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Il corpo luteo adeguato: miR-96 promuove la sopravvivenza delle cellule luteali e la produzione di progesterone.La produzione inadeguata di progesterone dal corpo luteo è associata all'interruzione della gravidanza. I dati disponibili nelle specie modello suggeriscono ruoli importanti dei microRNA (miRNA) nello sviluppo e nel mantenimento luteale Indagare in modo completo il coinvolgimento dei miRNA durante la transizione follicolo-luteale ovarico Gli effetti di specifici miRNA sulla sopravvivenza e sulla produzione di steroidi da parte delle cellule della granulosa luteinizzata umana ( hLGC) sono stati testati utilizzando specifici inibitori dei miRNA. I miRNA candidati sono stati identificati attraverso analisi di microarray di tessuti follicolari e luteali in un modello bovino. Un'istituzione accademica nel Regno Unito associata a un ospedale universitario. Gli hLGC sono stati ottenuti mediante aspirazione di fluido follicolare transvaginale standard da 35 donne sottoposte a concepimento assistito Inibizione dei miRNA candidati in vitro Livelli di miRNA, mRNA, proteina FOXO1, l'apoptosi e gli steroidi sono stati misurati nei tessuti e/o nelle cellule coltivate. Due cluster di miRNA specifici, miR-183-96-182 e miR-212-132, sono stati drammaticamente aumentati nei tessuti luteali rispetto ai tessuti follicolari. miR-96 e miR-132 erano i miRNA più sovraregolati all'interno di ciascun cluster. Le analisi del database hanno identificato FOXO1 come un bersaglio putativo di entrambi questi miRNA. Negli hLGC coltivati, l'inibizione del miR-96 ha aumentato l'apoptosi e i livelli di proteina FOXO1 e ha diminuito la produzione di progesterone. Questi effetti sono stati prevenuti da una piccola downregulation mediata da RNA interferente di FOXO1. Nelle cellule luteali bovine, l'inibizione del miR-96 ha anche portato ad aumenti dell'apoptosi e dei livelli di proteina FOXO1. miR-96 mira a FOXO1 per regolare lo sviluppo luteale attraverso effetti sulla sopravvivenza cellulare e sulla produzione di steroidi. Il cluster miR-183-96-182 potrebbe fornire un nuovo bersaglio per la manipolazione della funzione luteale.
La radiodensità del grasso bruno umano indica la composizione del tessuto sottostante e la salute metabolica sistemica.L'imaging metabolico che studia la fisiologia del tessuto adiposo bruno (BAT) è aumentato, in cui è stato calcolato La tomografia (TC) è comunemente usata come riferimento anatomico per l'imaging con tomografia a emissione di positroni metabolici (PET). Tuttavia, la capacità della TC di fornire informazioni metaboliche è stata sottosfruttata. Per valutare se la radiodensità TC del BAT potrebbe stimare in modo non invasivo la morfologia del tessuto sottostante, per quanto riguarda quantità di trigliceridi immagazzinati. Inoltre, l'alterazione delle caratteristiche dei tessuti dovuta allo stimolo freddo, come marker per la BAT attiva, può essere rilevata con la radiodensità. La BAT può essere differenziata dal tessuto adiposo bianco (WAT) esclusivamente utilizzando misurazioni basate su TC. Una croce -studio sezionale che valuta 66 soggetti umani sani con CT, PET e spettroscopia di risonanza magnetica 1H (1H-MRS). La radiodensità BAT è stata misurata con CT. Trig BAT-memorizzato il contenuto di liceride è stato misurato con 1H-MRS. Il volume del sangue arterioso in BAT, come marker di vascolarizzazione tissutale, è stato misurato con [15O]H2O, insieme all'assorbimento di glucosio o acidi grassi usando [18F]2-fluoro-2-desossi-D-glucosio o 14(R,S) -Imaging PET dell'acido [18F]fluoro-6-tia-eptadecanoico, rispettivamente. La radiodensità delle BAT è risultata correlata al sangue trattenuto dai tessuti e al contenuto di trigliceridi. Lo stimolo freddo ha indotto un aumento della radiodensità del BAT. I depositi di BAT attivi avevano una radiodensità maggiore rispetto sia ai BAT non attivi che ai WAT. Radiodensità BAT associata a parametri di salute metabolica sistemica. La radiodensità BAT può essere utilizzata come marker della morfologia del tessuto sottostante. Le BAT attive possono essere identificate mediante TC, sfruttando le informazioni sulla composizione dei tessuti. Inoltre, la radiodensità BAT fornisce una panoramica della salute metabolica sistemica di tutto il corpo.
Mirare al MYC come intervento terapeutico per il cancro anaplastico della tiroide.Studi recenti hanno dimostrato che la trascrizione del gene MYC è guidata dall'interazione di bromodominio ed extraterminale dominio (BET) con istoni acetilati sulla cromatina. JQ1, un potente inibitore che interrompe efficacemente l'interazione delle proteine BET con gli istoni acetilati, sopprime preferenzialmente la trascrizione del gene MYC. Recentemente abbiamo riportato che JQ1 diminuiva la crescita del tumore tiroideo e migliorava la sopravvivenza in un modello murino di carcinoma anaplastico della tiroide (ATC) mirando alla trascrizione di MYC. Il ruolo di MYC nell'ATC umano e se JQ1 può mirare efficacemente a MYC come modalità di trattamento non sono stati chiariti Per comprendere i meccanismi molecolari sottostanti di JQ1, abbiamo valutato la sua efficacia in linee cellulari ATC umane e modelli di xenotrapianto. Abbiamo determinato gli effetti di JQ1 sulla proliferazione e invasione in linee cellulari e tumori xenotrapianti. Abbiamo identificato reg chiave ulatori critici per la proliferazione e l'invasione delle cellule tumorali colpite da JQ1. JQ1 ha notevolmente inibito la proliferazione di quattro linee cellulari ATC mediante la soppressione di MYC e l'aumento di p21 e p27 per ridurre l'Rb fosforilato e ritardare la progressione del ciclo cellulare dalla fase G0/G1 alla fase S. JQ1 ha bloccato l'invasione cellulare attenuando i segnali di transizione epitelio-mesenchimale. Questi studi basati sulle cellule sono stati ulteriormente confermati negli studi sugli xenotrapianti in cui le dimensioni e il tasso di crescita del tumore sono stati inibiti da JQ1 tramite l'inibizione della segnalazione di p21-ciclina/ciclina-dipendente chinasi-Rb-E2F. Questi risultati suggeriscono che il targeting della proteina MYC potrebbe essere una potenziale modalità di trattamento per l'ATC umano per la quale le opzioni di trattamento efficaci sono limitate.
Insufficienza ovarica prematura nelle sopravvissute al cancro infantile: un rapporto della St. Jude Lifetime Cohort.Dati di follow-up a lungo termine sull'insufficienza ovarica prematura (POI) nei sopravvissuti al cancro infantile sono limitati. Descrivere la prevalenza di POI, i suoi fattori di rischio e gli esiti avversi di salute a lungo termine associati. Cross-sectional. Il St. Jude Lifetime Cohort Study, una coorte consolidata in un centro di assistenza terziaria. Novecentoventuno partecipanti (età media, 31,7 anni) sono stati valutati a una mediana di 24,0 anni dopo la diagnosi del cancro. Il POI è stato definito da amenorrea persistente combinata con un livello di ormone follicolo-stimolante >30 IU/L prima dei 40 anni. Multivariabile La regressione di Cox è stata utilizzata per studiare le associazioni tra fattori di rischio demografici o correlati al trattamento e POI. La regressione logistica multivariata è stata utilizzata per studiare le associazioni tra POI e marker di malattie cardiovascolari, densità minerale ossea (BMD) e fragilità. agli agenti alchilanti è stata quantificata utilizzando la dose equivalente di ciclofosfamide convalidata (CED). La prevalenza di POI è stata del 10,9%. I fattori di rischio indipendenti per POI includevano la radioterapia ovarica a qualsiasi dose e CED ≥8000 mg/m2. I pazienti con un indice di massa corporea ≥30 kg/m2 al momento della valutazione della St. Jude Lifetime Cohort avevano meno probabilità di avere una diagnosi di POI. BMD bassa e fragilità sono state associate in modo indipendente con POI. Agenti alchilanti ad alte dosi e radioterapia ovarica a qualsiasi dose sono associati a POI. Ai pazienti a più alto rischio dovrebbe essere offerta la conservazione della fertilità ogniqualvolta sia possibile. I POI contribuiscono a scarsi risultati di salute generale nei sopravvissuti al cancro infantile; sono necessari ulteriori studi per studiare il ruolo della sostituzione dell'ormone sessuale nel migliorare tali risultati.
11β-HSD1 modula il punto di riferimento della risposta del tessuto adiposo bruno ai glucocorticoidi nei topi maschi.I glucocorticoidi (GC) sono potenti regolatori del metabolismo energetico. L'esposizione cronica al GC sopprime la capacità termogenica del tessuto adiposo bruno (BAT) nei topi, con evidenza di un effetto simile nell'uomo. I livelli intracellulari di GC sono regolati dall'attività dell'11β-idrossisteroide deidrogenasi di tipo 1 (11β-HSD1), che può amplificare le concentrazioni di GC circolanti. Pertanto, 11β-HSD1 potrebbe modulare l'impatto dei GC sulla funzione BAT. Questo studio ha studiato come 11β-HSD1 regola l'architettura molecolare del BAT nel contesto dell'eccesso di GC e dell'invecchiamento. L'eccesso di GC circolante è stato indotto nel knockout 11β-HSD1 (KO) e topi wild-type integrando acqua potabile con 100 μg/mL di corticosterone e sono stati valutati gli effetti sui marcatori molecolari della funzione BAT e dell'attività mitocondriale. Colture primarie di adipociti bruni sono state utilizzate per esaminare le conseguenze autonome delle cellule del deficit di 11β-HSD1. I marcatori molecolari della funzione BAT sono stati esaminati anche in topi KO 11β-HSD1 di età avanzata per modellare l'esposizione GC a vita. L'espressione e l'attività di BAT 11β-HSD1 sono state elevate in risposta all'eccesso di GC e con l'invecchiamento. 11β-HSD1 KO BAT ha resistito alla soppressione della proteina di disaccoppiamento 1 (UCP1) e delle proteine della subunità della catena respiratoria mitocondriale normalmente imposte dall'eccesso di GC. Inoltre, gli adipociti marroni di topi KO 11β-HSD1 avevano un'elevata funzione mitocondriale basale ed erano in grado di resistere alla repressione dell'attività mediata da GC. I BAT di topi KO di età compresa tra 11β-HSD1 hanno mostrato un elevato contenuto di proteina UCP1 e mitocondriale e un profilo favorevole della funzione BAT. Questi dati rivelano un nuovo meccanismo in cui l'aumento dell'espressione di 11β-HSD1, nel contesto dell'eccesso di GC e dell'invecchiamento, compromette la funzione molecolare e metabolica del BAT.
Gli uomini anziani con anemia hanno aumentato il rischio di frattura indipendentemente dalla densità minerale ossea.Valori di emoglobina (Hgb) estremamente bassi sono stati collegati a un aumento del rischio di frattura a siti diversi. Tuttavia, manca un'attenta valutazione dell'anemia clinicamente definita e del rischio di frattura. Per determinare se gli uomini con anemia erano a maggior rischio di frattura dopo aver tenuto conto della densità minerale ossea (BMD) e della perdita ossea. Analisi della sezione trasversale (alla visita 3 ) e analisi prospettica (dal basale alla visita 3) nell'Osteoporotic Fractures in Men (MrOS), uno studio di coorte longitudinale multisito. Sei comunità negli Stati Uniti. Un totale di 3632 uomini residenti in comunità (età ≥ 65 anni) in MrOS al basale (dal 2000 al 2002) che erano in grado di camminare senza assistenza, non hanno subito protesi o fratture dell'anca e avevano un conteggio completo delle cellule ematiche alla visita 3 (dal 2007 al 2009). -up. Baseli analitica ne caratteristiche associate a fratture o anemia (definite come Hgb <12 g/dL) sono state incluse nei modelli multivariabili. L'anemia era associata ad un aumento del rischio di qualsiasi frattura [rapporto di rischio (HR), 1,67; Intervallo di confidenza al 95% (CI), da 1,26 a 2,21] e frattura non spinale (HR, 1,70; IC al 95%, da 1,25 a 2,31). Un modello che includeva il cambiamento nella BMD ha leggermente attenuato l'associazione con qualsiasi (HR, 1,60; 95% CI, 1,20-2,13) e fratture non vertebrali (HR, 1,57; 95% CI, 1,14-2,15). L'inclusione della BMD assoluta non ha alterato significativamente l'associazione anemia-frattura. L'anemia non era associata a frattura della colonna vertebrale. Gli uomini anziani con anemia residenti in comunità hanno avuto un aumento dal 57% al 72% del rischio di fratture non spinali, indipendentemente dalla BMD e dalla perdita ossea.
Lo stress cronico lieve provoca la perdita ossea attraverso un meccanismo dipendente dai glucocorticoidi osteoblastico specifico.Lo stress cronico e la depressione sono associati ad alterazioni dell'ipotalamo-ipofisi -cascata di segnalazione surrenale e considerato un fattore di rischio per la perdita ossea e fratture. Tuttavia, i meccanismi alla base dell'associazione tra stress e cattiva salute delle ossa non sono chiari. Utilizzando un modello murino transgenico (tg) in cui la segnalazione dei glucocorticoidi viene interrotta selettivamente negli osteoblasti maturi e osteociti [11β-idrossisteroide-deidrogenasi tipo 2 (HSD2) OB-tg topi], il presente studio esamina l'impatto dello stress cronico sul metabolismo e sulla struttura scheletrica. Topi HSD2OB-tg maschi e femmine di otto settimane e il loro wild-type (WT) sono stati esposti a stress cronico lieve (CMS) per la durata di settimane 4. All'endpoint, le vertebre e le tibie L3 sono state analizzate mediante tomografia microcomputerizzata e istomorfometria e il turnover osseo è stato misurato bioche micamente. Rispetto ai controlli non stressati, l'esposizione al CMS ha causato un aumento di circa tre volte delle concentrazioni sieriche di corticosterone nei topi WT e HSD2OB-tg di entrambi i sessi. Rispetto ai controlli, la CMS ha provocato la perdita di massa ossea trabecolare vertebrale nei topi maschi WT ma non nei fratellini maschi HSD2OB-tg. Inoltre, sia l'area corticale tibiale che la frazione dell'area sono state ridotte nei WT stressati ma non nei topi maschi HSD2OB-tg stressati. L'attività degli osteoclasti e il marker di riassorbimento osseo erano aumentati nei maschi WT dopo CMS, caratteristiche assenti nei maschi HSD2OB-tg. È interessante notare che la CMS ha avuto scarso effetto sui parametri strutturali vertebrali e delle ossa lunghe nei topi femmina. Concludiamo che nei topi maschi, la perdita ossea durante la CMS è mediata da una maggiore segnalazione dei glucocorticoidi negli osteoblasti (e osteociti) e dalla successiva attivazione degli osteoclasti. I topi femmina sembrano resistenti agli effetti scheletrici della CMS.
Anomalie del metabolismo del glucosio nella sindrome di Cushing: dalle basi molecolari alla gestione clinica.Un alterato metabolismo del glucosio, che spesso porta all'insorgenza del diabete mellito ( DM), è una complicanza comune dell'esposizione cronica all'eccesso di glucocorticoidi (GC) esogeni ed endogeni e svolge un ruolo importante nel contribuire alla morbilità e alla mortalità nei pazienti con sindrome di Cushing (CS). Questo articolo esamina la patogenesi, l'epidemiologia, la diagnosi e gestione dei cambiamenti nel metabolismo del glucosio associati all'ipercortisolismo, affrontando sia gli aspetti fisiopatologici che le implicazioni cliniche e terapeutiche. L'ipercortisolismo cronico può avere effetti pleiotropici su tutti i principali tessuti periferici che regolano l'omeostasi del glucosio. Aggiungendo ulteriore complessità, entrambi i meccanismi genomici e non genomici sono direttamente indotti da GC in modo specifico del contesto e dipendente da cellula/organo In questo articolo, la discussione si concentra su e potenziali meccanismi molecolari patologici che sono indotti da livelli circolanti cronicamente eccessivi di GC e influenzano l'omeostasi del glucosio in vari tessuti. La gestione dei pazienti con CS e DM include il trattamento della loro iperglicemia e la correzione dell'eccesso di GC. In questo articolo vengono esaminati gli effetti sul controllo glicemico di varie terapie mediche per la CS. Viene inoltre discussa l'associazione tra DM e CS subclinico e il ruolo dello screening per CS nei pazienti diabetici.
Capacità dei pneumococchi di attivare il fattore nucleare dei macrofagi κB: influenza sulla necroptosi e sulla gravità della polmonite.Durante la polmonite pneumococcica, la difesa antibatterica richiede l'espressione orchestrata di mediatori immunitari, avviati dai macrofagi alveolari e dipendenti dalla trascrizione guidata dal fattore nucleare κB (NF-κB). Tale pressione immunitaria può selezionare per pneumococchi, che evitano o sovvertono l'attivazione dei macrofagi NF-κB. Analizzando i pneumococchi raccolti da bambini in Massachusetts, abbiamo trovato che l'attivazione del macrofago NF-κB da parte di Streptococcus pneumoniae è molto diversificata, con una preponderanza di attivatori bassi di NF-κB che si associano particolarmente a polmoniti complicate. Gli attivatori bassi di NF-κB causano infezioni polmonari più gravi nei topi e guidano i macrofagi verso un destino cellulare alternativo e dannoso della necroptosi. Entrambi i risultati possono essere invertiti dall'attivazione dei macrofagi con pneumococchi che sono attivatori di NF-kB elevati. Questi risultati suggeriscono che una bassa attivazione di NF-κB è una proprietà di virulenza dei pneumococchi e che l'attivazione appropriata dei macrofagi, incluso NF-κB, può essere promettente come via terapeutica aggiuntiva per la polmonite pneumococcica.
Nuovo Regolamento Europeo sulla Sperimentazione Clinica: percezione e aspettative in Italia.Nel luglio 2012 la Commissione Europea ha formalizzato la proposta di Regolamento Europeo sulla Sperimentazione Clinica che dovrebbe sostituire la Direttiva Europea sulla Sperimentazione Clinica 2001/20/CE Il nuovo Regolamento 536/2014 è entrato in vigore nel giugno 2014 e la sua applicazione era prevista non prima di maggio 2016. Infatti, al momento, tutti gli strumenti centrali richiesti non sono ancora disponibile e nuove previsioni indicano che entrerà in vigore alla fine del 2018. Gli obiettivi del regolamento sono la promozione di standard più elevati nella sicurezza dei pazienti e una maggiore trasparenza nelle sperimentazioni cliniche, anche modificando la procedura di richiesta. condotto tra i coordinatori della ricerca clinica e i ricercatori clinici italiani per esaminare la percezione e la conoscenza dei prossimi cambiamenti nelle sperimentazioni cliniche. Un totale di 190 coordinatori di ricerca clinica e 80 Clinical I gli investigatori sono stati intervistati. I clinici sono meno consapevoli del contenuto del Regolamento rispetto ai coordinatori della ricerca clinica, che dimostrano una vasta competenza sul tema (84,4%), raggiunta principalmente attraverso l'autoformazione. La maggioranza degli Investigatori (74%) ritiene che le strutture e il personale del proprio sito abbiano già soddisfatto tutti i requisiti imposti dal Regolamento mentre i Coordinatori della Ricerca Clinica sono meno ottimisti: il 65,2% ritiene che il personale del sito non sia ancora pienamente consapevole modifiche associate alla sua attuazione. L'opinione generale degli intervistati è che il nuovo Regolamento influenzerà fortemente la gestione delle sperimentazioni indipendentemente dalla loro tipologia e fase, e il rispetto dei requisiti imposti rappresenta un'opportunità che l'Italia non dovrebbe perdere per aumentare la propria attrattività per il mercato farmaceutico.
Il microbiota intestinale al basale predice la risposta clinica e la colite nei pazienti con melanoma metastatico trattati con ipilimumab.Ipilimumab, un inibitore del checkpoint immunitario mirato a CTLA-4, prolunga la sopravvivenza in un sottogruppo di pazienti con melanoma metastatico (MM) ma può indurre eventi avversi immuno-correlati, inclusa l'enterocolite. Abbiamo ipotizzato che il microbiota intestinale al basale possa predire la risposta antitumorale di ipilimumab e/o la tossicità intestinale. Ventisei pazienti con MM trattati con ipilimumab sono stati arruolati prospetticamente. La composizione del microbiota fecale è stata valutata utilizzando il sequenziamento del gene 16S rRNA al basale e prima di ogni infusione di ipilimumab. I pazienti sono stati ulteriormente raggruppati in base ai modelli del microbiota. Gli immunofenotipi dei linfociti del sangue periferico sono stati studiati in parallelo. Una composizione distinta del microbiota intestinale al basale è stata associata a sia risposta clinica che colite Rispetto ai pazienti il cui microbiota basale è stato guidato da Bacteroides (c lustro B, n = 10), i pazienti il cui microbiota al basale era arricchito con il genere Faecalibacterium e altri Firmicutes (cluster A, n = 12) avevano una sopravvivenza libera da progressione (P = 0,0039) e una sopravvivenza globale più lunghe (P = 0,051 ). La maggior parte dei filotipi associati alla colite di base erano correlati a Firmicutes (ad es. parenti di Faecalibacterium prausnitzii e Gemmiger formicilis), mentre nessun filotipo correlato alla colite è stato assegnato a Bacteroidetes. Una bassa percentuale di cellule T regolatorie del sangue periferico è stata associata a cluster A, benefici clinici a lungo termine e colite. Ipilimumab ha portato a una maggiore induzione del COStimulator delle cellule T inducibili sui linfociti T CD4+ e a un aumento più elevato del CD25 sierico nei pazienti che appartenevano al cluster A guidato da Faecalibacterium. Il microbiota intestinale al basale arricchito con Faecalibacterium e altri Firmicutes è associato a una risposta clinica benefica a ipilimumab e l'insorgenza più frequente di colite indotta da ipilimumab.
Interferenza tra virus respiratorio sinciziale e infezione da rinovirus umano nell'infanzia.Il virus respiratorio sinciziale (RSV) e il rinovirus umano (HRV) sono i virus più comuni associata a infezioni acute del tratto respiratorio nell'infanzia. L'interferenza virale è importante per comprendere la circolazione virale respiratoria e l'impatto dei vaccini. Per studiare l'interferenza virale, abbiamo valutato casi di RSV e HRV codetection mediante reazione a catena della polimerasi in 2 studi prospettici di coorte di nascita (l'Infant Suscettibilità alle infezioni polmonari e all'asma in seguito all'esposizione a RSV [INSPIRE] e alla Tennessee Children\'s Respiratory Initiative [TCRI]) e uno studio in doppio cieco, randomizzato e controllato (MAKI), che utilizza analisi di regressione multivariata aggiustate. Tra 3263 campioni del tratto respiratorio , il 24,5% (798) e il 37,3% (1216) erano RSV e HRV positivi, rispettivamente. Le probabilità di infezione da HRV erano significativamente più basse nei neonati con infezione da RSV in tutti i c oorti, con odds ratio aggiustati di 0,30 (intervallo di confidenza 95% [CI], 0,22-0,40 nello studio INSPIRE, 0,18 (95% CI, 0,11-0,28) nel TCRI (aggiustato per gravità della malattia), e 0,34 (95% CI, 0,16-0,72) nello studio MAKI. L'infezione da HRV era significativamente più comune tra i bambini a cui era stata somministrata l'immunoprofilassi da RSV, rispetto ai bambini che non avevano ricevuto l'immunoprofilassi (OR, 1,65; 95% CI, 1,65-2,39). Un'associazione negativa di RSV sulla codifica HRV è stata costantemente osservata tra popolazioni, stagioni, gravità della malattia e regioni geografiche. La soppressione dell'infezione da RSV con l'immunoprofilassi da RSV potrebbe aumentare il rischio di contrarre l'infezione da HRV.
Ruolo e regolazione dei microRNA nel danno e disfunzione cardiaca mediati da aldosterone nei ratti maschi.L'aldosteronismo primario è caratterizzato da un eccesso di secrezione di aldosterone (ALDO) indipendente del sistema renina-angiotensina e rappresenta circa il 10% dei casi di ipertensione. L'eccesso di ALDO che è inappropriato per lo stato di assunzione di sale provoca ipertrofia cardiaca, infiammazione, fibrosi e ipertensione. I meccanismi molecolari che innescano l'insorgenza e la progressione della cardiopatia ALDO-mediata sono poco conosciuti. I microRNA (miRNA) sono RNA endogeni, piccoli e non codificanti che sono stati implicati in diverse anomalie cardiache, ma si sa molto poco sulla loro regolazione e sul ruolo nel danno cardiaco mediato da ALDO. Per chiarire la regolazione dei miRNA in ALDO danno cardiaco mediato, abbiamo eseguito un'analisi di serie temporali dell'espressione dei miRNA del ventricolo sinistro (LV) Ratti Sprague-Dawley maschi non frectomizzati sono stati trattati con ALDO (0,75 µg/h ) infusione e SALE (1,0% NaCl/0,3% KCl) nell'acqua da bere per un massimo di 8 settimane. Il tempo ALDO/SALT ha modulato in modo dipendente l'espressione di più miRNA nel ventricolo sinistro. miR-21 era il miRNA più sovraregolato dopo 2 settimane di trattamento ed è rimasto elevato fino alla fine dello studio. Per chiarire il ruolo di miR-21 nel danno cardiaco mediato da ALDO/SALT, il miR-21 è stato downregolato utilizzando antagomir nei ratti trattati con ALDO/SALT. La downregulation del miR-21 ha esacerbato l'ipertrofia cardiaca mediata da ALDO/SALT, l'espressione dei geni marcatori di fibrosi, la fibrosi interstiziale e perivascolare, il contenuto di OH-prolina e la disfunzione cardiaca. Questi risultati suggeriscono che la sovraregolazione cardiaca di miR-21 mediata da ALDO/SALT può essere un meccanismo compensatorio che mitiga gli effetti deleteri cardiaci mediati da ALDO/SALT. Ipotizziamo che l'integrazione di miR-21 avrebbe effetti benefici nel ripristinare o mitigare il danno cardiaco e la disfunzione nei pazienti con aldosteronismo primario.
Monitoraggio di un riarrangiamento del gene CAD-ALK nelle urine e nel sangue di un paziente con cancro del colon-retto trattato con un inibitore di ALK.Monitoraggio della risposta e della resistenza agli inibitori della chinasi è essenziale per la medicina oncologica di precisione, e di solito è indagato dal profilo molecolare di una biopsia tissutale ottenuta in progressione. Tuttavia, l'eterogeneità del tumore e il bias di campionamento dei tessuti limitano l'efficacia di questa strategia. Inoltre, le biopsie tissutali non sono sempre fattibili e sono associate a rischi dovuti all'invasività della procedura. Per superare queste limitazioni, l'analisi della biopsia liquida basata sul sangue si è dimostrata efficace per seguire in modo non invasivo l'evoluzione clonale del tumore. Abbiamo sfruttato il DNA trans-renale (tr-DNA) privo di cellule delle urine e abbinato DNA tumorale circolante nel plasma (ctDNA) per monitorare un paziente con cancro colorettale metastatico portatore di una traslocazione CAD-ALK durante il trattamento con un inibitore di ALK. Utilizzando un pannello di sequenziamento personalizzato di nuova generazione abbiamo identificato il riarrangiamento genomico CAD-ALK e una mutazione TP53 nel ctDNA plasmatico. Sono stati sviluppati saggi sensibili per rilevare entrambe le alterazioni nel tr-DNA delle urine. Le dinamiche del riarrangiamento CAD-ALK nel plasma e nelle urine erano concordanti e parallele al decorso clinico del paziente. Il rilevamento della fusione del gene CAD-ALK nell'urina tr-DNA ha anticipato la conferma radiologica della progressione della malattia. L'analisi del ctDNA plasmatico ha identificato le mutazioni della chinasi ALK emerse durante il trattamento con l'inibitore di ALK entrectinib. Troviamo che i test genetici basati sull'urina consentono di tracciare i riarrangiamenti oncogeni specifici del tumore. Questa strategia potrebbe essere efficacemente applicata per monitorare in modo non invasivo l'evoluzione del tumore durante la terapia. Lo stesso approccio potrebbe essere sfruttato per monitorare la malattia minima residua dopo l'intervento chirurgico con intento curativo in pazienti i cui tumori sono portatori di fusioni geniche. Quest'ultimo potrebbe essere implementato senza la necessità dell'ospedalizzazione del paziente poiché il tr-DNA dell'urina può essere auto-raccolto, è stabile nel tempo e può essere spedito in momenti specifici ai laboratori centrali per i test.
Il sequenziamento dell'intero genoma del longan (Dimocarpus longan Lour.) fornisce informazioni sulle basi molecolari delle sue caratteristiche ricche di polifenoli.Longan (Dimocarpus longan Lour. ). ), un importante frutto subtropicale della famiglia delle Sapindaceae, viene coltivato in più di 10 paesi. Il longan è un frutto commestibile della drupa e una fonte di medicina tradizionale con tratti ricchi di polifenoli. Dimensione dell'albero, portamento alternato e malattia della ginestra delle streghe pongono ancora seri problemi. Per ottenere informazioni sulla base genomica dei tratti longan, è stata assemblata una bozza di sequenza genomica. Si stima che la bozza del genoma (circa 471,88 Mb) di una cultivar cinese longan, "Honghezi," contenga 31 007 geni e 261.88 Mb di sequenze ripetitive. Nessun evento recente di duplicazione dell'intero genoma è stato rilevato nel genoma. Il risequenziamento dell'intero genoma e l'analisi di 13 accessioni coltivate di D. longan hanno rivelato l'entità della diversità genetica. Studi comparativi del trascrittoma combinati con genoma-wid L'analisi ha rivelato caratteristiche di resistenza agli agenti patogeni e ricchi di polifenoli. I geni coinvolti nel metabolismo secondario, in particolare quelli provenienti da famiglie di geni significativamente espanse (DHS, SDH, F3΄H, ANR e UFGT) e contratte (PAL, CHS e F3΄5΄H) con espressione tessuto-specifica, possono essere importanti contribuiscono agli elevati livelli di accumulo di composti polifenolici osservati nel frutto longan. L'elevato numero di geni che codificano la ripetizione ricca di leucina del sito di legame dei nucleotidi (NBS-LRR) e le proteine chinasi simili al recettore della ripetizione ricca di leucina, nonché la recente espansione e contrazione della famiglia NBS-LRR, hanno suggerito una base genomica per resistenza a insetti, funghi e batteri in questo albero da frutto. Questi dati forniscono informazioni sull'evoluzione e la diversità del genoma longan. Le analisi comparative genomiche e del trascrittoma hanno fornito informazioni sui tratti specifici del longan, in particolare sui geni coinvolti nelle sue caratteristiche ricche di polifenoli e di resistenza ai patogeni.
L'esposizione a lungo termine agli estrogeni neonatali provoca l'inibizione irreversibile degli impulsi di LH sopprimendo l'espressione arcuata della kisspeptina attraverso i recettori α e nei roditori.Esposizione a estrogeni durante il periodo di sviluppo provoca disfunzione riproduttiva nei mammiferi, perché il cervello in via di sviluppo è altamente sensibile agli estrogeni. Nel presente studio, riportiamo che l'esposizione a lungo termine a dosi sovrafisiologiche di estrogeni durante il periodo critico neonatale provoca la soppressione irreversibile di Kiss1/kisspeptin espressione nel nucleo arcuato (ARC) tramite il recettore alfa degli estrogeni (ERα) e ERβ, con conseguente disfunzione riproduttiva nelle femmine di ratto. La somministrazione giornaliera di estradiolo-benzoato (EB) dai giorni 0 ai giorni 10 dopo il parto ha causato diestro vaginale persistente nelle femmine di ratto. ratti femmine hanno mostrato una profonda soppressione del rilascio pulsatile dell'ormone luteinizzante (LH) e dell'espressione di ARC Kiss1/kisspeptin anche dopo ovariectomia in età adulta. ratti maschi trattati con una singola iniezione di EB al giorno 5 dopo il parto hanno mostrato estro vaginale persistente e hanno mostrato impulsi LH e numeri di cellule che esprimono ARC Kiss1 comparabili ai controlli trattati con veicolo dopo ovariectomia in età adulta. Poiché la risposta secretoria dell'LH alla kisspeptina esogena è stata risparmiata nelle femmine di ratto con esposizione neonatale a lungo termine agli estrogeni, la soppressione dell'impulso di LH è stata molto probabilmente dovuta alla carenza di ARC kisspeptin. Inoltre, l'estrogeno neonatale potrebbe agire sia attraverso ERα che ERβ, poiché l'esposizione a EB ha ridotto significativamente il numero di cellule che esprimono ARC Kiss1 nei topi wild-type ma non nei topi ERα o ERβ knockout. Nel loro insieme, l'esposizione a lungo termine a dosi sovrafisiologiche di estrogeni nel cervello in via di sviluppo potrebbe causare difetti nei neuroni kisspeptin ARC tramite ERα ed ERβ, con conseguente inibizione del rilascio pulsatile di LH e mancanza di ciclicità estrale.
Massa surrenale: approfondimento sulla patogenesi e un legame comune con la resistenza all'insulina.La massa surrenale (MA) è un reperto accidentale comune rilevato durante le indagini radiologiche con un'incidenza stimata del 4%. I soggetti con AM non mostrano alcun segno fisico di eccesso ormonale surrenale, sebbene siano spesso insulino-resistenti. È interessante notare che gli AM apparentemente non funzionanti sono spesso associati ad un'alta prevalenza di insulino-resistenza (IR) e sindrome metabolica. Tuttavia, non è chiaro se l'AM si sviluppi da un IR primario e da un'iperinsulinemia compensatoria o se l'IR sia solo secondario alla leggera ipersecrezione di cortisolo da parte dell'AM. Inoltre, è stato riportato che il grado di IR è direttamente correlato alla dimensione dell'AM, consentendo così uno ipotizzare che l'iperinsulinemia compensatoria a IR possa essere mitogenica sulla corteccia surrenale agendo attraverso l'attivazione dei recettori dell'insulina e del fattore di crescita insulino-simile 1. Pertanto, lo scopo del presente arti cle è quello di rivedere le prove attuali sul legame tra AM e iperinsulinemia compensatoria a IR.
La disregolazione del miRNA placentare nell'obesità materna è associata alla crescita pre e postnatale.La placenta umana mostra uno specifico pattern di espressione di microRNA (miRNA). Alcuni di questi miRNA sono disregolati nei disturbi della gravidanza come la preeclampsia e la restrizione della crescita intrauterina e sono potenziali biomarcatori per queste patologie Studiare il profilo dei miRNA placentari in donne in gravidanza con sovrappeso/obesità pregestazionale (preOB) o obesità gestazionale (gestOB) ed esplorare le associazioni tra i miRNA placentari disregolati nell'obesità materna e la crescita prenatale e postnatale I TaqMan Low Density Array e la reazione a catena della polimerasi in tempo reale sono stati utilizzati per profilare i miRNA placentari in 70 donne in gravidanza (20 preOB, 25 gestOB e 25 di controllo). sono stati pesati al momento del parto e i bambini sono stati pesati a 1, 4 e 12 mesi di età Otto miRNA sono stati ridotti nelle placente da preOB o gestOB (miR-100, miR-1269, miR-128 5, miR-181, miR-185, miR-214, miR-296 e miR-487) (tutti P < 0,05). Tra questi, miR-100, miR-1285, miR-296 e miR-487 erano associati a parametri metabolici materni (tutti P < 0,05) ed erano predittori di peso alla nascita inferiore (tutti P < 0,05; R2 > 30 %) e aumento di peso postnatale (tutti P < 0,05; R2 > 20%). L'analisi in silico ha mostrato che questi miRNA erano correlati alla proliferazione cellulare e alle vie di segnalazione dell'insulina. miR-296 era presente anche nei campioni di plasma e associato all'espressione placentare e ai parametri di crescita prenatale e postnatale (tutti P < 0,05). Abbiamo identificato uno specifico profilo di miRNA placentare nell'obesità materna. I miRNA placentari disregolati nell'obesità materna possono essere coinvolti nella mediazione degli effetti di promozione della crescita dell'obesità materna sulla prole e potrebbero essere usati come marcatori precoci della crescita prenatale e postnatale.
Secretina accoppiata a proteine di classe BG e recettori GLP-1 auto-associati e incrociati: impatto sulle isole pancreatiche.Nucleotide guanina di classe B- recettori accoppiati alla proteina legante (proteina G) formano complessi omodimerici simmetrici lungo la faccia lipidica del segmento transmembrana 4 (TM4) e possono formare complessi eterodimerici, sebbene la loro struttura sia sconosciuta. L'attuale studio dimostra che anche la faccia lipidica di TM4 è la predominante determinante per la formazione di complessi eterorecettori tra due recettori di classe B, il recettore della secretina (SecR) e il recettore del peptide-1 glucagonlike (GLP-1R), che sono espressi sulle cellule delle isole pancreatiche Poiché questi recettori utilizzano la stessa interfaccia per la formazione di omo- e complessi eterorecettori, le forze competitive possono influenzare l'espressione di diversi complessi. La valutazione dei complessi dimerici SecR e GLP-1R tramite espressione ricombinante nelle cellule ovariche di criceto cinese ha rivelato che il recettore omodimerico comp i lessi erano più stabili dei complessi eterodimerici e il complesso omodimerico SecR/SecR è più stabile del complesso GLP-1R/GLP-1R. Data la maggiore tendenza alla formazione di complessi omodimerici rispetto alla formazione di complessi eterodimerici, i complessi eterorecettori mancavano dell'espressione che avrebbe potuto essere prevista dalla sola geometria. Tuttavia, le cellule che coesprimono questi recettori hanno formato complessi eterodimerici correlati a una ridotta risposta del calcio intracellulare alla secretina, ma nessun cambiamento nelle risposte cicliche dell'adenosina monofosfato a ciascun agonista naturale. Questo effetto funzionale è stato confermato nelle isole pancreatiche isolate da topi wild-type e knockout per GLP-1R. In queste cellule, l'aumento della risposta del calcio mediata dalla secretina in assenza di GLP-1R è stato accompagnato da un'aumentata risposta dell'insulina glucosio-dipendente, indicando che i complessi recettoriali eterodimerici modulano le risposte della secretina. Inoltre, i complessi recettoriali eterodimerici mediano anche l'internalizzazione del cross-recettore indotta da agonisti, un processo che potrebbe avere un ampio significato funzionale nei siti di coespressione del recettore naturale.
La vitamina D riduce l'attivazione della procaspasi-3/ROCK1 indotta dallo stress ossidativo e il rilascio di MP da parte dei trofoblasti placentari.Aumento della diffusione di microparticelle (MP) da parte dei trofoblasti placentari contribuisce alla risposta infiammatoria vascolare materna e alla disfunzione endoteliale nella preeclampsia. La vitamina D ha effetti benefici in gravidanza; tuttavia, il suo effetto sul rilascio di MP del trofoblasto non è stato studiato. Per indagare se la vitamina D potrebbe proteggere i trofoblasti dal rilascio di MP indotto dallo stress ossidativo. Placenta i trofoblasti sono stati isolati da placente non complicate e preeclamptiche Sono stati studiati gli effetti della vitamina D sul rilascio di MP indotto dall'induttore dello stress ossidativo CoCl2 Sono stati valutati gli MP di annessina V+ mediante citometria a flusso Espressione di caveolina-1, ossido nitrico endoteliale sintasi (eNOS), procaspasi- 3, la caspasi-3 scissa e la proteina chinasi 1 a spirale associata a Rho (ROCK1) nei trofoblasti e negli MP derivati dal trofoblasto sono stati determinati mediante Western blot. le esplosioni di gravidanze preeclamptiche hanno rilasciato significativamente più MP rispetto alle cellule di gravidanze non complicate (P < 0,01). L'aumento indotto da CoCl2 nel rilascio di MP è stato associato alla sovraregolazione della caveolina-1 e alla sottoregolazione dell'espressione di eNOS nei trofoblasti (P < 0,05), che potrebbe essere attenuata di 1,25(OH)2D3. Inoltre, la 1,25(OH)2D3 potrebbe anche inibire la scissione della procaspasi-3 indotta da CoCl2 e l'attivazione di ROCK1 nei trofoblasti. In modo coerente, la sovraregolazione indotta da CoCl2 dell'espressione di procaspasi-3, caspasi-3 scissa e ROCK1 in MP derivati dal trofoblasto è stata ridotta anche nelle cellule trattate con 1,25(OH)2D3. I trofoblasti placentari delle gravidanze preeclamptiche hanno rilasciato più MP delle cellule delle gravidanze non complicate. L'aumento indotto dallo stress ossidativo nello spargimento di MP è associato alla sovraregolazione della caveolina-1 e alla sottoregolazione dell'espressione di eNOS nei trofoblasti placentari. L'inibizione della scissione della caspasi-3 e l'attivazione di ROCK1, insieme alla sovraregolazione dell'espressione di eNOS, potrebbero essere i potenziali meccanismi cellulari/molecolari degli effetti protettivi della vitamina D sui trofoblasti placentari.
Peptidi ciclici per un trattamento efficace in un modello a lungo termine della malattia di Graves e dell'orbitopatia nei topi femmine.Un modello per la malattia di Graves umana nei topi è stato utilizzato per confrontare diversi approcci terapeutici. I topi hanno ricevuto regolari immunizzazioni con adenovirus (Ad) recettore dell'ormone stimolante la tiroide (TSHR) A subunità (iniezioni ogni 4 settimane). La generazione di anticorpi anti-TSHR, dimensioni della tiroide ingrossate (gozzo), aumento del siero livelli di tiroxina, fibrosi retroorbitale e coinvolgimento cardiaco (tachicardia e ipertrofia) sono stati costantemente osservati nei mesi 9. Il trattamento della malattia consolidata in questi topi utilizzando peptidi ciclici che imitano uno dei loop cilindrici del dominio ripetuto ricco di leucina TSHR è migliorato o curato tutti i parametri studiati dopo sei iniezioni mensili consecutive. I primi effetti benefici significativi sono stati osservati 3-4 mesi dopo l'inizio di queste terapie. In topi immunologicamente naïve, la somministrazione di uno qualsiasi dei i peptidi ciclici non hanno indotto alcuna risposta immunitaria. Al contrario, le iniezioni mensili dell'intero dominio antigenico TSHR A come proteina di fusione con il frammento cristallizzabile dell'immunoglobulina G hanno indotto segni clinici di allergia nei topi immunizzati con Ad-TSHR e anticorpi anti-TSHR nei topi di controllo naïve. In conclusione, i peptidi ciclici hanno risolto molti risultati clinici in un modello murino di malattia di Graves accertata e orbitopatia. A differenza del blocco del TSHR mediante modulazione allosterica, l'approccio non comporta un antagonismo diretto del recettore, che potrebbe offrire un profilo di effetti collaterali favorevole.
Somministrazione continua di Kisspeptin nelle donne in postmenopausa: impatto dell'estradiolo sulla secrezione dell'ormone luteinizzante.La Kisspeptin stimola la cascata endocrina riproduttiva sia negli uomini che nelle donne. Sesso circolante si pensa che gli steroidi modulino la capacità della kisspeptin di stimolare il rilascio dell'ormone di rilascio delle gonadotropine (GnRH) indotto dall'ormone luteinizzante (LH). Per sondare gli effetti degli steroidi sessuali sugli impulsi di LH indotti da GnRH stimolati dalla kisspeptin. Otto donne sane in postmenopausa. sono stati sottoposti a prelievo di sangue ogni 10 minuti per misurare la secrezione di LH indotta da GnRH al basale e in risposta a un'infusione continua di kisspeptin (12,5 µg/kg/h) per 24 ore. Un sottogruppo dei partecipanti ha ricevuto anche kisspeptin (0,313 µg/kg ) e boli endovenosi di GnRH (75 ng/kg). Le donne in postmenopausa sono resistenti all'effetto stimolante della kisspeptina continua sulla secrezione di LH. Anche le donne in postmenopausa che ricevono terapia sostitutiva con estradiolo sono resistenti inizialmente a kisspeptin, ma dimostrano un aumento significativo dell'ampiezza dell'impulso di LH in proporzione diretta alla concentrazione di estradiolo circolante e alla durata della somministrazione di kisspeptin. La somministrazione di Kisspeptin ha effetti complessi sul GnRH e, per estensione, sulla secrezione di LH. La capacità della kisspeptin di influenzare la secrezione di LH può essere modulata dall'ambiente degli steroidi sessuali ambientali in modo dipendente dal tempo e dalla dose.
Concordanza del rilevamento su sangue e tumore delle mutazioni RAS per guidare la terapia anti-EGFR nel cancro del colon-retto metastatico.DNA tumorale circolante (ctDNA) è una potenziale fonte per l'analisi del genoma tumorale. Abbiamo esplorato la concordanza tra lo stato mutazionale di RAS nel tessuto tumorale e il ctDNA nei pazienti con carcinoma metastatico del colon-retto (mCRC) per stabilire l'idoneità alla terapia del recettore del fattore di crescita anti-epidermico (EGFR). è stato condotto uno studio di coorte retrospettivo. Il tessuto tumorale di 146 pazienti con mCRC è stato testato per lo stato RAS con tecniche PCR standard di cura (SoC) e Digital PCR (BEAMing) è stato utilizzato sia nel plasma che nel tessuto tumorale. Il test ctDNA BEAMing RAS ha mostrato l'89,7% accordo con SoC (indice Kappa 0,80; 95% CI 0,71 - 0,90) e BEAMing nel tessuto ha mostrato una concordanza del 90,9% con SoC (indice Kappa 0,83; 95% CI 0,74 - 0,92). Quindici casi (10,3%) hanno mostrato risultati discordanti tessuto-plasma L'analisi del ctDNA ha identificato nove casi di bassa fre quency mutazioni RAS che non sono state rilevate nel tessuto, probabilmente a causa della sensibilità tecnica o dell'eterogeneità. In sei casi, le mutazioni RAS non sono state rilevate nel plasma, potenzialmente spiegate da un basso carico tumorale o dalla diffusione del ctDNA. La previsione del beneficio del trattamento nei pazienti che ricevevano anti-EGFR più irinotecan in seconda o terza linea era equivalente se testata con SoC PCR e ctDNA. Il quarantotto percento dei pazienti ha mostrato frazioni alleliche mutanti nel plasma inferiori all'1%. La determinazione del plasma RAS ha mostrato un'elevata concordanza complessiva e ha catturato una popolazione di mCRC sensibile alla terapia anti-EGFR con lo stesso livello predittivo del test del tessuto SoC. La fattibilità e la praticità dell'analisi del ctDNA possono tradursi in uno strumento alternativo per la selezione del trattamento anti-EGFR.
Dinamiche della qualità della vita correlata alla salute 2 anni dopo l'emorragia subaracnoidea aneurismatica: uno studio di coorte prospettico che utilizza EQ-5D.Studi precedenti hanno dimostrato che l'aneurisma l'emorragia subaracnoidea (aSAH) influisce in larga misura sulla qualità della vita correlata alla salute (HRQoL), tuttavia, gli studi longitudinali su HRQoL dopo aSAH sono scarsi e vi è una conoscenza limitata se i diversi punteggi delle dimensioni HRQoL cambiano nel tempo e, in tal caso, se il punteggio differisce dai risultati della popolazione generale. Per valutare la dinamica della HRQoL nel tempo, 2 anni dopo aSAH, e confrontare i risultati con la popolazione generale. In un disegno prospettico di coorte, 88 pazienti consecutivi aSAH (85% degli eleggibili) sono stati seguiti con lo strumento generico HRQoL EQ-5D in 3 momenti: 6 mesi, 1 anno e 2 anni dopo l'esordio. I dati sono stati raccolti dal 2006 al 2009 e i risultati sono stati confrontati con un campione di popolazione generale dello Stockholm Public Health Survey 2006 , abbinati per età e sesso. La HRQoL complessiva nel campione aSAH è rimasta stazionaria nel tempo. La funzione migliorata è stata trovata solo nella consueta dimensione delle attività (P = .026). La HRQoL è stata maggiormente colpita nei partecipanti che hanno riportato comorbilità. Rispetto alla popolazione generale, le donne nel campione aSAH hanno riportato un numero significativamente maggiore di problemi in 4 dimensioni su 5 (mobilità, cura di sé, attività abituali e ansia/depressione). Gli uomini nel campione aSAH hanno riportato significativamente più problemi nella dimensione delle attività abituali rispetto alla popolazione generale. La HRQoL è stazionaria durante i primi 2 anni successivi all'aSAH ed è significativamente peggiore rispetto alla popolazione generale. Gli sforzi di riabilitazione dovrebbero essere avviati subito dopo il ricovero in ospedale.
Studio randomizzato di fase II su PM01183 rispetto a topotecan in pazienti con carcinoma ovarico avanzato resistente al platino/refrattario.PM01183 è un nuovo composto che blocca la trascrizione attiva , produce rotture del DNA e apoptosi e colpisce il microambiente infiammatorio. Il PM01183 ha mostrato una forte attività antitumorale in modelli preclinici di carcinoma ovarico epiteliale resistente al cisplatino. I pazienti con carcinoma ovarico platino-resistente/refrattario sono stati inclusi in un due stadi, controllato, randomizzato ( in una seconda fase), studio multicentrico di fase II. L'endpoint primario era il tasso di risposta globale (ORR) secondo i criteri RECIST e/o GCIG. La prima fase esplorativa (n = 22) ha confermato l'attività di PM01183 come singolo agente a 7,0 mg dose fissa ogni 3 settimane (q3wk). La seconda fase (n = 59) è stata randomizzata e controllata con topotecan nei giorni 1-5 q3wk o settimanalmente (ogni 4 settimane, q4wk). L'ORR era del 23% (IC 95%, 13%-37%) per 52 pazienti trattati con PM01183. Mediana dur zione della risposta è stata di 4,6 mesi (95% CI, 2,5-6,9 mesi) e il 23% (95% CI, 0%-51%) delle risposte è durata 6 mesi o più. Dieci delle 12 risposte confermate sono state riportate per 33 pazienti con malattia resistente al platino [ORR = 30% (95% CI, 16%-49%)]; per i 29 pazienti trattati con topotecan nella seconda fase, non sono state trovate risposte. La PFS mediana per tutti i pazienti trattati con PM01183 era di 4,0 mesi (IC 95%, 2,7-5,6 mesi) e 5,0 mesi (IC 95%, 2,7-6,9 mesi) per i pazienti con malattia resistente al platino. Neutropenia di grado 3/4 nell'85% dei pazienti; neutropenia febbrile nel 21% e affaticamento (grado 3 nel 35%) sono stati i principali risultati di sicurezza per PM01183. PM01183 è un farmaco attivo nel carcinoma ovarico resistente al platino/refrattario e merita un ulteriore sviluppo. L'attività più elevata è stata osservata nella malattia resistente al platino. Il suo profilo di sicurezza indica che la dose deve essere adattata alla superficie corporea (mg/m2). EudraCT 2011-002172-16.
Effetto della polarizzazione elettrostatica e dell'acqua a ponte sulle affinità di legame del ligando CDK2 calcolate utilizzando un metodo dell'entropia di interazione altamente efficiente.Una nuova entropia di interazione altamente efficiente ( Il metodo IE) combinato con il campo di forza della carica specifica della proteina polarizzata (PPC) viene impiegato per studiare il meccanismo di interazione del legame del ligando CDK2 e l'effetto dell'acqua ponte Il nostro risultato mostra che le energie libere di legame calcolate per cinque ligando CDK2 complessi che utilizzano il metodo IE hanno una correlazione significativamente lineare con i valori misurati sperimentalmente con un coefficiente di correlazione di 0,98 in considerazione dell'acqua ponte sotto il campo di forza PPC e il coefficiente di correlazione risulta essere leggermente più debole con un valore di 0,95 usando il metodo tradizionale in modalità normale (Nmode) per il calcolo della variazione di entropia È importante sottolineare che il rango delle energie libere di legame previste è significativamente coerente con l'esperimento rango entale basato sul metodo IE ha calcolato la variazione di entropia utilizzando il campo di forza PPC. Tuttavia, senza includere l'acqua ponte nella simulazione PPC, il coefficiente di correlazione è inferiore a 0,83. Per confronto, il risultato ottenuto dalla simulazione utilizzando il campo di forza AMBER non polarizzato fornisce una correlazione molto più debole con i coefficienti di correlazione di 0,44 e 0,45 utilizzando il metodo Nmode e il metodo IE, a causa della mancanza di polarizzazione elettrostatica. Inoltre, l'analisi del legame idrogeno indica che l'acqua di collegamento fornisce un contributo significativo alla mediazione della rete del legame idrogeno del legame proteina-ligando e alla stabilizzazione della struttura complessa. L'attuale studio dimostra che il nuovo metodo IE è superiore al metodo Nmode standard nel calcolo dell'energia libera di legame. E i nostri risultati sottolineano anche l'importanza della polarizzazione elettronica e del collegamento dell'acqua nelle simulazioni MD e nei calcoli dell'energia libera.
Co-dipendenza di PKCδ e K-Ras: associazione inversa con la sensibilità ai farmaci citotossici nel carcinoma polmonare mutante KRAS.Studi recenti suggeriscono che la presenza di una mutazione KRAS può essere insufficiente per definire un gruppo molecolare clinicamente omogeneo, poiché molti tumori mutanti KRAS perdono la dipendenza da K-Ras per la sopravvivenza L'identificazione di percorsi che supportano la dipendenza da K-Ras può definire sottogruppi KRAS clinicamente rilevanti e portare all'identificazione di un nuovo farmaco Abbiamo analizzato un pannello di 17 linee cellulari di carcinoma polmonare mutante KRAS classificate come K-Ras-dipendenti o -indipendenti per la co-dipendenza dalla protein chinasi C (PKCδ). Dimostriamo che la dipendenza funzionale da K-Ras e PKCδ co -segregate, e che la dipendenza è correlata con un fenotipo più simile all'epitelio. Inoltre, mostriamo che le funzioni pro-apoptotiche e pro-tumorigeniche di PKCδ segregano anche in base alla dipendenza da K-Ras, poiché le cellule K-Ras-indipendenti sono più sensibili agli inibitori della topoisomerasi, e l'esaurimento di PKCδ in questo sottogruppo sopprime l'apoptosi attraverso una maggiore attivazione della chinasi regolata dal segnale extracellulare (ERK). Al contrario, le cellule tumorali polmonari dipendenti da K-Ras sono in gran parte insensibili agli inibitori della topoisomerasi e l'esaurimento di PKCδ può aumentare l'apoptosi e diminuire l'attivazione di ERK in questo sottogruppo. Abbiamo precedentemente dimostrato che la traslocazione nucleare di PKCδ è necessaria e sufficiente per la segnalazione pro-apoptotica. I nostri studi attuali mostrano che le cellule dipendenti da K-Ras sono rifrangenti all'apoptosi guidata da PKCδ. L'analisi di questo sottogruppo ha mostrato un aumento dell'espressione di PKCδ e un aumento del rapporto nucleare:citoplasmatico di PKCδ. Inoltre, il targeting di PKCδ al nucleo induce l'apoptosi nelle cellule di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) K-Ras-indipendenti, ma non K-Ras-dipendenti. I nostri studi forniscono strumenti per l'identificazione del sottogruppo di pazienti con tumori mutanti KRAS più suscettibili al targeting della via K-Ras e identificano PKCδ come potenziale bersaglio in questa popolazione tumorale. È probabile che questi sottogruppi siano di rilevanza clinica, poiché l'elevata espressione di PKCδ è correlata a una maggiore sopravvivenza globale e a un fenotipo tumorale più epiteliale nei pazienti con adenocarcinomi polmonari con mutazione KRAS.
Myc migliora la segnalazione del recettore delle cellule B nelle cellule B precancerose e conferisce resistenza all'inibizione di Btk.La disregolazione del fattore di trascrizione oncogenico MYC induce le cellule B trasformazione ed è un driver per il linfoma non-Hodgkin a cellule B (B-NHL). La sovraespressione di MYC nel B-NHL è associata a fenotipi più aggressivi e prognosi infausta. Sebbene gli studi genomici suggeriscano un legame tra la sovraespressione di MYC e il recettore delle cellule B ( BCR) molecole di segnalazione in B-NHL, le vie di segnalazione essenziali per la trasformazione delle cellule B mediata da Myc non sono state completamente chiarite. Abbiamo utilizzato la fosfocitometria a flusso intracellulare per studiare la relazione tra la segnalazione di Myc e BCR nelle cellule B pre-maligne. il modello murino Eμ-myc, in cui Myc è sovraespresso specificamente nelle cellule B, la segnalazione BCR sia basale che stimolata è stata aumentata nei linfociti B precancerosi di topi Eμ-myc rispetto ai compagni di cucciolata di tipo selvaggio. yed livelli costitutivamente più elevati di CD79α, Btk, Plcγ2 e Erk1/2 attivati. In particolare, le cellule B con sovraespressione di Myc hanno mantenuto un elevato segnale BCR nonostante il trattamento con ibrutinib, un inibitore della tirosin-chinasi di Bruton\'s. Inoltre, anche la segnalazione della via PI3K/Akt è stata aumentata nelle cellule B Eμ-myc e questo aumento è stato parzialmente soppresso con ibrutinib. Inoltre, esperimenti con cellule B Btk-null hanno rivelato effetti fuori bersaglio di ibrutinib sulla segnalazione BCR. I nostri dati mostrano che nelle cellule B pre-maligne, la sovraespressione di Myc è sufficiente per attivare le vie di segnalazione BCR e PI3K/Akt e migliora ulteriormente la segnalazione dopo la legatura BCR. Pertanto, i nostri risultati indicano che le cellule B precancerose hanno già acquisito capacità di sopravvivenza e crescita migliorate prima della trasformazione e che livelli elevati di MYC conferiscono resistenza agli inibitori farmacologici del segnale BCR, il che ha implicazioni significative per il trattamento del B-NHL.
L'inibizione di P53/Rb induce carcinomi corticosurrenali metastatici in un modello transgenico preclinico.Il carcinoma corticosurrenale (ACC) è un tumore raro con prognosi infausta. le analisi genomiche hanno identificato le vie di segnalazione p53/Rb e WNT/β-catenina come principali contribuenti alla malattia. Tuttavia, l'attivazione costitutiva della -catenina isolata non è riuscita a indurre la progressione maligna nei tumori corticosurrenalici del topo. Pertanto, c'era ancora bisogno di un animale rilevante modello per studiare la patogenesi dell'ACC e per testare nuovi approcci terapeutici. Qui, abbiamo sviluppato un modello di topi transgenici con espressione specifica corticosurrenale dell'antigene T grande SV40 (topi AdTAg), per testare il potenziale oncogenico dell'inibizione di p53/Rb nella ghiandola surrenale Tutti i topi AdTAg sviluppano grandi carcinomi surrenali che alla fine metastatizzano al fegato e ai polmoni, con conseguente diminuzione della sopravvivenza globale Coerentemente con l'ACC nei pazienti, i tumori surrenali nei topi AdTAg producono autonomamente lar ge quantità di glucocorticoidi e attivano spontaneamente la via di segnalazione WNT/β-catenina durante la progressione maligna. Mostriamo che questa attivazione è associata alla downregulation delle proteine correlate secrete (Sfrp) e Znrf3 che agiscono come inibitori della segnalazione WNT. Mostriamo anche che l'attivazione della via mTORC1 è un evento precoce durante l'espansione della neoplasia e dimostriamo ulteriormente che la via mTORC1 è attivata nei pazienti ACC. L'inibizione preclinica dell'attività di mTORC1 induce una marcata riduzione delle dimensioni del tumore, associata all'induzione dell'apoptosi e all'inibizione della proliferazione che si traduce nella normalizzazione dei livelli plasmatici di corticosterone nei topi AdTAg. Complessivamente, questi dati stabiliscono che i topi AdTAg sono il primo modello preclinico per l'ACC metastatico.
Difetto di selettività nucleotidica e fenotipo mutatore conferito da una mutazione DNA polimerasi δ associata al cancro del colon nelle cellule umane.Mutazioni nei geni POLD1 e POLE che codificano Le DNA polimerasi δ (Polδ) e ɛ (Polɛ) causano il cancro colorettale ereditario (CRC) e sono state trovate in molti tumori colorettali ed endometriali sporadici Molta attenzione è stata focalizzata sulle mutazioni del dominio esonucleasi POLE, che si verificano frequentemente nella riparazione del disadattamento del DNA ipermutato. tumori MMR) e sembrano essere responsabili della maggior parte dell'instabilità genomica in questi tumori. Al contrario, le mutazioni somatiche di POLD1 sono osservate meno frequentemente e si verificano tipicamente nei tumori con deficit di MMR. Il loro significato funzionale è spesso poco chiaro. Qui dimostriamo che l'espressione dell'allele POLD1-R689W associato al cancro è fortemente mutageno nelle cellule umane Il tasso di mutazione è aumentato sinergicamente quando l'espressione di POLD1-R689W è stata combinata con un difetto MMR, indicando t ha l'effetto mutatore di POLD1-R689W risulta da un alto tasso di errori di replica. La Polδ-R689W umana purificata ha una normale attività di esonucleasi, ma la selettività nucleotidica dell'enzima è gravemente compromessa, fornendo una spiegazione meccanicistica per l'aumento del tasso di mutazione nelle cellule che esprimono POLD1-R689W. La stragrande maggioranza delle mutazioni indotte da POLD1-R689W sono transversioni GC→︀TA e transversioni GC→︀AT, con transversioni che mostrano una forte distorsione del filamento e una notevole preferenza per le sequenze polipurina/polipirimidina. La specificità mutazionale della variante Polδ corrisponde a quella della linea cellulare CRC ipermutata, HCT15, in cui questa variante è stata identificata per la prima volta. I risultati forniscono prove convincenti del ruolo patogeno della mutazione POLD1-R689W nello sviluppo del tumore umano e sottolineano la necessità di determinare sperimentalmente il significato delle varianti di Polδ presenti nei tumori sporadici.
Regolazione della chinasi Abl da parte di BRAF/ERK e cooperazione con Akt nel melanoma.ha un significato funzionale e biologico, guidando la proliferazione, l'invasione e il cambiamento nell'espressione del fattore di trascrizione di transizione epiteliale-mesenchimale, che è noto per essere critico per le cellule di melanoma per spostarsi tra stati differenziati e invasivi. Infine, descriviamo risultati di alto significato traslazionale dimostrando che Abl/Arg cooperano con PI3K/Akt/PTEN, una via parallela che è associata alla resistenza intrinseca a BRAFi e all'immunoterapia, poiché gli inibitori Abl/Arg e Akt cooperano per prevenire la vitalità, la progressione del ciclo cellulare e la crescita in vivo di melanomi che ospitano il mutante BRAF/PTEN. Pertanto, questi dati non solo forniscono informazioni meccanicistiche nella regolazione Abl/Arg durante lo sviluppo del melanoma, ma anche aprire la strada allo sviluppo di nuove strategie per il trattamento di pazienti con melanomi che ospitano BRAF/PTEN mutanti, che spesso sono refrattari alle terapie attuali.
ΔNp63α promuove l'adesione delle cellule metastatiche del cancro alla prostata all'osso attraverso la regolazione del CD82.ΔNp63α è un mediatore critico dello sviluppo epiteliale e della funzione delle cellule staminali in una varietà di tessuti tra cui la pelle e il seno, mentre la sovraespressione di ΔNp63α agisce come un oncogene per guidare la formazione del tumore e le proprietà delle cellule staminali del cancro nel carcinoma a cellule squamose Tuttavia, per quanto riguarda la prostata, mentre ΔNp63α è espresso nelle cellule staminali basali di la ghiandola matura, durante lo sviluppo dell'adenocarcinoma, la sua espressione viene persa e la sua assenza viene utilizzata per diagnosticare clinicamente lo stato maligno Sorprendentemente, qui identifichiamo una sottopopolazione di cellule di cancro alla prostata metastatico osseo nella linea cellulare PC3 che esprimono ΔNp63α. abbiamo scoperto che ΔNp63α favorisce l'adesione e la crescita simile allo stelo di queste cellule nel microambiente osseo. Inoltre, mostriamo che queste proprietà richiedono l'espressione del gene bersaglio CD82. Insieme, t il suo lavoro scopre una popolazione di cellule di cancro alla prostata metastatico osseo che esprimono ΔNp63α e fornisce importanti informazioni sui meccanismi della colonizzazione metastatica ossea. Infine, identifichiamo le proprietà che promuovono la metastasi per il membro della famiglia delle tetraspanine CD82.
I fibroblasti associati al cancro inducono l'apoptosi delle cellule cancerose che regola la modalità di invasione dei tumori.Nel processo di diffusione del cancro, esistono diverse modalità di invasione. Uno è un'invasione espansiva, in cui un gruppo di cellule tumorali si espande gradualmente insieme alla proliferazione delle cellule tumorali. L'invasione delle cellule tumorali è anche modificata dalla loro interazione con le cellule stromali inclusi i fibroblasti associati al cancro (CAF). Le cellule tumorali invadono insieme i CAF e L'invasione da parte dei CAF spesso precede l'invasione delle cellule tumorali, il che indica l'invasione delle cellule tumorali guidata da CAF. Qui, mostriamo che i CAF inducono l'apoptosi nelle cellule tumorali gastriche, che ha impedito l'invasione espansiva delle cellule tumorali e invece ha facilitato l'invasione guidata da CAF. e l'attivazione della caspasi-8 nelle cellule tumorali mediata dall'apoptosi delle cellule tumorali indotta da CAF, che dipendeva dal contatto tra cellule tumorali e CAF. Le cellule tumorali apoptotiche a loro volta rilasciavano vescicole apoptotiche e sti invasione multipla dei CAF. Di conseguenza, le cellule tumorali hanno seguito i CAF in migrazione. Il trattamento con un inibitore della caspasi, ZVAD, o l'espressione forzata di un frammento del dominio della morte nelle cellule tumorali ha impedito l'apoptosi delle cellule tumorali indotta dai CAF e ha aumentato l'invasione espansiva delle cellule tumorali nei saggi di invasione del gel extracellulare, mentre il tasso di invasione delle cellule tumorali guidato dai CAF è stato diminuito. L'espressione del frammento del dominio della morte ha anche impedito l'invasione intramurale da parte delle cellule tumorali gastriche nello stomaco. Poiché l'invasione guidata da CAF è caratterizzata dal movimento delle singole cellule tumorali lontano dal tumore, un'adeguata apoptosi delle cellule tumorali può favorire la diffusione del cancro.
Effetti oncogeni dell'RNA non codificante ECONEXIN sulla gliomagenesi.Studi accumulati hanno dimostrato l'importanza di lunghi RNA non codificanti (lncRNA) durante la trasformazione oncogenica. Tuttavia , poiché la maggior parte degli lncRNA non sono attualmente caratterizzati, l'identificazione di nuovi lncRNA oncogeni è difficile. Dato che gli lncRNA intergenici hanno modelli di conservazione della sequenza sostanzialmente inferiori rispetto ai geni che codificano proteine tra le specie, è probabile che gli lncRNA intergenici conservati nell'evoluzione siano funzionali. nuovo lncRNA intergenico, LINC00461 (ECONEXIN) utilizzando un approccio combinato che consiste nella ricerca di lncRNA mediante conservazione evolutiva e convalida della loro espressione in un modello murino di glioma. regione oltre 2500 bp di lunghezza all'interno del suo esone 3. Espressioni di ECONEXIN e C130071 C03Rik era significativamente sovraregolato nei tessuti di glioma sia umano che murino. Inoltre, l'espressione di C130071C03Rik era sovraregolata anche in condizioni precancerose e notevolmente aumentata durante la progressione del glioma. L'analisi funzionale di ECONEXIN nelle linee cellulari di glioma, U87 e U251, ha mostrato che era localizzato in modo dominante nel citoplasma e interagiva con miR-411-5p tramite due siti di legame all'interno di ECONEXIN. L'inibizione di ECONEXIN ha sovraregolato il miR-411-5p insieme alla sottoregolazione del suo bersaglio, la topoisomerasi 2 alfa (TOP2A), nelle linee cellulari di glioma, con conseguente diminuzione della proliferazione cellulare. I nostri dati hanno dimostrato che ECONEXIN è un potenziale oncogene che regola TOP2A mediante spugnatura di miR-411-5p nel glioma. Inoltre, i nostri approcci investigativi per identificare l'lncRNA conservato e la loro caratterizzazione molecolare mediante convalida in modelli di tumore murino possono essere utili per annotare funzionalmente nuovi lncRNA, in particolare gli lncRNA associati al cancro.
Sox2 è superfluo per il melanoma primario e la formazione di metastasi.L'inizio del tumore e la formazione di metastasi in molti tumori sono stati associati all'emergere di un programma di espressione genica normalmente attivo nelle cellule staminali embrionali o organo-specifiche. In particolare, il fattore di trascrizione delle cellule staminali Sox2 non solo è espresso in una varietà di tumori, ma è anche necessario per la loro formazione. Il melanoma, il tumore cutaneo più aggressivo, deriva dai melanociti che durante sviluppo originano dalle cellule staminali della cresta neurale. Mentre le cellule staminali della cresta neurale non esprimono Sox2, l'espressione di questo fattore di trascrizione è stata riportata nel melanoma. Tuttavia, il ruolo di Sox2 nel melanoma è controverso. Per studiare il requisito di Sox2 per la formazione del melanoma, abbiamo quindi eseguito l'inattivazione del gene CRISPR-Cas9-mediata nelle cellule di melanoma umano Inoltre, abbiamo inattivato condizionatamente Sox2 in un modello murino geneticamente modificato, in cui il melanoma spontano si sviluppa nel contesto di uno stroma e di un sistema immunitario intatti. Sorprendentemente, in entrambi i modelli, la perdita di Sox2 non ha influenzato l'inizio del melanoma, né la crescita, né la formazione di metastasi. La mancanza di un ruolo tumorigenico di Sox2 nel melanoma potrebbe riflettere un distinto programma di cellule staminali attivo nelle cellule staminali della cresta neurale e durante la formazione del melanoma.
Angiomotin-like 2 interagisce con e regola negativamente AKT.Angiomotin-like 2 (AMOTL2) è un membro della famiglia delle proteine angiomotine, che sono potenti inibitori per l'effettore della via dell'ippopotamo YAP. Tuttavia, ulteriori funzioni cellulari di AMOTL2 oltre all'inibizione di YAP sono in gran parte sconosciute. Qui, abbiamo riportato che AMOTL2 si associa e regola negativamente AKT. Meccanicamente, AMOTL2 si lega al dominio di omologia della pleckstrin di AKT e interrompe la membrana di AKT\'s localizzazione. Deplezione specifica del fegato di AMOTL2 ingrossato il fegato di topo e attivato sia YAP che AKT. La downregulation di AMOTL2 si trova nei tumori epatici umani, in correlazione con l'attivazione concomitante di YAP e AKT. Insieme, i nostri risultati forniscono nuove informazioni su un doppio tumore soppressivo funzione di AMOTL2 prendendo di mira sia YAP che AKT nel controllo delle dimensioni del fegato e nella prevenzione del cancro.
TGFβ coinvolge MEK/ERK per regolare in modo differenziato la funzione delle cellule del pancreas benigno e maligno.Mentre i segnali del TGFβ sono antiproliferativi nel pancreas benigno e ben differenziato cellule, TGFβ sembra promuovere la progressione dei tumori avanzati. Per comprendere meglio la disregolazione della via del TGFβ, abbiamo prima generato modelli murini di malattia neoplastica con carenze del recettore TGFβ. Questi modelli hanno mostrato livelli ridotti di pERK indipendentemente dalla mutazione KRAS. Inoltre, TGFβ esogeno ha portato a una rapida e sostenuta fosforilazione di ERK TGFBR1-dipendente nelle cellule del dotto pancreatico benigno Simile ai risultati che il nostro gruppo ha pubblicato nelle cellule del cancro del colon, l'inibizione della fosforilazione di ERK nelle cellule del dotto ha mitigato la sovraregolazione indotta dal TGFβ di pSMAD2 e p21 soppressivi della crescita, prevenendo la downregulation del segnale pro-crescita CDK2 e dell'EMT indotto da TGFβ ablato. Queste osservazioni suggeriscono che ERK è un fattore chiave nei segnali TGFβ soppressivi della crescita, tuttavia può anche contribuire alla segnalazione dannosa del TGFβ come l'EMT. Nelle cellule PanIN neoplastiche, pERK non era necessario né per la fosforilazione di pSMAD2 indotta da TGFβ né per la repressione di CDK2, ma era necessario per la sovraregolazione di p21 e EMT indicando una parziale divergenza tra TGFβ e MEK/ERK nella carcinogenesi precoce. Nelle cellule tumorali, pERK non ha avuto alcun effetto sulla sovraregolazione indotta da TGFβ di pSMAD2 e p21, suggerendo che le due vie si sono completamente divergenti rispetto al ciclo cellulare. Inoltre, l'inibizione di pERK ha ridotto i livelli di CDK2 e ha impedito l'EMT indipendentemente dal TGFβ esogeno, coerentemente con la maggior parte delle osservazioni che identificano pERK come promotore del tumore. Combinati, questi dati suggeriscono che durante la carcinogenesi pERK inizialmente facilita e successivamente antagonizza l'arresto del ciclo cellulare mediato dal TGFβ, ma rimane fondamentale per il braccio patologico, che induce EMT della segnalazione del TGFβ.
La segnalazione GLI1 non canonica promuove le caratteristiche di staminalità e la crescita in vivo nell'adenocarcinoma polmonare.La segnalazione aberrante di Hedgehog/GLI è stata implicata in un ampio spettro di tumori umani , ma il suo ruolo nell'adenocarcinoma polmonare (LAC) è ancora in discussione Mostriamo che l'effettore a valle della via Hedgehog, GLI1, è espresso nel 76% dei LAC, ma in circa la metà di questi tumori, l'attivatore della via canonica, Smoothened , è espresso a bassi livelli, probabilmente a causa del silenziamento epigenetico. Nelle cellule LAC compreso il compartimento delle cellule staminali del cancro, mostriamo che GLI1 è attivato in modo non canonico dalla segnalazione MAPK/ERK. Diversi meccanismi possono innescare la cascata MAPK/ERK/GLI1 inclusa la mutazione KRAS e stimolazione di NRP2 da parte del VEGF prodotto dalle stesse cellule cancerose in un loop autocrino o da cellule stromali come cross talk paracrino La soppressione di GLI1, mediante silenziamento o farmaco-mediata, inibisce la proliferazione delle cellule LAC, attenua le loro staminali se aumenta la loro suscettibilità all'apoptosi in vitro e in vivo. Questi risultati forniscono informazioni sulla crescita dei LAC e indicano GLI1 come effettore a valle per le vie oncogene. Pertanto, le strategie che comportano l'inibizione diretta di GLI1 possono essere utili nel trattamento dei LAC.
La co-amplificazione del potenziatore A del fosfoinositide 3-chinasi e della chinasi 4 dipendente dalla ciclina innesca la progressione del glioblastoma.Il glioblastoma (GBM) è il più comune primario tumore al cervello e ha una prognosi infausta. L'amplificazione del cromosoma 12q13-q15 (amplicone della chinasi 4 dipendente dalla ciclina (CDK4)) è frequentemente osservata in numerosi tumori umani tra cui GBM. Il potenziatore della fosfoinositide 3-chinasi (PIKE) è un gruppo di legamenti GTP proteine che appartengono al sottogruppo della famiglia centaurina GTPasi, codificata da CENTG1 situata nell'amplicone CDK4. Tuttavia, il significato patologico dell'amplicone CDK4 nella formazione di GBM rimane incompleto. In questo studio, mostriamo che la co-espressione di PIKE-A e CDK4 nel modello murino GBM double knockout TP53/PTEN riduce ulteriormente la latenza dell'insorgenza del glioma e la sopravvivenza rispetto alla sovraespressione di questi soli geni Di conseguenza, le vie p-mTOR, p-Akt e p-ERK sono altamente sovraregolate nei tumori cerebrali, in allineare mento con le loro attività oncogene da CDK4 e PIKE-A stabilmente trasfettate in linee cellulari GBM. Quindi, i nostri risultati supportano che l'amplificazione o la sovraespressione di PIKE agisce in modo coordinato con CDK4 per guidare la tumorigenesi del GBM.
Recettori degli estrogeni nel seno e nelle ossa: dalla virtù del rimodellamento alla viltà delle metastasi.Le metastasi ossee sono una causa importante di morbilità e mortalità nel cancro. Alti tassi di colonizzazione ossea nel cancro al seno, specialmente nel sottotipo che esprime i recettori degli estrogeni (ER), suggeriscono propensioni tessuto-specifiche per la formazione di tumori metastatici. I meccanismi alla base di questo tropismo d'organo specifico del sottotipo rimangono in gran parte sfuggenti. È interessante notare che, come il principale driver del cancro al seno ER+, gli ER hanno anche ruoli importanti nello sviluppo osseo e nell'omeostasi. Pertanto, qualsiasi agente mirato all'ER influenzerà inevitabilmente anche il microambiente, che coinvolge gli osteoblasti e gli osteoclasti. Tuttavia, come tali effetti microambientali sono integrati con le risposte terapeutiche dirette del cancro cellule rimangono poco comprese. Recenti scoperte sulle mutazioni ER, in particolare il loro arricchimento nelle metastasi ossee, hanno sollevato domande ancora più provocatorie sul ruolo di ER in ca interazione cer-osso. In questa recensione, valutiamo l'importanza degli ER nelle metastasi ossee e discutiamo nuove vie di indagine per il trattamento delle metastasi ossee sulla base delle conoscenze attuali.
PU.1 agisce come soppressore del tumore per le cellule di mieloma attraverso la repressione trascrizionale diretta di IRF4.In precedenza abbiamo riportato che PU.1 è sottoregolato nella maggioranza di linee cellulari di mieloma e cellule di mieloma primario di alcuni pazienti affetti da mieloma e l'espressione condizionale di PU.1 in tali linee cellulari di mieloma ha indotto l'arresto del ciclo cellulare e l'apoptosi Abbiamo trovato una sottoregolazione della proteina IRF4 nella linea cellulare di mieloma U266 a seguito dell'induzione di PU.1 Precedenti studi hanno riportato che il knockdown di IRF4 nelle linee cellulari di mieloma induce apoptosi, spingendoci a indagare ulteriormente sul ruolo della downregulation di IRF4 nell'arresto del ciclo cellulare indotto da PU.1 e nell'apoptosi nelle cellule di mieloma. PU.1 ha indotto la downregulation di IRF4 alla proteina livello, arresto del ciclo cellulare e apoptosi in sei linee cellulari di mieloma. L'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) ha rivelato che PU.1 si lega direttamente al promotore IRF4, mentre un test reporter ha mostrato che PU.1 può sopprimere l'attività del promotore IRF4. in grado di espressione di IRF4 in cellule di mieloma che esprimono PU.1 parzialmente salvato le cellule dall'apoptosi indotta da PU.1. Poiché è stato riportato che IRF4 si lega direttamente al promotore IRF7 e sottoregola la sua espressione nel sottotipo attivato di cellule B simili a cellule di linfoma diffuso a grandi cellule B, abbiamo eseguito saggi ChIP e abbiamo scoperto che IRF4 si lega direttamente al promotore IRF7 nelle cellule di mieloma. È noto che IRF7 sovraregola positivamente l'interferone-β (IFNβ) e induce l'apoptosi in molti tipi di cellule. Il legame di IRF4 al promotore IRF7 è diminuito dopo l'induzione di PU.1, accompagnato da una sottoregolazione dell'espressione della proteina IRF4. Atterramento di cellule di mieloma che esprimono PU.1 protette da IRF7 dall'apoptosi. Inoltre, IFNβ, che è un bersaglio a valle di IRF7, è stato sovraregolato nelle cellule di mieloma insieme a IRF7 dopo l'induzione di PU.1. Infine, abbiamo valutato i livelli di espressione di mRNA di PU.1, IRF4 e IRF7 nelle cellule di mieloma primario di pazienti e abbiamo scoperto che PU.1 e IRF7 erano fortemente sottoregolati in contrasto con gli alti livelli di espressione di IRF4. Questi dati suggeriscono fortemente che l'apoptosi indotta da PU.1 nelle cellule di mieloma è associata alla downregulation di IRF4 e alla successiva upregulation di IRF7.
I JNK funzionano come chinasi attivanti CDK4 fosforilando CDK4 e p21.La ciclina D-CDK4/6 è la prima chinasi ciclina-dipendente (CDK) complessi da attivare da percorsi mitogeni/oncogeni. Hanno un ruolo centrale nella decisione di moltiplicazione cellulare e nella sua deregolazione nelle cellule tumorali. Abbiamo identificato la fosforilazione T172 di CDK4 piuttosto che l'accumulo di ciclina D come il passo distintamente regolato che determina l'attivazione di CDK4. sfida l'opinione che l'unica chinasi attivante CDK metazoica identificata, la ciclina H-CDK7-Mat1 (CAK), che è costitutivamente attiva, è responsabile dell'attivazione della fosforilazione di tutti i CDK del ciclo cellulare. da una prolina adiacente (P173), che non è presente in CDK6 e CDK1 / 2. Sebbene l'attività di CDK7 sia stata recentemente dimostrata necessaria per l'attivazione di CDK4, abbiamo proposto che le chinasi dirette dalla prolina potrebbero specificamente avviare l'attivazione n di CDK4. Qui, segnaliamo che JNK, ma non ERK1/2 o CAK, possono essere chinasi attivanti CDK4 dirette per i complessi ciclina D-CDK4 che sono inattivati dalla stabilizzazione mediata da p21. JNK ed ERK1/2 hanno anche fosforilato p21 a S130 e T57, il che potrebbe facilitare l'attivazione dipendente da CDK7 di CDK4 legato a p21, tuttavia, la mutazione di questi siti non ha compromesso la fosforilazione di CDK4 da parte di JNK. In due cellule tumorali selezionate, due diversi inibitori di JNK hanno inibito la fosforilazione e l'attivazione della ciclina D1-CDK4-p21 ma non l'attivazione della ciclina D3-CDK4 che è principalmente associata a p27. L'inibizione specifica da parte della genetica chimica nei MEF ha confermato il coinvolgimento di JNK2 nell'attivazione della ciclina D1-CDK4. Pertanto, le JNK potrebbero attivare le chinasi per la ciclina D1-CDK4 legata a p21, fosforilando indipendentemente sia CDK4 che p21.
Il fattore di trascrizione SPZ1 promuove la transizione epitelio-mesenchimale mediata da TWIST e l'oncogenesi nel cancro del fegato umano.La transizione epitelio-mesenchimale (EMT) è un importante processo nella progressione del cancro. Tuttavia, la sua presenza e il meccanismo di regolazione non sono completamente compresi. Proponiamo un percorso normativo in cui la cerniera 1 della leucina spermatogenica (SPZ1) promuove l'EMT attraverso la sua capacità di transattivazione nell'aumentare l'espressione di TWIST1. Abbiamo confrontato l'espressione di SPZ1 e TWIST1 in campioni di cellule di epatocarcinoma (HCC) e non HCC. L'espressione di SPZ1 ha mostrato un modello di espressione tumore-specifico e un'elevata correlazione con il tempo di sopravvivenza dei pazienti, le dimensioni del tumore, il numero del tumore e lo stadio di progressione. Inoltre, l'espressione forzata e il knockdown di SPZ1 nelle cellule di epatoma ha mostrato che SPZ1 era in grado di regolare la proliferazione cellulare, l'invasione e l'attività tumorigenica in modo TWIST1-dipendente in vitro e in vivo. Questi dati dimostrano che SPZ1, una molecola appena descritta, transattiva i promotori TWIST1 e che questo asse SPZ1-TWIST media la segnalazione EMT ed esercita effetti regolatori significativi sull'oncogenesi tumorale.
I canali Connexin-43 sono una via per scaricare il lattato dalle cellule di adenocarcinoma duttale pancreatico glicolitico.ioni. Allo stato stazionario, trasmissione giunzionale del lattato ( una base chimica) dal nucleo sferoide ha avuto un effetto alcalinizzante sul bordo, producendo in esso un ambiente favorevole alla crescita. I saggi sui metaboliti hanno dimostrato che l'atterramento di Cx43 ha aumentato la ritenzione di lattato citoplasmatico negli sferoidi Colo357 (diametro ~ 150 μm). Cellule MiaPaCa2, che sono Cx43 negativo in coltura monostrato, ha mostrato un marcato aumento dell'immunoreattività Cx43 nelle aree di invasione in modelli murini xenotrapianti ortotopici. Queste aree di tessuto erano associate ad acidosi extracellulare cronica (come indicato dal marker LAMP2 vicino/in corrispondenza del plasmalemma), che può spiegare il vantaggio di trasmissione su MCT in vivo. Proponiamo che i canali Cx43 siano importanti condotti per dissipare gli anioni lattato dalle cellule PDAC glicolitiche. Inoltre, l'ingresso del lattato nel le cellule riceventi meglio perfuse hanno un effetto alcalinizzante favorevole e forniscono il substrato per la fosforilazione ossidativa. Cx43 è quindi un nuovo bersaglio per influenzare la gestione dei metaboliti nei tumori giunzionali accoppiati.
HBEGF promuove la gliomagenesi nel contesto della perdita di Ink4a/Arf e Pten.Fattore di crescita simile al fattore di crescita epidermico legante l'eparina (EGF) (HBEGF) ) è un ligando per il recettore EGF (EGFR), uno dei recettori tirosin chinasi (RTK) più comunemente amplificati nel glioblastoma (GBM). Sebbene l'HBEGF sia espresso in un sottoinsieme di gliomi maligni, è sufficiente per l'inizio del glioma non è stato valutato. In questo studio, dimostriamo che l'HBEGF può avviare GBM nei topi nel contesto della perdita di Ink4a/Arf e Pten e che questi tumori sono simili al classico sottotipo GBM osservato nei pazienti. Gli astrociti isogenici di questi topi hanno mostrato attivazione non solo di Egfr ma anche dell'RTK Axl in risposta alla stimolazione dell'HBEGF. La delezione di Egfr o Axl ha diminuito le proprietà tumorigeniche delle cellule trasformate con HBEGF; tuttavia, solo l'EGFR è stato in grado di salvare il fenotipo nelle cellule prive di entrambi gli RTK indicando che Egfr è necessario per l'attivazione di Axl in questo contesto. Il silenziamento dell'HBEGF in vivo ha determinato la regressione del tumore e un aumento significativo della sopravvivenza, suggerendo che l'HBEGF potrebbe essere un bersaglio clinicamente rilevante.
Sox2 non è richiesto per la melanomagenesi, la crescita del melanoma e la metastasi del melanoma in vivo.la mutazione coopera con la perdita di Pten per indurre lo sviluppo del melanoma metastatico, noi studiato se Sox2 è richiesto durante il processo di melanomagenesi, crescita e metastasi del melanoma e nell'acquisizione di resistenza ai trattamenti con inibitori BRAF (BRAFi). Abbiamo scoperto che la delezione di Sox2 specificamente nei melanociti Pten null e che esprimono BRafV600E non ha impedito la formazione del tumore e non ha modificato la cinetica temporale dell'insorgenza del melanoma rispetto ai topi Sox2 wt. Inoltre, la crescita del tumore era simile tra i melanomi Sox2 wt e Sox2 deleti (del). Interrogando i database disponibili pubblicamente, non abbiamo trovato differenze statisticamente significative nei livelli di espressione di SOX2 tra nevi benigni e melanomi, e l'analisi su due coorti di pazienti con melanoma ha confermato che i livelli di Sox2 non cambiavano significativamente tra melanoma primario e metastatico S. Le linee cellulari di melanoma derivate da entrambi i genotipi Sox2 hanno mostrato una sensibilità simile al trattamento con vemurafenib e la stessa capacità di sviluppare resistenza a vemurafenib in colture a lungo termine. Lo sviluppo della resistenza a vemurafenib non dipendeva dall'espressione di SOX2 anche nelle linee cellulari di melanoma umano in vitro. I nostri risultati escludono una funzione oncogenica per Sox2 durante lo sviluppo del melanoma e non supportano un ruolo per questo fattore di trascrizione nell'acquisizione della resistenza ai trattamenti BRAFi.
circRNA_100290 svolge un ruolo nel cancro orale fungendo da spugna della famiglia miR-29.Gli RNA circolari (circRNA) rappresentano una classe di non RNA codificanti che sono ampiamente espressi nei mammiferi. Tuttavia, è in gran parte sconosciuto la funzione dei circRNA umani e i ruoli dei circRNA nei carcinomi a cellule squamose orali umani (OSCC). Qui abbiamo eseguito uno studio completo dei circRNA nell'OSCC umano utilizzando circRNA e mRNA microarrays e identificato molti circRNA che sono espressi in modo differenziale tra tessuto OSCC e tessuto accoppiato non canceroso. Abbiamo inoltre trovato un circRNA chiamato circRNA_100290 che fungeva da regolatore critico nello sviluppo dell'OSCC. Abbiamo scoperto che circRNA_100290 era sovraregolato e co-espresso con CDK6 nel tessuto OSCC Atterramento di circRNA_100290 ha diminuito l'espressione di CDK6 e ha inibito la proliferazione delle linee cellulari OSCC in vitro e in vivo Tramite saggi reporter luciferasi, è stato osservato che circRNA_100290 bin direttamente d ai membri della famiglia miR-29. Ulteriori analisi dei reporter EGFP/RFP hanno mostrato che CDK6 era il bersaglio diretto di miR-29b. Presi insieme, concludiamo che circRNA_100290 può funzionare come un RNA endogeno in competizione per regolare l'espressione di CDK6 attraverso la spugnatura dei membri della famiglia miR-29b. Nel loro insieme, indica che i circRNA possono esercitare funzioni regolatorie nell'OSCC e possono essere un potenziale bersaglio per la terapia dell'OSCC.
L'interferone è un induttore diretto STAT1-dipendente dell'espressione di BCL6 nelle cellule di leucemia mieloide cronica trattate con imatinib.CLL/linfoma 6 a cellule B ( BCL6) esercita effetti oncogenici in diverse neoplasie ematopoietiche umane tra cui la leucemia mieloide cronica (LMC), dove l'espressione di BCL6 si è dimostrata essenziale per la sopravvivenza delle cellule staminali della LMC e l'auto-rinnovamento durante il trattamento con imatinib mesilato (IM). La produzione di interferone γ (IFNγ) nei pazienti con LMC potrebbe avere un ruolo centrale nella risposta alla terapia con inibitori della tirosin-chinasi (TKI), abbiamo analizzato se l'IFNγ modula l'espressione di BCL6 nelle cellule di LMC. Il trattamento ha indotto una notevole sovraregolazione di BCL6 nelle linee di LMC e nelle cellule staminali primarie umane di LMC CD34+ Abbiamo dimostrato che durante il trattamento combinato, l'inibizione del trasduttore di segnale costitutivo e l'attivazione dell'attivatore della trascrizione (STAT) 5 da parte L'IM ha consentito il potenziamento specifico della sovraregolazione diretta, dipendente da STAT1, di BCL6 da parte dell'IFNγ nelle cellule CML. Utilizzando il test di formazione di colonie, abbiamo scoperto che l'IFNγ ha migliorato la capacità ex vivo di formare colonie o cluster di cellule staminali umane LMC in assenza o presenza di IM, rispettivamente. Inoltre, l'inibizione della funzione di repressore trascrizionale di BCL6 in presenza di IM e IFNγ ha quasi completamente bloccato la formazione di cluster di cellule staminali LMC umane. D'altra parte, utilizzando un piccolo knockdown di RNA interferente di BCL6, abbiamo dimostrato che in una linea di LMC trattata con IM l'effetto antiapoptotico dell'IFNγ era indipendente dalla sovraregolazione di BCL6. Abbiamo scoperto che l'IFNγ sovraregolava anche diversi membri antiapoptotici delle famiglie di geni BCL2 e BIRC nelle cellule LMC, inclusa l'isoforma lunga di MCL1, che si è rivelata essenziale per l'effetto antiapoptotico dell'IFNγ in una linea di LMC trattata con IM. I nostri risultati suggeriscono che la combinazione di TKI con inibitori BCL6 e MCL1 può potenzialmente portare alla completa eradicazione delle cellule staminali della CML.
La stearoil-CoA-desaturasi 1 regola la staminalità del cancro del polmone attraverso la stabilizzazione e la localizzazione nucleare di YAP/TAZ.Evidenze recenti suggeriscono che la stearoil-CoA-desaturasi 1 (SCD1), l'enzima coinvolto nella sintesi degli acidi grassi monoinsaturi, ha un ruolo in diversi tipi di cancro. Abbiamo precedentemente dimostrato che SCD1 è importante nella sopravvivenza e nella propagazione delle cellule staminali del cancro del polmone. In questo articolo, mostriamo per la prima volta, utilizzando colture cellulari primarie da adenocarcinoma polmonare umano, che gli effettori della via dell'ippopotamo, la proteina associata al Sì (YAP) e il co-attivatore trascrizionale con motivo di legame PDZ (TAZ), sono necessari per la generazione di colture tridimensionali del cancro del polmone e che SCD1 abbatte e l'inibizione farmacologica diminuiscono l'espressione, la localizzazione nucleare e l'attività trascrizionale di YAP e TAZ. La regolazione di YAP/TAZ da parte di SCD1 dipende almeno in parte dall'attività della via della -catenina, poiché la sottoregolazione di YAP/TAZ indotta dal blocco di SCD1 de può essere salvato con l'aggiunta del ligando esogeno wnt3a. Inoltre, l'attivazione SCD1 di YAP/TAZ nucleare richiede l'inattivazione del complesso di distruzione della -catenina. In linea con i risultati in vitro, l'analisi immunoistochimica dei campioni di adenocarcinoma polmonare ha mostrato che i livelli di espressione di SCD1 co-variano con quelli di -catenina e YAP/TAZ. L'estrazione di set di dati di espressione genica disponibili ha permesso di osservare che alti livelli di co-espressione di SCD1, β-catenina, YAP/TAZ e bersagli a valle hanno un forte valore prognostico negativo nell'adenocarcinoma polmonare. Infine, le analisi bioinformatiche dirette a identificare quali combinazioni di geni hanno avuto effetti sinergici sull'esito clinico nel cancro del polmone hanno mostrato che una scarsa sopravvivenza è associata a un'elevata co-espressione di SCD1, β-catenina e birc5 bersaglio a valle di YAP/TAZ. In sintesi, i nostri dati dimostrano per la prima volta il coinvolgimento di SCD1 nella regolazione della via dell'ippopotamo nel cancro del polmone e indicano il metabolismo degli acidi grassi come un regolatore chiave delle cellule staminali del cancro del polmone.
Impatto molecolare della segnalazione selettiva di NFKB1 e NFKB2 sul fenotipo DLBCL.Il linfoma diffuso a grandi cellule B (DLBCL) è stato classificato in due sottotipi molecolari che hanno un significato prognostico, vale a dire cellule B del centro germinale come (GCB) e cellule B attivate come (ABC). Anche se ABC-DLBCL è stato associato all'attivazione di NF-κB, le relazioni tra l'attivazione di specifici segnali NF-κB e il fenotipo DLBCL rimangono poco chiare. L'applicazione di nuovi classificatori di espressione genica ha identificato due nuove categorie DLBCL caratterizzate da segnalazione selettiva p100 (NF-κB2) e p105 (NF-κB1). È interessante notare che i nostri studi molecolari hanno mostrato che la segnalazione p105 è prevalentemente associata al sottotipo GCB e alle mutazioni dell'istone Al contrario, la maggior parte dei tumori con segnalazione p100 mostrava il fenotipo ABC e ospitava mutazioni associate all'ABC in geni come MYD88 e PIM1. suggerendo un nuovo ruolo per questa proteina come regolatore a monte di p100. La segnalazione di p100 è stata coinvolta durante l'attivazione delle cellule B normali, suggerendo il ruolo di p100\' nello sviluppo del fenotipo ABC. Inoltre, il silenziamento di p100 nelle cellule ABC-DLBCL ha determinato un fenotipo simile a GCB, con soppressione di Blimp, IRF4 e XBP1 e sovraregolazione di BCL6, mentre l'introduzione di p52 o p100 nelle cellule GC ha portato alla differenziazione verso un fenotipo simile a ABC. Insieme, questi risultati identificano ruoli specifici per la segnalazione p100 e p105 nella definizione dei sottotipi molecolari DLBCL e postulano la segnalazione MYD88/p100 come regolatore per l'attivazione delle cellule B.
Meccanismo di legame al DNA del fattore di trascrizione della via dell'ippopotamo TEAD4.I fattori di trascrizione della famiglia del dominio TEA (TEAD) sono regolatori chiave dello sviluppo, dell'omeostasi tissutale e progressione del cancro. TEAD4 agisce come un effettore critico a valle della via di segnalazione dell'ippopotamo conservata in modo evolutivo. La proteina oncogenica YAP ben studiata forma un complesso con TEAD4 per regolare la trascrizione genica; così fa il soppressore del tumore VGLL4. Sebbene sia noto che le proteine TEAD possono legano le regioni promotrici dei geni bersaglio attraverso il dominio TEA, il meccanismo specifico e dettagliato di riconoscimento del DNA da parte del dominio TEA rimane parzialmente compreso. Qui, riportiamo la struttura cristallina del dominio TEAD4 TEA in complesso con un elemento di DNA muscolo-CAT. La struttura ha rivelato ampie interazioni tra il dominio TEA e il duplex del DNA che coinvolgono sia i solchi maggiori che quelli minori dell'elica del DNA. L'elica di riconoscimento del DNA, elica α3, determina la specificità del TE Un dominio che si lega alla sequenza del DNA. L'analisi biochimica guidata dalla struttura ha identificato due principali siti di legame sull'interfaccia del complesso dominio TEA-DNA. La mutazione di TEAD4 in entrambi i siti riduce sostanzialmente la sua occupazione nella regione del promotore dei geni bersaglio e la transattivazione di TEAD4 indotta da YAP e la trascrizione del gene bersaglio in gran parte alterate, portando all'inibizione della crescita e alla formazione di colonie di cellule di cancro gastrico HGC-27. Nel complesso, il nostro lavoro fornisce una base strutturale per comprendere il meccanismo di regolazione della trascrizione genica mediata da TEAD.
Il mutante p53 sovraregola l'espressione dell'alfa-1 antitripsina e promuove l'invasione nel cancro del polmone.Mutazioni missenso nel gene oncosoppressore TP53 inattivano le sue proprietà antitumorali e dotare le cellule incipienti di proprietà oncogene appena acquisite che guidano l'invasione e la metastasi. Anche se l'effetto oncogenico del trascrittoma di p53 mutante è stato ampiamente riconosciuto, l'influenza globale di p53 mutante sul proteoma delle cellule tumorali resta da chiarire completamente. Qui, mostriamo che mutante p53 guida il rilascio di fattori extracellulari invasivi (il \'secretome\') che facilita l'invasione delle linee cellulari del cancro del polmone. Caratterizzazione proteomica del secretoma dalla linea cellulare di cancro del polmone umano non a piccole cellule H1299 inducibile da p53 mutante ha scoperto che il mutante p53 guida i suoi percorsi oncogeni attraverso la modulazione dell'espressione genica di numerosi bersagli che vengono successivamente secreti dalle cellule. Di questi geni, l'alfa-1 antitriplo sin (A1AT) è stato identificato come un effettore critico del mutante p53 che guida l'invasione in vitro e in vivo, insieme all'induzione dell'espressione dei marcatori di transizione epiteliale-mesenchimale. Il mutante p53 ha sovraregolato A1AT trascrizionalmente attraverso il coinvolgimento con il suo membro della famiglia p63. Il mezzo condizionato contenente A1AT secreto ha potenziato l'invasione cellulare, mentre un anticorpo che blocca l'A1AT ha attenuato la migrazione e l'invasione guidate da p53 mutante. È importante sottolineare che l'elevata espressione di A1AT è correlata con un aumento dello stadio del tumore, un'elevata colorazione di p53 e una sopravvivenza globale più breve nei pazienti con adenocarcinoma polmonare. Nel loro insieme, questi risultati suggeriscono che A1AT è un obiettivo indispensabile di p53 mutante con potenziale prognostico e terapeutico nei tumori che esprimono p53 mutante.
L'inibizione dell'attivazione della matriptasi mediata dalla cicloossigenasi-2 contribuisce alla soppressione della motilità e delle metastasi delle cellule del cancro alla prostata.) ha causato un aumento dell'attivazione della matriptasi e Invasione delle cellule PCa, mentre il silenziamento della COX-2 ha antagonizzato l'attivazione della matriptasi e l'invasione cellulare. Inoltre, l'inibizione dell'attivazione della matriptasi mediata da COX-2 da parte di Celebrex e sulindac solfuro ha soppresso l'invasione delle cellule PCa PC-3 indipendente dagli androgeni e sovraesprimente COX2, crescita tumorale e metastasi polmonari in un modello di xenotrapianto ortotopico. I nostri risultati indicano che la segnalazione di COX-2/matriptasi contribuisce all'invasione, alla crescita del tumore e alla metastasi delle cellule PCa con sovraespressione di COX-2 e androgeno-indipendenti.
Struttura del 40S-ABCE1 post-splitting complesso ribosoma riciclaggio e inizio della traduzione", L'essenziale ATP-binding protein cassetta ABCE1 divide 80S ribosomi in Subunità 60S e 40S dopo la terminazione canonica o processi di sorveglianza dell'mRNA basati sul controllo di qualità. Tuttavia, il meccanismo di scissione sottostante rimane enigmatico. Qui, presentiamo una struttura crio-EM del complesso post-scissione 40S-ABCE1 del lievito con una risoluzione di 3,9-Å. Rispetto allo stato pre-splitting, si osserva il riposizionamento di ABCE1 \ 's dominio del cluster ferro-zolfo, che ruota di 150 ° in una tasca di legame sul 40S subunità. Questo riposizionamento spiega un recente osservato attività anti-associazione di ABCE1. in particolare, il movimento implica una collisione con fattori a-portale, spiegando così la scissione meccanismo. la distruzione di interazioni chiave nel post-splitting compromette complessi omeostasi cellulare. Inoltre, la struttura di un complesso nativo post-splitting rivela ABCE1 per far parte del complesso di iniziazione 43S, suggerendo un coordinamento di terminazione, riciclaggio e iniziazione.
L'amplificazione MET e la transizione epitelio-mesenchimale esistono come meccanismi di resistenza paralleli nelle cellule NSCLC HCC827 resistenti a erlotinib, mutate EGFR.Anche se molti I pazienti con carcinoma polmonare mutato dal recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) inizialmente beneficiano dell'inibitore dell'EGFR erlotinib, tutti acquisiscono resistenza Finora, sono stati identificati diversi meccanismi implicati nella resistenza, ma l'esistenza di più meccanismi di resistenza in parallelo è stata solo scarsamente In questo studio, abbiamo studiato i meccanismi di resistenza paralleli acquisiti da HCC827, una linea cellulare di adenocarcinoma EGFR-mutato dipendente dall'attività di EGFR e sensibile a erlotinib. La linea cellulare è stata trattata con erlotinib aumentando gradualmente la concentrazione del farmaco e resistente a erlotinib (HCC827ER) create. Le cellule HCC827ER hanno rappresentato un fenotipo misto epiteliale e mesenchimale. Per chiarire potenziali meccanismi di resistenza paralleli, 14 subcloni resistenti abbiamo ristabilito mediante diluizione limitata. È interessante notare che tutti i subcloni HCC827ER hanno ospitato un'amplificazione MET (6/14) o sono stati sottoposti a EMT (8/14), meccanismi entrambi trovati in studi precedenti, ma non in co-occorrenza. Entrambi i sottocloni erano resistenti a erlotinib, ma solo i subcloni MET hanno risposto agli inibitori del MET crizotinib e capmatinib. I subcloni EMT, d'altra parte, avevano notevolmente aumentato l'espressione di FGFR1 e rispondevano all'inibitore di FGFR AZD4547, mentre i subcloni MET no. Il monitoraggio dell'espressione genica attraverso lo sviluppo di HCC827ER ha rivelato la sovraregolazione dell'espressione di FGFR1 come risposta precoce a erlotinib. Inoltre, l'espressione di FGFR1 è aumentata durante il trattamento a breve termine con erlotinib (48 h) identificando un ruolo fisiologico immediatamente dopo l'esposizione a erlotinib. L'elevata espressione di FGFR1 osservata nei subcloni EMT era stabile anche dopo cinque passaggi senza erlotinib. Qui mostriamo che meccanismi di resistenza paralleli compaiono durante lo sviluppo della resistenza a erlotinib nelle cellule NSCLC con mutazione di EGFR ed evidenziano un ruolo per i cambiamenti di espressione di FGFR1 come risposta precoce a erlotinib e come meccanismo di segnalazione di bypass.
Segnalazione Wnt nel carcinoma mammario triplo negativo.La segnalazione Wnt regola una varietà di processi cellulari, tra cui destino cellulare, differenziazione, proliferazione e pluripotenza delle cellule staminali La segnalazione aberrante di Wnt è un segno distintivo di molti tumori. Un sottotipo aggressivo di cancro al seno, noto come carcinoma mammario triplo negativo (TNBC), dimostra disregolazione nella segnalazione canonica e non canonica di Wnt. In questa recensione, riassumiamo i regolatori di canonica e segnalazione Wnt non canonica, nonché disfunzione della segnalazione Wnt che media la progressione del TNBC. Esaminiamo la complessa natura molecolare del TNBC e le terapie emergenti attualmente in fase di studio per il trattamento di questa malattia.
p53 mira a TSPAN8 per prevenire l'invasione nelle cellule di melanoma.Il melanoma cutaneo è un cancro molto mortale a causa della sua tendenza a metastatizzare. Nonostante il recente sviluppo di terapie mirate e immunitarie, la sopravvivenza del paziente rimane bassa. È quindi fondamentale migliorare la comprensione dei meccanismi molecolari alla base dell'invasione. Abbiamo precedentemente identificato la tetraspanina 8 (TSPAN8) come un importante modulatore dell'invasività del melanoma e molti dei suoi regolatori trascrizionali, che influenzano TSPAN8 espressione durante la progressione del melanoma verso uno stadio invasivo. Questo studio ha scoperto che il promotore TSPAN8 contiene siti di legame di consenso per il fattore di trascrizione p53. Abbiamo dimostrato che il silenziamento di p53 era sufficiente per attivare l'espressione di Tspan8 nelle cellule di melanoma non invasivo e che p53 agisce come un diretto repressore trascrizionale di TSPAN8 Abbiamo anche dimostrato che p53 modula l'invasione del matrigel nelle cellule di melanoma in modo TSPAN8-dipendente. , questo studio rivela p53 come un regolatore negativo dell'espressione di Tspan8. Poiché il gene TP53 è raramente mutato nel melanoma, è stato finora poco studiato, ma il suo ruolo nell'apoptosi e nella soppressione della crescita nel melanoma sta diventando sempre più chiaro. Lo studio evidenzia l'importanza di p53 come regolatore dell'invasione del melanoma e il concetto che la riattivazione di p53 potrebbe fornire una strategia per modulare non solo la capacità proliferativa ma anche invasiva nel trattamento del melanoma.
La regolazione pleiotropica della ciclina D1 da parte della nuova proteina legante il sesamminolo ANT2.L'espressione della ciclina D1 è sovraregolata in varie cellule tumorali da diversi meccanismi , come l'aumento dei livelli di mRNA, la promozione della traduzione da parte del bersaglio dei mammiferi della segnalazione del complesso rapamicina 1 (mTORC1) e la stabilizzazione della proteina. Mostriamo qui che il sesaminolo, un lignano del sesamo, riduce l'espressione della ciclina D1 con la diminuzione dei livelli di espressione dell'mRNA , inibendo la segnalazione di mTORC1 e promuovendo la degradazione proteasomica. Successivamente abbiamo generato perline FG immobilizzate con sesamminolo per identificare nuovamente le proteine leganti il sesamminolo. Di conseguenza, abbiamo scoperto che l'adenina nucleotide traslocasi 2 (ANT2), la proteina della membrana mitocondriale interna, si lega direttamente al sesamminolo Coerentemente con gli effetti del sesaminolo, la deplezione di ANT2 ha causato una riduzione della ciclina D1 con diminuzioni dei suoi livelli di mRNA, inibizione di mTORC1 e degradazione proteasomica della sua proteina, suggerendo che il sesamminolo regola negativamente la funzione di ANT2. Inoltre, abbiamo esaminato altri composti leganti l'ANT2 e abbiamo scoperto che il troglitazone, agonista del recettore γ attivato dal proliferatore, riduceva anche l'espressione della ciclina D1 in modo multiforme, analogo a quello del trattamento con sesamminolo e della deplezione di ANT2. Pertanto, l'approccio di biologia chimica utilizzando perline magnetiche FG impiegate nel presente studio ha rivelato che il sesamminolo si lega all'ANT2, che può sovraregolare pleiotropicamente l'espressione della ciclina D1 a livello di mRNA e a livello di proteine con l'attivazione di mTORC1 e la stabilizzazione delle proteine. Questi risultati suggeriscono il potenziale di ANT2 come bersaglio contro i tumori con sovraespressione di ciclina D1.
Metilazione dei geni bersaglio WNT AXIN2 e DKK1 come biomarcatori robusti per la previsione delle recidive nel cancro del colon in stadio II.: 3,73, 95% CI: 1,22- 11.48). I tumori del sottotipo CMS4 con metilazione bersaglio WNT hanno mostrato prognosi peggiore. La combinazione della metilazione del gene bersaglio WNT e del sottotipo CMS4 porta a un'AUC di 0,89 (0.791-0.982, P<0.0001) per la previsione di recidiva. In particolare, abbiamo osservato che la metilazione di DKK1 è alto nei tumori mutanti BRAF e CIMP (fenotipo metilatore dell'isola CpG)-positivi, mentre la metilazione di AXIN2 sembra essere associata a CMS4. La metilazione di AXIN2 e DKK1 è risultata essere marcatori robusti per la previsione di recidiva nei pazienti con MSS CC in stadio II. la convalida di questi risultati in modo randomizzato e prospettico potrebbe aprire la strada all'identificazione di pazienti con prognosi sfavorevole di CC in stadio II per AT.
La diversificazione proteica guidata da retroelementi abbonda in vasti lignaggi di batteri e Archaea., sono caratteristiche importanti di organismi genomicamente ridotti dalla radiazione phyla batterica candidata ( CPR) e phyla ancora incolti appartenenti al DPANN (Diapherotrites, Parvarchaeota, Aenigmarchaeota, Nanoarchaeota e Nanohaloarchaea) archaeal superphylum. Da genomi ricostruiti abbiamo definito lignaggi DGR batterici e archeali monofiletici che espandono il range DGR noto del 120% di trasferimento orizzontale di retroelementi. La diversificazione guidata da retroelementi ha inoltre dimostrato di essere attiva nelle attuali popolazioni CPR e DPANN, con un assortimento di bersagli proteici potenzialmente coinvolti nell'attaccamento, nella difesa e nella regolazione. Sulla base delle osservazioni dell'abbondanza, della funzione e della storia evolutiva del DGR, abbiamo scoprire che la diversificazione proteica mirata è un tratto pronunciato di CPR e DPANN phyla rispetto ad altri batteri e archaea l phyla. Questo meccanismo di diversificazione può fornire agli organismi CPR e DPANN uno strumento versatile che potrebbe essere utilizzato per l'adattamento a un'esistenza dinamica e dipendente dall'ospite.
I transitori dopaminergici sono sufficienti e necessari per l'acquisizione di associazioni basate sul modello.L'apprendimento associativo è guidato da errori di previsione. I transitori dopaminergici sono correlati a questi errori, che le attuali interpretazioni limitano a fornire segnali con una quantità scalare che riflette il valore delle ricompense future. Abbiamo testato se la dopamina potrebbe agire in modo più ampio per supportare l'apprendimento di un modello associativo dell'ambiente. Utilizzando il precondizionamento sensoriale, mostriamo che gli errori di previsione alla base dello stimolo-stimolo l'apprendimento può essere bloccato dal punto di vista comportamentale e ripristinato attivando optogeneticamente i neuroni della dopamina. Mostriamo inoltre che la soppressione dell'attivazione di questi neuroni durante la transizione impedisce il normale apprendimento stimolo-stimolo. Questi risultati stabiliscono che l'acquisizione di informazioni basate su modelli sulle transizioni tra eventi non gratificanti è guidato anche da errori di previsione e che, contrariamente al canone esistente, i transitori della dopamina sono sufficienti e necessarie per supportare questo tipo di apprendimento. I nostri risultati aprono nuove possibilità su come questi segnali biologici potrebbero supportare l'apprendimento associativo nel cervello dei mammiferi in questi e altri contesti.
Un meccanismo per la scissione dell'acqua e la produzione di ossigeno nella fotosintesi., che erano in quantità limitata rispetto agli oceani di acqua liquida. Tuttavia, è è probabile che l'acqua fosse utilizzata anche come fonte di idrogeno prima della comparsa di PSII, come si trova oggi negli organismi anaerobi procarioti che utilizzano il monossido di carbonio come fonte di energia per scindere l'acqua. L'enzima che catalizza questa reazione è il monossido di carbonio deidrogenasi (CODH). tra PSII e la forma contenente ferro e nichel di questo enzima (Fe-Ni CODH) suggeriscono un possibile meccanismo per la formazione del legame OO fotosintetico.
Il GLP-1 agisce sui circuiti di evitamento abenulari per controllare l'assunzione di nicotina.I fumatori di tabacco regolano la loro assunzione di nicotina per evitarne gli effetti nocivi, la cui sensibilità può influenzano la vulnerabilità alla dipendenza dal tabacco, ma i meccanismi di evitamento della nicotina sono poco conosciuti. Qui mostriamo che la nicotina attiva i neuroni del peptide-1 simile al glucagone (GLP-1) nel nucleo del tratto solitario (NTS). I farmaci antidiabetici sitagliptin ed exenatide, che inibiscono la degradazione del GLP-1 e stimolano i recettori GLP-1, rispettivamente, diminuiscono l'assunzione di nicotina nei topi. L'attivazione chemogenetica dei neuroni GLP-1 in NTS riduce similmente l'assunzione di nicotina. Al contrario, i topi knockout Glp1r consumano maggiori quantità di nicotina rispetto ai topi wild-type. Usando la stimolazione optogenetica, mostriamo che il GLP-1 eccita le proiezioni abenulari mediali (MHb) al nucleo interpeduncolare (IPN). L'attivazione dei recettori GLP-1 nel circuito MHb-IPN ha abolito la ricompensa della nicotina e diminuito assunzione di nicotina, mentre il loro abbattimento o blocco farmacologico ha aumentato l'assunzione. I neuroni GLP-1 possono quindi fungere da \'sensori di sazietà\' per la nicotina che stimolano i sistemi abenulari a promuovere l'evitamento della nicotina prima che si verifichino i suoi effetti avversi.
L'oncostatina M guida l'infiammazione intestinale e predice la risposta alla terapia neutralizzante il fattore di necrosi tumorale nei pazienti con malattia infiammatoria intestinale.Malattie infiammatorie intestinali (IBD), tra cui la malattia di Crohn (MC) e la colite ulcerosa (CU), sono complesse condizioni infiammatorie croniche del tratto gastrointestinale che sono guidate da vie perturbate delle citochine. Gli anticorpi anti-tumor necrosis factor-α (TNF) sono terapie fondamentali per l'IBD. Tuttavia , fino al 40% dei pazienti non risponde agli agenti anti-TNF, il che rende prioritaria l'identificazione di bersagli terapeutici alternativi. Qui mostriamo che, rispetto ai controlli sani, i tessuti intestinali infiammati di pazienti con IBD esprimono elevate quantità di citochina oncostatina M (OSM) e il suo recettore (OSMR), che sono strettamente correlati alla gravità della malattia istopatologica L'OSMR è espresso nelle cellule stromali intestinali non ematopoietiche e non epiteliali, che rispondono all'OSM mediante pr producendo varie molecole proinfiammatorie, tra cui l'interleuchina (IL)-6, il fattore di adesione dei leucociti ICAM1 e le chemochine che attraggono neutrofili, monociti e cellule T. In un modello animale di infiammazione intestinale resistente agli anti-TNF, la delezione genetica o il blocco farmacologico dell'OSM attenua significativamente la colite. Inoltre, secondo un'analisi di oltre 200 pazienti con IBD, comprese due coorti di studi clinici di fase 3 su infliximab e golimumab, un'elevata espressione di OSM pretrattamento è fortemente associata al fallimento della terapia anti-TNF. L'OSM è quindi un potenziale biomarcatore e bersaglio terapeutico per l'IBD e ha particolare rilevanza per i pazienti resistenti agli anti-TNF.
Rischio di nevi melanocitici e cancro della pelle non melanoma nei bambini dopo trapianto allogenico di cellule staminali ematopoietiche.Esiste un noto aumento del rischio di cancro della pelle negli adulti popolazione dopo trapianto di cellule staminali ematopoietiche (HSCT). Tuttavia, gli effetti dermatologici tardivi che i bambini possono sperimentare dopo il trapianto non sono stati ben descritti. L'obiettivo principale di questo studio era quello di caratterizzare i nevi e i tumori della pelle che colpiscono i bambini dopo il trapianto allogenico. Lo studio di coorte di 85 pazienti trapiantati pediatrici e 85 controlli abbinati per età, sesso e fototipo cutaneo è stato eseguito presso un unico istituto. Tutti i partecipanti sono stati sottoposti a un esame cutaneo completo. L'età mediana alla visita dello studio era di 13,8 anni nei pazienti trapiantati con tempo mediano post-trapianto di 3,6 anni. I pazienti trapiantati avevano significativamente più nevi rispetto ai pazienti di controllo (mediana (intervallo): 44 (0-150) vs 11 (0-94), P<0.0001). I pazienti trapiantati avevano anche significativamente più nevi >5 mm di diametro e nevi atipici rispetto ai controlli. I fattori associati all'aumento della conta dei nevi includevano l'indicazione maligna per l'HSCT, la chemioterapia pre-trapianto, l'esposizione al trauma cranico e il condizionamento mieloablativo. Un totale del 16,5% dei pazienti trapiantati ha sviluppato lesioni cancerose, precancerose e/o lentiggini. Il nostro studio suggerisce che i trapiantati pediatrici hanno un aumentato rischio di proliferazioni melanocitiche benigne e atipiche e di cancro della pelle non melanoma che può manifestarsi anche durante l'infanzia.
Leucemia mieloide acuta correlata alla terapia e sindrome mielodisplastica dopo trapianto di cellule ematopoietiche per linfoma.Leucemia mieloide acuta correlata alla terapia e sindrome mielodisplastica (t-LMA /MDS) rappresentano gravi effetti tardivi nei pazienti sottoposti a trapianto di cellule ematopoietiche (HCT) per linfoma. La scelta tra terapia ad alte dosi con HCT autologo e HCT allogenico con condizionamento a intensità ridotta rimane controversa nei pazienti con linfoma recidivante. Abbiamo analizzato retrospettivamente l'incidenza e fattori di rischio per lo sviluppo di t-AML/MDS in pazienti con linfoma trattati con HCT autologo o allogenico Sono stati considerati un totale di 13 810 pazienti con linfoma che hanno ricevuto HCT autologo (n=9963) o allogenico (n=3847) tra il 1985 e il 2012 A una sopravvivenza globale mediana (OS) di 52 e 46 mesi nei gruppi HCT autologo e allogenico, rispettivamente, i pazienti con linfoma che ricevono HCT autologo (1,38% a 3 anni dopo autolo gous HCT) aveva un rischio significativo di sviluppare t-AML/MDS rispetto all'HCT allogenico (0,37% a 3 anni dopo l'HCT allogenico, P<0.001). Fattori di rischio significativi per lo sviluppo di t-AML/MDS dopo HCT autologo e allogenico erano il rischio ad alto stadio di HCT (P=0.04) o tumori secondari (P<0.001) e la ricezione di cellule staminali del sangue cordonale (P\ =0.03) o radioterapia sul campo coinvolta (P=0.002), rispettivamente. Strategie che selezionano attentamente i pazienti con linfoma per l'HCT autologo, escludendo i pazienti con linfoma ad alto rischio all'HCT, possono consentire l'identificazione di singoli pazienti con linfoma a rischio particolarmente elevato di t-AML/MDS.
Predittori della sopravvivenza globale tra i pazienti trattati con sirolimus/tacrolimus vs metotrexato/tacrolimus per la prevenzione della GvHD.Sirolimus (SIR)/tacrolimus (TAC) è un'alternativa al metotrexato (MTX)/TAC. Tuttavia, la selezione razionale tra questi approcci di profilassi GvHD per ottimizzare la sopravvivenza dei singoli pazienti non è possibile sulla base delle prove attuali. Abbiamo confrontato SIR/TAC (n=293) con MTX/TAC (n\ =414). L'obiettivo primario era identificare predittori unici di sopravvivenza globale (OS). L'obiettivo secondario era confrontare GvHD acuta e cronica, recidiva, mortalità non recidivante, microangiopatia trombotica (TMA), malattia veno-occlusiva epatica (VOD/SOS). ) e danno renale acuto. La GvHD acuta di grado II-IV al giorno 100 era significativamente ridotta nel gruppo SIR/TAC vs MTX/TAC (63 vs 73%, P=0.02). Un'interazione tra i gruppi di profilassi GvHD e l'indice di comorbilità ( trapianto di cellule ematopoietiche (HCT)-CI) ha avuto un impatto significativo sull'OS h HCT-CI⩾4 ha avuto una OS significativamente peggiore con MTX/TAC (HR 1,86, 95% CI 1,14-3,04, P=0,01) mentre nessun effetto è stato osservato per SIR/TAC (HR 0,78, 95% CI 0,48- 1.26, P=0.31). Altri endpoint non differivano significativamente tra i gruppi, tranne che TMA e VOD/SOS erano aumentati nel gruppo SIR/TAC, ma non è stata osservata una morte eccessiva per queste complicanze. Concludiamo, l'approccio di profilassi GvHD di SIR/TAC è associato a GvHD acuta di grado II-IV ridotta, profilo di tossicità paragonabile a MTX/TAC e OS migliorata tra i pazienti con HCT-CI⩾4.
Pazienti con mieloma multiplo in risposta completa a lungo termine dopo trapianto di cellule staminali autologhe esprimono una particolare firma immunitaria con potenziali implicazioni prognostiche.cellule T di memoria effettrici era associato con l'LTCR. Le cellule T regolatorie e le cellule NK erano simili in entrambi i gruppi, ma nei pazienti è stata riscontrata una particolare ridistribuzione dei recettori inibitori e attivanti nelle cellule NK. Per quanto riguarda le cellule B, un aumento delle cellule naïve e un corrispondente è stata osservata una riduzione delle cellule marginali di memoria a zona marginale e a commutazione di classe. I valori di HLC erano normali. I nostri risultati suggeriscono che i pazienti LTCR-MM esprimono una particolare firma immunitaria, che probabilmente riflette una ricostituzione immunitaria di \' esercitare una sorveglianza immunologica antitumorale competente insieme a un recupero dell'immunità umorale.
I linfociti T predicono il fallimento del trapianto dopo trapianto allogenico di midollo osseo o di sangue cordonale.il numero di linfociti/numero totale di cellule nucleate è stato definito come il rapporto Mac e CD8 rapporto, rispettivamente. Entrambi i gruppi DE e GF avevano rapporti Mac significativamente più alti al giorno 14 rispetto al gruppo normale (P<0.0001), ma non è stata osservata alcuna differenza significativa tra i gruppi DE e GF (P=1.000). Il rapporto CD8 al giorno 14 era significativamente più alto nel GF rispetto al gruppo normale (P=0.005), mentre i rapporti CD8 dei gruppi DE e normale erano simili (P=0.07). Un rapporto Mac elevato al giorno 14 era associato a un rischio di DE o successivo GF. I pazienti con un aumento del rapporto CD8 al giorno 14 avevano un ulteriore rischio di GF. Il rapporto Mac e il rapporto CD8 sembrano essere adatti per prevedere lo stato di attecchimento.
L'intensità della dose mieloablativa è necessaria nel trapianto allogenico di cellule ematopoietiche per i linfomi?L'avvento della nuova immunoterapia e degli inibitori della tirosin-chinasi ha inaugurato una nuova era nel trattamento dei linfomi di Hodgkin e non-Hodgkin. Il trapianto allogenico di cellule ematopoietiche rimane, tuttavia, una componente vitale nella gestione e nella potenziale cura dei linfomi, specialmente nel contesto recidivante. Considerando l'eterogeneità biologica e clinica dei vari sottotipi di linfomi, l'intensità ottimale dei regimi di condizionamento rimane controverso. I regimi di condizionamento a intensità ridotta hanno ampliato l'applicabilità della procedura ai pazienti più anziani e fragili. Studi osservazionali suggeriscono che sebbene l'allotrapianto a intensità ridotta sia associato a un rischio più elevato di recidiva, la sopravvivenza globale è paragonabile e in alcuni casi anche migliore, rispetto a osservati con regimi mieloablativi Qui, esaminiamo i dati pubblicati disponibili p inerente al trapianto allogenico di cellule ematopoietiche utilizzando intensità ridotta o condizionamento mieloablativo per varie istologie di linfoma. A causa della mancanza di studi prospettici randomizzati, le raccomandazioni si basano principalmente su studi di registro e di singoli istituti. Particolare enfasi deve essere data all'attuazione di strategie per prevenire le ricadute quando si utilizzano regimi a intensità ridotta. L'identificazione di particolari pazienti che possono trarre beneficio dai regimi mieloablativi nei linfomi resta da definire meglio.
ERCC1-XPF collabora con CTCF e cohesin per facilitare il silenziamento evolutivo dei geni impressi.Difetti congeniti nella riparazione del DNA sono associati a complessi disturbi dello sviluppo i cui I meccanismi causali sono poco compresi. Utilizzando un approccio di biotinilazione in vivo nei topi, mostriamo che il complesso endonucleasi ERCC1-XPF struttura-specifica di riparazione per escissione nucleotidica (NER) interagisce con la proteina legante l'isolante CTCF, le subunità di coesione SMC1A e SMC3 e con MBD2; i fattori co-localizzano con ATRX ai promotori e alle regioni di controllo (ICR) dei geni imprintati durante lo sviluppo epatico postnatale La perdita di Ercc1 o l'esposizione a MMC innesca la localizzazione di CTCF in eterocromatina, la dissociazione del complesso CTCF-coesina e ATRX da promotori e ICR, segni di istoni alterati e l'espressione di sviluppo aberrante dei geni impressi senza alterare la metilazione del DNA. Proponiamo che ERCC1-XPF cooperi con CTCF un d cohesin per facilitare il silenziamento evolutivo dei geni impressi e che il danno persistente al DNA innesca cambiamenti della cromatina che influenzano i programmi di espressione genica associati ai disturbi NER.
MnSOD mediata dai vettori HSV nel grigio periacqueduttale sopprime l'astinenza da morfina nei ratti.La morfina sembra essere il metabolita più attivo dell'eroina; pertanto, il gli effetti della morfina sono importanti per comprendere le ramificazioni dell'abuso di eroina. La dipendenza fisica da oppiacei (risposta all'astinenza) può avere effetti molto duraturi sulla motivazione alla ricompensa, inclusa l'incubazione di comportamenti di ricerca di droga indotti da stimoli. Tuttavia, i meccanismi esatti dell'astinenza da morfina (MW) non sono ancora chiari e il suo trattamento rimane sfuggente. Il grigio periacqueduttale (PAG) è uno dei siti importanti nella patogenesi del MW. Qui, abbiamo usato vettori ricombinanti del virus dell'herpes simplex (HSV) che codificano per la sod2 gene che esprime manganese superossido dismutasi (MnSOD) per valutare il suo potenziale terapeutico in MW. La microiniezione di vettori HSV che esprimono MnSOD nel PAG ha ridotto la sindrome MW. I vettori MnSOD hanno soppresso il supero mitocondriale sovraregolato xide e marcatori di stress del reticolo endoplasmatico (proteina 78 correlata al glucosio (GRP78) e fattore di trascrizione 6 alfa attivante (ATF6α)) nel PAG indotto da MW. L'immunocolorazione ha mostrato che il superossido mitocondriale, GRP78 e ATF6α erano colocalizzati con nuclei neuronali (un marcatore neuronale specifico), suggerendo che si trovano nei neuroni del PAG. Questi risultati suggeriscono che la sovraespressione di MnSOD da parte dei vettori HSV può alleviare la dipendenza da oppiacei. Questo studio può fornire un nuovo approccio terapeutico alla risposta fisica all'astinenza dalla morfina.
L'analisi globale dei cluster di geni biosintetici rivela un vasto potenziale di produzione di metaboliti secondari nelle specie Penicillium.I funghi filamentosi producono un'ampia gamma di composti bioattivi con importanti applicazioni, come le penicilline antibiotiche e le statine ipocolesterolemizzanti. Tuttavia, è stata prestata meno attenzione ai metaboliti secondari fungini rispetto a quelli dei batteri. In questo studio, abbiamo sequenziato i genomi di 9 specie di Penicillium e, insieme a 15 genomi pubblicati, abbiamo ha studiato il metabolismo secondario del Penicillium e ha identificato un immenso potenziale non sfruttato per la produzione di metaboliti secondari da parte di questo genere. Un totale di 1.317 cluster di geni biosintetici putativi (BGC) sono stati identificati e i BGC basati sulla polichetide sintasi e sul peptide non ribosomiale sintetasi sono stati raggruppati in geni famiglie di cluster e mappati su percorsi noti. Il raggruppamento di BGC ci ha permesso di studiare la traiettoria evolutiva del percorso metodi basati sulle sintasi dell'acido 6-metilsalicilico (6-MSA). Infine, abbiamo incrociato i percorsi previsti con i dati pubblicati sulla produzione di metaboliti secondari e convalidato sperimentalmente la produzione di yanutoni antibiotici nella Penicillia e identificato un composto precedentemente non descritto dal percorso degli yanutoni. Questo studio è la prima analisi a livello di genere della diversità genomica della Penicillia e mette in evidenza il potenziale di queste specie come fonte di nuovi antibiotici e altri prodotti farmaceutici.
Rassegna di prove controllate randomizzate di massaggio nei neonati pretermine.La nascita pretermine colpisce circa il 10% dei bambini nati negli Stati Uniti. La massoterapia è in corso utilizzato in alcune unità di terapia intensiva neonatale per i suoi potenziali effetti benefici sui neonati prematuri. Questo articolo esamina studi randomizzati controllati pubblicati sugli effetti del massaggio nei neonati prematuri. La maggior parte degli studi che valutano l'effetto del massaggio sull'aumento di peso nei neonati prematuri suggeriscono un effetto positivo su aumento di peso. L'aumento del tono vagale è stato segnalato nei neonati che ricevono il massaggio ed è stato suggerito come un possibile meccanismo per migliorare l'aumento di peso. Sono necessari ulteriori studi sui meccanismi alla base degli effetti della massoterapia sull'aumento di peso nei neonati prematuri. Mentre alcuni studi suggeriscono miglioramenti nei punteggi di sviluppo, diminuzione del comportamento di stress, effetti positivi sul sistema immunitario, miglioramento della tolleranza al dolore e dimissione anticipata dall'ospedale, il nu Il numero di tali studi è limitato e sono necessarie ulteriori prove. Sono necessari ulteriori studi, inclusi studi randomizzati controllati, sugli effetti del massaggio nei neonati prematuri.
Una variante cinese del ceppo del virus della malattia di Marek con divergenza tra virulenza e resistenza ai vaccini.Il virus della malattia di Marek (MD) (MDV) ha si è evoluto continuamente, portando a un crescente fallimento della vaccinazione. Qui, il ceppo di campo MDV BS/15 è stato isolato da un gregge di polli cinesi gravemente ammalato precedentemente vaccinato con CVI988. Per esplorare le cause del fallimento della vaccinazione, i polli senza agenti patogeni specifici (SPF) sono stati vaccinati con CVI988 o 814 e i controlli non vaccinati sono stati stimolati con BS/15 o con il ceppo di riferimento Md5. Entrambi i ceppi hanno indotto lesioni MD in polli non vaccinati con tassi di mortalità simili rispettivamente dell'85,7% e dell'80,0% durante il periodo sperimentale. Tuttavia, i polli non vaccinati hanno inoculato con BS/15 hanno mostrato un tasso di sviluppo del tumore più alto (64,3% vs. 40,0%), ma sopravvivenza prolungata e difetti immunitari diminuiti rispetto alle controparti con Md5 sfidati Questi risultati suggeriscono che BS/15 e Md5 mostrano una virulenza simile ma manifesta con caratteristiche patogene differenti. Inoltre, gli indici protettivi di CVI988 e 814 erano rispettivamente 33,3 e 66,7 per BS/15 e 92,9 e 100 per Md5, indicando che nessuno dei due vaccini poteva fornire una protezione efficace contro BS/15. Presi insieme, questi dati suggeriscono che il fallimento della vaccinazione contro la MD è probabilmente dovuto all'esistenza di ceppi varianti di MDV con virulenza nota e resistenza al vaccino inaspettata. I nostri risultati dovrebbero essere utili per comprendere la patogenicità e l'evoluzione dei ceppi di MDV prevalenti in Cina.
Interventi mente-corpo per la malattia infiammatoria intestinale pediatrica.La malattia infiammatoria intestinale pediatrica è una malattia autoimmune che causa infiammazione cronica della mucosa gastrointestinale. Esiste prove emergenti che la connessione cervello-intestino colpisce i pazienti con malattia infiammatoria intestinale (IBD) più di quanto si pensasse in precedenza, come dimostrano i disturbi dell'umore in comorbilità, i sintomi dell'intestino irritabile in concomitanza con l'IBD quiescente e il potenziale dei fattori di stress psicosociali per innescare riacutizzazioni dell'IBD. interventi sul corpo come la psicoterapia, il rilassamento, la consapevolezza, il biofeedback, lo yoga e l'ipnosi clinica offrono un'aggiunta al trattamento medico standard per l'IBD Esamineremo l'attuale base di prove per questi interventi mente-corpo nel trattamento dell'IBD pediatrica, illustreremo un caso studiare e offrire suggerimenti per ricerche future in questo promettente campo.
Approfondimenti sui biofilm di Klebsiella pneumoniae assemblati su diverse superfici utilizzando approcci fenotipici e genotipici.isolati che crescono su polistirene e silicone. Abbiamo anche applicato il sequenziamento dell'intero genoma (WGS) per cercare indizi genetici alla base delle differenze fenotipiche del biofilm. Abbiamo trovato importanti differenze nel contenuto di sostanze polimeriche extracellulari (EPS) tra i tre ceppi, che sono state ulteriormente confermate da un'analisi approfondita della composizione dell'EPS. L'analisi WGS ha rivelato un'elevata somiglianza nucleotidica all'interno del core-genoma, ma differenze rilevanti nel genoma accessorio che possono spiegare le differenze fenotipiche rilevate del biofilm, come i geni già associati alla formazione di biofilm in altri batteri patogeni (ad esempio, geni che codificano emogglutinine ed emolisine). Questi dati rafforzano che il gli sforzi di ricerca per sconfiggere i biofilm batterici dovrebbero tenere conto del fatto che la loro dinamica può dipendere dall'associazione dei dispositivi medici materiali lavorati.
Le diete ricche di grassi influiscono in modo specifico sul trascrittoma renale e programmano l'obesità, le lesioni renali e l'ipertensione nella prole.= 5-7/ gruppo): ND/ND, ND/HF, HF/ND e HF/HF La dieta HF post-svezzamento ha aumentato il peso corporeo di animali ND/HF e HF/HF da tre a sei mesi solo nei maschi. la dieta ha aumentato la pressione sanguigna sistolica nella prole maschile e femminile, indipendentemente dal fatto che siano stati esposti o meno allo scompenso cardiaco materno. I figli maschi affetti da scompenso cardiaco hanno mostrato gradi maggiori di lesioni glomerulari e tubulari rispetto al gruppo ND/ND. I nostri dati NGS hanno mostrato che la La dieta HF ha alterato significativamente il trascrittoma renale con la prole femminile più sensibile all'HF. L'ipertensione e il danno renale indotti dalla dieta HF sono associati allo stress ossidativo, all'attivazione del sistema renina-angiotensina e ai trasportatori di sodio disregolati e all'orologio circadiano. aggrava in modo specifico lo sviluppo di obesità, danni ai reni y, ma non l'ipertensione programmata dall'assunzione materna di SC. Una migliore comprensione dei meccanismi dipendenti dal sesso che sono alla base della programmazione renale indotta da HF aiuterà a sviluppare un nuovo intervento dietetico personalizzato per prevenire l'obesità e i disturbi correlati.
Sus scrofa miR-204 e miR-4331 regolano negativamente la replicazione del virus dell'influenza A suina H1N1/2009 mirando rispettivamente ad HA e NS virali.( ssc-, swine) miRNA mirati all'RNA genomico di SIV-H1N1/2009 da parte di RegRNA 2.0 e identificato ssc-miR-204 e ssc-miR-4331 per colpire HA e NS virali rispettivamente attraverso saggi reporter dual-luciferasi. (mRNA) i livelli di HA e NS virali sono stati significativamente soppressi quando le cellule della trachea di suino neonatale (NPTr) hanno rispettivamente sovraespresso ssc-miR-204 e ssc-miR-4331 e sono state infettate da SIV-H1N1/2009, mentre l'effetto di soppressione potrebbe essere ripristinato quando rispettivamente diminuendo ssc-miR-204 e ssc-miR-4331 endogeno con inibitori. effetto sulla replicazione di SIV-H1N1/2009 L'effetto antivirale era sequenza-specifico di SIV-H1N1/2009, per i siti bersaglio in HA e NS del virus dell'influenza A H5N1 o H9N2 non sono stati conservati. Inoltre, l'infezione da SIV-H1N1/2009 ha invertito la regolazione dell'espressione di ssc-miR-204 e ssc-miR-4331, che potrebbe facilitare la replicazione del virus nell'ospite. In sintesi, questo lavoro ci fornirà alcuni importanti indizi per controllare la prevalenza di SIV-H1N1/2009 nelle popolazioni di suini.
Collegamenti tra lo stato diagnostico del disturbo dello spettro autistico e la qualità della vita familiare.La qualità della vita è spesso relativamente ridotta nelle famiglie di bambini con bisogni aggiuntivi, e questo può essere particolarmente il caso in cui bisogni aggiuntivi sono accompagnati da un disturbo dello spettro autistico (ASD). Qui esploriamo gli effetti dello stato diagnostico in particolare, confrontando le famiglie con bambini con diagnosi di ASD con altri che a) hanno bisogni aggiuntivi ma non segni di ASD; e b) hanno bisogni e segni aggiuntivi di ASD ma nessuna diagnosi. Le madri (n = 76) di bambini con bisogni aggiuntivi hanno compilato questionari standardizzati sulla qualità della vita, lo stress, la fornitura di servizi, il comportamento del bambino e la presenza e la gravità dei tratti ASD Inoltre, un gruppo di madri di giovani a sviluppo tipico (n = 17) ha compilato questionari standardizzati sulla qualità della vita individuale e familiare e sul comportamento del figlio o della figlia. i giovani in via di sviluppo avevano punteggi di qualità della vita individuale e familiare significativamente più alti rispetto a ciascuno degli altri tre gruppi. L'aumento della gravità dell'ASD era associato a un aumento dello stress materno, che a sua volta era associato a una diminuzione della qualità della vita familiare e materna. Il gruppo che ha riportato la qualità di vita più bassa e lo stress più elevato erano le madri di individui con segni di ASD ma senza diagnosi. Questo modello non sembrava essere spiegato dalla mancanza di accesso ai servizi, o dai tassi di disabilità intellettiva o dal comportamento problematico in questo sottogruppo. La scoperta che la scarsa qualità della vita e lo stress elevato erano più evidenti nel sottogruppo di madri con bambini che avevano segni di ASD ma non avevano una diagnosi di ASD suggerisce che un argomento interessante per ulteriori indagini è se ricevere una diagnosi stessa può influenzare positivamente la qualità della vita e i livelli di stress materno.
Errori congeniti del metabolismo del fruttosio. Cosa possiamo imparare da loro?Il fruttosio è uno dei principali agenti dolcificanti della dieta umana e la sua ingestione è aumento a livello globale. Lo zucchero alimentare ha effetti particolari su coloro la cui capacità di metabolizzare il fruttosio è limitata. Se l'intolleranza ai carboidrati è un riscontro frequente nei bambini, gli errori congeniti del metabolismo dei carboidrati sono condizioni rare. Sono noti tre errori congeniti nella via del metabolismo del fruttosio; (1) fruttosuria essenziale o benigna dovuta a deficit di fruttochinasi, (2) intolleranza ereditaria al fruttosio e (3) deficit di fruttosio-1,6-bisfosfatasi In questa recensione l'attenzione è posta sulla descrizione dei sintomi clinici e delle anomalie biochimiche in i tre errori congeniti del metabolismo. Vengono discussi anche i potenziali effetti tossici del fruttosio negli esseri umani sani. Gli studi condotti in pazienti con errori congeniti del metabolismo del fruttosio hanno aiutato a comprendere il metabolismo del fruttosio e la sua potenziale tossicità nell'uomo sano. L'influenza del fruttosio sulla via glicolitica e sul catabolismo delle purine è causa di ipoglicemia, acidosi lattica e iperuricemia. La scoperta che la generazione di acido urico mediata dal fruttosio può avere un ruolo causale nel diabete e nell'obesità ha fornito nuove conoscenze sulla patogenesi di queste frequenti malattie.
Come nominare e classificare il tuo fago: una guida informale.Con questa guida informale, cerchiamo di assistere sia i ricercatori dei fagi nuovi che quelli esperti attraverso due tappe importanti che la scoperta di follow fago,. che è, la denominazione e la classificazione Fornire un nome appropriato per un batteriofago non è così banale come sembra, e gli effetti potrebbero essere di lunga durata nei database e nei nomi ufficiali taxon phage classificazione è la responsabilità. del Bacterial and Archaeal Viruses Subcommittee (BAVS) dell'International Committee on the Taxonomy of Viruses (ICTV). Mentre il BAVS mira a fornire un approccio olistico alla tassonomia dei fagi, per i singoli ricercatori che hanno isolato e sequenziato un nuovo fago, questo può essere un po' travolgente. Ora stiamo fornendo a questi ricercatori una guida informale alla denominazione e alla classificazione dei fagi, adottando un approccio "dal basso verso l'alto" dal livello di isolamento dei fagi.
Un metodo fluorescente privo di esonucleasi I-based che utilizza sonde a forcina per il rilevamento rapido di microRNA.I microRNA (miRNA) agiscono come biomarcatori per il diagnosi di una varietà di tumori. Poiché i metodi attualmente utilizzati per il rilevamento dei miRNA hanno dei limiti, sono necessari metodi semplici, sensibili ed economici per il rilevamento dei miRNA. Questo lavoro dimostra un metodo analitico facile, privo di quencher e basato sulla fluorescenza per il rilevamento conveniente e sensibile del miRNA utilizzando una sonda a forcina (HP) etichettata con super 2-aminopurina (2-AP) e l'attività dell'esonucleasi I. In particolare, la fluorescenza di 2-AP è fortemente estinta quando è incorporata nel DNA. In presenza di un miRNA bersaglio, HP raggiunge una conformazione aperta ibridandosi con il miRNA bersaglio per formare una struttura a doppio filamento con un 3\'-terminale sporgente. Successivamente, la digestione del 3\'-terminale sporgente è innescata da esonucleasi I, durante la quale 2-AP è r liberato in soluzione dal DNA, aumentando così la fluorescenza. Questo metodo è altamente sensibile, con un limite di rilevamento di 0,5 nM-10 volte inferiore a un metodo di fluorescenza senza quencher precedentemente riportato. Inoltre, questo metodo ha potenziali applicazioni nella diagnosi clinica e nella ricerca biomedica.
Analisi degli effetti antitumorali dell'estratto di Cincau (Premna oblongifolia Merr) e di altri tipi di fibre non digeribili utilizzando surnatanti di fermentazione fecale e cellule Caco-2 come modello di the Human Colon.Merr) è una pianta alimentare indonesiana con un alto contenuto di fibre alimentari. La ricerca ha dimostrato che le miscele di fibre alimentari possono essere più vantaggiose per la prevenzione del cancro del colon-retto rispetto a un singolo tipo di fibra alimentare. questo studio era di indagare gli effetti dell'estratto di cincau verde sulla produzione di acidi grassi a catena corta (SCFA) in colture batch anaerobiche inoculate con fanghi fecali umani e di confrontarli con i risultati ottenuti utilizzando diversi tipi di fibre alimentari (pectina, inulina e cellulosa), singolarmente e in combinazione. Inoltre, i surnatanti di fermentazione (FS) sono stati valutati nelle cellule Caco-2 per il loro effetto sulla vitalità cellulare, differenziazione e apoptosi. Cincau ha aumentato la concentrazione totale di SCFA aumentando acetato e propionato e, ma non la concentrazione di butirrato. Gli FS da tutte le fonti di fibre alimentari, incluso il cincau, hanno ridotto la vitalità delle cellule Caco-2. Tuttavia, gli effetti di tutte le FS sulla vitalità cellulare, sulla differenziazione cellulare e sull'apoptosi non erano semplicemente spiegabili dal loro contenuto di butirrato. In conclusione, i prodotti della fermentazione degli estratti di cincau hanno indotto la morte cellulare, ma è necessario ulteriore lavoro per comprendere il meccanismo d'azione. Questo studio dimostra per la prima volta che questa fonte tradizionale indonesiana di fibra alimentare può essere protettiva contro il cancro del colon-retto.
Identificazione e caratterizzazione dell'interazione tra la proteina X del virus dell'epatite B e Smc5/6.La proteina dell'epatite BX (HBx) svolge un ruolo essenziale nell'epatite B virus (HBV), ma la funzione di HBx è stata elusiva fino a poco tempo. È stato recentemente dimostrato che la trascrizione dal genoma dell'HBV (DNA circolare a chiusura covalente, cccDNA) è inibita dal mantenimento strutturale del complesso del cromosoma 5/6 ( Smc5/6), e che una funzione chiave di HBx è reindirizzare la proteina legante il danno al DNA 1 (DDB1) E3 ubiquitina ligasi per indirizzare questo complesso per la degradazione. In tal modo, HBx allevia la repressione trascrizionale da parte di Smc5/6 e stimola l'HBV espressione genica. In questa recensione, discutiamo in dettaglio come l'interazione tra HBx e Smc5/6 è stata identificata e caratterizzata. Discutiamo anche ciò che è noto per quanto riguarda la repressione della trascrizione di cccDNA da Smc5/6, i tempi di espressione di HBx, e il ruolo potenziale di HBx nella promozione dell'epatoce carcinoma illare (HCC).
La prevalenza dell'ipertensione accompagnata da alta omocisteina e i suoi fattori di rischio in una popolazione rurale: uno studio trasversale dalla Cina nordorientale.Studi precedenti trovati che l'ipertensione e l'alta omocisteina (HHcy) hanno mostrato un effetto sinergico sul rischio di malattie cardiovascolari. Questo studio mirava a indagare la prevalenza dell'ipertensione accompagnata da HHcy e dai suoi fattori di rischio nelle aree rurali del nord-est della Cina. Questo studio è stato condotto utilizzando uno studio stratificato metodo di campionamento casuale a grappolo e comprendeva 6529 soggetti con dati completi. Le caratteristiche demografiche sono state ottenute da un questionario. Sono stati misurati la pressione sanguigna e gli indici antropometrici e sono stati analizzati gli indici sierici. L'ipertensione accompagnata da HHcy è stata definita come ipertensione più HHcy [omocisteina (Hcy) > 10 µmol/L]. La concentrazione media di Hcy era di 17,29 µmol/L nella popolazione generale. La prevalenza di ipertensione accompagnata da HHcy era così alta gh che ha raggiunto il 45,1% della nostra popolazione di studio e rappresentava l'86,8% del totale dei partecipanti con ipertensione. L'analisi di regressione logistica multipla ha indicato che i fattori di rischio modificabili dell'ipertensione accompagnata da HHcy includevano obesità, diabete, dislipidemia e attività fisiche inattive. Abbiamo scoperto che il livello medio di Hcy e la prevalenza di HHcy e ipertensione accompagnata da HHcy erano molto alti tra la popolazione rurale della Cina nord-orientale. L'obesità, il diabete, la dislipidemia e le attività fisiche inattive erano fattori di rischio modificabili dell'ipertensione accompagnata da HHcy.
Un circuito integrato di lettura riconfigurabile per sistemi multisensori basati su display eterogenei.Questo documento presenta un'interfaccia multisensore riconfigurabile e il relativo circuito integrato di lettura (ROIC) per sistemi multisensore basati su display, che costruiscono funzioni multisensore utilizzando pannelli touch screen. Oltre al rilevamento tattile intrinseco, sono incorporate interfacce sensoriali fisiologiche e ambientali. La funzione riconfigurabile viene efficacemente implementata proponendo due basi topologie di lettura di circuiti basati su amplificatori e oscillatori. Per la progettazione immune al rumore contro vari rumori da operazioni intrinseche del tocco umano, viene proposto uno schema di correzione degli errori a campionamento alternativo e integrato all'interno del ROIC, ottenendo una risoluzione a 12 bit di registro di approssimazione successiva (SAR) di conversione analogico-digitale senza ulteriori calibrazioni Un prototipo ROIC che include tutte le funzioni proposte e convertitore di dati s è stato fabbricato in un processo di semiconduttore di ossido di metallo complementare (CMOS) da 0,18 μm e la sua fattibilità è stata verificata sperimentalmente per supportare molteplici funzioni di rilevamento eterogenee di tatto, elettrocardiogramma, impedenza corporea e sensori ambientali.
Polimorfismo del gene del recettore della leptina e rischio di malattie cardiovascolari: revisione sistemica e meta-analisi.Pochi studi hanno valutato l'associazione tra il recettore della leptina ( LEPR) polimorfismo del gene e rischio di malattie cardiovascolari (CVD). Dei pochi studi epidemiologici su questo argomento, i risultati sono ancora controversi. PubMed ed Embase sono stati selezionati per gli studi dal loro inizio fino al 9 ottobre 2016. L'odds ratio (OR ) con i corrispondenti intervalli di confidenza (CI) sono stati utilizzati per misurare la dimensione dell'effetto per gli studi che hanno riportato l'associazione in modelli allelici, omozigoti e dominanti. Le caratteristiche pre-specificate sono state condotte nell'analisi dei sottogruppi. L'eterogeneità tra i sottogruppi è stata valutata mediante meta- analisi di regressione. Sette studi ammissibili che hanno coinvolto 44.133 partecipanti sono stati inclusi nella nostra meta-analisi. È stata osservata un'associazione significativa borderline tra il polimorfismo del gene LEPR (rs1137101, rs11371 00, rs6700896 e rs8179183) e l'aumento del rischio di CVD con notevole eterogeneità sotto il modello allelico e l'OR complessivo aggregato (IC 95%) era 1,10 (0,99, 1,22). La variante del gene LEPR rs6700896, l'allele 109G e il genotipo 109GG erano significativamente associati all'aumento del rischio di CVD. Inoltre, l'analisi di gruppo stratificata ha rivelato che l'associazione era più pronunciata per l'ictus. Le differenze di razza potrebbero anche causare la notevole eterogeneità e l'associazione non significativa. Questa è la prima revisione sistematica e meta-analisi per indagare l'associazione tra varianti del gene LEPR e rischio CVD. Alcune varianti del gene LEPR erano significativamente associate all'aumento del rischio di CVD. Tuttavia, il presente studio è limitato nel suo piccolo numero di studi inclusi, notevole eterogeneità e disegno di studio osservazionale. Ulteriori ricerche sono ancora necessarie per confermare la grandezza dell'associazione.
Lipid Raft, Regulator of Plasmodesmal Callose Homeostasi.I microdomini specializzati della membrana plasmatica noti come lipid rafts sono arricchiti da steroli e sfingolipidi. trasduzione del segnale controllando l'assemblaggio di molecole di segnalazione e il traffico di proteine di membrana. Un altro compartimento specializzato delle cellule vegetali, il plasmodesmata (PD), che regola il movimento intercellulare simplasmatico di alcune molecole tra cellule adiacenti, contiene anche una membrana a doppio strato fosfolipidico. La permeabilità dinamica dei plasmodesmi (PDs) è altamente controllato dal plasmodesmata callose (PDC), che viene sintetizzato dalle callose sintasi (CalS) e degradato dalle β-1,3-glucanasi (BGs). In studi recenti, notevoli osservazioni sulla correlazione tra lipid raft sono stati segnalati la formazione e il traffico intracellulare simplasmatico ed è stato suggerito che il PDC sia il regolatore del limite di esclusione dimensionale dei PD. È stato suggerito che l'alterazione delle sostanze del raft lipidico altera l'omeostasi della PDC, influenzando successivamente le funzioni della PD. In questa recensione, discutiamo il ruolo sostanziale delle zattere lipidiche di membrana nell'omeostasi del PDC e forniamo strade per comprendere il comportamento fondamentale del PDC trattato con zattera lipidica.
Depth Edge Filtering mediante imaging a luce strutturata parametrizzata.Questa ricerca presenta il rilevamento parametrizzato dei bordi di profondità mediante imaging a luce strutturata che sfrutta un motivo a strisce di colore singolo e un pattern a strisce binarie associato. Per rilevamento parametrizzato dei bordi di profondità, ci riferiamo al rilevamento di tutti i bordi di profondità in un determinato intervallo di distanze con differenza di profondità maggiore o uguale a un valore specifico. Mentre la ricerca precedente non si è occupata adeguatamente delle regioni d'ombra, che risultano nei doppi bordi, rimuoviamo efficacemente le regioni d'ombra utilizzando l'apprendimento statistico attraverso l'efficace identificazione delle strisce di colore nelle immagini a luce strutturata. Forniamo anche un controllo molto più semplice dei parametri coinvolti. Abbiamo confrontato le prestazioni di filtraggio dei bordi di profondità del nostro metodo con quelle del metodo all'avanguardia e rilevamento del bordo di profondità dalla mappa di profondità Kinect. I risultati sperimentali mostrano chiaramente che il nostro metodo trova la profondità desiderata bordi più correttamente mentre gli altri metodi non possono.
Fluttuazioni di resistenza non gaussiane nei sensori di gas a base di nanoparticelle d'oro: una valutazione delle diverse tecniche di valutazione.Composti organici volatili, come la formaldeide, possono essere utilizzati come biomarcatori nell'espirazione umana al fine di rilevare in modo non invasivo varie malattie, e gli stessi composti sono di grande interesse anche nel contesto del monitoraggio e della protezione ambientale Qui riportiamo un sensore di gas di recente sviluppo, basato su nanoparticelle di oro funzionalizzate in superficie, in grado di generare rumore di tensione con una componente spiccatamente non gaussiana per esposizione a formaldeide con concentrazioni a livello di ppm, mentre tale componente è assente, o quantomeno molto più debole, quando il sensore è esposto a etanolo o all'aria pura. Esaminiamo quattro diversi metodi statistici per chiarire una componente non gaussiana e valutarne i pro e i contro per quanto riguarda l'efficiente rilevamento dei gas. In particolare, la componente non gaussiana è stata chiaramente esposti in analisi utilizzando parametri di passaggio a livello, che non richiedono altro che un modesto sforzo computazionale e semplici circuiti elettronici, e risultati analoghi potrebbero essere raggiunti attraverso la funzione bispettro, anche se con un calcolo più intenso. Informazioni utili potrebbero essere ottenute anche tramite la distribuzione Lévy-stable e, possibilmente, il secondo spettro.
Degradazione fotoriduttiva altamente migliorata di polibromodifenil eteri con g-C3N4/TiO2 sotto irradiazione di luce visibile.Una serie di fotocatalizzatori ad alta attività g-C3N4-TiO2 sono stati sintetizzati mediante un semplice metodo di trasformazione termica one-pot e caratterizzati da microscopia elettronica a trasmissione (TEM), microscopia elettronica a scansione (SEM), diffrazione di raggi X (XRD), spettroscopia fotoelettronica a raggi X, superficie di Brunauer-Emmett-Teller (BET) e spettroscopia di riflettanza diffusa ultravioletta-visibile (UV-Vis-DRS). I campioni g-C3N4-TiO2 mostrano una capacità fotoriduttiva altamente migliorata per la degradazione degli eteri di polibromodifenile rispetto a g-C3N4 sotto irraggiamento di luce visibile. Tra tutti gli ibridi, 0,02-C3N4-TiO2 con il 2% in peso di g-C3N4 caricato mostra la velocità di reazione più elevata, che è 15 volte superiore a quella del g-C3N4 nudo. intensità di assorbimento, ma mostrano anche più efficacia La separazione dei portatori di carica, che si traduce in prestazioni fotoriduttive altamente migliorate sotto irraggiamento di luce visibile. Gli esperimenti di intrappolamento mostrano che gli agenti di intrappolamento intrappolano in gran parte la velocità di reazione. La velocità di accumulo di elettroni nella banda conduttiva è la fase determinante nella reazione di degradazione. È stato proposto un possibile meccanismo fotoriduttivo.
Il ruolo delle cellule Th-17 e γδ-T-cellule nel modulare la risposta infiammatoria sistemica a gravi ustioni.Le ustioni sono una salute pubblica globale problema, che rappresenta circa 265.000 decessi all'anno. L'infiammazione è essenziale per fornire i fattori di crescita, le citochine e le chemochine necessari per reclutare le cellule T e le cellule mieloidi nel sito di una lesione da ustione per la guarigione della ferita. Tuttavia, le ustioni maggiori generano un marcato effetto fisiopatologico risposta infiammatoria attraverso un diffuso rilascio di abbondanti mediatori proinfiammatori che predispongono i pazienti a una sindrome da risposta infiammatoria sistemica, sepsi e insufficienza multiorgano. Recentemente, ci sono state promettenti ricerche sul ruolo delle cellule T γδ e delle cellule Th-17 nella la regolazione e la propagazione di questa risposta infiammatoria. Questo studio esamina l'attuale letteratura sulla risposta immunitaria post-ustione.
L'impatto della stima dei gradienti troposferici ad alta risoluzione sul posizionamento preciso multi-GNSS.I vantaggi del sistema di posizionamento globale (GPS) degli Stati Uniti modernizzato, il rivitalizzato il sistema satellitare di navigazione globale russo (GLONASS), il sistema satellitare di navigazione cinese BeiDou (BDS) e l'europeo Galileo, il sistema satellitare di navigazione globale multi-costellazione (GNSS) è emerso come un potente strumento non solo per il posizionamento, la navigazione, e temporizzazione (PNT), ma anche nel telerilevamento dell'atmosfera e della ionosfera. Sia il posizionamento preciso che la derivazione dei parametri atmosferici possono beneficiare di osservazioni multi-GNSS. In questo contributo, vengono condotte valutazioni estese con set di dati multi-GNSS raccolti da 134 stazioni di terra distribuite a livello globale della rete International GNSS Service (IGS) Multi-GNSS Experiment (MGEX) nel luglio 2016. I set di dati vengono elaborati in sei diverse combinazioni di costellazioni, ovvero G PS-, GLONASS-, solo BDS, GPS + GLONASS, GPS + BDS e GPS + GLONASS + BDS + posizionamento preciso del punto Galileo (PPP). I gradienti troposferici sono stimati con otto diverse risoluzioni temporali, da 1 h a 24 h, per studiare l'impatto della stima dei gradienti ad alta risoluzione sulle stime di posizione. La deviazione standard (STD) viene utilizzata come indicatore della ripetibilità del posizionamento. I risultati mostrano che la stima dei gradienti troposferici con un'elevata risoluzione temporale può ottenere prestazioni di posizionamento migliori rispetto alla strategia tradizionale in cui i gradienti troposferici sono stimati su base giornaliera. Inoltre, viene studiato l'impatto della stima di gradienti troposferici con diverse risoluzioni temporali a vari angoli di cutoff di elevazione (da 3° a 20°). Si può osservare che con l'aumento degli angoli di taglio dell'elevazione, il miglioramento della ripetibilità del posizionamento diminuisce.
Embolizzazione endovascolare mediante somministrazione transcatetere di particelle: passato, presente e futuro.Tecniche minimamente invasive per occludere il flusso all'interno dei vasi sanguigni, inizialmente sperimentate nel Gli anni '70 con materiali autologhi e successivamente avanzati con biomateriali ingegnerizzati sempre più sofisticati, vengono regolarmente eseguiti per una varietà di condizioni mediche. I radiologi interventisti contemporanei hanno a loro disposizione un ampio armamentario di agenti occlusivi per trattare una serie di processi patologici attraverso una piccola incisione nella pelle In questa recensione, forniamo una prospettiva storica sugli strumenti di embolizzazione endovascolare, riassumiamo l'attuale stato dell'arte e mettiamo in evidenza le tecnologie fiorenti che promettono di far avanzare il campo nel prossimo futuro.
Un nuovo sistema di somministrazione transdermica di gel di brucina progettato per attività antinfiammatorie e analgesiche.. I risultati hanno mostrato che il sistema di gel di brucina inibisce i sintomi dell'artrite e proliferazione dei sinoviociti nel modello di artrite adiuvante di ratto, che ha indicato il suo effetto curativo per l'artrite reumatoide. Nel frattempo, ha alleviato significativamente l'edema dell'orecchio indotto da xilene nel test di gonfiore dell'orecchio di topo, che ha manifestato la sua proprietà antinfiammatoria. gel ha alleviato il dolore dell'iniezione di formalina nella zampa nel test della formalina, che ha dimostrato i suoi effetti analgesici. Inoltre, la brucina ha inibito significativamente la produzione di prostaglandina E2 (PGE2) indotta da lipopolisaccaride (LPS) senza influenzare la vitalità del test antinfiammatorio cellulare in vitro , che ha dimostrato che le sue azioni antinfiammatorie e analgesiche erano correlate all'inibizione della sintesi delle prostaglandine. Si suggerisce che il gel di brucina sia un promettente ve hicle per la somministrazione transdermica nel trattamento della malattia infiammatoria.
La combinazione di micropompe a membrana e sensori di flusso per il controllo del flusso di liquidi a corsa singola.Con la combinazione di micropompe e sensori di flusso, estremamente precisi e sono possibili sistemi sicuri di microdosaggio controllato ad anello chiuso per liquidi L'implementazione di una modalità di controllo basata su una corsa singola con micropompe a membrana ad azionamento piezoelettrico può fornire una soluzione per il dosaggio di volumi fino a nanolitri o portate medie variabili nell'intervallo da nL/min a μL/min. Tuttavia, le tecnologie dei sensori presentano una precisione ancora indeterminata per la misurazione del flusso di micropompe altamente pulsati. Due tipi di sensori miniaturizzabili in linea che forniscono lettura elettrica-sensori di flusso basati sulla pressione differenziale e sensori di flusso calorimetrici-vengono valutati per la loro idoneità a combinarli con micropompe La calibrazione dei sensori basata su corsa singola è stata eseguita con un nuovo metodo, confrontando i volumi di spostamento e i volumi di flusso del sensore. sono descritti i livelli di precisione e prestazioni per il controllo del flusso basato su corsa singola. I risultati hanno mostrato che oltre alla robustezza delle particelle dei sensori, il controllo dello smorzamento resistivo e capacitivo sono aspetti chiave per la creazione di sistemi di dosaggio dei liquidi riproducibili e affidabili. A seconda della portata media richiesta o del volume definito, sono stati realizzati sistemi di dosaggio con una precisione migliore del 5% per il sensore basato sulla pressione differenziale e migliore del 6,5% per il calorimetro termico.
Confronti delle risposte infiammatorie ed endotossiemiche postprandiali ai pasti misti in individui giovani e anziani: uno studio randomizzato.= 15/gruppo) ha consumato un colazione ricca di grassi e colazione povera di grassi Il plasma prelevato al basale e dopo i pasti per 5 ore è stato analizzato per l'endotossina circolante, le citochine (proteina chemiotattica monocitaria-1 (MCP-1), interleuchina (IL)-1β, IL- 6 e il fattore di necrosi tumorale-alfa (TNF-α)), la proteina legante il lipopolisaccaride (LBP) e l'espressione genica dell'infiammazione nelle cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC). ) ma maggiore proteina legante il fattore di crescita insulino-simile 3 (IGFBP3) e MCP-1 circolante rispetto ai soggetti più giovani. Dopo entrambi i pasti, non ci sono state differenze di età nelle concentrazioni plasmatiche, dell'endotossina dei chilomicroni o della LBP plasmatica, né nel gene delle citochine infiammatorie e l'espressione della proteina (MCP-1, IL-1β e TNF-α). A differenza di par. più giovane partecipanti, il gruppo più anziano aveva diminuito l'espressione della superossido dismutasi (SOD)-2 dopo i pasti. Dopo un pasto ricco di grassi, gli anziani non hanno un aumento della risposta infiammatoria o endotossina, ma un'alterata risposta del gene dello stress ossidativo rispetto agli adulti più giovani. Gli anziani sani, senza apparente disfunzione metabolica, hanno una risposta infiammatoria ed endotossiemia postprandiale paragonabile agli adulti più giovani.
Miglioramento della sicurezza delle reti di sensori wireless che utilizzano intervalli di segnale.Diverse tecnologie wireless, come RF, Bluetooth e Zigbee, sono state applicate alle comunicazioni dei sensori Tuttavia, le applicazioni delle reti di sensori wireless (WSN) basate su Bluetooth presentano un problema di sicurezza. In un processo di accoppiamento durante la comunicazione Bluetooth, noto come accoppiamento sicuro semplice (SSP), i dispositivi devono specificare la capacità di I/O o interferenza dell'utente per prevenire attacchi man-in-the-middle (MITM). Questo studio propone un SSP avanzato in cui un nonce da trasferire viene convertito in un intervallo di segnale corrispondente. Il livello di quantizzazione, che viene utilizzato per interpretare gli intervalli di segnale fisico, viene rinnovato ad ogni connessione dal nonce trasferito e applicato al successivo scambio nonce in modo che gli stessi intervalli di segnale possano rappresentare numeri diversi. Anche se gli aggressori origliano i segnali, non possono capire cosa viene trasferito perché se non possono determinare il livello di quantizzazione. Inoltre, il modello proposto non richiede lo scambio di passkey come dati e i dispositivi sono sicuri in caso di utilizzo di un PIN fisso. Successivamente, il nuovo livello di quantizzazione viene calcolato automaticamente ogni volta che gli stessi dispositivi tentano di connettersi tra loro. Pertanto, il processo di associazione può essere protetto dagli attacchi MITM ed essere conveniente per gli utenti.
Sistema di misura a reticolo in fibra di Bragg per il monitoraggio simultaneo di temperatura e umidità nella ventilazione meccanica.Durante la ventilazione meccanica, l'umidificazione dell'aria secca erogata dal ventilatore meccanico è raccomandato. Tra le diverse soluzioni, gli umidificatori a filo riscaldato (HWH) hanno ottenuto una grande accettazione per l'uso in questo campo. Lo scopo di questo lavoro è fabbricare un sistema di misura basato su reticolo in fibra di Bragg (FBG) per il monitoraggio simultaneo di umidità relativa del gas (UR) e temperatura, destinati ad essere utilizzati per fornire feedback al controllo HWHs\'. Questa soluzione può essere implementata utilizzando un array di due FBG con una lunghezza d'onda centrale diversa. Per quanto riguarda il monitoraggio RH, sono stati fabbricati tre sensori da rivestimento di un FBG con due diversi materiali sensibili all'umidità e biocompatibili: i primi due sensori sono stati fabbricati rivestendo il reticolo con uno strato di agar e agarosio di 3 mm × 3 mm; influenza dello spessore del rivestimento sulla risposta del sensore, è stato sviluppato un terzo sensore con uno strato di agar di 5 mm × 5 mm. I sensori sono stati valutati in un ampio intervallo di UR (fino al 95%) sia durante una fase ascendente che in una successiva fase discendente. Solo la risposta dei sensori rivestiti da 3 mm × 3 mm è stata sufficientemente rapida da seguire le variazioni di umidità relativa, mostrando una sensibilità media di circa 0,14 nm/% (rivestito di agar) e 0,12 nm/% (rivestito di agarosio). L'errore di isteresi era di circa <10% nei due sensori. Il contributo delle variazioni di temperatura su questi sensori di UR era trascurabile. La misurazione della temperatura è stata eseguita da un FBG commerciale insensibile alle variazioni di umidità relativa. Le ridotte dimensioni di questi sensori basati su FBG, l'utilizzo di polimeri biocompatibili e la possibilità di misurare sia la temperatura che l'UR utilizzando la stessa fibra ottica incorporando un array di due FBG rendono intrigante l'utilizzo di questa soluzione per l'applicazione nel controllo di HWH.