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흑두 품종의 영향 콩의 종류가 발아에 비치는 영향을 검토하여 Fig. 2에 나타내었다. 흑두의 대표적 품종인 흑태, 서목태 및 서리태를 3시간 침지 후 2시간 물빼기의 조건으로 침지시켜 실온에서 발아를 행한 후 싹의 길이를 측정한 결과 12시간 경과 후 품종별 싹의 길이는 흑태, 서목태 및 서리태가 각각 \( 10 \mathrm { ~mm } , 10 \) \( \mathrm { mm } \) 및 \( 8 \mathrm { ~mm } \)이었으며 48시간째는 \( 35 \mathrm { ~mm } , 30 \mathrm { ~mm } \) 및 31 \( \mathrm...	청국장 제조 시 효율적인 발효를 위해 표면적이 넓은 흑두인 서목태를 이용한 실험을 진행하였다. 실험 결과, 흑두의 발아 온도는 10°C의 저온과 25°C의 고온보다는 18°C의 상온에서 가장 적절하다는 결론을 도출하였다. 또한, 발아 진행에 따라 조단백과 조지방 함량은 감소하였으나, 조회분과 조섬유 함량은 변화가 미미하였다. 본 연구 결과는 Kim 등의 연구 결과와 일치하여, 콩의 종류에 따라서도 이러한 변화가 나타나는 것을 확인하였다.
서 론 콩은 우리나라 전통 장류 발효식품의 주된 원료로 사용되어져 왔고 또한 식물류의 기능성 소재로서 양질의 단백질과 불포화지방산이 다량 함유되어 있는 것으로 알려져 있다.그리고 최근의 연구에 의하면 콩 발효식품의 영양적 인자로 알려진 여러 종류의 물질들이 오히려 항암성, 항산화능 및 면역성 강화 등의 다양한 새로운 기능성을 가지는 것으로 보고되어 콩의 생리활성과 영양학적 중요성에 대한 많은 관심과 기대가 고조되고 있는 실정이다. 우리나라의 전통 콩 발효식품 중의 하나인 청국장은 간장,된장, 고추장과는 달리 전통장류 중 유일하게 소금을 첨가하지 않고 고온에서 속성으로...	콩은 우리나라 전통적인 장류 발효식품의 핵심 원료로서, 단백질과 불포화 지방산을 풍부하게 함유하고 있다. 최근의 연구에 따르면, 콩 발효식품은 항암, 항산화 및 면역 강화 등 다양한 기능성을 갖는 것으로 알려져 있다. 볏짚을 사용하여 콩을 삶고 덮어두면 뜨거워져 표면이 하얗게 변하고 끈적이는 실이 나온다. 청국장은 단백질과 지방이 많고, 소화 흡수율이 높아 비타민 A, B, 칼슘을 공급하며, 다양한 건강 효과를 가지고 있다. 본 연구에서는 콩의 수침 방법, 최적 발아 온도, 발아된 원료의 특성 및 isoflavone 함량 등을 조사하여 두아청국장 제조를 위한 기초 정...
발아 조건 확립 흑두의 최적 발아조건을 확립하기 위하여 콩의 침지조건은 6시간 및 12시간 동안 냉수에 침지하여 발아 시키는 것과 3시간 침지한 다음 2시간 물빼기를 3회 반복한 후 일정온도에서 발아 시키는 조건에 대하여 검토하였다. 발아온도는 수침한 콩을 \( 10 ^ {\circ } \mathrm { C } , 18 ^ {\circ } \mathrm { C } \)(실온), \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 및 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 일정시간 발아시킨 후 발아율을 조사하였다. 발아는 빛이 들지 않...	흑두의 최적 발아조건을 확립하기 위해 다양한 침지 시간과 온도 조건에서 실험을 수행하였으며, 두아청국장 제조에는 발아시킨 콩을 사용하였다. 발아된 콩은 증기에서 30분 동안 가열 후, 항온실에서 발효를 진행하였다. 제품의 조단백, 조지방, 조회분 및 조섬유 같은 일반성분은 표준방법에 따라 분석하였다.
효소 활성 Protease 활성측정을 위한 기질용액은 milk casein \( 1.8 \mathrm { ~g } \)을 sodium phosphate buffer \( ( \mathrm { pH } 7.2) 300 \mathrm { ml } \)에 용해하여 사용하였다. 효소활성 측정은 조효소액 \( 1 \mathrm { ml } \)에 기질용액 \( 5 \mathrm { ml } \)을 넣고 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 10 분간 반응시킨 다음, \( 0.4 \mathrm { M } \) trichloracetic acid (TC...	Protease, Glucoamylase의 활성을 측정하기 위한 다양한 시약과 버퍼를 사용하여 실험하였다. 이 중 Protease의 활성 측정을 위해 우유 카세인을 이용하였고, 반응 결과를 tyrosine의 양으로 표현하였다. Glucoamylase의 활성은 가용성 전분을 이용한 반응 후 DNS법으로 환원당량을 측정하여 나타내었다. 각각의 실험은 특정 온도와 시간에서 반응을 진행하였으며, 효소의 활성은 해당 조건에서 생산되는 특정 물질의 양으로 표현되었다.
효소 활성 발아된 서목태의 싹 길이가 여러 가지 효소 활성에 미치는 영향을 검토하여 Fig. 4에 나타내었다. Protease의 활성은 싹이 발아하여 성장함에 따라 그 활성은 점차 낮아져 싹의 길이가 \( 15 \mathrm { ~mm } \)일 때 0.48 unit를 나타낸 반면에 glucoamylase활성은 싹의 길이가 \( 0 \mathrm { ~mm } \)일 때는 \( 0.2 \) unit 이었으나 20 \( \mathrm { mm } \)일 때는 0.4 unit로 싹 길이가 성장함에 따라 효소활성이 증가하는 것으로 나타났다. 그러나 \( \beta \)-g...	발아된 서목태의 싹 길이가 20 mm일 때 glucoamylase, \(\beta\)-glucosidase 활성이 약간 높고 대표적 생리 활성 성분인 Isoflavone 함량이 최대가 된다. 두아청국장이 발효에 따른 성분 변화는 거의 없지만 전통청국장보다 조단백 ,조지방 및 조섬유,함량이 약간 높게 나타난다.
Isoflavone 분석 Isoflavone 분석은 동결건조 하여 분쇄한 시료 \( 1 \mathrm { ~g } \)에 0.1 N HCl \(2 \mathrm { ml } \)와 acetonitril (HPLC grade, 99.9%) \( 10 \mathrm { ml } \)를 첨가한 다음 실온에서 2 시간 교반한 후 여과지(No. 4)로 여과하여 그 여과액을 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)이하에서 진공농축 시켜 \( 80 \% \) meth-anol (HPLC grade, 99.9 \%) \( 10 \mathrm { ml } \)에 ...	Isoflavone 분석은 동결건조 후 분쇄한 시료 1g에 0.1 N HCl 2ml와 acetonitril 10ml를 첨가해 실온에서 2시간 교반하고 여과지로 여과한 여과액을 30\(^\circ \mathrm{C}\) 이하에서 진공농축해 80% methanol 10ml에 용해시킨 후 0.45\(\mu\mathrm{m}\) membrane filter로 여과해 HPLC의 분석시료로 사용했다. 두아청국장의 제조방법을 확립하기 위해 흑두의 침지조건을 실험하니 콩을 3시간 침지 후 2시간 물빼기를 반복하는 것이 수분흡수량이 효율적인 것으로 나타났다.
관능 검사 본 연구에서 개발한 두아 청국장의 기호도를 평가하기 위하여 두아 생청국장에 대한 관능검사를 실시하여 Table 3에 나타내었다. 청국장의 발효가 종료된 직후에 실시한 생청국장의 관능검사 결과 색깔 및 점질물 생성은 대조구와 두아청국장이 거의 비슷하였지만 청국장 고유의 불쾌취는 오히려 두아 청국장에서 적게 발생하는 것으로 나타났다. 그리고 결과는 나타내지 않았지만 두아 청국장으로 찌개(물 \( 500 \mathrm { ml } \)에 청국장 \( 50 \mathrm { ~g } \), 두부 \( 10 \mathrm { ~g } \), 소금 \( 3 \math...	본 연구에서는 두아 청국장의 기호도를 평가하기 위해 관능검사를 실시하여 색깔, 점질물 생성 등과 불쾌취 발생 정도가 대조구와 비슷하게 나타났다. 두아 청국장으로 찌개를 만들어 행한 관능검사 또한 비슷한 결과를 나타냈다. 두아 청국장의 원료 콩에서 기능성 물질인 isoflavone이 발효과정 중 합성되어 있음을 알 수 있었다.
재료 및 방법 국화분말을 첨가한 빵의 제조 본 실험에 사용한 국화는 2009년 경남 마산에서 수확한 백국(White Chrysanthemum morifolium Ramat)을 동결건조 후 \(100\mesh\)로 분쇄하여 밀가루 \( 100 \% \) 기준으로 국화분말을 \(0\sim 7 \% \)씩 각각 다르게 첨가하였고, Table 1 과 같은 원료의 배합조건으로 식빵을 만들어 사용하였다. 또 반죽공정은 직접반죽법 (straight dough method)에 따라 쇼트닝을 제외한 모든 재료를 믹서 볼에 넣고 저속 3분간 믹싱 후 클린업단계(clean up stag...	본 연구에서는 동결건조한 백국을 이용하여 국화분말을 식빵에 첨가하고 제조하였다. 반죽은 직접반죽법을 사용하여 쇼트닝을 제외한 재료를 믹서 볼에 넣고 세 단계로 믹싱하였다. 발효 조건은 온도 27°C, 습도 80%에서 60분 동안 1차 발효 후 분할 및 둥글기와 15분의 중간발효를 거친다. 국화분말을 첨가한 빵의 pH와 가용성 고형물함량은 Stomacher Lab Blender와 측정기를 사용하여 측정하였다. 통계 분석은 SAS 패키지를 사용하여 분산분석을 수행하였으며, Duncan의 다중 범위시험법을 사용하여 각 시료간의 유의성을 확인하였다.
결과 및 고찰 국화분말을 첨가한 빵의 반죽 및 제빵 특성 국화분말의 첨가는 빵의 반죽특성에 몇 가지 변화를 유도하였다. 국화분말을 첨가한 빵의 경우 무첨가 시료에 비해 제빵 시간이 9~23분 더 소요되는 것을 알 수 있었다. Table 2에서 보는 바와 같이 \( 5 \% \) 와 \( 7 \% \) 의 국화분말을 첨가한 시료의 1차 발효시간이 60분에서 75분으로 증가하였으며 2차 발효는 모든 첨가군에서 5분이 더 소요되었는데 이것은 국화분말의 첨가가 효모의 발효지연에 영향을 미친 것으로 판단된다. 또 굽는 과정에서도 첨가군 모두에서 5분이 더 소요되었는데 이러한 ...	국화분말을 첨가하여 빵을 굽는 실험에서, 국화분말은 수분 흡수율을 증가시켜 빵의 수분 보수력을 향상시키고, 빵의 무게를 증가시켰다. 그 결과, 굽기 손실율은 감소하였다. 그러나 향, 경도, 촉촉함 등에는 큰 차이를 보이지 않았으며, 종합적인 기호도는 국화분말 첨가량이 많아질수록 낮아지는 경향을 보였다.
서 론 식생활의 형태가 서구화 내지는 편리한 식생활 패턴으로 변모되면서 주식대용으로 빵 소비가 크게 증가하게 되었고, 국민들의 건강에 대한 높은 관심으로 기능성이 부여된 제품에 대한 관심이 더욱 높아지고 있다. 따라서 빵이 가지는 장점인 간편성과 맛뿐만 아니라 건강적인 측면까지 고려한 기능성이 첨가된 제품의 개발이 요구되고 있다. 최근에는 빵에 기능성 및 저장성을 부여하기 위해 다양한 식품소재의 사용이 시도되고 있는데 지금까지 발표된 연구결과들을 보면 당 알코올, 멍게껍질, 저항전분(resistant starch), 그리고 미강식이성섬유 등을 이용한 기능성 제품에 관...	빵에 국화분말을 첨가할 수 있는지에 대한 기초연구를 수행하기 위해 식빵에 \( 0 \%, 3 \%, 5 \%, 7 \% \) 의 국화분말을 첨가하여 반죽특성, 비용적 및 굽기 손실율, 고형물함량, 경도, \( \mathrm{pH} \), 색도, 관능검사 등을 실시하였으며 또 국화분말의 첨가가 빵의 품질유지에 어떤 영향을 미치는지 조사하기 위해 상온에서 8일간 저장하며 품질변화를 관찰하였다.
서 론 파(Allium fistulosum)는 우리나라에서 식용으로 널리 사용되고 있는 백합목 백합과의 여러해살이풀로서, 파의 뿌리 부분은 특히 한의학에서 총백이라 불리며 맵고 따뜻한 성질을 가져 감기를 치료하는 데 사용되어져 왔다. 일반적으로 파는 칼슘과 비타민을 풍부하게 함유하고 있으며, 특히 파의 매운 향을 내는 황화아릴 성분은 소화를 돕고 장을 튼튼하게 하는 강장작용을 가진 것으로 알려져 있다. 또한 최근 연구에 따르면 파는 항산화작용을 포함하여 항혈액응고, 항콜레스테롤, 항균작용 및 혈당 강하 작용 등을 가지고 있음이 보고되었으나, 파 추출물의 염증에 관한 ...	파는 칼슘과 비타민을 풍부하게 함유하고 항산화작용 및 항혈액응고, 항콜레스테롤, 항균작용 및 혈당 강하 작용 등을 가지며, 파 추출물이 신경 염증 반응을 효과적으로 억제할 수 있는 염증 저해 활성을 보인다.
고 찰 Microglia는 CNS에 존재하는 면역세포로서 다양한 약물이나 독소에 의해 활성화되어 이물질을 제거하고 면역기능을 나타내므로 신경세포를 보호하고 CNS의 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 한다. 그러나 microglia가 과도하게 활성화 될 경우 진행성인 염증반응을 일으켜 \(\mathrm{NO}\), \(\mathrm{PGE}_{2}\), 전구염증 cytokine 및 ROS 등을 배출하며, 이러한 인자들은 microglia 매개 신경 독성을 유발한다고 알려져 있다. 염증성 반응과 연관된 과도한 \(\mathrm{NO}\)와 \(\mathrm{PGE}_{2...	Microglia는 중추신경계의 면역세포로, 다양한 약물과 독소에 반응해 이물질을 제거하며 신경세포를 보호하고 항상성을 유지하는 핵심 역할을 한다. 병리학적 관점에서 보면, iNOS와 COX-2는 CNS의 손상 및 질환과 연관된 조직에서 과발현되는데, 이는 특히 신경교증과 파킨슨 병의 흑질 내 글리아 세포에서 동시에 증가하는 현상이다. iNOS와 COX-2를 억제하는 약물이 신경독성에 대한 보호 효과를 보였으며, 이로 인해 iNOS와 COX-2의 발현을 저지하는 것이 신경염증과 신경퇴행성 질환 치료 및 예방에 대한 일반적인 접근법으로 인식되고 있다. 이 연구에서는 파...
결 과 파 추출물의 BV2 세포에 대한 세포독성 여부 다양한 파 추출물이 BV2 세포에 독성을 나타내지 않는 조건에서 항염증효과를 조사하기 위해 준비된 파 추출물을 각각 단독 처리한 후 MTT assay를 먼저 실시하였다. Fig. 1A에 나타난 바와 같이 파 추출물 처리 24시간 후 WEWA, EEWA 및 WERA 처리군에서는 \(250\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\)까지, EERA 단독 처리군에서는 \(40\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\)까지는 BV2 세포가 각각 \(90\%\) 이상의 생존율을 보였으나, 그 이상의 처리 농도에서는...	파 추출물이 독성을 나타내지 않는 조건에서 준비된 파 추출물을 각각 단독으로 처리한 후 MTT assay를 항염증효과를 조사하기 위하여 우선적으로 실험을 수행하였다. 각 추출물의 최고 농도와 LPS를 동시에 처리한 결과, 생존율이 \(90\%\) 이상으로서 BV2 세포에 대한 독성을 나타내지 않았기 때문에 이를 항염증효능 실험 조건으로 선정하였는데 이를 통하여 파 추출물이 iNOS와 COX-2 유전자의 발현을 억제하면서 항염증효능이 있을 것임을 알 수 있었다. 또한, WEWA와 EERA 처리군은 비슷한 수준의 \(\mathrm{NO}\) 생성 억제 효과를 보였으며, ...
재료 및 방법 실험 재료 본 실험에 사용된 파(A. fistulosum) 추출물은 인제대학교 식품영양학과에서 공급받았으며, 세포 배양에 사용된 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), fatal bovine serum (FBS), penicillin-streptomycin은 Gibco BRL (Grand Island, NY, USA)에서 구입하였다. mRNA 발현 분석을 위해 사용된 primer (Bioneer, Taejeon, Korea)는 Table 1에 표기하였으며, 단백질 발현 분석에 쓰인 모든 1차 항체는 Santa Cru...	BV2 세포를 \(37^{\circ}\mathrm{C}\), \( 5\% \mathrm{~CO}_{2} \) 조건에서 DMEM 배지에 \(10\%\mathrm{FBS}\)와 \(1\%\) penicillin-streptomycin을 첨가하여 배양하고, LPS \((500\mathrm{ng/ml})\)를 처리하여 24시간 배양하여 mRNA 발현 분석과 단백질 발현 분석을 수행하였다. MTT assay에 의한 세포독성 조사, RT-PCR에 의한 mRNA의 분석, Western blot analysis에 의한 단백질 발현의 분석, NO 농도 및 Cytokine를 측정하였다...
서 론 최근 우리나라는 생활의 변화로 동물성 포화지방, 고칼로리 식품의 섭취 등 지방 섭취량이 증가함에 따라 고콜레스테롤, 성인병, 동맥경화, 고혈압 등 순환기계 질환이 점차 증가되고 있는 추세다. 뿐만 아니라 순환기계 질환이 한국인 사망원인의 30% 이상을 차지하고, 주요 위험인자인 고지혈증 또한 빠른 속도로 증가하고 있으며, 심혈관계 질환에서는 혈중 콜레스테롤, 중성 지질의 증가 및 지단백 함량의 변화와 같은 비정상적인 지질대사가 문제시 되고 있다. 질환의 발병 원인은 지질대사 이상으로 나타나게 되는데, 그중에서 고콜레스테롤혈증(hypercholesterolemi...	동물성 포화지방과 고칼로리 식품 섭취 증가로 인해 우리나라의 순환기계 질환 유병률이 증가하는 가운데, 혈중 콜레스테롤 농도는 복합적인 기작을 통해 조절된다. 이 중 간에서 콜레스테롤을 제거하는 과정인 담즙합성은 포합 빌리루빈 및 UDP-GT 활성 증가와 연결되어 있다. 본 연구는 고지방 및 고콜레스테롤 식이를 섭취하는 흰쥐에게 울금 분말을 공급하여, 울금의 지질대사 효과를 조사하였다. 조사는 혈청 및 분변에서의 지질 함량, 간조직의 UDP-GT 활성 및 담즙산 함량 측정을 통해 이루어졌다.
간조직의 총지질, 중성지방 및 총콜레스테롤 함량 측정 간조직의 지질성분을 관찰한 결과는 Table 4와 같다. 간조직의 총 지질함량을 관찰한 결과 고지방 고콜레스테롤 군에 비해 울금 분말 공급군 모두에서 감소하였고, 특히 TPB군에서는 고지방 · 고콜레스테롤 군에 비해 유의적으로 감소하는 경향을 나타내었다. 중성지질의 함량은 정상군에 비해 고지방 · 고콜레스테롤 군에서 유의적으로 증가하였고, 고지방 · 고콜레스테롤 군에 비해 울금 분말 공급군 모두에서 유의적으로 감소하는 경향을 나타내었다. 콜레스테롤 함량에서 는 정상군에 비해 고지방 · 고콜레스테롤 군에서 유의적으로...	간조직의 지질성분 관찰 결과, 울금 분말 공급군에서 총 지질함량이 고지방 고콜레스테롤 군에 비해 감소하였다. 특히 TPB군에서는 더욱 감소하였다. 이는 울금 분말이 지질 흡수를 억제하여 지질대사를 개선하며, 중성지질의 배설량 증가를 통해 지질지하 효능을 갖는 것으로 파악된다. 또한, 울금 분말 공급으로 인해 혈청 중 담즙산 농도가 증가하였으며, 이는 울금이 폴리페놀을 풍부하게 함유하고 있음을 반영한다. 즉, 울금 파우더 공급이 간의 콜레스테롤 제거와 담즙 합성을 촉진한다.
혈청의 중성지방, 총콜레스테롤, \( \mathrm { HDL } \)-콜레스테롤, \( \mathrm { LDL } \) 콜레스테롤의 함량과 동맥경화지수(atherogenic index, Al) 측정 혈청 내 중성지방 함량은 표준 효소법에 의한 kit (Asan Co., Gyeonggi, Korea)를 사용하여 \(550\mathrm{nm}\)에서 홉광도를 측정하여 계산하였다. 총콜레스테롤 함량은 표준 효소법에 의한 kit(Asan Co., Gyeonggi, Korea)를 사용하여 \(500\mathrm{nm}\) 에서 흡광도를 측정하여 계산하였다. 그리고 HDL-...	혈청 내 중성지방, 총콜레스테롤, \( \mathrm { HDL } \)-콜레스테롤, \( \mathrm { LDL } \) 콜레스테롤 함량과 동맥경화지수(AI)를 측정하기 위해 효소법을 사용하여 kit (Asan Co., Gyeonggi, Korea)를 이용하여 \(550\mathrm{nm}\) 과 \(500\mathrm{nm}\)에서 흡광도를 측정하고, 간조직의 총지질, 중성지방 및 총콜레스테롤 함량은 Folch 등의 방법과 Sale 등의 수정된 방법으로 측정하고, 변의 총 지질 배설량은 Pearson 등의 방법으로 정량하고, 혈중 total bile acid 농...
재료 및 방법 울금 추출물 분말 제조 본 연구에 사용한 울금은 진도에서 제공받아 열풍건조기를 이용하여 85~80℃로 건조하였다. 울금은 분쇄기(대성파워 믹 서/분쇄기DA-280G, Seoul, Korea)로 분쇄한 울금 당 중량대비 6 배에 해당하는 증류수(w/v)를 가하여 95℃에서 24시간 추출한 후, 위와 같은 조건으로 3회 반복하고 상등액을 모아 여과지(Whatman No. 1)로 여과하였다. 여과한 여액은 rotary vacuum evaporator (HS-2001N, Hanshin Science CO. Korea)를 사용하여 감압 농축하고, 동결건조기(Bo...	울금을 열풍건조기로 건조하고 분쇄기로 분쇄하여 증류수로 추출하고, rotary vacuum evaporator로 감압 농축하고 동결건조기로 건조하여 사용하였다. 또한 Sprague-Dawley 종 수컷을 난괴법에 의해 대조군과 실헙군으로 나누어 4주간 사육하고, 12시간 절식 후 ether 마취하에 복부대동맥으로부터 혈액과 간을 채취하여 동결시켜 -80\(^\circ \mathrm{C}\)에 보관하였다.
통계처리 모든 실험결과에 대한 통계처리는 각 실험군 별로 평균값의 차이가 있는가를 검증하기위해 분산분석(ANOVA 검증)을 수행하였으며 분산분석결과 유의성이 발견된 경우 Tukey's HSD test에 의해 군 간의 유의도를 분석하였다. 결과 및 고찰 체중증가량, 식이섭취량 및 식이효율 울금 분말의 농도별 실험에서 체중증가량, 식이섭취량 및 식이효율을 관찰한 결과는 Table 2와 같다. 체중증가량은 정상군에 비해 고지방 · 고콜레스테롤 군에서 유의적으로 증가하였으나, 울금 분말을 공급한 군에서는 고지방 · 고콜레스테롤 군에 비해 유의적이지는 않았으나 체중이 감소하는...	본 논문은 모든 실험결과를 분산분석을 통해 각 실험군 별로 평균값의 차이가 있는지 검증하였고, Tukey's HSD test를 통해 군 간의 유의도를 분석한 결과 울금 분말의 농도별 실험에서 체중증가량, 식이섭취량 및 식이효율이 고지방 및 고콜레스테롤 군에서 유의적으로 증가하였다. 또한 울금 공급에 의해 단백질의 효소분해가 억제되어 식이 섭취가 감소하는 것으로 추정되었다. 혈중의 총콜레스테롤 및 중성지질의 함량을 분석한 결과 울금 분말을 공급해 지질 함량이 감소하는 것으로 보아 고지방, 고콜레스테롤 식이에 의한 혈중의 고혈압, 동맥경화 등의 심혈관계의 질환을 개선하는...
형질전환 공동배양을 위해 \( 0.85 \% \mathrm { NaCl } \) 로 세척한 Agrobacterium tumefaciens 현탁액에 \( 0.5 \mathrm { ~cm } \times 0.3 \mathrm { ~cm } \) 크기로 자른 잎 절편을 넣고 10 분간 공동배양 한 후 잎 절편을 멸균된 여과지에서 10 분간 건조 시겼다. 건조된 잎 절편을 공동배양배지에서 (MS, sucrose 3 \%,2 mg/L 2,4-D) 2일간 배양한 후 재분화 선발배지 (MS, sucrose \( 3 \%, 40 \mathrm { mg } / \mathrm { L ...	까마중 식물체의 잎 절편을 건조한 후 공동배양배지에서 2일간 배양한 후 재분화 선발배지로 옮겨 8주간 배양해 신초를 형성시켰다. 형성된 신초는 \( \operatorname { merB } \) 유전자가 확인된 신초들만 뿌리 유도 배지로 이식해 발근시켰고, 발근된 까마중 식물체의 잎으로부터 genomic DNA를 추출해 \( \operatorname { merB } \) 유전자 증폭 밴드 유무를 확인했다. 또한 RNA 발현을 확인하기 위해 RNA를 추출해 RNA \( 30 \mu \mathrm { g } \) 을 \( 1 \% \) formaldehyde 겔에 전기영...
결과 및 고찰 형질전환체 육성 환경정화용 유전자변형생물체의 환경위해성 평가연구를 위한 형질전환 식물체를 선발하기위하여 유기수은을 무기수은으로 전환시켜서 독성을 저감시키는 organomercurial lyase 유전자 \( ( \operatorname { merB } ) \) 를 까마중에 도입하여 형질전환하였다. Agrobacterium 과 공동배양한 까마중 잎 절편을 2,4-D \( 2 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 가 첨가된 동시배양 배지에서 2일간 배양한 후 항생제가 첨가된 선발배지로 옮기는 것이 공동배양한 후 잎 절편을 곧바로 항생...	환경정화를 위해 형질전환 식물체를 선발하기 위해 무기수은을 유기수은으로 전환시키는 organomercurial lyase 유전자 merB를 까마중에 도입하여 형질전환하였다. 2,4-D가 첨가된 동시배양 배지에서 2일간 배양한 후 항생제가 첨가된 선발배지로 옮기는 과정에서 캘러스 생성과 재분화가 빠르게 일어났고, 이는 2,4-D가 식물체의 상처부위에서 체세포배를 유도하여 캘러스가 왕성하게 유도된 것으로 사료된다.
유전자 발현 확인 대조구 식물체 잎 절편이 백화되어 고사하는 농도의 항생제가 포함된 재분화 선발배지 (MS, sucrose \( 3 \%, 40 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) hygromycin, \( 500 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) carbenicillin, \( 0.1 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) NAA, \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) \( \mathrm { BA } \) 에서 정상적으로 자라는 식물체는 유전자가 도입된 형질전환...	항생제 함유 재분화 선발배지에서 백화되지 않고 정상적으로 성장한 식물체는 유전자 도입이 성공적으로 이루어진 형질전환체로 판명되었다. 이를 바탕으로 merBl, merB4 두 라인을 연구 재료로 활용하였다. PCR과 northern blot 분석을 통해 merBl, merB4 라인에 유전자가 안정적으로 삽입되고 발현되는 것을 확인하였다. 또한, 이들 라인은 최대 2μM의 MMC에 저항성을 보였으며, 대조구 잎은 0.5 μM MMC에서 백화되어 고사하는 결과를 보였다.
서 론 미나마타병의 원인물질로 잘 알려진 수은 \( ( \mathrm { Hg } ) \) 은 자연생태계에서 토양과 하천 등 수계에 낮은 농로로 널리 분포하고 있으나, 산업이 발달함에 따라 방출량이 늘어나고 이로 인해 자연생태계의 먹이사슬에 의한 생물학적 축적 (bioaccumulation)으로 결국 인간에게 강한 독성을 나타내게 된다 (Bizily et al.2000). 특히, 수은의 위해도는 생태계에 존재하는 형태에 따라 크게 좌우되는데, 유기수은 형태 \( \left ( \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { Hg } ^ {\prime } \...	미나마타병의 원인물질인 수은은 자연에 널리 분포하고 있지만 산업이 발달함에 따라 방출량이 늘어나고 자연생태계의 먹이사슬에 의한 생물학적 축적으로 결국 인간에게 강한 독성을 나타내게 된다. 특히 수은의 유기수은 형태가 무기수은 형태보다 위해도가 크며, 독성은 약 200배 이상 강한 것으로 알려져 있다. 최근에는 토목학적, 물리·화학적 방법 대신에 식물을 이용한 중금속을 흡수- 무독화하거나 농-도를 저감시키기는 phytoremediation 기술이 시도된다.
형질전환 까마중의 수은 저항성 검정 유전자 밭현이 확인된 형질전환 까마중의 수은저항성을 확인하기 위하여 잎을 약 \( 0.5 \mathrm { ~cm } \times 0.3 \mathrm { ~cm } \) 로 잘라서 유기수은 제제인 methylmercury (II) chloride (MMC; \( \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { HgCl } \), Aldrich, Germany)와 phenylmercuric acetate (PMA; \( \mathrm { C } _ { 6 } \mathrm { H } _ { 5 } \mathrm { HgO...	형질전환 까마중의 수은저항성을 확인하기 위해 여러 농도의 유기수은 제제를 사용한 실험을 진행하였으며, 해당 저항성이 확인된 까마중은 배양실에서 순화시킨 후 온실로 이식하여 3개월 동안 재배하였다. 이후 화서당 열매수, 열매의 개당 종자수 등을 대조군과 비교하고, 자연 건조시킨 형질전환 1세대 까마중 종자의 건조 중량을 측정하였다.
현재까지 국내에서 상업화들 위하여 승인된 유전자변형 생물체는 국내 수입 콩, 옥수수, 면화, 유채, 감자, 알팔파 등 농업용 작물이 대부분이다. 국내에서도 다양한 유전자변형 생물체 연구가 수행되고 있으나 아직 실용화 단계에는 이르지 못하고 있으며 (Woo et al. 2006), 격리포장 단계에서 환경위해성율 평가 중인 유전자변형생물체도 벼, 고추, 배추, 들깨 등 농업용이다 (김동헌 2008). 환경정화용 유전자변형 생물체는 식물수목류를 대상으로 개발단계이고, 아직 환경 위해성 평가가 이루지고 있지는 않지만 환경정화용이 환경 정화 효과 검정을 위하여 환경에 방출될 ...	국내에서 승인된 유전자 변형 생물체는 농업용 작물이 대부분으로 환경정화용 유전자 변형 생물체는 식물수목류를 대상으로 개발단계이다. 환경위해성 평가가 이루어지고 있지 않으므로 환경정화용 유전자 변형 생물체의 환경위해성 평가기술 개발 연구가 필요하며, 그중 Organomercurial lyase 유전자를 도입하여 형질전환 식물체를 선발하고 그 특성을 조사하기 위한 연구를 수행하고 있다.
형질전환 1 세대 끼미중 종자의 수은 저항성 \( \operatorname { merB1 } , \operatorname { merB4 } \) 두 라인의 형질전환 1 세대 종자의 수은저항성을 확인하기 위하여 유기수은 제제인 MMC와 PMA가 \( 2 \mu \mathrm { M } \) 천가된 종가 밥아배지에 치상한 결과, 형질전환체는 발아후 뿌리를 내리며 성장하였으나 대조구근 발아 후 뿌리를 내지지 못하고 결국 갈변되어 고사하였다 (Fig. 6). 이상의 결과, \( \operatorname { merB } \) 유전자가 형질전환 1 세대로 안정되게 유전되어 수은...	두 개의 라인 merBl과 merB4은 유기수은 제제인 MMC와 PMA로 테스트한 후 수은 저항성을 위해 선택되었다. merB 유전자는 1세대 유전자가 안정적으로 유전돼 향후 유전자 전이 번식 및 평가는 물론 환경영향평가 실험 등에 활용될 예정이다. 유전자변형식물체는 환경 내 중금속의 독성을 제거하거나 줄이기 위해 만들어졌지만, 출시 전에 안전성을 확인해야 한다. 이들 형질전환체를 이용한 환경정화를 위한 유전자변형생물의 환경위험도 평가방법 개발 연구가 진행될 예정이다.
초록 본 연구에서는 혈전용해능이 우수한 Bacillus sp. sm26을 선별하고 신품종 기능성 콩인 노란 아가콩(YA)와 검정 아가콩(BA)을 발효시킨 발효콩(FYA, FBA)의 혈전용해 활성과 \( 70 \% \) ethanol 추출(FYAE, FBAE)에 대한 항산화 효능을 조사하였다. FYA와 FBA의 혈전용해 활성은 각각 \( 6.38 \pm 0.5 \)와 \( 6.83 \pm 0.5 \mathrm { U } / \mathrm { ml } \)로 대두 발효물(FSB)보다 각각 1.3배와 1.4배 높은 것으로 나타났다. 총 페놀 함량은 FYAE와 FBAE가 각...	혈전용해능이 우수한 Bacillus sp. sm26을 이용해 발효한 노란 아가콩(FYA)과 검정 아가콩(FBA)의 혈전용해 활성은 각각 1.3배와 1.4배 높게 나타나, 페놀 함량은 각각 약 2 배 이상 높았다. 또한, DPPH radical 소거능에서는 FBAE가 2 배 높은 활성을 보였다. 이러한 결과로 볼 때, 아가콩 발효물의 혈전용해 활성과 항산화 효능은 일반 콩보다 높으며, 이는 신 천연 기능성 식품으로서의 활용 가능성을 시사한다.
재료 및 방법 재료 일반 대두(SB)는 시중에서 판매되는 것을 구입하여 사용하였으며 육종 품종인 아가콩 3호(노란 아가콩, YA와 아가콩 4호(검정 아가콩, BA)는 경북대학교에서 제공받아 사용하였다. 발표 균주의 선별 각각의 콩을 \( 20^{\circ} \mathrm{C} \)의 물에 24시간 동안 침지하여 건져낸 후 30분간 물을 뺀 다음 \( 50 \mathrm{g} \)씩 담아 autoclave에서 30분간 가압증자하였다. 증자대두를 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 이하로 냉각시킨 후 혈전 용해능을 지닌 10가지의 Bacillus sp. 균...	본 연구의 재료는 아가콩 3호(노란 아가콩, YA와 아가콩 4호(검정 아가콩, BA)이며 72시간 발효된 콩중 혈전용해능이 가장 우수한 균주를 발효균주로 사용하였다. ethanol 추출액을 감압 농축하여 발효 대두 추출물 (FSBE), 발효 아가콩 3호 추출물(FYAE), 발효 아가콩 4호 추출물(FBAE)을 연구의 시료로 사용하였다. 총 페놀 함량은 Folin-Ciocalteu 시약이 페놀성 화합물에 의해 환원되어 몰리브덴 청색으로 발색되는 원리를 이용하여 분석하고, 단백질 함량은 protein assay kit를 사용하여 정량하여 측정한다.
Free radical scavenging activity Free radical scavenging activity의 측정은 Brand-Williams method을 이용하여 측정 하였다. \( 6 \times 10^{-5}\) M DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) MeOH용액 \( 195\mu \mathrm{l} \)와 증류수로 희석한 추출물 \( 5 \mu \mathrm{l} \)를 96-microwell plate에 혼합하였다 이때, 혼합용액 중의 추출물 최종 농도는 \( 1.0 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)...	본 연구에서는 Free radical scavenging activity, Reducing power activity, Hydrogen peroxide scavenging activity의 측정을 각각 Brand-Williams method, Oyaizu method, Miller method를 활용하여 수행하였다. 각각의 방법을 통해 추출물의 항산화 효능을 산출하였으며, 반응 액에 필요한 특정 물질을 첨가하고 특정 온도에서 반응 시킨 후 흡광도를 측정하였다.
결과 및 고찰 혈전용해효소 생산 균주의 선별 및 혈전용해 활성 콩 발효물의 혈전용해효소 활성을 알아보기 위하여 동아대학교 연구실에서 보관 중인 10가지 균주(Bacillus. sp LC-1, LC-3, LC-5, CKJ, #15, #18, #20, #38, BB-1, sm26 를 이용하여 대두콩(SB) 발효를 수행하였다. 그 결과, Fig. 1에 나타낸 것과 같이 Bacillus sp. sm26로 발효한 발효물의 혈전용해효소가 \( 4.80 \pm 0.3 \mathrm{unit} / \mathrm{ml} \)로 가장 높은 혈전용해 활성을 나타내었고 이 결과를 토대로 ...	동아대학교 연구실에서 보관 중인 10가지 균주를 이용해 대두콩 발효를 수행하여 콩 발효물의 혈정용해효소 활성을 알아보기 실험을 진행했다. 그 결과 FYA와 FBA에서 FSB에 비해 높은 혈전용해 활성을 나타내었다. 반면 이 셋은 형태학적 측면에서는 큰 차이가 발견되지 않았다. 또, 항산화능에 직접적으로 기여하는 총 페놀과 단백질 및 당 함량면에서는 FYAE가 FSBE 보다 높은 수치를 나타내었다. 그리고 추출물의 지질과산화 억제능을 측정한 결과 FBAE와 FYAE는 2차 산화물의 생성억제제로 유효하다는 결론을 얻었다. 따라서 아가콩을 이용한 발효물이 항혈전, 항산화 ...
서 론 현대과학의 발달로 인해 건강 장수생활의 혜택이 커지면서 식품이 단지 영양공급과 기호성을 충족시키는 기본적인 목적을 넘어서 꾸준한 일상섭취를 통하여 잠재적인 질병예방 및 치유의 능력까지 갖춘 기능성에 대한 연구가 중점적으로 이루어지고 있다. 특히 노화, 암, 뇌혈관과 심혈관계 질환 등은 free radical의 생성과 관련이 있다는 사실이 밝혀짐에 따라 항산화 효과를 가지는 식품의 섭취를 통해 노화를 지연시키고 이러한 질병을 예방, 치료하고자 하는 노력이 증가하고 있는 실정이다. Free radical은 생체내의 산화적 스트레스에 의해 생성되는데 세포 구성성분과...	현대 과학의 발전으로 인해 건강과 장수에 대한 이점이 커지면서 식품의 기능성 연구가 중요해지고 있다. 이제 식품은 영양 공급과 맛을 넘어서 잠재적인 질병 예방과 치유 능력을 갖추는 기능성을 강조하고 있다. 특히 노화, 암, 뇌혈관과 심혈관 질환과 같은 질병은 활성 산소 물질인 자유 라디칼과 관련이 있다는 사실이 알려져, 항산화 작용을 갖는 식품 섭취의 중요성이 증가하고 있다. 대두는 단백질 보충과 지방질 보충에 우수한 원료로 알려져 있으며, saponin, phyticacid, isoflavones, hemaglutinins 등 다양한 생리활성 물질을 포함하고 있어 ...
마늘은 \( 2-4 \% \) 첨가 고콜레스테롤 식이로 사육한 흰쥐의 간의 콜레스테롤 함량을 \( 30 \% \) 지하시켰다고 보고하고 있으나 콜레스테롤 급여 시 마늘을 \( 1 \%(17) \) 및 \( 3 \%(18) \) 첨가한 경우 간의 총콜레스테롤과 중성지방의 함량에는 차이가 없었다고 보고하였다. 토끼의 경우 마늘첨가로 간 조직중의 콜레스테롤 감소가 일어난다 하더라도 간의 콜레스테롤 합성 저하보다는 neutral 또는 acidic sterol로의 전환과 관련이 있으며 이는 간의 콜레스테롤 함량을 반영하지 않는다고 하였다. 또 흰쥐 를 대상으로 마늘가루가 지방...	흑마늘 추출물의 양에 따른 간의 지질농도 변화는 혈액의 지질 농도 변화보다 크지 않음을 확인하였다. 6주간 고지방식과 함께 흑마늘을 투여하면 혈중 지질 농도가 크게 개선되는 것으로 나타났다. 이러한 결과로 보아, 흑마늘은 간 조직의 지방 합성을 억제하며, 혈중 지질 농도를 감소시키는 효과가 있을 것으로 추정된다. 이로부터 액상 형태의 흑마늘이 지질 대사에 미치는 영향에 대한 연구는 식품 개발에 새로운 방향을 제시할 것으로 보인다.
사육 및 식이 실험동물은 대한 바이오 코리아에 구입하여 동일한 환경에서 고형배합사료(Rat chow, 삼양사)로써 사육한 체중증가가 비슷한 Sprague-Dawley종 수컷 횐줘로, 동물사육실은 온도 \( 22 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 습도 \( 45 \% \) 내외로 유지시켰으며, lighting cycle은 12시간 주기로 개인별 cage로 자유롭계 물과 표준식이를 먹도록하였다. 실험식이 공급 전날 체중에 따른 난괴법으로 7 마리씩 마우스를 5 group으로 나누어 AIN-76 기본식이에 고지방식이를 공급하였고, 고지방식이의 ...	체중 증가가 비슷한 Sprague-Dawley종 수컷 횐쥐를 실험동물로 하여 고지방 식이와 흑마늘 추출물을 섭취하는의 양에 따라 정상군, 위약군, 저농도군, 중농도군, 고농도군의 5그룹으로 나눈 후 마시는 물을 통해 흑마늘 추출물을 희석하여 정확한 양을 공급하는 방식으로 사육 및 식이 실험을 진행하였다.
생마늘과 흑마늘의 S-allylcysteine (SAC)의 함량 비교 생마늘을 고은으로 숙성시킬 때 높은 온도에 의하여 휘발성유황화합물은 거의 대부분 소실되고 비휘발성 성분만 남게 된다. 흑마늘의 비휘발성 성분에는 페놀성 화합물, 멜라노이딘 색소, 사포닌, 무기염류 등이 있으나 흑마늘의 기능적 특성을 가지는 대표적인 지표성분이 SAC 이라고 할 수 있다. 흑마늘의 주요 성분으로 알려져 있고, 기능성도 잘 알려진 SAC 를 지표물질로 지정하고 제품의 표준화를 위하여 흑마늘 숙성기간에 따른 SAC 의 함량변화를 비교하였다. Fig. 1은 생마늘 및 흑마늘에 들어 있는 S...	본 연구에서는 흑마늘의 주 성분인 SAC의 함량 변화를 관찰하였고, 이를 통해 흑마늘 제품의 표준화에 대한 연구를 수행하였다. 숙성 기간에 따른 SAC 함량의 변화를 분석한 결과, 15일 동안 숙성한 흑마늘에서 가장 높은 SAC 함량 및 최적의 관능적 특성을 보여, 이를 동물 실험에 사용하였다. 이러한 연구 결과를 바탕으로 SAC가 갖는 항산화, 항암, 인지기능 향상 등의 효능에 대해 논의하였다.
따라서 흑마늘 중에 높은 함량이 들어있는 SAC은 흑마늘의 주요 기능성을 갖는 대표적인 성분으로 숙성 흑마늘 제품의 건강 기능성 지표물질로 이용이 가능하다. 체중 및 장기의 중량변화 고지방 식이로 고지혈증을 유도시킨 흰쥐에 15 일 숙성한 흑마늘 첨가식이를 6주 급이 하는 동안 체중 변화를 Table3 에 나타내었다. 정상군, 위약군 몇 실험군 등 모든 실험 동물군에서 6주 동안 실험 종료시점까지 지속적으로 체중이 증가하였다. 실험 시작한 날부터 6주째 동안 최종 몸무게를 보면 정상군은 \( 3.85 \pm 0.32 \mathrm { ~g } / \) day 이였으나...	고지방 식이로 고지혈증을 유도시킨 흰쥐에 15 일 숙성한 흑마늘 첨가식이를 6주 급이 하는 동안 체중 변화를 Table3 에 나타내었는데, 실험 기간 동안 모든 실험 동물군에서 체중 이 지속적으로 증가하였고 유의적 차이는 찾아 볼 수 없었다. 흑마늘 추출물을 저농도군, 중농도군, 고농도군 등 첨가량을 달리하여 6 주간 급여 한 후 흰쥐의 혈청의 중성지방, 총콜레스테롤, HLD-cholesterol, LDL cholesterol 함량을 측정한 결과 첨가농도에 따른 함량 변화는 거의 없었다.
식이섭취량 및 식이효율 실험기간 동안 식이섭취량은 매일 일정시각에 측정하였고 체중은 1 주일에 1 회 일정 시각에 측정하였다. 체중 증가량 \( ( \mathrm { g } ) \)은 같은 기간 동안의 총 식이섭취량 \( ( \mathrm { g } ) \)으로 나누어 식이효율을 구하였다. 혈장, 간 및 변의 지질 농도 혈장의 총 지방 농도는 Frings법으로 측정하였으며, 혈장의 중성지방 농도는 glycerol-3-phosphate oxidase(GPO)-PAP법을 이용한 분석 kit (영동제약)로 \( 546 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정(...	실험기간 동안 식이섭취량은 매일 일정시각에 측정하였고 체중은 1 주일에 1 회 일정 시각에 측정하였고, 혈장의 총 지방 농도, 혈장의 중성지방 농도, 혈장의 콜레스테롤 농도, HDL-콜레스테롤 농도, 간의 총 지방 농도, 간의 중성지방과 콜레스테롤 농도의 흡광도를 측정하였다. 숙성 흑마늘의 제품 규격기준의 표준화를 위하여 본 실험에서는 생마늘의 숙성기간을 다르게 하여 흑마늘을 제조하였을 때 관능검사를 실시하였다.
본 연구는 흑마늘 숙성기간에 따른 S-allylcysteine의 함량을 조사함과 동시에 흰쥐에 고지방 콜레스테롤 식이를 급여하여 고지혈증을 유발시켜 흑마늘을 저농도, 중농도, 고농도로 구분하여 급이한 후 혈중 지질 개선효과를 조사하였다. 재료 및 방법 재료 본 연구에 사용한 마늘은 2010년 6월에 경남 남해에서 난지형 마늘을 구매하여 실힘에 사용하였다. 흑마늘의 제조 통마늘을 흐르는 물에 한 번 씻은 다음 스텐레스 제 밀폐용기에 담은 후 온도 \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 상대습도 \( 90 \% \) 상태로 조걸된 항온항습 숙성실(...	이 연구는 흑마늘 숙성기간과 S-allylcysteine의 함량, 그리고 고지방 콜레스테롤 식이로 인한 고지혈증 유발 및 흑마늘 급여에 따른 혈중 지질 개선효과를 살펴본다. 통마늘은 스테인리스 밀폐용기에 담겨 70℃, 상대습도 90%의 조건에서 10일, 15일, 20일 동안 숙성되며, HPLC 분석방법[2]을 통해 alliin, deoxyalliin, alliicin, dipeptide 등 마늘 성분의 표준물질이 분석된다.
서 론 현대 사회는 의약의 발달로 인간의 평균수명이 늘어나고 있으나 주요 사망원인이 되는 질병은 변하고 있다. 우리나라는 수년간 눈부신 경제성장으로 생활양식이 편리해지고 식생활이 서구화 되면서 각종 만성병이 증가하고 있으며 고혈압, 동맥경화 등 혈액순환기계 질환이 주요 사망 원인이 된다. 혈액순환기계 질환의 원인은 고혈압, 당뇨병, 비만과 함께 고지혈증을 들 수 있으며 그 중에서도 콜레스테롤의 농도가 주요한 위험인자로 알려져 있다. 실제로 콜레스테롤의 수치와 건강과의 관계를 연구한 보고를 보면 혈액 중 콜레스테롤의 수치가 \( 1 \mathrm { mmol } / 1...	현대 사회의 만성병인 혈액순환기계 질환의 주요 위험인자는 콜레스테롤의 농도로 알려져있고, 예로부터 향신료와 민간약으로 사용되어온 마늘은 암, 고혈압, 동맥경화, 혈중지질 및 콜레스테롤 저하효과, 항혈전의 예방과 치료에 효능이 있다고 알려지면서 많은 연구가 진행되고 있다. 생마늘을 높은 온도와 습도에서 장시간 숙성시켜 먹기 좋은 맛이 나는 흑마늘은 숙성을 통해 melanoidins, 총 phenol, 플라보노이드, SAC, SAMC 등이 생성되어 항산화, 암세포 증식억제, 인지기능향상, 간보호 등의 기능성이 있다고 보고되었다.
이와 유사한 연구에서 돈지로 고콜레스테롤을 유도한 흰쥐 에서 혈중 콜레스테롤 함량은 \( 121.3 \pm 15.3 \mathrm { mg } / \mathrm { dl } \) 및 \( 103.4 \) \( \mathrm { mg } / \mathrm { dl } \) 로 유의적 감소를 나타내었다고 하였고 또한 처리 조건을 달리한 마늘의 첨가 급이에도 혈첨 콜레스테롤의 저하 에 유의적 효과가 있었다고 보고하였다. 또한 고지혈증을 유도한 흰지에 고온에서 가열처리한 마늘과 생마늘을 급여한 경우를 비교한 실험에서 가열처리한 마늘을 급여한 경우 혈중 콜레스테롤의 함랑이 낮...	흑마늘 추출물의 첨가량과 숙성기간 따라 LDL 콜레스테롤 농도가 감소하는 것이 확인되었다. 돈지로 고콜레스테롤을 유도한 흰쥐 에서 혈중 콜레스테롤 함량은 감소되었고 처리 조건을 달리한 마늘의 첨가 급이에도 혈첨 콜레스테롤의 저하에 효과가 있었다. 또한 고지혈증을 유도한 흰지에 가열처리한 마늘을 급여한 경우 혈중 콜레스테롤의 함랑이 낮다고 보고한 바와 같이 본 실헙결과에서도 마늘을 장기간 가뎔, 숙성하여 만든 흑마늘도 헐중 콜레스테롤의 저하를 확인한 바 숙성기간 따른 상관성이 있는 것으로 판단된다. 마늘에도 S-methylcysteine sulfoxide등 수 많은 유...
중성지질의 농도는 마늘을 첨가한 고클레스테롤 식이에 혈중 중성지질의 함량이 유의적으로 지하하였다는 연구와 고지혈증 환자에게 건조마늘을 급여하였을 때 대조군에 비하여 중성지질 농도를 저하시킨다는 보고와 본 연구는 비슷한 경향을 나타내었다. 고콜레스테롤 혈증을 유발하는 흰쥐에 마늘즙을 \( 1 \% \) 및 \( 2 \% \) 급이한 경우 유의적 감소를 나타내었다고 하였다. 그러나 마늘 첨가량과 마늘의 열처리에 의하여 혈중 지질함량은 감소할 뿐 유의성은 없다는 보고도 있다.본 실험에서는 고지방식이로 급여한 흰쥐의 중성지질이 증가하였으나 흑마늘 추출물을 저농도, 중농도 및...	마늘 첨가가 혈중 중성지질 함량을 유의적으로 낮추는 연구 결과와, 건조마늘을 고지혈증 환자에게 급여했을 때 중성지질 농도를 줄임을 확인한 보고와 본 연구의 결과는 유사했다. 총 콜레스테롤의 농도는 위약군에서 고지방 급여로 인해 증가되었으나, 고지방식과 함께 흑마늘 추출물을 급여하면 농도가 감소되었다. 흑마늘의 저농도군, 중농도군, 고 농도군에서 혈청 중의 HDL-콜레스테롤의 농도는 대조군에 비해 유의적으로 증가하였다.
효소활성에 대한 온도의 영향 효소의 최적반응 온도를 결정하기 위해 \( 20 \mathrm { mM } \) Tris-HCl buffer \( ( \mathrm { pH } \) 8.0)로 녹인 효소를 점적한 fibrin plate \( ( \mathrm { pH } 7.8) \)를 각 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 범위의 배양기에 넣고 4 시간 후 plate의 용해면적을 축정하여 효소의 활성을 비교하였다. 온도의 안정성은 효소액을 \( 20 ^ {\circ } \math...	효소의 최적 반응 온도를 확인하기 위해, 효소를 Tris-HCl buffer에서 녹인 뒤 fibrin plate에 점적하고 각기 다른 온도에서 4시간 동안 반응시켜 효소 활성을 비교하였다. 또한, 금속 이온의 영향을 알아보기 위해 다양한 금속 이온을 첨가한 후 효소의 활성을 비교하였다. 결과적으로 최적 배양온도는 \( 35 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 생육 가능한 온도 범위는 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 45 ^ {\circ } \mathrm { C } \)이며, 생육 가능한 \( \mathrm { pH...
분자량 측정 BK는 부탄올 농축, 투석, 에탄올 침전, DEAE Sephadex A-50 chromatography, 그리고 Sephadex \( G-75 \) gel filtration을 이용하여 정제하였다. 이 정제된 효소를 SDS-PAGE 전기영동 결과 단일 band롤 화인 할 수 있었으며, 그 분자량은 약 \( 31 \mathrm { kDa } \) 이었다(Fig. 2). Bacillus subtilis BK-17 균주가 생산하는 fibrinolytic enzyme(BK)의 분자량은 지금까지 알려진Bacillus subtilis k-54(29 kDa)와 Bac...	BK는 부탄올 농축, 투석, 에탄올 침전, DEAE Sephadex A-50 chromatography, 그리고 Sephadex \( G-75 \) gel filtration을 이용하여 정제하였으며 BK의 활성 및 안정성에 미치는 \( \mathrm { pH } \)의 영향을 조사하기위해 \( \mathrm { pH } 4.0 \) 10.0까지 조정한 반응액을 이용하여 활성 및 안정성을 검토한 결과, BK의 활성은 \( \mathrm { pH } 7 과 8 \)에서 최대였다.
효소활성에 대한 금속 이온의 영향 금속이온이 첨가되지 않았을 때의 활성을 \( 100 \% \) 로 하여 그 상대적인 활성을 측정하였을 때, \( 1 \mathrm { mM } \) 의 \( \mathrm { Mg } ^ { 2 + } \) 와 \( \mathrm { Mn } ^ { 2 + } \) 에 \( 100 \% \) 활성을 유지 하였으며, \( \mathrm { Zn } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Fe } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Cu } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Co } ^ { 2 + } ...	금속 이온 \( \mathrm { Mg } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Mn } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Zn } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Fe } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Cu } ^ { 2 + } \), \( \mathrm { Co } ^ { 2 + } \)의 첨가로 효소 활성이 100%, 100%, 65%, 77%, 77%, 82%, 95%로 증가하였고, EDTA의 첨가로 45%의 활성 저해가 나타났다. 이는 natto, 청국장, 된장에서 분리한 fibrinolytic en...
효소활성에 대한 온도의 영향 효소의 최적반응 온도를 결정하기 위해 \( 20 \mathrm { mM } \) Tris-HCl buffer \( ( \mathrm { pH } 8.0 \))로 녹인 효소를 점적한 fibrin plate \( ( \mathrm { pH } 7.8) \)를 각 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 범위의 배양기에 넣고 4 시간 후 plate의 용해면적을 축정하여 효소의 활성을 비교하였다. 온도의 안정성은 효소액을 \( 20 ^ {\circ } \math...	효소의 최적반응 온도를 결정하기 위해 \( 20 \mathrm { mM } \) Tris-HCl buffer \( ( \mathrm { pH } 8.0 \))로 녹인 효소를 점적한 fibrin plate \( ( \mathrm { pH } 7.8) \)를 각 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 범위의 배양기에 넣고 4 시간 후 plate의 용해면적을 축정하여 효소의 활성을 바교하고 금속 2가 이온이 포함된 효소용액이나 효소만 포함된 용액을 paper disc에 흡입시켜 fibr...
최근 급속한 시대적 변화에 대응하여 간편하고 편리한 식문화 형성으로 인하여 혈액순환 장애에 따른 심혈관계의 질환 발병률이 증가하고 있으며, 이로 인한 사망률 역시 급속히 증가되고 있다. 상처 혹은 혈전 형성 자극이 유발되면 혈관내피 세포의 변화로 지혈에 관여하는 세포내 단백질들의 분비 및 혈소판 세포 표면의 특성이 변하여 혈전형성 환경이 조성된다. 혈소판 부착 및 활성, 동시에 혈장응고 활성이 트롬빈 형성을 촉진하여 피브린이 축적된다. 일반적으로 혈관내의 피브린 축적으로 인한 혈전의 형성 및 증가로 혈액의 흐름을 방해하거나 혈관을 따라 이동하면서 뇌경색, 심근경색과 ...	최근 혈액 순환 장애로 인해 발생하는 질병의 발병률과 사망률이 급속하게 증가하고 있다. 이는 간편하고 편리한 식문화 형성에 따른 결과로, 상처 혹은 혈전 형성 자극에 의해 혈관내피 세포의 변화로 혈전이 축적되어 혈액 순환계 질환을 유발하고 있다. Bacillus속의 균주들은 혈전분해 효소를 포함하여 다양한 종류의 단백질 분해효소들을 분비하는 특성이 있으며, 김치 및 멸치 젓갈로부터 혈전용해 효소를 분리하고 그 활성을 연구하고 있다.
요 약 마른 볏짚으로부터 fibrinolytic enzyme (BK)을 분비하는 균주를 분리하여 동정한 결과, Bacillus subtilis속으로 분류되었다. 분리된 균주(Bacillus subtilis BK-17)를 배양하여 그 배양액으로부터 에탄올 침전, ion exchange, gel filtration 등의 과정을 거쳐 fibrinolytic enzyme (BK)를 분리 및 정제하였다. 이 정제된 효소를 SDS-PAGE gel 전기영동한 결과 분자량은 약 \( 31 \mathrm { kDa } \) 이었다. BK의 활성 및 안정성에 대한 \( \mathrm ...	마른 볏짚에서 분리된 균주 Bacillus subtilis BK-17로부터 fibrinolytic enzyme (BK)를 분비하였다. BK는 에탄올 침전, 이온 교환, 겔 여과 등의 과정을 통해 분리 및 정제되었으며, 이는 plasminogen activator type보다는 fibrin에 직접 활성을 가지는 것으로 분석되었다. BK는 \(45\%\)의 EDTA에 대한 저해활성을 보였으므로 metallo enzyme로 판명되었다. 또한, BK의 활성은 \(20^{\circ}\mathrm{C}\)에서 약 \(62\%\)를 보여주며, \(50^{\circ}\mathrm{...
혈전용해 활성의 측정(fibrin plate assay) Haverkata-Trass의 fibrin plate법에 따라 \( 2 \% \) gelatin 용액에 녹인 \( 0.2 \% \) fibrinogen 용액 \( 10 \mathrm { ml } \) 에 \( 0.2 \mathrm { M } \) borate 완충 용-액 \( ( \mathrm { pH } 7.8 \) )에 녹인 thrombin 20 unit를 적하하여 잘 섞은 후 이를 petri-dish에 부어 fibrin막을 만들었다. 효소용액을 \( 100 \mu 1 \) 씩 paper disc 에 훕입시...	Haverkata-Trass의 fibrin plate법을 이용하여 fibrin막을 제작하였다. 분리된 단백질의 분자량은 4%의 stacking gel과 12.5%의 separating gel로 구성된 SDS-PAGE를 통한 전기영동으로 결정하였다. 효소의 활성에 영향을 미치는 pH를 조사하기 위해 다양한 pH 조건에서 효소를 희석한 후 잔존활성을 측정하고, 효소활성의 pH 의존성을 검토하여 최적 반응 pH를 결정하였다.
혈전용해 활성의 측정(fibrin plate assay) Haverkata-Trass의 fibrin plate법에 따라 \( 2 \% \) gelatin 용액에 녹인 \( 0.2 \% \) fibrinogen 용액 \( 10 \mathrm { ml } \) 에 \( 0.2 \mathrm { M } \) borate 완충 용-액 \( ( \mathrm { pH } 7.8 \) )에 녹인 thrombin 20 unit를 적하하여 잘 섞은 후 이를 petri-dish에 부어 fibrin막을 만들었다. 효소용액을 \( 100 \mu 1 \) 씩 paper disc 에 훕입시...	Haverkata-Trass의 fibrin plate법에 따라 gelatin, fibrinogen, borate 완충 용액과 thrombin이 포함된 petri-dish에 paper disc에 훕입시킨 효소용액을 놓고 \(\mathrm{37^{\circ} C}\)에서 18시간 방치하여 fibrin막의 용해면적을 측정하여 상대적인 활성을 측정하였다. 분리된 단백질의 분자량은 전기영동하여 결정하고, 효소의 활성에 미치는 pH의 영향을 알아보기 위해 농축한 효소를 다양한 pH로 조정하여 24시간 방치한 후 잔존활성을 측정하였다.
미생물의 동정 선발된 균주 BK-17의 분류학적 동정을 위해 전자현미경 촬영 및 Bergey's manual of systematic bacteriology 방법에 따라 형태학적, 생화학적 특성을 조사하여 최종적으로 Bacillus subtilis로 동정하였다. 혈전용해효소의 분리 및 정제 에탄을 침전 부탄올을 사용하여 Bacillus subtilis BK-17의 배양액을 감압 evaporator로 농축하였다. 농축한 배양액을 \( 20 \mathrm { mM } \) Tris-HCl buffer \( ( \mathrm { pH } \) 7.5)로 투석한 후 에 탄올...	부탄올을 이용하여 Bacillus subtilis BK-17의 배양액을 감압 evaporator로 농축한 후, 이를 투석하여 DEAE Sephadex A-50 column에 흡착시킨 다음 동일 buffer로 용출하였다. 이 과정에서 혈전용해 활성을 갖는 부분만을 선별하여 사용하였다. 또한 Bergey's manual of systematic bacteriology를 이용해 형태학적, 생화학적 특성 조사를 통해 Bacillus subtilis로 최종 동정하였다.
\( \mathrm { AGS } \) 와 \( \mathrm { HepG } 2 \) 세포에 대한 세포독성 실험 위 연구에 대한 재료 및 방법은 이전 실험과 동일하게 실시하였다. 결과 및 고찰 화합물 \(1 \)은 negative FAB-MS에서 \( \mathrm { m/z } ~443 \) \( \mathrm { [M } \)- \( \mathrm { H] } ^ { - } \) 의 분자이 온 peak가 관측되어 분자량을 444로 길정하였다. IR 스펙트럼으로부터 수산기 \( \left (3310 \mathrm { ~cm } ^ { -1 } \right ) \)...	화합물 1은 negative FAB-MS에 의해 분자량을 444로 결정하였으며 IR 스페트럼에 의해 수산기, 카보닐기, 이중결합이 있는 것으로 확인되었다. 또한 이 화합물은 sesquiterpene monoglycoside인 것과 육탄당의 당을 가지고 있다고 예상할 수 있다. 또한 이 화합물의 당이 \(\beta\)-glucopyranose임을 확인하였고 결과적으로 이 화합물은 cyclofarnesane sesquiterpene glucoside 이다.
서 론 겨우살이란 광합성은 가능하지만 물과 영양분은 숙주 나무로부터 흡수하는 반 기생 식물이다. 겨우살이는 유럽에서 고지혈증, 암, 당뇨병을 치료하는 천연 약재로 사용되어 왔으며, 한방에서 간과 신장, 근골을 강화하는 한약재 '상기생(상기생)'도 이에 속한다. 한국에 자생하는 겨우살이로는 강원도, 경상도, 제주도 지방에서 자생하는 겨우살이(Viscum album var. coloratum), 동백나무겨우살이(Korthalsella japonica), 참나무겨우살이(Loranthus yadoriki) 세 가지와 강원도, 경상도, 제주도 산지의 낙엽활엽수에 기생해서 자라...	꼬리겨우살이는 한방에서 사용되는 '상기생'이며, 강원도, 경상도, 제주도 지방에서 낙엽활엽수에 기생해서 자라는 비교적 드문 편의 겨우살이이다. 꽃은 황록색을 띄며 향은 미약하고, 열매는 노란색으로 구형의 열매가 맺힌다. 꼬리겨우살이는 미백, 항산화, 세포독성 활성이 보고되어 있으며, flavonoid, lignan, phenylethanoid 화합물을 분리 동정하였다. 본 실험에서 clclofarnesane sesquiterpene glucoside을 분리 동정했다.
Sesquiterpene glycoside 화합물들의 활성으로는 주로 간보호, 항간독성, 세포독성 활성이 보고되어 있다. 문헌 검색을 통하여 sesquieterpene 구조에서는 당이 결합 되어 있지 않을 때 보다 당이 결합 되어 있을 더 높은 수준의 세포독성 활성을 보임을 확인할 수 있었다. 이에 따라 화합물 1에 대한 세포독성 활성을 기대할 수 있다고 판단하여 활성 실험을 진행하였다. 화합물 1의 Caucasian gastric adenocarcinoma cells \( ( \mathrm { AGS } ) \)와 Hepatocyte carcinoma cells (...	꼬리겨우살이 전초로부터 cyclofarnesane sesquiterpene glucoside 하나를 분리하여 구조를 동정하였고 분리한 flavonol rhamnosides 4종의 암세포에 대한 세포독성 실험 결과와 비교하였을 때 유의한 정도의 세포독성을 보였고, 화합물 1은 AGS와 HepG2 cell에 대하여 농도의존적으로 유의한 정도의 세포독성을 보였으므로 다른 암세포에 대해 비슷한 정도의 세포독성을 가짐을 확인할 수 있었다.
추출 및 분리 건조한 '꼬리겨우살이' 전초 \( 5.5 \mathrm { ~kg } \) 을 \( 80 \% \) methanol \( ( \mathrm { MeOH } ) \) 수용액 \( (20.5 \mathrm { ~L } ) \)으로 실온에서 24시간씩 4회 반복 추출하였다. 얻어진 여액을 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 감압농축하여 \( \mathrm { MeOH } \) 추출물 \( (629 \mathrm { ~g } ) \)을 얻었다. 얻어진 \( \mathrm { MeOH } \) 주출물은 \( \mathrm { H } ...	본 논문은 건조한 꼬리겨우살이 전초 \( 5.5 \mathrm { ~kg } \)을 \( 80 \% \) methanol \( ( \mathrm { MeOH } ) \) 수용액 \( (20.5 \mathrm { ~L } ) \)으로 실온에서 24시간씩 4회 반복해서 추출한 후 여액을 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 감압농축해 \( \mathrm { MeOH } \)를 추출했다. 확보한 \( \mathrm { MeOH } \) 주출물은 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } ~(1.5 \mathrm { ~L...
재료 및 방법공시재료의 처리시험에 공시한 사슴육은 체중 \( 220 \mathrm{~kg} \pm 10 \mathrm{~kg} \) 내외의 Elk 암컷 5마리를 도축하여 24시간 냉각한 후 발골하였고, 배최장근과 대퇴근을 채취하여 냉장온도로 유지하면서 실험재료로 공시하였다. 포장방법에 따른 저장성의 구명을 위한 실험에서는 함기포장(A)과 진공포장(V), 가스치환 포장 \( (\mathrm{M}, 80 \% \) \( \mathrm{CO}_{2}+20 \% \mathrm{~N}_{2} \) )을 하여 냉장온도에서 보관하면서 실험을 수행하였다.보수성의 측정보수성의 측정은...	사슴육으로부터 배최장근과 대퇴근을 채취하여 실험재료로 공시하였고, 포장방법에 따른 저장성을 구명하고자 함기포장, 진공포장, 가스치환포장의 방식으로 냉장온도에서 보관하면서 실험을 수행하였다. 실험육의 보수성, TBARS, VBN, pH, 조직감과 육색을 측정한 후, 결과 데이터의 통계분석은 SAS 프로그램을 이용한 분산 분석과 Duncan의 다중 검정으로 하였다.
에스트로겐 유사효과의 검증 일반적으로 생물체내로 유입된 에스트로겐 유사물질은 에스트로겐을 모방하여 세포 내에 있는 에스트로겐 수용체(estrogen receptor: ER)와 결합하여 DNA의 특정 염기서열인 estrogen responsive element (ERE)를 인식하여 결합한다. 이러한 DNA 상의 반응인자와 단백질의 결합은 그 반응인자에 의해 조절되는 유전자의 전사를 증대시켜 결국 특정 단백질의 발현을 유도하여 에스트로겐 유사물질에 의한 세포반응을 유도하는 것으로 알려져 있다. 이 연구에서는 에스트로겐 수용체를 발현하는 것으로 알려진 인체 유방암 세포주 ...	일반적으로 생물체내로 유입된 에스트로겐 유사물질은 에스트로겐을 모방하여 세포 내에 있는 에스트로겐 수용체(estrogen receptor: ER)와 결합하여 DNA의 특정 염기서열인 estrogen responsive element (ERE)를 인식하여 결합한다. 이 연구에서는 에스트로겐 수용체를 발현하는 것으로 알려진 인체 유방암 세포주 MCF7에 에스트로겐에 반응성을 나타내도록 고안된 CAT 리포터 플라스미드인 pCAT-ERE119-Ad2MLP를 도입한 in vitro 검출시스템을 사용하여 에스트로겐 활성을 측정하였다. 천연물에 포함되어 있는 에스트로겐 효과를 가...
서 론 자연계에 존재하고 있는 천연물이나 식품에는 약효를 나타내는 성분들이 많이 있으며, 천연물 성분들의 각 분획별 생리활성 물질을 규명하는 연구가 세계적으로 활발히 진행되고 있다. 육상식물에서 많이 보고되고 있는 phytoe-stogen은 성호르몬인 에스트로겐과 유사한 구조 및 기능을 가지고 있으며 배당체(glycoside) 형태로 발견된다. Phytoestrogen은 폐경기 이후의 여성에게 에스트로겐 대체 작용을 할 수 있는 것으로 밝혀져 질병예방 차원에서 많은 연구가 수행되고 있다. Phytoestrogen은 in vitro 실험에서 에스트로겐과 유사한 작용을 ...	성호르몬인 에스트로겐과 유사한 구조 및 기능을 가지고 있는 Phytoestrogen은 육상식물에서 흔히 발견되며, 각종 질병을 예방하는데 도움을 준다는 연구결과가 있다. 지구 전체 생물의 80% 이상을 차지하는 해양생물에 대해서도 최근 많은 연구가 이루어짐에 따라 다양한 생리활성 물질을 포함한 유용한 성분들이 지속적으로 밝혀지고 있다. 따라서 본 연구를 통해 해양생물을 대상으로 에스트로겐 유사활성을 가질 가능성이 높은 생물을 선정하여 대상 생물의 에스트로겐 유사효과를 검증하였다.
세포배양 및 Transient Expression Assay MCF7 세포주는 American Type Culture Collection(ATCC, USA)에서 획득하였다. MCF7 세포주는 \( 10 \% \)의 Fetal Bovine Serum (FBS, Bio whittaker, USA)을 포함하는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, Bio whittaker, USA) 배지를 이용하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), \( 5 \% \) \( \mathrm{CO_2} \) incubator에서 배양하였다. ...	MCF7 세포주는 American Type Culture Collection에서 획득하였고 \( 10 \% \)의 Fetal Bovine Serum을 포함하는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium배지를 이용하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), \( 5 \% \) \( \mathrm{CO_2} \) incubator에서 배양, CAT 활성은 CAT-ELISA Kit를 이용하여 Manual에 따라 수행하였다. 파래, 새우, 불가사리, 스피루리나 건조시료 \( 100 \mathrm{g} \)을 에탄올로 추출, 농축한 후 동결건조하...
재료 및 방법 식물재료와 배양조건 본 실험에 사용된 식물세포배양액은 Taxus chinensis의 잎으로부터 얻은 세포주(cell line)를 이용하여 배양하였다. Taxus chinensis로부터 기원된 현탁액 세포는 \( 24^{\circ} \mathrm{C} \) 암조건에서 \( 150 \mathrm{rpm} \) 으로 교반하여 배양하였다. 현탁(suspension) 세포는 수정된 Gamborg's B5 배지, \( 30 \mathrm{~g} / \mathrm{L} \) sucrose, \( 10 \mu \mathrm{M} \) NAA (naphthalene a...	Taxus chinensis 잎에서 추출한 세포주를 이용해 식물 세포 배양액을 준비하였다. 이 세포주는 \( 24^{\circ} \mathrm{C} \)의 암조건에서 \( 150 \mathrm{rpm} \)으로 교반하며, 성분으로는 수정된 Gamborg's B5 배지, \( 30 \mathrm{~g} / \mathrm{L} \) sucrose, \( 10 \mu \mathrm{M} \) NAA (naphthalene acetic acid), \( 0. 2 \mu \mathrm{M} \) BA (6-benzylamino purine), \( 1 \mathrm{~g} /...
동일한 기공크기에서 알루미나의 표면적 변화에 따른 영향 알루미나 흡착제의 물리적인 특성 중 식물유래 타르 및 왁스 성분을 포함한 불순물을 효과적으로 제거하기 위해서 적절한 기공크기가 필요함을 알 수 있었다. 이를 토대로 일정한 기공크기에서 다양한 표면적을 가지는 다공성 메조기공 알루미나를 제조하여 표면적 변화에 따른 흡착제 처리 효과를 조사하였다. 본 실험에서는 일정한 기공크기(기공지름: 3.0-3.3 nm)에서 표면적이 다른 네 종류의 알루미나(Table \( 2,3 \mathrm{~A}-1 \sim 3 \mathrm{~A}-4) \) 를 제조하여 흡착제 처리 실험...	알루미나 흡착제의 물리적 특성으로 식물유래 타르 및 왁스 성분 포함 불순물의 제거를 효과적으로 하기 위해서 적절한 기공크기가 필요했다. 따라서 일정한 기공크기에서 표면적이 다른 알루미나 4가지를 제조하여 흡착제 처리 실험을 하였다. 그 결과 표면적이 증가할수록 바이오매스 유래 유기물이 더 많이 흡착/제거됨을 확인했다.
알루미나 흡착제 제조 분무열분해 공정에 의해 다공성 메조기공 알루미나를 제조하였다. 알루미늄 전구체로 aluminum nitrate \( \left[\mathrm{Al}\left(\mathrm{NO}_{3}\right)_{3}\right. \). \( 9 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \), Aldrich]를 사용하였고, 기공 형성을 위한 주형제로는 poly (ethylene glycol)-block-Poly(propylene glycol)-block-Poly (ethylene glycol) (P123, Aldrich), cetyltrimethyl-a...	분무열분해 공정을 통해 다공성 메조기공 알루미나를 제조하였고, 알루미늄 전구체, poly (ethylene glycol)-block-Poly(propylene glycol)-block-Poly (ethylene glycol), cetyltrimethyl-ammonium chloride, cetyltrimethyl-ammonium bromide를 사용하여 분무용액을 만들었다. X-ray 회절 분석과 FT-IR 분광분석을 통해 흡착제의 색상, 표면 분자 구조 및 화학 특성을 분석하였다.
서 론 Paclitaxel은 주목 (yew tree)의 표피에서 발견된 diterpenoid 계열의 항암물질로 난소암, 유방암, 카포시 종양(Kaposi's sarcoma) 및 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer, NSCLC) 치료용으로 미국 FDA (U.S. Food and Drug Administration) 허가를 취득하여 현재 가장 많이 사용되고 있는 항암제이다. 또한 류마티스성 관절염, 알츠하이머 치료 등의 적용증이 계속 확대되고 있으며, 여러 다른 치료 방법들과의 복합처방에 관한 임상실험이 진행 중에 있어 향후 paclitaxe...	Paclitaxel은 diterpenoid 계열의 항암물질로 FDA 허가를 받아 난소암, 유방암, 카포시 종양 및 NSCLC 치료용으로 가장 많이 사용되고 있으며, 류마티스성 관절염, 알츠하이머 치료 등에도 적용되고 있다. Paclitaxel은 세가지 방법으로 생산할 수 있는데 현재는 식물세포배양으로부터 추출,정제를 통해 순도 높은 paclitaxe을 생산하고 있다. 전처리 공정으로 식물유래 타르 및 왁스 성분을 흡착제 처리 후에 침전 공정을 통해 높은 순도의 crude paclitaxel을 얻을 수 있다. 본 연구에서는 물리적 특성에 차이가 있는 다공성 메조기공 알...
흡착제 처리 건조된 crude extract를 메틸렌 클로라이드에 \( 20 \%( \mathrm { v } / \mathrm { w } ) \) 비율로 녹이고 흡착제 (adsorbent)인 mesoporous spherical alumina를 건조된 crude extract 대비 \( 50 \%( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) 비율로 첨가하여 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분 동안 교반하며 반응시킨 후 여과하였다. 여과액은 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 감압상태...	Crude extract를 메틸렌 클로라이드에 20%(v/w)비율로 녹이고 mesoporous spherical alumina를 50%(w/w)비율로 첨가하여 40\(^\circ \mathrm{C}\)에서 30분 동안 교반하여 반응시킨 후, 헥산에 떨어뜨려 침전하여 비극성 불순물을 제거하고 TGA를 사용하여 유기물의 양을 측정하여 흡착제 처리 효과를 확인하였다. 결과는 알루미나 흡착제의 물리적 특성에서 표면적과 기공부피 보다는 기공크기 흡착제 처리효과가 크게 작용을 하였다고 생각한다. 활성탄을 이용하여 불순물(타르)을 제거하기 위해서는 적당한 기공크기의 활성탄이 요구...
일정한 기공크기(기공지름: \( 4.6-5.2 \mathrm { ~nm } \) )에서 표면적이 다른 세 종류의 알루미나(Table \( 2,5 \mathrm { ~A } -1 \sim 5 \mathrm { ~A } -3 \) )를 제조하여 흡착제 처리 효과를 조사하였다. 흡착제 처리를 한 후 헥산 침전을 수행한 결과를 Fig. \( 4 \mathrm { ~B } \) 에 나타내었다. 알루미나의 표면적이 증가할수록 paclitaxel 순도가 증가하다가 5A-2 (277 \( \left . \mathrm { m } ^ { 2 } / \mathrm { g } \right...	바이오매스에서 유래한 항암 물질 paclitaxel 정제를 위해 물리적 특성이 다른 메조기공 알루미나 흡착제를 만들어 흡착제 처리 효과를 조사했다. 그 결과 알루미나의 물리적 특징 중 표면적과 기공 부피 보다는 기공 크기가 흡착제 처리 효과에 많은 영향을 미쳤고, 균일한 기공크기에서 흡착제의 표면적은 paclitaxel 순도뿐만 아니라 수율에 많은 영향을 미쳤다. 즉, 흡착제의 표면적이 증가할수록 paclitaxel과 불순물의 흡착 정도는 증가했다.
따라서 토양 성분 분석에서는 갯벌 토양의 황산염 함량이 가장 높았지만, 실제 혐기 환경에 존재하는 초산과 젖산을 이용하는 SRB는 논토양이 평균 \( 10 ^ { 5 } \mathrm { ~MPN } / \mathrm { g } \), 담수가 평균 \( 10 ^ { 4 } \) \( \mathrm { ~MPN } / \mathrm { g } \) 그리고 갯벌에 그 이하의 균이 존재하고, 유기농 토양보다 농약 토양이, 그리고 오염담수 토양보다 청정 담수 토양의 SRB 분포가 약간 많음을 알 수 있었다. 그러나 계절적인 변화에 있어서는 큰 차이를 나타내지 않는 것으로 확...	본 연구에서는 토양 성분 분석을 통해 갯벌 토양의 황산염 함량이 높음을 확인하였으나, SRB 균의 분포는 논토양과 담수에서 더 높았다. 계절적 변화는 유의미하지 않았다. 가스 크로마토그래피를 이용하여 모든 토양 시료에서 3주 배양 시 최고의 황화수소 생성량을 관찰하였고, 청정갯벌 토양은 \(19.19 \mu \mathrm{mol}/\mathrm{g}\), 오염갯벌 토양은 \(52.71 \mu \mathrm{mol}/\mathrm{g}\)의 황화수소를 생성하였다.
황산염 환원세균(SRB)의 분포 유기농 토양에서 초산을 이용하는 SRB가 \( 9.33 \times 10 ^ { 4 } -2.4 \times 10 ^ { 5 } \) \( \mathrm { ~MPN } / \mathrm { g } \), 젖산을 이용하는 SRB는 \( 9.32 \times 10 ^ { 3 } -7.49 \times 10 ^ { 4 } \mathrm { ~MPN } / \mathrm { g } \)이 검출되어 유기농법 토양에 존재하는 평균 SRB는 \( 1.03 \times 10 ^ { 5 } \) \( \mathrm { MPN } / \mathrm {...	유기농법 토양, 농약 토양, 청정 담수, 오염 담수에서 초산과 젖산을 이용하는 SRB의 수치를 조사하였다. 유기농법 토양에서의 평균 SRB는 \(1.03 \times 10^5 ~MPN/g\), 농약 토양에서는 \(1.27 \times 10^5 ~MPN/g\), 청정 담수에서는 \(2.30 \times 10^4 ~MPN/g\), 오염 담수에서는 \(1.92 \times 10^4 ~MPN/g\)로 나타났다. 그러나 청정 갯벌과 오염 갯벌 토양에서 초산과 젖산을 이용하는 SRB는 \(3.61 \times 10^4 ~MPN/g\) 미만으로 측정되어 MPN으로 확인할 수 없었...
결 과 토양 성분 토양시료의 성분 분석 결과, 수분함량은 유기농법 토양이 농약 토양보다, 그리고 갯벌 토양 보다 담수 토양에서 더 높게 나타났고, 각 토양의 수분 함량은 장마 후인 8월에 채취한 토양에서 가장 높게 나타났다. 그리고 계절이 겨울로 갈수록 전반적으로 수분 함량은 감소하였으나 청정 지역과 오염 지역 토양간의 수분 함량 차이는 나타나지 않았다. 총 탄소는 농약과 청정 갯벌 토양에서 낮은 함량을 나타내고, 오염 지역 토양이 청정 지역 토양보다 비교적 높음을 알 수 있었으나, 수분함량의 경우처럼 계절의 변화에 따른 차이는 볼 수 없었다. 그러나 대부분의 토양에...	토양 시료 분석 결과, 수분함량은 유기농법 토양에서 가장 높았고, 총 탄소는 오염된 지역 토양에서 비교적 높게 나타났다. 장마 후인 8월에 채취한 토양의 수분함량은 가장 높았다. 총 질소와 총 무기인은 논과 담수 토양에서 더 높았으며, 갯벌 토양에서는 높지 않았다. 황산염 함량은 갯벌 토양이 가장 높았다.
황산염환원 세균 수 조사 토양시료 내에 기질로 초산과 젖산을 이용하는 황산염환원 세균의 수를 most probable numbers (MPN) 방법으로 실험한 후, 그 결과를 most probable numbers calculator (version4.04; United States Environmantal protection agency, Ohio) 프로그램을 이용하여 산정하였다. 황화수소 발생량 측정 \( 1 \mathrm { ~g } \)의 토양을 \( 9 \mathrm { ml } \)의 혐기성 BCYT 배지가 들어있는 혐기배양 시험관(Bellco Glass ...	토양시료 내의 황산염환원 세균 수를 most probable numbers (MPN) 방법으로 실험하고, 결과를 계산하였다. \(30^{\circ}C\)에서 배양하며, 디지털 압력계와 가스 크로마토그래피를 사용하여 황화수소 생성량을 조사하였다. 시험병에 토양시료, 초산 아연, BCYT 배지를 넣고 황산염을 환원시킨 후, 염산과 염화크롬을 추가하여 환원된 황산염을 포획하였다. 방사성 동위원소를 측정하여 황산염 환원율을 조사하였다.
전체적으로 초산과 젖산을 이용한 황화수소 생성량의 평균은 각각 \( 8.7 ~ \mu \mathrm { mol } / \mathrm { g } \)과 \( 15.6 \mathrm { ~ \mu mol } / \mathrm { g } \)으로 젖산을 이용할 때 황화수소 생성량이 더 많음이 확인되어 초산을 이용하는 완전 산화균보다, 발효산물을 초산까지 산화하는 불완전 산화균의 활성이 우세한 것을 확인하였다. 황산염 환원율 \( { } ^ { 35 } \mathrm { S } -S O_ { 4 } { } ^ { 2- } \)를 이용하여 황산염 환원율을 조사한 결과 유기농 ...	황화수소 생성에서는 초산보다 젖산이 더 효과적이며 완전 산화균보다 불완전 산화균의 활성이 더 우세했다. 황산염 환원율을 조사한 결과, 농약 토양과 유기농 토양의 SRR 모두 10월 시료 토양의 수치가 가장 컸다. 갯벌 토양에서 청정 갯벌은 10월에, 오염 갯벌은 8월에 SRR 수치가 가장 컸다. 담수토양의 SRR은 여름과 가을에는 갯벌토양과 비슷한 수치를 보였다. 담수와 갯벌을 비교하면 청정 토양과 오염 토양이 각각 서로 유사한 수치를 보였고, 일반적으로 오염 담수지역이 청정담수 지역보다 SRR이 높았다.
황화수소 생성 실험에서 기질로 초산보다 젖산을 이용할 때 황화수소가 더 많이 생성하는 것으로 보아, 이들 토양에는 초산을 이용하는 완전 산화균보다 발효산물을 초산까지 산화하는 불완전 산화균의 활성이 우세한 것으로 추정된다. 황산염 환원 반응에서 젖산이 초산으로 불완전 산화할 경우의 표준자유에너지의 변화 \( \left ( \mathrm { G } ^ { 0 \prime } \right ) \)가 \( -160.1 \mathrm { ~kJ } / \mathrm { mol } \cdot \mathrm { sulfate } \), 초산이 이산화탄소로 완전 산화할 경우 \(...	수소 생성은 불완전 산화균의 활성에 의해 인증된다. 황화수소 생성 실험에서 젖산이 초산보다 더 많이 생성되는 것으로 보아, 토양에는 불완전 산화균의 활성이 우세함이 추정되고, 불완전 산화가 완전 산화보다 더 자발적인 반응이라는 것이 인증되었다. 그리고 계절별로 황화수소 생성은 10월에 가장 높아, 온도보다는 영양소 성분에 의해 영향을 받는다.
토양시료 채취 유기농법, 관행농법, 청정담수, 오염담수, 청정해수, 오염해수 총 6가지 종류의 토양을 6월, 8월, 10월과 11월(12월) 총 4회에 걸쳐 채취하였다. 토양시료는 유기농과 농약, 청정, 오염담수 그리고 청정, 오염 갯벌 별로 각각 3지점의 토양에서 각 지점 별로 각각 3곳의 깊이 \( 10 \mathrm { ~cm } \) 정도의 토양을 채취한 후, 이들을 동량씩 혼합하여 각 지점의 대표적인 시료로 사용하였다. \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)로 유지하면서 운반된 토양은 황산염 환원균수, 황산염 환원율, 황화수소 생성량 그리...	6가지 종류의 토양을 4회에 걸쳐 10cm 깊이 3지점에서 채취하여 각 지점 별로 동량 혼합하여 대표적인 시료로 사용하였다. 채취된 토양성분은 공정시험법에 의거해 분석하였는데, 수분은 건토 중량법, 총 질소는 Kjeldahl 법, 총 무기인은 분광기를 통해 분석하였다. 또한 암모니아와 황산염의 성분도 각각의 화학적 방법으로 분석하였다.
토양 성분과 황산염 환원균의 분포를 비교한 결과, 농약 토양이 유기농 토양보다, 청정 담수토양이 오염 담수토양보다 황산염 환원균의 분포가 비교적 우세한 것으로 확인되어, 토양 성분은 갯벌 토양의 황산염 함량이 가장 높지만, 토양 내 황산염 성분이 일정량 이상 존재하면 토양 내 황산염 함량보다 다른 토양 성분들의 함량이 높은 토양에 황산염 환원균이 비교적 많이 분포하는 것을 확인하였다. 또 본 실험에서 확인 된 황산염 환원균의 수가, 논토양이 평균 \( 10 ^ { 5 } \mathrm { ~MPN } / \mathrm { g } \), 담수가 평균 \( 10 ^ { ...	본 연구에서는 토양 성분과 황산염 환원균 분포를 분석하였다. 토양 성분이 더 많은 농약 토양과 청정 담수토양에서 황산염 환원균 분포가 우세하였으며, 토양 내 황산염 성분보다 다른 토양 성분들의 함량이 높은 토양에 황산염 환원균이 더 많이 분포하는 것을 확인하였다. 이는 배지성분과 조건 등에 따라 황산염 환원균의 차이가 발생하는 것으로, 이를 파악하기 위해 방사성동위원소 \( { } ^ { 35 } \mathrm { S } - \mathrm { SO } _ { 4 } ^ { -2 } \)를 이용한 T-MPN 방법을 통한 추가 연구가 필요하다.
서 론 혐기성 상태를 유지하는 물에 잠긴 토양의 유기물 분해는 매우 복잡하며 여러 미생물 군집이 관여하는 일련의 동조된 과정에 의해 일어난다. 다양한 미생물에 의해 고분자 물질이 단량체로 분해된 후, 분해된 단량체는 Clostridium, Lactobacillus, Acetobacter 속의 일차적인 발효세균에 의해 휘발성 지방산, 알콜, 초산, 개미산, 수소, 이산화탄소 등으로 발효된다. 그리고 이들에 의해 생성된 초산, 개미산, 수소, 이산화탄소는 메탄생성세균에 의해 직접 메탄으로 전환하지만, 그 외의 발효 산물들은 이차적으로 발효균들의 대사활동으로 초산이나 수소...	다양한 미생물 군집이 참여하여 혐기성 상태에서 토양의 유기물이 분해되는 과정이 전자수용체의 존재에 따라 달라질 수 있다. 이를 연구하기 위해 오염된 연못과 갯벌, 청정 연못과 갯벌, 그리고 유기 농법과 관행 농법에서의 논토양을 채집하여 화학적 성분과 황산염 환원률, 황산염 환원균수, 황화수소 생성량을 측정하였다. 이를 통해 담수와 해수의 혐기 환경토양, 그리고 오염된 혐기환경토양과 청정 혐기환경 토양에서의 황산염환원에 대한 상관관계를 종합적으로 탐색하였다.
따라서 논토양의 SRR이 다른 지역 토양보다 높았고, 논토양끼리의 비교에서는 큰 차이는 없었으나 농약 토양이 유기농 토양보다 약간 높게 나타났고, 담수 토양보다는 갯벌 토양에서 더 높게, 그리고 청정 지역 토양보다는 오염 지역 토양의 SRR 값이 더 높은 것으로 확인되었다. 전체적으로는 농약 토양과 유기농 토양이 가장 큰 SRR 값을 나타냈고, 그 다음으로 오염 갯벌 토양, 오염 담수 토양, 청정 갯벌 토양 그리고 청정 담수 토양의 순서로 나타났다. 토양성분과 황산염 환원율의 상관관계 본 실험에서 조사된 토양의 화학 성분들 중 특히 자연 생태계의 균의 성장을 제한하는...	본 실험에서 논토양 SRR이 높고, 논토양이농약 토양과 유기농 토양의 SRR 값을 나타났다. 또한 담수토양보다는 갯벌 토양이, 청정지역 토양보다는 오염지역의 토양이 SSR값이 높았다. 본 연구를 통해 담수와 해수 그리고 오염지역과 청정지역, 유기농법과 관행농법 토양을 채취해 토양성분에 대해 알아보고자 했다. 황산염을 제외한 대부분의 토양성분은 논토양이 높게 나타났으며 유기농법이 다양한 토양성분을 함유하고 있어 작물이 자람에 있어 긍정적 영향을 줄 수 있음을 알 수 있었다.
WiDr 인체 대장암세포 증식 억제 효과 각 polymannuronate의 \( \mathrm { WiDr } \) 에 대한 암세포 중식 억제 효과는 Fig. 3과 같다. Polymannuronate의 분자량이 감소할수록, 각 polymannuronate의 농도가 증가할수록 WiDr 대장 암세포의 증식억제 효과가 증가하는 것으로 나타났다. 즉,whole molecular polymannuronate를 \( 0.25 \% \) 의 농도로 처리하였을 때, \( 48.1 \% \) 의 증식 억제율을 보였고 \( 0.25 \% \) 의 농도로 \( 40 \mathrm { k...	Polymannuronate의 분자량 감소와 농도 증가가 WiDr 대장 암세포와 HT-29 대장암세포의 증식 억제에 기여함을 확인하였다. 특히, 모든 분자량의 0.25% 농도에서 50%의 증식 억제율이 관찰되었으며, 이는 DNA 합성능의 감소를 통해 세포 증식을 지연시키는 결과를 가져왔다. 이 과정에서 세포 형태의 변화는 없었음이 확인되었다.
경제 수준의 향상과 함께 국민소득의 향상으로 동물성 식품소비량이 현저히 늘어났으며, 서구화된 식생활로 식이섬유 함량이 적은 가공식품의 섭취가 잦아짐에 따라 대장암과 같은 성인병과 비만증이 증가하게 되었다. 역학적 연구에서 육류와 대장암은 유의적인 양의 상관관계를 가지며, 고섬유식이를 하는 집단에서는 위험도가 감소한다는 것을 확인하였다. 따라서, 이를 예방하기 위하여 지질과 같은 열량원의 가치는 적은 반면 점질 다당류 식이섬유인 알긴산 등의 생리활성 물질이 풍부하게 함유되어 있는 식품인 미역, 다시마와 같은 해조류의 식이섬유에 대한 관심이 새롭게 부각되고 있다. 이러한...	경제 수준의 향상과 함께 동물성 식품 소비량이 증가하면서, 대장암과 비만증 등의 성인병이 증가하게 되었다. 이를 예방하기 위해 가공식품에 식이섬유를 첨가하고 있으며, 알긴산이 풍부하게 함유된 미역, 다시마 등 해조류의 식이섬유에 대한 관심이 새롭게 부각되고 있다. 본 연구에서는 polymannuronate를 부분가수분해하여 분자량별로 제조한 \(40\mathrm{kDa}\), \(10\mathrm{kDa}\) polymannuronate와 전분자량 polymannuronate가 인체 대장암세포의 증식과 DNA 합성에 어떠한 영향을 미치는 지를 검토하고자 한다.
대장암세포 배양 HT-29 대장암세포는 RPMI 1640 배양액에, DLD-1, WiDr 대장암세포는 MEM 배지에 미생물의 오염이나 증식을 억제 하기 위해 항생제 ( 100 units / mL penicillin, 100 units /mL streptomycin)와 \( 10 \% \mathrm { FBS } \) 를 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) , \( 5 \% \) \( \mathrm { CO } _ { 2 } \) incubator에서 배양하였다. 세포가 \(80 \% \) 정도 자라면 PBS-EDTA로 monolaye...	DLD-1, WiDr 대장암세포는 RPMI 1640 배양액과 MEM 배지에 항생제, \( 10 \% \mathrm { FBS } \) , \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \), \( 5 \% \) \( \mathrm { CO } _ { 2 } \) incubator에서 배양하고, Polymannuronate의 증식 영향을 측정하기 위해 96-well plate와 24-well plate에 분주한 HT-29, DLD-1, WiDr 대장암세포에 Polymannuronate를 첨가하여 배양하였고, Celltiter 96 AQueous Non-Radi...
Polymannuronate의 대장암세포의 형태학적 변화 측정 각각의 polymannuronate를 첨가하였을 때, 대장암세포의 형태학적 관찰 및 생존율을 육안으로 살펴보기 위해서 대장암 세포를 24-well plate에 100,000 cells/well의 농도로 분주하고 \( 10 \% \) FBS를 함유한 배양액으로 희석하여 배양하였다. 각 well 당 세포가 \( 60 \% \) 정도 자랐을 때, SFM으로 교환하여 24 시간 동안 배양한 후, 각 polymannuronate를 \( 0.01 \% \), \( 0.1 \% \), \( 0.25 \% \), \(0...	Polymannuronate를 대장암 세포에 첨가하여 형태학적 변화 및 증식을 측정한 연구 결과, polymannuronate의 분자량이 감소할수록 HT-29 대장암세포의 증식 억제 효과가 증가하는 것을 확인하였고 DLD-1 대장암세포에는 증식 억제효과를 보이지 않는 것으로 나타났다.
해조류에 의한 암세포 중식억제 효과에 관한 다른 연구들을 살펴보면, 톳과 미역의 열수추출물을 쥐에게 10 일간 투여한 결과 \( 56.6 \% \) 와 \( 69.8 \% \) 의 종양 중식억제 효과를 보였다고 하였다. 미역과 다시마의 다당류 분획은 sarcoma-180 세포에 대하여 항암작용을 나타내었으며[18], 또한 Sargassum fulvellum에서 분리한 알긴산은 대식세포의 활성을 통해서 항암활성을 나타낸다고 하였다. 또한, 일본에서 주로 식용되는 Wakame(미역)과 Mekonbu(다시마)의 수용액 성분은 쥐의 유방암에 대해 강한 저해작용을 보였고, M...	본 연구는 알긴산의 부분가수분해 과정에서 추출된 polymannuronate가 HT-29 대장암세포의 증식을 저해하는 것을 확인하였다. 이를 통해 polymannuronate가 대장암 예방과 치료에 중요한 역할을 할 수 있음을 시사하였으며, 이에 대한 보다 자세한 연구가 필요하다는 결론을 내렸다.
재료 및 방법 신이추출물 제조 신이는 목련과 및 그 밖의 동속 근연 식물의 꽃봉오리를 말하는 것으로 본 실험에 사용한 신이추출물은 (주)뉴온에서 제공받아 사용하였다. 실험에 사용한 신이는 중국 사천성에서 수확하여 건조한 목련(Magnolia kobus) 꽃봉오리를 사용하였으며 추출물은 Shaanxi Jiahe Phytochem Co., Ltd. (Shaanxi, China)에서 제조하였다. 추출물은 목련 꽃봉오리를 약 \(8 \)배 중량의 \(95 \) \( { } ^ {\circ } \mathrm { C } \) 물로 \(2 \)시간씩 \(3 \)회 추출한 후, \...	본 연구에서는 목련과 및 그 밖의 동속 근연 식물의 꽃봉오리인 신이를 사용한 추출물을 실험에 사용하였다. 추출과정은 목련 꽃봉오리를 물로 3회 추출한 후 농축 및 분무건조하여 얻은 추출물을 사용하였다. 실험에서는 신이 추출물을 최고용량으로 설정한 후 다른 농도는 일정한 간격으로 설정하였다. 실험에는 6주령의 암 수컷 SD rat를 사용하였고, 동물실험은 AAALAC-1에 인증된 기관의 동물실험윤리위원회의 승인을 받아 표준작업순서에 따라 수행되었다.
사료 및 물의 급여방법 실험동물용 고형사료(Teklad Certified Irradiated Global \( 18 \% \) Protin Rodent Diet \(2918 \)C, Research Diet INC., New Brunswick, NJ, USA)는 두열바이오텍에서 공급받아 급이기에 넣고 자유섭취 하였다. 음수는 음용 상수도수를 정수시킨 후 폴리카보네이트제 물병에 넣고 멸균하여 자유섭취 하였다. 사료와 음수의 분석은 생산자로부터 공급된 성적서 및 국가공인 검사기관에서 검사한 자료를 참고하여 분석결과가 시험기관에서 정한 허용범위내에 속하는지를 확인하였다. ...	실험동물은 고형사료(Teklad Certified Irradiated Global \( 18 \% \) Protin Rodent Diet \(2918 \)C)를 자유섭취하였다. 실험 종료 후 생존 동물은 음수를 자유섭취하면서 절식을 진행하였고, 도살 후 부검소견을 관찰하였다. 통계학적 결과는 평균 ± 표준편차로 표현되었고, 시험물질 투여군과 대조군 간 유의성은 Student's t-test를 통해 \( p<0. 05, p<0. 01, p<0. 001 \) 수준에서 검증하였다.
서 론 해양심층수는 수심 \( 200 \mathrm{~m} \) 이상에 있는 저온수로서 저온성, 청정성, 안정성 및 부영양성 등의 자원적 특성을 가진 유용한 해수자원이다. 최근, 세계적으로 해양심층수를 이용한 개발사업이 확산되고 있는 추세이며, 미국, 일본 등 선진국에서는 10여년 전부터 해양심층수를 이용하여 대체에너지개발, 수자원, 화장품, 생수 및 식품산업 분야에 활발히 이용하고 있다. 특히 일본을 중심으로 해양심층수의 난치성 질환(심혈관계질환, 알러지 등)에 대한 의학적 효능에 대한 관심이 증가하여 연구가 진행되고 있으며 질병치료에의 응용에 대한 관심도 고조되고...	해양심층수는 수심 \( 200 \mathrm{m} \) 아래 있는 저온수로서 난치성 질환(심혈관계질환, 알러지 등)에 대한 의학적 효능 개발과 질병치료 응용 연구가 이루어지고 있다. 최근 들어 암 연구는 치료보다 예방연구가 더 활발하게 진행되고 있으며, 특히 발암과정을 단계별로 억제하는 표적 효소를 제어해서 암을 예방하는 물질탐색이 활발하게 이루어지고 있다. 본 논문에서는 동해 해양심층수가 생화학적 표식자(암발생 억제물질 연구에 쓰임)인 CYP 1A2 활성, QR, GST의 활성, GSH 함량, ODC 활성에 미치는 영향을 알아보았다.
재료 및 방법 시약 Minimum essential medium (MEM), S-MEM, antibiotics, trypan blue dye, \(\beta \)-naphthoflavone \( (\beta\)-NF), methoxyresor-ufin, 2-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one (flavone), 3-4,5-dime-thylthiazol-2-yl-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT), glucose-6-phosphate dehydrogenase, glucose-6-phosphate, chloro-2,4-d...	해양심층수를 사용하여 역삼투압 시스템으로 탈염과 농축을 진행하였고, 탈염된 심층수에 미네랄을 첨가하여 희석하여 실험을 진행하였다. 관류법으로 처리한 흰쥐의 간 조직으로부터 Phol과 Fouts의 방법을 참고하여 CYP 1A2 활성을 진행하였고, 양성 대조군은 flavone을 사용하여 저해도 결과를 \(\%\)로 나타내었고 QR 활성은 MTT의 분당 환원된 흡광도와 crystal violet의 흡광도에 의해 산출하였고, QR의 활성 유도는 대조군의 QR 활성에 대한 시료에 의한 활성의 비로 계산하였다.
결과 및 고찰 CYP 1A2의 활성 저해효과 Phase Ⅰ 약물대사 효소인 CYP 1A2는 체내 \(\cdot\) 외의 각종 유해물질, 발암이나 돌연변이를 유발시키는 여러 화학물질 (xenobiotics)의 체내 활성화를 유도하여 발암과정의 개시단계(initiation)를 유발시키는 것으로 알려져 있다. 따라서 cytochrome P450 효소활성 억제효과는 암예방 효과를 의미하므로 해양심층수가 \( \beta\)-NF에 의해 유도된 CYP 1A2 효소활성 억제율을 측정한 결과, 해양심층수의 경도가 100, 200, 400, 600, 800, 1,000으로 증가함에 ...	해양심층수가 간세포에서의 QR과 GST의 활성을 증가시킨 것으로 보아 외부물질이나 대사산물에 의해 일어날 수 있는 암발생 억제 효과가 있는 것으로 사료되며 발암과정의 개시단계(initia-tion)를 저해할 수 있을 것으로 보인다. GSH는 외부의 독성물질이 세포내 침입했을 때 직접 반응하거나 독성물질과 결합하여 무독하게 하는 기능을 가지고 있으므로 해양심층수에 의해 경도의존적으로 GSH의 함량이 증가되어 해양심층수가 산화물질과 기타의 독성물질을 무독화할 가능성이 있을 것으로 추측할 수 있으며 또한, ODC 활성증가는 종양발생의 촉진단계를 자극하므로 해양심층수의 OD...
GST 활성 세포내 GST 활성 측정은 Habig 등의 방법을 응용하여 측정하였다. Hepa 1c1c7 세포를 96-well plate에 \( 0.5 \times 10^{4} \mathrm{~cells/well}\)로 접종시키고 24시간 배양 후, 해양심층수를 경도별로 포함한 새 배양액 \( 200 ~\mu \mathrm{l} \)을 각 well에 처리하였다. 48시간 배양 후, 세포를 세척하고 용해시켰다. 배양된 세포내에서 유도된 GST 활성 측정을 위해 \( 0.1 \mathrm{~M} \) potassium phosphate buffer (\( \mathrm{p...	세포내 GST 활성 검사는 Habig 등의 방법을 활용하여 검사한다. Griffith의 방법을 바꿔 세포내 총 GSH 생성량을 검사하였다. Mouse epidermal cells, line 308을 24-well tissue culture plate에 well당 \( 2 \times 10^{5} \mathrm{~cells/ml}\) 세포를 주입하고, 해양심층수, 그리고 양성대조군으로 \( 0.01 \mathrm{~mM} \) DFMO을 처리하여 6시간 동안 배양한다. 세포내 총 단백질 양은 BCA protein kit를 활용하여 BSA를 표준 단백질 용액으로 사용한 ...
결과 및 고찰 건조 및 염 처리에 따른 뿌리신장 건조 및 염 처리한 고체배지에서 치상 후 5 일간 생육시킨 동진벼의 뿌리 길이를 조사하였다. PEG 처리농도에 따른 뿌리길이는 대조구 (\(0 \%\) PEG)에 비해 \( 1 \% \)PEG 처리구는 \( 92 \% \), \( 2 \% \) PEG 처리구는 \( 67 \%, 4 \% \) PEG 처리구는 \( 14 \% \) 로 \( \)PEG 농도를 높임에 따라 신장의 억제가 관찰되었으며. 특히 \( 2 \% \) 와 \( 4 \% \) PEG 처리구에서는 현저하게 뿌리신장이 억제되었다. 한편, NaCl 처리에 따...	본 연구에서는 동진벼의 뿌리 길이를 조사하여 염 민감성 작물로서의 특징을 분석하였다. 염에 대한 처리와 건조한 환경에서 생육 시킨 후, 뿌리의 구조적 변화를 살펴보았다. 결과적으로 이러한 처리가 뿌리 생육의 저해를 일으키며, 이는 주로 이온의 영향에 의한 세포벽의 약화 때문으로 판명되었다.
재료 및 방법 공시재료로서는 국내에서 널리 재배되고 있는 일반 재배형 동진벼(Oryza sativa L. var. Dongjinbyeo)를 사용하였다.배지는 \( 0.4 \% \) agar를 넣고 잘 녹인 다음, 배양시험관에 \( 10 \mathrm { ml } \)씩 분주하여 agar 고체 배지(이후, 고체배지라 칭함)를 작성하였다. 종자는 \( 1 \% \) 차아염소산 나트륨으로 10 분간 종자표면을 살균한 후, 5 번 정도 증류수로 헹군 후, 표면 살균한 동진벼를 고체배지가 들어 있는 배양시험관에 1 립씩 치상하였다. 처리구는 \( 0.4 \% \) 한천을 넣고...	공시재료로서는 국내에서 널리 재배되고 있는 일반 재배형 동진벼를 사용했고 치상 후 5일간 생육시킨 식물체를 채취하여 뿌리길이를 측정하였으며, 지상부와 지하부로 나누어 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 72 시간 이상 건조시켜 건물 생산량을 조사했다. 상대 건물중( \(\%\))의 산출식은 \(\text{상대 건물중} (\%) = ( \text{처리구 건물무게} \div \text{대조구 건물무게} ) \times 100\) 과 같으며 조직관찰은 면도날을 이용, methyl-lignin 축적에 의한 리그닌화된 조직을 진한 녹색으로 염색해...
건조 및 염 처리에 의한 건물 생산량의 변화 PEG및 \( \mathrm{NaCl} \)을 처리한 고체배지에 치상 후 5일간 생육시킨 동진벼의 건물 생산량을 지하부와 지상부로 나누어 조사하였다. PEG 및 \( \mathrm{NaCl} \) 처리에 의한 건물생산은 지상부와 지하부에서 모두 억제되었다. PEG 처리에 따른 지상부의 상대 건물중 \(\%\)은 \( 1 \% \) PEG 처리구에서 \( 81 \%, 2 \% \) PEG 처리구에서 \( 79 \%, 4 \% \) PEG 처리구에서 \( 10 \% \)로 감소한 반면, 지하부의 상대 건물중은 \( 1 \% \...	동진벼의 건물 생산량에 대한 연구를 수행하였다. PEG 및 \( \mathrm{NaCl} \)을 처리한 고체배지에서 동진벼를 치상한 후 5일 동안 생육시킨 결과, 건물생산은 지상부와 지하부에서 모두 억제되었다. 이러한 고체배지의 이용은 공간적 효율성을 높이며, 발아기의 스트레스에 대한 식물체 반응 및 내성 특성을 관찰하는 데 유용함을 확인하였다.
서 론 지난 수십 년 동안 장기이식수술, 항암치련, 후천성면역결핍증(AIDS) 및 고령화 등으로 인하여 면역능력이 저하된 환자들이 급격히 중가하고 있고, 이들 고위험 군의 경우 Candida, Aspergillus 및 Cryptococcus 등의 인간 기회감염성 병원성 곰팡이(human opportunistic fungal pathogen)에 의한 감염과 질환이 전세계적으로 지속적인 증가추세를 보이고 있다. 특히 가장 대표적인 기회감염성 곰팡이인 Candida 는 미국 병원들에서 4 번째로 혈액 배양물에서 많이검출되는 병원감염(nosocomial infection) ...	세계적으로 면역능력 저하 환자의 증가에 따라 Candida, Aspergillus, Cryptococcus 등의 기회감염성 병원성 곰팡이에 의한 질병이 급증하고 있다. 이런 상황은 장기이식, 항암치료, 후천성면역결핍증(AIDS), 고령화와 같은 요인으로 야기되며, 특히 노령화 사회가 확산함에 따라 곰팡이 감염은 더욱 빈번해질 것으로 예상된다. 기존의 항진균제는 독성과 저항성 균주 문제로 인해 대응이 어렵기에, 독성이 적고 넓은 활성을 가진 새로운 항진균제의 필요성이 커지고 있다. 이를 위해 전 세계의 많은 연구소에서는 항 Cryptococcus 타깃 인자 개발에 힘쓰...
C. neoformans의 Stress-activated Signaling Pathway의 연구 지구상에 존재하는 수많은 생명체들은 생명 유지를 위해서 주변환경과 다른 생물체들과 상호작용하며 적응하여 살아간다. 외부에서 감지된 자극은 다양한 신호전달체계를 통해서 신호로 전달되고, 이 신호는 생장, 분화, 생식, 대사 등 세포 내에서 매우 복잡한 활동을 조절하여 해당 환경에 적응할 수 있도록 한다. 만약 이러한 환경 반응성 신호전달체계를 정확하게 이해 하고 조절 할 수 있다면 새로운 항곰팡이제의 개발 및 여러 질병의 치료에 획기적인 도구가 될 것이다. 반용선 교수 연구...	지구 상의 생명체들은 주변 환경과 상호작용하여 생존에 적응하고 있으며, 환경 반응성 신호전달체계를 통해 복잡한 활동을 조절하여 적응하고 있습니다. 반용선 교수 연구실은 인간 병원성 곰팡이인 C. neoformans의 신호전달체계를 연구하고 있으며, HOG와 Ras/cAMP 신호전달체계의 특성을 밝히고 신규 유전자를 발굴하고 있습니다. 이 연구는 항곰팡이제 개발과 질병 치료에 혁신적인 도구가 될 수 있습니다. 또한, \( \mathrm{CO}_{2} \) 감지 신호전달 경로에 대한 연구도 진행하고 있으며, \( \mathrm{CO}_{2} \) 변화에 대한 적절한 반응...
C. neoformans 전사조절인자(Transcription factor)에 대한 연구 병원성 곰팡이의 병원성결정인자(virulence factor)는 숙주 내의 특정한 환경에서 그 발현 및 생성량이 조절되며, 대부분은 곰팡이의 생존, 분화 및 병원력 조절에 큰 영향을 준다. 이러한 다양한 병원성결정인자의 발현을 가장 직접적으로 조절하는 인자가 전사조절인자(Transcription Factor, TF) 이다. 지금까지 동물식물 병원성 곰팡이에서 다양한 전사조 절인자들이 개별적으로 연구되어 왔으나 아직 이들 신호전달물질을 타깃으로 하는 항곰팡이 신약의 개발은 극히 미...	병원성 곰팡이의 병원성결정인자는 숙주 내의 특정한 환경에서 그 발현 및 생성량이 조절되며, 다양한 병원성결정인자의 발현을 가장 직접적으로 조절하는 인자가 전사조절인자는 대부분은 곰팡이의 생존, 분화 및 병원력 조절에 큰 영향을 준다.
C. neoformans 유전자의 기능규명 방법 C. neoformans 유전자의 기능규명에 가장 일반적으로 많이 사용되는 방법은 유전자 특이적 결손변이체 (targeted gene-deletion mutant) 제조와 이의 형질분선 (phenotypic analysis)이다. 일반적으로 유전자변이체를 만들기 위한 gene-disruption cassette는 타깃 유전자의 \( 5^{\prime} \) 과 \( 3^{\prime} \) 영역의 약 \( 1 \mathrm{~kb} \) 크기의 flanking region과 dominant selectable marke...	C. neoformans 유전자의 기능규명을 위해 일반적으로 사용되는 방식은 유전자 특이적 결손변이체를 제조하고 형질분석을 수행하는 것으로, 유전자변이체의 제조를 위해서는 overlap PCR 방법, 혹은 최근 반용선 교수 연구실에서 도입한 split-marker transformation 방법 등을 사용할 수 있다. 또한 유전자 발현 분석을 위하여 제조된 다양한 유전자 변이체에 대한 비교전사체분석을 진행하여 주목할만한 유전자를 선정하는데, 이러한 유전자가 실제로 예측된 기능을 갖는지 확인하려면 유전자변이체 제조에 의한 형질분석이 추가적으로 필요하다.
고 찰 본 연구 결과 TBTCl 및 BPA의 단기 투여는 농도에 상관없이 등줄쥐 성체 및 새끼(F1) 수컷의 생식소중량지수나 생식소의 미세구조에 영향을 미치지 않음이 밝혀졌고, 실험용 흰쥐나 생쥐에서도 이들 화합물의 단기 투여에 의해서 번식에 이상이 발생하지 않음이 보고된 바 있다. 즉, 수컷 흰쥐에게 TBTCl \(5 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \)을 단기간(10일) 투여했을 경우 생식소에 별다른 이상이 나타나지 않았다고 보고되어 있으며, 수컷 생쥐와 흰쥐에게 각각 \( 0.1,1,5,10 \mu \mathrm { g } / \math...	TBTCl과 BPA의 단기 투여는 농도에 상관없이 등줄쥐 성체 및 새끼(F1) 수컷의 생식소 중량지수나 생식소 조직에 영향을 미치지 않고 번식에 이상이 발생하지 않았으며, 15일 후 정세포의 첨체와 핵의 형태적 이상이 성 성숙 시기에 모두 정상으로 회복되었다. 그러나 성성숙 개시기부터 30일 동안 장기간 투여 했을 경우 생식소 중량지수가 뚜렷이 감소하고 정자형성과정에도 이상이 발생하였으며, 고농도로 투여시 유산율이 증가하고 태아의 수태율 및 생존율이 감소하였다. 따라서 태아의 발생에 영향을 미칠 가능성을 배제 할수 없으므로, 이들 화합물이 번식에 미치는 영향을 규명할...
서 론 내분비계장애물질로 알려져 있는 비스페늘 A (BPA)는 플라스틱인 폴리카보네이트와 에폭시 수지의 합성원료로서 캔용기의 코팅제와 치아의 보충제 등으로 사용되며, 고압과 열을 가하는 산업 공정 등에 의해 유출되어 식품 등을 오염시킨다고 알려져 있다. 또 다른 내분비계장애물질인 유기주석 화합물은 주로 선박이나 어망, 어구 등의 방오제 등에 사용되는데, 주로 해수 중에서 검출되며, 오염된 어패류 등을 통해 상위소비자에게까지 영향을 미치게 된다. 본 연구자들은 부산광역시 가덕도 대항동, 남해군 삼동면 및 산청군 지리산에서 1998년부터 2001년에 걸쳐 포획한 일부 등...	본 연구자들은 1998년부터 2001년에 걸쳐 부산광역시 가덕도, 남해군 삼동면 및 산청군 지리산에서 포획한 등줄쥐들이 높은 농도의 페놀화합물(4-t-octylphenol, non-ylphenol 및 BPA)과 유기주석화합물(monobutyltin, MBT; di-butyltin, DBT; tributyltin, TBT)을 체내에 가지고 있다는 사실을 알게 되었다. 그래서 이 연구진들은 2002년 11월 2003년 2월에 걸쳐 번식 이상이 발생하지 않은 등줄쥐를 포획하여, TBTCl 및 BPA를 등줄쥐에 단기간 투여하여 단기 노출이 등줄쥐의 생식기관에 미치는 영향과 ...
TBTCl 및 BPA의 잔류농도 측정 실험 종료 후 TBTCl 및 BPA를 투여한 실험군들로부터 조직학적 관찰을 위해 오른쪽 정소 및 부정소를 적출하고, 나머지 시료는 분석을 위하여 냉동 \( \left (-70 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)시켰다. 이후 분석을 위하여 모든 시료를 일본 에히메 대학의 환경과학연구소 (Laboratory of Environmental Science)로 보내어, 일본 환경성에 명기된 방법에 의하여 TBTCl 및 BPA의 잔류 농도를 분석하였다. 분석 조건 및 실험방법은 Table 1에 제시하였다. 각 ...	TBTCl 및 BPA의 잔류농도는 균질화한 시료로부터 적절한 유기용매를 사용하여 화합물을 추출하고, florisil-column으로 세정한 후 가스크로마토그래피로 분석하여 검출한계는 \(0.1 ^ {\sim } 6 \) \( \mathrm { ng } / \mathrm { g } \)였고 회수율은 \( 67 ^ {\sim } 108 \% \)였다. 조직학적 관찰을 위해 오른쪽 정소 및 부정소는 paraformaldehyde와 gluta-raldehyde의 혼합고정액에 24시간 전고정하고, 1.3% OsO4로 1시간 30분 동안 후고정하여 epon 812혼합액으로 포매...
생육억제활성올 보이는 점액세균 균주 선발 점액세균을 PDCY 배지 상에서 4일간 배양한 후, 아생균주를 멸균된 주걱으로 긁어 제거하였다. 그리고 점액세균이 제거된 배지의 중앙에 C. acutatum 균사체를 갖는 한천조각을 올려놓고 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 배양기에서 7일 동안 배양한 후, C.acutatum의 집락의 크기를 관찰함으로써 성장이 억제되는 정도를 측정하였다. 배양추출물의 제조 및 활성조사 Amberlite XAD-16(Sigma, USA) \( 5 \mathrm{~g} \) 이 들어있는 \(250 \mathrm{mL} \) CT...	본 논문은 점액세균을 배지에서 4일 동안 배양하고 아생균주를 제거해 점액세균 균주를 선발해 실험을 준비하였다. 활성조사는 추출물을 흡수시키고 건조한 \( 6\mathrm{~mm} \) paper disc를 C. acutatum 포자가 도말된 PDA 배지에서 배양해 성장이 억제되는 정도를 측정했으며, 분리 탐색된 야생 점액세균들의 경우 세포, 포자, 자실체, 집락의 형태 및 색, 색소의 생성 여부, 영양 및 16S rRNA 염기서열 비교에 의해 동정한 후 현미경을 사용해 자실체 집락과 세포, 포자를 관찰하였다.
점액세균 배양추출물의 고추탄저균의 성장 저해 활성 고추탄저균에 대해 성장 저해 활성을 보이는 10개 균주들이 항진균물질을 생산 분비함으로써 고추탄저균의 성장을 저해할 가능성이 높으므로 10개 점액세균들의 배양액 중 Amberlite XAD-16 resin에 홉착했다가 methanol에 의해 추출되는 배양추출물이 고추탄저균의 성장을 저해하는 활성을 보이는지 조사하였다. 그 결과 Fig. 4에서 보인 바와 같이, Myxococcus sp. \( \mathrm{KYC1136} \)의 배양추출물이 C. acutatum \( \mathrm{ACYSJ} 001 \)의 성장을 강...	우리는 점액세균을 배양하여 추출물을 만들었다. 그러나, 만약 추출물에 흡착되지 않거나 메탄올에 의해 추출되지 않는 특성의 물질이 저해 활성 성분으로 생산되었다면, 얻어진 배양추출물은 저해 활성을 가지지 않을 것이다. 점액세균은 토양 미생물로 유기물이 있는 대부분의 토양에 널리 분포하며, 인체에 해로운 영향이 없다고 알려져 있다. 따라서, 본 논문에서는 점액세균을 사용하여 고추 탄저병 방제의 가능성을 탐구하였으며, 앞으로 효율적인 고추 탄저균 성장 억제를 위한 점액세균 균주의 탐색 방향을 제안하였다.
서 론 고추탄저병(pepper anthracnose)은 우리나라에서 경제 작물인 고추(Capsicum annum) 재배 시에 과실에 발쟁하는 주요 병해로 고추역병과 함께 경제적으로 큰 피해를 주고 있다[8]. 병원균은 Collectotrichum gloesporioides, C. acutatum, C. dematium, C. coccodes 등이 보고되어 있으며, 2000년 이후 우리나라 고추 포장에서 분리된 탄저균주의 약 90% 이상은 C. acutatum에 의해 발생하는 것으로 알려져 있다. 고추탄저병의 방제는 저항성 품종 재배, 이병 식물 제거 등의 경종적인 방...	우리나라의 주요 농작물인 고추를 공격하는 고추탄저병은 경제적 손실을 유발하는 주요 병해로, 방제법으로는 저항성 품종 재배, 이병 식물 제거, 살균제 사용 등 다양한 방법이 있다. 또한, 생물학적 방제를 위한 연구도 활발히 진행 중이다. 본 연구에서는 고추탄저병을 유발하는 곰팡이인 C. acutatum의 생장을 억제하는 점액세균 균주를 선발하여 생물학적 방제제 개발에 활용하고자 하였다. 야생 점액세균의 배양은 PDCY 평판배지와 \( 32 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 온도를, C. acutatum의 배양은 PDA배지와 \( 25 ^ {\circ ...
고 찰어류 양식 산업에서의 질병발생은 세계적으로, 지리적으로도 많은 차이를 나타내고 있으며 항생제 사용에 따른 비용이나 관리 등이 매우 심각한 현실이다. 이미 백신이 개발되고 상용화 되고 있으나 모든 어류의 질병을 통제하지는 못한다. 더구나 치어의 경우 만족할만한 면역효과를 얻을 수 없을 뿐만 아니라 반드시 백신에 반응한다고도 할 수 없는 실정이다. 지속적인 항생물질이나 화학요법제의 경우 그 방법의 선택이 중요하며 주사에 의한 백신은 대량 사육 어류나 작은 어류의 경우 비실용적이라는 점이 지적되었으며 항생제 다량 사용이 내성균을 생성하게 되어 그 심각성은 인체에까지도...	항생제 내성 미생물의 증가에 따라 probiotic biocontrol agent로서 비병원성 세균(유산균, Pseudomonas 등) 을 이용하여 어병균에 길항 작용을 하는 미생물을 사용하여 어병균을 제어하자는 대안을 제시하였고, 본 연구에서는 fish probiotic bacteria를 탐색하고자 하였고, 환경 친화적인 방법개발의 하나로 해양 미생물 군집 중에서 어병 균의 길항작용을 하는 미생물을 찾고자 시도한 결과 여러 종의 미생물군집들 중에서 한 종류만을 찾을 수 있었다. 여러 종의 해산어를 대상으로 아가미, 장, 표피 등에서 분리한 결과, 방어의 장내에서 추...
결 과균 분리해산어의 여러 부위의 장, 피부, 아가미에서 다종의 균을 분리하여 VNSS 액체배지에서 1차로 20여종의 균을 분리한 결과 방어에서 분리된 균이 nutrient 한천 배지 상에서 V. anguilla-rum NCMB1에 대해 투명환이 생성되어 저해능력을 가지고 있다고 판단되어 이를 동정하기 위하여 미생물 자동 동정 분석기로 동정한 결과 \( 95\% \) 이상의 높은 유사값으로 Bacillus amyloli-quefaciens로 확인되어 B. amyloliquefaciens H41으로 명명하고 표준균주인 B. amyloliquefaciens KCTC172...	본 논문에서는 균 분리, 다른 Vibrio spp.에 대한 저해 능, 생육 저해물질 생산에 영향을 미치는 인자, 생육도 및 생육저해물질 최고생성시간 등에 대한 연구를 진행하였다. 최적조건으로 조절한 기본배지에 여러 가지 금속이온을 \( 0.05 \% \) 농도별로 첨가하여 배양한 결과 \( \mathrm{Mg}^{+2}\), \(\mathrm{Ca}^{+2} \)를 함유하는 배지에서 활성이 나타났다. 그 중에서 \( \mathrm{Mg}^{+2} \)을 함유하는 배지에서 가장 높은 활성을 나타내었다는 결과를 확인할 수 있었다.
재료 및 방법균 분리V. anguillarum의 생육 저해균주를 분리하기 위하여 해산어를 대상으로 장의 여러 부위, 지느러미, 어체 표면 등에서 다양한 가검물을 회수하여 NSS buffer와 VNSS broth로 균을 1차 배양하고, VNSS agar에 paper-disk 방법을 사용하여 V. anguillarum을 저해하는 균주를 다시 선별하였다. 저해를 나타내는 1종의 균주를 선별하여 생화학적 특성을 파악하여 1차 동정을 행한 뒤 정확한 확인을 위해 미생물 자동 동정분석기로(E-10136, Biolog Microstation, Biolog, USA)분석하였다. 분...	V. anguillarum의 생육 저해균주를 분리하기 위하여 해산어를 대상으로 장의 다양한 부분, 어체 표면, 지느러미 등에서 가검물을 회수한 후 NSS buffer 와 VNSS broth로 균을 1차 배양, VNSS agar에 paper-disk 방법을 사용, 저해 균주를 재선별하였고 1종의 균주를 분류하여 생화학적 특성을 파악하고 1차 동정을 행한 후에 미생물 자동 동정분석기로 분석, 표준 균주와 분리균주의 생육 저해능 비교는 B. amyloliquefaciens KCTC 1724를 paper-disk 법을 사용하였으며 투명환의 생성여부로 V. anguillaru...

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