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Effetti di vari agenti diuretici nel topo.Gli effetti diuretici di sette agenti diuretici ad azione orale sono stati esaminati nel topo. I seguenti composti, esempi di vari tipi di composti attivi per via orale disponibili, hanno prodotto i loro caratteristici effetti diuretici: bendrofluazide, furosemide, acido etacrinico, acetazolamide, triamterene, aminofillina e Su 15049A. Gli effetti diuretici dei vari agenti sono stati dimostrati sia in condizioni di carico idrico che salino. Dopo aver tenuto conto delle differenze nell'escrezione di sodio al basale, tutti i diuretici ad eccezione dell'acetazolamide hanno causato un ulteriore miglioramento dell'escrezione di sodio dopo il carico di soluzione fisiologica rispetto ai test di carico di acqua. Il topo possiede diversi vantaggi rispetto al ratto più comunemente usato poiché la gamma di reattività ai diuretici è maggiore. Questi risultati suggeriscono che il topo è una specie adatta per i test sui diuretici.
metaboliti diossigenati del cannabidiolo formati dal fegato di ratto.Il metabolismo del cannabidiolo (CBD) è stato studiato in vitro utilizzando un surnatante di 10.000 g dal fegato di ratto Dopo la rimozione del CBD immodificato e dei suoi metaboliti monoidrossilati, è rimasta una frazione polare da cui sono stati isolati dieci metaboliti diossigenati. La spettrometria di massa e la spettroscopia di risonanza magnetica nucleare sono state utilizzate per identificare i seguenti metaboliti: 6,7-diidrossi-CBD, 1 pollice,7 -diidrossi-CBD, 3 pollici, 7-diidrossi-CBD, 4 pollici, 7-diidrossi-CBD, 5 pollici, 7-diidrossi-CBD, 2 pollici, 6-diidrossi-CBD, 3 pollici, 6 beta-diidrossi-CBD, 4 pollici, 6beta-diidrossi-CBD (provvisorio), 3 pollici-idrossi-6-osso-CBD e 4 pollici-idrossi-6-osso-CBD. L'abbondanza di metaboliti diidrossi isolati rifletteva la quantità di metaboliti monoidrossi che era precedentemente In entrambe le serie, la 7-idrossilazione si è verificata in misura maggiore. L'idrossilazione della catena laterale si è verificata prevalentemente a C-4 pollici e in misura minore a t C-3 pollici. Tracce di metaboliti sono state idrossilate a C-1 pollici, -2 pollici o 5 pollici.
Un confronto tra gli effetti della morfina e della petidina sulla temperatura corporea e l'inversione degli effetti della reserpina sulla temperatura corporea nel topo.Gli effetti di morfina e petidina sulla temperatura corporea e sull'inversione dell'ipotermia da reserpina nel topo sono stati studiati sia la morfina che la petidina hanno prodotto un calo dose-dipendente della temperatura corporea, quella della morfina essendo totalmente antagonizzata dalla nalorfina e parzialmente dal naloxone, mentre quella della la petidina è stata antagonizzata dal naloxone e potenziata dalla nalorfina. Entrambi i farmaci hanno invertito l'ipotermia indotta dalla reserpina. L'inversione da morfina, ma non dalla petidina, è stata parzialmente antagonizzata dal naloxone. L'adrenalectomia ha impedito l'inversione dell'ipotermia da reserpina da parte della petidina, ma la morfina ha prodotto un'inversione parziale. Il blocco gangliare e il blocco alfa e beta hanno tutti impedito l'inversione dell'ipotermia da reserpina da parte di entrambi i farmaci. I risultati sono discussi per quanto riguarda le differenze tra it petidina e morfina e possibile coinvolgimento dei recettori degli oppiacei.
Un meccanismo proposto per le risposte vasocostrittrici bifasiche alla 5-idrossitriptamina e alla metisergide nell'arteria dell'orecchio di coniglio.Le arterie dell'orecchio di coniglio sono state isolate e perfuse a un velocità di flusso costante in modo che il perfusato fluisse nel fluido che bagna la superficie avventiziale dell'arteria. Dosi submassimali di noradrenalina applicata per via intraluminale iniettata come bolo nel fluido di perfusione producevano risposte vasocostrittrici monofasiche transitorie. Al contrario, 5-idrossitriptamina somministrata in modo simile (5- HT) o metisergide causavano risposte vasocostrittrici bifasiche prolungate. I rapporti di potenza extraluminale/intraluminale per noradrenalina, 5-HT e metisergide erano rispettivamente 230, 15 e 6, il che indica che la metisergide 5-HT è relativamente più potente se somministrata per via extraluminale rispetto alla noradrenalina. (3-0 X 10(-5) mol litro-1) ha notevolmente aumentato la potenza della noradrenalina somministrata per via extraluminale e ha convertito il monofasico risposte prodotte dalla noradrenalina alle risposte bifasiche. Si conclude che nelle condizioni sperimentali utilizzate 5-HT e metisergide hanno prodotto risposte bifasiche mediante un'azione sulla muscolatura liscia mediale in primo luogo attraverso la superficie intraluminale e in secondo luogo un'azione diretta aggiuntiva attraverso la superficie avventiziale. La potenza extraluminale della noradrenalina è bassa a causa del suo assorbimento neuronale e quindi le risposte sono normalmente monofasiche.
Procedura cromatografica su strato sottile per il dosaggio della noradrenalina marcata e dei suoi metaboliti nei tessuti e nel mezzo di incubazione.Un metodo per l'estrazione, la separazione e la determinazione quantitativa della [3H]noradrenalina [3H-NA] e dei suoi cinque principali metaboliti è stata messa a punto mediante cromatografia su strato sottile. Questa procedura è stata utilizzata per studiare il pattern di 3H-NA e dei suoi metaboliti nella radioattività totale dei tessuti e che liberata spontaneamente dal dotto deferente isolato di ratto. Mentre nei tessuti il 3H-NA rappresentava la quasi totalità della radioattività totale (94-8+/-0,47%), nei campioni di deflusso spontaneo rappresentava solo il 16-8+/-2,1% Il resto è stato per lo più rappresentato dai cinque metaboliti, principalmente 3H-DOPEG e 3H-MOPEG. Questi risultati mostrano che nel ratto dotto deferente 3H-NA è metabolizzato preferenzialmente attraverso i due derivati del glicole, cioè 3H-DOPEG e 3H-MOPEG.
La granulazione delle miscele binarie: gli effetti della composizione della soluzione di granulazione e la dimensione iniziale delle particelle di un componente sulle proprietà dei granuli.L'effetto del volume totale di solvente e la presenza di materiale disciolto (diverso dal legante) nella soluzione di granulazione, sulle proprietà dei granuli preparati da lattosio: è stato studiato miscele di acido borico Il volume totale di soluzione legante disponibile per miscele di polveri durante la messa in massa determina il dimensione media finale dei granuli prodotti. La dissoluzione parziale delle polveri da granulare contribuisce in modo significativo alla dimensione media dei granuli aumentando il volume totale della soluzione e riducendo la quantità di polvere da bagnare. Sebbene la quantità di PVP (legante) dissolta nella soluzione di granulazione contribuito molto poco alla dimensione del granulo alla concentrazione esaminata, determina l'effetto combinato del volume totale di soluzione e della quantità di PVP presente nella soluzione di granulazione resistenza e porosità dei granuli. L'effetto della dimensione iniziale delle particelle di lattosio in una miscela binaria con acido borico differisce dall'effetto riportato per i sistemi a singolo componente.
L'influenza della composizione del solvente di colata sulla struttura e sulla permeabilità dei film di copolimero di estere acrilico-metacrilico.Diminuzione della solvatazione del polimero mediante inclusione di etanolo in la soluzione di colata di acetone ha determinato una maggiore permeabilità all'urea del film di acrilato-metacrilato colato. La maggiore permeabilità è stata accompagnata in particolare da una diminuzione della dimensione dei pori e dall'aumento del numero dei pori, nonostante l'assenza di cambiamento nell'area dei pori. Una diminuzione della coesione nella film è stato suggerito dalla diminuzione della tortuosità dei pori come si vede dalla microscopia elettronica a scansione; inoltre, l'assorbimento di acqua è stato aumentato quando il film è stato lanciato da una soluzione etanolica I risultati supportano l'idea che, in pratica, la composizione del solvente, per il suo effetto sulla microstruttura, può influenzare la funzione del film che ne deriva.
Equilibrio acido-base alla nascita in neonati da travaglio con rottura precoce e tardiva delle membrane.Lo scopo di questo studio era determinare se il la rottura artificiale precoce delle membrane amniotiche eseguita per accorciare la durata di un travaglio altrimenti normale e il parto potrebbero avere effetti potenzialmente deleteri sul feto che si rifletterebbero nel neonato In 38 neonati partoriti a termine, gli equilibri acido-base e O2 e CO2 le pressioni sono state ottenute nel sangue arterioso e venoso ombelicale alla nascita, prima della prima inspirazione Ai fini dello studio i bambini sono stati divisi in due gruppi: i bambini del gruppo I sono nati dopo un travaglio normale in cui le membrane amniotiche sono state lasciate rompersi spontaneamente a dilatazione cervicale completa; i bambini del gruppo II sono nati dopo un travaglio in cui le membrane sono state rotte artificialmente quando la dilatazione cervicale era compresa tra 4 e 5 cm. Non c'era evidenza di sofferenza fetale e tutti i bambini erano v igoroso alla nascita. Il pH del sangue venoso ombelicale era maggiore nel gruppo con rottura tardiva delle membrane (cinquantesimo percentile [P50] = 7,36) rispetto a quelli nati dopo l'amniotomia precoce (P50 = 7,30) (p inferiore a 0,01). I valori di pH del sangue arterioso ombelicale erano anche più alti nei neonati del gruppo I (P50 = 7,31) rispetto a quelli nati dopo l'amniotomia (P50 = 7,25) (p inferiore a 0,025). Queste differenze sono state osservate anche nei 19 neonati in cui il cordone non era avvolto intorno al collo al momento della nascita. La PCO2 nel sangue venoso ombelicale era inferiore e la saturazione di emoglobina era maggiore (P inferiore a 0,05) nei neonati del gruppo I rispetto a quelli del gruppo II. È possibile che l'influenza dell'amniotomia precoce sul pH fetale possa essere deleteria nei bambini nati dopo gravidanze ad alto rischio in cui la circolazione uteroplacentare è compromessa.
La determinazione dei farmaci fenotiazinici nelle preparazioni farmaceutiche mediante un metodo spettrofotometrico differenziale.Viene descritto un metodo per la determinazione rapida dei farmaci fenotiazinici in un'ampia varietà di preparazioni farmaceutiche. I farmaci vengono determinati mediante una tecnica spettrofotometrica differenza basata sull'assorbanza del derivato solfossido del farmaco rispetto all'assorbanza di una soluzione del farmaco sottoinvaticato. I derivati solfossidici si formano rapidamente e quantitativamente a temperatura ambiente per addizione di una soluzione di acido perossiacetico, preparata per reazione lenta di acqua ossigenata e acido acetico glaciale a riposo. La differenza di assorbimento delle soluzioni è proporzionale alla concentrazione del farmaco fenotiazinico nel preparato ed è specifica per il farmaco intatto in presenza di prodotti di decomposizione ossidativa e fotochimica, coloranti e aromatizzanti, eccipienti e la maggior parte delle coformule drogato.
Uno studio sulla salute dei dipendenti esposti al cloruro di vinilidene.Studi precedenti hanno riferito su popolazioni di dipendenti esposti casualmente al cloruro di vinilidene nei processi di copolimero che utilizzano cloruro di vinile. L'attuale studio esamina i risultati degli esami sulla mortalità e sulla salute di 138 dipendenti esposti a livelli misurati di cloruro di vinilidene in cui il cloruro di vinile non è stato utilizzato come copolimero. Non ci sono risultati statisticamente correlati o attribuibili individualmente all'esposizione al cloruro di vinilidene in questa popolazione di dipendenti. ha raccomandato di intraprendere ulteriori studi epidemiologici per sviluppare dati sull'esposizione cronica al cloruro di vinilidene.
Effetti extrapiramidali dei neurolettici.Uno studio è stato condotto su 66 pazienti psichiatrici ricoverati che hanno assunto tranquillanti maggiori per periodi da 4 a 16 anni. La frequenza dei segni del parkinsonismo e gli effetti dell'orfenadrina su questi sono stati studiati in un metodo crossover in doppio cieco. Il sessantuno per cento dei pazienti ha mostrato segni di parkinsonismo. Le pazienti di sesso femminile e quelle con patologia cerebrale organica hanno mostrato più frequentemente parkinsonismo (sebbene la differenza non fosse statisticamente significativa). Non è stata trovata alcuna correlazione tra la durata del trattamento e gli effetti extrapiramidali. Dei 40 pazienti che hanno sviluppato parkinsonismo, 25 hanno risposto favorevolmente all'orfenadrina, mentre sei (15%) hanno avuto manifestazioni più marcate con l'orfenadrina rispetto al placebo.
Molluscum contagiosum -- a poxvirus difettoso?Preparazioni purificate del virus del mollusco contagioso contengono una RNA polimerasi DNA-dipendente (EC 2.7.7.6) con ma non proprietà identiche a quelle dell'enzima trovato nei virus vaccinici. La cinetica di inattivazione ultravioletta della RNA polimerasi da entrambi i virus era simile, mostrando componenti veloci e lenti. L'irradiazione ultravioletta ha distrutto le capacità interferenti del mollusco e ha inattivato i virus vaccinici e l'interferone -capacità di indurre il virus del mollusco lentamente e con cinetica del primo ordine. Gli studi di inattivazione della capacità di indurre il virus dell'interferone del virus vaccinico sono stati complicati da effetti citotossici. Gli studi al microscopio elettronico hanno mostrato tutti gli stadi di crescita del virus nelle cellule embrionali di topo infettate dal vaccino; virus del mollusco sembrava essere degradato nei corpi lisosomiali. In studi preliminari, marcati cambiamenti nella sintesi dell'RNA citoplasmatico e nei modelli di sin tesi sono state trovate in cellule embrionali di topo infettate da vaccinia ma non in cellule embrionali di topo infettate da mollusco.
L'effetto del perossido di idrogeno sulle spore di Clostridium bifermentans.L'effetto del perossido di idrogeno sulla germinazione, formazione di colonie e struttura delle spore di Clostridium bifermentans Il trattamento con perossido di idrogeno 0,35 M ha aumentato il tasso di germinazione a 25 gradi C, ma l'aumento della temperatura o della concentrazione di perossido di idrogeno ha diminuito sia il tasso di germinazione che la formazione di colonie. La presenza di Cu2+ ha aumentato l'effetto letale del perossido di idrogeno sulla formazione di colonie fino a 3000. La pre-incubazione delle spore con Cu2+ prima del trattamento con perossido di idrogeno ha prodotto un aumento simile, ma questo potrebbe essere eliminato lavando le spore con spore diluite - apparentemente dal mantello - e trattamento con ditiotreitolo, che rimuove anche la proteina del rivestimento delle spore, aumenta di 500 volte l'effetto letale del perossido di idrogeno, suggerendo che la proteina del rivestimento delle spore ha un effetto protettivo contro il perossido di idrogeno.
Permeabilità ionica dei granuli cromaffini isolati.La permeabilità ionica passiva, la regolazione del volume e il pH interno dei granuli cromaffini bovini isolati sono stati studiati mediante metodi radiochimici, tecniche potenziometriche, gravimetriche e spettrofotometriche I granuli cromaffini si comportano come osmometri perfetti tra 340 e 1.000 mosM in cloruro di colina, NaCl e KCl misurati dalle variazioni di assorbanza a 430 nm o dalle misurazioni dell'acqua intragranulare utilizzando 3H2O e [14C]polidestrano. sospendendo i granuli cromaffini in mezzi isoosmotici di vari ioni metallici e aumentando selettivamente la permeabilità al catione o all'anione mediante ioni intrinsecamente permeabili o specifici ionofori, è stato possibile determinare mediante misure di torbidità e potenziometrici la permeabilità al controione. indicano che il granulo cromaffine è impermeabile ai cationi testati (Na+, K+ e H+) Limitata permeabilità all'H+ attraverso il cromaffine la membrana dei granuli è stata anche mostrata per mezzo dell'andamento temporale del riequilibrio del pH dopo variazioni pulsate del pH nel mezzo circostante. La misurazione della distribuzione della [14C]metilammina indica che esiste un deltapH significativo attraverso la membrana, all'interno dell'acido, che a un valore esterno di 6,85 ha un valore di 1,16. Il deltaph è relativamente insensibile ai cambiamenti nella composizione dei media esterni e può essere potenziato o collassato mediante l'aggiunta di ionofori e disaccoppianti. La misurazione a vari valori di pH esterno indica un pH interno di 5,5. L'uso dello ionoforo A23187 indica che Ca++ e Mg++ possono essere accumulati contro un apparente gradiente di concentrazione con assorbimento di calcio superiore a 50 nmol/mg di proteina a saturazione. Queste misurazioni mostrano anche che Ca++ e Mg++ sono impermeabili. La misurazione del rilascio di catecolamine in condizioni in cui l'accumulo di calcio intravescicolare è massimo indica che non si verifica il rilascio di catecolamine. Il significato fisiologico dell'elevata impermeabilità agli ioni e l'esistenza di un grande deltapH sono discussi in termini di regolazione dell'assorbimento, stoccaggio e rilascio di catecolamine nei granuli cromaffini.
Analisi del ciclo della rodopsina nei fotorecettori ventrali del Limulus utilizzando il potenziale del recettore precoce.Il potenziale del recettore precoce (ERP) è stato registrato a livello intracellulare dai fotorecettori ventrali del Limulus L'ERP nelle cellule sezionate sotto luce rossa è stato alterato da un'illuminazione esaustiva. Non è stato osservato alcun recupero della forma wafe originale, anche dopo 1 ora al buio. La forma d'onda ERP potrebbe essere ulteriormente alterata dall'adattamento cromatico o da variazioni del pH. I risultati indicano che a pH 7,8 ci sono due stati di pigmento interconvertibili con lambdamax solo leggermente diversi, mentre a pH 9,6 ci sono due stati interconvertibili con lambdamax molto diversi. In tutte le condizioni studiate gli ERP erano quasi identici a quelli precedentemente ottenuti nelle retine di calamaro. Questo fortemente suggerisce che la luce converte la rodopsina del Limulus in una miscela stabile di fotoequilibrio di rodopsina in una miscela stabile di rodopsina e metarodopsina e che, come nei calamari, il lambdamax della metarodopsina dipende dal pH. Questa conversione a pH 7,8 è associata a una piccola diminuzione (0,7 unità log) della massima sensibilità del potenziale del recettore tardivo. Quindi la componente di adattamento legata alle variazioni della concentrazione di rodopsina è irrilevante rispetto alla componente "neurale".
Trasporto attivo di H+ nella vescica urinaria della tartaruga. Accoppiamento del trasporto all'ossidazione del glucosio.La vescica urinaria della tartaruga acidifica il contenuto del suo lume trasportando attivamente protoni. La secrezione di H+ da parte della vescica isolata è stata misurata contemporaneamente alla velocità di evoluzione di 14CO2 dal [14C]glucosio. L'applicazione di un gradiente di pH avverso ha determinato una diminuzione della velocità di secrezione di H+ (JH) e della velocità di ossidazione del glucosio (JCO2). I cambiamenti in JH e JCO2 erano funzioni lineari della differenza di pH attraverso la membrana. Quindi, JH e JCO2 erano correlati linearmente tra loro. La pendenza, deltaJH/deltaJCO2 è risultata simile nelle semivesciche del stesso animale ma è stato visto variare ampiamente in una popolazione di tartarughe. Per studiare l'effetto dei gradienti di pH su deltaJH/deltaJCO2, sono stati eseguiti due esperimenti in ciascuna delle 14 emivesciche. In uno, JH e JCO2 sono stati alterati modificando il pH luminale. Nell'altro, sono stati alterati b y modificando la pCO2 ambiente mentre il pH luminale è stato mantenuto costante. La pendenza media, deltaJH/deltaJCO2, in presenza di gradienti di pH era 14,45 eq-mol-1. In assenza di gradienti nelle stesse emivesciche era 14,72, delta = 0,27 +/- 1,46. I risultati mostrano che il trasporto di H+ è organizzato in modo tale che le perdite ai protoni in parallelo alla pompa siano trascurabili. L'analisi del sistema di trasporto mediante l'uso del formalismo termodinamico irreversibile lineare di Essig-Caplan mostra che il sistema è strettamente accoppiato. Il grado di accoppiamento, q, dato da quell'analisi è stato misurato e trovato pari o molto vicino al valore teorico massimo.
Controllo nervoso delle risposte alla luce nell'anemone di mare, Calamactis praelongus.1. L'anemone di mare scavatore, Calamactis praelongus, risponde alla luce con contrazioni non nervose della colonna. Ci sono anche risposte più estese della colonna e dei muscoli retrattori coordinate dagli impulsi della rete nervosa (NNP\'s) sotto il controllo del pacemaker. 2. Le NNP\'s si verificano in almeno due tipi di raffiche e in sequenze che a volte indicano un sito rotante di inizio dell'impulso 3. Le sequenze NNP evocate dalla luce possono essere registrate su nastro e utilizzate in seguito per guidare uno stimolatore per riprodurre le sequenze originali nello stesso o in diversi anemoni, evocando risposte muscolari che si avvicinano agli originali. Questa tecnica separa la componente della risposta alla luce diretta dal pacemaker dagli effetti locali della stimolazione luminosa. 4. I muscoli circolari e parietali isolati si contraggono lentamente quando stimolati dalla luce o eccitati indirettamente dagli NNP\'. Muscoli retrattori a re insensibile alla luce ma produce contrazioni rapide quando eccitato da NNP\' evocati dalla luce ravvicinati. 5. Viene proposto un modello per le risposte alla luce che incorpora le caratteristiche dei muscoli isolati e degli anemoni intatti.
Fisiologia di un recettore dell'ATP nei sensilli labellari della mosca tse-tse Glossina morsitans morsitans Westw. (Diptera: Glossinidae).Registrazioni elettrofisiologiche sono state effettuate da cellule negli otto grandi sensilli labellari di G. morsitans. Una di queste cellule in ciascun sensillum ha dimostrato di rispondere all'ATP in un intervallo di concentrazione di 10(-6)-10(-3) M. Era anche sensibile a diversi altri fosfati di adenosina, ma molto meno sensibili a CTP, GTP e ITP. L'attività del recettore era depressa al di sotto del pH 7 e talvolta aumentava notevolmente al di sopra del pH 9. Questi aspetti della fisiologia del recettore supportano i risultati degli studi comportamentali. ha concluso che gli otto recettori mediano la risposta comportamentale delle mosche all'ATP.
Un metodo elettrolitico per determinare le curve di dissociazione dell'ossigeno utilizzando piccoli campioni di sangue: l'effetto della temperatura sulla trota e sul sangue umano.1. Un resoconto dettagliato è viene fornito un metodo elettrolitico per determinare la curva di dissociazione dell'ossigeno del sangue di pesce utilizzando un singolo campione di 50-100 mul per l'intera curva. Si discute l'accuratezza e alcuni dei problemi derivanti dai suoi usi. 2. Sono state determinate le curve di dissociazione dell'ossigeno per sangue di trota e sangue umano a temperature di 15 e 37 gradi C. Il rapporto tra P50 e temperatura è simile a quello ottenuto con altri metodi I valori assoluti di P50 sono generalmente inferiori a quelli ottenuti con altri metodi, soprattutto nel caso dei pesci 3. Viene testato l'effetto della PCO2 e del pH sulla curva di dissociazione dell'ossigeno del sangue di trota e si dimostra che la PCO2 ha un effetto più marcato del pH quando l'altro fattore viene mantenuto a un livello costante. Il fattore di Bohr (delta log P5 0/delta pH) sembra essere approssimativamente lo stesso e indipendente dalla PCO2. 4. La P50 del sangue di raggio determinata dai pesci durante e dopo un'operazione ha mostrato un aumento del fattore di Bohr.
Inibizione della prolina di una risposta feromone di allarme dell'anemone di mare.1. La L-prolina, da sola o in estratti di tessuto animale, inibisce la risposta del anemone di mare Anthopleura elegantissima all'allarme feromone, antopeurina 2. L'effetto della prolina è mediato da un recettore specifico per la struttura e la configurazione della parte della molecola di L-prolina contenente i gruppi carbossilico e immino 3. Inibizione della prolina è competitivo, nel senso che gli effetti di una data concentrazione di prolina possono essere annullati da un aumento della concentrazione di antopeurine 4. L'entità dell'inibizione della prolina aumenta con la concentrazione di prolina e diminuisce all'aumentare della durata dell'esposizione alla prolina. sistema di conduzione finale che media la risposta all'allarme né i muscoli che rispondono sono abitati dalla prolina. L'inibizione si verifica presumibilmente al livello o subito dopo il livello dei recettori delle antopleurine. 6. L'inibizione della prolina può risolvere il potenziale c conflitto tra l'alimentazione reciprocamente esclusiva di Anthopleura e le risposte dei feromoni di allarme.
I ruoli coordinati dell'attività del nervo branchiale e del potassio nella stimolazione dell'attività ciliare in Mytilus edulis: osservazioni con fenossibenzamina, acido bromolisergico e istochimica a fluorescenza.Concentrazioni di potassio superiori a 30 mM aumentano la velocità di battito delle ciglia laterali sulla branchia di Mytilus edulis La cilioeccitazione prodotta dalla stimolazione elettrica a bassa frequenza (5 battiti/s) è stata potenziata con potassio ma bloccata con acido bromolisergico (un inibitore serotoninergico). La cilioinibizione prodotta dalla stimolazione ad alta frequenza (50 battiti/s) è stata ridotta con potassio e fenossibenzamina (un inibitore dopaminergico). La fenossibenzamina ha aumentato la cilioeccitazione prodotta dal potassio. Le dosi di potassio incapaci di mantenere una velocità basale di battito (inferiore a 30 mM) potrebbero aumentare attività ciliare se è stata aggiunta anche fenossibenzamina Dopo la resezione del nervo branchiale, il giallo-fluoroforo (deposito serotoninergico) e ci l'effetto lioexcitatory del potassio diminuisce gradualmente. Questo studio mostra che l'effetto del potassio sull'attività ciliare (a) aumenta con la stimolazione nervosa a bassa frequenza, presumibilmente attraverso il rilascio di serotonina e (b) diminuisce con la stimolazione nervosa ad alta frequenza, presumibilmente attraverso il rilascio di dopamina.
Acil specificità nella sintesi dei trigliceridi da allattamento ratto ghiandola mammaria", Abbiamo studiato la specificità del acil-CoA: reazione acyltransferase digliceridi in lattazione mammario di ratto ghiandola di fornire una spiegazione razionale a livello enzimatico per la distribuzione non casuale di acidi grassi in trigliceridi grasso di latte acil-CoA: attività acyltransferase digliceridi stata misurata utilizzando vari digliceridi e radioattive substrati acil-CoA; prodotti sono stati identificati come trigliceridi di strato sottile. . e la cromatografia gas-liquido maggior parte dell'attività enzimatica era situata nella frazione microsomiale e ha mostrato un'ampia specificità per i donatori acilici testato C10, C12, C14, C16, C18 e C18. 1 esteri CoA) l'attività aciltransferasica era altamente specifico per enantiomeri sn-1,2-digliceridi, rac-1,3- e sn-2,3-digliceridi erano relativamente inattiva la specificità acil-CoA non era influenzata dal tipo di accettore 1,2-digliceridi offerti, anche se. dilaurin era esimo e migliore accettore e sn-1,2-dilaurin maggiore di maggiore sn-1,2-dimyristin di maggiore sn-1,2-dipalmitina di sn-1,2-distearin. Abbiamo precedentemente dimostrato che nella frazione microsomiale da allattamento ratto ghiandola mammaria, le attività acyltransferase interessati alla conversione di sn-glicero-3-fosfato per diacylglycerophosphate mostrare una specificità molto marcata per catena lunga acil-CoA \ 's. Pertanto, concludiamo che la localizzazione predominante di acidi grassi a catena lunga nei 1 e 2 posizioni, e di acidi grassi a catena brevi in posizione 3 del backbone glicerolo, risultati almeno in parte dalla specificità della ghiandola mammaria aciltransferasi ".
Linfociti sensibilizzati alla tubercolina rilevati da un'alterata distribuzione della mobilità elettroforetica dopo l'incubazione con l'antigene PPD.Linfociti di donatori che avevano avuto la tubercolosi (una malattia nota per provocano un'immunità cellulo-mediata) sono stati incubati con l'antigene tubercolinico, derivato proteico purificato (PPD) e la loro distribuzione della mobilità elettroforetica è stata determinata mediante spettroscopia laser Doppler. Nel 75% dei casi, la distribuzione ha mostrato una nuova cellula ad alta mobilità sottopopolazione che non era presente prima dell'esposizione al PPD. I linfociti di controllo da individui con test cutanei negativi o nessun record di tubercolosi non hanno mostrato cambiamenti di mobilità dopo l'incubazione con PPD. Queste osservazioni indicano che la nuova sottopopolazione di mobilità è nata da una specifica interazione tra l'antigene e cellule sensibilizzate dei donatori.
Interazione degli eritrociti con le proteine del siero umano. I. Analisi dell'effetto del pH e della forza ionica del mezzo.L'effetto dei parametri ionici di il medium (pH e forza ionica) sui processi di interazione degli eritrociti trattati con tannino e le frazioni proteiche del siero umano (macroglobuline, microbuline e albumina) è stato studiato in esperimenti fattoriali Complesso effetto di questi parametri sui processi in esame e ottimale sono state stabilite le condizioni di sensibilizzazione eritrocitaria. La successiva fissazione degli anticorpi da parte della diagnostica eritrocitaria e la loro attività agglutinante si manifestano in maniera diversa a seconda delle condizioni di sensibilizzazione precedente. Sono state scoperte importanti peculiarità nel meccanismo di interazione tra gli eritrociti e le varie proteine sieriche. i risultati ottenuti dovrebbero essere presi in considerazione nella produzione dell'antigene eritrocitario e degli anticorpi diagnostici.
Coordinamento dell'aula e dell'esperienza clinica.L'esperienza clinica, che offre l'opportunità di applicare concetti e teorie presentate in classe, è essenziale nell'educazione di un dietista: sia come assistente, tecnico o professionista. È necessario il coordinamento della teoria e della pratica per consentire agli studenti di acquisire le conoscenze, le attitudini e le abilità necessarie per una pratica competente. I pianificatori e gli istruttori di programmi responsabili sono responsabili della presentazione dei curricula progettati fornire tali esperienze in aula e cliniche coordinate in un approccio olistico e pertinente alla formazione dei futuri professionisti della dietetica.
Valutazione dell'arricchimento, della conservazione e dell'età dell'agar sangue in relazione alla sua capacità di supportare la crescita di batteri anaerobi.Misurando la dimensione della colonia di una varietà di batteri anaerobi isolati da campioni clinici, è stata effettuata una valutazione dei benefici derivanti dall'aggiunta di diversi arricchimenti al terreno di agar sangue comunemente utilizzato per la crescita degli anaerobi. Metodi simili sono stati utilizzati per studiare gli effetti di varie condizioni di conservazione e età del terreno. I risultati sono stati confrontati con quelli ottenuti su piastre di agar sangue appena preparate e arricchite, nonché su piastre di agar sangue disponibili in commercio. È stato riscontrato che l'agar sangue appena preparato e arricchito fornisce colonie sostanzialmente più grandi di quelle che potrebbero essere coltivate su sangue ottenuto in commercio piastre di agar quando entrambi sono stati inoculati e incubati in condizioni identiche La conservazione dei terreni di piastratura sotto CO2 per periodi fino a 72 ore ha avuto solo un effetto minore sulla crescita dell'anae batteri robic studiati, ma periodi di conservazione più lunghi sotto CO2 hanno portato a un mezzo di placcatura meno efficiente. L'infusione di cuore e cervello non arricchita (BHI) è risultata essere un terreno di base migliore rispetto al terreno di agar di soia Trypticase (TSA). La dimensione della colonia su piastre di agar sangue BHI completamente arricchite era maggiore di BHI non arricchito maggiore di TSA non arricchito maggiore di piastre TSA non arricchite preparate commercialmente. I dati suggeriscono che la freschezza dei piatti può essere importante quanto l'utilizzo di rich media.
Attività micobattericida delle soluzioni di glutaraldeide.Soluzioni acquose di glutaraldeide alcalina (tamponata a pH 8,5) hanno inattivato una sospensione standard di Mycobacterium tuberculosis H37Rv più velocemente della corrispondente acido (preparazione con pH 3,7. Le differenze quantitative nel tasso di inattivazione di altre otto specie di Mycobacterium sono state determinate utilizzando una soluzione all'1% di glutaraldeide alcalina e l'inattivazione della glutaraldeide residua con una soluzione di bisolfito di sodio all'1%. Sono state osservate variazioni nel tasso di uccisione tra le varie specie di micobatteri testate, ma tali differenze probabilmente non erano sufficientemente grandi per essere di importanza pratica Una soluzione alcalina di glutaraldeide al 2% ha inattivato 10 (5) cellule vitali di M. tuberculosis presenti sulla superficie dei penicicilindri di porcellana entro 5 minuti a 18 gradi C. Questo tasso di inattivazione era più veloce rispetto alla soluzione acida.
Deprivazione dietetica di fosfati nelle donne e negli uomini: effetti sugli equilibri minerali e acidi, sull'ormone paratiroideo e sul metabolismo della 25-OH-vitamina D.Noi hanno valutato gli effetti della restrizione alimentare di PO4 sul metabolismo della 25-OH-Vitamina D3, sui livelli sierici di iPTH e sugli equilibri minerali in donne e uomini sani. Gli equilibri di PO4 erano progressivamente negativi a causa delle perdite fecali senza differenza di sesso. Turnover del plasma 25-OH- Il pool D è stato aumentato da 5,8 +/- 0,4 a 12 +/- 1,2 nmol/giorno; P inferiore a 0,001, nonostante un calo dell'iPTH sierico di -1,1 +/- 0,3 mulEq/ml; P inferiore a 0,01. In entrambi i sessi , l'assorbimento intestinale netto di calcio e magnesio è aumentato in proporzione a un ricambio più rapido del pool plasmatico di 25-OH-D, il che implica un aumento della produzione renale di 1,25-(OH)2-D3. la risposta della PO4 sierica alla deprivazione alimentare di PO4, i livelli che diminuiscono progressivamente nelle donne, ma rimangono a livelli di controllo negli uomini. ted progressiva ipercalciuria e bilanci negativi di Ca mentre negli uomini gli incrementi nell'assorbimento intestinale di Ca erano approssimativamente abbinati agli incrementi nell'escrezione urinaria di Ca in modo che i bilanci di Ca non fossero diversi da zero.
Eterogeneità dimensionale della somatomedina sierica umana.La somatomedina (SM) nel siero umano non estratto è stata studiata mediante cromatografia Sephadex, elettroforesi su gel di amido e SM in vitro biotest. Ricromatografie ripetute delle varie frazioni sieriche hanno rivelato attività SM in una varietà di aree di dimensione molecolare indicata (IMS); maggiore di 90.000, (molto grande); 90.000-20.000, (grande); 20.000-9000, (intermedio); 9000 -2000, (piccolo); e meno di 2000, (molto piccolo). La cromatografia del siero non estratto, a pH 7,4, ha rivelato il 65% di SM come SM molto grande. La maggior parte di questo SM molto grande è rimasta stabile a pH neutro; meno di Il 25% è apparso in dimensioni molecolari più piccole dopo la ricromatografia con eluente acido. Quest'ultimo si è significativamente riassociato con altre proteine del siero in condizioni alcaline. L'IMS SM grande era relativamente stabile alla ricromatografia, mentre la maggior parte dell'IMS SM intermedio è stata convertita in piccole proteine IMS SM acide. Il piccolo IMS SM era stabile, come base proteina c, dopo ripetute ricromatografie acide. La maggior parte degli IMS SM molto piccoli si è verificata in una dimensione molecolare inferiore a 500. Questi risultati suggeriscono la presenza di forme molecolari multiple di SM nel siero non estratto. Alcuni degli SM più grandi rappresentano un'aggregazione proteica del siero SM. L'SM acido, con una dimensione molecolare vicina all'insulina, può essere derivato da un SM più grande. L'SM molto piccolo può essere una sostanza o sostanze non polipeptidiche.
Legame pH-dipendente delle immunoglobuline alle cellule intestinali del ratto neonatale.Immunoglobuline IgG di ratto e coniglio coniugate alla perossidasi di rafano come marcatore istochimico si legano a 0 gradi C alla superficie luminale delle cellule assorbenti in segmenti isolati del digiuno di ratti di 10-12 giorni di età Il legame è osservato a pH 6,0, vicino al normale pH luminale del duodeno e del digiuno a questa età, ma non a pH 7,4 Inoltre, non si verifica alcun legame quando le cellule sono esposte a pH 6,0 alla perossidasi libera o alla perossidasi coniugata con immunoglobuline IgG di pollo o pecora o con sieroalbumina bovina. La sensibilità del legame al pH suggerisce un mezzo per cui le immunoglobuline che vengono assorbite selettivamente dalle cellule possono essere rilasciato efficacemente sulla superficie abluminale.
Motilità del bordo a spazzola. Contrazione di microvillar nei bordi a spazzola trattati con tritone isolati dall'epitelio intestinale.Il bordo a spazzola delle cellule epiteliali intestinali è costituito da una serie di microvilli strettamente imballati. All'interno di ciascun microvillo c'è un fascio di 20-30 filamenti di actina. Le estremità basali dei fasci di filamenti sono incorporate e interconnesse da una rete filamentosa, la rete terminale, che si trova direttamente sotto i microvilli. Quando calcio e ATP sono aggiunti ai bordi dei pennelli isolati che sono stati trattati con il detergente, Triton X-100, i fasci di filamenti microvillari si ritraggono rapidamente all'interno e attraverso la regione web terminale. Gli studi biochimici delle proteine contrattili dei bordi dei pennelli suggeriscono che la contrazione dei microvillari osservata è mediata dall'actomiosina. hanno dimostrato in precedenza che la principale proteina del bordo del pennello è l'actina (Tilney, LG e MS Mooseker. 1971. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 68:2611-2615). contiene anche una proteina con lo stesso peso molecolare della subunità della catena pesante della miosina (200.000 dalton). Inoltre, le preparazioni di bordi a spazzola demembranati mostrano un'attività di potassio-EDTA ATPasi di 0,02 mumol fosfato/mg-min (22 gradi C); questo test è diagnostico per l'ATPasi simile alla miosina isolata da fonti di vertebrati. Altre proteine del bordo a spazzola includono una proteina da 30.000 dalton con proprietà simili a quelle della tropomiosina e una proteina con lo stesso peso molecolare della proteina della banda Z, l'alfa-actinina (95.000 dalton). Il modo in cui queste osservazioni si basano sui movimenti dei microvillari in vivo è discusso nel quadro del nostro recente modello per l'organizzazione dell'actina e della miosina nel bordo del pennello (Mooseker, MS e LG Tilney. 1975. J. Cell Biol. 67: 725-743).
Una descrizione quantitativa dell'estensione e della retrazione delle protrusioni superficiali nella diffusione dei fibroblasti di topo 3T3.Suggeriamo un metodo per quantificare le azioni mobili delle protuberanze superficiali nella diffusione di cellule animali in coltura. La sua base è la determinazione della percentuale di cellule appena placcate che producono aree prive di particelle intorno a loro su un vetrino coprioggetto rivestito di particelle d'oro entro 50 min. Studiando le cellule 3T3 con questo test, abbiamo scoperto che la presenza di Na+, K+, Cl- e Mg++ o Ca++ in una soluzione tamponata con fosfato o bicarbonato neutra o leggermente alcalina è sufficiente per favorire la rimozione ottimale delle particelle da parte delle cellule per almeno 50 min Due inibitori metabolici, 2,4- dinitrofenolo e Na-azide, inibiscono la rimozione delle particelle. Se si aggiunge D-glucosio insieme agli inibitori, la rimozione delle particelle può essere ripristinata, mentre l'aggiunta di tre analoghi del glucosio che sono generalmente ritenuti non metabolizzabili non può ripristinare la attività. Il siero non è richiesto per i meccanismi delle azioni mobili delle protrusioni superficiali nella diffusione delle cellule 3T3. Tuttavia, contiene componenti in grado di neutralizzare l'azione inibitoria dell'albumina sierica bovina e di numerosi amminoacidi, in particolare L-cistina o L-cisteina e L-metionina. Inoltre, il siero determina quale delle principali estensioni di superficie, filopodi, lamellipodi o lobopodi, è prevalentemente attivo. Abbiamo trovato tre classi distinte di condizioni extracellulari in cui le proiezioni superficiali attive sono prevalentemente lamellipodia, (proiezioni a foglio), lobopodi (blebs) o filopodia (microspikes). Le dipendenze quantificate dalla temperatura, dal pH e dall'inibizione da parte della citocalasina B o dalla rimozione delle particelle sono molto simili in tutti e tre i casi. Impedire alle cellule di ancorarsi per 15-20 minuti prima della piastratura in un mezzo privo di siero sembra stimolare tre volte la rimozione delle particelle.
Risultati a lungo termine degli impianti di arteria mammaria.Ottantasei pazienti su 86 (93%) con impianti di arteria mammaria sono stati seguiti dopo l'intervento per un media di tre anni e mezzo. Il tasso di mortalità immediata è stato del 7% (6 casi) e la mortalità tardiva è stata del 6% (5 casi). Tutti avevano angina preoperatoria. Ventiquattro avevano una storia di infarto miocardico e trentuno erano in attività fisica limitata, a causa del dolore. Dopo l'intervento, trentatré (45%) sono diventati asintomatici. L'angina è migliorata significativamente in trentacinque (47%) ed è rimasta invariata in sei (8%). Miglioramento della ripolarizzazione ventricolare all'ECG è stata osservata nel 69% dei pazienti. La cineangiografia postoperatoria è stata eseguita in 23 pazienti, tredici con impianti singoli e dieci con impianti doppi. Su un totale di trentatré impianti, quattro (12%) sono stati ostruiti e venti sette brevetti (82%); venti erano in due casi di doppio impianto, un solo impianto poteva essere soddisfacente Rily studiato efficace funzionamento (61%). Non sono state osservate ostruzioni nei singoli impianti. Sono stati riscontrati impianti non funzionanti in cinque (38%) dei tredici impianti singoli e in due dei venti doppi (10%). La più alta incidenza di ostruzione o impianti non funzionanti si è verificata nel gruppo che non ha mostrato miglioramento (43%). Questo tasso è sceso al 40% nel gruppo che ha avuto qualche miglioramento e al 29% in quelli che erano completamente asintomatici. Dodici dei diciotto impianti mammari pervi (67%) sulla parete anteriore del ventricolo sinistro e otto su nove (89%) sulla parete latero-inferiore, stabilivano un circolo collaterale alle coronarie. L'indicazione all'intervento chirurgico è stata considerata soddisfacente per diciannove dei ventitré pazienti e scarsa in quattro. Ci sono stati due casi di ostruzione dell'impianto (7%) nel gruppo in cui l'intervento chirurgico è stato correttamente indicato e tre dei ventitré (11%) impianti brevettati non erano funzionanti. Il miglioramento clinico dell'angina si è verificato nell'84% nel primo gruppo e nel 50% nell'altro. In conclusione, questa tecnica di rivascolarizzazione indiretta del miocardio è valida per pazienti con gravi lesioni diffuse delle coronarie con rete collaterale e contrattilità miocardica conservata.
Trasporto del calcio dipendente dall'energia nel reticolo endoplasmatico degli adipociti.Il reticolo endoplasmatico degli adipociti di ratto isolati ha la capacità di accumulare attivamente calcio. L'assorbimento del calcio è stata caratterizzata utilizzando il surnatante di 20.000 X g (frazione S1) dell'omogenato cellulare totale. localizzato alle vescicole del reticolo endoplasmatico dall'aspetto morfologico, dall'uso di inibitori selettivi della captazione del calcio e dalla sedimentazione ad alta velocità del calcio accumulato. La captazione era MgATP- e dipendente dalla temperatura ed era sostenuta dall'ossalato utilizzato come intrappolamento intravescicolare L'assorbimento è stato lineare con il tempo per almeno 30 minuti a tutte le concentrazioni di calcio testate (da 3 a 100 muM) e ha mostrato un pH ottimale di circa 7,0. L'inibitore sulfidrilico p-cloromercuribenzene solfonato ha prodotto un'inibizione dose-dipendente dell'assorbimento del calcio con un'inibizione totale a 0,07 mumol/mg di proteina. Il rosso rutenio e la sodio azide hanno inibito meno del 5% dell'assorbimento a concentrazioni (5 muM e 10 mM, rispettivamente) che hanno bloccato completamente l'assorbimento del calcio da parte dei mitocondri isolati dalle stesse cellule. Il Km per l'assorbimento del calcio era 10 muM di calcio totale che corrispondeva a circa 3,6 muM di calcio ionizzato nel sistema di analisi. La velocità massima di assorbimento era 5,0 nmol (mg di proteina microsomiale)-1 (min)-1 a 24 gradi nelle condizioni di analisi utilizzate e mostrava un Q10 di 1,8. L'attività di captazione delle vescicole del reticolo endoplasmatico nella frazione S1 ha mostrato una marcata labilità dipendente dal tempo e dalla temperatura che potrebbe spiegare in parte la mancanza di captazione nella frazione microsomiale isolata. Questo sistema di assorbimento del calcio dipendente dall'energia sembra essere di importanza fisiologica per la regolazione del calcio intracellulare.
6-fosfogluconato deidrogenasi. Purificazione e cinetica.Viene descritto un metodo per l'isolamento e la purificazione della 6-fosfogluconato deidrogenasi dal fegato di maiale. La molecola il peso è stimato a 83.000 e quello delle subunità è 42.000 come determinato dall'elettroforesi su gel. Il pH massimo è 8,5 in tampone glicina/NaOH 50 mM e da 7,5 a 10 in tampone fosfato 50 mM a 30 gradi. Lo ione magnesio non è richiesto per attività e agisce come un inibitore a concentrazioni superiori a 20 mM. Uno studio di frazionamento cellulare indica che questo enzima si trova quasi interamente all'interno della porzione solubile del citoplasma. Gli studi cinetici sono stati condotti in tampone glicina 50 mM, pH 8,5, a 30 gradi. I dati sono coerenti con un meccanismo sequenziale in cui viene aggiunto per primo NADP+, seguito dal 6-fosfogluconato e i prodotti vengono rilasciati nell'ordine, CO2, ribulosio 5-fosfato e NADPH. La costante di Michaelis è 13,5 muM per il 6-fosfogluconato. Le costanti di dissociazione sono 4,8 muM per NADP+ e 5,1 muM per NADPH.
Dipendenza dalla temperatura del legame del colesterolo al citocromo P-450scc del surrene di ratto. Effetto dell'ormone adrenocorticotropo e della cicloesimide.Si osserva un cambiamento di assorbanza di tipo I in sospensioni di mitocondri corticali surrenalici quando la temperatura viene aumentata da 0-22 gradi. Questa variazione di assorbanza di tipo I "generata dal calore" è simile in grandezza alla variazione di assorbanza di tipo II indotta dal pregnenolone di questi mitocondri. Studi con inibitori di La scissione della catena laterale del colesterolo indica che la variazione di assorbanza di tipo I generata dal calore rappresenta l'interazione specifica del citocromo P-450scc con il colesterolo endogeno nei mitocondri. Questa scoperta è confermata dalla spettroscopia EPR a bassa temperatura su campioni mitocondriali surrenalici congelati e bilanciati in temperatura. La risonanza EPR a g = 8.2, che è quella del citocromo P-450scc legato al colesterolo ad alto spin, è assente nei campioni incubati a 0 gradi e aumenta i n grandezza con l'aumentare della temperatura di incubazione. Gli studi sulla dipendenza dal pH dei cambiamenti di assorbanza di tipo I generati dal calore e di tipo II indotti dal pregnenolone rivelano che entrambi sono diminuiti aumentando il pH nell'intervallo da 6 a 8. Il trattamento con ormone adrenocorticotropo (ACTH) dei ratti provoca mitocondri surrenali che mostrano un variazione dell'assorbanza di tipo I notevolmente maggiore generata dal calore. Quest'ultimo è correlato a un aumento dell'assorbanza di tipo II indotto da pregnenolone e a un aumento del segnale EPR g = 8.2. Il precedente trattamento di animali con cicloesimide ha eliminato l'aumento indotto da ACTH nella variazione dell'assorbanza di tipo I generata dal calore, la variazione dell'assorbanza di tipo II indotta dal pregnenolone e il segnale EPR g = 8.2. Stimiamo che il legame idrofobico del colesterolo al citocromo P-450scc avvenga con un deltaH0\' di circa +15 kcal/mol e un deltaS0\' di circa +55 cal/mol gradi. I nostri dati supportano il concetto di una proteina labile che partecipa direttamente a questo processo.
Meccanismo di attivazione intramolecolare del pepsinogeno. Evidenza di un delta intermedio e del coinvolgimento del sito attivo della pepsina nell'attivazione intramolecolare del pepsinogeno.Intramolecolare l'attivazione del pepsinogeno è inibita dalla pepstatina, un potente inibitore della pepsina, o dalla globina purificata dall'emoglobina, un buon substrato della pepsina. Inoltre, il pepsinogeno a pH 2 può essere legato a una colonna di pepstatina-sefarosio e recuperato come zimogeno nativo dopo eluizione a pH 8 tampone. Studi cinetici sull'inibizione globinica dell'attivazione del pepsinogeno mostrano che la globina si lega a un pepsinogeno intermedio. Questa interazione dà origine all'inibizione competitiva dell'attivazione intramolecolare del pepsinogeno. L'evidenza presentata in questo documento suggerisce che il pepsinogeno viene convertito rapidamente dopo l'acidificazione nell'intermedio del pepsinogeno delta. In assenza di un inibitore, l'intermedio subisce un cambiamento conformazionale per legare la porzione peptidica di attivazione di questo s una molecola di pepsinogeno nel centro attivo per formare un complesso enzima-substrato intramolecolare (theta intermedio). Segue l'idrolisi intramolecolare del legame peptidico tra i residui 44 e 45 della molecola del pepsinogeno e la dissociazione del peptide di attivazione dalla pepsina. Apparentemente il delta intermedio non attiva un'altra molecola di pepsinogeno attraverso un processo intermolecolare. Né il delta intermedio idrolizza il substrato globinico.
Ricostituzione di generatori molecolari biologici di corrente elettrica. H+-ATPasi.1. Generazione di una differenza di potenziale elettrico transmembrana mediante il complesso ATPasi sensibile all'oligomicina, incorporata in una membrana fosfolipidica sferica o planare, è stato dimostrato. A tal fine, sono state utilizzate sonda anionica penetrante e misurazione diretta con voltmetro del potenziale elettrico attraverso la membrana fosfolipidica. È stato scoperto che la risposta elettrica indotta dall'ATP è sensibile all'oligomicina e ai disaccoppiatori protonofori.2 È stato studiato l'effetto delle variazioni della componente fosfolipidica dei proteoliposomi sulla generazione elettrica ed è stato evidenziato che l'utilizzo di fosfolipidi mitocondriali e fosfatidiletanolammina permette di ottenere i più alti valori di potenziale di membrana nel caso dei proteoliposomi ATPasi. citocromo ossidasi e proteoliposomi di batteriorodopsina, anche la fosfatidilserina si è dimostrata abbastanza adatta. ine era assolutamente inefficace in tutti i casi. 3. Nei proteoliposomi, contenenti sia ATPasi che batteriorodopsina, ATP e generazione indotta dalla luce del campo elettrico della stessa direzione. 4. Nei proteoliposomi di ATPasi + citocromo ossidasi, è stato scoperto che l'idrolisi dell'ATP e l'ossidazione dell'ascorbato supportano la generazione elettrica nella stessa direzione se il citocromo c era all'interno delle vescicole. L'ossidazione tramite citocromo c esterno ha portato alla formazione di un campo elettrico di direzione, opposto a quello indotto dall'idrolisi dell'ATP. 5. Vengono discussi i dati ottenuti in esperimenti con proteoliposomi di diverso tipo. Si conclude che la conversione dell'energia di diverse risorse in forma elettrica è una caratteristica comune dei trasduttori di energia a membrana, che è in accordo con il principio mitcheliano dell'energia cellulare.
Una nuova ossigenasi, 2-nitropropano diossigenasi di Hansenula mrakii. Proprietà enzimatiche e spettrofotometriche.2-nitropropano diossigenasi, purificata all'omogeneità da Hansenula mrakii ( IFO 0895), ha un peso molecolare di circa 62.000 ed è costituito da due subunità non identiche di peso molecolare (39.000 e 25.000). Gli studi stechiometrici ed i risultati ottenuti con 18O2 hanno mostrato che 2 atomi di ossigeno molecolare sono incorporati in 2 molecole di acetone formate da 2-nitropropano Oltre al 2-nitropropano, il nitroetano, il 3-nitro-2-pentanolo e l'1-nitropropano sono ossidativamente dentrificati. L'enzima, che mostra massimi di assorbimento a 274, 370, 415 e 440 nm e una spalla a 470 nm, contiene 1 mole di FAD e 1 g atomo di ferro non eme per mole di enzima. Il FAD legato all'enzima è ridotto di 2-nitropropano in condizioni anaerogiche, ma il Fe3+ legato all'enzima non è influenzato. ossigeno alla forma ridotta dell'enzima c favorisce la riossidazione dell'enzima. Il FAD e il Fe3+ legati vengono ridotti mediante l'aggiunta di nitrometano, che non è un substrato, in condizioni anaerobiche. La dialisi aerobica dell'enzima trattato con nitrometano provoca la riossidazione del solo Fe2+. Il ditionito di sodio riduce anche sia il FAD legato all'enzima che il Fe3+ in condizioni anaerobiche. Quando l'enzima viene dializzato contro tampone fosfato di potassio 10 mM (pH 7,0) immediatamente dopo la riduzione con ditionito, lo spettro di assorbimento simile a quello dell'enzima nativo è apparso con un ripristino concomitante di circa l'80% dell'attività. L'attività enzimatica è significativamente inibita da pirocatecolo-3,5-disolfonato sale disodico, 8-idrossichinolina, agenti riducenti come 2-mercaptoetanolo e HgCl2. Le costanti di Michaelis sono le seguenti: 2-nitropropano (2,13 X 10 (-2) M), nitroetano (2,43 X 10 (-2) M), 3-nitro-2-pentanolo (6,8 X 10 (-3) M) , 1-nitropropano (2,56 X 10(-2) M) e ossigeno (3,03 X 10(-4) M, con 2-nitropropano).
Purificazione e proprietà di due aminotransferasi aromatiche in Bacillus subtilis.Due enzimi che transaminano tirosina e fenilalanina in Bacillus subtilis sono stati purificati ciascuno oltre 200 volte e parzialmente caratterizzato. Uno degli enzimi, chiamato istidinol fosfato aminotransferasi, è attivo anche con l'imidazolo acetil fosfato come destinatario del gruppo amminico. Studi precedenti hanno dimostrato che i mutanti privi di questo enzima richiedono istidina per la crescita. I mutanti nell'altro enzima chiamato aminotransferasi aromatica sono prototrofi Nessun enzima è attivo su nessun altro substrato coinvolto nella sintesi degli aminoacidi. I due enzimi possono essere distinti in base a una serie di criteri. L'analisi di filtrazione su gel indica che le aminotransferasi aromatiche e istidinolfosfato hanno pesi molecolari rispettivamente di 63.500 e 33.000. Istidinolfosfato aminotransferasi è sensibile al calore, mentre l'aminotransferasi aromatica è relativamente stabile al calore, in particolare in la presenza di alfa-chetoglutarato. Entrambi gli enzimi mostrano la tipica cinetica di Michaelis-Menten nelle loro velocità di reazione. I due enzimi hanno un pH ottimale simile e impiegano un meccanismo d'azione ping-pong. I valori di Km per vari substrati suggeriscono che l'istidinol fosfato aminotransferasi sia l'enzima predominante responsabile delle reazioni di transamainazione nella sintesi di tirosina e fenilalanina. Questo enzima ha un'affinità 4 volte maggiore per la tirosina e la fenilalanina rispetto all'aminotransferasi aromatica. È stata osservata un'inibizione competitiva del substrato tra tirosina, fenilalanina e istidinol fosfato per l'istidinol fosfato aminotransferasi. Viene discusso il significato del fatto che un enzima della sintesi dell'istidina svolge un ruolo importante nella sintesi degli amminoacidi aromatici.
Interazioni degli ioni idrogeno della ferritina e dell'apoferritina della milza equina.Le interazioni della ferritina della milza equina e del suo derivato apoferritina con gli ioni H+ sono state studiate mediante potenziometria e spettrofotometria titolazione; per facilitare l'analisi dei dati, sono stati anche determinati i calori di ionizzazione su un intervallo di pH limitato e il contenuto di ammidi. Per ogni subunità di apoferritina, tutte le catene laterali di tirosina e cisteina, due delle nove catene laterali della lisina e almeno tre delle sei catene laterali dell'istidina si è riscontrato che le catene non titolavano, si propone un'analisi preliminare ma coerente dei dati di titolazione La curva di titolazione della ferritina era identica a quella dell'apoferritina nell'intervallo di pH da 5,5 a 3. Inoltre, nelle condizioni utilizzate, le reattività di ferritina istidine a bromoacetato e di ferritina lisine a formaldeide erano identiche a quelle in apoferritina. Al di sopra di pH 8, si verifica una titolazione tempo-dipendente del nucleo di ferritina che impedisce il confronto del tit curve di razione delle due proteine in questa regione. Tuttavia, nelle regioni del pH da 5,5 a 7,5, due gruppi extra per subunità titolano in modo reversibile in ferritina rispetto all'apoferritina. Inoltre, sebbene i punti isoionici della ferritina e dell'apoferritina siano identici nell'acqua, il punto isoionico della ferritina è di 0,5 unità pH inferiore a quello dell'apoferritina in 0,16-1 M KCl. I diversi effetti di KCl e NaCl sulle due proteine indicano la presenza di siti di legame cationico nella ferritina che sono assenti nell'apoferritina ed eventualmente anche la presenza di siti di legame anioni nell'apoferritina che sono occupati nella ferritina dagli anioni del core. La differenza tra i punti isoionici delle due proteine in KCl è stata interpretata per indicare la presenza di circa 2 residui di fosfato per subunità di ferritina che fungono da siti di legame dei cationi e che sono caricati negativamente al punto isoionico in KCl. Questi fosfati possono anche rappresentare i residui aggiuntivi che titolano nella ferritina tra pH 5,5 e 7,5, o possono interagire con residui carichi positivamente sulla superficie interna del guscio di ferritina, o entrambi.
ATPasi di trasporto del calcio del reticolo sarcoplasmatico cardiaco del cane. Un confronto con quello del reticolo sarcoplasmatico del muscolo scheletrico veloce di coniglio.Definire il meccanismo responsabile del lento velocità di trasporto del calcio da parte del reticolo sarcoplasmatico cardiaco, le proprietà cinetiche dell'ATPasi Ca2+-dipendente dei microsomi cardiaci canini sono state caratterizzate e confrontate con quelle di una preparazione comparabile dal muscolo scheletrico veloce di coniglio. caratteristiche di stabilità di un acilfosfato, si forma durante l'idrolisi dell'ATP dai microsomi cardiaci. Ca2+ è richiesto per la formazione di E circa P e Mg2+ accelera la sua decomposizione. La concentrazione di Ca2+ richiesta per l'attivazione semimassima dell'ATPasi è 4,7 +/- 0,2 muM per microsomi cardiaci e 1,3 +/- 0,1 muM per microsomi scheletrici a pH 6,8 e gradi 0. L'attività dell'ATPasi a concentrazioni saturanti di Ca2+ ionizzato e pH 6.8, espressi come idrolisi di ATP per mg di proteina, sono da 3 a 6 volte inferiori per i microsomi cardiaci rispetto ai microsomi scheletrici in una varietà di condizioni testate. Il valore Km apparente per MgATP ad alte concentrazioni in presenza di concentrazioni saturanti di Ca2+ ionizzato è 0,18 +/- 0,03 ms a pH 6,8 e 25 gradi. La velocità massima dell'attività dell'ATPasi in queste condizioni è 0,45 +/- 0,05 mumol per mg al minuto per i microsomi cardiaci e 1,60 +/- 0,05 mumol per mg al minuto per i microsomi scheletrici. Il livello massimo allo stato stazionario di E circa P per i microsomi cardiaci, 1,3 +/- 0,1 nmol per mg, è significativamente inferiore al valore di 4,9 +/- 0,2 nmol per mg per i microsomi scheletrici, in modo che il numero di turnover del Ca2+- ATPasi dipendente dei microsomi cardiaci, calcolato come il rapporto tra l'attività dell'ATPasi e il livello E circa P è simile a quello dell'ATPasi scheletrico. Questi risultati indicano che il tasso relativamente lento di trasporto del calcio da parte dei microsomi cardiaci, rispetto a quello dei microsomi scheletrici, riflette una minore densità di siti di pompaggio del calcio e una minore affinità per il Ca2+ per questi siti, piuttosto che un tasso di turnover inferiore.
Purificazione e caratterizzazione della L-asparaginasi con attività anti-linfoma da Vibrio succinogenes.Homogeneols L-asparaginase con attività anti-linfoma è stata preparata da Vibrio succinogenes, un batterio anaerobico del rumine bovino. È stata ottenuta una resa complessiva di L-asparaginasi pura dal 40 al 45% e un'attività specifica di 200 +/- 2 UI per mg di proteina. L'enzima puro può essere conservato a -20 gradi per almeno 3 mesi senza perdita di attività. Il punto isoelettrico della L-asparaginasi è 8,74. Non sono stati rilevati gruppi di carboidrati, fosforo, triptofano, disolfuro o sulfidrile. L'enzima ha un peso molecolare di 146.000 e un peso di subunità di circa 37.000. Il Km dell'enzima per L-asparagina è 4,78 X 10(-5) M e il pH ottimale della reazione L-asparaginasi è 7,3. La D-asparagina è stata idrolizzata al 6,5% della velocità trovata con la L isomero L-Glutammina e una varietà di altre ammidi non sono state idrolizzate a un r. significativo mangia; l'attività dell'enzima per la L-glutammina era da 130 a 600 volte inferiore a quella di altre L-asparaginasi di origine batterica terapeuticamente efficaci. La L-asparaginasi di V. succinogenes è immunologicamente distinta dalla L-asparaginasi (EC-2) di Escherichia coli.
Ridotta attività della nicotinammide adenina dinucleotide ossidasi nelle membrane e nel citoplasma di Acholeplasma laylawii e Mycoplasma mycoides subsp. capri.Le proprietà della nicotinammide ridotta legata alla membrana adenina dinucleotide (NADH) ossidasi di Acholeplasma laylawii sono stati confrontati con quelli della corrispondente attività citoplasmatica di Mycoplasma mycoides subsp. capri. Le notevoli differenze di pH ottimale, suscettibilità a inibitori e detergenti e inattivazione termica tra l'attività NADH ossidasi, con ossigeno come un accettore di elettroni e l'attività NADH ossidoreduttasi, con il diclorofenolo indofenolo (DCPIP) come accettore di elettroni alternativo, supportano la presenza di più di una proteina catalitica sia nel sistema enzimatico legato alla membrana che in quello solubile. La rilevazione di più di una banda positiva per la reazione NADH-nitroblue tetrazolio ossidoreduttasi all'elettroforesi delle membrane di A. laylawii o del citoplasma di M my coides subsp. anche capri punta nella stessa direzione. Il sistema enzimatico legato alla membrana differiva, tuttavia, da quello solubile perché aveva un rapporto inferiore tra attività ossidasi e attività ossidoreduttasi, e perché era meno suscettibile all'inattivazione termica e più facilmente incorporato nelle membrane riaggregate. Inoltre, l'attività specifica del sistema enzimatico di membrana aumentava con l'invecchiamento della coltura, mentre quella del sistema solubile diminuiva con l'invecchiamento della coltura. Si suggerisce che la diversa posizione nella cellula potrebbe essere responsabile di alcune delle differenze tra l'attività della NADH ossidasi legata alla membrana di A. laylawii e quella trovata nel citoplasma di M. mycoides subsp. capri.
Aspetti unici della regolazione dell'aspartato transcarbamilasi di Serratia marcescens.Aspartato transcarbamilasi (ATC ase; EC 2.1.3.2) da Serratia marcescens HY ha stato purificato 134 volte. Le sue proprietà sono uniche. A differenza dell'ATCasi di Escherichia coli e Salmonella typhimurium, l'attività enzimatica di S. marcescens HY non è inibita a feedback da alcun effettore nucleotidico purinico o pirimidinico, ma l'enzima è attivato sia dalla citidina 5 \'-trifosfato e adenosina 5\'-trifosfato Come l'ATCasi di E. coli e S. typhimurium, l'adenosina 5\'-trifosfato altera la [S]0,5 dell'enzima e, al contrario, la citidina 5\'-trifosfato non altera la [S]0.5 ma, invece, altera la Vmax Come è stato dimostrato sia per E. coli che per S. typhimurium, la sensibilità dell'effettore può essere selettivamente dissociata dall'attività catalitica mediante trattamento con calore, paracloromercuribenzoato o neoidrina. enzima dissociato possiede tre e volte maggiore attività specifica rispetto all'enzima nativo. Il coefficiente di sedimentazione dell'enzima nativo è di circa 11,4S, mentre l'enzima dissociato ha un valore di 6,0S. Mentre è stato possibile ricostituire gli enzimi ATCasi di E. coli e S. marcescens dalle proprie subunità omologhe, non è stato possibile creare enzimi ibridi di subunità catalitiche ed eterologhe regolatorie l'una dall'altra. Non è stato possibile rilevare la repressione della formazione di ATCasi dopo la crescita di ceppi prototrofi di S. marcescens HY integrati con 200 tazze di uracile per ml, ma è stata osservata una riduzione di otto volte dopo la sospensione dell'uracile negli auxotrofi pirimidinici.
Evidenza di un potenziale di membrana negativo e del movimento di C1- contro il suo gradiente elettrochimico nell'ascomicete Neocosmospora vasinfecta.Gli ioduri di tre liposolubili cationi (dibenzildimetilammonio; tribenzilmetilammonio, TBMA+; etildimetilbenzilammonio) sono stati sintetizzati dalla reazione di metile marcato con 14C o ioduro di etile marcato con 14C con l'appropriato secondario di ammina terziaria e utilizzati nel tentativo di misurare la differenza di potenziale elettrico transmembrana in Neocosmospora. contenenti alti livelli di Na+ accumulavano quantità misurabili di questi cationi e solo al di sopra di pH 6. L'assorbimento era ridotto in presenza di K+, Na+, Mg2+ esogeno o tris(idrossimetil)amminometano. La velocità di assorbimento di TBMA+ era proporzionale alla sua concentrazione tra 46 e 427 muM. Né il tasso né l'entità dell'assorbimento di TBMB+ sono stati notevolmente influenzati dalla presenza di un eccesso di cinque volte di dibenzildimetilammonio o di e tildimetilbenzilammonio, anche se questi cationi erano essi stessi accumulati. Il disaccoppiatore m-clorofenilidrazone ha indotto la perdita di TBMA+ precedentemente accumulato dal micelio. L'anaerobiosi e la temperatura fredda (5 gradi C) hanno entrambi inibito l'assorbimento di TBMA+ ma non hanno indotto la perdita di TBMA+ accumulato in precedenza. L'assorbimento di cationi lipofili da parte del micelio ricco di Na+ indicava un potenziale elettrico transmembrana minimo da -60 a -70 mV (interno negativo). L'assorbimento netto di questi cationi sembrava essere fortemente influenzato dalla disponibilità di cationi scambiabili endogeni e dalla presenza di altri cationi esogeni, nonché dal potenziale di membrana. Nonostante queste limitazioni, il trasporto di C1- da parte di micelio ricco di Na+ sembrava avvenire contro il gradiente elettrochimico per C1-.
L'identificazione cromatografica su strato sottile di alcune ammine simpaticomimetiche.Il comportamento cromatografico su strato sottile di alcune ammine simpaticomimetiche in presenza di acidi in sistemi solventi neutri e organici è Le ammine simpaticomimetiche sono state sciolte in 0,1 N HCl o etanolo e trattate con reagenti verde bromocresolo o p-nitrobenzoil cloruro su fogli di fibra o lastre di vetro prerivestite. Sono stati testati sistemi solventi a due, 3 e 4 componenti. l'acetato di etile ha fornito 2 punti per ogni standard di ammina; i punti più polari sono stati separati in modo soddisfacente. Le ammine nei prodotti farmaceutici non sono state separate da alcun sistema di solventi testato.
[Aspetti farmacologici nella gestione delle malattie dell'orecchio interno (autore\'s transl)].La nostra conoscenza degli effetti dei farmaci sull'orecchio interno è estremamente insufficiente rispetto ai loro effetti su altri organi. Il ruolo dei farmaci comunemente raccomandati per la terapia dei disturbi dell'orecchio interno (come procaina, antistaminici, diuretici, osmotici, corticoidi e sostanze che modificano la viscosità del sangue) deve ancora essere chiarito dal momento che la gli effetti clinici di questi farmaci o sostanze vasoattive spesso non possono essere confermati da studi sperimentali. Nelle circostanze attuali, l'uso della terapia definitiva per prevenire la sordità ha solo un'applicazione limitata, come nella sostituzione dell'ormone tiroideo per prevenire la sordità da cretinismo.
[Una procedura di istofluorescenza migliorata per tessuti inclusi in paraffina liofilizzati basati sulla perfusione combinata di formaldeide-acido gliossilico con alto contenuto di magnesio e pH acido].E' descritta una tecnica per la visualizzazione altamente sensibile e precisa dei sistemi di catecolamine centrali in sezioni in paraffina di tessuto liofilizzato. La procedura si basa sulla perfusione dell'animale con una soluzione contenente formaldeide e/o acido gliossilico, in presenza di un alto contenuto di magnesio (40 g di soluzione MgSO4/150 ml) e pH acido. Il tessuto perfuso viene rapidamente congelato, liofilizzato, trattato con vapori di formaldeide (a +80 gradi C per 1 h), immerso in parffina sotto vuoto, e infine La presente tecnica ha una sensibilità per i sistemi contenenti dopamina e noradrenalina che è paragonabile a quella della tecnica dell'acido gliossilico-Vibratomo, che utilizza tessuto fresco, perfuso con acido gliossilico. Pertanto, le vie assoniche preterminali sono sono fluorescenti in tutta la loro estensione ei numerosi nuovi sistemi terminali, scoperti con il metodo dell'acido gliossilico-Vibratomo, sono ben dimostrabili. Il metodo è anche molto utile per lo studio dei corpi cellulari e dei loro processi dendritici. I sistemi di fibra di catacolamina vengono visualizzati senza alcun segno di diffusione e con una ricchezza di dettagli. Negli animali pretrattati con L-triptofano e MAO-inibitore la tecnica è utile anche per studi sui sistemi centrali contenenti indolamina.
Idrolisi dell'adenosina trifosfato nei tessuti dentali di ratto. Uno studio istochimico delle dipendenze ioniche.L'effetto delle procedure di decalcificazione, riattivazione e attivazione dell'EDTA sull'idrolisi di ATP è stato studiato istochimicamente nello sviluppo di tessuti dentali nel ratto. I mezzi di incubazione contenevano citrato di piombo a pH alcalino e nitrato di piombo a pH neutro, e i risultati con ATP come substrato sono stati confrontati con quelli ottenuti con beta-glicerofosfato. La dipendenza ionica di L'idrolisi dell'ATP poteva essere accertata solo in sezioni decalcificate. Come nei precedenti studi sull'idrolisi del beta-glicerofosfato nei tessuti dentali, questa idrolisi poteva essere prontamente riattivata mediante preincubazione delle sezioni in una serie di soluzioni 0,1 M di cationi bivalenti, essendo Zn2+ il Questo trattamento è stato ora trovato anche per dare origine a un'idrolisi di ATP, che si è verificata senza la necessità di attivare ioni nel mezzo di incubazione. Questo ATP idrolizza Si dovrebbe quindi descrivere come aspecifico e, in termini di dipendenza ionica, come dovuto ad un metalloenzima, cioè la fosfatasi alcalina. L'attivazione dell'idrolisi ione dipendente dell'ATP nei tessuti dentali è stata trovata nei vasi sanguigni e nella parte apicale degli ameloblasti secretori. Il primo è stato attivato da Mg2+, Ca2+ e Mn2+, il secondo da Ca2+ e, quasi nello specifico, da Sr2+. La preincubazione con Zn2+ ha sempre inibito l'idrolisi ione-dipendente dell'ATP nei tessuti dentali.
Studi microspettrofluorometrici rapidi in cellule EL2 a seguito di accumulo intracellulare di dibenzocarbazoli.Le osservazioni microspettrofluorometriche sono state effettuate in cellule cancerose di ascite EL2 e dibenzo(a,e) cellule EL2 coltivate con fluorantene (diB(a,e)F), dopo trattamento (5 min) con tre dibenzocarbazoli (1,2,7,8; 1,2,5,6 e 3,4,5,6). Dopo la microiniezione di glucosio-6-P che porta alla riduzione di NAD(P), viene registrata una sequenza di spettri di differenza (dopo il substrato meno prima) Nelle cellule non trattate con dibenzocarbazolo, riduzione massima (NAD(P) (massimo di emissione a 465- 475 nm) viene raggiunto entro 5 s, seguito da un graduale ritorno alla fluorescenza iniziale entro 20-200 s (più veloce nelle cellule coltivate con diB(a,e)F). intensità dello spettro di differenza fino a circa 300-500 s. Inizialmente l'aumento è più predominante nella regione intorno a 460-470 nm, ma acquista poi risalto i n la regione di lunghezza d'onda più corta (420-430 nm) caratteristica dell'idrocarburo (aumento più elevato e costante del diB(a,e)F coltivato con 3,4,5,6, trattato con dibenzocarbazolo). Successivamente si ha una graduale diminuzione della fluorescenza che può o meno tornare al livello iniziale. Gli spettri di aumento osservati richiedono una valutazione in termini di possibili componenti (ad esempio una miscela di NAD(P)H e idrocarburi, cambiamenti di legame, successione di metaboliti fluorescenti).
[Prolattina nella riproduzione maschile].La prolattina (PRL), un ormone peptidico dell'ipofisi, diventa più interessante, poiché può essere determinata da radioimmunologico. Il rilascio di prolattina è controllato da due fattori non ancora identificati, il fattore di rilascio della prolattina e il fattore di inibizione della prolattina. Quest'ultimo è predominante. Molte sostanze farmacologiche possono alterare il rilascio. I normali livelli sierici nell'uomo sono 6 -13 ng/ml La prolattina colpisce molti organi, fe rene, mamma, ovaio, testicolo, epa e pelle Per i test clinici l'aumento dei livelli sierici dopo TSH o clorpromcina e il calo dopo l'applicazione di 2-brom-alfa-ergocryptin viene utilizzato. Livelli sierici aumentati si riscontrano in pazienti con tumori che producono prolattina. Nel maschio questo è seguito da disturbi della potenza sessuale. Le relazioni tra la prolattina e l'infertilità maschile della ginecomastia non sono ancora note.
Studi a tempo pieno sulla glutammato deidrogenasi del fegato bovino. Simulazione dell'inibizione da parte del piridossal-5\'-fosfato.Inibizione della glutammato deidrogenasi del fegato bovino da piridossal-5\'-fosfato è stato studiato misurando il corso a tempo pieno dell'ossidazione di NADPH. Le curve di avanzamento sono state determinate prima e dopo l'incubazione dell'enzima con PLP in presenza di concentrazioni saturanti di alfa-chetoglutarato e ione ammonio, a pH 7,4 e 25 gradi C. I dati sono stati adattati all'equazione di Michaelis-Menten integrata e derivato un modello di inibizione. Secondo il modello, il PLP inibisce l'enzima in modo non competitivo, mediante la formazione reversibile dei complessi E--PLP ed E- -PLP--NADPH; anche l'ossidazione di NADPH è inibita da NADP+. Dopo l'incubazione con PLP, le costanti di dissociazione di E--NADPH e E--NADP+ (Km e Kp) mostrano una netta diminuzione, mentre la velocità massima di l'ossidazione (Vm) è aumentata. Le costanti di inibizione fo r sono stati calcolati anche i PLP.
Una rassegna di farmaci psicotropi e glaucomi.Quattro gruppi generali di farmaci psicotropi vengono esaminati in relazione ai possibili effetti avversi sulla pressione intraoculare. Dopo un breve discussione dei vari meccanismi del glaucoma, vengono fornite e discusse informazioni sia generali che specifiche relative a preparati antipsicotici, antidepressivi, antiparkinsoniani e ansiolitici di una varietà di strutture chimiche e utilità. Il consenso degli autori è che con alcune garanzie di base praticamente tutti dei farmaci studiati sono accettabilmente sicuri da prescrivere anche in pazienti con glaucoma diagnosticato.
Gli effetti degli allucinogeni sulle scimmie cieche.Due scimmie cieche sono state studiate con un profilo osservativo che in precedenza aveva dimostrato di distinguere gli effetti degli allucinogeni da quelli di altre classi di farmaci. La dietilamide e la dimetiltriptamina dell'acido lisergico possono essere distinte da soluzione salina, clorpromazina, d-anfetamina solfato e dietilamide dell'acido bromo-lisergico per l'aumentata frequenza di spasmi, stereotipia, protuberanza e tracciamento. Gli allucinogeni hanno anche prodotto aumenti drammatici nell'esplorazione e nei comportamenti correlati normalmente osservati solo in risposta a stimoli visivi o uditivi reali. Questi comportamenti sono discussi in termini di somiglianza con i comportamenti osservati con le scimmie vedenti in ambienti luminosi e bui.
Frammentazione termica di Escherichia coli beta-galattosidasi. Isolamento e caratterizzazione di una frazione polipeptidica alfa-complementante e di due non-complementanti.Escherichia coli beta carbossimetilato -galattosidasi EC 3.2.1.23 potrebbe essere scomposta in polipeptidi di dimensioni abbastanza uniformi (peso molecolare medio circa 22.000 dalton) mediante riscaldamento per meno di 8 h a 100 gradi C e pH 7,5 IN 8 M-urea. Utilizzando la cromatografia di fosfocellulosa in gradienti NaCl-urea, la miscela polipeptidica risultante potrebbe essere risolta in tre frazioni essenzialmente omogenee mediante elettroforesi su gel su disco in urea a diversi valori di pH e mediante focalizzazione isoelettrica. Una di queste frazioni era attiva come alfa-donatore in complementazione in vitro di beta- attività galattosidasica con il mutante M15 di Escherichia coli; questa attività è stata ampiamente mantenuta dopo la scissione del CNBr. Tutte e tre le frazioni trasportavano arginina come amminoacido carbossi-terminale. Nessuna quantità significativa di sp ecifico amino potrebbe essere rilevato in posizione NH2-terminale.
La distribuzione dell'antigene di superficie dell'epatite B in Africa e ai tropici: rapporto di uno studio di popolazione in Nigeria.Questo studio preliminare è stato progettato per esaminare la distribuzione dell'antigene di superficie dell'epatite B (HBsAg) in due gruppi contrastanti in un'area urbana situata nella fascia della foresta tropicale Il campione dell'area tradizionale rappresenta una popolazione di basso status socio-economico, che vive nelle baraccopoli centrali della città, e il campione dell'area periferica rappresenta una popolazione di alto status socio-economico che vive in ambienti moderni e puliti. Il tasso di prevalenza di HBsAg per fissazione del complemento (FC) era del 12-6 per cento in entrambe le aree. Non c'era differenza statisticamente significativa tra i due gruppi rispetto alla prevalenza dell'antigene Quando entrambi i gruppi sono stati combinati, non è stata trovata alcuna relazione significativa tra la presenza dell'antigene e il sesso, l'età, lo stato civile, il livello di istruzione, l'occupazione, il reddito e una presunta ex esposizione all'antigene da iniezioni, cure odontoiatriche, esami del sangue, operazioni chirurgiche, donazioni di sangue, contrassegni tribali, (medicinali), tatuaggi e cosmetici, smaltimento insalubre delle feci, dubbie fonti di approvvigionamento idrico ed esposizione alle zanzare. Non è stata trovata alcuna associazione con il genotipo.
Immunità alle infezioni da Mycobacterium leprae in topi stimolate da M. leprae, BCG e reazioni del trapianto contro l'ospite.Infezioni di topi con Mycobacterium leprae in un cuscinetto del piede posteriore li ha immunizzati contro una seconda infezione nell'altro cuscinetto del piede posteriore. I bacilli purificati raccolti dalla prima infezione hanno prodotto immunità anche quando l'iniezione nei cuscinetti del piede di topi precedentemente non infetti. Le iniezioni di BCG hanno offerto una protezione simile, ma non avevano adiuvante effetto su M. leprae. M. duvali, un micobatterio coltivabile che è segnalato per essere più strettamente correlato antigenicamente a M. leprae rispetto a BCG, ha fornito una protezione molto inferiore contro M. leprae challenge rispetto a BCG. Inoltre, quando M. duvali era miscelato con BCG, non era più efficace del solo BCG. Le reazioni del trapianto contro l'ospite, indotte da iniezioni di cellule della milza dei genitori negli ibridi F1, non fornivano alcuna protezione contro M. tuberculosis e M. marinum challenge. inst M. leprae in un esperimento ma non in un altro con un programma diverso. Le cellule della milza allogeniche hanno avuto un effetto protettivo quando iniettate localmente nel cuscinetto del piede infetto. L'effetto prodotto da queste iniezioni di cellule della milza era un ritardo nella comparsa della crescita batterica; tuttavia, non vi è stata alcuna diminuzione del tasso di crescita logaritmica quando è apparso e nessuna riduzione dell'eventuale livello di plateau.
Attività battericida del siero nel granchio a ferro di cavallo, Limulus polyphemus.Il siero del granchio a ferro di cavallo, Limulus polyphemus, è stato esaminato per l'attività battericida contro cinque specie di batteri. La maggiore attività è stata riscontrata contro Pseudomonas putida e Flavobacterium sp. ; con i primi, diluizioni del siero fino a 1:20 erano in grado di ridurre la conta vitale del 50% entro 2 ore. Un'attività battericida di entità significativamente inferiore è stata dimostrata contro Serratia marcesencs e Salmonella minnesota. Non è stata osservata alcuna uccisione quando è stato utilizzato l'agente patogeno dell'aragosta Aerococcus viridans (precedentemente Gaffkya homari). L'attività cicida contro Flavobacterium sp. è rimasta relativamente costante per 6 mesi.
Purificazione e caratterizzazione su larga scala dell'esotossina di Pseudomonas aeruginosa.L'esotossina (PE) di Pseudomonas aeruginosa è stata purificata da colture da 50 litri mediante una semplice procedura in tre fasi, che produce 135 mg di proteina essenzialmente omogenea. Nella diffusione del gel di Ouchterlony, il PE produce una singola linea che non interagisce con una linea di precipitina tossina difterica-antitossina. La proteina ha un peso molecolare di 66.000, un punto isoelettrico di 5.1, arginina N-terminale e quattro ponti disolfuro. La composizione amminoacidica non mostra alcuna apparente somiglianza con quella della tossina difterica. La dose letale media di questa preparazione di PE nei topi che pesano 20 g è 0,1 mug. La dose letale media in 350 -g ratti è 20 mug. La citotossicità del PE per i fibroblasti di topo L929 è completamente neutralizzata da piccole quantità di specifica antitossina pony. L'esotossina possiede attività di adenosina difosfato-ribosilazione. Sia citotossica che adenosina difosfato-ribosilato è dimostrato che le attività ioniche sono proprietà della proteina da 66.000 dalton intatta.
Analisi dell'immunosoppressione generata dalla reazione del trapianto contro l'ospite. II. Caratterizzazione della cellula di soppressione e del suo meccanismo d'azione.Cellule della milza da (CBA X C57/BL) I topi F1 sottoposti a reazione del trapianto contro l'ospite (GVH) indotta dall'iniezione di cellule parentali 7-14 giorni prima sono in grado di sopprimere una risposta immunitaria da parte delle cellule della milza F1 normali o innescate agli eritrociti di pollo e al levan in vivo ed eritrociti di pecora in vitro. Le cellule in queste milze GVH che erano responsabili della soppressione erano sensibili al trattamento con siero anti-0, resistenti all'irradiazione di 900 rad in vivo e non trattenute dalle colonne anti-immunoglobuline. L'attività soppressiva in vitro è stata presente solo nella frazione non aderente di queste sospensioni di cellule GVH. Inoltre, la frazione di cellule T, purificata mediante cromatografia di affinità, ha soppresso la risposta in vitro delle cellule F1 normali impoverite dai macrofagi a DNP-levan. y che le cellule T soppressorie generate dalla reazione GVH possono influenzare le funzioni delle cellule B direttamente senza la partecipazione di macrofagi intermedi. Le cellule della milza di topi F1 (CBA X C57/BL) sottoposti a reazione GVH indotta da cellule C57/BL sono state impoverite del loro contenuto di F1 mediante trattamento con alloantisiero anti-CBA. L'attività soppressiva del componente donatore residuo era ancora espressa contro altre cellule F1 (AKR X C57/BL) che erano H-2 compatibili con l'ospite originale, ma non contro cellule H-2 incompatibili (DBA/1 X C57/BL ) F1. Tuttavia, questi ultimi sono stati soppressi in presenza di cellule F1 (CBA X C57/BL). Pertanto, l'interazione delle cellule T del donatore con le cellule bersaglio F1 contenenti quegli antigeni H-2 verso cui sono sensibilizzate è obbligatoria per la successiva manifestazione di attività immunosoppressiva. Le cellule GVH hanno soppresso la risposta delle cellule F1 innescate nelle doppie camere di Marbrook quando le due popolazioni sono state separate da una membrana impermeabile alle cellule, a condizione che la sospensione GVH contenesse cellule F1 a cui le cellule T del donatore erano state sensibilizzate. Ciò suggerisce che i fattori solubili sono coinvolti nel meccanismo dell'immunosoppressione indotta da GVH.
Sostanza a reazione lenta come mediatore preformato dal polmone umano.Gli omogeneizzati dal polmone umano contenevano una sostanza a reazione lenta preformata (pSRS). Il modello di contrazione sull'ileo di cavia da pSRS era indistinguibile da quella di SRS-A. L'attività di pSRS non poteva essere attribuita alla presenza di ioni K+, Na+, Ca2+ e Mg2+, o qualsiasi prostaglandina incluso PGF2 o il suo derivato 15-oxo. Come con SRS-A, pSRS potrebbe essere assorbito su Amberlite XAD-2 e acido silicico. Entrambi sono stati eluiti dal primo con l'80% di etanolo e dal secondo con una miscela di etanolo, ammoniaca e acqua. Sia pSRS che SRS-A erano resistenti all'azione di NaOH mentre le loro attività sono state distrutte dall'ebollizione in HCl. Arylsulphatase II B ha distrutto le attività di pSRS e SRS-A. Un antagonista di SRS-A, FPL55712, ha inibito l'azione di pSRS a concentrazioni comparabili a quella di SRS-A. Questi esperimenti suggeriscono che pSRS e SRS-A sono identici us SRS unisce istamina e ECF-A come mediatore preformato. Sebbene SRS fosse presente in uno stato preformato, la quantità di materiale estraibile è stata più che raddoppiata dalla reazione anafilattica. L'estrazione di una sostanza a reazione lenta dal polmone umano senza apparente necessità di antigene o anticorpo indica un possibile ruolo di questo mediatore nelle reazioni infiammatorie evocate da meccanismi indipendenti dalle IgE e da altri anticorpi sensibilizzanti i tessuti.
[Approccio a un metodo pratico per lo screening e l'identificazione dei generi di microrganismi dall'urina (autore\'s transl)].In questo studio l'autore ha riferito su un nuovo pratico sistema per lo screening e l'identificazione degli agenti microbici che causano infezioni del tratto urinario. Questo sistema è composto da una combinazione di 3 procedure di screening (valore pH + nitrito-test + catalasi-test) e 8 terreni di coltura selettivi ai fini del genere identificazione entro 24 ore (Uripret-G). Sono state studiate un totale di 130 colture. I microrganismi impiegati sono stati recuperati principalmente da campioni di urina. Esse includevano le seguenti specie: Candida albicans, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Proteus inconstans, Proteus mirabilis, Proteus morganii, Proteus rettgeri, Proteus vulgaris, Serratia liquefaciens, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus faecalis e Streptococcus faecium. Utilizzando colture codificate sono state simulate non solo monoinfezioni ma anche multiinfezioni nei campioni di urina. Nelle circostanze dell'indagine è stato possibile, con l'aiuto del nuovo sistema, reidentificare i generi di tutti tranne due dei 130 microrganismi impiegati.
Sintesi della subunità alfa della gonadotropina corionica umana da presunte cellule HeLa.Diverse linee cellulari, originariamente ritenute derivate da una placenta umana a termine, ma possibilmente contaminate da HeLa, sono state studiate. Queste cellule secernono una proteina indistinguibile immunochimicamente dalla subunità alfa della gonadotropina corionica ma non dalla subunità beta della gonadotropina corionica o dal lattogeno placentare. La gonadotropina corionica completa è stata rilevata ma ammontava a meno dell'1% del livello della subunità alfa. Le cellule producono anche una fosfatasi alcalina simile alla fosfatasi alcalina placentare in proprietà immunochimiche, elettroforetiche su gel e di denaturazione del calore. Inducono la crescita del tumore quando inoculate in topi nudi. Queste cellule sono aneuploidi e hanno un numero di cromosomi modello di 66. In queste cellule sono presenti i comuni marcatori cariologici HeLa, designati 1, 2 e 3, e la glucosio-6-fosfato deidrogenasi di tipo A. Le cellule HeLa non hanno pre è stato ampiamente dimostrato che secernono la subunità alfa dell'hCG.
Cellule epatiche di ratto in coltura: effetto di conservazione, coltura a lungo termine e trasformazione su alcuni livelli di enzimi.Aril idrocarburo idrossilasi (AHH) e Le attività della tirosina aminotransferasi (TAT) sono state determinate in linee cellulari di fegato di ratto dopo conservazione congelata, coltura a lungo termine e trasformazione in vitro. I livelli di attività dell'AHH dopo 17 mesi in conservazione congelata erano paragonabili ai livelli prima del congelamento. Durante la coltura a lungo termine i livelli di AHH delle linee cellulari tendevano a diminuire. Le linee trasformate avevano livelli variabili di attività AHH. Le linee cellulari conservavano un'attività TAT misurabile dopo la coltura a lungo termine e la conservazione congelata. L'attività TAT delle cellule trasformate era paragonabile a quella delle linee normali. Congelato a lungo lo stoccaggio non ha indotto la trasformazione fino a un anno.
Influenza di varie etichette fluorescenti e non fluorescenti sulla cinetica della formazione complessa di alfa-chimotripsina con inibitore basico della tripsina pancreatica (Kunitz).L'associazione dell'alfa-chimotripsina con l'inibitore basico della tripsina pancreatica è stata studiata utilizzando segnali estrinseci prodotti da marcatori fluorescenti e non fluorescenti. I coloranti reattivi erano legati covalentemente alle proteine nello stato complessato, in cui la regione di legame era protetta. I segnali erano sufficientemente grandi per misurare la formazione complessa a concentrazioni proteiche di 10 (-9) M per fluorescenza e fino a 10 (-6) M per assorbimento. Pertanto, l'associazione e la dissociazione potrebbero essere seguite su un ampio intervallo di concentrazione. È stata osservata una buona corrispondenza tra dati che sono stati ottenuti con differenti marcatori e con valori pubblicati per le proteine non marcate. Le differenze esistenti potrebbero essere spiegate da differenti condizioni tampone usate dai differenti autori. Inoltre la dipendenza dal pH delle costanti di velocità di dissociazione è stata sostanzialmente inalterata dall'introduzione delle etichette. I grandi segnali hanno permesso una misurazione diretta delle costanti di equilibrio di dissociazione, anche a pH elevato, a cui sono nell'intervallo di 10(-8)M. Le costanti di legame determinate sperimentalmente erano in accordo con quelle calcolate dalle costanti di velocità. La dipendenza dalla temperatura delle costanti di legame ha rivelato una piccola variazione di entalpia positiva e pH-dipendente [deltaHo = 4,0 kcal/mol (16,7 kJ) a H 7,0[. I risultati dimostrano che l'etichettatura può essere eseguita in modo tale che i parametri di equilibrio e cinetici del sistema studiato non siano significativamente influenzati.
Segnali estrinseci per il monitoraggio della reazione di associazione delle proteine introdotte da etichette fluorescenti e non fluorescenti.Due etichette dansyl note (I, II) e L'acido 5-[2-(iodoacetamido)etilamino]-1-naftalen-solfonico (III) e tre nuovi coloranti azoici (IV - VI) sono stati attaccati covalentemente all'alfa-chimotripsina e all'inibitore basico della tripsina pancreatica da quattro diversi gruppi reattivi. Per proteggere la regione di contatto delle proteine è stato marcato il complesso delle due proteine, sfruttando il fatto che un gruppo sepolto nel complesso reagisce circa (vedi articolo) tempi più lenti di un gruppo sempre esposto ( K = costante di equilibrio di dissociazione, [C] = concentrazione del complesso). Il complesso è stato dissociato a pH 3 e le proteine etichettate sono state isolate mediante cromatografia su colonna. Erano completamente attive. L'etichetta dansile è stata immobilizzata quando introdotta dal cloruro di dansile ma altamente mobile quando collegato tramite il lon gruppo ger imidoestere (II). Sono stati studiati i cambiamenti di assorbimento e di fluorescenza che si verificano quando i partner di reazione etichettati in modo diverso si ricombinano. I cambiamenti nell'assorbimento (fino al 18%) erano principalmente dovuti alle interazioni del marcatore di una proteina con l'altra proteina. Si possono ottenere variazioni di fluorescenza fino al 480%. Sono stati interpretati in termini di un trasferimento di energia di tipo Förster tra le etichette del donatore e dell'accettore e le modifiche dell'assorbimento e della resa quantica dovute alle interazioni delle etichette con le proteine. Le costanti cinetiche della formazione complessa non sono seriamente alterate dalle etichette (Bösterling, B \& Engel, J. (1976) questo J. 357, 1297-1307, in seguito). Si conclude che la tecnica di etichettatura può essere di valore generale per gli studi cinetici e di equilibrio delle associazioni proteiche.
Attivazione della tirosina monoossigenasi del tessuto nervoso della lumaca (Helix pomatia) mediante calcio in vitro.Aggiunta di cloruro di calcio a preparazioni solubili di tirosina monoossigenasi dal cervello di lumaca sembra produrre un'attivazione dell'enzima quando dosato con concentrazioni subsaturanti del cofattore pteridina 6 MPH4 (2-ammino-4-idrossi-6-metiltetraidropteridina). Mentre si verifica un certo aumento dell'attività con cloruro di calcio a una concentrazione di 0,01 mM, l'attivazione è aumentata di circa il 100% a 1 mM e raggiunge un massimo a 5 mM (144%) dove rimane più o meno costante fino a 10 mM. Anche il cloruro di bario produce un effetto attivante sebbene sia molto meno pronunciato mentre il cloruro di magnesio è senza effetto. L'EGTA non ha un effetto diretto sull'enzima ma antagonizza l'attivazione prodotta dal cloruro di calcio L'attivazione della tirosina monoossigenasi da parte del calcio si riflette nelle variazioni delle proprietà cinetiche dell'enzima, diminuendo il Km da 43 muM a 19 muM per la tirosina e da 670 muM a 230 muM per il cofattore pteridina. Nessun cambiamento è stato osservato con i valori di V per il cofattore tirosina o pteridina. Si suggerisce che il calcio, che entra nel terminale nervoso durante la stimolazione nervosa, regoli il trasmettitore dopamina attivando l'enzima tirosina monoossigenasi che limita la velocità.
[Rilevazione di molteplici forme molecolari della gamma-glutamiltransferasi mediante cromatografia di affinità con concanavalina A (autore\'s transl)].La separazione di diverse forme della gamma-glutamiltransferasi è stata ottenuta utilizzando colonne di concanavalina A-Sepharose L'enzima del fegato adulto era legato totalmente alla lectina, mentre solo il 5% dell'enzima renale e il 50% della gamma-glutamiltransferasi pancreatica è stato adsorbito dalla concanavalina A. A causa di un maggiore contenuto di acido N-acetilneuraminico, l'enzima del fegato fetale non mostra alcuna affinità con la concanavalina A. Entro 8 giorni dalla nascita la gamma-glutamiltransferasi fetale ricca di acido N-acetilneuraminico viene sostituita dalla forma adulta.
[Focalizzazione isoelettrica di miscele proteiche complesse nell'intervallo dei nanogrammi in microgel (autore\'s trad.)].Descrizione di un metodo per la focalizzazione isoletrica di miscele proteiche complesse in 2, 5 o 10 mul capillari Per una separazione sono necessari solo 15-50 ng di una miscela proteica La focalizzazione isoelettrica è terminata dopo 10 min, la colorazione richiede 20 min e la decolorazione circa 30 min Utilizzando miscele definite di Servalyt da diversi intervalli di pH, la focalizzazione isoelettrica può essere adattata al campione proteico da frazionare. I picchi proteici separati dalla focalizzazione isoelettrica possono essere eluiti elettroforeticamente e per ulteriori analisi rifrattati direttamente in un gel microgradiente. La potenza di risoluzione della focalizzazione microisoelettrica è altrettanto buona della ben nota macroprocedura, come dimostrato dalla focalizzazione isoelettrica delle proteine idrosolubili del cervelletto e del cuore, del siero di ratto e umano e di un oncocitoma umano della tiroide.
[Funzione epatica in gravidanza non disturbata].Per valutare la funzionalità epatica durante la gravidanza le attività enzimatiche di GPT, GOT, GLDH, LDH, AP , LAP, gamma-GT e CHE sono stati determinati in 272 donne in gravidanza sane dalla 16a settimana di gestazione fino al termine Il range normale di GPT, GOT, GLDH, LDH, gamma-GT e CHE non differiva significativamente da quelli in non -donne in gravidanza. L'aumento di AP e LAP è condizionato dalla sintesi placentare. Le riserve funzionali di un fegato sano sono ovviamente sufficienti per compensare l'aumento delle richieste durante la gravidanza. L'aumento dell'attività enzimatica durante la gravidanza non è fisiologico, tranne che per l'aumento di AP e LAP.
[Agenti bloccanti i recettori beta in psichiatria (autore\'s transl)].Sono stati studiati gli effetti degli agenti bloccanti i recettori beta in varie indicazioni psichiatriche durante l'ultimo decennio. I risultati sono riassunti e discussi. Un giudizio finale sul valore dei beta-bloccanti all'interno del trattamento psicofarmacologico completo non è, allo stato, ancora possibile. Sembrano avere un certo effetto terapeutico in funzione del recettore beta periferico blocco, almeno sui disturbi funzionali psico- e neurovegetativi cardiaci e circolatori, nonché sugli stati d'ansia, nevrotici e da stress, entrambi presentanti sintomi prevalentemente somatici. In altri casi i risultati, allo stato attuale, presentano alcuni caratteristiche interessanti per ulteriori indagini.
[Danni teratogeni degli organi genitali maschili].1. Malformazioni e disturbi funzionali dei genitali maschili possono essere causati da teratogeni. 2. A una breve rassegna dello sviluppo prenatale indica i possibili siti di azione 3. Negli animali alcuni teratogeni distinti producono cellule tipiche della sindrome spermatogenetica malformativa Il Cyproteronacetat, un antiandrogeno, sopprime lo sviluppo degli organi genitali accessori e produce una femminilizzazione esterna. l'uomo, il criptorchidismo, l'agenesia delle vie spermatiche, l'anorchia e l'ipospadia sono note come malformazioni non ereditarie. 5. Viene discussa l'eziologia teratogena di alcuni disturbi della spermatogenesi.
Proteasi esocellulari di Serratia marcescens e loro tossicità per le larve di Galleria mellonella.Su 18 ceppi di Serratia marcescens che producono proteasi esocellulari il ceppo Serratia marcescens CCEB 415 è stato selezionato secondo esperimenti preliminari. Si potrebbe dimostrare che il treno esibisce attività proteolitica raggiungendo fino a 10 TU per 1 ml del filtrato di coltura in un mezzo con gelatina e peptone. Due enzimi proteolitici potrebbero essere dimostrati mediante inibitori specifici EDTA e diisopropifluorofosfato: metalproteasi con attività ottimale a pH 7,5 e serina proteasi con pH ottimale 10,9. Gli enzimi sono stati purificati su colonne di cellulosa Sephadex e DEAE e mediante elettroforesi su gel. Tuttavia, non è stato possibile separarli. La temperatura ottimale per l'attività della miscela dei due enzimi era di 50 gradi C, il peso molecolare variava intorno a 37000 (secondo la filtrazione su gel); alcune caratteristiche cinetiche di la loro attività è stata determinata. L'eccesso di substrato (caseina) ha inibito l'attività della miscela enzimatica. La tossicità delle proteasi espressa come unità LD50 equivale a 78 - 10(3) TU per larva di Galleria mellonella.
[Effetti sperimentali antiaritmici di un nuovo agente bloccante dei recettori beta-adrenergici, dl-l-(tert. butilammino)-3-[(2-propinilossi)fenossi] 2-propanolo cloridrato (dl Kö 1400-Cl)].Proprietà antiaritmica di un nuovo agente beta-bloccante adrenergico, dl-1-(tert. butilammino)-3[(2-propinilossi)fenossi] -2-propanolo cloridrato (Kö 1400-Cl) è stato studiato, utilizzando 1) aritmia indotta da ouabaina nella cavia, 2) aritmia indotta da aconitina nel ratto, 3) aritmia indotta da legatura in due fasi dell'arteria coronaria (Harris \'s) nel cane e 4) aritmia alotano-adrenalina nel cane ed è stato confrontato con quelli di propranololo, oxprenololo, procainamide e ajmalina. Procainamide e ajmalina hanno prodotto un marcato effetto protettivo contro l'extrasistole ventricolare indotta da aconitina, ma non erano così efficace contro la fibrillazione ventricolare indotta da aconitina, mentre l'oxprenololo e, in misura minore, il propranololo erano efficaci contro quest'ultimo tipo di aritmie da aconitina. Kö 1400-Cl si è rivelato inefficace. Tutti i composti testati hanno esercitato una spiccata azione protettiva contro l'ouabaina-aritmia. Mentre la procainamide era più efficace nell'abolire l'aritmia ventricolare dovuta alla legatura coronarica anche il primo giorno postoperatorio, il Kö 1400-Cl e il propranololo erano quasi inefficaci il primo giorno. Anche in seconda giornata postoperatoria gli effetti antiaritmici di questi due beta-bloccanti non sono stati notevoli, efficaci solo in 2/4 animali nel caso di Kö 1400-Cl e in 2/3 animali nel caso del propranololo. Al contrario, tutti i beta-bloccanti testati hanno prodotto un'azione protettiva contro l'aritmia alotano-adrenalina a dosi molto inferiori rispetto all'aritmia da legatura coronarica. Il rapporto di potenza di Kö 1400-Cl e propranololo era 3 : 1, in parallelo con l'attività beta-bloccante di questi composti.
Effetto delle dimensioni dell'epatoma di Morris 5123D sull'attività della gamma-glutamiltranspeptidasi nel siero e nelle urine.Stretta correlazione tra le dimensioni dell'epatoma di Morris 5123D impiantato nel è stata riscontrata attività dell'arto posteriore del ratto e della gamma-glutamiltranspeptidasi sierica. Il tumore impiantato in entrambe le zampe posteriori del ratto ha determinato un aumento di circa il doppio dell'attività enzimatica sierica. La crescita dell'epatoma ha comportato anche un aumento significativo dell'attività enzimatica in urina di ratti portatori di tumore. Dopo la rimozione chirurgica della gamba con epatoma è stata osservata una rapida diminuzione dell'attività enzimatica sia nei fluidi corporei studiati e il suo successivo rinnovato aumento associato alla formazione di metastasi polmonari. sull'attività della gamma-glutamiltranspeptidasi sierica.
[Caratteristiche di due nuove forme mutanti dell'eritrocita glucosio-6-fosfato deidrogenasi: "Kirovograd" G6PD e "Zhitomir" G6PD].L'articolo comprende la descrizione delle proprietà di tre forme mutanti di glucoso-6-fosfato deidrogenasi caratterizzate secondo il programma dell'OMS. Preparazioni degli enzimi sono state isolate da eritrociti di pazienti con deficit di G6PD da tre famiglie non imparentate tra loro di Ashkenasi provenienti dal Ucraina e dalla Bielorussia. Sono state scoperte due nuove varianti di G6PD mai descritte in letteratura. Queste varianti sono state designate come "Kirovograd" e "Zhitomir" dalle città da cui provenivano i probandi. Le proprietà degli enzimi purificati rivelate da i metodi del programma dell'OMS erano i seguenti: la variante "Kirovograd" ha una normale mobilità elettroforetica in tampone tris e TEB e il 98% della normale in tampone fosfato. KM per G6P è 6,54; KM per NADP-- 2,19. È caratterizzato da ar termostabilità indotta e da un picco acuto di attività a pH 8,5. La variante "Zhitomir" ha il 90-98% della normale mobilità elettroforetica in tampone TEB e il 78-84% in tampone fosfato. KM per G6P è 5,4-8,3. KM per NADP è 1,4-3,1; con deoxyG6P è del 50% e con deaminoNADP è del 35%. È inoltre caratterizzato da una ridotta termostabilità, mentre la curva della dipendenza della sua attività dal pH presenta due picchi. Entrambe le varianti sono perfettamente inattive con gli eritrociti e quindi dovrebbero essere assegnate al secondo gruppo delle varianti mutanti di G6PD. Il confronto di queste varianti con altre varianti incontrate nello stesso gruppo nazionale ha rivelato che assomigliano a determinate variazioni quantitative.
[Influenza dell'effetto materno sull'inibizione allogenica delle cellule staminali ematopoietiche].Cellule del midollo osseo (0,5-10(6)) di topi femmine di ceppi CBA o C57BL sono stati iniettati per via endovenosa in topi CBA, C57BL/6, (femaleCBA X maleC57BL/6)F1 e (femaleC57BL/6 X maleCBA)F1 irradiati in modo letale. dopo trapianto di midollo osseo con il metodo di Till e McCullouch. Le cellule staminali di topi CBA hanno dimostrato un fallimento dell'inibizione allogenica nei topi ibridi (CBA X C57BL/6)F1 e hanno formato lo stesso numero di colonie della milza dei destinatari singenici. dell'inibizione allogenica delle cellule staminali CBA trapiantate in topi ibridi (C57BL/6 XX CBA)F1 era del 50% Le cellule del midollo osseo di topi C57BL/6 formavano colonie nella milza di topi (CBA X C57BL/6)F1 almeno in 20 volte meno che in combinazione sigenica Nel trapianto di midollo osseo da topi C57BL/6 a topi ibridi (C57BL/6 X CBA)F1 l'inh allogenico l'ibizione era meno pronunciata (77-85%) rispetto al trasferimento di cellule a topi ibridi (CBA X C57BL/6)F1 (95%). Il sesso di un destinatario non ha influenzato il numero di colonie formate. Il diverso livello di inibizione allogenica delle cellule staminali parentali non può essere spiegato dall'effetto del legame con il sesso poiché la femmina di topi ibridi reciproci ha una struttura identica dei cromosomi sessuali (X(CBA)XC57BL/6). I dati ottenuti indicano che l'effetto materno influenza l'inibizione allogenica delle cellule staminali nel sistema genitore--F1. È possibile che l'influenza materna possa essere determinata da fattori citoplasmatici dell'ereditarietà che influenzano l'espressività dei geni recessivi Hh, controllando l'eredità di specifici antigeni delle cellule ematopoietiche.
Isolamento e caratterizzazione di quattro idrolasi peptidiche dal citosol della mucosa intestinale di ratto.Il fluido supernatante ad alta velocità preparato dalla mucosa intestinale di ratto è stato sottoposto a ione -cromatografia di scambio su dietilamminoetilcellulosa eluita con un gradiente lineare di cloruro di sodio (da 0 a 0,27 M). Il dosaggio delle frazioni eluite per l'attività dell'idrolasi Phe-Gly ha rivelato quattro picchi distinti di attività enzimatica. Questi enzimi del citosol sono stati designati I, II, III e IV in ordine di eluizione dalla colonna. L'esame della specificità del substrato dei quattro enzimi mediante l'uso di concentrazioni di peptidi di 20 mM ha indicato che i substrati più discriminanti per i quattro enzimi erano Leu-Gly-Gly, His-Met, Ser -Phe e leucina ammide, rispettivamente. La distribuzione media delle attività dell'idrolasi peptidica recuperata contro questi substrati tra i quattro enzimi I, II, III e IV era rispettivamente 96,1, 1,4, 1,7 e 0,8% per Leu-Gly -Gli: 0,6, 96,4, 2,4 e 0,6% per His-Met; 0, 0, 95,8 e 4,2% per Ser-Phe; e 20,8, 19,8, 5,6 e 53,8% per leucina ammide. La cromatografia a scambio ionico ha determinato un aumento dell'attività specifica di 19, 19, 46 e 3,5 volte per gli enzimi I, II, III e IV, rispettivamente. L'attività di tutti e quattro gli enzimi, ma soprattutto III e IV, è stata stabilizzata dalla presenza di ditioeritritolo 150 muM. L'attività di ciascuno dei quattro enzimi è stata ridotta dal 79 al 100% da 1 mM di etilendiamminotetraacetato, HgCl2, 1, 10-fenantrolina o 0,5 mM di p-idrossimercuribenzoato, tranne per il fatto che l'attività dell'enzima I è stata ridotta solo del 15% dall'etilendiamminotetraacetato. Non si è verificata alcuna attivazione significativa degli enzimi parzialmente purificati in presenza di 500 muM Zn++, Co++ o Mg++. I quattro enzimi hanno mostrato profili di pH distinti con ottimi a 7,5, 7,5, 8,5 e 8,0 per gli enzimi I, II, III e IV, rispettivamente. I pesi molecolari dei quattro enzimi determinati mediante filtrazione su gel su Sephadex G-200 erano rispettivamente 58.500, 74.000, 97.500 e 113.000. Tutti e quattro gli enzimi hanno perso più dell'85% della loro attività dopo 1 ora a temperature di 50 gradi C o superiori in tampone fosfato di sodio, pH 7,0. I valori di Km determinati con i substrati più specifici per ciascun enzima erano 0,76, 0,44, 3,82 e 8,3 mM per gli enzimi I, II, III e IV, rispettivamente. Prove recenti suggeriscono che una quantità significativa di alcuni piccoli peptidi viene assorbita intatta e idrolizzata dalle idrolasi peptidici del citosol. Un'adeguata comprensione della funzione e del controllo di questi enzimi intracellulari richiede la conoscenza delle caratteristiche e della specificità dei substrati dei singoli enzimi. Lo studio qui descritto dimostra la presenza di almeno quattro idrolasi peptidici del citosol con specificità di substrato distinte. Sono stati identificati substrati quasi esclusivamente idrolizzati da ciascuno dei tre enzimi, e quindi adatti al dosaggio di ciascuno di questi enzimi in presenza degli altri.
Proprietà dell'antro gastrico. III. Selettività e modifica della conduttanza dello shunt.La permselettività della via paracellulare dell'antro anfibio (Necturus e rana toro) è stata indagato rispetto alla selettività intracationica e al rapporto di permeabilità K+ e Cl- in funzione del pH della mucosa. La sequenza di selettività intracationica era Rb+ maggiore di K+ maggiore di Cs+ maggiore di Na+ maggiore di Li+. Entrambi gli antra mostravano una debole selettività cationica a pH 7,4, e a pH 4,4 per la rana toro e a pH 3,0 per Necturus, il rapporto Pk+/P Cl- era unitario. A pH della mucosa più basso i tessuti erano anion selettivi. Trattamento del tessuto con una carbodiimmide idrosolubile che aumentava la selettività anionica a pH più alto; carbenoxolone , un acido debole, ha determinato il mantenimento della selettività cationica a pH più basso Questi dati suggeriscono che i gruppi carbossilici svolgono un ruolo nel determinare la selettività dello shunt; l'aumento della selettività anionica al di sotto del pH 2.0 suggerisce che il fosfato o il solfato g potrebbero essere coinvolti anche gruppi.
Risposta gastrica, pancreatica e biliare postprandiale agli antagonisti dei recettori H2 dell'istamina ulcera duodenale attiva.Gli antagonisti dei recettori H2 dell'istamina sono agenti potenzialmente utili nell'azione duodenale ulcera e la conoscenza del loro effetto sugli eventi digestivi postprandiali contribuiranno alla loro applicazione clinica. Abbiamo studiato l'effetto di dosi di 200 e 300 mg di cimetidina, un antagonista dei recettori H2, assunte con un pasto normale, su stomaco, pancreas e funzione biliare. Entrambe le dosi hanno ridotto significativamente la produzione di acido e il suo rilascio nel duodeno. Il volume secretorio gastrico e la produzione di pepsina erano meno influenzati. L'inibizione acida era correlata ai livelli di farmaco nel sangue ed era inferiore a quella precedentemente riscontrata durante la notte negli studi sul digiuno notturno. Come la lo stomaco ha svuotato il cibo, il pH gastrico è aumentato. La velocità di svuotamento gastrico frazionato, l'enzima pancreatico e la produzione di acidi biliari sono rimasti inalterati. La cimetidina assunta per via orale con i pasti a queste dosi è un potente agente gastrico agente antisecretorio senza alterare altre funzioni gastriche, pancreatiche o biliari postprandiali.
Effetto della fundusectomia sui livelli sierici e di gastrina antrale nei ratti.Nei ratti maschi adulti, la fundusectomia ha diminuito la secrezione acida ma ha aumentato significativamente la gastrina antrale totale ed entrambi livelli di gastrina sierica a digiuno e stimolata dal cibo. L'aumento della gastrina sierica a digiuno potrebbe essere inibito dall'acidificazione antrale, suggerendo che la diminuzione dell'acidità ha causato l'ipergastrinemia postfundusectomia. Il meccanismo per l'aumento della gastrina totale nel tessuto antrale è probabilmente lo stesso. Questi studi forniscono un utile modello sperimentale per l'aumento della gastrina antrale e per la produzione di ipergastrinemia.
Il ruolo dei recettori dell'istamina nella fisiopatologia del danno della mucosa gastrica.In quattro tasche di Heidenhain canine i flussi netti di H+ e Na+ sono stati esaminati in precedenza , durante e dopo l'instillazione di sodio taurocolato nella sacca. Questi esperimenti sono stati condotti in animali a cui erano stati somministrati antagonisti dell'istamina H1 (mepiramina maleato) e H2 (metiammide), da soli o in combinazione. Sono stati condotti anche esperimenti di controllo senza antagonisti. Negli esperimenti di controllo, così come in coloro che usavano gli antagonisti dell'istamina separatamente, la consueta sequenza di eventi seguiva l'esposizione al taurocolato, cioè un aumento del volume della soluzione nella sacca e un aumento dei flussi di Na+ e H+ attraverso la mucosa. esperimenti in cui gli antagonisti dell'istamina H1 e H2 sono stati utilizzati in combinazione, il taurocolato ha avuto un effetto molto limitato sui flussi ionici di H+ e Na+, suggerendo che i cambiamenti nella permeabilità ionica della barriera della mucosa gastrica sono media ted dall'istamina attraverso entrambi i siti dei recettori H1 e H2.
Risposta dello sfintere esofageo inferiore alla somministrazione orale di cimetidina in soggetti normali.Recentemente sono state sviluppate anitistamine che bloccano specificamente l'azione gastrica e secretoria dell'istamina. È stato scoperto che uno di questi bloccanti dei recettori H2, la metiamide, aumenta la pressione dello sfintere esofageo inferiore (LES) nell'opossum. LES pressione, 8 volontari normali hanno ricevuto placebo o dosi orali di cimetidina (50, 100, 200 e 400 mg) in modo casuale, in cieco Indicativo di un adeguato assorbimento, sono stati raggiunti livelli sierici significativi con tutte le dosi di cimetidina (50 mg \ = 0,17 tazze per ml; 100 mg = 0,33 tazze per ml; 200 mg = 0,76 tazze per ml e 400 mg = 1,61 tazze per ml). Anche se è stato riscontrato che questi livelli sierici producono una marcata inibizione della secrezione acida gastrica , non distinguibile effetto è stato trovato sulla pressione LES rispetto al placebo. Quindi la cimetidina non aumenta la pressione del LES. Non diminuisce nemmeno la pressione dello sfintere e quindi non è controindicato nei pazienti con esofagite da reflusso.
Effetto della serotonina sul trasporto di acqua ed elettroliti nell'intestino tenue di coniglio in vivo.L'influenza della serotonina somministrata per via endovenosa sui flussi di acqua ed elettroliti nel è stato esaminato in vivo il digiuno e l'ileo di coniglio. Gli animali sono stati divisi in quattro gruppi: (1) quelli che hanno ricevuto soluzione salina per via endovenosa mentre una soluzione salina isotonica priva di glucosio perfuse il digiuno e l'ileo; (2) la serotonina somministrata per via endovenosa mentre il perfusato intestinale privo di glucosio è stato usato come nel gruppo 1; (3) soluzione salina endovenosa somministrata mentre una soluzione salina isotonica di glucosio 10 mM perfuse il digiuno e l'ileo; e (4) serotonina endovenosa somministrata mentre il perfusato intestinale era come nel gruppo 3. secrezione netta di H2O e sodio sia nel digiuno che nell'ileo nei gruppi con un perfusato privo di glucosio. Nel digiuno, la serotonina ha evocato la secrezione netta di acqua e sodio, mentre i controlli hanno assorbito acqua e sodio. Nell'ileo, siero la tonina aumenta notevolmente la secrezione. L'aggiunta di glucosio al perfusato ha completamente abolito l'effetto serotonina. L'analisi unidirezionale del flusso di 22Na ha rivelato una marcata diminuzione sia dei flussi da mucosa a sierosa che da sierosa a mucosa negli animali trattati con serotonina. La diminuzione del flusso da mucosa a sierosa era maggiore della diminuzione del flusso da sierosa a mucosa, spiegando così l'aumento della secrezione netta osservata con la serotonina nei gruppi che ricevevano perfusato privo di glucosio. Nonostante il suo pronunciato effetto sul trasporto di acqua ed elettroliti, la serotonina non è riuscita a produrre alterazioni istologiche rilevabili nella mucosa dell'intestino tenue, né al microscopio ottico né a quello elettronico. Ipotizziamo che la serotonina possa essere un importante mediatore della diarrea così frequentemente osservata nella sindrome da carcinoide in virtù dei suoi effetti sull'H2O intestinale e sul trasporto degli elettroliti.
Inibizione dell'assorbimento intestinale del ferro da parte dell'amido da bucato.La patogenesi dell'anemia sideropenica associata all'amilofagia è solitamente attribuita alla carenza di ferro alimentare. quantità di amido possono inibire l'assorbimento intestinale del ferro Di conseguenza, sono stati condotti studi per determinare l'effetto dell'amido da bucato sull'assorbimento intestinale del ferro inorganico e dell'emoglobina In vitro, l'amido da bucato ha legato dal 19 all'80% del 59FeSO4 disponibile e dal 34 al 68 % dell'emoglobina 59Fe disponibile. Il legame di entrambe le forme di ferro era pH-dipendente, con un legame massimo a pH 7,0. In vivo, l'amido da bucato ha inibito significativamente l'assorbimento da parte della mucosa di 59FeSO4 da anse duodenali isolate. In ratti non anemici, somministrazione di amido da bucato (100 mg) 1 ora prima di una dose da 100 tazze di 59FeSO4 ha ridotto significativamente l'assorbimento di 59FeSO4, rispetto ai controlli con soluzione salina o a basso contenuto di ferro (6,2 +/- 2,0 rispetto a 14,9 +/- 2,1 e -1,8 +/- 1,7, rispettivamente, P meno di 0,001). Nei ratti anemici l'assorbimento di una dose di 100 tazze di 59FeSO4 o di una dose di 500 tazze di 59Fe-emoglobina è stato significativamente ridotto anche dalla precedente somministrazione di amido da bucato. I dati ottenuti hanno indicato che l'amido da bucato (1) lega in vitro quantità apprezzabili di ferro inorganico ed emoglobinico; (2) inibisce l'assorbimento della mucosa o del ferro inorganico da parte di anse intestinali isolate; (3) inibisce l'assorbimento intestinale del ferro inorganico nei ratti normali non anemici e (4) attenua l'aumento compensatorio dell'assorbimento del ferro inorganico e organico nei ratti anemici.
La dopamina come possibile neurotrasmettitore nel rilassamento gastrico.Nei cani con fistole gastriche, la pressione intragastrica è stata misurata con un pallone flaccido contenente 500 ml di acqua. Dosi graduali di dopamina hanno causato diminuzioni graduali della pressione intragastrica. L'effetto è stato bloccato da pimozide o metoclopramide ma non è stato significativamente influenzato da fenossibenzamina, propranololo, guanetidina o FLA-63 (un inibitore della beta-idrossilasi). Pretrattamento con metoclopramide o con pimozide spostato il diagramma volume-pressione dello stomaco a sinistra, cioè, a qualsiasi volume dato la pressione era maggiore dopo che prima di questi farmaci. Nei cani con tasche gastriche innervate vagamente e fistole gastriche, alimentando per 1 min (pur lasciando il cibo lasciare lo stomaco attraverso la fistola gastrica) ha causato una rapida diminuzione della pressione nella sacca che è durata per circa 5 minuti. Il pretrattamento con metoclopramide ha ridotto l'entità e la durata di questa ricezione e relax. Si conclude che questi risultati sono coerenti con (ma non stabiliscono) l'ipotesi che la dopamina sia il neurotrasmettitore per il rilassamento recettivo dello stomaco, perché la dopamina imita il rilassamento recettivo e gli antagonisti della dopamina bloccano parzialmente il rilassamento recettivo indotto per via riflessa.
Alcune proprietà biologiche delle cellule della milza di topo frazionate dall'adesione di Sephadex G 25 e colonne di perle di vetro.Le possibilità di separazione delle cellule emopoietiche dai linfociti sono state studiate le cellule di milza di topo di ceppo A sono state frazionate nella frazione aderente e non aderente su Sephadex G-25, colonne di perle di vetro e perline di vetro rivestite con anticorpi contro la globulina di topo È stato riscontrato un aumento del numero di cellule che formano colonie emopoietiche nella frazione cellulare che non aderisce alle perle di vetro rivestite con anticorpo e nelle cellule che aderiscono in modo reversibile alle perline di vetro. Non è stata riscontrata alcuna diminuzione significativa nella reazione locale trapianto contro ospite in nessuna frazione ottenuto e la sopravvivenza prolungata dei riceventi semiallogenici irradiati è stata osservata in entrambe le frazioni ottenute su colonne Sephadex G-25.
La sensibilità della cromatina da timo e milza di topi irradiati a soluzioni alcaline.Quantità crescenti di DNA e proteine vengono rilasciate dalle sospensioni di cromatina da timo e milza di topi irradiati (6 ore dopo 600R corpo intero) per azione di soluzioni alcaline (pH 8-10) a forze ioniche fisiologiche La sospensione della cromatina dai tessuti normali rilascia in questo range di pH solo una piccola quantità di proteine e una quantità trascurabile di DNA. Il comportamento della cromatina epatica e renale rispetto alle soluzioni alcaline non mostra alcuna differenza tra i tessuti normali e quelli irradiati. Il tempo di insorgenza e il rapporto dose dell'aumentata sensibilità della cromatina del timo e della milza dai topi irradiati alle soluzioni alcaline mostrano un simile corso come descritto in precedenza segni di danno post-irradiazione alla cromatina di questi tessuti.
Riduzione della reattività del trapianto contro l'ospite di cellule di milza di topo e ratto di 5alfa-androstano-3,17-dione.L'innesto locale La reazione contro l'ospite valutata dall'ingrossamento del linfonodo popliteo è stata utilizzata per studiare la potenza immunosoppressiva dello steroide placentare 5alfa-androstano-3,17-dione Cellule di milza da topi e ratti femmine vergini iniettati per via sottocutanea con questo composto steroideo prodotto in appropriate riceventi F1 una reazione significativamente più debole (P inferiore a 0,001) rispetto alle cellule della milza da animali di controllo non trattati o trattati medi D'altra parte, il pretrattamento dei donatori di cellule con 5beta-androstane-3,17-dione o testosterone, i composti che non sono presenti nella placenta di topo e ratto, non hanno influenzato la normale reattività del trapianto contro l'ospite.
Il legame degli ioni di idrogeno legato all'ossigeno (il coefficiente di Haldane) dell'emoglobina bovina.Il coefficiente di Haldane (la quantità dello ione di idrogeno legato all'ossigeno) legame dell'emoglobina) è stata determinata in eritrolisato bovino (concentrazione di Hb uguale a 13,5 mM) mediante il metodo della titolazione differenziale con PCO2 variabile da 0 a 74 mm Hg e pH da 6,0 a 8,5 a 37 gradi C. Il valore massimo del coefficiente è stato trovato essere 0,49 mM per mM Hb a PCO2 uguale a 0 e pH 7,20. Con l'aumento di PCO2, il coefficiente è diventato più piccolo in tutti gli intervalli di pH studiati. Il coefficiente nelle condizioni di pH 7,20 e PCO2 è uguale a 45 mm Hg che sono normalmente prevalenti all'interno degli eritrociti bovini era 0,31.
Mucopolisaccaridi acidi in colture di fibroblasti. 1. Influenza della densità cellulare, del valore del pH e della concentrazione di lattato sul pattern di distribuzione MPS.Da cellule e coltura mezzo di fibroblasti embrionali di ratto (1a sottocoltura) i mucopolisaccaridi acidi sono stati isolati e frazionati. Il calcolo percentuale delle 6 frazioni si è basato sul contenuto di acido glucuronico. Le colture sono state mantenute come segue: 0,5 X 10(6) a 3 X 10 (6) cellule sono state esaminate in beute Demeter a pH 7,4 o 6,6, la concentrazione di lattato è stata aumentata al 100 mg% La quantità di ciascuna frazione è stata correlata con la densità cellulare (regressione lineare). Il valore del pH e la concentrazione di lattato in relazione con la densità cellulare si sono rivelati fattori importanti nella modifica del modello di distribuzione MPS.
Mitigazione della malattia del trapianto contro l'ospite nei topi con siero antitimocitario xenogenico e complemento.Trattamento in vitro di innesti di cellule linfoemopoietiche C57BL/6 parentali con Il siero anti-timociti di cavia non assorbito (ATS) e il complemento di cavia (GPC), prima dell'inoculazione in ospiti ibridi B6D2F irradiati in modo letale, si sono dimostrati utili in termini di mitigazione della malattia del trapianto contro l'ospite (GvHD). , l'effetto benefico di tale procedura di preinnesto è limitato alla prevenzione della GvHD acuta. La GvHD tardiva rimane un problema continuo ed è probabilmente dovuta all'attività del trapianto contro l'ospite (GvHA) di linfociti non tolleranti di nuova produzione da precursori linfoidi resistenti all'ATS. Vengono discussi i possibili modi per rendere questi precursori sensibili all'ATS e al complemento. Viene enfatizzato il potenziale significato degli ormoni timici e dell'AMP ciclico nel raggiungere questo obiettivo.
Riduzione indotta a livello centrale del tono simpatico-un'azione postsinaptica di stimolazione dei recettori alfa-adrenergici delle imidazoline.Nafazolina o ossimetazolina (entrambe 30 tazze/kg) sono state iniettato nella cisterna magna di gatti anestetizzati e ridotto la pressione sanguigna, la frequenza cardiaca e la velocità di scarica elettrica dei piccoli fasci di fibre del nervo splancnico simpatico pregangliare I gatti sono stati impoveriti di noradrenalina endogena mediante pretrattamento con reserpina (5 mg/kg, 18 h) e alfa-metil-p-tirosina (due volte 300 mg/kg, 18 e 2 ore). In questi animali, l'iniezione intracisternale di 30 mug/kg di ossimetazolina ha esercitato una diminuzione delle secrezioni simpatiche simile a quella descritta per gli animali non pretrattati. Anche l'iniezione intracisternale di 1 tazza/kg di clonidina nei gatti impoveriti di noradrenalina ha ridotto le secrezioni simpatiche. nel SNC.
Contributo della granulocitopenia alla sensibilità alle endotossine di topi irradiati o sottoposti a reazione trapianto contro ospite.Animali compromessi da irradiazione o reazione trapianto contro ospite (GVHR) sono altamente sensibili all'endotossina (ET). Al fine di determinare le cause dell'aumentata sensibilità dei topi compromessi, abbiamo studiato le alterazioni dei processi di clearance epatici (centrali) ed ematici (periferici) di ET. Abbiamo osservato che l'aumento della sensibilità all'ET , come determinato dalla mortalità, si è verificato poco dopo l'irradiazione e correlato con granulocitopenia e trombocitopenia piuttosto che con compromissione della funzionalità epatica. Il coinvolgimento dei granulociti nella clearance ET è stato indicato mediante iniezione di 51Cr-ET sospeso nel sangue intero. In confronto con la clearance di ET iniettato con soluzione salina o plasma, quantità maggiori di 51Cr-ET sono state sequestrate negli organi periferici rispetto al fegato Risultati simili sono stati ottenuti quando Cr-ET nel sangue intero è stato perfuso attraverso un fegato di topo. La clearance dell'ET è stata aumentata del 50% rispetto a quella osservata in M-199, plasma o plasma ricco di piastrine. È stato anche scoperto che l'ET intestinale contribuisce alla mortalità dei topi granulocitopenici-trombocitopenici. Ciò è stato supportato dall'osservazione che gli animali batteriologicamente decontaminati e irradiati erano otto volte più resistenti alla prova con ET rispetto agli animali convenzionali. Pertanto, un aspetto importante dell'aumento della sensibilità all'ET, nei topi compresi, è la clearance periferica difettosa.
Relazione tra la prevenzione delle erosioni gastriche nel ratto e l'inibizione della secrezione acida da parte delle prostaglandine.La formazione di erosioni della mucosa gastrica indotte dall'indometacina nel ratto è stato inibito in modo dipendente dal tempo e dalla dose dalle prostaglandine antisecretorie, gli analoghi metilici di PGE2 sono 400 volte più attivi della prostaglandina progenitrice. PGA2, un analogo metilico di PGF2alfa e l'antagonista del recettore H2 metiamide, hanno anche inibito la formazione dell'erosione. Esisteva una relazione variabile tra le dosi necessarie per inibire le erosioni e per inibire la secrezione acida gastrica. Nel ratto anestetizzato, la bassa incidenza di erosioni con indometacina era notevolmente aumentata dalla concomitante perfusione gastrica con soluzione salina acida e taurocolato. Questo danno alla mucosa era inibito da gli analoghi metilici della PGE2, suggerendo azioni protettive sulla mucosa diverse dall'inibizione della secrezione acida.
Effetti dei farmaci sulla formazione di acido omovanillico nella retina di ratto.I livelli di acido omovanillico (HVA) sono stati misurati nell'occhio e nel corpo striato di ratti in condizioni normali e dopo diversi trattamenti farmacologici. Gli agenti neurolettici come clozapina, cis-flupentixolo e aloperidolo hanno indotto aumenti comparabili dei livelli di HVA, mentre l'isomero trans non neurolettico del flupentixolo era inattivo in entrambe le strutture. L'apomorfina ha ridotto i livelli di HVA in la retina e il corpo striato, mentre l'anfetamina ha indotto una diminuzione della formazione di HVA nella retina e non ha modificato i livelli di HVA nel corpo striato. Il probenecid ha causato un aumento percentuale simile di HVA in entrambe le strutture. Morfina e oxotremorina hanno indotto un aumento dei livelli di HVA nel corpo striato ma non nei campioni retinici.
Azione antiaritmica di un nuovo agente bloccante beta-adrenergico, il 6-(2-idrossi-3-isopropilamminopropilossi)-benzotiazolo succinato (KF-577), rispetto a quello del propranololo .L'attività antiaritmica di un nuovo agente bloccante beta-adrenergico, il 6-(2-idrossi-3-isopropilamminopropilossi)-benzotiazolo succinato (KF-577), è stata confrontata con quella del propranololo. KF-577 aritmie indotte da ouabaina antagonizzate in cavie normali e bilateralmente vagotomizzate; la sua attività antagonista era uguale a quella del propranololo. La reserpinizzazione ha notevolmente ridotto l'intossicazione da ouabaina e nessuno dei due beta-bloccanti ha prodotto ulteriore riduzione. Le aritmie indotte da aconitina nei ratti non sono state antagonizzate da i due agenti. In cavie intatte, la riduzione dell'intossicazione da ouabaina da parte di entrambi i beta-bloccanti non poteva superare quella prodotta dall'infusione simultanea di KCl, e viceversa. Negli atri di cavia isolati, il propranololo era circa 10 volte più efficace del KF- 577 pollici riducendo l'intossicazione da ouabain. L'attività antiaritmica di KF-577 è parallela alla sua attività beta-bloccante nelle preparazioni isolate ma non negli animali intatti.
Studi in vitro sulla muscolatura liscia della pelvi renale umana.Segmenti isolati della pelvi renale umana sono stati studiati con una tecnica isometrica. Aumenti di tensione in seguito è stato dimostrato che l'aggiunta di adrenalina, noradrenalina e fenilefrina è mediata dai recettori alfa-adrenergici. Risposte simili all'acetilcolina sono dovute alla stimolazione del recettore muscarinico. I campioni hanno risposto alla stimolazione elettrica transmurale solo quando l'ampiezza dell'impulso era maggiore di 4 msec e tali risposte non sono state influenzate dal pretrattamento con tetrodotossina, fentolamina e atropina. Questi esperimenti suggeriscono che non esiste un'efficace innervazione dei siti recettoriali identificati, e quindi che la motilità della pelvi renale in vivo non è suscettibile di regolazione da parte del sistema nervoso autonomo.
Meccanismi mediante i quali i coniugati aptene del polisaccaride pneumococcico interferiscono con la stimolazione delle cellule di memoria anti-aptene.Incubazione dell'emocianina trinitrofenilata (TNP-KLH)- cellule della milza innescate con quantità di microgrammi di 2,4-dinitrofenile (DNP) o 2,4,6-trinitrofenile (TNP) coniugati di polisaccaride pneumococcico di tipo 3 (SIII) per appena 5 min a 4 gradi C si traducono in una specifica \ "blocco" della risposta della memoria adottiva 19 S e 7 S a TNP-KLH. Questo blocco indotto da aptene-SIII della reattività delle cellule B di memoria anti-aptene sembra essere un esempio di blocco specifico del recettore. Il blocco è specifico e può essere prevenuta mediante l'incubazione simultanea delle cellule innescate con coniugati aptene-proteina che presumibilmente competono con l'aptene-polisaccaride per l'attaccamento alla superficie delle cellule B tramite recettori anti-aptene Ig. Rimozione tramite capping di questi recettori Ig mediante esposizione di TNP-KLH- cellule di memoria innescate al siero Fab anti-topo di coniglio per 45 mi n a 37 gradi C rende queste cellule refrattarie all'effetto bloccante dell'aptene-SIII. Una volta che l'aptene-SIII si è attaccato alle cellule di memoria, queste cellule bloccate possono essere "salvate" (cioè riportate a uno stato di reattività) incubando queste cellule con anti-SIII di topo a 37 gradi C o anti-DNP di coniglio. siero a 4 gradi C. Poiché un digerito di papaina della frazione IgG dell'anti-DNP di coniglio non ha salvato le cellule mentre lo ha fatto l'IgG intatto, è stato proposto un capping del TNP-SIII come meccanismo per questo ritorno alla reattività del cellule finora bloccate. Non è stato osservato alcun salvataggio mediante il trattamento di topi riceventi con tali mitogeni delle cellule B come destrano solfato, endotossina o derivato proteico purificato della tubercolina.