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Mutagenicità mediata da tessuto di ratto e topo dei 3,3-dimetil-1-feniltriazeni sostituiti dall'anello in Salmonella typhimurium.3,3-Dimetil -1-feniltriazene e una serie di derivati con anello sostituito (X-phi-N=N-N-(CH3)2:X=sostituente/i; phi=fenile) sono stati testati per la loro azione mutagena e tossica su Salmonella typhimurium G-46 in un sistema di incubazione liquido contenente 9000 g di supernatanti tissutali e un sistema generatore di NADPH I composti potrebbero essere raggruppati in quattro classi in base alla loro tossicità e mutagenicità dopo 1 h di incubazione a 37 gradi C ad una concentrazione di 5 mM nel presenza di frazioni di surnatante epatico da topi pretrattati con fenobarbital Quando un surnatante epatico da topi non trattati è stato confrontato con uno da animali pretrattati con fenobarbitale, l'effetto mutageno di una serie di triazeni (con X=H; 4-cloro; 4-cloro; 4-bromo; 2,4,6-tricloro) in vitro è stato potenziato da due a dieci volte. La tossicità del triaz eni con X=4-metossi o 4-acetamido è stato fortemente ridotto da una frazione epatica di topi pretrattati con fenobarbital in presenza di un sistema che genera NADPH. Con il 3,3-dimetil-1-fenil-triazene, le frazioni di fegato di ratto hanno causato una mutagenicità mediata da enzimi inferiore in S. typhimurium G-46 rispetto a quelle del fegato di topo, mentre un surnatante di 9000 g dal cervello, un importante organo bersaglio per il l'azione cancerogena di alcuni triazeni, non è stata in grado, in nessuna delle due specie, di generare metaboliti mutageni per S. typhimurium G-46.
Composizione chimica e alcune proprietà del latte di bufala modificato per l'alimentazione dei bambini.È stata descritta una formula proposta per modificare il latte di bufala per l'alimentazione dei bambini. Il latte di bufala era diluito con quattro parti di siero di latte ottenuto per aggiunta di acido citrico o succo di limone al latte e neutralizzazione con bicarbonato di sodio. La composizione chimica e le proprietà della formula proposta sono state confrontate con latte crudo di bufala, latte umano e latte di bufala modificati dalla metodo ordinario La formula proposta era caratterizzata da un basso contenuto di caseina/proteine del siero di latte N paragonabile al latte umano e dalla tensione della cagliata.
[Modelli cinetici di inattivazione dell'idrogenasi batterica].La cinetica dell'inattivazione delle idrogenasi è esemplificata con l'enzima di Chloropseudomonas etilica. L'effetto della fase gassosa, temperatura, pH sulla cinetica di inattivazione è stata studiata l'inattivazione dell'idrogenasi durante l'incubazione di una soluzione enzimatica in aria L'analisi dei dati cinetici ha permesso di concludere che l'inattivazione coinvolge due forme dell'enzima che differiscono per la loro attività e resistenza alle azioni inattivanti. Vengono confrontate le stabilità del tempo medio di funzionamento delle idrogenasi da Chloropseudomonas etilica e Thiocapsa roseopersicina. Il meccanismo di inattivazione delle idrogenasi dalle due fonti è risultato simile in molti modi.
[Uno studio delle proprietà fisico-chimiche delle membrane di lecitina utilizzando sonde di spin idrofobe e idrofile].Alcune proprietà fisico-chimiche dei liposomi di lecitina e gli effetti dei cambiamenti di pH, temperatura e forza ionica sono studiati dall'ESR utilizzando radicali nitrossilici idrofobici e idrofili come sonde di spin. Le differenze di struttura tra gli strati esterni ed interni dei liposomi a doppio strato sono osservate utilizzando un complesso paramagnetico solubile in acqua ausiliario e attribuite provvisoriamente alla diversa curvatura segni di entrambi gli strati. Stime inferiori delle velocità di diffusione trasversale di entrambe le sonde attraverso la membrana sono ottenute utilizzando la tecnica dell'allargamento di scambio e un agente riducente solubile in acqua. Si rivela il passaggio limitante in questa diffusione, causato dal trasporto di un gruppo carico della molecola diffondente attraverso lo spazio della membrana idrofoba.
[Spettro di dicroismo circolare degli analoghi del dinucleoside fosfato].Spettro di dicroismo circolare di 11 analoghi del dinucleoside fosfato contenente monomeri achirali 3\'-terminali sono state misurate a diversi valori di pH, varie temperature e varie concentrazioni di etanolo. La conformazione degli analoghi studiati si è dimostrata molto simile a quella dei composti naturali. Il confronto dei risultati ottenuti con gli spettri di dicroismo circolare dei corrispondenti composti naturali indica che l'effetto Cotton deriva dal dicroismo circolare monomerico, almeno nelle caratteristiche principali. L'interazione degli eccitoni è relativamente piccola.
[Cambiamenti di conformazione del fibrinogeno e del monomero di fibrina dipendenti dall'ampiezza del pH].Gli stati conformazionali del fibrinogeno e del monomero di fibrina sono stati studiati mediante metodi di differenziale e solvente- spettrofotometria di perturbazione e fluorescenza ultravioletta a pH circa neutro (6,5) e nella regione di pH inferiore, da 3,2 a 4,0. Per prevenire la ripolimerizzazione del monomero di fibrina a pH 6,5, è stata aggiunta urea in una concentrazione non denaturante di 1,7 M. Nell'acido regione specificata, l'ambiente immediato dei residui di tirosina e triptofano è risultato essere più polare e l'accessibilità ai perturbanti maggiore rispetto a pH 6,5. Cambiamenti molto più drastici dello stesso tipo si sono verificati a pH inferiore a 3 quando avviene la denaturazione della proteina. La conformazione del fibrinogeno si alterava progressivamente abbassando il pH da 4,0 a 3,2. Questo aumento di acidità, in pratica, non influenzava la conformazione del monomero di fibrina, quindi la tolleranza di quest'ultimo alla comparsa del n. I nuovi gruppi modificati positivamente sembrano essere relativamente alti. La maggior parte dei cambiamenti conformazionali successivi alla neutralizzazione di una soluzione di monomero di fibrina acida procede a una velocità maggiore rispetto alla transizione di attivazione, ovvero l'acquisizione di uno stato di preparazione alla polimerizzazione da parte delle molecole di monomero di fibrina.
[La fluorescenza dei coniugati di pepsina con DNS-cloruro].Parametri di rilassamento rotazionale della pepsina coniugata in soluzioni neutre e leggermente alcaline con un'etichetta fluorescente L'1-dimetilamminonaftalen-5-solfonil cloruro (DNS-Cl) viene misurato con un metodo di polarizzazione a fluorescenza. È dimostrato che il globulo di pepsina denaturato e sciolto a valori di pH lacalino si converte in una forma compatta dopo il trasferimento in soluzione acida. questa nuova forma è vicina a quella della pepsina inibita nativa. Un nuovo globulo si distingue dal nativo per l'assenza di flessibilità segmentale. Coniugato con un DNS a pH inferiore o uguale a 7,0 la pepsina si rilassa in soluzione come amminopepsina dansilata cataliticamente attiva (DNS -3-aminotirosina pepsina). Viene presentata la prova che questi coniugati sono anche caratterizzati da flessibilità segmentale.
[Il meccanismo d'azione della d-amminoacido ossidasi. I. Evidenza di un meccanismo dei radicali liberi della reazione catalizzata dalla forma ba dimerica dell'enzima].la d-amminoacido ossidasi può ossidare il substrato ad un chetoacido in assenza di ossigeno. La stechiometria di questa reazione è precisamente 1 molecola di chetoacido per 1 molecola di enzima, contenente due gruppi flavinici. Quindi, la flavina deve essere nello stato di radicali liberi semi-ridotti. Ma questi radicali liberi non possono essere visualizzati dalla spettroscopia ESR a causa della vicinanza e della forte interazione. Dopo la denaturazione acida della proteina, il coenzima viene rilasciato come radicale libero semi-ridotto. Un metodo alternativo di registrazione è il trasferimento dello stato di radicali liberi ad un ulteriore eccesso di molecole di flavina libera. Con entrambi i metodi è determinato quantitativamente che ogni flavina dell'enzima è ridotta a un radicale libero. Pertanto, riteniamo di aver dimostrato inequivocabilmente che questa reazione enzimatica proce eds attraverso uno stato di transizione dei radicali liberi.
Il possibile ruolo dei sistemi sensibili antagonisti beta-adrenergici e alfa-adrenergici nel cervello nel meccanismo della psicosi.Sulla base di osservazioni cliniche su pazienti psicotici durante il trattamento con farmaci bloccanti adrenergici si postula che normalmente le attività di due sistemi nel cervello sono bilanciate: uno di questi sistemi può essere bloccato da farmaci beta-bloccanti e l'altro è responsivo ai farmaci alfa-bloccanti. La psicosi può verificarsi quando l'attività totale è troppo alta o troppo bassa, o quando l'equilibrio è disturbato. Le sindromi psichiatriche specifiche sono descritte come correlate a uno di questi sistemi.
Ageing of Neurospora crassa. IV. Induzione della senescenza in wild type mediante analoghi degli aminoacidi dietetici e inversione mediante antiossidanti e stabilizzatori di membrana.La crescita estensionale è stata misurata la velocità di 74A8 N. crassa wild-type in presenza di varie concentrazioni di 19 analoghi degli amminoacidi. La cinetica di crescita in presenza di questi analoghi a 30 gradi è stata caratterizzata da sette fasi sequenziali: (1) lag; (2) accelerazione del tasso di crescita; (3) tasso di crescita allo stato stazionario; (4) tasso esponenziale di declino del tasso di crescita; (5) nessuna crescita o tasso di crescita inferiore o uguale a 0,1 mm h-1; (6) accelerazione del tasso di crescita; e (7) stato stazionario. A 33 gradi, le fasi 6 e 7 non si sono verificate e avvenne la morte irreparabile dei cloni. Il meccanismo con cui i cloni acquisirono resistenza a 30 gradi sembrava implicano una combinazione di adattamento fisiologico e selezione cellulare. L'applicazione dietetica di scavenger di radicali liberi o di membrana tensioattiva \'stabilizzanti\' ha alleviato o prevenuto l'inibizione e il deterioramento del tasso di crescita che si verificava in presenza dei nove analoghi degli amminoacidi. La coltura con 4-fluorofenilalanina o etionina ha portato ad un aumento delle attività degli enzimi antiossigenici glutatione perossidasi, glutatione reduttasi e superossido dismutasi. Gli analoghi degli amminoacidi che causano la senescenza e la morte delle cellule in crescita sono noti per essere incorporati nelle proteine e tali proteine sono generalmente anormali. Poiché una frazione sostanziale delle proteine cellulari si trova nelle membrane e le proteine sintetizzate dai mitocondri sono esclusivamente proteine di membrana intrinseche, suggeriamo che una conseguenza primaria degli errori nella sintesi proteica sia la produzione di membrane difettose. Il deterioramento di tali membrane con associata autossidazione lipidica e produzione di radicali liberi che procede come una reazione a catena ad un tasso esponenziale può di per sé contribuire al tasso esponenziale di deterioramento cellulare che è caratteristico del processo di invecchiamento. Secondo questa ipotesi, gli stabilizzatori di membrana dietetici, gli scavenger di radicali liberi e gli enzimi antiossigenici proteggono le cellule dalla catastrofe dell'errore derivante dalla catena di eventi che porta al deterioramento della membrana.
Immunoregolazione e autoimmunità.Le risposte immunologiche, sia cellulo-mediate che umorali, agli antigeni esogeni riflettono un equilibrio cruciale tra le forze estrinseche che possono aumentare o sopprimono la reattività delle cellule effettrici T e B. È probabile che simili influenze immunoregolatorie svolgano un ruolo chiave nel mantenere la tolleranza ad alcuni antigeni self. Quindi, nonostante la presenza di cellule potenzialmente in grado di reagire agli antigeni autologhi, la mancanza di autoimmunità potrebbe riflettono un'assenza di amplificazione o una preponderanza di forze immunoregolatrici soppressive. In questo quadro, vengono discussi i dati ottenuti che indicano aberrazioni dell'immunoregolazione in pazienti con lupus eritematoso sistemico, in particolare perché le aberrazioni possono essere causalmente correlate alla natura autoimmune di questa malattia.
Proprietà della paramiosina monomerica utilizzando tecniche di birifrangenza elettrica transitoria.Campioni di paramiosina ottenuti dalla vongola Mercenaria mercenaria, mediante diverse tecniche di estrazione sono stati studiati utilizzando tecniche di birifrangenza elettrica transitoria La proteina rimane monomerica (non aggregata) in soluzione tampone 1 mM a pH 3,1-3,8 e vicino a pH 10. A pH 3,2, le molecole ottenute con diverse tecniche di estrazione mostrano costanti di diffusione rotazionale che indicano una differenza di lunghezza del 5% tra di loro, con la probabile forma nativa della paramiosina essendo la specie più lunga. Questa differenza nella costante di diffusione rotazionale scompare a pH più alti e, inoltre, una grande differenza nel momento di dipolo tra le molecole osservate a pH 3,2 scompare anche a pH alto. Questi risultati sono usati per ipotizzare che le molecole di paramiosina nativa a forma di bastoncello abbiano una o due porzioni parzialmente flessibili alle loro estremità; ad un'estremità di ogni molecola questo porzione probabilmente contiene amminoacidi basici in eccesso che sono caricati a pH basso per spiegare il momento di dipolo più alto di questa forma di paramiosina a questi bassi valori di pH. A pH 3,2, queste porzioni della macromolecola non sono flessibili e agiscono come parti rigide delle molecole a bastoncino, ma diventano gradualmente flessibili a pH più elevati. Vengono discussi i possibili meccanismi per questo cambiamento di flessibilità.
Compromissione dell'acidificazione delle urine indotta dal litio.Lo scopo di questo studio era chiarire i mezzi con cui il litio ha indotto un disturbo dell'acidificazione delle urine. Ratti infuso con acido cloridrico (1 mEq/kg) ha sviluppato acidosi metabolica acuta (Ph sangue = 7,32; bicarbonato, 18 mEq/litro) con un pH delle urine di circa 5,85. L'aggiunta di cloruro di litio (4 mEq/kg ip) ha causato un aumento del pH delle urine (6,38) e un'ulteriore diminuzione del bicarbonato nel sangue (11,0 mEq/litro). Durante il caricamento di bicarbonato, il litio ha causato un calo significativo della PCO2 nelle urine (meno la PCO2 nel sangue è diminuita da 25,3 +/- 2,8 a 14,4 +/- - 2,3 mm Hg) Questi cambiamenti non sono stati osservati dopo la somministrazione ip equimolare di cloruro di sodio Allo stesso modo, la somministrazione di litio ha ridotto il riassorbimento di bicarbonato dell'11,1% (da 30,6 a 27,2 muEq/ml di GFR) durante l'infusione di alcali, mentre la soluzione fisiologica ha causato solo un 5% diminuzione (da 30,0 a 28,5 muEq/ml di GFR). La combinazione di un aumento nelle urine la PCO2 nelle urine alcaline indica che il litio ha prodotto un difetto nella secrezione di ioni idrogeno del nefrone distale. La diminuzione del riassorbimento del bicarbonato in seguito alla somministrazione di litio potrebbe essere dovuta a un lieve difetto di secrezione di ioni idrogeno localizzato nel tubulo prossimale oa un grave difetto nel nefrone distale.
Regolazione isoidrica del potassio plasmatico da parte del bicarbonato nel ratto.pH e bicarbonato influenzano molte reazioni metaboliche, ma ognuna può cambiare indipendentemente. Per studiare il bicarbonato\'s L'effetto sul potassio plasmatico, il bicarbonato ematico in ratti normali, ipokaliemici o iperkaliemici è stato mantenuto costante, abbassato dall'acido cloridrico o aumentato dalla somministrazione di bicarbonato di sodio. Il pH del sangue è stato mantenuto costante modificando la PCO2. negli altri gruppi. Per eliminare le perdite urinarie di potassio, sono stati condotti esperimenti anche su ratti con legatura ureterale bilaterale. Anche in questo caso, la concentrazione plasmatica di potassio è aumentata significativamente nel gruppo con bicarbonato abbassato. Allo stesso modo, nell'ipokaliemia, il potassio plasmatico è aumentato di 1,2 e 0,4 mEq nel gruppo gruppi abbassati e invariati, ma è diminuito di 0,2 mEq/litro nel gruppo elevato Le differenze non possono essere attribuite alle perdite renali di potassio come p l'escrezione di otassio era essenzialmente zero in ciascun gruppo. Nell'iperkaliemia, la concentrazione plasmatica di potassio è rimasta elevata per 150 minuti nel gruppo con bicarbonato ridotto, ma è diminuita rispettivamente di 1,3 e 2,0 mEq nei gruppi immodificato ed elevato. Le perdite urinarie di potassio nei tre gruppi erano statisticamente identiche. In tutti gli esperimenti il pH del sangue è stato mantenuto invariato durante l'esperimento. I dati mostrano che il bicarbonato, indipendentemente dal pH ematico, altera la distribuzione transcellulare del potassio suggerendo l'utilità della terapia con bicarbonato nell'iperkaliemia anche a pH ematico compensato.
Movimento di farmaci e acido urico stimolato dalla vasopressina attraverso la vescica urinaria di rospo.È noto che la vasopressina aumenta la permeabilità della vescica di rospo, un analogo del dotto collettore dei mammiferi, all'acqua e ai soluti idrofili come l'urea. Nel presente studio, è stato determinato l'effetto della vasopressina sulla permeabilità di una serie di composti lipofili, inclusi molti farmaci comunemente usati. In tutti i casi, la permeabilità è aumentata dal 50 al 100%. La risposta alla vasopressina è stata mediata dall'adenosina monofosfato ciclico (cAMP) e generalmente non è stata alterata dalla floretina, un agente che inibisce il movimento dell'ammide attraverso la via di trasporto dell'ammide. Prova che questi composti si muovono direttamente attraverso la fase lipidica della membrana è stato fornito in studi di permeabilità al fenobarbital a pH luminale basso e alto. Da questi studi possiamo concludere che l'effetto della vasopressina sulla membrana cellulare luminale è diffuso, modificando sia componenti lipidici che componenti coinvolti nel trasporto di ammide, sodio e acqua. Questo può essere importante nel riassorbimento tubulare renale di molti farmaci, inclusi barbiturici, glutetimide e antibiotici.
[Uso del beta-bloccante visken in bambini con ipertensione arteriosa primaria].L'effetto di Visken è stato analizzato in bambini con ipertensione arteriosa primaria, Stadio IB, con riferimento al loro stato generale, dinamica delle contrazioni cardiache, pressione arteriosa, gittata cardiaca e resistenze vascolari periferiche. Il trattamento è stato effettuato in 28 bambini della durata da 6 a 8 settimane. Una multiformità dell'effetto del farmaco sullo stato dei bambini con ipertensione precoce. La risposta di diversi parametri del sistema circolatorio a Visken è individuale. Gli effetti collaterali possono svilupparsi anche a basse dosi.
[Ipertensione arteriosa ed emodialisi cronica].Sulla base dei dati della letteratura e delle proprie osservazioni di pazienti con emodialisi cronica gli autori hanno analizzato la patogenesi, corso, cambiamenti emodinamici e possibilità di trattamento mirato nell'uremia terminale. Oltre a due varianti del decorso dell'ipertensione (controllata e non controllata), è stato rilevato un terzo tipo, l'ipertensione difficile da controllare, nella cui patogenesi, oltre che nel variante non controllata, un ruolo importante è svolto dall'attivazione del sistema renina-angiotensina. Si analizzano i meccanismi emodinamici di una brusca variazione della pressione arteriosa (ipotensione acuta e crisi ipertensiva) nel processo di emodialisi.
[Osservazioni dinamiche della tolleranza all'esercizio fisico in pazienti con cardiopatia ischemica durante la terapia farmacologica].Procedendo da un'osservazione dinamica della tolleranza all'esercizio fisico esercizi nel processo di terapia farmacologica di 90 pazienti con cardiopatia ischemica l'autore conclude che esiste una certa dissociazione tra l'effetto soggettivo dei farmaci antianginosi e i risultati dei test della bicicletta nella valutazione dell'efficacia del trattamento. Mentre un miglioramento soggettivo è stato dichiarato in 2/3 dei pazienti, gli indici del test da sforzo sono migliorati solo in 1/3. Il test del bicipite prima e dopo il percorso terapeutico sembra facilitare una valutazione più precisa dell'efficacia dei farmaci antianginosi.
Approccio ai problemi acido-base nei pazienti critici e feriti.L'uso dell'equazione di Henderson-Hasselbalch e le relazioni tra i livelli di bicarbonato e la Vengono spiegate la pCO2 o la concentrazione di acido carbonico nella valutazione delle anomalie acido-base Vengono discussi l'eziologia, la fisiopatologia, la diagnosi e il trattamento dell'alcalosi e dell'acidosi respiratorie e dell'alcalosi e dell'acidosi metaboliche. I risultati dei test di laboratorio devono essere esaminati in relazione al paziente\' condizione e coerenza con altri test di laboratorio. La terapia è diretta a correggere i problemi sottostanti e, in secondo luogo, a correggere i numeri. I pazienti rispondono principalmente al tasso di cambiamento e non ai numeri assoluti. Pertanto, i problemi dovrebbero essere corretti approssimativamente alla velocità con cui si sviluppano. Il trattamento deve essere guidato dall'osservazione continua del paziente e da studi di laboratorio seriali.
Desensibilizzazione della preparazione del muscolo tracheale di cavia agli stimolanti beta-adrenergici mediante una precedente esposizione a una dose elevata di catecolamine.Quando una data concentrazione di un catecolamina è stata applicata alla preparazione tracheale di cavia contratta da 20 muM di istamina o da 30 mM-K+-Tyrode\'s, sono stati osservati rilassamenti costanti, se il rilassamento era submassimale. Quando un'alta concentrazione di catecolamina, 200 volte la ED50, era una volta applicato, le successive risposte ai beta-stimolanti (ED80) sono state ridotte di circa il 30-40%, nonostante ripetuti lavaggi. La risposta è stata gradualmente recuperata in 2 ore. Così 45 muM di adrenalina e 1 muM di isoproterenolo potrebbero causare desensibilizzazione a 0,65 muM di epinefrina E 0,03 muM isoproterenolo, rispettivamente. L'epinefrina e l'isoproterenolo potrebbero causare addensamento all'isoprofenamina, un beta-stimolante non catecolo. L'epinefrina non ha influenzato la risposta all'AMP ciclico, al dibutirril AMP ciclico, all'aminofillina e al pr ostaglandina E1. Questa densità non è stata influenzata da fentolamina, normetanefrina né dalla privazione di Ca2+ dalla soluzione di balneazione. I meccanismi della desensibilizzazione possono riguardare alcuni passaggi tra l'interazione recettore-farmaco e l'accumulo di AMP ciclico nel processo di rilassamento del muscolo tracheale indotto dai beta-stimolanti.
Alfa-Adrenocettori che mediano effetti inotropi positivi sul miocardio ventricolare: alcuni aspetti della relazione struttura-attività delle amine simpaticomimetiche.Sono stati condotti esperimenti sul muscolo papillare isolato del coniglio al fine di caratterizzare ulteriormente gli alfa-adrenocettori che mediano l'effetto inotropo positivo A questo scopo sono state confrontate le relazioni dose-risposta di sette ammine simpaticomimetiche sotto l'influenza di farmaci alfa e/o beta-adrenolitici. 10(-6) M) ha spostato a destra la parte inferiore delle curve dose-risposta per norfenefrina, sinefrina ed epinina come per fenilefrina e adrenalina, mentre il prindololo (10(-8) M) ha interessato solo la parte superiore delle curve In presenza di agenti bloccanti sia alfa che beta-adrenergici, l'intera curva dose-risposta per le amine simpaticomimetiche è stata spostata in modo parallelo. La noradrenalina ha colpito preferenzialmente i beta-adrenorecettori, mentre il suo effetto sugli alfa-adrenocettori era così debole che poteva essere rilevato solo quando il meccanismo di captazione neuronale ed extraneuronale delle ammine era bloccato dalla cocaina (3 X 10 (-5) M) e dal corticosterone (4 X 10 (-5) M), rispettivamente. L'effetto della dopamina non è stato influenzato né dalla fentolamina né dal prindololo, ma è stato antagonizzato dall'applicazione simultanea di agenti bloccanti sia alfa che beta-adrenergici. Dai risultati attuali, sembra che siano presenti le seguenti relazioni tra la struttura delle ammine e l'attività stimolante dei recettori alfa-adrenergici nel cuore: (1) La N-metilazione aumenta la potenza: (2) Assenza del gruppo ossidrile o in 3 o in posizione 4 diminuisce l'attività intrinseca e di stimolazione dei recettori beta-adrenergici, ma aumenta l'attività di stimolazione dei recettori alfa-adrenergici.
Studi sulla relazione struttura-attività di derivati adrenergici beta-mimetici benzilammine.Derivati benzilammine opportunamente sostituiti (BZA), derivati frammentati di tetraidroisochinoline, sono stati trovati essere beta-stimolanti adrenergici ad azione diretta, esibendo attività rilassanti tracheali, cronotrope positive e rilascianti acidi grassi liberi (FFA). Le strutture chimiche essenziali per la manifestazione dell'azione beta erano i) 3,4-diidrossibenzilammina, ii) gruppo arilmetilico a posizione alfa, iii) gruppo alchilico inferiore sull'atomo di N. Le relazioni struttura-attività dei derivati BZA erano quasi simili, ma in parte diverse da quelle dei derivati tetraidroisochinolina e catecolamine. di alfa-(3,4,5-trimetossibenzil)-N-metil-3,4-diidrossibenzilammina, il composto più attivo nei derivati BZA testati, erano circa centotrentacinque ty volte meno attivi di quelli di ISO, rispettivamente. Questi risultati indicano che questo composto è beta1-selettivo, mentre il trimetochinolo è beta2-selettivo.
Effetti emodinamici del blocco beta-adrenergico con pindololo, oxprenololo, propranololo e bufetololo cloridrato nell'ipertensione essenziale.Studi emodinamici (utilizzando (131)I- albumina marcata [RISA]) Sono stati eseguiti prima e 5 e 42 settimane dopo la somministrazione orale di pindololo (media 30 mg/giorno), oxprenololo (media 216 mg/giorno), propranololo (media 75 mg/giorno) o bufetololo cloridrato (av. 30 mg/die) in 40 pazienti con ipertensione essenziale I responsivi alle azioni antipertensive di pindololo o bufetololo a breve termine (5 settimane) hanno mostrato una riduzione delle resistenze periferiche totali (pindololo, da av. 2622 a 2022 dyne- sec-cm-5-m2; befetolol, da av. 3301 a 2620, p inferiore a 0,05), senza variazioni significative dell'indice cardiaco, mentre le azioni ipotensive del propranololo o dell'oxprenololo sembravano essere dovute principalmente ad una diminuzione della gittata cardiaca (propranololo , da media 4,03 a 2,99 L/min/m2; oxprenololo, da media 3,97 a 3,29 L/min/m2), sebbene la diminuzione di c la gittata cardiaca non era significativa. Nella terapia a lungo termine (42 settimane) con oxprenololo, gli effetti antipertensivi sembravano essere correlati a una ridotta gittata cardiaca e non sempre è stato osservato un riadattamento della resistenza periferica alla riduzione cronica della gittata cardiaca. Il tempo di circolazione è stato determinato in 9 pazienti con terapia con oxprenololo e 8 con terapia con pindololo mediante la misurazione del tempo di arrivo nell'emisfero cerebrale del radioisotopo iniettato per via endovenosa. I pazienti con terapia con oxprenololo hanno mostrato un significativo prolungamento del tempo di circolazione (somministrazione a breve termine, av. 6,6-8,4 sec; somministrazione a lungo termine av. 6,6-9,2 sec, p inferiore a 0,05), mentre non è stato osservato alcun prolungamento nella terapia con pindololo. Questi risultati suggeriscono che le risposte emodinamiche agli agenti beta-bloccanti non sono uniformi e che l'azione antipertensiva dei beta-bloccanti dipende dagli effetti sia sulla gittata cardiaca che sulle resistenze vascolari periferiche.
Trasporto anionico e morfologia della membrana.La microscopia elettronica a frattura congelata è stata utilizzata per esaminare l'ultrastruttura della membrana dei globuli rossi umani in presenza di inibitori di scambio di cloruri. L'entità dell'inibizione è stata correlata con una diminuzione della densità delle particelle intramembrana sulla faccia della frattura B. È stato dimostrato che il dimetilsolfossido (DMSO) e il glicerolo, che riducevano in modo marcato e reversibile la densità delle particelle intramembrana, inibivano drasticamente e reversibilmente l'auto-cloruro. scambio. È stato dimostrato che il DMSO è un inibitore non competitivo del flusso di cloruro.
Parametri di permeabilità dello strato corneo isolato del rospo.È stata messa a punto una tecnica per isolare lo strato corneo dagli strati sottostanti dell'epitelio che permette di studiare la strato corneo come membrana isolata montata tra semicamere. Il metodo consiste sostanzialmente in uno shock osmotico indotto immergendo un pezzo di pelle in acqua distillata a 50 gradi C per 2 minuti. Quando la membrana viene bagnata su ciascuna superficie da NaCl-Ringer \'s, la sua resistenza elettrica è 14,1 +/- 1,3 omega cm2 (n=10). Questo valore è circa 1/100 della resistenza dell'intera pelle in presenza della stessa soluzione. Il coefficiente di filtrazione idraulica (Lp) misurato da un metodo di pressione idrostatica, con soluzioni identiche su ciascun lato della membrana, è 8,8 X 10(-5) +/- 1,5 X 10(-5) cm sec-1 atm-1 (n=10) in acqua distillata e 9,2 X 10(-5) +/- 1,4 X 10(-5) cm sec-1 atm-1 (n=10) nella soluzione NaCl-Ringer\'s Questi valori non sono statisticamente differenti e sono nell'intervallo da 1/80 a 1/120 dell'intera pelle Lp. Lo strato corneo mostra un carattere anfotero quando studiato dai potenziali di diffusione di KCl a diversi pH\'S. La membrana presenta un pH isoelettrico di 4,6 +/- 0,3 (n=10). Al di sopra del pH isoelettrico il numero di trasporto del potassio è maggiore del numero di trasporto del cloruro; al di sotto di esso vale la situazione inversa. I cationi bivalenti (Ca++ o Cu++) riducono la discriminazione ionica della membrana quando la membrana è caricata negativamente e sono inefficaci quando le cariche fisse della membrana sono protonate a basso pH.
Potenziali antagonisti del recettore H2 dell'istamina. 3. Metilistamine.Le sintesi sono descritte per tutte le mono- e alcune di- e trimetilistamine. Nuovi metodi sono dato per le note Npi, Ntau-, Nalpha-, 2- e 4-methylistamines e per i nuovi composti, beta-metil-, 4,Nalpha-dimethyl- e 4,Nalpha,Nalpha-trimethylistamines. per la stimolazione dei recettori dell'istamina H1 (ileo di cavia) e H2 (secrezione acida gastrica di ratto). il legame viene sostanzialmente trattenuto con un sostituente metilico in queste posizioni. Pertanto, per la progettazione di potenziali antagonisti, vengono identificati due siti che vale la pena esplorare per l'introduzione di sostituenti lipofili.
Derivati 10-idrossi-4-metil-2,3,4,5,6,7-esaidro-1,6-metano-1H-4-benzazonine (omobenzomorfi ) come analgesici.Sei 10-idrossi-4-metil-2,3,4,5,6,7-esaidro-1,6-metano-1H-4-benzazonine derivati 17a-f hanno stati sintetizzati come potenziali analgesici. La sintesi di questi composti ha comportato la conversione dei derivati 4-(2-dimetilamminoetil)-6-metossi alfa tetralone 12a-f nei loro analoghi N-metilici e la successiva reazione di mannich intramolecolare con formaldeide per dare il 7- cheto C-ring omobenzomorphans 14a-f da cui sono stati ottenuti rispettivamente 17a-f. I composti 17a-f sono potenti quanto la morfina quanto gli analgesici (topi).
Trattamento in vitro delle superfici delle radici umane con fluoruri.Applicazioni topiche di due minuti con quattro diversi composti di fluoruro, fluoruro di fosfato acidulato, fluoruro di sodio, sodio monofluorofosfato e fluoruro stannoso, sono stati valutati per la capacità di ridurre la solubilità acida delle superfici delle radici umane in vitro. Ogni fluoruro era in soluzione acquosa con il livello di fluoruro regolato all'1,23% e il pH nativo. Finestre rettangolari sono state preparate sulle superfici delle radici e controllo contro le differenze di test sono state invariabilmente studiate all'interno dei denti e non tra i denti. Le soluzioni di fluoruro di sodio e monofluorofosfato di sodio hanno ridotto la solubilità della superficie radicolare di circa il 30% mentre il fluoruro di fosfato acidificato e il fluoruro stannoso erano più di 2,5 volte più efficaci, la riduzione della solubilità superava l'80%. quindi sono simili allo smalto nelle loro reazioni ai fluoruri applicati localmente Sulla base di questi risultati il clinico uno dovrebbe scegliere tra fluoruro di fosfato acidificato e fluoruro stannoso quando si effettua la scelta di un singolo composto di trattamento per l'applicazione in ufficio.
L'associazione tra acidificazione ed eventi elettrogeni nel digiuno prossimale del ratto.1. Misura simultanea della produzione di ioni idrogeno, differenza di potenziale transmurale e cortocircuito intermittente. La corrente del circuito (SCC) è stata effettuata in vitro nel digiuno prossimale di ratto: allo stesso modo, sono stati misurati i movimenti degli ioni di potassio e sodio per studiare la relazione tra l'acidificazione e gli eventi elettrogeni e i movimenti di ioni associati nel digiuno. corrente del circuito ed entrambi sono stati inibiti da ouabain sieroso 10 mM o aminofillina mucosale 10 mM. Entrambi gli inibitori hanno avuto effetti sul movimento netto del potassio ma non sul movimento netto del sodio. Inoltre, negli studi sugli isotopi, mentre l'ouabaina sierosa 10 mM riduceva il flusso di sodio J (ms) , l'aminofillina della mucosa 10 mM non ha avuto alcun effetto, cioè l'aminofillina può ridurre sia la corrente di cortocircuito che l'acidificazione senza alterare percettibilmente il flusso di sodio diretto dalla sierosa.3. n tamponi a basso contenuto di sodio in cui si verifica ancora l'acidificazione sebbene ridotta, si verificano differenze di potenziale transmurale di polarità inversa che sono apparentemente non correlate alle differenze di potenziale di diffusione del sodio (come evidenziato da esperimenti di efflusso di sodio isotopico) e che potrebbero essere causate dalla produzione di ioni idrogeno. In tamponi a basso contenuto di sodio, tuttavia, gli inibitori hanno effetti opposti, l'ouabaina provoca un aumento e l'aminofillina una diminuzione delle differenze di potenziale inverso.4. Viene proposto un modello per l'acidificazione (quello dello scambio ionico del potassio piuttosto che del sodio per lo scambio ionico idrogeno e dell'idrossile per lo scambio ionico cloruro) per spiegare i presenti risultati sperimentali e altre diverse osservazioni in letteratura: sebbene entrambi i passaggi possano essere il passaggio elettrogenico, l'acidificazione deve essere considerata anche come una componente della corrente di cortocircuito digiunale.
Cambiamenti indotti da catecolamine nel trasporto ionico nella pelle di rana in corto circuito e l'effetto del beta-blocco.1. Un metodo per misurare Cl bidirezionale è stato utilizzato per stimare i movimenti netti di Cl nella pelle di rana in cortocircuito e per confrontarli con la corrente di cortocircuito (Isc) e i flussi di Na. 2. In alcuni esperimenti sono stati misurati simultaneamente flussi bidirezionali sia di Na che di Cl. trovarono che la somma algebrica dei flussi netti di questi due ioni non differiva significativamente dai valori di Isc, sia nelle pelli non trattate che in quelle trattate con catecolamine, ad eccezione del periodo di mezz'ora immediatamente successivo all'aggiunta di catecolamine. Cl prodotto da noradrenalina (1-6 X 10 (-5) M), isoprenalina (8 X 10 (-7) M) e adrenalina (6 e 15 X 10 (-6) M) erano di entità simile per ciascuna catecolamina. L'entità della risposta Cl misurata come rapporto di flusso era correlata in una certa misura alla conduttanza della precatecolamina Cl. 4. T L'afflusso netto di Na è stato aumentato dall'isoprenalina e ridotto dalla noradrenalina. 5. L'aggiunta dell'agente bloccante beta-adrenergico oxprenololo (4-5 X 10 (-5) M) alle pelli stimolate dalla catecolamina ha portato alla scomparsa del movimento netto di Cl e alla caduta della conduttanza cutanea e di Isc. Questa caduta era di entità simile e correlata con l'aumento medio di Isc prodotto dall'isoprenalina, ma di entità significativamente maggiore nel caso della noradrenalina. 6. I cambiamenti nell'afflusso di Na sono stati fortemente associati ai cambiamenti in Isc dopo l'aggiunta di catecolamine. Allo stesso modo, i cambiamenti nell'efflusso di Na e nell'efflusso di Cl sono stati correlati, suggerendo che i flussi di Na sono dissociati, cambiamenti di afflusso ed efflusso forse avvenuti in loci diversi. 7. L'acetazolamide (1-2 X 10(-4)M), aggiunta prima o durante la stimolazione con noradrenalina, non ha avuto effetto sulla risposta di efflusso di Cl. 8. Lo scambio tissutale di Cl dal mezzo di balneazione esterno dopo 4 ore era maggiore nelle pelli stimolate da catecolamine rispetto a quelle in cui la risposta era stata bloccata dall'oxprenololo. 9. Questi risultati sono stati presi per supportare un modello che prevede una pompa NaCl neutra residente nelle ghiandole mucose e una pompa Na epiteliale potenziata dalla stimolazione beta e inibita dalla stimolazione alfa-adrenergica.
La farmacologia del flazalone: una nuova classe di agenti antinfiammatori.Descrizione dell'attività antinfiammatoria del flazalone, un farmaco chimico unico Nei test antinfiammatori irritanti acuti, il flazalone ha mostrato un ampio spettro di attività. Il composto era attivo nell'influenzare il decorso del gonfiore della zampa nell'artrite adiuvante quando somministrato quotidianamente all'inizio della poliartrite o dopo l'induzione. L'aspetto più insolito di questo composto è la sua capacità di inibire il rigetto del trapianto nei pesci rossi e nei conigli. Lo schema dell'attività antinfiammatoria non consente di classificare questo farmaco nei soliti gruppi.
Effetto degli agenti bloccanti del simpatico sull'antinatriuresi della stimolazione riflessa del nervo renale.Valutare gli effetti della stimolazione riflessa del nervo simpatico renale sulla manipolazione del sodio tubulare renale , sono stati eseguiti studi di clearance in cani anestetizzati. Con pressione di perfusione renale mantenuta costante, la stimolazione del nervo simpatico renale riflesso barocettore è stata prodotta da emorragia arteriosa controllata o perfusione del seno carotideo. Diminuzioni significative dell'escrezione urinaria di sodio si sono verificate in presenza di alterazioni lievi e insignificanti nel sangue renale flusso e nessun cambiamento nella velocità di filtrazione glomerulare. Il blocco del recettore alfa adrenergico renale (fenossibenzamina) o il blocco adrenergico (guanetidina) ha completamente invertito la caduta nell'escrezione urinaria di sodio; ciò non può essere attribuito ad alterazioni della velocità di filtrazione glomerulare o del flusso sanguigno renale. Questi studi supportano l'interpretazione che l'innervazione adrenergica dei tubuli renali sia coinvolta in la regolazione del riassorbimento tubulare renale del sodio.
Confronto tra assorbimento e legame di disodio cromoglicato e rosso fenolo nel polmone di ratto.In fette di polmone di ratto 3H-cromoglicato disodico (3H-DSCG) ( 0.001 mM) è stato assorbito rapidamente e gli spazi tissutali 3H-DSCG, che si sono equilibrati in 30 minuti, sono rimasti costanti per un periodo di incubazione di 4 ore. Al contrario, il 35S-fenolo rosso (0,001 mM) si è accumulato nelle sezioni polmonari in misura molto maggiore rispetto a DSCG e gli spazi tissutali misurati hanno continuato ad aumentare per un periodo di incubazione di 3 ore In presenza di rosso fenolo (1 mM) o degli inibitori metabolici, acido iodoacetico (10(-4) M) e dinitrofenolo (10 (-4) M), l'assorbimento di 3H-DSCG è stato significativamente ridotto. L'accumulo di 3H-DSCG nelle sezioni polmonari e il legame agli omogenati tissutali (pH 7,4) sono stati ridotti anche quando gli ioni Ca e Mg sono stati omessi dalla soluzione da bagno. Sebbene DSCG e il rosso fenolo ha inibito reciprocamente l'accumulo l'uno dell'altro nel tempo nelle sezioni polmonari e il 3H-DSCG (0,001 mM) si lega all'omogeneità polmonare tes è stato ridotto in presenza di rosso fenolo 1 mM, l'efflusso di rosso fenolo 35S non è stato alterato dall'aggiunta di DSCG 1 mM durante il lavaggio. Pertanto, sembra che, nel polmone di ratto, DSCG e rosso fenolo condividano un sito di legame comune per l'assorbimento, possibile sul "carrier" di trasporto. Inoltre, sembrano esserci ulteriori siti di legame polmonari per il rosso fenolo. Questi siti non sono occupati da DSCG e la loro presenza potrebbe spiegare le differenze osservate nell'entità dell'accumulo dei due composti nelle sezioni polmonari.
Rilascio di potassio dalla ghiandola sottomascellare di ratto in vitro. I. Induzione da parte delle catecolamine.Fette di ghiandola sottomascellare sono state incubate in vitro in un Krebs- Terreno bicarbonato di Ringer gasato con 95% O2-5% CO2 a 37 gradi C e il rilascio di K+ nel mezzo è stato monitorato dopo stimolazione con secretagoghi alfa e beta adrenergici in una varietà di condizioni sperimentali. Il K+ è stato rilasciato dal sistema slice dopo aggiunta di noradrenalina, epinefrina o fenilefrina, ma non dopo aggiunta di isoproterenolo. L'entità del rilascio di K+ dopo la noradrenalina dipende dalla dose di secretagogo ed è maggiore quando glucosio, adenina e inosina, o tutti e tre i substrati sono assenti dal terreno. L'effetto di noradrenalina sul rilascio di K+ è invertito dalla fentolamina ma non dal propranololo. La fentolamina provoca anche uno spostamento di 9,4 volte a destra nella curva dose-risposta alla noradrenalina. Aggiunta di ouabain al terreno di incubazione resul apporta una maggiore quantità di rilascio di K+ e previene l'inversione causata dalla fentolamina. La risposta alla noradrenalina non si verifica quando Ca++ è assente dal terreno, o per chelazione con acido etilenglicole bis (beta-ammino-etere etilico)-N,N\'-tetraacetico o per eliminazione dalla soluzione di Krebs-Ringer, e mostra gradazioni dipendenti dal contenuto di Ca++ del mezzo. Di per sé, tuttavia, Ca++ non induce il rilascio di K+ dal sistema slice. Da queste osservazioni derivano le seguenti conclusioni: 1) il rilascio di ioni K+ dalla ghiandola sottomascellare è mediato dai recettori alfa adrenergici; 2) la quantità netta di K+ rilasciata è il risultato di due meccanismi opposti e quasi simultanei, un'estrusione passiva e una ricaptazione attiva; 3) la ricaptazione attiva del K+ dipende dalla disponibilità di energia ed è mediata dall'adenosina trifosfatasi attivata da Na+-K+ sensibile all'ouabaina; 4) la reazione dipende in modo critico dalla presenza di Ca++ nel mezzo di incubazione e probabilmente comporta un afflusso di Ca++ dopo stimolazione con secretagoghi alfa adrenergici.
Effetti contrattili stereoselettivi e calcio-dipendenti degli analgesici narcotici antagonisti nella muscolatura liscia vascolare del ratto.Nei pazienti, la pentazocina somministrata ev può avere un effetto azione insolita per un forte analgesico-un aumento della pressione sanguigna. L'obiettivo di questo studio nei ratti era di quantificare e spiegare meglio il meccanismo molecolare per l'azione vascolare della l-pentazocina e confrontarlo con altri analgesici e antagonisti narcotici. In ratti anestetizzati , l-pentazocina (0,3-3 mg/kg iv) ha aumentato la pressione sanguigna e questo effetto è stato potenziato nei ratti snocciolati. La contrazione sembrava essere non adrenergica in quanto non era bloccata dall'alfa-bloccante, fenossibenzamina. In vitro, morfina (ED50 \ = 4 X 10 (-5) M) e gli isomeri l della pentazocina (ED50 = 8 X 10 (-6) M) hanno contratto la striscia aortica tagliata a spirale Gli isomeri l erano circa 5 volte più potenti del loro d -enantiomeri Contrazione dell'aorta da parte di l-pentazocina wa non è inibito da dibenamina, atropina, difenidramina, pirilamina o indometacina né potenziato dal propranololo. D'altra parte, non solo la contrazione dipendeva fortemente dalla concentrazione di calcio nel bagno, ma era anche bloccata dal verapamil e dall'SKF-525A, farmaci noti per inibire l'afflusso di calcio transmembrana. Il naloxone (da 3 X 10 (-4) a 1 X 10 (-3) M), che da solo non produceva alcun effetto contrattile, riduceva nella massima misura la contrazione aortica della l-pentazocina, quella del potassio moderatamente e quella della norepinefrina solo leggermente. Il blocco del naloxone della contrazione vascolare della l-pentazocina è stato invertito aumentando la concentrazione di Ca++ nei media, suggerendo che l'azione del naloxone potrebbe assomigliare a un calcio-bloccante. Si propone che un'azione vascolare diretta, stereoselettiva e calcio-dipendente della l-pentazocina contribuisca alla sua capacità di aumentare la pressione sanguigna. Dovrebbe essere presa in considerazione anche la possibilità che in dosi elevate gli antagonisti narcotici possano ridurre l'afflusso di calcio.
La granulazione di miscele binarie.I granuli sono stati preparati da miscele di lattosio e acido borico mediante il metodo di massa e vagliatura e le loro proprietà sono state confrontate con quelli dei granuli dei singoli materiali, granulati separatamente. Aumentando il volume della soluzione di legante utilizzata si ottengono granuli più forti e di dimensione media maggiore in tutte le miscele studiate. Si ottengono i granuli più grandi e resistenti, per ogni dato volume di soluzione di legante e tempo di ammassamento da una miscela, così come lo erano i granuli con la dimensione minima dei pori. L'effetto del tempo di massa sulle proprietà dei granuli è stato generalmente simile a quelli già riportati per i sistemi monocomponente; una massa prolungata in alcune miscele ha portato a una riduzione della dimensione media dei granuli. il tempo di premiscelazione non ha prodotto cambiamenti significativi nelle proprietà fisiche dei granuli preparati da una miscela di lattosio: acido borico.
Una doppia azione della 5-idrossitriptamina sul legamento sospensivo ovarico del ratto.La 5-idrossitriptamina ha un duplice effetto sull'ovaio di ratto che si contrae spontaneamente legamento, in vitro, una contrazione che è antagonizzata dalla precedente somministrazione di metisergide e un rilassamento del legamento osservato nella preparazione trattata con metisergide. L'effetto rilassante non è stato antagonizzato dal propranololo o dalla tetrodotossina ma il trattamento del legamento con indometacina ha abolito questa risposta Le prostaglandine della serie E hanno prodotto un'inibizione e la PGF2alfa una contrazione del legamento. La separazione cromatografica su strato sottile indica che la 5-HT provoca il rilascio di una sostanza simile alla PGE2 che rilassa il legamento sospensivo ovarico.
L'influenza dei derivati del diidrossiantracene sul movimento dell'acqua e degli elettroliti nel colon di ratto.Le attività purgative di 18 diversi derivati del diidrossiantracene, inclusi antrachinoni e antroni liberi, sono stati studiati determinando la loro influenza sull'assorbimento di acqua, sodio e potassio nel tratto gastrointestinale mediante iniezione diretta delle soluzioni in Tyrode nel colon di ratto in situ. È stato anche valutato il grado di solubilità dei composti. La struttura del -diidrossiantracene sembrava essere la migliore per l'effetto idragogo. L'antrachinone e l'antrone del Reno erano i composti più attivi testati.
L'assorbimento in situ del warfarin dall'intestino tenue di ratto.L'assorbimento in situ dall'intestino tenue di ratto del farmaco debolmente acido, il warfarin ( pKa 5-05), a 200 mug ml-1 nel fluido instillato con livelli di pH iniziali di 3, 5, 7 o 8. Questi pH\' iniziali nel tampone sono cambiati rapidamente verso la neutralità. I tamponi a pH\ 's 3 e 5 probabilmente hanno causato diverse quantità di precipitazione di warfarin, che ha portato a diversi tassi di scomparsa di warfarin dal fluido instillato che sono stati paralleli ai tassi iniziali di accumulo di warfarin nella (o sulla) parete intestinale. le velocità iniziali di assorbimento nel plasma erano più lente Al pH iniziale di 3 e mediante solubilizzazione del warfarin con glicole propilenico, la velocità di assorbimento era simile a quella di un fluido a pH 7. Il glicole propilenico in soluzione al 15% non ha influenzato il sistema in modo significativo h il trasferimento di warfarin in ottanolo dalla soluzione tampone a pH 7 potrebbe indicare che la piccola frazione di farmaco sindacalizzato (1 : 100) a pH 7 è sufficiente per un notevole trasferimento di questo farmaco altamente liposolubile.
Risposte adrenergiche della striscia sierosa dello stomaco di coniglio e loro modificazione da parte degli inibitori delle monoaminossidasi e farmaci anti-adrenergici.È stata trovata la striscia sierosa dello stomaco di coniglio contrarsi all'adrenalina e alla noradrenalina ma non all'isoprenalina. La risposta contrattile potrebbe essere totalmente abolita dalla fenossibenzamina ma non è stata influenzata dal propranololo, indicando che il preparato ha quasi esclusivamente alfa-adrenocettori. Le risposte all'adrenalina e alla noradrenalina sono state notevolmente potenziate in presenza di inibitori delle monoaminossidasi, guanetidina o reserpina, indicando la presenza di attività MAO nei tessuti e possibili depositi di catecolamine. Lo stato funzionale di quest'ultimo non è stato definitivamente stabilito, poiché la tiramina, un'ammina ad azione indiretta, non è stata in grado di suscitare una risposta qualitativamente simile a quello dell'adrenalina, anche in presenza di nialamide o tranilcipromina.
Studio comparativo degli effetti della mianserina, un antidepressivo tetraciclico, e dell'imipramina sull'assorbimento e sul rilascio di neurotrasmettitori nei sinaptosomi.Gli effetti della mianserina, un antidepressivo tetraciclico, sulla captazione e rilascio di [3H]noradrenalina (3H-NA), [3H]dopamina (3H-DA), [3H]-5-idrossitriptamina (3H-5-HT) e [3H]gamma-ammino -butirrico (3H-GABA) in sinaptosomi da diverse aree del cervello di ratto sono stati studiati in uno studio comparativo con l'antidepressivo triciclico imipramina Mianserina e imipramina erano inibitori della captazione di 3H-NA nell'ipotalamo, ma non potevano aumentare 3H-NA rilascio dalle terminazioni nervose noradrenergiche. Questo comportamento era simile a quello della (+)-anfetamina. Sia la mianserina che l'imipramina non avevano essenzialmente alcun effetto sui meccanismi di trasporto 3H-DA nei sinaptosomi striatali. La (+)-amfetamina, al contrario, influenzava fortemente entrambi i 3H Captazione e rilascio di -DA L'imipramina era più forte della mianserina nell'inibire l'accumulo di 3H-5-HT mulazione da parte dei sinaptosomi striatali. Al contrario, la mianserina stimolava il rilascio di 3H-5-HT mentre l'imipramina era inefficace. Mianserin non aveva praticamente alcuna attività inibitoria sull'assorbimento di 3H-5-HT da parte delle piastrine del sangue di ratto. L'imipramina era un modesto inibitore dell'accumulo di 3H-GABA da parte dei sinaptosomi dell'intero cervello; mianserin non ha avuto effetto. Entrambi i farmaci non hanno alterato il rilascio di 3H-GABA. Questi risultati indicano che la mianserina interferisce in modo diverso da quello degli antidepressivi triciclici con i meccanismi di trasporto dei neurotrasmettitori a livello presinaptico.
Derivati alfa-metilici di ammine biogene come inibitori della monoaminossidasi.I valori di Km app e Vmax per tre substrati naturali della monoaminossidasi sono stati determinati a vari stadi nell'isolamento dell'enzima da tessuto epatico di ratto. I risultati sono coerenti con la presenza nella preparazione enzimatica di almeno due distinte forme molecolari dell'enzima. Utilizzando i derivati alfa-metilici dei substrati naturali come inibitori di l'enzima, la dipendenza dal substrato di Ki conferma ulteriormente questo punto di vista. Inoltre, la cinetica dell'inibizione suggerisce che il valore di Km app potrebbe non essere necessariamente per tutti i substrati una misura dell'affinità del substrato per l'enzima.
Differenze tra le azioni anoressiche dell'anfetamina e della fenfluramina - possibili effetti sulla fame e sulla sazietà.L'inibizione dell'alimentazione nei ratti causata dall'anfetamina e La fenfluramina è stata continuamente monitorata per periodi fino a 24 ore utilizzando un eatometro a rilevamento di pellet. Per i ratti testati in condizioni di deprivazione alimentare i due farmaci hanno dato origine a profili anoressici distinti: l'anfetamina ha ritardato l'inizio dell'alimentazione mentre la fenfluramina ha permesso di iniziare a mangiare normalmente ma ha portato quando i farmaci sono stati somministrati a ratti con libero accesso al cibo, l'analisi del modello del pasto ha mostrato che l'anfetamina ha dato luogo a un piccolo aumento nell'intervallo tra i pasti mentre la fenfluramina ha determinato un chiaro riduzione delle dimensioni del pasto Si suggerisce che le modalità d'azione contrastanti di questi farmaci rappresentino un effetto dell'anfetamina sulla fame e un'azione della fenfluramina sulla sazietà. Questo suggerimento è in linea con i meccanismi d'azione proposti per questi farmaci, l'anfetamina che agisce su un sistema motivazionale ipotalamico e la fenfluramina che agisce attraverso un sistema di sazietà serotoninergico ipotizzato. L'uso della tecnica di monitoraggio continuo ha evidenziato alcune limitazioni nella valutazione dell'azione dei farmaci anoressici mediante periodi di campionamento degli alimenti discreti.
Influenza della velocità di diluizione sulle concentrazioni e sui rapporti di NAD(P) e NAD(P)H in una specie di Pseudomonas cresciuta in coltura continua.A Pseudomonas sp. d'acqua dolce è stato coltivato in coltura continua in condizioni stazionarie in terreni limitati con L-lattato, succinato, glucosio o ammonio. aumentava esponenzialmente da circa 2 a 7 mumol/g peso secco mentre la velocità di diluizione della coltura (D) veniva ridotta da 0,5 a 0,02 h-1 Gli organismi cresciuti a un dato D in uno qualsiasi dei terreni a carbonio limitato possedevano livelli molto simili di NAD (H). Pertanto, in queste condizioni, il NAD(H) cellulare era solo una funzione della coltura O ed era indipendente dalla natura della fonte di carbonio della coltura. D non aveva alcuna influenza sul contenuto di NAD(H) delle cellule cresciute sotto limitazione dell'ammonio Al contrario, la concentrazione di NADH cellulare non è stata influenzata da D in terreni limitati con carbonio o ammonio. edium, i batteri possedevano 0,14 mumol NADH/g peso secco; livelli molto simili sono stati trovati in organismi cresciuti in altri terreni. I risultati sono coerenti con quelli di Wimpenny \& Firth (1972) secondo cui i batteri mantengono rigidamente un livello di NADH costante piuttosto che un rapporto NADH costante: NAD. Anche i livelli di NADP(H) (cioè NADP + NADPH) e NADPH non sono stati influenzati dai cambiamenti nella fonte di carbonio della coltura o in D; nel terreno L-lattato-limitato queste concentrazioni erano rispettivamente di 0,97 e 0,53 mumol/g di peso secco di cellule. Il rapporto NADPH:NADP(H) era molto più alto del rapporto NADH:NAD(H), con una media del 55% nelle cellule a carbonio limitato.
Studi sulla Sphaeromonas communis flagellata del rumine.La Sphaeromonas communis flagellata del rumine ha mostrato un aumento significativo della densità di popolazione da 1 a 2 ore dopo l'inizio della pecora ospitante alimentazione, seguita da una riduzione del numero al livello pre-alimentazione dopo altre 2 o 3 ore. La storia della vita dell'organismo ha dimostrato di essere costituita da un flagellato mobile che germinato per produrre uno stadio vegetativo comprendente un limitato sistema rizoide su quali fino a tre corpi riproduttivi venivano portati insieme (in vitro) ad altri corpi sferici di funzione sconosciuta; in vivo, i corpi riproduttivi venivano stimolati a liberare flagellati da un componente della dieta dell'ospite. Lo stadio vegetativo somigliava molto a quello di certi specie di funghi ficomiceti acquatici, e i flagellati possono quindi da zoospore I flagellati liberati in vivo hanno perso la loro motilità entro 2 o 3 ore e si sono sviluppati nella fase vegetativa riproduttiva, producendo un rapido de piega nel numero di flagellati. Condizioni di massima produzione flagellata (pH 6,5, 39 gradi C, presenza di CO2, assenza di ossigeno) approssimate a quelle riscontrate nel rumine. L'organismo è stato coltivato in vitro in un terreno indefinito in assenza di batteri e altri flagellati.
Effetto dell'amiloride e di alcuni dei suoi analoghi del trasporto cationico nella pelle di rana isolata e nelle sottili membrane lipidiche.L'inibizione della corrente di cortocircuito (Isc ) in pelle di rana isolata e l'induzione di potenziali di superficie nelle membrane a doppio strato lipidico prodotte dal farmaco diuretico amiloride e da un certo numero dei suoi analoghi chimici. Le principali conclusioni del nostro studio sono: (a) La forma carica di amiloride è biologicamente specie attive. (b) Sia l'entità di Isc che l'effetto inibitorio dell'amiloride sono sensibili all'ambiente ionico che bagna la pelle isolata e queste due caratteristiche sono modulate in regioni separate e distinte sul sito di trasporto. (c) L'amiloride è molto specifica nella sua interazione inibitoria con il sito di trasporto del Na+ poiché lievi modifiche strutturali possono comportare cambiamenti significativi nell'efficacia del farmaco Abbiamo scoperto che le sostituzioni in posizione 5 dell'anello pirazinico riducono notevolmente l'attività del farmaco, mentre i cambiamenti in posizione pos. ition 6 sono meno drastici. Le alterazioni nella frazione guanidinio diminuiscono l'attività solo se il risultato è un cambiamento nell'orientamento spaziale del gruppo amminico che porta la carica positiva. (d) L'amiloride può legarsi e alterare la carica sulle superfici della membrana, ma questa azione non può spiegare i suoi effetti altamente specifici nei sistemi biologici.
Orticaria.L'orticaria è un problema spesso tanto fastidioso per il medico quanto per il paziente. L'approccio al paziente con orticaria richiede innanzitutto una ricerca l'eziologia, sia endogena e scatenata da emozioni o malattie sistemiche occulte, esogena e scatenata da allergia ad antigeni inalati o ingeriti, sia fisica e dovuta ad anormale sensibilità al caldo, al freddo, alla luce o alla pressione. Spesso una ricerca infruttuosa, la valutazione diagnostica deve essere accompagnata da un'adeguata terapia sintomatica che richieda familiarità con gli antistaminici e i relativi vantaggi nelle varie forme di orticaria Le diete di eliminazione hanno valore diagnostico oltre che terapeutico: sono particolarmente utili le diete prive di matitalina, di lievito e di salicilati Gli studi terapeutici con tetraciclina, nistatina e griseofulvina possono essere utili, mentre i corticosteroidi e la desensibilizzazione specifica sono raramente utili.
Cromatografia di affinità della lipasi con ligandi idrofobici accoppiati ad agarosio attivato dal bromuro di cianogeno.Il comportamento della lipasi prodotta da Pseudomans mephitica var. lipopytica verso i residui idrofobici accoppiato a gel spaziatori che sono stati preparati accoppiando un'ammina primaria ad agarosio attivato da CNBr, è stata studiata La lipasi adsorbita sul ligando di una lunga catena alifatica non ramificata, un anello benzenico o acido desossicolico è stata solo leggermente o non tutta eluita a pH 5 o pH 11 mediante tamponi contenenti 1 M NcC1. La lipasi è stata eluita da un liquido contenente un tensioattivo o un solvente organico miscibile con acqua, indicando un maggiore coinvolgimento di forze idrofobiche. L'adsorbimento di propano, ciclopentano, cicloesano, cicloeptano o crisene sembra essere ottenuto attraverso forze elettrostatiche, in quanto il desorbimento è stato causato da un tampone contenente 1 M NaC1 a pH 11. La quantità di lipasi adsorbita su questi ligandi idrofobici era circa la stessa di quella adsorbita sui leganti appartenenti al primo gruppo. Poiché una piccola quantità di lipasi è adsorbita su ciclopropano, ciclottano, piridina, metano, n-pentano o catene alifatiche ramificate, questi ligandi sembrano imporre un ostacolo sterico all'adsorbimento della lipasi, oppure possono essere troppo piccoli per adattarsi ai siti idrofobici della lipasi.
Infezione neonatale da virus timico di topo. Effetti differenziali sulle cellule T che mediano la reazione del trapianto contro l'ospite.Infezione neonatale da virus timico di topo (TA ), un virus dell'herpes murino, ha prodotto una necrosi estesa ma temporanea del timo che era massima tra 10 e 14 giorni di età. Studi su cellule precursori e amplificatrici che mediano la reattività del trapianto contro l'ospite (GVH) di timociti, cellule della milza (SC) , e cellule linfonodali (LNC) di topi normali e con infezione da TA sono state prodotte a 4 e 8 settimane di età. L'infezione con TA ha comportato una profonda riduzione (dal 70 all'80%) della reattività diretta del GVH dei timociti a entrambe le età; in confronto, la capacità dei timociti di produrre sinergia quando combinati con LNC normale era normale a 8 settimane. La reattività diretta di GVH di SC era depressa del 90% 4 settimane dopo l'infezione con TA ma è tornata quasi normale a 8 settimane. Reattività di GVH diretta di LNC da topi con infezione da TA era normale a 4 e 8 settimane di età, ma l'attivazione delle cellule T dell'amplificatore vity in LNC era marcatamente depresso a 8 settimane. Questi risultati dimostrano che l'AT ha effetti altamente selettivi sulle sottopopolazioni di cellule T nel timo e nei linfonodi.
Ricombinazione parziale dell'attività in ricombinanti eterologhi di componenti M che legano la fosforilcolina di diverse specie.Esperimenti di ricombinazione sono stati eseguiti con catene pesanti e leggere derivate da a Waldenström\'s IgM con specificità contro la fosforilcolina. Le molecole ricombinanti avevano una costante di associazione per la fosforilcolina dello stesso ordine di grandezza delle IgM native; il numero di siti di legame a saturazione era solo leggermente diminuito nelle molecole ricostituite, indicando il recupero del legame attività dopo ricombinazione di catene pesanti e leggere di IgM. Ricombinanti eterologhi ottenuti con catene polipeptidiche di un'altra IgM monoclonale senza attività di legame dimostrabile hanno recuperato solo dal 5 al 10% dell'attività di legame di ricombinanti omologhi Molecole ibride preparate con catene pesanti e leggere dalla fosforilcolina- La proteina TEPC-15 del mieloma di topo IgA legante, tuttavia, ha riguadagnato fino al 41% del legame ac attività dei ricombinanti omologhi; questi dati suggeriscono un considerevole grado di omologia strutturale condivisa dalle IgM umane e dalle proteine IgA murine con specificità di legame alla fosforilcolina.
Deficit di immunoglobuline duodenali nei topi con malattia del trapianto contro l'ospite (GVHD).L'intestino tenue è un organo bersaglio ben documentato nel topo e nella GVHD umana, e la diarrea è una parte importante della sindrome clinica della GVHD. Sebbene sia stata documentata una pletora di deficit immunitari sistemici nella GVHD, l'integrità del sistema immunitario del piccolo intestino non è stata studiata. Non è stata dimostrata una correlazione tra la disfunzione immunitaria sistemica e l'incidenza di linfomi nei topi sopravvissuti alla GVHD. Se esiste un'immunodeficienza gastrointestinale nella GVHD di topo, dovrebbe essere studiata la sua possibile relazione con i linfomi GVHD, spesso addominali. La GVHD è stata prodotta in topi neonati BLA (C57 BL/Ka femmine x BALB-C maschi) in uno specifico ambiente privo di agenti patogeni mediante inoculazione ip di 10 (7) cellule di milza maschi BALB-C. I topi di controllo hanno ricevuto cellule di milza singeniche. Venti GVHD e 16 topi di controllo sono stati sacrificati a 3 settimane e campioni di duode num sono stati rimossi per l'esame istologico e immunofluorescente di routine. Tutti i topi GVHD tranne uno (95%) avevano IgA e IgM duodenali praticamente assenti. La fluorescenza cellulare duodenale è stata dimostrata in tutti i controlli. Un significativo deficit di immunoglobuline duodenali è stato dimostrato in topi GVHD di 3 settimane. La relazione di questo risultato con la diarrea, il deperimento e la neoplasia GVHD resta da determinare.
[Scelta volontaria del sesso. Lo stato attuale delle nostre conoscenze].Che ci piaccia o no, la prossima richiesta che la coppia moderna fare dopo il controllo delle nascite sarà la selezione volontaria del sesso dei loro bambini. Inoltre, questa selezione ha un indubbio valore medico nella prevenzione di alcune malattie congenite o ereditarie legate al sesso. Molti ricercatori hanno rivolto la loro attenzione a questi problemi negli ultimi anni , soprattutto negli Stati Uniti, in Inghilterra e in Germania. Dopo una rassegna storica dei progressi compiuti in questo settore è stato intrapreso uno studio sullo stato attuale della ricerca negli USA e in Germania, in cui il Paese il Federal Il governo ha creato un dipartimento speciale per la ricerca scientifica. Le nostre attuali conoscenze sui metodi che vengono adottati per ottenere un feto di sesso maschile di sesso femminile fino ad oggi viene quindi brevemente spiegato. I risultati ottenuti dai principali ricercatori hanno b een riassunto. Questi sono tra l'80 e il 90% di successo. Vengono delineati i passaggi che hanno segnato queste scoperte in questo campo poco compreso dalla maggior parte dei medici e dal pubblico francese.
Disodio cromoglicato nella rinite allergica all'ambrosia.Questo studio è stato progettato per testare l'efficacia del disodio cromoglicato rispetto al placebo in uno studio in doppio cieco in pazienti con rinite allergica all'ambrosia I pazienti sono stati selezionati sulla base di una storia clinica e di una reazione 4+ all'iniezione intradermica di ambrosia idrosolubile, 0,02 cc di 500 PNU/cc I gruppi di agenti attivi/placebo sono stati selezionati a caso e sono stati sul farmaco per circa 8 settimane, iniziando 1 settimana prima dell'inizio della stagione pollinica dell'ambrosia. La risposta del paziente è stata valutata utilizzando le schede del diario del paziente, il numero di compresse antistaminiche assunte e le interviste ai pazienti. Nello studio di Toronto, su 17 pazienti del farmaco attivo, 15 sono stati classificati come migliorati, rispetto a solo 6 dei 21 pazienti trattati con placebo che sono stati migliorati. Tuttavia, nello studio di Hamilton, i risultati sono stati meno impressionanti. Tuttavia, sembra che l'insufflazione intranasale di disodio cromoglicato fosse più efficace nel ridurre i sintomi della febbre da fieno di ambrosia rispetto al placebo.
L'effetto della pertosse e degli agenti beta-bloccanti adrenergici sui mastociti.Vaccino contro la pertosse iniettato ip a dosi note per causare ipersensibilizzazione ha provocato una marcata diminuzione nel numero di mastociti dai lavaggi peritoneali di ratti e topi. Una riduzione significativa è stata ottenuta già un giorno dopo l'iniezione di pertosse di dieci miliardi di cellule nei ratti ed è stata osservata dopo 5-7 giorni. Una riduzione massima del numero di mastociti è stato ottenuto da una dose di 20 miliardi di cellule. Non è stata rilevata attività biologica dell'istamina nel surnatante dai lavaggi peritoneali ottenuti dopo 10 min, 60 min e 24 ore da ratti di controllo e trattati con pertosse, indicando che la pertosse non ha causato degranulazione dei mastociti in vivo. Il contenuto di istamina nei pellet di mastociti precipitati da ratti di controllo era molto più alto del corrispondente contenuto di istamina da ratti trattati con pertosse. In ratti e topi, propranololo e altri beta adrene agenti bloccanti rgici hanno causato la degranulazione dei mastociti nei lavaggi peritoneali in vitro. Practolol era l'agente beta-bloccante adrenergico meno efficace nella degranulazione dei mastociti. Catecolamine, istamina, 6-idrossidopamina, metacolina e pertosse non sono riuscite a causare alcuna degranulazione. L'isoproterenolo proteggeva i mastociti dalla degranulazione indotta dal propranololo. Il propranololo ha causato la colorazione bluastra della pelle di ratto e topo quando iniettato id. I mastociti di ratti di controllo e di ratti iniettati pertosse erano ugualmente sensibili al propranololo in vitro. Si pensa che il basso recupero dei mastociti dai lavaggi peritoneali di ratti e topi sia dovuto alla mobilizzazione dei mastociti lontano dal peritoneo.
Il ruolo delle precipitine e dell'attivazione del complemento nell'eziologia della malattia polmonare allergica.È stato descritto un modello sperimentale di malattia polmonare allergica monitorato da analisi della tensione arteriosa di ossigeno in seguito a provocazione aerosol con antigene. Conigli immunizzati con un antigene solubile classico, l'albumina sierica umana (HSA), fino al punto in cui era dimostrabile una grave reattività cutanea di Arthus, sono stati sottoposti a test aerosol con antigene. Misurazioni della tensione arteriosa di ossigeno effettuate su campioni pre e post-sfida hanno prodotto modelli di risposta precoce, tardiva e continua, che ricordano quelli ottenuti negli esseri umani a seguito di test di provocazione. La sfida con aerosol di animali non immunizzati con HSA non ha comportato alcun cambiamento rispetto alle condizioni di base. Conigli non immunizzati esposti a piccoli e massicci ( 10X) gli aerosol di spore di Aspergillus hanno anche dimostrato varie depressioni post-sfida nella tensione arteriosa di ossigeno e livelli ridotti nel complemento emolitico activi ty, a seconda della specie di fungo e della dose di spore utilizzate. Animali non immunizzati pretrattati con fattore di veleno di cobra in un modo noto per ottenere l'esaurimento del complemento non sono riusciti a rispondere con tensioni di ossigeno arterioso alterate a seguito di una simile sfida con aerosol. Si ipotizza che, sebbene le precipitine possano svolgere un ruolo nella malattia artificiale iniziata da antigeni solubili, l'attivazione aspecifica del complemento può essere più importante nella comprensione dell'eziologia della malattia spontanea nell'uomo causata dall'inalazione di particolato ammuffito.
Calcio dietetico e pH rispetto all'equilibrio minerale nelle vacche Holstein 84 giorni prima o 2 giorni dopo il parto.Sedici vacche Holstein in asciutta sono stati assegnati a quattro gruppi che combinavano uno dei due 0,2 o 2,1% di calcio e pH di 4,5 o 6,1 in una disposizione fattoriale 2 X 2 di trattamenti per studiare l'effetto del calcio e dell'acidità (pH) della dieta sull'assunzione volontaria di sostanza secca, metabolismo minerale e costituenti del sangue. L'esperimento è stato avviato 84 giorni prima del parto e completato 2 giorni dopo il parto. L'assunzione volontaria di sostanza secca tendeva ad essere maggiore con diete più ricche di calcio e acidità (pH più basso). La nutrizione di calcio era migliorata da diete più acide. Apparentemente veniva assorbito più calcio totale (26 e 7 g) quando la dieta conteneva il 2,1% di calcio, ma la dieta con lo 0,2% di calcio ha determinato un assorbimento percentuale apparente più elevato (25 e 17%) durante il periodo secco. Un aumento dell'assorbimento apparente (70 e 5 g) e dell'utilizzo di il calcio nella dieta si è verificato con il trattamento con calcio più elevato a 2 giorni p parto. L'utilizzo di magnesio e fosforo è stato migliorato con una dieta a basso contenuto di calcio. Sebbene i trattamenti sperimentali non abbiano avuto effetti significativi sui minerali nel sangue, il calcio sierico è diminuito del 12% 2 giorni dopo il parto. Una migliore nutrizione di calcio è stata fornita dalle diete ad alto contenuto di calcio quando le diete hanno mantenuto un equilibrio positivo per magnesio e fosforo.
Lipasi lipoproteiche del latte: una recensione.L'attività della lipasi lipoproteica è stata trovata nei latti di diverse specie dove si presume derivi da perdite dal ghiandola mammaria nel latte. La funzione dell'enzima nella ghiandola è apparentemente quella di aiutare il trasferimento degli acidi grassi del triacilglicerolo della lipoproteina del sangue nei triacilgliceroli del latte. Il latte scremato bovino è una delle fonti più ricche di lipoproteina lipasi e questo enzima è stato ampiamente purificato ( 7000 volte) mediante cromatografia di affinità. La lipasi ha un peso molecolare di circa 62000, è inibita da solfato di protamina, cloruro di sodio 1,0 M, apolipoproteina CI (apolipoproteina-serina) e apolipoproteina C-III (apolipoproteina-alanina). L'enzima è attivata dall'apolipoproteina C-II (acido apolipoproteina-glutammico), dal siero e dall'eparina alla quale si lega anche. La lipasi è altamente specifica per gli esteri primari degli acilgliceroli e presenta una leggera stereospecificità per l'estere sn-1 in preferenza al SN-3-estere. Il latte bovino ha anche un'attività separata verso gli 1-monoacilgliceroli. Il latte umano contiene una lipoproteina lipasi stimolata dal siero con molte delle caratteristiche dell'enzima nel latte bovino, nonché un enzima stimolato dai sali biliari che assomiglia all'idrolasi dell'estere di sterolo del succo pancreatico di ratto. Vengono discussi il dosaggio, la funzione, la purificazione, le caratteristiche e le specificità del substrato di questi enzimi.
Peptidi sintetici per dosaggi di chimosina e pepsina: effetto del pH e determinazione indipendente dalla pepsina nelle miscele.Peptide I [H-Phe-Gly-His- Phe(NO2)-Phe-Ala-Phe-OMe] idrolizzato dalla chimosina con kcat=.3+/-.3 s-1 e KM=7+/-3 mM (pH 4,7) inibiscono competitivamente il peptide II [H-Leu -Ser-Phe(NO2)-Nle-Ala-Leu-OMe] idrolisi da chimosina con KI=.23 +/- .12 mM a pH 4.7 In condizioni di riferimento (.4 mM peptide, .01 M tampone acetato pH 4.7), le attività specifiche della pepsina e della chimosina suina sul peptide I erano 470 +/- 70 nM S-1 e 0,8 nM S-1 per mg di enzima. Questa differenza di attività specifica per il peptide I ha permesso lo sviluppo di una chimosina- dosaggio indipendente della pepsina per miscele di questi enzimi. Inoltre, il peptide II con un'attività specifica di 2400 +/- 300 nM S-1 e 154 +/- 20 nM S-1 per mg di pepsina suina e chimosina fornisce un'alternativa alla misurazione della coagulazione del latte per la misurazione delle attività simili a chimosina e pepsina in commer caglio ciale. I prodotti di idrolisi del peptide II da parte della chimosina hanno mostrato un gruppo ionizzato di pK apparente di 3,5 +/- 0,2 e una variazione del coefficiente di assorbimento molare di 1000 +/- 100 a pH 4,7 ea 310 nm. Dalle misurazioni delle costanti cinetiche, kcat e KM, da pH 2,5 a 7 con il peptide II, l'attività della chimosina dipende dalla protonazione di un gruppo di pK apparente 5,3 +/- 0,2 nell'enzima libero. Il caglio in polvere si è dimostrato abbastanza stabile dopo 17 mesi di conservazione a 4 C. Nello stesso periodo, una soluzione di chimosina cristallina mantenuta a --18 C ha perso dal 30 al 50% della sua attività.
Ossidazione del NADPH manganese-dipendente da parte di particelle di granulociti. Il ruolo del superossido e la natura non fisiologica del fabbisogno di manganese.Lavori recenti hanno indicato che il superossido è coinvolto nell'ossidazione del NADPH stimolata dal manganese da parte di preparazioni di granuli grezzi di neutrofili di cavia. per quanto riguarda la dipendenza dal pH, la sensibilità al cianuro e la ridotta specificità del nucleotide piridinico, le proprietà dei due sistemi sono molto simili. Sono state ottenute ulteriori informazioni sulla specificità dei cationi e la cinetica dell'ossidazione del NADPH catalizzata da metalli. Dalle somiglianze tra le proprietà di il modello e i sistemi di particelle dei neutrofili, postuliamo che l'ossidazione del NADPH manganese-dipendente osservata in presenza di granuli neutrofili rappresenti ts in gran parte della catena di radicali liberi non enzimatici che comportano l'ossidazione di NADPH a NADP, con O2- sia come iniziatore di catena che come una delle specie di propagazione. In questa reazione, le particelle di neutrofili servono solo come fonte di O2-. Inoltre, gli stessi cambiamenti nella cinetica (diminuzione del Km apparente per NADPH) osservati in precedenza quando venivano impiegati granuli provenienti da cellule fagocitanti piuttosto che da cellule a riposo potrebbero essere imitati variando il tasso di generazione di O2 dal sistema modello. Concludiamo da questi risultati che non è necessario invocare un enzima che richiede manganese come componente del sistema respiratorio fagocitamente stimolato del neutrofilo.
Determinanti della clearance batterica polmonare nei topi normali.Le determinanti della clearance polmonare di Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli e Staphylococcus aureus sono state studiati in topi normali dopo esposizione a un aerosol di batteri vitali e batteri morti marcati con 99mTc. La frazione di batteri nei polmoni che è rimasta vitale 4 ore dopo l'esposizione è stata: S. pneumoniae, 7,3%; K. pneumoniae, 121%; E. coli, 88,5%; S. aureus, 27,6%. Il tasso di rimozione fisica delle particelle batteriche (Kmc) è stato determinato dalla variazione nel tempo della conta polmonare di 99mTc: Kmc variava tra 7 e 12%/h ed era simile in tutti specie. Il tasso di clearance mucociliare e di uccisione batterica intrapolmonare (Kk + Kmc) è stato calcolato dalla variazione nel tempo della conta batterica negli animali che avevano ricevuto tetraciclina per inibire la moltiplicazione batterica. Kk, il tasso di uccisione intrapolmonare, è stato ottenuto per sottrazione di Kmc da (Kk + Kmc). i valori calcolati per Kk erano: S. pneumoniae, - 87%/h; K. pneumoniae, - 17%/h; E. coli, - 18%/h; S. aureus, - 22%/h. Il tasso di moltiplicazione batterica intrapolmonare (Kg) è stato stimato dalla relazione tra la conta batterica negli animali trattati con tetraciclina e non trattati con tetraciclina, assumendo che la tetraciclina alterasse solo Kg. Kg, espresso come tempo di raddoppio, è stato: S. pneumoniae, 310 min; K. pneumoniae, 217 min; E. coli, 212 min; S. aureus, infinito (nessuna moltiplicazione). I dati indicano che le marcate differenze nella clearance di queste specie dal normale polmone di topo derivano dall'interazione di diversi tassi di moltiplicazione e uccisione batterica in vivo.
Agenti bloccanti i recettori alfa e beta-adrenergici combinati con un diuretico nel trattamento dell'ipertensione essenziale.L'efficacia antipertensiva e gli effetti collaterali della combinazione La terapia con propranololo, fenossibenzamina e idroclorotiazide è stata esaminata in 17 pazienti con ipertensione moderata e moderatamente grave. Dopo un periodo di controllo di due o tre settimane\', il propranololo è stato iniziato in nove pazienti come unico agente antiipertensivo e insieme alla fenossibenzamina, in otto Titolando il dosaggio contro la frequenza cardiaca e la risposta pressoria, il propranololo è stato somministrato, in dosi frazionate, da 80 a 160 mg e fenossibenzamina, da 20 a 50 mg al giorno. Quando il propranololo è stato somministrato da solo in nove pazienti, da quattro a 12 settimane, la pressione sanguigna normale non è stata raggiunta in nessun paziente. Durante da tre a dieci settimane di terapia combinata con propranololo e fenossibenzamina in 17 pazienti, pressione sanguigna normale (150/90 mm Hg o meno) o una pressione quasi normale (150/100 o meno) è stata raggiunta in 12 pazienti in posizione supina e in 15 pazienti in posizione eretta, mentre non è stata osservata ipotensione ortostatica. Fatta eccezione per una riduzione dell'eiaculazione in tre pazienti maschi su sei, non sono stati riscontrati altri effetti collaterali. L'aggiunta di diuretico idroclorotiazide in tutti i suddetti 17 pazienti, alla dose di 50-100 mg al giorno con una concomitante diminuzione della dose di fenossibenzamina, ha prodotto un'ulteriore riduzione della pressione sanguigna e la pressione sanguigna normale o quasi normale è stata raggiunto in tutte le materie. L'ipotensione ortostatica sintomatica, osservata in due pazienti, è stata trattata con un ulteriore aggiustamento della dose di fenossibenzamina, mentre l'inibizione dell'eiaculazione è stata persistente in un solo paziente. Si conclude che la somministrazione combinata di propranololo, fenossibenzamina e idroclorotiazide in dosi individualizzate è molto efficace nell'abbassare la pressione sanguigna con effetti collaterali minimi.
Counterimmunoelectrophoresis of staphylococcal antibody.Modifiche della tecnica di controimmunoelettroforesi stafilococcica sono state valutate per determinare come le variazioni nella procedura hanno influenzato i risultati. Né un intervallo di pH del tampone di 7,8-9,0 né la molarità del tampone di 0,015 o 0,025 quando testati in combinazioni hanno causato differenze apprezzabili. Tuttavia, l'uso di diverse preparazioni di agar o il ritardo nell'aggiunta dell'antigene al vetrino del test ha alterato la posizione della banda della precipitina. L'agarosio è risultato essere più sensibile nel determinare il titolo della precipitina sierica e ha fornito una documentazione fotografica migliore rispetto a Ionagar o Noble agar.
Recettori di membrana per ormoni e neurotrasmettitori.I recettori per gli ormoni peptidici e i neurotrasmettitori sono componenti integrali della membrana plasmatica delle cellule che servono ad accoppiare l'ambiente esterno ai regolatori intracellulari del metabolismo. Queste macromolecole sono solitamente glicoproteine ad alto peso molecolare, e in molti casi sembrano avere più di una subunità in grado di legare l'ormone. L'interazione dell'ormone o neurotrasmettitore con il suo recettore è rapida, reversibile e di alta affinità e specificità Molti recettori mostrano proprietà cooperative nel legame ormonale o nella funzione biologica La concentrazione dei recettori sulla membrana è una funzione della sintesi e della degradazione continue e può essere alterata da una varietà di fattori compreso l'ormone stesso Il mosaico fluido la natura della membrana può consentire ai recettori ormonali e agli effettori di esistere in stati fluttuanti. Ulteriori indagini sul recettore ormonale r interazione fornirà senza dubbio nuove intuizioni sia sul meccanismo dell'azione dell'ormone che sulla struttura e funzione della membrana.
Deficiente attività della 17 beta-idrossisteroide ossidoriduttasi nei testicoli di uno pseudoermafrodito maschio.attività della 17beta-idrossisteroide ossidoriduttasi (17 beta-HOR) nel tessuto testicolare di un maschio pseudoermafrodita (MP) che aveva livelli plasmatici elevati di LH e androstenedione (A) e livelli normali di deidroepiandrosterone (DHA) è stato confrontato da studi in vitro a quello del tessuto testicolare di un uomo normale. era localizzata prevalentemente nella frazione microsomiale, come nel normale tessuto testicolare Con DHA, A ed estrone come substrati, l'attività 17 beta-HOR del MP era diminuita in presenza di NADPH, ma non di NADH, rispetto a normale. NADPH era il cofattore preferito per 17 beta-HOR dai testicoli normali, mentre l'attività del 17 beta-HOR dai testicoli MP era inferiore con NADPH che con NADH come cofattore. Questi risultati indicano che la produzione inefficiente di testosterone nel I test MP possono essere account ed a causa di una deficienza dell'attività 17 beta-HOR NADPH-dipendente. Ulteriori studi hanno suggerito che la 3 beta-idrossisteroide ossidoreduttasi-isomerasi (3 beta-HOR) era aumentata nei testicoli MP ed era molto maggiore dell'attività della 17 beta-HOR con DHA come substrato. Questi risultati spiegano in gran parte i livelli plasmatici elevati di A con livelli normali di DHA e suggeriscono che il DHA porta ad A porta al testosterone che era la principale via di biosintesi del testosterone nei testicoli MP.
Secrezione di prolattina da parte della metoclopramide nell'uomo.Sei uomini e nove donne hanno ricevuto iniezioni endovenose di 2,5 mg di metoclopramide per valutarne il potenziale come stimolo a rilascio di prolattina. Dopo la somministrazione di metoclopramide, si è verificato un rapido aumento della prolattina sierica fino a un picco di risposta di 38,2 +/- 3,9 ng/ml negli uomini e di 103 +/- 10,2 ng/ml nelle donne. La risposta della prolattina alla metoclopramide negli uomini è stata confrontata con la risposta a 400 tazze di TRH in 10 uomini. La risposta di picco dopo TRH è stata di 22,4 +/- 2,2 ng/ml, che era significativamente inferiore a quella osservata dopo la metoclopramide. Il pretrattamento con 500 mg di L-dopa ha soppresso la prolattina risposta alla metoclopramide in 6 uomini a una risposta media di 16,3 +/- 4,3 ng/ml Abbiamo concluso che la metoclopramide è uno stimolo sicuro, affidabile e potente della secrezione di prolattina ed esercita questo effetto bloccando i recettori della dopamina nell'ipotalamo e diminuendo fattore di inibizione della prolattina È gratuito di effetti collaterali ed è un'utile alternativa alla clorpromazina.
Comportamento cromatografico di alcaloidi su strati sottili di scambiatori cationici. II. Acido alginico, Rexyn 102, Dowex 50-X4 e CMCNa.Il comportamento cromatografico di 48 alcaloidi su scambiatori cationici con matrici cellulosiche, paraffiniche e polistireniche sia in forma acida che sodica, miscele di solventi idro-organici, soluzioni tampone acquose e soluzioni acide organiche e minerali sia in acqua che in solventi acquoso-organici hanno sono stati utilizzati come eluenti. Vengono discussi i meccanismi di ritenzione di questi composti su acido alginico, strati sottili di Rexyn 102 (Hplus) e Dowex 50-X4 (Hplus). Interessanti separazioni degli alcaloidi sono state effettuate su acido alginico e Rexyn 102 (Hplus).
Studi cinetici sulla gamma-glutamil transpeptidasi di rene di pecora.La cinetica della gamma-glutamil transpeptidasi di rene di pecora è stata studiata utilizzando un nuovo substrato L-alfa- metil-gamma-glutamil-L-alfa-amminobutirrato. Quando il substrato è stato incubato con l'enzima in presenza di un amminoacido o accettore peptidico, si sono formati i corrispondenti derivati L-alfa-metil-gamma-glutamil degli accettori. si è verificata l'assenza dell'idrolisi del solo accettore e non sono stati rilevati prodotti di transpeptidazione La presenza del gruppo metilico sul carbonio alfa impedisce apparentemente il trasferimento enzimatico del residuo L-alfa-metil-gamma-glutamil al gruppo amminico del substrato stesso (autotranspeptidazione). Quando l'enzima è stato incubato con substrati convenzionali, come glutatione o gamma-glutamil-p-nitroanilide e un accettore di amminoacidi, si sono verificate contemporaneamente idrolisi, autotranspeptidazione e transpeptidazione all'accettore. Velocità iniziale me accertamenti in cui la concentrazione di L-alfa-metil-gamma-glutamil-L-alfa-amminobutirrato è stata variata a diverse concentrazioni fisse di accettori, ed è stato determinato il rilascio di alfa-amminobutirrato o la formazione dei prodotti di transpeptidazione, hanno prodotto risultati che sono coerenti con un meccanismo da ping-pong modificato da uno shunt idrolitico. Viene presentato uno schema di tale meccanismo. Questo meccanismo prevede la formazione di un intermedio alfa-metil-gamma-glutamil-enzima, che può reagire con un amminoacido per formare il prodotto di transpeptidazione; oppure in assenza o in presenza di basse concentrazioni di amminoacidi, può reagire con l'acqua per formare i prodotti idrolitici. Le derivazioni cinetiche per la reazione dell'enzima con il substrato convenzionale gamma-glutamil-p-nitroanilide prevedono grafici doppi reciproci lineari o non lineari, a seconda della prevalenza delle reazioni idrolitiche, di autotranspeptidazione o transpeptidazione. I risultati degli esperimenti cinetici hanno confermato queste previsioni.
Distribuzione delle attività enzimatiche nelle frazioni subcellulari della retina bovina.La centrifugazione di omogenati di retine bovine all'equilibrio isopicnico in gradienti di densità di saccarosio ha prodotto tre bande parzialmente sovrapposte di particelle che erano, nell'ordine di densità crescente: (a) segmenti esterni di cellule fotorecettrici (bastone), (b) membrane plasmatiche, lisosomi e grandi frammenti di reticolo endoplasmatico e (c) mitocondri. aveva un picco coincidente solo con le frazioni del segmento esterno era la guanilato ciclasi Le attività enzimatiche con picchi sia nel segmento esterno che nelle frazioni più dense includevano la 5\'-nucleotidasi e la fosfodiesterasi ciclica GMP Le attività enzimatiche con picchi solo nelle frazioni più dense includevano lo ione sodio e potassio -ATPasi attivata ((Na+ + K+)-ATPasi), adenilato ciclasi, AMP fosfodiesterasi ciclica, beta-glucosidasi, beta-galattosidasi e citocromo c reduttasi succinato-dipendente. Questi r i risultati suggeriscono che alcune delle attività un tempo ritenute presenti nei segmenti esterni dei bastoncelli sono in realtà presenti in particelle provenienti da altre parti della retina che contaminano le preparazioni del segmento esterno dei bastoncelli.
Richiesta di un gruppo tiolico essenziale e ferro ferrico per l'attività della fosfatasi porpora uterina porcina indotta dal progesterone.La fosfatasi porpora indotta dal progesterone isolata dalle vampate uterine dei maiali è attivato da una varietà di reagenti che scindono i legami disolfuro, tra cui 2-mercaptoetanolo, ditiotreitolo, L-ascorbato, L-cisteina, solfito e cianuro. È inibito da vari mercuriali, iodoacetamide, O-iodosobenzoato , e perossido di idrogeno. I tioli aumentano l'attività specifica della fosfatasi da 25 a circa 300 unità per mg di enzima. Questa attivazione è accompagnata da uno spostamento del massimo di estinzione a una maggiore energia per produrre una proteina con una colorazione rosa. Dopo la massima attivazione c'è una graduale diminuzione dell'attività enzimatica e del colore delle proteine che è accompagnata dalla perdita di ferro ferroso dalla proteina. Il ditionito di sodio a 10 mM o superiore provoca un'immediata inibizione dell'attività della fosfatasi e della candeggina g di colore, e può essere utilizzato per preparare l'apoproteina senza ferro. Quest'ultimo può essere parzialmente riattivato dai sali di Fe3+ ma non dal Fe2+. Il Fe3+ ripristina la forma rosa dell'enzima con un'attività specifica di circa 200 unità/mg di proteine. Cu2+ provoca anche una certa riattivazione, ma altri ioni metallici erano inefficaci. Gli studi sulla VES hanno mostrato che la forma rosa della fosfatasi contiene circa 1 atomo di ferro ferrico ad alto spin per molecola. Si conclude che la fosfatasi richiede un tiolo libero e Fe3+ per l'attività. La riduzione del ferro porta alla completa perdita sia del colore che dell'attività enzimatica. Il cambiamento di colore dal viola al rosa rappresenta la riduzione del disolfuro e non è dovuto alla riduzione del ferro.
Proprietà del sistema guanilato ciclasi-guanosina 3\':5\'-monofosfato della corteccia renale di ratto. Attivazione della guanilato ciclasi e modulazione indipendente dal calcio della guanosina tissutale 3\ ':5\'-monofosfato di sodio azide.Gli effetti della sodio azide sull'attività della guanilato ciclasi degli omogenati della corteccia renale di ratto e sul contenuto di guanosina 3\':5\'-monofosfato (cGMP) di fette corticali sono state esaminate e confrontate con quelle di carbamilcolina e NaF. Nel tampone bicarbonato di Krebs-Ringer completo contenente 10 mM di teofillina, il contenuto di cGMP tissutale è stato aumentato da 5 a 6 volte di 0,05 mM di carbammilcolina o 10 mM di NaN3 e 3 volte di 10 mM NaF. Gli aumenti di cGMP sono stati massimi in risposta a queste concentrazioni degli agonisti e si sono verificati entro 2 minuti. L'esclusione di Ca2+ dai mezzi di incubazione ha ridotto il cGMP basale del 50% in 20 minuti e ha abolito le risposte a carbamilcolina e NaF, mentre l'esclusione di Mg2+ era senza effetto s riduzioni di cGMP sono state osservate in un tampone completo contenente 1 mM di tetracaina, un agente che blocca il movimento del Ca2+ attraverso e il legame con le membrane biologiche. Al contrario, l'esclusione di Ca2+ o l'aggiunta di tetracaina non ha alterato le risposte relative di cGMP a NaN3 (aumento di 6 volte rispetto al basale), sebbene i livelli siano stati ridotti nelle fette esposte a questi buffer per 20 minuti. Quando le fette sono state incubate senza Ca2+ o con tetracaina per soli 2 minuti prima dell'aggiunta di agonisti, il cGMP basale non è diminuito. In queste condizioni, gli aumenti sia assoluti che relativi di cGMP in risposta a NaN3 erano paragonabili a quelli delle fette incubate in un tampone completo, mentre gli effetti di carbamilcolina e NaF su cGMP erano aboliti. NaN3 ha aumentato l'attività della guanilato ciclasi di interi omogenati (da 10 a 20 volte) e delle frazioni di corteccia solubili (20 volte) e particolate (4 volte) da 100.000 X g. La precedente incubazione di fettine con NaN3 in presenza o assenza di Ca2+ o con Ca2+ più tetracaina ha anche notevolmente potenziato l'attività enzimatica negli omogenati e nelle frazioni subcellulari successivamente preparati da queste fette. In presenza di MnCl2 in eccesso di 3 mM, NaN3 ha aumentato il Km apparente per MnGTP della guanilato ciclasi solubile da 0,11 mM a 0,20 mM e ha ridotto la dipendenza enzimatica da Mn2+. Pertanto, quando Mg2+ è stato impiegato come unico catione bivalente nella miscela di reazione enzimatica, le attività basali e NaN3-responsive erano rispettivamente del 7% e del 30% di quelle osservate con concentrazioni ottimali di Mn2+. In una varietà di condizioni di analisi in cui le risposte a NaN3 erano facilmente rilevabili, non è stato possibile dimostrare alterazioni nelle attività della guanilato ciclasi in risposta alla carbamilcolina o al NaF. Al contrario, il Ca2+ ha aumentato l'attività della guanilato ciclasi da 6 a 7 volte rispetto al basale in condizioni di Mn2+ ridotto (0,75 mM Mn2+/1 mM GTP). Quest'ultimo effetto del Ca2+ è stato condiviso da Mg2+ e non bloccato dalla tetracaina. Carbamilcolina, NaF, Ca2+ e NaN3 non sono riusciti ad alterare l'attività della fosfodiesterasi cGMP nella corteccia. Pertanto, mentre la carbamilcolina e il NaF aumentano l'accumulo corticale renale di cGMP attraverso azioni che dipendono dalla presenza di Ca2+ extracellulare, NaN3 stimola la generazione di cGMP in questo tessuto attraverso un meccanismo apparentemente distinto Ca2+-indipendente.
Regolazione del potenziale transmembrana dei granuli cromaffini isolati mediante ATP, analoghi dell'ATP e pH esterno.Il potenziale transmembrana dei granuli cromaffini isolati è stato misurato utilizzando gli ioni permeanti [14C]metilammina e [35S]tiocianato, nonché la sonda fluorescente, 9-aminoacridina. A pH 7,0, la membrana del granulo aveva un potenziale protonico di Nernst di -45mV, all'interno negativo. Questo potenziale era sensibile al pH esterno, ma non era influenzato da K+,Na+, Ca2+, Mg2+ o altri cationi. Il pH del potenziale zero era 6,25 sia per la metilammina che per il tiocianato. Il tiocianato aveva anche un potenziale di Nernst di grandezza e segno simili a quello della metilammina a pH 7,0 , ed era anche sensibile alla variazione del pH esterno. È stato scoperto che Mg2 + ATP depolarizza la membrana dei granuli mediante un meccanismo saturabile con un K 1/2 per ATP di 40 muM. Ca2 + era solo il 30% efficace come Mg2 + nel supportare l'ATP Il pH ottimale per questo processo era 6,25 ed è apparso essere accompagnato da una marcata alcalinizzazione dell'interno del granulo. La specificità per l'ATP è stata ulteriormente testata con analoghi strutturali di ATP e GTP. La velocità di variazione del potenziale di membrana in risposta alle variazioni del pH esterno o di Mg2+ATP è stata stimata utilizzando la sonda fluorescente 9-aminoacridina. Le modifiche sono state completate in meno di 1 s. Ciò ha suggerito che gli effetti dell'ATP non dipendevano da una trasformazione enzimatica ma da un cambiamento conformazionale indotto dall'ATP nella membrana. Concludiamo che il granulo cromaffine esiste in almeno due stati di permeabilità protonica, corrispondenti alla presenza o assenza di Mg2+ATP. Questi stati possono essere correlati al rilascio di ormoni dai granuli e alla regolazione della secrezione in vivo.
Studi sulla localizzazione subcellulare e sulle proprietà della biosintesi del bis(monoacilgliceril)fosfato nel fegato di ratto.Conversione del fosfatidilglicerolo in bis(monoacilgliceril)fosfato da parte del fegato di ratto è stato studiato l'omogenato e sono state osservate velocità massime di sintesi a pH 4,4. È stata determinata la distribuzione della bis(monoacilgliceril)P sintetasi nelle frazioni subcellulari del fegato di ratto e sono state presentate prove che stabiliscono i lisosomi come sito di sintesi di bis(monoacilgliceril)P. Oltre al fosfatidilglicerolo, l'1-acil- e il 2-acillisofosfatidilglicerolo servivano anche come precursori del bis(monoacilgliceril)P con i lisosomi come fonte di enzimi. La sintesi del bis(monoacilgliceril)P non richiedeva intermedi o cofattori ad alta energia. La possibilità che una fosfoslipasi È stato studiato A con attività aciltransferasica catalizza la formazione di bis(monoacilgliceril) P. La stabilità al calore e gli studi sugli inibitori hanno suggerito che questo probabilmente non è il Astuccio. È stato dimostrato che i lisosomi non sono in grado di sintetizzare il fosfatidilglicerolo e le analisi dei lipidi hanno mostrato che i lisosomi non contengono fosfatidilglicerolo o lisofosfatidilglicerolo. La sintesi del bis(monoacilgliceril)P nella cellula può richiedere l'interazione dei lisosomi con una membrana contenente fosfatidilglicerolo.
Purificazione e proprietà della catepsina D dalla milza suina.La catepsina D è stata purificata dalla milza suina fino a raggiungere una quasi omogeneità determinata mediante elettroforesi su gel. Lo schema di isolamento comportava una precipitazione acida dell'estratto di tessuto, la cromatografia con DEAE-cellulosa e Sephadex G-200 e la focalizzazione isoelettrica. Il prodotto finale rappresentava una purificazione di circa 1000 volte e un recupero di circa il 10%. L'enzima purificato era l'isoenzima principale, che rappresentava 60 % di catepsina D presente nella milza suina. Due isoenzimi minori della catepsina D erano presenti in piccole quantità. L'enzima purificato assomigliava alla pepsina suina per peso molecolare (35.000), composizione aminoacidica e inattivazione da parte di specifici inattivatori della pepsina. La curva di attività del pH di l'enzima purificato ha mostrato due ottimi vicino a pH 3 e 4. Le attività relative a questi valori di pH ottimali sono state influenzate dalla concentrazione di sale. L'evidenza sperimentale ha indicato che il fenomeno dei due ottimi è un pro proprietà di una singola specie enzimatica.
Un metodo ossigrafico per la determinazione del colesterolo e la misurazione delle reazioni lente di consumo di ossigeno dei microsomi epatici.Reazioni di consumo di ossigeno della colesterolo ossidasi [ EC 1.1.3.6] e i microsomi sono stati misurati con un elettrodo galvanico ad ossigeno collegato a un amplificatore offset per la misurazione sensibile dei processi di reazione. La sensibilità di questo metodo ossigrafico per la rilevazione del consumo di ossigeno era dieci volte maggiore di quella del metodo usuale Il tasso minimo di reazioni lente di consumo di ossigeno che potrebbe essere stimato era di circa 5 nmoli di ossigeno al minuto e anche la quantità minima di consumo di ossigeno che poteva essere determinata era di circa 5 nmoli Un metodo ossigrafico per la determinazione diretta e rapida del colesterolo è stato dimostrato utilizzando un ventesimo della quantità di colesterolo ossidasi utilizzata per il metodo colorimetrico. I processi di consumo di ossigeno beta-NADH-dipendente soppresso dal cianuro e c il consumo di ossigeno alfa-NADH-dipendente insensibile allo yanide, difficile da seguire con il metodo usuale, è stato seguito utilizzando una piccola quantità di microsomi (meno di 1 mg di proteine/ml). Inoltre, in presenza di ADP sono state seguite la temporanea cessazione del consumo di ossigeno alfa-NADH-dipendente causato dal ferricianuro e la corrispondente ossidoriduzione del ridotto citocromo b5. L'ADP non ha inibito il consumo di ossigeno. I risultati indicano che il consumo di ossigeno con l'alfa-NADH è dovuto al trasferimento di elettroni dall'alfa-NADH tramite la NADH-citocromo b5 reduttasi e il citocromo b5, in cui il passaggio determinante per la velocità si trova in una reazione dopo la riduzione del citocromo b5.
Processo di attivazione del pepsinogeno.Il processo di attivazione del pepsinogeno è stato analizzato mediante una combinazione di simulazione al computer ed esperimento. Al fine di indagare in dettaglio il comportamento degli schemi di base proposti nello studio precedente, sono state condotte ulteriori simulazioni al computer. Sono stati eseguiti alcuni esperimenti sulla base delle informazioni ottenute. Le variazioni dello spettro di differenza UV nella fase iniziale sono state misurate mediante la tecnica del flusso interrotto e la conversione del pepsinogeno alla pepsina [EC 3.4.23.1] è stata seguita da elettroforesi su gel di sodio dodecil solfato-poliacrilammide Inoltre, sulla base dei risultati sperimentali, è stato selezionato e modificato lo schema più ragionevole. Di conseguenza, uno schema per il processo di attivazione del pepsinogeno è stato ottenuto (Schema 8) Sulla base delle analisi di cui sopra, si è ipotizzato che il primo passaggio e il terzo passaggio siano dipendenti dal pH in base alla variazione dello spettro UV, che il secondo passaggio sia un nonli vicino alla reazione contenente una reazione ad anello con un intermedio dimerico (in questo passaggio vengono rilasciati frammenti peptidici e il pepsinogeno viene convertito in una molecola simile alla pepsina) e che il terzo passaggio è una reazione di equilibrio che coinvolge il legame protonico.
Studi sull'alfa-amilasi da un batterio termofilo. II. Stabilità termica dell'alfa-amilasi termofila.L'effetto del pH, ioni mentali, e reagenti denaturanti sulla stabilità termica dell'alfa-amilasi termofila [EC 3.2.1.1] sono stati esaminati. L'enzima era più stabile a circa pH 9.2, che è coincidente con il punto isoelettrico dell'enzima. La stabilità dell'enzima è stata aumentata di l'aggiunta di ioni calcio, stronzio e sodio. L'aggiunta di ioni calcio ha stabilizzato notevolmente l'enzima. Gli effetti protettivi degli ioni calcio e sodio sono stati additivi. A temperatura ambiente, non è stata osservata alcuna distruzione rilevabile della struttura elicoidale dell'enzima dopo l'incubazione per 1 ora in presenza di dodecilsolfato di sodio 1%, urea 8 M o guanidina-HC1 6 M. L'aggiunta di urea 8 M o guanidina-HC1 6 M ha abbassato la temperatura di denaturazione termica dell'enzima. L'enzima conteneva un atomo di calcio intrinseco legato per molec ule che non può essere rimossa mediante elettrodialisi a meno che l'enzima non sia stato denaturato. Sono state misurate le costanti di velocità delle reazioni di inattivazione e denaturazione in assenza e presenza di ioni calcio e sono stati determinati i parametri termodinamici. La presenza di ioni calcio ha causato una notevole diminuzione dell'entropia di attivazione.
Formazione di legami disolfuro intercatena in proteine e immunoglobuline di Bence Jones.È stata studiata la formazione di legami disolfuro intercatena in proteine e immunoglobuline di Bence Jones parzialmente ridotte in presenza di glutatione. Si è riscontrato che solo il glutatione ossidato (GSSG) era efficace per la formazione dei legami disolfuro intercatena nelle proteine di tipo gamma Bence Jones e IgG. Nelle proteine di tipo kappa Bence Jones, invece, nessuna formazione di il legame disolfuro interLL è stato osservato in presenza di GSSG a pH superiore a 6. Il modello cinetico di formazione del legame disolfuro delle proteine di Bence Jones è stato ben interpretato assumendo che due monomeri di un tipo dimero proteico gamma siano discriminati (monomeri 1 e 2) e che solo un intermedio in cui il gruppo SH sul monomero 1 è bloccato con GSSG può formare un dimero legato con disolfuro e l'intermedio in cui il gruppo SH sul monomero 2 è bloccato con GSSG non può. i dati cinetici per la formazione dei legami disolfuro intercatena di IgG con quelli per le proteine di Bence Jones hanno suggerito che il disolfuro misto catena H-GSSG è un intermedio principale per la formazione del legame disolfuro inter H-L.
Studi sulle specie molecolari di DNA polimerasi estratte da cellule di epatoma di ascite di ratto.Attività della DNA polimerasi [EC 2.7.7.7] presenti nell'estratto ipotonico di Le cellule AH130 di epatoma di ascite di ratto sono state eluite in tre picchi separabili sulla cromatografia su colonna di cellulosa DEAE. L'attività del picco I aveva un pH ottimale alcalino ed era relativamente resistente ai reagenti bloccanti SH e alla concentrazione di sale. Queste proprietà del picco DEAE I sono tipiche di bassa DNA polimerasi a peso molecolare Le attività DEAE picco II e picco III possedevano proprietà corrispondenti alla polimerasi ad alto peso molecolare (6-8 S), mostravano la massima attività a pH neutro ed erano sensibili ai reagenti bloccanti SH e al sale. L'attività della polimerasi è stata rilasciata dal picco DEAE II o dal picco III mediante trattamento con sale, sebbene sia stata osservata una conversione parziale dal picco DEAE II al picco III durante lo stesso trattamento.
Studi comparativi sulle attività della poliguanilato polimerasi e della poliadenilato polimerasi nella frazione RNA polimerasi I DNA-dipendente dal cavolfiore.Le proprietà della poli(G) polimerasi e le attività della poli(A) polimerasi nella RNA polimerasi DNA-dipendente [nucleosidetrifosfato: RNA nucleotidiltransferasi EC 2.7.7.6] frazione I da cavolfiore (Brassica oleracea var. botrytis) sono state studiate in modo comparativo. Il pH ottimale, l'effetto della forza ionica, il l'effetto della concentrazione del substrato sulla velocità di sintesi, l'effetto della concentrazione di ioni metallici bivalenti e l'andamento temporale della sintesi a diverse temperature erano tutti diversi per le tre attività della polimerasi. La frazione enzimatica utilizzava preferibilmente DNA denaturato. Poli(C) e polimerasi sintetici poli(U) sono stati utilizzati in modo più efficace per la sintesi rispettivamente di poliguanilato e poliadenilato. Inoltre, si è scoperto che poli(G) e poli(A) formati in vitro dall'enzima fract lo ione aveva una lunghezza della catena di 25-28 e 84-89 nucleotidi, rispettivamente, e quella catena poli (adenilato-gluanilato) si formava appena quando ATP e GTP venivano aggiunti insieme come substrati nello stesso mezzo di reazione.
Alterato deidratasi del prefenato in mutanti che espellono la fenilalanina di Brevibacterium flavum.Le proprietà regolatorie di tre enzimi chiave nella via biosintetica della fenilalanina, 3-desossi- D-arabino-eptulosonato 7-fosfato sintetasi (DAHP sintetasi) [EC 4.1.2.15], corismato mutasi [EC 5.4.99.5] e prefenato deidratasi [prefenato idroliasi (decarbossilante), EC 4.2.1.51] sono stati confrontati in tre mutanti escretori di fenilalanina e il ceppo selvatico di Brevibacterium flavum. La regolazione della sintetasi DAHP da parte di fenilalanina e tirosina in questi mutanti non è cambiata affatto, ma le attività specifiche degli estratti di cellule mutanti sono aumentate da 1,3 a 2,8 volte, come riportato in precedenza ( 1) Le attività della chorismate mutasi sia nei ceppi selvatici che in quelli mutanti sono state inibite cumulativamente da fenilalanina e tirosina e recuperate con triptofano, mentre le attività specifiche dei mutanti sono aumentate da 1,3 a 2,8 volte, come quelle della DAHP sintetasi. d'altra parte, le attività specifiche della prefenato deidratasi nei ceppi mutanti e selvatici erano simili, quando era presente la tirosina. Mentre il prefenato deidratasi del ceppo selvatico è stato inibito da fenilalanina, triptofano e diversi analoghi della fenilalanina, gli enzimi mutanti non sono stati affatto inibiti ma sono stati attivati da questi effettori. La tirosina ha attivato gli enzimi mutanti molto più fortemente dell'enzima wild-type: nel mutante 221-43, la tirosina 1 mM ha causato l'attivazione di 28 volte. Km e la costante di attivazione per la tirosina sono state leggermente alterate a metà e 6 volte rispetto all'enzima wild-type, rispettivamente, mentre le costanti di attivazione per fenilalanina e triptofano erano 500 volte superiori alle rispettive costanti di inibizione dell'enzima wild-type enzima. Il peso molecolare dell'enzima mutante è stato stimato pari a 1,2 x 10(5), la metà di quello dell'enzima wild-type. Il peso molecolare dell'enzima mutante è stato stimato pari a 1,2 X 10(5) la metà di quello dell'enzima wild type, mentre in presenza di tirosina, fenilalanina o triptofano è aumentato a quello dell'enzima wild type. Immediatamente dopo che l'enzima mutante è stato attivato dalla tirosina e quindi rimossa la tirosina, mostrava ancora un'attività specifica circa 10 volte superiore rispetto a prima dell'attivazione da parte della tirosina. Tuttavia, stando nel ghiaccio, l'attività è gradualmente scesa al livello iniziale prima dell'attivazione da parte della tirosina. Il solfato di ammonio ha favorito la diminuzione dell'attività. Sulla base di questi risultati, vengono discussi i meccanismi regolatori per la biosintesi della fenilalanina in vivo e i meccanismi per la sovrapproduzione di fenilalanina nei mutanti.
Due glicosulfatasi dal fegato di un gasteropode marino, Charonia lampas. Purificazione parziale e proprietà.Due glicosulfatasi [EC 3.1.6.3], I e II, sono stati purificati rispettivamente 31,3 e 33,9 volte, da un estratto grezzo del fegato di Charonia lampas. La purificazione è stata effettuata mediante le seguenti procedure cromatografiche: fosfocellulosa, Sephadex G-150, Concanavalina A-Sepharose e focalizzazione isoelettrica. i preparati enzimatici ottenuti erano praticamente esenti da contaminazione da arilsolfatasi [EC 3.1.6.1]. Entrambe le glicosulfatasi sono probabilmente glicoproteine che differiscono nelle loro parti di carboidrati. I pesi molecolari della glicosulfatasi I e II sono stati stimati rispettivamente di circa 112.000 e 79.000. Avevano lo stesso valore ottimale pH di 5,5 e lo stesso valore Km di 25,0 mM per il glucosio 6-solfato.
La rimozione di componenti non collagene dal derma di vitello neonato con soluzione di cloruro di magnesio.1. Le sostanze non collagene nel derma di vitello neonato sono state estratte con soluzioni a varie concentrazioni di MgCl2. Il contenuto totale di proteine e idrossiprolina negli estratti di MgCl2 aumenta con l'aumento della concentrazione di MgCl2 nelle soluzioni. In particolare, sono stati osservati forti aumenti del loro contenuto a concentrazioni di MgCl2 da 0,5 a 1,0 M. Quantità totali di idrossiprolina in estratti 1.0, 2.0 e 3.0 M MgCl2 erano equivalenti al 40-50% del contenuto di idrossiprolina nell'intero tessuto connettivo. I contenuti di esoso ed esosamina degli estratti di MgCl2 aumentavano con l'aumento della concentrazione di MgCl2 L'acido esuronico era poco presente in i residui dopo estrazioni con MgCl 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 M 2. Le proteine plasmatiche, l'acido ialuronico e il solfato di dermatan sono stati estratti a basse concentrazioni di MgCl 2. Una proteina non collagenica e Mg Il collagene solubile in Cl2 è stato estratto con soluzioni di MgCl2 1,0, 2,0 e 3,0 M. La dispersione delle fibrille di collagene è stata osservata nel residuo estratto con soluzione 1.0 M MgCl2 mediante microscopia elettronica; la struttura delle fibrille del collagene è stata disordinata mediante estrazione con 2.0 e 3.0 M MgCl2. I risultati suggeriscono che la dispersione e il disordine delle fibrille di collagene portano al rilascio di una proteina non collagenica. Inoltre, si suggerisce che la rimozione dell'acido ialuronico e del dermatan solfato non fosse molto efficace per la solubilizzazione di una grande quantità di collagene, ma fosse adatta come pretrattamento all'estrazione di una proteina non collagenica accompagnata dalla solubilizzazione di una grande quantità di collagene. quantità di collagene. 3. La proteina non collagenica è stata purificata mediante cromatografia su colonna di DEAE-cellulosa. L'elettroforesi su gel di poliacrilammide di questa proteina a pH 8,5 ha mostrato una singola banda che si muoveva verso il catodo. La proteina non collagena conteneva il 3,7% di esoso, l'1,8% di esosamina e nessun acido esuronico. Questa proteina è ricca di glicina, acido glutammico e alanina e non contiene né idrossiprolina né idrossilisina. L'analisi di sedimentazione ha mostrato un singolo picco con 1,8 S e il peso molecolare era di ca. 43.000 come determinato dall'elettroforesi su gel di poliacrilammide SDS.
Studi potenziometrici sulle interazioni acido benzenboronico-alfa-chimotripsina.Quando l'inibitore competitivo acido benzeneboronico (BBA) forma un complesso con l'alfa-chimotripsina [EC 3.4.21.1] i protoni vengono rilasciati nella regione del pH acido. Il rilascio di protoni può essere misurato con una tecnica potenziometrica differenziale. Il rilascio di protoni si osserva anche nel chimotripsinogeno A ma non in TRCK-, DIP- e anidrochimotripsina. Sulla base di queste osservazioni , viene proposta una semplice procedura per stimare le costanti di equilibrio dell'interconversione trigonale-tetraedrica di BBA I parametri termodinamici della ionizzazione di His 57 e di ogni fase coinvolta nel legame di BBA possono essere stimati dalla dipendenza dalla temperatura del rilascio di protoni. I suoi 57 sono essenzialmente gli stessi di quelli dell'imidazolo in acqua. Per quanto riguarda l'interconversione di BBA sull'enzima, il valore di delta S è simile a delta S non uguale a della fase di deacilazione di substr non specifico ati, e il delta H è notevolmente ridotto rispetto a quello per la ionizzazione di BBA in acqua. Si suggerisce che il guadagno entalpico del processo enzimatico sia dovuto al cambiamento dell'accettore di protoni, che è l'acqua nel caso della ionizzazione del BBA in acqua, in imidazolo sull'enzima.
Movimenti protonici accoppiati al trasporto di lattato e alanina in Escherichia coli: isolamento di mutanti con stechiometria alterata nel trasporto di alanina.L'aggiunta di lattato a leggermente tamponato sospensioni di cellule a riposo di Escherichia coli hanno causato un aumento del pH della fase extracellulare poiché lattato e protoni sono entrati insieme nella cellula. Dall'entità della variazione di pH e dal carattere non elettrogenico dell'assorbimento del lattato, abbiamo concluso che la stechiometria del processo era 1 anione protone/lattato. L'aggiunta di alanina ha causato un lento aumento del pH, anche apparentemente dovuto al trasporto dell'amminoacido mediante un meccanismo di symport con stechiometria protone/alanina 1. Quando le cellule sono state coltivate nel chemostato con alanina come unica fonte di carbonio e come nutriente limitante, questa stechiometria è risultata alterare a 2 protoni/alanina, e quindi a 4 protoni/alanina. Questi aumenti stechiometriosi erano dovuti alla selezione di mutanti. di questi cambiamenti sulla potenziale capacità di assorbimento delle cellule sono discussi.
Grandezza della forza protonmotrice negli Staphylococcus aureus e nell'Escherichia coli che respirano.Il potenziale di membrana e il gradiente di pH sviluppati attraverso le membrane plasmatiche di intere cellule di Staphylococcus aureus e sferoplasti di Escherichia coli. Le distribuzioni degli ioni potassio in presenza di valinomicina e il gradiente di pH attraverso la membrana sono state determinate dalle variazioni di pK e pH osservate nel mezzo esterno durante la transizione dallo stato di respirazione energizzata allo stato di de -condizione di riposo engerizzata. La forza protonmotrice nelle cellule che respirano è stata stimata a 211 mV per S. aureus e 230 mV per E. coli a valori di pH esterno di circa 6,5. L'adeguatezza di queste forze protonmotrici come forza trainante per l'accumulo di substrato o adenosina Viene discussa la sintesi del 5\'-trifosfato.
Meccanismo di autolisi di Neisseria gonorrhoeae.La principale autolisina(i) di Neisseria gonorrhoeae è stata solubilizzata dalle buste mediante estrazione con Triton X-100 al 2% contenente 0,5 M NaCl. Né Triton X-100 né NaCl da soli potrebbero rilasciare efficacemente l'autolisina. L'autolisina principale è la N-acetilmuramil-L-alanina amidasi (EC 3.5.1.28). Il pH ottimale per questa reazione era ampio, compreso tra 5,5 e 8,5. L'idrolisi ottimale del peptidoglicano si è verificata nel 2% di Triton X-100 in 0,1 M KCl. I tentativi di purificare l'autolisina non hanno avuto successo. È stato sviluppato un test rapido per l'attività enzimatica utilizzando pareti cellulari radioattive come substrato ([3H] acido diamminopimelico).
Fase che richiede calcio nell'assorbimento di molecole di acido desossiribonucleico attraverso la superficie di pneumococchi competenti.La conversione dell'acido desossiribonucleico adsorbito in superficie (DNA) molecole ad uno stato in cui sono inaccessibili alla desossiribonucleasi esogena richiede specificamente ioni calcio; gli ioni magnesio non possono sostituire gli ioni calcio. Livelli virtualmente massimi di legame al DNA nucleasi-resistente e trasformazione genetica possono essere ottenuti in mezzi privi di magnesio e contenenti solo ioni calcio. Si suggerisce che il processo che richiede il calcio sia il trasporto di molecole di DNA attraverso la membrana plasmatica. Gli ioni di magnesio stimolano sia la perdita di DNA adsorbito in superficie nel mezzo che la degradazione extracellulare del DNA.
Captazione del ferro in mutanti resistenti alla colicina B di Escherichia coli K-12.Quattro classi di mutanti resistenti alla colicina B di Escherichia coli K-12 sono stati esaminati per i difetti nell'assorbimento del ferro. Tutte e quattro le classi mutanti (cbt, exbC, exbB e tonB) erano difettose nell'assorbimento di ferri-enterochelina. Il mutante tonB era anche difettoso nell'acido citrato, ferricromo e rodoturulico mediato captazione del ferro. I difetti nel trasporto del ferro si riflettevano in una maggiore sensibilità ai chelanti del ferro e ai sali di cromo e alluminio e nell'ipersecrezione di enterochelina. Uno dei mutanti (cbt) era apparentemente difettoso nell'attività del recettore ferri-enterochelina della membrana esterna. (incapace di sintetizzare l'enterochelina) delle quattro classi mutanti e il ceppo genitore ha prodotto quantità aumentate di due polipeptidi delle membrane esterne quando cresciuto sotto stress da ferro. Questi polipeptidi sono implicati nell'attività del recettore della ferri-enterochelina.
Studio collaborativo di un dosaggio spettrofluorimetrico per compresse di Rauwolfia serpentina e radice in polvere.Gli alcaloidi del gruppo reserpina-rescinnamina vengono estratti dalle preparazioni di Rauwolfia serpentina in un dimetilsolfossido ( miscela DMSO)-metanolo e diluito con 0,5 N H2SO4. L'estratto cloroformico di questa soluzione viene fatto passare attraverso una colonna di NaOH-Celite 0,1 N e quindi attraverso una colonna di gel di silice. Gli alcaloidi debolmente basici intrappolati su quest'ultima colonna vengono eluiti con un metanolo miscela; una parte dell'eluato viene trattata con acido nitroso e il contenuto di reserpina-rescinnamina viene determinato misurando l'intensità di fluorescenza del prodotto di ossidazione. Per la determinazione della reserpina-rescinnamina sono state ottenute le seguenti medie e deviazioni standard (11 collaboratori) alcaloidi del gruppo in 4 campioni di Rauwolfia serpentina (polvere di riferimento NF, compresse commerciali da 100 mg e 50 mg e una formulazione in compresse sintetiche da 45 mg): 0,174% +/- 0,0112, 0 0,131% +/- 0,0047, 0,160% +/- 0,0100 e 0,153% +/- 0,0083, rispettivamente.
Lorazepam e diazepam in pazienti ambulatoriali ansiosi. Uno studio controllato.La risposta di 134 pazienti ambulatoriali nevrotici ansiosi a lorazepam, diazepam e placebo è stata valutata in un Studio in doppio cieco di 4 settimane. Entrambi i farmaci attivi hanno prodotto una riduzione dei sintomi significativamente maggiore rispetto al placebo. Il lorazepam, tuttavia, si è dimostrato efficace principalmente in quei pazienti che non si lamentavano della sedazione e ha prodotto un miglioramento maggiore nei pazienti inizialmente più malati. La sedazione era significativamente più fastidiosa ai pazienti trattati con lorazepam rispetto ai pazienti trattati con diazepam. I risultati attuali suggeriscono che 3 mg/die di lorazepam possono essere un dosaggio troppo alto per pazienti lievemente ansiosi, mentre 15 mg/die di diazepam sembrano un dosaggio appropriato per pazienti lievemente ansiosi, ma possono essere un dosaggio troppo basso per i pazienti molto ansiosi.
Effetti della stimolazione beta-adrenergica sulla funzione del midollo osseo in topi normali e irradiati subletalmente. I. L'effetto dell'isoproterenolo sul contenuto di cAMP nelle cellule del midollo osseo in vivo e in vitro.L'effetto dell'isoproterenolo (IPR) sul contenuto di cAMP nel midollo osseo è stato studiato in vivo e in vitro. In topi CFW non irradiati, il contenuto di cAMP nel midollo osseo è risultato essere elevato dalla somministrazione di noradrenalina, adrenalina e isoproterenolo. Dopo la somministrazione di IPR, l'aumento di cAMP era bifasico con massimi a 1 e 15 min. Un aumento del contenuto di cAMP è stato osservato anche nel midollo osseo di topi irradiati subletalmente, ma non è stato osservato alcun ulteriore aumento 15 min dopo la somministrazione di IPR. L'aumento del cAMP da parte dell'IPR o della radiazione è stato prevenuto dal pretrattamento con l'agente bloccante beta-adrenergico - propranololo. L'IPR è stato anche efficace nell'aumentare il contenuto di cAMP quando aggiunto alla sospensione delle cellule del midollo osseo. Questo effetto è stato abolito da p ropranololo. L'IPR non ha aumentato i livelli di cAMP nelle cellule del midollo osseo isolate da animali irradiati. I risultati suggeriscono che le cellule differenziate del midollo osseo hanno recettori beta-adrenergici.
Meccanismi battericidi nei macrofagi alveolari di coniglio: evidenza contro i meccanismi battericidi perossidasi e perossido di idrogeno.Il ruolo dell'uccisione batterica mediata dalla perossidasi da parte dei macrofagi alveolari di coniglio è stato Durante 3 h di incubazione in vitro, i macrofagi alveolari hanno ingerito e ucciso più dell'88% di Streptococcus faecalis, Proteus mirabilis o Streptococcus pneumoniae presenti nella miscela di incubazione Preincubazione di macrofagi alveolari con inibitori della catalasi, 3-amino-1 ,2,4-triazolo o nitrito di sodio, non hanno alterato il loro potenziale battericida. Non è stata osservata iodurazione delle particelle di zimosano ingerite, una reazione dipendente dalla perossidasi e dal perossido di idrogeno, nonostante la vigorosa fagocitosi da parte dei macrofagi alveolari. dai macrofagi alveolari non è stato significativamente aumentato quando sono state ingerite particelle di zymosan rivestite di perossidasi I risultati suggeriscono che il perossido di idrogeno potrebbe non essere disponibile lable al vacuolo fagocitario per l'uccisione microbica. Poiché la riduzione del colorante al tetrazolio riflette l'attività di un'ossidasi responsabile del consumo di ossigeno stimolato da parte dei leucociti polimorfonucleati, è stata misurata anche questa reazione. I macrofagi alveolari di coniglio incubati con particelle di lattice non hanno mostrato una maggiore riduzione del colorante rispetto alle cellule a riposo. L'assenza di una stimolazione significativa della riduzione del colorante del tetrazolio indica che la reazione dell'ossidasi non si verifica in prossimità del vacuolo fagocitico dei macrofagi alveolari.
Interazioni tra antibiotici aminoglicosidici e carbenicillina o ticarillina.Carbenicillina o ticarcillina sono state incubate singolarmente con ciascuno dei seguenti antibiotici: gentamicina, tobramicina, sisomicina, amikacina L'attività residua di ciascun aminoglicoside in questa miscela è stata saggiata enzimaticamente L'amikacina è stata inattivata dal meno degli aminoglicosidi Entrambe le penicilline hanno inattivato ciascun aminoglicoside in misura simile di un grado che variava a seconda del mezzo di incubazione, la minima inattivazione è stata osservata in siero umano in pool e il più in tampone fosfato a pH 7,4.
Studi su normali colture di midollo osseo umano in sistemi di coltura a film sottile in ambiente controllato.Due sistemi di coltura a film sottile, il sistema di stato stazionario in ambiente controllato ( SS) e la configurazione del tubo oscillante di tale sistema (RT), sono stati utilizzati per identificare alcune delle condizioni che sembrano mantenere in vitro le caratteristiche morfologiche e funzionali delle cellule degli espianti di midollo osseo umano. monitoraggio delle colture Preparazioni citocentrifuganti di terreni di campioni coltivati in RT hanno rivelato, anche se in numero decrescente, varie cellule ematopoietiche per periodi superiori a un mese Le cellule ematopoietiche rilasciate da campioni coltivati nel sistema SS sono state trattenute nelle provette di coltura; serie mielocitica predominava per le prime due settimane mentre un numero crescente di monociti e macrofagi è apparso nei mezzi di delle culture più vecchie. Esame istologico di cultu espianti rossi hanno rivelato la conservazione dell'architettura del midollo e la persistenza delle cellule ematopoietiche. I campioni coltivati in provette RT tendevano ad essere meno cellulari rispetto a colture simili poste in sacche per dialisi o coltivate nel sistema SS. Le immunoglobuline (Ig) sono state rilasciate nei terreni di coltura a una velocità costante per tutto il periodo di coltura. I campioni coltivati a un pH controllato di 7,4 hanno rilasciato da 2 a più di 4 volte più Ig rispetto a campioni simili mantenuti a un livello di pH di 7,1. Non ci sono state differenze definitive nei livelli di Ig nelle colture mantenute a livelli di pH comparabili e ricoperte con varie concentrazioni di CO2, cioè 2%, 5%, 10% in modo simile, non sono state trovate differenze nei livelli di Ig in campioni coltivati in terreni contenenti sieri bovini fetali al contrario dei sieri di cavallo.
Un'analisi delle relazioni tra obesità, insulina plasmatica ed enzimi lipogenici epatici in topi "obesi gialli vitali" (Avy/a).Lo sviluppo dell'obesità, dell'iperinsulinemia e di sei enzimi lipogenici epatici nei topi Avy/a è stato confrontato con quello nei topi a/a. È stata analizzata la correlazione tra peso corporeo, peso del fegato, concentrazione plasmatica di insulina e attività degli enzimi epatici. topi, il peso corporeo, il peso del fegato e il livello di insulina plasmatica aumentavano costantemente con l'età dei topi. Nei topi a/a, il cambiamento di questi tre parametri era molto più lento. La concentrazione di insulina plasmatica nei topi a/a non aumentava fino a otto mesi di Rispetto ai topi a/a, i topi Avy/a avevano attività di 6-fosfogluconato deidrogenasi e sintetasi degli acidi grassi più elevate a due mesi di età, enzima di scissione del citrato inferiore, glucosio-6-fosfato deidrogenasi e attività di 6-fosfogluconato deidrogenasi a tre mesi di età; enzima di scissione del citrato inferiore e gluco se-6-fosfato deidrogenasi e attività più elevate dell'acetil CoA carbossilasi a cinque mesi di età; e attività dell'enzima malico superiore, dell'enzima di scissione del citrato e della 6-fosfogluconato deidrogenasi a otto mesi di età. C'erano correlazioni significative tra il livello plasmatico di insulina e il peso corporeo e tra il livello plasmatico di insulina e le attività dell'enzima malico e dell'enzima di scissione del citrato nei topi Avy/a. La correlazione tra peso corporeo e attività dell'enzima malico e dell'enzima di scissione del citrato è scomparsa dopo che l'analisi è stata aggiustata per il livello plasmatico di insulina.
[Studi sulla biosintesi degli acidi grassi a catena corta (autore\'s transl)].Studi riportati qui sulla biosintesi di acidi grassi a catena corta acidi nelle ghiandole mammarie di coniglio in lattazione. L'incorporazione massima da [1-14C] acetato negli acidi grassi totali è stata osservata nei microsomi e nelle frazioni del surnatante delle ghiandole mammarie, ma il tasso di sintesi sia nei soli microsomi che nel solo surnatante era piuttosto basso. Tuttavia circa l'80% della velocità massima è stata ripristinata nel surnatante per la sintesi dell'acido n-butirrico L'incorporazione da [1-14C] acetato nell'acido-n-butirrico è stata notevolmente stimolata in presenza di NADH, rispetto a NADPH mentre gli acidi grassi totali la sintesi era più dipendente dal NADPH. La sintesi di acidi grassi a catena lunga da [1-14C] acetato è stata notevolmente ridotta dall'aggiunta di avidina sebbene la formazione di acido n-butirrico sia stata ripristinata all'80%. Quindi con l'aggiunta di malonil CoA o biotina il sistema avidina, medio e lungo cha negli acidi grassi sono stati nuovamente recuperati. [1-14C] propionato è stato incorporato negli acidi grassi a catena pari e negli acidi grassi a catena dispari. La sintesi degli acidi grassi totali da [1-14C] propionato era più dipendente dal sistema di generazione di NADPH rispetto a NADH o NADPH. Il bicarbonato [1-14C] è stato anche leggermente incorporato negli acidi grassi, come gli acidi decanoico o dodecanoico. Nella riduzione da acetoacetil CoA o crotonil CoA, il trizio di NADP3H è stato incorporato stereospecificamente nella posizione beta dell'acido n-butirrico. La reazione di riduzione dell'acetoacetil CoA era molto più dipendente dal NADH mentre il crotonil CoA era più ridotto dal NADPH. Non c'era alcuna differenza tra le dipendenze da NADH e NADPH nella riduzione del 2-esenil CoA.
Funzione dell'emoglobina nel sangue immagazzinato. XIII. Un conservante citrato-adenina con pH ottimale per mantenere 2,3-DPG (funzione) e ATP (vitalità) dei globuli rossi", L'aumento del pH di un incremento di 0,5 rispetto al conservante comunemente usato, acido-citrato-destrosio con adenina (ACD-Ad), si traduce in un significativo miglioramento del 2,3-DPG, senza perdita significativa delle concentrazioni di ATP Il conservante a pH intermedio, 6,0, aveva anche concentrazioni di ATP uguali a quelle dei conservanti a pH basso, 5,0 e 5,5, dal 21° al 42° giorno di conservazione. Un conservante citrato-adenina, con un pH compreso tra 5,5 e 6,0, avrebbe sembrano essere ottimali per il mantenimento della funzione dell'emoglobina e della vitalità dei globuli rossi, come determinato dalle misurazioni delle concentrazioni di 2,3-DPG e ATP.
Influenza di un pasto sull'assorbimento della cimetidina. Un nuovo antagonista del recettore H2 dell'istamina.L'assorbimento di una dose orale di 300 mg di cimetidina è stato studiato dopo un digiuno notturno in sei volontari maschi sani in tre diverse occasioni, 20 min prima, durante e 2 h dopo una colazione standard Rispetto alle dosi assunte prima e dopo il pasto, la dose assunta con il pasto ha mostrato un significativo ritardo nel tempo impiegato per raggiungere le concentrazioni ematiche terapeutiche del farmaco senza alcuna riduzione del periodo di tempo durante il quale tale concentrazione è stata mantenuta. Si suggerisce pertanto di assumere il farmaco con un pasto per ottenere un'inibizione acida ottimale nel periodo interdigestivo.
Parametri quantitativi per la valutazione al microscopio ottico dei tubuli seminiferi.Per la valutazione quantitativa e istologica dei testicoli ci sono quattro parametri adatti: diametro del tubulo , area del tubulo, numero di nuclei cellulari per tubulo e area dei nuclei delle varie cellule che partecipano alla spermatogenesi Per la stima delle aree, il metodo di misurazione integrativo, con una griglia o con l'ausilio del sistema di analisi delle immagini ottico manuale , viene proposto. Il diametro del tubulo può essere determinato rapidamente e facilmente, sebbene la dimensione del tubulo possa essere valutata in modo più accurato mediante la stima dell'area. Una valutazione dettagliata della capacità riproduttiva è possibile mediante una determinazione piuttosto dispendiosa in termini di tempo del numero di nuclei cellulari e del nucleo zona, per cui devono essere considerate le fasi del ciclo dell'epitelio seminifero.
Metabolismo muscolare indagato a riposo e durante esercizio e/o trattamento farmacologico con vasodilatatori.Il preparato di Ruderman è stato utilizzato per indagare in situ alcuni aspetti del metabolismo muscolare sia a riposo che durante esercizio submassimale su stimolazione bilaterale del nervo sciatico, e/o durante la perfusione con alcuni vasodilatatori: papaverina, caffeina, nicergolina, bametano, assorbimento di O2 e glucosio, produzione di lattato e livello di glicogeno del muscolo sono stati studiati. La disponibilità di acetoacetato modifica il metabolismo muscolare, altri combustibili (es. il corpo chetonico stesso) sono probabilmente utilizzati a fini energetici sia in condizioni basali che durante l'esercizio, anche in presenza di elevate concentrazioni di glicogeno nei tessuti. Alcuni vasodilatatori aumentano l'utilizzo di altri combustibili in sostituzione del glicogeno (es. nicergoline), alcuni altri aumentano l'eliminazione del glicogeno stesso (es. bametano e caffeina), mentre altri (es. papaverina) non influiscono sui parametri biochimici studiati. I dati attuali confermano l'importanza sia della disponibilità del substrato sia del potere dei farmaci di interferire con alcuni sistemi enzimatici che modulano l'utilizzo dei substrati disponibili, soprattutto durante l'esercizio.