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Il legame dei lantanidi fluorescenti alle membrane mitocondriali del fegato di ratto e alle proteine che legano gli ioni calcio.(1) Il legame di Tb3+ alle membrane mitocondriali può essere monitorato mediante potenziamento fluorescenza ionica a 545 nm con eccitazione a 285 nm A basse concentrazioni proteiche (inferiori a 30 mug/ml) non si osservano effetti del filtro interno (2) Questo legame è localizzato sulla superficie esterna della membrana interna e non è influenzato dagli inibitori della respirazione o della fosforilazione ossidativa (3) Una proteina legante Ca2+ solubile isolata secondo Lehninger, AL ((1971) Biochem. Biophys. Res. Commun. 42, 312-317) lega anche Tb3+ con una fluorescenza ionica potenziata all'eccitazione a 285 nm Lo spettro di eccitazione della proteina isolata e dei mitocondri intatti sono indicativi di un amminoacido aromatico nel sito di legame del catione (4) Un'ulteriore caratterizzazione dell'interazione Tb3+-proteina ha rivelato che esiste più di un sito di legame per molecola proteica e Quello questi siti sono raggruppati (meno di 20 A). Il trattamento con neuraminidasi o l'estrazione con solvente organico della proteina non ha influenzato il legame Tb3+ fluorescente. (5) Studi di dipendenza dal pH del legame di Tb3+ alla proteina isolata o ai mitocondri intatti hanno dimostrato l'importanza di un gruppo ionizzabile di pK maggiore di 6. A pH inferiore a 7,5 la quantità di Tb3+ legata alla proteina isolata diminuiva con l'aumento del pH come monitorato dalla fluorescenza Tb3+. Con i mitocondri intatti si è verificato il contrario con un grande aumento della fluorescenza di Tb3+ a pH più elevati. Questo aumento non è stato osservato quando i mitocondri sono stati preincubati con antimicina A e rotenone.
Proteine ferro-zolfo del batterio fotosintetico verde Chlorobium.Le proteine ferro-zolfo del batterio fotosintetico verde Chlorobium sono state caratterizzate da ossidoriduzione potenziometria in combinazione con spettroscopia di risonanza paramagnetica elettronica a bassa temperatura. La clorobio ferredossina era l'unica proteina ferro-zolfo rilevata nella frazione solubile; non è stata osservata alcuna proteina ferro-zolfo ad alto potenziale. Inoltre, la proteina ferro-zolfo ad alto potenziale non era rilevate nei cromatofori. Sono state rilevate quattro proteine ferro-zolfo legate ai cromatofori. Una è la proteina ferro-zolfo di tipo "Rieske" con un valore g di 1,90 allo stato ridotto; la proteina ha un potenziale di punto medio di + 160 mV (pH 7,0) e questo potenziale dipende dal pH. Sono state osservate tre proteine ferro-zolfo legate al cromatoforo, con potenziali del punto medio di -25, -175 e circa -550 mV. Un possibile ruolo per il quest'ultima proteina ferro-zolfo nel primario viene considerata la reazione fotochimica nel clorobio.
dipendenza dal pH del potenziale di ossidoriduzione del citocromo c2.La dipendenza dal pH degli spettri e del potenziale di ossidoriduzione di tre citocromi c2 , da Rhodopseudomonas capsulata, Rhodopseudomonas sphaeroides e Rhodomicrobium vannielii, è stato osservato un singolo pK alcalino per i cambiamenti spettrali in tutti e tre i ferricitocromi. Nel citocromo c2 di Rps capsulata questo pK spettroscopico corrisponde al pK osservato nella dipendenza dell'ossidazione-riduzione potenziale sul pH. Per gli altri due citocromi il potenziale di ossidoriduzione ha mostrato una complessa dipendenza dal pH che può essere adattata a curve teoriche che coinvolgono tre ionizzazioni. La terza ionizzazione corrisponde alla ionizzazione osservata negli studi spettroscopici ma le prime due si verificano senza variazioni negli spettri visibili. Vengono discusse le possibili basi strutturali per queste ionizzazioni.
Eterogeneità funzionale e proprietà di dissociazione dipendenti dal pH della transferrina umana.La transferrina diferrica umana è stata parzialmente marcata con 59Fe a pH basso o neutro (marcato chimicamente) e sostituendo il ferro diferrico precedentemente donato ai reticolociti di coniglio (marcato biologicamente). Gli esperimenti di assorbimento del 59Fe dei reticolociti con preparati marcati chimicamente hanno indicato che il ferro legato a pH quasi neutro era più facilmente incorporato dai reticolociti rispetto al ferro legato a pH basso. studi di dissociazione di soluzioni di transferrina etichettate biologicamente hanno indicato che Fe3+, legato al sito da cui il metallo è stato inizialmente utilizzato dalle cellule, si è dissociato tra pH 5,8 e 7,4. Al contrario, era necessario un pH più basso (5,2--5,8) per effettuare la dissociazione di ferro che è rimasto legato alla proteina dopo l'incubazione con i reticolociti Questi risultati suggeriscono che ogni sito di legame del ferro della transferrina umana ha diversi legami di ferro acido-base ng che potrebbero essere correlate alle proprietà di donazione del ferro dei reticolociti di coniglio osservate della transferrina umana e identifica che il sito di legame del ferro vicino alla neutralità inizialmente cede il suo ferro a queste cellule.
L'interazione tra vitamina B-12 e micelle in soluzione acquosa.Il pK apparente per lo spostamento del benzimidazolo di un certo numero di cobalamine è marcatamente influenzato dal presenza di micelle di sodio laurilsolfato. Tuttavia, le micelle di bromuro di cetiltrimetilammonio o Triton X hanno poco o nessun effetto sul pK. Misurando il pK apparente in funzione della concentrazione di sodio laurilsolfato, le costanti di associazione tra le micelle e sia la base che base off metilcobalamina sono stati calcolati. Questo calcolo indica che la forma base off è fortemente associata alla micella mentre la forma base off non lo è.
Resistenza all'ametopterina di Pediococcus cerevisiae in conseguenza di cambiamenti nell'attività enzimatica e nella permeabilità cellulare. II. Cambiamenti di permeabilità all'ametottero e ad altri folati nel mutante resistente ai farmaci.", l'accumulo di ametotterina in un ceppo di Pediococcus cerevisiae resistente a questo analogo era circa il 30% di quello in P. cerevisiae/PteGlu, il genitore sensibile. L'assorbimento nel ceppo resistente era strettamente dipendente dal glucosio, mentre nel ceppo sensibile genitore circa il 16% di accumulo si è verificato in assenza di glucosio. Il trasporto in entrambi i ceppi è stato inibito da iodoacetato e KF. L'assorbimento di ametopterina ha mostrato una cinetica di saturazione con un Km apparente di 5 muM in P. cerevisiae/AMr e 0,5 muM in P. cerevisiae/PteGlu Il V apparente era di 0,2 nmol al minuto per mg di cellule (peso secco); lo stesso per entrambi i ceppi. Il pH ottimale per l'assorbimento di ametotterina da parte di P. cerevisiae/AMr e P. cerevisiae/PteGlu era di pH 6,0. Folato e metiltetraidrofolato La competitività ha inibito l'assorbimento di ametotterina con valori Ki apparenti di 8 e 0,7 muM, rispettivamente. L'assorbimento del folato ha mostrato un valore di Km leggermente aumentato rispetto a quello del ceppo sensibile, mentre la velocità dell'attività di assorbimento era nello stesso intervallo. Il metiltetraidrofolato ha accumulato una concentrazione intracellulare fino a circa 60 volte superiore a quella del mezzo, che è un accumulo notevolmente inferiore rispetto a quello nel ceppo sensibile. L'assorbimento era glucosio dipendente e inibito da iodoacetato e KF. Il pH ottimale per l'assorbimento del metiltetraidrofolato nel ceppo resistente era lo stesso di quello nel genitore sensibile (pH 5,7--6). Contrariamente all'aumento del valore Km apparente dell'ametotterina nel ceppo resistente, l'affinità del trasportatore per il metiltetraidrofolato era apparentemente invariata, mentre il valore di V era circa 16 volte inferiore a quello del ceppo sensibile. Il Ki per l'ametotterina quando aggiunto a concentrazioni crescenti di metiltetraidrofolato era di 5,2 muM, un valore all'incirca uguale a quello del Km.
Resistenza di Pediococcus cerevisiae all'ametopterina come conseguenza di cambiamenti nell'attività enzimatica e nella permeabilità cellulare. I. Diidrofolato reduttasi, timidilato sintetasi e formiltetraidrofolato sintetasi in ceppi resistenti e sensibili all'ametotterina of Pediococcus cerevisiae.Pediococcus cerevisiae/AMr, resistente all'ametopterina, possiede una maggiore attività di diidrofolato reduttasi (5, 6, 7, 8-tetraidrofolato: NADP+ ossidoriduttasi, EC 1.5.1.3) rispetto al genitore, a ceppo permeabile ai folati e quindi sensibile all'ametopterina e rispetto al wild-type. Le proprietà della diidrofolato reduttasi dei tre ceppi sono state confrontate. La temperatura, il pH ottimale, la stabilità al calore, così come il legame con l'ametotterina non hanno rivelato differenze significative tra gli enzimi di i ceppi sensibili e resistenti. L'enzima del wild-type era 10 volte più sensibile all'inibizione da parte dell'ametopterina e più suscettibile alla denaturazione termica. I valori di Km per il diidrofolato negli enzimi dei tre ceppi erano nell'intervallo 4,8-7,2 muM e per NADPH 6,5-8,0 muM. Il ceppo resistente all'ametotterina ha mostrato resistenza crociata al trimetoprim ed era circa 40 volte più resistente a quest'ultimo rispetto al genitore sensibile e al tipo selvatico. La resistenza al trimetoprim sembra essere un risultato diretto dell'aumentata attività della diidrofolato reduttasi. L'inibizione dell'attività della diidrofolato reduttasi da parte di questo farmaco è risultata simile nei tre ceppi. 10--20 nmol ha causato l'inibizione del 50% di 0,02 unità enzimatiche. Il trimetoprim era circa 10.000 volte meno efficace dell'inibitore della diidrofolato reduttasi rispetto all'ametotterina. L'estratto cellulare del ceppo AMr possedeva un'attività folato reduttasi tre volte superiore a quella del ceppo sensibile. Le attività di altri enzimi correlati ai folati come timidilato sintetasi e 10-formiltetraidrofolato sintetasi (formato: tetraidrofolato ligasi (formante ADP), EC 6.3.4.3) erano simili nei tre ceppi studiati.
Regolazione della sintesi della 6-idrossi-2,4,5-triaminopirimidina da parte di riboflavina e ferro in mutanti carenti di riboflavina del lievito Pichia guilliermondii.Il L'effetto della riboflavina e del ferro sulla velocità di sintesi della 6-idrossi-2,4,5-triaminopirimidina è stato studiato nelle colture del lievito Pichia guilliermondii (mutanti rib2) con la seconda reazione bloccata alla flavinogenesi È stato dimostrato che la riboflavina inibisce la 6- velocità di sintesi dell'idrossi-2,4,5-triaminopirimidina in cellule ricche e carenti di ferro di mutanti con basso fabbisogno di riboflavina La cicloesimide non ha impedito la stimolazione della sintesi di 6-idrossi-2,4,5-triaminopirimidina causata dalla carenza di riboflavina La 7-metil-8-trifluorometil-10-(1\'-D-ribitil)isoallossazina ha fortemente inibito la sintesi della 6-idrossi-2,4,5-triaminopirimidina, mentre la 7-metil-8-trifluoro-metil-10- (beta-idrossietil)izoallossazina e galattoflavina esercitato solo un leggero effetto su questo processo. Il 6-idrossi-2,4,5-triami il tasso di sintesi della nopirimidina nelle cellule carenti di ferro era significativamente più alto rispetto alle cellule ricche di ferro. Il trattamento con 2,2\'-dipiridile delle cellule ricche di ferro ha causato la stimolazione della sintesi della 6-idrossi-2,4,5-triaminopirimidina e la cicloesimide ha abolito questo effetto. I risultati suggeriscono che l'attività del primo enzima della flavinogenesi (cicloidrolasi guanilica) è sotto il controllo dell'inibizione del feedback da parte delle flavine e la biosintesi di questo enzima è regolata dal ferro.
Biosintesi del mannano di lievito. Diversità delle mannosiltransferasi nel sistema enzimatico di sintesi del mannano dal lievito.1. Preparato enzimatico microsomiale dal lievito Saccharomyces cerevisiae catalizza il trasferimento di unità mannosile dal PILmannosio al mannosio e un certo numero di oligosaccaridi e glicosidi contenenti mannosio per cui si formano diversi legami glicosidici 2. Dei composti testati oltre al mannosio, solo quelli contenenti un'unità mannosile alfa-legata nella posizione non riducente di la loro molecola era efficace come accettori. I monodesossianaloghi del mannosio così come i fosfati alfa-mannosio non servivano come accettori nella reazione di cui sopra 3. La struttura del prodotto formato con il mannosio come accettore è stata determinata essere O-alfa-D-mannosile -(1 porta a 2)-mannosio; con alphaMan (1 porta a 6)mannosio come accettore, il prodotto era alphaMan(1 porta a 6)mannosio e con alphaMan-(1 porta a 2)mannosio il prodotto era provvisoriamente carattere erizzato come una miscela di alphaMan-(1 porta a 3)alphaMan(1 porta a 2)mannosio e alphaMan(1 porta a 2)alphaMan(1 porta a 2)mannosio. 4. Gli enzimi che catalizzano la formazione di diversi tipi di legami glicosidici differivano nella loro specificità accettore, curve di attività pH e velocità di denaturazione termica. 5. I disaccaridi radioattivi non sono stati in grado di entrare nella molecola proteica del mannano nel sistema privo di cellule mentre il mannosio radioattivo libero si è incorporato nel polisaccaride in misura minore nelle stesse condizioni.
Sintesi enzimatica di 2-O-alpha-D-mannopyranosyl-methyl-alpha-D-mannopyranoside da parte di un sistema particolato privo di cellule di Mycobacterium smegmatis.Un preparato enzimatico particolato privo di cellule di Mycobacterium smegmatis ATCC 607 ha catalizzato il trasferimento di mannosio marcato dal mannosio PIL[14C] al metil-alfa-D-mannopiranoside (un accettore aggiunto esogenamente) per formare un prodotto caratterizzato da 2 -O-alfa-D[14C]mannopiranosil-metil-alfa-D-mannopiranoside. Questa attività transmannosilasica era specifica sia per il donatore di nucleotidi dello zucchero che per l'accettore di metil monosaccaride. La reazione era stimolata dall'aggiunta di vari ioni metallici e aveva un pH ottimale di 6.0. Il Km apparente di questa reazione transmannosilasica per il metil-alfa-D-mannopiranoside era di 35 mM. La possibile relazione tra questo sistema "artificiale" di trasferimento del mannosile e il sistema "naturale" che porta alla formazione degli oligomannosidi e delle glicoproteine è discusso.
Trasporto e utilizzo dell'acido shikimico intermedio biosintetico in Escherichia coli.Mutanti auxotrofi di Escherichia coli W o K12 bloccati prima dell'acido shikimico nel biosintetico aromatico percorso è cresciuto male sull'acido shikimico come unico integratore aromatico. Questa scarsa risposta di crescita è stata correlata con una capacità relativamente scarsa di trasportare l'acido shikimico. Se il citrato era presente nel mezzo di crescita (come è in alcuni mezzi basali comunemente usati) la crescita di alcuni dei mutanti di E. coli K12 su shikimato è stato ulteriormente ridotto. I mutanti sono stati derivati da auxotrofi pre-shikimato che sono cresciuti rapidamente su terreni contenenti acido shikimico. Questi derivati avevano tutti una maggiore capacità di trasportare l'acido shikimico. Pertanto, si propone che la crescita sullo shikimato osservato nelle cellule madri è limitato dal loro assorbimento relativamente scarso di shikimato dal mezzo e che questa restrizione può essere rimossa da una mutazione che aumenta il trasporto di shikimato. analisi di ansduzione delle mutazioni che hanno aumentato l'utilizzo e il trasporto dell'acido shikimico da parte dei ceppi di E. coli K12 hanno indicato almeno due classi. La classe 1 era circa il 20% cotrasdotta con la regione istidina del cromosoma E. coli K12 e sembrava coincidere con un noto locus di trasporto shikimate, shiA. La classe 2 non è stata cotrasdotta con la sua. Il locus (o loci) di questa classe è sconosciuto. Le misurazioni cinetiche hanno suggerito che entrambe le classi avevano sistemi di assorbimento dello shikimate derivati dal sistema wild-type. Due mutanti di classe 1 avevano livelli aumentati di trasporto di tipo selvatico altrimenti inalterato, mentre un mutante di classe 2 aveva una costante di Michaelis alterata (Km) per il trasporto di shikimate.
Località subcellulari della guanilato ciclasi e del nucleotide fosfodiesterasi 3\',5\'-ciclico negli spermatozoi di riccio di mare.Le localizzazioni subcellulari della guanilato ciclasi e Sono stati esaminati 3\',5\' nucleotide fosfodiesterasi ciclici nello sperma di riccio di mare. Sia le attività specifiche che quelle totali di questi due enzimi erano molto più elevate nei flagelli (code) degli spermatozoi rispetto alle teste. Oltre all'osservazione che la guanilato ciclasi nel flagello è stato legato al particolato e solubilizzato da Triton X-100, più dell'80% dell'attività della ciclasi nel flagello è stata trovata nella frazione di membrana plasmatica, mentre l'attività del nucleotide ciclico fosfodiesterasi è stata osservata sia nell'assonema che nella membrana plasmatica Le osservazioni hanno indicato che la ciclasi nei flagelli sembrava essere associata alla membrana plasmatica La fosfodiesterasi del nucleotide ciclico nella frazione di membrana plasmatica e la frazione assonemica idrolizzate sia GMP ciclico e AMP ciclico; tuttavia, i tassi di idrolisi per il GMP ciclico erano ovviamente superiori a quelli per l'AMP ciclico. Sono state anche brevemente descritte le proprietà enzimatiche della guanilato ciclasi e del nucleotide ciclico fosfodiesterasi nei flagelli spermatici.
Effetto del Ca2+, del rosso rutenio e dell'invecchiamento sulla produzione di pregnenolone da parte delle frazioni mitocondriali di testicoli di ratto normali e trattati con ormone luteinizzante.L'effetto del Ca2+ in vitro sui tassi di produzione di pregnenolone in varie condizioni di incubazione da parte di frazioni mitocondriali isolate da testicoli di ratti normali e di ratti dopo trattamento in vivo con ormone luteinizzante è stato studiato Concentrazioni di Ca2+ nell'intervallo di 0,1-0,5 mM succinato stimolato produzione di pregnenolone supportata nelle frazioni mitocondriali Quando le frazioni mitocondriali sono state isolate in 0,25 M di saccarosio senza aggiunte, il Ca2+ in vitro ha aumentato i tassi di produzione di pregnenolone supportato dal succinato nelle frazioni mitocondriali isolate dai testicoli di controllo in misura maggiore rispetto alle frazioni mitocondriali, dall'ormone luteinizzante trattato testicoli Velocità di produzione nella frazione mitocondriale di controllo, incubata in prese Una volta che le concentrazioni iniziali di Ca2+ di 0,7 mM e superiori erano quasi simili ai tassi di produzione nei relativi mitocondri trattati con ormone luteinizzante.
La distribuzione subcellulare e la caratterizzazione parziale delle attività della colinesterasi delle piastrine canine.Sono state studiate le attività multiple della colinesterasi nelle piastrine canine. Le piastrine sono state omogeneizzate mediante rapida decompressione sotto azoto, tubo di vetro/pestello in teflon e tecniche di lisi del glicerolo. La tecnica di decompressione rapida sotto azoto è risultata essere il metodo più efficiente e delicato per la distruzione cellulare. Gli omogenati sono stati subfrazionati utilizzando gradienti di densità di diatrizoato di sodio. Saggi di marker enzimatici ed esperimenti di etichettatura a impulsi con 5-idrossi[14C] triptamina e [125I] trombina su frazioni subcellulari preparate ha confermato che le frazioni solubili, della membrana plasmatica e del granulo-1 erano tutte in forma ragionevolmente pura. Inoltre, la marcatura della membrana plasmatica con [125I] trombina è citato come il primo tentativo riuscito di ottenere un marcatore significativamente legato per questa struttura. Le distribuzioni dell'attività della colinesterasi misurano urato in queste frazioni indicava che circa il 30% dell'attività era presente nella membrana plasmatica, il 50% nel granulo-1 e il 5% nelle frazioni solubili. I dati cinetici delle attività della colinesterasi ottenuti da piastrine intatte, preparazioni di membrane plasmatiche e surnatanti a rilascio di piastrine hanno indicato che sono sorprendentemente simili.
Analisi stereochimica della reazione di eliminazione catalizzata dalla D-amminoacido ossidasi.La stereochimica del trasferimento protonico intramolecolare catalizzato dal flavoenzima, D- amminoacido ossidasi, durante la reazione di eliminazione di substrati di beta-cloro-alfa-amminoacido (Walsh et al. (1973), J. Biol. Chem. 248, 1964). Sia D-eritro- che D- Il butirrato di treo-2-ammino-3-cloro(2-3H) ha mostrato di produrre prevalentemente (3R)-2-cheto (3-3H)-2-butirrato Effetti dell'isotopo cinetico del trizio sulla velocità della reazione (4.7 per il D-eritro e 3,8 per il D-treo) e le percentuali di trasferimento intramolecolare del tritone (7,2% per il D-eritro- e 2,6% per il D-treo) sono state misurate Le loro implicazioni sul meccanismo di questa insolita reazione di eliminazione viene discussa.
La dipendenza dal pH della conformazione dei peptidi dell'angiotensina mediante risonanza magnetica nucleare: isomeria cis-trans della prolina 7.La dipendenza dal pH del protone NMR spettro di [Asn1, Val5] angiotensina II in soluzione acquosa mostra l'esistenza di una conformazione maggiore e una minore sopra pH 6.5, la conformazione minore rappresenta il 12 +/- 2% del peptide totale. Un'osservazione simile è stata fatta per (Asn1 , Val5) angiotensina I e Val-Tyr-Val-His-Pro-Phe. Questo effetto non è dovuto alla presenza di impurezze simili all'angiotensina nei campioni di peptidi. Abbiamo mostrato due impurezze attese, [beta-Asp1, Val5] angiotensina II e [Asn1, 3-Bzl-Ty4, Val5] - angiotensina II, assente, e una terza impurezza [Asn1, Val5, D-His6] angiostensina II, presente in misura minore o uguale a 2,1 moli% , troppo poco per tenere conto della quantità osservata (12 +/- 2%) di conformazione minore. Lo spettro del carbonio-13 dell'esapeptide ad alto pH mostra che la conformazione maggiore ha Pro7 nella forma trans e la conformazione minore ha Pro7 nella forma cis.
Assegnazioni complete di tirosina nello spettro di risonanza magnetica nucleare 1H ad alto campo dell'inibitore della tripsina pancreatica bovina selettivamente ridotto e carbossammidometilato alla cistina 14-38.Il porzioni a basso campo degli spettri di risonanza magnetica nucleare 1H a 250 MHz dell'inibitore della tripsina pancreatica basica nativa e chimicamente modificata sono state studiate in funzione del pH nell'intervallo pH 5-13 In derivati selettivamente ridotti e carbossammidometilati alla cistina 14-38 , le risonanze associate a 15 dei 16 protoni degli anelli aromatici delle quattro tirosine dell'inibitore sono state localizzate e assegnate a specifici residui di tirosile. Titolazioni di pH hanno prodotto pK\'s per le tirosine 10, 21, 23 e 35 nel modificato inibitore rispettivamente di 9.9, 10.6, 11.6 e 11.0 Risonanze associate ai tre protoni nitrotirosina 10 del derivato mononitrato e ai sei protoni nitrotirosina 10 e 21 del derivato dinitrato sono state sim ilarly localizzato, assegnato e titolato, producendo pK\'s per le nitrotirosine 10 e 21 di 6.5 e 6.4, rispettivamente. I risultati precedentemente riportati per i derivati con cistina 14-38 intatta sono stati rivisti sulla base di nuovi dati. Il confronto di questi risultati rivisti con i nuovi dati per i derivati con cistina modificata 14-38 non rivela cambiamenti nei pK\' per qualsiasi tirosina o anello nitrotirosante e nessun cambiamento nello spostamento chimico per le risonanze della nitrotirosina 21 o delle tirosine 21 e 23. Tuttavia, la modifica della cistina 14-38 provoca cambiamenti significativi negli spostamenti chimici delle risonanze dei vicini anelli di nitrotirosina 10 e tirosina 10 e 35. La tirosina 35 rimane relativamente immobile, ruotando meno di 1600 volte/s a 25 gradi C per pH\'s nell'intervallo 5-13.
Risonanza magnetica nucleare carbonio-13 di eme carbonili. Citocromo c e derivati carbossimetilici del citocromo c.Complessi carbonilici del citocromo c di cavallo e vari derivati carbossimetilati sono stati esaminati utilizzando la spettroscopia 13C NMR (risonanza magnetica nucleare del carbonio 13. La molteplicità e lo spostamento chimico della risonanza 13CO sono risultati essere funzioni del pH e dell'entità dell'alchilazione. Sono state effettuate correlazioni tra le caratteristiche principali della titolazione dello spostamento chimico curve e cambiamenti nell'ambiente dell'eme. È stato suggerito un modello semplice compatibile con la maggior parte delle osservazioni precedenti per spiegare i numerosi picchi di risonanza carbonilica e il comportamento complesso dello spostamento chimico con i cambiamenti di pH.
Una nuova fosfodiesterasi da cellule di tabacco in coltura.Una nuova fosfodiesterasi è stata purificata da cellule di tabacco in coltura ad uno stato che appariva omogeneo all'elettroforesi su gel di poliacrilammide. enzima idrolizzato vari legami fosfodiestere e pirofosfato, tra cui p-nitrofenil timidina 5\'-fosfato, p-nitrofenil timidina 3\'-fosfato, nucleotidi ciclici, ATP, NAD+, pirofosfato inorganico, dinucleotidi e poli(adenosina difosfato ribosio), che è un polimero sintetizzato da NAD+. Tuttavia, non idrolizza polinucleotidi altamente polimerizzati. Il peso molecolare dell'enzima nativo è stato stimato tra 270 000 e 280 000 mediante filtrazione su gel su Sephadex G-200 e Bio-Gel A-5m. L'elettroforesi su gel di solfato-poliacrilammide indicava che l'enzima era composto da subunità con pesi molecolari calcolati pari a 75 000. L'enzima non richiedeva cationi bivalenti per l'attività essendo completamente attivo in presenza e di acido etilendiamminotetraacetico. Il pH ottimale per l'enzima era di circa 6 con p-ni-trofenil timidina 5\'-fosfato o adenosina ciclico 3\',5\'monofosfato e 5,3 con NAD+. I doppi grafici reciproci della velocità iniziale contro la concentrazione di p-nitrofenil timidina 5\'-fosfato hanno fornito due valori Km apparenti di 0,17 e 1,3 mM, suggerendo la presenza di almeno due siti attivi.
Potenziale di membrana indotto dalla luce e gradiente di pH nelle vescicole dell'involucro di Halobacterium halobium.L'illuminazione delle vescicole dell'involucro preparate dalle cellule di Halobacterium halobium provoca la traslocazione di protoni dall'interno verso l'esterno, a causa del ciclo indotto dalla luce della batteriorodopsina. Questo processo si traduce in un gradiente di pH attraverso le membrane, un potenziale elettrico e i movimenti di K+ e Na+. Il potenziale elettrico è stato stimato seguendo la fluorescenza di un colorante cianina, 3,3\'-dipentyloxadicarbocyanine. L'illuminazione delle vescicole di H. halobium ha determinato una diminuzione rapida e reversibile della fluorescenza del colorante, fino al 35%. Questo effetto non è stato osservato nelle chiazze non vescicolari della membrana viola. Osservazione della massima diminuzione della fluorescenza dopo l'illuminazione delle vescicole è stato richiesto un rapporto ottimale colorante/proteina di membrana. Il pH ottimale per la diminuzione della fluorescenza indotta dalla luce era 6,0. La diminuzione era lineare con l'intensità della luce attinica fino a circa 4 X 10(5) erg cn-2 s-1. La valinomicina, la gramicidina e lo ione trifenilmetilfosfonio hanno abolito tutti i cambiamenti di fluorescenza. Tuttavia, il cambiamento di pH indotto dalla luce è stato potenziato da questi agenti. Al contrario, le vescicole tamponate non hanno mostrato variazioni di pH, ma hanno fornito variazioni di fluorescenza uguali o maggiori. Pertanto, abbiamo identificato la diminuzione della fluorescenza con un potenziale di membrana indotto dalla luce, all'interno negativo. Utilizzando i potenziali di membrana indotti dalla valinomicina-K+, abbiamo calibrato la diminuzione della fluorescenza con i potenziali di diffusione di Nernst calcolati. Abbiamo trovato una dipendenza lineare tra potenziale e diminuzione della fluorescenza di 3 mV/%, fino a 90 mV. Quando le vescicole dell'involucro sono state illuminate, la forza protonica totale generata dipendeva dalla presenza di Na+ e K+ e dai loro gradienti di concentrazione attraverso la membrana. In generale, il K+ sembrava essere più permeabile del Na+ e, quindi, consentiva lo sviluppo di gradienti di pH maggiori e potenziali elettrici inferiori. Calcolando la forza protonica totale dalla somma del pH e dei termini potenziali, abbiamo scoperto che le vescicole possono produrre forze protoniche vicine a 200 mV.
Localizzazione dell'inibizione da parte dell'adenosina difosfato dell'evoluzione dell'ossigeno dipendente dal fosfoglicerato in un sistema di cloroplasti ricostituiti.È stato dimostrato che l'ADP inibisce l'evoluzione dell'O2 dipendente dal fosfoglicerato in un sistema semplificato di cloroplasti ricostituiti contenente 3-fosfoglicerato chinasi e trioso fosfato deidrogenasi. I tassi di evoluzione dell'O2 nel sistema semplificato sono paragonabili a quelli ottenuti utilizzando la proteina stromale anziché gli enzimi purificati. L'ADP non inibisce l'evoluzione dell'O2 con glicerato 1,3-bifosfato come substrato né inibisce la trioso fosfato deidrogenasi. L'effetto inibitorio dell'ADP è attribuito ad un aumento della velocità di conversione del glicerato bifosfato in fosfoglicerato. I risultati sono discussi in termini di controllo da parte dell'ADP dell'evoluzione dell'ossigeno dipendente dal fosfoglicerato.
Fosforilazione proteica in sezioni respiranti di corteccia cerebrale di cavia. Evidenza di un ruolo della noradrenalina e dell'adenosina 3\':5\'-monofosfato ciclico nell'aumentata fosforilazione osservata su applicazione di impulsi elettrici.1. L'esposizione di fette di corteccia cerebrale da cavie a impulsi elettrici per 10 secondi o a noradrenalina, 5-idrossitriptamina o istamina aumenta il tasso di fosforilazione di proteine non identificate nel tessuto; il gli aumenti della fosforilazione delle proteine dovuti agli impulsi elettrici e alla noradrenalina non erano additivi, mentre gli aumenti dovuti agli impulsi e alla 5-idrossitriptamina o all'istamina erano additivi 2. Gli effetti stimolanti degli impulsi elettrici e della noradrenalina sulla fosforilazione delle proteine erano antagonizzati dai beta-adrenergici agenti bloccanti L-propranololo, dicloroisoprenalina, practolol e ICI 66082, ma non dagli agenti bloccanti alfa-adrenergici, fentolamina e fenossibenzamina 3. L'aumento nella fosforilazione proteica associata a impulsi elettrici è stata antagonizzata da 10 mum-trifluoperazine e 0,5 mum-prostaglandine E1. 4. Si ipotizza che nelle condizioni sperimentali utilizzate l'azione degli impulsi elettrici sulla fosforilazione delle proteine sia mediata dalla noradrenalina che agisce attraverso un meccanismo del recettore beta-adrenergico che probabilmente coinvolge l'adenilato ciclasi.
La biosintesi dei lipidi in fette di fegato di cavia fetale.La sintesi dei lipidi misurata mediante l'incorporazione di acetato o 3H2O in fette di fegato fetale, è molto più alto che nelle fette di fegato adulto e mostra un picco a circa due terzi della gestazione. In questo momento la sintesi dal glucosio era bassa e ha raggiunto un picco 10 giorni dopo. I cambiamenti nell'attività dell'ATP citrato liasi, che rispecchiava l'acetato l'incorporazione e l'effetto del glucosio e del piruvato sulla corporazione dell'acetato nei lipidi suggerisce che parte della sintesi dei lipidi avviene tramite la produzione intramitocondriale di acetil-CoA dall'acetato. Nonostante ciò, la sintesi dei lipidi non è stata inibita dal (-)-idrossicitrato. Il basso tasso di la sintesi dal glucosio a due terzi della gestazione è attribuita alla bassa attività della piruvato carbossilasi in questo momento e viene proposto un ruolo per una fosfoenolpiruvato carbossichinasi nel fornire ossalacetato per la lipogenesi. d'accordo con i cambiamenti nella sintesi dei lipidi, mentre l'attività dell'acetil-CoA carbossilasi era appena sufficiente per spiegare i tassi di sintesi dei lipidi in vivo. È probabile che l'acetato e gli acidi grassi a catena corta siano i principali precursori per la sintesi dei lipidi in vivo.
Sedimentazione a gradiente di densità in sol di silice. Spostamenti anomali nelle densità delle bande delle perle di "lattice" di polistirene.Quando il "lattice\ di polistirene\ " le sfere vengono centrifugate all'equilibrio in gradienti di Nalcoag 1030, Nalcoag 1034A e Ludox 130M, che sono formulazioni commerciali di silice colloidale, le sfere a densità che possono essere notevolmente inferiori o superiori alla densità apparente. Aggiunta al gradiente di piccole quantità di alcuni polimeri ripristinano le densità di banda verso il valore atteso. Questi risultati imitano da vicino i "spostamenti di densità" delle particelle biologiche osservati in precedenza. Viene discusso un possibile modello per questo comportamento anomalo.
Purificazione e alcune proprietà dell'acetil-coenzima A carbossilasi dalla ghiandola mammaria di coniglio.1. L'acetil-Coa carbossilasi dalla ghiandola mammaria di coniglio in allattamento è stata purificata all'omogeneità mediante il criterio dell'elettroforesi su gel di poliacrilammide in presenza di sodio dodecilsolfato 2. L'uso di tampone fosfato durante la purificazione ha dato un basso recupero di enzima Di conseguenza, nell'estrazione e in fasi selezionate della procedura di purificazione sono stati utilizzati tamponi Tris 3. L'enzima purificato aveva un'attività specifica di 5,15 +/- 0,3 mumol di bicarbonato incorporato/min per mg di proteina (media +/- SEM di cinque preparati), che rappresenta una purificazione di 257 +/- 16 volte e una resa di 4,3 +/- 0,13% 4. I parametri cinetici dell'enzima purificato erano simili a quelli riportati per l'enzima da altre fonti tissutali 5. L'enzima è stato dosato mediante un saggio spettrofotometrico e da un [14C]bicarbonato- test di fissazione. Incubazione breve sono stati utilizzati in il test radiochimico per evitare una perdita sostanziale di [14C]bicarbonato.
Stima delle costanti di dissociazione dei complessi enzima-substrato da misurazioni allo stato stazionario. Interpretazione dell'indipendenza dal pH di Km.Se la costante di Michaelis di una reazione enzimatica catalizzata è indipendente dal pH in condizioni in cui la costante catalitica varia con il pH, è uguale alla costante di dissociazione termodinamica del complesso enzima-substrato. Questo è vero per meccanismi realistici in cui le fasi di legame e catalitiche sono chiaramente distinte , così come per i meccanismi più semplici che sono stati considerati in precedenza. È anche vero per un meccanismo in cui un profilo di pH a campana per la costante catalitica risulta da un cambiamento del passo limitante con il pH. Il tempo di rilassamento per la ionizzazione di un gruppo tipico in soluzioni non tamponate a 25 gradi C è dell'ordine di 0,1 ms al massimo, ed è molto più breve nelle soluzioni tamponate. Quindi le ionizzazioni in quasi tutti i meccanismi enzimatici possono essere correttamente trattate come equilibri , a condizione che la ionizzazione non sia accompagnata da un lento e obbligato cambiamento di conformazione.
Purificazione e proprietà dell'arilsolfatasi B del fegato umano.1. Viene descritto uno schema di purificazione per un'arilsulfatasi B dal fegato umano. La specificità della purificazione è stata ottenuto mediante l'uso della cromatografia di affinità su un derivato di agrosio-4-idrossi-2-nitrofenil solfato. Lo schema fornisce un metodo rapido e conveniente per la preparazione di un enzima altamente purificato. 2. L'enzima purificato è stato esaminato mediante elettroforesi di focalizzazione isoelettrica su gel di poliacrilammide e per ultracentrifugazione ed è risultato cataliticamente omogeneo, con un peso molecolare apparente di 50000 e un'attività specifica di 93,3 unità/mg di proteina 3. Le proprietà cinetiche del preparato purificato e l'effetto di vari gruppi di amminoacidi- vengono descritti reagenti specifici sulla catalisi dell'enzima Viene suggerito il coinvolgimento di residui di istidina nel sito attivo dell'enzima 4. L'enzima purificato perde rapidamente attività al congelamento. ione di questa osservazione è discusso in termini di un possibile fenomeno di dissociazione-riaggregazione indotto dal trattamento a freddo.
Specificità del substrato e modificazioni del centro attivo delle proteinasi neutre simili all'elastasi da leucociti del sangue di cavallo.Due proteinasi (2A e 2B) purificate dal frazione granulare dei leucociti del sangue di cavallo degradano la caseina (valori Km 12,8 e 6 mg/ml rispettivamente) con attività massima a pH 7,4 e in presenza di 2 m-urea vengono digeriti emoglobina denaturata con urea, fibrinogeno, albumina ed elastina colorata con resorcina/fucsina Gli enzimi idrolizzano substrati sintetici di elastasi, N-benzilossicarbonil-L-alanina 4-nitrofenil estere (Km 0,114 e 0,178 mM) e N-acetil-tri-L-alanina metil estere (Km 5,55 e 0,98 mM) , ma non idrolizzano substrati sintetici di tripsina, chimotripsina e trombina. Le proteinasi esaminate sono completamente inibite dal 2 mM-di-isopropil fosfofluoridato e mostrano una sensibilità agli isocianati di butile e ottile simile a quella dell'elastasi pancreatica. la loro fotoinattivazione in la presenza di Rosa Bengala indica la presenza di istidina nel centro attivo. La proteinasi 2A è piuttosto insensibile alla iodurazione da parte di IC1 così come l'elastasi pancreatica, mentre la proteinasi 2B è totalmente inattivata dopo l'incorporazione di cinque atomi di iodio per molecola di enzima.
Isolamento e alcuni parametri molecolari di proteinasi normali simili all'elastasi da leucociti del sangue di cavallo.I granuli citoplasmatici sono stati isolati da leucociti polimorfonucleati del sangue di cavallo con il metodo dell'eparina ed estratte con 0,9% di NaCl mediante congelamento ripetuto. Le proteine solubili sono state separate su una colonna di Sephadex G-75 seguita da cromatografia su una colonna di CM-Sephadex con un gradiente di NaCl. Filtrazione su gel, centrifugazione in gradiente di densità, focalizzazione isoelettrica e 0,1% Per determinare i parametri molecolari delle proteinasi sono stati utilizzati sodio dodecil solfato/poliacrilammide-gel elettroforesi a pH 7,0 e a pH 4,5. Nell'estratto di granuli sono stati trovati tre enzimi che idrolizzano sia la caseina che l'N-benzilossicarbonil-L-alanina nitrofenil estere: proteinasi 1, mol 38000, pI5.3; proteinasi 2A, peso molecolare 24500, pI8.8; e proteinasi 2B, peso molecolare 20500, pI superiore a 10. Le ultime due proteinasi simili all'elastasi sono state purificate all'apparente omogeneità.
Acidi biliari di serpenti della sottofamiglia Viperinae e biosintesi degli acidi biliari C-23-idrossilati in frazioni omogenate epatiche della vipera, Vipera berus (Linn.).", 1. L'analisi dei sali biliari di quattro serpenti della sottofamiglia Viperinae ha mostrato che i loro acidi biliari consistevano principalmente di acidi biliari C-23-idrossilati. 2. Incubazioni di colato di sodio marcato con 14C (3 alfa, 7 alfa, 12 alfa-triidrossi-5 beta-colan-24-oato) e desossicolato (3 alfa, 12 alfa-diidrossi-5 beta-colano-24-oato) con omogenati di fegato di sommatore intero e frazionato sono stati effettuati in presenza di ossigeno molecolare e NADPH o un sistema che genera NADPH La formazione di acidi biliari C-23-idrossilati, vale a dire acido bitocolico (acido 3 alfa, 12 alfa, 23xi-triidrossi-5 beta-colan-24-oico) e 3 alfa, 7 alfa , acido 12 alfa, 23 xi-tetraidrossicolanico (3 alfa, 7 alfa, 12 alfa, 23 xi-tetraidrossi-5 beta-colan-24-oico), è stato osservato principalmente nella frazione microsomiale e in parte nella frazione mitocondriale. 3. Vengono discusse le vie biosintetiche degli acidi biliari C-23-idrossilati.
Studi cinetici sulla glucoamilasi dell'intestino tenue di coniglio.Le proprietà cinetiche di un complesso maltasi-glucoamilasi con un pH ottimale, purificato all'omogeneità dal vengono descritti i bordi a spazzola dell'intestino tenue di coniglio, che presenta un'ampia gamma di specificità di substrato, idrolizzando di- e poli-saccaridi con legami alfa-1,4 e alfa-1,6 I valori di Km e Vmax, dell'enzima per i vari substrati sono stati determinati l'amido e il maltosio sono stati i suoi migliori substrati Sono state studiate le cinetiche di idrolisi di due maltosaccaridi lineari sintetici, il maltotrioso e il maltopentasio Studi di incubazione con substrato misto hanno rivelato la presenza di almeno due siti interagenti sull'enzima , e i dati sono stati ulteriormente analizzati mediante l'uso di una serie di inibitori non substrati.
Studi di equilibrio e cinetica dell'aggregazione di porfirine in soluzione acquosa.Un'indagine sul comportamento di protoporfirina IX, deuteroporfirina IX, ematoporfirina IX e coproporfirina III in soluzione acquosa ha rivelato processi di aggregazione estesi e complessi. La protoporfirina sembra essere altamente aggregata in tutte le condizioni studiate. A concentrazioni inferiori a 4 μM, l'aggregazione di deutero-, emato- e coproporfirina è probabilmente limitata alla dimerizzazione. A circa 4 μM ciascuna di queste tre porfirine mostrano bruschi cambiamenti negli spettri coerenti con un processo di "micellizzazione" per formare grandi aggregati di dimensioni sconosciute. Questa concentrazione critica aumenta con l'aumento della temperatura e del pH, ma non è molto sensibile alla variazione della forza ionica. Studi cinetici a salto di temperatura sulla deuteroporfirina implicano anche un processo di dimerizzazione iniziale, le cui costanti di velocità sono paragonabili a quelle di varie porfirine sintetiche , seguito da un'ulteriore estesa aggregazione. La capacità di una particolare porfirina di dimerizzare sembra parallela a quella dei corrispondenti complessi di ferro(III) (ferriemi), sebbene si pensi che i ferriemi non mostrino ulteriore aggregazione in queste condizioni.
Gamma-glutamiltransferasi del rene di ratto. Saggio simultaneo delle reazioni di idrolisi e trasferimento con (glutammato-14C)glutatione.1. L'idrolisi e il trasferimento Le reazioni catalizzate dalla gamma-glutamiltransferasi (EC 2.3.2.2) del rene di ratto (EC 2.3.2.2) sono state studiate in vitro con substrati [U-14C] glutatione e metionina marcati con acido glutammico. meccanismo non sequenziale in cui un intermedio gamma-glutamil-enzima può reagire sia con l'acqua (idrolisi) che con la metionina (trasferimento gamma-glutamil) 2. La costante di Michaelis per il glutatione in idrolisi era 13,9 +/- 1,4 mum, per il glutatione nel trasferimento era 113 +/- 15 muM e per la metionina come substrato era 4,7 +/- 0,7 mM. A concentrazioni di substrato negli intervalli delle rispettive costanti di Michaelis, la velocità di trasferimento era circa dieci volte superiore a quella dell'idrolisi, ma a concentrazioni di metionina avvicinandosi a quello fisiologico (64 muM nel plasma di ratto) il trasferimento è trascurabile. 3. È stato riportato che l'enzima si trova sulla superficie luminale del tubulo renale prossimale rettilineo. In questa situazione, se i risultati cinetici ottenuti con l'enzima detergente-solubilizzato sono rilevanti per il comportamento dell'enzima in vivo, sembra probabile che la funzione principale della gamma-glutamiltransferasi renale non sia nel trasporto degli aminoacidi, ma piuttosto nell'idrolisi del glutatione nel filtrato renale.
Catepsina milza bovina B1 e catepsina collagenolitica. Uno studio comparativo delle proprietà dei due enzimi nella degradazione del collagene nativo.Catepsina milza bovina B1 e la catepsina collagenolitica sono state separate mediante cromatografia su Amberlite IRC-50 e la catepsina collagenolitica è stata parzialmente purificata mediante cromatografia su DEAE-Sephadex (A-50). 2. La catepsina collagenolitica ha degradato il collagene insolubile del tendine al massimo a pH 3,5 e 28 gradi C; principalmente alfa- componenti della catena sono stati rilasciati in soluzione. A 28°C i telopeptidi nel collagene cutaneo solubile sono stati anche scissi per produrre componenti della catena alfa. La catepsina collagenolitica era quindi simile alla catepsina B1 nella sua azione contro il collagene nativo, ma le miscele di questi due enzimi hanno mostrato un effetto sinergico 3. L'aggiunta di composti tiolo-bloccanti ha prodotto un'inibizione simile della catepsina collagenolitica e della catepsina B1 L'enzima ha risposto in modo simile a tutti gli altri composti te sted tranne che per l'acido 6-aminoesanoico, quando la catepsina collagenolitica era leggermente attivata e la catepsina B1 era quasi inalterata. 4. La leupeptina, che è un analogo strutturale dei substrati sintetici contenenti arginina, ha inibito la catepsina collagenolitica con la stessa efficacia della catepsina B1. È stato dimostrato che la catepsina collagenolitica mantiene una bassa attività residua contro l'alfa-N-benzoil-DL-arginina p-nitroanilide durante la purificazione, che era equivalente allo 0,2% dell'attività della catepsina B1. 5. La catepsina B1 e la catepsina collagenolitica non possono essere separate mediante cromatografia di affinità su Sepharose 4B organomercuriale. I due enzimi potrebbero essere risolti su DEAE-Sephadex (A-50) e mediante focalizzazione isoelettrica in un gradiente di pH di Ampholine. Il pI dell'isoenzima B1 della catepsina maggiore era 4,9 e il pI della catepsina collagenolitica era 6,4. 6. Dalla cromatografia su Sephadex G-75 (grado superfine) i pesi molecolari sono stati calcolati in 26000 per la catepsina B1 e 20000 per la catepsina collagenolitica. La differenza di peso molecolare è stata confermata dall'elettroforesi su gel di sodio dodecilsolfato/poliacrilammide.
Fattori che influenzano l'attività della citrato sintasi dell'Acetobacter xylinum e il suo possibile ruolo regolatore.L'attività della citrato sintasi delle cellule di Acetobacter xylinum coltivate su glucosio era il lo stesso delle cellule cresciute su intermedi del ciclo dell'acido tricarbossilico. L'attività della citrato sintasi negli estratti è compatibile con la velocità complessiva di ossidazione dell'acetato in vivo. L'enzima è stato purificato 47 volte da estratti sonici e il suo peso molecolare è stato determinato essere 280000 mediante gel filtrazione. Ha un'attività ottimale a pH 8,4. Le velocità di reazione con l'enzima purificato erano funzioni iperboliche sia dell'acetil-CoA che dell'ossalacetato. Il Km per l'acetil-CoA è 18 mum e quello per l'ossalacetato 8,7 mum. L'enzima è inibita dall'ATP secondo schemi cinetici classici. Questa inibizione è competitiva rispetto all'acetil-CoA (Ki = 0,9 mM) e non competitiva rispetto all'ossalacetato. Non è influenzata dalle variazioni di pH e forza ionica a nd non è alleviato da un eccesso di ioni Mg2+. A differenza di altri batteri Gram-negativi, l'enzima A. xylinum non è inibito dal NADH, ma è inibito da alte concentrazioni di NADPH. L'attività dell'enzima varia con la carica energetica in modo coerente con il suo ruolo nel metabolismo energetico. Si suggerisce che il flusso attraverso il ciclo dell'acido tricarbossilico in A. xylinum sia regolato dalla modulazione dell'attività del citrato sintasi in risposta allo stato energetico delle cellule.
Captazione del succinato e relativi movimenti protonici in Escherichia coli K12.1. I valori Km apparenti per la captazione del succinato da parte di cellule intere di Escherichia coli K12 dipendono da pH nell'intervallo 6.5-7.4.2 L'assorbimento di succinato in un mezzo leggermente tamponato è accompagnato da assorbimento di protoni 3. I valori di Km apparenti per l'assorbimento di succinato e per l'assorbimento di protoni indotto da succinato sono simili 4. Circa due protoni entrano nella cellula con ciascuna molecola di succinato 5. Il modello di inibizione dell'assorbimento del succinato è simile a quello dell'assorbimento del protone indotto dal succinato 6. L'assorbimento di fumarato e malato, che condividono il sistema di trasporto del succinato, è anche accompagnato dall'assorbimento di circa due protoni per molecola di fumarato o malato 7. L'assorbimento di aspartato da parte del sistema di trasporto dell'acido dicarbossilico è accompagnato dall'assorbimento di circa due protoni per molecola di aspartato 8. Si conclude che l'assorbimento di acidi dicarbossilici da parte dell'acido dicarbossilico-trans sistema portuale è obbligatoriamente accoppiato all'assorbimento di protoni in modo tale che il succinato, il malato e il fumarato vengano assorbiti in forma elettroneutra e l'asparato in forma cationica. 9. Questi risultati sono coerenti con, sebbene non dimostrino definitivamente, l'energizzazione dell'assorbimento del succinato del deltapH.
Caratterizzazione degli stadi terminali della sintesi della clorofilla (ide) nelle preparazioni di membrane di etioplasti.1. Formazione di clorofilla (ide) da protoclorofilla (ide) che è normalmente inattivo è stato dimostrato in membrane di etioplasto isolate da piante di mais e orzo, il processo dipende dall'illuminazione intermittente e dall'aggiunta di NADPH 2. È stato dimostrato che l'aggiunta di NADPH alle membrane provoca la conversione della protoclorofilla inattiva (ide) assorbendo a circa 630 nm in una forma(e) con massimi di assorbimento della luce a circa 640 e 652 nm, che scompaiono entrambi quando la clorofilla (ide) si forma all'illuminazione 3. La dipendenza dalla temperatura del processo di attivazione e la sua risposta a una varietà di reagenti sono stati esaminati. Da questi, si trae la conclusione che i gruppi -SH sono coinvolti nell'attivazione ma nel complesso attivo questi non sono disponibili per la reazione con i reagenti -SH 4. Viene presentata la prova per il verificarsi di l'attività della glucosio 6-fosfato deidrogenasi all'interno degli etioplasti e viene suggerito che la via ossidativa del pentoso fosfato può fornire il NADPH necessario per la biosintesi della clorofilla durante le prime fasi dell'inverdimento.
Struttura subcellulare della ghiandola tiroidea bovina. Uno studio sulle membrane della tiroide bovina mediante centrifugazione in gradiente di densità di galleggiamento in un rotore zonale B-XIV.A la frazione mitocondriale e mitocondriale leggera combinata e una frazione microsomiale sono state isolate dalla ghiandola tiroidea bovina e ulteriormente frazionate in un rotore zonale B-XIV. È stato utilizzato un gradiente di densità compreso tra il 20 e il 50% (p/p) di saccarosio. Il rotore è stato azionato per 3 h a 45 000 giri/min Tutte le manipolazioni sono state eseguite a 4 gradi C e a pH 7,4 2. Il materiale membranoso è stato recuperato in due zone: zona I, contenente materiale microsomiale derivato sia dal reticolo endoplasmatico liscio che dalle membrane plasmatiche e probabilmente anche da altre membrane lisce; zona II, contenente materiale proveniente dal reticolo endoplasmatico ruvido 3. L'aumento del pH del terreno fino a 8,6, o l'aggiunta di Mg2+ al terreno, ha determinato la formazione di un'unica zona a densità intermedie (aggregazione di membrane. ). Un analogo L'effetto us è stato ottenuto dopo trattamento con Pb (NO3) 2. 4. In presenza di eparina (50 ui/ml) la maggior parte delle membrane è stata trovata nella zona I. Ciò era dovuto al rilascio di ribosomi dal reticolo endoplasmatico rugoso.
Traslocazione protonica e nitrato reduttasi respiratoria di Escherichia coli.Stoicheometrie e tassi di traslocazione protonica associati alla riduzione respiratoria di NO3- sono state misurate per gli sferoplasti di Escherichia coli cresciuto anaerobicamente in presenza di NO3-. Le steicheiometrie osservate [porta al rapporto H+/NO3-; P. Mitchell (1966) Chemiosmotic Coupling in Oxidative and Photosynthetic Phosphorylation, Glynn Research, Bodmin] erano circa 4 per L-malate ossidazione e circa 2 per l'ossidazione del succinato, del D-lattato e del glicerolo. Le misurazioni del rapporto di piombo nel rapporto H+/2e- con formiato come riducente e ossigeno o NO3- come ossidante sono state complicate da variazioni di pH associate all'assorbimento di formiato e alla formazione di CO2 Tuttavia, è stato possibile concludere che il sito di ossidazione del formiato si trova sull'aspetto interno della membrana citoplasmatica, che il rapporto H+/O per l'ossidazione del formiato è circa 4 e che il rapporto H+/NO3- porta è maggiore di 2. Le misurazioni della velocità di penetrazione di NO3- negli sferoplasti osmoticamente sensibili hanno dimostrato un ingresso elettrogenico dell'anione NO3. Il coefficiente di permeabilità per l'ingresso di nitrati a 30 gradi C era compreso tra 10(-9) e 10(-10) cm-s(-1). La velocità calcolata di ingresso di nitrati alla concentrazione tipicamente utilizzata per il dosaggio dell'attività della nitrato reduttasi (EC 1.7.99.4) era circa lo 0,1% di quella richiesta per supportare la velocità osservata di riduzione dei nitrati da parte del Benzyl Viologen ridotto. Le misurazioni della distribuzione del nitrato tra gli spazi intracellulare ed extracellulare di un mutante senza eme, de-represso per la nitrato reduttasi ma incapace di ridurre il nitrato dalla catena respiratoria, hanno mostrato che, indipendentemente dalla presenza o assenza di glucosio aggiunto, il nitrato non era concentrato a livello intracellulare. Esperimenti di rigonfiamento osmotico hanno mostrato che la velocità di diffusione dell'anione azide attraverso la membrana citoplasmatica è relativamente bassa rispetto alla rapida diffusione dell'acido idrazoico. L'effetto inibitorio dell'azide sulla nitrato reduttasi non è stato alterato da trattamenti che modificano i gradienti di pH attraverso la membrana citoplasmatica. Si conclude che il sito sensibile all'azide che riduce i nitrati della nitrato reduttasi si trova sull'aspetto esterno della membrana citoplasmatica. Vengono discusse le conseguenze di questa localizzazione per i meccanismi di traslocazione protonica guidati dalla riduzione dei nitrati e portano alla proposta che la nitrato reduttasi della membrana citoplasmatica sia vettoriale, riducendo i nitrati sull'aspetto esterno della membrana con 2H+ e 2e- che hanno attraversato dall'aspetto interno della membrana.
Sintesi degli acidi grassi a catena corta nel cervello. Localizzazione subcellulare e cambiamenti durante lo sviluppo.Acetil-CoA sintasi (EC 6.2.1.1), propionil- La CoA sintasi (EC 6.2.1. -) e la butirril-CoA sintasi (EC 6.2.1.2) sono state misurate in frazioni subcellulari preparate mediante frazionamento primario e gradiente di densità da cervello di ratto adulto con un metodo che ha portato a recuperi vicini al 100%. dell'attività dei tre enzimi è stata recuperata nella frazione mitocondriale grezza Al subfrazionamento di questa frazione mitocondriale grezza con continui gradienti di densità di saccarosio, la maggior parte dell'attività dei tre enzimi è stata trovata ad una densità maggiore della NAD+-isocitrato deidrogenasi e a circa la stessa densità della glutammato deidrogenasi, confermando i dati riportati in precedenza per l'acetil-CoA sintasi. La scoperta che la propionil-CoA sintasi e la butirril-CoA sintasi avevano circa la stessa distribuzione nei gradienti dell'acetil-CoA sintasi aggiunge supporto all'ipotesi che i mitocondri coinvolti nel metabolismo di questi acidi grassi a catena corta (tutti e tre i quali hanno dimostrato di provocare una rapida e alta marcatura della glutammina in vivo) formano una sottopopolazione distinta della popolazione mitocondriale totale. È stato scoperto che le tre attività della sintasi differiscono l'una dall'altra nella loro velocità di cambiamento e nella loro localizzazione subcellulare durante lo sviluppo del cervello di ratto. Questo, in combinazione con l'osservazione che nei gradienti delle preparazioni del cervello adulto le tre attività non si sovrappongono completamente, suggerisce che le tre attività sintasiche non sono presenti nella stessa proporzione tra loro nella stessa sottopopolazione (i) di mitocondri nel cervello.
Aspetti biomedici delle prestazioni del regolatore dell'ossigeno: II. caratteristiche dinamiche.Diversi regolatori dell'ossigeno sono stati valutati quantitativamente durante l'interfaccia con la simulazione respiratoria dinamica e la respirazione dell'utente umano. Le misurazioni continue del flusso del regolatore, della pressione erogata e dell'ossigenazione erogata sono state fornite durante volumi correnti e frequenze respiratorie variabili, come realizzato inizialmente con la simulazione della respirazione e successivamente con gli utenti umani. I regolatori hanno dimostrato un'ampia sensibilità alla domanda di flusso e alle caratteristiche dell'impulso del flusso inspiratorio. Grandi variazioni nella pressione di aspirazione in uscita e nella concentrazione di ossigeno erogato hanno accompagnato le modalità di respirazione variabili dei soggetti umani. L'incapacità dei regolatori di ossigeno di fornire costantemente l'erogazione di ossigeno/aria richiesta viene discussa rispetto alle specifiche di prestazione inadeguate attualmente utilizzate.
Aspetti biomedici delle prestazioni del regolatore dell'ossigeno: I. Caratteristiche statiche.Le caratteristiche delle prestazioni statiche dei regolatori dell'ossigeno USAF dell'attuale inventario sono state valutate con l'uso di un banco di prova specializzato per regolatori. Le pressioni di aspirazione in uscita, i flussi, le pressioni positive e le diluizioni di ossigeno erogate sono state monitorate e registrate in funzione delle altitudini operative. I risultati generali hanno indicato che: 1) si verifica un'eccessiva aggiunta di ossigeno in tutti i modelli, specialmente a basse altitudini della cabina; 2 ) i programmi di pressione positiva generalmente sono conformi alle specifiche; 3) le pressioni di aspirazione negative per la maggior parte dei regolatori sono inferiori a -2,54 cm H2O. Viene discussa la validità della valutazione statica e l'interpretazione dei dati è considerata rispetto alla compatibilità biomedica, sottolineando il mantenimento della sufficienza fisiologica dei membri dell'equipaggio.
[Conferenze morfologiche (biottiche): esperienza con organizzazione, compiti e risultati].L'articolo tratta dell'esperienza nell'organizzazione di conferenze pratiche a Mosca (The Central Institute of Advanced Medical Training) e a Lvov. Le conferenze consentono ai patoanatomisti di varie istituzioni di ottenere consultazioni sul materiale bioptico, di scambiare opinioni su ogni osservazione individuale. Questa nuova forma di considerazione collettiva di biopsie complesse dovrebbe essere considerata come uno dei metodi importanti del lavoro dei patoanatomisti. Alcuni problemi associati all'interpretazione dei campioni bioptici, all'evitamento di errori nel processo di indagine dei preparati istologici, nonché al ruolo delle conferenze nell'aggiornamento delle qualità professionali dei patoanatomisti sono discusso.
Glicogenolisi nel cuore e nel muscolo scheletrico durante la stimolazione e il blocco dei recettori colinergici. III. Azione dell'acetilcolina in condizioni di simpaticolisi.Cambiamenti nelle attività enzimatiche sono stati studiati in vitro nella glicogenolisi fosforolitica e idrolitica nel cuore funzionante e nel muscolo scheletrico a riposo dopo iniezione endovenosa di composti simpaticolitici. Reserpina, alderline e legatura delle ghiandole surrenali hanno inibito l'influenza dell'acetilcolina sulla fosforilasi, la sola reserpina o la legatura delle ghiandole surrenali ha causato un aumento dell'attività idrolitica simile a quella prodotta dai composti che agiscono sui gangli, a conferma del concetto secondo cui il sistema adrenergico (beta-recettore) inibisce l'attività idrolitica durante la glicogenolisi.
[Attività e proprietà della fosfatasi alcalina nel plasma e in vari organi (rene, fegato, mucosa dell'intestino tenue, osso) dei suini].C'era un'elevata attività della fosfatasi alcalina nel plasma sanguigno dei suinetti durante i primi giorni di vita; l'enzima ottenuto in questo momento aveva un'elevata stabilità al calore ed era prontamente inibito dalla L-fenilalanina (5 mM). L'enzima nel sangue era inibito in misura maggiore rispetto alla fosfatasi alcalina della mucosa intestinale. Con l'avanzare dell'età si verificava una diminuzione della stabilità al calore e della facilità con cui l'enzima poteva essere inibito dalla fenilalanina. La proporzione di fosfatasi alcalina derivata dall'osso e presente nel plasma sanguigno aumentava con età avanzata. Due isoenzimi sono stati rilevati nel fegato, rene, polmone, mucosa intestinale e mucosa endometriale mediante elettroforesi in gel di poliacrilammide. La termolabilità e l'inibizione da parte della fenilalanina erano buoni criteri per differenziare diversi tipi di alcali fosfatasi nei suini. Nel caso della fosfatasi alcalina nel plasma sanguigno, il fenilfosfato disodico si scindeva più facilmente del p-nitrofenilfosfato e molto più facilmente della fenolftaleina difosfato e del beta-glicerofosfato.
Ribulose biofosfato carbossilasi da Thiobacillus A2. Sua purificazione e proprietà.Ribulose bisfosfato carbossilasi (EC 4.1.1.39) da Thiobacillus A2 è stata purificata fino all'omogeneità sulla base di elettroforesi su gel di poliacrilammide e analisi UV durante studi di velocità di sedimentazione. L'enzima aveva un pH ottimale di circa 8,2 con tamponi Tris-HCl. Il peso molecolare era di circa 521000 con uno Srel. di 16,9. Km per RuBP era di 122 muM, per "CO2" totale era 4,17 mM e per Mg2+ 20,0 muM. Il requisito assoluto di un catione bivalente era soddisfatto da Mg2+ che era sostituibile in una certa misura da Mn2+. L'attività non era significativamente influenzata da SO(2-4 ), SO(2-3) o S(2)O(2-3) a 1,0 mM. A questa concentrazione S(2-) ha causato una stimolazione del 27%. Tutti i mercuriali testati erano inibitori. Il pHMB era la causa più potente circa il 60% di inibizione a 0,04 mM. Questa inibizione era reversibile da basse concentrazioni di cisteina. Anche il cianuro era inibito ria. La sua modalità di inibizione rispetto a RuBP era non competitiva e con un Ki di 20 muM. L'attività persa potrebbe essere ripristinata parzialmente da GSH o Cu2+. Sebbene l'azide alla concentrazione testata non abbia avuto effetti significativi sull'attività enzimatica, il 2, 4-dinitrofenolo a 1,0 mM ha causato un'inibizione del 91%. Infine, anche l'attività è stata influenzata dalla carica energetica.
Attività della nitrogenasi nel ceppo 32H1 di Rhizobium sp.: considerazioni nutrizionali e fisiche.Condizioni nutrizionali e fisiche che influenzano l'attività della nitrogenasi nel ceppo di "fagiolo dall'occhio " rhizobia, 32H1, sono stati esaminati utilizzando colture coltivate su terreno agar. Arabinosio nel terreno di base (CS7) potrebbe essere sostituito da ribosio, xilosio o glicerolo, ma mannitolo, glucosio, saccarosio o galattosio supportavano solo una bassa azotosi (riduzione di C2H2 ). Il succinato potrebbe essere sostituito da piruvato, fumarato, malato o 2-ossoglutarato, ma senza alcun acido carbossilico, l'attività nitrogenasi era bassa o non rilevabile a meno che non fosse fornito un alto livello di arabinosio. L'inositolo non era essenziale. Diverse fonti di azoto potrebbero sostituire glutammina inclusi glutammato, urea, (NH4)2SO4 e asparagina. La massima attività nitrogenasi delle colture coltivate in aria a 30 gradi C è stata osservata in condizioni di saggio di pO2=0.20-0.25 atm e incubazione a 30 gradi C. vity si è verificata dopo un periodo di rapida crescita batterica, quando il numero di cellule vitali era relativamente costante. Rispetto ai risultati ottenuti sul terreno CS7, l'attività della nitrogenasi potrebbe essere sostanzialmente aumentata e/o sostenuta per periodi di tempo più lunghi utilizzando 12,5 MM di succinato e 100 mM di arabinosio, aumentando la concentrazione di fosfato da 2 a 30-50 mM, o coltivando il batteri a 25 gradi C.
Proprietà di eterocisti isolate con silice colloidale.Viene descritto un metodo per l'isolamento di eterocisti che sono virtualmente privi di detriti cellulari contaminanti dopo la sonicazione di cresciuto Anabaena 7120. Le eterocisti isolate hanno ridotto l'acetilene in un processo dipendente dalla luce in assenza di ATP fornito esogenamente, le eterocisti fornite con ATP e Na2S2O4 hanno ridotto lentamente l'acetilene al buio ma hanno comunque mostrato una marcata attivazione della luce. eterocisti. Fino al 13% dell'attività dei filamenti intatti è stato rappresentato nella preparazione di eterocisti isolate. Le eterocisti isolate hanno assorbito O2 in un processo indipendente dalla luce; l'assorbimento di O2 con l'aggiunta di NADP+ è stato potenziato da piruvato, isocitrato e intermedi dell'ossidante via pentosa.
Un batterio ossidante l'ammoniaca, Nitrosovibrio tenuis nov. gen. nov. sp.Un bastoncino snello e ricurvo, ossidante l'ammoniaca, autotrofico, era isolato dal suolo delle Hawaii. È ben distinguibile da qualsiasi altro batterio nitrificante finora descritto per la loro morfologia. Le cellule sono lunghe 1,1-3,0 mm e larghe 0,3-0,4 mm. Sono mobili per mezzo di 1-4 da subpolari a laterali flagelli. In contrasto con la maggior parte dei batteri che ossidano l'ammoniaca, il vibrio isolato è privo di un esteso sistema di citomembrane. Per classificare questa specie non ancora descritta, proponiamo di creare il nuovo genere Nitrosovibrio e classificare il ceppo isolato come Nitrosovibrio tenuis.
Isolamento di un batterio ossidante ammoniaca alofilo moderato, Nitrosococcus mobilis nov. sp.Un batterio ossidante ammoniaca è stato isolato da un campione di acqua salmastra (Mare del Nord, Porto di Husum). È un grande cocco mobile di 1,5-1,7 mm di diametro. Da sottolineare l'esteso sistema di citomembrane che si presenta come vescicole appiattite nella regione periferica del citoplasma e come intrusioni nel centro del citoplasma come segno caratteristico di identificazione. Il batterio a crescita litoautotrofia si è rivelato un alofilo obbligato. Per le sue proprietà fisiologiche e morfologiche, lo abbiamo assegnato al genere Nitrosococcus e proponiamo il nome Nitrosococcus mobilis.
Fissazione dell'azoto da parte di batteri che utilizzano idrogeno.Diciassette ceppi di batteri che fissano l'azoto, isolati da diversi habitat su idrogeno e anidride carbonica, nonché su altri substrati, morfologicamente simili tra loro. Tutti i ceppi, compreso Mycobacterium flavum 301, crescevano autotrofi con idrogeno. Il ceppo isolato 6 era sensibile all'ossigeno quando dipendente da N2 come fonte di azoto, una conseguenza della sensibilità della sua nitrogenasi verso l'ossigeno. allo stesso tempo, il ceppo 6 era sensibile all'idrogeno quando cresceva autotroficamente su N2 come fonte di azoto, ma l'idrogeno non ha influenzato la riduzione dell'acetilene da parte di queste cellule.
Farmaci e onde PGO nel corpo genicolato laterale del gatto curato. V. Composti vari. Sinossi del ruolo dei neurotrasmettitori centrali sull'attività delle onde PGO.Nell'ultima parte di questa serie abbiamo studiato gli effetti di vari farmaci sulle onde ponto-genicolo-occipitale (PGO) indotte dal derivato della benzochinolizina, Ro 4-1284 (PGO(1284)), e dall'inibitore del tripotofano idrossilasi, p-clorofenilalanina (PGO(PCPA)), e continuamente registratore e contato nei corpi genicolati laterali (LGB) di gatti immobilizzati e non anestetizzati. Lo scopo principale di questo studio era testare la specificità delle alterazioni indotte da farmaci dell'onda PGO attività suggerita dalle precedenti indagini. Gli ipnotici-sedativi di diverse classi non hanno avuto effetti significativi a dosi che non hanno alterato in modo marcato l'attività elettrica di fondo nelle persone LGB. Un'eccezione degna di nota è stata l'acido gamma-idrossibutirrico che ha aumentato la densità di PGO (1284) e PGO(PCP UN). Un certo numero di neurolettici è stato trovato inattivo; la sulpiride ha sorprendentemente ridotto la densità di PGO (1284). La bulbocapnina ha avuto un effetto simile. I convulsivi in dosi subconvulsive non hanno influenzato uniformemente le onde PGO; mentre il pentetrazolo non ha avuto un effetto consistente, la stricnina è diminuita e la picrotossina ha aumentato la densità di PGO (1284). Alte dosi di morfina, metadone e meperidina hanno ridotto la PGO (1284). L'etanolo era inattivo anche a dosi elevate. La caffeina e la mefexamide hanno ridotto la densità di PGO (1284). Il mepiprazolo era il più potente sedativo di PGO (1284, probabilmente inibendo l'assorbimento di 5-HT. La mescalina era un debole depressore di PGO (1284). Le onde PGO indotte dalla p-clorometamfetamina nei gatti non trattati erano meno consistenti rispetto al PCPA. ampiezza delle onde PGO dovute ad un'azione antinicotinica centrale I risultati di questo studio e dell'intera serie hanno suggerito uno schema sperimentale della generazione e modulazione delle onde PGO, in cui sono inclusi i ruoli e i siti ipotetici di azione di quattro neurotrasmettitori centrali.
Effetti degli anestetici per via endovenosa sul comportamento di evitamento continuo nel ratto.Sono state valutate le azioni di ketamina, etoxadrol e tiopentale sul comportamento di evitamento continuo nel ratto dopo somministrazione ev. Ketamina e tiopentale hanno esercitato solo un effetto depressivo sul comportamento di evitamento attribuibile alle proprietà anestetiche dei farmaci. Al contrario, l'attività bifasica è stata mostrata con etoxadrol; la risposta all'evitamento è stata aumentata a basse dosi e diminuita a dosi elevate. la stimolazione persistente di rimbalzo della risposta si è verificata dopo il recupero dall'effetto anestetico di alte dosi di etoxadrol. Gli effetti di questi farmaci sul comportamento di evitamento continuo non sono correlati con gli effetti precedentemente riportati sulla disposizione delle monaoamine cerebrali.
Effetto dell'infusione di sodio acetato sulla funzione renale nel cane.Il sodio acetato (AC) viene utilizzato abitualmente nelle soluzioni per dialisi nelle unità di emodialisi in quanto fornisce una fonte pronta di base fissa. La dinamica renale del sale tampone non è ben nota. I cani anestetizzati hanno ricevuto infusioni ev di AC a una velocità da 40 a 600 muEq/kg/min. AC urinaria e l'escrezione di bicarbonato è stata misurata e correlata con PAH e clearance della creatinina ed escrezione di elettroliti urinari. L'AC è apparso nelle urine con la stessa rapidità con cui è stato rilevato nel plasma. La sua escrezione aumentava gradualmente e tendeva a parallelamente all'escrezione di bicarbonato. La clearance della PAH aumentava con l'avvento dell'infusione di AC, il pH plasmatico e il bicarbonato aumentavano man mano che Viene introdotta la corrente alternata. L'infusione di corrente alternata ha causato un calo immediato della pressione sanguigna. La pressione sanguigna sistolica è tornata al controllo in 3-5 minuti; c'è stato un ritorno più graduale della pressione diastolica. Concludiamo che la corrente alternata viene filtrata ed escreta nelle urine a bassi livelli plasmatici e ha una soglia renale bassa.
Soppressione del rilascio di renina da parte del timololo.L'agente bloccante beta-adrenergico, timololo, somministrato a conigli a riposo come bolo ev (0,125 mg/kg ) sostenuta da un'infusione di 2 ore a 0,0625 mg/kg/ora, ha causato una significativa depressione dell'attività della renina plasmatica (PRA) al 49% del livello di controllo. Sono emerse correlazioni significative tra la caduta della pressione sanguigna media e le variazioni della frequenza cardiaca sia e PRA. Il timololo ha antagonizzato anche il rilascio di renina indotto dall'isoprenalina. In ratti normali anestetizzati, il timololo (0,2 mg/kg ip) ha soppresso la concentrazione plasmatica media di renina (PRC) al 16% del valore pre-trattamento. Inoltre, la PRC media del normale ratti, dissanguati immediatamente dopo la decapitazione, per evitare di stimolare la secrezione di renina, è stata ridotta del 55% un'ora dopo l'iniezione ip di timololo. La potenza del timololo in questo senso era 8 volte quella del dl-propranololo. Così, nei conigli e nei ratti, il timololo abbassa efficacemente i livelli di renina plasmatica sia basale che stimolata.
Riparazione angioplastica di un aneurisma dell'arteria polmonare rotto.Una donna di 28 anni ha avuto la rottura di un aneurisma dell'arteria polmonare solitario che è stato trattato con successo mediante pericardio innesto di patch. L'eziologia dell'aneurisma non può essere determinata sebbene il paziente abbia avuto diversi episodi di trauma toracico chiuso in passato. Aspetti insoliti di questo caso includono: localizzazione dell'aneurisma nella porzione intermedia dell'arteria polmonare sinistra all'interno del principale fessura intralobare, rottura intrapleurica, diagnosi preoperatoria mediante angiografia polmonare e un'anomalia istopatologica scoperta casualmente dell'aneurisma stesso per la quale non è stata trovata una spiegazione soddisfacente.
Ipotermia e riscaldamento mediante dialisi peritoneale e inalazione a temperatura controllata.In 12 conigli l'ipotermia e il riscaldamento sono stati indotti con dialisi peritoneale circolante a temperatura controllata in combinazione con miscele di gas ipossico e ipercapnico a temperatura controllata. Il tempo medio di raffreddamento necessario affinché la temperatura esofagea scenda da 37,7 gradi +/- 0,7 a 20,6 gradi +/- 1,0 gradi C era di 81 +/- 34 minuti con un intervallo da 41 a 150 minuti. Il tempo medio di riscaldamento per l'aumento della temperatura esofagea da 20,6 gradi +/- 1,0 gradi C a 35,2 gradi +/- 1,8 gradi C era di 90 +/- 35 minuti. Il tempo di raffreddamento era correlato alle proporzioni di anidride carbonica inspirata e ossigeno. In contrasto con i metodi di superficie e di bypass, le temperature esofagee e muscolari concordano molto strettamente, suggerendo un'assenza di gradienti di temperatura regionali.
Esperienza clinica con l'ossigenatore a membrana monouso Teflo.Un ossigenatore a membrana monouso semplice, economico e altamente efficiente con basso volume di innesco e membrana microporosa ha recentemente disponibili. Le indagini cliniche e sugli animali sul suo utilizzo sono state molto soddisfacenti e l'esperienza clinica ora è stata estesa a includere 285 pazienti. Il suo vantaggio principale è stata la capacità di controllare separatamente l'ossigenazione e l'anidride carbonica. Gli svantaggi hanno incluso la complessità leggermente aumentata di il sistema rispetto ai sistemi di ossigenazione a bolle, la necessità di convertire le pompe per il suo utilizzo e l'eccessiva condensazione del vapore acqueo nella fase gassosa dell'ossigenatore a meno che non vengano seguite determinate precauzioni.
Risposta cardiorespiratoria all'alimentazione nei neonati.Il latte è stato somministrato attraverso sondini nasogastrici a 14 bambini con distress respiratorio. Disturbi cardiorespiratori simili sono stati osservati quando i bambini sono stati nutriti (5 ml/kg per mangime) con latte umano, latte vaccino delicato o acqua distillata. La PaO2 è diminuita dopo una poppata ma è tornata al valore pre-alimentazione a 30 minuti, momento in cui la PaCO2 era diminuita e la frequenza respiratoria era aumentato. Non sono state osservate variazioni del pH, della frequenza cardiaca o della pressione sanguigna. La pressione del seno portale è aumentata dopo l'alimentazione in associazione con un aumento della pressione venosa centrale. Al contrario, quando i bambini malati sono stati nutriti con latte umano a un volume di 2-5 ml/kg per mangime non sono state riscontrate variazioni consistenti in nessuna delle misurazioni. Questi studi hanno suggerito che gli effetti cardiorespiratori erano correlati allo spostamento di volume risultante dall'introduzione di mangimi nello stomaco. La relazione dell'aumento della p venosa centrale repressione e l'entità e la direzione dello shunt nei neonati con sindrome da distress respiratorio è incerta. Gli effetti avversi possono essere evitati somministrando pasti più piccoli, e quindi anche più frequenti.
Attività della gamma glutamil transpeptidasi e ittero neonatale.L'attività della gamma glutamil transpeptidasi (GGT) è stata misurata in neonati normali e nel siero materno post partum. Livelli erano al di sopra del normale range adulto (35I U/1) in tutti i neonati e una correlazione significativa era legata tra l'attività enzimatica e i livelli di bilirubina al giorno 7 (P inferiore a 0-005). Il livello medio di bilirubina nei giorni 4 e 7 era più alto nei bambini con valori del cordone ombelicale inferiori a 90 UI/1. In alcune circostanze l'aumento dell'attività plasmatica della GGT può servire come indice di induzione enzimatica. Tuttavia, i nostri risultati suggeriscono che livelli elevati nel neonato possono riflettere un danno microsomiale epatico con conseguente compromissione della coniugazione della bilirubina Sono indicati ulteriori studi di valutazione dell'attività della GGT cordonale nei neonati a rischio, in vista di misure profilattiche o terapeutiche precoci.
Conversione enzimatica della sterigmatocistina in aflatossina B1 mediante estratti senza cellule di Aspergillus parasiticus.Estratto senza cellule, preparato da Aspergillus parasiticus ATCC 15517 cresciuto in terreno sintetico, era attivo nel convertire la [14C]sterigmatocistina in aflatossina B1 in presenza di ridotta nicotinammide adenina dinucleotide fosfato. L'attività è stata dimostrata dal decorso temporale della conversione e dalla dipendenza lineare della resa del prodotto dalle concentrazioni enzimatiche. è stato ottenuto a pH 7,5-7,8 a 27°C. I risultati confermano la sterigmatocistina come precursore biogenetico dell'aflatossina B1. Sono state sviluppate tecniche per studi enzimatici sulla biosintesi dell'aflatossina.
Incorporazione di prolina in prodigiosina da parte di un mutante Put di Serratia marcesens.Un mutante Put di Serratia marcescens, carente di prolina ossidasi e quindi incapace di degradarsi prolina, è stato utilizzato per testare una reazione enzimatica responsabile dell'incorporazione della prolina nella prodigiosina. La reazione aveva un pH ottimale di 7,5 e un Km di 1,1 X 10(-4) M a 27 C. A temperature superiori a 27 C, la velocità della reazione diminuiva con l'aumentare della temperatura e si rilevava poca attività a 42 C. L'attività dell'enzima era direttamente proporzionale alla quantità di pigmento formato ed era inibita dalla tioprolina, un analogo del substrato. Questi dati suggerivano la presenza di un enzima unico e specifico nella via biosintetica della prodigiosina.
Crescita di Fusarium moniliforme su estratto acquoso di carruba e valutazione nutrizionale della sua biomassa.Fusarium moniliforme è stato coltivato semicontinuamente su un terreno di carruba in un contenitore da 14 litri fermentatore (volume di lavoro di 8,5 litri). Il mezzo di crescita ha fornito il 2,4% di zucchero di carruba, lo 0,72% di NH4H2PO4 e lo 0,03% di MgSO4-7H2O. Il raccolto di biomassa è stato di 8,8 g/litro al giorno. Il 90% degli zuccheri è stato consumato e il Il pH è sceso da 5,9 a circa 3,7. La proteina grezza (NX 6,25) del micelio atomizzato era di 380 g/kg, 300 g/kg per la vera proteina (Lowry) e 4,8 g/kg per (Folin-Denis ) acido tannico. Il micelio è stato valutato nutrizionalmente con il ratto svezzato come animale da esperimento. Il rapporto di efficienza proteica e i valori di utilizzo netto delle proteine per il micelio non integrato erano rispettivamente 1,15 e 0,42, e per il micelio integrato con DL-metionina (5 g/ kg) erano rispettivamente 2,31 e 0,72. Non è stata osservata alcuna depressione della crescita nello sperimentale ratti, e alla dissezione delle carcasse gli organi interni sono risultati normali.
Beta-glucosidasi di Trichoderma: la sua biosintesi e ruolo nella saccarificazione della cellulosa.La beta-glucosidasi extracellulare di Trichoderma viride è generalmente presente a bassi livelli quando l'organismo viene coltivato su cellulosa perché inattivato nelle condizioni acide che si sviluppano nel terreno mentre gli altri enzimi del complesso della cellulasi sono più stabili Con l'opportuno controllo del pH si previene l'inattivazione della beta-glucosidasi e l'attività di questa enzima aumenta durante la crescita. Nella saccarificazione della cellulosa cristallina, o della cellulosa a basse concentrazioni, gran parte del glucosio prodotto è il risultato della scissione del cellobiosio da parte della beta-glucosidasi. Tuttavia quando vengono saccarificate alte concentrazioni (10%) di cellulosa pretrattata , quantità significative di glucosio sono prodotte dall'azione di enzimi diversi dalla beta-glucosidasi.
[Studio della biosintesi di un frammento di carboidrati di rubomicina].Quando l'organismo produttore di rubomicina è stato coltivato in presenza di un C14 marcato in modo uniforme -glucosio e varie fonti di carbonio non marcate, anche la parte carboidratica dell'antibiotico è stata marcata in modo casuale. L'attività dell'atomo di carbonio I dello zucchero rubomicina cresciuto sullo sfondo di glicerolo non marcato era quasi 3 volte superiore al rispettivo valore del attività aglicone. C14-acetato, C14-propionato, C14-metionina e daunosamina non sono stati incorporati. I dati sono indicativi del fatto che non si è verificata la scissione dello scheletro carbonioso del glucosio durante la conversione del glucosio in amminozucchero.
[Regolazione della biosintesi delle tetracicline controllando la crescita del produttore].Regolazione della velocità di crescita di Act. aureofaciens nella fermentazione batch mantenendo la concentrazioni di fosforo, azoto ammoniacale, glucosio e valori di pH ai livelli favorevoli per la crescita intensiva all'inizio del processo e dopo l'accumulo della biomassa ai livelli ottimali per la crescita ritardata dell'organismo hanno determinato un prolungamento significativo del periodo di antibiotico intensivo produzione, cioè l'intensificazione del processo di fermentazione. L'indagine microscopica dello sviluppo dell'organismo in condizioni di fermentazione regolata ha rivelato la presenza di quantità significative di ife periferiche libere altamente basofile per un periodo di tempo prolungato. Le ife possedevano una capacità di crescita e un metabolismo intensivo a differenza la coltura di controllo che era suscettibile di autolisi precoce.
[Studio della penicillina amidasi da E. coli. Un metodo ultrasonico per studiare le transizioni conformazionali ph e temperatura nel centro attivo dell'enzima].Le transizioni di conformazione del pH e della temperatura nel centro attivo della penicillina amidasi cioè penicillinamidoidrolasi EC 3.5. I. II sono state studiate mediante il metodo cinetico e un nuovo metodo ultrasonico. È stato dimostrato che l'attività catalitica dell'enzima è stata controllata da 2 gruppi ionogenici con pK 6.1 e 10.2 Lo studio della penicillinamidasi mediante il metodo ad ultrasuoni ha mostrato che il gruppo ionogenico con pK 10 era responsabile del mantenimento della conformazione cataliticamente attiva del centro attivo dell'enzima. i parametri dell'idrolisi enzimatica della benzilpenicillina catalizzata dalla penicillina amidasi e i dati sull'effetto degli ultrasuoni sull'enzima hanno mostrato che l'enzima è stato sottoposto alla temperatura c transitorio informativo. Sono stati determinati i parametri di temperatura e termodinamici della transizione di conformazione (T=318 gradi K, delta H=81 kcal/mole e delta S=255 e. u. ). La struttura del centro attivo dell'enzima viene discussa sulla base dei dati ottenuti.
[Criteri per la valutazione del carbonato di calcio dal punto di vista della biosintesi della clortetraciclina].Il carbonato di calcio viene aggiunto ai mezzi di fermentazione nella biosintesi delle tetracicline per fornire valori di pH definiti e legame della tetraciclina in complessi insolubili. Sono stati studiati sette diversi campioni rispetto alle loro proprietà fisiche, come la dimensione microscopica delle particelle, la loro forma, capacità di agglomerazione, volume specifico, velocità di precipitazione delle particelle e proprietà chimiche, quali purezza, capacità tampone, effetto sul pH del mezzo prima e dopo la sterilizzazione. Le proprietà di cui sopra sono state studiate in confronto con l'attività di biosintesi della clortetraciclina. Il carbonato di calcio microfine si è rivelato il migliore dal punto di vista della produttività di Str. aureofaciens. Con il suo utilizzo l'attività del fluido di coltura è aumentata del 20 per cento rispetto agli altri campioni. La curva di titolazione del campione ha avuto il più basso essere ns.
Mastociti regolatori. I Azione soppressiva dei loro prodotti su una reazione immunitaria primaria in vitro.Prodotti della degranulazione dei mastociti, nonché istamina e serotonina, sono stati aggiunti a una preparazione Mishell e Dutton per l'immunizzazione primaria in vitro (induzione della formazione di anticorpi IgM) ai globuli rossi di pecora o di cavallo. I prodotti di degranulazione sono stati ottenuti in anticipo facendo reagire i mastociti sensibilizzati passivamente con l'antigene corrispondente (non correlato identico all'antigene immunizzante in vitro) o liberato nel terreno di coltura in cui erano stati aggiunti mastociti sensibilizzati attivamente all'antigene immunizzante in vitro. In tutti i casi è stata osservata una riduzione del 46-72% delle cellule che formano placca diretta (IgM). Questo la riduzione è stata impedita dall'antistaminico. I mediatori responsabili erano attivi nel periodo da 0 a 24 ore dopo l'introduzione dell'antigene. Gli anticorpi degranulanti anafilattici che attivavano questa attività inibitoria erano fou nd essere termolabile in un esperimento. Una degranulazione dei mastociti indotta in vivo ha portato a una ridotta formazione di cellule che formano la placca. L'attività potenziante e immunoregolatoria degli anticorpi anafilattici di topo è quindi provvisoriamente e almeno in parte attribuita alla loro capacità di degranulare i mastociti dopo il contatto con l'antigene.
Adenilato chinasi nell'uomo: evidenza di un terzo locus.La distribuzione tissutale degli isoenzimi dell'adenilato chinasi nell'uomo è stata esaminata utilizzando vari substrati. sono stati identificati gli isoenzimi attribuibili ai loci AK1 e AK2 ed è stato trovato anche un set aggiuntivo di isoenzimi probabilmente attribuibile a un terzo locus, che è stato provvisoriamente designato AK3. Gli isoenzimi AK3 mostrano attività con GTP + AMP o ITP + AMP ma non mostrano attività con ATP + AMP. Differiscono anche dagli isoenzimi AK1 e AK2 nella mobilità elettroforetica e dagli isoenzimi AK1 nell'essere resistenti all'inibizione dell'argento. Sono simili nella dimensione molecolare agli isoenzimi AK1 mentre gli isoenzimi AK2 sono apparentemente più grandi Gli isoenzimi AK3 corrispondono evidentemente all'enzima nucleosidetrifosfato-adenilato chinasi (2.7.4.10). Gli studi ibridi di cellule somatiche indicano che il locus AK3 non è sintenico con quello di AK2 (cromosoma 1). Il locus AK3 è invece, probabilmente sintenico con il locus AK1, sul cromosoma 9. La variazione geneticamente determinata di AK3 non è stata osservata in un sondaggio di circa 80 individui.
Isoenzimi dell'enolasi umana: evidenza elettroforetica e biochimica per tre loci.1. Quattro isoenzimi dell'enolasi principali sono stati identificati nei tessuti umani e sono indicati come L, M, \'intermedio\' e \'rapido\'. L'isoenzima M è la forma principale che si trova negli estratti del muscolo scheletrico e del cuore e l'isoenzima L è la forma principale che si trova negli estratti di fegato e nella maggior parte degli altri tessuti. e \'fast\' gli isoenzimi sono più attivi nel cervello ma sono osservati come componenti deboli nella maggior parte degli altri tessuti compreso il cuore, ma non si vedono nel muscolo scheletrico. È stato osservato che durante lo sviluppo fetale del cuore e del muscolo scheletrico la forma L diminuisce di attività mentre la forma M aumenta di attività. 2. Le proprietà cinetiche, la stabilità al calore e le dimensioni molecolari dei principali isoenzimi dell'enolasi sono state confrontate. Sebbene gli isoenzimi condividano molte caratteristiche in comune, l'isoenzima \'fast\' è più stabile se sottoposto a calore tr rispetto agli isoenzimi L o M. Inoltre, l'isoenzima \'fast\' mantiene la sua struttura e attività dimerica in assenza di ioni magnesio mentre gli isoenzimi L e M si dissociano e perdono attività. L'isoenzima \'intermediate\' ha proprietà che sono intermedie a quelle degli isoenzimi L e \'fast\'. 3. L'isoenzima \'intermedio\' può essere parzialmente dissociato in quantità uguali di isoenzimi L e \'rapido\' mediante conservazione a temperatura ambiente o congelamento e scongelamento in presenza di 2 M-NaCl. Al contrario, miscele di L con \'rapido\' e M con \'rapido\' danno luogo a un isoenzima \'intermedio\' dopo il congelamento e lo scongelamento. 4. L'evidenza derivata da questo studio ha portato a suggerire che tre loci genici separati sono coinvolti nella determinazione dell'enolasi umana. Si propone che uno di questi, ENO1, determini l'isoenzima L che è l'omodimero alfaalfa; un altro locus, ENO2, determina l'isoenzima \'fast\' che è l'omodiner betabeta; e il terzo locus, ENO3, determina l'isoenzima M che è l'omodimero gammagamma. Si pensa che l'isoenzima \'intermedio\' visto come un componente forte nel cervello e come un componente debole nella maggior parte degli altri tessuti sia l'eterodimero alfabeto. Nel cuore però probabilmente è principalmente betagamma.
Interazioni RNA-proteina nel virus del mosaico dell'erba medica.Le particelle del componente inferiore del virus del mosaico dell'erba medica hanno una struttura bacilliforme compatta a pH neutro. Quando il Il pH viene portato a 8,3 la struttura si dispiega Poiché il peso delle particelle non cambia si conclude che le subunità proteiche rimangono attaccate all'RNA Il peso delle particelle del componente superiore sferoidale a del virus viene dimezzato quando le particelle si dispiegano a pH 8,3 Ciò può essere spiegato dal fatto che queste particelle contengono due molecole di RNA di dimensioni identiche. Le molecole di RNA libero del virus del mosaico di erba medica sono in grado di prelevare subunità proteiche dalle particelle intatte del virus. È dimostrato che per molecola di RNA ce ne sono alcune siti con un'elevata affinità per la proteina di rivestimento. Forse questi sono i siti in cui la proteina di rivestimento svolge il suo ruolo nell'attivazione del genoma.
Antigenemia in pneumococcemia fulminante.Due pazienti asplenici con pneumococcemia fulminante hanno sviluppato porpora e coagulopatia. I livelli di C3 e C4 nel siero erano bassi. Entrambi i pazienti aveva livelli elevati di polisaccaride capsulare circolante e un paziente aveva diplococchi visibili su uno striscio di sangue periferico. Polisaccaride pneumococcico di gruppo C (sostanza C) è stato rilevato nel siero di uno dei pazienti. Possibile relazione patogenetica degli antigeni pneumococcici circolanti con viene discusso lo sviluppo della coagulopatia nella pneumococcemia.
Rilevazione di emoglobine mutanti con affinità alterata per l'ossigeno. Una tecnica semplificata.Rilevazione di emoglobine ad alta o bassa affinità in soggetti con policitemia o l'anemia è difficile per la maggior parte dei medici a causa della necessità di attrezzature speciali per eseguire le curve di dissociazione ossigeno-emoglobina. La misurazione del pH, della tensione di ossigeno e della saturazione di ossigeno del sangue venoso antecubitale con gli strumenti presenti nella maggior parte dei laboratori di chimica clinica consente una stima della forza del legame dell'ossigeno all'emoglobina. Un'equazione può essere utilizzata per convertire la tensione venosa di ossigeno (standardizzata a pH 7,4) e la saturazione di ossigeno alla P50 della curva di dissociazione ossigeno-emoglobina su cui cade il punto osservato. I dati indicano che questo metodo è un passo iniziale affidabile nell'identificazione di un'emoglobina con un'affinità anormale per l'ossigeno e può essere applicato a studi di popolazione, poiché risultati affidabili si ottengono con il sangue venoso conservato a 4 gradi C per un massimo di 24 ore.
[Sistema enzimatico e coenzimi coinvolti nel metabolismo energetico dei leucociti. Funzione e metabolismo dei neutrofili polimorfonucleati].I mitocondri possono essere isolati da vari tipi di leucociti (polimorfi neutrofili e linfociti da sangue umano, polimorfi neutrofili e macrofagi da essudati peritoneali della cavia) dopo la distruzione da parte dell'eparina della membrana cellulare. Questa procedura è molto semplice e meno traumatica per queste strutture subcellulari rispetto alle consuete procedure meccaniche. L'attività enzimatica della catena respiratoria e il consumo di ossigeno possono essere misurati in questi preparati mitocondriali. Il consumo di ossigeno viene determinato utilizzando l'ossiemoglobina che funge sia da donatore di ossigeno, come nel sistema respiratorio in vivo, sia da indicatore della reazione a 435,8 nm. l'integrità dei mitocondri può essere dimostrata mediante la determinazione dell'"indice di controllo accettore", l'esistenza della fosforilazione dell'ADP accoppiata con il consumo di ossigeno (ossidazione fosforilante) è stato dimostrato in tutte le cellule studiate anche se il rapporto ADP/O è calcolabile solo per alcune di esse (linfociti, macrofagi). In questi casi i rapporti ottenuti sono prossimi ai valori teorici qualunque sia il substrato di ossidazione utilizzato. I mitocondri delle cellule leucemiche hanno una maggiore attività di ossidazione rispetto alle corrispondenti cellule di riferimento. La determinazione dei coenzimi leucocitari mediante ciclo enzimatico (NAD, NADH, NADP, NADPH) ha mostrato i seguenti fatti: -- In genere, le concentrazioni di NAD rimangono costanti, quelle di NADH aumentano mentre quelle di NADP e NADPH diminuiscono durante l'incubazione dei polimorfi dei neutrofili in Dulbecco\ 's medio. -- I cambiamenti metabolici osservati durante l'endocitosi indotta dal calore di S. albi sono a favore della stimolazione simultanea della NADH ossidasi e della NADPH ossidasi nei polimorfi umani e della NADPH ossidasi nelle corrispondenti cellule degli essudati peritoneali nelle cavie.
[Tamponamento acuto: complicazione della rianimazione (perforazione cardiaca da un catetere succlavia)].Gli autori riportano un caso di tamponamento acuto a seguito della raccolta sotto pressione di una soluzione lipidica nel pericardio a seguito di perforazione dell'atrio destro da parte di un catetere succlavio Diagnosi e trattamento sono stati praticamente simultanei L'aspirazione della soluzione lipidica (450 ml) tramite il catetere ha confermato la diagnosi e trattato con successo il problema Per quanto riguarda il caso vengono discussi: - le caratteristiche diagnostiche del tamponamento acuto (segni aceziologici, clinici, emodinamici, elettrocardiografici e radiologici) - il meccanismo fisiopatologico del tamponamento con alterazioni della pressione intrapericardica e ventricolare/volume cura; - infine, la gestione del tamponamento.
[Incidenza di trombosi venose profonde in traumatologia e metodi di diagnosi precoce].In questo lavoro svolto presso il Centro traumatologico di Strasburgo, su In 227 pazienti operati per una frattura situata tra il bacino e il piatto tibiale, gli autori hanno cercato di evidenziare una trombosi degli arti inferiori. I mezzi di esplorazione comprendevano oltre agli esami ematochimici e biologici una sorveglianza isotopica, reografica e flebografica. queste ultime tre modalità di esplorazione sono particolarmente viste in questo studio, durante il quale è stato possibile dimostrare 44 p.100 manifestazioni tromboemboliche di cui 38 p.100 rilevate solo con il metodo isotopico, il controllo flebografico da parte sua confermando 80 p. . 100 dei casi di trombosi clinicamente non dichiarati.
[Uso del Cessna 206 per evacuazioni mediche].Il velivolo CESSNA 206 della Polizia Nazionale è stato utilizzato per effettuare evacuazioni mediche. Dopo aver descritto le specifiche di questo velivolo e sottolineato i suoi vantaggi (velocità, autonomia, prezzo di costo) e i suoi svantaggi (cabina molto piccola, necessità di atterraggi predisposti, livello sonoro) rispetto all'elicottero generalmente utilizzato in circostanze simili, gli autori concludono che questo nuovo velivolo potrebbe essere vantaggiosamente utilizzato per l'evacuazione di casi medio-gravi su distanze superiori a 200 chilometri a condizione che venga modificata la cabina. Ancor più che con l'elicottero, il pilota deve rimanere il giudice delle possibilità tecniche di volo dell'aeromobile, che non è pressurizzato e non dispone di apparecchiature per lo sbrinamento.
[Il respiratore MA 1 B. A proposito di un esperimento di 91.300 ore di funzionamento].Descrizione del principio di funzionamento e delle caratteristiche del Bennet Respiratore MA 1 B, che è del tipo a rilascio di volume con funzionamento elettromeccanico Studio dei vantaggi e degli inconvenienti Durante un esperimento che ha coinvolto 91.300 ore di utilizzo di 21 apparecchi, sono stati registrati 12 guasti riguardanti un componente meccanico o elettrico. Non è stato riscontrato alcun incidente nel funzionamento della parte elettronica del sistema di controllo o di sorveglianza. L'affidabilità dell'apparato appare nel complesso soddisfacente, tenuto conto delle sue notevoli possibilità di funzionamento.
[Uso di un nuovo anestetico locale a lunga durata d'azione, l'etidocaina nell'anestesia-rianimazione (Duranest)].Il nostro esperimento ha riguardato 123 pazienti a cui è stato somministrato questo nuovo preparato ad azione prolungata per vari tipi di anestesia locale e regionale. In 9 casi di somministrazione peridurale per più giorni, le dosi totali sono state molto elevate e la tolleranza eccellente. I risultati sono stati buoni per tutte le anestesie locali e regionali per le quali questo prodotto è stato utilizzato: - Buona tolleranza locale e generale - Breve periodo di latenza - Durata costantemente e regolarmente prolungata: una media di 3 ore per le forme non adrenaliniche e 5 ore per le forme adrenaliniche.
[2 casi di chilotorace causati da cateterizzazione dei grossi tronchi venosi sinistri].Gli autori presentano due casi di cateterizzazione quasi certa del dotto toracico, mediante cateteri per infusione posti nelle grosse vene alla base del collo (una volta nella giugulare interna sinistra, una volta nella succlavia sinistra) Le loro manifestazioni cliniche sono l'esistenza di un versamento pleurico rapidamente progressivo, a parte il decorso anomalo del catetere La rimozione del catetere è sufficiente per portare alla scomparsa della sintomatologia, per cui è difficile parlare di incidente in quanto tale, ma piuttosto di incidente. Questi incidenti potrebbero essere evitati con una radiografia sistematica dal momento in cui il catetere viene posto in posizione o il posizionamento di quest'ultimo sotto controllo da amplificatore di brillantezza.
Farmaci premedicanti e pH e volume del succo gastrico in pazienti pediatrici.Gli effetti della premedicazione sul volume e sul pH del succo gastrico sono stati valutati in cinque gruppi di 206 pazienti pediatrici sottoposti a procedure chirurgiche elettive: Gruppo 1 (Controllo) non ha ricevuto premedicazione, Gruppo 2 ha ricevuto morfina solfato e pentobarbital come premedicanti Gli altri gruppi hanno ricevuto, oltre a morfina e pentobarbital, atropina (Gruppo 3), scopolamina (Gruppo 4) , o glicopirrolato (Gruppo 5). Dopo l'intubazione endotracheale, gli aspirati gastrici sono stati esaminati per volume, pH e colore. Né la premedicazione con morfina e pentobarbital né l'aggiunta di atropina o scopolamina alla premedicazione hanno alterato significativamente il volume. Nei pazienti trattati con glicopirrolato, il volume è stato ridotta a meno di un terzo di quella dei pazienti del Gruppo 1 (P inferiore a 0,001) e la percentuale di pH\' superiore a 2,5 era significativamente maggiore rispetto ad altri gruppi. s di campioni non ottenibili e campioni con pH\'s superiore a 2,5 erano maggiori con atropina (32,0 per cento, P inferiore a 0,05) e glicopirrolato (58,1 per cento, P inferiore a 0,01). Nel 60 per cento dei campioni macchiati di bile, il pH\' era inferiore a 2,5. Si conclude che a causa del suo effetto inibitorio selettivo sulle secrezioni acide gastriche, il glicopirrolato sembra superiore ad altri farmaci anticolinergici. La riduzione del volume del succo gastrico e dell'acidità prodotta dal glicopirrolato avrebbe importanti implicazioni cliniche in caso di aspirazione accidentale. Si conclude inoltre che la colorazione biliare del contenuto gastrico non è un indicatore affidabile del pH del succo gastrico.
Una valutazione della memoria in anestesia regionale con lorazepam IV come premedicante.Quaranta pazienti volontari maschi sottoposti ad anestesia regionale sono stati valutati per la vigilanza e la memoria in un studio in doppio cieco che ha confrontato lorazepam IV (4 mg) più meperidina IM (50 mg) con placebo IV più meperidina IM (50 mg) come premedicanti. I dati non indicano effetti retrogradi significativi. Differenze significative in tutti i punti di misurazione da 20 minuti a 3 ore dopo la somministrazione endovenosa del farmaco hanno indicato una maggiore sedazione e un minor richiamo e riconoscimento di eventi e stimoli (uditivi e visivi) con la combinazione di lorazepam e meperidina rispetto a placebo e meperidina. Un numero significativo di pazienti di età superiore ai 40 anni è stato giudicato eccessivamente sedato dopo la somministrazione di lorazepam. Tuttavia, la respirazione, la pressione sanguigna e il polso non sembrano essere influenzati in modo differenziale dal lorazepam e non ci sono stati cambiamenti avversi anche nei pazienti considerati rischiato di essere sedato.
L'effetto dell'anestesia con enflurano, isoflurano, flurossene, metossiflurano e dietil etere sulla tolleranza all'ouabaina nel cane.Tolleranza digitale nei cani anestetizzati con enflurano, isoflurano, fluroxene, metossiflurano e dietil etere è stato confrontato con quello nei cani anestetizzati con pentobarbital. Il dosaggio di Ouabain necessario per causare tachicardia ventricolare era significativamente più alto di quello del pentobarbital con tutti gli agenti tranne il flurossene, così come la DL50. La potenza relativa di questi anestetici nel convertire la tachicardia ventricolare indotta da ouabaina in ritmo sinusale, in ordine di efficacia decrescente, era: dietil etere, metossiflurano, enflurano, fluorosseno, isoflurano, pentobarbital.
Indagine clinica su un nuovo anestetico endovenoso: etoxadrol cloridrato (CL-1848; U-37862A).Ventotto pazienti sono stati anestetizzati con etoxadrol come agente primario. L'anestesia prodotta era caratterizzata da profonda analgesia e amnesia, mentre i riflessi faringei e laringei, così come i riflessi della deglutizione e delle palpebre, sono rimasti attivi. La pressione sistolica, diastolica e del polso erano leggermente aumentate, con associate tachicardia e tachipnea. A una dose di 0,75 mg/kg ha prodotto anestesia per una media di 26 (da 14 a 53) minuti. Il nistagmo alternato è stato presente per diverse ore e associato a sogni e/o visioni che sono stati piacevoli per la maggior parte dei pazienti. Sei pazienti, tuttavia, hanno avuto sogni spiacevoli per un massimo di 24 ore. Un paziente a cui è stata somministrata una dose eccessiva (4,65 mg/kg) è stato catalettico, amnesico e analgesico per 6 giorni. Il verificarsi di sogni spiacevoli e aberrazioni in oltre il 20% dei pazienti suggerisce che il farmaco probabilmente ha poco utile lness in anestesia. Tuttavia, l'estrema sicurezza del farmaco (una DL50 pari a circa 20-40 volte la ED50) e l'analgesia prolungata hanno giustificato i test clinici. Non c'è stata evidenza di cambiamenti metabolici o sistemici del sistema d'organo da nessuno degli studi clinici di laboratorio.
Ipossiemia arteriosa causata da ketamina endovenosa.Ventotto pazienti sono stati anestetizzati con etoxadrol come agente primario. L'anestesia prodotta era caratterizzata da profonda analgesia e amnesia, mentre i riflessi faringei e laringei, così come i riflessi della deglutizione e delle palpebre, sono rimasti attivi. La pressione sistolica, diastolica e del polso erano leggermente aumentate, con associate tachicardia e tachipnea. A una dose di 0,75 mg/kg ha prodotto anestesia per una media di 26 (da 14 a 53) minuti. Il nistagmo alternato è stato presente per diverse ore e associato a sogni e/o visioni che sono stati piacevoli per la maggior parte dei pazienti. Sei pazienti, tuttavia, hanno avuto sogni spiacevoli per un massimo di 24 ore. Un paziente a cui è stata somministrata una dose eccessiva (4,65 mg/kg) è stato catalettico, amnesico e analgesico per 6 giorni. Il verificarsi di sogni spiacevoli e aberrazioni in oltre il 20% dei pazienti suggerisce che il farmaco probabilmente ha poco utile lness in anestesia. Tuttavia, l'estrema sicurezza del farmaco (una DL50 pari a circa 20-40 volte la ED50) e l'analgesia prolungata hanno giustificato i test clinici. Non c'è stata evidenza di cambiamenti metabolici o sistemici del sistema d'organo da nessuno degli studi clinici di laboratorio.
Ipotermia accidentale: riscaldamento del nucleo con bypass parziale.Tre pazienti con ipotermia profonda sono stati trattati mediante riscaldamento con bypass parziale. Due sono sopravvissuti e hanno problemi mentali e funzioni metaboliche. La rianimazione del paziente ipotermico deve essere affrontata con entusiasmo poiché l'esito è spesso molto migliore di quanto previsto dai segni vitali iniziali e dall'esame neurologico. Per evitare la fibrillazione ventricolare, il paziente deve essere maneggiato con delicatezza e deve essere fatto uno sforzo per mantenere il paziente ben ossigenato e pH normale. I gas ematici devono essere misurati spesso e corretti per la temperatura. Anche la concentrazione di potassio e lo stato di idratazione del paziente devono essere monitorati attentamente. Il riscaldamento di pazienti profondamente ipotermici può essere facilmente realizzato con un ossigenatore a pompa e calore scambiatore. Le indicazioni per questo metodo non sono stabilite dalla nostra piccola esperienza e dai pochi casi riportati in letteratura Certamente la fibrillazione ventricolare è un'indicazione convincente. Anche i pazienti con estremità congelate potrebbero trarre beneficio da questo metodo poiché teoricamente il recupero dei tessuti aumenterebbe. Infine, quei pazienti che non rispondono rapidamente al riscaldamento esterno possono essere a minor rischio di fibrillazione ventricolare se riscaldati tramite bypass.
Risposta clinica e livelli plasmatici: effetto della dose, schemi di dosaggio e interazioni farmacologiche sui livelli plasmatici di clorpromazina.Livelli plasmatici di clorpromazina (CPZ) di 50 pazienti ricoverati psicotici sono stati misurati mediante gascromatografia liquida; è stato anche valutato il progresso clinico di 29 di questi pazienti con psicosi acute. Livelli di CPZ di 50-300 ng/ml erano generalmente associati a un miglioramento clinico; c'era anche una relazione tra livelli di CPZ e aumenti in alcuni sintomi Il livello di 50-300 ng/ml è stato raggiunto meglio con dosi di 400-800 mg/die Trihexyphenidyl ha ridotto la CPZ plasmatica in media del 44,7% in 12 pazienti su 15 Una singola dose di 400-800 mg di La CPZ al momento di coricarsi ha prodotto stati stazionari uguali o migliori di quelli raggiunti con dosi multiple. I pazienti che non sono riusciti a raggiungere livelli di CPZ superiori a 70 ng/ml nonostante le dosi di 400-1000 mg/die ricevevano litio per tutto lo studio e si sono dimessi diagnosi di psicosi maniaco-depressiva, maniaco tipo e schizofrenia schizo-affettiva: una scoperta con implicazioni per la ricerca futura.
Effetti diretti di varie catecolamine sulla circolazione epatica nei cani.Come misurato da trasduttori elettromagnetici del flusso sanguigno, infusione diretta di epinefrina, norepinefrina e dopamina in la vena porta (PV) ha prodotto una diminuzione del 40-50% del flusso sanguigno arterioso (HA) epatico; l'isoproterenolo ha aumentato il flusso di HA di circa il 69%. Non sono state osservate variazioni nel flusso o nella pressione PV. L'infusione diretta di HA dei vasocostrittori ha ridotto il flusso di HA da quantità paragonabili a quelle che si verificano dopo l'infusione di PV. Tuttavia, l'infusione di HA di isoproterenolo ha aumentato il flusso di HA solo del 15% suggerendo una differenza nella popolazione di recettori beta nei due vasi. Quando infuso direttamente nell'arteria mesenterica superiore (SMA), l'adrenalina e la norepinefrina ha ridotto il flusso di SMA di circa il 45% e il flusso di PV del 20-25%, il flusso di HA è aumentato del 6-8% L'infusione di isoproterenolo e dopamina nella SMA ha aumentato il flusso di SMA del 115% e 206% e il flusso di PV del 60% e 70%, rispettivamente, mentre il flusso di HA è diminuito del 25% a e 50%. La pressione della vena porta è aumentata di meno di 3 mmHg. Il blocco dei recettori alfa e beta del fegato non ha modificato in modo significativo le alterazioni del flusso sanguigno arterioso epatico che erano secondarie ai cambiamenti del flusso sanguigno venoso portale. È probabile che la regolazione del flusso arterioso epatico risieda in meccanismi localizzati all'interno dei sinusoidi epatici.
Effetti dei transitori di temperatura sullo scambio di gas e sullo stato acido-base delle tartarughe.Ventilazione polmonare (VE), consumo di O2 (VO2) e CO2 produzione (VCO2) sono stati misurati continuamente su ciascuna delle 10 tartarughe, Pseudemys scripta elegans, a 20 gradi C, durante e per 1 ora dopo il riscaldamento a 30 gradi C e durante e per 1 ora dopo il raffreddamento a 20 gradi C. In sette dei animali, il sangue arterioso è stato prelevato ai tre plateau di temperatura Rapporti ventilatori (VE/VO2 e VE/VCO2) e tasso metabolico si sono adeguati prontamente al cambiamento di temperatura, stabilizzandosi a valori simili a quelli osservati in precedenza nelle tartarughe dopo 1 giorno o più a ciascuna temperatura Allo stesso modo, i valori medi di pH e PCO2 del sangue si sono conformati sia in valori assoluti che in dipendenza dalla temperatura ai dati precedentemente ottenuti da animali esposti alle varie temperature per periodi di tempo più lunghi o da sangue di tartaruga equilibrato termicamente in vitro. Il plasma totale [CO2] non ha cambiare in modo significativo y, suggerendo che lo scambio di CO2 allo stato stazionario ha prevalso durante l'esperimento. In accordo con questo, R(VCO2/VO2) non è cambiato significativamente durante la transizione di 20-30 gradi C; tuttavia, R è aumentato durante la transizione di 30-20 gradi C, suggerendo una possibile iperventilazione in questa fase. Concludiamo che il controllo respiratorio dello stato acido-base del sangue si adatta rapidamente al cambiamento di temperatura nella tartaruga e la sua regolazione riduce al minimo il disturbo al bilancio di CO2.
Alterato metabolismo del glicogeno epatico e ormoni glucoregolatori durante la sepsi.Livelli di glucosio, insulina e glucagone nel plasma della vena porta e di glicogeno epatico e AMP ciclico e le attività della glicogeno sintasi e della fosforilasi nel fegato sono state analizzate nei ratti controllo (CONT) e nei ratti infettati (INF) con Diplococcus pneumoniae Nei ratti INF rispetto ai ratti CONT, i livelli di insulina e glucagone erano più alti (8,12,24 h). L'attività della sintasi I era più bassa (8, 12, 24 h) e della fosforilasi più alta (12 e 24 h) nei ratti INF. I livelli di AMP ciclico erano più alti nei ratti INF a 12 e 24 h. L'attività totale della sintasi era inferiore nei ratti INF a 24 h. Il glucosio somministrato per via endovenosa ha aumentato il glicogeno meno nei ratti INF rispetto ai ratti CONT e la sintasi attivata e la fosforilasi inattivata in tutti gli animali tranne che a 24 h nei ratti INF Tuttavia, la perfusione in situ dei fegati a 24 h con glucosio nel tampone ha ridotto la fosforilasi attività in tutti gli animali e aumento dell'attività della sintasi I legami in CONT ma non in ratti INF.
Valutazione dello stato redox di polmone di ratto perfuso isolato.La reattività metabolica del tessuto polmonare all'inibizione del metabolismo ossidativo è stata determinata misurando lo stato redox del polmone di ratto isolato, perfuso e ventilato. Le variazioni dello stato redox sono state valutate mediante fluorescenza dalla superficie polmonare a lunghezze d'onda adatte a nucleotidi piridinici ridotti e mediante misurazione dei rapporti delle coppie redox nel tessuto polmonare rapidamente congelato. È stata osservata la massima variazione dello stato redox durante la ventilazione con monossido di carbonio; la fluorescenza superficiale è aumentata del 6,6%, il lattato/piruvato è aumentato di 5,8 volte, il glicerolo 3-P/diidrossiacetone-P è aumentato di quattro volte e il glutammato/alfa-chetoglutarato è raddoppiato. in variazioni inferiori al massimo nei rapporti di coppia redox fino a quando la PO2 alveolare non è stata ridotta al di sotto di 0,1 mmHg. ritenne che il mantenimento dello stato redox citoplasmatico dipendesse dal funzionamento di una "navetta" malato-aspartato. Il polmone perfuso isolato sembra adatto a studiare i fattori che controllano il metabolismo ossidativo parenchimale polmonare. I risultati sottolineano la necessità di ventilazione con CO per stabilire l'anossia intracellulare.
La valutazione del monitoraggio continuo della frequenza cardiaca fetale in gravidanza ad alto rischio.Si pensa che il monitoraggio elettronico della frequenza cardiaca fetale intrapartum del paziente ostetrico ad alto rischio È stato condotto uno studio prospettico randomizzato su 483 pazienti ostetriche ad alto rischio in travaglio, confrontando l'efficacia del monitoraggio fetale elettronico con l'auscultazione dei toni cardiaci fetali. gas e morbilità neonatale. Non ci sono state differenze negli esiti infantili in nessuna categoria misurata tra il gruppo monitorato elettronicamente e il gruppo auscultato. Il tasso di taglio cesareo è stato notevolmente aumentato nel gruppo monitorato (16,5 vs. 6,8% nel gruppo auscultato pazienti). I presunti benefici del monitoraggio fetale elettronico per migliorare l'esito fetale non sono stati trovati in questo studio.
Equilibrio acido-base fetale. I. Interdipendenza della PCO2 materna e fetale e concentrazione di bicarbonato.Questo documento presenta i risultati delle misurazioni dell'acido- stato basale e gassoso del sangue capillare materno e fetale al momento dell'amniotomia, prima dell'inizio del travaglio. Il coefficiente di correlazione tra concentrazione di bicarbonato materno e fetale è 0,6, e quello tra PCO2 materno e fetale è 0,31. così come da un'indagine di altri lavori nel campo, si propone che la diffusione dell'anidride carbonica attraverso la placenta non possa spiegare alcuni dei risultati e che le concentrazioni di bicarbonato si equilibrano attraverso la placenta.
Comportamento autoaggressivo nei bambini schizofrenici e ritardati.Il comportamento autoaggressivo è un problema con alcuni bambini che sono principalmente non verbali e poco funzionali. Questo comportamento ha comportato difficoltà di gestione del tutto sproporzionate rispetto alla sua incidenza. Nel presente documento, abbiamo considerato possibili paradigmi operante e rispondente strumentali all'acquisizione e al mantenimento di diverse topografie di comportamento autolesionista. Il supporto per questi paradigmi è stato raccolto dalla letteratura epidemiologica esistente che si occupa di esseri umani e primati e dalla letteratura relativa al trattamento del comportamento autoaggressivo Gli esiti immediati e i risultati del follow-up successivo sono stati presentati in funzione del tipo di intervento, della natura del rinforzo positivo utilizzato e della topografia della risposta autolesionista coinvolta. Sono state tratte le implicazioni per la ricerca e il trattamento futuri.
Compatibilità dell'iniezione di penicillina e acido ascorbico.La stabilità della penicillina G di potassio, USP, se miscelata con l'iniezione di acido ascorbico, USP, nel 5% È stata studiata l'iniezione di destrosio, USP. La variazione della concentrazione su un periodo di otto ore di potassio penicillina G nella miscela è stata determinata mediante il metodo di dosaggio colorimetrico dell'idrossilammina e il metodo di analisi microbiologico. La stabilità della penicillina non è stata influenzata negativamente dalla presenza di ascorbato di sodio. Le segnalazioni di incompatibilità tra penicillina e acido ascorbico sono una funzione del pH piuttosto che una caratteristica dello ione ascorbato. Gli articoli che riportano studi che coinvolgono l'acido ascorbico dovrebbero specificare se il lavoro si riferisce all'uso di acido ascorbico o iniezione di acido ascorbico, USP La confusione nella letteratura potrebbe essere ridotta cambiando il titolo ufficiale da Ascorbico Acid Injection a Sodio Ascorbato Injection.
Residui nei preparati antibiotici, ii: effetto del pH sulla natura e sul livello del particolato nelle soluzioni endovenose di cefalotina sodica.L'effetto del pH sul è stata studiata l'entità e la natura della contaminazione da particolato nelle soluzioni endovenose di cefalotina di sodio. L'entità della contaminazione da particolato è stata determinata mediante procedure di conteggio elettronico microscopico e automatico e la natura fisica delle particelle è stata determinata mediante microscopia elettronica a scansione. A bassi valori di pH (ad es. , 4.9--5.9), era preponderante un residuo amorfo, mentre a valori di pH più elevati (6,9--7,8), la natura gelatinosa del residuo scompariva e prevalevano piccoli particolati cristallini di varie dimensioni. Il livello di contaminazione del particolato (particelle oltre 10 mum in size) diminuiva con l'aumento del pH fino a un livello minimo compreso tra pH 7 e 8. Ai professionisti vengono dati consigli per quanto riguarda la preparazione di soluzioni di sodio cefalotina.
Residui in preparati antibiotici, i: studi al microscopio elettronico a scansione della topografia superficiale.Le caratteristiche superficiali dei residui ottenuti da diversi prodotti antibiotici commerciali sono state studiate utilizzando microscopia elettronica a scansione. Le microfotografie hanno mostrato la presenza di particolato con proprietà cristalline o amorfe con dimensioni delle particelle comprese tra 1 mamma e diverse mamme. Particolati cristallini granulari piccoli, ben definiti sembravano predominare nei residui di prodotti che sono stati lavorati in condizioni di pH ottimali La coalescenza o l'aggregazione di piccole particelle cristalline (1-10 mum) per formare masse più grandi è stata interpretata come un segno di instabilità dell'antibiotico. La maggior parte delle penicilline e delle penicilline semisintetiche ha prodotto residui caratterizzati come amorfi, squamosi, voluminosi e non distinti forma. Tali strutture sono state attribuite all'essiccazione di particelle gelatinose. Le possibili fonti e cause del l'occorrenza di questi particolati sono discussi. Sembra che in molti dei prodotti il particolato sia correlato al prodotto piuttosto che al processo e può essere coinvolto un degrado sottile. Ai professionisti vengono forniti consigli in merito alla preparazione, conservazione e somministrazione di questi prodotti.
Cambiamenti nelle concentrazioni di istamina nella mucosa e venosa durante l'instillazione di etanolo nello stomaco del cane.Concentrazioni di istamina nella mucosa gastrica, nel sangue delle vene gastriche e nello stomaco i contenuti sono stati misurati dopo instillazione di 300 ml di 40%, 20% e 12,5%, vol/vol, etanolo intragastricamente per 30 min nei cani anestetizzati. La concentrazione media di istamina nella mucosa gastrica, nel sangue della vena gastrica e nel contenuto gastrico nei cani trattati con il 40% di etanolo era significativamente più alto rispetto ai cani trattati con cloruro di sodio (NaCl). Gli studi seriali del sangue della vena gastrica dei cani trattati con etanolo dovrebbero aumentare significativamente le concentrazioni di istamina per 2 ore dopo l'instillazione di etanolo al 40%, ma meno aumenti a 20 e 30 min dopo l'instillazione del 12,5% e del 20%, rispettivamente. Non è stata osservata alcuna variazione dopo la somministrazione di 50% di glucosio e 25% di mannitolo. Morfologicamente, la mucosa gastrica dei cani trattati con etanolo era edematosa, congestionata e emorragico. La gravità di questi cambiamenti è aumentata con la concentrazione utilizzata. La mucosa dei cani trattati con cloruro di sodio, glucosio o mannitolo era normale. Vengono discussi i fattori che possono essere alla base dell'aumento delle concentrazioni di istamina nel sangue della vena gastrica e la possibile relazione di tale aumento con le alterazioni morfologiche.
Gli anioni organici inducono la secrezione colinica.Gli esperimenti sono stati condotti instillando soluzioni di prova nel colon pulito di ratti anestetizzati. Soluzioni di prova isotoniche ad un acido (2,9 Sono stati utilizzati pH % o neutro (7,0) e contenenti acido acetico o ioni acetato. A pH più basso, l'acido acetico è stato assorbito bene e il liquido assorbito dal colon. L'effetto secretorio non può essere riprodotto da soluzioni di acido cloridrico a pH 2,9. Fluido la secrezione indotta dall'acido acetico era associata allo scarico di muco dalle cellule caliciformi. L'interferenza dell'assorbimento del colon da parte dell'acido acetico potrebbe essere importante in alcune malattie diarroiche.