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[Lo studio della reazione a microonde di acido stearico e pentilamina].In questo studio, la reazione a microonde di acido stearico e pentilamina è stata indagato mediante spettroscopia FTIR. I risultati hanno indicato che dopo aver miscelato i due reagenti insieme, è stato creato il pentil ammonio stearato e ha formato una struttura acido-sale con l'acido stearico rimasto. I risultati hanno anche dimostrato che sotto radiazione a microonde, il pentil ammonio stearato potrebbe non essere solo decomposto, ma anche disidratato per formare pentil ammide stearica. Ha suggerito che la radiazione a microonde fosse una tecnica ideale per rendere questa reazione chimica molto più veloce e molto più completa.
Claudin 14 topi knockout, un modello per la sordità autosomica recessiva DFNB29, sono sordi a causa della degenerazione delle cellule ciliate cocleari.Le giunzioni strette (TJ) creano ioni -barriere selettive di permeabilità paracellulare tra compartimenti extracellulari Nell'organo del Corti dell'orecchio interno, le TJ della lamina reticolare separano l'endolinfa ricca di K(+) e la perilinfa ricca di Na(+) Nell'uomo, mutazioni del gene che codifica per la claudina La proteina 14 TJ causa sordità profonda ma la patogenesi sottostante è sconosciuta. Per esplorare il ruolo della claudina 14 nell'orecchio interno e in altri tessuti abbiamo creato un modello murino mediante una delezione mirata di Cldn14. Nell'allele mirato una cassetta lacZ è espressa sotto il promotore Cldn14. Nei topi eterozigoti Cldn14-lacZ l'attività della beta-galattosidasi è stata rilevata nelle cellule ciliate interne ed esterne cocleari e nelle cellule di supporto, nei dotti collettori del rene e intorno ai lobuli del fegato. I topi Cldn14-null hanno un normale endococleare potenziali ma sono sordi a causa della rapida degenerazione delle cellule ciliate esterne cocleari, seguita da una degenerazione più lenta delle cellule ciliate interne, durante le prime 3 settimane di vita. Monostrati di cellule MDCK che esprimono claudina 14 mostrano un aumento di 6 volte della resistenza elettrica transepiteliale diminuendo la permeabilità paracellulare per i cationi. Nei topi wild type, la claudina 14 è stata immunolocalizzata nelle cellule ciliate e nelle cellule TJ di supporto. I nostri dati suggeriscono che il complesso TJ all'apice della lamina reticolare richiede la claudina 14 come barriera catione restrittiva per mantenere la corretta composizione ionica del fluido che circonda la superficie basolaterale delle cellule ciliate esterne.
Samaderin B e C da Samadera indica.Samaderin B, o (1R,2S,5R,5aR,7aS,11S,11aS,11bR, 14S)-1,7,7a,11,11a,11b-esaidro-1,11-diidrossi-8,11a,14-trimetil-2H-5a,2,5-(metanossimeteno)naft[1,2-d] oxepina-4,6,10(5H)-trione, C(19)H(22)O(7) e samaderina C, o (1R,2S,5R,5aR,7aS,10S,11S,11aS,11bR, 14S)-7,7a,10,11,11a,11b-esaidro-1,10,11-triidrossi-8,11a,14-trimetil-2H-5a,2,5-(metanossimeteno)naft[1,2- d]oxepina-4,6(1H,5H)-dione, C(19)H(24)O(7), sono stati isolati dai semi di Samadera indica e hanno mostrato attività antifeedant contro Spodoptera litura di terzo stadio larve. La sostituzione del gruppo carbonilico in samaderin B con un gruppo idrossi in samaderin C provoca cambiamenti conformazionali nel sito di sostituzione, ma la conformazione complessiva non è influenzata; tuttavia, i composti si impacchettano in modo diverso nel reticolo cristallino.
Una revisione sistematica della natura degli eventi avversi psichiatrici in bambini e adolescenti trattati con inibitori selettivi della ricaptazione della serotonina.Nonostante una letteratura in rapida crescita sul efficacia degli inibitori selettivi della ricaptazione della serotonina (SSRI) nel trattamento dei disturbi psichiatrici giovanili, relativamente poco è descritto sugli effetti negativi emotivi, comportamentali e cognitivi associati al loro uso A tal fine abbiamo completato un'analisi retrospettiva delle cartelle cliniche per determinare incidenza, natura e correlati clinici degli effetti avversi emergenti dal trattamento nei domini comportamentali, cognitivi ed emotivi Abbiamo valutato sistematicamente le cartelle cliniche dei bambini trattati con SSRI per disturbi depressivi o ossessivo-compulsivi per una media (+/- SD) di 26,9 + 20,8 mesi per determinare l'incidenza, la natura e i correlati clinici degli eventi avversi psichiatrici emergenti dal trattamento (PAE). gnosi, tipo e dose di SSRI e farmaci aggiuntivi, tipo specifico di PAE e tempo di insorgenza e compensazione di PAE. In totale, sono stati esaminati 82 grafici di bambini e adolescenti (età media 12,2 +/- 3,2 anni). Le PAE si sono verificate nel 22% dei bambini ed erano più comunemente correlate a disturbi dell'umore. Le PAE non erano associate a diagnosi psichiatriche, età, sesso, farmaci concomitanti, dosi o inibitori specifici della ricaptazione della serotonina. L'insorgenza di PAE è stata osservata in genere 3 mesi dopo l'esposizione a SSRI (mediana = 91 giorni). Sebbene la PAE sia diminuita con l'interruzione dell'SSRI, quelli emersi all'inizio del trattamento sono diminuiti significativamente più rapidamente di quelli emersi in seguito (l'offset mediano era rispettivamente di 10 e 49 giorni). La riesposizione a un SSRI ha provocato un altro PAE nel 44% (n = 18) del gruppo. Sulla base della revisione retrospettiva delle cartelle cliniche, i giovani che ricevono SSRI sembrano essere a rischio di PAE emergente dal trattamento e recidiva con riesposizione a un SSRI. Sono necessari studi prospettici a lungo termine che valutino il decorso e la prognosi dei giovani che manifestano PAE a SSRI.
Azione antipsicotica dell'agonista selettivo del recettore metabotropico del glutammato di gruppo II MGS0008 e MGS0028 sulle risposte di evitamento condizionato nel ratto.Il presente studio è stato progettato per indagare la effetti simil-antipsicotici degli agonisti selettivi del recettore metabotropico del glutammato di gruppo II (mGluR), 5-[2-[4-(6-fluoro-1H-indolo-3-il) piperidin-1-il]etil]-4-(4 acido -fluorofenil)tiazolo-2-carbossilico (MGS0008) e acido (1R, 2S, 5S, 6S)-2-ammino-6-fluoro-4-ossobiciclo[3.1.0]esan-2,6-dicarbossilico monoidrato ( MGS0028) sulle risposte di evitamento condizionato nei ratti MGS0008 (1, 3 e 10 mg/kg, PO) e MGS0028 (0,3, 1 e 3 mg/kg, PO) significativamente e hanno ridotto le risposte di evitamento condizionato in modo dose-dipendente. effetti sono stati osservati con LY418426 (0,3, 1 e 3 mg/kg, PO), ma non con LY354740 (3, 10 e 30 mg/kg, PO), entrambi agonisti selettivi per il gruppo II mGluR. Poiché questo effetto è visto con una vasta gamma di antipsichici otici, come l'aloperidolo e la clozapina [Life Sciences 71 (2002) 947], gli agonisti mGluR di gruppo II meritano ulteriore attenzione per la possibile attività antipsicotica.
Valutazione della bioequivalenza di due sospensioni orali di oxcarbazepina rispetto a una compressa rivestita con film in soggetti sani.La sospensione orale di oxcarbazepina (trileptal) è stata riformulata e è stato condotto uno studio per confrontare la biodisponibilità dopo dosi singole e allo stato stazionario dell'attuale e precedente sospensione orale rispetto alle compresse rivestite con film commercializzate e per confrontare la biodisponibilità dell'attuale e precedente sospensione orale. I risultati supportano il passaggio dalla precedente sospensione orale all'attuale sospensione orale e anche da entrambe le sospensioni orali alla compressa rivestita con film e viceversa. Lo studio era uno studio in aperto, monocentrico, crossover a 3 vie. Ogni periodo di trattamento consisteva in una singola dose di 600 mg di oxcarbazepina il Giorno 1, somministrazione ripetuta di 600 mg di oxcarbazepina bid dal Giorno 4 fino al Giorno 7 incluso e una dose finale di 600 mg di oxcarbazepina somministrata la mattina del Giorno 8. I campioni di sangue sono stati prelevati il Giorno 1, giorno 7 e giorno 8 (pre-dose). Le concentrazioni plasmatiche del principale metabolita dell'oxcarbazepina (MHD) sono state determinate utilizzando un test HPLC convalidato. Le 2 sospensioni orali sono state confrontate con la compressa rivestita con film come formulazione di riferimento a digiuno. Anche l'attuale sospensione orale è stata confrontata con la precedente sospensione orale. Questi confronti sono stati effettuati utilizzando i dati dopo la somministrazione di una singola dose e in condizioni di stato stazionario. Per la valutazione della bioequivalenza sono stati utilizzati l'AUC plasmatico per dose singola e l'AUC(0-12h) allo stato stazionario e la Cmax plasmatica, trasformata in log (base naturale). L'approccio dell'intervallo di confidenza (CI) del 90% è stato utilizzato per testare la bioequivalenza. La bioequivalenza è stata accettata se l'IC era contenuto all'interno della regione (0,8, 1,25). Allo stato stazionario, sia la precedente che l'attuale sospensione orale hanno mostrato bioequivalenza con la compressa rivestita con film per quanto riguarda l'AUC e la Cmax. L'attuale sospensione orale era anche bioequivalente rispetto alla precedente sospensione orale per quanto riguarda l'AUC e la Cmax. Dopo dose singola, la precedente sospensione orale era bioequivalente rispetto alla compressa rivestita con film per quanto riguarda sia l'AUC che la Cmax. Tuttavia, l'attuale sospensione orale era bioequivalente sia alla compressa rivestita con film che alla precedente sospensione orale per quanto riguarda l'AUC ma non la Cmax.
Linee guida aggiornate sui metodi per le revisioni sistematiche nel gruppo di revisione della collaborazione cochrane.Linee guida descrittive sui metodi. Per aiutare i revisori a progettare, condurre e riportare revisioni di studi nel campo del dolore alla schiena e al collo. Nel 1997, il Cochrane Collaboration Back Review Group ha pubblicato linee guida metodologiche per le revisioni sistematiche. Dalla sua pubblicazione, sono emerse nuove prove metodologiche e è stata acquisita più esperienza nella conduzione di revisioni. Tutte le revisioni e i protocolli della schiena Review Group sono stati valutati per la conformità alle linee guida del metodo 1997. Inoltre, la versione più recente del Cochrane Handbook (4.1) è stata controllata per nuove raccomandazioni. Inoltre, sono stati inclusi alcuni argomenti importanti che non sono stati affrontati nelle linee guida del metodo 1997 (ad es. , metodi per l'analisi qualitativa, rendicontazione delle conclusioni e discussione della rilevanza clinica dei risultati) Nel maggio 2002, i risultati preliminari sono stati presentati e discussi in un workshop. In due turni, è stato distribuito un elenco di tutte le possibili raccomandazioni e la bozza finale per i commenti tra i redattori del gruppo di revisione posteriore. Le raccomandazioni sono suddivise in cinque categorie: ricerca bibliografica, criteri di inclusione, valutazione della qualità metodologica, estrazione dei dati e analisi dei dati. Ogni raccomandazione è classificata in criteri minimi e ulteriori indicazioni. Sono incluse ulteriori raccomandazioni in merito alla valutazione della rilevanza clinica e alla segnalazione dei risultati e delle conclusioni. Le revisioni sistematiche devono essere condotte con la stessa attenzione degli studi che riportano e, per ottenere il massimo impatto, le revisioni sistematiche devono soddisfare elevati standard metodologici.
L'analogo etereo del 2-arachidonoilglicerolo (noladin ether) non è stato rilevato nel cervello di varie specie di mammiferi.2-Eicosa-5\ ',8\',11\',14\'-tetraenilglicerolo (2-AG etere, HU310, etere noladina) è un analogo legato all'etere metabolicamente stabile del 2-arachidonoilglicerolo (2-AG), un ligando del recettore dei cannabinoidi endogeno. L'etere 2-AG è stato utilizzato come valido strumento sperimentale da un certo numero di ricercatori. Recentemente, diversi gruppi hanno riferito che l'etere 2-AG è presente nel cervello dei mammiferi. Abbiamo esaminato in dettaglio se l'etere 2-AG esiste effettivamente nel cervello di vari specie di mammiferi Abbiamo scoperto che l'etere 2-AG non è presente, almeno in quantità apprezzabile, nel cervello di ratto mediante analisi gascromatografica-spettrometria di massa e analisi di cromatografia liquida ad alte prestazioni fluorometriche. Il livello di etere 2-AG nel ratto cervello era inferiore a 0,2 pmol/g cervello, se non del tutto presente Risultati simili sono stati ottenuti per il reggiseno del topo in, cervello di criceto, cervello di cavia e cervello di maiale. Il fatto che l'etere 2-AG non sia stato rilevato nel cervello di varie specie di mammiferi è coerente con il fatto che un legame etereo si forma attraverso la sostituzione enzimatica della frazione acilica grassa dell'1-acil diidrossiacetone fosfato con un alcol grasso, il risultante 1 -O-alchil diidrossiacetone fosfato essendo un comune intermedio della biosintesi dei lipidi legati all'etere nei tessuti dei mammiferi. È piuttosto discutibile se l'etere 2-AG sia presente in quantità apprezzabili nel cervello e agisca come un ligando del recettore dei cannabinoidi \'endogeno\'.
Inibizione selettiva di ADAMTS-1, -4 e -5 da parte degli esteri di gallato di catechina.Tre enzimi ADAMTS di mammifero, ADAMTS-1, -4 e -5, sono noti per scindere l'aggrecano in alcuni legami glutamilici e sono considerati in gran parte responsabili del catabolismo dell'aggrecano della cartilagine osservato durante lo sviluppo dell'artrite. Abbiamo precedentemente riportato che alcune catechine, composti polifenolici presenti in più alta concentrazione nel tè verde (Camellia sinensis ), sono in grado di inibire la rottura dell'aggrecano della cartilagine in un modello in vitro di degradazione della cartilagine. Abbiamo ora clonato ed espresso ADAMTS-1, -4 e -5 umani ricombinanti e riportiamo qui che gli esteri di gallato di catechina trovati nel tè verde inibiscono potentemente il attività aggrecan-degradante di questi enzimi, con valori di IC50 submicromolari Inoltre, la concentrazione necessaria per l'inibizione totale di questi membri del gruppo ADAMTS è di circa due ordini di grandezza inferiore a quella necessaria per parti alleato inibiscono la collagenasi o l'attività di ADAM-10. Gli esteri di catechina gallato forniscono quindi un'inibizione selettiva di alcuni membri del gruppo di enzimi ADAMTS e potrebbero costituire un importante aiuto nutrizionale nella prevenzione dell'artrite oltre a far parte di una terapia efficace nel trattamento delle malattie articolari e di altre patologie che coinvolgono l'azione di questi enzimi.
Effetto stimolante della cianidina 3-glicosidi sulla rigenerazione della rodopsina.Gli antociani sono stati suggeriti per migliorare le funzioni visive. Questo studio ha esaminato l'effetto di quattro antociani nei frutti di ribes nero sulla rigenerazione della rodopsina utilizzando membrane del segmento esterno dei bastoncini di rana (ROS). Cianidina 3-glicosidi, glucoside e rutinoside, hanno stimolato la rigenerazione, ma le corrispondenti delfinidine non hanno mostrato alcun effetto significativo. È stata suggerita la formazione di un intermedio di rigenerazione essere accelerato dalla cianidina 3-rutinoside. Anche i loro effetti sull'attività della cGMP-fosfodiesterasi nelle membrane ROS sono stati studiati, ma sono risultati trascurabili. Si è concluso che l'effetto principale degli antociani nei fotorecettori dei bastoncelli è sulla rigenerazione della rodopsina".
Terapia anti-vascolare con fattore di crescita endoteliale per la neovascolarizzazione coroideale subfoveale secondaria a degenerazione maculare senile: risultati dello studio di fase II.Ci sono prove che suggeriscono che la terapia anti-fattore di crescita endoteliale vascolare (anti-VEGF) può essere utile nel trattamento della neovascolarizzazione oculare. Uno studio di fase IA con singola iniezione intravitreale della terapia anti-VEGF per pazienti con neovascolarizzazione coroidale subfoveale (CNV) secondaria a degenerazione maculare senile ( AMD) ha rivelato un buon profilo di sicurezza. Abbiamo eseguito uno studio di fase II iniezioni multiple della terapia anti-VEGF con e senza terapia fotodinamica per i pazienti con CNV subfoveale secondaria ad AMD per determinare il profilo di sicurezza della terapia iniezioni multiple. Una dose multipla di fase II studio di sicurezza. Ventuno pazienti sono stati trattati con iniezione intravitreale con e senza terapia fotodinamica. Evidenza clinica di tossicità e complicanze. Nessun effetto grave correlato al farmaco altri eventi sono stati rivelati. La valutazione oftalmica ha rivelato che l'87,5% dei pazienti che hanno ricevuto l'aptamer anti-VEGF da solo ha mostrato una visione stabilizzata o migliorata 3 mesi dopo il trattamento e che il 25% degli occhi ha mostrato un miglioramento della vista di 3 linee o più nella tabella dello studio sul trattamento precoce della retinopatia diabetica durante questo periodo. È stato osservato un guadagno di 3 linee del 60% a 3 mesi nei pazienti che hanno ricevuto sia l'aptamero anti-VEGF che la terapia fotodinamica. La terapia anti-VEGF è un trattamento promettente per varie forme di neovascolarizzazione oculare, inclusa l'AMD. Iniezioni intravitreali multiple dell'aptamer anti-VEGF sono state ben tollerate in questo studio di fase II. Sono necessari ulteriori studi clinici per dimostrare l'efficacia e la sicurezza a lungo termine della terapia anti-VEGF per l'AMD.
VEGF164 è proinfiammatorio nella retina diabetica.Gli obiettivi di questo studio erano di caratterizzare la potenza differenziale di due principali isoforme di VEGF, VEGF(120) e VEGF(164), per indurre la stasi dei leucociti (leucostasi) all'interno del sistema vascolare retinico e la rottura della barriera emato-retinica (BRB) e per determinare se il VEGF(164) endogeno media la leucostasi retinica e la rottura del BRB nel diabete precoce e stabilizzato. La rottura di BRB è stata quantificata simultaneamente combinando l'etichettatura di perfusione di concanavalina A lectina (ConA) con un test di perdita di destrano fluorofotometrico. È stata eseguita l'immunoistochimica CD45 per confermare che le cellule colorate con ConA all'interno del sistema vascolare erano leucociti. La leucostasi retinica e la rottura di BRB sono state confrontate in ratti non diabetici che ricevevano iniezioni intravitreali di VEGF(120) o VEGF(164) I livelli della molecola di adesione intercellulare retinica (ICAM)-1 e della proteina VEGF sono stati studiati mediante Western blot e EL ISA, rispettivamente. Un aptamer anti-VEGF(164(165)) (EYE001) è stato somministrato mediante iniezione intravitreale a ratti diabetici di 2 settimane e 3 mesi ed è stato quantificato l'effetto sulla leucostasi retinica e sulla rottura del BRB. Rispetto a VEGF(120), VEGF(164) ha aumentato più potentemente i livelli di ICAM-1 retinici (2,2 volte), leucostasi (1,9 volte) e la rottura del BRB (2,1 volte, P < 0,01 per tutti), nonostante trascurabile differenze nei livelli di VEGF vitreoretinico al momento della valutazione (P > 0,05). La leucostasi retinica e la perdita sono aumentate con la durata del diabete (P < 0,01) e strettamente correlate (P < 0,01, r = 0,889). Il blocco specifico dell'isoforma del VEGF endogeno (164) con EYE001 ha determinato una significativa soppressione della leucostasi retinica e della rottura del BRB sia nel diabete precoce (72,4% e 82,6%, rispettivamente) che stabilito (48,5% e 55,0%, rispettivamente) (P < 0,01). Su base equimolare, VEGF(164) è almeno due volte più potente di VEGF(120) nell'indurre la leucostasi retinica mediata da ICAM-1 e la rottura del BRB in vivo. L'inibizione della leucostasi retinica diabetica e della rottura del BRB con EYE001 nel diabete precoce e stabilizzato indica che il VEGF(164) è un'isoforma importante nella patogenesi della retinopatia diabetica precoce.
Biocompatibilità dei metaboliti idrossilati di BISGMA e BFDGE.I monomeri dentali non polimerizzati possono lisciviare nella biofase orale e sono biodisponibili per il metabolismo. Ipotizziamo che i metaboliti sarebbe meno tossico dei monomeri progenitori. Abbiamo prima identificato la formazione di metaboliti dal bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE) e dal bisfenolo A glicidil metacrilato (BISGMA) dopo la loro esposizione alle frazioni S9 epatiche. Quindi, i metaboliti e i composti progenitori sono stati sottoposti a studi in vitro di citotossicità, mutagenicità ed estrogenicità Il bisfenolo A bis(2,3-diidrossipropil) etere e il bisfenolo F bis(2,3-diidrossipropil) etere erano i metaboliti idrossilati rispettivamente di BISGMA e BFDGE. i metaboliti erano significativamente (p < 0,05) meno citotossici rispetto ai monomeri progenitori. Solo BFDGE era mutageno nel test di Ames con il ceppo TA100 di Salmonella typhimurium. Progenitore e metabolita com libbre non hanno stimolato la proliferazione delle cellule MCF-7 estrogeno-dipendente al di sopra dei controlli con solvente. Questi risultati hanno indicato che i metaboliti idrossilati erano non mutageni, non estrogenici e meno citotossici dei loro monomeri progenitori.
Studio di bioequivalenza sulla formulazione di compresse con immagine del mercato finale di oxcarbazepina dopo somministrazione singola e allo stato stazionario in soggetti sani.Una formulazione in compresse con immagine di mercato finale (FMI) di oxcarbazepina è stato confrontato con la formulazione commercializzata (formulazione corrente sul mercato (CMF)) e con la compressa della formulazione della sperimentazione clinica (CTF) utilizzata durante gli studi di efficacia e sicurezza clinica. L'obiettivo dello studio era confrontare la biodisponibilità dopo dosi singole e allo stato stazionario dell'FMI rispetto a CMF e CTF. Inoltre, è stato valutato l'effetto del cibo sulla formulazione finale del mercato. Lo studio era uno studio in aperto, a centro singolo, crossover a 4 vie. Ogni periodo di trattamento consisteva in una singola dose di 600 mg OXC il Giorno 1. Dal Giorno 4 fino al Giorno 7 incluso, sono stati somministrati 600 mg bid. Una dose finale di 600 mg è stata somministrata al mattino il Giorno 8. I campioni di sangue sono stati prelevati il Giorno 1 prima e il Giorno 7 (predose) e il giorno 8 (mattina dose). Le concentrazioni plasmatiche di MHD (il principale metabolita di OXC) sono state determinate utilizzando un test HPLC convalidato. FMI come formulazione di prova è stato confrontato con CMF e CTF come formulazioni di riferimento. L'FMI a stomaco pieno è stato anche confrontato con l'FMI a digiuno. Questi confronti sono stati effettuati utilizzando i dati dopo la somministrazione di una singola dose e le condizioni di stato stazionario. Per la valutazione della bioequivalenza sono stati utilizzati l'AUC plasmatico per dose singola o l'AUC(0-12h) per lo stato stazionario e la Cmax plasmatica, trasformata logaritmica (base naturale). L'approccio dell'intervallo di confidenza (CI) del 90% è stato utilizzato per testare la bioequivalenza. La bioequivalenza è stata accettata se l'IC era contenuto all'interno della regione (0,8, 1,25). Allo stato stazionario a stomaco pieno, la formulazione testata (FMI) era bioequivalente al CTF e con la formulazione commercializzata di riferimento (CMF) per quanto riguarda AUC e Cmax. Dopo dose singola a stomaco pieno, FMI e CTF erano bioequivalenti per quanto riguarda AUC e Cmax, e FMI e CMF erano equivalenti per quanto riguarda l'AUC ma non la Cmax. Il cibo non ha avuto alcun effetto sulla biodisponibilità dell'FMI. Questi risultati supportano chiaramente il passaggio dall'attuale formulazione di mercato (CMF) alla tavoletta immagine per il mercato finale nei paesi in cui Trileptal è o era già registrato.
Inibizione della fusione del virus respiratorio sinciziale da parte della piccola molecola VP-14637 tramite interazioni specifiche con la proteina F.Il virus respiratorio sinciziale umano (RSV) è un principale causa di infezioni del tratto respiratorio in tutto il mondo. Sono stati identificati diversi nuovi inibitori di piccole molecole di RSV, ma sono ancora in fase di valutazione preclinica o clinica precoce. Uno di questi inibitori è una molecola a base di trifenolo scoperta di recente, VP-14637 (ViroPharma). Gli esperimenti iniziali suggerivano che VP-14637 agisse precocemente e potesse essere un inibitore della fusione di RSV. Qui presentiamo studi che dimostrano che VP-14637 non blocca l'adsorbimento di RSV ma inibisce la fusione cellula-cellula indotta da RSV e si lega specificamente alle cellule infettate da RSV con un affinità corrispondente alla sua potenza inibitoria. VP-14637 è in grado di interagire in modo specifico con la proteina di fusione RSV espressa da un sistema di vaccinia virus T7. Sono state selezionate varianti di RSV resistenti a VP-14637 che avevano mutazioni loca lizzato a due regioni distinte della proteina F RSV, ripetizione eptade 2 (HR2) e il dominio intermedio tra ripetizione eptade 1 (HR1) e HR2. Nessuna mutazione si è verificata in HR1, suggerendo un meccanismo diverso dall'interruzione diretta dell'interazione della ripetizione dell'eptade. Le proteine F contenenti le mutazioni di resistenza hanno mostrato un legame notevolmente ridotto di VP-14637. Nonostante la segregazione con la frazione di membrana dopo l'incubazione con cellule infettate da RSV intatte, il composto non si è legato alle membrane isolate da cellule infettate da RSV. Inoltre, il legame di VP-14637 è stato sostanzialmente compromesso a temperature di < o =22 gradi C. Pertanto, proponiamo che VP-14637 inibisca l'RSV attraverso un nuovo meccanismo che implica un'interazione tra il composto e una conformazione transitoria dell'RSV F proteina.
Valutazione mutagena e genotossica del bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE) nei sistemi procariotici ed eucariotici.La resina epossidica bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE), è stato esaminato per la sua mutagenicità in saggi procariotici (test Salmonella typhimurium His(-) ed Escherichia coli Trp(-)) e la sua genotossicità nei sistemi eucariotici (sister chromatid exchange (SCE) e test del micronucleo nei linfociti umani), in presenza o assenza di un sistema metabolizzante esogeno (S9 da fegato di ratto). Nei test procariotici, le concentrazioni di BFDGE variavano tra 100 e 5000 micro g per piastra, e nei saggi eucariotici da 12,5 a 62,5 micro g/ml. Il composto è in grado di inducono effetti mutageni nei ceppi batterici TA100, TA1535, WP2uvrA e IC3327, come rivelato dall'aumento osservato del numero di revertanti indotti Rispetto ai saggi di genotossicità, BFDGE induce un aumento della frequenza degli scambi di cromatidi fratelli e micron uclei nei linfociti del sangue periferico umano.
Gli effetti dell'inibitore della farnesil transferasi FTI L-778,123 sulla proliferazione in vitro dei progenitori del midollo osseo della leucemia normale, mielodisplastica e mieloide.Gli effetti di è stato studiato l'inibitore della farnesil transferasi FTI-778,123 sulla proliferazione delle cellule progenitrici emopoietiche normali, MDS, AML e CML. I progenitori mieloidi ed eritroidi MDS sono significativamente più sensibili all'FTI rispetto ai progenitori normali mentre i progenitori mieloidi AML possono essere un po' più sensibili del normale progenitori. Al contrario, non è rilevabile alcuna differenza tra LMC e progenitori normali. Questi dati suggeriscono fortemente che è indicata una sperimentazione di questo agente in pazienti con MDS e forse in pazienti con LMA.
Ruolo della segnalazione redox nella risposta proliferativa autonoma delle cellule endoteliali all'ipossia.Le cellule endoteliali mostrano una risposta proliferativa autonoma all'ipossia, indipendente dagli effettori paracrini In colture di cellule endoteliali dell'aorta suina, abbiamo analizzato la segnalazione di questa risposta, con particolare attenzione ai ruoli della segnalazione redox e della via MEK/ERK L'ipossia transitoria (1 ora) ha stimolato la proliferazione del 61+/-4% (n =16; P<0.05 rispetto al controllo), quantificato dopo 24 ore di postincubazione normossica. L'ipossia ha indotto un'attivazione di ERK2 e della NAD(P)H ossidasi e un burst di specie reattive dell'ossigeno (ROS), determinato dalla fluorescenza DCF. inibire la via MEK/ERK, abbiamo usato PD 98059 (PD, 20 micromol/L); per sottoregolare la NAD(P)H ossidasi, abbiamo applicato gli oligonucleotidi antisenso p22phox; e per inibire la generazione di ROS mitocondriali, abbiamo usato il derivato dell'ubichinone mitoQ (MQ , 10 micromol/L). Tutte e tre le inibizioni hanno soppresso il pro risposta vitale: PD inibisce l'attivazione della NAD(P)H ossidasi; La trasfezione antisenso di p22phox non ha inibito l'attivazione di ERK2, ma ha soppresso la produzione di ROS; e MQ hanno inibito l'attivazione di ERK2 e la produzione di ROS. La risposta proliferativa autonoma dipende dalla via MEK/ERK e dai passaggi di segnalazione redox a monte ea valle di ERK. A monte si trova la generazione di ROS da parte dei mitocondri, a valle si trova la NAD(P)H ossidasi.
Trasformazioni chimiche sullo scheletro botryano. Effetto sull'attività citotossica.Diciotto composti con uno scheletro botryane sono stati ottenuti attraverso trasformazioni chimiche di varie tossine dal fungo Botrytis cinerea. Nel corso di queste trasformazioni, il carbonio C-10 dello scheletro botryane è risultato mostrare un'interessante elevata regioselettività agli agenti ossidanti e riducenti. Inoltre, la citotossicità di 27 derivati botryane è stata determinata in vitro contro Hs578T, Linee cellulari MDA-MB-231, HT-1080, U87-MG, IMR-90 e HUVEC I risultati di questo studio confermano che la citotossicità del botrydial (1) e dei suoi derivati è correlata alla presenza di un 1,5 -funzionalità dialdeide.
Interazione tra flavonoidi e barriera ematoencefalica: studi in vitro.C'è un notevole interesse attuale per gli effetti neuroprotettivi dei flavonoidi. Questo studio si concentra sul potenziale dei flavonoidi alimentari, e dei loro noti metaboliti fisiologicamente rilevanti, di entrare nell'endotelio cerebrale e attraversare la barriera emato-encefalica (BBB) utilizzando modelli in vitro consolidati (linee di cellule endoteliali cerebrali e monostrati ECV304 co-coltivati con glioma C6 Segnaliamo che i flavonoidi degli agrumi, l'esperetina, la naringenina e i loro metaboliti rilevanti in vivo, così come gli antociani alimentari e le forme in vivo, cianidina-3-rutinoside e pelargonidin-3-glucoside, sono assorbiti da due cellule endoteliali cerebrali linee cellulari da topo (b. END5) e ratto (RBE4). In entrambi i tipi di cellule, l'assorbimento di esperetina e naringenina era maggiore, aumentando significativamente con il tempo e in funzione della concentrazione. A sostegno di queste osservazioni riportiamo per il prima volta elevata permeabilità apparente (Papp) dei flavonoidi degli agrumi, esperetina e naringenina, attraverso il modello BBB in vitro (da apicale a basolaterale) rispetto ai loro coniugati glucuronidati più polari, nonché a quelli dell'epicatechina e dei suoi metaboliti in vivo, la dieta antociani e ad acidi fenolici specifici derivati dalla biotrasformazione del colon di flavonoidi. I risultati dimostrano che i flavonoidi e alcuni metaboliti sono in grado di attraversare la BBB e che il potenziale di permeazione è coerente con la lipofilia dei composti.
Farmacocinetica a dose singola e ripetuta di eplerenone, un bloccante selettivo del recettore dell'aldosterone, nei ratti.1. La farmacocinetica di eplerenone (EP) è stata esaminati nei ratti dopo somministrazione singola o ripetuta di EP (14) marcato o non marcato per caratterizzare l'assorbimento, il metabolismo e l'escrezione. I tassi di metabolismo di EP e le attività del citocromo P450 sono stati determinati in vitro dopo somministrazione di dosi ripetute di EP 2. Dopo una singola iv (15 mg kg(-1)), l'emivita di eliminazione di EP era di 0,80 e 1,14 h rispettivamente nei ratti maschi e femmine. Le clearance plasmatiche (CL) di EP erano 1,62 e 1,20 l kg(-1) h (-1) rispettivamente nei maschi e nelle femmine. Dopo una singola dose orale (15 mg kg(-1)), C(max) e T(max) di EP erano 1,71 micro g ml(-1) e 0,5 h in ratti maschi. I valori corrispondenti nei ratti femmine erano 3,54 micro g ml (-1) e 1,0 h. La disponibilità sistemica di EP era del 25,6% nei ratti maschi e del 66,4% nei ratti femmine, a dimostrazione della differenza di sesso enza nella farmacocinetica dell'EP. 3. Nello studio di 8 giorni, l'AUC(0-24h)\'s di EP totale (forma ad anello lattonico chiuso più forma aperta) dopo dosi orali di 100 e 200 mg kg(-1) erano circa la metà di quelle del giorno 1 in ratti maschi. Dopo dosi ripetute per 13 settimane, la farmacocinetica dell'EP totale non è cambiata con la durata dello studio alla dose di 20 mg kg(-1) sia nei maschi che nelle femmine. Tuttavia, alla dose di 100 mg kg(-1), l'AUC(0-24h)\'s era notevolmente ridotta il giorno 24, ma aumentava progressivamente nei giorni successivi fino ad avvicinarsi ai livelli del giorno 1 entro il giorno 86 in entrambi i sessi. Alla dose di 500 mg kg(-1), le AUC del giorno 86 sono rimaste inferiori a quelle del giorno 1. Le riduzioni delle AUC nei giorni 8 e 24 sembravano essere il risultato dell'induzione del metabolismo. 4. EP è stato ampiamente metabolizzato nei ratti maschi e la maggior parte della radioattività fecale e urinaria era sotto forma di metaboliti. Nelle femmine di ratto, la stragrande maggioranza della radioattività urinaria e fecale è stata associata a EP totale. Pertanto, la differenza di sesso nella farmacocinetica dell'EP era dovuta a un metabolismo più esteso nei ratti maschi. 5. Il principale metabolita nel ratto era 6beta-OH EP. L'attività di EP 6beta-idrossilasi era ben correlata con l'attività di testosterone 6beta-idrossilasi, indicando che il metabolismo di EP a 6beta-OH EP era mediato principalmente dal CYP3A nel ratto. 6. Dopo somministrazione di dosi ripetute, l'EP ha aumentato le attività della 6beta-idrossilasi del testosterone e dell'EP stesso in maniera dose-dipendente nei ratti sia maschi che femmine, indicando che EP era un induttore del CYP3A nel ratto. Non sembravano esserci effetti sulle attività di CYP1A1, 2B e 2E1.
Inibitori della farnesil transferasi nel trattamento del cancro al seno.Fino a poco tempo fa, il trattamento terapeutico del cancro al seno è stato dominato da farmaci a base endocrina (estrogeni antagonisti dei recettori, inibitori dell'aromatasi ecc. ) e citotossici convenzionali (doxorubicina, ciclofosfamide, 5-fluorouracile ecc. ) Tuttavia, l'avvento di farmaci inibitori della trasduzione del segnale di nuova generazione mirati contro le anomalie molecolari del cancro al seno (ad es. , l'anticorpo trastuzumab, diretto contro il recettore cERBB2) ha la promessa di fornire una nuova era di terapia più selettiva contro i tumori. Gli inibitori dell'enzima farnesil transferasi (FTI) sono ora in fase di sperimentazione clinica in fase iniziale, anche in pazienti con carcinoma mammario avanzato. Anche se originariamente sviluppati come inibitori delle vie di trasduzione del segnale RAS, è ora evidente che questi farmaci sono meglio descritti come inibitori della prenilazione; l'aggiunta di un prenyl o farnesil moi a 15 atomi di carbonio ety da farnesil transferasi essendo fondamentale per la funzione di un certo numero di proteine, tra cui RAS. Almeno tre FTI sono attualmente in fase di valutazione clinica; R115777 (tipifarnib, Zarnestra), SCH66336 (lonafarnib, Sarasar) e BMS-214662. In termini di potenziale utilizzo nel trattamento chemioterapico del carcinoma mammario avanzato, uno studio di Fase II su R115777 (utilizzando somministrazione orale continua o intermittente due volte al giorno) ha dimostrato un'attività promettente (circa il 10% di percentuale di risposta parziale). Nel complesso, tuttavia, l'attività del singolo agente degli FTI in vari studi di Fase II è stata piuttosto modesta (oltre allo studio sul cancro al seno sopra menzionato, alcune risposte sono state osservate in pazienti con leucemie mieloidi acute e croniche). Le principali tossicità dose-limitanti che sono state riportate sono mielosoppressione, affaticamento e neurotossicità (con R115777). Due studi di Fase III su R115777 nel cancro del colon-retto (rispetto al placebo) e del pancreas (con gemcitabina rispetto al placebo) non sono riusciti a mostrare un beneficio in termini di sopravvivenza. È probabile che la futura direzione clinica degli FTI sarà come terapia combinata, specialmente con i taxani, dove la sinergia è stata osservata in una varietà di studi preclinici.
Caratterizzazione funzionale della proteina legante la penicillina 1b da Streptococcus pneumoniae.L'uso diffuso di antibiotici ha incoraggiato lo sviluppo di resistenza ai farmaci nei batteri patogeni. In Al fine di superare questo problema, è attualmente in corso la modifica degli antibiotici esistenti e/o l'identificazione di bersagli per la progettazione di nuovi antibiotici. inibita da antibiotici beta-lattamici e la cui attività glicosiltransferasica (GT) rappresenta un potenziale bersaglio nella lotta antibatterica In questo lavoro descriviamo l'espressione e la caratterizzazione biochimica della regione extracellulare solubile di Streptococcus pneumoniae PBP1b (PBP1b*). l'efficienza per benzilpenicillina e cefotaxime è stata caratterizzata mediante fluorometria a flusso interrotto ed è stato generato un dominio TP stabile di 40 kDa dopo una proteolisi limitata. Al fine di analizzare l'attività GT di PBP1b*, abbiamo sviluppato un test elettroforetico che monitora il segnale di fluorescenza dal lipide II dansilato legato a PBP1b*. Questo legame è stato inibito dall'antibiotico moenomicina ed era specifico per il dominio GT, poiché non è stato osservato alcun segnale in presenza del dominio TP funzionale purificato. Studi di associazione eseguiti con forme troncate di PBP1b* hanno dimostrato che il primo motivo conservato del dominio GT non è richiesto per il riconoscimento del lipide II, mentre il secondo motivo è necessario per tale interazione.
Sintesi del peptidoglicano in assenza di proteine leganti la penicillina di classe A in Bacillus subtilis.Le proteine leganti la penicillina (PBP) catalizzano le reazioni finali, essenziali della sintesi del peptidoglicano. Tre classi di PBP catalizzano attività trans-, endo- o carbossipeptidasi sulle catene laterali del peptidoglicano. Solo le PBP di classe A ad alto peso molecolare hanno chiaramente dimostrato attività glicosiltransferasiche che polimerizzano i filamenti di glicani, e in alcuni specie queste proteine hanno dimostrato di essere essenziali. La sequenza del genoma di Bacillus subtilis contiene quattro geni che codificano per PBP di classe A e nessun altro gene con somiglianza con il loro dominio glicosiltransferasico. Un ceppo privo di tutte e quattro le PBP di classe A è stato costruito e produce una parete di peptidoglicano con solo piccole differenze strutturali da quello del wild type. Il tasso di crescita del mutante quadruplo è molto inferiore a quello dei ceppi privi solo di tre della classe A PB Ps e aumenti della lunghezza delle cellule e delle frequenze delle anomalie della parete erano evidenti. La vitalità e la produzione di parete del ceppo quadruplo-mutante indicano che un nuovo enzima può svolgere l'attività glicosiltransferasica richiesta per la sintesi del peptidoglicano. Questa attività è stata dimostrata in vitro e si è dimostrata sensibile all'inibitore della glicosiltransferasi moenomicina. Al contrario, il ceppo quadruplo-mutante era resistente alla moenomicina in vivo. L'esposizione del ceppo selvatico alla moenomicina ha portato alla produzione di un fenotipo simile a quello del mutante quadruplo.
Una glutammato mutasi è coinvolta nella biosintesi dell'antibiotico lipopeptidico friulimicina in Actinoplanes friuliensis.Actinoplanes friuliensis produce l'antibiotico lipopeptidico friulimicina. Questo antibiotico è attivo contro i batteri gram-positivi come i ceppi multiresistenti di Enterococcus e Staphylococcus. È costituito da 10 amminoacidi che formano una struttura ad anello e 1 amminoacido esociclico a cui è attaccato un residuo acilico. Con un approccio genetico inverso, sono stati identificati i geni biosintetici necessari per la sintesi non ribosomiale dell'antibiotico. In stretta vicinanza sono stati trovati due geni (glmA e glmB) che sono coinvolti nella produzione di metilaspartato, uno degli amminoacidi del nucleo del peptide. Il metilaspartato è sintetizzato da un meccanismo di glutammato mutasi, che è stato fino ad ora descritto solo per la fermentazione del glutammato in Clostridium sp. o membri della famiglia ENTEROBACTERIACEAE: l'enzima attivo è costituito da due subun suo, e i geni corrispondenti si sovrappongono l'uno all'altro. Per dimostrare l'attività enzimatica in un ospite eterologo, era necessario fondere geneticamente glmA e glmB. Il gene risultante è stato sovraespresso in Streptomyces lividans e la proteina di fusione è stata purificata in forma attiva. Per la mutagenesi della distruzione genica, è stato stabilito un sistema vettore-ospite che consente la manipolazione genetica di Actinoplanes spp. per la prima volta. Pertanto, è stata possibile l'inattivazione mirata dei geni biosintetici ed è stato dimostrato il loro coinvolgimento nella biosintesi della friulimicina.
Capacità sensibilizzante e pattern di reazione crociata degli isomeri di diglicidil etere del bisfenolo F nella cavia.In questo studio, le capacità sensibilizzanti di i 3 principali isomeri a basso peso molecolare delle resine epossidiche a base di diglicidil etere del bifenolo F (DGEBF) sono stati studiati in un test di massimizzazione della cavia (GPMT). Gli isomeri sono p,p\'-DGEBF, o,p\' -DGEBF, e o,o\'-DGEBF. Le capacità di sensibilizzazione sono state confrontate con il diglicidil etere del bisfenolo A (DGEBA), che è il principale costituente nella più comune resina epossidica. È stato inoltre rilevato lo schema di reazione incrociata tra tutti e 4 i composti È stato scoperto che tutti e 3 gli isomeri DGEBF erano potenti sensibilizzanti È stato anche scoperto che p,p\'-DGEBF, o,p\'-DGEBF e DGEBA hanno reagito in modo incrociato tra loro e che gli animali indotti con o ,o\'-DGEBF ha reagito in modo significativo solo a o,p\'-DGEBF, ma non agli altri 2 isomeri DGEBF o DGEBA.
CP-465.022, un antagonista selettivo del recettore AMPA non competitivo, blocca i recettori AMPA ma non è neuroprotettivo in vivo.Alfa-amino-3-idrossi- È stato ipotizzato che l'inibizione del recettore dell'acido 5-metil-4-isossazolopropionico (AMPA) fornisca un'efficacia neuroprotettiva dopo ischemia cerebrale sulla base dell'attività in modelli sperimentali di ischemia di una varietà di composti con selettività variabile per AMPA rispetto ad altri sottotipi di recettori del glutammato. -465.022 è un nuovo, potente e selettivo antagonista del recettore AMPA. Il presente studio ha studiato la capacità di questo composto di ridurre la perdita neuronale dopo ischemia cerebrale sperimentale per sondare il potenziale neuroprotettivo dell'inibizione del recettore AMPA. Per dimostrare che CP-465.022 ottiene l'accesso al cervello, sono stati studiati gli effetti della somministrazione sistemica di CP-465.022 sulle risposte elettrofisiologiche mediate dal recettore AMPA nell'ippocampo e sulle convulsioni indotte chimicamente nei ratti. Il composto è stato quindi studiato per l'efficacia neuroprotettiva in modelli di ischemia globale e focale di ratto a dosi che si sono dimostrate essere massimamente efficaci nei modelli di elettrofisiologia e convulsioni. CP-465.022 ha inibito in modo potente ed efficace la trasmissione sinaptica ippocampale mediata dal recettore AMPA e l'induzione di convulsioni. Tuttavia, a dosi comparabili, CP-465.022 non è riuscito a prevenire la perdita di neuroni CA1 dopo una breve ischemia globale o a ridurre il volume dell'infarto dopo l'occlusione temporanea dell'arteria cerebrale media. Data l'elevata selettività di CP-465.022 per AMPA rispetto ai sottotipi kainato e N-metil-D-aspartato dei recettori del glutammato, la mancanza di efficacia neuroprotettiva del composto mette in discussione l'efficacia neuroprotettiva dell'inibizione del recettore AMPA dopo l'ischemia.
Danno neuronale acuto, eccitotossicità e sistema endocannabinoide.Il sistema endocannabinoide è un obiettivo prezioso per la scoperta di farmaci, perché è coinvolto nella regolazione di molte funzioni cellulari e fisiologiche. Il sistema endocannabinoide costituisce i lipidi endogeni anandamide, 2-arachidonoilglicerolo e noladin etere, e i recettori cannabinoidi CB1 e CB2 nonché le proteine per la loro inattivazione. Si pensa che i farmaci a base di (endo)cannabinoidi può potenzialmente essere utile per ridurre gli effetti della neurodegenerazione. Questo documento esamina i recenti sviluppi nel sistema endocannabinoide e il suo coinvolgimento nella neuroprotezione. I cannabinoidi esogeni (endo) hanno dimostrato di esercitare la neuroprotezione in una varietà di modelli in vitro e in vivo di danno neuronale attraverso diversi meccanismi, come la prevenzione dell'eccitotossicità mediante l'inibizione della trasmissione glutamatergica mediata da CB1, la riduzione dell'afflusso di calcio e il successivo in inibizione delle cascate deleterie, formazione di TNF-alfa e attività antiossidante. È stato suggerito che il rilascio di endocannabinoidi endogeni durante il danno neuronale potrebbe essere una risposta protettiva. Tuttavia, diverse osservazioni indicano che il ruolo del sistema endocannabinoide come sistema di protezione endogena generale è discutibile. I dati vengono esaminati criticamente e vengono fornite possibili spiegazioni.
[Effetto della miscela di betametasone butirrato propionato unguento sull'efficacia del conservante].Il 20% dei dermatologi ha riscontrato una separazione dell'acqua o un deterioramento dei corticosteroidi topici miscelato con unguenti e/o creme disponibili in commercio. Tuttavia, sono state riportate poche indagini su questo deterioramento delle miscele. Per valutare gli effetti dei conservanti nella prevenzione della contaminazione microbica di queste miscele, abbiamo tentato di studiare la concentrazione di agenti conservanti nelle miscele e contaminazione microbica di queste miscele con un unguento topico di corticosteroidi (Antebate). La concentrazione di parabeni è stata ridotta della metà utilizzando una miscela di unguento di corticosteroidi con quattro tipi di creme idratanti, Urepearl, Pastaronsoft, Hirudoid e Hirudoidsoft. Dopo altri 3 mesi, non è stata osservata alcuna diminuzione dei parabeni Nessuna contaminazione microbica è stata trovata in nessuna miscela conservata a temperatura ambiente rature per 1 settimana e toccato due volte al giorno con un dito. La concentrazione e il rapporto dei parabeni nella fase acquosa e nella fase oleosa erano completamente differenti nelle miscele prima di essere centrifugate. La fase acquosa delle miscele delle emulsioni di tipo olio/acqua (O/W) di Urepearl e Hirudoid non è risultata avere contaminazione microbica subito dopo essere stata centrifugata. Tutte le fasi acquose conservate a temperatura ambiente o in frigorifero per 1 settimana e toccate con un dito due volte al giorno hanno mostrato contaminazione microbica. Questi esperimenti hanno dimostrato che le emulsioni di tipo O/W, in cui l'acqua si separa facilmente dalle basi, dovrebbero essere accuratamente miscelate per prevenire la contaminazione microbica.
Erogazione controllata dell'aptamer anti-VEGF EYE001 con microsfere di acido poli(lattico-co-glicolico).Sviluppo di un sistema di somministrazione controllata di farmaci per l'inibizione a lungo termine del fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) e delle sue risposte mediate. Microsfere di acido poli(lattico-co-glicolico) (PLGA) contenenti anti-VEGF RNA aptamer (EYE001) formulazioni allo stato solido sono state sviluppate da un processo di evaporazione del solvente olio-in-olio Sono stati eseguiti esperimenti in vitro per caratterizzare i profili di rilascio La stabilità e la bioattività del farmaco rilasciato sono state valutate monitorando la capacità dell'aptamero di RNA di inibire la proliferazione cellulare indotta da VEGF nell'endoteliale della vena ombelicale umana cellule (HUVEC). Esperimenti di proliferazione cellulare sono stati condotti con aliquote di aptamer raccolte dopo punti temporali di rilascio a breve, medio e lungo termine. Per indagare sulla fattibilità di questo dispositivo polimerico come potenziale dispositivo di somministrazione transclerale, un apparato in vitro è stato sviluppato per valutare l'idratazione e la degradazione del polimero attraverso la sclera di coniglio e il successivo rilascio attraverso di essa. Le microsfere PLGA sono state in grado di fornire EYE001 in modo prolungato, con un tasso medio di 2 micro g/giorno in un periodo di 20 giorni. La stabilizzazione allo stato solido dell'aptamero con disaccaride trealosio prima della liofilizzazione e dell'incapsulamento in PLGA ha reso il farmaco più stabile dopo il rilascio. Esperimenti di proliferazione cellulare hanno dimostrato che la bioattività dell'aptamero è stata preservata dopo il rilascio, come indicato dall'inibizione della proliferazione delle cellule endoteliali dopo l'incubazione con VEGF. Le microsfere confezionate in una camera sigillata e poste sulla parte "orbitale" di una sclera di coniglio per un periodo di 6 giorni si sono idratate e hanno iniziato a degradarsi, come mostrato dalla microscopia elettronica a scansione (SEM). Di conseguenza, l'aptamero è stato rilasciato dalle microsfere attraverso la sclera, come determinato spettrofotometricamente. Il caricamento di microsfere contenenti aptamer in un dispositivo e il suo posizionamento sulla superficie orbitale della sclera è stato valutato e si è dimostrato fattibile. L'aptamer di RNA EYE001 incapsulato in PLGA è stato rilasciato in un periodo di 20 giorni con attività trattenuta. Questo metodo rappresenta un approccio promettente per la somministrazione transclerale di farmaci e il trattamento delle malattie della coroide e della retina.
Valutazione farmacodinamica preclinica e clinica di L-778,123, un doppio inibitore della farnesil:transferasi proteica e della geranilgeranil:transferasi proteica di tipo I.Farnesyl: Gli inibitori della proteina transferasi (FPTase) sono stati sviluppati come farmaci anti-Ras, ma non riescono a inibire l'attività del Ki-Ras perché Ki-Ras può essere modificato dalla geranilgeranil: proteina transferasi di tipo I (GGPTasi-I). di FPTase e GGPTase-I, è stato sviluppato in parte perché può inibire completamente la prenilazione di Ki-Ras. Per supportare lo sviluppo clinico di L-778,123, abbiamo sviluppato saggi farmacodinamici utilizzando cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) per misurare l'inibizione della prenilazione di HDJ2 e Rap1A, proteine che sono rispettivamente substrati di FPTasi e GGPTasi I. Abbiamo convalidato questi saggi in modelli animali e mostrato che l'inibizione della prenilazione di HDJ2 nelle PBMC di topo è correlata alla concentrazione di inibitori della FPTasi nel sangue. Nei cani, l'infusione continua o f L-778,123 ha inibito la prenilazione sia di HDJ2 che di Rap1A nelle PBMC, ma non abbiamo rilevato l'inibizione della prenilazione di Ki-Ras. Abbiamo riportato in precedenza i risultati del primo studio di Fase I L-778,123 che mostrava un'inibizione dose-dipendente della farnesilazione di HDJ2 nelle PBMC. In questo rapporto, presentiamo un'ulteriore analisi dei campioni dei pazienti di questo studio e un secondo studio di Fase I di L-778,123 e dimostriamo l'inibizione della prenilazione sia di HDJ2 che di Rap1A nei campioni di PBMC. Questo studio rappresenta la prima dimostrazione dell'inibizione della GGPTasi-I nell'uomo. Tuttavia, nei campioni dei pazienti non è stata rilevata alcuna inibizione della prenilazione di Ki-Ras da parte di L-778,123. Questi risultati confermano il profilo farmacologico di L-778,123 nell'uomo come doppio inibitore di FPTasi e GGPTasi-I, ma indicano che il bersaglio previsto del farmaco, Ki-Ras, non è stato inibito.
Contenuto di quattro componenti attivi in diverse droghe grezze commerciali e preparazioni di danshen (Salvia miltiorrhiza).Per rilevare il contenuto di quattro componenti attivi di Salvia miltiorrhiza in vari farmaci e preparati danshen grezzi disponibili in commercio. Sono stati raccolti farmaci e preparati danshen grezzi disponibili in commercio da diverse fonti, nonché pillole danshen e preparati per iniezione endovenosa contenenti danshen da solo o in combinazione con altre erbe. La composizione di questi campioni danshen è stata analizzata utilizzando HPLC. In particolare, sono state determinate le quantità di magnesio tanshinoato B (MTB), danshensu, isotanshinone HA e criptotanshinone. In alcuni di questi campioni, il contenuto di MTB è stato ulteriormente confermato mediante cromatografia liquida-spettrometro di massa tandem (LC-MS)/ Metodo MS Ci sono state grandi variazioni nella quantità dei quattro ingredienti attivi nei farmaci grezzi danshen disponibili in commercio e nelle preparazioni di farmaci in questo perno y. La quantità di MTB era la più alta tra le quattro componenti misurate nei farmaci grezzi. Tuttavia, le quantità di MTB in tutte le preparazioni danshen erano molto inferiori a quelle delle droghe grezze. I 2 componenti lipofili, isotanshinone HA e criptotanshinone, erano molto bassi o non rilevabili sia nelle preparazioni iniettabili che orali. L'MTB può essere utilizzato per standardizzare le varie forme di droghe grezze danshen e preparazioni di farmaci da diverse fonti. In considerazione della variazione delle quantità di MTB e di altri componenti, il miglioramento dei metodi di produzione dei preparati danshen è essenziale per garantire una quantità costante dei suoi principi attivi e azioni farmacologiche riproducibili.
Purificazione, clonazione, espressione e proprietà della fosfatasi trealosio-fosfato micobatterico.La fosfatasi trealosio-fosfato (TPP) è stata purificata dal citosol di Mycobacterium smegmatis quasi all'omogeneità utilizzando una varietà di passaggi convenzionali per ottenere una purificazione di circa 1600 volte con una resa di enzima attivo di circa l'1%. In base alla filtrazione su gel, l'enzima attivo aveva un peso molecolare di circa 27.000 e il più la frazione purificata ha anche fornito una banda maggiore su SDS-PAGE corrispondente ad un peso molecolare di circa 27.000. Sono stati sequenziati un certo numero di peptidi della proteina 27-kDa e queste sequenze hanno mostrato una notevole omologia con la trealosio-P fosfatasi (otsB) di Escherichia coli Sulla base di questi peptidi, il gene M. smegmatis per TPP è stato clonato ed espresso in E. coli. La proteina ricombinante è stata sintetizzata con un tag (His) (6) all'estremità amminica. La maggior parte dell'attività TPP nell'E grezzo. coli sonicato era inizialmente trovato nella frazione di membrana, ma si è solubilizzato in presenza di 0,2% Sarkosyl. La proteina solubilizzata è stata purificata fino all'apparente omogeneità su una colonna di ioni metallici e questa frazione aveva un'elevata attività di fosfatasi che era completamente specifica per il trealosio-P. L'enzima purificato, isolato da M. smegmatis o espresso in E. coli, defosforilava rapidamente il trealosio-6-P, ma non aveva essenzialmente alcuna attività su altri fosfati di zucchero o sul p-nitrofenil fosfato. Il K(m) per il trealosio-6-P era di circa 1,6 mm e il pH ottimale era di circa 7,5. L'enzima nativo ha mostrato un requisito quasi assoluto per Mg(2+) e non era molto attivo con Mn(2+), mentre entrambi questi cationi erano ugualmente efficaci con il TPP ricombinante. L'attività enzimatica è stata inibita dagli antibiotici, diumicina e moenomicina, ma non da un certo numero di altri antibiotici o analoghi del trealosio. L'attività del TPP è stata fortemente inibita dai detergenti, Sarkosyl e desossicolato, anche allo 0,025%, ma non è stata inibita da Nonidet P-40, Triton X-100 o ottil glucoside, anche a concentrazioni fino allo 0,3%. L'enzima purificato è rimasto stabile al riscaldamento a 60 gradi C per un massimo di 6 minuti, ma è stato lentamente inattivato a 70 gradi C. Gli studi di dicroismo circolare sul TPP ricombinante indicano che la struttura secondaria di questa proteina ha un considerevole foglio pieghettato beta ed è molto compatta. Il TPP può svolgere un ruolo chiave nella biosintesi dei composti del trealosio, come i micolati di trealosio, e quindi può rappresentare un eccellente sito bersaglio per la chemioterapia contro la tubercolosi e altre malattie micobatteriche.
pH Dipendenza degli inibitori mirati all'ansa occlusiva della catepsina B.Inibitori potenti e selettivi della catepsina B sono stati precedentemente sintetizzati sulla base del prodotto naturale cisteina proteasi inibitore E-64. I dati sui cristalli a raggi X indicano che questi composti interagiscono attraverso il loro carbossilato libero con i residui di istidina caricati positivamente situati sul lato principale del sito attivo all'interno dell'ansa occlusiva della catepsina B. Qui, esaminiamo la dipendenza dal pH di due composti che legano il lato principale. In ogni caso vi è una drastica diminuzione di k(inact)/K(I) quando il pH viene aumentato da 4 a 7,8 corrispondente a una singola ionizzazione di pK(a) 4,4. Questi risultati suggeriscono che il targeting dell'ansa occlusiva della catepsina B può essere una strategia di progettazione dell'inibitore scadente se l'ambiente enzimatico ha un pH maggiore di 5,5. Tuttavia, questo tipo di inibitore può essere uno strumento utile per aiutare a chiarire il ruolo e l'ambiente della catepsina B nell'invasione dei tumori".
Anandamide e noladin etere prevengono la neurotossicità del peptide beta-amiloide umano.Agonisti del recettore dei cannabinoidi tra cui anandamide e noladina sono stati recentemente suggeriti per mostrare neuroprotezione proprietà. Si pensa che il peptide beta-amiloide (Abeta) sia responsabile dei cambiamenti neurodegenerativi associati alla patologia della malattia di Alzheimer. Questo studio caratterizza gli effetti dell'anandamide e dell'etere noladina sulla neurotossicità di Abeta nella linea cellulare differenziata di teratocarcinoma umano, Ntera neuroni 2/cl-D1. Anandamide e noladin ether, a concentrazioni nanomolari, hanno mostrato un'inibizione concentrazione-dipendente della tossicità di Abeta. Un antagonista del recettore dei cannabinoidi CB (1), AM251, ha impedito gli effetti protettivi di anandamide e noladin ether. La protein chinasi attivata da mitogeni L'inibitore della via MAPK PD98059 ha anche impedito gli effetti protettivi dei cannabinoidi e dell'ormone di rilascio della corticotropina. est che l'attivazione della via MAPK da parte dei cannabinoidi o dell'ormone di rilascio della corticotropina potrebbe essere utilizzata per prevenire la neurodegenerazione indotta dal peptide Abeta.
Confronto tra la stabilità enzimatica e gli effetti sulla pressione intraoculare di 2-arachidonylglycerol e noladin ether, un nuovo endocannabinoide putativo.I cannabinoidi endogeni N-arachidonylethanolamide ( AEA) e 2-arachidonilglicerolo (2-AG) sono noti per ridurre la pressione intraoculare (IOP). Recentemente, un nuovo cannabinoide endogeno putativo, noladin ether, è stato isolato nel cervello di suino e ratto. sono stati confrontati i cannabinoidi nei tessuti oculari e l'effetto sulla IOP di 2-AG e noladin ether I tassi di degradazione enzimatica per AEA, 2-AG e noladin ether sono stati determinati negli omogenati della cornea bovina e dell'iride-corpo ciliare. noladin ether sono stati disciolti in idrossipropil-beta-ciclodestrina (HP-beta-CD) o glicole propilenico e somministrati unilateralmente nell'occhio del coniglio. La IOP è stata misurata negli occhi trattati e non trattati. L'antagonista del recettore CB1 AM251 è stato somministrato per via topica ly 15 minuti prima dei cannabinoidi per indagare se i recettori CB1 mediano l'effetto sulla IOP prodotto da 2-AG e noladin etere. L'etere di noladina si è degradato più lentamente del 2-AG o dell'AEA nel corpo iride-ciliare e negli omogenati della cornea. L'effetto sulla IOP di 2-AG era bifasico (cioè un aumento iniziale della IOP seguito da una riduzione dell'occhio trattato). L'etere noladino ha ridotto la IOP immediatamente dopo la somministrazione topica e non è stato osservato alcun aumento iniziale della IOP nell'occhio trattato. L'antagonista del recettore CB1 AM251 (25 micro g) ha bloccato l'effetto sulla IOP di noladin ether ma non ha influenzato l'azione di 2-AG. La somministrazione topica del nuovo cannabinoide endogeno putativo noladin ether ha ridotto la IOP nei conigli. Questa riduzione della IOP è stata molto probabilmente mediata dal recettore CB1. L'effetto sulla IOP del noladin etere differiva da quelli dei noti cannabinoidi endogeni AEA e 2-AG, probabilmente a causa della sua struttura chimica più stabile.
Fase I e studio farmacocinetico del nuovo analogo del taxano BMS-184476 somministrato settimanalmente in pazienti con neoplasie avanzate.Lo studio è stato progettato per stabilire il massimo dose somministrata e dose massima tollerata (MTD) di BMS-184476, un analogo del paclitaxel, somministrato settimanalmente per 3 settimane consecutive ogni 28 giorni, successivamente modificato in un regime di somministrazione settimanale per 2 settimane consecutive ogni 21 giorni. Pazienti adulti con tumori solidi ricevuto BMS-184476 iv nei giorni 1, 8 e 15 senza premedicazione. Lo studio ha seguito un disegno di titolazione accelerata modificato. Sono state studiate dosi di 7, 14, 28, 40, 50 e 60 mg/m2/settimana. La farmacocinetica di BMS-184476 nel plasma e nelle urine è stata studiata mediante un test di cromatografia liquida ad alte prestazioni. Cinquantatré pazienti sono stati trattati; la dose massima somministrata era di 60 mg/m²/settimana e la MTD era di 50 mg/m²( 2)/settimana. La neutropenia dose-limitante è stata la principale tossicità. Neutropenia ai livelli di dose più alti frequ ha impedito in modo efficace la somministrazione della dose del giorno 15 ed è stato valutato un programma modificato al dosaggio MTD nei giorni 1 e 8 ogni 21 giorni e ritenuto più fattibile per gli studi di fase II. La diarrea era la principale tossicità non ematologica; altre tossicità erano vomito, stanchezza cumulativa e perdita di appetito. Due pazienti sono deceduti per complicanze correlate alla neutropenia. L'attività antitumorale è stata osservata in pazienti con carcinoma mammario e non a piccole cellule del polmone, con risposte parziali confermate nel 22% dei pazienti. BMS-184476 era la principale specie trovata nel plasma con <5% presente come paclitaxel o metaboliti del solfossido. I PK di BMS-184476 sembravano essere lineari nell'intervallo di dosi di 7-60 mg/m(2). La dose raccomandata e il programma settimanale di BMS-184476 sono 50 mg/m(2) nei giorni 1 e 8 ogni 21 giorni.
Indagine sul bisfenolo A e bisfenolo F negli alimenti in scatola.Il bisfenolo A (BPA) e il bisfenolo F (BPF) sono stati determinati in un intervallo di cibi in scatola. Sessantadue diversi cibi in scatola sono stati acquistati dai punti vendita al dettaglio nel Regno Unito da gennaio a novembre 2000 e il contenuto è stato estratto e analizzato mediante GC-MS per gli isomeri BPA e BPF. Sono stati analizzati i seguenti prodotti in scatola: pesce in mezzo acquoso, 10 campioni; verdura, 10; bevande, 11; zuppa, 10; dessert, cinque; frutta, due; latte artificiale, quattro; pasta, cinque; e prodotti a base di carne, 5. Gli isomeri BPF non sono stati rilevati in nessuno degli alimenti in scatola con limiti di rilevazione di 0,005 mg kg(-1) per gli isomeri 2,2\' e 2,4\' e 0,01 mg kg(-1) per l'isomero 4,4\'. Il BPA è stato rilevato in 38 campioni con un rilevamento limite di 0,002 mg kg(-1). Di questi, il BPA è stato quantificato in 37 alimenti in scatola a livelli da 0,007 mg kg(-1), con un campione di carne contenente un livello medio di 0,38 mg kg(-1). altri campioni co ntenuto <0,07 mg kg(-1) BPA.
Revisioni sistematiche in endocrinologia. The Cochrane Metabolism and Endocrine Disorders Review Group.The Cochrane Collaboration è un'organizzazione internazionale senza scopo di lucro che mira a -dare informazioni accurate sugli effetti dell'assistenza sanitaria prontamente disponibili in tutto il mondo preparando, mantenendo e diffondendo revisioni sistematiche degli effetti dell'assistenza sanitaria. La preoccupazione principale del Cochrane Metabolism, Endocrinology, and Diabetes Review Group è la valutazione di studi randomizzati controllati e altri confronti controllati di interventi sanitari rilevanti per la prevenzione, il trattamento o la gestione e la riabilitazione di disturbi metabolici, nutrizionali ed endocrini. Questo articolo discute il ruolo delle revisioni sistematiche e delle metaanalisi e invita le parti interessate a essere coinvolte e a contribuire.
Pteropodine e isopteropodine modulano positivamente la funzione dei recettori muscarinici M(1) e 5-HT(2) di ratto espressi nell'ovocita di Xenopus.Pteropodine e isopteropodine sono componenti alcaloidi ossindolici di tipo eteroyohimbina di Uncaria tomentosa (Willd. ) DC, una pianta medicinale peruviana nota come artiglio di gatto. In questo studio, gli effetti di questi alcaloidi sulla funzione di Cl(2+)-attivato -) le correnti evocate dalla stimolazione dei recettori muscarinici M(1) acetilcolina e 5-HT(2) accoppiati a proteine G sono state studiate in ovociti di Xenopus in cui è stato tradotto l'RNA totale della corteccia di ratto. inducono la corrente di membrana da soli. Tuttavia, questi alcaloidi hanno notevolmente migliorato le risposte attuali evocate sia dall'acetilcolina che dalla 5-idrossiiptamina (5-HT) in modo dipendente dalla concentrazione e reversibile con i massimi effetti a 30 microM. Pteropodine e isopteropodine hanno prodotto 2.7- e aumenta di 3,3 volte in la risposta all'acetilcolina con valori di EC(50) di 9,52 e 9,92 microM, rispettivamente, e aumenti di 2,4 e 2,5 volte nella risposta 5-HT con valori di EC(50) di 13,5 e 14,5 microM, rispettivamente. Al contrario, negli ovociti iniettati con RNA totale dal cervelletto di ratto o dal midollo spinale, nessuno dei due alcaloidi ha avuto un effetto sulle risposte della corrente metabotropica mediate dai recettori del glutammato (1 e 5) (mGlu (1/5)) o sulle risposte ionotropiche mediate da N-metil-D-aspartato, acido kainico o glicina. Pteropodine e isopteropodine (10 microM) hanno ridotto significativamente i valori EC(50) di acetilcolina e 5-HT che hanno suscitato risposte correnti, ma non hanno avuto alcun effetto sulle risposte correnti massime suscitate da acetilcolina e 5-HT. D'altra parte, la mitrafillina, uno stereoisomero della pteropodina, non è riuscita a modulare le risposte indotte dall'acetilcolina e dalla 5-HT. Questi risultati suggeriscono che pteropodine e isopteropodine agiscono come modulatori positivi dei recettori muscarinici M(1) e 5-HT(2).
Determinazione spettrofotometrica della fenilefrina cloridrato nei prodotti farmaceutici mediante analisi per iniezione a flusso sfruttando la reazione con ferricianuro di potassio e 4-amminoantipirina.Questo documento presenta un metodo per la determinazione della fenilefrina cloridrato nei prodotti farmaceutici mediante analisi spettrofotometrica per iniezione in flusso sfruttando la reazione con ferricianuro di potassio e 4-amminoantipirina, che porta alla formazione di un prodotto di condensazione con forte assorbenza a 500 nm. Il range dinamico lineare era compreso tra 0,95 e 9 mg/L , con un limite di rilevamento di 0,2 mg/L e una velocità di campionamento di 120 campioni all'ora. Il metodo è stato applicato a colliri e medicinali liquidi decongestionanti nasali.
Inibitori della farnesil transferasi come agenti antitumorali.La farnesilazione proteica catalizzata dall'enzima farnesil protein transferasi comporta l'aggiunta di un gruppo farnesilico a 15 atomi di carbonio all'aminoacido conservato residui acidi al terminale carbossilico di alcune proteine I substrati proteici della farnesil transferasi includono diverse proteine G, che sono intermedi critici della segnalazione cellulare e dell'organizzazione citoscheletrica come Ras, Rho, PxF e le lamine A e B. Le proteine Ras attivate innescano una cascata di eventi di fosforilazione attraverso l'attivazione sequenziale della via PI3 chinasi/AKT, che è fondamentale per la sopravvivenza cellulare, e la via della chinasi Raf/Mek/Erk che è stata implicata nella proliferazione cellulare. % di tumori umani Poiché la farnesilazione di Ras è necessaria per la sua attività di trasformazione e proliferazione, gli inibitori della proteina transferasi farnesil sono stati progettati come agenti acerrimi per abrogare la funzione di Ras. Tuttavia, le prove attuali suggeriscono che l'attività antitumorale degli inibitori della farnesil transferasi potrebbe non essere semplicemente dovuta all'inibizione di Ras. Questa recensione discuterà i dati clinici disponibili su tre di questi agenti che sono attualmente in fase di sperimentazione clinica.
Identificazione mediante espressione eterologa e distruzione genica di VisA come L-lisina 2-aminotransferasi essenziale per la biosintesi della virginiamicina S in Streptomyces virginiae.Il gene visA di Streptomyces virginiae è stato pensato per essere una parte del cluster di geni biosintetici della virginiamicina S (VS) in base alla sua posizione nel mezzo di geni che codificano per enzimi molto simili a quelli che partecipano alla biosintesi degli antibiotici di tipo streptogramina. gene è stato ottenuto in Escherichia coli da una fusione N-terminale con tioredossina (TrxA), e la proteina VisA ricombinante intatta (rVisA) è stata purificata dopo la scissione con enterochinasi per rimuovere la frazione TrxA. La rVisA purificata ha mostrato chiara L-lisina 2-aminotransferasi attività con un pH ottimale di circa 8,0 e una temperatura ottimale a 35 gradi C, con 2-ossoesanoato come miglior accettore amminico, indicando che VisA converte L-lisina in Delta (1)-piperidina 2-ca acido rbossilico. Un mutante di delezione visA di S. virginiae è stato creato mediante ricombinazione omologa e la funzione in vivo del gene visA è stata studiata mediante confronto fenotipico tra il tipo selvatico e il mutante di delezione visA. Non sono state osservate differenze nella crescita in terreni liquidi o nel comportamento morfologico su terreni solidi, indicando che visA non è coinvolto nel metabolismo primario o nella differenziazione morfologica. Tuttavia, il mutante visA non è riuscito a produrre VS mantenendo la produzione di virginiamicina M(1) a un livello paragonabile a quello del ceppo parentale wild-type, dimostrando che visA è essenziale per la biosintesi di VS. Questi risultati, insieme al recupero osservato del difetto nella produzione di VS mediante l'aggiunta esterna di acido 3-idrossipicolinico (3-HPA), una molecola di partenza nella biosintesi di VS, suggeriscono che VisA è il primo enzima della via biosintetica di VS e che fornisce 3-HPA dalla L-lisina.
[Birra e malattie cardiovascolari. Revisione bibliografica sistematica (meta-analisi)].Gli obiettivi del presente studio sono: Effettuare un revisione della letteratura stampata sul consumo di birra e sui suoi possibili effetti sulla salute umana. Analizzare la possibilità di applicare tecniche utilizzate negli studi epidemiologici considerando la meta-analisi come l'elemento più importante. La meta-analisi è un insieme di diverse tecniche statistiche che mirano a ottenere una sintesi quantitativa e qualitativa dei risultati di diversi studi indipendenti sullo stesso argomento. Per prima cosa si procede alla ricerca e alla compilazione bibliografica tramite le seguenti Date-Bases: Medline, Embase e Toxline. Birra è usata come parola chiave , specificando il periodo di tempo compreso tra gennaio 1998 e maggio 2000. Sono stati ottenuti un totale di 403 opere di riferimento e sottoposte ai corrispondenti criteri di inclusione ed esclusione La meta-analisi degli studi selezionati riguarda ed alle malattie cardiovascolari fornisce un OR di 0,89 (0,89-0,97) che mostra che il gruppo a rischio si ammala in meno casi rispetto ai non esposti. Consumo di birra: possibile fattore di protezione cardiovascolare. Tuttavia dobbiamo prendere questa considerazione con la massima cautela possibile. È necessario determinare gli effetti del consumo di birra sulla popolazione spagnola.
S-Isopetasin, un sesquiterpene di Petasites formosanus, antagonizzato allostericamente carbacolo in atri isolati di cavia.Abbiamo studiato l'effetto antimuscarinico di S-isopetasin in atri isolati di cavia per chiarire se agisce preferenzialmente sui recettori muscarinici M 2 o M 3. I cambiamenti di tensione degli atri isolati sono stati registrati isometricamente su un poligrafo. La S-isopetasina a 50 e 100 microM ha inibito significativamente le linee di base della tensione contrattile e della frequenza cardiaca, ma l'atropina a 1 microM ha potenziato entrambi S-Isopetasina (10 - 100 microM) non ha alterato significativamente le curve di risposta inotropa concentrazione-negativa del carbacolo (CCh) nell'atrio sinistro S-Isopetasina (10 - 100 microM) antagonizzata allostericamente inotropo negativo e cronotrope indotte da CCh negli atri destri battenti spontaneamente, sulla base di pendenze dei grafici di Schild significativamente differenti dall'unità. Al contrario, l'atropina (0,01 - 1 microM) antagonizza competitivamente d tutte le risposte di cui sopra a CCh. I valori di pA2 della S-isopetasina erano significativamente inferiori a quelli della S-isopetasina nella tracheale di cavia, suggerendo che la S-isopetasina può agire preferenzialmente sui recettori M3 muscarinici tracheali, ma non sui recettori M2 muscarinici cardiaci. Tuttavia, l'atropina non agisce preferenzialmente né l'una né l'altra. Questa scoperta rivela che la S-isopetasina può avere benefici nel trattamento dell'asma.
Farmacocinetica di interconversione dell'eplerenone, un bloccante selettivo dell'aldosterone, e della sua forma aperta ad anello lattonico.Farmacocinetica di interconversione dell'eplerenone e del suo anello lattonico aperto forma, SC-70303, sono stati esaminati nei cani utilizzando un metodo isotopico stabile [13CD3] EP e SC-70303 sono stati co-somministrati per via orale (10 mg/kg) e per via endovenosa (5 mg/kg) come soluzioni acquose in condizioni di digiuno. Dopo IV somministrazione di [13CD3]EP, l'AUC media di [13CD3]EP era 16,0 ore microg/mL, mentre C(max), T(max) e AUC per l'acido [13CD3]SC-70303 erano 0,744 microg/mL rispettivamente, 0,5 h e 3,49 h. L'AUC per EP era rispettivamente di 2,26 microg/mL, 0,5 h e 9,48 h. microg/mL Dopo somministrazione orale di [13CD3]EP, C(max), T(max) e AUC per [13CD3]EP erano 6,01 microg/mL, 0,5 h e 27,7 h. microg/mL, rispettivamente, e il co i valori corrispondenti per l'acido [13CD3]SC-70303 erano 0,972 microg/mL, 0,75 h e 5,52 h. microg/ml, rispettivamente. Dopo somministrazione orale di SC-70303, C(max), T(max) e AUC per EP erano 1,38 microg/mL, 0,83 h e 9,29 h. microg/mL, rispettivamente, e i valori corrispondenti per l'acido SC-70303 erano 0,330 microg/mL, 0,67 h e 2,19 h. microg/ml, rispettivamente. La disponibilità sistemica era del 90% per [13CD3]EP e del 17,5% per l'acido SC-70303. L'acido EP e SC-70303 erano rapidamente interconvertibili nel cane. La percentuale di dose convertita in acido [13CD3]SC-70303 dopo somministrazione endovenosa. somministrazione di [13CD3]EP è stata del 55,0%, mentre la percentuale di dose convertita in EP dopo somministrazione endovenosa. la somministrazione di SC-70303 è stata del 60,2%.
Collaborazione internazionale nella conduzione di revisioni sistematiche: il Cochrane Collaborative Review Group on HIV Infection and AIDS.Per prendere decisioni sane in materia di assistenza sanitaria, responsabili politici, fornitori e i ricercatori hanno bisogno di accedere ai risultati della ricerca rilevanti. Il ruolo delle revisioni sistematiche è sempre più riconosciuto come un importante contributo nel processo decisionale sanitario basato sull'evidenza e sono in corso diversi sforzi di revisione, incluso quello della Cochrane Collaboration internazionale. Review Group on HIV Infection and AIDS (CRG on HIV/AIDS), conduce revisioni sistematiche sulla prevenzione e il trattamento dell'infezione da HIV e dell'AIDS ed è guidato dai principi della Cochrane Collaboration, che includono la riduzione al minimo di potenziali distorsioni, la garanzia della qualità nel processo di revisione, mantenendo le revisioni aggiornate e migliorando la collaborazione Il progetto CDC HIV/AIDS Prevention Research Synthesis (PRS) sta lavorando a stretto contatto con il CRG o n HIV/AIDS per produrre revisioni Cochrane degli interventi di prevenzione comportamentale e sullo sviluppo e il mantenimento di un database elettronico cumulativo centralizzato di studi sulla prevenzione comportamentale dell'HIV/AIDS. Le revisioni sistematiche possono svolgere un ruolo importante nel promuovere politiche e pratiche basate sull'evidenza nella prevenzione e nella cura dell'HIV/AIDS.
Effetti della carbamazepina e dei nuovi derivati della 10,11-diidro-5H-dibenz[b,f]azepina-5-carbossammide sulla trasmissione sinaptica in fettine di ippocampo di ratto.Gli effetti della carbamazepina sulla trasmissione sinaptica in fettine di ippocampo di ratto sono stati confrontati con quelli di due nuovi analoghi (BIA2-093 e BIA2-024) con efficacia anticonvulsivante equivalente ma con minori effetti collaterali. Carbamazepina (10-1000 microM) inibita in modo concentrazione-dipendente la risposta del potenziale postsinaptico eccitatorio di campo (fPSP), con una EC50 di 263 microM, e attenuava anche la scarica presinaptica con un valore di EC50 simile. La carbamazepina era più potente nell'inibire la componente del recettore NMDA della fPSP (fPSPNMDA ), con una EC50 di 160 microM. BIA2-093 e BIA2-024 erano quasi equipotenti con carbamazepina per inibire la trasmissione sinaptica e mostravano una potenza simile per inibire le risposte fPSP (EC50 di 145 microM e 205 microM) e fPSPNMDA (EC50 di 198 microM e 2 06 microM). Come con la carbamazepina, anche BIA2-093 e BIA2-024 hanno attenuato la scarica presinaptica con valori di EC50 compresi tra 142 e 322 microM. Questi risultati indicano che la carbamazepina e i suoi analoghi inibiscono principalmente la trasmissione sinaptica attraverso l'inibizione della conduzione, sebbene la carbamazepina, ma non BIA2-093 e BIA2-024, possa anche deprimere le risposte mediate dal recettore NMDA.
DM235 (sunifiram): un nuovo nootropico con potenziale come potenziatore cognitivo.DM235 (sunifiram), un nuovo composto strutturalmente correlato al piracetam, prevenuto l'amnesia indotta da scopolamina (1,5 mg kg(-1) ip), dopo somministrazione intraperitoneale (0,001-0,1 mg kg(-1)) o orale (0,01-0,1 mg kg(-1)), come dimostrato da un evitamento passivo test nei topi L'effetto antiamnesico del DM235 era paragonabile a quello di noti farmaci nootropici come piracetam (30-100 mg kg (-1) ip), aniracetam (100 mg kg (-1) PO) o rolipram (30 mg kg(-1) PO). Il DM235 previene anche la mecamilamina (20 mg kg(-1) ip)-, il baclofen (2 mg kg(-1) ip)- e la clonidina (0,125 mg kg(-1) ip)- ha indotto l'amnesia nello stesso test. Nel test Morris water maze con i ratti, la scopolamina (0,8 mg kg(-1) ip) ha inibito la riduzione della latenza di fuga sia nei test di acquisizione che di ritenzione/riqualificazione. DM235 (0,1 mg kg(-1 ) ip), 20 min prima di ogni allenamento di acquisizione giornaliero, impediva lo scopo compromissione della memoria indotta dalla lamina. DM235 (1 mg kg(-1) i. p. ) ha anche ridotto la durata dell'ipnosi indotta da pentobarbitale nei topi senza modificare il tempo di induzione dell'ipnosi. Alle dosi efficaci più elevate, il composto studiato non ha alterato la coordinazione motoria (test rota-rod), né ha modificato la motilità spontanea e l'attività ispettiva (test Animex e hole board). Questi risultati indicano che DM235, un composto strutturalmente correlato al piracetam, è un nuovo nootropico dotato della capacità di prevenire deficit cognitivi a dosi molto basse. In effetti, la sua potenza è circa 1.000 volte superiore a quella dei composti più attivi simili al piracetam.
Inibizione della fosforilazione della tirosina del recettore beta PDGF e della sua via di trasduzione del segnale intracellulare a valle nelle cellule muscolari lisce vascolari di ratto e umane da parte di diverse catechine.Anormale proliferazione delle cellule muscolari lisce vascolari (VSMC) e il fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGF) svolge un ruolo importante nello sviluppo di malattie cardiovascolari proliferative. In questo studio, mostriamo che il trattamento di ratto e VSMC aortico umano con 50 microM Il 2-(3,4-diidrossifenil)-3,4-diidro-2H-1-benzopiran-3,5,7-triolo (catechina) e l'epicatechina (EC) non inibiscono la via di trasduzione del segnale intracellulare attivata dal PDGF-Rb e crescita VSMC Al contrario, 10-50 microM epigallocatechina-3 gallato (EGCG), epicatechina-3 gallato (ECG) e catechina-3 gallato (CG), che hanno tutti un gruppo galloile nella posizione 3 della catechina struttura, inibiscono efficacemente la fosforilazione della tirosina di PDGF-Rb, PI 3\'-K e PLC-gamma1, nonché un s l'aumento di [Ca2+]i indotto da PDGF-BB. L'aumento indotto da PDGF-BB nella sintesi del DNA e nel numero di cellule è stato inibito da ECG, EGCG e CG, ma non da catechina ed EC. L'epigallocatechina (EGC) che ha un gruppo galloile in posizione 2 ha inibito efficacemente la crescita di VSMC senza influenzare la via del segnale PDGF-Rb. Una riduzione del 45% e del 70% del numero di cellule intimali e mediali nella fase S, rispettivamente, è stata osservata nell'arteria carotide sinistra danneggiata da catetere 7 giorni dopo il trattamento di ratti Wistar Kyoto con 10 mg/die di EGCG. Questi risultati suggeriscono che il gruppo galloile nella posizione P3 della struttura della catechina è essenziale per inibire la via di trasduzione del segnale intracellulare mediata da PDGF-Rbeta.
Miglioramento dell'estrazione e della pulizia del campione per la determinazione GC-MS di BADGE e BFDGE in olio vegetale.È stato stabilito un metodo semplice per la determinazione dei contaminanti di migrazione nell'olio di oliva con un'attenzione particolare ai due composti di migrazione del rivestimento delle lattine bisfenolo A diglicidil etere (BADGE) e bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE). La preparazione del campione preferita era una singola estrazione liquido-liquido dei composti dall'olio in 20% (v/v) metanolo in acetonitrile, seguito da clean-up con estrazione in fase solida su amminopropile legato a silice. Questa procedura di purificazione ha rimosso selettivamente tutti gli acidi grassi liberi dagli estratti senza rimuovere i composti fenolici di interesse. colonne di estrazione di fase sono state utilizzate molte volte implementando una procedura di lavaggio degli acidi grassi fortemente trattenuti con acido acetico al 2% in metanolo. Gascromatografia accoppiata con spettro di massa a ionizzazione elettronica a scansione completa (m/z 33-700) metrica è stata utilizzata per la determinazione di diversi composti modello in campioni di olio d'oliva. BADGE e BFDGE potrebbero essere determinati nell'intervallo 0,05-2 mg kg(-1) in campioni di olio con una DS relativa di <6% (sei repliche). Il metodo è stato utilizzato in una campagna di controllo per l'Autorità norvegese per il controllo degli alimenti per analizzare campioni di olio vegetale da conserve di pesce sott'olio.
Proteine leganti la penicillina bifunzionali: focus sul dominio della glicosiltransferasi e sul suo specifico inibitore moenomicina.Antibiotici beta-lattamici e glicopeptidi diretti contro gli enzimi coinvolti nei batteri sintesi della parete cellulare hanno generato resistenza batterica. La ricerca di nuove molecole antibiotiche è ampiamente focalizzata sulle proteine leganti la penicillina (PBPs), con particolare enfasi sulla loro attività glicosiltransferasica. Questa funzione catalizza la polimerizzazione della catena glicanica del peptidoglicano della parete cellulare. Questa recensione riassume recenti risultati sulla caratterizzazione biochimica delle PBP bifunzionali e sulle proprietà enzimatiche del dominio glicosiltransferasico La moenomicina, un inibitore dell'attività glicosiltransferasica ben studiato, ha fornito utili informazioni sulle proprietà di legame lipidico e sul ruolo cellulare delle PBP bifunzionali. Questi enzimi hanno dimostrato di essere parte del multienzimatico complesso coinvolto nella biosintesi del peptidoglicano. Inoltre, le PBP bifunzionali sono presenti anche nel complesso proteico situato nel sito di settazione durante la divisione cellulare. Il dominio della glicosiltransferasi delle PBP bifunzionali rimane caratterizzato in modo insufficiente: l'analisi strutturale può portare allo sviluppo di nuovi antibatterici e alla comprensione delle proprietà enzimatiche, mentre studi genetici e cellulari focalizzati sulle PBP bifunzionali forniranno un patrimonio di conoscenze sulla crescita e la divisione cellulare.
[Nuovi taxani e derivati dell'epotilone negli studi clinici].Questa recensione descrive le proprietà sperimentali e cliniche di nuovi taxani ed epotiloni. Sei nuovi taxani sono attualmente in sperimentazione clinica: BMS 184476, BMS 188797, BMS 275183, IDN 5109/BAY 598862, RPR 109881A e RPR 116258 Tutti questi derivati condividono la stessa caratteristica che è un ridotto riconoscimento da parte di Pgp-170, il prodotto del gene MDR1. conferisce proprietà innovative come attività in vitro e in vivo sui tumori che esprimono l'attività della Pgp-170 per via orale. L'identificazione di altre famiglie di molecole aventi lo stesso meccanismo d'azione del taxolo è stato un obiettivo perseguito da molti gruppi. La scoperta di epotilone ha portato allo sviluppo farmaceutico di due molecole: EPO 906 (che corrisponde al composto naturale epotilone B) e BMS 247550. Gli studi clinici di fase I hanno stabilito che tutti questi farmaci sperimentali (taxani ed epotiloni) possono essere sicuri ly somministrato nei pazienti, la tossicità limitante essendo la maggior parte del tempo neutropenia febbrile. Sono state notate molte risposte tumorali.
Uno studio di Fase I sull'inibitore della farnesiltransferasi L-778,123 e sulla radioterapia per il cancro del polmone e della testa e del collo localmente avanzato.Dati preclinici hanno dimostrato che gli inibitori della farnesiltransferasi (FTI) sono sensibilizzanti alle radiazioni in linee cellulari selezionate. L'obiettivo di questo studio di Fase I era determinare la dose massima tollerata di FTI L-778,123 in combinazione con la radioterapia nel carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) e nel carcinoma della testa e del collo (HNC). L-778,123 è stato somministrato mediante infusione endovenosa continua e la dose è stata aumentata in combinazione con la radioterapia standard. La presenza di una mutazione ras non era richiesta per l'ingresso nello studio. Nove pazienti (sei pazienti con NSCLC e tre pazienti con HNC) sono stati arruolati in due livelli di dose di FTI Non sono state osservate tossicità dose-limitanti al primo livello di dose di 280 mg/m2/die durante le settimane 1, 2, 4 e 5. Un episodio di tossicità dose-limitante, neutropenia di grado IV, è stato osservato in uno dei tre pa pazienti trattati a 560 mg/m2/die durante le settimane 1, 2, 4, 5 e 7. Non sono stati osservati episodi di mucosite dose-limitante, esofagite o polmonite. Dei quattro pazienti con NSCLC con malattia valutabile, tre pazienti hanno avuto una risposta completa al trattamento e un paziente ha avuto una risposta parziale. Una risposta clinica completa al trattamento è stata osservata in due pazienti con HNC. Studi in vitro su cellule tumorali ottenute da un paziente con NSCLC in questo studio hanno mostrato radiosensibilizzazione con FTI e che le cellule tumorali si sono accumulate in G2-M dopo il trattamento con L-778,123. La combinazione di L-778,123 e radioterapia al livello di dose 1 è associata a tossicità accettabile. Risposte locali sono state osservate in quattro pazienti con NSCLC senza un chiaro aumento delle tossicità associate alla radioterapia.
Antociani da ribes nero (Ribes nigrum L.).Sono riportate quindici strutture antocianiche da un estratto di bacche di ribes nero (Ribes nigrum L. ) Questi sono i 3-O-glucosidi e i 3-O-rutinosidi di pelargonidina, cianidina, peonidina, delfinidina, petunidina e malvidina, cianidina 3-O-arabinoside e 3-O- (6\' \'- p-cumaroilglucoside) di cianidina e delfinidina. Gli antociani sono stati caratterizzati mediante cromatografia ad esclusione dimensionale, cromatografia liquida ad alta prestazione, spettroscopia UV-visibile e spettrometria di massa elettrospray. I quattro pigmenti principali (i 3-O-glucosidi e il 3-O-rutinosidi di delfinidina e cianidina) costituivano >97% del contenuto totale di antociani. I pigmenti minori sono stati arricchiti dall'estratto mediante successiva partizione contro acetato di etile e frazionamento su gel. Queste fasi cromatografiche sono state utilizzate con successo per isolare l'acilato antociani dallo strato di acetato di etile an d per separare la cianidina 3-O-arabinoside dalla miscela di antociani. Le quantità di antociani rutinosidi sono risultate superiori alla quantità dei corrispondenti glucosidi per tutti i pigmenti rilevati aventi la stessa frazione aglicone.
Prevenzione del danno ossidativo mitocondriale mediante antiossidanti mirati.Sono stati sviluppati antiossidanti mirati ai mitocondri che bloccano selettivamente il danno ossidativo mitocondriale e prevengono alcuni tipi di morte cellulare Questi antiossidanti sono derivati dell'ubichinone e del tocoferolo e sono mirati ai mitocondri mediante attaccamento covalente a un catione lipofilo trifenilfosfonio. L'ubichinone localizzato nei mitocondri proteggeva anche le cellule di mammifero dall'apoptosi indotta dal perossido di idrogeno, mentre un analogo dell'ubichinone non mirato era inefficace contro l'apoptosi Quando somministrato ai topi, questi composti si accumulavano nel cervello, nel cuore e nel fegato; pertanto, utilizzando questi antiossidanti mirati ai mitocondri può aiutare le indagini di il ruolo del danno ossidativo mitocondriale in modelli animali di invecchiamento.
Il tè verde e le sue catechine inibiscono gli xenotrapianti di cancro al seno.I ricercatori hanno dimostrato che il tè verde può ridurre il rischio di cancro. È ampiamente accettato che il principale componente attivo del tè verde è l'epigallocatechina-3-gallato (EGCG). In questo studio, abbiamo esaminato l'effetto del tè verde sulla crescita del cancro al seno e sulle cellule endoteliali in saggi in vitro e in modelli animali. Inoltre, abbiamo confrontato la potenza di i diversi componenti della catechina dell'estratto di tè verde (GTE), incluso l'EGCG. I nostri dati hanno mostrato che la GTE mista e i suoi singoli componenti della catechina erano efficaci nell'inibire il cancro al seno e la proliferazione delle cellule endoteliali. Negli esperimenti sui topi, la GTE ha soppresso le dimensioni dello xenotrapianto e ha ridotto il vaso tumorale densità. I nostri risultati hanno dimostrato il valore di tutte le catechine e hanno sostenuto l'uso di un GTE misto come integratore alimentare botanico, piuttosto che EGCG purificato, in futuri studi clinici.
Meccanismi d'azione della carbamazepina e dei suoi derivati, oxcarbazepina, BIA 2-093 e BIA 2-024.La carbamazepina (CBZ) è stata ampiamente utilizzato nel trattamento dell'epilessia, così come nel trattamento del dolore neuropatico e dei disturbi affettivi. Tuttavia, i meccanismi d'azione di questo farmaco non sono completamente chiariti e sono ancora oggetto di dibattito. Poiché CBZ non è molto efficace in alcuni epilettici pazienti e possono causare diversi effetti avversi, diversi farmaci antiepilettici sono stati sviluppati dalla variazione strutturale di CBZ, come l'oxcarbazepina (OXC), che viene utilizzata nel trattamento dell'epilessia dal 1990. (S)-(-)-10-acetossi- 10,11-diidro-5H-dibenz[b,f]azepina-5-carbossammide (BIA 2-093) e 10,11-diidro-10-idrossiimmino-5H-dibenz[b,f] azepina-5-carbossammide ( BIA 2-024), che sono stati recentemente sviluppati da BIAL, sono nuovi farmaci antiepilettici putativi, con alcune proprietà migliorate. In questa recensione, ci concentreremo sui meccanismi d'azione del CB Z e suoi derivati, OXC, BIA 2-093 e BIA 2-024. I dati disponibili indicano che l'efficacia anticonvulsivante di questi farmaci antiepilettici è principalmente dovuta all'inibizione dell'attività del canale del sodio.
Valutazione clinica preclinica e di fase 1A di un aptamero pegilato anti-VEGF (EYE001) per il trattamento della degenerazione maculare essudativa senile.Studi recenti hanno suggerito che il fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) è uno stimolo importante per la crescita di nuovi vasi sanguigni nell'occhio. La terapia anti-VEGF è quindi un potenziale trattamento per la degenerazione maculare essudativa e la retinopatia diabetica. Modelli animali precedentemente descritti di perdita vascolare e neovascolarizzazione oculare, compreso il test Miles, il modello di angiogenesi corneale di ratto e il modello di retinopatia del prematuro (ROP) di topo, sono stati utilizzati per studiare questo farmaco. Dopo questi studi, uno studio di fase IA a dose singola ascendente di iniezioni intravitreali del farmaco è stato eseguita in 15 pazienti con neovascolarizzazione coroideale subfoveale secondaria a degenerazione maculare essudativa senile (AMD). Il modello di analisi Miles ha mostrato un'attenuazione quasi completa del vascuo mediato da VEGF lar perdita dopo l'aggiunta di EYE001 e il modello di angiogenesi corneale ha anche mostrato una significativa riduzione della neovascolarizzazione con EYE001. Il modello ROP ha mostrato l'inibizione dell'80% della neovascolarizzazione retinica rispetto ai controlli (P = 0,0001). Lo studio di sicurezza di fase IA su pazienti con AMD essudativa non ha mostrato problemi di sicurezza significativi relativi al farmaco. La valutazione oftalmica ha rivelato che l'80% dei pazienti mostrava una visione stabile o migliorata 3 mesi dopo il trattamento e che il 27% degli occhi mostrava un miglioramento della vista di tre righe o superiore nella tabella dello studio sul trattamento precoce della retinopatia diabetica in questo momento. La terapia anti-VEGF è una nuova strada promettente per il trattamento delle malattie neovascolari dell'occhio, compresa la degenerazione maculare essudativa e la retinopatia diabetica. I dati preclinici degli studi con EYE001 supportano la valutazione clinica della sua efficacia in tali malattie. Questo rapporto è il primo a descrivere la somministrazione della terapia anti-VEGF nell'uomo per la degenerazione maculare essudativa e mostra la sicurezza di tale terapia per singole iniezioni. Sono necessari ulteriori studi clinici per determinare la sicurezza di iniezioni intravitreali multiple di EYE001 e sono necessari studi più ampi per dimostrare l'efficacia di questo nuovo agente potenzialmente terapeutico per l'AMD neovascolare.
Effetti alimentari atipici dose-route-dipendenti di eplerenone nel cane: presenza di effetti alimentari a seguito di somministrazione endovenosa e mancanza di effetti alimentari a seguito di somministrazione orale."Questo studio è stato condotto per indagare sul motivo per cui è stato osservato un effetto alimentare a seguito di una dose endovenosa di eplerenone (EP) nel cane, ma non dopo somministrazione orale. Tre cani femmine sono stati impiantati con una porta di accesso alla vena porta cronica e hanno ricevuto dosi EP radiomarcate per via orale (15 mg/kg in soluzione) e per via endovenosa (7,5 mg/kg tramite vena cefalica e porta) in condizioni di digiuno e alimentazione I valori medi di AUC per EP dopo infusione attraverso la vena cefalica erano 23,0 +/- 2,7 e 18,2 +/- 1,1 h. microg/mL rispettivamente a digiuno e a stomaco pieno. I valori corrispondenti dopo infusione attraverso la vena porta erano rispettivamente 20,7 +/- 3,2 e 12,9 +/- 1,3 h. microg/mL. Dopo somministrazione orale, EP è stato assorbito 82,0 +/- 6.9 e 98,0 +/- 8,3% in condizioni di digiuno e alimentazione; i valori medi spontanei di AUC erano rispettivamente di 32,0 +/- 2,0 e 30,8 +/- 3,6 h. microg/mL. Il valore AUC per l'acido SC-70303 (la forma lattonica aperta di EP) era inferiore a stomaco pieno dopo l'infusione della vena cefalica, ma era maggiore a stomaco pieno dopo l'infusione nella vena porta o la somministrazione di soluzione orale. L'effetto epatico di primo passaggio dell'EP è stato del 12,6 +/- 6,3% a digiuno e del 27,1 +/- 6,0% a stomaco pieno. L'analisi farmacocinetica delle concentrazioni di EP dopo infusione nella vena porta e somministrazione orale ha mostrato che a stomaco pieno le costanti di velocità per l'escrezione biliare e per il metabolismo epatico e l'escrezione urinaria erano aumentate mentre la velocità costante per l'eliminazione e/o il metabolismo nel tratto gastrointestinale era ridotta. In conclusione, è stata osservata l'apparente mancanza di effetto del cibo dopo la somministrazione orale perché una maggiore clearance è stata compensata da un maggiore assorbimento.
Noladin ether, un presunto nuovo endocannabinoide: meccanismi di inattivazione e un metodo sensibile per la sua quantificazione nei tessuti di ratto.La presenza del nuovo endocannabinoide proposto, sono stati studiati noladin ether (2-arachidonyl glyceryl ether, 2-AGE) in vari organi di ratto e regioni del cervello, e la sua inattivazione da parte di cellule di glioma C6 intatte, 2-AGE è stato misurato mediante diluizione isotopica cromatografia liquida-pressione atmosferica ionizzazione chimica-massa spettrometria, con un limite di rilevamento di 100 fmol. Un composto con la stessa massa e proprietà cromatografiche/chimiche di 2-AGE è stato trovato in tutto il cervello, con le quantità più elevate nel talamo e nell'ippocampo. Sintetico [(3)H]2- L'AGE è stato inattivato dalle cellule di glioma C6 di ratto intatte mediante un processo dipendente dal tempo e dalla temperatura che consiste nell'assorbimento cellulare e nell'incorporazione parziale nei fosfolipidi Ulteriori dati hanno suggerito che il 2-AGE è assorbito dalle cellule tramite l'anandamide/2-arachidonoil glicerolo (2 -AG) m trasportatori di membrana e biosintetizzati in modo diverso rispetto a 2-AG.
Tomografia a emissione di positroni nella diagnosi e stadiazione del cancro del polmone: una revisione sistematica e quantitativa.Il cancro del polmone è la causa del 32% di tutti i maschi decessi per cancro e il 25% di tutti i decessi per cancro femminile. Poiché la prognosi dipende dalla diagnosi precoce e dalla stadiazione, è importante una valutazione continua degli strumenti diagnostici disponibili. Lo scopo di questo studio era valutare il valore diagnostico della tomografia a emissione di positroni dedicata (PET) e gamma-camera PET nell'indagine diagnostica del carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC). È stata effettuata una ricerca sistematica della letteratura nei database MEDLINE ed EMBASE e nel Cochrane Controlled Trials Register. Abbiamo identificato 55 lavori originali sulle prestazioni diagnostiche di PET con fluorodesossiglucosio nello studio del NSCLC. Per la diagnosi di NSCLC, le sensibilità e le specificità medie erano, rispettivamente, 0,96 (SE 0,01) e 0,78 (0,03) per la PET dedicata e 0,92 (0,04) e 0,86 (0,04) per gam ma-camera PET. Nella stadiazione mediastinica del NSCLC, i risultati sono stati 0,83 (0,02) e 0,96 (0,01) per la PET dedicata e 0,81 (0,04) e 0,95 (0,02) per la ganuna-camera PET. Concludiamo che la PET dedicata potrebbe essere uno strumento prezioso nella diagnosi e nella stadiazione del NSCLC. Tuttavia, si raccomandano studi su popolazioni con una minore prevalenza di NSCLC.
Effetto della serotonina endogena sul legame del ligando 5-hT1A PET 18F-MPPF nell'ippocampo di ratto: misurazioni della beta cinetica combinate con la microdialisi.Utilizzando una combinazione di una sonda intracerebrale beta+-sensibile originale e microdialisi, l'effetto dell'aumento della serotonina endogena sul legame specifico del 18F-MPPF [4-(2\'-metossifenil)-1-[2\'-[N-( 2"-piridinil)-p-fluorobenzamido]etil]piperazina] ai recettori della serotonina-1A (5-HT1A) è stata studiata nell'ippocampo del ratto anestetizzato. Il nostro prototipo di sonda beta-sensibile era abbastanza sensibile da ottenere curve tempo-attività specifiche 18F-MPPF nel roditore (rapporto ippocampo/cervelletto circa 2). Il rilascio neuronale di serotonina è stato potenziato farmacologicamente utilizzando fenfluramina a tre diverse dosi (1, 2 e 10 mg/kg per via endovenosa) moltiplicando per 2-15 la serotonina extracellulare nell'ippocampo. Queste variazioni extracellulari della serotonina extracellulare hanno portato a diminuzioni dose-range del legame specifico del 18F-MPPF nello stesso ratto. I nostri risultati hanno mostrato per la prima volta che il legame 18F-MPPF potrebbe essere modulato da modifiche della serotonina extracellulare nell'ippocampo di ratto. Questi risultati sono stati confermati dall'aumento della radioattività extracellulare raccolta nei dializzati dopo lo spostamento del 18F-MPPF da parte della fenfluramina. Dopo la modellizzazione, il legame 18F-MPPF potrebbe costituire un interessante radiotracciante per la tomografia a emissione di positroni nella valutazione dei livelli endogeni di serotonina nelle aree limbiche del cervello umano.
Metabolismo di 10,11-diidro-10-idrossiimmino-5H-dibenz/b, f/azepina-5-carbossamide, un potente farmaco antiepilettico.1. 10,11-Diidro-10-idrossiimmino-5H-dibenzo/b, f/azepina-5-carbossammide (BIA 2-024) è un nuovo farmaco antiepilettico simile nella struttura all'oxcarbazepina (OXC) ed efficacia, ma con un profilo farmacodinamico preferito. Possiede un'elevata attività in vitro, ma poiché le ossime vengono solitamente metabolizzate nei loro corrispondenti chetoni, è importante sapere se la sua potenza in vivo è il risultato dell'azione come profarmaco di OXC o se agisce da solo. 2. Il farmaco è stato somministrato per via orale a ratti, topi e conigli, i metaboliti identificati e i profili farmacocinetici confrontati tra quelle specie. Inoltre, il profilo farmacocinetico del principale metabolita è stato stabilito nel ratto. I risultati sono stati rispetto a studi sul metabolismo in vitro con microsomi epatici di diverse specie di mammiferi e umani 3. In una reazione atipica per l'ossima s, BIA 2-024 nei ratti è stato rapidamente (t(max) = 2h) metabolizzato nel derivato 10-nitro non attivo (BIA 2-254), mentre i conigli e in particolare i topi hanno ossidato la frazione di ossima a un livello molto più basso estensione. BIA 2-254 è stato poi trasformato in OXC e successivamente nel 10-idrossi derivato e altri metaboliti minori. 4. I dati in vitro hanno mostrato un comportamento tra specie molto simile ai risultati in vivo; i microsomi epatici umani hanno catalizzato l'ossidazione di BIA 2-024 al metabolita nitro solo a bassa velocità, e lo stesso è stato osservato per il successivo metabolismo a OXC. 5. I risultati consentono di prevedere il metabolismo in vivo di BIA 2-024 nell'uomo, dove questo farmaco è molto probabilmente assorbito in modo efficiente ed escreto principalmente come composto progenitore con una clearance epatica relativamente bassa. Ad eccezione del ratto, BIA 2-024 non agisce come profarmaco di OXC.
L'effetto elettrofisiologico cellulare di un nuovo farmaco antiaritmico simile all'amiodarone GYKI 16638 nel muscolo ventricolare umano non malato: confronto con sotalolo e mexiletina.L'effetto elettrofisiologico cellulare di GYKI 16638, un nuovo composto antiaritmico è stato studiato e confrontato con quello di sotalolo e mexiletina nella preparazione del muscolo ventricolare destro umano non malato mediante l'applicazione della tecnica convenzionale dei microelettrodi. GYKI 16638 (5 microM), alla durata del ciclo di stimolazione di 1000 ms, potenziale d'azione allungato durata (APD(90)) da 338,9 +/- 28,6 ms a 385,4 +/- 24 ms (n = 9, p > 0,05). Questo effetto di allungamento dell'APD, a differenza di quello del sotalolo (30 microM), è stato rate- GYKI 16638, contrariamente al sotalolo e come la mexiletina (10 microM), ha esercitato una depressione dipendente dall'uso del tasso massimo di depolarizzazione (V(max)) che ammontava a 36,4 +/- 11,7% alla lunghezza del ciclo di 400 ms ( n = 5, p < 0,05) ed è stato caratterizzato wit h una costante di tempo cinetica offset di 298,6 +/- 70,2 ms. Si è concluso che GYKI 16638 nel muscolo ventricolare umano mostra proprietà antiaritmiche combinate di classe IB e classe III, simili alla manifestazione elettrofisiologica osservata dopo il trattamento cronico con amiodarone.
Le catechine del tè verde inibiscono la fosforilazione del recettore del fattore di crescita endoteliale vascolare.I recettori del fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) (VEGFR) svolgono un ruolo importante nell'angiogenesi tumorale e, quindi, rappresentano bersagli interessanti per lo sviluppo di nuove terapie antitumorali. In questo lavoro, riportiamo che le catechine del tè verde sono nuovi inibitori dell'attività di VEGFR-2. Concentrazioni fisiologiche (0,01-1 microM) di epigallocatechina-3 gallato, catechina- 3 gallato e, in misura minore, epicatechina-3 gallato inducono una rapida e potente inibizione della fosforilazione tirosina VEGF-dipendente del VEGFR-2. L'inibizione del VEGFR-2 da parte dell'epigallocatechina-3 gallato era simile a quella indotta da Semaxanib ( SU5416), un inibitore specifico del VEGFR-2. L'inibizione dell'attività del VEGFR-2 da parte delle catechine ha mostrato una correlazione positiva con la soppressione dell'angiogenesi in vitro. Queste osservazioni suggeriscono che le proprietà antitumorali degli estratti di tè verde possono essere correlato alla loro inibizione dell'angiogenesi VEGF-dipendente.
Caratterizzazione funzionale di CP-465.022, un antagonista selettivo e non competitivo del recettore AMPA.L'ipotesi che aberrante alfa-amino-3-idrossi-5- L'attività del recettore dell'acido metil-4-isossazolopropionico (AMPA) contribuisce all'epilettogenesi e alla neurodegenerazione ha spinto la ricerca di antagonisti del recettore AMPA come potenziali terapie per il trattamento di queste condizioni Descriviamo la caratterizzazione funzionale di un nuovo antagonista del recettore AMPA chinazolina-4-one, 3 -(2-cloro-fenil)-2-[2-(6-dietilamminometil-piridin-2-il)-vinil]-6-fluoro-3H-chinazolin-4-one (CP-465.022). Questo composto inibisce AMPA correnti mediate dal recettore nei neuroni corticali di ratto con un IC(50) di 25 nM. L'inibizione non è competitiva con la concentrazione dell'agonista e non è dipendente dall'uso o dal voltaggio. CP-465.022 è selettiva per AMPA su kainato e N-metil-D- recettori dell'aspartato Tuttavia, il composto risulta essere equipotente per i recettori AMPA composti da diversi recettori AMPA combinazioni di subunità. Ciò è indicato dalla scoperta che CP-465.022 è equivalentemente potente per l'inibizione delle risposte mediate dal recettore AMPA in diversi tipi di neuroni che esprimono diverse subunità del recettore AMPA. Pertanto, CP-465.022 fornisce un nuovo strumento per studiare il ruolo dei recettori AMPA nei processi fisiologici e fisiopatologici.
Sintesi, conformazione e attività biologica di analoghi della Thr6-bradichinina lineari e ciclici contenenti N-benzilglicina al posto della fenilalanina.Tre analoghi lineari della Thr6-bradichinina in cui uno o entrambi i due residui di fenilalanina nella sequenza peptidica sono stati sostituiti da N-benzilglicina (BzlGly) e i loro analoghi ciclici testa-coda sono stati sintetizzati e testati su una preparazione di duodeno di ratto isolato. -BK, BzlGly8,Thr6-BK e BzlGly(5,8),Thr6-BK) e il ciclico (ciclo BzlGly5,Thr6-BK, ciclo BzlGly8,Thr6-BK e ciclo BzlGly(5,8),Thr6-BK) analoghi peptoidi sono stati caratterizzati mediante analisi degli amminoacidi, rotazione ottica, HPLC analitica e spettroscopia di massa MALDI-TOF. Le caratteristiche conformazionali dei derivati lineari e ciclici sono state studiate mediante misurazioni FT-IR e CD. Sono stati inoltre eseguiti calcoli preliminari di meccanica molecolare su alcuni peptidi sintetici Screeni farmacologici ng utilizzando il rilassamento della preparazione del duodeno di ratto isolato ha mostrato che l'incorporazione di N-benzilglicina nelle posizioni 5 e/o 8 nel Thr6-BK lineare provoca una sostanziale diminuzione della potenza. L'incorporazione comparabile nel ciclo Thr6-BK, in posizione 8, o 5 e 8, ha prodotto analoghi quasi inattivi. Tuttavia, cyclo BzlGly5,Thr6-BK ha mostrato una potenza dello stesso ordine di grandezza di cyclo-BK e cyclo Thr6-BK.
Influenza delle condizioni di polimerizzazione sulla degradazione idrolitica del poli(DL-lattide) polimerizzato in presenza di ottoato stannoso o zinco-metallo.Laboratorio- e polilattidi racemici su scala pilota (PLA50) sono stati sintetizzati in presenza di ottoato stannoso (SnOct2) o zinco-metallo come iniziatori in assenza di alcol. I polimeri risultanti sono stati lavorati mediante stampaggio a compressione o stampaggio a iniezione a seconda della scala del lotto. La degradazione idrolitica dei campioni stampati a compressione selezionati per essere comparabili è stata studiata prima per mostrare l'influenza del sistema iniziatore. Sono state trovate differenze nell'assorbimento di acqua tra PLA50-Zn (iniziazione zinco-metallo) e PLA50-Sn (iniziazione SnOct2). PLA50-Zn è molto più idrofilo PLA50-Sn ha mostrato una diminuzione del peso molecolare più lenta e inizio ritardato di perdita di peso, rilascio di acidità e formazione di stereocomplessi, rispetto a PLA-Zn. La concentrazione di stagno residuo in PLA50-Sn aumentato da 306 a 795 ppm durante l'invecchiamento. Nel caso di PLA50-Zn il metallo residuo rimane costante a ca. 40 ppm. In una seconda serie di esperimenti, sono state confrontate PLA50 ad alto peso molecolare diverse nelle caratteristiche e nell'iniziatore, sintetizzate su scala pilota. Gli effetti dell'iniziatore sulla degradazione dei polimeri concordano bene con i risultati su scala di laboratorio, poiché le differenze di idrofobicità sono aumentate dall'aumento della scala. I polimeri PLA50-Sn sono apparsi molto più resistenti alla degradazione rispetto a quelli PLA50-Zn. Anche i contributi delle altre caratteristiche (ad esempio peso molecolare, purezza, stereoregolarità, elaborazione) si sono dimostrati importanti.
Attenuazione selettiva dell'attività aritmica stimolata dall'isoproterenolo da parte di un agonista parziale del recettore A1 dell'adenosina.L'obiettivo di questo studio era esaminare l'ipotesi che un agonista parziale del recettore dell'adenosina A1 (A1AdoR) può causare una maggiore attenuazione dell'attività aritmica ventricolare indotta da catecolamine rispetto alla contrattilità. Gli effetti di CVT-2759 e adenosina, un agonista parziale e completo dell'A1AdoR, sull'aritmica stimolata da isoproterenolo sono state determinate l'attività e la contrattilità dei miociti ventricolari isolati di cavia. CVT-2759 (10 micromol/L) e adenosina (10 micromol/L) hanno inibito significativamente l'attività aritmica indotta dall'isoproterenolo (dopo la contrazione e corrente transitoria verso l'interno) ma non hanno ridotto le ampiezze di accorciamento della contrazione e corrente Ca2+ di tipo L. L'aumento della concentrazione dell'adenosina agonista completo da 10 a 100 micromol/L, tuttavia, ha causato una significativa attenuazione dell'accorciamento della contrazione e postcontrazioni, mentre l'aumento della concentrazione dell'agonista parziale CVT-2759 da 10 a 100 micromol/L non lo ha fatto. CVT-2759 ha anche inibito significativamente i battiti ventricolari spontanei indotti da isoproterenolo nei cuori isolati. A differenza dell'adenosina, CVT-2759 non ha attivato la corrente K+ sensibile all'adenosina né ha ridotto la durata dell'APD atriale. I risultati attuali supportano l'ipotesi e suggeriscono un ruolo potenziale per un agonista parziale dell'A1AdoR nel trattamento delle aritmie cardiache.
attivazione del 3,5-di-t-butil-4-idrossianisolo (DTBHA) del reticolo sarcoplasmatico del muscolo scheletrico di ratto Ca(2+)-ATPasi.3,5-Di-t-butil-4-idrossianisolo (DTBHA) è aumentato in modo dipendente dalla concentrazione (calcolato pEC(50) = 4,55 +/- 0,18 M) il Ca(2+)- stimolato da ossalato velocità di pompaggio delle vescicole del reticolo sarcoplasmatico (SR) del muscolo scheletrico di ratto L'analisi cinetica di questo effetto ha suggerito che l'attivazione della SR Ca(2+)-ATPasi operata da (DTBHA) era di tipo misto e non competitivo rispetto all'ATP in l'intervallo di concentrazioni rispettivamente 0,1-0,5 mM e superiore a 1 mM, inoltre era indipendente dalle concentrazioni di Ca(2+) libero, indicando che l'attivazione dell'enzima è avvenuta attraverso l'accelerazione della scomposizione del complesso enzima-substrato. , è apparso che il suo sito bersaglio era sensibile all'acido ciclopiazonico. La capacità rara di (DTBHA) di sovraregolare l'assorbimento di Ca(2+) SR è di interesse in vista del suo possibile uso per t condizioni patologiche caratterizzate da sovraccarico cellulare di Ca(2+) e disordini genetici in cui l'omeostasi di SR Ca(2+) è alterata.
Uno studio di fase I e farmacologico sull'inibitore della proteina farnesil transferasi L-778,123 in pazienti con tumori solidi.Questo studio di fase I è stato condotto per valutare la fattibilità della somministrazione di L-778,123, un inibitore peptidomimetico della proteina farnesil transferasi (FPTase), come infusione endovenosa continua per 7 giorni ogni 3 settimane e per determinare la dose raccomandata per successivi studi diretti alla malattia. Questo studio ha anche cercato di caratterizzare il farmaco comportamento di L-778,123 e per determinare se l'effetto biologico desiderato, l'inibizione della farnesilazione proteica, potesse essere rilevato e valutato durante il trattamento. I pazienti con tumori solidi avanzati sono stati trattati con L-778,123 come infusione endovenosa continua per 7 giorni ogni 3 settimane a dosi comprese tra 35 e 1120 mg/m(2)/die Sulla base di studi preclinici, le valutazioni della tossicità includevano telemetria cardiaca, elettrocardiogrammi ed elettroretinogrammi oltre a più r prove di laboratorio per il monitoraggio della sicurezza. Il campionamento del plasma è stato eseguito per caratterizzare la farmacocinetica di L-778,123 e le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) sono state campionate per rilevare e monitorare gli effetti inibitori di L-778,123 sulla prenilazione di HDJ2, una proteina chaperone che subisce farnesilazione. Venticinque pazienti hanno ricevuto 51 cicli completi di L-778,123. Un'incidenza inaccettabilmente elevata di tossicità dose-limitanti, costituita da trombocitopenia di grado 4, prolungamento significativo dell'intervallo QT(c) e affaticamento profondo, è stata osservata al livello di dose di 1120 mg/m(2)/giorno. Al successivo livello di dose L-778.123 inferiore, 560 mg/m²/giorno, sette nuovi pazienti non hanno manifestato tossicità inaccettabile. Invece, la mielosoppressione era da lieve a moderata e il prolungamento dell'intervallo QT(c) era trascurabile. La farmacocinetica era lineare e le concentrazioni plasmatiche di L-778.123 allo stato stazionario (media, 8,09 +/- 3,11 microM a 560 mg/m²/giorno) superavano i valori di IC(50) (intervallo, 0,07-5,35 microM) richiesti per inibizione della crescita e citotossicità negli studi preclinici. La clearance sistemica di L-778.123 era in media di 106,4 +/- 45,6 ml/min/m(2) e l'emivita terminale di eliminazione era di 2,8 +/- 1,0 h. L-778,123 ha inibito la prenilazione di HDJ2 per la durata dell'infusione del farmaco in modo dose-dipendente, ma sembrava stabilizzarsi al di sopra di 560 mg/m(2)/giorno. Al livello di dose di 560 mg/m(2)/giorno, la percentuale media di proteina HDJ2 nella sua forma non prenilata è aumentata da 1,41% +/- 1,71% (pretrattamento) a 28,76% +/- 6,10% (giorno 4) e 30,86 +/- 4,96 (giorno 8) ed è sceso al 2,28% +/- 2,11% una settimana dopo l'interruzione del farmaco (giorno 16). L-778.123 somministrato come un continuo 7 giorni i. v. l'infusione per 7 giorni ogni 21 giorni è ben tollerata a dosi di 560 mg/m²/giorno e determina concentrazioni biologicamente rilevanti e una consistente inibizione della prenilazione dell'HDJ2 nelle PBMC. Sebbene la relazione tra l'inibizione farmaco-correlata della prenilazione dell'HDJ2 nelle PBMC e la prenilazione delle proteine rilevanti e l'inibizione della crescita nelle cellule tumorali sia sconosciuta, le analisi seriali della prenilazione dell'HDJ2 forniscono un marker farmacodinamico della prenilazione proteica che può essere utile per ottimizzare lo sviluppo di farmaci mira a FPTase.
Aumento della distribuzione della lunghezza della catena glicanica e diminuzione della suscettibilità alla moenomicina in un mutante di Staphylococcus aureus resistente alla vancomicina.Un mutante di Staphylococcus aureus resistente alla vancomicina, COL- VR1 (MIC, 16 microg/ml), è stato isolato da S. aureus COL meticillino-resistente mediante esposizione a vancomicina. COL-VR1 ha anche mostrato una ridotta suscettibilità a teicoplanina (8 volte), meticillina (2 volte), macarbomicina (8 volte). -fold) e moenomicina (16 volte). Si ritiene che la macarbomicina e la moenomicina inibiscano direttamente l'attività della transglicosilasi. La caratterizzazione del mutante ha rivelato un ispessimento della parete cellulare e la soppressione della lisi indotta dalla penicillina, sebbene le quantità delle cinque proteine leganti la penicillina (PBP 1, 2, 3, 4 e 2\') e i profili delle idrolasi peptidoglicano non sono stati alterati. L'analisi del profilo muropeptide e della distribuzione della lunghezza della catena glicanica mediante cromatografia liquida ad alta pressione in fase inversa ha rivelato una leggera diminuzione della croce peptidica -linking e una maggiore lunghezza media della catena glicani rispetto a quelli del genitore. Questi risultati insieme suggeriscono che un'attività della transglicosilasi è stata potenziata nel mutante. Questo può rappresentare un nuovo meccanismo di resistenza ai glicopeptidi in S. aureus.
Inibitori della farnesiltransferasi.Il targeting delle anomalie molecolari nelle neoplasie può fornire un'opportunità per migliorare la selettività della terapia del cancro. Le mutazioni di Ras sono un evento genetico comune nei tumori umani. Anche altri cambiamenti genetici nei tumori possono segnalare attraverso percorsi ras-dipendenti. Il targeting di ras attraverso l'inibizione della farnesilazione della proteina Ras è una nuova strategia di trattamento del cancro in fase di valutazione clinica. Diversi inibitori della farnesiltransferasi (FTI) sono stati valutati in studi di fase I. La tossicità e le dosi massime tollerate di diversi FTI sono state determinate e sono in corso studi clinici per valutare gli FTI in combinazione con agenti chemioterapici citotossici convenzionali. Sono inoltre in corso tentativi per sviluppare saggi per misurare gli effetti biologici dell'FTI nei pazienti Attualmente si sta studiando l'inibizione della farnesilazione di un certo numero di marcatori surrogati. Questi sforzi possono fornire informazioni sulla meccanismo d'azione di questi composti e portare a una migliore selezione dei pazienti per gli studi clinici.
Gcosidi della cianidina inibitori e antiossidanti della ciclossigenasi in ciliegie e frutti di bosco.Antociani da amarene, Prunus cerasus L. (Rosaceae) cv. Balaton e Montmorency; ciliegie, Prunus avium L. (Rosaceae); mirtilli, Vaccinum myrtillus L. (Ericaceae); more, Rubus sp. (Rosaceae); mirtilli var. Jersey, Vaccinium corymbosum L. (Ericaceae); mirtilli rossi var. Early Black, Vaccinium macrocarpon Ait. (Ericaceae), sambuco, Sambucus canadensis (Caprifoliaceae), lamponi, Rubus idaeus (Rosaceae) e fragole var. Honeoye, Fragaria x ananassa Duch (Rosaceae), sono stati studiati per le attività antiossidanti e inibitorie della cicloossigenasi. sono stati determinati nei frutti mediante HPLC i livelli di cianidina-3-glucosilrutinoside 1 e cianidina-3-rutinoside 2. L'attività antiossidante degli antociani delle ciliegie era paragonabile agli antiossidanti commerciali, tert-butilidrochinone, idrossitoluene butilato e ma ilato idrossianisolo, e superiore alla vitamina E, alla concentrazione di prova di 125 microg/ml. Gli antociani di lamponi e ciliegie hanno dimostrato rispettivamente il 45% e il 47% di attività inibitoria della cicloossigenasi-I e della cicloossigenasi-II, quando dosati a 125 microg/ml. Le attività inibitorie della cicloossigenasi degli antociani di questi frutti erano paragonabili a quelle dell'ibuprofene e del naprossene a concentrazioni di 10 microM. Gli antociani 1 e 2 sono presenti sia nelle ciliegie che nel lampone. Le rese di antociani puri 1 e 2 in 100 g di amarene Balaton e Montmorency, amarene e lamponi sono state 21, 16,5; 11, 5; 4.95, 21; e 4,65, 13,5 mg, rispettivamente. Le more e le fragole fresche contenevano solo antocianina 2 con rese di 24 e 22,5 mg/100 g, rispettivamente. Gli antociani 1 e 2 non sono stati trovati in mirtilli, mirtilli, mirtilli o sambuco.
Ras inibitori e radioterapia.La recidiva locale dopo un ciclo definitivo di radioterapia rimane un problema clinico significativo e rappresenta un modello comune di fallimento per molti tumori solidi. Si ritiene che la sensibilità delle cellule tumorali alla citotossicità delle radiazioni ionizzanti sia uno dei principali determinanti del controllo locale dei tumori nei pazienti trattati con radioterapia. Esistono prove sperimentali sostanziali per dimostrare che una maggiore resistenza alle radiazioni è associata alla espressione di oncogeni attivati, tra cui Ras. Le forme mutate di Ras si trovano nel 30% dei tumori umani, compresa una proporzione sostanziale di adenocarcinomi pancreatici e del colon. Ras mutato produce proteine che rimangono bloccate in uno stato costitutivamente attivo, trasmettendo così segnali incontrollati. Proteine Ras sono proteine leganti la guanosina trifosfato che svolgono un ruolo fondamentale nel controllo di molti processi cellulari, inclusa la crescita h e differenziazione. Studi preclinici hanno dimostrato che l'espressione di Ras mutante aumenta la radioresistenza cellulare. La funzione di Ras dipende dalla sua localizzazione sulla membrana plasmatica. Ciò è ottenuto mediante modifiche post-traduzionali, inclusa l'aggiunta di una frazione farnesil isoprenoide in una reazione catalizzata dall'enzima proteina farnesiltransferasi (FTase). Questo enzima è diventato un obiettivo importante per la progettazione di nuovi agenti mirati a Ras. Gli inibitori della FTasi (FTI) bloccano la farnesilazione di Ras e invertono la radioresistenza mediata da Ras nelle linee cellulari umane. Gli FTI sono stati ben tollerati negli studi sugli animali e non sembrano causare citotossicità generalizzata. Sono in corso studi clinici per determinare i programmi terapeutici ottimali e la dose per FTI. Recentemente è stata completata una sperimentazione di fase 1 dell'FTI L778-123 e della radioterapia.
Prodotti di degradazione dei glicosidi cianidinici delle amarene e loro bioattività.Gli antociani bioattivi presenti nelle amarene, Prunus cerasus L. (Rosaceae) cv. Balaton, sono la cianidina 3-glucosilrutinoside (1), la cianidina 3-rutinoside (2) e la cianidina 3-glucoside (3). La cianidina (4) è la principale antocianidina nelle amarene. Nella nostra continua valutazione del in vivo e in l'efficacia in vitro di questi antociani per prevenire l'infiammazione e il cancro del colon, abbiamo aggiunto questi composti al terreno McCoy\'s 5A nel tentativo di identificare i loro prodotti di degradazione durante gli studi di coltura cellulare in vitro. Ciò ha portato all'isolamento e alla caratterizzazione dell'acido protocatechuico (5 ), il prodotto di degradazione predominante. Inoltre, l'acido 2,4-diidrossibenzoico (6) e l'acido 2,4,6-triidrossibenzoico (7) sono stati identificati come prodotti di degradazione. Tuttavia, questi prodotti di degradazione non sono stati quantificati. Composti 5-7 sono stati identificati anche come degrado pr odotti quando gli antociani sono stati sottoposti a pH e condizioni termiche variabili. Nei saggi inibitori dell'enzima cicloossigenasi (COX)-I e -II, i composti 5-7 non hanno mostrato attività significative rispetto ai FANS Naproxen, Celebrex e Vioxx o Ibuprofen, a concentrazioni di 50 microM. Tuttavia, a una concentrazione di prova di 50 microM, l'attività antiossidante dell'acido protocatechuico (5) era paragonabile a quella degli antiossidanti commerciali tert-butilidrochinone (TBHQ), idrossitoluene butilato (BHT) e idrossianisolo butilato (BHA) e superiore a quello della vitamina E a concentrazioni di 10 microM.
Approccio enantiospecifico ai sesquiterpeni triciclici mayurone e tujopseni.Approccio enantiospecifico ai mayurone e tujopseni, sesquiterpeni contenenti tre atomi di carbonio quaternario contigui, a partire da ( Viene descritto R)-carvone (8). (S)-3,4,4-trimetilcarvone (7), ottenuto da (R)-carvone, è stato trasformato nel biciclo[2.2.2]ottanone 13 tramite alchilazione intramolecolare regioselettiva del bromuro di allile 11. L'ozonolisi regioselettiva e la frammentazione Criegee del chetone biciclico 13 hanno fornito il cheto estere 14. La deossigenazione riduttiva seguita da omologazione a un carbonio ha trasformato il cheto estere 19 nell'estere 6. Ciclopropanazione intramolecolare del diazo chetone 25, derivato da l'acido 5, fornito (-)-diidromayurone (4), costituendo così una sintesi formale enantiospecifica di mayurone e tujopseni.
I nuovi analoghi del taxano, BMS-184476 e BMS-188797, potenziano gli effetti della radioterapia in vitro e in vivo contro le cellule tumorali polmonari umane.Per valutare i nuovi analoghi del taxano, BMS-184476 e BMS-188797, come potenziali radiosensibilizzatori in vitro e in vivo. Le cellule di cancro del polmone umano H460 sono state incubate con paclitaxel o un analogo del taxano e irradiate in vari momenti. Sono state quindi determinate le frazioni sopravvissute. utilizzando un test clonogenico Sono stati utilizzati tre diversi programmi: (A) 1 h di incubazione del farmaco con radiazioni a t = 8 h, (B) 1 h di incubazione del farmaco con radiazioni a t = 24 h, (C) 24- h incubazione del farmaco con radiazioni immediatamente dopo. La ridistribuzione del ciclo cellulare da parte dei soli taxani è stata misurata con ioduro di propidio e citometria a flusso. La percentuale di apoptosi è stata misurata anche utilizzando la colorazione 7-aminoactinomycin D (7-AAD) con citometria a flusso. Per studi in vivo, cellule H460 xenotrapianti sono stati utilizzati in topi nudi. I tumori sono stati cresciuti sc sul f lank e poi trattato con BMS-184476 (10 mg/kg i. p. iniezione, giorni 0, 2 e 4) e/o radiazioni (2 Gy/giorno, giorni 0-4). Il ritardo della crescita del tumore è stato quindi misurato per ciascun gruppo di trattamento. I rapporti medi di potenziamento della dose di radiazioni in vitro di BMS-184476, BMS-188797 e paclitaxel erano 1,76, 1,49 e 1,31 rispettivamente per le Schede A, B e C. L'analisi dell'isobologramma ha mostrato che BMS-184476 era sinergico con le radiazioni utilizzando il Programma A. Il trattamento con i taxani ha causato un aumento della percentuale di cellule G2/M al momento dell'irradiazione. Gli incrementi medi della percentuale di G2/M al di sopra dei valori di controllo per tutti e tre i farmaci sono stati rispettivamente di 5,6, 2,5 e 1,7 per le Schede A, B e C. Gli effetti combinati dei taxani più le radiazioni sull'induzione dell'apoptosi sono stati additivi per tutti e tre i farmaci. Studi in vivo hanno mostrato che BMS-184476 può potenziare gli effetti della radioterapia frazionata, con un fattore di potenziamento medio di 1,66 ottenuto da tre esperimenti indipendenti. Questi risultati hanno dimostrato che i nuovi analoghi del taxano, BMS-184476 e BMS-188797, possono potenziare gli effetti delle radiazioni nelle cellule del cancro del polmone umano sia in vitro che in vivo. Questi dati supportano anche l'ipotesi che un blocco G2/M sia coinvolto nella radiosensibilizzazione causata dai taxani.
Inibizione differenziale delle funzioni effettrici infiammatorie da parte di petasina, isopetasina e neopetasina negli eosinofili umani.Priming di eosinofili con fattore stimolante le colonie di granulociti-macrofagi (GM -CSF) e la successiva stimolazione con il fattore attivante le piastrine (PAF) o l'anafilatossina C5a è associata a una rapida produzione di leucotrieni (LTs) e al rilascio di proteina cationica eosinofila (ECP). Questo studio è stato progettato per determinare gli effetti del sesquiterpene esteri petasina, isopetasina e neopetasina sulla generazione di LT e sul rilascio di ECP negli eosinofili in vitro. Il modello di attivazione degli eosinofili sopra descritto è stato utilizzato per indurre la produzione di LT e il rilascio di ECP. Le cellule sono state incubate con petasine e inibitori di controllo prima del priming e della stimolazione. Per analizzare fasi intracellulari di attivazione degli eosinofili e determinare potenziali bersagli farmacologici, sono stati studiati alcuni eventi chiave di segnalazione. L'attività della fosfolipasi citosolica A2 (cPLA(2)) è stata misurata sicuro analizzando la generazione di acido arachidonico (AA). La traslocazione della 5-lipossigenasi (5-LO) è stata osservata mediante microscopia a immunofluorescenza. Le concentrazioni di calcio intracellulare [Ca2+]i sono state misurate mediante un'analisi spettrofluorimetrica di massa. Mentre tutti e tre i composti hanno inibito la sintesi di LT, il rilascio di ECP dagli eosinofili è stato bloccato solo dalla petasina, ma non dall'isopetasina o dalla neopetasina. Allo stesso modo, gli aumenti indotti da PAF o C5a in [Ca2+]i sono stati completamente abrogati dalla sola petasina, mentre l'isopetasina e la neopetasina hanno avuto un'efficacia bloccante significativamente inferiore. Inoltre, solo la petasina, ma non l'isopetasina o la neopetasina, ha impedito l'aumento dell'attività di cPLA(2) e la traslocazione di 5-LO dal compartimento citosolico all'involucro del nucleo negli eosinofili stimolati da ionofori di calcio. Questi dati suggeriscono che diverse petasine possono almeno parzialmente bloccare diverse molecole di segnalazione intracellulare. Per ridurre la sintesi di LT, l'isopetasina e la neopetasina possono agire a livello di 5-LO o distalmente. Al contrario, la petasina può inibire le funzioni effettrici infiammatorie negli eosinofili umani interrompendo gli eventi di segnalazione a livello o prossimalmente alla fosfolipasi Cbeta (PLCbeta), oltre alla sua potenziale attività inibitoria all'interno della proteina chinasi attivata da mitogeni (MAPK) e delle vie LT.
Base genetica per le differenze di attività tra vancomicina e derivati glicolipidici della vancomicina.Piccole molecole che influenzano specifiche funzioni proteiche possono essere strumenti preziosi per sezionare processi cellulari complessi La sintesi e la degradazione del peptidoglicano è un processo nei batteri che coinvolge più enzimi sotto una stretta regolazione temporale e spaziale Abbiamo utilizzato una serie di piccole molecole che inibiscono la fase di transglicosilazione della sintesi del peptidoglicano per scoprire geni che aiutano a regolare questo processo Abbiamo identificato un gene responsabile della suscettibilità delle cellule di Escherichia coli all'uccisione da parte dei derivati glicolipidici della vancomicina, stabilendo così una base genetica per le differenze di attività tra questi composti e la vancomicina.
Nuovi derivati azoici come profarmaci dell'acido 5-aminosalicilico e derivati amminici con una potente attività antagonista del fattore di attivazione delle piastrine.Questo documento descrive la sintesi di una serie di composti azoici in grado di fornire acido 5-aminosalicilico (5-ASA) e un potente antagonista del fattore di attivazione piastrinica (PAF) in modo specifico del colon allo scopo di trattare la colite ulcerosa Abbiamo trovato possibile aggiungere un gruppo amminico sul frazione aromatica dei nostri derivati 1-[(1-acil-4-piperidil)metil]-1H-2-metilimidazo[4,5-c]piridinici riportati o sui composti British Biotech BB-882 e BB-823 mantenendo un livello elevato di attività come antagonista del PAF Un composto selezionato UR-12715 (49c) ha mostrato un IC(50) di 8 nM nel saggio di aggregazione indotta da PAF in vitro e un ID(50) di 29 microg/kg nel PAF in vivo test di ipotensione indotta in ratti normotesi Attraverso l'attaccamento di 49c al 5-ASA tramite funzionalità azo abbiamo ottenuto UR-12746 (70). erimenti con [14C]-70 ci permettono di giungere alle seguenti conclusioni, critiche nella progettazione di questi nuovi profarmaci del 5-ASA. Né l'intera molecola 70 né il carrier 49c sono stati assorbiti dopo somministrazione orale di [14C]-70 nel ratto come dimostrato dall'assenza di livelli plasmatici di radioattività e dall'elevato recupero di essa nelle feci. Si ottiene un'efficace scissione del legame azoico (84%) da parte della microflora nel colon. Questi fatti assicurano elevate concentrazioni topiche di 5-ASA e 49c nel colon. Inoltre, 70 ha mostrato un potente effetto anticolitico nel modello di colite indotta da acido trinitrobenzensolfonico nel ratto. Questo profilo suggerisce che UR-12746 (70) fornisce un nuovo interessante approccio al trattamento della colite ulcerosa.
Relazioni quantitative struttura-attività nella riduzione enzimatica a singolo elettrone di esplosivi nitroaromatici: implicazioni per la loro citotossicità.I meccanismi di citotossicità degli esplosivi polinitroaromatici, un importante gruppo di inquinanti ambientali, rimangono finora insufficientemente studiati Abbiamo trovato che le costanti di velocità di riduzione enzimatica a singolo elettrone, e le entalpie di riduzione a singolo elettrone di composti nitroaromatici (DeltaHf(ArNO(2)(-*)), ottenuti mediante calcolo meccanico quantistico, possono servire come strumenti utili per l'analisi della citotossicità degli esplosivi nitroaromatici rispetto al possibile coinvolgimento dello stress ossidativo. Le costanti di velocità di riduzione a singolo elettrone di un certo numero di esplosivi tra cui 2,4,6-trinittrotoluene ( TNT) e 2,4,6-trinitrofenil-N-metilnitramina (tetryl), e modelli di composti nitroaromatici mediante ferredossina:NADP(+) reduttasi (FNR, EC 1.18.1.2) e NADPH:citocromo P-450 reduttasi (P-45 0R, EC 1.6.2.4) è aumentato con una diminuzione di DeltaHf(ArNO(2)(-*)). Ciò indica che i tassi di riduzione sono determinati dall'energia di trasferimento degli elettroni, ma non dalla particolare struttura degli esplosivi. La citotossicità degli esplosivi nei confronti dei fibroblasti renali di agnello trasformati dal virus della leucemia bovina (linea FLK) è aumentata con un corrispondente aumento della loro costante di velocità di riduzione di P-450R e FNR, o con una diminuzione del loro DeltaHf(ArNO(2)(-*) ). Ciò indica un'importanza dello stress ossidativo nella tossicità degli esplosivi in questa linea cellulare, che è stata ulteriormente evidenziata dagli effetti protettivi della deferoxamina e dell'antiossidante N,N\'-difenil-p-fenilendiammina, e un aumento della perossidazione lipidica. La DT-diaforasi (EC 1.6.99.2) ha esercitato un ruolo minore ed equivoco nella citotossicità degli esplosivi per le cellule FLK.
Farmacocinetica e distribuzione tissutale di SB-251353, una nuova chemochina CXC umana, dopo somministrazione endovenosa a topi.La farmacocinetica e la distribuzione tissutale di SB- 251353, una nuova forma troncata del prodotto beta del gene correlato alla crescita delle chemochine umane CXC, sono stati studiati dopo somministrazione endovenosa al topo (0,1-250 mg/kg). Alla dose più bassa, la clearance ha superato il flusso sanguigno al rene. All'aumentare della dose, la clearance si avvicinava alla velocità di filtrazione glomerulare nel topo. La clearance di questa chemochina può essere mediata dal suo recettore farmacologico, CXCR2, tramite endocitosi con successiva degradazione lisosomiale, come è stato osservato per diversi fattori di crescita ed ematopoietici. Volumi di distribuzione apparenti erano alti (> o =1 l/kg). È stato osservato un legame moderato con l'antigene/recettore Duffy per le chemochine sugli eritrociti. Coerentemente con l'analisi farmacocinetica, l'autoradiografia microscopica ha mostrato assorbimento in cellule epiteliali del tubulo prossimale renale. L'escrezione limitata di SB-251353 nelle urine (<2%) era coerente con il catabolismo delle chemochine nei tubuli. È stato osservato il legame ai sinusoidi epatici e al tessuto connettivo nel derma. Questo probabilmente riflette l'interazione di SB-251353 con il proteoglicano di eparina solfato e può spiegare i grandi volumi di distribuzione. Questo primo studio sulla disposizione di una chemochina fornisce informazioni sul meccanismo d'azione e sui fattori fisiologici che possono influenzare la farmacodinamica delle chemochine.
Ossidazione della trifenilarsina a trifenilarsineossido da parte di Trichoderma harzianum e altri funghi.Ceppi di batteri e funghi resistenti all'arsenico sono stati isolati dal suolo contaminato da agenti di guerra chimica. Fino ad ora non sono stati trovati prodotti metabolici di attacco microbico contro i residui fenilici del substrato modello trifenilarsina (TP) se incubato insieme a questi ceppi in test di coltura liquida. Tuttavia, uno dei funghi isolati, Trichoderma harzianum As 11, è stato trovato ossidare TP a trifenilarsineossido (TPO). Il lievito Trichosporon mucoides SBUG 801 e il fungo del marciume bianco Phanerochaete chrysosporium sono stati anche in grado di ossidare l'As(III) in TP. Inoltre, P. chrysosporium ha trasformato il fenilarsineossido (PAO) in fenilarsonico acido (PAA) in atmosfera O2. Per mezzo di un sistema respirometro, l'ossidazione di TP da parte di T. harzianum As 11 è stata confermata da un consumo di ossigeno significativamente più elevato in presenza di questi com libbre. L'analisi HPLC dei prodotti di ossidazione TPO e PAA nel mezzo dei saggi ha fornito evidenza della reazione di trasferimento di As(III) ad As(V) nei legami organici. I prodotti di ossidazione TPO e PAA sono più idrofili di TP e PAO. Pertanto, si è concluso che particolari funghi contribuiscono alla mobilitazione dell'arsenico nel suolo contaminato da agenti di guerra chimica.
Meccanismo di danno al DNA mediato da metalli indotto da metaboliti del cancerogeno 2-nitropropano.2-nitropropano (2-NP), un prodotto industriale ampiamente utilizzato solvente, è cancerogeno per i ratti Per chiarire il meccanismo di cancerogenesi da 2-NP, abbiamo studiato il danno al DNA da metaboliti 2-NP, N-isopropilidrossilammina (IPHA) e acido idrossilammina-O-solfonico (HAS), utilizzando 32P-5\ Frammenti di DNA marcati all'estremità ' ottenuti da geni che sono rilevanti per il cancro umano. In presenza di Fe(III) EDTA, sia IPHA che HAS hanno causato danni al DNA in ogni posizione del nucleotide senza una marcata preferenza per il sito. Il danno è stato inibito dall'idrossile libero scavenger di radicali (-*OH), catalasi e deferoxamina mesilato, un agente chelante del ferro. Questi risultati suggeriscono che il danno al DNA è stato causato da -*OH generato tramite H(2)O(2) sia da IPHA che da HAS. in presenza di Cu(II), l'IPHA ha spesso causato danni al DNA a livello della timina. Il danno al DNA mediato da Cu(II) causato dall'IPHA è stato inibito d da catalasi, metionale e batocuproina, un chelante specifico per Cu(I), suggerendo il coinvolgimento di H(2)O(2) e Cu(I). Questi risultati suggeriscono che il danno al DNA indotto dall'IPHA in presenza di Cu(II) sia stato causato da una specie reattiva dell'ossigeno come il complesso Cu(I)-hydroperoxo. D'altra parte, HA più frequentemente indotto danni al DNA alle sequenze 5\'-TG-3\', 5\'-GG-3\' e 5\'-GGG-3\'. Catalasi e metionale hanno inibito solo in parte il danno al DNA mediato da Cu(II) causato da HAS, suggerendo che le specie reattive dell'ossigeno e un'altra specie reattiva partecipano a questo processo. La formazione di 8-oxodG da parte di IPHA o HAS è aumentata in presenza di ioni metallici. Questo studio suggerisce che il danno al DNA mediato dai metalli causato dai metaboliti 2-NP gioca un ruolo importante nella mutagenicità e cancerogenicità di 2-NP.
Inibizione della protein chinasi attivata dallo stress nel cuore ischemico/riperfuso: ruolo del tanshinoato di magnesio B nella prevenzione dell'apoptosi.L'attivazione di stress-activated proteina chinasi (SAP) può portare a un'induzione di apoptosi che è responsabile di parte della morte dei cardiomiociti nel danno da riperfusione. L'obiettivo del presente studio era di indagare il meccanismo mediante il quale il magnesio tanshinoato B (MTB), un composto bioattivo isolato da Danshen, previene l'apoptosi nei cardiomiociti nel cuore ischemico/riperfuso. Cuori di ratto adulto isolati sono stati perfusi mediante la modalità Langendorff con terreno contenente MTB prima dell'induzione dell'ischemia globale normotermica. Al termine del periodo ischemico di 30 minuti, il cuore era riperfuso con lo stesso mezzo con o senza MTB per ulteriori 20 min. Nel cuore ischemico/riperfuso trattato con MTB, il numero di nuclei apoptotici è stato ridotto di 2,5 volte rispetto a quello nel cuore ischemico/riperfuso non trattato. controlli riperfusi [23 +/- 4 vs 57 +/- 7 (media +/- SD) celle TUNEL positive, rispettivamente, N = 3-4, P < 0,001]. L'attività della chinasi SAP è stata elevata di 1,7 volte nei cuori di ratto ischemici/riperfusi [35,6 +/- 3,8 vs 21,2 +/- 3,3 (controllo) (media +/- SEM) unità densitometriche relative, N = 4-6, P < 0,05]. Il trattamento con MTB ha abolito questo aumento dell'attività della chinasi SAP (25,0 +/- 5,2 unità densitometriche relative), che è stata anche ridotta del 40% nel nucleo. Quando il cuore è stato sottoposto alla sola ischemia, non vi è stato alcun cambiamento significativo nell'attività della chinasi SAP in presenza o assenza di MTB. MTB non sembra influenzare l'attività della proteina chinasi attivata dal mitogeno p38 in questo sistema modello. In conclusione, è stato dimostrato che MTB ha attività cardioprotettiva contro l'apoptosi, probabilmente attraverso l'inibizione dell'attività della chinasi SAP.
Glicosidi naturali contenenti allopiranosio dalla pianta del frutto della passione e dicroismo circolare dei glicosidi della benzaldeide cianidrina.[struttura: vedi testo] Foglie del frutto della passione commestibile pianta, Passiflora edulis, contengono beta-D-allopiranosidi benzilici 1 e 2, rappresentanti di una rara classe di glicosidi naturali con allosio D come unico costituente dello zucchero. Il glicoside 1 è il primo glicoside cianogeno noto contenente uno zucchero diverso dal D- glucosio attaccato direttamente al centro della cianidrina. La perturbazione asimmetrica della transizione (1) L(b) del cromoforo benzenico si è dimostrata utile per la determinazione della configurazione assoluta del centro della cianidrina dei glicosidi cianogenici aromatici.
Applicazioni di reazioni di Mannich viniloghe. Sintesi totali degli alcaloidi dell'Ergot rugulovasine A e B e setoclavina.Sintesi concise degli alcaloidi dell'Ergot rugulovasine A (3a ), la rugulovasina B (3b) e la setoclavina (2) sono state completate da strategie che hanno come passaggi chiave le reazioni di Mannich intramolecolari e intramolecolari Così, la prima sintesi di 3a,b è iniziata con la conversione del noto indolo 17 in 24 tramite l'aggiunta del furano 22 allo ione iminio 21, che è stato generato in situ dall'aldeide 19. La ciclizzazione di 24 mediante una nuova reazione S(RN)1 seguita dalla rimozione del gruppo N-benzilico ha fornito una miscela ( 1:2) di 3a e 3b. In un approccio alternativo a questi alcaloidi, il biarile 35 è stato ridotto con DIBAL-H per dare un'immina intermedia che ha subito ciclizzazione spontanea tramite un'aggiunta intramolecolare di Mannich per fornire 36a,b. dei derivati benzilici carbammati 37a,b seguiti per deprotezione globale ha dato una miscela (2:1) di rugulovasine A e B (3a,b). La setoclavina (2) è stata quindi preparata dal biarile 41 utilizzando una reazione di Mannich intramolecolare viniloga strettamente correlata per fornire i lattoni spirociclici 42a,b. Questi lattoni sono stati successivamente trasformati per riduzione con idruro e metilazione riduttiva nei derivati ergolinici 43a,b, che sono stati a loro volta convertiti in 2 per deprotezione e riarrangiamento solvolitico 1,3 del gruppo idrossile allilico.
Nuovi prodotti dall'ossidazione dell'alcaloide norditerpenoide pseudaconina con HIO4.L'ossidazione della pseudaconina 8, un alcaloide norditerpenico, con HIO4 ha portato a una serie di nuovi prodotti interessanti, che dipendono molto dal mezzo di reazione e dalle condizioni di lavorazione. Il trattamento di 8 in MeOH-H2O (1:1) con NaIO4 ha dato i composti 10 e 11, ma il composto 12 è stato ottenuto quantitativamente quando la soluzione di reazione finale è stata alcalinizzata con conc. NH4OH. L'immina 12 è stata ottenuta anche con una resa del 100% trattando 8 in una soluzione di HCl al 5% con NaIO4 seguita dall'alcalinizzazione dei prodotti di reazione a pH>9 con conc. NH4OH. Quando il pH di elaborazione era 7-8, solo N, Si è formato acetal-chetale 13 miscelato in O con una resa del 96%, che è stato convertito quantitativamente in 12 mediante ulteriore alcalinizzazione. Quando la miscela di reazione è stata alcalinizzata a pH 7-8 con Na2CO3, è stato fornito un emiacetalchetale 14 quantitativamente, che è stato convertito in 15 con una resa dell'87% per ulteriore trattamento con Na2CO3 o 5% NaOH metanolo il composto 15 potrebbe essere riconvertito in 14 mediante trattamento con una soluzione di HCl al 10%. L'acetilazione dell'immina 12 ha dato i composti 16 e 17 rispettivamente con rese del 15% e del 19%. Tutti i nuovi composti sono stati isolati e completamente caratterizzati.
Sintesi e reattività dei metaboliti del catecolo dall'estrogeno equino, 8,9-deidroestrone.I fattori di rischio per le donne che sviluppano il cancro al seno e all'endometrio sono tutti associati a una vita di esposizione agli estrogeni. La terapia sostitutiva con estrogeni, in particolare, è stata correlata con un aumento del rischio di cancro. In precedenza, abbiamo dimostrato che gli estrogeni equini equilina ed equilenina, che sono i componenti principali della formulazione sostitutiva degli estrogeni ampiamente prescritta Premarin, vengono metabolizzati a chinoidi altamente citotossici che hanno causato stress ossidativo e alchilazione del DNA in vitro [Bolton, JL, Pisha, E. , Zhang, F. e Qiu, S. Chem. Res. Toxicol. 1998, 11, 1113-1127]. questo studio, abbiamo sintetizzato l'8,9-deidroestrone (un terzo componente estrogeno equino di Premarin) e i suoi potenziali metaboliti catecolici, 4-idrossi-8,9-deidroestrone e 2-idrossi-8,9-deidroestrone. -8,9-deidroestrone e 4-idrossi-8,9-deidroestrone erano ossidato da tirosinasi o microsomi di fegato di ratto a o-chinoni che hanno reagito con GSH per dare un coniugato mono-GSH e due coniugati di-GSH. Come gli estrogeni endogeni, l'8,9-deidroestrone è stato principalmente convertito dai microsomi di fegato di ratto nei coniugati 2-idrossilati piuttosto che nei 4-idrossilati o-chinone GSH; il rapporto tra 2-idrossi-8,9-deidroestrone e 4-idrossi-8,9-deidroestrone era 6:1. Inoltre, contrariamente agli esperimenti con l'equilina, la 4-idrossiequilenina non è stata osservata nelle incubazioni microsomiali con 8,9-deidroestrone o suoi catecoli. Il comportamento del 2-idrossi-8,9-deidroestrone è risultato essere più complesso del 4-idrossi-8,9-deidroestrone poiché i coniugati GSH risultanti dal 2-idrossi-8,9-deidroestrone sono stati rilevati anche senza catalisi enzimatica ossidativa. In condizioni fisiologiche, il 2-idrossi-8,9-deidroestrone si isomerizza a 2-idrossiequilenina per formare il catecolo 2-idrossiequilenina molto stabile; tuttavia, il 4-idrossi-8,9-deidroestrone è risultato stabile in condizioni simili. Infine, studi preliminari condotti con le linee cellulari S-30 di tumore al seno umano hanno dimostrato che i metaboliti catecolici dell'8,9-deidroestrone erano molto meno tossici della 4-idrossiequilenina (20-40 volte). Questi risultati suggeriscono che i metaboliti catecolici dell'8,9-deidroestrone possono avere la capacità di causare citotossicità in vivo principalmente attraverso la formazione di o-chinoni; tuttavia, la maggior parte degli effetti avversi degli estrogeni Premarin è probabilmente dovuta alla formazione di 4-idrossiequilenina o-chinone da equilina ed equilenina.
Quantificazione dell'occupazione del recettore 5-HT1A correlata al farmaco con.C'è un crescente interesse nel misurare l'interazione di farmaci nuovi o consolidati con i loro bersagli, al fine di ottenere una migliore comprensione dei loro meccanismi d'azione. La PET può fornire queste informazioni se è disponibile un radioligando appropriato. [18F]MPPF (4-(2\'-metossifenil)-1-[2\'-(N- 2"-piridinil)-p-[18F]fluorobenzamido]etilpiperazina) è un radioligando selettivo per i recettori della serotonina 5-HT1A. Abbiamo stabilito che il potenziale di legame (BP=Bmax/KD) di [18F]MPPF per i recettori 5-HT1A cerebrali può essere valutato nel cervello umano senza campionamento arterioso. Lo scopo di questo studio era valutare se l'occupazione del recettore 5-HT1A può essere misurata attraverso il calcolo di una diminuzione della PA correlata al farmaco con [18F]MPPF e PET. Sei volontari sono stati scansionati due volte utilizzando una fotocamera Siemens Exact HR+ dopo l'iniezione di 70+/-18 MBq [18F]MPPF (condizioni basali e medicate). Prima della seconda scansione, i volontari hanno ricevuto per via orale 3x10 mg di pindololo a T=-15,5 h, T=-6,5 h e T=-1,5 h (n=3) o 10 mg di buspirone in una singola dose a T\ =-1,5 ore (n=3). I potenziali di legame sono stati calcolati utilizzando il modello di tessuto di riferimento semplificato con il cervelletto come riferimento. La somministrazione di 30 mg di pindololo ha portato a una riduzione significativa del potenziale di legame del [18F]MPPF del 42+/-17%. Al contrario, non è stata osservata alcuna riduzione significativa del potenziale di legame del [18F]MPPF dopo la somministrazione di buspirone (5+/-17%). Questi risultati mostrano che [18F]MPPF può essere utilizzato per la misurazione dell'occupazione del recettore 5-HT1A correlata al farmaco e può essere di particolare interesse nel determinare l'interazione del recettore 5-HT1A di farmaci nuovi o consolidati negli studi sui farmaci di fase 1 e fase iniziale 2. . Apparentemente, l'agonista parziale 5-HT1A buspirone è già clinicamente efficace a bassi livelli di occupazione del recettore 5-HT1A.
Botrydial è prodotto in tessuti vegetali infettati da Botrytis cinerea.Il metabolita fungino botrydial è stato rilevato per la prima volta nei frutti maturi del peperone dolce (Capsicum annuum) inoculato nella ferita con sospensioni conidiali di Botrytis cinerea e anche in foglie di Phaseolus vulgaris e Arabidopsis thaliana inoculate senza ferire. Questa fitotossina è stata prodotta nelle regioni del marciume molle dell'infezione. In C. annuum, l'isolato più aggressivo ha prodotto la botrydial più alta concentrazioni in planta. I livelli di botrydial prodotti da questo isolato non erano correlati con le suscettibilità relative riportate di quattro genotipi di P. vulgaris. I risultati suggeriscono che il botrydial è un fattore di patogenicità per questo fungo, ma non un determinante primario di patogenicità.
Relazioni quantitative struttura-attività nella riduzione a due elettroni di composti nitroaromatici da parte di Enterobacter cloacae NAD(P)H:nitroreduttasi.Enterobacter cloacae NAD(P )H:nitroreduttasi (NR; EC 1.6.99.7) catalizza la riduzione di una serie di composti nitroaromatici con costanti di velocità bimolecolari allo stato stazionario (kcat/Km) che vanno da 10(4) a 10(7) M(-1) s (-1) In accordo con uno schema precedentemente proposto di riduzione in due fasi a quattro elettroni di nitroaromatici da parte di NR (Koder, RL e Miller, A. -F. (1998) Biochim. Biophys. Acta 1387, 395-405 ), sono state ossidate 2 mol di NADH per mole di mononitrocomposto. È stata osservata un'ossidazione di NADH in eccesso da parte dei polinitrobenzeni, inclusi gli esplosivi 2,4,6-trinitrotoluene (TNT) e 2,4,6-trinitrofenil-N-metilnitramina (tetryl). come un processo secondario più lento, accompagnato dal consumo di O2. Questo tipo di "ciclo redox" non era correlato a reazioni di radicali anionici nitroaromatici, ma era causato dall'autox idazione di prodotti di reazione relativamente stabili. La riduzione iniziale di tetryl e altre polinitrofenil-N-nitramine da parte di E. cloacae NR era analoga a un meccanismo di riduzione a quattro elettroni in due fasi di TNT e altri nitroaromatici. I log kcat/Km di tutti i composti esaminati hanno mostrato dipendenza parabolica dalle loro entalpie di riduzione a singolo elettrone oa due elettroni (idruro), ottenute mediante calcoli quantomeccanici. Questo tipo di relazione quantitativa struttura-attività mostra che la reattività dei nitroaromatici nei confronti della nitroreduttasi di E. cloacae dipende principalmente dalle loro proprietà di accettazione dell'idruro, ma non dalla loro particolare struttura, e non esclude la possibilità di trasferimento di idruro in più fasi.
Degradazione fotocatalitica dell'acido blu 80 in soluzioni acquose contenenti sospensioni di TiO2.La degradazione fotocatalitica del colorante antrachinonico Acid Blue 80 in soluzioni acquose contenenti dispersioni di TiO2 Il processo è stato monitorato seguendo sia la scomparsa del colorante (tramite HPLC) sia la formazione dei suoi prodotti finali (tramite analisi IC, GC e TOC). Anche se una decolorazione relativamente rapida delle soluzioni è stata osservata, la mineralizzazione è più lenta e la presenza di composti organici residui è stata evidenziata anche dopo irradiazione a lungo termine, a conferma della relativa stabilità dei derivati antrachinonici. L'identificazione di vari intermedi instabili formatisi dopo tempi di irraggiamento bassi è stata effettuata mediante HPLC-MS, consentendoci di per dare un'idea delle prime fasi del processo di degradazione che coinvolgono principalmente la rottura dei legami CN e l'idrossilazione del substrato Minerali completi e relativamente veloci ization del substrato è stata ottenuta irradiando le dispersioni di semiconduttori in presenza di K2S2O8 aggiunto.
Spettroscopia di correlazione di fluorescenza come nuovo metodo per lo studio delle interazioni aptamer/bersaglio.La spettroscopia di correlazione di fluorescenza è uno strumento interessante per monitorare le interazioni molecolari in soluzione Riportiamo qui un metodo nuovo e altamente sensibile per studiare l'interazione degli aptameri con i loro bersagli utilizzando questa tecnica. La tecnologia di selezione in vitro è un metodo combinatorio per la generazione di recettori dell'acido nucleico (aptameri) che sono in grado di legarsi a varie molecole bersaglio Utilizzando l'approccio di selezione in vitro abbiamo isolato gli RNA che si legano all'antibiotico moenomicina con elevata affinità. La formazione di complessi RNA-moenomicina è stata studiata mediante spettroscopia di correlazione di fluorescenza con un derivato della moenomicina marcato con tetrametilrodamina.
Meccanismi di azione rilassante di S-petasin e S-isopetasin, sesquiterpeni di Petasites formosanus, nella trachea isolata di cavia.Abbiamo studiato i meccanismi di azione di S-petasin e S-isopetasin, da Petasites formosanus Kitamura che è usato come medicina popolare per il trattamento di ipertensione, tumori e asma a Taiwan. I cambiamenti di tensione dei segmenti tracheali sono stati registrati isometricamente su un poligrafo. S-Petasin e S -isopetasina non ha inibito in modo competitivo le contrazioni cumulative indotte da istamina e carbacolo, con l'eccezione che la S-isopetasina ha prodotto uno spostamento parallelo verso destra della curva concentrazione-risposta del carbacolo in modo competitivo. Contrazioni indotte da Ca(2+) nella trachea di cavia depolarizzata (K+, 60 mM; istamina, 100 microM; o carbacolo, 10 microM). La S-Isopetasina lo ha fatto anche nella trachea depolarizzata (K+, 60 mM). La nifedipina ( 10 microM)-tensione residua di c La precontrazione indotta da arbachol (0,2 microM) è stata ulteriormente rilassata da S-petasina o S-isopetasina, suggerendo che, indipendentemente dal fatto che i VDCC siano bloccati o meno, S-petasina o S-isopetasina possono avere altri meccanismi di azione rilassante. L'effetto rilassante di S-petasina o S-isopetasina non è stato influenzato dalla presenza di propranololo (1 microM), 2\',5\'-dideossiadenosina (10 microM), blu di metilene (25 microM), glibenclamide (10 microM), N omega-nitro-L-arginina (20 microM), o alfa-chimotripsina (1 U/ml). Tuttavia, S-petasina (100-300 microM), ma non S-isopetasina, ha inibito significativamente l'attività PDE cAMP-, ma non cGMP-dipendente della tracheale. I risultati di cui sopra rivelano che i meccanismi dell'azione rilassante della S-petasina e della S-isopetasina possono essere principalmente dovuti ai suoi effetti antispasmodici e antimuscarinici non specifici, rispettivamente.
2,5-pirrolidinedioni alogenati: sintesi, mutagenicità batterica nel ceppo tester di Ames TA-100 e calcoli semi-empirici dell'orbitale molecolare.La cloroimmide 3 ,3-dicloro-4-(diclorometilene)-2,5-pirrolidinedione, un tetracloroitaconimide, è il principale mutageno prodotto dalla clorazione dell'acqua di raffreddamento simulata del pollame. È il secondo sottoprodotto di disinfezione mutageno più potente della clorazione mai riportato. di sette nuovi analoghi sintetici di questo composto sono mutageni ad azione diretta nel ceppo di tester di Ames TA-100. Energie calcolate dell'orbitale molecolare più basso non occupato (E(LUMO)) e della stabilità dell'anione radicale (DeltaH(f)(rad)- DeltaH(f)) da MNDO-PM3 per le cloroimmidi mostra una correlazione quantitativa con i valori di mutagenicità batterica di Ames TA-100. Le mutagenicità molari di queste immidi mutagene ad azione diretta con un doppio legame esociclico si adattano alla stessa correlazione lineare (lnM(m) contro E(LUMO);lnM(m) contro DeltaH(f) (rad)--DeltaH(f)) come i 2(5H)-furanoni clorurati, incluso il potente mutageno MX, 3-cloro-4-(dicloro-metil)-5-idrossi-2(5H)-furanone, un sottoprodotto della clorazione dell'acqua e dello sbiancamento della carta con cloro. Sono forniti anche dati di mutagenicità per aloimmidi correlate aventi doppi legami endociclici. Per lo stesso numero di atomi di cloro, le immidi con doppi legami endociclici hanno una mutagenicità di Ames significativamente maggiore rispetto ai loro analoghi strutturali con doppi legami esociclici, ma non seguono lo stesso E(LUMO) o DeltaH(f)(rad)-DeltaH( f) correlazione come le cloroimmidi esocicliche e i 2(5H)-furanoni clorurati.
Fase I e studio farmacocinetico di BMS-184476, un taxano con maggiore potenza e solubilità rispetto al paclitaxel.Per valutare fattibilità, tossicità, farmacocinetica, e attività preliminare di BMS-184476 somministrato come infusione endovenosa (IV) di 1 ora ogni 3 settimane. I pazienti con tumori solidi avanzati sono stati trattati con dosi crescenti di BMS-184476 come infusione endovenosa di 1 ora ogni 3 settimane senza premedicazione per prevenire reazioni di ipersensibilità (HSR) Per caratterizzare la farmacocinetica e la farmacodinamica di BMS-184474 sono stati eseguiti prelievi di plasma e urine, 34 pazienti sono stati trattati con 78 cicli di BMS-184476 a cinque livelli di dose compresi tra 20 e 80 mg/m2. La tossicità dose-limitante (DLT), consistente in neutropenia grave con febbre, diarrea grave e/o mucosite grave, è stata riscontrata durante il corso 1 in sei dei nove pazienti minimamente pretrattati trattati con dosi di 70 e 80 mg/m2. , di 15 pazienti valutabili trattati al livello di dose di 60 mg/m2, che è la dose massima tollerata (MTD) di BMS-184476 con questo schema di somministrazione, solo un paziente pesantemente pretrattato ha sviluppato DLT (neutropenia di grado 4 con febbre e diarrea di grado 3). Un paziente ha sviluppato una HSR di grado 2 durante un secondo ciclo di BMS-184476 al livello di dose di 40 mg/m2. Un paziente precedentemente non trattato con un colangiocarcinoma avanzato ha avuto una risposta parziale e un paziente con un carcinoma della giunzione gastroesofagea non trattato ha avuto una risposta minore. La farmacocinetica di BMS-184476 sembrava lineare nell'intervallo di dosi studiato. I valori medi +/- DS per clearance, volume di distribuzione allo stato stazionario ed emivita terminale erano 220 +/- 89 ml/min/m2, 402 +/- 231 L/m2 e 40,8 +/- 21,8 ore , rispettivamente. La MTD e la dose raccomandata per le valutazioni di fase II di BMS-184476 è di 60 mg/m2 come infusione endovenosa di 1 ora ogni 3 settimane. I risultati di questo studio suggeriscono che BMS-184476 può avere diversi vantaggi rispetto al paclitaxel in termini di tossicità, farmacocinetica, farmaci e somministrazione e giustifica un ulteriore sviluppo clinico.
Relazione tra atrofia muscolare scheletrica e stato funzionale: una revisione sistematica della ricerca.Nel campo della ricerca sull'atrofia muscolare, molti studi affrontano dettagli minuziosi di funzione ma pochi esaminano gli effetti dell'atrofia in termini di mobilità, forza, resistenza e prestazioni delle attività della vita quotidiana. La relazione tra menomazione e limitazione funzionale è al centro di questa rassegna di ricerca. Una vasta gamma di studi costituisce quest'area di indagine , comprese indagini diverse e ampiamente disparate come la chimica molecolare e i viaggi spaziali e popolazioni diverse come ratti, giovani uomini sani e donne anziane. Trentaquattro studi sono stati selezionati in base alla loro corrispondenza con il modello Enabling-Disabling. Tre paradigmi di atrofia e la funzione è emersa. L'adattamento riflette la natura plastica del muscolo quando posto in determinate condizioni, che vanno dal disuso all'esercizio ad alta resistenza. le tessuto da ischemia, farmaci, o ricarico o trauma da riperfusione. Anche in questa categoria è la perdita di muscolo che si vede con l'invecchiamento. L'integrità si riferisce alla tendenza del muscolo a proteggersi ea mantenere le adiacenze strutturali e le proporzioni cellulari. Sulla base dei 3 paradigmi di ricerca muscolare, la relazione tra atrofia muscolare e funzione è descritta come un'interazione bidirezionale in cui forma e funzione si influenzano a vicenda attraverso cambiamenti fisici, inclusi quelli di adattamento, lesioni/perdita o integrità. Un modello concettuale è costruito per riflettere questa relazione.