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Immunizzazione contro la febbre Q di vacche da latte naturalmente infette.Bovine da latte infettate naturalmente da Coxiella burnetii come evidenziato dalla presenza di anticorpi agglutinanti di fase II in sangue o versando C. burnetii nel latte, sono stati vaccinati per via sottocutanea con organismi C. burnetii di fase I uccisi con formalina. C. burnetii nel latte di vacche da latte di controllo non vaccinate è stato ripetutamente dimostrato nel corso di 123 giorni (periodo di indagine). Non è stata osservata alcuna reazione sistemica dannosa dopo la vaccinazione.
Aumento dell'attività antigenica e della virulenza del ceppo vaccinale E di Rickettsia prow azeki mediante passaggi in coltura cellulare.Cambiamenti nelle proprietà biologiche del ceppo vaccinale E di Rickettsia prowazeki si è verificato sulla coltivazione di cellule A1 (amnione umano) infettate con questo ceppo. Nel corso del passaggio di queste cellule l'attività antigenica e la virulenza della rickettsia sono aumentate. I cambiamenti sono stati osservati in 10 colture cellulari su 22 esaminati: in 6 colture vi è stato un aumento dell'attività antigenica e in 4 sia dell'attività antigenica che della virulenza. Il tempo di insorgenza di tali alterazioni nelle popolazioni di rickettsie variava da 12-18 a 53-102 giorni di passaggio di le cellule infette.
Differenze sierologiche tra alcuni isolati del virus del mosaico del fagiolo giallo.È stato studiato il grado di correlazione sierologica di tre isolati del virus del mosaico del fagiolo giallo (BYMV) Un gruppo antigenico comune (m) è stato dimostrato in tutti e 3 gli isolati Inoltre, un altro gruppo antigenico (a) è stato dimostrato nell'isolato FvM1 Questo gruppo era assente dagli isolati TpM3 e TpM11, in cui è stato trovato il gruppo antigenico n Gli antisieri ai 3 isolati contenevano i corrispondenti gruppi anticorpali. Il gruppo anticorpale (M) condiviso da tutti e 3 gli isolati BYMV era presente nell'antisiero FvM1 in un livello solo di poco superiore al secondo gruppo anticorpale (A). Antisieri a TpM3 e Gli isolati di TpM11 hanno mostrato solo un basso titolo di anticorpi M, mentre il secondo gruppo di anticorpi (N) ha raggiunto titoli da 512 a 1024. I test di assorbimento incrociato hanno rivelato l'identità sierologica di entrambi gli isolati di "tipo necrotico" (TpM3 e TpM11) e permesso di stimare il grado del loro r. sierologico esaltazione verso i rappresentanti degli isolati di "tipo mosaico" di BYMV (FvM1).
La distribuzione del virus Lednice (Yaba 1) nell'embrione di pollo.La distribuzione dell'antigene del virus Lednice (Yaba 1) (LVA) è stata seguita da immunofluorescena (IF) in embrioni di pollo inoculati nel sacco vitellino È stata osservata una fluorescenza positiva di LVA nei neuroni e nei neuroblasti del cervello in via di sviluppo, del midollo spinale e dei gangli spinali, nonché nei muscoli scheletrici, nel muscolo cardiaco, nell'endotelio vascolare e nel mesenchima polmonare. sacco vitellino, focolai di fluorescenza specifica sono stati occasionalmente osservati nelle cellule endoteliali dei vasi e nelle isole di emopoesi extraembrionale. Nei siti corrispondenti alla comparsa di LVA, edema esteso è stato accompagnato da stravaso di eritrociti e accumulo di globuli bianchi. La natura dei tessuti in cui il virus si replica è stato discusso dal punto di vista della distribuzione dei LVA e delle lesioni morfologiche osservate.
Correlazione tra dimensione molecolare e attività di induzione dell'interferone del poli I:C.La microscopia elettronica ha mostrato che il poli I:C commerciale consisteva di molecole che variavano in lunghezza da meno di 0,05 nm a più di 5 nm e anche nella morfologia Per chiarire la relazione tra la sua dimensione molecolare e l'attività di induzione dell'interferone, il poli I: C è stato sonicato o frazionato mediante centrifugazione in gradiente di densità di saccarosio e la distribuzione della lunghezza molecolare e L'attività di induzione dell'interferone di ciascuna preparazione è stata determinata in vivo e in vitro. I risultati hanno mostrato che (1) le molecole di poli I : C lunghe 0,1-0,3 nm erano le più efficaci per l'induzione di interferone; (2) la sonicazione di poli I : C ridotta la sua lunghezza molecolare e anche l'attività di induzione dell'interferone, il grado di riduzione che varia nelle diverse frazioni; e (3) l'attività di induzione dell'interferone di poli I: C di 0,1-0,3 nm ottenuta mediante centrifugazione in gradiente di densità di saccarosio era superiore a quella di poli IO: C di lunghezza corrispondente preparata per sonicazione.
Effetto degli adsorbenti sugli anticorpi del morbillo IgM e IgG.Sieri di conigli immunizzati con virus del morbillo L-16 assorbito con cellule del sangue di scimmia; caolino e sangue cellule; e MnCl2 ed eparina sono stati esaminati nei test di inibizione dell'emoagglutinazione (HI) e di neutralizzazione. Caolino e MnCl2 hanno adsorbito principalmente anticorpi HI IgM dal periodo di immunizzazione precoce. Gli adsorbenti utilizzati non hanno avuto influenza sugli anticorpi HI e IgG di neutralizzazione. Il siero convalescente umano ha dato risultati simili risultati, cioè sono stati trovati solo anticorpi IgG e non sono stati influenzati da caolino e MnCl2 con eparina.
L'istopatologia della malattia sperimentale prodotta in topi infettati da Trypanosoma vivax.È stata prodotta una forma acuta di tripanosomiasi (corso della malattia da 4 a 8 giorni) nei topi infettati sperimentalmente con un ceppo di T. vivax. Le caratteristiche della malattia erano: una parassitemia che sembrava aumentare esponenzialmente da 23,8 a 243,6 volte 10(6) tripanosomi per ml nelle ultime 24 ore dalla malattia; l'anemia non era grave nella malattia nei topi; la lesione istologica di base era la formazione generalizzata di trombi di fibrina nei vasi sanguigni del cuore, polmone, milza e cervello; gli enboli del tripanosoma erano presenti nel cervello, nella milza e nel fegato dei topi infetti. La malattia nei topi potrebbe rivelarsi un utile modello negli studi sulla patogenesi della tripanosomiasi acuta e anche negli studi sul meccanismo della coagulazione intravascolare generalizzata.
I microrganismi delle mosche tse-tse.I microrganismi dei micetomi della mosca tse-tse sono stati mantenuti in coltura, dove erano più pleomorfi rispetto ai micetomi , ma erano in alcuni casi molto simili a quelli osservati nelle ovaie da altri Autori. Test di agglutinazione sulle forme coltivate indicate in affinità alla Rickettsia. Erano sensibili agli antibiotici introdotti nutrendosi di mosche su ospiti trattati con Ampicillina, questo ne riduceva la longevità e la fecondità delle mosche tse-tse e sembrava disturbare la normale digestione dei pasti di sangue.
[Studio ecologico di Ixodes ricinus (Linné, 1758) (Acarina, Ixodoides) nel sud-est della Francia].Ixodes ricinus (LINNE, 1758) è oggetto di censimento nelle Alpi settentrionali e nelle montagne del Giura. Questa specie, molto frequente nei boschi mesofili delle colline, attecchisce preferibilmente nei grappoli forestali, dove è presente un humus mite di tipo mugginoso spesso ricoperto da un'abbondante lettiera. gli strati mantengono un alto grado di umidità, che influisce positivamente su questa specie. Gli esami effettuati per tre anni in una località del Giura meridionale consentono di garantire un'approssimazione preliminare per quanto riguarda le variazioni stagionali della popolazione.
Studi sulla malaria e risposte di Anopheles balabacensis balabacensis e Anopheles minimus all'irrorazione residua di DDT in Thailandia.Studi sulla malaria e su A. b. balabacensis e A. minimus risposte all'irrorazione di DDT sono state condotte in una zona collinare boscosa nel nord della Thailandia. In una prima fase, i dati di base sono stati raccolti dal luglio 1970 al marzo 1972. In una seconda fase, l'area di studio ha ricevuto cinque round di DDT irrorazione per un periodo di due anni e allo stesso tempo tutte le infezioni da malaria hanno ricevuto un trattamento radicale. Durante questo periodo di due anni di operazioni sul campo, sono proseguite le osservazioni entomologiche ed epidemiologiche. Gli studi effettuati nella seconda fase, hanno mostrato che la trasmissione della malaria diminuiva nell'ambito delle misure antimalariche ottimali applicate, ma non è stato interrotto. L'ecologia umana e il movimento della popolazione all'interno della foresta, specialmente durante la stagione secca, hanno contribuito in larga misura a questo risultato. g nella prima parte della stagione dei monsoni indica chiaramente l'importanza della tempistica dell'irrorazione del DDT. A. b. balabacensis sembrava trasmettere la malaria tutto l'anno nella foresta profonda, ma solo nella stagione dei monsoni ai margini della foresta. La capacità vettoriale di entrambi i vettori è stata stimata separatamente per le popolazioni indoor e outdoor. I valori di pre-irrorazione ottenuti per A. b. balabacensis erano molto più alti di thaan per A. minimus. Dopo la spruzzatura di DDT A. b. balabacensis ha mostrato una diminuzione della capacità vettoriale stimata in 31,5 volte per la popolazione indoor e 18 volte per la popolazione outdoor. A. minimus, d'altra parte, ha mostrato una diminuzione molto più contenuta, stimata in 6,8 e 1,9 volte rispettivamente per le popolazioni indoor e outdoor.
Classificazione e distribuzione biologica dei sottotipi di recettori dell'istamina.La distribuzione e la classificazione dei recettori dell'istamina nei tessuti di mammiferi e uccelli sono state riassunte nelle Tabelle 1 -4. È evidente che i recettori dell'istamina sono presenti su un numero di tipi cellulari morfologicamente distinti e la proporzione di cellule recanti i recettori H1 e H2 varia non solo con la specie ma anche con la fonte cellulare. I recettori farmacologici che mediano la mepiramina- le risposte sensibili all'istamina sono state definite come recettori H1. I recettori che mediano la resistenza alla mepiramina, ma le risposte all'istamina sensibili alla burimamide o alla metiammide sono state classificate come recettori H2. Le risposte all'istamina mediate dai recettori H2 sembrano coinvolgere il sistema dell'adenilciclasi con conseguente aumento di livello intracellulare di AMP ciclico, che è suscettibile al blocco della burimamide ma insensibile agli agenti bloccanti beta-adrenergici Questa modalità d'azione dell'istamina coinvolge È stato dimostrato che i recettori H2 e il sistema adenilico ciclasi stimolano il cuore dei mammiferi; promuovere la secrezione acida gastrica; inibiscono il rilascio di istamina indotto dall'antigene dai leucociti e inibiscono la citotossicità mediata dai linfociti. Si può inoltre concludere che sia i recettori H1 che H2 sono ampiamente distribuiti in tutto il corpo animale nei sistemi gastrointestinale, riproduttivo, respiratorio e cardiovascolare, nel sistema nervoso e sui mastociti e leucociti del sangue. In questi tessuti, i recettori dell'istamina svolgono un ruolo importante nei processi fisiologici, immunologici e immunopatologici. L'interazione dell'istamina con entrambi i recettori H1 e H2 in proporzioni variabili modula la manifestazione complessiva delle sindromi cardiovascolari e respiratorie durante determinate condizioni immunopatologiche (ad esempio infiammazione, allergia e anafilassi). Anche i recettori dell'istamina sembrano svolgere un ruolo importante nello sviluppo dell'immuno-competenza e dell'immunità.
Identificazione di ceppi di T. brucei-sottogruppo isolati dal gioco.Diversi ceppi di T. brucei-sottogruppo isolati dal gioco sono stati studiati con l'infettività dell'incubazione del sangue test (BIIT) e in volontari umani. Sono stati testati isolati originali e loro derivati clonali. Per verificare la validità del BIIT, sono stati utilizzati cloni testati su volontari in condizioni BIIT modificate. L'inoculazione di diversi ceppi di tripanosoma in volontari ha prodotto parassitemia positiva per l'originale isolati da leone, iena e alcelafo Coke\'. La variazione dei titoli anticorpali durante il corso dell'infezione nei volontari è stata controllata con il test anticorpale a fluorescenza indiretta (IFT). Il BIIT era affidabile (costantemente positivo) per T. b. rhodesiense clonato Durante il test di T. b. brucei, i risultati BIIT dipendevano dal numero di parassiti incubati e dal numero di picchi di parassitemia da cui derivavano i tripanosomi testati. È stato inoltre dimostrato che la parte in vivo del BIIT è infatti indispensabile per la completa neutralizzazione di T. b. brucei indotto dall'azione del plasma umano. Prove con tripanosomi originati da T. misti sperimentalmente b. rhodesiense e brucei hanno dato risultati incoerenti. D'altra parte, le popolazioni pure si sono mescolate in vitro prima dell'incubazione per risultati rivelati dal BIIT a seconda della proporzione delle 2 specie: fino al 20% T. b. rhodesiense ha dato risultati negativi, a concentrazioni più elevate costantemente positivi.
Differenziazione di ceppi appena isolati di Trypanosoma (Schizotrypanum) cruzi mediante reazioni di agglutinazione e precipitazione.Relazioni sierologiche tra nuovi isolati di Trypanosoma cruzi da una singola località sono stati esaminati mediante agglutinazione diretta e immunodiffusione, e confrontati con ceppi accertati. I ceppi sono stati divisi in tre gruppi in base alle proprietà di assorbimento dei loro precipitinogeni. I tre gruppi sono stati definiti dalle stesse caratteristiche di quelli in cui ceppi di ampia provenienza e una lunga storia di laboratorio sono stati collocati da lavoratori precedenti. Una mancanza di corrispondenza tra le costituzioni antigeniche dei gruppi come descritto qui e come descritto in precedenza è stata dimostrata utilizzando ceppi di riferimento. I valori di correlazione sono stati calcolati dai titoli di agglutinazione, che indicavano una complessa eterogeneità di antigeni , e da cui è stato tratto uno schema di relazioni.
Effetto dell'acidificazione bulbare sulla secrezione basale di acido e gastrina nel cane.I cani erano dotati di tasche settali mucose dello stomaco e del bulbo duodenale In alcuni cani è stata inserita una cannula gastrica di drenaggio nella porzione più dipendente dello stomaco Nei cani che sono stati trovati a secernere acido spontaneamente durante un periodo di controllo all'inizio di ogni esperimento, le cavità bulbari sono state perfuse con 0,1 M HC1 per 5 -120 min L'acidificazione bulbare riduce rapidamente e profondamente la produzione di acido basale Nei cani che non secernono acido spontaneamente durante il periodo di controllo le tasche bulbari sono state perfuse con HC1 0,1 M per 1 h L'acidificazione bulbare non ha influenzato significativamente la concentrazione plasmatica di gastrina e non acido è stato secreto dalle tasche di Pavlov a seguito di tale acidificazione. I risultati attuali supportano l'ipotesi che la riduzione del pH intrabulbare possa contribuire alla riduzione della secrezione acida durante la fase interdigestiva iodi. Viene messo in dubbio il significato fisiologico dei meccanismi nell'intestino superiore che inducono la secrezione acida a seguito di una riduzione del pH intraluminale.
Un metodo per lo studio continuo del trasporto idrico netto nell'intestino tenue felino.È stata sviluppata una nuova tecnica di perfusione per lo studio dell'acqua netta trasporto attraverso l'epitelio intestinale in vivo. Il lume di un segmento intestinale isolato è costantemente perfuso con una soluzione di composizione nota in un sistema di perfusione chiuso con un serbatoio sufficientemente grande da impedire il ricircolo. Il segmento intestinale può essere racchiuso in un pletismografo. Cambiamenti di il volume perfuso viene registrato da un trasduttore di volume accoppiato al sistema di ricircolo tramite un tubo a T. Se non si verifica alcuna motilità, le variazioni del volume di perfusione riflettono il trasporto netto di acqua attraverso l'epitelio intestinale. Un confronto quantitativo di questa tecnica con la convenzione polietilene il metodo del glicole non ha rivelato differenze significative. Il metodo pletismografico consente anche di quantificare l'assorbimento netto di acqua attraverso la linfa e il sangue.
Sul meccanismo dell'effetto rilassante dell'adrenalina sul digiuno del gatto.L'effetto di propranololo, fentolamina, papaverina, teofilina e Ca++, somministrati in diverse combinazioni delle loro dosi soglia, è stato studiato l'effetto rilassante dell'adrenalina su un segmento isolato del digiuno prossimale di gatti maschi. È stato stabilito che la fentolamina ha indebolito l'effetto rilassante dell'adrenalina, mentre il propranololo non ha avuto alcun effetto su di esso. La papaverina ha potenziato gli effetti rilassanti di adrenalina sia somministrata da sola che in associazione con propranololo o con fentolamina. La teofillina ha indebolito l'effetto rilassante dell'adfrenalina e della combinazione fentolamina-adrenalina. Ca++ ha aumentato il tono della muscolatura liscia. L'interpretazione dei risultati ottenuti porta alle conclusioni fondamentali che il l'effetto rilassante dell'adrenalina sul digiuno del gatto è più alfa- che beta-adrenergico determinato e che il sistema dell'AMP ciclico vi partecipa s realizzazione. Al tempo stesso, tuttavia, non è esclusa la possibilità di partecipazione di altri meccanismi. L'effetto sulla muscolatura liscia della papaverina e della teofillina non è determinato solo dal loro effetto inibitorio sulla fosfodiesterasi.
Reazioni della pressione arteriosa in condizioni emodinamiche mutate e sotto l'effetto di occlusione carotidea bilaterale.Per fare luce sulle problematiche legate alla l'entità e la possibilità di mantenere la risposta pressoria in caso di occlusione carotidea bilaterale (BCO), sono stati condotti esperimenti acuti su gatti eparinizzati in narcosi da clorosio-uretano e respirazione spontanea. La pressione di perfusione in una zampa posteriore autoperfusa con una pompa a rulli con sono stati registrati elettromanometricamente un flusso costante e la pressione arteriosa. Si è studiato le modificazioni in atto per effetto della BCO nell'animale normale, negli animali in stato emorragico, dopo blocco farmacologico alfa-adrenergico, emorragia dopo blocco alfa-adrenergico blocco, ritrasfusione di sangue + agente bloccante alfa-adrenergico e dopo applicazione locale di papaverina 0,01. È stato accertato che alcuni dei fattori che determinano l'emoglobina stato dinamico dell'organismo, quali: volume sanguigno, pressione arteriosa, resistenza vascolare, gittata cardiaca, ecc. , sono di grande importanza per la realizzazione della risposta pressoria al BCO, ma lo stato emodinamico dell'animale prima dell'occlusione e la le interazioni tra i suddetti fattori sono determinanti per la forma, l'entità e il mantenimento della risposta pressoria in BCO.
Influenza delle variazioni della PCO2 arteriosa sul flusso sanguigno cerebrale e sullo stato energetico cerebrale durante l'ipotermia nel ratto.Per studiare la relazione tra PCO2 arteriosa e il flusso sanguigno cerebrale (CBF) nell'ipotermia, la temperatura corporea dei ratti ventilati artificialmente è stata ridotta a 22 gradi C e i cambiamenti nel CBF sono stati valutati dalle differenze arterovenose nel contenuto di ossigeno (AVDO2) a valori di PaCO2 di 15, 30, 40 e 60 mm Hg. I risultati sono stati confrontati con quelli ottenuti a temperatura corporea normale (37 gradi C) nell'intervallo PaCO2 15-60 mm Hg. Sono stati eseguiti esperimenti separati per valutare CBF e CMRO2 a 22 gradi C e una PaCO2 di 15 mm Hg, utilizzando una tecnica di gas inerte per CBF. I contenuti tissutali di fosfocreatina, ATP, ADP, AMP e lattato sono stati misurati in animali ipotermici a valori di PaCO2 di 15, 30 e 60 mm Hg. I risultati hanno mostrato che i cambiamenti nel CBF erano della stessa entità relativa in ipotermia e normotermia quando la PaCO2 era aumentato da circa 35 a circa 60 mm Hg. Tuttavia, con una diminuzione della PaCO2 la riduzione del CBF era molto più pronunciata nell'ipotermia e a PaCO2 15 Mm Hg CBF era inferiore al 20% del valore misurato negli animali normotermici e normocapnici. I risultati delle misurazioni dei metaboliti non hanno evidenziato ipossia tissutale nonostante la marcata riduzione del CBF. Sebbene i risultati dimostrino che il cervello di un animale ipotermico è protetto dagli effetti dannosi di un CBF ridotto, potrebbe non giustificare la raccomandazione di iperventilazione nei casi clinici di ipotermia, specialmente nei pazienti con arteriosclerosi o malattie cerebrovascolari.
Trattamento aerosol con beclometasone dipropionato della febbre da fieno. Un'indagine dose-risposta.In uno studio controllato in doppio cieco 20 bambini e adulti, affetti da febbre da fieno estiva, sono stati trattati per via intranasale con una dose giornaliera di 200 tazze, 300 tazze o 400 tazze di beclometasone dipropionato (Beconase, Becotide Nasal) o con placebo per 2 settimane durante la stagione del raffreddore da fieno. Non è stato osservato alcun effetto benefico del trattamento con placebo. Nei pazienti trattati con 200 tazze e 300 tazze di beclometasone dipropionato al giorno si è verificata una moderata diminuzione dei punteggi dei sintomi nasali e nell'uso di compresse antistaminiche. Poiché i risultati hanno indicato che 400 tazze al giorno hanno l'effetto più pronunciato sui sintomi nasali, questo dosaggio è consigliato sia per i bambini che per gli adulti che soffrono di febbre da fieno estiva.
[Studio comparativo su un nuovo antistaminico, mequitazina e placebo].In uno studio in doppio cieco della durata di 2 settimane, un nuovo sono stati confrontati antistaminici ad azione, mequitazina e un placebo. 115 pazienti allergici hanno partecipato a questo esperimento (mequitazina n = 56, placebo n = 59). I risultati terapeutici e l'effetto sulla vigilanza diurna sono stati valutati mediante un questionario compilato giornalmente dai pazienti. Sia considerando i risultati giorno per giorno o i risultati dell'intero periodo di trattamento, statisticamente, la Mequitazina (10 mg/24 ore) è molto significativamente più attiva del placebo. La sonnolenza diurna indotta dalla Mequitazina non è statisticamente maggiore rispetto a quello indotto dal placebo, analizzato giorno per giorno o durante l'intero periodo di trattamento (P = 0,23). Gli effetti collaterali, 8 per la mequitazina, 5 per il placebo, sono lievi e non hanno portato all'interruzione del trattamento nel gruppo mequitazina.
Proprietà delle membrane plasmatiche da tessuto di granulazione con riferimento alla matrice extracellulare.Il trattamento con neuraminidasi ha ridotto l'attività della Mg2+-adenosina trifosfatasi attivata da Na+,K+ nelle membrane plasmatiche isolate dal tessuto di granulazione sperimentale ma non quello della 5\'-nucleotidasi o della leucina-beta-naftilaminasi Un abbassamento temporaneo del pH della sospensione della membrana plasmatica a 2-3 ha inattivato tutti e tre gli enzimi, che sono rimasti inattivi dopo il pH era stato riaggiustato a 7,4. L'aggiunta di preparazioni di destrano alla sospensione di membrana ha diminuito l'attività dell'adenosina trifosfatasi. L'etanolo (0,4%) ha avuto un effetto simile. Questi enzimi marcatori delle membrane plasmatiche non sono stati influenzati dalle aggiunte di ialuronato, condroitin solfato, polisaccaride proteico o collagene solubile. La serotonina ha stimolato leggermente l'attività dell'adenosina trifosfatasi. Circa il 10-20% della proteina nella preparazione della membrana plasmatica è stata estratta con EDTA. Thi s "cappotto fuzzy" ha prodotto un modello proteico elettroforetico distinto. La ialuronidasi non è stata utile nel separare questo strato superficiale dalle membrane plasmatiche.
[Modifica dell'artrite adiuvante da parte della carragenina, composto 48/80, antagonisti dell'istamina e della serotonina, antiflogistici non steroidei e inibitori della proteasi e loro possibili relazioni con i mediatori dell'infiammazione ].1. Le iniezioni di carragenina (1,25 mg/kg iv) dal 1° al 3° giorno e poi ogni 2° o 3° giorno hanno inibito il gonfiore della zampa nell'artrite adiuvante del ratto durante il periodo di Le iniezioni dall'11° al 15° giorno sono risultate inefficaci. Il livello di chininogeno plasmatico era leggermente diminuito ma il livello sierico totale del complemento era significativamente ridotto. 2,5 e 3 mg di carragenina/kg rispettivamente erano tossici dopo iniezioni ripetute. Dopo una singola somministrazione i livelli di chininogeno plasmatico e di complemento sierico totale sono diminuiti del 50% sebbene il gonfiore della zampa non sia stato influenzato 2. Il pentosano polisulfoestere (25 mg/kg ev) non ha influenzato il gonfiore della zampa nonostante la somministrazione giornaliera dal 1° al 17° giorno. Hepar in (10 000 IE/kg i. v. ) era altrettanto inefficace. 3. Iniezioni singole o ripetute del composto 48/80 (0,125-0,5 mg/kg iv; 1-5 mg/kg ip; 3-6 mg/kg sc), reserpina (0,2 mg/kg ip), la ciproeptadina (5 mg/kg iv), la dietilamide dell'acido bromolisergico (2 x 2 mg/kg iv) o la metiamide (10 mg/kg iv) non hanno avuto effetto sul gonfiore della zampa. Né il composto 48/80 ha influito sul livello sierico del complemento. 4. La somministrazione giornaliera di cloropromazina (4-10 mg/kg p. o. ) o di prometazina (10-15 mg/kg s. c. o p. o. ) ha inibito il gonfiore della zampa nella prima fase dell'artrite adiuvante ma non nella seconda. 5. L'inibitore della tripsina di soia (15 mg/kg e. v. ) ha inibito significativamente il gonfiore della zampa fino al 4° giorno, l'inibitore di Kunitz (25.000 E/kg e. v. ) è stato inefficace. 6. Il contenuto di prostaglandina E delle zampe infiammate era triplicato in entrambe le fasi dell'artrite. I risultati sono discussi per quanto riguarda il ruolo putativo dei mediatori dell'infiammazione (istamina, serotonina, chinine, prostaglandine, enzimi lisosomiali, linfochine, complemento).
[Influenza della temperatura sulla determinazione dell'attività enzimatica nel siero: isoenzimi L-aspartato aminotransferasi].L'influenza della temperatura sui saggi di attività degli isoenzimi di L-aspartico aminotransferasi è descritto. A questo scopo, isoenzimi umani isolati sono stati aggiunti al siero inattivato. Le costanti di semisaturazione sono state determinate a 17,8 gradi C, 25 gradi C, 30 gradi C e 37 gradi C, e la saturazione del substrato e il pH curve sono state registrate. Il GOT citoplasmatico (c) e mitocondriale (m) ha mostrato differenze dipendenti dalla temperatura nelle costanti di semisaturazione per i substrati L-aspartato e 2-ossoglutarato. Per entrambi gli isoenzimi il pH 7,4 è considerato ottimale indipendentemente dalla temperatura di misura, e Tris-HCl è il tampone ottimale. Nel grafico di Arrhenius c'è una curvatura a 27°C per entrambi gli isoenzimi. La denaturazione termica come possibile ragione di questa deviazione dalla linearità nel grafico di Arrhenius potrebbe essere regola fuori.
Eluizione di affinità della piruvato chinasi dalla fosfocellulosa.La piruvato chinasi delle cellule tumorali dell'ascite può essere eluita dalla fosfocellulosa mediante concentrazioni molto basse di fosfoenolpiruvato, fruttosio 1, 6-bisfosfato, adenosina 5\'-difosfato e pirofosfato, rispettivamente. Le condizioni limite appropriate per il "desorbimento facilitato" dell'enzima dalla fosfocellulosa da parte di questi ligandi sono state elaborate per ottenere la massima selettività e recupero nel processo della sua purificazione. Questo metodo è stato designato come "cromatografia per eluizione di affinità" a causa delle interazioni specifiche tra un ligando come costituente del mezzo eluente con l'enzima adsorbito, che provoca il suo desorbimento selettivo dallo scambiatore di ioni. L'eluizione per affinità con fosfoenolpiruvato è stata trovato molto efficace per la preparazione dei tipi M di piruvato chinasi. Un'attività specifica di 420 per una preparazione quasi omogenea di piruvato chinasi e da cellule tumorali di ascite è stato ottenuto al massimo.
[Uno studio sperimentale dello spettro dell'attività psicotropa individuale di clozapina (Leponex)].Un'analisi sperimentale dell'attività psicotropa di Leponex (in un esperimento cronico su II gatti) in condizioni di interazione di gruppo ha mostrato che il preparato svolge un preciso effetto tranquillizzante e antipsicotico. In condizioni di interazioni zoosociali questo farmaco favorisce la scomparsa delle reazioni nevrotiche e una risocializzazione degli animali nella gerarchia zoosociale. In dosi tranquillizzanti il preparato ha un effetto antipertensivo e previene lo sviluppo di un'ipertensione tonica a lungo termine dovuta a stress emotivo.
[Alcune proprietà dell'alfa-emolisina prodotta da un ceppo emolitico di E. coli].È stato riscontrato che l'alfa-emolisina di E. coli P 678 HIy+ era massimamente attivo contro gli eritrociti umani a pH 6,5. L'attività emolitica è caratterizzata nel tempo da una distinta fase di latenza e da una fase di massima velocità della reazione immediatamente successiva. La durata della fase di latenza e anche la velocità di emolisi dipende dalla concentrazione di alfa-emolisina, il cui aumento è accompagnato da una diminuzione della fase di latenza e accelerazione dell'emolisi. Vi è un limite definito al di sotto del quale la durata della fase di latenza rimane invariata con un ulteriore aumento della concentrazione di emolisina È stata notata una relazione lineare tra la quantità di eritrociti prelevati per il test e la velocità di rilascio dell'emoglobina e anche un'attivazione della temperatura della reazione emolitica.
[Polifunzionalità immunologica delle proteine e suo significato per l'analisi di un substrato batterico allergene-attivo].È stato dimostrato con l'ausilio dell'immunoassorbimento di un substrato allergene-attivo di E. coli 020: K84 (n. 2-rII) che le sostanze proteiche che partecipano al fenomeno dell'ipersensibilità cellulare erano attive nelle reazioni di immunità umorale L'attività allergenica e immunochimica fungeva da funzioni delle stesse molecole di proteine batteriche, questo avvalorando l'uso dell'analisi immunochimica per lo studio di un substrato batterico attivo all'allergene Mediante la denaturazione proteica è possibile ottenere preparati immunochimici inerti allergenici in grado di rilevare l'ipersensibilità cellulare alle proteine batteriche grezze. la polifunzionalità immunologica delle proteine è discussa dall'aspetto della non omogeneità dei loro gruppi determinanti antigenici.
[La distribuzione del benorilato nel plasma, nel liquido sinoviale e nel tessuto sinoviale nell'artrite reumatoide].Gli autori riferiscono sul farmaco benorilato disponibile in Repubblica Federale con il nome di Benortan (4-acetamidofenil-2-acetossibenzoato). Numerosi esami hanno dimostrato che è ben tollerato per via orale e che ha effetti clinici benefici con pochi effetti collaterali. Il Benorilato è un prodotto neutro, liposolubile, sostanza insolubile in acqua che all'assorbimento viene quasi completamente idrolizzata in salicilato e paracetamolo 6 pazienti con artrite reumatoide sieropositiva classica e con sinovialite altamente attiva di una o entrambe le articolazioni del ginocchio non precedentemente trattate hanno ricevuto 4 g di una sospensione di benorilato al 40% per via orale due volte al giorno per un periodo di 9-14 giorni. In giorni diversi a tempi esattamente determinati di somministrazione del farmaco sangue, e il giorno della sinoviectomia liquido sinoviale e tessuto sinoviale, sono stati prelevati e congelati a - 70 gradi C un d successivamente esaminato per quanto riguarda il contenuto di salicilato, paracetamolo e benorilato invariato. I livelli plasmatici di salicilato e paracetamolo erano generalmente nettamente superiori alle concentrazioni di questi metaboliti nel liquido sinoviale. Il benorilato, praticamente non rilevabile nel sangue, si trova nel tessuto sinoviale ed è rilevabile in maggior quantità nei villi sinoviali più infiammati. Il benorilato può probabilmente penetrare nella membrana sinoviale come i suoi metaboliti salicilato e paracetamolo; resta, tuttavia, da esaminare se i metaboliti sono distribuiti in modo diverso nelle diverse aree sinoviali (tessuto sinoviale attivo infiammato e non attaccato, rispettivamente) allo stesso modo del benorilato di per sé.
[Analisi farmacologica dei meccanismi preparatori dell'attività stereotipata nei cani].In cani con elaborati stereotipi ritmici e mozaici di riflessi condizionati situazionali secretori e motori caratteristiche specifiche sono state rilevate nell'azione di alcuni farmaci neurotropici (amizyl, amedine, diphacil, pedifene, clorpromazina e sodio ossibutirrato) su condizioni preparatorie (latenti) di eccitazione e inibizione, che compaiono nei sistemi stabilizzati dei riflessi. natura prevalentemente colinergica dei meccanismi preparatori e di innesco dell'attività alimentare condizionata. Il blocco dei recettori M-colinorecettori (mediante amizile e amedina) indebolisce o elimina le condizioni preparatorie che appaiono in uno stereotipo dinamico e disturba le reazioni di innesco entro tre-dieci giorni. il blocco del pedifene dei recettori H-colino intensifica gli stati preparatori.
[Studio comparativo sulla riproduzione del virus della malattia di Aujeszky\'s in una sospensione di cellule e tessuti embrionali di pollame (trad.autore\'s)].Riproduzione di È stato confrontato il virus della malattia di Aueski in colture in sospensione di cellule trisinizzate e tessuto macinato meccanicamente di embrioni di pulcino, anatra e quaglia. Sono state determinate le condizioni ottimali per la coltivazione di vaccini e ceppi virali virulenti in questi sistemi. I vantaggi e le prospettive dell'utilizzo di colture in sospensione di sono stati dimostrati tessuti di embrioni aviari tritati per la preparazione di materiali virali con elevata attività biologica e in grandi volumi rispetto a sospensioni cellulari tripsinizzate.
[Sopravvivenza enterococcica in carne forzata conservata in pellicole polimeriche e in cotolette ricavate da essa].I dati disponibili suggeriscono che a 2 gradi e 5 gradi con una conservazione di 12 giorni in carne confezionata non imballata e in film polimerico non si verifica alcuna propagazione degli enterococchi A 22-24 gradi la moltiplicazione di Str. faecalis var. la parte centrale delle cotolette preparate dalla carne di forza contaminata da enterococchi raggiunge i 7-80 gradi la massa delle cellule di Str. faecalis var liquefaciens perisce, ma anche a 80 gradi sopravvivono singole cellule resistenti al calore.
[Cambiamenti nei livelli di lattato e piruvato nel liquido cerebrospinale durante la chirurgia cerebrale in anestesia con fluotano].Il contenuto di lattato e piruvato nel sangue arterioso e nel liquido cerebrospinale di Sono stati misurati 24 pazienti operati al cervello in anestesia fluorurata con ventilazione artificiale dei polmoni. Verso la fine dell'operazione e dell'anestesia sono stati rilevati un livello di lattato notevolmente elevato e l'accumulo del suo eccesso nel sangue, questi cambiamenti essendo stati più marcati con l'ipocapnico ventilazione dei polmoni. Un aumento della concentrazione di lattato e piruvato nel liquido cerebrospinale non è stato accompagnato da accumulo di lattato in eccesso.
[Analisi dell'inibizione nelle vie di ossidazione di NADP.H2 e NAD.H2 nei microsomi del tessuto epatico].I complessi microsomiali del trasferimento di elettroni erano resistenti a inibitori tipici della via mitocondriale di trasporto degli elettroni Nell'ossidazione di NADP. H2 si sono verificati almeno tre punti di riduzione molecolare dell'O2: NADP. H2-flavoproteina specifica, Fe2+ che partecipa alle reazioni di perossidazione degli acidi grassi insaturi e citocromo P-450. degli inibitori del citocromo P-450 non può essere valutato mediante polarografia poiché nella via sono stati osservati diversi siti di attivazione molecolare di O2. Nell'ossidazione di NADP. H2 la stima della velocità delle reazioni di trasferimento di elettroni è stata effettuata monitorando la velocità di assorbimento di O2 in presenza di EDTA (inibitore della reazione di perossidazione) poiché circa il 50% dell'ossigeno totale è stato utilizzato solo nel processo in cui è stato ossidato NADP. H2 L'ossidazione di NAD. H2, inibita con EDTA, è stata attivata mediante aggiunta di Ca2+.
[Effetto dell'antibiotico D-cicloserina e del suo dimero sull'attività della tirosina aminotransferasi nel tessuto epatico di ratti intatti, adrenalectomizzati e ipofisectomizzati].In un periodo di minima attività giornaliera della tirosina aminotransferasi, entro 6-8 giorni dalla surrenectomia bilaterale, l'attività enzimatica è diminuita di circa il 20% rispetto ad un adeguato controllo. Contemporaneamente, entro un giorno e sette giorni dopo l'ipofisectomia, nel tessuto epatico di ratto l'attività enzimatica era aumentata, circa due volte rispetto allo stato normale Entro quattro ore dalla somministrazione intraperitoneale in ratti a digiuno intatti alla dose di 2-2,5 g per 1 kg di peso corporeo D-cicloserina e suoi il dimero ha causato un'induzione della tirosina aminotransferasi rispettivamente del 75% e del 180%. L'induzione dell'enzima da parte della D-cicloserina e del suo dimero è stata inibita dall'actinomicina D; il fenomeno non è stato osservato nei ratti adrenalectomizzati. Entro un giorno dopo l'ipofisectomia D- la cicloserina non ha causato l'induzione della tirosina aminotransferasi nel tessuto epatico di ratto; al contrario, il dimero della D-cicloserina ha causato l'induzione dell'enzima, paragonabile all'effetto dell'ACTH, nel tessuto epatico di ratti ipofisectomizzati.
[Cambiamenti nel contenuto dell'RNA ribosomiale e nell'attività dell'RNAasi ribosomiale nel cervello in condizioni fisiologiche naturali].Attività ottimale dell'RNAasi dal cervello frazione ribosomiale è stata osservata a pH 5,4 e pH 7,9. Dopo la stimolazione alimentare e condizionata-alimentare, il contenuto di rRNA era significativamente aumentato nel cervello, ma l'attività dell'RNAasi era diminuita di più di due volte. Dopo l'inibizione condizionata-alimentare il contenuto di rRNA era leggermente diminuito rispetto agli esperimenti con la stimolazione alimentare e condizionata-alimentare, ma era nettamente superiore rispetto al controllo. Rispetto alla stimolazione alimentare nella stimolazione condizionata-alimentare, l'attività della RNAasi è stata aumentata a pH 5,4 e diminuita a pH 7,9.
[Cellule di Leydig simili a surrene (autore\'s transl)].Cellule di Leydig ricche di lipoidi simili a surrene, che potrebbero essere trovate in un criptorchid testis, sono stati studiati mediante microscopia ottica ed elettronica. C'erano proliferazione nodulare e diffusa di queste cellule simili a surrene nell'interstizio del testicolo. Elettromicroscopicamente queste cellule sono fascicolate e caratterizzate da grandi liposomi, molti mitocondri tubulovescicolari e un grande reticolo endoplasmatico liscio Ma la presenza di cristalli di Reinke in queste cellule ha sottolineato la loro relazione con le cellule di Leydig. La storia clinica di questo caso è caratterizzata da un'estrema adiposità (167 kg) e un'elevata escrezione urinaria di estrogeni. Questa escrezione potrebbe essere soppressa con desametasone e stimolata con HCG Dopo l'orchiectomia l'escrezione di estrogeni è diminuita per 4 mesi e poi è aumentata nuovamente, dopo la stimolazione con ACTH eseguita a causa dell'insufficienza surrenalica. In questo momento non ci sono prove di adre tumore nale; nel testicolo controlaterale, scrotale, la spermiogenesi e le cellule di Leydig sono senza alterazioni patologiche come rivelato dalla biopsia.
[Studio del liquido amniotico di pecora nel corso normale della gravidanza e dell'aborto].Sono stati condotti studi citologici, biochimici e immunoelettroforetici su liquido amniotico in 100 pecore con gravidanza normale e 40 pecore che avevano abortito. Ogni mese di gravidanza sono stati studiati rispettivamente 20 e 8 animali dei due gruppi. Si è riscontrato che i processi biochimici e metabolici che avvengono nel feto portano alle variazioni dei liquidi amniotici che alterano il valore del pH, la riserva alcalina, il contenuto di potassio, calcio, fosforo, fosfatasi alcalina nonché la loro attività battericida. Modificazioni più caratteristiche legate alla gravidanza sono state osservate nella composizione cellulare dei liquidi amniotici. Con l'avanzare dell'età l'aumento del numero di cellule è stato accompagnato (colorazione con solfato di Nilo blu) con un aumento del contenuto di "cellule arancioni". I liquidi amniotici delle pecore con gravidanza normale sono risultati contenere proteine precipitato con sieri iperimmuni contro le proteine del siero del sangue e dei reni, del cuore e della placenta. Nelle pecore che avevano abortito i valori di pH del liquido amniotico sono diminuiti nei mesi in cui sono avvenuti gli aborti: 7,36, 7,11, 6,90, 6,80 e 6,90, contro 7,41, 7,36, 7,28, 7,17 e 7,18 rispettivamente. Insieme al pH, anche la riserva alcalina è scesa a 37,9 nel primo mese ea 14,20 nel quinto mese. Nelle pecore che avevano abortito nel 2°, 3° e 4° mese questi valori erano 18,90, 14,90 e 13,80 cu. cm, rispettivamente. Nei casi di aborto la composizione proteica dei liquidi amniotici mostrava livelli più elevati di alfa e beta globuline.
Effetto dell'eparina o della diluizione salina del sangue sulla PCO2 e sul pH.L'effetto di diverse diluizioni con soluzioni di eparina o soluzione salina sulla PCO2, pH e è stato studiato il bicarbonato standard. Il sangue è stato prima equilibrato per dare circa 40 o 60 mmHg PCO2. Le soluzioni erano in equilibrio con l'aria ambiente. L'effetto sulla PCO2 ematica ecc. potrebbe essere completamente spiegato dalla diluizione con un mezzo avente una PCO2 molto più bassa. Pertanto, la correzione della soluzione di eparina a pH 7,40 e PCO2 40 mmHg ha eliminato l'effetto su PCO2, pH e bicarbonato standard. Con la normale procedura di eparinizzazione del sangue (diluizione al 2% circa) l'effetto è praticamente trascurabile.
[p-nitrofenil fosfatasi specifica del lievito Pichia guilliermondii].Le cellule del lievito P. guilliermondii contengono specifica p-nitrofenil fosfatasi (pNPPasi), il cui livello dipende dall'apporto di fosforo inorganico alle cellule L'enzima parzialmente purificato è attivato dagli ioni Mg2+, Co2+ e un po' più debole -- dagli ioni Fe2+ Con la presenza di Mg2+ l'attività enzimatica è inibita dagli ioni Cd2+, Zn2+, f- , Be2+, Cu2+, Mn2+, Ca2+, MoO42-, Fe3+, Fe2+, fosfato inorganico e da EDTA Una miscela di ioni Be2+ e F- provoca una completa inibizione dell'attività Gli ioni K+ e Na+ inibiscono in una certa misura l'attività enzimatica , l'ATP rimuove l'effetto inibitorio dei cationi monovalenti. Km di pNPPasi è pari a 3,3-10(-4) M, il peso molecolare determinato con il metodo della gelfiltrazione è 60 000. L'enzima è il più attivo a 50 gradi C e pH 9,5 La PNPPasi non manifesta l'attività della fosfotransferasi nel tampone tris-HC1.
[Idrolisi del collagene insolubile delle ossa di toro da parte della proteasi cristallina di Streptomyces griseus].L'idrolisi del collagene è stata studiata nei tessuti delle ossa di toro da Str. griseus proteasi cristallina. La quantità di collagene da essa idrolizzato è composta dal 6,6% e dal 16% rispettivamente dopo 4 e 6 ore di idrolisi. Quando il rapporto enzima:substrato è 1:50 l'idrolisi procede più intensamente; con una diminuzione del rapporto fino a 1:1000 la quantità media di peptidi aumenta rispettivamente da 2,6 fino a 4 residui amminoacidici In condizioni di idrolisi del collagene denaturato il contenuto di idrossiprolina in soluzione rispetto a quello nativo aumenta, in questo caso i legami con la presenza degli imminoacidi sono più facili da scindere, tanto più resistenti sono quelli formati da idrossiprolina. Entro il limite di 20-45 gradi C l'idrolisi delle proteine si intensifica con l'aumento della temperatura. Nel range di pH di 5,0-11.0 la quantità massima di alfa- NH2-gruppi e l'idrossiprolina è osservata a pH 8,5, il minimo, a pH 5,0. L'idrossiprolina nella composizione dei peptidi compare all'inizio dell'idrolisi mentre quella libera degli enzimi dall'effetto più lungo 24 h dopo l'inizio dell'esperimento compone il 12,2% del suo contenuto totale nei prodotti risolti. Nella parte insolubile del substrato, dopo 3 ore di idrolisi, la tirosina compone meno del 25% della sua quantità iniziale in proteine, mentre la fenil alanina - oltre il 70%. Dopo 6 ore di idrolisi, la parte risolta del sistema contiene circa il 30% di alanina e rispettivamente l'8,9 e il 6% di glicina, prolina e idrossiprolina.
Attività placentare umana delta5-3beta idrossisteroide deidrogenasi (delta5-3beta HSDH): distribuzione intracellulare, proprietà cinetiche, retroinibizione e influenza della delipidazione di membrana.Delta5 L'attività -3beta HSDH è stata valutata sia mediante metodo spettrofotometrico che mediante l'uso di substrati radioattivi. L'attività enzimatica è equamente distribuita tra le frazioni mitocondriali e microsomiali verificate al microscopio elettronico. L'attività specifica è comparabile in entrambe le frazioni, così come il pH ottimale e il Km per NAD e per i substrati Il pH ottimale delta5-3beta Hut, l'attività specifica e la sensibilità all'azione inibitoria dei vari steroidi sono differenti quando si utilizzano come substrati gli steroidi C19 e C21 Gli estrogeni e l'AMP ciclico hanno anche un'azione inibitoria su l'ossidazione degli steroidi C21. Il trattamento delle membrane microsomiali o mitocondriali con fosfolipasi A rilascia acidi grassi (principalmente arachidonici) e diminuisce l'enzima attività matica. "L'assorbimento" degli acidi grassi sull'albumina di siero bovino riattiva parzialmente il delta5-3beta HSDH.
Effetti emodinamici dei propellenti aerosol. II. Circolazione polmonare nel cane.L'inalazione di triclorofluorometano (FC11), diclorotetrafluoroetano (FC114) e diclorodifluorometano ( FC12) ha causato una riduzione della pressione sanguigna aortica media ma solo FC11 e FC114 hanno causato una riduzione della pressione arteriosa polmonare media. La causa principale della caduta è una diminuzione del flusso sanguigno polmonare. Quando il flusso sanguigno a un lobo è mantenuto costante e l'adrenergico i recettori alfa sono bloccati dall'iniezione di fentolamina, l'inalazione di FC11 ha causato vasodilatazione. Nella circolazione intatta, la vasodilatazione è mascherata dal rilascio di catecolamine che restringono i vasi sanguigni polmonari.
Anidrasi carbonica B e C degli eritrociti umani nella malattia polmonare ostruttiva cronica.I livelli degli isoenzimi dell'anidrasi carbonica B e C nei globuli rossi umani sono stati determinati utilizzando una tecnica immunologica quantitativa in pazienti con malattia polmonare ostruttiva cronica. In questi pazienti è stato osservato un aumento significativo del livello di anidrasi carbonica B, mentre il livello di anidrasi carbonica C non è cambiato sostanzialmente. Sono state trovate correlazioni positive tra il livello di anidrasi carbonica B e la tensione arteriosa di CO2 e la concentrazione plasmatica di HCO3. È stata osservata una correlazione negativa tra i livelli di anidrasi carbonica B e il pH del sangue. Questi risultati suggeriscono che la sintesi o la degradazione dell'isoenzima dell'anidrasi carbonica B è influenzata dalla tensione arteriosa di CO2 o dalla concentrazione plasmatica di HC03. Il significato clinico è stato discusso anche in relazione a questi livelli di isoenzimi nei globuli rossi.
Effetti degli agenti stimolanti e bloccanti beta-adrenergici sulla risposta adrenalinica e sull'attività dell'adenil ciclasi dei leucociti nella scimmia e nell'essere umano.Uso del metodo in quali sospensioni di leucociti sono state incubate con NaF o metaproterenolo a 30 gradi C per 15-30 minuti per consentire loro di convertire 3H-ATP (10 muCi) in AMP 3H-ciclico, seguito dalla separazione dell'AMP 3H-ciclico formato mediante cromatografia comune, l'attività dell'adenil ciclasi dei leucociti delle scimmie e degli esseri umani è stata misurata con elevata riproducibilità. La somministrazione orale di metaproterenolo ha aumentato l'attività dell'adenil ciclasi dei leucociti che è stata stimolata dal NaF e ha diminuito il conteggio degli eosinofili periferici in alcune scimmie. blocco della scimmia che è stato effettuato mediante somministrazione di propranololo, l'attività dell'adenil ciclasi dei leucociti è diminuita significativamente. farmaci con propranololo.
Anemia cronica, guarigione delle ferite e 2,3-difosfoglicerato dei globuli rossi.Relazioni tra vari tipi di anemia cronica, guarigione delle ferite e globuli rossi Il 2,3-difosfoglicerato (2,3 DPG) è stato esaminato nei conigli. La resistenza alla trazione della ferita e l'assorbimento di energia non sono stati influenzati dall'anemia sideropenica cronica, dall'anemia emolitica cronica causata dall'infusione endovenosa di acqua né dall'anemia emolitica cronica causata dall'acqua endovenosa infusione né da anemia cronica indotta da fenilidrazina. I livelli di 2,3 DPG dei globuli rossi erano aumentati nell'anemia da carenza di ferro ed erano normali nei conigli con anemia cronica indotta da fenilidrazina al momento dell'asportazione della ferita, ma erano bassi dopo l'iniezione di fenilidrazina. i risultati mostrano che l'anemia cronica di per sé non influisce sulla resistenza alla trazione e sull'assorbimento di energia della guarigione della ferita. I risultati suggeriscono che il processo di guarigione della ferita può differire in alcuni tipi di anemia.
Rivascolarizzazione diretta dell'infarto miocardico acuto mediante impianto dell'arteria mammaria interna sinistra nel miocardio ventricolare sinistro infartuato.Questo è un rapporto preliminare. Chiaramente, l'interno l'arteria mammaria impiantata nella porzione anterolaterale infartuata della parete del ventricolo sinistro è stata di aiuto nel ridurre le dimensioni dell'infarto e nel mantenere la vita dei cani e la normale funzione sei ore dopo la creazione di un grande infarto miocardico della parete ventricolare sinistra Più animali devono essere studiati alla fine di sei ore, otto ore e dieci ore dopo l'impianto Sono necessari ulteriori studi per sapere se la legatura delle vene coronarie contemporaneamente alle arterie è benefica o meno. Due mammelle interne le arterie possono agire meglio di una quando impiantate fianco a fianco in un infarto di 5 x 5. Nell'uomo, sia le arterie mammarie interne che l'arteria gastroepiploica destra potrebbero essere utilizzate per rivascolarizzare il mio infarto ocardico nelle parti posteriore e anterolaterale del ventricolo sinistro.
Un'indagine sul metabolismo catalizzato dal citocromo P-450 epatico dell'anestetico fluorosseno (2,2,2-trifluoroetilviniletere).Il ruolo dei diversi citocromi P-450 nel metabolismo dell'agente anestetico flurossene, e il meccanismo di produzione degli effetti tossici osservato dopo il pretrattamento degli animali con pehnobarbital prima dell'anestesia, sono stati studiati ratti maschi sono stati anestetizzati con flurossene, o con 2,2,2-trifluroetil etil etere, o con etil vinil etere nel tentativo di accertare gli effetti tossici in vivo dei tre agenti anestetici. L'istologia epatica risultante è riportata. Uno studio del legame e del metabolismo del fluorosseno da isolati sono stati realizzati anche microsomi epatici di ratto. Concludiamo che sono i livelli elevati di citocromo P-450 che potenziano la tossicità dell'anestesia con flurossene negli animali trattati con fenobarbital e che il citocromo P-448 non si lega o metabolizza il flurossene. Si ritiene che la città della molecola di fluorosseno risieda nella frazione trifluoroetilica, mentre il gruppo vinilico del fluorosseno sembra svolgere un ruolo nel danno epatico osservato.
Il meccanismo di inibizione dell'assorbimento del ferro da parte del tè.Precedenti studi sull'uomo hanno dimostrato che bere il tè durante i pasti inibisce significativamente l'assorbimento sia del ferro alimentare e ferro medicinale. Questo studio fornisce prove da esperimenti con ratti che i tannini nel tè sono responsabili dell'inibizione, probabilmente formando complessi non assorbibili con il ferro all'interno del lume intestinale. Il rapporto molare di tannino: ferro dipende dalla pH, essendo 1:1 a pH 2,0 2:1 a pH 5,5 e 3:1 a pH 8,0 Poiché i tannini sono presenti in molti alimenti vegetali la formazione di tali complessi può essere un fattore della scarsa disponibilità per l'assorbimento di molto ferro alimentare.
[Determinazione dei barbiturici da materiale biologico].Un'analisi quantitativa in tracce dei barbiturici è stata effettuata nel sangue, nelle urine, negli organi e nelle intestinali. La quantità di campione necessaria per l'analisi è molto piccola [circa 400 mul di sangue. L'estrazione viene eseguita quattro volte con la miscela di acetone e 1:1]. È stata descritta la preparazione delle colonne, il confezionamento e gli standard. Il dispositivo utilizzato per le analisi [Chrom 3] è dotato di un blocco di alimentazione regolato che impedisce la decomposizione dei campioni nel dosatore. La temperatura della colonna è di 190 gradi C, l'impaccamento della colonna è Chromaton N-AW-DMCS rivestito con 3% NPGS e 0,75% di acido trimero, rivelatore FID.
Purificazione delle proteine: cromatografia ad adsorbimento su vetro a pori controllati con l'uso di tamponi caotropici.La cromatografia su vetro a pori controllati in combinazione con tamponi caotropici rende possibile, in un unico passaggio, purificazioni proteiche di diverse centinaia di volte. La nuova enfasi è sull'adsorbimento controllabile altamente selettivo. Il metodo è utile per la purificazione e concentrazione di proteine da grandi volumi di mezzi complessi e per la purificazione di proteine che sono scarsamente solubili o tendono per aggregare in soluzione acquosa D-(-)-Beta-idrossibutirrato deidrogenasi, una proteina legata alla membrana mitocondriale, diverse proteine solubili e un'alfa tossina stafilococcica, che può essere purificata direttamente da grandi volumi di terreno di coltura, sono utilizzati per illustrare il metodo.
Costruzione e valutazione di un semplice ossigenatore a membrana per la perfusione di piccoli organi.Viene descritto un semplice ossigenatore a membrana per la perfusione di organi isolati. La membrana impiegata era costituita da un normale tubo in gomma siliconica, diametro interno 2 mm, spessore parete 0,3 mm, la lunghezza del tubo variabile in base al trasferimento di gas richiesto. Nel descrivere la capacità dell'ossigenatore, è stato riscontrato che la velocità massima di trasferimento del gas per unità di superficie della membrana era una misura inadeguata, poiché questa varierebbe sia con la portata attraverso l'ossigenatore che con la capacità di legame del gas del perfusato. La seguente formula per la funzione che descrive la relazione tra la variazione massima possibile della concentrazione di gas nel perfusato (C), la portata (F) ed è stata proposta la variazione effettiva della concentrazione di gas nel perfusato (U): U=C-e(-bF), b essendo una costante specifica per il gas e la membrana. Questa formula è stata testata da una serie di test in vitro e esperimenti e ha dimostrato di fornire una valida descrizione della capacità dell'ossigenatore. Si scoprì inoltre che l'anidride carbonica veniva sempre trasferita più facilmente dell'ossigeno, per cui la capacità di trasferimento dell'ossigeno era il fattore limitante nell'uso dell'ossigenatore. Per facilitare la costruzione della membrana della giusta dimensione, è stato costruito un nomogramma per il trasferimento di ossigeno.
L'influenza dell'ischemia e dell'iperemia del braccio sul flusso sanguigno dell'arteria succlavia e vertebrale in pazienti con malattia occlusiva dell'arteria succlavia e del tronco brachiocefalico. Uno studio peroperatorio.Uno studio peroperatorio del flusso sanguigno e della direzione del flusso è stato eseguito in una serie di pazienti con malattia occlusiva dell'arteria succlavia. Particolare attenzione è stata focalizzata sulle variazioni di flusso causate dall'ischemia del braccio e dall'iperemia postischemica e sull'effetto dell'iniezione di un vasodilatatore nell'arteria succlavia distale. L'effetto sul flusso sanguigno e sulla direzione del flusso è stato misurato con l'ausilio di un flussometro elettromagnetico. Durante l'ischemia del braccio indotta da un bracciale gonfiato sul braccio, il flusso succlavia diminuiva, così come il flusso dell'arteria vertebrale quando era retrogrado. Se il flusso dell'arteria vertebrale era anterogrado, aumentava durante l'ischemia del braccio. L'iperemia postischemica causava un aumento del flusso succlavia e della ve invertita flusso rtebrale. Se il flusso vertebrale era anterogrado, diminuiva durante l'iperemia postischemica. Risultati simili sono stati ottenuti con l'iniezione intra-arteriosa di un vasodilatatore. La grande quantità di flusso sanguigno che attraversa l'arteria vertebrale, così come le variazioni di flusso causate dall'iperemia reattiva del braccio, sottolineano il ruolo di questa arteria come vaso collaterale all'arto superiore nei casi di furto della succlavia.
Plasma potassio e insulina durante la circolazione extracorporea utilizzando un primer con pompa contenente glucosio.Per indagare la possibile relazione tra un primer con pompa contenente glucosio e variazioni del potassio plasmatico durante la circolazione extracorporea, sono state effettuate determinazioni di glicemia e insulina plasmatica, potassio e magnesio in 18 soggetti sottoposti a chirurgia a cuore aperto. In 6 pazienti, gli stessi parametri erano stati misurati durante una glicemia preoperatoria test di tolleranza Si è riscontrato che l'eliminazione del glucosio era notevolmente compromessa durante la circolazione extracorporea, nonostante alti livelli di insulina Durante i primi minuti di circolazione extracorporea, il potassio plasmatico è diminuito più che durante il test di tolleranza al glucosio, nonostante livelli comparabili di insulina Si conclude che i cambiamenti nel potassio plasmatico durante la circolazione extracorporea non riflettono l'attività dell'insulina in misura notevole.
Risultati radiologici nel criptorchidismo.L'urografia endovenosa di 78 ragazzi criptorchidi non ha rivelato anomalie clinicamente significative del tratto urinario superiore. Due ragazzi avevano un rene ruotato e altri 2 una doppia pelvi renale. Un ragazzo era stato precedentemente operato a causa di idronefrosi. Non sembra quindi esserci alcun motivo per l'urografia endovenosa di routine dei ragazzi criptorchidi. Il quarantadue per cento dei ragazzi aveva la spina bifida occulta nella colonna lombare e sacrale. Un caso di cardiopatia congenita asintomatica è stato scoperto durante una normale radiografia del torace.
Valutazione dell'effetto antibiotico del trattamento della sinusite mascellare.Poiché è stato messo in dubbio l'effetto del trattamento antibiotico della sinusite mascellare, l'eliminazione dei batteri dalla secrezione sinusale è stata studiata durante il trattamento antibiotico. Penicillina V, azidocillina, tetraciclina o doxiciclina è stata somministrata a 54 pazienti con sinusite mascellare. Campioni di secrezione sinusale sono stati aspirati sia prima del trattamento che 2-3 giorni dopo l'inizio del trattamento. Quando la concentrazione di antibiotico era al di sotto del limite superiore della MIC per il gruppo di sensibilità 1, la crescita batterica era presente praticamente in tutti i campioni. Quando la concentrazione di antibiotico era uguale o superiore a questo limite, non c'era crescita batterica in circa la metà dei campioni. Un prerequisito per l'effetto antibiotico-- eliminazione dei batteri--è che la concentrazione di antibiotico è ben al di sopra della MIC dei batteri nel sito di infezione. La scelta tra antibi battericida o batteriostatico l'ottica sembrava irrilevante. La sopravvivenza batterica nel seno mascellare nonostante un'elevata concentrazione di antibiotici nel seno mostra che i valori di MIC determinati in laboratorio non sempre rispecchiano la sensibilità dei batteri agli antibiotici in vivo.
L'influenza della superinfezione batterica sul decorso clinico dell'influenza. Studi sulle epidemie di influenza a Stoccolma durante gli inverni 1969-70 e 1971-72.Durante due epidemie di infezione da influenza A a Stoccolma 1969-72, 249 casi sono stati selezionati per uno studio sull'effetto della superinfezione batterica. Il coinvolgimento batterico è stato dimostrato attraverso colture e reazioni sierologiche. La presenza di proteina C-reattiva in quantità maggiore nel siero era significativamente più comune nel gruppo che aveva la più forte indicazione di infezione batterica. Una maggiore durata della febbre e una maggiore incidenza di polmonite, leucocitosi e velocità di eritrosedimentazione superiore a 50 mm/lh era anche la regola nei casi con coinvolgimento batterico. entrambe le epidemie i batteri più spesso coinvolti erano gli pneumococchi.
Sopravvivenza di ratti soggetti ad anemia acuta a diversi livelli di 2,3-difosfoglicerato eritrocitario.È stata elaborata una procedura sperimentale in cui sono stati sottoposti i ratti ad uno scambio di eritrociti, seguito da anemia acuta mediante emodiluizione. Un gruppo di ratti ha ricevuto eritrociti con un'alta concentrazione di 2,3-difosfoglicerato (DPG), e l'altro gruppo ha ricevuto eritrociti con una bassa concentrazione di DPG. La sopravvivenza il tasso era uguale nei due gruppi. Indipendentemente dalla concentrazione di DPG, i ratti la cui concentrazione di emoglobina raggiungeva il livello più basso morivano. I ratti morti erano anche più acidotici degli altri. I risultati indicano che la concentrazione di emoglobina e il valore del pH erano più importanti determinanti per la sopravvivenza rispetto alle concentrazioni di DPG.
Gas nel sangue arterioso normale durante l'ipertrigliceridemia sperimentale nel ratto.Il possibile effetto di alte concentrazioni di trigliceridi plasmatici sulla tensione arteriosa di ossigeno è stato studiato nei ratti da infusione di linfochilomicroni o emulsione di olio di soia (Intralipid). Le concentrazioni medie di trigliceridi sono state aumentate da 130 a 1454 mg/100 ml senza variazioni statisticamente significative della tensione arteriosa di ossigeno, della saturazione di ossigeno, della tensione di anidride carbonica o del pH. La piccola riduzione della pressione arteriosa la tensione, il contenuto o la saturazione di ossigeno osservati in studi precedenti potrebbero essere stati dovuti a una stabilizzazione inadeguata dell'emulsione di grasso allora disponibile per l'uso endovenoso. I dati attuali suggeriscono che alte concentrazioni di trigliceridi plasmatici prodotti dall'infusione di chilomicroni o Intralipid non influenzano i gas del sangue arterioso nel ratto normale.
Acqua tissutale e pH nella cardiomiopatia primaria sperimentale indotta da isoproterenolo nella rana.Aneurismi acuti e altre lesioni cardiache morfologicamente definite sono state prodotte nelle rane dall'isoproterenolo ( IPR) come descritto in precedenza Campioni di lesioni verificate in vivo e da aree ventricolari macroscopicamente normali, insieme a campioni di animali di controllo non trattati, sono stati analizzati per contenuto totale di acqua, spazio inulina, pHe e pHi utilizzando DMO-14C e inulina-3H Il contenuto totale di acqua nel tessuto cardiaco è stato aumentato in tutti i tipi di lesioni dopo l'iniezione di IPR. Il contenuto più alto è stato riscontrato negli aneurismi sporgenti e non contrattili. Lo spazio di inulina è stato ampliato in tutti i campioni di muscolo cardiaco di animali trattati con IPR, compresi quelli senza lesioni macroscopicamente visibili. Quei campioni con aneurismi hanno mostrato il maggior grado di ingrandimento. Il (pHe-pHi) non differiva tra animali iniettati e non iniettati, e i campioni non contrattili da aneurismi non differiva da altre lesioni e aree macroscopicamente intatte. Negli animali iniettati con IPR, non c'era differenza nel pHi tra i segmenti macroscopicamente danneggiati e non danneggiati della parete ventricolare. Confrontando questi animali con i controlli, tuttavia, è stato osservato un leggero spostamento verso il lato alcalino sia per pHi che per pHe. Il (pHe-pHi) era più alto nel muscolo scheletrico che nel muscolo cardiaco sia negli animali trattati con IPR che in quelli non trattati. L'acqua tissutale è aumentata nel muscolo scheletrico dopo l'iniezione di IPR, riflettendo un cambiamento di acqua intracellulare man mano che lo spazio di inulina veniva mantenuto.
Effetti degli anestetici per inalazione sulla funzione cardiaca e sul metabolismo nel cane intatto.In cani sani a torace chiuso, depressione dose-dipendente della funzione ventricolare è stato prodotto dagli anestetici alotano, metossiflurano e fluorosseno, come prova della diminuzione della gittata sistolica ventricolare sinistra, dell'ictus, del dP/dt e dell'aumento della pressione endodiastolica. Il flusso sanguigno miocardico e il consumo di ossigeno diminuivano contemporaneamente ed erano correlati con la pressione sanguigna aortica Non vi è stato alcun cambiamento nell'estrazione del lattato miocardico con alotano e metossiflurano, suggerendo che l'ossigenazione miocardica era adeguata nonostante la diminuzione del flusso sanguigno. tendeva infatti a diminuire. Gli effetti emodinamici dell'alotano e del metossiflurano sono simili a quelli precedentemente riportati nell'uomo, ma quelli del fluorosseno sono di fferente. Di conseguenza, la speculazione clinica da questi risultati non è al momento giustificata.
Effetti di pH e pCO2 sulle prestazioni del miocardio ischemico.Le prestazioni contrattili del miocardio felino ischemico sono state valutate in condizioni di variazioni selettive del perfusato nel pH e pCO2 È stato notato un aumento sostanziale delle prestazioni del miocardio quando la pCO2 è stata abbassata a pH costante e una diminuzione delle prestazioni è stata osservata quando la pCO2 è stata aumentata a pH costante L'acidosi perfusata a pCO2 costante ha comportato una diminuzione delle prestazioni e una riduzione delle prestazioni solo dopo 20 min di esposizione. L'alcalosi non ha aumentato le prestazioni e ha ridotto le prestazioni in modo transitorio durante l'ischemia lieve. Questi studi suggeriscono che le prestazioni del miocardio durante l'ischemia sono strettamente correlate alla pCO2 tissutale ed è minimamente correlata al livello di pH extracellulare.
Fattori che influenzano la tolleranza del muscolo cardiaco all'ipossia.Gli effetti di isoproterenolo, glucosio e pH sulle risposte del muscolo cardiaco isolato di ratto all'ipossia ( 95% N2, 5% CO2) sono stati esaminati mentre i muscoli si contraevano isometricamente 12 volte al minuto a 28 gradi C. In presenza di glucosio 5,5 mM, l'isoproterenolo 10 (-5) M e il pH alcalino (7,8) miglioravano le prestazioni di muscolo cardiaco durante l'ipossia precoce. Questo è stato seguito da un declino prematuro della tensione sviluppata e la contrattura è apparsa. Il recupero della funzione dopo la riossigenazione con il 95% di O2 e il 5% di CO2 dopo un periodo di 60 minuti di ipossia era scarso. pH acido (6,8) ha provocato un declino precoce dell'attività meccanica durante l'ipossia, ma non si è verificata contrattura e si è osservato il completo recupero della tensione sviluppata dopo la riossigenazione dopo 60 minuti di ipossia. Quando il glucosio 22 mM è stato utilizzato come substrato, le prime risposte all'ipossia non sono state alterate ; ma le prestazioni tardive sono state migliorate, al contrario la tura non è apparsa ed è stato osservato un completo recupero dopo 60 minuti di ipossia. Se si aggiungeva ulteriore glucosio al bagno dopo 30 min di ipossia (concentrazione 22 mM), era evidente uno scarso effetto sulla tensione sviluppata; ma la contrattura è diminuita e il recupero dopo 60 minuti di ipossia è stato migliorato. L'aggiunta di glucosio 22 mM ha permesso all'isoproterenolo di esercitare il suo effetto inotropo in assenza di cambiamenti deleteri tardivi. I dati supportano il concetto che i fattori che tendono ad aumentare l'utilizzo di riserve limitate di substrato anaerobico durante l'ipossia facilitano il deterioramento. Aumentando il glucosio esogeno, sembra possibile il supporto dell'attività inotropa senza effetti negativi tardivi e il recupero è migliorato con la riossigenazione.
Alcuni approcci metabolici per migliorare le prestazioni miocardiche durante l'ipossia cardiaca.Sono stati considerati quattro possibili approcci metabolici per migliorare la funzione cardiaca in presenza di ipossia miocardica. 1. Sembra che ci siano prove crescenti che suggeriscono che gli acidi grassi liberi sono dannosi per il cuore ischemico 2. Sebbene sia stato dimostrato che gli intermedi del ciclo di Krebs possono provocare la formazione di energia anaerobica da parte dei mitocondri, e in determinate condizioni estreme possono portare per migliorare le prestazioni del cuore, il potenziale di un effetto fisiologicamente importante di questo approccio è probabilmente limitato. 3. La protezione del cuore ischemico o ipossico mediante alcalosi può essere un approccio fattibile. Il principale effetto benefico sembra essere esercitato attraverso una più efficiente conversione dell'energia già disponibile in prestazioni contrattili piuttosto che aumentando la fornitura di energia 4. Sembra esserci un reale potenziale per migliorare l'erogazione di energia cardiaca attraverso la via glicolitica. I calcoli basati su studi isolati su cuore di ratto indicano che, al 50% di ossigenazione, la generazione di ATP glicolitica potrebbe correggere totalmente il deficit nella formazione di ATP mitocondriale. Pertanto, è nell'area del superamento dell'inibizione della formazione di ATP glicolitico e dello sfruttamento di questa potenziale via metabolica che l'erogazione di energia può essere ripristinata verso la normalità nell'ipossico e forse nella zona limite di ipoperfusione nel cuore ischemico. Il problema dell'inibizione ischemica della glicolisi può essere parzialmente superato creando alcalosi extracellulare, ma questa presunzione dovrà essere verificata.
Attenuazione degli effetti euforizzanti e attivanti della d- e l-anfetamina mediante il trattamento con carbonato di litio.Sette dei nove pazienti depressi hanno avuto un aumento dell'euforia nominale e dell'attivazione dopo 30 mg di d-anfetamina in una dose replicata, studio in doppio cieco. La d-amfetamina è risultata da 2 a 2,3 volte più efficace nel produrre effetti di attivazione, euforia ed antidepressivi rispetto alla stessa dose di l-amfetamina. Il co-trattamento con carbonato di litio ha prodotto un'attenuazione del 60% (P inferiore a 0,001) delle risposte di attivazione ed euforia alla d-anfetamina. Le risposte alla l-anfetamina sono state quasi completamente abolite dal litio. Questo studio solleva la possibilità dell'uso del carbonato di litio come coadiuvante nel trattamento della dipendenza da anfetamine.
La transizione termica delle proteine solubili nel cervello.Le proteine solubili del cervello di ratto subiscono una denaturazione termica reversibile nell'intervallo 20 gradi C -65 gradi C. La transizione termica studiata in una soluzione di saccarosio 0,25 M, è associata a cambiamenti nella capacità di ionizzazione delle proteine mediante l'abbassamento del pH della soluzione isoionica da un valore di 6,95 a 20 gradi C a 6,55 a 65 gradi C. L'apparente variazione di entalpia delta H a la temperatura di transizione (t=50 gradi C) è di circa 34 Kcal, la capacità termica delta Cp di circa 1,75 Kcal e la variazione di entrofia apparente deltaS 100 eu I dati suggeriscono che la transizione termica è prevalentemente un processo a due stati. la soluzione proteica all'aumentata temperatura produce una parziale reversibilità delle transizioni termiche mediante un abbassamento dei cationi 5-HT che si fissano sulla molecola proteica.
Gli effetti antinicotinici di farmaci con proprietà sedative-ansiolitiche clinicamente utili.Ai topi è stato somministrato un farmaco per os e 2 ore dopo sono stati stimolati con una somministrazione endovenosa LD95 di nicotina. Amitriptilina, imipramina, doxepina, meprobamato, clordiazepossido, diazepam, trifluorooperazina, aloperidolo, tioridazina, clorpromazina, fenobarbital, propranololo e difenilidantoina erano tutti attivi nel proteggere i topi dalla convulsione estensiva, triadione, iprotropina e letensore. erano inattivi. Sembra esserci una relazione tra il blocco delle convulsioni estensori indotte dalla nicotina e la letalità nei topi e gli effetti sedativi-ansiolitici nell'uomo. Questa relazione è particolarmente buona per i farmaci denominati antidepressivi, ansiolitici e antipsicotici.
Confronto delle proprietà di blocco dei recettori beta-adrenergici di sotalolo, oxprenololo, propranololo e pindololo sulla muscolatura liscia intestinale di coniglio.Gli agonisti adrenergici hanno prodotto una diminuzione caratteristica e definita nell'ampiezza delle contrazioni spontanee e nel tono del digiuno di coniglio isolato. L'effetto della fenilefrina è stato abolito o dalla fenossibenzamina o dalla fentolamina. Il rilassamento indotto dall'adrenalina e dalla norepinefrina è stato inibito dopo il trattamento combinato con fentolamina e propranololo. La fentolamina da sola ha diminuito la risposta all'adrenalina e alla noradrenalina, ma la diminuzione per l'adrenalina è stata maggiore, indicando che l'adrenalina ha una maggiore affinità per i recettori alfa rispetto ai beta-recettori nel digiuno di coniglio. La stimolazione dei beta-recettori da parte dell'isoproterenolo è stata inibita da propranololo, oxprenololo, sotalolo e pindololo, ma il blocco era incompleto L'attività di questi quattro beta-bloccanti nel prevenire la risposta inibitoria e all'isoproterenolo era il seguente: inidololo maggiore o uguale a oxprenololo maggiore del propranololo maggiore del sotalolo. Ciò dimostra il fatto che non tutti gli agenti bloccanti beta-adrenergici possiedono uno spettro di attività farmacologico identico. Si può anche suggerire che i recettori beta del digiuno differiscono in specificità da quelli di altri organi.
Aumento dell'acquisizione di un compito appetitoso complesso dopo MSH e MIF.Dopo iniezioni giornaliere di ormone stimolante i melanociti (MSH), fattore di inibizione del rilascio di MSH ( MIF), o ratti albini diluenti hanno eseguito un labirinto Warden a scelta 12 per una ricompensa alimentare appetibile. I ratti che ricevevano gli ormoni avevano latenze più brevi e facevano meno errori dei controlli durante l'apprendimento ma, a differenza dei risultati con compiti semplici, non c'erano differenze durante l'estinzione. i risultati hanno dimostrato che sia MSH che MIF-I potrebbero facilitare l'acquisizione di un compito appetitoso che sembrava di complessità sufficiente per enfatizzare le differenze nelle prestazioni.
Effetto del propranololo sulle caratteristiche antinocicettive e di astinenza dalla morfina.Propranololo a una dose (10 mg/kg) che non ha alterato la latenza del colpo di coda di per sé, non ha alterato la ED50 della morfina quando somministrato 10 min prima del narcotico Il propranololo a dosi di 10 e 25 mg/kg somministrato 10 min prima del challenge con naloxone non ha alterato significativamente la frequenza del salto indotto dal naloxone 72 ore dopo la morfina impianto di pellet. La ED50 di naloxone in topi con pellet di morfina non è stata alterata dal trattamento con propranololo a 0, 24 e 48 ore dopo l'impianto di pellet. Il naloxone ha causato iperattività nei topi quando somministrato 72 ore dopo l'impianto di pellet di morfina. Un'iniezione di 25 mg/ kg di propranololo 10 minuti prima del naloxone non ha bloccato questa iperattività. Inoltre, la somministrazione di 10 mg/kg di propranololo ogni 8 ore ai ratti durante l'astinenza dalla morfina non è riuscita ad alleviare la sindrome da astinenza come evidenziato dai cambiamenti in entrambi i corpi. lotta o presa d'acqua. Questi dati suggeriscono che l'agente bloccante beta-adrenergico, il propranololo, non altera l'attività antinocicettiva né riduce la sindrome da astinenza della morfina nei roditori.
Secrezione di AMP ciclico e bicarbonato pancreatico in risposta alla secretina nei cani.In cani anestetizzati somministrati secretina per via endovenosa in dosi che raddoppiano ogni 60 min e che vanno da Da 0,5 a 8 unità per kg di peso corporeo all'ora, i livelli di AMP ciclico nel tessuto pancreatico sono aumentati continuamente, mentre le concentrazioni di DNA erano leggermente diminuite. concentrazioni e uscite di succo erano significativamente correlate. Nei cani con fistola pancreatica cosciente, c'era anche una correlazione significativa tra le concentrazioni di AMP ciclico e bicarbonato e le uscite nel succo pancreatico dopo stimolazione con secretina esogena. Di conseguenza, un maggiore rilascio di secretina endogena ottenuto da intraduodenale l'acidificazione ha portato ad un aumento dose-dipendente della produzione di bicarbonato e di AMP ciclico sia nei cani coscienti che in quelli anestetizzati. gli inibitori (aminofillina, caffeina e papaverina) somministrati da soli ai cani coscienti non hanno avviato la secrezione pancreatica di bicarbonato, ma hanno potenziato le risposte del bicarbonato alla secretina esogena. Questi dati suggeriscono che l'AMP ciclico ha un ruolo nella secrezione pancreatica stimolata dalla secretina.
Le attività della guanilato ciclasi e della fosfodiesterasi ciclica-GMP nelle ghiandole mammarie dei topi durante la gravidanza e l'allattamento.Le attività della guanilato ciclasi e della fosfodiesterasi ciclica-GMP sono state misurate in omogenati delle ghiandole mammarie di topi vergini, gravide e in allattamento. L'attività della guanilato ciclasi è aumentata del 35% nei tessuti mammari durante la gravidanza e un ulteriore aumento del 40% è stato osservato durante l'allattamento. Anche l'attività della fosfodiesterasi ciclica-GMP è aumentata durante la gravidanza ma le attività non erano diverse nelle ghiandole di topi in allattamento vs ghiandole di topi in gravidanza. Questi risultati sono discussi in merito a un possibile ruolo del GMP ciclico nella regolazione dei processi di allattamento.
Un metodo rapido per misurare l'attività della guanilato ciclasi nel tessuto mammario.Un metodo semplice e rapido per misurare l'attività della guanilato ciclasi nelle preparazioni cellulari rotte di tessuti biologici Questo metodo impiega la velocità di conversione di [32P]GTP in [32P]ciclico-GMP. Il prodotto di questa reazione viene isolato mediante cromatografia a scambio ionico e mediante precipitazione di ZnSO4-Ba(OH)2 a pH 5,7. Utilizzando questo metodo, è possibile analizzare circa 30-50 campioni per l'attività della guanilato ciclasi durante un periodo di 5-6 ore. Le caratteristiche di questo enzima nella ghiandola mammaria sono risultate simili a quelle descritte per altri tessuti utilizzando metodi diversi per misurare il guanilato attività ciclasi.
L'effetto del desametasone sull'acidificazione urinaria.Sebbene sia ben noto che i mineralcorticoidi migliorano l'escrezione acida renale, l'effetto dei glucocorticoidi sull'acidificazione renale non è chiaro La somministrazione orale di desametasone a sei volontari sani per 1 settimana alla dose giornaliera di 4,5 mg è stata associata ad alcalosi respiratoria lieve e ad un aumento piccolo ma statisticamente significativo del pH basale delle urine. Tuttavia, né la capacità di abbassare il pH delle urine né di espellere il titolabile acido e ammonio dopo l'alterazione del carico acido di NH4Cl La somministrazione di una singola dose endovenosa di desametasone sodio fosfato (7,5 mg) è stata associata a un aumento significativo del pH urinario e dell'escrezione di potassio e a una diminuzione dell'escrezione titolabile di acido, ammonio e fosforo in assenza dei cambiamenti nello stato acido-base del sangue, nella clearance della creatinina o nel flusso urinario.
Effetto del pH ambientale sul virus associato all'adenovirus.L'influenza del pH ambientale sull'AAV è stata studiata nelle titolazioni dei virus infettivi, nell'induzione della produzione di antigeni CF di virus infettivo, induzione di antigene colorabile con immunofluorescenza e aggregazione delle particelle virali. Il pH del terreno è risultato influenzare il titolo delle scorte di virus in quanto meno virus è stato registrato a pH acido, dando differenze fino a 105 TCID50 nelle cellule HEK e HEp-2. Nelle cellule KB è stato prodotto meno virus infettivo e quantità ridotte di antigene CF sono apparse a pH acido\'. Tuttavia, livelli aumentati di antigene FA intracellulare rilevabile sono apparsi a pH acido\'. Esame al microscopio elettronico di Le particelle di AAV colorate negativamente a vari pH hanno mostrato aggregati di particelle sempre più grandi man mano che il pH veniva abbassato. Nelle condizioni acide studiate, l'helper dell'adenovirus e le attività cellulari erano solo leggermente soppresse, con il nuovo effetto dovuto all'aggregazione delle particelle virali.
Deiodinazione della tiroxina associata a perossidazione lipidica NADPH-dipendente in un sistema submicrosomiale.Una lipoproteina presente nei microsomi trattati con tripsina può essere ossidata con formazione di malondialdeide in un sistema che contiene NADPH, complesso ione ferrico-ADP, NADPH-citocromo c reduttasi e un fattore Questo fattore, una miscela di peptidi, può essere isolato dai microsomi epatici mediante digestione con tripsina e successiva gel filtrazione tramite Sephadex G-100 e G -25 colonne. La perossidazione lipidica in questo sistema catalizza la deiodinazione della tiroxina, così come la perossidazione lipidica NADPH-dipendente nei microsomi epatici freschi. La tiroxina inibisce la perossidazione lipidica poiché è deiodata in questo sistema.
Una lipoproteina presente nei microsomi trattati con tripsina può essere ossidata con formazione di malondialdeide in un sistema che contiene NADPH, complesso ione ferrico-ADP, NADPH-citocromo c reduttasi e un fattore Questo fattore, una miscela di peptidi, può essere isolato dai microsomi epatici mediante digestione con tripsina e successiva gel filtrazione tramite Sephadex G-100 e G -25 colonne. La perossidazione lipidica in questo sistema catalizza la deiodinazione della tiroxina, così come la perossidazione lipidica NADPH-dipendente nei microsomi epatici freschi. La tiroxina inibisce la perossidazione lipidica poiché è deiodata in questo sistema.
Metabolismo nucleotidico ciclico nell'ipertrofia renale compensatoria e nella crescita renale neonatale.Il metabolismo nucleotidico ciclico è stato studiato nei reni in crescita dei ratti durante l'ipertrofia compensatoria e durante lo sviluppo neonatale Dopo nefrectomia unilaterale è stata osservata una diminuzione lieve e di breve durata dell'adenosina monofosfato ciclico 3\':5" (cAMP) nel rene ipertrofico. Al contrario, il 3\':5\' guanosina monofosfato ciclico (cGMP) ha mostrato un netto calo al 20% del controllo a 15 minuti e un rapido aumento al 200-300% sopra la linea di base a 1-72 ore. Le alterazioni nei livelli tissutali renali di cGMP sono state associate a cambiamenti paralleli nell'attività guanilato ciclasi del surnatante solubile, 100.000 X g [GTP pirofosfato-liasi (ciclizzazione): EC 4.6.1.2. Non è stata osservata alcuna variazione nella fosfodiesterasi totale di cGMP (3\':5\'-nucleotide ciclico 5\'-nucleotidoidrolasi; EC 3.1.4.17). Nel rene in rapida crescita dei ratti neonati i livelli di cAMP erano 983 +/- 65 e 833 +/- 42 pmol/g di rene a 4 e 7 giorni dopo la nascita e aumentati ai livelli dell'adulto (1518 +/- 57 pmol/g) a 21 giorni, mentre i livelli di cGMP erano 59,8 +/- 6,8 e 92,5 +/- 13,9 pmol/ga 4 e 7 giorni e sono scesi ai livelli degli adulti (36 +/- 1,5) a 21 giorni. I risultati indicano che l'ipertrofia renale compensatoria e la crescita renale neonatale sono associate a cambiamenti nel metabolismo di cAMP e cGMP.
Meccanismo molecolare di inibizione della luminescenza della lucciola da parte di anestetici locali.Viene presentata la cinetica dell'azione degli anestetici locali sui sistemi luciferina e luciferasi di lucciola. Clinica concentrazioni di anestetici locali hanno inibito questa luminescenza indotta da ATP in modo dose-dipendente Dagli effetti della temperatura e del pH sull'azione inibitoria degli anestetici locali, si conclude che l'interazione idrofoba ligando-enzima è la causa predominante dell'inibizione, ma anche l'interazione idrofila contribuisce all'inibizione in misura minore. Viene delineata una teoria molecolare dell'anestesia che postula che il rilascio di molecole d'acqua elettroristrette dalle parti idrofile dell'enzima a causa dei cambiamenti conformazionali proteici indotti dagli anestetici sia la causa della diminuzione luminescenza Un meccanismo simile dovrebbe verificarsi in corrispondenza della membrana cellulare, che probabilmente disidrata il canale del sodio e sopprime t ha conduttanza di questo ione attraverso la membrana. Questi eventi portano ad un'espansione del volume del sistema totale e il sistema diventa reattivo a una pressione che inverte l'anestesia spostando l'equilibrio al volume originale non anestetizzato. L'antagonismo pressorio dell'anestesia può essere spiegato da questa espansione complessiva del volume e non da un semplice rigonfiamento della membrana cellulare.
Studi meccanicistici della glutammina sintetasi da Escherichia coli: evidenza cinetica di due intermedi di reazione nella reazione biosintetica.Tecniche di reazione rapida sono state utilizzate per studiare la cinetica di variazioni di intensità della fluorescenza proteica associate alle reazioni della glutammina sintetasi di Escherichia coli non denilata [L-glutammato: ammonia ligasi (formante ADP), EC 6.3.1.2] con i suoi substrati. È stato stabilito che la sintesi della glutammina avviene per gradi Durante il processo catalitico sono stati osservati due intermedi fluorimetricamente distinti. Sono state valutate sia le costanti di velocità diretta che quelle inverse che portano alla formazione e al consumo di questi intermedi. La costante di velocità catalitica, kc, che è stata calcolata da queste costanti di velocità concorda bene con il valori di kc che sono stati determinati mediante misurazione diretta delle attività biosintetiche complessive mediante tecnica a flusso interrotto o test allo stato stazionario metodo.
Proprietà di una tossina dell'anemone di mare Stoichacis helianthus, incluso il legame specifico alla sfingomielina.Tossina di Stoichactis helianthus, una proteina derivata presumibilmente dalle nematocisti, è stato purificato fino all'omogeneità. Ha un peso molecolare di circa 16.000, un pH isoelettrico di 9,8 e contiene circa il 3,7% di carboidrati. È potentemente emolitico per gli eritrociti derivati da una varietà di specie animali, quelle del gatto sono le più sensibili e quelli della cavia i più resistenti. La tossina è litica anche per le piastrine del sangue di coniglio, e distrugge i fibroblasti in coltura ma è inattiva per diversi tipi di protoplasti e sferoplasti batterici. L'attività emolitica è inibita specificamente dalla sfingomielina, e viene proposta che questo fosfolipide è il costituente della membrana che funge da recettore per la tossina. Le prove a sostegno includono i risultati che gli enzimi noti per distruggere la sfingomielina (a) prevedono nt membrane eritrocitarie dall'inibizione dell'emolisi e (b) rendono gli eritrociti resistenti alla lisi da parte della tossina. Il meccanismo alla base dell'emolisi può comportare la traslocazione della sfingomielina di membrana in virtù di un'affinità specifica della proteina celenterato per questo fosfolipide.
Maturazione di cellule di neuroblastoma in presenza di dimetilsolfossido.Aggiunta di dimetilsolfossido a concentrazioni dell'1% e del 2% (vol/vol) a cellule di Il clone di neuroblastoma di topo NIE-115 nella fase confluente di crescita ha portato alla produzione di colture morfologicamente differenziate con un'ampia formazione di processo. La cellula mantenuta in dimetilsolfossido al 2% è rimasta in una condizione stabile non dividente per periodi fino a 4 settimane. Un alto grado di l'eccitabilità è stata trovata in queste cellule, ma non c'era una chiara correlazione di questa proprietà con il livello di induzione dell'acetilcolinesterasi (acetilcolina idrolasi; EC 3.1.1.7) o della tirosina idrossilasi [L-tirosina, tetraidropteridina: ossigeno ossidoriduttasi (3-idrossilante) CE 1.14.16.2]. Inoltre, i livelli intracellulari di 3\':5\'-AMP ciclico non erano elevati nelle cellule completamente differenziate morfologicamente ed elettricamente, mentre la divisione cellulare era marcatamente inibita del 2% o concentrazioni più elevate di dimetilsolfossido, all'1% la crescita è continuata ad una velocità alquanto rallentata e tali colture hanno mostrato una maggiore formazione di processo e attività elettrica per un periodo relativamente breve. Alte concentrazioni (3% o 4%) di dimetilsolfossido hanno totalmente soppresso la formazione del processo e non hanno determinato un aumento dell'eccitabilità, ma le cellule hanno mantenuto alti potenziali di riposo. I risultati suggeriscono che lo sviluppo della membrana eccitabile nelle cellule di neuroblastoma può essere espresso indipendentemente dall'induzione di enzimi neurospecifici e non richiede un aumento prolungato dei livelli ciclici di 3\':5\'-AMP.
Glutatione e gli enzimi del ciclo gamma-glutamil nelle cellule della cripta e della punta dei villi della mucosa digiunale di ratto.Le cellule della punta dei villi e le cellule della cripta della mucosa digiunale di ratto erano separati dalla procedura di pianificazione di Imondi et al. e sono stati studiati rispetto alle loro attività degli enzimi del ciclo gamma-glutamil e contenuto di glutatione. Le cellule della punta dei villi mostrano attività gamma-glutamil transpeptidasi molto più elevate rispetto alle cellule della cripta: quindi , la gamma-glutamil trnaspeptidasi sembra essere un enzima specifico dei villi. La gamma-glutamil ciclotransferasi e gli enzimi necessari per la sintesi del glutatione non sono specificamente localizzati nelle cellule della cripta o della punta dei villi, ma sono presenti in entrambi. Le cellule della cripta hanno un'alta concentrazione di glutatione (4-5 mM) paragonabili ai livelli riscontrati nel fegato e nei reni; al contrario, le cellule della punta dei villi hanno concentrazioni molto più basse. A digiuno, la concentrazione di glutatione è diminuita notevolmente sia nella punta dei villi che nella crip cellule t; l'alimentazione di proteine, ma non di saccarosio, ha portato ad un aumento delle concentrazioni di glutatione. La migrazione delle cellule dalla regione delle cellule della cripta indifferenziata alla punta dei villi è associata a cambiamenti strutturali e biochimici che equipaggiano la cellula per le sue attività funzionali mature, che includono il trasporto. I risultati attuali indicano che tale differenziazione e migrazione cellulare è associata a un marcato aumento dell'attività della gamma-glutamil transpeptidasi e dell'utilizzo del glutatione.
Evidenza che l'attività dell'acil coenzima A sintetasi è necessaria per la repressione dell'acetil coenzima A carbossilasi da parte degli acidi grassi esogeni.Il contenuto cellulare di acetil-CoA carbossilasi [acetil-CoA:anidride carbonica ligasi (formante ADP), EC 6.4.1.2] in Saccharomyces cerevisiae viene ridotta mediante l'aggiunta di acidi grassi a catena lunga al terreno di coltura. I ceppi mutanti di S. cerevisiae difettosi nell'acil- La CoA sintetasi [acido:CoA ligasi (formante AMP), EC 6.2.1.3] è stata isolata e utilizzata per determinare se l'acido grasso stesso o un metabolita dell'acido grasso è più direttamente responsabile della repressione dell'acetil-CoA carbossilasi. i ceppi mutanti erano in grado di incorporare acidi grassi in una misura paragonabile a quella osservata con il ceppo selvatico, ma hanno accumulato notevolmente più acido grasso incorporato nella forma non esterificata rispetto alle cellule di tipo selvatico. attività carbossilasi nei mutanti, al contrario t o che nel ceppo selvatico, è stato difficilmente influenzato dall'aggiunta di acidi grassi al terreno. Questi risultati indicano che l'attivazione dell'acido grasso esogeno è necessaria per la repressione dell'acetil-CoA carbossilasi, supportando l'idea che l'effetto repressivo sia mediato da un composto metabolicamente derivato dall'acido grasso.
Attivazione indotta dal rame della lisil ossidasi aortica in vivo.L'allevamento di pulcini di un giorno con diete prive di rame ha gravemente depresso l'attività della lisil ossidasi, un rame metalloenzima nel tessuto connettivo La somministrazione di CuSO4 attraverso la dieta o attraverso iniezioni intraperitoneali ha ripristinato l'attività della lisil ossidasi nel tessuto aortico Due ore dopo che i pulcini hanno ricevuto CuSO4 (1 mg/kg) l'attività della lisil ossidasi è aumentata rapidamente per raggiungere, entro 4-6 ore, un nuovo livello allo stato stazionario che era da cinque a 20 volte superiore all'attività basale (soluzione salina iniettata). Venti ore dopo la somministrazione di rame, l'attività era ancora più elevata, in alcuni esperimenti doppia rispetto a quella ottenuta a 6 ore. basse quantità di cicloesimide iniettate per via intraperitoneale 45 minuti prima e 3 ore dopo il rame hanno soppresso di due terzi la risposta di attivazione. La cicloesimide somministrata 2 o 4 ore dopo il rame è risultata efficace solo la metà. L'actinomicina D ha causato solo un'inibizione del 10-15% del c attivazione indotta dall'operatore. I dati suggeriscono che il rame è un regolatore chiave dell'attività della lisil ossidasi nell'aorta e può infatti essere un importante determinante dei livelli di enzima in quel tessuto allo stato stazionario.
Modifiche della glucosio-6-fosfato deidrogenasi purificata e di altri enzimi da un fattore di basso peso molecolare abbondante in alcune cellule leucemiche.Glucosio piastrinico altamente purificato La -6-fosfato deidrogenasi (G6PD; D-glucosio-6-fosfato:NADP+ 1-ossidoreduttasi, EC 1.1.1.49) può essere modificata nel suo punto isoelettrico e nella sua attività molecolare specifica mediante estratti di alcuni granulociti leucemici. fattori" sono molecole relativamente piccole (peso molecolare leggermente inferiore a 5000), termostabili, dializzabili e ultrafiltrabili. Queste molecole vengono distrutte da varie endo- ed esopeptidasi e da enzimi serina presenti negli estratti grezzi di leucociti e nelle preparazioni commerciali di ribonucleasi. Le alterazioni di piastrine G6PD a causa dei "fattori modificanti G6PD" sono stabili e non reversibili mediante dialisi o ulteriore cromatografia. Gli estratti leucemici che sono in grado di modificare G6PD possono anche modificare la mobilità elettroforetica e (o) la attività enzimatica della piruvato chinasi leucocitaria purificata, della 6-fosfogluconato deidrogenasi e della glucosiofosfato isomerasi. Viene discussa la natura chimica di tali modificazioni e le loro relazioni con le modificazioni post-traduzionali che si verificano nelle cellule leucemiche o normali.
Rotture del DNA a filamento singolo durante la riparazione del danno UV nei fibroblasti umani e anomalie della riparazione nello xeroderma pigmentoso.È stato applicato il metodo di eluizione alcalina del DNA a uno studio sulla formazione e la risigillatura delle rotture del DNA a filamento singolo dopo l'irradiazione di fibroblasti umani con luce ultravioletta (UV). Le caratteristiche generali dei risultati erano coerenti con gli attuali concetti di riparazione per escissione del DNA, in quanto le rotture apparivano rapidamente dopo l'UV, e risigillato lentamente nei fibroblasti normali, mentre le rotture non sono apparse in quelle cellule di pazienti con xeroderma pigmentoso (XP) che sono noti per avere difetti nella sintesi di riparazione del DNA. La comparsa di rotture ha richiesto una breve incubazione post-UV, coerente con il previsto azione di un'endonucleasi. Le cellule della forma variante di XP caratterizzate da una normale sintesi di riparazione del DNA hanno mostrato una normale produzione di rotture dopo UV, ma erano più lente delle cellule normali nel risigillare queste rotture. Questa differenza era potenziato dalla caffeina. Viene proposto un modello per mettere in relazione questa scoperta con un difetto precedentemente descritto nella riparazione post-replicativa in queste cellule varianti XP. La reticolazione del DNA sembra causare una sottostima nella misurazione della rottura del DNA dopo i raggi UV.
Isolamento e caratterizzazione di un mutante che richiede acidi grassi insaturi di cellule di mammifero coltivate.Un mutante che richiede acidi grassi insaturi derivato dall'ovaio di criceto cinese ( CHO) cellule è stato isolato e caratterizzato. Questo mutante cresce normalmente quando oleato o altri acidi grassi insaturi sono integrati nel mezzo di crescita. A differenza delle cellule CHO wild-type, la crescita si ferma quando il mezzo è privato di acido grasso insaturo. Esperimenti di impulso cellulare intero con [14C]acetato o [14C]stearato indicano che il mutante è difettoso nella sintesi degli acidi grassi insaturi. I saggi enzimatici in vitro mostrano che il difetto enzimatico del mutante è localizzato nella desaturasi microsomiale stearoil-CoA.
beta-Bungarotoxin, una tossina presinaptica con attività enzimatica.beta-Bungarotoxin, una neurotossina presinaptica isolata dal veleno del serpente Bungarus multicinctus, ha dimostrato di modificare il rilascio di neurotrasmettitore alla giunzione neuromuscolare. In questa comunicazione, dimostriamo che la beta-bungarotossina è una potente fosfolipasi A2 (fosfatid 2-acil idrolasi, EC 3.1.1.4), paragonabile in attività con fosfolipasi purificata enzimi da Naja naja e Vipera russellii. L'attività fosfolipasi della beta-bungarotossina richiede calcio ed è stimolata dal desossicolato. Quando lo stronzio sostituisce il calcio, non viene rilevata alcuna attività fosfolipasi. Poiché la trasmissione neuromuscolare non viene bloccata quando il calcio viene sostituito dallo stronzio, è stato possibile per esaminare gli effetti della tossina sulla trasmissione neuromuscolare in presenza di stronzio. In queste condizioni, quando l'attività della fosfolipasi deve essere inibita, la tossina ha poca o nessuna effe ct sulla trasmissione neuromuscolare. Se la beta-bungarotossina deve in parte la sua tossicità alla sua attività enzimatica, allora deve essere collocata in una classe diversa da quelle tossine che producono il loro effetto legandosi passivamente a un recettore appropriato.
Inversione del deficit di UDP-galattosio 4-epimerasi dei leucociti umani in coltura.Stimolazione con fitoemoagglutinina dei leucociti da sei dei sette individui noti con Il deficit di UDP-galattosio 4-epimerasi (= UDP-glucosio 4-epimerasi; EC 5.1.3.2) ha portato costantemente alla comparsa dell'attività dell'epimerasi nelle cellule coltivate. Una coltura di linfoblasti a lungo termine derivata da un probando conteneva anche un'epimerasi attiva Un confronto delle proprietà di questo enzima con quelle dell'epimerasi prodotta dalle linee di linfoblasti di controllo ha rivelato valori di Km comparabili per UDP-galattosio e NAD e un comportamento identico sull'elettroforesi di poliacrilammide. Tuttavia, una differenza nel requisito di NAD per la stabilità al calore a 40 gradi ha fornito alcune prove per un difetto strutturale in questo enzima. Le possibili spiegazioni per la comparsa dell'attività dell'UDP-galattosio 4-epimerasi nei linfociti stimolati includono un aumento della velocità di sintesi di un mutan t e una derepressione di un locus dell'epimerasi durante la trasformazione dei linfociti.
Studi di risonanza magnetica nucleare 31P ad alta risoluzione di cellule di lievito intatte.Gli spettri di risonanza magnetica nucleare (NMR) 31P ad alta risoluzione a 145,7 MHZ sono presentati per intatti cellule di lievito. Diversi picchi vengono risolti e assegnati. Includono i picchi medi di fosfato da polifosfati a catena lunga o ciclici. I nostri risultati sono coerenti con il suggerimento che questi polifosfati agiscono come un deposito di fosfato nella cellula. Siamo stati anche in grado di misurare il citoplasma pH utilizzando il picco di ortofosfato all'interno della cellula, rispetto all'esterno della cellula. I risultati mostrano che le cellule di lievito mantengono il loro pH citoplasmatico intorno a 6,3. Questo valore è notevolmente superiore al pH acido extracellulare al quale vivono normalmente. Questi risultati preliminari indicano che 31P NMR a 145,7 MHZ può essere un metodo rapido, informativo e non invasivo per sondare eventi biochimici all'interno delle cellule viventi.
Regolazione delle fosforilazioni fotosintetiche catalizzate da ferredossina.In condizioni aerobiche che potrebbero prevalere nei cloroplasti in vivo, la concentrazione ottimale di ferredossina per la fotofosforilazione ciclica è risultata uguale a quella richiesta per la riduzione di NADP e circa un decimo di quella necessaria per la fotofosforilazione ciclica in condizioni anaerobiche. In presenza di ferredossina e NADP, la fotofosforilazione ciclica ha operato in concomitanza con la fotofosforilazione non ciclica, producendo un rapporto ATP:NADPH di circa 1.5. L'operazione efficace della fotofosforilazione ciclica catalizzata da ferredossina di per sé ha richiesto una riduzione del flusso di elettroni dall'acqua che è stata ottenuta sperimentalmente mediante l'uso di un inibitore o di luce monocromatica lontano rosso. Una scoperta inaspettata è stata che l'operazione di fotofosforilazione ciclica di per sé è stato anche regolato da una reazione di NADPH e ferredossina con due componenti di clo membrane roplast, componente C550 e citocromo b559. Viene discusso il significato di questi risultati per la fotosintesi in vivo.
Proprietà neuronali delle cellule gangliari simpatiche di neuroblastoma X ibrido.Cellule clonali di neuroblastoma di topo senza tirosina 3-monoossigenasi [EC 1.14.16.2; tirosina idrossilasi; L -tirosina, tetraidropteridina:ossigeno ossidoreduttasi (3-idrossilante)] sono state fuse con cellule normali provenienti da gangli simpatici di topo embrionale. Una delle 37 linee cellulari ibride ottenute possiede un'elevata attività tirosina 3-monoossigenasi e sintetizza la dopamina. Queste cellule hanno anche membrane eccitabili e generare potenziali d'azione in risposta a stimoli elettrici. Quindi le cellule ibride, generate dalla fusione di cellule di neuroblastoma con cellule normali del sistema nervoso, possono acquisire proprietà neurali non riscontrate con le cellule di neuroblastoma dei genitori.
Regolazione della sintesi della glutammina sintetasi da parte della glutammina sintetasi adenilata.Abbiamo esaminato tre mutanti di Klebsiella aerogenes le cui lesioni genetiche (glnB, glnD e glnE ) sono in loci non collegati al gene strutturale per la glutammina sitetasi (glnA) e in cui è alterato il controllo sia del livello che dello stato di adenililazione della glutammina sintetasi. Ogni mutazione altera un diverso componente del sistema di adenililazione della glutammina sintetasi [L- glutammato:ammoniaca ligasi (ADP-forming), EC 6.3.1.2) L'incapacità della cellula di deadenilatare la glutammina sintetasi (glnB e glnD) diminuisce notevolmente la sua produzione, mentre l'incapacità di adenililare la glutammina sitetasi (glnE) determina la sua produzione costitutivamente elevata. Questi risultati, insieme ai nostri risultati precedenti, indicano che la glutammina sintetasi adenilata inibisce la trascrizione di glnA.
[Condizioni per la scissione della protodioscina, il principale glicoside del Tribulus terrestris L. mediante la preparazione enzimatica dell'Aspergillus niger BKMt-33].Le condizioni per la scissione della protodioscina--il principale steroide saponina isolato da Tribulus terrestris L. dalla preparazione enzimatica di Aspergillus niger Str. BKMt-33. Le condizioni ottimali sono risultate essere le seguenti: pH 4-5, temperatura 30-37 gradi (concentrazione del substrato --5 mg%, concentrazione del preparato enzimatico --1%). In queste condizioni l'enzimolisi è continuata per 24 ore. Gli ioni Mg+2 e K+ hanno accelerato la reazione due volte. Come risultato dell'idrolisi enzimatica dioscina e trillina sono stati ottenuti. Ciò indica attività beta-glucosidasi e alfa-ramnosidasi del complesso enzimatico isolato da Aspergillus niger str. BKMt-33.
[Stabilità termica e del pH della proteinasi solubile e immobilizzata con silicromo-80 da Bacillus subtilis].La stabilità al riscaldamento e al cambiamento del pH di due è stata studiata la proteinasi del Bacillus subtilis. I preparati erano: protosubtilina G10x con un'attività di 21500 unità/g e proteinasi immobilizzata su silocromo C-80 con un'attività di 3880 unità/g. Per la protosubtilina G10x il pH ottimale era 7,0-7,2. l'attività del preparato immobilizzato 96-100% è stata trovata a pH 5,5-10,0. La differenza tra le due preparazioni di proteinasi era più netta rispetto alla temperatura minima. La preparazione iniziale-protosubtilina G10x era più stabile a bassa temperatura e mostrava attività massima a 40 gradi; il preparato immobilizzato era meno attivo alle basse temperature e mostrava massima attività a 60-70 gradi. La protosubtilina G10x era più sensibile alle variazioni di pH, soprattutto nella zona acida (pH 4,5). Si attivava significativamente a 30-40 gradied era instabile a 50-60 gradi. La preparazione immobilizzata è stata attivata a 50-60 gradi ed era insensibile alle variazioni di pH nell'intervallo da 4,5 a 9,2 e alle variazioni di temperatura da 10 gradi a 40 gradi per 1,5-2,0 ore.
[Analisi delle proteinasi acide da Aspergillus terricola].L'azione specifica e la composizione dei gruppi funzionali dei centri attivi di tre frazioni di proteinasi acide da Aspergillus terricola sono stati studiati Per quanto riguarda i tassi di idrolisi di acetil-L-fenilalanil-L-tirosina e carbobenzossi-D, L-glicil-fenilalanina dalle tre frazioni si suggerisce che l'interazione delle proteinasi acide con il substrato coinvolge idrofobico È stato dimostrato che le suddette frazioni non sono enzimi metallici. Per mezzo dell'inibitore diazocarbonilico è stata riscontrata la presenza di un gruppo carbossilico cataliticamente attivo nel centro attivo delle proteinasi. L'inibizione della proteinasi da parte di Fe3+ in presenza di acido citrico è una prova indiretta dell'esistenza di diversi gruppi carbossilici e, possibilmente, di un gruppo idrossi nel centro attivo delle proteinasi acide da Aspergillus terricola.
[Preparazione di enzimi proteolitici dall'actinomicete termofilo Actinomyces thermovulgaris str. T-54].Una preparazione ad elevata attività proteolitica è stata ottenuta da precipitazione di acetone dal liquido di coltura filtrato dell'actinomycete termofilo Actinomyces thermovulgaris Str. T-54 L'attività proteolitica (caseinolitica), fibrinolitica e trombolitica del preparato è paragonabile a quella della tripsina e di gran lunga superiore a quella della fibrinolisina Il preparato è stabile a pH 5,0=9,5 e inattivato nella zona acida. Lo studio dell'attività proteolitica dipendente dal pH ha mostrato proteasi acide, neutre e alcaline nella preparazione. È relativamente termostabile ed è completamente inattivato per 10 minuti a 90 gradi. È si suggerisce che la preparazione contenga quattro enzimi o quattro gruppi enzimatici che differiscono nella loro sensibilità alla temperatura.
[Rhizopus microsporus ceppo UzLT-I--un produttore termotollerante di lipasi].Le proprietà del fungo termotollerante Rhizopus microsporus ceppo UzLT-1- - vengono descritti i produttori di enzimi lipolitici Condizioni ottimali di coltivazione --40 gradi, C, pH 4,5 - Vengono determinate l'attività lipolitica della coltura sul terreno costituito da estratto di mais (2%), olio di semi di cotone (1% ) e l'acqua è 850 ml 0,1 n KOH per 100 ml di liquido di coltura. I preparati enzimatici di lipasi sono stati precipitati da isopropanolo e solfato di ammonio. Il preparato precipitato da isopropanolo mostra la sua massima attività a pH 4,2 e 7,8 e ad una temperatura di 40-- 50 gradi C.
[Effetto di diversi valori di pH sull'attività e sulla struttura quaternaria dell'asparaginasi negli estratti di Escherichia coli].L'effetto di bassi valori di pH sull'attività e la stabilità della struttura quaternaria dell'asparaginasi da Escherichia coli è stata studiata nelle prime fasi di purificazione dell'enzima. L'acidificazione dell'estratto di E. coli era più efficace prima della separazione della biomassa. Questa procedura ha aiutato a separare la biomassa insieme alle proteine di zavorra coagulate e non per ridurre l'attività. Dopo la conservazione della soluzione acidificata a 5 gradi C, si è verificata la dissociazione reversibile della struttura tetrametrica in dimeri e monomeri. È stata studiata la stabilità della L-asparaginasi nello stoccaggio di polveri di acetone e durante l'estrazione. Si suggerisce che l'asparaginasi in è improbabile che le cellule batteriche abbiano la struttura quaternaria che normalmente si trova nella soluzione a pH neutro.
[Proprietà della tripsina e alfa-chimotripsina immobilizzate e loro uso per la purificazione degli inibitori della proteinasi dalle patate].Sono state ottenute tripsina e alfa-chimotripsina immobilizzate come risultato dell'adesione enzimatica al cefarosio attivato dal bromocianogeno. L'attività proteolitica (substrato--caseina) della tripsina e dell'alfa-chimotripsina immobilizzate era rispettivamente del 18,7 e del 9% e la loro attività esterasi con l'estere metilico benzoil-L-arginina (tripsina ) e l'estere etilico acetil-L-tirosina (alfa-chimotripsina) era il 75 e il 20% di quello degli enzimi solubili. Gli enzimi immobilizzati sono stati usati per purificare gli inibitori della proteinasi dalle patate mediante cromatografia affine. L'attività specifica degli inibitori della tripsina e della chimotripsina è stata aumentata di 10 e 6 volte, rispettivamente. Mediante focalizzazione isoelettrica è stato dimostrato che la preparazione purificata di inibitori della chimotripsina consisteva di due proteine acide e una proteina alcalina, quest'ultima essendo in predominanza. Lo ione degli inibitori della tripsina conteneva quantità uguali di proteine con punto isoelettrico a pH 7,1 e 8,9 e una bassa quantità del componente con punto isoelettrico a pH 5,7.