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Metabolismo del carbonio e dell'ammoniaca di Spirillum lipoferum.Cellule intatte ed estratti di Spirillum lipoferum rapidamente ossidati malato, succinato, lattato e piruvato. Glucosio, galattosio , fruttosio, acetato e citrato non hanno aumentato il tasso di assorbimento di O2 da parte delle cellule al di sopra del tasso endogeno. Le cellule cresciute su NH+/4 hanno ossidato i vari substrati all'incirca alla stessa velocità delle cellule cresciute su N2. Aggiunto generalmente nicotinammide adenina dinucleotide ossidato l'aumento dell'assorbimento di O2 da parte degli estratti forniti acidi organici, mentre la nicotinammide adenina dinucleotide fosfato ossidata ha avuto scarso effetto. La sintesi della nitrogenasi repressa dalla crescita delle cellule in presenza di NH+/4 è stata derepressa dalla metionina sulfoximina o dalla metionina solfone. L'attività totale della glutammina sintetasi da N2- cellule cresciute era circa otto volte quella da NH+/4-cresciute S. lipoferum, la risposta della glutammato deidrogenasi era l'opposto. L'attività totale di glutammato sintetasi da N2-cresciute S. li poferum era da 1,4 a 2,6 volte quello delle cellule cresciute con NH+/4. I livelli di poli-beta-idrossibutirrato e beta-idrossibutirrato deidrogenasi erano elevati nelle cellule cresciute su N2 rispetto a quelle cresciute su NH+/4. Sono stati preparati estratti cell-free in grado di ridurre C2H2; sia Mg2+ che Mn2+ sono necessari per una buona attività.
Dimensione e attività trasformante dell'acido desossiribonucleico in Diplococcus pneumoniae durante la carenza di timidina.L'attività trasformante e la struttura molecolare del DNA dalle cellule di Diplococcus pneumoniae durante la carenza di timidina è stata analizzata e gli effetti della carenza di timidina sono stati confrontati con gli effetti delle rotture a filamento singolo prodotte dalle desossiribonucleasi nel DNA di cellule non affamate La diminuzione dell'attività trasformante dei lisati da cellule affamate in funzione della dimensione delle particelle di DNA , misurato mediante centrifugazione in gradienti di saccarosio neutri e alcalini, non segue la cinetica osservata dopo la degradazione enzimatica del DNA di cellule non affamate. Inoltre, un ceppo privo di attività eso- ed endonucleasica non è protetto dalla morte senza timina. Questi risultati suggeriscono che il letale di base meccanismo di carenza di timidina potrebbe avere un'origine diversa dall'attivazione delle nucleasi.
Alfa-amilasi termoacidofila stabile e inducibile da Bacillus acidocaldarius.Bacillus acidocaldarius Agnano 101 produce un'alfa-amilasi termoacidofila inducibile. La produzione dell'enzima avviene durante il fase stazionaria di crescita in presenza di composti con legami alfa-1,4-glucosidici L'attività enzimatica è sia presente nel terreno di coltura che associata alle cellule, gli enzimi purificati da entrambe le fonti mostrano proprietà molecolari e catalitiche identiche. l'amilasi ha una singola catena polipeptidica di peso molecolare 68.000 e si comporta come un'alfa-amilasi con costanti di affinità per l'amido e le sostanze correlate da 0,8 a 0,9 mg/ml. Il pH e la temperatura ottimali per l'attività sono rispettivamente 3,5 e 75 gradi C. L'amilasi è stabile a pH acido (inferiore a 4,5). La sua stabilità termica è strettamente dipendente dalla concentrazione proteica; l'emivita a 60 gradi C dell'amilasi in una soluzione da 70 tazze/ml è di circa 5 giorni.
Ceppi mutanti (nit) di Salmonella typhimurium con un difetto pleiotropico nel metabolismo dell'azoto.Abbiamo isolato ceppi mutanti (nit) di Salmonella typhimurium che sono difettosi nel metabolismo dell'azoto. Hanno una ridotta capacità di utilizzare una varietà di composti tra cui glutammato, prolina, arginina, N-acetil-glucosamina, alanina e adenosina come unica fonte di azoto. Inoltre, sebbene crescano normalmente su alte concentrazioni di ammonio cloruro (maggiore di 1 mM) come fonte di azoto, crescono sostanzialmente più lentamente del tipo selvatico a basse concentrazioni (meno di 1 mM). Abbiamo ipotizzato che l'incapacità di questi ceppi di utilizzare basse concentrazioni di cloruro di ammonio spieghi la loro scarsa crescita su altre fonti di azoto La lesione biochimica specifica nei ceppi con una mutazione nit non è nota; tuttavia, i ceppi mutanti non hanno alterazioni rilevabili nelle attività della glutammina sintetasi, glutammato sintetasi o glutammato deidro ogenasi, gli enzimi noti per essere coinvolti nell'assimilazione dell'ammoniaca. Una mutazione nit è soppressa da mutazioni del secondo sito nel gene strutturale per la glutammina sintetasi (glnA) che diminuiscono l'attività della glutammina sintetasi.
Ossidazione microbica del metano e del metanolo: cristallizzazione e proprietà della metanolo deidrogenasi da Methylosinus sporium.I metilotrofi obbligati sono divisibili in due tipi sulla base della struttura ultrastrutturale caratteristiche biochimiche. Entrambi i gruppi possiedono una metanolo deidrogenasi solubile fenazina metosolfato (PMS)-dipendente. Inoltre, sono state trovate metanolo deidrogenasi particolato PMS-dipendente e metanolo ossidasi PMS-indipendente nel gruppo di membrana di tipo I. È stata sviluppata una procedura per la cristallizzazione di metanolo deidrogenasi dalla frazione solubile del metilotropo obbligato di tipo II Methylosinus sporium. Questo è il primo rapporto di una metanolo deidrogenasi cristallina da un batterio metilotrofico. L'enzima cristallizzato è omogeneo come giudicato dall'ultracentrifugazione e dall'elettroforesi su gel di acrilammide. In presenza di un accettore di elettroni (fenazina o composto di fenazinio) e un attivatore (composto di ammonio) , l'enzima cristallizzato ha catalizzato l'ossidazione degli alcoli primari e della formaldeide. Gli alcoli secondari, terziari e aromatici non sono stati ossidati. Il peso molecolare dell'enzima come stimato mediante filtrazione su gel è di circa 60.000 e come stimato dall'analisi dell'equilibrio di sedimentazione è di 62.000. La costante di sedimentazione (S20,W) è 2,9. La dimensione della subunità determinata mediante elettroforesi su gel di sodio dodecil solfato è di circa 60.000. Vengono inoltre presentate la composizione amminoacidica e le proprietà spettrali dell'enzima. Gli antisieri preparati contro l'enzima cristallino non sono specifici, hanno reagito in modo incrociato e hanno inibito gli enzimi isofunzionali di altri batteri metilotrofi obbligati.
Metabolismo della DL-(+/-)-fenilalanina da Aspergillus niger.Un fungo in grado di degradare la DL-fenilalanina è stato isolato dal terreno e identificato come Aspergillus niger. È stato scoperto che metabolizza la DL-fenilalanina attraverso una nuova via che coinvolge l'acido 4-idrossimandelico. D-amminoacido ossidasi e L-fenilalanina: l'aminotransferasi dell'acido 2-ossoglutarico ha avviato la degradazione di D- e L-fenilalanina, rispettivamente Sia l'attività della fenilpiruvato ossidasi che quella della fenilpiruvato decarbossilasi potrebbero essere dimostrate nel sistema privo di cellule. La fenilacetato idrossilasi, che richiedeva una riduzione della nicotinammide adenina dinucleotide fosfato, convertì l'acido fenilacetico in acido 2- e 4-idrossifenilacetico. Anche se il 4-idrossifenilacetato fu convertito in 4- idrossimandelato, 2-idrossifenilacetato non è stato utilizzato fino all'inizio della sporulazione. Durante la sporulazione, è stato convertito rapidamente in omogentisato e ossidato a prodotti tagliati ad anello. 4-idrossimandelato è stato degradato ded a protocatechuate tramite 4-idrossibenzoilformiato, 4-idrossibenzaldeide e 4-idrossibenzoato.
La proliferazione di cellule emopoietiche trapiantate derivate dal midollo osseo e dal fegato fetale.La proliferazione di cellule ematopoietiche murine trapiantate, derivate dal midollo osseo femorale di giovani adulti e dal fegato al sedicesimo giorno di gestazione, è stato confrontato in condizioni standardizzate Sospensioni di cellule del midollo osseo contenevano 9-6+/-0-9 CFU per 10(5) cellule (sm) e sospensioni di fegato fetale le cellule contenevano 3-7+/-0-5 CFU per 10(5) cellule (Sl). Sl/Sm = 0-4. Il diametro medio delle colonie stabilite dalle cellule derivate dal midollo osseo era 1-3+/- 0-3 mm (volume medio stabilito, Vm = 1-2 mm3) e il diametro medio delle colonie stabilite da cellule derivate dal fegato fetale era 1-7+/-0-1 mm (volume medio stimato, Vl ;-6 mm3). Vl/Vm ;-2. È stata confermata la relazione tra il peso della milza e il numero di cellule del midollo osseo iniettate in riceventi irradiati letalmente 10 giorni prima, e un simile r è stata dimostrata la relazione tra il peso della milza e il numero di cellule epatiche fetali iniettate. Una differenza arbitrariamente definita di 50 mg tra il peso della milza nei controlli irradiati non trattati e il peso della milza nei riceventi irradiati di cellule ematopoietiche è stata osservata 10 giorni dopo la somministrazione di 2-2 x 10(6) cellule del midollo osseo ( Dm) o 3-0 x 10(6) cellule epatiche fetali (Dl). Dm/Dl = 0-7. I valori calcolati di Dm/Dl (capacità proliferativa relativa), Sl/Sm (contenuto relativo di cellule staminali) e Vl/Vm (dimensione relativa del clone) sono in buon accordo con i valori stimati utilizzando l'equazione Dm/Dl = Sl/Sm x Vl/Vm.
Osservazioni sull'immobilizzazione del cervo di Père David.Etorfina e xilazina sono risultate essere una combinazione di farmaci sicura e affidabile per l'immobilizzazione di Père David "Cervo di Père David, eccitato o non eccitato. Il cervo eccitato ha avuto un periodo di preimmobilizzazione più lungo, se confrontato con il cervo non eccitato a dosaggi comparabili. In genere, lo stato acido-base dei cervi di Père David durante l'immobilizzazione non è stato seriamente alterato. Il cervo che era stato eccitati ed esercitati hanno avuto lievi problemi respiratori; il cervo non eccitato, relativamente calmo ha presentato un'acidosi minima. Ph e PO2 significativamente alti e valori significativamente più bassi di PCO2 e bicarbonato sono stati trovati nel cervo eccitato, rispetto al cervo non eccitato. Rapidi cambiamenti fisiologici si sono verificati dopo il somministrazione endovenosa dell'antagonista, la diprenorfina.
Interazione di Listeria monocytogenes e influenza in un modello animale.Questo studio è stato progettato per studiare gli effetti dei virus nella patogenesi di Listeria monocytogenes. gli organismi utilizzati in questo studio erano: Listeria monocytogenes Tipo 1 isolato da un caso fatale locale; Influenza adattata al topo A/PR8/34 (HONI); Streptococcus pneumoniae Gruppo B (UM Med. Ctr. ) e poliovirus Tipo 2 MEF--G3M2. I topi Balb-C sono stati inoculati per via intraperitoneale con una LD50 di Listeria monocytogenes. Dieci giorni dopo, i sopravvissuti sono stati stimolati per via intratransale con 10 LD50 del virus dell'influenza e osservati per 14 giorni. Un'altra serie di topi Balb-C è stata inoculata per via intranasale con una LD50 di influenza virus e i sopravvissuti sono stati stimolati 14 giorni dopo per via intraperitoneale con 10 LD50 di Listeria monocytogenes. I controlli consistevano in metodi di inoculazione e provocazione simili nei topi utilizzando Streptococcus pneumoniae e virus della polio con Listeria monocytogenes e influenza v irus. La protezione incrociata è stata osservata solo tra Listeria monocytogenes e il virus dell'influenza. L'immunità cellulare può svolgere un ruolo in questa interazione. Questi risultati sembrano concordare con i rapporti di altri che hanno mostrato una protezione incrociata tra Listeria monocytogenes e altri batteri e parassiti intracellulari.
L'effetto dei miotici sulla pressione intraoculare delle scimmie gufo coscienti.La pressione intraoculare delle scimmie gufo coscienti e non sedate (Aotus trivirgatus) è stata misurata con un tonometro ad applanazione. Gli occhi non trattati degli animali coscienti sono risultati avere valori più alti di quelli riportati per le scimmie gufo anestetizzate con pentobarbital. Pilocarpina, carbacolo e oxotremorina applicati localmente hanno dato una riduzione della pressione correlata alla concentrazione, essendo l'oxotremorina il più potente e con più durata dell'effetto rispetto agli altri composti. Leggere riduzioni sono state osservate anche con aceclidina e RS 86. Questi risultati sono discussi in relazione agli effetti dei miotici nell'uomo.
La risposta della pressione intraoculare dei conigli coscienti alla clonidina.È stato effettuato uno studio sui corsi temporali delle risposte alla pressione pupillare e intraoculare dei conigli coscienti alla clonidina somministrata per via topica o endovenosa. L'applicazione topica unilaterale di clonidina ha causato una transitoria dilatazione della pupilla e una risposta bifasica pressoria intraoculare; una risposta ipertensiva iniziale ha preceduto una fase ipotensiva della durata di diverse ore. Nell'occhio non trattato erano assenti risposte pupillari e ipertensive, ma c'era una rapida diminuzione della pressione intraoculare La somministrazione endovenosa di clonidina ha causato un'immediata e ampia diminuzione della pressione intraoculare in entrambi gli occhi La fenossibenzamina somministrata per via endovenosa ha inibito la dilatazione pupillare e le risposte ipertensive alla clonidina Il ruolo dell'attività neuronale adrenergica efferente nel mediare la bifasica locale risposta alla pressione è stata studiata in conigli con precervi. unilaterale simpatotomia cal e postcervicale. I risultati hanno mostrato che la risposta ipotensiva dipende da un'innervazione adrenergica intatta dei tessuti oculari.
Prevenzione della mutagenicità indotta dal benzo(a)pirene mediante epossido idratasi omogenea.Benzo(a)pirene e benz(a) anthrancene che, in contrariamente alla regione K gli epossidi benzo(a)pirene 4,5-ossido e benz(a)antracene 5,6-ossido, non sono mutageni per Salmonella typhimurium TA 1537 in assenza di preparati enzimatici di mammifero, sono stati attivati da microsomi epatici da topi C3H, che non avevano ricevuto alcun pretrattamento, a mutageni che riportano questo ceppo tester alla prototrofia dell'istidina L'aggiunta di inibitori dell'epossido idratasi ha notevolmente aumentato questa mutagenicità e l'aggiunta di pura epossido idratasi l'ha ridotta di oltre il 95% fino alla gamma di mutazioni spontanee come osservato in assenza di qualsiasi agente mutageno aggiunto. Ciò dimostra che la via metabolica responsabile della mutagenicità di entrambi gli idrocarburi policiclici osservata in questo sistema procede interamente attraverso una via di epossidazione e che i metaboliti responsabili sono epossidi o specie arisina g da loro. Inoltre, un ulteriore metabolismo da parte dell'epossido idratasi non porta a produrre contribuendo alla mutagenicità osservata con il ceppo tester utilizzato. Infine, gli epossidi rilevanti per la mutagenicità osservata sono substrati per l'epossido idratasi; infatti, modeste quantità di enzima puro possono prevenire l'effetto mutageno.
Risposta blastogenica dei linfociti umani agli antigeni batterici orali: confronto tra individui con malattia parodontale e soggetti normali ed edentuli.Immunità cellulo-mediata nell'uomo a Gli antigeni derivati dai batteri della placca orale sono stati studiati utilizzando il test di blastogenesi dei linfociti Sono stati confrontati soggetti con gravità variabile di malattia parodontale tra cui normale, gengivite, parodontite ed edentula. Leucociti mononucleati sono stati separati dal sangue periferico e coltivati con antigeni preparati mediante sonicazione di Actinomyces viscosus (AV), Actinomyces naeslundii (AN), Veillonella alcalescens (VA), Leptotrichia buccalis (LB), Bacteroides melaninogenicus (BM), e placca dentale omologa (DP). La risposta linfocitaria dei soggetti con gengivite o parodontite era significativamente maggiore di quella quella dei soggetti normali agli antigeni di AV, AN e DP, ma non differiva dalla risposta dei soggetti edentuli. erano significativamente più reattivi rispetto ai soggetti edentuli e normali in risposta a VA, LB e BM. Questi risultati suggeriscono che i batteri gram-negativi testati e la risposta dell'ospite che evocano sono associati alla distruzione parodontale avanzata.
L'attivatore della cerebroside solfatasi. Localizzazione lisosomiale.1) Una proteina attivatrice necessaria per l'idrolisi enzimatica del cerebroside solfato potrebbe essere parzialmente purificata dal ratto non frazionato fegato. Questo attivatore, che è simile a quello di origine umana, ha dimostrato di essere una proteina termostabile, non dializzabile, a basso peso molecolare con un punto isoelettrico di 4.1. La sua attività potrebbe essere distrutta dalla pronasi. 2) Per delucidazione di la localizzazione subcellulare dell'attivatore, fegato di ratto è stata frazionata mediante centrifugazione differenziale. La distribuzione intracellulare dell'attivatore cerebroside solfatasi è stata confrontata con i modelli di distribuzione degli enzimi marcatori per diversi organelli cellulari e trovata coincidere con l'arilsolfatasi lisosomiale, indicando così una localizzazione lisosomiale 3) Ciò è stato confermato utilizzando lisosomi secondari altamente purificati, cioè carichi di ferro. Dopo la rottura per shock osmotico, questi organelli hanno idrolizzato la cerebrosi de solfato quando le incubazioni sono state eseguite in condizioni fisiologiche con solfatasi A endogena ed esogena come enzima. 4) Dopo il subfrazionamento dei lisosomi secondari disgregati nelle frazioni di membrana e lisosolo mediante centrifugazione ad alta velocità, si è riscontrato che la proteina attivatore era esclusivamente associata al lisosolo, mentre le idrolasi acide erano distribuite in modo diverso tra le due frazioni. 5) Il lisosolo è stato ulteriormente frazionato mediante elettroforesi semi-preparativa su gel di poliacrilammide. Sono state ottenute due frazioni proteiche: una frazione ad alto peso molecolare, contenente le idrolasi acide prive di attivatore, e una frazione a basso peso molecolare, contenente l'attivatore esente da enzimi della cerebroside solfatasi. 6) Viene discusso il significato di questi risultati per l'idrolisi degli sfingolipidi nei lisosomi.
Studi sul metabolismo dell'acido ribonucleico utilizzando colonne nucleari. Rilascio di RNA rapidamente marcato da nuclei di fegato di ratto.Descrizione di un metodo per studiare l'effetto di mutevoli condizioni di incubazione sul rilascio di RNA rapidamente marcato da nuclei isolati Colonne nucleari contenenti nuclei immobilizzati di fegato di ratto isolati dopo l'applicazione in vivo di acido orotico marcato sono perfuse con diversi mezzi non radioattivi Nel corso di una perfusione, la velocità di RNA il rilascio può essere ripetutamente alterato dalla variazione di temperatura, acidità e concentrazioni di nucleosidi trifosfati, agenti complessanti, cloruro di sodio e cloruro di manganese. Il rilascio di RNA può essere avviato e interrotto, indicando che la reazione non deriva da danni ai nuclei. Durante 60 min di perfusione lo stesso prodotto, etichettato ribonucleoproteina (sigma = 1,43 g/cm3 in CsCl), viene rilasciato. Alti tassi di rilascio dipendono dal rapporto tra nucleoside trifosfato e bivalente concentrazione di cationi, non sulla concentrazione degli agenti in sé. Il ribonucleoside e il desossiribonucleosidi trifosfati esercitano lo stesso effetto dell'ATP. I reagenti SH iodoacetamide e iodoacetato influenzano solo leggermente la reazione indotta dall'ATP. Al contrario, il p-cloromercuribenzoato, dopo una stimolazione iniziale, provoca l'inibizione del rilascio di RNA.
[Metabolismo dell'acido nicotinico in colture in sospensione di cellule vegetali: II; Isolamento, caratterizzazione ed enzimologia dell'acido nicotinico N-alfa-arabinoside (autore\'s trad.)]", Un composto molto idrofilo è stato isolato da colture in sospensione di cellule di prezzemolo in alta resa dopo l'applicazione di acido nicotinico. Utilizzando procedure chimiche, cromatografiche e spettroscopiche, la struttura di questo nuovo costituente vegetale è stata chiarita come acido nicotinico N-alfa-L -arabinopiranoside. Questa struttura è stata dimostrata mediante sintesi chimica. Un'arabinosiltransferasi è stata isolata da colture in sospensione di cellule di prezzemolo e purificata circa 19 volte. L'enzima ha convertito l'acido nicotinico N-alfa-arabinoside con UDP in acido nicotinico e UDP-arabinosio. Sono stati misurati il valore ottimale (pH 7,0-8,0), il valore Km per l'acido nicotinico N-alfa-L-arabinoside (2,2 X 10(-4) mol/l) e il peso molecolare (circa 70 000) della transferasi. e la biosintesi dell'arabinoside nelle colture cellulari sono di scusi.
La modificazione chimica di due residui di triptofano abolisce l'attività catalitica dell'aminoacilasi.1) La reazione dell'1 H-diazotetrazolo e della N-bromosuccinimide con l'aminoacilasi è stata studiato in condizioni diverse. Un eccesso molare dieci volte maggiore di 1 H-diazotetrazolo (2 X 10(-4) M) a pH 5,5 abolisce l'attività catalitica dell'enzima modificando solo due residui di triptofano. Nessun altro amminoacido ha reagito in queste condizioni come testato mediante analisi degli amminoacidi. 2) Con un eccesso molare di 40 volte di N-bromosuccinimide (8 X 10(-4)M) a pH 5,0, due residui di triptofano dell'enzima sono stati ossidati con completa perdita di attività. In queste condizioni non è stata osservata una significativa scissione della catena polipeptidica. Né la tirosina né l'istidina sono state modificate da questo reagente, fino a un eccesso molare di 100 volte.3) I substrati e gli inibitori reversibili (N-tosilalanina) e irreversibili (TosPheCH2Cl) dell'enzima non proteggere i due triptofani reattivi contro th e reagenti di modifica. In condizioni più drastiche, i reagenti modificano anche i residui di lisina, tirosina e istidina.
Effetto dell'ipofisectomia e dell'insulina sulla lipogenesi nei galletti.L'ipofisectomia aumenta la lipogenesi epatica nei galletti. Nel tentativo di trovare il possibile meccanismo ormonale per questo hanno esaminato gli effetti dell'ipofisectomia, dell'insulina e degli omogenati ipofisari sulla lipogenesi epatica. L'insulina (5 U/kg) iniettata per via endovenosa, contemporaneamente al tracciante glucosio-14C, ha aumentato la quantità di 14C presente nei lipidi epatici a 30 minuti dall'iniezione. l'insulina iniettata 5 minuti prima dell'uccisione, ha aumentato l'incorporazione di glucosio-14C e acetato-14C da parte di fette di fegato durante un'incubazione di 30 minuti. L'ipofisectomia ha aumentato la lipogenesi entro 24 ore. L'effetto dell'insulina è stato più pronunciato nei galletti ipofisectomizzati. L'attività del lipogenico enzima, l'acetil CoA carbossilasi è stata similmente influenzata. Un omogenato di ipofisi di pollo aggiunto al mezzo ha ridotto la sintesi lipidica dal glucosio-14C mediante fette di fegato. Questo effetto era maggiore in fette di fegato in cui la lipogenesi era stata stimolata dall'insulina. L'aumento del tasso di lipgenesi epatica nei galletti ipofisectomizzati può essere causato in parte dall'aumento della sensibilità epatica all'azione lipogenica dell'insulina o dalla rimozione di un'inibizione diretta da parte degli ormoni ipofisari.
[Meccanismo d'azione della dibenamina sul tono e inibizione della contrazione farmacologica dell'ileo isolato di cavia, con particolare riferimento alla sua relazione con Ca].La dibenamina (DB) ha prodotto una contrazione dovuta all'afflusso e al rilascio di Ca nel mezzo normale, mentre ha prodotto il rilassamento della contrazione indotta da K a causa della depressione dell'attività della membrana cellulare muscolare. La DB ha inibito l'afflusso attivo, l'afflusso passivo e rilascio di Ca indotto da ACh in questo ordine come le concentrazioni sono state aumentate e anche inibito selettivamente la contrazione dell'istamina rispetto alle contrazioni di ACh, K e Ba, l'inibizione delle contrazioni ACh, K e Ba essendo quasi a lo stesso grado. Inoltre, DB ha inibito più o meno allo stesso grado la contrazione fasica (PC) e la contrazione tonica (TC) da parte dell'istamina, mentre inibiva la TC piuttosto che la PC indotta da ACh, K e Ba. Inibizione irreversibile da parte di DB di Contrazioni indotte da ACh, K e Ba erano protetti dal Ca, mentre quelli della contrazione indotta dall'istamina erano protetti selettivamente dall'istamina e dall'antistaminico, ma non dal Ca. Questi risultati indicano che l'antagonismo di DB e la sua irreversibilità contro l'istamina possono essere dovuti al blocco del recettore istaminergico, mentre quelli contro ACh, K e Ba possono essere dovuti all'inibizione del sito Ca. Sono state ottenute prove che suggeriscono che lo spostamento parallelo irreversibile a destra della curva log concentrazione-azione dell'istamina dopo il washout di DB può essere dovuto a recettori di riserva, mentre quello di ACh, K o Ba può essere dovuto all'inibizione del Ca- posto.
[Studio sperimentale sulla previsione della tossicità dei farmaci. Emolisi indotta da farmaci e lisi dei lisosomi in vitro].L'effetto dei farmaci sui lisosomi isolati di fegato di ratto , eritrociti e alcuni enzimi eritrocitari è stato studiato in vitro Molti tranquillanti, antistaminici e antidepressivi, che sono noti per avere il maggior numero di reazioni avverse nell'uso clinico, hanno avuto un effetto litico sulle membrane delle particelle a concentrazioni superiori a 2 X 10 (-4 ) M. Il presente studio ha evidenziato una buona correlazione tra la po LD50 (ratto e topo) e H30 (concentrazione molare del farmaco che causa il 30% di emolisi). Si suggerisce, quindi, che l'effetto labilizzante dei farmaci sugli eritrociti di ratto sia utile per testare l'azione litica dei farmaci in vivo.
[Meccanismi d'azione dei farmaci contraenti, K, acetilcolina, istamina e Ba e degli antispastici, isoproterenolo e papaverina nell'ileo isolato di cavia, in particolare in relazione al Ca] .Le forme delle contrazioni indotte da K, acetilcolina (AHc), istamina e Ba consistevano nella contrazione fasica (PC) e nella successiva contrazione tonica (TC). Le PC da K, ACh e istamina sono avviate dal rilascio e dall'afflusso passivo di Ca, mentre quello di Ba è iniziato solo dal rilascio di Ca. I TC di K, ACh e istamina sono mantenuti dall'afflusso attivo di Ca, mentre quello di Ba è mantenuto dall'afflusso attivo e il rilascio di Ca. I siti di stoccaggio di Ca nella membrana cellulare di questa preparazione possono essere suddivisi in tre: il primo, il secondo e il terzo, che contengono rispettivamente il Ca sciolto, il meno debolmente e il Ca strettamente legato. K rilascia Ca per provocare la contrazione dalla prima divisione, ACh o istamina lo fa da la prima e la seconda divisione, e Ba lo fa da tutte e tre le divisioni. Sulla base dell'influenza della soluzione del bagno ad alto contenuto di K-depolarizzante sui rilassamenti di isoproterenolo (Iso) e papaverina (Pap) e degli effetti di Iso e Pap sulle forme delle contrazioni di K, ACh, Ba e Ca esogeno, le seguenti ipotesi erano svolta: l'azione antispasmodica degli Iso è prodotta dall'inibizione della membrana cellulare (inibizione del rilascio e dell'afflusso di Ca), mentre quella del Pap è dovuta a tale inibizione seguita dall'inibizione del sistema contrattile muscolare con l'aumento delle concentrazioni. Gli effetti di Iso e Pap sulle curve concentrazione-azione delle contrazioni di K, ACh, Ba e del Ca esogeno (Tabella II) suggeriscono che lo spostamento parallelo a destra delle curve di K, ACh e Ba sia dovuto alla funzione antagonismo tra gli antispastici e la mobilitazione di Ca prodotta dagli agenti contraenti.
Formazione sul lavoro sociale di nuovi professionisti della salute.Il programma Child Health Associate fornisce un modello per l'utilizzo degli assistenti sociali nella formazione di nuovi professionisti della salute. , gli assistenti sociali hanno contribuito allo sviluppo del curriculum nelle scienze comportamentali. Hanno influenzato le decisioni relative alla selezione degli studenti e hanno sviluppato e implementato un programma di consulenti di facoltà. Grazie alla loro esperienza pratica come operatori di cure primarie, gli assistenti sociali sono stati in grado di definire efficacemente le competenze necessari ai nuovi professionisti per soddisfare i bisogni sociali ed emotivi dei loro pazienti. Gli assistenti sociali hanno utilizzato i loro contatti negli ospedali e nelle comunità per progettare e implementare corsi e cliniche che combinano in modo significativo materiale teorico ed esperienze pratiche a contatto con il paziente. La ricerca valutativa nell'area delle capacità di colloquio e della gestione delle crisi dimostra che i metodi di insegnamento si applicano ied dalla professione di assistente sociale sono efficaci nell'aumentare il livello delle capacità di intervista degli studenti nella pratica clinica e aiutano a prepararli a riconoscere le crisi familiari.
Meccanismi delle aritmie nella malattia polmonare ostruttiva cronica.A causa della stretta relazione anatomica e fisiologica tra cuore e polmoni, i pazienti con malattia polmonare ostruttiva cronica sono particolarmente a rischio di aritmie. Una terapia efficace dipende dall'identificazione dei meccanismi delle aritmie: emodinamici, metabolici o indotti da farmaci. L'uso impulsivo di agenti antiaritmici può provocare solo un disturbo del ritmo più complesso e pericoloso. Gli estremi del pH sono un principale causa di aritmie in questi pazienti. L'alcalemia respiratoria di solito si origina con ventilazione inadeguata, spesso durante la respirazione meccanica, mentre l'alcalemia metabolica generalmente può essere ricondotta a terapia diuretica o bicarbonato. Lidocaina o difenilidantoina sono di scarsa utilità, poiché il pH alcalino all'interno e all'esterno del cuore le cellule muscolari ostacolano la distribuzione e l'attività del farmaco All'altro estremo, le aritmie dell'acidemia colpiscono i pazienti che hanno gravi problemi respiratori. ailure con ritenzione di anidride carbonica o grave insufficienza cardiaca con shock e acidemia lattica. Possono svilupparsi aritmie se si perde la moderazione vagale, il che è particolarmente probabile nei pazienti con deplezione di potassio. I recettori irritanti lungo l'albero broncopolmonare possono scatenare aritmie se stimolati da tosse, microembolia o irritazione meccanica, che è un pericolo con i tubi endotracheali o tracheostomici.
[Effetto dell'attivazione metabolica mutagena di N-nitrosomorfolina sui microrganismi].Una sensibilità quasi simile è dimostrata di diversi metodi di studio dell'attivazione metabolica mutagena di N -nitrosomorfolina (NM) in Salmonella typhimurium TA 1950 (saggio mediato dall'ospite e sistema di attivazione metabolica con omogenato di fegato di ratto) Viene studiato il ruolo della correlazione di alcuni ingredienti del sistema di attivazione metabolica NM con omogenati (concentrazioni di omogenato e cofattore NADPH) È stato stabilito il fatto dell'influenza dell'attivatore della proteina microsomiale (fenobarbital) sull'effetto di attivazione del mutageno NM.
Accumulo di clorporomazina da parte di frazioni subcellulari del cervello di ratto.1. Lo studio dell'accumulo in vitro di [3H] clorpromazina che uno stato di rapida è stato raggiunto l'equilibrio per le particelle subcellulari della corteccia, del mesencefalo e del romboencefalo dei ratti 2. Questo accumulo non era saturabile aumentando la concentrazione di clorpromazina e la relazione tra accumulo e concentrazione non veniva modificata dalla temperatura, dalla preincubazione con alta concentrazione di clorpromazina non marcata o abbassando la concentrazione della frazione 3. Il più alto accumulo di radioattività è stato osservato nella regione del mesencefalo e il più basso nel romboencefalo 4. Nella corteccia e nel mesencefalo la frazione di membrana ha mostrato il più alto accumulo 5. L'effetto del pH sull'accumulo ha indicato che è stato osservato un aumento significativo tra pH 8 e 5. 6. Questo fattore potrebbe essere spiegato anche in termini di solubilità del farmaco nelle membrane 7. Studi sulla fa metabolica te del farmaco durante l'incubazione indicava che c'era una rottura abbastanza rapida durante l'incubazione, la più alta osservata con le frazioni dei mitocondri e la minima con le procedure a membrana. 9. Si conclude che l'accumulo di clorpromazina da parte delle frazioni subcellulari in vitro può essere associato alla solubilità nelle membrane e che il quadro può essere complicato dalla presenza di prodotti di degradazione.
Effetto della colchicina e della vinblastina sulla giunzione neuromuscolare dei gamberi.1. L'effetto degli agenti di disturbo dei microtubuli colchicina e vinblastina è stato studiato sulla trasmissione neuromuscolare eccitatoria dei gamberi 2. La colchicina, a concentrazioni di 1-3 mM, ha determinato una diminuzione delle ampiezze dei potenziali giunzionali eccitatori (ejps) registrati intracellularmente. La vinblastina, a concentrazioni di 0,08-0,32 mM, ha aumentato le ampiezze di ejps. 3. Farmaco- alterazioni indotte nell'ampiezza di ejp risultavano da cambiamenti nel contenuto quantale del nervo eccitatorio come determinato dalla registrazione extracellulare. L'effetto non poteva essere spiegato da cambiamenti nella dimensione quantale. 4. L'effetto della colchicina e della vinblastina non sembra essere correlato a un'azione sui microtubuli.
Interazioni 5-idrossitriptamina e narcotici-analgesici nell'intestino.Gli effetti della 5-idrossitriptamina (5-HT), agenti bloccanti la 5-HT , morfina, narcotici-antagonisti e agenti bloccanti gangliari sono stati testati nell'intestino del cane mediante iniezione intra-arteriosa stretta. La morfina, come 5-HT, ha indotto un immediato aumento del tono intestinale seguito da contrazioni fasiche. Quando 5-HT è stato iniettato immediatamente dopo la cessazione delle contrazioni fasiche indotte dalla morfina, si potrebbe osservare un significativo potenziamento della contrazione intestinale indotta da 5-HT. Il potenziamento potrebbe essere dimostrato per altri narcotici-analgesici come la destromoramide ed è specifico per 5-HT. bloccanti 5-HT come LSD, BOL e ciproeptadina non bloccavano né la 5-HT né la morfina, tuttavia la bufotenidina, un agente bloccante neurale triptaminergico, bloccava gli effetti sia della 5-HT che della morfina. Gli effetti della 5-HT e della morfina sulla motilità intestinale erano anche diminuito di g agenti depolarizzanti angliari come nicotina e DMPP. Questo effetto potrebbe tuttavia essere prevenuto dal pretrattamento con esametonio. Questi risultati sembrano confermare l'ipotesi di un ruolo mediatore della 5-HT nell'effetto contrattile intestinale indotto dai narcotico-analgesici. D'altra parte, gli antagonisti narcotici come la nalorfina e la ciclazocina, non solo non hanno avuto l'effetto di potenziamento della 5-HT, ma hanno anche impedito il potenziamento della 5-HT indotto dalla morfina. La ciclazocina ha anche mostrato un effetto bloccante 5-HT di lunga durata. Questi risultati sembrano mostrare che l'effetto di potenziamento della 5-HT della morfina in vivo è molto specifico e caratteristico dei narcotici e quindi potrebbe essere implicato in alcuni dei loro effetti centrali.
L'effetto della conservazione a freddo sulla sensibilità agli alfa e beta agonisti nel rene di coniglio isolato.I reni di coniglio sono stati perfusi a 25 gradi C e è stato studiato l'effetto di alfa e beta agonisti, prima e dopo 24 ore di conservazione a freddo. Sono stati valutati parametri funzionali vascolari e in vitro. Abbiamo concluso che la conservazione a freddo altera parzialmente il recettore alfa vascolare. Non siamo riusciti a trovare recettori beta in queste condizioni. Un'analisi al microscopio elettronico di questi reni ha mostrato un certo grado di autolisi delle cellule tubulari e una buona conservazione delle cellule e delle membrane muscolari lisce vascolari. Questi risultati sono molto importanti per la conservazione del rene prima del trapianto.
Uno studio farmacologico del recettore dell'angiotensina e della tachifilassi nella muscolatura liscia.L'interazione dell'angiotensina con il suo recettore è stata studiata sulla base della tachifilassi mostrato dall'utero di ratto verso l'angiotensina II quando il pH e la concentrazione di Ca2+ sono al di sotto dei livelli fisiologici. Le indagini sul legame dell'angiotensina 14C e sull'assorbimento del 45Ca2+ suggeriscono che la tachifilassi sia dovuta all'aumento del legame a basso pH e concentrazione di Ca2+. Studi con angiotensina alchilante (marcata per affinità) derivati contenenti il clorambucile N-senape suggeriscono un'inibizione "tipo Charnière" al sito di legame del Ca del recettore e un'inibizione irreversibile a un sito anionico. Gli inibitori dell'angiotensina contenenti clorambucile non alchilano i tessuti ma sono inibitori competitivi suggerendo che il lato aromatico catena dell'angiotensina può indurre cambiamenti conformazionali nel recettore I risultati ottenuti portano a un modello logico per il recettore dell'angiotensina che consente per la normale attivazione da parte dell'ormone e per la produzione di tachifilassi.
Stima della capacità secretoria gastrica mediante il metodo di telemetria di radiocapsule sensibili al pH.Utilizzo di una capsula radiotelemetrica sensibile al pH con elettrodo di antimonio o elettrodo di vetro , la capacità di secrezione acida gastrica è stata determinata secondo un metodo Satveny\'s modificato su quattro controlli sani e 19 pazienti con ulcera peptica, ed è stata confrontata con quella del consueto metodo di aspirazione. \'t essere misurato con il metodo di telemetria nella maggior parte dei casi a causa dell'alto valore di pH nello stomaco. Non c'era una relazione definita tra i due metodi. D'altra parte, l'uscita di acido dal telemetro dopo la stimolazione di AOC-tetragastrina (4 gamma/kg , sc) ha mostrato una buona riproducibilità e una buona correlazione con quella del metodo di aspirazione (r = +0.86) e la differenza tra due metodi potrebbe essere spiegata dal fatto che una parte dell'acido secreto è sfuggita nel duo denum prima di essere neutralizzato dal bicarbonato di potassio, e che parte del succo gastrico non è rimasto aspirato nello stomaco.
Influenza di farmaci e sostanze chimiche su enzimi e proteine epatici. II. Gli effetti di vari barbiturici sull'induzione e la riduzione delle proteine leganti gli anioni organici del citoplasma epatico.Gli effetti di sette barbiturici (fenobarbital, tre N-fenilbarbiturici e tre N-cicloesilbarbiturici) sulle proteine leganti gli anioni organici del citoplasma epatico, Y e Z, sono stati studiati nel tentativo di osservare la relazione struttura-attività dei baributrati con induzione e riduzione di queste due proteine. La sulfobromoftaleina (BSP) era completamente legata dalle proteine Y e Z a dieci minuti di miscelazione con il supernato di 10,500 X g. A basse concentrazioni di BSP, saturazione del legame di BSP da parte della proteina Z era molto basso e con l'aumentare della concentrazione, il legame al BSP da parte della proteina Z aumentava rapidamente. Il BSP legato alla proteina Y sufficientemente anche a basse concentrazioni del colorante. La capacità di legame al BSP della proteina Y è stata aumentata dal fenobarbital, p hetharbital e bucolome, e diminuito da uno degli N-fenilbarbiturici. La capacità di legare BSP della proteina Z tendeva ad essere ridotta dal fenobarbital e dal phetharbital, ma ad essere aumentata dal bucolome. Gli altri N-fenil- e N-cicloesilbarbiturici non hanno avuto effetto sulle capacità di legame delle due proteine. Da questi risultati si è concluso che la regolazione da parte dei barbiturici delle proteine citoplasmatiche è diversa da quella degli enzimi microsomiali e che sia il tipo che la relazione strutturale sono importanti nell'induzione e nella riduzione delle proteine Y e Z.
Formazione di salicilammide glucuronide nelle malattie del fegato e sua modificazione da farmaci.Salicilammide glucuronide (SAMG) in campioni di urina da 0-6 e 6-12 ore è stato determinato dopo somministrazione orale di salicilammide in 7 volontari normali (NV), in 51 casi di varie malattie epatiche e iperbilirubinemia, e in 19 casi dopo somministrazione di farmaci, per predire il metabolismo dei farmaci in vivo nell'uomo e la sua variazione da parte dei farmaci. formazione è stata ottenuta da 1,0 g di salicilammide somministrati a NV; quindi, questo dosaggio è stato utilizzato nel presente studio. SAMG come percentuale di salicilammide totale, la percentuale di SAMG, da 0-6 ore - campioni di urina era alta e costante in NV ( 71,3 +/- 8,3 (media +/- DS)). Lo 0-0,08% della salicilammide totale è stato confermato come salicilammide libera in campioni di urina di 0-12 ore di NV. La percentuale di SAMG di campioni di urina di 0-6 ore era 57,2 +/- 8,6 nell'epatite acuta, 66,6 +/- 10,9 nell'epatite cronica e 48,6 +/- 10,7 nella cirrosi epatica (media +/- D. S. ). La salicilammide libera è leggermente aumentata nelle malattie del fegato. I livelli sierici di bilirubina tendevano ad essere inversamente correlati con la percentuale di SAMG. Nella maggior parte dei casi di sindrome di Gilbert, la percentuale di SAMG è rimasta a un livello normale. La percentuale di SAMG nei casi con iperbilirubinemia non coniugata di altre genesi era quasi entro i limiti normali. Bucolome e fenobarbital hanno aumentato la percentuale di SAMG in pazienti con varie malattie del fegato. Dopo la somministrazione di rifampicina o fenitoina, la percentuale di SAMG dei pazienti con tubercolosi polmonare o epilessia non ha superato quella di NV.
[Analisi dei gas ematici ed equilibrio acido-base nell'infarto miocardico acuto. Osservazioni personali (autore\'s trad.)].Ph arterioso, pO2 e La pCO2 è stata analizzata con il micrometodo Astup\'s su centotre infarti miocardici acuti (IMA) senza malattie metaboliche, polmonari e renali. A seguito del picute clinico, i pazienti sono stati divisi in cinque gruppi e i risultati sono stati valutati clinicamente e statisticamente (media, standard deviazione, test di Student"t", coefficiente di correlazione "r" tra pO2 e pressione diastolica arteriosa polmonare): --I gruppo (IMA senza complicazioni): solo ipossiemia lieve; --II gruppo (IMA con lieve insufficienza ventricolare sinistra): ipossiemia e ipocapnia più marcate, spesso con alcalosi respiratoria; --III° gruppo (IMA complicato da edema polmonare acuto): acidosi mista e grave ipossiemia; --IVo gruppo (IMA complicato da shock): prevalente acidosi metabolica e grave ipo xemia. L'acidosi mostra buone correlazioni con il quadro clinico; --V° gruppo (A. M. I. con gravi aritmie): acidosi mista e profonda e importante ipossiemia durante fibrillazione ventricolare e arresto cardiaco. In venti pazienti l'ipossiemia e la pressione diastolica polmonare arteriosa hanno mostrato una correlazione significativa.
Proprietà dei granuli di renina isolati dal rene di ratto.I granuli di renina di rene di ratto preparati a 25 gradi C mostrano una maggiore stabilità a 25 gradi C che a 0 gradi C quando incubato in mezzo ionico La somma della renina nel liquido surnatante più quella nel pellet era la stessa a 25 gradi C come a 0 gradi C, escludendo così la possibilità che il rilascio extra a 0 gradi C rappresentasse semplicemente maggiore stabilità della renina libera a 0 gradi C. In comune con altri granuli secretori, i granuli di renina erano più stabili a pH 6.0 ed erano osmoticamente sensibili. In contrasto con i granuli neurosecretori e cromaffini, i granuli di renina sono stati stabilizzati da Mg-ATP in mezzo ionico. Questo risultato è simile a studi di altri sui lisosomi. Si conclude che la membrana dei granuli di renina condivide molte delle proprietà di altre membrane dei granuli. Alcune di queste proprietà (temperatura e labilità del pH) dovranno essere considerate nella progettazione di future esperienze informazioni sull'immagazzinamento e il rilascio della renina.
Diversi tipi di vescicole sinaptiche negli assoni del muscolo retrattore del pene del toro.Sono stati osservati tre tipi di profili degli assoni nella muscolatura liscia del retrattore del pene e dell'arteria peniena del toro: 1. profili contenenti piccole vescicole granulari, presumibilmente rappresentanti assoni adrenergici 2. profili contenenti piccole vescicole agranulari, presumibilmente rappresentanti assoni colinergici 3. profili contenenti numerose vescicole granulari grandi e piccole Il terzo tipo di profilo non è stato trovato nel dotto deferente o nell'arteria metatarsale. È quindi possibile che questo tipo di profilo rappresenti i nervi inibitori non adrenergici, non colinergici, la cui presenza è stata precedentemente indicata farmacologicamente in questi tessuti.
I tassi di lipoperossidazione e le attività enzimatiche ossidanti del farmaco nel fegato e nella placenta di alcune specie di mammiferi durante il periodo perinatale.La lipoperossidazione e gli enzimi che metabolizzano i farmaci sono stati misurata nel fegato e nella placenta di diverse specie di mammiferi durante il perio perinatale. Nelle placente e nel fegato fetale di ratto, coniglio e cavia, la lipoperossidazione supportata da cofattori era trascurabile, così come le attività degli enzimi ossidanti dei farmaci. Il fegato fetale umano conteneva un catena di trasporto degli elettroni ossidante il farmaco intatta e l'attività di lipoperossidazione è stata di conseguenza osservata. Si suggerisce che le lesioni mediate dalla lipoperossidazione possano essere possibili nel feto umano, ma sono meno probabili nei feti animali.
Regolazione degli enzimi del metabolismo dell'etanolo nel lievito (Rhodotorula gracilis).I tre enzimi del metabolismo dell'etanolo alcool deidrogenasi, aldeide deidrogenasi e acetil-CoA sintetasi nel lievito aerobico obbligato Rhodotorula gracilis sono repressi dal glucosio e indotti da combustibili metabolici C2 con un pattern regolatorio che indica una correlazione nei meccanismi di controllo Per tentare di identificare i segnali molecolari coinvolti nella trasmissione dello stimolo inducente, sono stati effettuati esperimenti bloccando con pirazolo 2 mM la fase metabolica dell'etanolo acetaldeide. I risultati indicano che l'etanolo non è specificamente richiesto come segnale molecolare per l'induzione.
Effetto dei farmaci antipsicotici sull'attivazione delle cellule del rafe dorsale. II. Inversione da picrotossina.Come riportato nello studio precedente, la capacità di alcuni agenti antipsicotici e adrenolitici per inibire l'attivazione spontanea dei neuroni serotoninergici 5HT nel nucleo del rafe dorsale sembravano essere correlati all'efficacia del blocco adrenergico Tuttavia, l'interazione tra sistemi adrenergici e serotoninergici era apparentemente indiretta. In questa fase dello studio abbiamo indagato l'ipotesi che un altro sistema di trasmettitori potrebbe mediare questa interazione. Abbiamo esaminato gli effetti di due trasmettitori di amminoacidi inibitori (GABA e glicina) per i possibili effetti sull'attivazione delle cellule del rafe dorsale utilizzando la registrazione di singole cellule e tecniche microiontoforetiche. Inoltre, la capacità dell'antagonista GABA, Sono stati testati la picrotossina e l'antagonista della glicina, la stricnina, per invertire gli effetti dei farmaci antipsicotici e alfa-bloccanti sulla scarica del rafe dorsale. e la glicina sono stati trovati per inibire selettivamente l'attivazione delle cellule del rafe, consentendo una possibile funzione di neurotrasmettitore per questi amminoacidi all'interno del nucleo dorsale del rafe. Tuttavia, è stato scoperto che la picrotossina, ma non la stricnina, inverte gli effetti dei farmaci antipsicotici e alfa-bloccanti sul fuoco del rafe. Sulla base di questi risultati, proponiamo che l'input adrenergico possa influenzare i neuroni 5HT indirettamente tramite un interneurone GABAergico o un neurone GABA interposto.
Effetto dei farmaci antipsicotici sulla scarica delle cellule del rafe dorsale. I. Ruolo del sistema adrenergico.L'attività dei neuroni serotoninergici (5HT) nel nucleo del rafe dorsale è stato inibito dalla somministrazione ev di alcuni farmaci antipsicotici (metiotepina, clozapina e tioridazina). Tuttavia, altri agenti antipsicotici (clorpromazina, aloperidolo e pimozide) non hanno inibito l'attivazione delle cellule del rafe. La potenza inibitoria di questi farmaci sull'attività del rafe è correlata con efficacia bloccante noradrenergica centrale segnalata. Un agente bloccante alfa-adrenergico, piperoxane, ma non gli agenti beta-bloccanti, propranololo e MJ 1999, ha inibito l'attività del rafe quando somministrato per via sistemica. Tutti questi farmaci sembrano agire indirettamente poiché (e NE) hanno effetti relativamente deboli o variabili quando applicati microiontoforeticamente ai neuroni del rafe. Gli effetti depressivi di alcuni farmaci antipsicotici e piperossano sui neuroni 5HT sembrano essere mediati da un sistema adrenergico poiché (1) la depressione potrebbe essere invertita dagli agenti di rilascio delle catecolamine 1- e d-anfetamina; (2) la depressione potrebbe essere abolita dalla distruzione delle vie adrenergiche nel SNC da parte di lesioni chimiche, meccaniche o elettrotermiche. Sebbene non sia stata ancora ottenuta una localizzazione precisa, i dati suggeriscono che questi effetti del farmaco possono essere mediati da una via adrenergica che sale dal tronco cerebrale inferiore.
Ruolo della densità epitopica nell'induzione dell'immunità e della tolleranza con antigeni timo-indipendenti. I. Studi con 2,4-dinitrofenil coniugati in vitro.L'effetto di diversi gradi di coniugazione di levano, destrano, polisaccaride pneumococcico SIII e il copolimero di acido D-glutammico e D-lisina con il determinante 2,4-dinitrofenile (DNP) sulla capacità immunogenica e tollerogenica dei suoi coniugati aptenici è stato studiato in vitro. Un effetto sorprendentemente uniforme della coniugazione aptene è stato osservato nonostante la marcata differenza nel peso molecolare e nella struttura (ramificata o lineare) delle molecole di trasporto. Per quanto riguarda la risposta anti-DNP, i coniugati a bassa densità erano immunogenici ma non tollerogenici (anche ad alte dosi), i coniugati più alti erano entrambi, a seconda della concentrazione, mentre i coniugati ad altissima densità erano solo tollerogenici. Questi risultati confermano ed estendono i risultati precedenti fatti con i coniugati DNP di flagellina polimerica e indicano la probabile generalità di questo principio. Insieme a studi paralleli in vivo (Eur. J. Immunol. 1975. 5:541), riaffermano l'importanza della densità degli epitopi nella discriminazione tra immunità e tolleranza.
Reazione del trapianto contro l'ospite indotta dai cerotti di Peyer.I cerotti di Peyer dei genitori sono stati impiantati nel lobo epatico anteriore di ratti ibridi F1 Utilizzando tecniche istologiche convenzionali, sono stati osservati fenomeni tipici di una reazione del trapianto contro l'ospite, come l'infiltrazione linfoide paravascolare nel fegato, la deplezione cellulare delle aree timo-dipendenti della milza e la proliferazione diffusa delle cellule reticoloendoteliali in vari tessuti linfoidi. da questi risultati e da altre osservazioni si conclude che nelle placche di Peyer è presente una popolazione cellulare dipendente dal timo.
Induzione immunologica del sarcoma delle cellule del reticolo: linfomi di tipo donatore nel modello del trapianto contro l'ospite.Lo scopo di questo studio era di indagare su tumori maligni linfomi di origine donatrice indotti in topi F1 sottoposti a reazione cronica del trapianto contro l'ospite (GVHR) dopo l'iniezione di cellule di milza del ceppo parentale. Un totale di 3 X 10(8) o 4 X 10(8) C57BL/10 cellule di milza erano somministrato a ibridi H-2 incompatibili (C57BL/10 X HTG)F1 di 7-8 settimane come iniezioni IP singole o frazionate. I riceventi sono stati uccisi a intervalli che vanno da 1 mese a 1 anno dopo la prima iniezione e le loro cellule linfoidi tipizzati per antigeni di istocompatibilità derivati dall'ospite e dal donatore Nel 49% degli 88 topi GVH F1, le cellule non sono state uccise da un siero iperimmune contro HTG (H-2g) ma hanno reagito normalmente con gli antisieri a C57BL/10 (H- 2b) e, nei 9 casi testati, a theta-C3H. La conclusione che le cellule linfoidi di questi topi fossero derivate da cellule del donatore era supportata ed dalla scoperta che questi animali mancavano di immunoglobuline che portassero l'allotipo Iga derivato dall'ospite nel loro siero. Il 43% dei topi GVH F1 ha sviluppato sarcomi delle cellule del reticolo (RCS), il 32% ha rivelato tessuto linforeticolare iperplastico e il 25% non ha mostrato cambiamenti grossolanamente anormali. I topi con tessuti linfoidi di tipo donatore sono stati trovati in tutti e tre i gruppi; Il 50% dei 38 RCS rilevati erano neoplasie di tipo donatore. L'induzione di RCS di tipo donatore durante la GVHR rafforza il concetto di linfomagenesi attraverso la stimolazione persistente con l'antigene(i).
Reclutamento di linfociti effettori da parte di linfociti iniziatori. Migrazione in vivo di linfociti T iniziatori sensibilizzati in vitro.In precedenza abbiamo scoperto che i linfociti T di topo sensibilizzati in vitro contro i fibroblasti allo- o singenici, dopo l'iniezione in riceventi singenici, non si differenziano in cellule effettrici, ma reclutano linfociti T effettori all'interno dei linfonodi drenanti. Come risultato della sensibilizzazione, questi linfociti iniziatori acquisiscono una proprietà di membrana sensibile alla tripsina che è necessari per il reclutamento. Ora riportiamo studi sul comportamento migratorio in vivo dei linfociti iniziatori dopo la sensibilizzazione. Abbiamo iniettato linfociti iniziatori marcati con 51Cr nelle zampe del ricevente e abbiamo riscontrato un aumento significativo della migrazione delle cellule sensibilizzate al linfonodo popliteo drenante (PLN) durante il primo Con l'amputazione del piede in vari momenti, abbiamo dimostrato che la migrazione durante le prime 12-24 ore era critica per subse quent reclutamento. Il trattamento con tripsina dei linfociti iniziatori ha abolito questa migrazione accelerata. I linfociti attivati in modo non specifico da Con A migrarono al PLN come cellule sensibilizzate all'antigene. Abbiamo anche confrontato la migrazione dei linfociti iniettati dal footpad al PLN nelle reazioni graft-versus-host e host-versus-graft e abbiamo riscontrato che queste reazioni differiscono sia l'una dall'altra che dal reclutamento in termini di migrazione dei linfociti. Questi risultati sono discussi in termini di fisiologia della risposta immunitaria cellulo-mediata e della nozione di sensibilizzazione periferica.
Tolleranza delle cellule B indotta da antigeni polimerici. II. Effetti della tolleranza sui livelli di linfociti che legano gli aptene nelle risposte anticorpali primarie e secondarie.Dosi tollerogeniche di Il polisaccaride pneumococcico di tipo 3 accoppiato con aptene [2,4-dinitrofenil (DNP)] (DNP-lys2.5-S3) ha completamente abolito la risposta delle cellule formanti rosette (RFC) anti-DNP all'immunizzazione primaria con DNP-emocianina nei topi, mentre l'antigene leggermente sostituito (DNP-lys0.6-S3) ha avuto scarso effetto Entrambi gli antigeni hanno soppresso le risposte RFC anti-DNP secondarie a DNP-KLH. effetto su RFC. DNP-lys2.5-S3 era 500--1000 volte più potente nel "blocco" RFC primario in vitro rispetto a DNP-lys0.6-S3, mentre entrambi gli antigeni erano ugualmente efficaci nel bloccare RFC secondario. Questi risultati suggeriscono che la sensibilità dei linfociti B innescati all'inattivazione da parte di DNP-lys-S3 è correlata alla loro elevata avidità per l'antigene. Inoltre, ciò sembra essere in gran parte dovuto a un'elevata densità di recettori delle immunoglobuline sulle cellule innescate poiché le affinità di RFC primaria e secondaria per l'aptene monovalente erano indistinguibili. Il trattamento di topi principalmente immunizzati con DNP-lys2.5-S3 2 h prima del dosaggio ha abolito il 90% di RFC. Pertanto, la riduzione dei livelli di RFC nei topi tolleranti può essere dovuta al blocco cellulare dovuto al tolerogen persistente. Tuttavia, sembra improbabile che il semplice blocco delle cellule reattive all'antigene sia l'unico meccanismo operativo in questo sistema.
Le proprietà immunologiche degli apteni accoppiati a molecole carrier timo-indipendenti. III. Il ruolo dell'immunogenicità e mitogenicità del carrier nell'induzione di risposte anti-aptene IgM primarie. Hapten (DNP-lys) coniugati di due polimeri putativamente non immunogenici, acido ialutonico e acido poli-gamma-D-glutammico, inducono significative risposte IgM primarie anti-DNP nei topi C3H. Preparazioni di vari immunogenici (tipo 3 polimeri pneumococcici di polisaccaride (SIII), levan, lipopolisaccaride di E. coli) e polimeri non immunogenici (acido ialuronico e acido poliglutammico) sono stati testati per la loro capacità di agire come mitogeni policlonali in vitro. In colture di cellule di milza contenenti siero, solo il lipopolisaccaride stimolato sostanziale proliferazione cellulare. In mezzo privo di siero e utilizzando un'elevata attività specifica [3H]timidina, lipopolisaccaride, levan, SIII e, in misura minore, acido ialuronico hanno indotto una significativa incorporazione di timidina. Tuttavia, sotto il queste ultime condizioni la sopravvivenza e la proliferazione cellulare erano molto meno impressionanti. Non c'era alcuna correlazione apparente tra la capacità di vari polimeri di indurre la proliferazione dei linfociti e la loro "potenza" come vettori per la generazione di una risposta IgM anti-DNP primaria. Inoltre, mentre basse dosi di lipopolisaccaride hanno provocato la formazione di anticorpi "policlonali" in vivo, alte dosi di SIII, levan e acido ialuronico non lo hanno fatto. Questi risultati indicano che l'attivazione delle cellule B indipendente dalle cellule T dipende dalla natura polimerica dell'antigene e che i polimeri non devono essere immunogenici o mitogeni per agire come vettori per l'induzione di risposte anticorpali anti-aptene IgM primarie.
Tolleranza delle cellule B indotta da antigeni polimerici. I. Confronto dei requisiti di dose e densità degli epitopi per l'inattivazione di cellule B innescate e non innescate in vivo.La tolleranza specifica per aptene [2,4-dinitrofenil (DNP)] è stata indotta in topi non immuni o innescati con DNP-emocianina (DNP-KLH) somministrando polisaccaride pneumococcico di tipo 3 coniugato con aptene (DNP-lys-S3). -lys2.5-S3 richiesto per sopprimere le risposte anticorpali primarie anti-DNP era circa dieci volte superiore a quello richiesto per sopprimere la risposta secondaria Grandi dosi di antigene leggermente sostituito (DNP-lys0.6-S3) non hanno avuto effetto sul primario risposte anticorpali, mentre piccole dosi di questo coniugato sopprimevano il 90-95% della risposta secondaria. La conclusione di questo modello di tolleranza (presumibilmente delle cellule B) è che i linfociti B "maturi" nella loro suscettibilità alla tollerabilità dopo il contatto primario con l'immunogeno, poiché le cellule innescate sono inattivate da dosi più basse di tolero gen, e da tolerogen con densità epitopica inferiore, rispetto alle cellule B non immuni. Questi e altri dati suggeriscono che la soglia di tolleranza dei linfociti B è correlata al loro stato di differenziazione e soprattutto alle loro caratteristiche di legame con l'antigene.
Concentrazioni sieriche di metaqualone dopo dosi orali ripetute di una formulazione combinata a soggetti umani.Le concentrazioni di metaqualone sono state misurate nel siero di cinque uomini di sesso maschile soggetti che ricevono cinque dosi serali consecutive di una formulazione combinata contenente metaqualone (250 mg), carbromal (300 mg) e benactyzine (0,33 mg) in ciascuna compressa Dopo la somministrazione della prima dose, le concentrazioni sieriche massime medie di metaqualone (1,2 mug/ml ) si è verificato a 3 ore. Dopo aver ottenuto i livelli di picco, le concentrazioni medie di metaqualone sono diminuite rapidamente durante le successive 6 ore e successivamente più lentamente durante le successive 18 ore. Dopo la somministrazione dell'ultima (quinta) dose, le concentrazioni medie di picco sierico di metaqualone (1,9 mug/ml; 1,5 mug/ml sopra il livello di predose) si è verificato a 2 ore. Dopo aver raggiunto i livelli di picco, le concentrazioni medie di metaqualone sono diminuite rapidamente durante le successive 6 ore, e successivamente più lentamente, con un'emivita di circa 10 h. Le concentrazioni medie di metaqualone nei campioni di siero 24 ore dopo la seconda, terza, quarta o quinta dose non erano significativamente differenti (0,3 mug/ml - 0,6 mug/ml) durante questo periodo di somministrazione. Ciò suggerisce che non si è verificato un accumulo significativo di metaqualone nel siero durante un periodo di cinque dosi serali consecutive della formulazione combinata.
Aminoacidi plasmatici e cerebrali nell'insufficienza epatica fulminante e loro relazione con l'encefalopatia epatica.Le concentrazioni di aminoacidi sono state determinate nel plasma, nel sangue intero, nel liquido cerebrospinale e tessuto cerebrale di 45 pazienti con coma di grado 3 o 4. La concentrazione di 15 dei 19 amminoacidi determinati era significativamente aumentata nel sangue e gli aumenti erano maggiori per gli amminoacidi coinvolti nel metabolismo dei neurotrasmettitori. correlazione, tuttavia, tra la concentrazione plasmatica di questi aminoacidi e le variazioni del grado di coma epatico. Le concentrazioni plasmatiche degli aminoacidi a catena ramificata erano normali tranne in quei pazienti che successivamente hanno recuperato nei quali i livelli erano leggermente diminuiti. la metionina era tra i 15 amminoacidi su 18 che erano significativamente aumentati nel liquido cerebrospinale e tra i 15 amminoacidi su 21 che erano significativi istantemente aumentato nel cervello. L'aumento del triptofano è stato associato a un aumento significativo della concentrazione cerebrale di acido 5-idrossiindoleacetico, suggerendo un aumento del turnover della 5-idrossitriptamina nel coma epatico. I rapporti cervello/plasma della maggior parte degli amminoacidi nei pazienti in coma epatico erano simili a quelli dei soggetti di controllo, suggerendo che la concentrazione plasmatica è il principale fattore che controlla la concentrazione cerebrale. Tuttavia, per gli aminoacidi a catena ramificata, le concentrazioni nel liquido cerebrospinale e nel cervello erano aumentate quando le concentrazioni plasmatiche erano normali, suggerendo un aumento dell'assorbimento cerebrale.
Indagine cinetica dell'idrolisi catalizzata da proteasi da stafilococco di substrati sintetici.Indagare sull'idrolisi catalizzata da proteasi da stafilococco di N-tert-butossicarbonil-L -glutammato alfa-fenil estere, N-benzilossicarbonil-L-glutammato alfa-fenil estere e N-benzilossicarbonil-L-glutammato alfa-p-nitroanilide, abbiamo ottenuto prove cinetiche coerenti con la formazione di un intermedio acil-enzimatico. l'aggiunta di un nucleofilo, come il metanolo, ha portato alla partizione del comune acil-enzima intermedio tra l'acqua e l'alcol. Con N-benzil-ossicarbonil-L-glutammato alfa-fenil estere, un substrato estere specifico, è stato dimostrato che la deacilazione essere il fattore limitante. Studiando il rapporto kcat/Km di queste idrolisi in funzione del pH, abbiamo dimostrato che due gruppi ionizzabili sull'enzima sono essenziali per il processo catalitico. Uno di questi gruppi ha un pK di 6,58 e l'altro, un pK di 8,25. L'assegnazione del se i valori di pK vengono discussi in relazione alle caratteristiche note del meccanismo di reazione della serina proteinasi. Inoltre, è stato dimostrato che gli anioni monovalenti inibiscono l'idrolisi della proteasi stafilococcica. Sembrano competere con la carica negativa del substrato, inibendo così il suo legame con la molecola enzimatica. Infine abbiamo confrontato i parametri cinetici ottenuti con cinque proteasi isolate da diversi ceppi di Staphylococcus aureus.
Attività DD-carbossipeptidasi e transpeptidasi legate alla membrana da Bacillus megaterium KM a pH 7. Proprietà generali, specificità del substrato e inibizione da parte degli antibiotici beta-lattamici.1. Le membrane di Bacillus megaterium KM contenevano una DD-carbossipeptidasi con attività ottimale nelle seguenti condizioni: pH 7; forza ionica, 1,3 M; temperatura, 40 gradi C e inferiore a 20 gradi C. Non richiedeva alcun catione bivalente, ma è stato inattivato da Cu2+ e Hg2+. È stato stimolato da 2-mercaptoetanolo e basse concentrazioni di p-cloromercuribenzoato. 2. La preparazione della membrana ha anche catalizzato una semplice reazione di transpeptidazione utilizzando come accettori carbossilici D-alanina o glicina. 3. Le condizioni per un ottimale l'attività, l'inattivazione dalla temperatura, la dipendenza dalla temperatura dell'attività, la specificità del donatore carbossilico, la sensibilità agli antibiotici beta-lattamici e l'insensibilità ai potenziali inibitori peptidici di entrambe le attività enzimatiche, erano identiche. La DD-carbossipeptidasi ha mostrato l'inibizione di D-alanina e Ac2-L-Lys-D-Ala. 4. L'inibizione dell'antibiotico beta-lattamico era reversibile per entrambe le attività enzimatiche e la dipendenza dal tempo per il loro recupero era identica. 5. La DD-carbossipeptidasi era molto sensibile ai cambiamenti nella configurazione e nella dimensione delle catene laterali del dipeptide C-terminale del substrato. I residui di amminoacidi al C-terminale che precludevano al peptide di essere un substrato di DD-carbossipeptidasi non erano accettori nella reazione di transpeptidazione. I dipeptidi non erano accettori per la \' transpeptidasi modello\'. 6. Si suggerisce che entrambe le attività siano catalizzate dalla stessa molecola enzimatica, il cui ruolo fisiologico non è la formazione di legami incrociati peptidici durante la biosintesi del peptidoglicano.
Efficienza della fosforilazione ossidativa e della dissipazione di energia mediante il riciclaggio di ioni H+ nel piruvato metabolizzante mitocondriale del fegato di ratto.È stato sviluppato un metodo per il calcolo dei flussi metabolici attraverso singole reazioni enzimatiche del metabolismo del piruvato compreso il ciclo dell'acido citrico nei mitocondri di fegato di ratto incubati a stati metabolici tra lo stato 4 e lo stato 3. Questo metodo si basa sulla misurazione delle radioattività specifiche dei prodotti formati dal [2-14C]piruvato. Con questa procedura è stato calcolato il bilancio energetico dei mitocondri incubati in presenza di [2-14C]piruvato, ATP, bicarbonato e fosfato a diversi rapporti ATP/ADP nel mezzo. I rapporti ATP/ADP sono stati mantenuti allo stato stazionario con creatina chinasi più creatina come accettore di fosforile. I calcoli hanno rivelato che aggiungendo concentrazioni crescenti di creatina fino a 20 mM l'energia dissipata dai mitocondri diminuiva ma mostrava un massimo locale massimo a 13 mM di creatina. L'omissione di bicarbonato dal mezzo ha portato a uno spostamento di questo massimo. Quando la dissipazione di energia era minima, il rapporto P/O complessivo era massimo. La quantità di energia dissipata era parallela alla grandezza del gradiente di pH attraverso la membrana interna. Da questi risultati si è concluso che il riciclo degli ioni H+ che consiste in una perdita passiva di ioni H+ nella matrice e un'estrusione attiva di questi ioni fuori da questo compartimento, è un importante processo di dissipazione dell'energia. Il riciclo degli ioni H+ è quindi uno dei processi che danno origine alla respirazione di stato 4 nei mitocondri.
Studi sugli effetti cinetici della fosforilazione adenosina-3\':5\'-monofosfato-dipendente della piruvato chinasi purificata di fegato di maiale tipo L.È stato studiato l'effetto della fosforilazione dipendente dall'AMP ciclico sull'attività della piruvato chinasi del fegato di maiale isolato. È stato scoperto che il principale effetto cinetico della fosforilazione era ridurre l'affinità per il substrato fosfoenolpiruvato, K0,5 per questo substrato aumentando da 0,3 a 0,9 mM alla fosforilazione. L'effetto cooperativo con il fosfoenolpiruvato è stato potenziato, la costante di Hill nH aumentando contemporaneamente da 1,1 a 1,5. V è rimasta inalterata. La variazione di attività è avvenuta in parallelo con l'incorporazione del fosfato, tranne durante la parte iniziale del reazione, quando l'inattivazione è stata corrispondentemente più lenta. L'affinità per il secondo substrato ADP è rimasta invariata, con un Km apparente di 0,3 mM a concentrazione saturante di fosfoenolpiruvato. Analogamente, il requisito per potassi um non era influenzato, mentre il fosfoenzima richiedeva una maggiore concentrazione di ioni magnesio per la massima attività, rispetto all'enzima di controllo. L'effetto inibitorio della fosforilazione è stato contrastato da effettori positivi, il fruttosio 1,6-bifosfato in concentrazioni micromolari ha attivato completamente il fosfoenzima, risultando in un enzima con proprietà simili all'enzima non fosforilato attivato dal fruttosio 1,6-bifosfato, con K0,5 per il fosfoenolpiruvato di circa 0,025 mM e con una costante di Hill di 1,1. Gli ioni idrogeno erano anche efficaci nell'attivare il fosfoenzima. Pertanto, quando il pH è stato abbassato da 8 a 6,5 l'inibizione dovuta alla fosforilazione è stata abolita. Il fosfoenzima era sensibile a un'ulteriore inibizione da parte di effettori negativi come ATP e alanina. 2 mM ATP ha aumentato K0,5 per fosfoenolpiruvato a 1,5 mM e nH a 2,3. I valori corrispondenti con alanina erano 1,3 mM e 1,9. Si pensa che la fosforilazione sia un meccanismo aggiuntivo di inibizione dell'enzima in condizioni gluconeogenetiche.
Legame del monossido di carbonio ad alfa-emocianina e beta-emocianina da Helix pomatia.Il legame del monossido di carbonio ad alfa e beta-emocianina da lumaca Helix pomatia è stata studiata in condizioni di equilibrio. Le interazioni omotropiche sul legame del monossido di carbonio erano molto più deboli rispetto al legame dell'ossigeno. Le interazioni eterotropiche (effetto Bohr ed effetto calcio-ione), tuttavia, erano altrettanto forti come nel caso del legame di ossigeno. Per l'alfa-emocianina è stato osservato un legame tra il legame del monossido di carbonio e un cambiamento nella struttura quaternaria della proteina.
Concentrazioni di emoglobina, ioni idrogeno ed elettroliti nei globuli rossi durante l'esercizio in soggetti allenati e non.Concentrazioni di emoglobina (MCHC), H+, Na+ nei globuli rossi , K+, Mg++, cl- sono stati misurati nel sangue venoso femorale di sei soggetti non allenati (UT), sei allenati alla resistenza (TR) e tre semi-addestrati (ST) durante un lavoro graduale crescente (4, 8, 12, 18 e 24 mkp/s , 10-15 min su ogni passo) su un cicloergometro. Prima dell'esercizio non sono state rilevate differenze significative per le variabili misurate confrontando UT e TR. Durante l'esercizio MCHC, [Na+], [K+] e [Mg++] sono rimasti costanti indicando una mancanza di acqua si sposta negli eritrociti nonostante una marcata acidosi (pH più basso valore del sangue 7,225). Questa mancanza derivava da un'elevata osmolalità extracellulare. [H+]Ery e [Cl-]Ery aumentarono al massimo di 2.0 X 10(-8) eq /kg H2O e 10 meq/l, rispettivamente. La variazione era nettamente maggiore in UT che in TR a parità di carico. Tuttavia, se [H+] Ery e [Cl-] Ery fossero relative al pH del sangue intero, le differenze tra i gruppi, sono quasi scomparse e gli ioni sono stati distribuiti come prevedibile da esperimenti in vitro (Fitzsimmons e Sendroy, 1961). Il comportamento di H+ e Cl- può essere importante per la dissociazione dell'ossigeno in condizioni in vivo.
Un criptorchide equino con tessuti testicolari e ovarici.Studi citogenetici e istologici sono stati condotti su un cavallo intersessuale a cui è stato diagnosticato clinicamente come criptorchide. Chirurgia ha confermato che il cavallo era un criptorchide addominale bilaterale e l'esame istologico ha rivelato tessuto ovarico associato all'epididimo sinistro L'analisi cromosomica di cellule coltivate da tessuto testicolare, tessuto ovarico e pelle ha rivelato un trucco 64-XX e 64-XY, la gonade sinistra contenente una maggiore preponderanza delle cellule XX sulle cellule XY. Le caratteristiche esterne e il comportamento del cavallo erano indistinguibili da quello di un criptorchide "di routine". Altri casi di intersessuali equini vengono esaminati e teorie per le discrepanze tra sesso genetico, gonadico e fenotipico sono discussi.
Farmaci ansiolitici: farmacologia clinica e uso terapeutico.E' difficile scegliere tra i tanti farmaci consigliati per il trattamento dei sintomi dell'ansia. I barbiturici erano i più ansiolitici comunemente usati fino a poco tempo fa, ma sono stati sostituiti dalle benzodiazepine. Queste ultime sono più efficaci dei barbiturici come mostrato in studi clinici comparativi, sono più sicuri in caso di sovradosaggio (intenzionale o accidentale) e hanno un po' meno probabilità di indurre dipendenza. I barbiturici hanno l'ulteriore svantaggio di interferire con l'azione di altri farmaci inducendo enzimi microsomiali epatici (ossidanti) metabolizzanti i farmaci. I principali tranquillanti (neurolettici o antipsicotici) sono spesso utili a basso dosaggio in pazienti con una precedente storia di dipendenza da alcol , i barbiturici o le benzodiazepine. Gli antidepressivi triciclici sono il trattamento di scelta nei pazienti ansiosi e depressi e gli inibitori delle monoamino ossidasi possono essere utile nei pazienti fobici. Gli agenti bloccanti i beta-adrenorecettori come il propranololo spesso migliorano i sintomi somatici come palpitazioni e tremori. Nel trattamento dei pazienti ansiosi è importante rimuovere le cause dell'ansia e limitare qualsiasi ciclo di trattamento farmacologico a un periodo finito. Sia il livello di dosaggio che l'intervallo di dosaggio devono essere flessibili. Le benzodiazepine rimangono il trattamento farmacologico di scelta.
[Un nuovo test immunochimico per la gravidanza, che utilizza il principio della reazione di inibizione dell'agglutinazione al lattice. I. Studi di base (autore\'s trad.)].In uno studio congiunto di cinque laboratori è stato esaminato il test immunochimico per la gravidanza \'Roche\', che utilizza il principio del test di inibizione dell'agglutinazione al lattice. Un totale di 1117 campioni, integrato da una serie di studi di laboratorio, dimostrato che il test è specifico, riproducibile e a bassa interferenza con una sensibilità di 900-1000 U/l HCG È un test semplice, i risultati possono essere facilmente letti dopo 90 minuti pH del campione di urina, proteine, urea o il contenuto di calcio, la presenza di contraccettivi orali, detergenti, disinfettanti o solventi organici causano interferenze minime o nulle.
La secrezione di metadone e del suo principale metabolita nel succo gastrico dell'uomo: confronto con le concentrazioni ematiche e salivari.Quattro soggetti sani e quattro tossicodipendenti su alte dosi giornaliere di mantenimento di metadone hanno ricevuto ciascuna una dose parenterale di metadone cloridrato dopo un digiuno notturno. La concentrazione di metadone nel sangue è stata confrontata con quella nel succo gastrico ottenuta in 8 ore mediante aspirazione continua a bassa pressione tramite un sondino nasogastrico. nel succo gastrico era 25-200 volte quella misurata contemporaneamente nel sangue. Così, 8 ore dopo l'iniezione, sono state registrate concentrazioni ematiche medie di 28 e 210 ng di metadone per ml rispettivamente nei soggetti normali e nei tossicodipendenti. Le corrispondenti concentrazioni nel succo gastrico erano rispettivamente di 2.200 ng/ml e 18.000 ng/ml Nei soggetti normali circa il 2% della dose somministrata veniva ritrovata nel succo gastrico in 8 ore, mentre nei tossicodipendenti circa il 7% wa s recuperato. Il maggior recupero di metadone dai tossicodipendenti sembra essere il risultato del maggior volume di succo gastrico recuperato da questi ultimi soggetti. Il metadone è stato escreto anche nella saliva di entrambi i gruppi di soggetti. Nei tossicodipendenti, le concentrazioni salivari erano spesso 10 volte quelle registrate nel sangue. Il metabolita N-monodemetilato del metadone è stato identificato nel succo gastrico dei tossicodipendenti mediante gascromatografia e spettrometria di massa.
La disposizione fisiologica dell'agente uricosurico-saluretico (6,7-dicloro-2-metil-1-osso-2-fenil-5-indanilossi)acido acetico (MK -196) nel ratto, cane e scimmia.La disposizione fisiologica di un nuovo agente saluretico-uricosurico, (6,7-dicloro-2-metil-1-osso-2-fenil-5 -indanilossi)acetico (MK-196), è stato studiato nel ratto, cane e scimmia. L'MK-196 è stato ben assorbito e ha mostrato un metabolismo minimo in queste specie. I livelli plasmatici di picco di radioattività e farmaco si sono verificati 0,5-2 ore dopo la somministrazione orale somministrazione alla dose di 2,5 mg/kg Essenzialmente tutta la radioattività presente nel plasma durante il primo giorno era MK-196 intatta Dopo una singola dose, nel cane è stata osservata una lunga emivita terminale per la radioattività plasmatica (circa 68 ore) e scimmia (circa 105 ore). La somministrazione cronica di MK-196 ai cani ha determinato un profilo plasmatico correlato alla dose e non ha mostrato alcuna tendenza ad aumentare o diminuire con la somministrazione. somministrazione alle scimmie, i livelli plasmatici del farmaco sono aumentati e poi diminuiti, probabilmente a causa di ipocloremia e alcalosi metabolica secondaria. L'escrezione fecale era la via predominante di eliminazione del tracciante nel cane (circa l'80%) e nel ratto (circa il 94%), mentre la scimmia ha eliminato la maggior parte della dose (circa il 60%) attraverso le urine. Nelle tre specie inferiori è stato osservato un metabolismo minimo; la maggior parte della radioattività urinaria, plasmatica e fecale è stata considerata come farmaco intatto e suo coniugato glucuronide. Tre metaboliti minori, presenti nella bile, nel plasma e nelle urine di cane, sono stati caratterizzati come: acido (l,7-dicloro-1alfa-idrossi-2-metil-2-fenil-5-indanilossi)acetico, I; acido (6,7-dicloro-2-(4-idrossifenil)-2-metil-2-osso-5-indanilossi)acetico, II; e 2-metil-2-fenil-5-idrossi-6,7-dicloro-1-indanone, III. L'urina e il plasma delle scimmie contenevano anche piccole quantità di II.
L'escrezione biliare di rame nel ratto è potenziata dallo spironolattone.Distribuzione tissutale ed escrezione (urina, fecale e biliare) di un bolo endovenoso di 64Cu (NO3)2 sono stati misurati nei ratti pretrattati con spironolattone e nei controlli. Gli animali intatti pretrattati con spironolattone hanno escreto il 10% in più di un'iniezione endovenosa standard di rame nelle prime 24 ore rispetto ai controlli. Alla fine di quel periodo, rene, rosso i livelli di cellule del sangue e di rame nel siero erano tutti simili per i due gruppi, ma le concentrazioni di rame nel fegato erano più alte nei controlli. Durante la prima ora dopo l'iniezione di rame, i livelli di rame nel plasma tendevano a diminuire più rapidamente negli animali pretrattati, mentre le concentrazioni di rame nel fegato aumentavano di più rapidamente; le concentrazioni di rame nei globuli rossi non erano più elevate negli animali a cui era stato somministrato lo spironolattone. Gli animali pretrattati espellevano significativamente più rame nella bile durante le prime 2 ore dopo l'iniezione di 64Cu(NO3)2 e avevano un più alto le di rame epatico vel a 3 ore.
La biotrasformazione dell'acido (6,7-dicloro-2-metil-1-osso-2-fenil-5-indanilossi) acetico (MK-196) nello scimpanzé .Il metabolismo di un nuovo agente saluretico polivalente (6,7-dicloro-2-metil-1-osso-2-fenil-5-indanilossi)acido acetico (MK-196) è stato studiato nel scimpanzé. Dopo somministrazione orale, il 50% della dose radioattiva è stata ritrovata nelle urine in quattro giorni; l'8-14% della dose è stata escreta come farmaco immodificato. I campioni fecali hanno rappresentato il 5-9% della dose. Dopo somministrazione endovenosa è stata osservata una rapida eliminazione iniziale del farmaco dal plasma [(t1/2)alfa circa 0,4 ore, (t1/2)beta circa 4 ore] I dati sono coerenti con la rapida eliminazione della radioattività, circa il 30% della dose, nelle urine durante le prime 24 ore, seguite da una velocità di escrezione molto più lenta di farmaco e metaboliti. Questi risultati sono congruenti con l'elevata affinità (superiore al 98%) di MK-196 e il principale metabolita con plas ma proteine. I metaboliti urinari sono stati isolati e identificati mediante le seguenti tecniche: estrazione con solvente, colonna, cromatografia su strato sottile e gas-liquido, derivatizzazione e spettroscopia di risonanza magnetica nucleare e di massa. Il principale metabolita, risultato della para-idrossilazione del sostituto del 2-fenile, rappresentava circa il 40% della radioattività urinaria. È stata inoltre dimostrata la riduzione del gruppo chetone, la metilazione del gruppo p-idrossi e l'ulteriore idrossilazione dell'anello fenilico. Non c'erano prove della formazione di glucuronide né l'SKF-525-A inibiva il metabolismo del farmaco nello scimpanzé. In condizioni di alcalosi metabolica indotta, i livelli urinari di MK-196 sono aumentati dall'11 al 40%. Il probenecid e il p-aminoippurato somministrati durante l'alcalosi metabolica hanno ridotto la clearance del farmaco (dal 40 al 15%).
I profili di escrezione urinaria del naltrexone nell'uomo, nella scimmia, nel coniglio e nel ratto.È stato sviluppato un metodo gascromatografico per la determinazione simultanea di naltrexone, alfa-naltrexolo e beta-naltrexolo come derivati trimetilsilici. L'analisi delle urine di coniglio, scimmia e ratto ha dimostrato che, come l'uomo, queste specie riducono il naltrexone principalmente a beta-naltrexolo. In pazienti di mantenimento con naltrexone trattati con 125 mg PO tre volte a settimana, una media del 37% della dose è stata recuperata nelle urine delle 48 ore come naltrexone libero (0,8%), naltrexone coniugato (7,6%), beta-naltrexolo libero (16,8%) e beta-naltrexolo coniugato (11,8% ). Il 34% della dose è apparso in 0-24 ore e il 3% durante 24-48 ore. Il rapporto tra beta-naltrexolo e naltrexone è aumentato da 2 a 0-4 ore a 34-48 ore. dose di 12 mg/kg PO, cronicamente, ha escreto pochissimo beta-naltrexolo libero e ha mostrato un'apparente differenza correlata al sesso nel pattern di escrezione ns, con le femmine che espellono più del doppio della base totale rispetto ai maschi. I conigli a cui è stata somministrata una dose di 30 mg/kg ip per 4 giorni hanno escreto naltrexone coniugato come metabolita urinario predominante, che rappresenta l'80% della base totale recuperata in 24 ore. Nei ratti trattati con 100 mg/kg PO, meno dell'1% della dose somministrata potrebbe essere rappresentato nelle urine delle 24 ore, indicando che sebbene il beta-naltrexolo sia prodotto come metabolita urinario, altri mezzi di eliminazione del farmaco devono esistere. Pertanto, nell'uomo e nella scimmia, il beta-naltrexolo è il metabolita urinario predominante e persistente. I profili di escrezione urinaria del naltrexone differiscono notevolmente tra le specie comunemente esaminate per gli studi di tossicità cronica.
Il decorso temporale della tolmetina e dei suoi metaboliti nel plasma di singoli ratti e topi.Tolmetina, 1-metil-(5-p-toluoil )pirrolo-2-acetico, è un nuovo agente antinfiammatorio non steroideo. Dopo somministrazione orale di tolmetina-14C a ratti e topi, sono stati ottenuti microcampioni sequenziali di sangue dal plesso venoso oftalmico attraverso il seno orbitario. Il plasma è stato raccolto dopo la centrifugazione e le microaliquote di ciascun campione di plasma sono state analizzate. La radioattività totale e i saggi cromatografici su strato sottile hanno utilizzato la quantificazione della tolmetina, del suo metabolita dell'acido dicarbossilico e (per differenza) di tutti gli altri metaboliti collettivamente per ciascun campione. livelli plasmatici sono stati ottenuti per singoli ratti e topi. L'emivita di eliminazione plasmatica di tolmetina è stata stimata in 0,67 +/- 0,13 ore (media +/- SD) nei ratti maschi, 1,4 +/- 0,6 ore nelle femmine di ratto, 1,2 + /- 0,3 ore nei topi maschi e 1,0 +/- 0,0 ore nei topi femmine t è stato utilizzato il modello aperto.
Ruolo del flusso sanguigno nelle alterazioni indotte da monossido di carbonio e ipossia ipossica nel metabolismo dell'esobarbital nei ratti.È stata esaminata la dipendenza dal flusso del metabolismo epatico dell'esobarbital nel fegato di ratto perfuso isolato. A basse velocità di flusso (0,5-1,0 ml/min/g di fegato) è stato riscontrato che la clearance dell'esobarbital dipende dal flusso del fluido di perfusione, mentre a velocità di flusso più elevate la clearance del farmaco si avvicina all'indipendenza dal flusso. flusso sanguigno epatico ha suggerito che il metabolismo dell'esobarbital in vivo dovrebbe essere fortemente dipendente dal flusso. Il flusso sanguigno nel ratto cosciente è stato misurato mediante l'uso di microsfere radiomarcate durante l'esposizione acuta a livelli di ipossia ipossica (ridotta pO2) o monossido di carbonio che ha provocato alterazioni uguali nel contenuto di ossiemoglobina arteriosa (circa il 65% di ossiemoglobina). L'ipossia ipossica (8% O2) ha causato una massiccia ridistribuzione del flusso lontano dall'area splancnica, con conseguente diminuzione del 45% del flusso sanguigno epatico. il monossido di carbonio (500 ppm) non ha avuto effetti significativi sul flusso sanguigno epatico. Questi dati sembrerebbero spiegare la potenza inibitoria relativamente maggiore dell'ipossia ipossica sul metabolismo dei farmaci in vivo, poiché la somministrazione del farmaco al fegato è depressa dall'ipossia ipossica ma non è influenzata dall'esposizione al monossido di carbonio.
Contenuto di citocromo P-450 e attività ossidasi a funzione mista in microsomi isolati da pelle di topo.Una frazione microsomiale, preparata da pelle di topo, ha catalizzato il idrossilazione di benzpirene e anilina e deetilazione della 7-etossicumarina. La contaminazione del preparato da parte della citocromo ossidasi e del citocromo P-420 è stata determinata mediante analisi spettrale. Le attività enzimatiche studiate nella pelle di topo (Swiss-Webster CD-1) non hanno risposto a applicazione topica di 3-MC. Ventiquattro ore dopo l'applicazione topica di TCDD ai topi, i microsomi della pelle avevano un'attività di benzpirene idrossilasi e 7-etossicumarina deetilasi maggiore del 50% e un'attività di questi enzimi da 4 a 8 volte maggiore è stata osservata dopo 72 ore Aumenti nel contenuto di citocromo P-450 dei microsomi cutanei potrebbero essere dimostrati 24 e 72 ore dopo il trattamento topico con TCDD dei topi. Il trattamento con colato (solubilizzazione) dei microsomi cutanei, seguito da centrifugazione, ha rimosso l'ossido di citocromo contaminante ase. Dalle preparazioni solubilizzate sono state effettuate analisi quantitative e qualitative degli spettri di differenza del citocromo P-450.
Conservazione di vari componenti che metabolizzano i farmaci microsomiali in preparazioni tissutali provenienti da fegati, polmoni e intestino tenue di roditori.Fegati, polmoni e piccoli l'intestino di conigli non trattati e il fegato di ratti di controllo sono stati conservati intatti, o come sospensioni microsomiali, sotto azoto liquido a -196 gradi C. Anilina idrossilasi, aminopirina demetilasi, benzpirene idrossilasi, bifenil idrossilasi, NADPH-citocromo c reduttasi, attività UDP-glucuroniltransferasi , il contenuto microsomiale del citocromo P-450 e le variazioni spettrali indotte dall'anilina e dalla benzfetamina sono state confrontate in preparazioni fresche e conservate. fino a 28 giorni Il pretrattamento dei conigli con fenobarbital non ha influenzato la stabilità dei preparati microsomiali conservati Attività enzimatiche nel fegato di animali non trattati o 3-meth I ratti pretrattati con ilcolantrene erano meno stabili alla conservazione rispetto alle preparazioni di tessuti di conigli conservati in condizioni identiche. Tuttavia, quando i microsomi epatici di ratto sono stati risospesi in KCl-HEPES integrato con 1 mM EDTA prima dello stoccaggio, le attività enzimatiche non sono state in gran parte influenzate dal congelamento in azoto liquido.
Proprietà dei sistemi enzimatici microsomiali che riducono la N-idrossifentermina.La riduzione della N-idrossifentermina è stata studiata in microsomi epatici isolati da ratto, cavia, e coniglio. La riduzione richiede un sistema di generazione di NADPH ed è stata inibita da ossigeno e monossido di carbonio. Nel ratto, la riduzione è stata aumentata dal pretrattamento con fenobarbital. L'analisi cinetica dell'attività della reduttasi nei microsomi del fegato di ratto suggerisce che la riduzione dell'idrossilammina è mediato da almeno due sistemi enzimatici, uno dei quali è un sistema CO-sensibile inducibile dal fenobarbital.
Biotrasformazione di farmaci in microsomi dal macaco dalla coda mozzata fetale, Macaca arctoides: N-demetilazione epatica.La cinetica della N-demetilazione di benzfetamina, etilmorfina , meperidina e metadone sono stati studiati in microsomi isolati da fegati di macaco dalla coda mozza fetale (Macaca arctoides) durante l'ultimo terzo di gestazione. Il KM apparente per ciascun substrato non è cambiato durante questo periodo di tempo. I valori erano simili a quelli dei fegati di scimmie verdi africane adulte. Il Vmax per ciascun substrato, espresso per mg di proteina microsomiale, non è cambiato durante l'ultimo terzo di gestazione L'attività della N-demetilasi (Vmax) per g di fegato è aumentata durante l'ultimo terzo di gestazione, come il contenuto di proteine microsomiali, la concentrazione di citocromo P-450 e il peso del fegato. La quantità di citocromo P-450 per g di fegato era maggiore negli omogenati interi del lobo fisiologico sinistro rispetto a quelli del lobo fisiologico destro e di fegato fetale ottenuto a breve termine; non si sono verificate differenze negli omogenati interi dei lobi separati del fegato adulto. Questa osservazione suggerisce che tra i due lobi fisiologici del fegato fetale possa esistere una capacità differenziale per il metabolismo dei farmaci (e possibilmente degli steroidi).
Poliamine e ossidazioni di farmaci.L'aggiunta di spermina o di spermidina ai sistemi di analisi del fegato di ratto ha prodotto notevoli cambiamenti in una serie di ossidazioni microsomiali di farmaci. l'idrossilazione dell'anilina e la N-demetilazione dell'etilmorfina sono state entrambe migliorate con concentrazioni di 1-10 mM di spermina o di spermidina I risultati con la putrescina sul metabolismo dell'etilmorfina sono stati meno drammatici e nessun effetto è stato osservato con la putrescina negli studi con altri substrati di farmaci In contrasto con gli effetti di potenziamento, è stata osservata inibizione quando la spermina o la spermidina sono state aggiunte alle miscele di saggi di O-demetilazione di p-nitroanisolo e non è stato osservato alcun effetto nei saggi per l'idrossilazione dell'acetanilide. Gli effetti di inibizione e potenziamento delle poliammine possono essere osservati in saggi contenenti preparazioni epatiche di ratti maschi e femmine e quelli di ratti pretrattati con fenobarbital o 3-metilcolantrene. In tutti gli studi, le alterazioni erano cineticamente non competitivo. Gli effetti hanno dimostrato di essere indipendenti dal sistema di generazione di NADPH e dai requisiti di cationi e non sono stati mediati da un'interazione con la NADPH-citocromo c reduttasi. Si ritiene che gli effetti di potenziamento e inibizione possano essere correlati alla capacità di questi policationi di legarsi alle membrane microsomiali e causare alterazioni in diversi siti di interazione del substrato.
Relazione tra emodinamica polmonare e pH arterioso e tensione di anidride carbonica in pazienti critici.Accertare il significato clinico delle alterazioni del pH arterioso e del carbonio arterioso tensione di biossido (PaCO2) nel modificare le pressioni arteriose polmonari e le resistenze vascolari polmonari in pazienti critici, la relazione tra questi due gruppi di variabili è stata valutata in 75 pazienti. Non sono state riscontrate differenze significative nei valori emodinamici polmonari tra i pazienti con acidemia, un pH normale , o alcalemia, anche a valori di pH estremi; e non c'era una relazione coerente tra PaCO2 e ciascuna delle misurazioni emodinamiche polmonari. Nei pazienti che inizialmente avevano un pH normale ma che successivamente hanno sviluppato acidemia o alcalemia, non c'era anche una correlazione significativa tra i cambiamenti di pH e valori emodinamici polmonari Concludiamo che le anomalie dei valori emodinamici polmonari in pazienti gravemente malati sono us generalmente a causa di fattori diversi dagli squilibri acido-base. Di importanza pratica è l'osservazione che la prevedibilità della pressione di incuneamento dell'arteria polmonare dalla pressione diastolica dell'arteria polmonare non è invalidata da disturbi acido-base.
Aneurismi arteriosi intrarenali.Aneurismi renali intraparenchimali sono stati riportati con crescente frequenza; tuttavia, a nostra conoscenza, questo argomento non è stato rivisto nella letteratura radiologica Lo spettro di tali aneurismi comprende aneurismi congeniti, quelli secondari a malattie che solitamente colpiscono le principali arterie renali, quelli associati a masse renali, microaneurismi e falsi o pseudo aneurismi Condizioni apparentemente non correlate, come aterosclerosi, endocardite batterica e traumi, possono tutti producono un aspetto radiografico simile di dilatazione aneurismatica all'interno del rene, anche se attraverso meccanismi diversi. Inoltre, ci sono diverse eziologie per i microaneurismi renali, anche se questo reperto è stato considerato specifico per la poliarterite in passato. Anche se esistevano alcune linee guida per il riconoscimento determinate eziologie specifiche basate esclusivamente sull'aspetto angiografico, si deve apprezzare che molte di queste condizioni potrebbe essere indistinguibile. Viene discussa anche la possibilità di emorragia da tali aneurismi intrarenali e la questione se tali lesioni siano responsabili dell'ipertensione renovascolare.
Sequenze psichiatriche dell'abuso di fenciclidina.È stato osservato che l'uso di fenciclidina produce una psicosi della durata di diverse settimane in una piccola frazione di utenti. delle personalità premorbose di coloro che sono diventati psicotici assomigliano alle descrizioni dei consumatori di LSD e marijuana che hanno sperimentato difficoltà psichiatriche prolungate. Inoltre, la psicosi prodotta può essere spesso riconosciuta come una psicosi "allucinogena". le anomalie neurologiche, la gravità dei sintomi correlata alla dose e la regolarità della durata della malattia, non vengono notate con altri farmaci psichedelici, portando alla conclusione che la psicosi PCP è un effetto farmacologico piuttosto che una breve psicosi funzionale precipitata dall'esperienza disintegrante del PCP. Tuttavia, il raro verificarsi di psicosi nella (apparentemente) ampia popolazione esposta suggerisce ancora che si tratti di una combinazione di effetto farmaco e vulnerabile, patologo personalità magica.
Osservazioni farmacologiche cliniche su atenololo, un beta-bloccante dei recettori adrenergici.Gli effetti della somministrazione orale ed endovenosa di atenololo sono stati studiati in volontari sani. la somministrazione di una serie di dosi singole di atenololo ha ridotto la tachicardia da sforzo. Dopo una dose di 200 mg, l'effetto su una tachicardia da sforzo era massimo a 3 ore e diminuiva linearmente con il tempo ad una velocità di circa il 10% ogni 24 ore. la concentrazione plasmatica di atenololo si è verificata a 3 ore e successivamente è diminuita esponenzialmente nel tempo con un'emivita di eliminazione di 6,36 +/- 0,55 ore: 43 +/- 3,9% della dose è stata escreta nelle urine entro 72 ore. la riduzione della tachicardia da sforzo e del logaritmo della corrispondente concentrazione plasmatica La somministrazione endovenosa di atenololo riduce la tachicardia da sforzo con una correlazione significativa tra effetto e concentrazione plasmatica Dopo 50 mg per via endovenosa, il 100% della la dose è stata recuperata dalle urine e la clearance è stata di 97,3 ml/min. Il confronto dell'AUC O porta al chi dopo la somministrazione orale ed endovenosa di 50 mg ha mostrato che la biodisponibilità è del 63% dopo il farmaco orale. La somministrazione orale ripetuta di atenololo 200 mg al giorno sia come dose singola che in dosi frazionate di 12 ore per 8 giorni ha mantenuto una riduzione della tachicardia da sforzo di almeno il 24% durante il periodo di somministrazione del farmaco. L'emivita di eliminazione plasmatica, l'area sotto la curva concentrazione plasmatica-tempo e la concentrazione plasmatica di picco dopo 200 mg di atenololo non sono stati modificati dal dosaggio cronico per 8 giorni.
Farmacocinetica dell'oxprenololo in soggetti normali.L'effetto dell'oxprenololo somministrato per via endovenosa (10 e 20 mg) e per via orale (20, 40, 80 e 160 mg) sulle concentrazioni plasmatiche del farmaco, sulla frequenza cardiaca a riposo, sulla tachicardia indotta dall'esercizio e sulla pressione arteriosa è stata valutata in funzione del tempo in 6 soggetti sani. La farmacocinetica dell'oxprenololo dopo somministrazione endovenosa è meglio descritta come aperta a 2 compartimenti modello con parametri dose-dipendenti. L'emivita plasmatica media (+/-SD) per le dosi orali è 1,94 +/- 0,37 e per le dosi endovenose è 2,31 +/- 0,64 ore. Dopo la somministrazione orale, le concentrazioni plasmatiche di picco vengono raggiunte entro 30-90 min e l'area sotto la curva concentrazione plasmatica-tempo varia linearmente con la dose. Il confronto dei dati orali e endovenosi rivela la variazione nella biodisponibilità dell'oxprenololo somministrato per via orale che varia dal 19% al 74%. A differenza del propranololo, l'oxprenololo non non mostrare un saturabile Effetto di eliminazione "first-pass". Il blocco dei recettori beta si verifica a livelli plasmatici superiori a 60 ng/ml come evidenziato da riduzioni significative della frequenza cardiaca a riposo e dalla tachicardia indotta dall'esercizio. Per abbassare la pressione sanguigna sono necessarie concentrazioni plasmatiche più elevate di oxprenololo rispetto a quelle necessarie per rallentare la frequenza cardiaca. Questi dati suggeriscono differenze farmacocinetiche significative tra l'oxprenololo e altri antagonisti dei recettori beta-adrenergici.
Effetto della sulfasalazina sulla biodisponibilità della digossina.Bassi livelli di digossina sono stati osservati in un paziente che riceveva digossina e sulfasalazina (SSA). L'interruzione della SSA ha provocato un aumento significativo dei livelli sierici di digossina. Per determinare se l'SSA interferisse costantemente con l'effetto terapeutico della digossina, entrambi i farmaci sono stati somministrati a 10 soggetti normali in uno studio crossover. Ognuno ha ricevuto 2 dosi di digossina (0,5 mg, elisir): una dose somministrata da sola e una seconda dose dopo 6 giorni di trattamento con SSA. Quando la digossina è stata somministrata con SSA, l'area media sotto la curva della digossina sierica è scesa dal valore di controllo di 8,79 ng-hr-ml(-1) a 6,66 ng -hr-ml(-1) (p inferiore a 0,05), è diminuita e l'escrezione urinaria totale è diminuita da 278 mcg/10 giorni a 228 mcg/10 giorni (p inferiore a 0,025). Questi cambiamenti suggeriscono un'interferenza con la biodisponibilità della digossina da parte di SSA Sono stati condotti studi per determinare se l'SSA ha inibito l'assorbimento della digossina per via fisica y assorbendo il glicoside dalla soluzione. I test in vitro non sono riusciti a rivelare proprietà adsorbenti significative per l'SSA.
Interrelazioni vitamina B12--folato.L'anemia megaloblastica è dovuta a uno squilibrio della sintesi del DNA causato da un insufficiente apporto di uno o l'altro dei quattro desossiribonucleosidi trifosfato (dNTP) precursori della sintesi del DNA o per inibizione diretta dell'una o dell'altra DNA polimerasi. Il ridotto apporto di pirimidina deossitimidina trifosfato (dTTP) può essere causato da carenze di folati o vitamina B12 o dall'azione di inibitori della diidrofolato reduttasi (es. metotrexato, pirimetamina o trimetoprim), che causano tutti un ridotto apporto del coenzima 5, 10 metilene tetraidrofolato (pentaglutammato) necessario per la timidilato sintetasi. La riduzione dell'apporto di dTTP può anche essere causata dall'inibizione diretta della timidilato sintetasi da parte del 5-fluorouracile. Ridotto apporto di entrambe le purine , deossiadenosina trifosfato (dATP) e deossiguanosina trifosfato (dGTP), possono essere causati da idrossiurea, 6-mercaptopurina (e probabilmente da un altro antagonista delle purine azaserina), mentre t Il ridotto apporto di entrambi i precursori del DNA pirimidinico, dTTP e dCTP (deossicitidina trifosfato) può essere dovuto ad un'aciduria orotica ereditaria o al trattamento con azauridina. La citosina arabinoside inibisce direttamente la DNA polimerasi. La replicazione del DNA è un processo discontinuo e un certo numero di enzimi si occupa di diversi aspetti del processo. I fili parentali si srotolano parzialmente e un gran numero di punti di iniziazione o origini vengono attivati su entrambi i fili. Un primer RNA viene prima sintetizzato utilizzando il filamento parentale di DNA come stampo. Frammenti di nuovo DNA vengono quindi sintetizzati sullo stampo del DNA parentale, a partire dal primer dell'RNA, sotto l'azione dell'una o dell'altra DNA polimerasi (probabilmente gamma). Il primer dell'RNA viene quindi rimosso e lo spazio rimasto viene riempito da un'ulteriore sintesi del DNA sotto l'azione di una diversa DNA polimerasi (probabilmente alfa). I frammenti di nuovo DNA vengono uniti per dare tratti di DNA di nuova sintesi (replicani) che vengono poi legati insieme per formare DNA in massa di enorme peso molecolare. Si suggerisce qui che l'apporto ridotto dell'uno o dell'altro dei quattro desossiribonucleosidi trifosfato (dNTP) durante la fase \'S\' del ciclo cellulare (dovuto a carenza di vitamina B12 o folati, trattamento farmacologico o altra anomalia congenita o acquisita nella sintesi di il dNTP) compromette la capacità della cellula di allungare i frammenti di DNA appena iniziati impedendo il riempimento del gap, la polimerasi necessaria per il riempimento del gap che richiede concentrazioni sostanzialmente maggiori di deossiribonucleosidi trifosfati rispetto alla polimerasi coinvolta nell'inizio della catena. La citosina arabinoside, che può anche causare megaloblastosi, può influenzare principalmente la sintesi di nuovi frammenti di DNA. Poiché è necessaria la sintesi proteica attiva affinché la cellula entri nella fase S e la sintesi dell'RNA è necessaria per innescare la nuova sintesi del DNA, ci si può aspettare che l'anemia megaloblastica si verifichi solo quando la sintesi del DNA è inibita, ma la sintesi delle proteine e dell'RNA è relativamente intatta...
Assorbimento e malassorbimento di folati.L'acido folico è una delle vitamine \'più giovani\', eppure ha attirato studi intensivi nei trent'anni successivi l'identificazione dell'acido pteroilglutammico e dei suoi poliglutamil coniugati L'assorbimento e il malassorbimento dei folati, naturali, purificati e sintetici, nella malattia è stato studiato più di ogni altra vitamina e infatti l'assorbimento dei folati è diventato un test clinico della funzione intestinale. il rilascio di folato da complessi proteici, ma abbiamo appreso, con l'aiuto di pteroilpoliglutammati sintetici radiomarcati, che i poliglutamilfolati vengono idrolizzati in corrispondenza o vicino al bordo luminale dell'intestino e il folato rilasciato viene assorbito in modo efficiente. essere il trasporto del monoglutamil folato. Nella malattia e con i farmaci, il malassorbimento del folato si verifica principalmente quando il trasporto del monoglutamil è depresso. Il c specifico gli esponenti del sistema di trasporto dei folati, elencati nella tabella 4, stanno ricevendo maggiore attenzione. Il meccanismo di assorbimento è ancora un argomento controverso, ma un sistema duale che includa sia una componente saturabile che una di diffusione spiegherebbe la maggior parte dei dati. La riduzione e l'aggiunta di metile o formile si verificano nell'intestino ma tale metabolismo non è obbligatorio per il trasporto. La natura del legame dei folati all'interno della cellula e la funzione di specifiche proteine leganti i folati richiedono ulteriori studi. Al momento abbiamo poche o nessuna informazione sul meccanismo di rilascio dei folati dalla cellula epiteliale alla circolazione, ma anche questo passaggio potrebbe influenzare la velocità e la specificità del processo complessivo. Gli strumenti sono ora a portata di mano per completare la nostra comprensione delle fasi dell'assorbimento e del metabolismo dei folati. Tale comprensione dovrebbe facilitare la gestione della carenza di folati ogni volta che complica una malattia gastrointestinale o una terapia farmacologica.
Vie metaboliche saturabili per l'etotoina nell'uomo.1. Il modello di escrezione urinaria dell'etotoina e di cinque metaboliti è stato esaminato in tre pazienti sottoposti a trattamento continuo con etotoina a due livelli di dose, al fine di indagare il meccanismo alla base della cinetica dose-dipendente di questo farmaco anticonvulsivante. 2. I risultati suggeriscono una parziale saturazione del processo di dealchilazione ad alti livelli di dose in tre pazienti. 3. Una approssimativa approssimazione del Michaelis -Sono state tentate le costanti di Menten per diversi processi enzimatici. In base ai risultati ottenuti, la p-idrossilazione può essere un processo saturabile 4. La cinetica dose-dipendente dell'etotoina nell'uomo sembra essere spiegabile dall'esistenza di enzimi parzialmente saturabili percorsi.
Confronto dei farmaci sedativo-ipnotici bromureide, bromvaletone (bromisoval) e carbromal, e loro analoghi del cloro nei topi.1. Gli effetti depressivi centrali di bromvaletone, carbromal e sei analoghi non bromo sono stati confrontati nei topi 2. Gli analoghi cloro di bromvaletone e carbromal erano leggermente meno potenti come agenti depressivi centrali rispetto ai composti bromo 3. L'analogo cloro di bromvaletone aveva il margine maggiore tra il dosi depressive e letali. 4. La lipofilia (coefficiente di ripartizione ottanolo-acqua) non ha fornito una relazione unificante per la potenza all'interno di questo gruppo di otto aciluree. Tuttavia, all'interno di ciascuno dei due sottoinsiemi di composti, è stata trovata una relazione lineare tra potenza relativa e lipofilia.
L'influenza dell'istamina sulla proliferazione delle cellule epiteliali nel digiuno del ratto.1. L'influenza dell'istamina e del blocco del recettore dell'istamina sul tasso mitotico nella proliferazione delle cellule epiteliali nelle cellule epiteliali che rivestono le cripte di Lieberkühn nel digiuno di ratto è stato studiato 2. L'iniezione di istamina ha provocato un aumento del tasso mitotico. Questo aumento del tasso mitotico è stato bloccato dalla metiamide ma non dalla mepiramina. 3. Prevenzione dell'istamina la sintesi mediante somministrazione di alfa-metilistidina non ha alterato il tasso mitotico. 4. Vengono discussi il meccanismo attraverso il quale l'istamina può influenzare la proliferazione delle cellule della cripta e il possibile ruolo del GMP ciclico in questa mediazione.
Fattori adrenergici che influenzano il tasso mitotico nell'epitelio squamoso stratificato della mucosa buccale del ratto.1. Una tecnica statmocinetica in vivo è stata utilizzata per determinare l'effetto immediato di vari agonisti e antagonisti dei recettori adrenergici sulla velocità mitotica nell'epitelio squamoso stratificato della mucosa buccale di ratto 2. La velocità mitotica è aumentata significativamente nei ratti trattati con propranololo e con practololo, mentre la velocità mitotica è diminuita significativamente nei ratti trattati con metaraminolo Negli animali trattati con isoprenalina e fentolamina la velocità mitotica non differiva significativamente dal valore di controllo 3. La natura del coinvolgimento dei meccanismi adrenergici con la proliferazione cellulare è ancora incerta ma sembrano essere associati sia meccanismi alfa che beta-adrenergici con il controllo della proliferazione cellulare.
Effetti della morfina sull'istamina cerebrale, antinocicezione e attività nei topi.1. L'effetto della morfina sul contenuto di istamina nel cervello del topo è stato I cambiamenti nel livello di istamina cerebrale sono stati correlati all'analgesia indotta dalla morfina e ai cambiamenti indotti dalla morfina nell'attività locomotoria 2. Con dosi di morfina comprese tra 1 e 5 mg/kg si è verificato un aumento significativo dei livelli di istamina. necessario per produrre un aumento massimo del livello di istamina cerebrale con 5 mg/kg di morfina era di 15 minuti 3. C'era una diminuzione significativa dei livelli di istamina cerebrale con dosi di morfina comprese tra 7-5 e 100 mg/kg. quale la diminuzione maggiore è stata prodotta con 50 mg/kg era di 30 min 4. Il time couse dell'alterazione dell'istamina cerebrale da parte della morfina non era correlato con la sua attività antinocicettiva. topi mentre i livelli di istamina nel cervello erano aumentati e diminuiti d, rispettivamente. 5. Il pretrattamento di topi con composti che modificano la funzione istaminergica non ha modificato l'azione antinocicettiva della morfina. 6. La morfina ha prodotto un effetto bifasico sull'attività locomotoria quando la dose è stata aumentata da 0-5 fino a 100 mg/kg. Dosi fino a 2-5 mg/kg hanno causato una riduzione dell'attività e dosi superiori a questa hanno prodotto aumenti significativi. 7. Sembra esserci una relazione inversa tra i cambiamenti dell'istamina cerebrale indotti dalla morfina e i cambiamenti nell'attività locomotoria indotti dalla morfina.
Un metodo semplice e rapido per la rilevazione prenatale di difetti nel metabolismo del propionato.Incorporazione di radiomarca da propionato-1(-14)C in proteine ( materiale insolubile TCA) nei fibroblasti o nelle cellule del liquido amniotico, fornisce un mezzo rapido e semplice per rilevare feti con errori congeniti del metabolismo propionato utilizzando un piccolo numero di cellule. I controlli sono stati facilmente differenziati dalle linee mutanti in diverse condizioni di pH del mezzo. Questo metodo è stato utilizzato con successo per diagnosticare correttamente un feto normale a rischio di acidemia metilmalonica. Questo metodo può essere utilizzato come coadiuvante nella diagnosi, ma non può sostituire l'analisi enzimatica diretta.
Gamma-glutamil transpeptidasi sierica ed esercizio fisico.L'influenza immediata e ritardata dell'esercizio di tipo, durata e intensità variabili sul gamma-glutamil sierico è stata esaminata l'attività della transpeptidasi (gamma-GT) in atleti e persone non allenate. Sono stati discussi i possibili effetti dei cambiamenti indotti dall'esercizio in altri parametri (glutammato plasmatico libero, trigliceridi sierici, emoconcentrazione) sulla gamma-GT sierica misurata dopo l'esercizio, in parte sulla base dei nostri stessi dati sperimentali, sembra che né l'esercizio in sé, né alcuno dei fattori sopra menzionati (ad eccezione di un leggero e transitorio effetto di emoconcentrazione dopo uno sforzo breve e intenso) abbiano un'influenza notevole sulla gamma-GT sierica. è quindi probabile che questo enzima per scopi diagnostici venga utilizzato indipendentemente dalla storia di esercizio fisico acuto e cronico nell'uomo.
beta-Glucuronidase and estrogens in hydatidiform mole.L'attività della beta-glucuronidase (beta-D-glucuronide glycuronohydrolase, EC 3.2.1.31) in è stato determinato il tessuto placentare e molare idatiforme e nei sieri di donne in gravidanza non gravide, normali e molari. Sono state inoltre determinate le concentrazioni di estrogeni nei due tessuti solidi. Sono state riscontrate differenze significative nell'attività dell'enzima tra i tessuti placentari e molari e tra i vari sieri. La minore attività nel siero molare corrisponde a una minore concentrazione di estrogeni nei tessuti molari e può essere considerata una risposta all'attenuazione dei requisiti di coniugazione.
Determinazione del contenuto di isoenzima dell'attività lattica deidrogenasi e dell'attività della 2-idrossibutirrico deidrogenasi nelle preparazioni lattiche deidrogenasi.In questa indagine, una determinazione del contenuto di isoenzima delle attività di LDH e HBD nelle preparazioni di lattato deidrogenasi e sono state esaminate le differenze nell'interazione di queste preparazioni con gli analoghi del NAD. I risultati ottenuti sono stati i seguenti: 1. Il rapporto di attività tra ossidazione e riduzione nella reazione di LDH si è dimostrato simile in entrambi Preparazioni H4 e M4, mentre per l'attività HBD, il rapporto sembra essere inferiore nella preparazione M4 rispetto a H4(H4/M = 1/2). 2. Vengono mostrati NAD e i suoi analoghi (NXD, TNAD e TNXD) essere coenzimi utili per la reazione LDH, mentre i 3-acetil derivati sembrano essere inadatti a questo scopo a causa della loro minore attività. L'attività dell'HBD con 3-acetil NXD si è dimostrata superiore a quella con TNAD o TNXD. tra questi analoghi del NAD, 3-acetile NXD dà la più alta attività HBD, specialmente nella preparazione M4. 3. È stato dimostrato che l'attività LDH di H4 rispetto alle preparazioni M4 è massima quando si utilizzano acido lattico 450 mM con NAD o acido lattico 15 mM con TNXD. In queste condizioni, il contenuto delle subunità LDH può essere stimato con notevole affidabilità. Per quanto riguarda l'attività dell'HBD, il contenuto della subunità LDH avente attività dell'HBD è stato stimato determinando l'attività enzimatica in condizioni in cui vengono impiegati 2-idrossibutirrato 300 mM con 3-acetil NXD o 2-idrossibutirrato 15 mM con NAD.
Attività della gamma glutamil transferasi e della fosfatasi alcalina negli epilettici sottoposti a terapia anticonvulsivante.1. Gamma glutamil transferasi (gammaGT) e fosfatasi alcalina (ALP) nel siero sono state stimate in 49 pazienti epilettici che assumevano farmaci anticonvulsivanti 2. L'attività sierica gammaGT era chiaramente elevata in 12 dei pazienti e borderline in 8, dando una frequenza del 40% di valori anormali 3. L'attività totale di ALP sierica era elevata in 7 pazienti su su 33 pazienti adulti e 2 su 16 giovani 4. L'elettroforesi su gel di poliacrilammide ha mostrato che l'isoenzima osseo era responsabile della maggior parte dell'aumento dell'attività sierica dell'ALP e che anche quando il totale non era elevato, il contributo dell'isoenzima osseo era maggiore di 5. Non vi era alcuna correlazione tra le attività sieriche totali di ALP e gammaGT, ma gli aumenti di gammaGT sieriche erano spesso accompagnati da un aumento della proporzione dell'enzima osseo nell'attività sierica totale di ALP y.
Gamma-Glutamil-3-carbossi-14-nitroanilide: il substrato di scelta per le determinazioni di routine dell'attività della gamma-glutamil-transferasi nel siero?La gamma-glutamil-3-carbossi-4-nitroanilide è stata testata come substrato donatore nel dosaggio dell'attività della gamma-glutamiltransferasi nel siero, utilizzando la glicilglicina come substrato accettore. Questo substrato donatore è altamente solubile anche in soluzioni neutre, contrariamente al gamma-glutamil-4-nitroanilide comunemente usata. L'enzima che apparentemente agisce secondo un meccanismo bi-cinetico da ping-pong, mostra un valore assoluto di KM per la gamma-glutamil-3-carbossi-4-nitroanilide di circa 0,64 mmol/l, e per la glicilglicina di circa 13,4 mmol/l. Il primo valore di KM è significativamente inferiore a quello precedentemente riscontrato per la gamma-glutamil-4-nitroanilide. Il derivato carbossilico mostra un marcato effetto inibitorio competitivo sulla gamma-glutamiltransferasi. Questo effetto è più pronunciato rispetto a quello della gamma-glutamil-4-nitroanilide. Il derivato carbossilico ha un'assorbanza leggermente superiore nell'intervallo di lunghezze d'onda (400-420 nm) utilizzate per monitorare la formazione del prodotto. Si conclude che come substrato donatore nel dosaggio dell'attività della gamma-glutamiltransferasi del siero, il nuovo derivato non è sostanzialmente superiore alla gamma-glutamil-4-nitroanilide convenzionalmente utilizzata.
Caratterizzazione degli isoenzimi dell'adenosina deaminasi da normali eritrociti umani.L'adenosina deaminasi del fenotipo ADA è stata parzialmente purificata mediante cromatografia su CM-Sephadex C-50 e ammonio precipitazione del solfato. Con DEAE-Sephadex A-50 è stato possibile rilevare tre isoenzimi. a. I valori di KM per l'adenosina del substrato sono risultati pari a 30 muM per ciascun isoenzima. b. Il pH ottimale era 7,0 e il peso molecolare stimato mediante filtrazione su gel era è risultato essere 30 000 per ciascun isoenzima. c. La stabilità al calore di RBC-ADA tipo 1-1 era maggiore del tipo 1-2. L'isoenzima di tipo 2-1 che rappresenta la banda elettroforetica del fenotipo ADA2-2 è il più labile d. ATP, ADP, AMP e AMP ciclico, PCMB e 6-metilmercaptopurina riboside sono risultati inibitori competitivi con l'ADA in tutti e tre gli isoenzimi.
[Sialyltransferase nel melanoma maligno umano].Una glicosiltransferasi, acido CMP-N-acetilneuraminico: la glicoproteina sialiltransferasi è stata trovata nel melanoma maligno umano. Le attività sono state misurato con glicoproteina desializzata come accettore esogeno. L'enzima è stato caratterizzato per mezzo del suo valore ottimale di pH, 5,5, ottimale di temperatura, 30 gradi C, valori di KM, 10 muM per il nucleotide dello zucchero e 0,3 mM per la glicoproteina desalizzata. Non ha richiesto esogenamente ha aggiunto ioni metallici ma è stato leggermente stimolato da Mg2+. Per un'attività ottimale è necessario un detergente. È stato studiato l'effetto dei nucleotidi e dei nucleotidi dello zucchero sull'attività enzimatica.
Una forma anormale di fosforilasi nucleosidico purinico in una famiglia con un bambino con una grave immunità difettosa delle cellule T e delle cellule B normali.1. La fosforilasi nucleosidica purinica e l'adenosina deaminasi (ADA) sono state studiate nei globuli rossi e nei linfociti normali e nelle cellule di una famiglia con un bambino con un difetto dell'immunità dei linfociti T e dei linfociti B. 2. Nel propositus nessun nucleoside purinico l'attività della fosforilasi (NP) potrebbe essere rilevata nei suoi globuli rossi e nei linfociti, mentre l'attività dell'ADA è stata leggermente aumentata. trovato per il substrato inosina ma anche quando guanosina o xantosina sono stati utilizzati come substrato. La modalità di trasmissione è autosomica recessiva. 3. Con l'elettroforesi su gel di amido non è stata rilevata alcuna attività NP nell'emolisato del paziente. I modelli elettroforetici di NP dal padre, madre r e il fratello del paziente sembrano essere gli stessi della normale NP con sei bande di attività NP. 4. Le fosforilasi nucleosidici del padre, della madre e del fratello del paziente erano caratterizzate da un aumento del KM per il substrato inosina, pH ottimale normale e stabilità al calore ridotta.
Una ricerca del miglior tampone da utilizzare nel dosaggio della lattato deidrogenasi umana con la reazione lattato-piruvato.Lattato deidrogenasi umana altamente purificata I e V sono stati dosati in 17 diversi tamponi, a una varietà di pH di reazione\'. La dietanolammina e il 2-ammino-2-metil-1,3-propandiolo hanno fornito le migliori misurazioni dell'enzima, dosato da lattato a piruvato. la preparazione commerciale di 2-ammino-2-metil-1,3-propandiolo conteneva materia insolubile ed era relativamente costosa. Tutti e quattro i tamponi ora più comunemente usati presentavano difficoltà. La glicina e il pirofosfato inibivano l'attività del tolattato deidrogenasi con l'aumento della concentrazione del tampone Il 2-ammino-2-metil-1-propanolo presenta tre principali svantaggi: è chimicamente instabile durante la preparazione del reagente, l'attività dipende dalla concentrazione del tampone e il pH ottimale per gli isoenzimi I e V è molto diverso. Il pKa di tris( l'idrossimetil)amminometano è 8,0 a 30 gradi C, mentre per misurare l'attività totale il pH di reazione dovrebbe essere maggiore di 8,5; quindi il tris(idrossimetil)amminometano ha una capacità tampone limitata al pH di reazione.
Applicazione di uno spettrometro vidicon per determinazioni simultanee di farmaci multicomponente.Uno spettrometro vidicon a scansione rapida è stato valutato per la determinazione simultanea di farmaci in miscele, senza una fase di separazione I dati spettrali nella regione dell'ultravioletto vengono raccolti in linea con un piccolo computer a velocità di ripetizione di 100 scansioni al secondo I dati di assorbimento a diverse lunghezze d'onda vengono elaborati da equazioni matriciali per risolverli nella concentrazione di ciascun componente in ciascuna miscela I risultati sono riportati per miscele a due componenti di procainamide e N-acetilprocainamide nel siero, per miscele acquose a due componenti di butarbital e seconbarbital e per miscele acquose a sette componenti di fenobarbital, difenilidantoina, aminofillina, acetaminofene, salicilamide, e fenilbutazone secobarbital. Concludiamo che lo spettrometro vidicon interfacciato al computer è uno strumento praticabile per determinazioni multicomponenti simultanee.
Riproducibilità a lungo termine di un nuovo sistema di controllo qualità pH/gas ematico rispetto ad altre due procedure.Precisione e stabilità a lungo termine di un nuovo sistema di controllo qualità per la misurazione del pH ematico e dei gas vengono confrontati con quello delle soluzioni tonometriche di bicarbonato e dei preparati a base di siero. Il nuovo sistema, costituito da soluzioni di bicarbonato equilibrate in fiale di vetro, si dimostra stabile quanto il preparazione a base di siero e riproducibile come uno degli altri metodi. Il nuovo sistema, che offre tre serie discrete di valori di controllo, presenta alcuni vantaggi nella qualità simultanea delle misurazioni del pH, della tensione di anidride carbonica e della tensione di ossigeno.
Reazione del picrato sodico alcalino con la creatinina: I. Cinetica e meccanismo di formazione del complesso acido picrico mono-creatinina.Spettrofotometrico, cinetico e studi di risonanza magnetica nucleare indicano che il picrato sodico alcalino e la creatinina reagiscono per formare un addotto 1/1 tra picrico e creatinina, con una costante di stabilità di log K= 4,26. Gli studi cinetici indicano che la reazione diretta è del primo ordine rispetto all'acido picrico , idrossido e concentrazione di creatinina. La reazione inversa, la dissociazione del complesso 1/1, mostra una dipendenza complessa dalla concentrazione di idrossido. L'espressione per la costante di velocità di pseudo-primo ordine osservata in presenza di eccesso di acido picrico è: Kobsd = K1K0[P][OH] +[K2[OH]x. Si ottiene un valore di K1K0 = 5,0 (mol/litro)-2s-1. Per risultati analitici accurati con questa reazione, la concentrazione di idrossido deve essere mantenuta a un valore costante sia per i campioni che per gli standard.
Fattori che contribuiscono alla variazione intra-individuale dei costituenti del siero: variazione fisiologica quotidiana nelle concentrazioni di 10 proteine specifiche nei sieri di soggetti sani.Utilizzando un metodo automatizzato di immunoprecipitina, abbiamo analizzato sieri umani per 10 proteine: aptoglobina, orosomucoide, transferrina, alfa1 antitripsina, alfa2-macroglobulina, IgG, IGa, IgM, complemento C3 e complemento C4. Sangue di 14 soggetti sani (25-40 anni ) è stato campionato in sei giorni separati Da ciascun siero di venipuntura è stato diviso in quattro eliquote; due sono stati saggiati il giorno della venipuntura e due sono stati congelati e conservati fino alla fine dello studio, quando tutti i campioni congelati sono stati analizzati in un lotto Con questo disegno sperimentale, è stato possibile stimare la variazione analitica da lotto a lotto, evitando di confonderla con la variazione biologica. L'analisi dei dati si è basata sulla tecnica dell'analisi della varianza. zione variava dal 2,5% per la transferrina all'11,1% per l'orosomucoide. La variazione interindividuale variava dal 9,5% per la transferrina al 70,5% per l'aptoglobina e il rapporto tra variazione intra-individuale e variazione interindividuale variava da 0,66 per IgM a 0,26 per orosomucoide e transferrina.
Limiti normali dell'escrezione urinaria di undici enzimi.Escrezione urinaria di lattato deidrogenasi, idrossibutirrato deidrogenasi, gamma-glutamiltransferasi, fosfatasi alcalina, arilsolfatasi A, alfa -glucosidasi, beta-galattosidasi, trealasi, N-acetil-beta-glucosaminidasi, beta-glucuronidasi e leucinearilamidasi sono stati studiati in un gruppo accuratamente selezionato di 100 soggetti sani, 50 donne e 50 uomini. Le attività enzimatiche sono state valutate in 3 ore al mattino campioni dopo la filtrazione su gel delle urine. Le attività erano correlate al volume temporale e alla concentrazione di creatinina urinaria. Diverse funzioni di trasformazione dovevano essere applicate ai dati sull'output enzimatico per ottenere un'approssimazione alla distribuzione della frequenza gaussiana. Gli uomini mostravano un'escrezione significativamente maggiore di gamma- attività di glutamiltransferasi, alfa-glucosidasi, trealasi, N-acetil-beta-glucosaminidasi, beta-glucuronidasi e leucina arilamidasi rispetto alle donne se l'attività enzimatica era correlata al tempo urinario volume. Le donne espellevano più lattato deidrogenasi, idrossibutirrato deidrogenasi, gamma-glutamiltransferasi, fosfatasi alcalina, alfa-glucosidasi, trealasi e N-acetil-beta-glucosaminidasi rispetto agli uomini, se la creatinina urinaria fosse utilizzata come base di riferimento. Gli intervalli di riferimento sono stati calcolati come 2,5 e 97,5 percentili per entrambi i sessi.
Isolamento e identificazione di farmaci benzodiazepinici e dei loro metaboliti nelle urine mediante l'uso di resina Amberlite XAD-2 e cromatografia su strato sottile.Abbiamo utilizzato il metodo qui descritto per rilevare e identificare sette derivati delle benzodiazepine - diazepam, clorodiazepossido, nitrazepam, cloxazolam, oxazolam, oxazepam e medazepam - e i loro metaboliti nelle urine dei conigli a cui sono stati somministrati i sette farmaci per via orale. urina su Amberlite XAD-2. I farmaci e i loro metaboliti nelle urine sono stati adsorbiti dalla resina, indipendentemente dal pH urinario, e per successiva eluizione con metanolo e acetato di etile/metanolo/acido acetico (90/10/0,1 in vol) hanno possono essere separati ed estratti dai normali componenti dell'urina con un soddisfacente recupero analitico. I metaboliti coniugati sono stati quindi idrolizzati enzimaticamente e l'idrolizzato è stato estratto in acetato di etile e l'estratto cromatografato su strato sottile per rilevare e identificare ificare ogni farmaco e ciascuno dei suoi metaboliti. In un esperimento in cui è stata analizzata con questo metodo l'urina di soggetti umani a cui sono stati somministrati 5 mg di nitrazepam per via orale, è stato possibile identificare in modo soddisfacente i metaboliti del nitrazepam nelle urine delle 24 ore.
L'uso della gamma-glutamil transpeptidasi nel differenziare il fegato dagli isoenzimi ossei della fosfatasi alcalina.Sessantuno pazienti con elevata attività della fosfatasi alcalina dovuta al fegato o malattie ossee. Si è cercato di identificare l'origine dell'aumento della fosfatasi alcalina mediante inibizione chimica, inattivazione mediante calore e urea e separazione elettroforetica. I risultati ottenuti da queste procedure sono stati correlati con le attività della gamma-glutamil transpeptidasi eseguita su ciascun paziente. Abbiamo concluso da questo studio che la determinazione della gamma-glutamil transpeptidasi, insieme alle separazioni elettroforetiche della fosfatasi alcalina, sono procedure di laboratorio utili per identificare con precisione l'origine dell'elevata attività della fosfatasi alcalina.
Cambiamenti nell'attività extracellulare del potassio in risposta alla diminuzione del pH nel muscolo atriale di coniglio.Le attività extracellulari e intracellulari del potassio (K+) dell'atriale superfuso isolato di coniglio muscolare sono stati misurati utilizzando microelettrodi scambiatori di ioni liquidi sensibili al K. Quando il pH del mezzo di balneazione è diminuito da 7,5 a 6,8, l'attività intracellulare di K+ è diminuita e l'attività extracellulare di K+ è aumentata da un livello di controllo medio di 3,6 mM a un nuovo livello di stato stazionario di 3,9 mM dopo 1 ora. Quando il pH è stato ulteriormente ridotto a 6,1, l'attività extracellulare del K+ è aumentata fino a una media di 4,9 mM. Dopo la variazione del pH, l'aumento dell'attività extracellulare del K+ si è verificato in un periodo di 30-40 minuti, momento in cui un valore stabile è stato raggiunto e mantenuto per l'ora successiva. Al ritorno al pH normale, l'attività extracellulare del K+ è tornata sotto controllo con una costante di tempo di 20 minuti o meno. Le misurazioni dell'attività intracellulare del K+ nell'arco di 1 ora hanno mostrato una media perdita di 3 mM a pH 6,8 e una perdita media di 8 mM a pH 6,1. La perdita era reversibile entro 20 minuti dal ritorno al controllo del pH. L'aumento dell'attività del K+ extracellulare è stato accompagnato da una diminuzione del potenziale di membrana a riposo, nonché da diminuzioni del dv/dt massimo e dall'overshoot del potenziale d'azione. Il profilo del potenziale d'azione ha subito complessi cambiamenti consistenti in una diminuzione del plateau e un prolungamento del tempo fino alla completa ripolarizzazione.