ̀lé tí hypoxia-inducible factor-1alpha (HIF-1alpha) lábẹ́ àwọn ipo normoxic ṣùgbọ́n kìí ṣe lábẹ́ àwọn ipo hypoxic, ó sì máa ń fa ìyàtọ̀ àyíká nẹ́rvì lára àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀dá ìṣẹ̀dá nẹ́rvì. Àmọ́, ipa tí pVHL ń kó nínú ìyàtọ̀ àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀dá ìṣẹ̀dá nẹ́rvì lábẹ́ èyíkéyìí ipo kò tí ì hàn pátápátá. Ní ibí, a fi hàn pé lábẹ́ ipo anoxic, a di ìfihàn pVHL àti àwọn àmì nẹ́rvì nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀dá ìṣẹ̀dá nẹ́rvì lọ́wọ́, nígbà tí a fa HIF-1alpha. Ní àfikún, àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀dá ìṣẹ̀dá nẹ́rvì tí ń fi pVHL hàn lẹ́yìn ìgbéhá gẹ́ẹ̀nù fihàn ìyàtọ̀ nẹ́rvì tó hàn kedere àti àìfa HIF-1alpha lábẹ́ ipo normoxic ṣùgbọ́n kìí ṣe lábẹ́ ipo anoxic.

Hypothesis:
Nítorí náà, a parí wípé pVHL dí ìdàgbàsókè àwọn nẹ́rọ̀nù lábẹ́ ipò àìsí ọ̀kùnkùn afẹ́fẹ́.


Premise:
Àwọn ohun tó ńmú ọ̀yà jáde nígbà tó bá ṣe àìtó afẹ́fẹ́ (HIF) jẹ́ olùdarí pàtàkì fún ìdáhùn sé̩lù sí àìní afẹ́fẹ́ tó ń ge̩nile̩ ìfiránṣé̩ afẹ́fẹ́ àti ìṣe̩dà iye̩sókèyesílẹ̀ sí àìsí afẹ́fẹ́. Bí ó tilẹ̀ rí bẹ́ẹ̀, ìwọ̀n àti ìgbà tí HIF-1α fi ńfara hàn nígbà tí afẹ́fẹ́ kò tó gbọ́dọ̀ wà ní ìwọ̀n tí ó dára láàrín àwọn sé̩lù kí wọ́n lè yẹra fún àwọn àbájáde búburú tí ó wà nípasẹ̀ iṣẹ́ tó ju òǹkà lọ. Ìfihàn HIF-1α mRNA a máa dínkù nígbà tí àìní afẹ́fẹ́ bá pẹ́, èyí fi hàn pé ìdarí ìse̩dà HIF1A gene wà lábẹ́ ìtọ́sọ́nà pẹ̀lú ọ̀nà ìdápadà òdì. Kò sí ìmọ̀ tó pọ̀ nípa ìyanjú ìdáhùn HIF-1α protein àti ìdínkù HIF-1α mRNA ní àìní afẹ́fẹ́ tí ó pẹ́. Níhìn-ín, a fi hàn pé Repressor Element 1-Silencing Transcription factor (REST) má ń so mọ́ HIF-1α promoter ní ọ̀nà tí ó dá lórí àìní afẹ́fẹ́. Yíyọ REST pẹ̀lú RNAi a máa mú kí HIF-1α mRNA, protein àti iṣẹ́ ìṣẹ̀dà wọn pọ̀ sí i. Síwájú sí i, yíyọ REST mú kí ìlò sírọ̀ọ̀bù àti ìpèsè lactic pọ̀ sí i ní ọ̀nà tí ó dá lórí HIF-1α (ṣùgbọ́n kìí ṣe HIF-2α). Ní ìparí, REST ń ge̩nile̩ ìyanjú ìfihàn HIF-1α protein nígbà tí àìní afẹ́fẹ́ bá pẹ́.

Hypothesis:
Ní ìparí, a ń ṣe àlàyé pé àìní-ọ̀kísíjẹ̀nì dínkù ìgbésẹ̀ ìkọsílẹ̀ HIF-1α nígbà tí REST pẹ́, nítorí bẹ́ẹ̀ ó ń ṣe àfikún sí ìdáhùn tí HIF-1α ń ṣe.


Premise:
Ìfihàn àkójọpọ̀ autophagy kinase, Unc51-like kinase 1 (ULK1), ni a ṣàkóso rẹ̀ nípa ètò-ìṣe àti ìṣáfọ̀ nípasẹ̀ autophagy tí ebi-àkókò bí. Síbẹ̀síbẹ̀, bí a ṣe ń ṣàkóso ULK1 nígbà tí oxígénì bá kéré kò tíì di òye dáadáa. Tẹ́lẹ̀, a ti fihàn pé ìfihàn ULK1 ni a gbé dìde nípasẹ̀ ìnira àìní oxígénì tó tó. Níbí, a sọ nípa microRNA tuntun tí ń ṣàkóso ULK1, miR-93; ìṣe rẹ̀ ni ó ní ìbáṣepọ̀ ìdákejì pẹ̀lú ìṣáfọ̀ ULK1 ní àwọn ipò àìní oxígénì tó tó. miR-93 ń darí ULK1 kí ó sì dín ìwọ̀n protein rẹ̀ kù ní àwọn ipò àìní oxígénì tó tó. miR-93 tún dènà autophagy tí àìní oxígénì tó tó gbé dìde nípa dídá-nà ìyípadà LC3-I sí LC3-II àti ìparun P62; àwọn ìgbésẹ̀ wọ̀nyí ni a yí padà nípasẹ̀ ìṣẹ̀dá àlékún ti olùdènà miR-93 abẹ́lé. Àtúnfihàn ULK1 láìsí àwọn ìdáhùn miR-93 tún mú autophagy tí àìní oxígénì tó tó gbé dìde padà, èyí tí miR-93 ti dènà. Ní ìparí, a ríi àwọn ipa ti miR-93 lórí ìlera àwọn hóró àti apoptosis ní àwọn ẹ̀ka hóró tí kìí ṣe jẹjẹrẹ àti àwọn hóró jẹjẹrẹ. A rí pé miR-93 n fi agbára fún ìlera MEFs (mouse embryonic fibroblasts) tí ó sì ń dènà apoptosis rẹ̀ ní ipò àìní oxígénì tó tó.

Hypothesis:
Nítorí náà, a parí pé miR-93 ní ìlò nínú aṣa-jìjɛ-ara-ẹni tí àìpé-òfuurufù fa nípasẹ̀ ìṣàkóso ULK1.


Premise:
Àwọn ipo tí àìtó ọ̀kẹ́ ẹ̀jẹ̀ (hypoxic) ti fi han lati ipa ipò ìyàtọ ti àwọn hóró kúkúrú (stem cells (SC)), pẹlu àwọn hóró kúkúrú ti àdàpọ̀ (embryonic stem cells (ESC)). Hypoxia inducible factor (HIF) jẹ ọkan lara awọn apajuwe inu-hóró yẹn tí ó jẹ́ aláìse fún ìdáhùn hóró sí àìtó ọ̀kẹ́ ẹ̀jẹ̀. Àìtó ọ̀kẹ́ ẹ̀jẹ̀ fún HIF ní ìmúdúró-nípò nípa dídílọ́nà iṣẹ́ àwọn HIF prolyl-hydroxylases (PHD), tí wọ́n jẹ́ aláìse fún pípa-nílò àwọn ìpín HIF-alpha fún àwọn ìsọdíbàjẹ́ proteosomal. Láti dá ipa ìmúdúró-nípò HIF lórí ìfipamọ́ àmì ìtumọ̀ hóró kúkúrú ti mouse ESC (mESC), a ṣe àyẹ̀wò ipa ìdílọ́nà PHDs àti àìtó ọ̀kẹ́ ẹ̀jẹ̀ (1% O2 àti 5% O2) lórí ìyàtọ àwọn ESC ti ara tí ó faragbára nípasẹ̀ yíyọkúrò leukemia inhibitory factor fún 24 àti 48 wákàtí. Panhydroxylase inhibitor tí a mọ̀rán, dimethyloxaloylglycine (DMOG) àti PHD inhibitor JNJ-42041935 (JNJ) pẹ̀lú ìfihàn amọ̀sí gíga sí àwọn PHD ní a lò. Àwọn inhibitor méjèèjì àti àwọn ìwọ̀n méjèèjì ti àìtó ọ̀kẹ́ ẹ̀jẹ̀ mu ìwọ̀n protein HIF-1alpha àti HIF-2alpha àti ìṣe ìrèkọjá HIF díkíndíkín nínú ìyàtọ àwọn mESC ti ara. Èyí tẹ̀lé pẹ̀lú ìdínkù díkíndíkín ti ìbísí hóró tí ó fihàn nípa ìdádúró pípé ti ìsọdisowopo DNA àti ìdádúró díẹ̀ ní ìpín S lẹ́hìn 48 wákàtí. Síwájú sí, ìmúdúró-nípò HIF gbé ìdínkù ní ìfihàn àwọn àmì pluripotency kan (OCT-4, NANOG, ZFP-42, TNAP) nínú ìyàtọ àwọn mESC ti ara. Síbẹ̀síbẹ̀, ní àkókò kannáà, ó sì tún ní ìdínkù díkíndíkín nínú ìfihàn àwọn gene tí a yàn gẹ́gẹ́ bí àwọn àmì ìyàtọ hóró (bíi SOX1, BRACH T, ELF5).

Hypothesis:
Ní ìparí, ìmúdúró fún ìgbà díẹ̀ ti aláìní-átẹ́gùn-tótọ́ nípasẹ̀ àwọn ìdínà PHD JNJ àti DMOG àti HIF kò dínà ìpòfo àrà rẹ̀ ti àwọn àmì ọ̀pọ̀lọpọ̀ ìpìlẹ̀ nínú mESC.


Premise:
Ibrutinib olùdínà BTK ti fi hàn àṣeyọrí ìtọ́jú tí ó tayọ̀ nínú mantle cell lymphoma (MCL). Síbẹ̀síbẹ̀, níwọ̀n ìdá mẹ́ta nínú mẹ́wàá àwọn aláìsàn kò faramọ́ òògùn náà láti ìbẹ̀rẹ̀. Láti mọ àwọn ọ̀nà tí ó ṣokùnfà àìfaragbà ibrutinib àkọ́kọ́ nínú MCL, a ṣe àtúpalẹ̀ àwọn ìyípadà transcriptome nínú àwọn ẹ̀ka-hóró tí ó faramọ́ ibrutinib àti àwọn tí kò faramọ́ rẹ̀ lórí ìtọ́jú ibrutinib. A rí wípé àmì ẹ̀dà gẹ́nù MYC ní a tẹ̀ẹ́ mọ́lẹ̀ nípasẹ̀ ibrutinib nínú àwọn ẹ̀ka hóró tí ó faramọ́ ṣùgbọ́n kìí ṣe nínú àwọn tí kò faramọ́. A fi hàn pé gẹ́nù MYC ní àìdá ní ìhun àti pé purotéìnì MYC ṣe àgbékalẹ̀ púpọ̀ nínú àwọn hóró MCL. Síwájú sí i, ìdínà MYC pẹ̀lú ìdíwọ́ RNA dín ìdàgbàsókè hóró kù nínú àwọn hóró tí ó faramọ́ ibrutinib àti àwọn tí kò faramọ́ ibrutinib. A wádìí ìṣeéṣe ìdínà MYC nípasẹ̀ ìdínà HSP90. Purotéìnì chaperon ṣe àgbékalẹ̀ púpọ̀ nínú àwọn ẹ̀ka hóró méjèèjì àti àwọn hóró MCL àkọ́kọ́ láti ọ̀dọ̀ àwọn aláìsàn. A fi hàn pé MYC jẹ́ oníbàárà tòótọ́ HSP90 nínú ìdí ti MCL nípasẹ̀ immunoprecipitation àti ìyọkúrò kẹ́míkà méjèèjì. Síwájú síi, ìdínà HSP90 nípa lílo PU-H71 fa apoptosis àti ìdádúró sáyíkù hóró. PU-H71 tún fi hàn ìdínà tí ó lágbára tí ó sì ní ìfarahàn gbòòrò ti ètò ìgbékalẹ̀ MYC ní ìfiwèédàá pẹ̀lú àwọn ipa ọ̀nà ìṣẹ̀dá àrùn míràn. Nínú àpẹẹrẹ xenograft tí ó wá láti ọ̀dọ̀ aláìsàn MCL, olùdínà HSP90 dín ìdàgbàsókè àrùn jẹjẹrẹ àti fa ìsọdálẹ̀ ìgbésí ayé. Ní ìparí, a fi hàn pé PU-H71 fa apoptosis àti ìdínkù nípa purotéìnì MYC nínú àwọn hóró MCL tí ó wá láti ọ̀dọ̀ àwọn aláìsàn tí kò faramọ́ ibrutinib ní ojúlùmọ̀.

Hypothesis:
Ní ìparí, ìṣiṣẹ́ MYC jẹ́ ìdí àìgbówó fún ibrutinib nínú MCL.


Premise:
Enzyme deaminase cytidine ti a mu jade nipa imu-sisẹ (AID) jẹ ohun ti o nilo fun iyipada ti o pọju ti somatic ati atunse pipadapọ kilasi immunoglobulin (Ig) ninu awọn sẹẹli B ti ile-isẹ (GC). Nigbamisan, AID le da awọn gene ti kii se Ig si, eyi ti o le gbekalẹ ikọlu lymphoma sẹẹli B ti ile-isẹ. A fi han laipẹ yi pe kinase BCR-ABL1 ti o nfaragba mu jade ni ọna ti ko deede ipada AID ninu ikọlu akute lymphoblastic leukemia tẹlẹ (ALL) ati ikọlu awọn ja ti arun chronic myelogenous leukemia. Lati salaye itumo ijinlẹ isẹda ti ipada AID ti ko deede, a se iwadi isọ ise AID ninu awoṣe ti BCR-ABL1 ALL lori eku. Awọn eku ti a gbinawọn pẹlu egungun ọpa ti a fi BCR-ABL1 bọ nipasẹ AID(-/-) ni igbesi aye ti o gun diẹ sii ni akawe pẹlu awọn eku ti a gbinawọn pẹlu awọn sẹẹli leukemia ti a ṣẹda lati egungun ọpa AID(+/+). Ni ibamu pẹlu ipa ti o fa ti AID ninu ailera awọn gene, leukemia AID(-/-) ni iwọn ti ko pọ ninu fifi kun ati yiyọ kuro ati iwọn ti ko pọ ninu awọn iyipada ninu awọn gene ti kii ṣe Ig, pẹlu Pax5 ati Rhoh ni akawe pẹlu awọn leukemia AID(+/+). Awọn sẹẹli ALL AID(-/-) ati AID(+/+) fi han ilana ipada gene ti o yatọ pupọ, ati pe awọn sẹẹli ALL AID(-/-) kuna lati dinku diẹ ninu awọn gene ti o diwọn arun kan pẹlu Rhoh, Cdkn1a (p21), ati Blnk (SLP65).

Hypothesis:
A pinnu pe ALL mu clonal evolution yara ni BCR-ABL1 AID nipa fifi agbara kun aibalẹ jẹnẹtiki ati aberrant somatic hypermutation, ati nipa iṣakoso iyasoto awọn jini-dínà-jẹjẹrẹ.


Premise:
Àwọn àyípadà tí ó ńṣiṣẹ́ nínú c-Kit máa ńjẹ́ rírí ní ẹ̀kúnrẹ́rẹ́ lára àwọn aláìsàn ti acute myeloid leukemia (AML) tí wọ́n ní t(8;21) chromosomal translocation tí ó ńpèsè ìsopọ̀ purotéìnì AML1-ETO. Níbí a fi hàn pé àyípadà tí ó ńṣiṣẹ́ nínú c-Kit ńṣiṣẹ́ pẹ̀lú AML1-ETO láti fa AML nínú àwọn àwòṣe ìgbékalẹ̀ ẹgun ara ẹranko. Àwọn sẹ́ẹ̀lì àìsàn tí ó ńfi AML1-ETO hàn pẹ̀lú c-Kit(D814V) lè ṣe ìgbékalẹ̀ lẹ́sẹẹsẹ. Àwọn ìgbékalẹ̀ àyẹ̀wò fi hàn pé àwọn lineage(-)c-Kit(+)Sca-1(+) (KSL) sẹ́ẹ̀lì àìsàn, ṣùgbọ́n kì í ṣe lineage(+) sẹ́ẹ̀lì àìsàn, ni wọ́n kún fún àwọn sẹ́ẹ̀lì ipasẹ̀ leukemia (LSCs). Ìfiwéra àwọn àpẹẹrẹ ìfihàn gèné láàrín àwọn KSL sẹ́ẹ̀lì àìsàn àti tí ó dára túmọ̀ sí pé CD200R1 ní ìfihàn gíga nínú àwọn KSL sẹ́ẹ̀lì àìsàn ní àfiwé pẹ̀lú àwọn KSL sẹ́ẹ̀lì tí ó dára. Ìmudórí-òkè CD200R1 jẹ́ ẹ̀rí-àmúlò nínú àwọn lineage(-) sẹ́ẹ̀lì àìsàn, ṣùgbọ́n kì í ṣe nínú àwọn lineage(+) sẹ́ẹ̀lì àìsàn. Ìfihàn CD200R1 nínú àwọn lineage(-) sẹ́ẹ̀lì àìsàn kò ní ìbámu pẹ̀lú ìṣọ̀pọ̀ àwọn LSCs, èyí tó ńtọ́kasí pé CD200R1 kì í ṣe àmì tí ó wúlò fún àwọn LSCs nínú àwọn àwòṣe wọ̀nyí. Ó jẹ́ kíkàsí pé CD200R1 ní ìmudórí-òkè nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì KSL tí a gba pẹ̀lú AML1-ETO, ṣùgbọ́n kì í ṣe pẹ̀lú àwọn àyípadà leukemogenic mìíràn, tí ó ní c-Kit(D814V), AML1(D171N), àti AML1(S291fsX300). Ní ìbámu, ìmudórí-òkè CD200R1 nínú àwọn lineage(-) sẹ́ẹ̀lì àìsàn jẹ́ rírí nínú BM àwọn ẹranko tí wọ́n ńjìyà AML1-ETO-positive leukemia nìkan.

Hypothesis:
Ní ìgúnlẹ̀, AML1-ETO ṣe ìlọsókè CD200R1 nínú àwọn hóró lineage(-), èyí tí ó jẹ́ àbùdá pàtàkì fún AML1-ETO-positive leukemia nínú àwọn ẹlẹ́dẹ̀.


Premise:
Láti ṣe ìwádìí iṣẹ́ onkojẹ́nì tí jẹ́nì onkojẹ́nì NRAS (NRAS(G12V)) ní àyè àìsàn leukimia akutẹ myeloid (AML), a lo ìgbékalẹ̀ sistẹmu jẹnì tí a lè darí láti òpómúléró Vav- látéró tétírásakilínì (Vav-tTA) tí ó ń darí TRE-NRAS(G12V) transijẹni tí a lè fi dá dúró nínú àwọn ẹranko elégé tí Mll-AF9 tí ó ń fara hàn AML. Ìdásílẹ̀ alábàáṣẹ́ fún ìfihàn NRAS(G12V) dín iye àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ funfun (WBC) kù púpọ̀ lára àwọn ẹranko aláìsàn leukimia tí ó gba ẹ̀, ó sì mú ìparun aráàyà (apoptosis) wá fún àwọn sẹ́ẹ̀lì AML tí a gbè dáná tí ó bá mu pẹ̀lú ìdínkù ìfiránṣẹ́ Ras/Erk. Lẹ́yìn ìdínkù tí ó hàn gbangba ní àwọn sẹ́ẹ̀lì tí ó fẹ́ gbòòrò AML, àìsàn bí myeloproliferative (MPD) tí ó dàbí AML tún fara hàn tí ó ní ìwà àwọn sẹ́ẹ̀lì tí wọn kò fi NRAS(G12V) hàn. Ní ìfiwéra pẹ̀lú AML àkọ́kọ́, AML tí ó dàbí MPD fihàn pé kò le gbórò tí ó jẹ́ pàtàkì, ìdínkù ní ìnilólè myeloid, àti ìwà tí ó ti di oníyàtọ̀ sí.

Hypothesis:
A parí pé, nínú AML tí Mll-AF9 transgene ti fa, pípe NRAS(G12V) ṣe ìrànlọ́wọ́ láti ṣe àtìlẹ́yìn ìgbáyé lojijì nípa bíbò àpẹẹrẹ ìparun àyíká àti dídín ìyàtọ̀ àwọn hóró àìsàn lójijì kù.


Premise:
Ìpaarọ̀ tuntunrun (ITD) nínú àyè juxtamembrane ti Fms-like tyrosine kinase 3 (FLT3), èyí tí í ṣe onírúurú III ti awọn agbára tyrosine kinase (RTK), jẹ́ àbùjá ẹ̀yà kòkòrò tó wọ́pọ̀ jùlọ tí a mọ̀ sí acute myeloid leukemia (AML). Ìgbòkègbodò àbùjá ìdásílẹ̀ yìí mú un di àfojúsùn fún ìtọ́jú tó dá lórí ẹ̀yà kòkòrò. Àwọn ìdínà tyrosine kinase Indolinone ní àṣeyege tí a ti mọ̀ sí KIT, tí ó jẹ́ ẹgbẹ́ mìíràn nínú ẹ̀bí RTK onírúurú III. Nítorí ìjọra tí ó wà láàrín àwọn ẹgbẹ́ inú ẹ̀bí yìí, a ṣe àkíyèsí pé iṣẹ́ àwọn ìdínà KIT kan yíò tẹ̀síwájú dé FLT3. A lo oríṣiríṣi àwọn ìsàn hóró leukemic (BaF3, MV 4-11, RS 4;11) láti ṣe àyẹ̀wò iṣẹ́ àwọn ohun èlò indolinone lòdì sí iṣẹ́ FLT3 kinase ti àwọn ìpawó méjèèjì wild-type (WT) àti ITD. Àwọn SU5416 àti SU5614 méjèèjì lágbára láti dínà autophosphorylation ti àwọn ITD àti WT FLT3 (SU5416 ìdiwọ̀n tó dínà ìdá àádọ́ta [IC(50)], 100 nM; àti SU5614 IC(50) 10 nM). Ìdásílẹ̀ FLT3-onídàámọ́ ti àwọn èròjà ìfitónilétí ìdádúró mitogen-activated protein kinase (MAPK) àti signal transducer and activator of transcription 5 (STAT5) tún jẹ́ dídínà nípa ìtọ́jú nínú àwọn ìdiwọ̀n kannáà. Ìdínà FLT3 nípa SU5416 àti SU5614 yọrí sí àdínkù ìdàgbàsókè (IC(50), 250 nM àti 100 nM, lẹ́sẹẹsẹ) àti ìmúdání àtiwọ̀nsẹ̀ àwọn ìsàn hóró leukemic tó ní FLT3 ITD. Ìtọ́jú àwọn hóró wọ̀nyí pẹ̀lú àfikún ìdàgbà míràn (granulocyte-macrophage colony-stimulating factor [GM-CSF]) mú kí ìfitónilétí MAPK àti ìdàgbàsókè àwọn hóró padà sí ipò, tó fi hàn pé àwọn ipa ìdínà tí a ṣàkíyèsí jẹ́ pàtàkì.

Hypothesis:
A parí pé SU5416 àti SU5614 jẹ́ àwọn ajẹsẹ́pa alágbára ti FLT3.


前提:
伊卡替班，一种缓激肽-2受体拮抗剂，通过皮下注射给药，用于治疗I型和II型遗传性血管性水肿（hereditary angioedema）发作。注射后，患者会感到短暂的疼痛，随后在注射部位出现短暂的风团和潮红反应（即局部皮肤隆起和发红）。我们假设伊卡替班引起的风团和潮红反应是由于皮肤肥大细胞被激活释放组胺所致，因此可以通过H(1)-抗组胺药减轻。在健康志愿者前臂内皮内注射100 μg/mL组胺100 μL和10 mg/mL伊卡替班，引起了类似程度的风团和潮红反应，这些反应经西替利嗪预处理后分别减少了49%和41%（组胺）以及35%和41%（伊卡替班）。体外研究表明，1 × 10^(-4)和1 × 10^(-5) M浓度的伊卡替班可显著（P < 0.05）引起离体的人体皮肤肥大细胞（皮质肥大细胞）释放组胺。

假说:
总之，艾卡替班会引起组胺介导的风团和潮红反应（皮肤局部红肿和发热），这些反应的严重程度可能会通过预防性使用H(1)-抗组胺药（H1受体拮抗剂）而降低。


前提:
人体纤维蛋白原蛋白水解降解产物（纤维蛋白原降解产物，FDP）被发现可诱导大鼠腹腔肥大细胞（肥胖细胞）释放组胺。低分子量、可透析的肽（FDP）显示出最高的剂量依赖性组胺释放活性。FDP诱导的组胺释放可被金化合物奥拉诺芬在10(-5) - 10(-7) mol/l浓度下有效抑制，同时也可被非甾体抗炎药BW 755c、替美加定（timegadine）、美多桑（medosan）、萘普生和阿司匹林在较高的10(-4) - 10(-6) mol/l浓度范围内抑制。

假设:
研究结论是，抗炎药物，尤其是金诺芬(auranofin)、BW 755c（一种药物代码）和替美加定(timegadine)，可以在一定程度上调节肥大细胞释放组胺的过程，这一功能特性可能对关节疾病的治疗有益。


前提:
(E,Z)-3-(3',5'-二甲氧基-4'-羟基-苄叉)-2-吲哚酮（吲哚酮，indolinone）是一种生物碱，已被确定为传统抗炎药草菘蓝（woad，Isatis tinctoria）提取物中的药理活性成分。体外研究表明，吲哚酮能够抑制48/80复合物诱导的肥大细胞脱颗粒。将吲哚酮应用于骨髓源性肥大细胞，显示其在细胞质中均匀分布，且细胞摄取在几分钟内即告终止。用100nM吲哚酮预处理IgE致敏的肥大细胞，使其对FcεRI（高亲和力IgE受体）受体依赖性脱颗粒不敏感。然而，抗原诱导的上游信号传导，如PI3-K（磷脂酰肌醇3-激酶）和MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）的激活仍不受影响。

假说:
我们得出结论，吲哚酮（indolinone）在颗粒胞吐水平上阻断肥大细胞脱颗粒，其IC(100)为54nM。


前提:
FcεRI介导的肥大细胞和嗜碱性粒细胞预形成介质的胞吐作用（如组胺、血清素、β-己糖苷酶）对免疫抑制剂环孢素A和FK506敏感（IC50（半数抑制浓度）分别为200和4 nM），但对雷帕霉素不敏感。抑制机制似乎不涉及酪氨酸磷酸化、肌醇磷酸盐水解或钙离子流动。在此我们报告了使用分子方法来评估钙调神经磷酸酶（calcineurin，一种被认为是这些药物主要药理靶点的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶）作用的实验。钙调神经磷酸酶的活性需要其催化（A）亚基与固有调节（B）亚基的结合。我们假设，通过消耗钙调神经磷酸酶B亚基，从而减少活性A:B复合物的数量，或许会影响对钙调神经磷酸酶敏感的信号传递。因此，我们将钙调神经磷酸酶A亚基的抑制性（显性负性，dominant negative）形式转染到大鼠嗜碱性白血病（RBL）细胞中，该形式与钙调神经磷酸酶B亚基具有高亲和力，但不具有催化活性（B亚基敲除，BKO）。在这些转染细胞中，FK506抑制FcεRI介导的胞吐作用的剂量-反应曲线向左偏移，表明BKO转染细胞对药物的敏感性增加。

假说:
我们得出结论，腺苷对肥大细胞FcεRI介导的胞吐过程的抑制特异性地靶向调节钙调神经磷酸酶(CaN)的活性。


前提:
肥大细胞经过特异性识别2,4-二硝基苯基（DNP）基团的单克隆IgE抗体致敏后，暴露于DNP-BSA，并分别使用荧光探针BCECF和Fura-2记录pH和细胞质钙信号。阿塞拉斯汀完全抑制了DNP-BSA诱导的细胞碱化，其IC50（1.6 ± 0.5 μmol/l，平均值 ± 标准误差 (SEM)，n = 5）与抑制组胺释放所需的IC50（1.4 μmol/l）相似。相反，需要高浓度的阿塞拉斯汀（>100 μmol/l）才能抑制DNP-BSA依赖的细胞钙调动（IC50约为200 μmol/l，n = 3）。阿米洛利能够抑制DNP-BSA诱导的pH信号，而H1组胺拮抗剂吡拉明（马来酸氯苯那敏）则不能。在酸化的肥大细胞中，阿塞拉斯汀能有效抑制Na+:H+泵活性（IC50 = 7.7 ± 3.6 × 10⁻⁶ M，平均值 ± 标准误差 (SEM)，n = 3）。相反，在小鼠脾脏淋巴细胞中，阿塞拉斯汀无法抑制刀豆蛋白A (Concanavalin A) 诱导的对阿米洛利敏感的pH信号。

假说:
综上所述，氮卓斯汀促进组胺释放的作用并非是由于干扰细胞质钙信号通路所致。


前提:
罗德念虫聚集抑制剂1（RPAI-1）是一种从罗德念虫唾液腺中分离出的19千道尔顿（kDa）的蛋白质，通过强阳离子交换色谱和反相高效液相层析法纯化。基于RPAI-1的49个氨基末端氨基酸序列，制备了引物以生成探针，用于筛选罗德念虫唾液腺cDNA文库。含有RPAI-1全长克隆的噬菌体编码一个155个氨基酸的成熟蛋白。RPAI-1与来自苍白锥蝽（Triatoma pallidipennis）的triabin和pallidipin这两种脂蛋白显示序列同源性。cDNA序列被克隆到Pet17B大肠杆菌表达载体中，产生了一种活性肽。RPAI-1抑制由低浓度ADP、胶原、花生四烯酸、血栓素A2模拟物（U46619）以及极低剂量的凝血酶和convulxin触发的人类富血小板血浆聚集。我们在此证明ADP是RPAI-1的靶标，因为（i）RPAI-1抑制由U46619触发的ADP依赖性大量聚集形成和分泌，而不影响Ca2+增加和形态变化；（ii）ADP恢复了RPAI-1对U46619诱导的血小板聚集的抑制；（iii）RPAI-1恢复了PGE1诱导的cAMP增加（这种增加被U46619以ADP依赖的方式拮抗）；（iv）RPAI-1抑制低浓度ADP介导的经茚满处理的血小板反应；（v）通过大区域色谱法评估，RPAI-1与ADP结合。RPAI-1既不影响整合素α2β1介导的血小板反应，也不影响糖蛋白VI介导的血小板反应。

假说:
由此我们得出结论，RPAI-1是首个通过与腺苷二磷酸（ADP）结合这种新机制抑制血小板聚集的脂载蛋白。


前提:
为了增进我们对生长激素（GH）和胰岛素样生长因子（IGF）-I影响牛乳腺发育机制的理解，我们研究了T-box2（TBX2）和T-box3（TBX3）的潜在作用。尽管目前没有关于这两种转录因子在牛乳腺中表达的信息，但已知TBX3及其密切相关的家族成员TBX2对人类和小鼠的乳腺发育是必需的。此外，人类和小鼠的TBX3突变会导致尺神经-乳腺综合征。骨骼中的证据表明，TBX3对于细胞增殖是必需的，其表达受GH调节，而GH是乳腺发育和泌乳的重要调节因子。我们假设TBX2和TBX3在牛乳腺中表达，并且GH、IGF-I或两者都能增加牛乳腺上皮细胞（MEC）中TBX2和TBX3的表达。我们获取了牛乳腺组织、MAC-T细胞（牛乳腺上皮细胞系）、原代MEC和成纤维细胞，并通过实时逆转录PCR（聚合酶链式反应）测定TBX2和TBX3的表达。此外，我们还检测了用100或500纳克/毫升的GH或100或200纳克/毫升的IGF-I处理24或48小时后细胞中TBX2和TBX3的表达。TBX2和TBX3均在牛乳腺组织中表达。令人惊讶的是，TBX2的表达仅在乳腺成纤维细胞中检测到，而TBX3在所有3种细胞类型中均有表达。生长激素并未改变MAC-T细胞或MEC中TBX3的表达。然而，IGF-I增加了MAC-T细胞中TBX3的表达，但对原代MEC无影响。我们没有观察到用GH和IGF处理的成纤维细胞中TBX2或TBX3表达的变化。

假说:
因此，我们得出结论：（1）TBX2和TBX3在牛乳腺中表达，（2）它们的表达具有细胞类型特异性的，以及（3）Fur（毛皮蛋白）刺激MAC-T细胞（乳腺上皮细胞系）中TBX3的表达。


前提:
已经研究了肝素对凝血酶和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）之间反应的影响。当PAI-1过量50倍时，凝血酶抑制的速率常数为458 mol·L-1·s-1，在存在25微克/毫升未分级肝素或对抗凝血酶低亲和力肝素的情况下，这一数值增加到5,000 mol·L-1·s-1。然后通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），使用接近等摩尔浓度的反应物，研究了低亲和力肝素的效果。在没有肝素的情况下，凝血酶和PAI-1形成了稳定的化学计量复合物，这种复合物在加入25微克/毫升低亲和力肝素后没有解离。相比之下，当在反应开始时加入低亲和力肝素时，PAI-1-凝血酶复合物的形成最初有所增加，但随后迅速出现未反应PAI-1和凝血酶-PAI-1复合物的大量蛋白水解裂解。(我们)详细研究了凝血酶和PAI-1的相对浓度以及低亲和力肝素的存在可能影响反应产物的这一想法。对组织纤溶酶原激活剂（tPA）和PAI-1活性的定量酶谱图分析以及凝血酶活性的发色底物法测定表明，低亲和力肝素刺激了等摩尔量凝血酶对PAI-1的失活，但仅对凝血酶抑制产生最小程度的刺激。

假说:
结论是，当PAI-1过量时，低亲和力肝素刺激凝血酶抑制作用，但意外的是，当凝血酶与PAI-1等摩尔浓度时，低亲和力肝素增强PAI-1的失活。


前提:
骨延长术（DO）是一种通过机械牵引直接诱导新骨形成的过程。肿瘤坏死因子-α（TNF）是一种可以调节成骨细胞生成的细胞因子。在啮齿类动物中，TNF对直接骨形成的直接影响被假设是通过TNF受体1和/或2（TNFR1/2）信号传导介导的。我们利用一种独特的小鼠DO模型来评估1）TNFR纯合子基因敲除对直接骨形成的影响和2）重组鼠TNF（rmTNF）对野生型（WT）、TNFR1(-/-)（R1KO）和TNR2(-/-)（R2KO）小鼠的影响。对牵引间隙直接骨形成的放射学和组织学分析显示，WT、R1KO、R2KO或TNFR1(-/-)和R2(-/-)（R1和2KO）小鼠之间没有显著差异。R1和2KO小鼠血清TNF水平升高，但没有显示新骨形成的抑制。在DO期间通过渗透泵系统给予rmTNF（10 μg/kg/天）导致WT和R2KO小鼠的间隙骨形成指标显著抑制，但对R1KO小鼠没有影响。

假说:
我们得出结论，外源性重组鼠肿瘤坏死因子（rmTNF）和/或内源性肿瘤坏死因子（TNF）主要通过肿瘤坏死因子受体1（TNF R1）信号传导来抑制骨延长术（DO）期间的新骨形成。


前提:
尽管Gbetagamma被认为介导了G蛋白偶联受体刺激引起的有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）活化，但这一途径中涉及的机制尚未明确定义。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）被提议作为这一过程中的早期中间体，但其作用尚不明确。我们观察到p110beta的显性抑制性突变体，而非p110gamma的突变体，抑制了溶血磷脂酸（LPA）响应引起的MAPK刺激。p110beta的作用位于Ras的上游。为了确定p110beta的脂质或蛋白激酶活性中哪一个对Ras活化更为重要，我们制造了一种缺乏脂质激酶活性但保留蛋白激酶活性的p110beta突变体。这种蛋白质表现出与激酶失活突变体相似的显性抑制性活性，表明p110beta的脂质激酶活性本质上参与了Ras的活化。与此一致，过表达脂质磷酸酶PTEN被发现特异性地抑制LPA诱导的Ras刺激。此外，我们观察到含PH结构域的衔接蛋白Gab1，在LPA刺激期间参与p110beta的活化，也在p110beta的下游参与了这一途径。事实上，在PI3K抑制剂或显性抑制性p110beta存在的情况下，Gab1的膜重定位和磷酸化都减少了。在Gab1的下游，Src同源性蛋白酪氨酸磷酸酶2（SHP2）被发现介导了LPA响应引起的Ras活化，并通过PI3K和Gab1被招募，因为转染缺乏SHP2结合位点的Gab1突变体抑制了Ras活化，但不干扰PI3K活化。

假说:
我们得出结论，p110beta的脂质激酶活性对于LPA诱导的Ras蛋白活化至关重要，并且PI3K和Gab1参与了这一通路。


前提:
促卵泡刺激素（FSH）在精子发生中的作用尚不明确，因为有报道称在促性腺激素缺乏的大鼠中，单独使用睾酮就足够了。本研究考察了重组FSH对促性腺激素释放激素（GnRH）免疫导致促性腺激素撤退后精子发生恢复的影响。成年Sprague-Dawley大鼠接受GnRH免疫原（100 微克，皮下注射，每4周一次）以诱导促性腺激素缺乏，12周后出现严重的精子发生退化。然后给予重组人FSH（10或50 IU/kg，皮下注射，每日一次）7、14和21天，分析中将两种剂量的数据合并。

对睾丸进行灌注固定，并使用光学分割器技术定量生殖细胞数量。FSH治疗7天后，睾丸重量明显增加43%（P < 0.01），14天和21天时没有进一步增加。GnRH免疫显著减少了生殖细胞数量。经过7天的FSH治疗后，除了延长的精子细胞外，所有类型的细胞数量都明显恢复（P < 0.05）：
- A型精原细胞（精子干细胞）：45% --> 61%（对照）
- B型精原细胞/前粗线期精母细胞：46% --> 65%
- 细线期/偶线期精母细胞：39% --> 55%
- I-VIII期粗线期精母细胞：11% --> 30%（对照）
- IX-XIV期粗线期精母细胞：4.3% --> 22%（对照）
- I-VIII期圆形精子细胞：1.4% --> 4.4%（对照）

延长FSH治疗并未进一步增加A型精原细胞或粗线期精母细胞数量，而圆形精子细胞增加到对照值峰值的12.8%。在任何阶段，FSH都未能使延长的精子细胞数量增加到对照水平的1%以上。

GnRH免疫或FSH治疗后，溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）在精原细胞和早期精母细胞核中的掺入没有变化。任何处理都没有改变Sertoli细胞（支持细胞）数量。然而，GnRH免疫显著降低了Sertoli细胞核体积（142 ± 9 vs. 455 ± 22 μm³；P < 0.01），FSH治疗7天和14天后分别增加到212 ± 10和259 ± 24 μm³。

FSH治疗使血清抑制素水平恢复正常，但没有增加血清或睾丸雄激素水平。

假说:
我们得出结论，重组促卵泡激素（rFSH）通过增加精原细胞数量并促进后续成熟步骤直至圆形精子细胞阶段，部分恢复了促性腺激素缺乏的大鼠的精子生成。


前提:
人类卵泡液（hFF）诱导人类精子发生顶体反应（AR）的能力已被多个实验室证实，这些卵泡液来自接受体外受精（IVF）的女性。然而，hFF中的活性因子的本质及AR诱导的生理意义仍存在高度争议。我们对hFF进行了三步纯化，并对所有分离组分进行了AR诱导活性筛选。AR活性与分子量（M(r)）大于180 kD的蛋白质组分相关，进一步通过聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分析发现该组分由表观分子量为50,000和29,000的亚基组成。这些条带的N末端序列（蛋白质氨基端序列）与人IgG的重链和轻链显示100%的同源性。针对纯化蛋白质制备的多克隆抗体和抗人IgG抗体都能抑制未处理hFF的顶体反应诱导活性。然而，正常人血清和纯化的人IgG制剂都无法模拟hFF的AR诱导活性。

假说:
我们得出结论，人IgG介导了在人胎儿成纤维细胞（hFF）中AR的诱导。


前提:
高胰岛素血症增强了人绒毛膜促性腺激素（hCG）亚排卵剂量诱导大鼠卵巢囊肿的能力。为确定这些激素对卵巢囊肿发展的相对贡献，成年雌性大鼠接受以下处理：（1）仅给予载体（对照组），（2）相于对照组的高脂饮食（HFD）以研究体重增加的影响，（3）每天两次1.5~6IU hCG加上6U胰岛素（Ins）/天，或（4）1.5～9U Ins/天加上每天两次3IU hCG。在体内实验的第23天，所有接受至少6U Ins/天的组别与对照组和HFD组相比显示体重增加（P < or = .05）。此日，没有对照组大鼠和仅有一只HFD大鼠出现卵巢囊肿。与对照组大鼠相比，具有非囊性卵泡的HFD大鼠的血浆雌酮（E1）和雄烯二酮（A4）水平升高（P < or = .05）。接受6UIns/天加上每天两次1.5～6IU hCG注射的大鼠中，64%至80%在第23天出现卵巢囊肿。这些处理组的血浆雌二醇（E2）浓度与对照组大鼠相似。在激素处理的动物中，只有那些接受对每天两次4.5或6IU hCG加6U Ins/天注射处理的反应出现卵巢囊肿的动物，其血浆A4和/或睾酮水平与对照组相比升高。相比之下，对增加hCG剂量的加固定剂量6U Ins/天的反应出现卵巢囊肿的动物，其血浆E1浓度在第23天升高。接受每天两次3IUhCG加上每天1.5至6UIns处理的大鼠中，70%至80%在第23天出现卵巢囊肿。与之形成鲜明对比的是，接受这一剂量hCG加9UIns/天处理的大鼠中，只有25%发展出囊性卵泡。在测试的血浆类固醇激素中，只有E1和A4在这些处理组中与对照组相比升高。然而，这些血浆类固醇激素浓度的增加与胰岛素剂量并不相关。

假说:
我们从这些数据得出结论，尽管其机制尚待阐明，极度高胰岛素血症具有看似矛盾的能力，可在某些动物中抑制人绒毛膜促性腺激素（hCG）诱导的肾小球肌酐比（ACR）。


前提:
我们证明了在非繁殖季节，皮质醇输注降低了去势母羊在雌二醇处理下对固定每小时促性腺激素释放激素（GnRH）注射的黄体生成素（LH）反应（垂体钳制模型）。相比之下，在繁殖季节，皮质醇并不影响下丘脑-垂体断离的去势母羊对每2小时不变GnRH注射的反应。为了理解这些动物模型中的不同结果，并确定皮质醇是否可以直接作用于垂体以抑制对GnRH的反应性，我们对GnRH刺激频率、雌二醇的存在以及年周期性繁殖季节阶段的重要性进行了研究。在实验1中，非繁殖季节期间，去势母羊接受雌二醇处理，并通过每小时或每2小时静脉注射（i.v.）GnRH恢复脉冲性LH分泌，同时给予或不给予外源性皮质醇。实验2和3在下丘脑-垂体断离的去势母羊中进行，每2小时静脉注射一次GnRH。实验2在非繁殖季节进行，采用交叉实验设计输注生理盐水或皮质醇30小时。实验3在非繁殖季节和繁殖季节进行，采用交叉实验设计在有无雌二醇的情况下输注生理盐水或皮质醇30小时。从所有动物中采集样本以测量血浆LH。在垂体钳制模型中，皮质醇降低了LH脉冲幅度，每小时和每2小时GnRH脉冲模式之间没有差异。在没有雌二醇的情况下，在两个季节中，皮质醇对GnRH替代的去势下丘脑-垂体断离母羊的LH脉冲幅度没有影响。在实验3中，当在雌二醇处理期间输注皮质醇时，两个季节的LH脉冲幅度都降低了。

假说:
我们得出结论，毫克/千克(mg/kg)减少LH分泌的能力不依赖于GnRH刺激的频率，并且雌二醇使毫克/千克(mg/kg)能够直接作用于卵巢切除和下丘脑-垂体断开连接的母羊的垂体，从而抑制对GnRH的反应性。这种效应在繁殖季节和非繁殖季节都会发生。


前提:
在实验1中，向26天大的青春期前大鼠注射PMSG以诱导排卵。在第2天（2天后，相当于动情前期）上午8点给予5毫克羟基氟胺（hydroxyflutamide）或载体（对照组），中午12点给予2毫克孕酮或睾酮或载体（对照组）。动物在第2天下午6点或第3天上午9点被处死。在羟基氟胺处理的大鼠中，孕酮而非睾酮恢复了排卵前黄体生成素（LH）峰值和排卵。在实验2中，在第2天上午10:30至11:00之间注射2毫克孕酮或睾酮，以提前PMSG预处理的青春期前大鼠的动情前LH峰值和排卵。注射羟基氟胺消除了孕酮提前LH峰值或排卵的能力。睾酮未能诱导LH峰值或排卵的提前。在实验3中，植入雌二醇-17β（oestradiol-17 beta）的卵巢切除青春期前大鼠在下午6点的血清LH浓度显著（P < 0.01）高于上午10点观察到的浓度。向这些动物注射孕酮进一步以剂量依赖性方式提高了下午6点的血清LH浓度，最大值为1毫克孕酮。羟基氟胺处理显著（P < 0.003）降低了接受0-1毫克孕酮的大鼠的血清LH值，但2毫克孕酮能够克服这种抑制。

假说:
结论是羟基氟他胺而非睾酮可以逆转孕酮对排卵前促黄体激素峰值和排卵的影响。


前提:
病例对照研究探讨了海洋来源的n-3长链多不饱和脂肪酸（n-3 LC PUFAs）与尿酸（UA）在葡萄糖代谢和2型糖尿病（T2DM）风险方面的相互作用。研究包括对照组211名健康受试者和病例组268名T2DM受试者。采用标准方法检测血浆磷脂脂肪酸和生化参数。病例组血浆磷脂C22:6n-3显著低于对照组，并与空腹血糖呈负相关（r = -0.177，p < 0.001）。较高的血浆磷脂C22:6n-3与较低的T2DM风险相关，每单位C22:6n-3增加的优势比（比值比）为0.32（95%置信区间（CI），0.12 至 0.80；p = 0.016）。病例组UA显著低于对照组。在健康受试者中，UA与空腹血糖呈正相关，但在T2DM受试者中，这种相关性变为负相关。观察到C22:6n-3和UA对空腹血糖有显著的相互作用（相互作用p值 = 0.005）：C22:6n-3的降低效应仅在UA水平较低的受试者中显著。

假说:
总之，葡萄糖代谢与:6n-3相互作用，并与尿酸（UA）共同来调节C22。


前提:
我们先前报告了内源性ATP结合盒转运蛋白(ABC)A7与吞噬功能而非高密度脂蛋白(HDL)的生成强烈相关，并受固醇调节元件结合蛋白(SREBP)2的调控。在J774细胞和小鼠腹膜巨噬细胞中，发现载脂蛋白(apo)A-I和apoA-II将吞噬活性提高到最大值的两倍以上。因此，我们研究了这一反应的分子基础及其与ABCA7功能的关联。与ABCA1类似，ABCA7可能被钙蛋白酶降解，而apoA-I和apoA-II可稳定ABCA7免于降解。细胞表面生物素标记实验表明，内源性ABCA7主要存在于细胞表面，而载脂蛋白可增加表面ABCA7。在经ABCA1 siRNA处理的J774细胞和ABCA1基因敲除小鼠的腹膜巨噬细胞中，载脂蛋白引起的吞噬作用增强仍然存在，但在经ABCA7 siRNA处理的J774细胞和ABCA7基因敲除小鼠的腹膜巨噬细胞中，这种增强作用被消除。与野生型对照组相比，ABCA7基因敲除小鼠腹腔内细胞的吞噬作用降低。

假说:
因此，我们得出结论，细胞外螺旋状载脂蛋白（extracellular helical apolipoproteins）通过稳定 ABCA7 来增强与 ABCA7 相关的吞噬作用。


前提:
脂蛋白在代谢和心血管疾病的发展中具有至关重要的作用，从对靶组织有保护作用，也有有害影响。已经证明极低密度脂蛋白（VLDL）可诱导脂毒性脂质聚集（即有害的脂质积累），并对心肌细胞产生多种负面影响。脂毒性和内质网（ER）应激被认为是代谢疾病对心血管系统造成损害的介质。我们用脂蛋白处理心肌细胞，以评估这些细胞对饥饿和脂蛋白过量引起的代谢应激的适应性，并评估脂蛋白和脂质聚集对ER应激的影响。VLDL逆转了饥饿引起的代谢应激，而高密度脂蛋白（HDL）则没有。VLDL诱导心肌细胞剂量依赖性脂质聚集，但这并未导致细胞活力降低或ER应激的诱导。此外，VLDL或HDL预处理减少了霉酮素（tunicamycin）和棕榈酸诱导的心肌细胞ER应激，这通过ER应激标志物的表达测量，即使在脂质聚集增加的情况下也是如此。VLDL和HDL诱导心肌细胞中促细胞存活的ERK1/2的活化；然而，这种活化并不参与对抗ER应激的保护。此外，此外，我们观察到 LDLR 和 VLDLR 受脂蛋白和细胞应激的不同调节，因为脂蛋白诱导的 VLDLR 蛋白与脂质积累水平无关。

假说:
我们得出结论，内质网应激本质上并非对心肌细胞有害，甚至可能产生有益影响，使细胞能够在饥饿状态下存活并减弱VLDL。


前提:
肝毒性的胆汁酸甘氨胆酸（GCDC）通过活化JNK、Akt和Erk调节肝细胞死亡。非肝毒性的胆汁酸牛磺胆酸（taurocholate）通过鞘氨醇-1-磷酸受体2（S1PR2）活化Akt和Erk。S1PR2在GCDC介导的细胞凋亡和激酶活化中的作用尚不清楚。研究在大鼠肝细胞、HUH7细胞和稳定转染大鼠钠离子依赖性牛磺胆酸共转运多肽（Ntcp）的HUH7细胞（HUH7-Ntcp）中进行。细胞经GCDC处理后，通过Hoechst染色形态学观察细胞凋亡，并通过免疫印迹法对活化的caspase 3裂解片段进行生化监测。使用磷酸化特异性抗体进行免疫印迹法测定激酶活化。S1PR2抑制剂JTE-013显著减弱了GCDC诱导的形态学细胞凋亡证据，并阻止了大鼠肝细胞和HUH7-Ntcp细胞中caspase 3的裂解。在肝细胞中，JTE-013对GCDC诱导的JNK、Akt和Erk磷酸化分别有轻度抑制、增强作用和无影响。除JNK和Erk磷酸化受到轻度抑制外，在HUH7-Ntcp细胞中观察到类似结果。在HUH7-Ntcp细胞中基因敲低S1PR2增强了Akt磷酸化，抑制了JNK磷酸化，但对Erk磷酸化无影响。GCDC未能在HUH7细胞中诱导细胞凋亡或激酶活化。

假说:
总结而言，SIPR2抑制缓解了GCDC诱导的细胞凋亡，并分别促进和增强了GCDC诱导的JNK和Akt磷酸化。


前提:
大脑沉积淀粉样β肽（A β，amyloid beta-peptide）是阿尔茨海默病的组织病理学特征。由于A β清除受损可能参与该疾病的发生，我们研究了合成A β（40个残基肽）在胶质细胞培养中的蛋白水解降解，并同定了其中涉及的一种蛋白酶。虽然大鼠星形胶质细胞的降解能力很低，而培养的大鼠小胶质细胞能够切割A β。小胶质细胞的活性在脂多糖刺激下显著增强，在佛波酯刺激下增强程度较小。大部分A β降解活性被释放到培养基中。通过使用选择性抑制剂，该蛋白酶被鉴定为约200 kDa的金属蛋白酶，与中性内肽酶（一种神经肽降解酶）、基质金属蛋白酶或巨噬细胞弹性蛋白酶不同。四种已被证实可抑制膜蛋白分泌酶（解整合素）的羟肟酸基锌金属蛋白酶抑制剂能有效降低其活性。

假说:
我们得出结论，在体外条件下，Aβ（β-淀粉样蛋白）被微胶质细胞通过一种新型金属蛋白酶酶进行降解。


前提:
选择性5-HT2受体阻断剂利坦色林是抗高血压药物酮坦色林的类似物。通过评估利坦色林的降压效果，本研究旨在间接阐明酮坦色林的作用机制。十三名原发性高血压患者接受安慰剂和利坦色林（10mg, b.i.d.)）治疗，采用双盲交叉试验设计（每期4周）。在治疗期结束时，对24小时内的血压 (BP) 和利坦色林血浆浓度进行评估。尽管利坦色林的稳态和峰值血浆浓度较高，但与安慰剂相比，该化合物并未降低血压。

假说:
由于通过利坦色林进行慢性选择性 4alpha-PDBu 受体阻断并未降低血压，因此，可以得出结论，凯坦色林(ketanserin)的 4alpha-PDBu 阻断特性不能单独解释其降压效果。


前提:
慢性肾病（CKD）与肾脏一氧化氮（NO）产生的减少和血浆甲基精氨酸水平的升高有关。天然存在的胍基甲基化精氨酸N-单甲基-l-精氨酸（l-NMMA）和非对称二甲基-l-精氨酸（ADMA）抑制一氧化氮合酶活性。我们假设ADMA和l-NMMA通过耗竭NO而损害肾小球滤过屏障的完整性。我们研究了ADMA对分离肾小球白蛋白渗透性（P(alb)）的影响，并检查这种影响是否涉及NO和超氧化物自由基（O(2)(*-)）依赖的机制。CKD患者循环中发现的ADMA浓度以剂量依赖的方式降低了cGMP并增加了P(alb)。l-NMMA也引起了类似的P(alb)增加，但所需浓度比ADMA高两个数量级。NO供体DETA-NONOate（地特诺诺酯）或cGMP类似物消除了ADMA对P(alb)的影响。超氧化物歧化酶模拟物tempol（坦泊尔）或NAD(P)H氧化酶抑制剂apocynin（阿朴西宁）也阻止了ADMA诱导的P(alb)增加。NO独立的可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）激活剂BAY 41-2272（巴伊41-2272），在增加肾小球cGMP的产生的浓度下，减弱了ADMA诱导的P(alb)增加。此外，血红素位点选择性抑制剂ODQ（奥迪奇）使sGC失能，增加了P(alb)。

假说:
我们得出结论，ADMA通过改变NO和O(2)(*-)的生物利用度（生物可利用性）损害了滤过屏障的完整性，并且NO独立性的sGC（可溶性鸟苷酸环化酶）激活在NO耗竭的条件下维持了这一屏障的完整性。


前提:
血管紧张素II（ANG II）诱导的炎症性和氧化应激反应促进了高血压的发病机制。在这项研究中，我们确定了下丘脑室旁核（PVN）中肾素-血管紧张素系统（RAS）的激活是否通过与PVN中的神经递质相互作用促进了ANG II诱导的高血压反应。大鼠接受了为期4周的ANG II或生理盐水的皮下输注。这些大鼠通过微型渗透泵经双侧PVN进行了4周输注载体或losartan（LOS，一种血管紧张素II 1型受体[AT1-R]拮抗剂）的治疗。ANG II输注导致PVN中谷氨酸、去甲肾上腺素（NE）、AT1-R和促炎细胞因子（PIC）水平升高，而γ-氨基丁酸（GABA）水平降低。接受ANG II的大鼠的平均动脉压、血浆PIC、NE和醛固酮水平也高于对照动物。PVN用LOS治疗缓解了这些ANG II诱导的高血压反应。

假说:
我们得出结论，血管紧张素II在室旁核引起的肾素-血管紧张素系统(RAS)活化，通过与室旁核中的神经递质相互作用，促进了RAS介导的高血压反应。


前提:
我们研究了不同药理类别的降压药物长期（15天）给药对两肾-夹型肾 血管性高血压（2K1C）大鼠动脉压（AP）和心率变异性的影响。2K1C大鼠通过灌胃接受以下之一：水、雷米普利、氯沙坦、阿替洛尔、氨氯地平或氢氯噻嗪。假手术的正常血压大鼠接受水。治疗15天后，通过留置导管在清醒大鼠中连续2小时AP采样，并对收缩压AP和脉搏间期（PI）进行自回归谱分析（autoregressive spectral analysis），将振荡成分分别量化为低频（LF：0.25至0.75 Hz）和高频（HF：0.75至3.0 Hz）频带。尾压法测得的AP在2K1C大鼠中为170 ± 2毫米汞柱，在正常血压大鼠中为131 ± 3毫米汞柱。综合数据显示，所有降压药物将2K1C大鼠的AP降至127 ± 2毫米汞柱，而接受水处理的2K1C大鼠仍保持高血压（206 ± 11毫米汞柱）。接受水处理的2K1C大鼠收缩压AP变异度增加（34 ± 2毫米汞柱²），而接受雷米普利、阿替洛尔、氨氯地平或氢氯噻嗪治疗的2K1C大鼠的AP变异度与正常血压大鼠相似（16 ± 2毫米汞柱²）。氯沙坦使2K1C大鼠的AP正常化，但收缩压AP变异度仍然增加（34 ± 7毫米汞柱²）。接受水处理的2K1C大鼠收缩压AP的LF增加，而接受氯沙坦治疗的2K1C大鼠显示出更高的收缩压AP和PI的LF。阿替洛尔表现出较低的LF和较高的PI的HF。

假说:
总之，AP（请提供全称）使洛沙坦正常化（归一化），但未减少洛沙坦的变异性（波动性），这表明存在以心血管系统更高的交感神经调节为特征的自主神经失衡。


前提:
人们对高频（HF）和低频（LF）血压变异性（BPV）的产生机制已有相当充分的了解。然而，关于极低频（VLF）BPV的起源知之甚少。我们检测了“VLF BPV是由L型Ca²⁺通道依赖机制产生的”这一假设。在清醒的大鼠中，记录对照组（n = 8）和神经节阻滞（阻断自主神经节传导）组（n = 7）的动脉血压，同时静脉输注剂量逐渐增加（0.01-5.0 mg·100μL⁻¹·h⁻¹）的L型Ca²⁺通道阻滞剂硝苯地平。通过收缩压功率谱分析评估VLF（0.02-0.2 Hz）、LF（0.2-0.6 Hz）和HF（0.6-3.0 Hz）BPV。

在对照组，硝苯地平导致VLF和LF BPV呈剂量依赖性的下降，而HF BPV不受影响。在最高剂量的硝苯地平下，VLF BPV与基线相比减少了86%，表明VLF BPV主要由L型Ca²⁺通道依赖机制介导。VLF BPV似乎比LF BPV对L型Ca²⁺通道的依赖性相对更高，这是因为显著降低VLF BPV所需的硝苯地平剂量低于降低LF BPV所需的剂量。

神经节阻滞显著降低了VLF和LF BPV，并消除了硝苯地平引起的VLF和LF BPV剂量依赖性的下降。这表明VLF和LF BPV需要交感神经活动才能显现。

假说:
总之，极低频血压变异性（VLF BPV）主要由L型NF449 (2+) 通道依赖性机制介导。


前提:
人体血液树突状细胞（DC）包括浆细胞样树突状细胞（PDC）和髓样树突状细胞（MDC），它们都能启动抗肿瘤T细胞反应。我们前瞻性地监测了30名慢性骨髓性白血病（CML）患者在甲磺酸伊马替尼治疗前后的血液DC。我们发现在治疗前PDC和MDC显著减少。这种减少与血浆中血管内皮生长因子(VEGF)水平较高有关，VEGF是血管生成的中心调节因子，同时也参与肿瘤相关的免疫缺陷。对DC的表型分析显示，一些患者的PDC上BDCA-4/神经纤毛蛋白-1表达缺失，这种分子参与血管生成和DC-T细胞相互作用。高水平的血浆VEGF与体内Th1/Th2平衡(辅助T细胞1型/2型平衡)失调相关，并在体外将PDC诱导的T细胞极化转向Th2。在甲磺酸伊马替尼治疗后，血浆VEGF水平迅速下降，BDCA-4表达恢复正常。PDC和MDC数量增加，但未达到健康个体的水平。

假说:
我们得出的结论是，VEGF可能在慢性髓性白血病中血液树突状细胞缺乏方面扮演关键角色，我们还证明了伊马替尼能够抑制VEGF的过度产生。


前提:
白细胞介素-6（IL-6）调节免疫参数和系膜细胞功能的能力，这表明该细胞因子在自身免疫性肾小球肾炎的发展中发挥作用。这一假说在6个月大的雌性（NZB x NZW）F1小鼠中进行了测试，这些小鼠被施用重组人IL-6（rhIL-6）（50和250mg/kg 皮下注射）持续12周，导致出现了加速的和严重的膜增生性肾小球肾炎，伴随着系膜主要组织相容性复合体（MHC）II类抗原和肾小球ICAM-1（细胞间粘附分子-1）表达的显著上调。为了区分rhIL-6对肾脏系膜的直接影响和通过免疫系统介导的影响，（NZB x NZW）F1小鼠接受了环孢素A免疫抑制治疗。环孢素A的免疫抑制作用抑制了肾小球肾炎的发展，降低了II类抗原表达，并消除了IL-6介导的效应。给予中和抗IL-6抗体对（NZB x NZW）F1小鼠自发性肾小球肾炎的发展没有影响。这一发现，加上血清中无法检测到的IL-6水平，使得内源性产生的IL-6在该疾病模型中起致病作用的可能性不大。与（NZB x NZW）F1小鼠相比，每天给予高剂量rhIL-6（500微克/公斤）或重组鼠IL-6（100微克/公斤）持续4周的亲本NZW或BALB/c小鼠未出现膜增生性肾小球肾炎的形态学或生化证据。急性期反应蛋白的诱导、贫血、血小板增多以及肾脏II类抗原的诱导证实了IL-6在这些小鼠中的生物学活性。

假说:
总之，虽然在正常小鼠中是不引起肾炎的，但IL-6通过调节免疫系统介导的效应，加速了(NZB x NZW)F1小鼠遗传性肾小球肾炎的发展。


前提:
我们之前证明了蓝藻螺旋藻(Spirulina platensis, SPE)的有机提取物对巨噬细胞具有强效的抗炎作用。由于巨噬细胞和脂肪细胞之间的相互作用对脂肪细胞功能至关重要，我们研究了SPE在巨噬细胞中的抗炎作用对3T3-L1脂肪细胞的脂肪生成/脂质生成过程的影响。在脂肪细胞分化的不同阶段，3T3-L1前脂肪细胞分别用10%的脂多糖(LPS)刺激的RAW 264.7巨噬细胞条件培养基(CMC)或LPS刺激但预先用SPE处理的巨噬细胞条件培养基(CMS)处理。当在第3天添加时，CMC显著抑制了脂肪细胞分化标志物的表达，如CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和周脂素，而CMS减轻了这种抑制。油红O染色法证实，CMS处理的细胞的脂肪细胞成熟度与对照细胞相当，而CMC处理的细胞则不然。与CMC相比，CMS降低了核因子κB (NF-κB) p65的核转运。在富脂肪细胞中，CMC促进了脂滴流失，而CMS的影响则很小。在脂肪细胞成熟过程中，组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)的mRNA和蛋白质水平增加，而CMC则降低了这种增加。

假说:
总之，通过与脂肪细胞的交互作用，SPE在巨噬细胞中的抗炎作用促进了脂肪细胞的分化和成熟，至少部分是通过抑制NF-κB炎症信号通路的激活，而这一过程在炎症条件下可能会受到影响。


前提:
本研究的目的是进一步探讨剧烈运动后外周血中自然杀伤（NK）细胞的细胞毒性活性被抑制的机制。从跑步者（RUN，n=6）和静息对照组（CONTROL，n=4）在 VO2 峰值 80% 的情况下跑步机上跑 60 分钟前、后0、1.5、5和24小时收集血液，分析自然杀伤（NK）细胞浓度、细胞毒性活性、CD2表面表达和穿孔素基因表达。自然杀伤（NK）细胞毒性活性使用全血51铬释放试验测量，CONTROL组波动很小，而RUN组在运动后0和1.5小时分别增加63%和减少43%（组别与时间的交互作用，P < 0.001）。溶解指数（每个细胞的细胞毒性活性）没有变化。使用定量实时聚合酶链反应（QRT-PCR）测量的穿孔素mRNA从运动前到运动后有所减少，并在24少时内保持减少状态。从运动前到运动后0小时的减少主要见于RUN组，并与运动前穿孔素mRNA呈负相关（r=-0.95）。自然杀伤（NK）细胞表面CD2（淋巴细胞功能相关抗原-2）的表达使用荧光抗体和流式细胞计量术测定。表达CD2的自然杀伤（NK）细胞比例或CD2密度没有变化。

假说:
我们得出结论：（1）数量重新分布解释了剧烈跑步后NK细胞杀伤活性变化的大部分原因，（2）跑步过程中穿孔素基因表达的增加与运动前水平成反比，但与NK细胞杀伤活性的变化并不平行，（3）运动CD2表面表达不受运动影响。


前提:
Toll样受体（TLRs）通过感知保守的微生物产物在激活先天免疫系统中发挥重要作用。Fc γ受体IIb（FcγRIIb），即抑制性Fc受体，通过与免疫球蛋白G的Fc区域结合来发挥其免疫调节功能。尽管对Toll样受体和FcγRIIb的各自作用进行了深入研究，但FcγRIIb和TLR4在B细胞上的相互作用仍不清楚。本研究表明，FcγRIIb与免疫复合物（IC）结合可通过增强LYN原癌基因（Lyn）的磷酸化，减弱TLR4触发的核因子κB（NF-κB）激活，并降低B细胞释放白细胞介素-6（IL-6）的水平。此外，IC处理可保护小鼠免于致命的内毒素休克。相应地，IC降低了LPS诱导的血清IL-6水平，以及体内B细胞的细胞内IL-6产生。然而，在FcγRIIb基因敲除小鼠中未观察到IC的这些保护和抑制作用。

假说:
综上所述，现有数据表明TLR4通过激活Lyn磷酸化和抑制NF-κB信号传导作用来抑制B细胞中的FcγRIIb信号传导作用。


前提:
我们采用[3-(3)H]葡萄糖输注、[(3)H]水形成测量和间接量热法相结合的方式，研究了葡萄糖耐量受损（IGT；n = 21）和正常葡萄糖耐量（NGT；n = 10）受试者在高血糖钳夹试验期间血浆葡萄糖的细胞内代谢命运。IGT与第一阶段胰岛素反应降低约35%、正常的第二阶段胰岛素反应和胰岛素敏感性降低25-30%相关，导致血浆葡萄糖处置率减少约35%。这与血浆葡萄糖储存减少约55%（P < 0.01）和血浆葡萄糖糖酵解减少约15-20%（P < 0.03）相关，分别占葡萄糖处置率减少的约75%和25%。葡萄糖氧化的减少几乎解释了糖酵解的所有减少。因此，IGT中血浆葡萄糖的非氧化性糖酵解与NGT相似（P > 0.9），并且占系统性葡萄糖处置率的比例增加（P < 0.05）。

假说:
我们得出结论，在葡萄糖耐量受损（IGT）中，血浆葡萄糖处置减少主要表现为糖原合成减少，其次是糖酵解减少，这是由葡萄糖氧化减少造成的。


前提:
通过测定GLUT4的亚细胞分布，研究了钒处理对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠心脏组织中胰岛素刺激的葡萄糖转运蛋白4型（GLUT4）转位的影响。对四组大鼠进行了检查：对照组和糖尿病组，分别接受或不接受双（麦芽酚）氧钒（IV）（BMOV，一种有机钒形式）治疗8周组。在胰岛素注射后5分钟（作为早期胰岛素反应）和15分钟（作为最大胰岛素反应）时，调查了钒对胰岛素诱导的GLUT4转位的影响。

胰岛素注射后5分钟，糖尿病治疗组的质膜GLUT4水平与对照组没有差异，显著高于胰岛素刺激的糖尿病组。这表明钒处理增强了胰岛素对GLUT4转位的反应。相比之下，在胰岛素注射后15分钟，糖尿病组和糖尿病治疗组之间的质膜GLUT4水平没有显著差异。

在胰岛素注射15分钟后，还研究了GLUT4在细胞内池（细胞内储存区域）中响应胰岛素反应的情况。糖尿病治疗组细胞内的基础GLUT4水平显著高于同等条件下的糖尿病组。然而，糖尿病治疗组细胞内基础GLUT4的增加的并未在胰岛素注射后15分钟导致胰岛素介导的GLUT4转位增加。

假说:
总之，研究发现在胰岛素注射后5分钟时，接受治疗的糖尿病组的质膜葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）水平与糖尿病组相比没有显著提高，但在15分钟时有所不同。这表明钒元素治疗通过增强对胰岛素的早期反应，促进了胰岛素介导的GLUT4在心脏组织中的转运。


前提:
肠胰轴影响β细胞功能的机制尚未阐明。我们对葡萄糖耐受性正常（NGT；n = 11）或受损（IGT；n = 10）的受试者进行了口服和等血糖静脉（IV）葡萄糖给药，使用C肽解卷积计算胰岛素分泌率，并使用数学建模量化β细胞功能。肠促胰岛素效应被认为是口服反应对静脉反应的比率。

在NGT中，肠降血糖素效应[口服葡萄糖耐受试验（OGTT）/IV比率 = 1.59 ± 0.18，P = 0.004]导致胰岛素释放达到18 ± 2 nmol/m(2)（口服反应的32 ± 4%），其时间进程与总胰岛素分泌相匹配。β细胞葡萄糖敏感性（OGTT/IV比率 = 1.52 ± 0.26，P = 0.02），速率敏感性（对葡萄糖变化率的反应，OGTT/IV比率 = 2.22 ± 0.37，P = 0.06）和与葡萄糖无关的增强效应在口服葡萄糖时明显高于静脉给药。

在IGT中，OGTT时β细胞葡萄糖敏感性（75 ± 14 vs. NGT的156 ± 28 pmol.min(-1).m(-2).mM(-1)，P = 0.01）和增强效应受损。就血浆胰高血糖素样肽-1和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽反应、总胰岛素分泌以及β细胞葡萄糖敏感性增强（OGTT/IV比率 = 1.73 ± 0.24，P = NS vs. NGT）而言，肠促胰岛素效应与NGT没有显著差异。然而，肠促胰岛素效应导致的胰岛素分泌和增强效应的时间进程发生了改变，葡萄糖诱导的刺激相对于肠促胰岛素效应介导的刺激占主导地位。

假说:
我们得出结论，在生理条件下，肠促胰岛素介导的胰岛素分泌刺激源于增强了β细胞的各方面的动态功能。特别是包括β细胞对葡萄糖的敏感性。


前提:
在含糖原的肌肉中，糖原合成似乎受葡萄糖6-磷酸（6-P）供应控制，但在糖原耗竭后，糖原的自身抑制控制可能成为决定因素。我们在培养的人体肌肉中分析了糖原耗竭与葡萄糖6-磷酸在控制糖原恢复中的贡献。通过基因工程改造的细胞过表达糖原磷酸化酶（GP）实现急性糖原耗竭。用AdCMV-MGP腺病毒处理以表达10倍高活性GP的细胞在25 mM葡萄糖条件下显示与对照组相比糖原含量无变化，但对6小时葡萄糖匮乏的反应是更广泛的糖原耗竭。尽管葡萄糖6-磷酸相同，但葡萄糖匮乏的AdCMV-MGP细胞中糖原合成酶（GS）活性比率是对照组的两倍。由葡萄糖重新孵育引起的GS活化峰值（30分钟）与葡萄糖6-磷酸浓度呈剂量依赖性相关，在两种类型细胞中达到相似的稳态水平。AdCMV-MGP细胞中GS活化明显减弱，而它与糖原含量呈强烈的反相关。只有在AdCMV-MGP细胞中观察到初始（0-1小时）快速的胰岛素非依赖性糖原重合成，进展到约150 微克葡萄糖/毫克蛋白的糖原水平；对照细胞糖原未降低到这个浓度以下，恢复有1小时滞后期。总之，由GP过表达实现的急性糖原耗竭导致GS活化，这与糖原补充呈反相关，独立于葡萄糖6-磷酸。在糖原恢复过程中，急性糖原耗竭促进的活化使GS有效控制糖原合成，而葡萄糖6-磷酸上升引起的GS瞬时活化对重合成速率没有影响。

假说:
我们得出结论，早期非胰岛素依赖性糖原再合成依赖于糖原合成酶的激活。这种激活是由糖原磷酸化酶介导的糖原耗尽引起的，而非由葡萄糖6-磷酸(G6P)供应造成的。


前提:
胰淀素在控制营养物质流动中扮演着重要角色，并且已确立为人类糖尿病的疗法，因为它可以减少餐后胰高血糖素分泌并减缓胃排空。鉴于人类 2 型糖尿病和猫糖尿病的病理生理学相似，我们研究了胰淀素是否能降低猫的血浆胰高血糖素水平。对健康的猫进行了静脉注射精氨酸刺激试验（IVAST），餐后反应试验（测试餐包含平均每日食物摄入量的50%），以及静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）。在所有测试情况下，在相应刺激前5分钟注射非淀粉样变性的大鼠淀素显著降低了血浆胰高血糖素水平。在IVAST和IVGTT中，接受淀素治疗的猫的血浆胰岛素浓度也较低。

假说:
未能得出淀粉样肽(amylin)能降低猫的血浆胰高血糖素水平的结论。这一特性在糖尿病动物中具有治疗潜能，因为联合给药淀粉样肽可以降低控制血糖所需的胰岛素需求量。


前提:
酒精的抗焦虑作用参与了该药物的强化特性，其中伏隔核起着重要作用。伏隔核中的阿片能系统被认为是参与动物情绪反应的主要通路：在伏隔核中微注射吗啡和全身给予μ-阿片受体（MOR）激动剂，会在高架十字迷宫（EPM）(一种焦虑行为测试)中产生低度焦虑评分。然而，伏隔核MOR在乙醇抗焦虑作用中的具体参与还未阐明。腺苷酸环化酶5（AC5）是一种合成cAMP的酶，在伏隔核中高度表达；它与MOR呈负相关，并被认为与动物的焦虑水平有关。我们通过EMP评估了动物胃内给予乙醇（2.5 g/kg）后1、4和8小时后的抗焦虑效果。使用开放场测试（OFT）评估运动能力；我们还通过实时荧光定量PCR（RT-PCR）测量了伏隔核AC5和MOR的mRNA水平。1小时后，接触乙醇的动物表现出类抗焦虑行为，同时伏隔核中AC5表达降低而MOR表达增加。向伏隔核注射MOR拮抗剂β-富纳曲沙明（β-funaltrexamine，FNA）并未阻断乙醇诱导的抗焦虑作用，反而在水暴露组中表现出增加焦虑水平的趋势。FNA部分降低了乙醇处理大鼠伏隔核中AC5的表达。

假说:
我们得出结论：伏隔核（NAcc）中的腺苷酸环化酶5（AC5）参与了乙醇的情绪效应；μ阿片受体并未介导药物诱导的NAcc中AC5减少，也未介导乙醇诱导的抗焦虑效应。


前提:
神经性疼痛是一种病理性疼痛感受，在相当一部分脊髓损伤（SCI）患者中发生，致使人常常感到衰弱的、长期的身体和心理负担。虽然许多外周和中枢机制与神经性疼痛有关，但背角脊髓丘脑束（STT）神经元的中枢致敏化是一个主要的潜在机制。此外，细胞外谷氨酸稳态的失调和星形胶质细胞的慢性活化在这些浅层背角神经元持续性兴奋中起着重要的潜在作用。迄今为止，尽管大部分 SCI 患者都遭受颈髓挫伤，但尚未在颈髓 SCI 诱发的神经性疼痛模型中表征中枢致敏化和星形胶质细胞变化。在这项研究中，我们对两种单侧颈部挫伤SCI的大鼠模型进行了研究了，这些模型在行为上出现同侧前爪热痛觉超敏的慢性持续。此外，我们发现与仅行椎板切除的对照大鼠相比，这两个模型中的STT神经元都呈现慢性活化。最后，持续的星形胶质细胞活化和浅层背角星形胶质细胞中主要中枢神经系统谷氨酸转运体GLT1表达的显著降低与STT神经元兴奋性变化和神经性疼痛行为学表型相关。

假说:
总之，我们已经描述了具有临床相关性的颈部神经性疼痛诱导挫伤的啮齿动物模型。这些模型导致脊髓丘脑束神经元和星形胶质细胞的长期激活，同时也使星形胶质细胞谷氨酸转运蛋白的表达受到损害。


前提:
我们测量了未受约束的Lymnaea stagnalis（大沼螺）在经皮给予两种选择性章胺拮抗剂——依匹斯汀和酚妥拉明后，运动能力降低的程度。在标准蜗牛水中处理3小时后，使用4 mM依匹斯汀或3.5 mM酚妥拉明的蜗牛速度分别降低到对照组的25%和56%（P < 0.001和P = 0.02）。蜗牛的速度随着药物浓度的增加而下降。在分离的中枢神经系统（CNS）中，0.5 mM章胺增加了支配足部的纤毛的足部A群运动神经元的放电率。在正常盐水中增加了26%，在高镁/低钙盐水中增加了22%（分别为P < 0.05和P = 0.01）。

假说:
我们得出结论，即奥克托巴胺（八肽胺）拮抗作用降低了大沼螺（Lymnaea stagnalis）的运动能力。


前提:
抗血管生成治疗的血管效应可能会给基于对比增强磁共振成像（MRI）评估脑肿瘤反应带来问题。我们使用12 T的连续动态对比增强MRI来评估抗血管生成治疗与类固醇治疗的血管反应。脑内U87MG人类胶质瘤的无胸腺大鼠（n=17）先接受了使用铁羧糖（一种仅存在于血管内的超小超顺磁性氧化铁（USPIO）纳米颗粒）的磁敏感加权灌注MRI，随后进行钆双胺增强的T1加权动态MRI以测量血管通透性。在接受抗血管生成药物贝伐珠单抗或皮质类固醇地塞米松治疗前以及治疗24、48和72小时后对大鼠进行成像。钆双胺给药后迅速观察到对比剂渗出，而铁羧糖给药后未观察到。贝伐珠单抗显著降低了肿瘤的血量并降低了通透性，这表现为达到峰值增强的时间延长。单次剂量45 mg/kg的贝伐珠单抗产生的变化类似于极高剂量（12 mg/kg每天）的地塞米松，并且明显优于2 mg/kg每天剂量的地塞米松。

假说:
我们得出结论，使用铁羟化糖澱粉（ferumoxytol）超小粒氧化铁（USPIO）进行动态灌注磁共振成像（MRI）测量以评估脑血容量，以及使用钆双胺（gadodiamide）增强磁共振成像（MRI）来评估血管通透性，有望更准确地检测抗血管生成治疗的治疗反应。


前提:
阿片样肽强啡肽-A（强啡肽-A）被认为会加剧脊髓创伤后的继发性二次损伤过程，但其中涉及的生化机制知之甚少。在本研究中，我们结合使用磁共振成像（MRI）和磁共振波谱（MRS）以及后肢运动功能测试，来检查鞘内注射强啡肽-A对大鼠脊髓的影响。在注射100 nmol的强啡肽-A（1-17）24小时后，通过MRI观察到明显的水肿形成。注射100 nmol的强啡肽-A（2-17）片段（该片段对阿片受体无活性）也产生了严重水肿，而100 nmol的低效价κ阿片受体配体强啡肽-A（1-8）或人工脑脊液（ACSF）则没有产生任何水肿。与强啡肽-A（1-8）和ACSF相比，强啡肽-A（1-17）和强啡肽-A（2-17）在24小时时都产生了显著的后肢运动障碍（P < 0.05），但强啡肽-A（1-17）组明显比强啡肽-A（2-17）处理组更严重（P < 0.05）。同样，强啡肽-A（1-17）处理组的死亡率显著高于其他组（P = 0.002）。磷磁共振波谱显示，强啡肽-A（1-17）和强啡肽-A（2-17）处理的动物在注射后24小时脊髓中的高能磷酸盐也出现显著降低。

假说:
我们得出结论，dynA通过引起代谢衰竭和水肿发展， 导致了脊髓细胞死亡。


前提:
GATA家族转录因子调控发育过程中组织特异性的基因表达模式。我们已经描述了GATA蛋白与乳糖酶基因启动子之间的相互作用。通过凝胶电泳迁移率分析（EMSA）和使用GATA抗体的超级迁移分析，对结合到乳糖酶基因GATA区域顺式作用元件（-97至-73）的核蛋白进行了分析。在转染了野生型和突变型荧光素酶启动子-报告基因构建以及GATA-4/5/6表达构建体的Caco-2细胞中，测定了乳糖酶启动子活性。使用GATA区域探针进行的EMSA产生了一个特异性的DNA-蛋白复合物，该复合物需要GATA因子结合位点WGATAR。这个复合物可被GATA-4和GATA-6特异性抗体识别。在Caco-2和非肠道QT6细胞系中，GATA-4/5/6表达构建体能够激活由野生型启动子驱动的转录，但不能激活GATA结合位点突变的启动子。GATA因子与乳糖酶顺式作用元件的结合与启动子功能性激活相关。

假说:
我们得出结论，乳糖酶(lactase)启动子被GATA转录因子家族中的GATA-4和-6激活。


前提:
细胞有丝分裂纺锤体向细胞的一侧移位对许多细胞的不均等分裂至关重要。尽管最近的进展已开始揭示有丝分裂纺锤体移位的一些分子机制，但对于纺锤体移位如何精确定时的了解还远远不够。已知一种保守的有丝分裂进程机制可以为分裂细胞中的事件定时，尽管这从未与纺锤体移位联系在一起。这种机制涉及后期促进复合物（APC）、其激活因子Cdc20/Fizzy、其降解靶标细胞周期蛋白以及周期蛋白依赖性激酶（CDK）。在此我们表明这些组件构成了一个此前未被认识到的纺锤体移位计时器。在秀丽隐杆线虫合子（受精卵）中，有丝分裂纺锤体移位在精确的时间开始，即染色体排列在赤道板（metaphase plate）上后不久。我们发现，降低蛋白酶体、后期促进复合物（APC）或Cdc20/Fizzy的功能会延迟纺锤体移位。相反，在前中期失活CDK会导致纺锤体提前移位。通过实验将纺锤体移位与这一计时机制人为解耦的后果是有丝分裂纺锤体未完全组装的组分过早移位。

假说:
我们得出结论，在这个系统中，有丝分裂纺锤体的不对称定位通常会延迟一小段时间，直到APC（细胞周期蛋白酶复合体）使CDK（细胞周期依赖性激酶）失活。这种延迟确保了有丝分裂纺锤体在完全组装之后才开始移动。


前提:
细胞衰老是体细胞干细胞再生治疗的限制因素。我们先前证明，细胞衰老开始于抑制牙囊干细胞（Dental Follicle Cells, DFCs）的成骨分化，但其机制仍不清楚。细胞衰老的诱导涉及两种不同的途径，分别由细胞周期蛋白P21或细胞周期蛋白P16驱动。

在本研究中，我们调查了细胞衰老诱导后DFCs中细胞周期蛋白的表达。通过β-半乳糖苷酶表达的增加和长期细胞培养后群体倍增期的延长，证实了细胞衰老的诱导。细胞衰老调节了细胞周期蛋白的表达。

细胞周期蛋白P16的表达上调，这与DFCs中细胞衰老标志物的诱导相关。然而，周期蛋白依赖性激酶（CDK）2和4以及细胞周期蛋白P21的表达在DFCs中逐渐减少。

假说:
总之，我们的数据表明，P16-依赖性通路驱动了牙囊成纤维细胞细胞衰老过程的诱导。


前提:
地西他滨（DAC）和5-氮杂胞苷最近已获批用于治疗骨髓异常增生综合征。DAC和5-氮杂胞苷在其已知的DNA甲基转移酶（DNMTs）抑制剂活性之外的药效动力学作用需要进一步研究。本研究的目的是调查DAC对p21(WAF1/CIP1)表达的影响，该基因在其启动子区域周围有一个推测性CpG岛。对白血病细胞中p21(WAF1/CIP1)启动子甲基化的分析显示缺乏CpG甲基化。然而，DAC以剂量依赖的方式上调p21(WAF1/CIP1)的表达（半数有效剂量(ED50)=103.34 nM），并在白血病细胞中诱导G2/M细胞周期阻滞。DAC随后应用不同的组蛋白去乙酰化酶抑制剂协同诱导p21(WAF1/CIP1)的表达。p21(WAF1/CIP1)的上调与DAC诱导的细胞凋亡（半数有效剂量(ED50)=153 nM）平行。低剂量的DAC诱导γ-H2AX（组蛋白H2AX磷酸化）表达（半数有效剂量(ED50)=16.5 nM），并在同基因型HCT 116结肠癌细胞中以DNMT独立和p53依赖的方式上调p21(WAF1/CIP1)。通过pifithrin-α抑制p53转录激活或通过特异性ATM（共济失调毛细血管扩张突变蛋白）抑制剂KU-5593或咖啡碱抑制ATM的激酶活性，阻断了p21(WAF1/CIP1)的上调，表明DAC上调p21(WAF1/CIP1)在白血病细胞中是依赖于p53和ATM的。

假说:
结论是，DAC通过DNA损伤/ATM（程序腺苷酸激酶）/p53信号通路以非DNMT依赖方式上调TGF-β（转化生长因子β）(WAF1/CIP1)。


前提:
抗菌肽微菌素J25（MccJ25）抑制细菌RNA聚合酶（RNA polymerase，RNAP）的转录。生化结果表明，转录抑制发生在RNAP的核苷三磷酸（NTP）摄取或NTP结合水平。基因研究结果表明，转录抑制需要RNAP次级通道（也称为"NTP摄取通道"或"孔道"）内的一个广泛的决定性区域，包含超过50个氨基酸残基。生物物理结果表明，转录抑制涉及MccJ25在RNAP次级通道内的结合。分子模拟显示，MccJ25在RNAP次级通道内的结合阻塞了RNAP次级通道。

假说:
我们得出结论，MccJ25 通过阻塞核糖核酸聚合酶二级通道来抑制转录。


前提:
建议使用口服葡萄糖作为新生儿静脉穿刺的疼痛治疗。目前尚不清楚这种干预是否能减少与静脉穿刺相关的过度氧消耗（o(2)，氧消耗）、能量损失或心血管不稳定，以及<2 mL葡萄糖溶液是否有效。我们检验了口服葡萄糖溶液是否能减轻与静脉穿刺相关的新生儿氧消耗、能量消耗（EE）和心率增加的假设，并对两种不同体积的葡萄糖溶液（2 mL和0.4 mL）进行了测试。在这项前瞻性、随机、对照、双盲试验中，58名新生儿（胎龄31-42周；出生后1-7天）被随机分配到静脉穿刺前口服2 mL 30%葡萄糖、0.4 mL 30%葡萄糖或2 mL水三组。使用早产儿疼痛量表对录像的行为疼痛反应进行评分。测量了哭泣持续时间、o(2)、EE（间接测热法）和心率。与对照组相比，2 mL葡萄糖溶液降低了静脉穿刺后的疼痛评分和哭泣[中位疼痛评分，5.5（四分位距，IQR：4-9）vs11（7-12），p值 = 0.01；首次哭泣的中位持续时间，0秒（0-43秒）vs13秒（2-47秒），p值 < 0.05]。0.4 mL葡萄糖溶液没有效果。2 mL葡萄糖溶液并未减轻静脉穿刺期间o(2)的增加[1.5 ± 0.2 mL/kg·min（水）vs1.7 ± 0.5（0.4 mL葡萄糖）vs1.1 ± 0.2（2 mL葡萄糖）（平均值±标准误，SEM）]，也未减轻EE和心率的增加。

假说:
我们得出结论，在静脉穿刺前口服2毫升30%浓度的葡萄糖溶液可以减少疼痛表现和哭泣，但无法降低氧气消耗 (O₂)、能量消耗 (EE) 或心率的上升。


前提:
这项随机、双盲、安慰剂对照的临床试验的目的是确定局部麻醉剂（丁卡因）是否能在桡动脉穿刺（radial arterial puncture）前提供有效的局部镇痛。丁卡因或安慰剂凝胶在动脉穿刺前45分钟涂抹在被转诊进行常规动脉血气分析的患者身上。主要结果是通过视觉模拟量表（visual analog scale）测量的患者对手术相关疼痛的感知。50名患者被随机分组进入研究，24名接受丁卡因，26名接受安慰剂。视觉模拟量表上的平均疼痛评分，丁卡因治疗患者为26.2 +/- 32.6，安慰剂治疗患者为23.8 +/- 27.4（P = 0.78）。从第一次皮肤穿刺到成功获取1毫升动脉血的平均时间，丁卡因组为70 +/- 103秒，安慰剂组为49 +/- 48秒（P = 0.40）。执行测试的呼吸治疗师（respiratory therapist，专门从事呼吸系统疾病治疗的医疗专业人员）评估的动脉穿刺难度对两组来说是相同的（P = 0.86）。

假说:
我们得出结论，止痛凝胶丁卡因（dīng kǎ yīn）的使用既没有减少患者对与动脉穿刺相关的痛觉感知，也没有促进动脉血气分析程序（ABG）的进行。


前提:
我们测试了右美托咪定，一种能降低心率、血压和血浆去甲肾上腺素浓度的α2受体激动剂，以评估其在大型血管手术后从麻醉中苏醒时减轻应激反应的能力。接受血管手术的患者在麻醉诱导前20分钟开始静脉给予右美托咪定（n = 22）或安慰剂（n = 19），持续至手术结束后48小时。所有患者接受标准化麻醉。通过调整麻醉水平和使用血管活性药物将心率和动脉血压维持在预设范围内。持续监测心率、动脉血压和吸入麻醉药浓度；额外测量包括血浆和尿液儿茶酚胺水平。在从麻醉中苏醒期间，右美托咪定组的心率（73 ± 11 次/分）比安慰剂组（83 ± 20 次/分）更慢（P = 0.006），心率在预设范围内的时间百分比在右美托咪定组更高（P < 0.05）。血浆去甲肾上腺素水平仅在安慰剂组上升，而右美托咪定组的术后即刻血浆去甲肾上腺素水平显著低于安慰剂组（P = 0.0002）。

假说:
我们得出结论，右美托咪定可减弱麻醉苏醒期间心率和血浆"Frago"浓度的增加。


前提:
在大鼠体内，在一系列剂量范围内研究了鞘内（蛛网膜下腔）吗啡与局部麻醉药（布比卡因和利多卡因）在痛觉（nociception，伤害性刺激感受）（52.5度热板和爪压）、运动功能和自主神经功能（血压[BP]和心率[HR]）方面的相互作用。

高剂量鞘内布比卡因（75微克）或利多卡因（500微克）产生运动阻滞和低血压（150微克布比卡因），分别持续约15分钟和7分钟。低剂量鞘内布比卡因（25微克）和利多卡因（100微克）仅产生持续2分钟或更短的短暂运动无力。

单独使用时，在不影响运动功能的剂量或时间点上，这两种药物均不改变热板或爪压反应。相比之下，在低剂量的任一局部麻醉药中，在短暂运动无力消退后，这些剂量导致鞘内吗啡在热板和爪压测试中的剂量-反应曲线显著左移（向左偏移，表示药效增强）。这通过观察到的最大峰值效应和时间-效应曲线下面积（AUC）来衡量。

因此，例如，吗啡/生理盐水的吗啡ED50（半数有效剂量）（95%置信区间）在热板上为1.7微克（0.7-1.9），在爪压上为1.1微克（0.8-1.4）。而吗啡/布比卡因（25微克）的ED50在热板上为0.25微克（0.21-0.42），在爪压上为0.28微克（0.2-0.4）。

未观察到鞘内吗啡对鞘内布比卡因在运动或自主神经阻滞方面的剂量依赖性效应有任何影响。利多卡因也观察到类似的结果。研究发现布比卡因对脊髓吗啡清除率没有显著影响。

假设:
我们的结论是，尽管单独使用低剂量的鞘内利多卡因和布比卡因时没有抗痛觉效果，但在联合使用时，在明显不影响运动功能的时间点，能够显著增强鞘内吗啡在热板实验和足部压力实验中的抗痛觉活性。


前提:
在一项双盲随机对照研究中，我们考察了在使用芬太尼进行麻醉诱导前，预先使用小剂量咪达唑仑是否会影响芬太尼引起的胸壁强直（FITR）的发生。同时，我们评估了强直对心血管和呼吸系统的影响。16名接受冠状动脉搭桥手术的患者被分为两组。咪达唑仑组（M）在开始芬太尼诱导前3分钟静脉注射0.075 mg/kg咪达唑仑，安慰剂组（P）注射0.9%氯化钠注射液。在诱导期间，使用3分制临床量表评估FITR。在麻醉诱导前、芬太尼输注结束时以及插管术后3分钟收集血流动力学和呼吸变量。两组FITR发生率均较高：M组为63%，P组为75%（差异无统计学意义）；然而，M组的严重程度较轻。强直的出现影响了心血管和呼吸系统：出现FITR的患者中心静脉压和肺毛细血管楔压急剧升高，同时由于无法对这些患者进行充分的通气而导致二氧化碳蓄积。

假说:
我们得出结论，小剂量咪达唑仑不能预防，但可能减轻全身诱导性强直反应（FITR，fentanyl-induced truncal rigidity），而且强直的出现会导致诱导期间血液动力学和呼吸变量的改变。


前提:
射频消融（RFA）被用作不可手术切除肝肿瘤的微创治疗方法。继RFA之后的免疫学反应可能在观察到的肿瘤控制中发挥作用。在我们的研究中，VX2癌瘤被植入兔子的肝脏。3周后，肿瘤接受RFA治疗或未接受治疗。在肿瘤植入前、术后2周以及此后每2周间隔采集外周血淋巴细胞。T细胞被肿瘤组织或非肿瘤肝组织的裂解物刺激，这些裂解物被加载到自体抗原呈递细胞上，并通过[(3)H]胸腺嘧啶核苷掺入法（[(3)H]thymidine incorporation）测定其刺激指数。超过背景值或对照组3倍被认为具有显著性。植物血凝素（phytohemagglutinin）刺激作为阳性对照。对动物进行尸检，并对肝脏和肿瘤组织进行免疫组织学分析以检测T细胞浸润。对携带肿瘤（n = 9）和接受RFA治疗（n = 11）的动物的T细胞进行了后续研究。平均术后观察时间为45天。所有11只接受RFA治疗的动物在整个观察期内均表现出特异性针对肿瘤抗原被激活的循环T细胞，伴随有密集的T细胞浸润。相比之下，未治疗的肿瘤负荷兔子体内的T细胞未显示明显反应，且仅有稀疏的T细胞浸润。

假说:
我们得出结论，射频消融(RFA)在原本无反应的肿瘤宿主中诱导了肿瘤特异性的T细胞反应。这显然克服了免疫耐受性，并导致了原本隐匿的肿瘤抗原的呈现。


前提:
使用混合人肝微粒体对吉非罗齐对细胞色素P450 (CYP) 1A2（苯乙酮胺O-脱乙基化）、CYP2A6（香豆素7-羟基化）、CYP2C9（甲苯磺丁脲羟基化）、CYP2C19（S-甲苯妥4'-羟基化）、CYP2D6（右美沙芬O-脱乙基化）、CYP2E1（氯唑沙宗6-羟基化）和CYP3A4（咪达唑仑1'-羟基化）活性的体外抑制作用进行了研究。利用[I]/([I] + K(i))值在体外预测了吉非罗齐的体内药物相互作用。吉非罗齐强烈且竞争性地抑制了CYP2C9活性，K(i) (IC(50)，半数抑制浓度)值为5.8 (9.6)μM。此外，吉非罗齐对CYP2C19和CYP1A2活性表现出较小的抑制作用，K(i) (IC(50))值分别为24 (47)μM和82 (136)μM。在浓度高达250μM时，吉非罗齐对CYP2A6、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4活性未显示出明显影响。根据使用吉非罗齐峰值总（或游离）血浆浓度计算的[I]/([I] + K(i))值，可以预期CYP2C9、CYP2C19和CYP1A2底物的清除率分别被抑制96%（56%）、86%（24%）和64%（8%）。

假说:
总之，CYP2C9在临床相关浓度下会抑制吉非贝齐的活性，这最有可能是CYP2C9与吉非贝齐底物药物（如华法林(warfarin)和格列本脲(glyburide)）相互作用的机制。


前提:
托非索泮是苯二氮卓类抗焦虑药物，化学名为1-(3,4-二甲氧基苯基)-4-甲基-5-乙基-7,8-二甲氧基-5H-2,3-苯并二氮杂卓。托非索泮(TZP)在氮原子的位置上与传统的1,4-苯二氮卓类药物不同。有三个临床病例报告，托非索泮增加了免疫抑制剂的血液水平，导致临床相关的不良药物反应，需要减少药物剂量或停止使用托非索泮。所使用的免疫抑制剂是CYP3A4系统的底物，因此使用人重组CYP3A4超微体在体外研究了托非索泮对CYP3A4酶的影响。苯氧基-4-(三氟甲基)-香豆素(BFC)被用作底物。托非索泮在0.1、0.25、0.5、0.75、1和5 μmol/L的浓度下剂量依赖性地抑制了酶活性。活性抑制率分别为4%、29%、40%、56%、61%和94%，IC50为0.8  μmol/L。阳性对照物酮康唑的IC50为0.03  μmol/L。在体外实验中，托非索泮的抑制作用比酮康唑（强效CYP3A4抑制剂）低一个数量级。

假说:
根据体外结果可以得出结论，托非索泮是CYP3A4的抑制剂，但要明确这种抑制作用的临床意义，还需要进一步的人体临床数据。


前提:
在这项研究中，我们调查了24R,25-二羟维生素D3 [24R,25(OH)(2)D(3)]对N,N'-二甲基肼（DMH）诱发大鼠结肠致癌作用的影响。在实验1和2中，每个实验将50只6周龄的F344雄性大鼠被分为5组。动物每周皮下注射一次DMH，持续4周。第1-5组分别在饲料中给予24R,25(OH)(2)D(3)（10、5、2.5、1.25或0百万分之一，即p.p.m.），实验1在诱导后阶段给予，实验2在诱导阶段给予。

实验结束时，在诱导后阶段给予24R,25(OH)(2)D(3)的大鼠结肠粘膜中的异常隐窝灶（aberrant crypt foci, ACF，一种癌前病变）数量呈剂量依赖性减少，但在诱导阶段给予时则没有这种效果。

在实验3中，15只9周龄的雄性大鼠被分为三组，在饲料中给予24R,25(OH)(2)D(3)（10、5或0 p.p.m.）。动物在处死前1小时腹腔注射5-溴-2'-脱氧尿苷（BrdU）以检查结肠粘膜的DNA合成。给予24R,25(OH)(2)D(3)的大鼠结肠隐窝的BrdU标记指数呈剂量依赖性减少。

在实验4中，使用多重致癌方案，我们不仅能够分析单个器官的数据，还能在整体水平进行分析。68只6周龄的雄性大鼠在第1-4周分别用DMH、N-甲基亚硝脲（N-methylnitrosourea）、2,2'-二羟基-二-正丙基亚硝胺（2,2'-dihydroxy-di-n-propylnitrosamine）、二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine）和N-丁基-N-(4-羟基丁基)亚硝胺（N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine）处理，然后在第5-30周的饲料中给予24R,25(OH)(2)D(3)（5、1或0 p.p.m.）。

对各种器官中肿瘤和癌前病变发展的检查显示，24R,25(OH)(2)D(3)显著抑制了结肠肿瘤的发展，但对其他器官的肿瘤诱导没有影响。

假说:
总之，这些结果强烈表明，当在后启动期施用24R,25(OH)2D3时，特异性地抑制结肠癌发生，而不会增强其他器官的致癌作用。


前提:
肝癌发生过程是一个复杂的多因素过程，其中持续的肝内炎症起着主要作用。虽然在化学诱导的肝癌发生过程中观察到炎症细胞浸润，但炎症反应的病理生理作用尚未得到很好的定义。为了研究这个问题，在暴露于饮用水中的化学肝癌原二乙基亚硝胺（DEN，二亚）（50微克/升）的小鼠中，监测了肝肿瘤发展过程中的分子和细胞反应。在肝细胞癌出现前2个月，发现诱导了肝内I型和II型干扰素（分别为IFN-β和IFN-γ）mRNA表达。通过监测基因缺陷的IFN-α/β受体（IFN-α/βR KO）或IFN-γ受体（IFN-γR KO）小鼠的肿瘤发展情况，确定了IFN的病理学重要性。IFN-γR KO小鼠比IFN-α/βR KO和野生型（wt，野型）小鼠发展的肿瘤更少，尽管三种品系的肿瘤直径没有显著差异。有趣的是，应用免疫组织化学研究表明，IFN-γR KO小鼠肝脏中浸润单核细胞中单核细胞/巨噬细胞的百分比大大减少，这与肝内细胞因子表达减少和氧化性DNA损伤程度较低的事实一致。

假说:
总之，II型干扰素而非I型干扰素可能在二乙基亚硝胺（DEN）诱导的肝癌发生的启动阶段，而非促进阶段中，起着关键作用，它通过增强单核细胞/巨噬细胞的活化并最终导致肝细胞DNA损伤。


前提:
使用1至56天龄的肉鸡雏鸡，研究了在有无0.2%胆酸存在的情况下以及存在低（0.8%）或高（1.2%）钙存在的情况下，年龄对8%添加量的棕榈酸或50/50棕榈酸和油酸混合物利用率的影响。观察到脂肪酸类型的补充与胆酸的存在或缺失之间在体重增加和饲料效率方面存在显著的交互作用（P小于0.01）。用等重量的棕榈酸和油酸混合物补充饮食，相对于对照饮食和仅用棕榈酸补充的饮食，减少了饲料摄入量。鸟的年龄与补充脂肪酸类型对脂肪保留和饮食可代谢能（ME）的影响存在交互作用（P小于0.01）。补充脂肪酸类型与添加胆酸对脂肪保留和饮食ME也存在显著的交互作用。虽然胆酸减少了消化过程中的皂化物形成（P小于0.05），但增加饮食钙水平增加了以皂形式存在的消化道脂肪比例（P小于0.01）。消化道和排泄物脂肪中以皂形式存在的比例取决于补充的脂肪酸类型。向肉鸡饲料中添加游离脂肪酸导致骨骼灰分和骨钙含量相对于饲喂对照饮食的鸟显著降低。

假说:
可得出结论，肉用鸡利用日粮中的游离脂肪酸的能力取决于饲喂的年龄，尽管在任何情况下，补充胆酸(cholic acid)都能增强脂肪酸的利用率。


前提:
本研究的目的是评估降钙素（CALC）在亚临床低钙血症发生过程中的潜在重要性（实验1），以及在代谢性酸中毒条件下预防牛低钙血症的生理机制中的作用（实验2和3）。在实验1中，15头产后5天内自然发生亚临床低钙血症的荷斯坦奶牛被分类为轻度亚临床低钙血症（LSH）（血钙浓度在7.5到8.5mg/dL之间）和重度亚临床低钙血症（HSH）（血钙浓度在6.0到7.6mg/dL之间）。从分娩前5天到分娩后5天每天采集血样，以测定甲状旁腺激素（PTH）、CALC和1,25(OH)2D3（活性维生素D）的浓度。在实验2中，24头荷斯坦公牛（体重497 ± 69 kg，年龄342 ± 10.5天）被分配到2个处理组（代谢性酸中毒组或对照组）。代谢性酸中毒通过口服氯化铵（2.5 mEq/天，毫当量/天）持续10天诱导，之后动物被屠宰。屠宰前采集血样以测定CALC、PTH、1,25(OH)2D3，并在屠宰后立即获取尿液、肾脏、甲状旁腺和甲状腺样本，以测定这些组织中几种相关基因的表达。最后，在实验3中，我们使用乳腺癌细胞（T47D株）培养，在体外测试了代谢性酸中毒条件下CALC的活性。尽管HSH组的PTH水平倾向于高于LSH组，但HSH组奶牛的1,25(OH)2D3水平较低（实验1）。血钙浓度不受亚临床低钙血症严重程度的影响，但受分娩后天数的影响（实验1）。在代谢性酸中毒条件下，肾脏中PTH受体（PTHR）的表达增加（实验2）。此外，在酸性血液pH条件下，CALC的活性降低（实验3）。

假说:
总之，分娩后高敏感性低钙血症（HSH）奶牛中钙调节素（CALC）的升高阻碍了血钙浓度的恢复，这是因为甲状旁腺激素受体（PTHR）反应不足以激活1,25(OH)2D3（骨化三醇）并补偿钙调节素的影响。血钙浓度是指血液中钙离子的含量，对维持正常生理功能至关重要。


前提:
钒酸盐形式的钒（VO3-）是Na+、K+-ATPase的强效抑制剂。由于钒和磷的氧阴离子（含氧的负离子）之间的相似性，人们对Al(OH)3是否会像限制磷的肠吸收那样限制钒的肠吸收产生了兴趣。在pH 5-8的范围内，VO3-大量结合到Al(OH)3悬浮液上。将Sprague-Dawley大鼠（180-300克）禁食过夜，并给予溶于1.0毫升0.9%氯化钠溶液的5 μmol Na3VO4灌胃，其中含有1 μCi 48V。对照组动物（n = 12）同时接受1.0毫升稀释剂，实验组动物（n = 12）接受1毫升Al(OH)3。随后连续4天每天给予稀释剂和Al(OH)3灌胃。每天分别收集尿液和粪便。在对照组动物中，4天内48V的总回收率（粪便和尿液）为给药剂量的86.6 ± 2.4%。虽然Al(OH)3对48V的总回收率影响不显著（93.6 ± 3.2%），但它相比尿液显著增加了粪便中48V的排泄量（对照组：粪便，69.1 ± 1.8%；尿液，12.5 ± 1.3%；Al(OH)3组：粪便，85.7 ± 1.5%；尿液，7.9 ± 1.8%）。随后处死动物并测量组织中示踪剂的摄取量。两组中未排泄48V在组织中的分布模式均为肾>骨>肝>肠>肌，但对照组的组织水平普遍高于Al(OH)3处理组。还研究了Al(OH)3清除内源性VO3-的能力。通过腹腔注射（ip）48V（n = 20）。一半动物接受稀释剂，另一半动物连续4天每天接受1.0毫升Al(OH)3灌胃。两组在48V组织分布和排泄模式上没有差异。

假说:
研究得出结论，Al (OH)3 可能通过减少肠道 VO3- 吸收来防止来自膳食来源的 VO3- 在组织中蓄积。


前提:
机制研究和流行病学研究为钙摄入与结直肠癌（CRC）发病率之间的保护性关联提供了大量证据。虽然这种关系尚未被短期随机对照试验（RCTs）证实，但试验确实显示对腺瘤（CRC的癌前病变）有益。为解决这些不一致性，我们基于截至2013年12月发表的前瞻性观察性研究，对钙摄入来源进行了剂量-反应荟萃分析，这些研究从PubMed、Embase和BIOSIS中提取。使用随机效应模型计算汇总相对风险和95%置信区间。对于总钙摄入量，每增加300 mg/天与大约8%的CRC风险降低相关（汇总RR = 0.92，95% 置信区间 = 0.89-0.95，I(2) = 47%，15项研究共12,305例，摄入量 = 250-1,900 mg/天，随访 = 3.3-16年）。虽然在较高范围的总钙摄入量中风险降低较缓慢（非线性P值 = 0.04），但曲线的弯曲程度较轻，非线性的统计学显著性对一项研究敏感。对于钙补充剂，每增加300 mg/天与大约9%的CRC风险降低相关（汇总RR = 0.91，95% 置信区间 = 0.86-0.98，I(2) = 67%，六项研究共8,839例，摄入量 = 0-1,150 mg/天，随访 = 5-10年）。非线性检验未达到统计学显著性（非线性P值 = 0.11）。

假说:
结论，饮食中的钙摄入和钙补充剂摄入甚至超过每日1,000毫克可能会持续降低结肠直肠癌的风险。


前提:
减少反刍动物的甲烷生成是几十年来的一个重要目标。游离月桂酸已知可抑制瘤胃的甲烷生成作用，但其适口性较差；因此，本研究旨在评估其酯化形式（单月桂酸酯，月桂酸单酯）的减缓效果。此外，还测定了产甲烷作用和发酵过程中的13C同位素丰度（δ13C）和13C-12C分馏，以评估可能的微生物碳同位素偏好。使用瘤胃模拟技术，将四种分别以C3植物草（干草）和小麦（秸秆和谷物），或C4植物（与C3植物相比13C含量较高）玉米（秸秆和谷物），以及后两者的混合物为特征的基础饲粮，分别在添加和不添加单月桂酸酯（50克/千克饲粮干物质）的条件下进行培养。添加到干草中时，单月桂酸酯对产甲烷作用没有显著影响。当添加到其他饲粮中时（小麦基础饲粮P < 0.05），甲烷形成降低。单月桂酸酯降低了纤维消失率（干草饲粮影响最小）、乙酸与丙酸比例和原生动物数量。饲料残留物和短链脂肪酸显示与饲粮相同的δ13C。与饲粮相比，甲烷的13C含量降低，而二氧化碳的13C含量增加。添加单月桂酸酯导致二氧化碳的13C含量降低和甲烷的13C含量增加（后者仅在干草饲粮中观察到）。

假说:
总之，月桂酸单酯被证实可有效降低秸秆-谷物混合饲粮中的产甲烷过程，尽管这种效果可能部分归因于同时发生的纤维降解减少。


前提:
我们检测了蔗糖硫酸铝预防大鼠促泌剂诱发十二指肠溃疡的能力。在开始24小时持续输注五胃泌素和贝沙胆碱之前以及之后3小时和6小时，给予口服50毫克、100毫克或200毫克的蔗糖硫酸铝。24小时后处死动物，并对溃疡的数量和重症度进行评分。9只对照组大鼠全部出现溃疡，50毫克剂量组9只中有8只出现溃疡，100毫克剂量组9只中有4只出现溃疡，而200毫克铝剂量组9只中仅1只出现溃疡。

假说:
我们得出结论，tubastatin A可以预防大鼠中由分泌素（secretagogue）诱导的十二指肠溃疡的形成。


前提:
在装有慢性胃瘘和十二指肠Thiry-Vella环的清醒大鼠中对十二指肠暴露于酸和高渗溶液对戊胃泌素(pentagastrin)刺激的胃酸分泌抑制作用进行了研究。Thiry-用生理盐水、盐酸或高渗聚乙二醇刺激Vella环。通过胃瘘采集样本测量胃酸分泌。每30分钟收集十二指肠灌洗液测量胃肠肽浓度，并在单独刺激酸分泌期间以及实验结束时结合环腔内刺激收集血浆样本。在戊胃泌素刺激的胃酸分泌过程中，用酸灌注十二指肠环腔内导致酸分泌抑制（P < 0.001）和促生长素抑制素（生长抑素）显著释放到腔内（P < 0.001）和循环中（P < 0.05）。此外，神经降压肽（P < 0.01）和血管活性肠肽（P < 0.01）释放到腔内，但不释放到循环中。用高渗聚乙二醇灌注十二指肠环时，酸分泌受到抑制（P < 0.05），只有促生长素抑制素释放到腔内侧（P < 0.01）。

假说:
我们得出结论，用酸进行十二指肠环的腔内灌注会抑制由五肽胃泌素（pentagastrin）刺激的胃酸分泌过程。


前提:
在这项研究中，我们评估了影响正常受试者食管酸清除的因素。将15毫升0.1 N氯化氢（pH 1.2）注入食管，然后受试者每30秒吞咽一次。食管测压和pH监测显示，食管酸清除是通过一系列pH值的阶梯式上升实现的，每次上升都与吞咽引发的食管蠕动序列相关。在食管蠕动序列之间，pH值的增加很小。含片刺激唾液分泌极大地改善了酸清除，而口腔抽吸唾液则消除了食管pH值的阶梯式上升，并明显延迟了酸清除。用碳酸氢盐溶液替代被抽吸的唾液可以重现食管pH值的阶梯式上升，并使酸清除恢复正常，而仅用水替代则无法改善酸清除。类似于含片的效果，贝沙考林（卡波曲林，5毫克皮下注射）改善了食管酸清除，但这种改善被口腔抽吸唾液所逆转，显著延迟了酸清除。从卧位改为坐位略微改善了酸清除，但这种改善在统计学上并不显著。

假说:
我们得出结论：在正常受试者中，(a) 吞咽将唾液带入食管，蠕动运动将食管内的液体排空到胃中，(b) 每次吞咽带入食管的唾液中和酸的过程解释了pH值阶梯式上升的食管酸清除现象，(c) 贝沙考林(bethanechol)改善食管酸清除的原因是刺激唾液分泌，(d) 在正常蠕动剥离波（食管壁的收缩运动）存在的情况下，重力对食管酸清除的贡献很小。


前提:
在一项安慰剂对照双盲随机交叉试验中，对健康志愿者测试了新型胃肠动力药西沙必利对胃排空和十二指肠胃反流胆盐的影响。二十名受试者接受了为期一周的每天三次(tid)口服10毫克西沙必利或对应的安慰剂片剂治疗。在测试日，使用胃插管示踪剂技术对受试者进行空腹和摄入混合液体餐后的研究。西沙必利对胃分泌和胃排空没有影响。西沙必利治疗后，无论是空腹（0.63 ± 0.14对比0.38 μmol/min ± 0.05平均标准误）还是进食后（2.60 ± 0.61对比1.88 μmol/min ± 0.33平均标准误），反流率都有降低的趋势。这是由于高安慰剂反流率的降低：西沙必利实现的反流率降低与安慰剂反流率的高度显著相关（p<0.001）。胃胆盐浓度也发现了类似的关系（p<0.001）。

假说:
研究结论表明，西沙必利（顺铂）能够减少高胆盐反流现象。


前提:
本研究的目的是在清醒的猪身上评估短链脂肪酸（SCFA）诱导的回肠制动机制所涉及的神经和体液通路。在有神经支配和无神经支配的 Babkin 回肠袢中输注 SCFA来评估外部回肠神经支配的作用，并用应变计测量了胃动力。在这两种情况下评估了肽YY（PYY）和胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的浓度。通过使用乙酸盐的静脉输注来测试吸收的SCFA的可能参与。在完整的回肠末端输注SCFA降低了远侧和末端胃窦收缩的波幅（33 ± 1.2对比输注前记录的最大波幅的49 ± 1.2%），并增加了其频率（1.5 ± 0.11对比1.3 ± 0.10/分钟）。在神经支配和去神经支配的回肠袢中输注SCFA时观察到类似的效果（波幅，35 ± 1.0和34 ± 0.8对比47 ± 1.3和43 ± 1.2%；频率，1.4 ± 0.07和1.6 ± 0.06对比1.1 ± 0.14和1.0 ± 0.12/分钟）。静脉输注乙酸盐不改变胃窦收缩的波幅和频率。在神经支配和去神经支配的回肠袢中输注SCFA期间，PYY但不是GLP-1的浓度增加。

假说:
我们得出结论，外部回肠神经支配介导 SCFA 引起的胃运动制动作用。


前提:
普遍认为，L型钙离子通道介导的钙诱导钙释放（CICR）是成年哺乳动物心脏兴奋-收缩（E-C）偶联的主要模式，而新生儿中没有明显的CICR。然而，我们观察到，在用咖啡碱耗尽肌浆网（SR）钙离子后，新生儿心脏细胞收缩显著减弱。因此，本研究调查了兔心室肌细胞在3、10、20和56天龄时CICR的发育变化。

我们发现，L型钙离子电流（I(Ca)）抑制剂尼非地平（Nif；15 μM）的抑制作用在年龄较大的组别中导致去极化时钙离子瞬变减少的程度越来越大。从3天龄（3d）心肌细胞的约15%增加到56天龄（56d）心肌细胞的约90%。在年龄较小的组别中，存在Nif时剩余的钙离子瞬变通过随后添加10 μM KB-R7943（KB-R）抑制钠/钙交换器（NCX）而被消除。

此外，在所有年龄组中，用咖啡碱耗尽SR钙离子后，钙离子瞬变的幅度显著降低。这种效应在年龄较大的组别中显著更强，从3d肌细胞的约40%增加到56d肌细胞的约70%。最早发育阶段的这种对SR钙离子敏感的钙离子瞬变对Nif不敏感，但对随后添加的KB-R敏感。这表明存在NCX介导的CICR，这种CICR随年龄显著减少，从3d心肌细胞的约37%降至56d心肌细胞的约0.5%。

相反，I(Ca)介导的CICR随年龄显著增加，从3d肌细胞的约10%增至56d肌细胞的约70%。通过CICR钙离子瞬变的积分除以其钙离子瞬变触发器的积分来估算的CICR增益，当由NCX介导时较小（3d心肌细胞约为1.0），而当由I(Ca)介导时较大（56d心肌细胞约为3.0）。

假说:
我们得出结论，在最早的发育阶段，较低效率的钠钙交换器(NCX)介导的钙诱导钙释放(CICR)是一种主要的CICR模式，随着个体发育，这种模式逐渐减弱，而更高效的L型钙离子(Ca2+)通道介导的CICR则逐渐变得更加突出。


前提:
GS-458967，6-(4-(Trifluoromethoxy)phenyl)-3-(trifluoromethyl)-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine（GS967）是一种新近描述的新型钠离子通道抑制剂，在各种体外和体内模型中表现出强效的抗心律失常作用。其抗心律失常机制被归因于对晚期钠电流的优先抑制。然而，目前还没有关于这种化合物对分离钠离子通道影响的系统性研究报告。在这里，我们研究了GS967对异源表达人心脏电压门控钠离子通道（主要心脏钠离子通道）的细胞记录的峰值（INaP）和晚期（INaL）钠电流的影响。如前所述，我们观察到GS967对INaL的持续性阻断（63%）明显大于对INaP的阻断（19%）。然而，GS967还以频率依赖的方式导致INaP减少，这与使用依赖性阻断（UDB）一致。GS967引起的INaP的UDB（IC50 = 0.07 µM，半数抑制浓度）比雷诺嗪（16 µM）和利多卡因（17 µM）更强效。使用依赖性阻断最好的解释为在GS967存在下，快速和慢速失活恢复显著减慢，同时慢速失活显著增强。此外，GS967被发现对典型的长QT综合征突变（delKPQ）也产生相同的影响。在局部麻醉剂相互作用位点的工程突变（F1760A）部分减弱了GS967对UDB的影响，但对持续性INaL阻断没有影响。

假说:
我们得出结论，GS967是INaL的选择性抑制剂。但它也对缓慢失活和失活后恢复产生了先前未报告的强烈影响，导致了实质性的使用依赖性阻滞（use-dependent block，UDB）。这种阻滞并不完全依赖于局部麻醉药已知的相互作用位点。


前提:
我们使用全细胞膜片钳技术研究单个兔房细胞的瞬时外向电流。IA，是一种大的瞬时外向电流，被4-氨基吡啶（4AP）和/或去极化保持电位所阻断。在阻断IA后，仍残存一个较小的瞬时外向电流。它被尼索地平、镉、雷亚诺定或咖啡碱完全阻断，这表明所有4AP抗性电流都是由引起收缩的钙离子瞬变激活的。钙激活的钾电流和钙激活的非特异性阳离子电流似乎都不会对4AP抗性瞬时外向电流有所影响。当ECl被设置为等于脉冲电位时，瞬时外向电流消失；在无钾的细胞内外溶液中仍存在该电流。它被阴离子转运抑制剂SITS和DIDS所阻断，瞬时电流-电压关系的逆转电位随细胞外氯离子浓度的变化而变化，这与氯离子选择性电导的预测一致。

假设:
我们得出结论，在兔子心房细胞中引起收缩的钙离子瞬变激活了一种氯离子选择性电导，这种电导对4AP (4-氨基吡啶) 耐受的瞬时电流有贡献。


前提:
磷鞘蛋白（PLM）表达在大鼠心肌梗死（MI）后的心脏中增加。在正常成年大鼠心肌细胞中过表达PLM改变了收缩功能和胞质Ca2+浓度（[Ca2+]i）稳态，与MI后心肌细胞观察到的情况相似。在本研究中，我们测试了PLM在正常成年大鼠心肌细胞中下调是否会导致与MI后心肌细胞观察到的相反的收缩性和[Ca2+]i瞬变变化。与仅表达绿色荧光蛋白（GFP）的腺病毒（Adv）感染的对照心肌细胞相比，同时表达GFP和大鼠反义PLM（rASPLM）的Adv感染的心肌细胞在3天后PLM蛋白减少23%（P < 0.012），但在SR Ca2+-ATPase、Na+/Ca2+交换器（NCX1）、Na+-K+-ATPase和集钙蛋白水平上没有发现差异。SR Ca2+摄取和整个细胞电容没有受到rASPLM处理的影响。咖啡因诱导的挛缩的舒张更快，rASPLM心肌细胞的NCX1电流幅度更高，表明PLM下调增强了NCX1活性。在原代大鼠心肌细胞中，免疫共沉淀实验表明PLM与NCX1之间存在关联。在0.6 mM [Ca2+]o下，rASPLM心肌细胞的收缩和[Ca2+]i瞬变幅度显著低于对照GFP心肌细胞（P < 0.003）。在5 mM [Ca2+]o下，rASPLM心肌细胞的收缩和[Ca2+]i瞬变幅度均较高。rASPLM心肌细胞的这种收缩性和[Ca2+]i瞬变行为模式与MI后大鼠心肌细胞观察到的相反。

假说:
我们得出结论，在正常大鼠心肌细胞中下调PLM，增强了NCX1 功能，并影响了[Ca(2+)]i瞬变振幅和收缩幅度。


前提:
通过使静息膜电位去极化并部分抑制内向Na+电流（INa），[K+]o的升高被认为减慢在心肌缺血期间的传导中发挥关键作用。在多细胞心室标本中，有人提出[K+]o升高可能使最大上升速度（Vmax）降低的程度大于单纯由膜去极化所预期的程度。目前尚不清楚[K+]o这种与电压无关的效应的机制，其在单个心脏细胞中的意义也未确定。我们在电压钳和电流钳条件下研究了[K+]o升高对兔心房和心室分离肌细胞INa和动作电位上升相的与电压无关的影响。灌流液[K+]从5 mmol/L增加到14或24 mmol/L，而[Na+]保持在150 mmol/L。在培养的心房细胞和新鲜分离的心房和心室细胞中切除的外向外膜片中，[K+]o升高并不改变INa的幅度和动力学。在心房细胞中，从-70 mV保持电位诱发的动作电位在5和24 mmol/L [K+]o下具有相似的Vmax（114.9 ± 5.7对112.2 ± 4.8 V/s，平均值±标准误差（SEM），n = 6）和动作电位幅度（115.0 ± 2.4vs.113.4 ± 3.9 mV）。相比之下，在心室细胞中，当保持电位为-70 mV时，将[K+]o从5增加到14 mmol/L使Vmax从161.8 ± 18.0降低到55.3 ± 5.0 V/s（n = 7，P < .001），动作电位幅度从128.1 ± 1.3降低到86.6 ± 5.4 mV（P < .001）。在1 mmol/L Ba2+存在的情况下，这种由[K+]o升高引起的与电压无关的Vmax和动作电位幅度降低被消除，这表明它可能是由于背景钾离子电导增加所致。

假说:
我们得出结论，将[K+]o升高到缺血（缺血症，ischemia）期间的预期水平会导致心室细胞的Vmax出现显著的电压非依赖性抑制，这反过来可能会导致早期缺血特有的心肌（心肌，myocardial）传导减慢。


前提:
细胞外钙（Ca²⁺(e)）诱导的孤立的、苯肾上腺素（PE）收缩的肠系膜动脉舒张依赖于表达钙敏感受体（CaSR）的完整的血管周围感觉神经网络。受体的激活会刺激内源性大麻素血管舒张通路，该通路依赖于细胞色素P450和磷脂酶A₂，但在很大程度上独立于内皮。在本研究中，我们确定了一氧化氮（NO）在血管周围神经CaSR介导的小鼠分离的PE收缩肠系膜阻力动脉舒张中的作用。

我们用自行肌丝描记术研究了一氧化氮合酶（NOS）基因敲除（NOS(-/-)）和NOS药理学抑制对Ca²⁺(e)诱导PE收缩动脉舒张的影响。内皮NOS敲除（eNOS(-/-)）上调但神经元NOS敲除（nNOS(-/-)）下调CaSR表达。NOS(-/-)降低了Ca²⁺(e)诱导舒张的最大值，但EC₅₀值（半数最大效应浓度）没有变化，eNOS(-/-)的影响最大。血管对calindol（卡林多）和Calhex 231（卡海克斯231）的反应表明了CaSR介导舒张。

L-N⁵-(1-亚氨基乙基)-鸟氨酸减少了C57BL/6对照小鼠PE收缩动脉的Ca²⁺(e)诱导舒张的约38%，但对eNOS(-/-)小鼠血管的影响较小。7-硝基吲唑对NOS(-/-)小鼠动脉的舒张没有显著影响。然而，N(G)-硝基-L-精氨酸甲酯和N(G)-单甲基-L-精氨酸显著降低了所有组的舒张最大值。

有趣的是，nNOS选择性抑制剂S-甲基-L-硫瓜氨酸显著增加了C57BL/6小鼠组织EC₅₀值的约60%，但降低了nNOS(-/-)小鼠组织最大反应的约80%。钙激活的大钾通道在这个过程中起主要作用，正如伊伯铁毒素的作用所证明的那样。

假说:
我们得出结论，钙敏感受体（CaSR）在肠系膜动脉中的信号传导刺激内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和一氧化氮（NO）的产生，从而调节细胞外钙（Ca²⁺(e)）诱导的舒张。


前提:
腺苷是一种血管扩张代谢物，通常在氧气供不应求的组织中产生。我们最近在分离的套管小动脉中证明，腺苷及其代谢物肌苷也可以通过刺激肥大细胞导致血管收缩。组胺和血栓素的继发性释放是造成体内肌苷诱导血管收缩的原因。在本研究中，我们探讨了腺苷在体内的血管收缩舒张效应，并研究了A3腺苷受体（A3 adenosine receptor）在介导血管收缩中的作用。在体内，局部应用腺苷（10⁻⁶至10⁻⁴ mol/L）持续引起剂量依赖性的血管扩张。然而，一部分小动脉表现出双相反应，即扩张后伴随收缩。这也是剂量依赖性的；37%的小动脉在10⁻⁴ mol/L腺苷的作用下比初始直径收缩了12.7 ± 4.3%。在存在A1和A2腺苷受体拮抗剂8-（对磺苯基）茶碱（8-SPT）的情况下，对相同剂量腺苷的扩张反应减弱，而收缩增强；85%的受试小动脉比初始直径收缩了-44.3 ± 6.0%。研究表明，A3腺苷受体可以促进肥大细胞释放介质，我们也研究了它的作用。N6-（3-碘-4-氨基苄基）腺苷（I-ABA），一种A1和A3腺苷受体的激动剂，有剂量依赖性血管收缩的作用。1,3-二丙基-8-（4-丙烯酸酯）苯基黄嘌呤（BW-A1433），一种A1、A2和A3受体的拮抗剂，显著减少了在8-SPT处理期间显露出来的腺苷引起的血管收缩反应。此外，腺苷和I-ABA都刺激了肥大细胞对钌红的摄取，表明发生了肥大细胞释放（脱颗粒）。组胺和血栓素受体拮抗剂的联合使用可消除I-ABA诱导的收缩。

假说:
我们得出结论，腺苷可在活体内引起血管收缩作用，这常常被A2受体介导的血管舒张所掩盖。


前提:
我们比较了乙酰胆碱和P物质的血管舒张机制，重点关注K+通道，并在猴子和狗的冠状动脉中药理学分析了除一氧化氮（NO）和前列腺素类物质之外的内皮衍生物质的性质。从猴子和狗中分离出冠状动脉，测量动脉条的等长张力。在用吲哚美辛加N(G)-硝基-L-精氨酸（L-NA）处理并用前列腺素F2α（prostaglandin F2α）部分收缩的犬冠状动脉条中，乙酰胆碱诱导了浓度相关的舒张，这种舒张在去除内皮后消失。在暴露于高K+培养基的动脉条中，舒张显著抑制但未完全消失。霍布多托辛（charybdotoxin）加阿帕明（apamin）强烈抑制舒张，程度与高K+培养基相似，而格列本脲（glibenclamide）或伊比利毒素（iberiotoxin）则无影响。这种舒张被磷脂酶A(2)抑制剂奎纳克林（quinacrine）和选择性细胞色素P450（CYP）3A抑制剂酮康唑显著抑制，但不被选择性CYP 2C抑制剂苯唑硫酸所抑制。与乙酰胆碱相比，P物质引起的内皮依赖性和对吲哚美辛加L-NA具有抗性的舒张不被高K+培养基、霍布多托辛加阿帕明或酮康唑抑制。奎纳克林和5-脂氧合酶抑制剂AA861抑制了P物质引起的舒张。在猴子冠状动脉中，乙酰胆碱引起的对吲哚美辛加L-NA具有抗性的舒张被内皮去除和高K+培养基、霍布多托辛加阿帕明、孕酮和酮康唑处理所消除，但不受伊比利毒素或苯唑硫酸的影响。P物质不能舒张猴子冠状动脉。

假说:
结论是，在猴子和狗的冠状动脉中，乙酰胆碱诱导的内皮依赖性、一氧化氮和前列腺素类非依赖性舒张是由霉毒素加阿帕明敏感但伊比利奥毒素不敏感的钙离子激活的钾离子通道开放物质(们)介导的，这些物质可能是细胞色素P450 3A (CYP3A)衍生的花生四烯酸代谢产物。


前提:
我们的目标是确定Rho相关激酶（ROK）在调节前臂血流量（FBF）中的作用，并揭示ROK在调节内皮源性一氧化氮（NO）中的潜在作用。此外，还记录了法舒地尔（fasudil）对内皮素-1缩血管反应的影响。关于背景，肌球蛋白轻链（MLC）的磷酸化作用决定了收缩装置对钙的敏感性。MLC磷酸化取决于MLC激酶和MLC磷酸酶的活性。后者通过ROK的磷酸化作用而被抑制。人研究表明ROK可能通过抑制Akt通路来抑制NO的产生。在这项研究中，通过静脉阻塞容积描记法检查了ROK抑制剂法舒地尔动脉内输注对12名健康志愿者FBF的影响。为了揭示NO的作用，在NO钳制（NO水平保持恒定）期间输注法舒地尔。结果表明，法舒地尔显著增加了FBF，以剂量依赖性方式从2.34 ± 0.21增加到80 μg/min时的6.96 ± 0.93 ml/100 ml前臂体积（P < 0.001）。在1,600 μg/min时，法舒地尔降低了收缩压、舒张压和平均动脉压，同时增加了心率。法舒地尔消除了内皮素-1的缩血管作用。在NO钳制期间，对法舒地尔（80 微mol/min）的血管反应减弱（104 ± 18% vs. 244 ± 48%，NO钳制 + 法舒地尔 vs. 单独使用法舒地尔；数据为输注臂与非输注臂的比值，基线 = 0%，P < 0.05）。

假说:
总之，1）基础外周和全身血管张力依赖于Rho激酶（ROK）；2）法舒地尔（盐酸法舒地尔）引起的血管舒张有相当一部分是由NO（一氧化氮）介导的，这表明血管中生物可利用的一氧化氮受到Rho激酶的负调节；3）对内皮素（ET）的收缩反应涉及Rho激酶的激活。


前提:
已经研究了氟桂利嗪对兔肠系膜动脉平滑肌条的血管扩张效应，并与硝苯地平的效应进行了比较。氟桂利嗪（30-300 nM）以剂量依赖的方式抑制了在含100 mM K+的无Ca2+溶液中由Ca2+诱导的收缩。双倒数分析（双倒数作图法）显示，这种抑制在低浓度下（30-100 nM；类似硝苯地平）是竞争性的，而在高浓度下（0.3-1 微摩尔）是非竞争性的。通过皂苷处理的化学去膜肌肉条中Ca2+诱导的收缩推测，后者似乎与收缩蛋白的部分抑制有关。与硝苯地平的作用相比，氟桂利嗪对去甲肾上腺素（NE）诱导的收缩的抑制比高K+诱导的收缩更强，在0.3 微摩尔时，这种物质完全阻断了NE诱导的收缩。氟桂利嗪还抑制了在含2 mM EGTA（乙二醇双(β-氨基乙醚)四乙酸）的无Ca2+溶液中NE诱导的收缩。在无Ca2+溶液中，NE迅速水解磷脂酰肌醇4,5-二磷酸（PI-P2）并产生磷脂酸（PA）。氟桂利嗪（30和300 nM），而不是硝苯地平（100 nM），抑制了NE诱导的PI-P2水解和PA的产生。然而，氟桂利嗪（100 nM）并未改变在化学去膜肌肉条中由10 微摩尔肌醇1,4,5-三磷酸诱导的收缩。

假说:
结论：与硝苯地平相反，低浓度的氟桂利嗪通过干扰去甲肾上腺素诱导的PI-P2（磷脂酰肌醇二磷酸）水解和PA（磷脂酸）生成来抑制钙离子（Ca2+）诱导的收缩。


前提：
硬骨鱼能够在摄入纯宏观营养素时调整其能量摄入，尽管调节宏观营养选择的确切机制仍不清楚。由于已报告胆囊收缩素（CCK）能够改变哺乳动物的宏观营养选择模式，我们探讨了口服CCK对欧洲海鲈鱼选择分开封装的宏观营养素的影响。以明胶胶囊形式连续5天给予0.05、0.15和0.25 mg/kg体重的CCK，结果显示在最高剂量下显著抑制了总食物摄入（分别为21%、28%和51%），均匀减少了所有摄入的宏观营养素的数量，但未影响它们在饮食中的相对比例。口服给予非特异性CCK受体拮抗剂普鲁咪嗪（proglumide），剂量为5、15和25 mg/kg体重，分别诱导总食物摄入增加2%、18%和44%，并且在最高剂量下，碳水化合物（CH）和蛋白质（P）的摄入量分别增加了52%和43%。同时给予普鲁咪嗪（25 mg/kg体重）和CCK（0.25 mg/kg体重）在同一个预装胶囊中，阻止了仅用CCK时观察到的效果。

假设：
总之，口服给予的普鲁咪嗪对总食物摄入和单一宏观营养素摄入产生了抑制食欲的效应，而这一效应被普鲁咪嗪拮抗剂CCK所抵消。


前提:
下丘脑室旁核（paraventricular hypothalamic nucleus,PVN）似乎整合了一种新型肽——胃饥饿素（ghrelin）。因此，我们研究了通过PVN内注射胃饥饿素所引发的摄食行为的中枢神经机制。我们确定，PVN内注射0.03nmol胃饥饿素是引起食物摄入增加的最低剂量，并且该剂量在PVN自身及其他与摄食相关的大脑区域中（包括下丘脑弓状核、背内侧核、杏仁核中央核以及孤束核）诱导了c-Fos免疫反应（这是神经元激活的标志）。

假设:
我们得出结论，胃饥饿素通过激活PVN及其他与摄食相关的脑区的神经元，从而来促进食物摄入。


前提:
瘦素在骨量的中枢调节中起着关键作用，而胃饥饿素（ghrelin）则与瘦素相互抗衡。在本研究中，我们探究了慢性脑室内注射胃饥饿素对Sprague-Dawley大鼠骨量的影响（1.5微克/天，持续21天）。大鼠分为对照组、胃饥饿素自由进食组(ghrelin ad lib-fed)和胃饥饿素配对进食组。与对照组相比，胃饥饿素自由进食组大鼠体重显著增加，但胃饥饿素配对进食组未出现体重增加。慢性脑室内胃饥饿素注射显著增加了胃饥饿素配对进食组大鼠的骨量，表现在胫骨松质骨的骨体积百分比、骨小梁厚度、骨小梁数量和体积性骨矿物质密度的增加。而对照组与胃饥饿素自由进食组大鼠的松质骨量之间无显著差异。慢性脑室内胃饥饿素注射显著增加了胃饥饿素配对进食组大鼠的矿物质沉积速率。

假设:
综上所述，慢性中枢注射胃饥饿素通过一种与体重无关的机制增加了骨量，这表明胃饥饿素可能通过中枢神经系统对骨产生促进作用。


前提:
胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK）或氯化锂（LiCl）的全身给药可以抑制大鼠的胃动力和食物摄取。下丘脑室旁核（PVN）中投射至脑干的催产素（oxytocin，OT）神经元，被认为介导了CCK和LiCl对胃动力和食物摄取的抑制作用。在本研究中，我们发现大鼠在PVN刀切病变后12至20小时基础胃动力增加；然而，这一效应在3天后消失。此外，CCK和LiCl在PVN病变后的12至20小时、3天和3周内仍抑制胃动力，尽管其效果有所减弱。将局部麻醉剂利多卡因注射入PVN，产生了类似于急性PVN损伤的效果。在PVN病变的大鼠中，CCK和LiCl对食物摄取的抑制作用与假病变大鼠中没有区别。

假设:
我们得出结论，胃动力对PVN有持续的抑制作用，并参与了CCK和LiCl对PVN及大鼠食物摄取的抑制作用，但这一作用并非必不可少。


前提:
硬骨鱼类鲑鱼降钙素（teleost salmon calcitonin，sCT）在骨骼肌中的生物作用与胰淀素（amylin）和降钙素基因相关肽（CGRP）相似，但哺乳动物的降钙素（CT）没有这种作用。研究表明这些肽类还可以减少公羊的食物摄入。由于sCT（而非胰淀素）能不可逆地与胰淀素结合位点结合，本研究的目的是比较两者的抑制食欲效力。为了确定sCT是否通过与胰淀素结合位点的相互作用来减少食物摄入，我们还测试了适当的拮抗剂（CORP 8-37，AC 187）是否能减弱sCT的厌食作用。最后，我们想知道大鼠降钙素（rCT）和sCT在减少食物摄入方面的效果是否相同。在24小时禁食的大鼠中，于暗期开始时进行腹腔内注射2类降钙素。在剂量为5或0.5微克/千克时，sCT的厌食效果比胰淀素更强，持续时间也更长（例如，5微克/千克：sCT > 10小时；胰淀素约2小时）。CORP 8-37和AC 187（10微克/千克）显著减少了sCT（0.5微克/千克）的厌食作用。与sCT不同，rCT（0.5微克/千克）对食物摄入没有影响。

假设:
总之，sCT比胰淀素更强且持续时间更长的厌食作用表明，这表明sCT可能通过与胰淀素结合位点的相互作用来减少食物摄入。


前提：
ATP刺激嘌呤能受体和囊性纤维化跨膜导电调节因子（CFTR）的激活都会抑制阿米洛利（amiloride）敏感的Na+转运并激活Cl-分泌。这些离子转运的变化可能会影响细胞体积。因此，我们检查了细胞收缩或细胞膨胀是否会影响上皮组织或非洲爪蛙(Xenopus)卵母细胞中的阿米洛利敏感的Na+转运，以及渗透应激是否会干扰ATP或CFTR对Na+转运的调节。在小鼠气管和结肠中，ATP/UTP刺激嘌呤能受体和IBMX和福斯可林激活CFTR，分别通过一种Cl-依赖的机制抑制了阿米洛利敏感的转运。当暴露于高渗透而非低渗溶液时，小鼠气管和结肠中的阿米洛利敏感Na+转运被抑制，而这种抑制与细胞外Cl-浓度无关。高渗透溶液和ATP对Na+转运的抑制是叠加的。当在非洲爪蛙卵母细胞中共同表达时，IBMX和福斯可林激活CFTR以Cl-依赖的方式抑制上皮Na+通道（ENaC）。然而，高渗和低渗溶液对阿米洛利敏感的电导率仅有微小影响，而与溶液的Cl-浓度无关。此外，即使在暴露于高渗或低渗浴液后，CFTR引起的ENaC抑制仍能在卵母细胞中检测到。

假设：
我们得出的结论是，小鼠气道和结肠中的阿米洛利敏感的Na+吸收被细胞收缩抑制，而这一机制不会干扰嘌呤能受体和CFTR介导的ENaC抑制。


前提：
髓袢升支粗段（TAL）对NaCl的吸收涉及主动转运，因此依赖于氧化磷酸化。细胞外ATP具有多重效应，包括对转运的刺激和抑制以及对氧化磷酸化的抑制。然而，目前尚不清楚ATP是否会改变TAL的转运以及该转变如何发生。我们假设ATP通过减少Na+的进入来抑制TAL的Na+吸收。我们测量了TAL悬浮液中的氧气消耗。ATP以浓度依赖的方式减少了氧气消耗。嘌呤（P2）受体拮抗剂苏拉明（300微摩尔）阻断了ATP对TAL氧气消耗的影响（147 ± 15对146 ± 16 nmol O2 x min(-1) x mg蛋白(-1)）。相反，腺苷受体拮抗剂茶碱并未阻断ATP对氧气消耗的影响。当用呋塞米（100微摩尔）和二甲基氨基阿米洛利（100微摩尔）阻断Na-K-2Cl共转运（Na-K-2Cl cotransport）和Na/H交换时，ATP并未抑制TAL的氧气消耗（从78 ± 13到98 ± 5 nmol O2 x min(-1) x mg蛋白(-1））。Na+离子载体奈斯汀（200 U/ml）在ATP处理和载体处理样本中都以相似程度增加TAL氧气消耗（368 ± 41对397 ± 47 nmol O2 x min(-1) x mg蛋白(-1)）。一氧化氮合酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯（3 毫摩尔）阻断了ATP对TAL氧气消耗的影响（157 ± 10对165 ± 15 nmol O2 x min(-1) x mg蛋白(-1)）。P2X选择性受体拮抗剂NF023阻断了ATP对氧气消耗的影响，而P2X选择性激动剂β-γ-Me-ATP则以浓度依赖的方式减少氧气消耗。

假设：
我们得出结论，ATP通过减少Na+的进入来促进促进髓袢升支粗段与Na+转运相关的氧气消耗，而P2X受体和一氧化氮介导了这一效应。


前提：
我们之前已经证明，抑制蛋白酪氨酸激酶会增加肾外髓质钾通道1（ROMK1）的通道活性，而抑制蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）会降低其活性（1）。现在，我们使用共聚焦显微镜、膜片钳技术和生物素标记技术进一步研究酪氨酸磷酸化在调节ROMK1转运中的作用。将人胚肾293细胞与c-Src和绿色荧光蛋白-ROMK1共转染，后者具有与ROMK1相同的生物物理特性。膜片钳研究表明，PTP抑制剂苯亚砜氧化物（PAO）降低了ROMK1的活性。此外，添加PAO减少了通过共聚焦显微镜检测的绿色荧光蛋白-ROMK1的细胞表面定位，并通过生物素标记测量的表面ROMK1密度减少了65%。同时，PAO处理显著增加了ROMK1的磷酸化。PAO的影响通过刺激酪氨酸磷酸化诱导的ROMK1内吞作用实验得到支持，发现将ROMK1的酪氨酸残基337突变为丙氨酸消除了PAO的作用。最后，在共转染有显性负调节的动力蛋白（dynaminK44A）的细胞中，PAO对ROMK1的抑制作用被完全阻断。这表明酪氨酸磷酸化诱导的ROMK1内吞作用依赖于动力蛋白。

假设：
我们得出结论，PTP通过依赖于动力蛋白的机制刺激ROMK1的内吞作用。


前提：
丁酸盐刺激哺乳动物结肠中的盐吸收。我们研究了丁酸盐是否也影响氯离子(Cl⁻)的分泌。我们在乌氏室中研究了雄性Sprague-Dawley大鼠的远端结肠的粘膜段和T84细胞。在对照结组中，1 毫摩尔的二丁酸腺苷3',5'-环磷酸（DBcAMP）分别使短路电流（Isc）和浆膜到粘膜的Cl⁻离子流（JsmCl）分别增加了3.2 ± 0.8和2.9 ± 0.8 μeq·cm⁻²·h⁻¹。粘膜或浆膜的25 毫摩尔丁酸盐阻止了DBcAMP诱导的Isc和JsmCl的增加。4和8毫摩尔的丁酸盐分别对JsmCl和Isc的增加造成了半最大抑制。丁酸盐还抑制了基础JsmCl（减少了2.0 ± 0.4 μeq·cm⁻²·h⁻¹），但不影响美克啡（carbachol）介导的Cl⁻分泌。在25 毫摩尔的浓度下，其他短链脂肪酸（SCFA）的相对抑制效力与其细胞代谢程度平行：丁酸盐 > 醋酸 = 丙酸 > 异丁酸。在25 毫摩尔时，所有SCFA暂时将粘膜内的细胞pH（pHi）降低了0.1个pH单位。在完整的T84细胞中，50 毫摩尔的丁酸盐抑制了DBcAMP诱导的Isc上升55%。在用尼斯他汀（nystatin）使基底外侧膜通透化的T84细胞中，丁酸盐抑制了Isc的增加82%。

假设：
我们得出结论，丁酸盐通过一种独立于细胞内pH值(pHi)的机制促进基础和cAMP介导的Cl⁻分泌，可能位于顶膜上，这种机制可能位于细胞顶端膜。


前提：
由于阴离子分泌抑制剂重现了囊性纤维化（CF）肺病的重要特征，因此我们在分离灌注的猪肺中评估了这些拮抗剂对气道粘液形态的影响。最大抑制浓度的布美他尼和二甲基阿米洛利分别阻断了猪气道中Cl-和HCO3-的分泌，诱导气道表面形成致密的“黏附”粘液、导致纤毛周围液的耗竭和纤毛的塌陷。当肺部暴露于百氯胆碱以刺激黏膜下腺分泌时，这一效应更加明显，黏附”粘液覆盖了超过98%的气道表面。百氯胆碱还能在没有阴离子分泌抑制剂的情况下，降低腺体导管中的粘蛋白含量，但在有抑制剂的情况下上述能力则消失。阴离子分泌抑制剂未诱导可测量的杯状细胞去颗粒化增加。

假设：
我们得出结论，抑制猪肺中的阴离子和液体分泌会破坏气道表面粘液的正常形态，进一步证明单独的阴离子分泌受损可能解释CF肺病的关键方面。


前提：
我们已经证明，维生素A（VA）和视黄酸（RA）能协同增加新生大鼠肺中视黄醇酯的含量。为了确认这种生化协同作用是否减轻小鼠早期新生儿高氧肺损伤，我们将新生C57BL/6小鼠从出生起暴露于95%的氧气或空气，持续4天。每天口服给予试剂（载体、VA、RA或维生素A与视黄酸的组合（VARA））。测量肺和肝脏的视黄醇酯含量，并评估肺损伤和发育。我们观察到，肺部的视黄醇酯水平在VARA组中比单独的VA或RA更高，而肝脏视黄醇酯水平则没有变化。维生素A和RA减轻了高氧肺损伤，VARA的效果更为显著。VARA降低了高氧引起的巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-2 mRNA和蛋白表达的增加，但并未改变高氧对肽生长因子（PDGF、VEGF和TGF-β1）的影响。4天的高氧或视黄醇类物质暴露，并未导致肺部发育的明显差异。

假设：
我们得出结论，VARA组合在新生小鼠的肺视黄醇酯浓度及减轻高氧诱导的肺损伤方面具有协同作用，并且这种作用可能通过调节炎性介质实现。


前提：
多种药物已被证明可以刺激表面活性物质磷脂的代谢。特别是β-肾上腺素能激动剂在生理条件下发挥着重要作用。我们使用离体肺模型，首次研究了二氧化氮（NO₂）吸入是否会改变β-肾上腺素对表面活性物质磷脂代谢的调节。在大鼠体内，连续暴露于含5 ppm NO₂的大气中48小时。分离肺脏并用含有β-肾上腺素能激动剂多巴胺（dopexamine）的灌注液灌注，研究了三个肺部区域的表面活性物质代谢：（1）肺灌洗液；（2）肺组织；（3）可洗脱的自由肺泡细胞。我们发现：（1）在正常大鼠肺中，多巴胺增加了灌注液中棕榈酸和胆碱向肺灌洗磷脂的掺入。在二氧化氮暴露的大鼠肺中，β-肾上腺刺激未导致前体掺入的增加。正常和NO₂暴露的大鼠肺在未刺激的前体掺入方面没有显著差异。（2）暴露于NO₂的大鼠肺组织中，由于细胞内储池大小增加，导致掺入二亚油酸磷脂酰胆碱的前体减少。（3）通过灌洗获得的肺泡细胞，在吸入二氧化氮和β-肾上腺刺激后显示出棕榈酸摄取增加。

假设：
根据这些数据，我们得出结论，NTG吸入损害了表面活性物质磷脂代谢的β-肾上腺素调节。


前提：
我们在慢性肺淋巴瘘管绵羊的清醒状态下，对其体内注射内毒素（1微克/公斤），随后立即给予G-CSF一次性大剂量（250微克/体重），以研究G-CSF的后期治疗对内毒素诱导的肺损伤的影响。我们测量了肺血流动力学参数、肺淋巴流量，以及血浆和肺淋巴中的血栓素B2和6-酮前列腺素F1α的浓度。在G-CSF后治疗组中，肺动脉压、肺血管阻力和肺淋巴流量在后期（内毒素输注后3-5小时）没有显著增加。后期的动脉氧气张力在接受G-CSF后治疗组中高于仅接受内毒素组。尽管在注射内毒素后1小时血浆中的血栓素B2水平显著增加，但G-CSF后治疗组的肺淋巴流量并没有显著增加。

假设：
我们得出结论，G-CSF（粒细胞集落刺激因子）的后期治疗可以防止内毒素诱导的肺损伤。


前提：
吸烟者在面对细菌感染时往往表现出气道高反应性（airway hyperreactivity，AHR）增强。本研究使用小鼠器官培养模型来解析这种平滑肌过度反应的机制。尼古丁模拟吸烟的效果，而脂多糖（LPS）代表细菌感染。通过在有或没有特定MAPK抑制剂的情况下，分析在器官培养中使用不同浓度的LPS和/或尼古丁处理4天后，孤立的小鼠气管段的收缩反应。使用实时PCR检测尼古丁对细胞表面Toll样受体（TLRs）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、环氧合酶-2（COX-2）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。通过免疫组织化学验证蛋白表达的增加。LPS的浓度依赖性地增加了对缓激肽和去氨基（9）-缓激肽的收缩反应。尼古丁与低剂量LPS的组合引起强烈的协同收缩，同时增加了激肽受体的表达。特异性激肽B1和B2受体抑制剂阻止了这种反应。尼古丁增加了上皮和光滑肌层中TLR4和TLR6的mRNA和蛋白表达，同时MCP-1和COX-2的mRNA也随之增加。特定抑制JNK减少了尼古丁的效果。

假设：
总之，长期暴露于尼古丁通过与JNK相关的通路能上调TLR4和TLR6的表达，导致LPS诱导的局部气道炎症的加剧以及AHR的增加。


前提：
为了比较表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）和倍他米松对肺气体交换区域形态发生和肺泡II型细胞分化在胎儿肺发育中的影响，我们对胎儿恒河猴（妊娠期的78%）进行了宫内治疗， 隔日一次给予EGF（总剂量5.33 mg/kg）、倍他米松（总剂量2.6 mg/kg）或载体生理盐水（对照），治疗共持续7天。EGF处理的胎儿恒河猴体重和肾上腺重量显著增加。而倍氯米松处理的胎儿恒河猴体重和肾上腺重量显著减少。外源性EGF减少了肺泡II型上皮细胞中的细胞质中糖原，并增加了细胞质器官和SP-A的含量。相比之下，外源性倍他米松并未改变肺泡II型细胞的细胞分化和成熟。无论是EGF还是倍他米松治疗均未显著改变气体交换区域的结构，表现为肺泡气体空间的大小或气体交换区域潜在气体空间的比例与对照组相比没有变化。

假设：
我们得出结论，在临床相关剂量下，EGF极大地加速了肺泡II型细胞的成熟，而倍他米松则没有。


前提：
Dravet 综合征 (DS) 是一种儿童早期发作的严重癫痫，通常由钠通道基因 SCN1A 的突变引起。DS 患者具有较高的癫痫猝死综合征 (SUDEP) 风险，普遍认为其与心脏机制有关。在此我们展示，DS 患者通常伴随发作期呼吸功能障碍。视频脑电图监测期间，一位患者在发作后出现严重且持续的通气不足，之后死于 SUDEP。带有 Scn1aR1407X/+ 丧失功能突变的小鼠在自发或热诱导癫痫发作后因中枢性呼吸暂停导致进行性心动过缓，并最终死于中枢性呼吸暂停。在高温或最大电击诱导的癫痫发作后，通过机械通气可避免小鼠死亡。选择性外周副交感神经阻断剂剂量的毒蕈碱受体拮抗剂无法阻止心动过缓或死亡，但在足以穿过血脑屏障的高剂量下，毒蕈碱受体拮抗剂可预防呼吸暂停、心动过缓和死亡。通过脑室内低剂量注射毒蕈碱受体拮抗剂，也可以预防呼吸暂停、心动过缓和死亡。

假设：
我们推断，Dravet 综合征 (DS) 患者的 SUDEP 可能源于原发性中枢性呼吸暂停，而这可导致心动过缓，推测其机制为缺氧对心肌的直接作用。


前提：
常染色体显性遗传性痉挛性截瘫（AD-HSP）是一种具有遗传异质性的神经退行性疾病，其特征为下肢进行性痉挛。位于2p21-p22的SPG4位点占所有AD-HSP患病人群的40-50%。SPG4基因最近被鉴定出来。该基因在成人和胎儿组织中广泛表达，并编码一种属于AAA家族的ATP酶——spastin。我们在德国的AD-HSP家族中鉴定出四种新的SPG4突变，包括一个曾提出过遗传早现的大家族。这些突变包括一个移码突变和一个错义突变，两者均影响到Walker B基序。另外两个突变影响了第12和第16内含子的两个供体剪接位点。对这两个供体剪接位点突变的RT-PCR分析显示外显子跳跃和异常剪接的SPG4 mRNA稳定性降低。所有突变均预计会导致功能性蛋白的缺失。

假设：
我们得出结论，AD-HSP是由SPG4基因的功能丧失突变引起的。


前提：
Joubert综合征（JBTS）是一种主要为常染色体隐性遗传的疾病，其特征为特异性的中脑-后脑和小脑畸形、眼球运动失用、不规则呼吸、发育迟缓和共济失调。JBTS是一种在遗传异质性的纤毛病。我们旨在表征与JBTS相关的法国加拿大人（FC）人群的遗传图谱。我们结合靶向测序和外显子组测序，对来自35个家庭的43位FC JBTS患者进行了研究。除了1例之外，所有患者均在之前与JBTS相关的基因中发现了致病性（32个家庭）或可能致病性（2个家庭）的变异。在那个例外患者的病例中，我们发现CEP104基因中的一个纯合剪接位点突变（c.735+2T>C）。有趣的是，我们还在两位非FC JBTS患者中发现了CEP104突变；其中一位患者携带一个母系遗传的无义突变（c.496C>T [p.Arg166*]）和一个新发剪接位点突变（c.2572-2A>G），而另一位患者在CEP104中携带一个纯合移码突变（c.1328_1329insT [p.Tyr444fs*3]）。先前研究表明，在纤毛生成过程中，CEP104从母中心粒转移到初级纤毛的尖端。在人视网膜色素上皮（RPE1）细胞中敲除CEP104会导致严重的纤毛生成缺陷。这些观察结果表明，CEP104在纤毛形成的早期通过调节母中心粒向纤毛基体的转化发挥作用。

假设：
我们得出结论，FC JBTS是由CEP104中的突变引起的。


前提：
RET基因的突变和多态性是导致先天性巨结肠症（Hirschsprung disease，HSCR）的主要原因。理论上，所有具有新的遗传病表现的真实杂合患者的父母都应该在某种程度上存在遗传嵌合体（基因镶嵌）。然而，目前尚未在HSCR的RET基因中发现遗传嵌合体。因此，因此，我们分析了RET基因突变家族中患者父母的遗传嵌合情况。从HSCR患者及其家庭/父母处采集血液样本，进行RET编码区的测序。在125个HSCR家庭中，分析了33个具有RET突变的家庭。在其中一个家庭中，我们检测到RET基因117/118位点的密码子中四个连续胞嘧啶中的一个丢失（c.352delC），导致蛋白质发生移码突变（p.Leu118Cysfs*105），该突变影响了两个兄弟姐妹。在无症状父亲的血样中，我们发现了该突变的遗传嵌合体，并在唾液和毛根的两个独立样本中得到了证实。通过峰值高度的量化并与不同比例的正常和突变质粒DNA混合样本进行比较，推测该突变发生在创始者的早期桑椹胚阶段，即4至8细胞期之间。

假设：
总之，我们识别出了一种导致HSCR的RET基因移码突变（frameshift mutation），该突变出现在其父母中，并至其父母患有巨结肠症。


前提：
MicroRNA（miRNA）通过对靶标mRNA的转译抑制参与了多种疾病的进展和抑制。因此，miRNA生物合成的改变会引发多种疾病。已知核因子90（NF90）-NF45复合物是miRNA生物合成的负调控因子。在本研究中，我们发现了NF90-NF45双基因转染（dbTg）小鼠在成年期会出现骨骼肌萎缩和中心核肌纤维。进一步研究发现，与野生型小鼠相比，NF90-NF45 dbTg小鼠骨骼肌中促进肌肉成熟的肌源性miRNA（包括miRNA 133a [miR-133a]）水平显著下降。然而，这些miRNA的初级转录物（pri-miRNA）在NF90-NF45 dbTg小鼠中明显升高。这一结果表明，NF90-NF45复合物通过抑制pri-miRNA的加工来抑制miRNA的产生。NF90-NF45通过结合到pri-miRNA上抑制pri-miRNA 133a-1（pri-miR-133a-1）的加工这一事实进一步支持了这一发现。最后，在NF90-NF45 dbTg小鼠的骨骼肌中，中心核肌病致病基因兼miR-133a的靶基因dynamin 2的水平也有所升高。

假设：
综上所述，我们得出结论，肌病复合症通过肌病引起的miR-133a表达降低，导致动力蛋白2表达增加，从而在体内诱导中心核性NF90-NF45。


前提：
既存肺动脉高压（PH）与功能性二尖瓣返流（FMR）患者进行外科二尖瓣修复后的不良结果相关。然而，肺动脉高压对MitraClip二尖瓣夹治疗的临床影响尚不清楚。因此，本研究的目的是评估既存肺动脉高压对FMR患者MitraClip治疗的影响。我们研究了91名接受MitraClip手术的FMR患者，按肺动脉收缩压将其分为2组：PH组（n = 48）和非PH组（n = 43）。通过多普勒超声心动图，将PH定义为肺动脉收缩压超过50 mm Hg。两组的手术成功率（定义二尖瓣反流程度降至2级或以下）和30天死亡率相似。根据纽约心脏协会功能等级分级，在12个月时，PH组（从2.9%提高至94.3%）和非PH组（从9.4%提高至96.9%）的大多数患者的心脏等级改善至I或II级。PH组的平均肺动脉收缩压从基线显著下降，但仍高于非PH组（50.8 ± 15.3 vs 36.7 ± 11.6 mm Hg, p <0.001）。经过平均25.0 ± 16.9个月的随访，Kaplan-Meier生存分析显示PH组的全因死亡率显著高于非PH组。在Cox回归分析中，既存PH是全因死亡率的最强预测因子（风险比[HR] 3.731，95%置信区间[CI] 1.653至8.475，p = 0.002）。

假设：
总之，MitraClip治疗在PH组和非PH组中均有效降低了功能性二尖瓣返流，缓解症状，并具有良好的早期安全性。


前提：
为了进一步明确莱姆性心肌炎的性质，对一名莱姆病患者进行了电生理研究和心内膜活检，该患者的主要心脏表现为高度房室传导阻滞。心内记录显示希氏束上阻滞和逃逸机制的完全缺失。镓67扫描显示心肌摄取，而右心室的心内膜活检显示活动性淋巴细胞性心肌炎。在一个活检样本中发现了与螺旋体生物相符的结构。

假设：
结论是，莱姆病（Lyme disease）可以导致急性活动性心肌炎，这一点通过镓67成像和心内膜活检得到了证实。


前提：
尽管冠状动脉疾病和胃食管反流病是常见病症，因此可能共存，但尚不清楚其中一种病症的存在是否会影响另一种病症。我们对37名患者进行了食管酸灌注测试，同时监测血压、心率和12导联心电图。其中25名患者经血管造影证实患有冠心病，12名患者的冠状动脉正常。我们计算了心率-血压乘积，这是心肌工作负荷的指标。在冠状动脉疾病患者中，若在食管酸灌注期间出现胸痛，心率-压力乘积从基线的10.0 ± 1.0 x 10³（均值 ± SEM）增加到15.2 ± 1.5 x 10³（p < 0.001），且9名患者中有3名显示心电图证据表明心肌缺血。此外，在冠状动脉疾病患者中，64%的患者虽然病史上极少或没有反流症状，但食管酸灌注测试呈阳性，而56%的冠心病患者在食管酸灌注过程中出现疼痛时，无法将这种疼痛与他们通常的心绞痛区分开来。

假设：
我们得出的结论是，在冠状动脉疾病中，酸灌注（以及可能的胃食管反流）引起的胸痛会导致心率-压力乘积升高，并可能诱发心肌缺血。


前提：
本研究旨在确定硫铊成像与心电图监测在非侵入性检测冠状动脉痉挛方面的敏感性，比较静脉注射麦角新碱(ergonovine)后与同时进行的冠状动脉造影。32名患有轻微冠状动脉疾病和胸痛的患者接受了12导联心电图监测、硫铊成像和冠状动脉造影，注射了0.05、0.1、0.2和0.3毫克的麦角新碱，每次间隔5分钟，或直到发生胸痛为止。在最后一次麦角新碱剂量注射后1分钟，静脉注射了2.5毫居(mCi)的硫铊-201，并记录了最终的心电图，随后进行了重复的冠状动脉造影。在注射硫铊后的10分钟内，分别在40度和70度左前斜位及前位进行成像。心电图、硫铊成像和冠状动脉造影结果均由盲法读取并进行比较。若发生以下情况，心电图、血管造影和硫铊研究结果将被判定为阳性：ST段抬高、压低或T波倒置大于或等于1毫米；血管狭窄大于50%；可逆性灌注缺陷。由于导管引起的痉挛、硫铊研究不理想或违反方案，5名患者被排除在分析之外。在纳入分析的27名患者中，6人出现胸痛，5人血管造影阳性，5人铊显像阳性，1人心电图阳性。研究结果如下：
• 铊显像敏感性：80%
• 心电图监测敏感性：25%
• 铊显像准确性：92%
• 心电图监测准确性：80%

假设：
我们得出结论，硫铊成像在非侵入性检测麦角新碱诱导的冠状动脉痉挛方面明显优于心电图，并且没有损失准确性。


前提：
在因头晕或晕厥而转诊的患者群体中，研究了24小时动态心电图监测（AM）期间主要心律失常（ARS）与症状（SX）的相关性。研究纳入了98名连续患者，年龄范围为25至82岁，他们有充足的活动和症状日记。被认为是主要的ARS包括2级、3级和4级的心室和室上性早搏（Lown分类）、窦房停搏和阻滞、房室阻滞，以及窦性心动过缓（≤40次/分钟）。尽管所有患者都是因头晕和/或晕厥而被转诊，但只有41人（42%）在记录期间出现了症状（SX）。ARS在63人（64%）中被记录下来。在有症状的组和无症状的组中，ARS的发生率或类型没有统计学上显著的差异（x² = 1.64）。在23名同时有主要ARS和记录症状的受试者中，只有两名在症状和ARS同时发生。

假设：
我们得出结论，存在症状（SX）并不会增加在24小时AM期间发生主要心律失常（ARS）的可能性。


前提：
为研究流行性感冒引发的支气管哮喘的时间进程，我们回顾性地检查了20名8至12岁哮喘儿童的FEV1值（第一秒用力呼气容积），这些儿童均在发病前5天到发病后10天内，呼吸症状尚较轻。血清补体结合试验滴度至少上升四倍，通过这条指标确认感染了流行性感冒感染。20名患者中有15名在急性期FEV1下降超过基线水平的20%。在这15名患者中，FEV1值均从发病开始就开始下降，除了一例例外的患者，其FEV1在潜伏期内就有所下降外。FEV1值在第二天持续下降，达到了平均最大下降值30.3 +/- 10.9%。在第三天开始改善，并在第七至第十天恢复到与基线水平差距在10%以内。

假设：
我们得出结论，流感诱发的哮喘可能在疾病的前两天持续加重恶化，并且可能需要至少七天才能恢复。


前提：
我们已经证明，在气道中激活蛋白酶激活受体-2（PAR(2)）会导致对同时吸入的抗原产生过敏性致敏，因此 PAR(2) 在哮喘的发病机制中起着重要作用。许多具有蛋白酶活性的空气过敏原会激活 PAR(2)。为了研究 PAR(2) 在对空气过敏原的过敏性致敏中的作用，我们开发了一种对蟑螂蛋白粘膜致敏的小鼠模型。我们假设，具有丝氨酸蛋白酶活性的天然过敏原在气道中激活 PAR(2) 在过敏性致敏中起着重要作用。连续5天（致敏阶段）经鼻给予BALB/c小鼠蟑螂提取物（CE），一周后再给予四天（激发阶段）。在最后一次激发后评估气道高反应性 (AHR) 和过敏性气道炎症。为了研究 PAR(2) 的作用，在致敏阶段，每次施用 CE 之前，小鼠都会通过鼻腔接触受体阻断性抗 PAR(2) 抗体。粘膜暴露于 CE 会诱发嗜酸性气道炎症、AHR 和蟑螂特异性 IgG1。热灭活或大豆胰蛋白酶抑制剂（SBTI）处理的 CE 无法诱导这些效应，表明蛋白酶活性起着重要作用。在致敏阶段使用抗 PAR(2) 阻断抗体可完全抑制气道炎症，并降低 AHR 和蟑螂特异性 IgG1 的产生。即使在没有功能性 TLR4 的情况下，CE 激活的 PAR(2) 也可作为过敏性致敏的佐剂。

假设：
我们得出结论，在过敏性气道炎症的小鼠模型中，血管系统诱导了依赖PAR(2)的过敏性气道致敏


前提：
干咳是使用血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI) 的最常见限制因素。ACEI 会增加支气管上皮细胞上的促炎物质一氧化氮（NO）的生成。我们通过一项随机、双盲、安慰剂对照试验，检验了补充铁剂（NO 合酶抑制剂）可能减少与 ACEI 使用相关的咳嗽的假设。研究对象是 19 名出现 ACEI 诱发咳嗽的患者。经过 2 周的观察期后，他们被随机分配到每天早上服用 256 毫克硫酸亚铁片剂或安慰剂的组，治疗期为 4 周。要求受试者填写咳嗽记录日记，以 0 到 4 的量表对咳嗽的每日严重程度进行评分。比较了观察期和治疗期最后一周的平均每日咳嗽评分。评估了两个时期之间的血细胞计数和血清铁和铁蛋白浓度的变化。观察和治疗期间，补铁组的平均每日咳嗽评分分别为 3.07+/-0.70 和 1.69+/-1.10，安慰剂组的平均每日咳嗽评分分别为 2.57+/-0.80 和 2.35+/-1.22，表明补铁后咳嗽评分显著降低（P<0.01），但安慰剂组没有显著降低。补铁组的三名受试者几乎完全停止咳嗽。两组的实验室数据均未观察到显著变化。

假设：
总之，补铁成功减少了 ACEI 引起的咳嗽。


前提：
急性呼吸道合胞病毒 (RSV) 诱发的细支气管炎通常与住院后持续出现的呼吸道症状有关。迄今为止，我们还没有有效的客观措施来评估 RSV 诱发的细支气管炎的症状。我们报告了细支气管炎照护者日记（BCD）在评估急性RSV后症状和医疗资源利用方面的可靠性、有效性和反应性。BCD 测量四种症状（白天咳嗽、喘息、呼吸困难和夜间咳嗽）、医疗保健使用情况以及肺部症状增厚的急救药物。所报道的孟鲁司特治疗急性后 RSV 的前瞻性、安慰剂对照试验的 4 周治疗期的数据，可用于评估可靠性（内部一致性和重测）、结构效度（横断面和纵向相关性）、判别效度（已知该研究的主要结果是无症状天数 (SFD) ）的百分比，次要结果是综合症状评分（CSS；日间咳嗽、喘息和呼吸困难的平均数）。 Cronbach's alpha 系数为 0.85，表明这四种症状的内部一致，支持单维量表结构。SFD 和 CSS 百分比的重复测试可靠性高于建议的临界点0.70，横截面和纵向相关性显著且具有统计学意义，证明了假设的已知组的有效性。响应性分析表明 SFD 百分比具有中等效应量。

假设：
总之，细支气管炎照护者日记（BCD）为评估急性后 RSV 诱发的细支气管炎症状提供了一种有效、可靠且反应灵敏的工具，能够测量中等效应大小，并表现出对治疗的敏感性。


前提：
气道壁重塑是哮喘的一种既定病理特征，其原因尚不清楚，但其潜在相关的一个介质是转化生长因子-β 1 (TGF-β1)。我们测量了临床稳定的特应性哮喘患者和健康对照受试者支气管肺泡灌洗（BAL）液中的免疫反应性转化生长因子-β1水平。我们还使用分段支气管激发模型（局部支气管刺激），检查了过敏原暴露对气道中 TGF-β1 释放的影响，在支气管内过敏原和对照生理盐水挑战后的两个时间节点分别进行了 BAL。哮喘患者的 TGF-β 1 基础浓度显着高于对照组（中位数 8.0 与 5.5 pg/ml，p = 0.027）。段支气管激发后10 分钟，2组中受攻击部位的转TGF-β1浓度没有显着差异（31.3 对 25.0 pg/ml，p = 0.78），但 24 小时后，过敏原攻击部位的 TGF-β1 浓度显着升高（46.0 21.5 pg/ml，p = 0.78）。p = 0.017）。

假设：
我们得出的结论是，气道中的基础哮喘 1 水平在特应性 TGF-β 中升高，并且这些水平随着过敏原暴露而进一步升高。


前提：
我们之前在绵羊身上发现，持续运动后肺血管阻力迅速降低，随后是较慢且较小的第二次血管舒张。第二阶段部分由α和β肾上腺素受体激活调节。我们研究了吸入一氧化氮（NO；40 ppm）和静脉注射硝酸甘油对运动期间β受体阻滞（β阻滞）诱导的肺血管收缩的影响。在配对研究中，我们让八只羊在跑步机上以每小时 4 英里的恒定速度锻炼 4 分钟，并测量了血流动力学反应。 β-阻断（普萘洛尔，1 mg 静脉注射）期间，有或没有40 ppm吸入NO或连续输注硝酸甘油（3.2-4.0微克/(千克·分钟)）。β阻滞导致稳态运动（稳定状态运动）期间（40-240秒）的肺血管阻力高于未阻断状态；运动第二阶段肺血管阻力的降低幅度（13-16%）小于吸入对照运动（26-30%）。吸入 NO和硝酸甘油将β-阻滞剂相关的肺血管收缩逆转至对照运动的水平。吸入NO和静脉注射硝酸甘油也逆转了静息状态下静脉注射去氧肾上腺素产生的肺血管收缩。

假设：
我们得出的结论是，通过气体吸入或亚硝基化合物传递的外源黄芩素可以对抗并完全逆转绵羊运动过程中α受体激活的肺血管收缩。


前提：
我们在缺氧性肺血管收缩期间，重新评估了内源性和吸入式一氧化氮（NO，一氧化氮）的作用位点。对 21 只成年猫用自体血液原位灌注第三区肺。通过双闭塞技术测量毛细血管的压力。在常氧（FiO2 = 0.3）和缺氧（FiO2 = 0.02）的条件下，通过零微穿刺技术，测量在NG-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME，10 mg/kg，一种NO合酶抑制剂）和吸入NO（5-100 ppm）处理下，直径 70-100 微米的小动脉和小静脉的压力。灌注液的PO2从正常氧时的187.6 ± 5.3 mmHg降至缺氧时的25.7 ± 1.3 mmHg，并在缺氧加50 ppm NO时进一步降至20.8 ± 2.2 mmHg（与仅缺氧相比，p < 0.05）对缺氧的反应中，肺血管压力下降的增幅在未处理和经L-NAME处理的肺中分别为4.8 ± 1.0 cmH2O和9.1 ± 1.4 cmH2O（p < 0.05）。L-NAME显著增加了静脉段的缺氧收缩。呼出NO的浓度从正常氧时的13 ± 4 ppb增加到缺氧时的18 ± 4 ppb（p < 0.1）。吸入NO不仅以剂量依赖方式降低肺动脉压，还降低毛细血管血压，从而减轻了缺氧性肺血管收缩。肺静脉对吸入NO的敏感性高于动脉。吸入NO（50 ppm）使小于70至100微米直径的血管扩张39%（p < 0.05），使大于100微米直径的小静脉扩张26%（p < 0.05），但对大于100微米直径的小动脉的扩张效果不显著（11%）。吸入NO对湿重与干重的比率无显著影响。

假设：
我们得出的结论是，内源性NO和吸入NO都会减弱缺氧性肺血管收缩，并伴有显着的肺静脉扩张。


前提：
在西方国家，心脏病是孕期孕妇死亡的主要原因。对于已有心脏病的患者来说，研究妊娠对心脏的影响较为困难。由于缺乏实验性研究，我们调查了通过横主动脉缩窄术（TAC）在小鼠中产生的压力过载对其受孕能力、妊娠结局以及母体心脏结构和功能的影响。四周的TAC导致左心室（LV）肥厚和功能障碍，伴随显著的间质纤维化、毛细血管密度下降，并诱导了病理性心脏基因表达。妊娠增加了相对左心室和右心室重量，但未对TAC后左心室功能的衰退产生影响。令人意外的是，妊娠减轻了由TAC引起的相对心脏和肺重量相对增加，这伴随着毛细血管密度和心房利钠肽A型（natriuretic peptide type A）表达的趋向正常化。此外，妊娠和TAC的联合增加了心脏c-Jun和STAT1的心脏磷酸化作用，但减少了磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）的磷酸化。最后，TAC对受孕率、妊娠时长、子宫大小、胎仔数量和仔鼠重量没有显著影响。

假设：
综上所述，我们发现妊娠不仅没有加重心脏压力过载引起的变化，反而减轻了病理性左心室重塑和肺部充血，同时减弱了由TAC诱导的病理性基因表达，这表明妊娠对压力过载的心脏具有积极的影响。


前提：
尽管内源性一氧化氮（NO）调节胎儿肺循环和体循环的基础张力，但其在调节动脉导管（DA）张力中的作用知之甚少。对妊娠晚期胎羊DA组织的免疫染色显示，DA内皮中存在强烈的内皮型NO合酶（eNOS）染色。为了研究NO和鸟苷酸3',5'-环磷酸（cGMP）系统在体内DA中的生理作用，我们在10只慢性处理的妊娠晚期胎羊中测量了NG-硝基-L-精氨酸（L-NNA；30 mg，一种NOS抑制剂）、亚甲蓝（40 mg，一种鸟苷酸环化酶抑制剂）和吲哚美辛（0.8 mg，一种环氧合酶抑制剂）的血流动力学效应。L-NNA增加了主肺动脉（MPA）和主动脉的压力（P < 0.05 vs. 基线），但未改变MPA和主动脉之间的压力梯度。L-NNA导致DA流量轻微下降，并使DA阻力略有上升。亚甲蓝增加了MPA压力以及MPA与主动脉之间的压力梯度，从0.3 ± 0.2（基线）升至7.0 ± 2.7 mmHg（P < 0.05）。吲哚美辛在40分钟后增加了MPA压力和MPA与主动脉之间的压力梯度，从1.1 ± 0.4（基线）升至6.3 ± 1.5 mmHg（P < 0.05）。吲哚美辛减少了DA流量并增加了DA阻力。

假设：
我们得出结论，eNOS（内皮型一氧化氮合酶）存在于胎儿DA的内皮细胞中，并且NOS抑制会在体内引起DA收缩。


前提：
在从经历1周低氧引起的肺动脉高压大鼠中分离的肺动脉中，通过二氨基荧光素-2二乙酸酯进行的原位可视化显示，碳酰胆碱刺激的内皮一氧化氮（NO）生成以及cGMP含量显著下降。此变化伴随着碳酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张减弱。低氧肺动脉中内皮型NO合酶（eNOS）及其调节蛋白（caveolin-1和热休克蛋白90）的蛋白表达未发生变化，表明慢性低氧在翻译后水平损害了eNOS的活性。在低氧肺动脉中，碳酰胆碱但非离子霉素刺激的细胞内Ca(2+)水平增加被抑制。接下来，我们重点关注eNOS激活系统中Ca(2+)敏感性的变化。形态学研究显示，低氧条件下内皮细胞萎缩，eNOS在低氧内皮细胞中呈现外周浓缩，但仍保持在eNOS与高尔基体或质膜之间的共定位。然而，在低氧肺动脉中，无论是否存在碳酰胆碱，eNOS与小窝蛋白-1紧密耦合，并与热休克蛋白90或钙调蛋白分离。此外，在低氧动脉中，无论何种条件，eNOS Ser¹¹⁷⁷（丝氨酸1177位点）磷酸化显著降低，但不影响Akt磷酸化。

假设：
综上所述，慢性低氧损害了内皮细胞钙（Ca²⁺）代谢，以及eNOS与小窝蛋白-1的正常耦合，从而导致eNOS失活。


前提：
妥布霉素是一种氨基糖苷类抗生素，用于治疗囊性纤维化患者的铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）感染。然而，痰液会拮抗妥布霉素的生物活性。糖蛋白（粘蛋白）和高分子量DNA分别占痰液干重的2%至3%（P.L. Masson和J.F. Heremans，p. 412-475，M.J. Dulfano, Sputum: Fundamentals and Clinical Pathology，1973）以及3%至10%（W.S. Chernick和G.J. Barbero，Pediatrics 24:739-745，1959，和R. Picot，I. Das和L. Reid，Thorax 33:235-242，1978）。妥布霉素与从痰液中提取的粘蛋白和DNA结合（R. Ramphal，M. Lhermitte，M. Filliat和P. Roussel，J. Antimicrob. Chemother. 22:483-490，1988）。在体外，重组人DN酶（rhDNase）将痰液中的大于50 kb的高分子量DNA水解为2至4 kb的片段。在研究可透析的妥布霉素时，我们考察了药物与全痰液以及“模拟痰液”（由猪胃粘蛋白和小牛胸腺DNA组成）的结合情况。我们还研究了rhDN酶对痰液、模拟痰液和小牛胸腺DNA的处理对妥布霉素结合的影响。我们发现，使用rhDN酶处理痰液、模拟痰液和小牛胸腺DNA并未显著增加透析液中妥布霉素的生物活性；令人惊讶的是，rhDN酶增加了痰液对妥布霉素的结合。

假设：
我们得出结论，rhDNase（重组人脱氧核糖核酸酶）不会增加妥布霉素在痰液中的生物活性。


前提：
卡氏肺孢子虫性肺炎（PCP）仍然在实体器官移植受者中引起显著的发病率。尽管一些移植项目在移植后为患者预防性地使用甲氧苄啶-磺胺甲恶唑（复方磺胺甲噁唑，TMP-SMX），但目前尚无前瞻性研究报告其在心脏移植受者中的安全性和有效性。因此，我们将58位心脏移植受者随机分为三组：每周三天每天两次服用TMP（160 mg）-SMX（800 mg）的组（B组），或每周七天每天服用两次的组（C组），以及不接受治疗的对照组（A组）。治疗在移植后14天开始并持续四个月。各组在年龄、性别、既存的肺部病变及免疫抑制方案方面没有差异。在对照组（A组）的17名患者中，有7人在移植后的前四个月出现了符合PCP症状的临床表现，并在移植后四个月内通过支气管肺泡灌洗的组织学检查确诊。然而，在每日或间歇治疗组中，没有任何患者在研究期间患上PCP（P < 0.005）。两种剂量的TMP-SMX均良好耐受，且无患者因治疗需要中止。总白细胞计数、硫唑嘌呤剂量及每位患者治疗的排斥反应次数在三组间无显著差异。

假设：
我们得出结论，TMP-SMX可以安全且有效地用于预防心脏移植后四个月内的卡氏肺孢子虫性肺炎的发生。


前提：
通常，霉酚酸酯[MMF，霉酚酸(MPA)的前药]与环孢素联合使用时，剂量为与他克莫司联用时的两倍，因为人们认为在环孢素治疗期间，MPA的暴露量较低。本研究旨在比较稳定的肾脏移植受者在环孢素（n = 12）或他克莫司（n = 12）维持治疗下，12小时稳态浓度-时间曲线的MPA及其酚-和酰基-葡萄糖醛酸代谢物（MPAG和AcMPAG）的情况。在环孢素组的吸收阶段，总和游离MPA的剂量标准化浓度（即按给药剂量调整后的浓度）显著较高，但浓度-时间曲线下面积（AUC0-12）并没有显著差异。此外，环孢素组的AcMPAG暴露量也较高（P < 0.05）。环孢素组的12名患者中有10名接受了酮康唑治疗；然而，无论是否与酮康唑一起口服给药，MMF对Sprague-Dawley大鼠（斯普拉格-道利大鼠）的MPA或MPAG的暴露量并没有差异。

假设：
总之，MPA对环孢素及其代谢物的处理方式与他克莫司不同；然而，接受MPA的患者可能不需要双倍剂量的MMF来达到相同的药物暴露水平。


前提：
巨细胞病毒（CMV）是固体器官移植受者中常见的病原体，而接受肺移植的患者似乎受到的影响更为频繁和严重。由于预防性使用更昔洛韦的持续时间可能会影响固体器官移植受者中CMV疾病的发生率，因此我们评估了肺移植受者中6周预防性方案的有效性。我们还评估了CMV抗体滴度上升四倍对预测CMV疾病发展的能力。研究纳入了21名连续的肺移植受者：15人在移植时CMV抗体阳性，6人CMV抗体阴性且接受了来自CMV阳性供体的肺移植。平均随访时间为430 ± 157天（范围178-730天，中位数449天）。6周的甘昔洛韦方案既未预防CMV感染（发生在17/21名患者中，占81%），也未预防CMV疾病（在21名患者中见于8名，占38%）。CMV抗体滴度的四倍上升仅在13例中的3例（占23%）中先于CMV疾病的发生。

假设：
我们得出结论，6周的甘昔洛韦预防方案无法预防肺移植受者中的CMV感染或疾病，并且CMV抗体滴度的上升很少在CMV疾病发展之前出现。


前提：
在兔子的肺炎链球菌脑膜炎模型中，对抗生素治疗开始后的炎症反应和神经元损伤的参数进行了比较，使用了静脉注射的奎努普汀/达福普汀（100 mg/kg，短程或持续输注）和头孢曲松（10 mg/kg/h）。在两种给药方式下，奎努普汀/达福普汀的杀菌活性均低于头孢曲松。然而，前炎症细胞壁成分（脂磷壁酸（LTA）和磷壁酸（TA））的浓度以及脑脊液（CSF）中肿瘤坏死因子（TNF）的活性，奎努普汀/达福普汀组中显著低于头孢曲松治疗组。LTA/TA浓度中位数（25/75百分位数）如下：(i) 感染后14小时：奎努普汀/达福普汀持续输注为133 (72/155) ng/mL，短程输注为193 (91/308) ng/mL，而头孢曲松为455 (274/2042) ng/mL（P值分别为0.002和0.02）；(ii) 感染后17小时：奎努普汀/达福普汀持续输注为116 (60/368) ng/mL，短程输注为117 (41/247) ng/mL，而头孢曲松为694 (156/2173) ng/mL（P值分别为0.04和0.03）。感染后14小时，TNF活性中位数（25/75百分位数）为：奎努普汀/达福普汀持续输注为0.2 (0.1/1.9) U/mL，短程输注为0.1 (0.01/3.5) U/mL，而头孢曲松为30 (4.6/180) U/mL（每次比较的P值均为0.02）；感染后17小时，TNF活性为：2.8 (0.2/11) U/mL（奎努普汀/达福普汀持续输注）和0.1 (0.04/6.1) U/mL（短程输注），而头孢曲松为48.6 (18/169) U/mL（P值分别为0.002和0.001）。感染后24小时，接受奎努普汀/达福普汀治疗的动物神经元特异性烯醇化酶（NSE）浓度显著较低：4.6 (3.3/5.7) μg/L（持续输注）和3.6 (2.9/4.7) μg/L（短程输注），而头孢曲松治疗组为17.7 (8.8/78.2) μg/L（P值分别为0.03和0.009）。

假设：
总之，使用奎普利斯丁/达尔佛普利斯丁的抗生素治疗在抗生素治疗开始后减弱了蛛网膜下腔内的炎症反应。


前提：
由于突变或扩增的酪氨酸激酶的酪氨酸磷酸化（pYSTAT3）而导致的组成型STAT3的持续激活，对癌症的起始、进展、侵袭以及癌细胞的运动性至关重要。我们展示了AF1q与乳腺癌细胞中的STAT3信号传导相关的研究。在异种移植模型中，AF1q表达的增强激活了STAT3，并在免疫缺陷的NSG小鼠中促进了肿瘤的生长和转移。改变AF1q表达的MDA-MB-231LN乳腺癌细胞的细胞因子分泌表型显示，血小板衍生生长因子B亚单位（PDGF-B）的表达发生了变化。AF1q诱导的PDGF-B刺激了MDA-MB-231LN细胞的运动性、迁移和侵袭，且AF1q上调了血小板衍生生长因子受体（PDGFR）信号传导。此外，AF1q诱导的PDGFR信号通过Src激酶激活增强了STAT3活性，这可以被Src激酶抑制剂PP1阻断。此外，AF1q通过PDGFR信号上调了酪氨酸激酶信号，这一过程可被伊马替尼抑制。

假设：
总之，我们证明了AF1q的增强表达通过激活PDGF-B/PDGFR级联反应通路中的Src激酶，从而促进了侵袭性癌细胞中持续且致癌的pYSTAT3水平。


前提：
雌激素受体-α（ER-α），由ESR1基因编码，通过免疫组织化学检测发现约70%的侵袭性乳腺癌中存在ER-α，并作为一种强有力的预测性生物标志物。在ER阳性转移性乳腺癌中，配体结合域（ligand-binding domain）的ESR1激活突变报道的发生率高达35-40%，并与内分泌治疗抗性和疾病进展相关。目前尚不清楚ESR1突变是否会影响常规临床实践中免疫组织化学对ER的检测。在本研究中，通过Memorial Sloan Kettering癌症中心集成可操作癌症靶标突变分析（MSK-IMPACT）方法检测乳腺癌中的ESR1突变，该方法是一种经食品药品监督管理局（FDA）批准的杂交捕获（hybridization capture-based）为基础的下一代测序检测方法。研究期间，共分析了来自局部晚期或转移性乳腺癌患者共586例。在66名患者的67个乳腺癌样本中发现了ESR1体细胞改变。这些患者的原发性和接受治疗后的乳腺癌样本在确诊时进行了雌激素受体ER、孕激素受体和人类表皮生长因子受体2的免疫组织化学分析。发现了20种独特的涉及配体结合域的ESR1突变，均来自先前接受内分泌治疗的患者的乳腺癌样本。其中最常见的突变是D538G（n = 22）、Y537S（n = 7）和E380Q（n = 7）。所有具有ESR1突变的乳腺癌样本在免疫组织化学检测中均为ER阳性。对34例患者的配对未经治疗的原发肿瘤和接受治疗后的肿瘤样本进行的ER免疫组织化学回顾分析显示，ER阳性免疫组织化学状态未发生可检测到的变化（侵袭性肿瘤细胞核染色的中位百分比：未经治疗的原发肿瘤为90%，治疗后的肿瘤为95%）。

假设：
我们得出结论，ESR1突变不会显著减少免疫组织化学中ER的阳性染色。


前提：
食道癌（EC）是一种侵袭性疾病，主要有两种组织学亚型：腺癌（EAC）和鳞状细胞癌（ESCC）。这两种亚型在几乎所有因素上都有显著差异。ESCC 的发生主要与烟草和酒精的滥用有关，而肥胖和慢性胃食管反流病（GERD）则是 EAC 和 EAC 前驱病变巴雷特食管（Barrett's esophagus，BE）的重要危险因素。BE是一种肠上皮化生，是EAC的前兆。肥胖会导致非脂肪组织中的异位脂滴（ectopic lipid droplets，LD）的积聚。LD 是参与细胞代谢、信号传导、增殖和炎症介质产生的细胞器。因此，本研究的目的是探讨 LD 在 EC 中的发生及其作用。研究显示，从非肥胖到肥胖个体的食管样本中，随着 BE 和 EAC 的发展，LD 水平逐渐增加，而 ESCC 样本与非肿瘤样本相比没有显著变化。此外，为模拟 BE 和 EAC 的风险因素暴露，非肿瘤食管细胞系被用油酸（OA）和酸化培养基及/或脱氧胆酸（DCA）处理，结果显示 LD 数量显著增加，COX-2 和 CXCL-8 表达及 IL-8 分泌也显著增加。进一步研究发现，COX-2 表达与 LD 数量呈显著正相关，并在 EAC 中共定位，但在 ESCC 中未观察到这一现象，表明 LD 可能是 EAC 中类二十烷酸的产生位点。

假设：
总之，本研究表明，肥胖及巴雷特食管 (BE) 和食管腺癌 (EAC)相关的炎症刺激导致 LD 的逐步增加，LD 可能负责调控炎症介质的产生和/或作用，从而促进巴雷特食管和食管腺癌的发生与进展。


前提：
前列腺癌进展为转移性和去势抵抗性疾病代表了一个关键步骤。我们之前的研究表明，蛋白激酶C（PKC）激活后，Twist1和雄激素受体（AR）诱导在去势抵抗中起到了关键作用，但具体的分子机制尚不清楚。本研究旨在阐明相关的分子机制，重点研究NF-κB转录因子。在抑制PKC后，我们检测了NF-κB的活性，并在抑制NF-κB后检测了Twist1和AR在人体前列腺癌细胞中的表达情况。同时，我们还研究了在对激素治疗产生抵抗的细胞中抑制AR信号后的PKC/NF-κB的状态。结果表明，通过敲低和小分子抑制PKC信号抑制了RelA（NF-κB转录因子亚基）活性，而阻断NF-κB抑制了Twist1和AR的表达。相反，通过去除雄激素和使用新型抗雄激素药物恩扎卢胺（安可坦）抑制AR信号，可诱导PKC和RelA活性，导致Twist1/AR在转录水平的诱导。此外，抑制NF-κB信号阻止了恩扎卢胺（安可坦）诱导的Twist1和AR的诱导。最后，NF-κB在去势抵抗性和恩扎卢胺（安可坦）抵抗性细胞中均被激活。

假设：
综上所述，NF-κB信号负责通过PKC上调Twist1以响应AR的促进，从而导致AR的异常激活。


前提：
癌细胞即使在氧气充足的情况下也偏好使用糖酵解作为能量代谢方式，这种现象称为沃伯格效应（Warburg effect），能够促进肿瘤的形成和恶性进展。在本研究中，我们证明了EZH2（一种在肿瘤增殖、侵袭和转移中具有多方面致癌作用的蛋白）通过激活沃伯格效应促进了胶质母细胞瘤的发生和恶性进展。我们观察到HIF1α是EZH2的靶点，其激活对EZH2介导的代谢适应是必要的，且在EZH2过表达时HIF1α被激活。EZH2抑制了EAF2的表达，而EAF2的下调反过来上调了HIF1α的水平。

假设：
我们从这些结果得出结论，EZH2通过EAF2-HIF1α信号轴激活糖酵解，从而部分抑制了肿瘤发生和恶性进展。


前提：
与Ca2+类似，线粒体内的Sr2+抑制完整的大鼠肝线粒体中的氧化磷酸化。Ca2+和Sr2+还抑制亚线粒体颗粒（线粒体碎片）中ATP酶的水解活性。当培养基中Mg2+的浓度为1.0 毫摩尔时，在2.5 毫摩尔 Ca2+或5.0 毫摩尔 Sr2+的浓度下，可达到ATP酶活性的半最大抑制。通过增加反应介质中Mg2+的浓度，Ca2+和Sr2+对ATP酶活性的抑制都显著降低。此外，动力学数据和在不同浓度的Ca2+或Sr2+存在下对MgATP（ATP酶的底物）浓度的测定的结果，强有力地表明这些阳离子通过与Mg2+竞争形成MgATP而抑制ATP水解。

假设：
基于这些亚线粒体颗粒的结果与用羧基阿曲草苷或寡聚霉素滴定预加载Sr2+的线粒体中的氧化磷酸化结果之间的良好一致性，可以得出结论，线粒体内的Ca2+或Sr2+通过降低腺嘌呤核苷酸对ADP（腺苷二磷酸）/ATP（腺苷三磷酸）载体和ATP合酶的可得性，抑制完整线粒体中的氧化磷酸化。


前提：
线粒体钙是细胞代谢的重要调节因子。研究表明，CCDC90A是线粒体钙单向转运蛋白（MCU）复合体的调节因子，这是一个控制线粒体钙摄取的选择性通道，因此CCDC90A被重新命名为MCUR1。在此，我们展示了在人类成纤维细胞中抑制CCDC90A会导致特定的细胞色素c氧化酶（COX）组装缺陷，进而导致线粒体膜电位降低和线粒体钙摄取能力减弱。由于TACO1或COX10突变而导致COX组装缺陷的患者的成纤维细胞也显示出降低的线粒体膜电位降低和钙摄取能力受损，这两者均可通过表达相应的野生型cDNA得到恢复。在缺乏MCU的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）中，删除fmp32（CCDC90A的同源基因）也会导致COX缺陷，证明了CCDC90A的功能在进化上是保守的。

假设：
我们得出结论，CCDC90A并不直接调节线粒体钙单向转运蛋白（MCU），而是在细胞色素C氧化酶（COX）的装配过程中发挥作用。


前提：
在大多数细胞中（包括脑细胞）大部分ATP（三磷酸腺苷）是由线粒体产生的。调节这一复杂的机制以满足细胞的能量需求是一个复杂的过程，我们尚未完全理解。在这种背景下，3',5'-环磷酸腺苷（cAMP）被认为在信号-代谢耦合（即信号传导与代谢过程的协调）及线粒体ATP生产调节中起着重要作用。在细胞中，cAMP信号可能从细胞质侧影响线粒体，但最近有研究提出，由可溶性腺苷酸酰化酶（sAC）在线粒体基质内产生的cAMP信号可能调节呼吸，从而调节ATP的产生。然而，关于脑线粒体中的这些过程知之甚少，在线粒体基质内产生的cAMP信号的效应器尚不完全清楚，因为蛋白激酶A（PKA）和cAMP激活的交换蛋白1（EPAC1，环磷酸腺苷激活蛋白1）都被认为参与其中。在这里，我们回顾了当前的知识，并将其与脑线粒体联系起来。此外，基于对分离的小鼠大脑皮层线粒体进行的呼吸、细胞膜电位和ATP生产的测量，表明sAC、PKA或EPAC的抑制剂以不同的方式影响线粒体功能。

假设：
总之，我们认为脑线粒体确实通过cAMP介导的sAC（可溶性腺苷酸环化酶）信号调节其功能，并且PKA和EPAC可能都参与cAMP下游的过程。


前提：
ADP不仅是ATP生成的关键底物，也是线粒体通透性转变孔（mPTP）的有效抑制剂。在这项研究中，我们评估了氧化应激如何影响ADP作为mPTP抑制剂的效力，以及其对活性氧（ROS）产生的减少是否可能相关。我们定量测定了ADP对正常和受应激的分离心脏线粒体，在诱导mPTP之前的线粒体钙（Ca²+）保持能力（CRC）的影响。我们使用了两种慢性氧化应激模型（老年鼠和糖尿病小鼠）和两种急性氧化应激模型（缺血再灌注（IR）和叔丁基过氧化氢（t-BH））。在对照线粒体中，CRC为344 ± 32 nmol/mg蛋白质。500 μmol/L的ADP使CRC增加到774 ± 65 nmol/mg蛋白质。ADP的这个效应似乎与其浓度有关，因为50 μmol/L的ADP效果明显较小。此外，抑制F0F1ATP酶将ADP转化为ATP的寡霉素显著增强了50 μmol/L ADP的效果。慢性氧化应激对CRC或500 μmol/L ADP的效果没有影响。在IR或t-BH暴露后，CRC显著降低到1 ± 0.2和32 ± 4 nmol/mg蛋白质。令人惊讶的是，ADP使CRC在IR和t-BH中分别增加到447 ± 105和514 ± 103 nmol/mg蛋白质。因此，其对CRC的增加与对照组相同。在对照线粒体中，ADP减少了底物和Ca²+诱导的ROS增加。然而，在t-BH线粒体中，ADP对ROS的影响相对较小。

假设：
我们得出结论，ADP（二磷酸腺苷）能够强效地恢复严重受应激的线粒体的CRC能力。


前提：
先前的研究人员已经证明，在动物的骨骼肌中，3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺（MDMA）引起的高热依赖于解耦联蛋白3（UCP3）。鉴于我们的研究表明，在寒冷适应条件下，UCP1的体内磷酸化会增强，我们着手调查以下问题：（a）UCP3是否在体内被磷酸化，（b）MDMA给动物施用后，UCP3的体内磷酸化是否导致质子泄漏质子泄漏（即氢离子跨膜流动）增加。我们的数据表明，MDMA处理（而非PBS处理）动物会导致其骨骼肌线粒体中UCP3的体内丝氨酸和酪氨酸磷酸化，而线粒体是在含有磷酸酶抑制剂的条件下分离的，以保留体内磷酸化状态。此外，只有在MDMA处理的动物中分离出的骨骼肌线粒体中（在磷酸酶抑制剂存在下），质子泄漏才会增加，而且这种增加是由于UCP3的磷酸化引起的。MDMA处理对骨骼肌线粒体中UCP3的丰度没有影响。当骨骼肌线粒体在没有磷酸酶抑制剂的条件下分离时，UCP3的磷酸化保持和质子泄漏的增加会丧失。

假设：
我们得出结论，对动物进行UCP3（解偶联蛋白3）处理会增加骨骼肌线粒体的质子泄漏现象，这是通过激活MDMA来实现的，具体通过MDMA在体内经磷酸化进行共价修饰而完成。


前提：
CsrA（碳储存调节因子A）是一种广泛分布的细菌RNA结合蛋白，它调节目标转录本的翻译起始和mRNA稳定性。在γ-变形菌中，CsrA的活性受到包含多个CsrA结合位点的小RNA（sRNA）的竞争性拮抗作用。然而，γ-变形菌以外的细菌中，CsrA的活性则受到一种称为FliW的蛋白的拮抗作用。在本研究中，我们发现枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的FliW不会与CsrA中用于RNA结合的相同残基结合。相反，对FliW拮抗作用产生抗性的CsrA突变体（crw）改变了CsrA上一个先前未归属功能的变构表面的残基。有些crw突变体消除了CsrA-FliW结合，而另一些则没有，表明FliW和RNA的相互作用并不相互排斥。

假设：
我们得出结论，FliW通过一种非竞争性机制来抑制甲状旁腺激素，这种机制与公认的sRNA抑制因子有显著不同。


前提：
枯草芽孢杆菌的全局转录调控因子Spx在基因表达过程的多个层面上受到控制。在未受干扰的生长条件下，通过ATP依赖性蛋白酶ClpXP维持Spx的低浓度。在二硫键应激条件下，Spx的浓度增加，部分原因是ClpXP催化的蛋白水解减少。Larsson及其同事的近期研究（Mol. Microbiol. 66:669-684, 2007）指出yjbH基因的产物在Spx的蛋白水解调控中是必需的。在本研究中，酵母双杂交分析和蛋白质-蛋白质交联显示Spx与YjbH相互作用。实验表明，在含有ClpXP蛋白酶但不含ClpCP蛋白酶的反应混合物中，YjbH蛋白可以增强Spx的蛋白水解作用。缺失1到24个氨基酸残基的YjbH截短形式（YjbH(Δ1-24)）未显示出蛋白酶解增强活性。YjbH对Spx具有特异性，因为它不会加速ClpXP底物绿色荧光蛋白（GFP）-SsrA（一种带有ClpXP识别的C端SsrA标签的GFP衍生物）的蛋白水解。通过电感耦合等离子体原子发射光谱和4-(2-吡啶偶氮)释放实验，发现YjbH含有锌离子。对YjbH(Δ1-24)的锌分析表明，N端的富含组氨酸区域对于至少一个锌离子的配位是不可或缺的。在强氧化剂处理下，N端区域配位的锌原子会迅速从蛋白质中释放出来。

假设：
我们得出结论，YjbH是一种锌配位蛋白，可增强ClpXP催化的Spx蛋白水解作用。


前提：
枯草芽孢杆菌中的外切蛋白酶的生产受到双组分调控系统DegS-DegU的正向调控，此外还受到一些次要因子的影响。degR基因的产物属于次要因子之一，并通过DegS-DegU依赖的方式发挥正向作用。我们发现，无论是mecA还是mecB的中断都会阻止degR的转录，但进一步中断comK可以恢复degR的转录。然而，仅中断comK并不会改变degR的转录。此外，我们还发现mecA突变需要degR转录起始点相对位置-52附近的一个区域来发挥其作用。我们先前已证明degR的转录由替代性σ因子sigmaD驱动。当使用人工构建的sigmaA型启动子指导degR表达时，中断mecA/B并不会显著降低degR的表达，这表明mec突变的负面作用通过sigmaD驱动的转录来实现。研究表明，MecA和MecB对ComK具有负调控作用，mecA/B缺失突变会增强comK的表达。

假设：
根据这些结果，我们得出结论，ComK通过抑制sigmaD驱动的degR转录来负向调控degR的表达，可能是通过与控制区的相互作用实现的。


前提：
费氏弧菌（Vibrio fischeri）中的群体密度依赖性荧光表达由自诱导物N-3-氧代己酰-L-高丝氨酸内酯（自诱导物1 [AI-1]）控制，通过LuxR激活lux操纵子（luxICDABEG，包括假定的自诱导物合成酶[LuxI]和荧光酶）的转录。我们最近鉴定出费氏弧菌中的一个新基因位点ainS，该位点对于合成第二种自诱导物N-辛酰-L-高丝氨酸内酯（AI-2）是必要的，在AI-1缺失的情况下，AI-2可通过LuxR激活lux操纵子的转录。为了明确AI-2的调节作用，构建了一个luxI ainS双突变体；与亲本菌株和luxI突变体不同，luxI ainS突变体没有表现出荧光诱导，且未产生可检测的荧光自诱导物，表明费氏弧菌除了luxI和ainS所指导合成的自诱导物外，不产生其他荧光自诱导物。仅在ainS中有缺陷的突变体显示出加速的荧光诱导。与亲本菌株相比，这表明AI-2在费氏弧菌中起到延迟荧光诱导的作用。与该观察结果一致的是，外源添加AI-2会以剂量依赖方式抑制费氏弧菌和携带lux基因的大肠杆菌中的诱导。AI-2不会单独或在AI-1存在的情况下介导luxR的负反馈调节，并且在luxR受自身或外源启动子控制的情况下，都抑制大肠杆菌中的荧光诱导。增加AI-1的量可以克服AI-2的抑制作用，且等量的荧光激活需要比AI-1多25至45倍的AI-2。

假设：
我们得出结论，AI-1抑制了lux操纵子的转录。


前提：
非致病性且快速生长的分枝杆菌（Mycobacterium smegmatis）目前被用作研究分枝杆菌遗传学的模型生物。M. smegmatis的乙酰酰胺酶是分枝杆菌中一种高度可诱导的酶，它能利用多种酰胺化合物作为唯一的碳和氮源。乙酰酰胺酶操纵子具有复杂的调控机制，涉及三个调控蛋白、四个启动子和三个操纵元件。在我们之前的研究中，发现过量表达AmiA会通过阻断P2启动子对乙酰酰胺酶进行负调控。在本研究中，我们鉴定出一种新的正调控蛋白AmiC，通过蛋白-蛋白相互作用与AmiA相互作用。凝胶迁移率实验表明AmiC蛋白能够抑制AmiA与P2启动子的结合。AmiC与顺式作用元件相互作用，表明其可以结合于操纵子多个调控区域，如P3、OP3和P1启动子/操纵元件。因此，向AmiC复合物中加入诱导剂乙酰胺会破坏复合物，表明AmiC似乎是对酰胺的感受蛋白。同源建模和分子对接研究表明，AmiC属于周质结合蛋白家族的成员，优先与诱导剂结合而不与抑制剂结合。过量表达AmiC会下调负调控因子amiA，并持续上调乙酰酰胺酶的表达。

假设：
基于这些发现，我们得出结论，AmiC对乙酰酰胺酶操纵子起正调控作用。


前提：
组织金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）与肝纤维化的自发性恢复有关。该研究的目的是调查TIMP-1是否通过抑制基质金属蛋白酶（MMP）和激活肝星状细胞（HSC）改变肝纤维化的自发性恢复。在CCl₄诱导的肝纤维化自发性消退后的0、3、7和28天，收集了肝脏靶向TIMP-1转基因（TIMP-Tg）小鼠和对照杂交（Cont）小鼠的肝脏。评估了两组在各个时期的纤维化恢复程度、MMP表达、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性细胞和前胶原-(I)信使RNA（mRNA）的水平。我们还研究了TIMP-1对HSC凋亡的影响。与对照小鼠相比，TIMP-Tg小鼠的自发性肝纤维化恢复明显减弱。对照小鼠的羟脯氨酸含量、α-SMA阳性细胞数量和前胶原-(I)mRNA随着时间的推移迅速减少，而这些指标在TIMP-Tg小鼠中变化不大。TIMP-Tg小鼠中金属蛋白酶-2（MMP-2）的活性形式水平低于对照小鼠。在肝纤维化消退模型中，金属蛋白酶组织抑制剂-1显著减少了非实质细胞凋亡，并且在体外还抑制了与抑制半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）活性相关的HSC凋亡。

假设：
总之，纤维化通过净减少MMP活性和抑制活化肝星状细胞凋亡的共同作用，显著减弱了肝脏TIMP-1的自发性清除。


前提：
肝纤维化是肝脏对慢性肝损伤持续愈合反应的病理生理过程，最终会发展为肝硬化。葛根素是一种来源于传统中药葛根的生物活性异黄酮苷，已被报道具有许多抗炎和抗纤维化特性。然而，其详细机制尚未得到充分研究。本研究旨在探讨葛根素对CCl₄诱导的小鼠肝功能和纤维化过程的影响。C57BL/6J小鼠连续四周腹膜内注射10%橄榄油CCl4(2mL/kg)，同时伴或不伴葛根素给药（100和200mg/kg每日一次腹膜内注射）。改善的血清肝酶水平和减少的组织病理学异常水平数据表明，葛根素可以保护小鼠免受CCl₄诱导的慢性肝损伤。此外，CCl₄诱导的纤维化发展（表现为肝脏中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、胶原蛋白-1、转化生长因子（TGF）-β和结缔组织生长因子（CTGF）表达增加）被葛根素抑制。与这些抑制效应相关的可能机制通过抑制NF-κB信号通路、活性氧（ROS）产生和线粒体功能障碍在体内实现。此外，上述保护性抑制是由于葛根素对PARP-1的下调，因为葛根素可以减少CCl₄损伤肝脏中的PARP-1表达，而PJ34（一种PARP-1抑制剂）则模拟了葛根素的保护作用。

假设：
结论是，葛根素在CCl₄诱导的肝纤维化中发挥了保护作用，可能是通过抑制PARP-1及其后续的NF-κB、ROS产生和线粒体功能障碍的减轻发挥作用。


前提：
聚烯基磷脂酰胆碱（PPC）是从大豆提取的多不饱和磷脂类，能够防止动物模型中肝硬化的发展。其作用机制尚不清楚。基于PPC可能通过减少肝星状细胞增殖而发挥作用的假设，我们研究了PPC及其主要成分二亚油酰磷脂酰胆碱（DLPC）和棕榈酰-亚油酰磷脂酰胆碱（PLPC）对PDGF诱导的星状细胞增殖和细胞内信号转导的影响。正常大鼠肝星状细胞在组织培养中被去除血清法饥饿处理，并在无磷脂或有磷脂的情况下与10 ng/ml PDGF孵育。细胞增殖通过^3H-胸苷掺入来测量。通过激酶测定法确定P44MAPK的活化，并通过电泳迁移率变化实验确定AP-1结合。PPC（200 ng/ml）显著抑制了PDGF诱导的增殖（p < 0.05；ANOVA，n = 3），并拮抗了PDGF诱导的P44MAPK活化和AP-1结合。这一效应被DLPC模拟，但PLPC没有这种效果。DLPC和PLPC均未能阻止PDGF受体的激活。

假设：
我们得出结论，PPC对促分裂素诱导的星状细胞增殖产生了以前未被认识的作用，这种作用可能是通过DLPC介导的。