Premise:
Rhodnius prolixus aggregation inhibitor 1 (RPAI-1) ซึ่งเป็นโปรตีนขนาด 19 กิโลดาลตันที่แยกได้จากต่อมน้ำลายของ R. prolixus ถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วยโครมาโทกราฟีแลกเปลี่ยนแคตไอออนแบบแรงและโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงแบบรีเวิร์สเฟส อาศัยลำดับกรดอะมิโน 49 ตำแหน่งแรกบริเวณปลายเอมีโนของ RPAI-1 ได้สร้างไพรเมอร์เพื่อผลิตโพรบสำหรับคัดกรองไลบรารี cDNA ของต่อมน้ำลาย R. prolixus ฟาจที่มีโคลนความยาวเต็มของ RPAI-1 เข้ารหัสโปรตีนสมบูรณ์ขนาด 155 กรดอะมิโน RPAI-1 แสดงความเป็นเนื้อเดียวกันของลำดับกับ triabin และ pallidipin ซึ่งเป็นลิโพคาลินจาก Triatoma pallidipennis ลำดับ cDNA ถูกโคลนลงในเวกเตอร์แสดงออกใน Escherichia coli ชื่อ Pet17B ให้ได้เปปไทด์ที่ออกฤทธิ์ RPAI-1 ยับยั้งการเกาะกลุ่มของพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือดของมนุษย์ซึ่งถูกกระตุ้นโดยความเข้มข้นต่ำของ ADP, คอลลาเจน, กรดอะราชิโดนิก, อนาล็อกของ thromboxane A(2) (U46619) และโดสต่ำมากของ thrombin และ convulxin ที่นี่เราแสดงว่า ADP เป็นเป้าหมายของ RPAI-1 เนื่องจาก (i) RPAI-1 ยับยั้งการเกิดการเกาะกลุ่มขนาดใหญ่และการหลั่งที่ขึ้นกับ ADP ซึ่งถูกกระตุ้นโดย U46619 โดยไม่กระทบต่อการเพิ่มขึ้นของ Ca(2+) และการเปลี่ยนรูปร่าง; (ii) ADP ทำให้การยับยั้งการเกาะกลุ่มของเกล็ดเลือดที่ถูกกระตุ้นด้วย U46619 โดย RPAI-1 กลับคืน; (iii) การเพิ่มขึ้นของ cAMP ที่เหนี่ยวนำโดย PGE(1) (ซึ่งถูกต่อต้านโดย U46619 ในลักษณะที่ขึ้นกับ ADP) ถูกทำให้กลับคืนโดย RPAI-1; (iv) RPAI-1 ยับยั้งการตอบสนองที่ไกล่เกลี่ยโดย ADP ในความเข้มข้นต่ำของเกล็ดเลือดที่ผ่านการรักษาด้วยอินโดเมทาซิน; และ (v) RPAI-1 จับกับ ADP ตามที่ประเมินด้วยโครมาโทกราฟีโซนขนาดใหญ่ RPAI-1 ไม่ส่งผลต่อการตอบสนองของเกล็ดเลือดที่ไกล่เกลี่ยผ่าน integrin alpha(2)beta(1) หรือ glycoprotein VI
Hypothesis:
เราสรุปว่า RPAI-1 เป็นลิโพคาลินตัวแรกที่มีการบรรยายว่ายับยั้งการเกาะกลุ่มของเกล็ดเลือดด้วยกลไกใหม่ คือการจับกับ ADP


Premise:
เพื่อเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับกลไกที่ฮอร์โมนการเจริญเติบโต (growth hormone; GH) และปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน-1 (insulin-like growth factor-I; IGF-I) ส่งผลต่อการพัฒนาของต่อมน้ำนมโค ได้มีการศึกษาบทบาทที่เป็นไปได้ของ T-box2 (TBX2) และ T-box3 (TBX3) แม้ว่าจะยังไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับการแสดงออกของปัจจัยการถอดรหัสทั้งสองชนิดนี้ในต่อมน้ำนมของโค แต่เป็นที่ทราบว่าทั้ง TBX3 และสมาชิกในตระกูลที่ใกล้เคียงกัน TBX2 จำเป็นต่อการพัฒนาต่อมน้ำนมในมนุษย์และหนู นอกจากนี้ การกลายพันธุ์ของ TBX3 ในมนุษย์และหนูนำไปสู่ ulnar mammary syndrome มีหลักฐานในกระดูกว่า TBX3 จำเป็นต่อการเพิ่มจำนวนเซลล์ และการแสดงออกของมันถูกควบคุมโดย GH ซึ่งเป็นตัวควบคุมที่สำคัญของการพัฒนาต่อมน้ำนมและการผลิตน้ำนม เราตั้งสมมติฐานว่า TBX2 และ TBX3 มีการแสดงออกในต่อมน้ำนมของโค และ GH, IGF-I หรือทั้งสองร่วมกันเพิ่มการแสดงออกของ TBX2 และ TBX3 ในเซลล์เยื่อบุผิวต่อมน้ำนมของโค (MEC) ได้เก็บเนื้อเยื่อต่อมน้ำนมโค เซลล์ MAC-T เซลล์ MEC ปฐมภูมิ และไฟโบรบลาสต์ แล้วตรวจการแสดงออกของ TBX2 และ TBX3 ด้วยวิธี real-time reverse transcription PCR นอกจากนี้ ได้ตรวจการแสดงออกของ TBX2 และ TBX3 ในเซลล์ที่ได้รับ GH 100 หรือ 500 ng/mL หรือ IGF-I 100 หรือ 200 ng/mL เป็นเวลา 24 หรือ 48 ชั่วโมง พบว่าทั้ง TBX2 และ TBX3 มีการแสดงออกในเนื้อเยื่อต่อมน้ำนมโค ที่น่าสังเกตคือ ตรวจพบการแสดงออกของ TBX2 เฉพาะในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของต่อมน้ำนม ขณะที่ TBX3 แสดงออกในทั้ง 3 ชนิดเซลล์ GH ไม่ได้เปลี่ยนแปลงการแสดงออกของ TBX3 ในเซลล์ MAC-T หรือ MEC อย่างไรก็ตาม IGF-I เพิ่มการแสดงออกของ TBX3 ใน MAC-T แต่ไม่เพิ่มใน MEC ปฐมภูมิ เราไม่พบการเปลี่ยนแปลงของการแสดงออกของ TBX2 หรือ TBX3 ในไฟโบรบลาสต์ที่ได้รับ GH และ IGF
Hypothesis:
ดังนั้น เราสรุปว่า (1) TBX2 และ TBX3 มีการแสดงออกในต่อมน้ำนมของโค (2) การแสดงออกของยีนเหล่านี้มีความจำเพาะต่อชนิดของเซลล์ และ (3) Fur กระตุ้นการแสดงออกของ TBX3 ในเซลล์ MAC-T


Premise:
ได้ตรวจสอบอิทธิพลของเฮพารินต่อปฏิกิริยาระหว่างทรอมบินกับตัวยับยั้งตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจนชนิดที่ 1 (PAI-1) โดยเมื่อมี PAI-1 มากกว่าทรอมบิน 50 เท่า ค่าคงที่อัตราการยับยั้งทรอมบินเท่ากับ 458 mol/L-1s-1 ซึ่งเพิ่มขึ้นเป็น 5,000 mol/L-1s-1 ในที่มีเฮพารินชนิดไม่แยกส่วน 25 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร หรือเฮพารินที่มีความชอบต่อแอนติทรอมบินต่ำ จากนั้นได้ตรวจสอบผลของเฮพารินความชอบต่ำด้วยอิเล็กโตรโฟรีซิสในเจลโพลีอะคริลาไมด์ที่มีโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต โดยใช้ความเข้มข้นของสารตั้งต้นเกือบเท่าโมลกัน ทรอมบินและ PAI-1 สร้างคอมเพล็กซ์เชิงสโตอิชิโอเมทรีที่เสถียรในสภาวะไม่มีเฮพาริน ซึ่งไม่แยกตัวหลังจากเติมเฮพารินความชอบต่ำ 25 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ตรงกันข้าม เมื่อเติมเฮพารินความชอบต่ำตั้งแต่เริ่มปฏิกิริยา เริ่มแรกมีการเพิ่มขึ้นของการเกิดคอมเพล็กซ์ PAI-1-ทรอมบิน แต่ตามมาด้วยการถูกตัดด้วยโปรตีเอสอย่างมากของ PAI-1 ที่ยังไม่ทำปฏิกิริยาและของคอมเพล็กซ์ทรอมบิน-PAI-1 ต่อมาได้ตรวจสอบอย่างละเอียดว่าความเข้มข้นสัมพัทธ์ของทรอมบินและ PAI-1 และการมีอยู่ของเฮพารินความชอบต่ำ สามารถมีอิทธิพลต่อผลิตภัณฑ์ของปฏิกิริยาได้หรือไม่ การวิเคราะห์ไซโมกราฟเชิงปริมาณของกิจกรรมตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจนชนิดเนื้อเยื่อและ PAI-1 และการทดสอบกิจกรรมของทรอมบินด้วยซับสเตรตโครโมเจนิก แสดงว่าเฮพารินความชอบต่ำกระตุ้นการทำให้ PAI-1 สูญเสียฤทธิ์โดยทรอมบินในปริมาณที่มีโมลเท่ากัน แต่กระตุ้นการยับยั้งทรอมบินเพียงเล็กน้อย
Hypothesis:
สรุปว่าเฮพารินความชอบต่ำกระตุ้นการยับยั้งทรอมบินเมื่อ PAI-1 มีอยู่ในส่วนเกิน แต่ที่ไม่คาดหมายคือ เฮพารินความชอบต่ำเพิ่มการทำให้ PAI-1 สูญเสียฤทธิ์เมื่อทรอมบินมีปริมาณโมลเท่ากับ PAI-1


Premise:
Distraction osteogenesis (DO) เป็นกระบวนการที่ชักนำให้เกิดการสร้างกระดูกใหม่โดยตรงอันเป็นผลจากการดึงยืดทางกล Tumor necrosis factor-alpha (TNF) เป็นไซโตไคน์ที่สามารถควบคุมการเกิดออสทีโอบลาสต์ได้ ผลโดยตรงของ TNF ต่อการสร้างกระดูกโดยตรงในสัตว์ฟันแทะคาดว่าถูกสื่อผ่านการส่งสัญญาณของตัวรับ TNF ชนิดที่ 1 และ/หรือ 2 (TNFR1/2) เราใช้แบบจำลอง DO ในหนูเมาส์ที่มีลักษณะเฉพาะเพื่อประเมินผลของ 1) การกลายพันธุ์ยีนแบบโฮโมไซกัสนัลของ TNFR ต่อการสร้างกระดูกโดยตรง และ 2) rmTNF ในหนูสายพันธุ์ปกติ (wild type; WT), หนูขาด TNFR1 แบบ (-/-) (R1KO) และหนูขาด TNFR2 แบบ (-/-) (R2KO) การวิเคราะห์ทางรังสีวิทยาและจุลพยาธิวิทยาของการสร้างกระดูกโดยตรงในช่องว่างการยืดกระดูกแสดงว่าไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างหนู WT, R1KO, R2KO หรือหนูขาด TNFR1(-/-) และ TNFR2(-/-) (R1 และ 2KO) หนู R1 และ 2KO มีระดับ TNF ในซีรั่มสูงขึ้นแต่ไม่แสดงการยับยั้งการสร้างกระดูกใหม่ การให้ rmTNF ทางระบบด้วยปั๊มออสโมติกในช่วง DO (10 ไมโครกรัม/กก./วัน) ส่งผลให้ตัวชี้วัดการสร้างกระดูกในช่องว่างลดลงอย่างมีนัยสำคัญในหนู WT และ R2KO แต่ไม่ใช่ในหนู R1KO
Hypothesis:
เราสรุปว่า rmTNF จากภายนอก และ/หรือ TNF ภายในร่างกาย ออกฤทธิ์ยับยั้งการสร้างกระดูกใหม่ระหว่างกระบวนการ DO โดยส่งสัญญาณเป็นหลักผ่าน TNFR1


Premise:
แม้ว่า Gเบต้าแกมมา (Gβγ) เชื่อกันว่าทำหน้าที่เป็นตัวกลางในการกระตุ้นไมโทเจน-แอคติเวเตด โปรตีนไคเนส (MAPK) เพื่อตอบสนองต่อการกระตุ้นตัวรับที่จับกับโปรตีน G (GPCR) แต่กลไกที่เกี่ยวข้องในวิถีนี้ยังไม่ได้ถูกกำหนดอย่างชัดเจน มีข้อเสนอว่า ฟอสโฟอิโนซิไทด์ 3-ไคเนส (PI3K) เป็นตัวกลางระยะแรกในกระบวนการนี้ แต่บทบาทของมันยังคงคลุมเครือ เราพบว่ามิวแทนต์ชนิดโดมินันต์-เนกาทีฟของ p110เบต้า แต่ไม่ใช่ของ p110แกมมา ยับยั้งการกระตุ้น MAPK เพื่อตอบสนองต่อไลโซฟอสฟาติดิกแอซิด (LPA) บทบาทของ p110เบต้าอยู่เหนือลำธารของ Ras เพื่อระบุว่ากิจกรรมไคเนสต่อไขมันหรือไคเนสต่อโปรตีนของ p110เบต้าอย่างใดสำคัญต่อการกระตุ้น Ras เราได้สร้างมิวแทนต์ p110เบต้าที่ขาดกิจกรรมไคเนสต่อไขมันแต่ยังคงมีกิจกรรมไคเนสต่อโปรตีน โปรตีนนี้แสดงฤทธิ์โดมินันต์-เนกาทีฟคล้ายกับมิวแทนต์ชนิดไร้กิจกรรมไคเนส ซึ่งบ่งชี้ว่ากิจกรรมไคเนสต่อไขมันของ p110เบต้ามีส่วนจำเป็นต่อการกระตุ้น Ras สอดคล้องกัน การแสดงออกเกินของฟอสฟาเตสต่อไขมัน PTEN พบว่ายับยั้งการกระตุ้น Ras ที่เหนี่ยวนำโดย LPA อย่างจำเพาะ นอกจากนี้ เรายังสังเกตว่าโปรตีนอะแดปเตอร์ Gab1 ซึ่งมีโดเมน PH และเกี่ยวข้องกับการกระตุ้น p110เบต้าระหว่างการกระตุ้นด้วย LPA ก็มีส่วนในวิถีนี้ที่ปลายน้ำของ p110เบต้าเช่นกัน จริงอยู่ ทั้งการกระจายตัวใหม่บนเยื่อหุ้มเซลล์และการฟอสโฟรีเลชันของ Gab1 ลดลงเมื่อมีตัวยับยั้ง PI3K หรือ p110เบต้าชนิดโดมินันต์-เนกาทีฟ ที่ปลายน้ำของ Gab1 พบว่าฟอสฟาเตสไทโรซีน SHP2 เป็นตัวกลางการกระตุ้น Ras เพื่อตอบสนองต่อ LPA และถูกระดมผ่านทาง PI3K และ Gab1 เนื่องจากการทรานส์เฟกต์ Gab1 มิวแทนต์ที่บกพร่องการจับกับ SHP2 ยับยั้งการกระตุ้น Ras โดยไม่รบกวนการกระตุ้น PI3K
Hypothesis:
เราสรุปว่ากิจกรรมไคเนสต่อไขมันของ p110เบต้าเป็นสิ่งจำเป็นต่อการกระตุ้น Ras ที่เหนี่ยวนำโดย LPA และว่า PI3K และ Gab1 มีส่วนเกี่ยวข้องในวิถีนี้


Premise:
บทบาทของ FSH ในกระบวนการสร้างสเปิร์มยังไม่ชัดเจน เนื่องจากมีรายงานว่าเทสโทสเทอโรนเพียงอย่างเดียวก็เพียงพอในหนูที่ขาดโกนาโดโทรปิน งานวิจัยนี้ตรวจสอบผลของ FSH ชนิดรีคอมบิแนนท์ต่อการฟื้นฟูการสร้างสเปิร์มหลังการถอนโกนาโดโทรปินด้วยการทำภูมิคุ้มกันต่อ GnRH หนูสายพันธุ์ Sprague-Dawley ตัวเต็มวัยได้รับ GnRH อิมมูโนเจน (100 ไมโครกรัม, ฉีดใต้ผิวหนัง, ทุก 4 สัปดาห์) เพื่อชักนำภาวะขาดโกนาโดโทรปิน โดยเกิดการเสื่อมถอยของการสร้างสเปิร์มอย่างรุนแรงภายใน 12 สัปดาห์ จากนั้นให้ FSH มนุษย์ชนิดรีคอมบิแนนท์ (10 หรือ 50 IU/กก., ฉีดใต้ผิวหนัง, ทุกวัน) เป็นเวลา 7, 14 และ 21 วัน โดยรวมข้อมูลจากทั้งสองขนาดยาในการวิเคราะห์ อัณฑะถูกตรึงด้วยวิธีเพอร์ฟิวชัน และจำนวนเซลล์สืบพันธุ์ถูกหาปริมาณด้วยเทคนิค optical disector หลังให้ FSH 7 วัน น้ำหนักอัณฑะเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ 43% (P < 0.01) และไม่เพิ่มขึ้นต่อที่วันที่ 14 และ 21 การทำภูมิคุ้มกัน GnRH ลดจำนวนเซลล์สืบพันธุ์อย่างรุนแรง ซึ่งต่อมาถูกฟื้นกลับอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.05) ในเซลล์ทุกชนิด ยกเว้นสเปอร์มาทิดระยะยืดตัว ภายใน 7 วันของ FSH; สเปอร์มาโทโกเนียชนิด A (45%-->61% ของค่าควบคุม), สเปอร์มาโทโกเนียชนิด B/สเปอร์มาโตไซต์ระยะพรีเลพโททีน (46%-->65%), สเปอร์มาโตไซต์ระยะเลพโททีน/ไซโกทีน (39%-->55%), สเปอร์มาโตไซต์ระยะแพคไคทีนในระยะที่ I–VIII (11%-->30% ของค่าควบคุม) และ IX–XIV (4.3%-->22% ของค่าควบคุม), และสเปอร์มาทิดแบบกลมในระยะที่ I–VIII (1.4%-->4.4% ของค่าควบคุม) การให้ FSH ต่อเนื่องไม่เพิ่มจำนวนสเปอร์มาโทโกเนียชนิด A หรือสเปอร์มาโตไซต์ระยะแพคไคทีนเพิ่มเติม ในขณะที่สเปอร์มาทิดแบบกลมเพิ่มขึ้นสูงสุดเป็น 12.8% ของค่าควบคุม ในทุกช่วง FSH ไม่ได้เพิ่มจำนวนสเปอร์มาทิดระยะยืดตัวให้เกิน 1% ของระดับควบคุม การแทรกตัวของโบรโมดีออกซียูริดีน (BrdU) เข้าสู่นิวเคลียสของสเปอร์มาโทโกเนียและสเปอร์มาโตไซต์ระยะแรกไม่เปลี่ยนแปลงหลังการทำภูมิคุ้มกัน GnRH หรือการให้ FSH จำนวนเซลล์เซอร์โทลีไม่เปลี่ยนแปลงด้วยการรักษาใด ๆ; อย่างไรก็ตาม ปริมาตรนิวเคลียสของเซลล์เซอร์โทลีลดลงจากค่าควบคุมอย่างมีนัยสำคัญโดยการทำภูมิคุ้มกัน GnRH (142 ± 9 เทียบกับ 455 ± 22 ไมโครเมตร^3; P < 0.01) และเพิ่มขึ้นหลังการให้ FSH 7 และ 14 วันเป็น 212 ± 10 และ 259 ± 24 ไมโครเมตร^3 ตามลำดับ การรักษาด้วย FSH ฟื้นระดับอินฮิบินในซีรัมกลับสู่ปกติ แต่ไม่เพิ่มระดับแอนโดรเจนในซีรัมหรือในอัณฑะ
Hypothesis:
เราสรุปว่า FSH ชนิดรีคอมบิแนนท์สามารถฟื้นฟูการสร้างสเปิร์มในหนูที่ขาดโกนาโดโทรปินได้บางส่วน โดยเพิ่มจำนวนสเปอร์มาโทโกเนียและส่งเสริมขั้นตอนการเจริญถัดไปจนถึงระยะสเปอร์มาทิดแบบกลม


Premise:
ความสามารถของ human follicular fluid (hFF) ที่เก็บจากสตรีที่เข้ารับการทำ IVF ในการกระตุ้นให้เกิด acrosome reaction (AR) ในสเปิร์มของมนุษย์ ได้รับการรายงานโดยห้องปฏิบัติการหลายแห่ง อย่างไรก็ตาม ธรรมชาติของปัจจัยที่ออกฤทธิ์ใน hFF และความหมายเชิงสรีรวิทยาของการเหนี่ยวนำ AR นั้นยังเป็นที่ถกเถียงอย่างมาก เราได้ดำเนินการทำให้ hFF บริสุทธิ์แบบสามขั้นตอน และคัดกรองแฟรกชันทั้งหมดเพื่อหากิจกรรมการเหนี่ยวนำ AR พบว่ากิจกรรม AR เกี่ยวข้องกับแฟรกชันโปรตีนที่มี M(r) > 180 kD ซึ่งเมื่อวิเคราะห์ต่อด้วย PAGE พบว่าประกอบด้วย subunits ที่มี apparent M(r) 50,000 และ 29,000 N-terminal sequences ของแถบเหล่านี้แสดง homology 100% กับ heavy และ light chains ของ human IgG Polyclonal antibody ที่สร้างขึ้นต่อโปรตีนบริสุทธิ์ และ anti-human IgG ต่างก็สามารถยับยั้งกิจกรรมการเหนี่ยวนำ acrosome reaction ของ crude hFF ได้ อย่างไรก็ตาม ทั้ง normal human serum และ purified human IgG preparation ไม่สามารถเลียนแบบกิจกรรมการเหนี่ยวนำ AR ของ hFF ได้

Hypothesis:
เราสรุปว่าการเหนี่ยวนำ AR ใน hFF ถูก mediated โดย human IgG


Premise:
ภาวะ hyperinsulinemia ช่วยเพิ่มความสามารถของขนาดยาของ human chorionic gonadotropin (hCG) ที่ต่ำกว่าขนาดกระตุ้นการตกไข่ในการชักนำให้เกิดถุงน้ำที่รูขุมรังไข่ในหนู การจะกำหนดส่วนร่วมสัมพัทธ์ของฮอร์โมนเหล่านี้ต่อการเกิดถุงน้ำรังไข่ หนูเพศเมียโตเต็มวัยได้รับการรักษาอย่างใดอย่างหนึ่งดังนี้ (1) สารพาหะเพียงอย่างเดียว (กลุ่มควบคุม) (2) อาหารไขมันสูง (HFD) เพื่อควบคุมผลของการเพิ่มน้ำหนัก (3) hCG 1.5 ถึง 6 IU วันละสองครั้ง ร่วมกับ insulin (Ins) 6 U/วัน หรือ (4) insulin 1.5 ถึง 9 U/วัน ร่วมกับ hCG 3 IU วันละสองครั้ง ในวันที่ 23 ของการรักษาในร่างกาย กลุ่มที่ได้รับ insulin อย่างน้อย 6 U/วันทุกกลุ่มแสดงน้ำหนักตัวเพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับหนูกลุ่มควบคุมและ HFD (P ≤ .05) ในวันดังกล่าวไม่มีหนูกลุ่มควบคุม และมีเพียงหนู HFD 1 ตัวที่แสดงถุงน้ำรังไข่ ระดับ estrone (E1) และ androstenedione (A4) ในพลาสมาสูงขึ้นในหนู HFD ที่มีรูขุมรังไข่ที่ไม่เป็นถุงน้ำเมื่อเทียบกับหนูกลุ่มควบคุม (P ≤ .05) ระหว่าง 64% ถึง 80% ของหนูที่ได้รับ insulin 6 U/วัน ร่วมกับการฉีด hCG 1.5 ถึง 6 IU วันละสองครั้ง มีถุงน้ำรังไข่ในวันที่ 23 ความเข้มข้นของ estradiol (E2) ในพลาสมาของกลุ่มที่ได้รับการรักษาเหล่านี้ใกล้เคียงกับของหนูกลุ่มควบคุม ในบรรดาสัตว์ที่ได้รับฮอร์โมน เฉพาะสัตว์ที่มีถุงน้ำรังไข่เพื่อตอบสนองต่อการฉีด hCG 4.5 หรือ 6 IU วันละสองครั้ง ร่วมกับ insulin 6 U/วัน เท่านั้นที่มีระดับ A4 และ/หรือ testosterone ในพลาสมาสูงกว่ากลุ่มควบคุม ตรงกันข้าม ระดับ E1 ในพลาสมาสูงขึ้นในวันที่ 23 สำหรับสัตว์ที่มีถุงน้ำรังไข่เพื่อตอบสนองต่อขนาดยาที่เพิ่มขึ้นของ hCG ร่วมกับขนาดยาคงที่ของ insulin 6 U/วัน ระหว่าง 70% ถึง 80% ของหนูที่ได้รับ hCG 3 IU วันละสองครั้ง ร่วมกับ insulin ขนาดวันละ 1.5 ถึง 6 U มีถุงน้ำรังไข่ในวันที่ 23 ตรงกันอย่างชัดเจน มีเพียง 25% ของหนูที่ได้รับ hCG ขนาดนี้ร่วมกับ insulin 9 U/วันที่พัฒนารูขุมรังไข่เป็นถุงน้ำ ในบรรดา steroids ในพลาสมาที่ตรวจวัด พบว่าเฉพาะ E1 และ A4 เท่านั้นที่สูงขึ้นในกลุ่มการรักษาเหล่านี้เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม แต่การเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นของ steroids ในพลาสมาไม่มีความสัมพันธ์กับขนาดของ insulin
Hypothesis:
จากข้อมูลเหล่านี้เราสรุปได้ว่า แม้กลไกจะยังไม่กระจ่าง ภาวะ hyperinsulinemia อย่างรุนแรงมีความสามารถที่ขัดกับความคาดหมายในการลดทอนการชักนำ ACR โดย hCG ในสัตว์บางตัว


Premise:
การให้ cortisol ทางหลอดเลือดดำแบบหยดต่อเนื่องทำให้การตอบสนองของ luteinizing hormone (LH) ต่อการฉีด GnRH แบบคงที่ทุกชั่วโมงลดลงในแกะตัวเมียที่ถูกผ่าตัดตัดรังไข่ออกซึ่งได้รับ estradiol ในช่วงนอกฤดูสืบพันธุ์ (pituitary-clamp model) ตรงกันข้าม cortisol ไม่ส่งผลต่อการตอบสนองต่อการฉีด GnRH แบบคงที่ทุก 2 ชั่วโมงในแกะตัวเมียที่ผ่าตัดตัดรังไข่ออกและตัดการเชื่อมต่อ hypothalamo-pituitary disconnected ในช่วงฤดูสืบพันธุ์ เพื่อทำความเข้าใจผลที่แตกต่างกันในแบบจำลองสัตว์เหล่านี้และเพื่อตรวจสอบว่า cortisol สามารถออกฤทธิ์โดยตรงที่ต่อมใต้สมองเพื่อกดการตอบสนองต่อ GnRH ได้หรือไม่ เราได้ศึกษาความสำคัญของความถี่ของสิ่งเร้า GnRH การมีอยู่ของ estradiol และช่วงของวัฏจักรฤดูกาลสืบพันธุ์ตามรอบปี ในการทดลองที่ 1 ซึ่งทำในช่วงนอกฤดูสืบพันธุ์ แกะตัวเมียที่ผ่าตัดตัดรังไข่ออกได้รับ estradiol และได้ฟื้นการหลั่ง LH แบบเป็นจังหวะด้วยการฉีด GnRH ทางหลอดเลือดดำทุก 1 ชั่วโมงหรือทุก 2 ชั่วโมง ทั้งในภาวะที่มีหรือไม่มี cortisol จากภายนอก การทดลองที่ 2 และ 3 ทำในแกะตัวเมียที่ผ่าตัดตัดรังไข่ออกและตัดการเชื่อมต่อ hypothalamo-pituitary disconnected ซึ่งได้รับการฉีด GnRH ทางหลอดเลือดดำทุก 2 ชั่วโมง การทดลองที่ 2 ทำในช่วงนอกฤดูสืบพันธุ์ และให้สารน้ำเกลือหรือ cortisol แบบหยดต่อเนื่องเป็นเวลา 30 ชั่วโมง โดยใช้การออกแบบไขว้ การทดลองที่ 3 ทำทั้งในช่วงนอกฤดูและฤดูสืบพันธุ์ และให้สารน้ำเกลือหรือ cortisol แบบหยดต่อเนื่องเป็นเวลา 30 ชั่วโมง ในภาวะที่ไม่มีและมี estradiol โดยใช้การออกแบบไขว้ เก็บตัวอย่างจากสัตว์ทุกตัวเพื่อตรวจวัด LH ในพลาสมา LH pulse amplitude ลดลงโดย cortisol ในแบบจำลอง pituitary clamp โดยไม่มีความแตกต่างระหว่างโหมดพัลส์ GnRH ทุก 1 ชั่วโมงและทุก 2 ชั่วโมง เมื่อไม่มี estradiol cortisol ไม่มีผลต่อ LH pulse amplitude ในแกะตัวเมียที่ผ่าตัดตัดรังไข่ออกและตัดการเชื่อมต่อ hypothalamo-pituitary disconnected ซึ่งได้รับการทดแทน GnRH ไม่ว่าในฤดูกาลใด LH pulse amplitude ลดลงทั้งสองฤดูกาลในการทดลองที่ 3 เมื่อให้ cortisol แบบหยดต่อเนื่องระหว่างการรักษาด้วย estradiol
Hypothesis:
เราสรุปว่า ความสามารถของ mg/kg ในการลดการหลั่ง LH ไม่ขึ้นอยู่กับความถี่ของสิ่งเร้า GnRH และ estradiol ทำให้ mg/kg สามารถออกฤทธิ์โดยตรงที่ต่อมใต้สมองของแกะตัวเมียที่ผ่าตัดตัดรังไข่ออกและตัดการเชื่อมต่อ hypothalamo-pituitary disconnected เพื่อกดการตอบสนองต่อ GnRH ผลนี้เกิดขึ้นทั้งในฤดูสืบพันธุ์และนอกฤดูสืบพันธุ์


Premise:
ในการทดลองที่ 1 ได้ฉีด PMSG ให้กับหนูวัยก่อนเจริญพันธุ์อายุ 26 วันเพื่อกระตุ้นการตกไข่ ในวันที่ 2 (สองวันถัดมา เทียบเท่ากับวันโปรเอสทรัส) เวลา 08:00 น. ให้ไฮดรอกซีฟลูทาไมด์ 5 มก. หรือสารพาหะ และเวลา 12:00 น. ให้โปรเจสเตอโรน 2 มก. หรือเทสโทสเทอโรน 2 มก. หรือสารพาหะ สัตว์ถูกสังเวยเวลา 18:00 น. ของวันที่ 2 หรือเวลา 09:00 น. ของวันที่ 3 โปรเจสเตอโรน แต่ไม่ใช่เทสโทสเทอโรน สามารถฟื้นคืนการพุ่งสูงของ LH ก่อนการตกไข่และการตกไข่ในหนูที่ได้รับไฮดรอกซีฟลูทาไมด์ ในการทดลองที่ 2 ฉีดโปรเจสเตอโรนหรือเทสโทสเทอโรนขนาด 2 มก. ระหว่าง 10:30–11:00 น. ของวันที่ 2 เพื่อเร่งให้เกิดการพุ่งสูงของ LH ในระยะโปรเอสทรัสและการตกไข่ในหนูก่อนวัยเจริญพันธุ์ที่ไพรมด้วย PMSG การฉีดไฮดรอกซีฟลูทาไมด์ยกเลิกความสามารถของโปรเจสเตอโรนในการเร่งการพุ่งสูงของ LH หรือการตกไข่ เทสโทสเทอโรนไม่ก่อให้เกิดการเร่งของการพุ่งสูงของ LH หรือการตกไข่ ในการทดลองที่ 3 หนูก่อนวัยเจริญพันธุ์ที่ตัดรังไข่ออกและฝังเอสตราดิออล-17 เบตา มีความเข้มข้นของ LH ในซีรัมเวลา 18:00 น. สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01) เมื่อเทียบกับเวลา 10:00 น. การฉีดโปรเจสเตอโรนให้สัตว์เหล่านี้ทำให้ความเข้มข้นของ LH ในซีรัมเวลา 18:00 น. สูงขึ้นเพิ่มเติมในลักษณะขึ้นกับขนาดยา โดยค่าสูงสุดเกิดจากโปรเจสเตอโรน 1 มก. การให้ไฮดรอกซีฟลูทาไมด์ลดค่าของ LH ในซีรัมลงอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.003) ในหนูที่ได้รับโปรเจสเตอโรน 0–1 มก. แต่โปรเจสเตอโรน 2 มก. สามารถเอาชนะแรงยับยั้งนี้ได้
Hypothesis:
สรุปได้ว่า ไฮดรอกซีฟลูทาไมด์ แต่ไม่ใช่เทสโทสเทอโรน สามารถย้อนกลับผลของโปรเจสเตอโรนต่อการพุ่งสูงของ LH ก่อนการตกไข่และการตกไข่ได้


Premise:
การศึกษาแบบผู้ป่วย-ควบคุมฉบับนี้ได้สำรวจปฏิสัมพันธ์ระหว่างกรดไขมันไม่อิ่มตัวหลายตำแหน่งสายยาวชนิด n-3 ที่ได้จากทะเล (n-3 LC PUFAs) กับกรดยูริก (UA) ต่อการเผาผลาญกลูโคสและความเสี่ยงของโรคเบาหวานชนิดที่ 2 (T2DM) โดยรวมอาสาสมัครสุขภาพดี 211 คนในกลุ่มควบคุม และผู้ป่วย T2DM 268 คนในกลุ่มผู้ป่วย ตรวจวัดกรดไขมันในฟอสโฟลิพิดของพลาสมา (PL) และพารามิเตอร์ทางชีวเคมีด้วยวิธีมาตรฐาน ระดับ C22:6n-3 ใน PL ของพลาสมาต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มผู้ป่วยเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม และมีความสัมพันธ์เชิงลบกับระดับกลูโคสขณะอดอาหาร (r = -0.177, p < 0.001) ระดับ C22:6n-3 ใน PL ของพลาสมาที่สูงกว่าสัมพันธ์กับความเสี่ยงต่อ T2DM ที่ต่ำกว่า โดยมีค่า OR เท่ากับ 0.32 (ช่วงความเชื่อมั่น 95% (CI) 0.12 ถึง 0.80; p = 0.016) ต่อการเพิ่มขึ้นหนึ่งหน่วยของ C22:6n-3 ระดับ UA ต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มผู้ป่วยเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม UA มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับกลูโคสขณะอดอาหารในอาสาสมัครสุขภาพดี แต่ความสัมพันธ์นี้กลับเป็นเชิงลบในผู้ป่วย T2DM พบปฏิสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญระหว่าง C22:6n-3 กับ UA ต่อระดับกลูโคสขณะอดอาหาร (p สำหรับปฏิสัมพันธ์ = 0.005): ผลลดระดับของ C22:6n-3 มีนัยสำคัญเฉพาะในบุคคลที่มีระดับ UA ต่ำกว่า
Hypothesis:
โดยสรุป, การเผาผลาญกลูโคส :6n-3 มีปฏิสัมพันธ์กับ UA เพื่อปรับ C22


Premise:
เราได้รายงานไว้ก่อนหน้านี้ว่า endogenous ATP-binding cassette transporter (ABC)A7 มีความเกี่ยวข้องอย่างมากกับหน้าที่การ phagocytosis มากกว่ากับการสร้าง high-density lipoprotein (HDL) และอยู่ภายใต้การควบคุมของ sterol-regulatory element binding protein (SREBP)2 พบว่ากิจกรรมการ phagocytosis เพิ่มขึ้นมากกว่าสองเท่าโดย apolipoprotein (apo)A-I และ apoA-II ในเซลล์ J774 และ mouse peritoneal macrophages ดังนั้นเราจึงตรวจสอบพื้นฐานระดับโมเลกุลของปฏิกิริยานี้ที่สัมพันธ์กับหน้าที่ของ ABCA7 เช่นเดียวกับ ABCA1, ABCA7 ถูกย่อยสลายน่าจะโดย calpain และ apoA-I กับ apoA-II ทำให้ ABCA7 คงตัวต่อการสลาย การทดลอง cell surface biotinylation แสดงว่า endogenous ABCA7 ตามธรรมชาติมักอยู่ที่ผิวเซลล์เป็นส่วนใหญ่ และ apolipoproteins เพิ่มปริมาณ ABCA7 บนผิวเซลล์ การเพิ่มของ phagocytosis โดย apolipoproteins ยังคงพบในเซลล์ J774 ที่ได้รับ ABCA1 siRNA และใน peritoneal macrophages จากหนู ABCA1-knockout แต่หายไปในเซลล์ J774 ที่ได้รับ ABCA7 siRNA และใน peritoneal macrophages จากหนู ABCA7-knockout การ phagocytosis ลดลงในเซลล์ในโพรงช่องท้องของหนู ABCA7-knockout เมื่อเทียบกับ wild-type control
Hypothesis:
ดังนั้นเราจึงสรุปว่า extracellular helical apolipoproteins ช่วยเพิ่ม ABCA7-associated phagocytosis โดยทำให้ ABCA7 คงตัว


Premise:
Lipoproteins มีบทบาทสำคัญต่อการเกิดโรค metabolic และ cardiovascular diseases โดยมีผลต่อเนื้อเยื่อเป้าหมายตั้งแต่เชิงปกป้องไปจนถึงเชิงทำลาย พบว่า VLDL กระตุ้นการสะสมไขมันที่เป็นพิษต่อเซลล์และก่อผลเสียหลายประการต่อ cardiomyocytes มีข้อเสนอว่า lipotoxicity และ endoplasmic reticulum (ER) stress เป็นตัวกลางของผลกระทบที่เป็นอันตรายของโรค metabolic ต่อระบบหัวใจและหลอดเลือด เราให้ cardiomyocytes สัมผัสกับ lipoproteins เพื่อประเมินความสามารถในการปรับตัวต่อความเครียดทาง metabolic ที่เกิดจากการอดอาหารและภาวะ lipoproteins ส่วนเกิน และเพื่อประเมินผลของ lipoproteins และการสะสมไขมันต่อ ER stress VLDL ย้อนกลับความเครียดทาง metabolic ที่เกิดจากการอดอาหารได้ ในขณะที่ HDL ไม่ได้ VLDL กระตุ้นการสะสมไขมันใน cardiomyocytes แบบขึ้นกับขนาดยา อย่างไรก็ตาม ไม่ได้ทำให้ cell viability ลดลงหรือกระตุ้น ER stress ยิ่งไปกว่านั้น การให้ VLDL หรือ HDL ล่วงหน้าลด ER stress ใน cardiomyocytes ที่ถูกกระตุ้นด้วย tunicamycin และ palmitic acid โดยวัดจากการแสดงออกของ ER stress markers แม้ในภาวะที่มีการสะสมไขมันเพิ่มขึ้น VLDL และ HDL กระตุ้นการทำงานของ pro-survival ERK1/2 ใน cardiomyocytes อย่างไรก็ตาม การกระตุ้นนี้ไม่เกี่ยวข้องกับการป้องกัน ER stress นอกจากนี้ เรายังพบว่า LDLR และ VLDLR ถูกควบคุมแตกต่างกันโดย lipoproteins และ cellular stress โดยที่ lipoproteins กระตุ้นโปรตีน VLDLR โดยเป็นอิสระจากระดับการสะสมไขมัน
Hypothesis:
สรุปว่า ER stress ไม่ได้เป็นอันตรายต่อ cardiomyocytes เสมอไป และอาจมีผลในเชิงบวก โดยช่วยให้เซลล์อยู่รอดได้ภายใต้การอดอาหาร และลดทอนผลกระทบที่เป็นอันตรายจาก VLDL


Premise:
กรดน้ำดีที่เป็นพิษต่อตับ glycochenodeoxycholate (GCDC) ปรับการตายของเซลล์เฮปาโตไซต์ผ่านการกระตุ้น JNK, Akt และ Erk กรดน้ำดีที่ไม่เป็นพิษต่อตับ taurocholate กระตุ้น Akt และ Erk ผ่านตัวรับ sphingosine-1-phosphate ชนิดที่ 2 (S1PR2) บทบาทของ S1PR2 ใน apoptosis ที่เหนี่ยวนำโดย GCDC และการกระตุ้นไคเนสยังไม่ทราบ มีการศึกษาในเฮปาโตไซต์หนู เซลล์ HUH7 และเซลล์ HUH7 ที่ถูกทรานส์เฟกอย่างเสถียรด้วย Ntcp ของหนู (HUH7-Ntcp) เซลล์ได้รับการรักษาด้วย GCDC และติดตาม apoptosis ทางสัณฐานวิทยาโดยการย้อม Hoechst และทางชีวเคมีโดยอิมมูโนบลอตเพื่อตรวจชิ้นส่วนที่ถูกตัดแล้วของ caspase 3 ที่มีฤทธิ์ การกระตุ้นไคเนสประเมินด้วยอิมมูโนบลอตโดยใช้แอนติบอดีจำเพาะต่อฟอสโฟรีเลต JTE-013 ซึ่งเป็นตัวยับยั้ง S1PR2 ลดหลักฐานทางสัณฐานของ apoptosis ที่เหนี่ยวนำโดย GCDC ลงอย่างมีนัยสำคัญ และป้องกันการตัดของ caspase 3 ในเฮปาโตไซต์หนูและเซลล์ HUH7-Ntcp ในเฮปาโตไซต์ JTE-013 กดการฟอสโฟรีเลชันของ JNK เล็กน้อย เพิ่มการฟอสโฟรีเลชันของ Akt และไม่มีผลต่อ Erk ที่เหนี่ยวนำโดย GCDC ตามลำดับ ผลลัพธ์ที่คล้ายกันพบในเซลล์ HUH7-Ntcp ยกเว้นว่ากดการฟอสโฟรีเลชันของ JNK และ Erk เล็กน้อย การ knockdown ของ S1PR2 ใน HUH7-Ntcp เพิ่มการฟอสโฟรีเลชันของ Akt ยับยั้ง JNK และไม่มีผลต่อ Erk GCDC ไม่สามารถเหนี่ยวนำให้เกิด apoptosis หรือการกระตุ้นไคเนสในเซลล์ HUH7
Hypothesis:
โดยสรุป การยับยั้ง SIPR2 ช่วยลด apoptosis ที่เหนี่ยวนำโดย GCDC และส่งเสริมและเพิ่มการฟอสโฟรีเลชันของ JNK และ Akt ที่เหนี่ยวนำโดย GCDC ตามลำดับ


Premise:
การสะสมของอะไมลอยด์ เบตา-เปปไทด์ (A เบตา) ในสมองเป็นลักษณะทางพยาธิวิทยาของโรคอัลไซเมอร์ เนื่องจากการกำจัด A เบตาที่บกพร่องอาจเกี่ยวข้องกับโรคนี้ เราจึงศึกษาการย่อยสลายแบบโปรตีโอไลติกของ A เบตาสังเคราะห์ (เปปไทด์ยาว 40 เรซิดิว) ในการเพาะเลี้ยงเซลล์เกลีย และจำแนกโปรตีเอสที่เกี่ยวข้อง ในขณะที่แอสโทรไซต์ของหนูมีความสามารถในการย่อยสลายต่ำมาก เซลล์ไมโครเกลียของหนูที่เพาะเลี้ยงสามารถตัด A เบตาได้ กิจกรรมของไมโครเกลียเพิ่มขึ้นอย่างมากเมื่อกระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ และเพิ่มขึ้นน้อยกว่าด้วยฟอร์บอลเอสเทอร์ กิจกรรมส่วนใหญ่ในการย่อยสลาย A เบตาถูกปลดปล่อยออกสู่ตัวกลางเพาะเลี้ยง โดยการใช้ตัวยับยั้งแบบจำเพาะ เราจำแนกโปรตีเอสว่าเป็นเมทัลโลโปรตีเอสที่มีขนาดประมาณ 200 กิโลดาลตัน ซึ่งแตกต่างจากนิวทรัลเอนโดเปปทิเดส (เอนไซม์สลายนิวโรเปปไทด์), เมทริกซ์เมทัลโลโปรตีเอส หรืออีลาสเทสของมาโครฟาจ กิจกรรมของมันถูกลดทอนได้อย่างมีประสิทธิภาพด้วยตัวยับยั้งสังกะสี-เมทัลโลโปรตีเอสที่มีโครงสร้างบนพื้นฐานของไฮดรอกซามิกแอซิดจำนวนสี่ชนิด ซึ่งเคยแสดงว่ายับยั้งซีครีเทสของโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ (disintegrins)
Hypothesis:
เราสรุปว่า A เบตาถูกย่อยสลายโดยเซลล์ไมโครเกลียในหลอดทดลองโดยเมทัลโลโปรตีเอสชนิดใหม่


Premise:
สารต้านตัวรับ 5-HT2 แบบจำเพาะ ritanserin เป็นอนาล็อกของยาลดความดันโลหิต ketanserin โดยการประเมินผลลดความดันโลหิตของ ritanserin วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือเพื่ออธิบายกลไกการออกฤทธิ์ของ ketanserin ทางอ้อม ผู้ป่วยความดันโลหิตสูงชนิดปฐมภูมิ 13 รายได้รับการรักษาด้วยยาหลอกและ ritanserin ขนาด 10 mg วันละ 2 ครั้ง ในการศึกษาแบบปกปิดสองฝ่าย ชนิดไขว้ (แต่ละช่วง 4 สัปดาห์) เมื่อสิ้นสุดช่วงการรักษา ได้ประเมินความดันโลหิตร่วมกับความเข้มข้นของ ritanserin ในพลาสมาเป็นเวลา 24 ชั่วโมง แม้ว่า ritanserin จะมีความเข้มข้นในพลาสมาที่สภาวะคงตัวและค่าจุดสูงสุดสูง แต่ตัวยานี้ไม่ทำให้ความดันโลหิตลดลงเมื่อเทียบกับยาหลอก
Hypothesis:
เนื่องจากการปิดกั้นตัวรับ 4alpha-PDBu แบบจำเพาะเรื้อรังด้วย ritanserin ไม่ได้ทำให้ความดันโลหิตลดลง จึงสรุปได้ว่าคุณสมบัติการปิดกั้น 4alpha-PDBu ของ ketanserin ไม่สามารถอธิบายผลลดความดันโลหิตของ ketanserin ได้โดยลำพัง


Premise:
โรคไตเรื้อรัง (CKD) มีความสัมพันธ์กับการลดการสร้างไนตริกออกไซด์ (NO) ของไตและการเพิ่มขึ้นของระดับเมทิลอาร์จินีนในพลาสมา อาร์จินีนที่ถูกเมทิลเลตที่หมู่กัวนิดิโนตามธรรมชาติ ได้แก่ N-โมโนเมทิล-L-อาร์จินีน (L-NMMA) และอสมมาตรไดเมทิล-L-อาร์จินีน (ADMA) สามารถยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์ไนตริกออกไซด์ซินเทส เราตั้งสมมติฐานว่า ADMA และ L-NMMA ทำให้ความสมบูรณ์ของกำแพงการกรองของโกลเมอรูลัสบกพร่องผ่านการพร่องของ NO เราได้ศึกษาผลของ ADMA ต่อการซึมผ่านของอัลบูมิน (P(alb)) ในโกลเมอรูลัสที่แยกเดี่ยว และตรวจสอบว่าผลนี้เกี่ยวข้องกับกลไกที่ขึ้นกับ NO และซูเปอร์ออกไซด์ (O(2)(*-)) หรือไม่ ADMA ที่ความเข้มข้นซึ่งพบในกระแสเลือดของผู้ป่วย CKD ทำให้ cGMP ลดลงและเพิ่ม P(alb) ในลักษณะขึ้นกับขนาดยา การเพิ่มขึ้นของ P(alb) ที่คล้ายกันเกิดจาก L-NMMA แต่ต้องใช้ความเข้มข้นสูงกว่า ADMA ประมาณสองลำดับขนาด แหล่งให้ NO อย่าง DETA-NONOate หรือแอนะล็อกของ cGMP สามารถลบล้างผลของ ADMA ต่อ P(alb) ได้ สารเลียนแบบ SOD ชื่อเทมพอล (tempol) หรือสารยับยั้งเอนไซม์ NAD(P)H ออกซิเดสชื่ออะโพไซนิน (apocynin) ก็ป้องกันการเพิ่มขึ้นของ P(alb) ที่เหนี่ยวนำโดย ADMA ได้เช่นกัน ตัวกระตุ้นเอนไซม์ soluble guanylyl cyclase (sGC) ที่ไม่ขึ้นกับ NO คือ BAY 41-2272 ที่ความเข้มข้นซึ่งเพิ่มการสร้าง cGMP ในโกลเมอรูลัส สามารถบรรเทาการเพิ่มขึ้นของ P(alb) ที่เหนี่ยวนำโดย ADMA ได้ ยิ่งไปกว่านั้น การทำให้ sGC เสียหน้าที่ด้วยตัวยับยั้งเลือกจำเพาะต่อบริเวณฮีม ODQ ทำให้ P(alb) เพิ่มขึ้น
Hypothesis:
เราสรุปว่า ADMA บั่นทอนความสมบูรณ์ของกำแพงการกรองโดยเปลี่ยนแปลงความพร้อมใช้ทางชีวภาพของ NO และ O(2)(*-) และการกระตุ้น sGC แบบไม่ขึ้นกับ NO จะคงไว้ซึ่งความสมบูรณ์ของกำแพงนี้ภายใต้ภาวะพร่อง NO


Premise:
Angiotensin II (ANG II)-induced inflammatory และ oxidative stress responses มีส่วนต่อ pathogenesis ของ hypertension ในการศึกษานี้ เราตรวจสอบว่าการกระตุ้น renin-angiotensin system (RAS) ใน hypothalamic paraventricular nucleus (PVN) มีส่วนต่อ ANG II-induced hypertensive response ผ่านปฏิสัมพันธ์กับ neurotransmitters ใน PVN หรือไม่ หนูได้รับการให้ ANG II หรือ saline แบบ subcutaneous infusion เป็นเวลา 4 สัปดาห์ หนูเหล่านี้ได้รับการรักษาเป็นเวลา 4 สัปดาห์ด้วยการให้ vehicle หรือ losartan (LOS) ซึ่งเป็น angiotensin II type 1 receptor (AT1-R) antagonist เข้าสู่ PVN ทั้งสองข้างผ่าน osmotic minipump การให้ ANG II ทำให้ระดับ glutamate, norepinephrine (NE), AT1-R และ pro-inflammatory cytokines (PIC) ใน PVN สูงขึ้น และระดับ gamma-aminobutyric acid (GABA) ต่ำลง หนูที่ได้รับ ANG II ยังมี mean arterial pressure, plasma PIC, NE และ aldosterone สูงกว่า control animals การรักษา PVN ด้วย LOS ลดทอน ANG II-induced hypertensive responses เหล่านี้

Hypothesis:
เราสรุปว่าการกระตุ้น RAS ใน PVN ที่ induced โดย ANG II มีส่วนต่อ RAS-mediated hypertensive response ผ่านปฏิสัมพันธ์กับ neurotransmitters ใน PVN


Premise:
เราศึกษาผลของการให้ยาต้านความดันโลหิตสูงแบบเรื้อรัง (15 วัน) จากหลายกลุ่มทางเภสัชวิทยา ต่อความดันหลอดเลือดแดง (AP) และความแปรปรวนของอัตราการเต้นของหัวใจ ในหนูที่ถูกทำให้เกิดความดันโลหิตสูงแบบสองไตหนึ่งคลิป (2K1C). หนู 2K1C ได้รับโดยการให้อาหารทางสายยางเข้ากระเพาะ (gavage) อย่างใดอย่างหนึ่งดังต่อไปนี้: น้ำ, ramipril, losartan, atenolol, amlodipine หรือ hydrochlorothiazide ส่วนหนูผ่าตัดหลอกที่มีความดันปกติได้รับน้ำ. หลังการรักษา 15 วัน ได้เก็บตัวอย่าง AP อย่างต่อเนื่องจากสายสวนที่คาไว้ในหนูที่ตื่น ตลอดช่วงเวลา 2 ชั่วโมง และนำค่า AP ช่วงซิสโตลิกและช่วงห่างระหว่างชีพจร (PI) ไปวิเคราะห์สเปกตรัมแบบออโตรีเกรสซีฟ โดยปริมาณองค์ประกอบการแกว่งในย่านความถี่ต่ำ (LF: 0.25 ถึง 0.75 Hz) และย่านความถี่สูง (HF: 0.75 ถึง 3.0 Hz). ค่า AP ที่วัดด้วยปลอกหางเท่ากับ 170 +/- 2 มม.ปรอท ในหนู 2K1C และ 131 +/- 3 มม.ปรอท ในหนูความดันปกติ. ข้อมูลรวมบ่งชี้ว่ายาต้านความดันโลหิตสูงทุกชนิดลด AP ของหนู 2K1C ลงเหลือ 127 +/- 2 มม.ปรอท ขณะที่หนู 2K1C ที่ได้รับน้ำยังคงมีความดันโลหิตสูง (206 +/- 11 มม.ปรอท). ความแปรปรวนของ AP ซิสโตลิกพบว่าเพิ่มขึ้นในหนู 2K1C ที่ได้รับน้ำ (34 +/- 2 มม.ปรอท^2) ในขณะที่หนู 2K1C ที่ได้รับ ramipril, atenolol, amlodipine หรือ hydrochlorothiazide มีความแปรปรวนของ AP ใกล้เคียงกับหนูความดันปกติ (16 +/- 2 มม.ปรอท^2). Losartan ทำให้ AP ของหนู 2K1C กลับสู่ปกติ แต่ความแปรปรวนของ AP ซิสโตลิกยังคงสูง (34 +/- 7 มม.ปรอท^2). หนู 2K1C ที่ได้รับน้ำมีค่า LF ของ AP ซิสโตลิกเพิ่มขึ้น ขณะที่หนู 2K1C ที่ได้รับ losartan แสดงค่า LF ของ AP ซิสโตลิกและ PI สูงกว่า. Atenolol มีค่า LF ของ PI ต่ำกว่าและค่า HF ของ PI สูงกว่า
Hypothesis:
โดยสรุป AP ถูกทำให้เป็นปกติด้วย losartan แต่ไม่ได้ลดความแปรปรวนของ losartan บ่งชี้ถึงความไม่สมดุลของระบบประสาทอัตโนมัติ ซึ่งมีลักษณะโดยการครอบงำของระบบประสาทซิมพาเทติกต่อระบบหัวใจและหลอดเลือดที่สูงขึ้น


Premise:
กลไกที่ก่อให้เกิด blood pressure variability (BPV) ที่ความถี่สูง (HF) และความถี่ต่ำ (LF) เป็นที่เข้าใจค่อนข้างดี แต่ที่มาของ very low-frequency (VLF) BPV ยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด เราได้ทดสอบสมมติฐานที่ว่า VLF BPV เกิดจากกลไกที่ขึ้นกับ L-type Ca(2+) channel ในหนูที่มีสติ ได้บันทึกความดันเลือดแดงระหว่างสภาวะควบคุม (n = 8) และระหว่าง ganglionic blockade (n = 7) ขณะให้ L-type Ca(2+) channel blocker nifedipine ทางหลอดเลือดดำในขนาดที่เพิ่มขึ้น (0.01-5.0 mg.100 μl(-1).h(-1)) ได้ประเมิน VLF (0.02-0.2 Hz), LF (0.2-0.6 Hz) และ HF (0.6-3.0 Hz) BPV ด้วย spectral analysis ของ systolic blood pressure ภายใต้สภาวะควบคุม nifedipine ทำให้ VLF และ LF BPV ลดลงตามขนาดยา ในขณะที่ HF BPV ไม่เปลี่ยนแปลง ที่ขนาดยาสูงสุดของ nifedipine, VLF BPV ลดลง 86% เมื่อเทียบกับ baseline ซึ่งบ่งชี้ว่า VLF BPV ถูกควบคุมเป็นส่วนใหญ่โดยกลไกที่ขึ้นกับ L-type Ca(2+) channel VLF BPV ดูจะขึ้นกับ L-type Ca(2+) channels มากกว่า LF BPV เนื่องจากต้องใช้ขนาดยา nifedipine ต่ำกว่าในการลด VLF BPV อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับการลด LF BPV Ganglionic blockade ทำให้ VLF และ LF BPV ลดลงอย่างชัดเจน และทำให้ผลของ nifedipine ในการลด VLF และ LF BPV ตามขนาดยาหายไป ซึ่งชี้ว่า VLF และ LF BPV ต้องอาศัย sympathetic activity จึงจะปรากฏ

Hypothesis:
โดยสรุป BPV ช่วง VLF ถูกควบคุมเป็นส่วนใหญ่โดยกลไกที่ขึ้นกับช่อง L-type NF449 (2+)


Premise:
เซลล์เดนไดรต์ในเลือดของมนุษย์ (DC) ประกอบด้วยเซลล์เดนไดรต์ชนิดพลาสมาไซทอยด์ (PDC) และชนิดไมอิลอยด์ (MDC) ซึ่งทั้งสองชนิดทำหน้าที่กระตุ้นการตอบสนองของทีเซลล์ต่อต้านเนื้องอก เราได้ติดตามเซลล์เดนไดรต์ในเลือดแบบไปข้างหน้าในผู้ป่วยลูคีเมียไมอิลอยด์เรื้อรัง (CML) จำนวน 30 ราย ก่อนและหลังการรักษาด้วยอิมาทินิบ เมซิเลต พบว่า PDC และ MDC ลดลงอย่างมากก่อนเริ่มการรักษา การลดลงนี้สัมพันธ์กับระดับปัจจัยการเจริญของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือด (VEGF) ในพลาสมาสูง ซึ่งเป็นตัวควบคุมส่วนกลางของกระบวนการสร้างหลอดเลือดใหม่และยังมีส่วนร่วมในภาวะบกพร่องทางภูมิคุ้มกันที่สัมพันธ์กับเนื้องอก การวิเคราะห์เชิงฟีโนไทป์ของ DC พบว่าในผู้ป่วยบางรายมีการแสดงออกของ BDCA-4/neuropilin-1 บน PDC บกพร่อง ซึ่งเป็นโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการสร้างหลอดเลือดและปฏิสัมพันธ์ระหว่าง DC กับทีเซลล์ ระดับ VEGF สูงสัมพันธ์กับสมดุล Th1/Th2 ที่เปลี่ยนแปลงไปในร่างกาย และทำให้แนวโน้มการโพลาริซาชันของทีเซลล์ที่ชักนำโดย PDC เอียงไปทาง Th2 ในหลอดทดลอง เมื่อได้รับอิมาทินิบ ระดับ VEGF ในพลาสมาลดลงอย่างรวดเร็ว และการแสดงออกของ BDCA-4 กลับสู่ภาวะปกติ PDC และ MDC เพิ่มขึ้น แต่ยังไม่ถึงระดับที่พบในบุคคลสุขภาพดี
Hypothesis:
เราสรุปว่า VEGF อาจเป็นปัจจัยสำคัญของภาวะบกพร่องของ DC ในเลือดใน CML และเราชี้ให้เห็นว่าอิมาทินิบยับยั้งการผลิต VEGF เกินปกติ


Premise:
ความสามารถของ interleukin-6 (IL-6) ในการ modulate immune parameters และ mesangial cell function บ่งชี้ว่า cytokine นี้อาจมีบทบาทในการเกิด autoimmune glomerulonephritis สมมติฐานนี้ถูกทดสอบในหนูเพศเมียอายุ 6 เดือนสายพันธุ์ (NZB x NZW)F1 ที่ได้รับ recombinant human IL-6 (rhIL-6) ขนาด 50 และ 250 μg/kg s.c. เป็นเวลา 12 สัปดาห์ ส่งผลให้เกิด membranoproliferative glomerulonephritis ที่เกิดเร็วและรุนแรง ร่วมกับการเพิ่มการแสดงออกอย่างชัดเจนของ mesangial major histocompatibility complex class II antigen และ glomerular ICAM-1 expression เพื่อแยกแยะผลโดยตรงของ rhIL-6 ต่อ renal mesangium จากผลที่ mediated ผ่าน immune system จึงให้ immunosuppression แก่หนู (NZB x NZW)F1 ด้วย cyclosporin การ immunosuppression ด้วย cyclosporin ยับยั้งการเกิด glomerulonephritis, ลด class II antigen expression และลบล้างผล IL-6-mediated effects การให้ neutralizing anti-IL-6 antibody ไม่มีผลต่อการเกิด spontaneous glomerulonephritis ในหนู (NZB x NZW)F1 ข้อนี้ร่วมกับ undetectable IL-6 serum levels ทำให้บทบาท pathogenetic ของ endogenously produced IL-6 ในโมเดลโรคนี้ไม่น่าเป็นไปได้ ตรงกันข้ามกับหนู (NZB x NZW)F1, หนูสายพันธุ์ parental NZW หรือ BALB/c ที่ได้รับ rhIL-6 ขนาดสูง (500 μg/kg) หรือ recombinant murine IL-6 (100 μg/kg) ทุกวันเป็นเวลา 4 สัปดาห์ ไม่เกิด morphological หรือ biochemical evidence ของ glomerulonephritis การ induction ของ acute phase proteins, anemia, thrombocytosis และ renal class II antigen ยืนยัน biological activity ของ IL-6 ในหนูเหล่านี้

Hypothesis:
โดยสรุป แม้ IL-6 จะ non-nephritogenic ในหนูปกติ แต่ IL-6 เร่งการพัฒนา genetically determined glomerulonephritis ของหนู (NZB x NZW)F1 ผ่านผลที่ mediated โดย modulated immune system


Premise:
ก่อนหน้านี้เราได้แสดงว่าสารสกัดอินทรีย์จากสาหร่ายสีเขียวแกมน้ำเงิน Spirulina platensis (SPE) มีฤทธิ์ต้านการอักเสบอย่างแรงในแมคโครฟาจ เนื่องจากปฏิสัมพันธ์ระหว่างแมคโครฟาจกับเซลล์ไขมันมีความสำคัญต่อหน้าที่ของเซลล์ไขมัน เราจึงศึกษาว่าฤทธิ์ต้านการอักเสบของ SPE ในแมคโครฟาจมีส่วนต่อการเกิดเซลล์ไขมัน/การสร้างไขมันในเซลล์ไขมัน 3T3-L1 อย่างไร เซลล์ก่อนพัฒนาเป็นเซลล์ไขมัน 3T3-L1 ถูกเลี้ยงด้วยสารเลี้ยงที่ถูกปรับสภาพ (conditioned medium) 10% ที่ได้จากแมคโครฟาจ RAW 264.7 ที่ถูกกระตุ้นด้วย lipopolysaccharide (LPS) (CMC) หรือจากแมคโครฟาจที่ถูกกระตุ้นด้วย LPS แต่พรีทรีตด้วย SPE (CMS) ในช่วงระยะต่างๆ ของการแยกตัวเป็นเซลล์ไขมัน การแสดงออกของตัวบ่งชี้การแยกตัวเป็นเซลล์ไขมัน เช่น CCAAT/enhancer-binding protein α, peroxisome proliferator-activated receptor γ และ perilipin ถูกกดลงอย่างมีนัยสำคัญโดย CMC เมื่อเติมในวันที่ 3 ขณะที่การกดดังกล่าวลดลงเมื่อใช้ CMS การย้อมสี Oil Red O ยืนยันว่าการเจริญเต็มที่ของเซลล์ไขมันในเซลล์ที่ได้รับ CMS แต่ไม่ใช่ในเซลล์ที่ได้รับ CMC มีความเทียบเท่ากับเซลล์ควบคุม การย้ายเข้าของ nuclear factor κB (NF-κB) p65 เข้านิวเคลียสลดลงในกลุ่ม CMS เมื่อเทียบกับ CMC ในเซลล์ไขมันที่มีไขมันสะสม CMC ส่งเสริมการสูญเสียหยดไขมัน ในขณะที่ CMS มีผลเพียงเล็กน้อย ระดับ mRNA และโปรตีนของ histone deacetylase 9 เพิ่มขึ้นระหว่างการเจริญเต็มที่ของเซลล์ไขมัน และถูกลดลงโดย CMC
Hypothesis:
โดยสรุป การสื่อสารข้ามกับเซลล์ไขมันทำให้ฤทธิ์ต้านการอักเสบของ SPE ในแมคโครฟาจส่งเสริมการแยกตัว/การเจริญเต็มที่ของเซลล์ไขมัน อย่างน้อยบางส่วน โดยการยับยั้งการกระตุ้นของเส้นทางการอักเสบ NF-κB ซึ่งไม่เช่นนั้นแล้วกระบวนการนี้อาจถูกบั่นทอนในภาวะอักเสบ


Premise:
วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือการตรวจสอบเพิ่มเติมถึงกลไกการกดการทำงานของกิจกรรมการทำลายเซลล์ของเซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติ (NK) ในเลือดส่วนปลายภายหลังการออกกำลังกายอย่างหนัก มีการเก็บเลือดเพื่อตรวจวิเคราะห์ความเข้มข้นของเซลล์ NK กิจกรรมการทำลายเซลล์ การแสดงออกของ CD2 บนผิวเซลล์ และการแสดงออกของยีน perforin จากนักวิ่ง (RUN, n=6) และกลุ่มควบคุมที่พัก (CONTROL, n=4) ในช่วงก่อนออกกำลังกาย และที่เวลา 0, 1.5, 5 และ 24 ชั่วโมงหลังการวิ่งบนลู่วิ่งเป็นเวลา 60 นาทีที่ 80% ของ VO2 peak กิจกรรมการทำลายเซลล์ของ NK ซึ่งวัดโดยการทดสอบการปล่อยโครเมียมแบบ whole blood มีความผันผวนน้อยในกลุ่ม CONTROL และในกลุ่ม RUN เพิ่มขึ้น 63% ที่เวลา 0 ชม. และลดลง 43% ที่เวลา 1.5 ชม. หลังออกกำลังกายตามลำดับ (ปฏิสัมพันธ์ระหว่างกลุ่มกับเวลา, P < 0.001) ดัชนีไลซิส (กิจกรรมการทำลายต่อหนึ่งเซลล์) ไม่เปลี่ยนแปลง mRNA ของ perforin ซึ่งวัดด้วยวิธี quantitative real-time polymerase chain reaction (QRT-PCR) ลดลงจากก่อนถึงหลังออกกำลังกายและคงอยู่ในระดับต่ำจนถึง 24 ชม. การลดลงจากก่อนถึงเวลา 0 ชม. หลังออกกำลังกายพบเด่นชัดในกลุ่ม RUN และมีความสัมพันธ์ผกผัน (r = -0.95) กับระดับ mRNA ของ perforin ก่อนออกกำลังกาย การแสดงออกของ CD2 บนผิวเซลล์ NK (lymphocyte function-associated antigen-2) ถูกกำหนดโดยใช้แอนติบอดีเรืองแสงและโฟลว์ไซโตเมทรี ไม่พบการเปลี่ยนแปลงในสัดส่วนของเซลล์ NK ที่แสดง CD2 หรือความหนาแน่นของ CD2
Hypothesis:
เราสรุปว่า (1) การกระจายจำนวนเซลล์ใหม่เป็นสาเหตุหลักของการเปลี่ยนแปลงของกิจกรรมการทำลายของ NK ภายหลังการวิ่งอย่างหนัก (2) การเพิ่มขึ้นของการแสดงออกของยีน perforin ระหว่างการวิ่งมีความสัมพันธ์ผกผันกับระดับก่อนออกกำลังกาย แต่ไม่เป็นไปในทิศทางเดียวกับการเปลี่ยนแปลงของกิจกรรมการทำลายเซลล์ และ (3) การแสดงออกของ CD2 บนผิวเซลล์ไม่ได้รับผลกระทบจากการออกกำลังกาย


Premise:
ตัวรับคล้าย Toll (TLRs) มีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดโดยตรวจจับองค์ประกอบของจุลชีพที่มีการอนุรักษ์ ตัวรับ Fc γ receptor IIb (FcγRIIb) ซึ่งเป็นตัวรับ Fc ชนิดยับยั้ง ทำหน้าที่ควบคุมภูมิคุ้มกันโดยการจับกับโดเมน Fc ของอิมมูโนโกลบูลิน G แม้ว่าบทบาทเฉพาะของ TLRs และ FcγRIIb จะถูกศึกษาอย่างเข้มข้น แต่การสื่อสารไขว้ระหว่าง FcγRIIb และ TLR4 บนเซลล์บียังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าการจับของ FcγRIIb โดย immune complex (IC) ช่วยลดการกระตุ้น nuclear factor (NF)-κB ที่ถูกเหนี่ยวนำโดย TLR4 และลดการหลั่ง interleukin (IL)-6 จากเซลล์บี ผ่านการเพิ่มการฟอสโฟรีเลชันของ LYN proto-oncogene (Lyn) นอกจากนี้ การรักษาด้วย IC ยังปกป้องหนูจากภาวะช็อกจากเอนโดท็อกซินที่รุนแรงถึงชีวิต สอดคล้องกัน IC ลดระดับ IL-6 ในซีรัมที่ถูกเหนี่ยวนำด้วย LPS ตลอดจนการสร้าง IL-6 ภายในเซลล์บีในร่างกาย (in vivo) อย่างไรก็ตาม ไม่พบฤทธิ์ปกป้องและฤทธิ์ยับยั้งเหล่านี้ของ IC ในหนู FcγRIIb‑/‑
Hypothesis:
โดยสรุป ข้อมูลในงานนี้แสดงให้เห็นว่า TLR4 ยับยั้งการส่งสัญญาณของ FcγRIIb ในเซลล์บี โดยการกระตุ้นการฟอสโฟรีเลชันของ Lyn และโดยการยับยั้งการส่งสัญญาณของ NF‑κB


Premise:
เราได้ตรวจสอบชะตากรรมการเผาผลาญภายในเซลล์ของกลูโคสในพลาสมาระหว่างการทำไฮเปอร์ไกลซีมิกแคลมป์ในผู้ที่มีภาวะทนต่อกลูโคสบกพร่อง (IGT; n = 21) และผู้ที่ทนต่อกลูโคสปกติ (n = 10) โดยใช้การให้ [3-(3)H]glucose ร่วมกับการวัดการเกิด [(3)H]water และการทำคาโลริเมตรีทางอ้อม IGT มีความเกี่ยวข้องกับการตอบสนองของอินซูลินระยะที่หนึ่งที่ลดลงประมาณ 35% การตอบสนองของอินซูลินระยะที่สองคงปกติ และความไวต่ออินซูลินลดลง 25-30% ส่งผลให้การกำจัดกลูโคสจากพลาสมาลดลงประมาณ 35% ทั้งนี้พบว่าการเก็บสะสมกลูโคสจากพลาสมาลดลงประมาณ 55% (P < 0.01) และไกลโคไลซิสของกลูโคสจากพลาสมาลดลงประมาณ 15-20% (P < 0.03) ซึ่งคิดเป็นประมาณ 75% และ 25% ของการลดลงของการกำจัดกลูโคสตามลำดับ การออกซิเดชันของกลูโคสที่ลดลงเป็นตัวอธิบายแทบทั้งหมดของการลดลงของไกลโคไลซิส ดังนั้น ไกลโคไลซิสแบบไม่ออกซิเดชันของกลูโคสในพลาสมาใน IGT มีความคล้ายคลึงกับใน NGT (P > 0.9) และคิดเป็นสัดส่วนที่เพิ่มขึ้นของการกำจัดกลูโคสทั่วร่างกาย (P < 0.05)
Hypothesis:
เราสรุปว่า ใน IGT การกำจัดกลูโคสจากพลาสมาที่ลดลงเกี่ยวข้องหลักกับการสังเคราะห์ไกลโคเจนที่ลดลง และในระดับที่น้อยกว่าคือการลดลงของไกลโคไลซิส ซึ่งอธิบายได้โดยการออกซิเดชันของกลูโคสที่ลดลง


Premise:
จากการศึกษาผลของการรักษาด้วย vanadium ต่อการ translocation ของ glucose transporter type 4 (GLUT4) ที่ถูกกระตุ้นโดย insulin ในเนื้อเยื่อหัวใจของหนูที่เหนี่ยวนำให้เป็นเบาหวานด้วย streptozotocin (STZ) โดยการกำหนด subcellular distribution ของ GLUT4 มีการตรวจสอบหนู 4 กลุ่ม: control และ diabetic โดยได้รับหรือไม่ได้รับการรักษาด้วย bis(maltolato)oxovanadium(IV) (BMOV, รูปแบบ organic ของ vanadium) เป็นเวลา 8 สัปดาห์ ศึกษาผลของ vanadium ต่อ insulin-induced GLUT4 translocation ที่ 5 นาทีเป็น early insulin response และที่ 15 นาทีหลัง insulin injection เป็น maximal insulin response ที่ 5 นาทีหลังฉีด insulin, plasma membrane GLUT4 level ในกลุ่ม diabetic-treated ไม่แตกต่างจากกลุ่ม control และสูงกว่ากลุ่ม insulin-stimulated diabetic อย่างมีนัยสำคัญ บ่งชี้ว่าการรักษาด้วย vanadium เพิ่ม insulin response ต่อ GLUT4 translocation ตรงกันข้ามกับที่ 5 นาที ไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญของ plasma membrane GLUT4 level ระหว่างกลุ่ม diabetic และ diabetic-treated ที่ 15 นาทีหลัง insulin injection ยังได้ตรวจสอบ GLUT4 mobilization จาก intracellular pool ตอบสนองต่อ insulin ที่ 15 นาทีหลัง insulin injection Basal intracellular GLUT4 content สูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม diabetic-treated เมื่อเทียบกับกลุ่ม diabetic ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน อย่างไรก็ตาม basal intracellular GLUT4 ที่เพิ่มขึ้นในกลุ่ม diabetic-treated ไม่ได้ส่งผลให้เกิด insulin-mediated GLUT4 translocation มากขึ้นที่ 15 นาทีหลัง insulin injection

Hypothesis:
โดยสรุป การที่ plasma membrane GLUT4 ในกลุ่ม diabetic-treated สูงกว่ากลุ่ม diabetic อย่างมีไม่มีนัยสำคัญที่ 5 นาที แต่ไม่ใช่ที่ 15 นาทีหลัง insulin injection บ่งชี้ว่าการรักษาด้วย vanadium เพิ่ม insulin-mediated GLUT4 translocation ในเนื้อเยื่อหัวใจโดยการเพิ่ม early response


Premise:
กลไกที่ enteroinsular axis มีอิทธิพลต่อ beta-cell function ยังไม่ได้รับการศึกษาอย่างละเอียด เราให้ glucose ทางปากและทาง intravenous (IV) แบบ isoglycemic ในอาสาสมัครที่มี normal glucose tolerance (NGT; n = 11) หรือ impaired glucose tolerance (IGT; n = 10) โดยใช้ C-peptide deconvolution เพื่อคำนวณ insulin secretion rates และใช้ mathematical modeling เพื่อหาปริมาณ beta-cell function กำหนดให้ incretin effect เป็นอัตราส่วนของ oral ต่อ IV responses ใน NGT, incretin-mediated insulin release [อัตราส่วน OGTT/IV = 1.59 ± 0.18, P = 0.004] มีค่า 18 ± 2 nmol/m² (32 ± 4% ของ oral response) และ time course สอดคล้องกับ total insulin secretion Beta-cell glucose sensitivity (อัตราส่วน OGTT/IV = 1.52 ± 0.26, P = 0.02), rate sensitivity (response ต่อ glucose rate of change, อัตราส่วน OGTT/IV = 2.22 ± 0.37, P = 0.06) และ glucose-independent potentiation สูงกว่ามากเมื่อให้ glucose ทางปากเทียบกับ IV ใน IGT, beta-cell glucose sensitivity (75 ± 14 vs. 156 ± 28 pmol·min⁻¹·m⁻²·mM⁻¹ ของ NGT, P = 0.01) และการเสริมฤทธิ์บกพร่องใน OGTT Incretin effect ไม่แตกต่างจาก NGT อย่างมีนัยสำคัญในด้าน plasma glucagon-like peptide 1 และ glucose-dependent insulinotropic polypeptide responses, total insulin secretion และการเพิ่ม beta-cell glucose sensitivity (อัตราส่วน OGTT/IV = 1.73 ± 0.24, P = NS vs. NGT) อย่างไรก็ตาม time courses ของ incretin-mediated insulin secretion และ potentiation เปลี่ยนแปลง โดยมี glucose-induced stimulation เด่นกว่า incretin-mediated stimulation

Hypothesis:
เราสรุปว่า ภายใต้สภาวะสรีรวิทยา incretin-mediated stimulation ของ insulin secretion เกิดจากการเพิ่มขึ้นของทุก dynamic aspects ของ beta-cell function โดยเฉพาะ beta-cell glucose sensitivity


Premise:
ในกล้ามเนื้อที่มีไกลโคเจน ไกลโคเจเนซิส (การสังเคราะห์ไกลโคเจน) ดูเหมือนถูกควบคุมโดยการจัดหากลูโคส 6-ฟอสเฟต (6-P) แต่หลังจากไกลโคเจนพร่อง กลไกการควบคุมแบบยับยั้งตนเองของไกลโคเจนอาจเป็นปัจจัยกำหนด เราวิเคราะห์ในกล้ามเนื้อมนุษย์เพาะเลี้ยงถึงบทบาทของการพร่องไกลโคเจนเทียบกับกลูโคส 6-P ในการควบคุมการฟื้นตัวของไกลโคเจน การลดไกลโคเจนอย่างเฉียบพลันทำได้โดยวิศวกรรมให้เซลล์แสดงออกเกินของเอนไซม์ไกลโคเจนฟอสโฟรีเลส (GP) เซลล์ที่ได้รับอะดีโนไวรัส AdCMV-MGP เพื่อให้มีการแสดงออกของ GP ที่ทำงานได้สูงขึ้น 10 เท่า มีระดับไกลโคเจนไม่เปลี่ยนแปลงเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่กลูโคส 25 mM แต่ตอบสนองต่อการงดกลูโคส 6 ชม. ด้วยการพร่องไกลโคเจนที่มากกว่า อัตราส่วนกิจกรรมของไกลโคเจนซินเทส (GS) สูงเป็นสองเท่าในเซลล์ AdCMV-MGP ที่งดกลูโคสเมื่อเทียบกับควบคุม แม้มีระดับกลูโคส 6-P เท่ากัน การกระตุ้นสูงสุดของ GS (30 นาที) ที่เหนี่ยวนำโดยการบ่มกับกลูโคสใหม่ มีความสัมพันธ์ตามขนาดโดสกับความเข้มข้นของกลูโคส 6-P ซึ่งเข้าสู่ระดับคงที่ที่คล้ายกันในทั้งสองชนิดเซลล์ การกระตุ้นของ GS ถูกลดทอนอย่างมีนัยสำคัญในเซลล์ AdCMV-MGP ในขณะที่มีความสัมพันธ์อย่างมากแบบผกผันกับปริมาณไกลโคเจน พบการสังเคราะห์กลับของไกลโคเจนอย่างรวดเร็วในระยะแรก (0-1 ชม.) ที่ไม่ขึ้นกับอินซูลินเฉพาะในเซลล์ AdCMV-MGP ซึ่งเพิ่มขึ้นจนถึงระดับไกลโคเจนประมาณ 150 ไมโครกรัมกลูโคส/มก.โปรตีน; ส่วนเซลล์ควบคุมซึ่งไม่ได้พร่องไกลโคเจนต่ำกว่าความเข้มข้นนี้ มีระยะหน่วง 1 ชม. สำหรับการฟื้นตัว โดยสรุป การลดไกลโคเจนอย่างเฉียบพลันที่ได้จากการแสดงออกเกินของ GP ก่อให้เกิดการกระตุ้น GS ซึ่งมีความสัมพันธ์ผกผันกับการเติมไกลโคเจนกลับ โดยไม่ขึ้นกับกลูโคส 6-P ระหว่างการฟื้นไกลโคเจน การกระตุ้นที่เกิดจากการลดไกลโคเจนอย่างเฉียบพลันทำให้ GS มีประสิทธิภาพในการควบคุมไกลโคเจเนซิส ขณะที่การกระตุ้นชั่วคราวของ GS ที่เหนี่ยวนำโดยการเพิ่มขึ้นของกลูโคส 6-P ไม่มีผลต่ออัตราการสังเคราะห์กลับ
Hypothesis:
เราสรุปว่า การสังเคราะห์กลับของไกลโคเจนระยะแรกที่ไม่ขึ้นกับอินซูลินขึ้นกับการกระตุ้นของ GS อันเกิดจากการพร่องของไกลโคเจนที่สื่อกลางโดย GP มากกว่าการจัดหากลูโคส 6-P


Premise:
อะไมลินจากตับอ่อนมีบทบาทสำคัญในการควบคุมการไหลเวียนของสารอาหาร และเป็นแนวทางการรักษาที่ได้รับการยอมรับในโรคเบาหวานของมนุษย์ เนื่องจากช่วยลดการหลั่งกลูคากอนหลังมื้ออาหารและชะลอการว่างของกระเพาะอาหาร เนื่องจากพยาธิสรีรวิทยาของโรคเบาหวานชนิดที่ 2 ในคนและในแมวมีความคล้ายคลึงกัน เราจึงตรวจสอบว่าอะไมลินช่วยลดระดับกลูคากอนในพลาสมาของแมวหรือไม่ ได้ทดสอบในแมวสุขภาพดีโดยใช้การทดสอบกระตุ้นด้วยอาร์จินีนทางหลอดเลือดดำ (IVAST) การทดสอบการตอบสนองต่อมื้ออาหาร โดยมื้อทดสอบมีปริมาณคิดเป็น 50% ของปริมาณอาหารเฉลี่ยต่อวัน และการทดสอบความทนทานต่อกลูโคสทางหลอดเลือดดำ (IVGTT) การฉีดอะไมลินของหนูที่ไม่ก่ออะไมลอยด์ 5 นาที ก่อนสิ่งกระตุ้นแต่ละชนิด ช่วยลดระดับกลูคากอนในพลาสมาได้อย่างมีนัยสำคัญในทุกสถานการณ์การทดสอบ ในการทดสอบ IVAST และ IVGTT แมวที่ได้รับอะไมลินยังมีความเข้มข้นอินซูลินในพลาสมาต่ำกว่าอีกด้วย
Hypothesis:
ไม่ได้สรุปว่าอะไมลินช่วยลดระดับกลูคากอนในพลาสมาของแมว ซึ่งเป็นคุณสมบัติที่อาจมีศักยภาพทางการรักษาในสัตว์ที่เป็นเบาหวาน เพราะการให้ยาอะไมลินร่วมกับอินซูลินจะช่วยลดความต้องการอินซูลินในการควบคุมระดับน้ำตาลในเลือด


Premise:
ฤทธิ์ anxiolytic ของ alcohol มีส่วนต่อ reinforcing properties ของยา โดยมี nucleus accumbens (NAcc) เข้ามาเกี่ยวข้อง ระบบ opioidergic ใน NAcc ถือเป็นเส้นทางหลักที่เกี่ยวข้องกับ emotional responses ของสัตว์: หนูที่ถูก microinjected ด้วย morphine เข้า NAcc และที่ได้รับ μ-opioid receptor (MOR) agonists ทาง systemic มีคะแนนความกังวลต่ำใน elevated plus maze (EPM) ซึ่งเป็น behavioral test สำหรับความกังวล อย่างไรก็ตาม การมีส่วนร่วมเฉพาะของ NAcc MOR ต่อ anxiolytic effect ของ ethanol ยังไม่ได้รับการศึกษา AC5 ซึ่งเป็น cAMP-synthesizing adenylyl cyclase มีการแสดงออกสูงใน NAcc; มันมี negatively coupled กับ MOR และเกี่ยวข้องกับระดับความกังวลของสัตว์ เราประเมิน anxiolytic effects ของการให้ ethanol ทาง intra-gastric (2.5 g/kg) ในสัตว์ที่ถูกทดสอบด้วย EPM ที่ 1, 4 และ 8 ชั่วโมงหลังได้รับยาหรือน้ำ การเคลื่อนไหวถูกประเมินด้วย open-field test; เรายังวัดระดับ AC5 และ MOR mRNA ใน accumbal ด้วย RT-PCR หลังจาก 1 ชั่วโมง สัตว์ที่ได้รับ ethanol แสดง anxiolytic-like behavior พร้อมทั้งมี AC5 expression ลดลงและ MOR expression เพิ่มขึ้นใน NAcc ตามลำดับ การฉีด β-funaltrexamine (FNA) ซึ่งเป็น MOR antagonist เข้า intra-accumbal ไม่ได้ block ethanol-induced anxiolysis แต่กลับมีแนวโน้มเพิ่มระดับความกังวลในกลุ่มที่ได้รับน้ำ FNA ลด accumbal AC5 expression บางส่วนในหนูที่ได้รับ ethanol

สมมติฐาน:
เราสรุปว่า AC5 ใน NAcc มีส่วนร่วมใน emotional effects ของ ethanol; MOR ไม่ได้เป็น mediator ของการลด AC5 ที่ induced โดยยาใน NAcc หรือ ethanol-induced anxiolysis


Premise:
Neuropathic pain เป็นรูปแบบหนึ่งของ pathological nociception ที่เกิดขึ้นในผู้ป่วย traumatic spinal cord injury (SCI) จำนวนมาก ส่งผลให้เกิดภาระทางกายและจิตใจที่รุนแรงและมักยืดเยื้อ แม้ว่าจะมี peripheral และ central mechanisms หลายประการที่เกี่ยวข้องกับ neuropathic pain แต่ central sensitization ของ dorsal horn spinothalamic tract (STT) neurons เป็นพื้นฐานสำคัญ นอกจากนี้ dysregulation ของ extracellular glutamate homeostasis และ chronic astrocyte activation ยังมีบทบาทสำคัญต่อ persistent hyperexcitability ของ superficial dorsal horn neurons เหล่านี้ จนถึงปัจจุบัน central sensitization และการเปลี่ยนแปลงของ astrocyte ยังไม่ได้รับการ characterize ในโมเดล cervical SCI-induced neuropathic pain ทั้งที่ผู้ป่วย SCI ส่วนใหญ่ได้รับ contusion trauma ที่ cervical spinal cord ในการศึกษานี้ เราได้ characterize แบบจำลองหนู 2 แบบของ unilateral cervical contusion SCI ที่ทำให้เกิด chronic thermal hyperalgesia ใน ipsilateral forepaw นอกจากนี้ เราพบว่า STT neurons ถูก activated อย่าง chronic ในทั้งสองโมเดลเมื่อเทียบกับหนูที่ได้รับเพียง laminectomy โดยไม่มีบาดเจ็บ สุดท้าย persistent astrocyte activation และการลดลงอย่างมีนัยสำคัญของ major CNS glutamate transporter, GLT1 ใน superficial dorsal horn astrocytes มีความสัมพันธ์กับทั้งการเปลี่ยนแปลง excitability ของ STT neurons และ neuropathic pain behavioral phenotype

สมมติฐาน:
โดยสรุป เราได้ characterize clinically-relevant rodent models ของ cervical contusion-induced neuropathic pain ที่ทำให้เกิด chronic activation ของทั้ง STT neurons และ astrocytes รวมทั้งการบกพร่องใน astrocyte glutamate transporter expression


Premise:
เราวัดการลดลงของการเคลื่อนไหวของหอยน้ำจืด Lymnaea stagnalis ที่เคลื่อนไหวอิสระ หลังจากให้ยาผ่านผิวหนังด้วย selective octopamine antagonists สองชนิดคือ epinastine และ phentolamine หลังจากอยู่ในน้ำมาตรฐานสำหรับหอยในน้ำจืด 3 ชั่วโมง หลังรักษาด้วย epinastine 4 mM หรือ phentolamine 3.5 mM ความเร็วของหอยลดลงเหลือ 25% และ 56% ของกลุ่มควบคุมตามลำดับ (P < 0.001 และ P = 0.02) ความเร็วของหอยลดลงเมื่อความเข้มข้นยาเพิ่มขึ้น ใน isolated CNS, octopamine 0.5 mM ทำให้อัตราการยิงสัญญาณของมอเตอร์นิวรอนกลุ่ม pedal A ซึ่งเลี้ยงซิเลียของเท้าเพิ่มขึ้น ใน normal saline การเพิ่มขึ้นเท่ากับ 26% และใน high magnesium/low calcium saline เท่ากับ 22% (P < 0.05 และ 0.01 ตามลำดับ)

สมมติฐาน:
เราสรุปว่า octopamine antagonism ลดการเคลื่อนไหวใน Lymnaea stagnalis


Premise:
ผลต่อหลอดเลือดของการรักษาต้านการสร้างหลอดเลือดอาจก่อให้เกิดปัญหาในการประเมินการตอบสนองของเนื้องอกสมองโดยอาศัยการถ่ายภาพด้วยคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้าแบบเสริมความเปรียบต่าง (MRI) เราใช้การทำ DCE-MRI ต่อเนื่องที่สนามแม่เหล็ก 12 เทสลาเพื่อประเมินการตอบสนองของหลอดเลือดต่อการรักษาต้านการสร้างหลอดเลือดเทียบกับสเตียรอยด์ หนูไม่มีต่อมไทมัสที่ปลูกถ่ายกลัยโอมาของมนุษย์สาย U87MG ภายในสมอง (n=17) ได้รับการถ่ายภาพ MRI แบบเพอร์ฟิวชันถ่วงน้ำหนักความไวต่อสนามด้วยเฟรูมอกซิทอล ซึ่งเป็นอนุภาคนาโนเหล็กออกไซด์ซูเปอร์พาราแมกเนติกขนาดจิ๋ว (USPIO) ที่อยู่เฉพาะภายในหลอดเลือด ตามด้วย MRI แบบไดนามิกถ่วงน้ำหนัก T1 ที่เสริมความเปรียบต่างด้วยแกโดเดียไมด์เพื่อวัดการซึมผ่านของหลอดเลือด ทำการถ่ายภาพก่อนการรักษา และหลังการรักษา 24, 48 และ 72 ชั่วโมง ด้วยยาต้านการสร้างหลอดเลือด bevacizumab หรือคอร์ติโคสเตียรอยด์ dexamethasone พบการรั่วออกนอกหลอดเลือดของสารเพิ่มความเปรียบต่างอย่างรวดเร็วหลังให้แกโดเดียไมด์ แต่ไม่พบหลังให้เฟรูมอกซิทอล Bevacizumab ลดปริมาตรเลือดอย่างมีนัยสำคัญและลดการซึมผ่านในเนื้องอก ซึ่งประเมินจากเวลาถึงค่าสูงสุดของการเสริมความเปรียบต่างที่ยาวนานขึ้น การให้ bevacizumab ขนาดครั้งเดียว 45 มก./กก. ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงที่คล้ายกับ dexamethasone ขนาดสูงมาก (12 มก./กก./วัน) และมีประสิทธิภาพมากกว่า dexamethasone ขนาด 2 มก./กก./วันอย่างมีนัยสำคัญ
Hypothesis:
เราสรุปว่า การวัด MRI แบบเพอร์ฟิวชันไดนามิกด้วยเฟรูมอกซิทอล USPIO เพื่อประเมินปริมาตรเลือดในสมอง ร่วมกับ MRI แบบไดนามิกที่เสริมความเปรียบต่างด้วยแกโดเดียไมด์เพื่อประเมินการซึมผ่านของหลอดเลือด มีศักยภาพในการตรวจหาการตอบสนองต่อการรักษาต้านการสร้างหลอดเลือดได้อย่างแม่นยำมากยิ่งขึ้น


Premise:
โอปิออยด์ไดนอร์ฟิน-เอ (dynA) เชื่อว่ามีส่วนต่อกระบวนการบาดเจ็บทุติยภูมิหลังการบาดเจ็บไขสันหลัง แม้ว่าจะทราบเกี่ยวกับกลไกทางชีวเคมีที่เกี่ยวข้องยังน้อยก็ตาม ในการศึกษานี้ เราใช้การผสมผสานระหว่างการถ่ายภาพด้วยคลื่นสนามแม่เหล็ก (MRI) และสเปกโตรสโกปีเรโซแนนซ์แม่เหล็ก (MRS) ร่วมกับการทดสอบการทำงานการเคลื่อนไหวของขาหลัง เพื่อตรวจสอบผลของการให้ dynA ทางช่องไขสันหลังต่อไขสันหลังของหนู การให้ dynA (1-17) ขนาด 100 นาโนโมล ทำให้เกิดอาการบวมน้ำเด่นชัดตามที่ตรวจโดย MRI ที่ 24 ชั่วโมงหลังให้ยา การให้ชิ้นส่วน dynA (2-17) ขนาด 100 นาโนโมล ซึ่งไม่มีฤทธิ์ต่อตัวรับโอปิออยด์ ก็ทำให้เกิดอาการบวมน้ำอย่างมากเช่นกัน ในขณะที่การให้ dynA (1-8) ซึ่งเป็นลิแกนด์ของตัวรับโอปิออยด์ชนิดแคปปาที่มีฤทธิ์ต่ำ ขนาด 100 นาโนโมล หรือการให้น้ำไขสันหลังสังเคราะห์ (ACSF) ไม่ก่อให้เกิดอาการบวมน้ำ ทั้ง dynA (1-17) และ dynA (2-17) ทำให้เกิดความบกพร่องการเคลื่อนไหวของขาหลังอย่างมีนัยสำคัญที่ 24 ชั่วโมง เมื่อเทียบกับ dynA (1-8) และ ACSF (P < 0.05) แต่ความบกพร่องในกลุ่ม dynA (1-17) แย่กว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มที่ได้รับ dynA (2-17) (P < 0.05) ในทำนองเดียวกัน การตายในสัตว์ที่ได้รับ dynA (1-17) สูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มอื่น (P = 0.002) การตรวจ MRS ของฟอสฟอรัสแสดงให้เห็นว่าสัตว์ที่ได้รับ dynA (1-17) และ dynA (2-17) มีการลดลงอย่างเด่นชัดของฟอสเฟตพลังงานสูงในไขสันหลังที่ 24 ชั่วโมงหลังให้ยา
Hypothesis:
เราสรุปว่า dynA มีส่วนทำให้การตายของเซลล์ในไขสันหลัง โดยก่อให้เกิดความล้มเหลวทางเมแทบอลิซึมและการเกิดอาการบวมน้ำ


Premise:
ครอบครัว GATA ของปัจจัยการถอดรหัสควบคุมรูปแบบการแสดงออกของยีนที่เฉพาะต่อเนื้อเยื่อระหว่างการพัฒนา เราได้อธิบายลักษณะปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีน GATA กับโพรโมเตอร์ของยีนแลคเตส โปรตีนในนิวเคลียสที่จับกับองค์ประกอบ cis บริเวณ GATA ของยีนแลคเตส (-97 ถึง -73) ถูกวิเคราะห์ด้วยการทดสอบการเปลี่ยนการเคลื่อนที่ทางอิเล็กโตรโฟรีซิส (EMSA) และการทดสอบซูเปอร์ชิฟต์โดยใช้แอนติบอดีต่อ GATA กิจกรรมของโพรโมเตอร์แลคเตสถูกทดสอบในเซลล์ Caco-2 ที่ถูกทรานส์เฟกต์ด้วยคอนสตรักต์โปรโมเตอร์-รีพอร์ตเตอร์ลูซิฟิเรสชนิดปกติและชนิดกลายพันธุ์ และคอนสตรักต์การแสดงออกของ GATA-4/5/6 การทำ EMSA ด้วยโพรบบริเวณ GATA ให้คอมเพล็กซ์ดีเอ็นเอ-โปรตีนจำเพาะที่ต้องการตำแหน่งจับของปัจจัย GATA แบบ WGATAR คอมเพล็กซ์นี้ถูกจดจำโดยแอนติบอดีจำเพาะต่อ GATA-4 และ GATA-6 คอนสตรักต์การแสดงออกของ GATA-4/5/6 สามารถกระตุ้นการถอดรหัสที่ขับโดยโพรโมเตอร์ชนิดปกติ แต่ไม่สามารถกระตุ้นโพรโมเตอร์ที่ตำแหน่งจับ GATA ถูกกลายพันธุ์ได้ ทั้งในเซลล์ Caco-2 และเซลล์ QT6 ที่ไม่ใช่ลำไส้ การจับของปัจจัย GATA กับองค์ประกอบ cis ของแลคเตสสอดคล้องกับการกระตุ้นโพรโมเตอร์ในเชิงหน้าที่
Hypothesis:
เราสรุปว่าโพรโมเตอร์ของแลคเตสถูกกระตุ้นโดยปัจจัยการถอดรหัสครอบครัว GATA ได้แก่ GATA-4 และ GATA-6


Premise:
การเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิลไมโทซิสไปยังด้านใดด้านหนึ่งของเซลล์มีความสำคัญต่อการที่เซลล์จำนวนมากจะแบ่งตัวอย่างไม่เท่ากัน แม้ความก้าวหน้าล่าสุดจะเริ่มเปิดเผยกลไกระดับโมเลกุลบางประการของการเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิลไมโทซิส แต่ยังรู้น้อยมากเกี่ยวกับวิธีที่การเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิลถูกกำหนดเวลาอย่างแม่นยำ กลไกการดำเนินไปของไมโทซิสที่อนุรักษ์ตามวิวัฒนาการเป็นที่ทราบกันว่าใช้กำหนดเวลาของเหตุการณ์ต่างๆ ในเซลล์ที่กำลังแบ่งตัว แม้ว่าไม่เคยมีการเชื่อมโยงกับการเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิล กลไกนี้เกี่ยวข้องกับคอมเพล็กซ์ส่งเสริมอนาเฟส (APC) ตัวกระตุ้นของมัน Cdc20/Fizzy เป้าหมายการสลายตัวคือไซคลิน และไคเนสที่ขึ้นกับไซคลิน (CDK) ที่นี่เราชี้ให้เห็นว่าองค์ประกอบเหล่านี้รวมกันเป็นตัวจับเวลาที่ไม่เคยถูกตระหนักมาก่อนสำหรับการเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิล ในไซโกตของ Caenorhabditis elegans การเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิลไมโทซิสเริ่มขึ้นในเวลาที่แน่นอน ไม่นานหลังจากที่โครโมโซมรวมตัวกันที่แผ่นเมตาเฟส เราพบว่าการลดหน้าที่ของโปรตีโซม APC หรือ Cdc20/Fizzy ทำให้การเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิลล่าช้า ในทางกลับกัน การทำให้ CDK ไม่ทำงานในโพรมีตาเฟสทำให้สปินเดิลเคลื่อนตำแหน่งก่อนกำหนด ผลจากการแยกการเคลื่อนตำแหน่งของสปินเดิลออกจากกลไกการจับเวลาดังกล่าวโดยการทดลอง คือการเคลื่อนตำแหน่งก่อนเวลาอันควรขององค์ประกอบของสปินเดิลไมโทซิสที่ประกอบยังไม่สมบูรณ์
Hypothesis:
เราสรุปว่า ในระบบนี้ การจัดวางตำแหน่งแบบอสมมาตรของสปินเดิลไมโทซิสโดยปกติจะถูกหน่วงเวลาไว้ช่วงสั้นๆ จนกว่า APC จะทำให้ CDK ไม่ทำงาน และการหน่วงเวลานี้ทำให้มั่นใจว่าสปินเดิลจะไม่เริ่มเคลื่อนที่จนกว่าจะประกอบเสร็จสมบูรณ์


Premise:
Cellular senescence เป็นปัจจัยจำกัดสำหรับการรักษาฟื้นฟูด้วย somatic stem cells เราเคยแสดงให้เห็นมาก่อนว่า การเริ่มเกิด cellular senescence ยับยั้ง osteogenic differentiation ใน stem cells ของ dental follicle (DFCs) แม้ว่ากลไกยังไม่ชัดเจน มีวิถีสัญญาณสองแบบเกี่ยวข้องกับการเหนี่ยวนำ cellular senescence ซึ่งขับเคลื่อนโดย cell cycle protein P21 หรือ cell cycle protein P16 ในการศึกษานี้ เราตรวจสอบการแสดงออกของ cell cycle proteins ใน DFCs หลังการเหนี่ยวนำ cellular senescence การเหนี่ยวนำ cellular senescence ได้รับการยืนยันด้วยการเพิ่มขึ้นของการแสดงออกของ β-galactosidase และการเพิ่มขึ้นของ population doubling time หลังการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นเวลานาน Cellular senescence ควบคุมการแสดงออกของ cell cycle proteins การแสดงออกของ cell cycle protein P16 เพิ่มขึ้น ซึ่งสอดคล้องกับการเหนี่ยวนำเครื่องหมายของ cellular senescence ใน DFCs อย่างไรก็ตาม การแสดงออกของ cyclin-dependent kinases (CDK)2 และ 4 และการแสดงออกของ cell cycle protein P21 ลดลงอย่างต่อเนื่องใน DFCs
Hypothesis:
โดยสรุป ข้อมูลของเราชี้ว่า P16-dependent pathway เป็นตัวขับเคลื่อนการเหนี่ยวนำ cellular senescence ใน DFCs


Premise:
Decitabine (DAC) และ 5-azacitidine เพิ่งได้รับการอนุมัติให้ใช้รักษากลุ่มอาการไขกระดูกสร้างเม็ดเลือดผิดปกติ (myelodysplastic syndrome, MDS) ผลทางเภสัชพลศาสตร์ของ DAC และ 5-azacitidine นอกเหนือจากบทบาทที่ทราบกันว่าเป็นตัวยับยั้งเอนไซม์ DNA methyltransferase (DNMTs) ยังต้องมีการศึกษาเพิ่มเติม วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือการตรวจผลของ DAC ต่อการแสดงออกของ p21(WAF1/CIP1) ซึ่งเป็นยีนที่คาดว่ามีเกาะ CpG (CpG island) ล้อมรอบบริเวณโปรโมเตอร์ การวิเคราะห์เมทิลเลชันของโปรโมเตอร์ของ p21(WAF1/CIP1) ในเซลล์ลูคีเมียพบว่าไม่มีการเมทิลเลชันที่ตำแหน่ง CpG อย่างไรก็ตาม DAC เพิ่มการแสดงออกของ p21(WAF1/CIP1) ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา (ED50 = 103.34 นาโนโมลาร์) และเหนี่ยวนำให้เกิดการหยุดวงจรเซลล์ที่ระยะ G2/M ในเซลล์ลูคีเมีย การให้ DAC ต่อเนื่องตามด้วยตัวยับยั้ง histone deacetylase ชนิดต่างๆ ช่วยเหนี่ยวนำการแสดงออกของ p21(WAF1/CIP1) แบบเสริมฤทธิ์กัน การเพิ่มขึ้นของ p21(WAF1/CIP1) สอดคล้องกับการเกิดอะพอพโทซิสที่เหนี่ยวนำโดย DAC (ED50 = 153 นาโนโมลาร์) ขนาดยาต่ำของ DAC กระตุ้นการแสดงออกของ γ-H2AX (ED50 = 16.5 นาโนโมลาร์) และเพิ่มการแสดงออกของ p21(WAF1/CIP1) ในเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HCT116 ที่เป็น congenic ในลักษณะที่ไม่ขึ้นกับ DNMT แต่ขึ้นกับ p53 การยับยั้งการทรานส์แอคทิเวชันของ p53 ด้วย pifithrin-α หรือการยับยั้งกิจกรรมไคเนสของ ATM ด้วยทั้งตัวยับยั้ง ATM จำเพาะ KU-5593 หรือคาเฟอีน ทำให้การเพิ่มขึ้นของ p21(WAF1/CIP1) ถูกยกเลิก ซึ่งบ่งชี้ว่า การที่ DAC เพิ่มการแสดงออกของ p21(WAF1/CIP1) ในเซลล์ลูคีเมียนั้นขึ้นกับ p53 และ ATM
Hypothesis:
โดยสรุป DAC เพิ่มการแสดงออกของ TGF-เบต้า (WAF1/CIP1) ในลักษณะที่ไม่ขึ้นกับ DNMT ผ่านแกนสัญญาณความเสียหายของดีเอ็นเอ/ATM/p53


Premise:
Antibacterial peptide microcin J25 (MccJ25) ยับยั้งการถอดรหัสที่กระทำโดย bacterial RNA polymerase (RNAP) ผลทางชีวเคมีชี้ว่าการยับยั้งการถอดรหัสเกิดขึ้นในระดับการรับเข้า NTP หรือการจับ NTP โดย RNAP ผลทางพันธุกรรมชี้ว่าการยับยั้งการถอดรหัสต้องอาศัยบริเวณกำหนดที่กว้างขวางภายในช่องทางรองของ RNAP (หรือที่เรียกว่า "NTP-uptake channel" หรือ "pore") โดยบริเวณดังกล่าวประกอบด้วยกรดอะมิโนมากกว่า 50 ตำแหน่ง ผลทางชีวฟิสิกส์ชี้ว่าการยับยั้งการถอดรหัสเกี่ยวข้องกับการที่ MccJ25 จับอยู่ภายในช่องทางรองของ RNAP แบบจำลองเชิงโมเลกุลชี้ว่าการที่ MccJ25 จับอยู่ภายในช่องทางรองของ RNAP ทำให้ช่องทางรองของ RNAP ถูกอุดกั้น
Hypothesis:
เราสรุปว่า MccJ25 ยับยั้งการถอดรหัสโดยการอุดกั้นช่องทางรองของ RNAP


Premise:
มีการแนะนำให้ใช้น้ำตาลกลูโคสรับประทานเป็นการบำบัดความปวดระหว่างการเจาะเลือดดำในทารกแรกเกิด ยังไม่ชัดเจนว่าการแทรกแซงนี้ช่วยลดการใช้ออกซิเจนเกิน (O2), การสูญเสียพลังงาน หรือความไม่คงตัวของระบบหัวใจและหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับการเจาะเลือดหรือไม่ และว่าสารละลายกลูโคสปริมาตรน้อยกว่า 2 มล. มีประสิทธิผลหรือไม่ เราทดสอบสมมติฐานว่าสารละลายกลูโคสรับประทานช่วยบรรเทาการเพิ่มขึ้นของการใช้ออกซิเจนของทารกแรกเกิด การใช้พลังงาน (EE) และอัตราการเต้นหัวใจที่สัมพันธ์กับการเจาะเลือด สำหรับปริมาตรของสารละลายกลูโคส 2 ระดับ (2 และ 0.4 มล.) ในการทดลองแบบไปข้างหน้า สุ่ม มีกลุ่มควบคุม และปกปิดทั้งสองฝ่าย ทารกแรกเกิด 58 ราย (อายุครรภ์ 31–42 สัปดาห์; อายุหลังคลอด 1–7 วัน) ถูกสุ่มให้ได้รับกลูโคส 30% ปริมาตร 2 มล., กลูโคส 30% ปริมาตร 0.4 มล., หรือ น้ำ 2 มล. ทางปากก่อนการเจาะเลือด ปฏิกิริยาความปวดเชิงพฤติกรรมที่บันทึกวิดีโอถูกให้คะแนนด้วยแบบประเมินความปวดของทารกคลอดก่อนกำหนด (Premature Infant Pain Profile) มีการวัดระยะเวลาการร้อง การใช้ออกซิเจน (O2), EE (แคลอริเมตรีทางอ้อม) และอัตราการเต้นหัวใจ สารละลายกลูโคส 2 มล. ลดคะแนนความปวดและการร้องหลังการเจาะเลือดเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม [ค่ามัธยฐานของคะแนนความปวด 5.5 (ช่วงควอไทล์ 4–9) เทียบกับ 11 (7–12), p = 0.01; ค่ามัธยฐานของระยะเวลาการร้องครั้งแรก 0 วินาที (0–43 วินาที) เทียบกับ 13 วินาที (2–47 วินาที), p < 0.05 ตามลำดับ] สารละลายกลูโคส 0.4 มล. ไม่มีผล สารละลายกลูโคส 2 มล. ไม่ได้ลดการเพิ่มขึ้นของ O2 ระหว่างการเจาะเลือด (1.5 ± 0.2 mL/kg/นาที (น้ำ) เทียบกับ 1.7 ± 0.5 (กลูโคส 0.4 มล.) เทียบกับ 1.1 ± 0.2 (กลูโคส 2 มล.) (ค่าเฉลี่ย ± SEM)) เช่นเดียวกันไม่ได้ลด EE หรืออัตราการเต้นหัวใจ
Hypothesis:
เราสรุปว่า การให้กลูโคส 30% ปริมาตร 2 มล. ทางปากก่อนการเจาะเลือด ลดการแสดงออกของความปวดและการร้อง แต่ไม่ป้องกันการเพิ่มขึ้นของ O2, EE หรืออัตราการเต้นหัวใจ


Premise:
วัตถุประสงค์ของการทดลองทางคลินิกแบบ randomized, double-blind, placebo-controlled นี้ คือเพื่อพิจารณาว่า topical anesthetic agent (tetracaine) ให้การระงับปวดเฉพาะที่อย่างมีประสิทธิผลก่อนการเจาะ radial arterial หรือไม่ Tetracaine gel หรือ placebo gel ถูกทาให้ผู้ป่วยที่ได้รับการส่งตรวจ elective arterial blood gas ก่อนการเจาะหลอดเลือดแดง 45 นาที ผลลัพธ์หลักคือการรับรู้ความเจ็บปวดของผู้ป่วยที่เกี่ยวข้องกับหัตถการ ซึ่งวัดด้วย visual analog scale ผู้ป่วย 50 รายถูกสุ่มเข้าสู่การศึกษา โดย 24 รายได้รับ tetracaine และ 26 รายได้รับ placebo คะแนนความปวดเฉลี่ยบน visual analog scale เท่ากับ 26.2 +/- 32.6 ในกลุ่มที่ได้รับ tetracaine และ 23.8 +/- 27.4 ในกลุ่มที่ได้รับ placebo (P = 0.78) ระยะเวลาเฉลี่ยตั้งแต่การแทงผิวหนังครั้งแรกจนได้เลือดแดง 1 ml สำเร็จ เท่ากับ 70 +/- 103 s ในกลุ่ม tetracaine และ 49 +/- 48 s ในกลุ่ม placebo (P = 0.40) ความยากของการเจาะหลอดเลือดแดงตามการประเมินของ respiratory therapist ผู้ทำการทดสอบ เหมือนกันทั้งสองกลุ่ม (P = 0.86)
Hypothesis:
เราสรุปว่า pain gel ไม่ได้ลดการรับรู้ของผู้ป่วยต่อ tetracaine ที่เกี่ยวข้องกับการเจาะหลอดเลือดแดง และการใช้มันก็ไม่ได้ช่วยให้ขั้นตอนการตรวจ ABG ง่ายขึ้น


Premise:
การทดสอบ dexmedetomidine ซึ่งเป็น alpha(2) agonist ที่ลดอัตราการเต้นหัวใจ ความดันโลหิต และความเข้มข้นของ norepinephrine ในพลาสมา สำหรับความสามารถในการลดการตอบสนองต่อความเครียดระหว่างระยะฟื้นจากการดมยาสลบหลังการผ่าตัดหลอดเลือดขนาดใหญ่ ผู้ป่วยที่วางแผนผ่าตัดหลอดเลือดได้รับ dexmedetomidine (n = 22) หรือ placebo (n = 19) ทาง IV โดยเริ่มให้ 20 นาทีก่อนการ induction ของ anesthesia และให้ต่อเนื่องจนถึง 48 ชั่วโมงหลังสิ้นสุดการผ่าตัด ผู้ป่วยทุกคนได้รับ standardized anesthesia อัตราการเต้นหัวใจและความดันโลหิตแดงถูกควบคุมให้อยู่ในขอบเขตที่กำหนดไว้ล่วงหน้าโดยการปรับระดับ anesthetic และการใช้ vasoactive medications มีการ monitor อัตราการเต้นหัวใจ ความดันโลหิตแดง และความเข้มข้นของ inhaled anesthetic อย่างต่อเนื่อง การวัดเพิ่มเติมรวมถึง plasma และ urine catecholamines ระหว่างระยะฟื้นจากการดมยาสลบ อัตราการเต้นหัวใจช้ากว่าในกลุ่ม dexmedetomidine (73 +/- 11 bpm) เมื่อเทียบกับ placebo (83 +/- 20 bpm) (P = 0.006) และร้อยละของช่วงเวลาที่อัตราการเต้นหัวใจอยู่ในขอบเขต hemodynamic ที่กำหนดไว้ล่วงหน้าก็มากกว่าในกลุ่ม dexmedetomidine (P < 0.05) ระดับ plasma norepinephrine เพิ่มขึ้นเฉพาะในกลุ่ม placebo และต่ำกว่าอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม dexmedetomidine ในช่วงหลังผ่าตัดทันที (P = 0.0002)
Hypothesis:
เราสรุปว่า dexmedetomidine ลดทอนการเพิ่มขึ้นของอัตราการเต้นหัวใจและความเข้มข้นของ plasma norepinephrine ในระยะฟื้นจากการดมยาสลบ


Premise:
การศึกษาปฏิสัมพันธ์ในหนูระหว่าง intrathecal morphine กับ local anesthetics (bupivacaine และ lidocaine) ต่อ nociception (ทดสอบ hot plate 52.5°C และ paw pressure), motor function และ autonomic function (blood pressure [BP] และ heart rate [HR]) โดยประเมินในช่วงขนาดยาหลากหลายของทั้ง morphine และ local anesthetics ขนาดสูงของ intrathecal bupivacaine (75 μg) หรือ lidocaine (500 μg) ก่อให้เกิด motor block และ hypotension (เมื่อใช้ bupivacaine 150 μg) เป็นเวลาประมาณ 15 และ 7 นาที ตามลำดับ ในทางตรงกันข้าม ขนาดต่ำของ intrathecal bupivacaine (25 μg) และ lidocaine (100 μg) ทำให้เกิดเพียง transient motor weakness นาน 2 นาทีหรือน้อยกว่า เมื่อให้เดี่ยวๆ ทั้งสองชนิดไม่เปลี่ยนแปลงการตอบสนองใน hot plate หรือ paw pressure ที่ขนาดยา หรือในช่วงเวลาที่ตัวยาไม่มีผลต่อ motor function ตรงกันข้าม ที่ขนาดต่ำของ local anesthetic ทั้งสองชนิด หลังจากที่ transient motor weakness หายไป ขนาดยานี้ทำให้ dose-response curves ของ intrathecal morphine ทั้งใน hot plate และ paw pressure เลื่อนไปทางซ้ายอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งประเมินจากค่า maximum observed peak effect และ area under the time-effect curve ดังนั้น ตัวอย่างเช่น morphine ED50 (95% confidence intervals) สำหรับ morphine/saline เท่ากับ 1.7 μg (0.7-1.9) ใน hot plate และ 1.1 μg (0.8-1.4) ใน paw pressure เมื่อเทียบกับ morphine/bupivacaine (25 μg): hot plate 0.25 μg (0.21-0.42) และ paw pressure 0.28 μg (0.2-0.4) ไม่พบว่า intrathecal morphine มีผลใดๆ ต่อ dose-dependent effects ของ intrathecal bupivacaine ต่อ motor หรือ autonomic blockade ได้ผลลัพธ์ที่ใกล้เคียงกันกับ lidocaine ด้วย (พบว่า bupivacaine ไม่มีผลอย่างมีนัยสำคัญต่อ spinal cord morphine clearance)
Hypothesis:
เราสรุปว่า ขนาดต่ำของ intrathecal lidocaine และ bupivacaine ซึ่งเมื่อให้เดี่ยวๆ ไม่มี antinociceptive effect และให้ในช่วงเวลาที่ motor function ไม่บกพร่องอย่างชัดเจน สามารถเสริม antinociceptive activity ของ intrathecal morphine ใน hot plate และ paw pressure tests ได้อย่างมีนัยสำคัญ


Premise:
ในการศึกษาชนิดสุ่มแบบ double-blind เราตรวจสอบว่าการให้ midazolam ขนาดต่ำเป็นการเตรียมก่อนการ induction ของ anaesthesia ด้วย fentanyl มีผลต่อการเกิด fentanyl-induced thoracic rigidity (FITR) หรือไม่ พร้อมกันนี้ได้ประเมินผลของ rigidity ต่อระบบ cardiovascular และ respiratory ผู้ป่วย 16 รายที่เข้ารับการผ่าตัด coronary artery bypass surgery ถูกแบ่งเป็นสองกลุ่ม กลุ่ม midazolam (M) ได้รับ midazolam 0.075 mg/kg i.v. และกลุ่ม placebo (P) ได้รับ NaCl 0.9% ก่อนเริ่ม fentanyl induction 3 นาที ระหว่างช่วง induction ได้ประเมิน FITR ทางคลินิกด้วยมาตรา 3 ระดับ ตัวแปรด้าน haemodynamic และ respiratory ถูกเก็บก่อน anaesthesia induction เมื่อสิ้นสุดการให้ fentanyl infusion และ 3 นาทีหลัง intubation อัตราการเกิด FITR สูงในทั้งสองกลุ่ม: 63% ในกลุ่ม M และ 75% ในกลุ่ม P (n.s.) อย่างไรก็ดี ความรุนแรงน้อยกว่าในกลุ่ม M การเกิด rigidity มีผลต่อระบบ cardiovascular และ respiratory: central venous และ pulmonary capillary wedge pressures เพิ่มสูงขึ้นอย่างมากในผู้ป่วยที่มี FITR และมีการคั่งของ CO2 เนื่องจากไม่สามารถ ventilate ผู้ป่วยได้อย่างเพียงพอ
Hypothesis:
เราสรุปว่า midazolam ขนาดต่ำไม่สามารถป้องกัน FITR แต่อาจบรรเทาได้ และการเกิด rigidity ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของตัวแปรด้าน haemodynamic และ respiratory ระหว่าง induction


Premise:
Radio-frequency ablation (RFA) ใช้เป็นการรักษาแบบ minimally invasive สำหรับ inoperable hepatic tumors ปฏิกิริยา immunological หลัง RFA อาจมีบทบาทต่อการควบคุม tumor ที่สังเกตได้ ในการศึกษาของเรา ได้นำ VX2 carcinoma ไปปลูกถ่ายในตับของกระต่าย หลังจาก 3 สัปดาห์ tumors ได้รับการรักษาด้วย RFA หรือปล่อยไว้โดยไม่รักษา เก็บ peripheral blood lymphocytes ก่อนการปลูกถ่าย tumor ที่ 2 สัปดาห์หลังการผ่าตัด และทุก 2 สัปดาห์ถัดมา กระตุ้น T cells ด้วย lysates จาก tumor tissue หรือจาก nontumorous liver ซึ่งถูก load บน autologous antigen-presenting cells และกำหนดค่า stimulation index โดยการ incorporation ของ [(3)H]thymidine การเพิ่มขึ้น 3 เท่าจาก background หรือ controls ถือว่ามีนัยสำคัญ การกระตุ้นด้วย phytohemagglutinin ใช้เป็น positive control ทำการ necropsy สัตว์ และวิเคราะห์ liver และ tumor tissue ด้วย immunohistology เพื่อประเมิน T-cell infiltration T cells จากสัตว์ที่มี tumor (n = 9) และจากสัตว์ที่ได้รับ RFA (n = 11) ได้รับการตรวจใน follow-up study ระยะเวลาสังเกตหลังผ่าตัดเฉลี่ยคือ 45 วัน สัตว์ทั้ง 11 ตัวที่ได้รับ RFA แสดง circulating T cells ที่ถูก activated specifically ต่อ tumor antigens ตลอดช่วงการสังเกต โดยพบ dense T-cell infiltration ร่วมด้วย ตรงกันข้าม T cells ของกระต่ายที่มี tumor ซึ่งไม่ได้รับการรักษาไม่แสดงปฏิกิริยา และพบ T cell infiltration เพียงเล็กน้อย
Hypothesis:
เราสรุปว่า RFA กระตุ้น tumor-specific T-cell reaction ในโฮสต์ที่มี tumor ซึ่งโดยปกติไม่เกิดปฏิกิริยา โดยดูเหมือนว่าจะเอาชนะ immune tolerance และนำไปสู่การนำเสนอ tumor antigens ที่ปกติซ่อนเร้นอยู่


Premise:
ได้ตรวจสอบฤทธิ์ยับยั้งในหลอดทดลองของเจมไฟโบรซิลต่อกิจกรรมของไซโตโครม P450 (CYP) ได้แก่ CYP1A2 (phenacetin O-deethylation), CYP2A6 (coumarin 7-hydroxylation), CYP2C9 (tolbutamide hydroxylation), CYP2C19 (S‑mephenytoin 4'-hydroxylation), CYP2D6 (dextromethorphan O‑deethylation), CYP2E1 (chlorzoxazone 6‑hydroxylation) และ CYP3A4 (midazolam 1'-hydroxylation) โดยใช้ไมโครโซมตับมนุษย์แบบรวม การเกิดปฏิกิริยาระหว่างยาของเจมไฟโบรซิลในร่างกายถูกพยากรณ์จากข้อมูลในหลอดทดลองโดยใช้ค่า [I]/([I] + K(i)). เจมไฟโบรซิลยับยั้งกิจกรPremise:
ได้ตรวจสอบฤทธิ์ยับยั้งในหลอดทดลองของ gemfibrozil ต่อกิจกรรมของ cytochrome P450 (CYP) ได้แก่ CYP1A2 (phenacetin O-deethylation), CYP2A6 (coumarin 7-hydroxylation), CYP2C9 (tolbutamide hydroxylation), CYP2C19 (S-mephenytoin 4'-hydroxylation), CYP2D6 (dextromethorphan O-deethylation), CYP2E1 (chlorzoxazone 6-hydroxylation) และ CYP3A4 (midazolam 1'-hydroxylation) โดยใช้ pooled human liver microsomes การเกิดปฏิกิริยาระหว่างยาของ gemfibrozil ในร่างกายถูกพยากรณ์จากข้อมูลในหลอดทดลองโดยใช้ค่า [I]/([I] + K(i)) Gemfibrozil ยับยั้งกิจกรรมของ CYP2C9 อย่างแรงและแบบ competitive โดยมีค่า K(i) (IC(50)) เท่ากับ 5.8 (9.6) μM นอกจากนี้ gemfibrozil ยังแสดงฤทธิ์ยับยั้งต่อกิจกรรมของ CYP2C19 และ CYP1A2 ในระดับที่น้อยกว่า โดยมีค่า K(i) (IC(50)) เท่ากับ 24 (47) μM และ 82 (136) μM ตามลำดับ ที่ความเข้มข้นสูงถึง 250 μM gemfibrozil ไม่มีผลต่อกิจกรรมของ CYP2A6, CYP2D6, CYP2E1 และ CYP3A4 อย่างมีนัยสำคัญ โดยอาศัยค่า [I]/([I] + K(i)) ที่คำนวณจาก peak total (หรือ unbound) plasma concentration ของ gemfibrozil คาดว่าจะเกิดการยับยั้ง clearance ของ CYP2C9, CYP2C19 และ CYP1A2 substrates ได้ 96% (56%), 86% (24%) และ 64% (8%) ตามลำดับ
Hypothesis:
โดยสรุป CYP2C9 ยับยั้งกิจกรรมของ gemfibrozil ที่ความเข้มข้นที่มีความหมายทางคลินิก และนี่น่าจะเป็นกลไกที่ CYP2C9 มีปฏิสัมพันธ์กับยาที่เป็น substrate ของ gemfibrozil เช่น warfarin และ glyburideรมของ CYP2C9 อย่างแรงและแบบแข่งขัน โดยมีค่า K(i) (IC(50)) เท่ากับ 5.8 (9.6) ไมโครโมลาร์ นอกจากนี้ เจมไฟโบรซิลยังแสดงฤทธิ์ยับยั้งต่อกิจกรรมของ CYP2C19 และ CYP1A2 ในระดับที่น้อยกว่า โดยมีค่า K(i) (IC(50)) เท่ากับ 24 (47) ไมโครโมลาร์ และ 82 (136) ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ ที่ความเข้มข้นสูงถึง 250 ไมโครโมลาร์ เจมไฟโบรซิลไม่มีผลต่อกิจกรรมของ CYP2A6, CYP2D6, CYP2E1 และ CYP3A4 อย่างมีนัยสำคัญ โดยอาศัยค่า [I]/([I] + K(i)) ที่คำนวณจากความเข้มข้นสูงสุดในพลาสมาแบบรวมทั้งหมด (หรือแบบไม่จับโปรตีน) ของเจมไฟโบรซิล คาดว่าจะเกิดการยับยั้งการกำจัดของสารตั้งต้นของ CYP2C9, CYP2C19 และ CYP1A2 ได้ 96% (56%), 86% (24%) และ 64% (8%) ตามลำดับ
Hypothesis:
โดยสรุป CYP2C9 ยับยั้งการออกฤทธิ์ของเจมไฟโบรซิลที่ความเข้มข้นที่มีความหมายทางคลินิก และนี่น่าจะเป็นกลไกที่ CYP2C9 มีปฏิสัมพันธ์กับยาที่เป็นสารตั้งต้นของเจมไฟโบรซิล เช่น วาร์ฟารินและไกลบูไรด์


Premise:
Tofisopam เป็นยา anxiolytic ในกลุ่ม BZD มีสูตรเคมีคือ 1-(3,4-dimethoxyphenyl)-4-methyl-5-ethyl-7,8-dimethoxy-5H-2,3-benzodiazepine TZP แตกต่างจาก traditional 1,4-benzodiazepines ในตำแหน่งของอะตอมไนโตรเจน มีรายงานผู้ป่วย 3 รายที่ tofisopam เพิ่มระดับเลือดของ immunosuppressive agent ทำให้เกิด clinically relevant adverse drug reaction และจำเป็นต้องลดขนาดยาดังกล่าวหรือหยุดให้ tofisopam ยากดภูมิคุ้มกันที่ให้เป็น substrate ของระบบ CYP3A4 ดังนั้นจึงได้ศึกษาผลของ tofisopam ต่อเอนไซม์ CYP3A4 ในหลอดทดลอง โดยใช้ human recombinant CYP3A4 supersome Benzyloxy-4-(trifluoromethyl)-coumarin (BFC) ถูกใช้เป็น substrate Tofisopam ที่ความเข้มข้น 0.1, 0.25, 0.5, 0.75, 1 และ 5 μmol/l ยับยั้งการทำงานของเอนไซม์แบบ dose-dependent อัตราการยับยั้งกิจกรรมของเอนไซม์คือ 4%, 29%, 40%, 56%, 61% และ 94% ตามลำดับ และค่า IC50 เท่ากับ 0.8 μmol/l โดยค่า IC50 ของ positive control substance ketoconazole เท่ากับ 0.03 μmol/l ในการทดลองในหลอดทดลอง ผลการยับยั้งของ tofisopam ต่ำกว่าของ ketoconazole (potent CYP3A4 inhibitor) ประมาณหนึ่งลำดับขนาด
Hypothesis:
จากผลการทดลองในหลอดทดลอง สามารถสรุปได้ว่า tofisopam เป็นตัวยับยั้ง CYP3A4 แต่เพื่อชี้แจงความสำคัญทางคลินิกของ promotion นี้ ยังจำเป็นต้องมีข้อมูลการศึกษาในมนุษย์เพิ่มเติม


Premise:
ในการศึกษานี้ เราได้ตรวจสอบผลของ 24R,25-dihydroxyvitamin D(3) [24R,25(OH)(2)D(3)] ต่อการก่อมะเร็งลำไส้ใหญ่ในหนูที่ถูกชักนำด้วย N,N'-dimethylhydrazine (DMH) สำหรับการทดลองที่ 1 และ 2 หนูเพศผู้สายพันธุ์ F344 อายุ 6 สัปดาห์ จำนวน 50 ตัว ถูกแบ่งออกเป็นห้ากลุ่มในการทดลองแต่ละครั้ง สัตว์ได้รับการฉีด DMH ทางใต้ผิวหนัง (s.c.) สัปดาห์ละครั้ง เป็นเวลา 4 สัปดาห์ กลุ่มที่ 1–5 ได้รับ 24R,25(OH)(2)D(3) ผสมในอาหาร (ตามลำดับที่ 10, 5, 2.5, 1.25 หรือ 0 p.p.m.) ในระยะหลังการเริ่มก่อมะเร็ง (post-initiation) ในการทดลองที่ 1 และในระยะเริ่มก่อมะเร็ง (initiation) ในการทดลองที่ 2 เมื่อสิ้นสุดการทดลอง พบว่าจำนวนบริเวณคริปต์ที่ผิดปกติ (aberrant crypt foci; ACF) ในเยื่อบุลำไส้ใหญ่ของหนูลดลงตามขนาดยาในหนูที่ได้รับ 24R,25(OH)(2)D(3) ในระยะ post-initiation แต่ไม่พบผลดังกล่าวในระยะ initiation สำหรับการทดลองที่ 3 หนูเพศผู้อายุ 9 สัปดาห์ จำนวน 15 ตัว ถูกแบ่งเป็นสามกลุ่ม และได้รับ 24R,25(OH)(2)D(3) ในอาหาร (10, 5 หรือ 0 p.p.m.) สัตว์ถูกฉีด 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) ทางช่องท้อง (i.p.) 1 ชั่วโมงก่อนตาย เพื่อศึกษาการสังเคราะห์ดีเอ็นเอในเยื่อบุลำไส้ใหญ่ ดัชนีการติดฉลาก BrdU ลดลงตามขนาดยาในคริปต์ของลำไส้ใหญ่ของหนูที่ได้รับ 24R,25(OH)(2)D(3) ในการทดลองที่ 4 โดยใช้โพรโทคอลก่อมะเร็งหลายชนิด (multicarcinogenic) เราสามารถวิเคราะห์ข้อมูลได้ไม่เพียงในระดับอวัยวะเดียว แต่ในระดับทั้งตัวสัตว์ หนูเพศผู้ อายุ 6 สัปดาห์ จำนวน 68 ตัว ได้รับ DMH, N-methylnitrosourea, 2,2'-dihydroxy-di-n-propylnitrosamine, diethylnitrosamine และ N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine ในสัปดาห์ที่ 1–4 และจากนั้นได้รับ 24R,25(OH)(2)D(3) ในอาหาร (5, 1 หรือ 0 p.p.m.) ตลอดสัปดาห์ที่ 5–30 การตรวจการเกิดเนื้องอกและรอยโรคก่อนเนื้องอกในอวัยวะต่าง ๆ พบว่า 24R,25(OH)(2)D(3) ยับยั้งการเกิดเนื้องอกในลำไส้ใหญ่ได้อย่างมีนัยสำคัญ แต่ไม่มีผลต่อการเหนี่ยวนำเนื้องอกในอวัยวะอื่น
Hypothesis:
โดยสรุป ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้อย่างชัดเจนว่า 24R,25( Gastric Cancer )(2)D(3) ยับยั้งการก่อมะเร็งลำไส้ใหญ่อย่างจำเพาะ โดยไม่เพิ่มการก่อมะเร็งในอวัยวะอื่น เมื่อให้ในระยะหลังการเริ่มก่อมะเร็ง (post-initiation)


Premise:
การเกิดมะเร็งตับเป็นกระบวนการที่ซับซ้อนและมีหลายปัจจัย โดยการอักเสบภายในตับอย่างต่อเนื่องมีบทบาทสำคัญ แม้มีการสังเกตการแทรกซึมของเซลล์อักเสบในกระบวนการเกิดมะเร็งตับที่ถูกเหนี่ยวนำด้วยสารเคมี แต่บทบาททางพยาธิสรีรวิทยาของการตอบสนองการอักเสบยังไม่ชัดเจน เพื่อศึกษาคำถามนี้ ได้ติดตามการตอบสนองระดับโมเลกุลและระดับเซลล์ระหว่างการพัฒนาเนื้องอกตับในหนูที่ได้รับสารก่อมะเร็งตับไดเอทิลไนโตรซามีน (DEN) ในน้ำดื่ม (50 ไมโครกรัม/ลิตร) พบว่าการแสดงออกของ mRNA ของอินเตอร์เฟอรอนชนิดที่ I และชนิดที่ II (IFN-β และ IFN-γ ตามลำดับ) ภายในตับถูกชักนำให้เพิ่มขึ้น 2 เดือนก่อนการปรากฏของมะเร็งตับชนิดเฮปาโตเซลลูลาร์ ความสำคัญเชิงพยาธิกำเนิดของ IFN ถูกประเมินโดยติดตามการเกิดเนื้องอกในหนูที่ขาดตัวรับ IFN-α/β (IFN-α/βR KO) หรือขาดตัวรับ IFN-γ (IFN-γR KO) ทางพันธุกรรม หนู IFN-γR KO พัฒนาเนื้องอกน้อยกว่าหนู IFN-α/βR KO และหนูสายพันธุ์ปกติ (wt) แม้ว่าขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางของเนื้องอกจะไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างทั้งสามกลุ่ม ที่น่าสนใจ การศึกษาอิมมูโนฮิสโตเคมีแสดงว่า ร้อยละของโมโนไซต์/มาโครฟาจในกลุ่มเซลล์โมโนนิวเคลียร์ที่แทรกซึมลดลงอย่างมากในตับของหนู IFN-γR KO ซึ่งสอดคล้องกับข้อเท็จจริงที่ว่าการแสดงออกของไซโตไคน์ภายในตับลดลง และความเสียหายของดีเอ็นเอเชิงออกซิเดชันถูกเหนี่ยวนำให้น้อยกว่า
Hypothesis:
โดยสรุป IFN ชนิดที่ II แต่ไม่ใช่ IFN ชนิดที่ I อาจมีส่วนเกี่ยวข้องอย่างสำคัญยิ่งในระยะเริ่มก่อ ไม่ใช่ระยะส่งเสริม ของการเกิดมะเร็งตับที่ถูกเหนี่ยวนำโดย DEN โดยผ่านการเพิ่มการกระตุ้นของโมโนไซต์/มาโครฟาจ และท้ายที่สุดทำให้เกิดความเสียหายของดีเอ็นเอในเซลล์ตับ


Premise:
ได้ศึกษาผลของอายุต่อการใช้ประโยชน์ palmitic acid ในอาหาร หรือส่วนผสม palmitic และ oleic acid แบบ 50/50 ที่ระดับใส่ 8% ในสภาวะที่ไม่มีหรือมี cholic acid 0.2% และในสภาวะที่มี calcium ต่ำ (0.8%) หรือสูง (1.2%) โดยใช้ลูกไก่เนื้ออายุ 1-56 วัน พบปฏิสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.01) ระหว่างชนิดของ fatty acid ที่เสริมกับการมีหรือไม่มี cholic acid ต่อการเพิ่มน้ำหนักตัวและประสิทธิภาพการใช้อาหาร การเสริมอาหารด้วยส่วนผสม palmitic และ oleic acid ในสัดส่วนเท่ากันทำให้การกินอาหารลดลง เมื่อเทียบกับอาหารควบคุมและอาหารที่เสริม palmitic acid เดี่ยว มีปฏิสัมพันธ์ระหว่างอายุของไก่กับชนิดของ fatty acid ที่เสริมต่อ fat retention และ metabolizable energy (ME) ของอาหาร (P < 0.01) ยังพบปฏิสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญระหว่างชนิดของ fatty acid ที่เสริมกับการเติม cholic acid ต่อ fat retention และค่า ME ของอาหาร แม้ว่า cholic acid ลดการเกิด soap formation ระหว่างกระบวนการย่อย (P < 0.05) แต่การเพิ่มระดับ dietary calcium ทำให้สัดส่วนของ digesta fat ที่อยู่ในรูป soap เพิ่มขึ้น (P < 0.01) สัดส่วนของ digesta และ excreta fat ที่อยู่ในรูป soap ขึ้นกับชนิดของ fatty acid ที่เสริม การเติม free fatty acids ลงในอาหารไก่เนื้อทำให้ bone ash และปริมาณ bone calcium ลดลงเมื่อเทียบกับไก่ที่ได้รับอาหารควบคุม
Hypothesis:
สรุปได้ว่า ความสามารถของไก่เนื้อในการใช้ประโยชน์ dietary free fatty acids ขึ้นอยู่กับอายุที่ได้รับอาหาร ทั้งนี้ในทุกกรณี การเสริม cholic acid จะช่วยเพิ่มการใช้ประโยชน์ fatty acid


Premise:
วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือประเมินความสำคัญที่เป็นไปได้ของแคลซิโทนิน (CALC) ต่อการเริ่มเกิดภาวะฮัยโปแคลซีเมียแบบใต้คลินิก (การทดลองที่ 1) และต่อกลไกทางสรีรวิทยาที่อยู่เบื้องหลังการป้องกันภาวะฮัยโปแคลซีเมียในโคภายใต้ภาวะกรดเมตะบอลิก (การทดลองที่ 2 และ 3) ในการทดลองที่ 1 โคพันธุ์โฮลสไตน์ 15 ตัวที่เกิดภาวะฮัยโปแคลซีเมียใต้คลินิกโดยธรรมชาติในช่วง 5 วันแรกหลังคลอด ถูกจัดเป็นกลุ่มฮัยโปแคลซีเมียใต้คลินิกระดับต่ำ (LSH) เมื่อความเข้มข้นแคลเซียมในเลือดอยู่ระหว่าง 7.5 ถึง 8.5 mg/dL หรือเป็นกลุ่มฮัยโปแคลซีเมียใต้คลินิกระดับสูง (HSH) เมื่อความเข้มข้นแคลเซียมในเลือดอยู่ระหว่าง 6.0 ถึง 7.6 mg/dL เก็บตัวอย่างเลือดทุกวันตั้งแต่วัน -5 ถึง 5 เทียบกับวันคลอด เพื่อวัดความเข้มข้นของฮอร์โมนพาราไทรอยด์ (PTH), CALC และ 1,25(OH)2D3 ในการทดลองที่ 2 โคเพศผู้พันธุ์โฮลสไตน์ 24 ตัว (น้ำหนักตัว 497 ± 69 กก. และอายุ 342 ± 10.5 วัน) ถูกสุ่มให้ได้รับ 2 วิธีการทดลอง (ภาวะกรดเมตะบอลิก หรือ กลุ่มควบคุม) ชักนำภาวะกรดเมตะบอลิกด้วยการให้แอมโมเนียมคลอไรด์ทางปาก (2.5 mEq/วัน) เป็นเวลา 10 วัน แล้วจึงทำการเชือดสัตว์ เก็บตัวอย่างเลือดก่อนเชือดเพื่อวัด CALC, PTH, 1,25(OH)2D3 และเก็บตัวอย่างปัสสาวะ ไต ต่อมพาราไทรอยด์ และต่อมไทรอยด์ทันทีหลังเชือดเพื่อวัดการแสดงออกของยีนหลายชนิดในเนื้อเยื่อเหล่านี้ สุดท้าย ในการทดลองที่ 3 เราทดสอบกิจกรรมของ CALC ภายใต้ภาวะกรดเมตะบอลิกในสภาวะหลอดทดลอง โดยใช้การเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งเต้านม (T47D) แม้ว่า PTH จะมีแนวโน้มสูงกว่าในกลุ่ม HSH เมื่อเทียบกับ LSH แต่ระดับ 1,25(OH)2D3 ต่ำกว่าในโคกลุ่ม HSH (การทดลองที่ 1) ความเข้มข้น CALC ในเลือดไม่ถูกกระทบโดยความรุนแรงของภาวะฮัยโปแคลซีเมียใต้คลินิก แต่ได้รับอิทธิพลจากจำนวนวันหลังคลอด (การทดลองที่ 1) การแสดงออกของตัวรับ PTH (PTHR) ในไตเพิ่มขึ้นภายใต้ภาวะกรดเมตะบอลิก (การทดลองที่ 2) นอกจากนี้ กิจกรรมของ CALC ถูกบั่นทอนภายใต้ภาวะ pH เลือดเป็นกรด (การทดลองที่ 3)
Hypothesis:
โดยสรุป การเพิ่มขึ้นของ CALC ในโคกลุ่ม HSH หลังคลอดทำให้การฟื้นตัวของความเข้มข้นแคลเซียมในเลือดแย่ลง เพราะการตอบสนองของ PTHR ไม่เพียงพอที่จะกระตุ้น 1,25( Intramedullary tumors )2D3 และชดเชยผลของ CALC


Premise:
วาเนเดียมในรูปเมทวาเนเดต (VO3-) เป็นตัวยับยั้ง Na+, K+-ATPase ที่มีฤทธิ์แรง เนื่องจากออกซีแอนไอออนของวาเนเดียมและฟอสฟอรัสมีความคล้ายกัน จึงน่าสนใจที่จะตรวจดูว่า Al(OH)3 จะจำกัดการดูดซึมวาเนเดียมทางลำไส้ได้หรือไม่ เช่นเดียวกับที่มันจำกัดการดูดซึมของฟอสฟอรัส พบว่า VO3- ถูกจับยึดกับสารแขวนลอยของ Al(OH)3 อย่างมากที่ pH 5-8 หนูสายพันธุ์ Sprague-Dawley (180-300 กรัม) ถูกงดอาหารข้ามคืนและป้อนด้วยสายให้อาหารด้วย Na3VO4 5 ไมโครโมล ในน้ำเกลือ 0.9% ปริมาตร 1.0 มล. ซึ่งมี 48V ปริมาณ 1 ไมโครคิวรี สัตว์กลุ่มควบคุม (n = 12) ได้รับสารเจือจาง 1.0 มล. และสัตว์กลุ่มทดลอง (n = 12) ได้รับ Al(OH)3 1.0 มล. จากนั้นให้สารเจือจางและ Al(OH)3 วันละครั้ง เป็นเวลา 4 วัน รวบรวมปัสสาวะและอุจจาระแยกกันทุกวัน ในสัตว์กลุ่มควบคุม การกู้คืนรวมของ 48V (จากอุจจาระและปัสสาวะ) ตลอด 4 วัน เท่ากับ 86.6 ± 2.4% ของขนาดยาที่ให้ แม้ว่า Al(OH)3 จะเพิ่มการกู้คืนรวมของ 48V ได้เพียงเล็กน้อยและไม่มีนัยสำคัญ (93.6 ± 3.2%) แต่มันเพิ่มการขับถ่าย 48V ทางอุจจาระอย่างชัดเจนเมื่อเทียบกับทางปัสสาวะ (ควบคุม: อุจจาระ 69.1 ± 1.8%; ปัสสาวะ 12.5 ± 1.3%; Al(OH)3: อุจจาระ 85.7 ± 1.5%; ปัสสาวะ 7.9 ± 1.8%) หลังจากนั้นจึงทำการฆ่าสัตว์ทดลองและวัดการรับสารติดตามในเนื้อเยื่อ ลำดับของ 48V ที่ยังไม่ถูกขับออกในเนื้อเยื่อของทั้งสองกลุ่มคือ ไต > กระดูก > ตับ > ลำไส้ > กล้ามเนื้อ แต่ระดับในเนื้อเยื่อของกลุ่มควบคุมสูงกว่าในสัตว์ที่ได้รับ Al(OH)3 อย่างสม่ำเสมอ นอกจากนี้ยังได้ตรวจสอบความสามารถของ Al(OH)3 ในการกำจัด VO3- ที่เกิดขึ้นภายในร่างกาย โดยฉีด 48V เข้าช่องท้อง (ip) (n = 20) สัตว์ครึ่งหนึ่งได้รับสารเจือจาง และอีกครึ่งหนึ่งได้รับ Al(OH)3 1.0 มล. ทางสายให้อาหาร วันละครั้ง เป็นเวลา 4 วัน ไม่พบความแตกต่างในรูปแบบการกระจายตัวในเนื้อเยื่อและการขับถ่ายของ 48V
Hypothesis:
สรุปได้ว่า Al(OH)3 อาจป้องกันการสะสมของ VO3- ในเนื้อเยื่อที่มาจากอาหาร โดยลดการดูดซึม VO3- ทางลำไส้


Premise:
การศึกษาทางกลไกและระบาดวิทยาให้หลักฐานจำนวนมากถึงความสัมพันธ์เชิงป้องกันระหว่างการบริโภค calcium กับการเกิด colorectal cancer (CRC) รายใหม่ แม้ว่าความสัมพันธ์นี้ยังไม่ถูกยืนยันโดย randomized controlled trials (RCTs) ระยะสั้นเกี่ยวกับ CRC แต่การทดลองแสดงประโยชน์ต่อ adenomas ซึ่งเป็นภาวะก่อนเป็น CRC เพื่อจัดการกับความไม่สอดคล้องนี้ เราได้ทำการวิเคราะห์อภิมานแบบ dose-response จำแนกตามแหล่งที่มาของการบริโภค calcium โดยอิงจากการศึกษาเชิงสังเกตแบบ prospective ที่ตีพิมพ์จนถึงเดือนธันวาคม 2013 ซึ่งสืบค้นจาก PubMed, Embase และ BIOSIS ได้คำนวณ summary relative risks (RRs) และ 95% confidence intervals (CIs) โดยใช้ random-effects model สำหรับการบริโภค total calcium ทุกการเพิ่มขึ้น 300 mg/day มีความสัมพันธ์กับความเสี่ยง CRC ที่ลดลงประมาณ 8% (summary RR = 0.92, 95% CI = 0.89-0.95, I² = 47%, 15 การศึกษา ผู้ป่วย 12,305 ราย, intake = 250-1,900 mg/day, follow-up = 3.3-16 ปี) แม้ว่าความเสี่ยงจะลดลงชันน้อยลงในช่วงการบริโภค total calcium ที่สูงกว่า (P(non-linearity) = 0.04) แต่ระดับความโค้งมีเพียงเล็กน้อย และนัยสำคัญทางสถิติของ non-linearity ไวต่อการศึกษาเพียงฉบับเดียว สำหรับ supplementary calcium ทุกการเพิ่มขึ้น 300 mg/day มีความสัมพันธ์กับความเสี่ยง CRC ที่ลดลงประมาณ 9% (summary RR = 0.91, 95% CI = 0.86-0.98, I² = 67%, 6 การศึกษา ผู้ป่วย 8,839 ราย, intake = 0-1,150 mg/day, follow-up = 5-10 ปี) การทดสอบ non-l


Premise:
การลดการสร้าง methane ในสัตว์เคี้ยวเอื้องเป็นเป้าหมายสำคัญมาหลายทศวรรษ Free lauric acid ซึ่งทราบว่ายับยั้งการสร้าง methane ใน rumen มีความน่ากินต่ำ ดังนั้นในการศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินประสิทธิภาพการลด mitigation ของรูป esterified ของมัน (monolaurin) นอกจากนี้ยังได้กำหนด ¹³C-isotope abundance (δ¹³C) และ ¹³C-¹²C fractionation ระหว่าง methanogenesis และ fermentation เพื่อประเมิน microbial C-isotope preferences ที่อาจมีอยู่ โดยใช้ rumen simulation technique ได้บ่มอาหารพื้นฐาน 4 สูตร ซึ่งจำแนกโดยพืช C3 ได้แก่ grass (hay) และ wheat (straw และ grain) หรือพืช C4 (¹³C excess เมื่อเทียบกับพืช C3) คือ maize (straw และ grain) และส่วนผสมของสองชนิดหลัง โดยบ่มทั้งแบบมีและไม่มีการเติม monolaurin (50 g/kg dietary DM) เมื่อเติมกับ hay, monolaurin ไม่ส่งผลต่อ methanogenesis อย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเติมกับสูตรอื่นๆ (P < 0.05 สำหรับ wheat-based diet) methane formation ลดลง Monolaurin ทำให้ fibre disappearance ลดลง (มีผลน้อยที่สุดกับ hay diet), acetate:propionate ratio ลดลง และ protozoal counts ลดลง Feed residues และ SCFA มีค่า δ¹³C เหมือนกับ diets Methane พร่องใน ¹³C ขณะที่ CO₂ มี ¹³C enriched เมื่อเทียบกับ diets การเติม monolaurin ทำให้ CO₂ มี ¹³C depletion และ CH₄ มี enrichment (อย่างหลังพบเฉพาะใน hay diet)
Hypothesis:
สรุปว่า monolaurin สามารถลด methanogenesis ได้อย่างมีประสิทธิภาพใน straw-grain diets แม้ว่าผลนี้อาจอธิบายได้บางส่วนจากการที่ fibre disappearance ลดลงควบคู่กัน


Premise:
เราศึกษาความสามารถของ sucralfate ในการป้องกัน secretagogue-induced duodenal ulcer ในหนู Sucralfate ให้ทางปากในขนาด 50 mg, 100 mg หรือ 200 mg ก่อนเริ่ม และที่ 3 และ 6 ชั่วโมงหลังจากเริ่มให้ pentagastrin และ bethanechol แบบ continuous infusion 24 ชั่วโมง สัตว์ทดลองถูกทำให้ตายที่ 24 ชั่วโมง และทำการให้คะแนนจำนวนและความรุนแรงของแผล พบแผลในหนูกลุ่มควบคุมทั้ง 9 ตัว, ใน 8 จาก 9 ตัวในกลุ่มขนาด 50 mg, ใน 4 จาก 9 ตัวในกลุ่มขนาด 100 mg, และเพียง 1 จาก 9 ตัวในกลุ่มขนาด 200 mg ของ sucralfate
Hypothesis:
เราสรุปว่า tubastatin A ป้องกันการเกิด secretagogue-induced duodenal ulcer ในหนูได้


Premise:
ได้ศึกษาผลยับยั้งของการที่ duodenum สัมผัสกับ acid และ hyperosmolal solutions ต่อ pentagastrin-stimulated gastric acid secretion ในหนูที่มีสติซึ่งติดตั้ง chronic gastric fistula และ duodenal Thiry-Vella loop Loop ถูกท้าทายด้วย saline, HCl หรือ hyperosmolal polyethylene glycol การหลั่ง gastric acid วัดจากตัวอย่างที่ได้จาก gastric fistula วัดความเข้มข้นของ gut peptides ใน duodenal perfusates ที่เก็บทุก 30 นาที และในตัวอย่าง plasma ที่เก็บทั้งในช่วงที่มี stimulated acid secretion เพียงอย่างเดียว และเมื่อสิ้นสุดการทดลองร่วมกับ luminal challenges ของ loops ระหว่าง pentagastrin-stimulated gastric acid secretion, luminal perfusion ของ duodenal loop ด้วย acid ทำให้การหลั่ง acid ถูกยับยั้ง (P < 0.001) และเกิดการหลั่ง somatostatin อย่างเด่นชัดทั้งสู่ lumen (P < 0.001) และเข้าสู่ circulation (P < 0.05) นอกจากนี้ neurotensin (P < 0.01) และ vasoactive intestinal peptide (P < 0.01) มีการหลั่งสู่ lumen แต่ไม่เข้าสู่ circulation เมื่อ perfusion ของ duodenal loop ด้วย hyperosmolal polyethylene glycol, acid secretion ถูกยับยั้ง (P < 0.05) และมีเพียง somatostatin เท่านั้นที่ถูกหลั่งออกสู่ luminal side (P < 0.01)
Hypothesis:
เราสรุปว่า luminal perfusion ของ duodenal loop ด้วย acid ทำให้ pentagastrin-stimulated gastric acid secretion ถูกยับยั้ง


Premise:
ในการศึกษานี้ เราประเมินปัจจัยที่มีผลต่อการกวาดล้างกรดในหลอดอาหารในอาสาสมัครปกติ ได้ฉีดสารละลาย HCl 0.1 N ปริมาตรโบลัส 15 มล. (pH 1.2) เข้าไปในหลอดอาหาร และให้อาสาสมัครกลืนทุกๆ 30 วินาที การติดตามด้วยแมนโนเมทรีและการเฝ้าระวังค่า pH แสดงให้เห็นว่าการกวาดล้างกรดของหลอดอาหารเกิดขึ้นเป็นชุดของการเพิ่มค่า pH แบบเป็นขั้นๆ โดยแต่ละขั้นสัมพันธ์กับลำดับคลื่นเพอริสตัลซิสที่ถูกกระตุ้นโดยการกลืน ระหว่างลำดับคลื่นเพอริสตัลซิส การเพิ่มขึ้นของ pH มีน้อยมาก การกระตุ้นน้ำลายด้วยยาอมชนิดโลเซนจ์ช่วยปรับปรุงการกวาดล้างกรดอย่างมาก ในขณะที่การดูดน้ำลายในช่องปากทำให้การเพิ่มค่า pH แบบเป็นขั้นในหลอดอาหารหายไปและทำให้การกวาดล้างกรดล่าช้าอย่างมาก การทดแทนน้ำลายที่ถูกดูดออกด้วยสารละลายไบคาร์บอเนตทำให้เกิดการเพิ่มค่า pH ในหลอดอาหารแบบเป็นขั้นขึ้นอีกครั้งและฟื้นการกวาดล้างกรดให้กลับสู่ภาวะใกล้ปกติ ในขณะที่การทดแทนด้วยน้ำเปล่าเพียงอย่างเดียวไม่ช่วยปรับปรุงการกวาดล้างกรด ผลคล้ายกับยาอมโลเซนจ์ เบทาเนคอล (5 มก. ฉีดใต้ผิวหนัง) ช่วยปรับปรุงการกวาดล้างกรดในหลอดอาหาร แต่การปรับปรุงนี้ถูกยับยั้งโดยการดูดน้ำลายในช่องปาก ซึ่งทำให้การกวาดล้างกรดล่าช้าอย่างมาก การเปลี่ยนท่าจากนอนราบเป็นนั่งมีแนวโน้มช่วยให้การกวาดล้างกรดดีขึ้นเล็กน้อย แต่การปรับปรุงนี้ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ
Hypothesis:
เราสรุปว่าในบุคคลปกติ (ก) การกลืนพาน้ำลายเข้าสู่หลอดอาหาร และเพอริสตัลซิสช่วยระบายของเหลวภายในหลอดอาหารลงสู่กระเพาะอาหาร (ข) การที่น้ำลายซึ่งถูกพาเข้าสู่หลอดอาหารทุกครั้งที่กลืนไปทำให้กรดเป็นกลาง อธิบายการเกิดการกวาดล้างกรดในรูปแบบการเพิ่มค่า pH แบบเป็นขั้น (ค) การที่เบทาเนคอลช่วยให้การกวาดล้างกรดดีขึ้นเกิดจากการกระตุ้นการหลั่งน้ำลาย และ (ง) แรงโน้มถ่วงมีบทบาทน้อยต่อการกวาดล้างกรดในหลอดอาหารเมื่อมีคลื่นเพอริสตัลซิสแบบกวาดลอกที่ปกติ


Premise:
ได้ทดสอบผลของ cisapride ซึ่งเป็น new gastrokinetic drug ต่อ gastric emptying และ duodenogastric reflux ของ bile salts ในอาสาสมัครสุขภาพดี โดยเป็นการทดลองแบบ placebo-controlled double-blind randomized cross-over อาสาสมัคร 20 รายได้รับ cisapride ขนาด 10 mg tid orally หรือได้รับ matching placebo tablets เป็นเวลา 1 สัปดาห์ ในวันทดสอบ ศึกษาผู้เข้าร่วมด้วย marker technique ร่วมกับ gastric intubation ทั้งใน fasting state และหลังให้ mixed liquid meal Cisapride ไม่มีผลต่อ gastric secretion และ gastric emptying พบแนวโน้มว่า reflux rates ลดลงหลังใช้ cisapride ทั้งใน fasting (0.63 +/- 0.14 versus 0.38 μmol/min +/- 0.05 SEM) และหลัง feeding (2.60 +/- 0.61 versus 1.88 μmol/min +/- 0.33 SEM) การเปลี่ยนแปลงนี้เกิดจากการลดลงของ high placebo reflux rates: การลดลงของ reflux rate ที่เกิดจาก cisapride มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับความสูงของ placebo reflux rate (p < 0.001) พบความสัมพันธ์ในทำนองเดียวกันสำหรับ gastric bile salt concentration (p < 0.001)
Hypothesis:
สรุปได้ว่า cisapride ช่วยลด high bile salt reflux


Premise:
วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือประเมิน nervous และ humoral pathways ที่เกี่ยวข้องกับ short-chain fatty acid (SCFA)-induced ileal brake ในสุกรที่รู้สึกตัว บทบาทของ extrinsic ileal innervation ถูกประเมินหลังการให้ SCFA ใน innervated และ denervated Babkin's ileal loops และทำการวัด gastric motility ด้วย strain gauges ประเมินความเข้มข้นของ peptide YY (PYY) และ glucagon-like peptide-1 (GLP-1) ในทั้งสองภาวะ ความเป็นไปได้ของการเกี่ยวข้องของ absorbed SCFA ถูกทดสอบโดยการให้ acetate ทาง intravenous การให้ ileal SCFA ใน intact terminal ileum ทำให้ amplitude ของ distal และ terminal antral contractions ลดลง (33 +/- 1.2 vs. 49 +/- 1.2% ของ maximal amplitude ที่บันทึกก่อนการให้) และเพิ่ม frequency (1.5 +/- 0.11 vs. 1.3 +/- 0.10/min) พบผลคล้ายกันระหว่างการให้ SCFA ใน ileal innervated และ denervated loops (amplitude, 35 +/- 1.0 และ 34 +/- 0.8 vs. 47 +/- 1.3 และ 43 +/- 1.2%; frequency, 1.4 +/- 0.07 และ 1.6 +/- 0.06 vs. 1.1 +/- 0.14 และ 1.0 +/- 0.12/min) Intravenous acetate ไม่เปลี่ยนแปลง amplitude และ frequency ของ antral contractions ความเข้มข้นของ PYY แต่ไม่ใช่ GLP-1 เพิ่มขึ้นระหว่างการให้ SCFA ใน innervated และ denervated loops
Hypothesis:
เราสรุปว่า extrinsic ileal innervation เป็นตัวกลางให้เกิด SCFA-induced brake ของ gastric motility


Premise:
เป็นที่ยอมรับโดยทั่วไปว่า Ca(2+)-induced Ca(2+) release (CICR) ที่สื่อกลางโดยช่องแคลเซียมชนิด L (L-type Ca(2+) channel) เป็นโหมดหลักของการเชื่อมโยงการกระตุ้น-การหดตัว (excitation-contraction; E-C coupling) ในหัวใจสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมวัยผู้ใหญ่ และว่าแทบไม่มี CICR ที่ตรวจวัดได้ในทารกแรกเกิด อย่างไรก็ตาม เราพบว่าการหดตัวของเซลล์ในหัวใจทารกแรกเกิดลดลงอย่างมีนัยสำคัญหลังจากทำให้แซโครพลาสมิกเรติคิวลัม (SR) ขาด Ca(2+) ด้วยคาเฟอีน ดังนั้น การศึกษานี้จึงตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงของ CICR ตามพัฒนาการในไมโอไซต์ห้องล่างของหัวใจกระต่ายที่อายุ 3, 10, 20 และ 56 วัน เราพบว่าผลการยับยั้งของไนเฟดิพีน (Nif; 15 ไมโครโมลาร์) ซึ่งเป็นตัวยับยั้งกระแส Ca(2+) ชนิด L [I(Ca)] ทำให้การลดลงของทรานเซียนต์ Ca(2+) เมื่อทำให้ดีโพลาไรซ์มีขนาดมากขึ้นตามอายุ [จากประมาณ 15% ในไมโอไซต์อายุ 3 วัน (3d) เป็นประมาณ 90% ในไมโอไซต์อายุ 56 วัน (56d)] ทรานเซียนต์ของ Ca(2+) ที่เหลืออยู่ในกลุ่มอายุน้อยในสภาวะมี Nif ถูกกำจัดได้ด้วยการยับยั้งตัวแลกเปลี่ยน Na(+)/Ca(2+) (NCX) โดยการเติม KB-R7943 10 ไมโครโมลาร์ (KB-R) ตามมา นอกจากนี้ ทรานเซียนต์ของ Ca(2+) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญหลังจากทำให้ Ca(2+) ใน SR หมดไปด้วยคาเฟอีนในทุกช่วงอายุ แม้ว่าผลจะเด่นชัดกว่าในกลุ่มอายุมาก (จากประมาณ 40% ในไมโอไซต์ 3d เป็นประมาณ 70% ในไมโอไซต์ 56d) ทรานเซียนต์ของ Ca(2+) ที่ไวต่อ Ca(2+) ของ SR นี้ในระยะพัฒนาการเริ่มแรกไม่ไวต่อ Nif แต่ไวต่อการเติม KB-R ตามมา บ่งชี้ว่ามี CICR ที่สื่อกลางโดย NCX ซึ่งลดลงอย่างมีนัยสำคัญตามอายุ (จากประมาณ 37% ในไมโอไซต์ 3d เป็นประมาณ 0.5% ในไมโอไซต์ 56d) ตรงกันข้าม CICR ที่สื่อกลางโดย I(Ca) เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญตามอายุ (จากประมาณ 10% ในไมโอไซต์ 3d เป็นประมาณ 70% ในไมโอไซต์ 56d) เกนของ CICR ที่ประเมินจากปริพันธ์ของทรานเซียนต์ Ca(2+) ของ CICR หารด้วยปริพันธ์ของทรานเซียนต์ตัวกระตุ้น Ca(2+) ของมัน มีค่าน้อยกว่าเมื่อสื่อกลางโดย NCX (ประมาณ 1.0 สำหรับไมโอไซต์ 3d) เมื่อเทียบกับเมื่อสื่อกลางโดย I(Ca) (ประมาณ 3.0 สำหรับไมโอไซต์ 56d)
Hypothesis:
เราสรุปว่า CICR ที่สื่อกลางโดย NCX ซึ่งมีประสิทธิภาพต่ำกว่า เป็นโหมดเด่นของ CICR ในระยะพัฒนาการเริ่มแรก และจะค่อยๆ ลดลงเมื่อ CICR ที่สื่อกลางโดยช่องแคลเซียมชนิด L ของ Ca(3+) ซึ่งมีประสิทธิภาพสูงกว่า มีบทบาทเด่นมากขึ้นตามพัฒนาการ


Premise:
GS-458967, 6-(4-(Trifluoromethoxy)phenyl)-3-(trifluoromethyl)-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pyridine (GS967) เป็นตัวยับยั้งช่องโซเดียมชนิดใหม่ที่เพิ่งมีการอธิบาย ซึ่งแสดงฤทธิ์ต้านภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะอย่างแรงในแบบจำลองทั้งในหลอดทดลองและในสิ่งมีชีวิตหลายแบบ กลไกต้านภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะถูกระบุว่าเกิดจากการยับยั้งกระแสโซเดียมระยะปลายอย่างเด่นชัด อย่างไรก็ดี ยังไม่มีรายงานการศึกษาระบบอย่างเป็นระบบเกี่ยวกับผลของสารนี้ต่อช่องโซเดียมที่แยกเดี่ยว ในที่นี้ เราได้ตรวจสอบผลของ GS967 ต่อกระแสโซเดียมช่วงพีค (INaP) และช่วงปลาย (INaL) ที่บันทึกจากเซลล์ซึ่งแสดงออกช่องโซเดียมชนิดควบคุมด้วยแรงดันของหัวใจมนุษย์แบบเฮเทอโรโลกัส ซึ่งเป็นช่องโซเดียมหลักของหัวใจ ดังที่เคยมีรายงาน เราพบว่า GS967 ทำให้เกิดการบล็อกแบบโทนิกของ INaL (63%) มากกว่า INaP (19%) อย่างมีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม GS967 ยังทำให้ INaP ลดลงในลักษณะที่ขึ้นกับความถี่ สอดคล้องกับการบล็อกขึ้นกับการใช้งาน (use-dependent block; UDB) GS967 ก่อให้เกิด UDB ของ INaP ที่แรงกว่า (IC50 = 0.07 µM) เมื่อเทียบกับ ranolazine (16 µM) และ lidocaine (17 µM) การบล็อกขึ้นกับการใช้งานสามารถอธิบายได้ดีที่สุดโดยการทำให้การฟื้นตัวจากการไม่ทำงานแบบเร็วและแบบช้าช้าลงอย่างมีนัยสำคัญ พร้อมทั้งเพิ่มการไม่ทำงานแบบช้าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อมี GS967 นอกจากนี้ พบว่า GS967 ก่อให้เกิดผลแบบเดียวกันนี้ต่อการกลายพันธุ์ต้นแบบของกลุ่มอาการ Long QT (delKPQ) การกลายพันธุ์ที่ออกแบบไว้ที่ตำแหน่งปฏิสัมพันธ์ของยาชาเฉพาะที่ (F1760A) ลดทอนผลของ GS967 ต่อ UDB ได้บางส่วน แต่ไม่มีผลต่อการบล็อก INaL แบบโทนิก
Hypothesis:
เราสรุปว่า GS967 เป็นตัวยับยั้ง INaL อย่างจำเพาะมากกว่า แต่ยังออกฤทธิ์แรงต่อการไม่ทำงานแบบช้าและการฟื้นตัวจากการไม่ทำงาน ซึ่งก่อนหน้านี้ยังไม่เคยมีรายงาน ส่งผลให้เกิด UDB ในระดับมากซึ่งไม่ได้ขึ้นกับตำแหน่งปฏิสัมพันธ์ที่ทราบกันของยาชาเฉพาะที่ทั้งหมด


Premise:
เราใช้เทคนิคแพตช์แคลมป์แบบโฮลเซลล์เพื่อศึกษากระแสชั่วครู่แบบออกนอกเซลล์ของเซลล์เอเทรียมเดี่ยวของกระต่าย พบว่ากระแสชั่วครู่ขนาดใหญ่ IA ถูกบล็อกโดย 4-อะมิโนไพริดีน (4AP) และ/หรือโดยโฮลดิงโพเทนเชียลที่ถูกดีโพลาไรซ์ หลังจากบล็อก IA แล้วยังมีกระแสชั่วครู่ที่เล็กกว่าคงเหลืออยู่ ซึ่งถูกบล็อกอย่างสมบูรณ์โดยนิโซลดิพีน แคดเมียม ไรยาโนดีน หรือคาเฟอีน บ่งชี้ว่ากระแสที่ดื้อต่อ 4AP ทั้งหมดถูกกระตุ้นโดยแคลเซียมทรานเซียนต์ที่ก่อให้เกิดการหดตัว ทั้งกระแสโพแทสเซียมที่ถูกกระตุ้นโดยแคลเซียมและกระแสแคตไอออนชนิดไม่จำเพาะที่ถูกกระตุ้นโดยแคลเซียมดูเหมือนไม่ได้มีส่วนต่อกระแสชั่วครู่ที่ดื้อต่อ 4AP กระแสชั่วครู่ดังกล่าวหายไปเมื่อทำให้ ECl เท่ากับศักย์พัลส์ และยังพบอยู่ได้ในสารละลายภายในและภายนอกที่ปราศจากโพแทสเซียม นอกจากนี้ กระแสดังกล่าวยังถูกบล็อกโดยตัวยับยั้งการขนส่งแอนไอออน SITS และ DIDS และศักย์กลับขั้วของความสัมพันธ์กระแส-แรงดันแบบทันทีเปลี่ยนแปลงตามคลอไรด์นอกเซลล์ ตามที่คาดหมายสำหรับการนำไฟฟ้าที่เลือกจำเพาะต่อคลอไรด์
Hypothesis:
เราสรุปว่าแคลเซียมทรานเซียนต์ที่ก่อให้เกิดการหดตัวในเซลล์เอเทรียมของกระต่ายจะกระตุ้นการนำไฟฟ้าที่เลือกจำเพาะต่อคลอไรด์ และการนำไฟฟ้านี้มีส่วนต่อกระแสชั่วครู่ที่ดื้อต่อ 4AP


Premise:
การแสดงออกของ phospholemman (PLM) เพิ่มขึ้นในหัวใจหนูหลัง myocardial infarction (MI) การ overexpression ของ PLM ใน normal adult rat cardiac myocytes ทำให้ contractile function และ cytosolic Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)) homeostasis เปลี่ยนแปลงไปในลักษณะคล้ายกับที่พบใน post-MI myocytes ในการศึกษานี้ เราทดสอบว่า PLM downregulation ใน normal adult rat myocytes จะทำให้ contractility และ [Ca(2+)](i) transient เปลี่ยนแปลงในทิศทางตรงกันข้ามกับที่พบใน post-MI myocytes หรือไม่ เมื่อเทียบกับ control myocytes ที่ติดเชื้อ adenovirus (Adv) ซึ่งแสดง green fluorescent protein (GFP) เพียงอย่างเดียว myocytes ที่ติดเชื้อ Adv ซึ่งแสดงทั้ง GFP และ rat antisense PLM (rASPLM) มีระดับ PLM protein ต่ำลง 23% (P < 0.012) ที่ 3 วัน แต่ไม่พบความแตกต่างของระดับ sarcoplasmic reticulum (SR) Ca(2+)-ATPase, Na(+)/Ca(2+) exchanger (NCX1), Na(+)-K(+)-ATPase และ calsequestrin SR Ca(2+) uptake และ whole cell capacitance ไม่ได้รับผลกระทบจากการรักษาด้วย rASPLM การ relaxation จาก caffeine-induced contracture เกิดเร็วขึ้น และ NCX1 current amplitudes สูงขึ้นใน rASPLM myocytes บ่งชี้ว่า PLM downregulation เพิ่ม NCX1 activity ใน native rat cardiac myocytes การทดลอง coimmunoprecipitation แสดงให้เห็น association ของ PLM กับ NCX1 ที่ 0.6 mM [Ca(2+)](o), rASPLM myocytes มี contraction และ [Ca(2+)](i) transient amplitudes ต่ำกว่า control GFP myocytes อย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.003) ที่ 5 mM [Ca(2+)](o) ทั้ง contraction และ [Ca(2+)](i) transient amplitudes สูงกว่าใน rASPLM myocytes แบบแผนของ contractile และ [Ca(2+)](i) transient behavior ใน rASPLM myocytes นั้นตรงกันข้ามกับที่พบใน post-MI rat myocytes
Hypothesis:
เราสรุปว่า downregulation ของ PLM ใน normal rat cardiac myocytes เพิ่ม NCX1 function และมีผลต่อ [Ca(2+)](i) transient และ contraction amplitudes


Premise:
การเพิ่มขึ้นของ [K+]o ซึ่งก่อให้เกิดการดีโพลาไรซ์ของศักย์เยื่อหุ้มเซลล์ขณะพักและทำให้กระแสโซเดียมเข้าสู่เซลล์ (INa) ถูกอินแอคทิเวตบางส่วน เชื่อกันว่ามีบทบาทสำคัญในการชะลอการนำสัญญาณระหว่างภาวะกล้ามเนื้อหัวใจขาดเลือด ในการเตรียมชิ้นเนื้อห้องล่างหัวใจแบบหลายเซลล์ มีข้อเสนอว่าการเพิ่ม [K+]o ทำให้ Vmax ลดลงมากกว่าที่คาดจากการดีโพลาไรซ์ของเยื่อหุ้มเพียงอย่างเดียว กลไกของผลที่ไม่ขึ้นกับแรงดันไฟฟ้าของ [K+]o นี้ยังไม่ทราบแน่ชัด และความสำคัญของมันในเซลล์หัวใจเดี่ยวยังไม่ได้รับการกำหนด เราได้ตรวจสอบผลที่ไม่ขึ้นกับแรงดันไฟฟ้าของ [K+]o ที่เพิ่มขึ้นต่อ INa และความชันช่วงขึ้นของศักย์กระทำในไมโอไซต์เอเทรียมและเวนทริเคิลของกระต่ายที่แยกเดี่ยว ภายใต้สภาวะโวลเทจแคลมป์และเคอร์เรนต์แคลมป์ ความเข้มข้น [K+] ในสารละลายที่ไหลผ่านถูกปรับจาก 5 mmol/L เป็น 14 หรือ 24 mmol/L ขณะที่ [Na+] คงไว้ที่ 150 mmol/L ในเซลล์เอเทรียมที่เพาะเลี้ยงและแพตช์แบบ outside-out ที่ตัดออกจากเซลล์เอเทรียมและเวนทริเคิลที่แยกใหม่ แอมพลิจูดและจลนพลศาสตร์ของ INa ไม่เปลี่ยนแปลงเมื่อเพิ่ม [K+]o ในเซลล์เอเทรียม ศักย์กระทำที่กระตุ้นจากศักย์คงที่ -70 mV มี Vmax (114.9 ± 5.7 เทียบกับ 112.2 ± 4.8 V/s, ค่าเฉลี่ย ± SEM, n = 6) และแอมพลิจูดของศักย์กระทำ (115.0 ± 2.4 เทียบกับ 113.4 ± 3.9 mV) ใกล้เคียงกันใน [K+]o 5 และ 24 mmol/L ตรงกันข้าม ในเซลล์เวนทริเคิลที่ศักย์คงที่ -70 mV การเพิ่ม [K+]o จาก 5 เป็น 14 mmol/L ทำให้ Vmax ลดลงจาก 161.8 ± 18.0 เป็น 55.3 ± 5.0 V/s (n = 7, P < .001) และทำให้แอมพลิจูดของศักย์กระทำลดลงจาก 128.1 ± 1.3 เป็น 86.6 ± 5.4 mV (P < .001) การลดลงของ Vmax และแอมพลิจูดของศักย์กระทำที่ไม่ขึ้นกับแรงดันไฟฟ้านี้ซึ่งเหนี่ยวนำโดย [K+]o ที่เพิ่มขึ้นถูกยกเลิกเมื่อมี Ba2+ 1 mmol/L บ่งชี้ว่าเกิดจากการนำไฟฟ้า K+ พื้นหลังที่เพิ่มขึ้น
Hypothesis:
เราสรุปว่าการเพิ่ม [K+]o ไปสู่ระดับที่คาดว่าจะเกิดขึ้นระหว่างภาวะขาดเลือด ทำให้เกิดการกดทอน Vmax อย่างเด่นชัดที่ไม่ขึ้นกับแรงดันไฟฟ้าในเซลล์เวนทริเคิล ซึ่งอาจมีส่วนทำให้การนำสัญญาณของกล้ามเนื้อหัวใจช้าลง อันเป็นลักษณะของระยะเริ่มต้นของภาวะขาดเลือด


Premise:
การคลายตัวที่ถูกกระตุ้นโดย extracellular calcium (Ca²⁺(e)) ของ isolated, phenylephrine (PE)-contracted mesenteric arteries นั้นขึ้นอยู่กับ intact perivascular sensory nerve network ที่แสดงออกของ Ca²⁺-sensing receptor (CaSR) การกระตุ้นตัวรับนี้กระตุ้น endocannabinoid vasodilator pathway ซึ่งขึ้นกับ cytochrome P450 และ phospholipase A₂ แต่โดยมากไม่ขึ้นกับ endothelium ในการศึกษานี้ เราได้กำหนดบทบาทของ nitric oxide (NO) ต่อ perivascular nerve CaSR-mediated relaxation ของ PE-contracted mesenteric resistance arteries ที่แยกได้จากหนู โดยใช้ automated wire myography เราได้ศึกษาผลของ NO synthase (NOS) gene knockout (NOS(-/-)) และ pharmacologic inhibition ของ NOS ต่อ Ca²⁺(e)-induced relaxation ของ PE-contracted arteries Endothelial NOS knockout (eNOS(-/-)) upregulates แต่ neuronal NOS knockout (nNOS(-/-)) downregulates CaSR expression NOS(-/-) ลด maximum Ca²⁺(e)-induced relaxation โดยไม่เปลี่ยนแปลงค่า EC₅₀ โดย eNOS(-/-) มีผลมากที่สุด การตอบสนองของหลอดเลือดต่อ calindol และ Calhex 231 บ่งชี้ว่า CaSR เป็นตัวกลางของการคลายตัว L-N⁵-(1-iminoethyl)-ornithine ลด Ca²⁺(e)-induced relaxation ของ PE-contracted arteries จากหนูควบคุม C57BL/6 ประมาณ 38% แต่มีผลน้อยกว่าในหลอดเลือดจากหนู eNOS(-/-) 7-Nitroindazole ไม่มีผลอย่างมีนัยสำคัญต่อ relaxation ของ arteries จากหนู NOS(-/-) แต่ทั้ง N(G)-nitro-L-arginine methylester และ N(G)-monomethyl-L-arginine ลด relaxation maxima อย่างมีนัยสำคัญในทุกกลุ่ม ที่น่าสนใจ nNOS-selective inhibitor S-methyl-L-thiocitrulline เพิ่มค่า EC₅₀ อย่างมีนัยสำคัญประมาณ 60% ในเนื้อเยื่อจากหนู C57BL/6 แต่ลด maximum response ประมาณ 80% ในเนื้อเยื่อจากหนู nNOS(-/-) Ca²⁺-activated big potassium channels มีบทบาทสำคัญในกระบวนการนี้ ดังแสดงโดยผลของ iberiotoxin
Hypothesis:
เราสรุปว่า CaSR signaling ใน mesenteric arteries กระตุ้น eNOS และการสร้าง NO ซึ่งควบคุม Ca²⁺(e)-induced relaxation


Premise:
Adenosine ซึ่งเป็น vasodilator metabolite มักถูกสร้างในเนื้อเยื่อที่ความต้องการออกซิเจนสูงกว่าการจัดหา เราได้แสดงให้เห็นเมื่อเร็วๆ นี้ใน isolated cannulated arterioles ว่า adenosine และ metabolite ของมันคือ inosine สามารถทำให้เกิด vasoconstriction ได้โดยการกระตุ้น mast cells การหลั่ง histamine และ thromboxane แบบ secondary เป็นสาเหตุของ inosine-induced constriction in vivo ในการศึกษานี้ เราสำรวจผล vasomotor ของ adenosine ในร่างกาย และตรวจสอบบทบาทของ A3 adenosine receptor ในการทำให้เกิด vasoconstriction In vivo, การให้ adenosine เฉพาะที่ (10⁻⁶ ถึง 10⁻⁴ mol/L) แก่ arterioles ทำให้เกิด dose-dependent vasodilation อย่างสม่ำเสมอ อย่างไรก็ตาม arterioles บางส่วนแสดง biphasic response โดยมีการหดตัวตามหลังการขยาย ซึ่งก็เป็น dose dependent เช่นกัน; 37% ของ arterioles หดตัว 12.7 ± 4.3% ของเส้นผ่านศูนย์กลางเริ่มต้นในการตอบสนองต่อ adenosine 10⁻⁴ mol/L ในสภาวะที่มี 8-(p-sulfophenyl)theophylline (8-SPT) ซึ่งเป็น A1 และ A2 adenosine receptor antagonist, การขยายตัวในการตอบสนองต่อ adenosine ขนาดเดียวกันลดลง และการหดตัวเพิ่มขึ้น; 85% ของ arterioles ที่ทดสอบหดตัว -44.3 ± 6.0% ของเส้นผ่านศูนย์กลางเริ่มต้น A3 adenosine receptor ได้แสดงว่าช่วยให้เกิดการปลดปล่อยสารตัวกลาง จาก mast cells และได้ตรวจสอบบทบาทของมันด้วย N6-(3-Iodo-4-aminobenzyl)adenosine (I-ABA) ซึ่งเป็น A1 และ A3 adenosine receptor agonist ทำให้เกิด dose-dependent vasoconstriction 1,3-Dipropyl-8-(4-acrylate)phenylxanthine (BW-A1433) ซึ่งเป็น A1, A2 และ A3 receptor antagonist ลดการตอบสนองการหดหลอดเลือดต่อ adenosine อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งถูกเปิดเผยระหว่างการรักษาด้วย 8-SPT นอกจากนี้ ทั้ง adenosine และ I-ABA กระตุ้นการรับ ruthenium red โดย mast cells ซึ่งบ่งชี้ถึง degranulation I-ABA-induced constriction ถูกยกเลิกโดย combined histamine และ thromboxane receptor antagonists

สมมติฐาน:
เราสรุปว่า adenosine สามารถทำให้เกิดเกิดการหดตัวของหลอดเลือดในร่างกาย ซึ่งมักถูกบดบังโดย A2 receptor-mediated vasodilation