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Poliarterite nei bambini.La poliarterite è stata diagnosticata in tre bambine, di età compresa tra 9 e 10 anni, mediante biopsie renali e cutanee. Sono state trattate con una combinazione di prednisone (da 1,5 a 2 mg/kg) e ciclofosfamide (2 mg/kg) fino a 12 mesi. La malattia era grave in tutti e tre, complicata da ipertensione, convulsioni, infiltrati polmonari, insufficienza renale o allucinazioni. Tutti e tre i pazienti sono vivi e stanno bene senza sintomi residui o minimi da due a tre anni dopo l'interruzione della terapia. Il trattamento con corticosteroidi o con una combinazione di steroidi e farmaci immunosoppressori sembra migliorare considerevolmente la prognosi della poliarterite.
Avvelenamento accidentale da psicofarmaci nei bambini.Settantasette (0,24%) su 32.005 ricoveri al servizio pediatrico del Massachusetts General Hospital nel periodo 1962 fino al 1973 erano dovute ad avvelenamento accidentale. In 27 casi, riguardanti per lo più bambini di età inferiore ai 6 anni, sono stati implicati farmaci psicotropi. Questi includevano sedativi-ipnotici in sei casi, fenitoina in due, tranquillanti maggiori in cinque, antidepressivi in tre, stimolanti o allucinogeni in tre e miscele di farmaci in otto. Le analisi tossicologiche hanno contribuito poco alla diagnosi e alla gestione iniziale. Ad eccezione di un bambino che ha ingerito solfato ferroso, nessun paziente è stato gravemente intossicato e tutti si sono ripresi rapidamente senza sequele. un altro ospedale potrebbe aver distorto i risultati, i risultati suggeriscono che l'avvelenamento accidentale da farmaci psicotropi non è una delle principali fonti di morbilità infantile.
Un test automatizzato della glutatione reduttasi dipendente dalla flavina adenina dinucleotide per valutare la nutrizione della riboflavina.Un metodo automatico di analisi automatica che utilizza 5:5\'-ditiobis-2 -l'acido nitrobenzoico è descritto per determinare l'attività della glutatione reduttasi (BGR) nel sangue intero e per misurare l'attivazione in vitro del BGR con flavina adenina dinucleotide (FAD). L'attività del BGR è espressa come mumoli glutatione rigenerato da glutatione ossidato per ml di sangue intero (WB) o per g di emoglobina. L'effetto stimolatorio del FAD sull'attività del BGR diviso per l'attività senza FAD ha determinato il coefficiente di attività (AC). Abbiamo trovato che le concentrazioni di dosaggio di NADPH e glutatione ossidato di 0,100 mmole/litro e 0,250 mmole/litro, rispettivamente, in 0,1 mole/litro di tampone fosfato, pH 7,4, ha dato risultati coerenti quando WB, prima dell'analisi, è stato diluito 20 volte. I campioni WB da conservare vengono inizialmente diluiti 10 volte con acqua distillata e congelati. Prima dell'analisi, due a le aliquote del campione vengono diluite 2 volte, un'aliquota con acqua distillata e un'altra con 46 mumole/litro FAD. Con le diluizioni del campione e del collettore, le concentrazioni di FAD del test sono 1,0 mumole/litro: è stato dimostrato che le concentrazioni di test superiori a 5,0 mumole FAD/litro sono inibitorie. Abbiamo esaminato i campioni di sangue di 617 bambini di età compresa tra 6 e 60 mesi e abbiamo determinato che il normale intervallo di AC era compreso tra 1,00 e 1,35. Sei ratti svezzati (23 giorni di età), mantenuti con una dieta carente di riboflavina, hanno mostrato un AC medio di 1,23, 1,54, 2,02 e 2,41 a 23, 26, 30 e 36 giorni di età, rispettivamente. Sei ratti di controllo hanno mantenuto una CA di 1,23 +/- 0,05 (DS) durante lo stesso periodo.
Effetto della stimolazione del nervo vago sull'eccitabilità del ventricolo canino. Ruolo delle interazioni simpatico-parasimpatiche.L'effetto della stimolazione del nervo vago sull'eccitabilità ventricolare è stato studiata in 28 cani in varie condizioni di tono neurale adrenergico. Le curve forza-intervallo sono state delineate dall'apice dell'endocardio ventricolare destro con un catetere bipolare transvenoso. La stimolazione del nervo vago sia nei cani a torace chiuso che a torace aperto ha spostato la curva forza-intervallo6 a 8 msec più tardi nella diastole elettrica (P inferiore a 0,001). La stimolazione del ganglio stellato sinistro ha spostato la curva dell'intervallo di forza da 9 a 11 msec prima nella diastole (P inferiore a 0,001). L'effetto della stimolazione simultanea del ganglio stellato sinistro e del nervo vago è stato non significativamente diverso da quello della sola stimolazione del ganglio stellato sinistro L'influenza della stimolazione del nervo vago sulla curva forza-intervallo in condizioni basali è stata abolita da blocco beta adrenergico acuto con propranololo. Si conclude che la stimolazione del nervo vago influisce sull'eccitabilità ventricolare e sulla vulnerabilità opponendosi agli effetti del tono neurale simpatico.
[Mediatori della reazione allergica. Sostanza a reazione lenta (SRS-A)].La sostanza a reazione lenta dell'anafilassi (SRS-A) appartiene ad un gruppo di sostanze che producono una lenta contrazione progressiva e sostenuta di alcuni muscoli lisci. Viene rilasciato dall'interazione dell'antigene con determinati anticorpi; nell'uomo attraverso l'interazione con le IgE o reagine. L'SRS-A è un calore- sostanza labile, chimicamente instabile, di carattere acido, a basso peso molecolare. Non viene distrutta dall'azione di enzimi proteolitici. La sua struttura molecolare non è stata ancora chiarita. Non si trova accumulata nelle cellule ma sintetizzata e rilasciata da alcuni globuli bianchi principalmente da mastociti sensibilizzati e leucociti polimorfonucleati dopo sfidato con l'antigene specifico. L'SRS-A è un potente agente farmacodinamico, produce la contrazione della muscolatura liscia bronchiale in dosi di nanogrammi. Probabilmente svolge un ruolo predominante nella fisiologia Siopatologia dell'asma. La catena di reazioni chimiche suscitate dall'interazione antigene-anticorpo non si esaurisce con il rilascio di SRS-A e degli altri mediatori (istamina, fattore chemiotattico eosinofilo dell'anafilassi, ECF-A), anzi, questi mediatori soprattutto SRS-A inducono il rilascio di prostaglandine di tipo E (PGE1 e PGE2) che producono broncodilatazione e inibiscono il rilascio della stessa SRS-A, forse essendo un meccanismo di autoregolazione. Il PGF2a, invece, produce broncocostrizione. Il rilascio di SRS-A è inoltre inibito dall'azione della dietil-carbamazina e soprattutto dal cromoglicato di sodio e dal composto AH-7725. Dal punto di vista biochimico si riscontra che l'antigene Igells, una serina esterasi, avvia numerose reazioni chimiche la cui conseguenza è una diminuzione della concentrazione di cAMP. Questa riduzione del livello intracellulare di cAMP è seguita dalla sintesi e dall'escrezione dell'SRS-A nonché dall'aggregazione dei microtubuli e dall'escrezione dell'istamina immagazzinata. Le PGE (1 e 2) che agiscono su un tipo di recettore di membrana e le catecolamine beta-agoniste su un altro producono un fenomeno comune: l'attivazione dell'adenilciclasi che produce l'aumento della concentrazione di cAMP e inibisce il rilascio di mediatori dell'azione anafilattica reazione. Il sistema parasimpatico attraverso il suo mediatore chimico acetilcolina, tramite un meccanismo in cui l'adeniciclasi non è coinvolta è anche in grado di stimolare il rilascio di istamina e SRS-A. Qualcosa di simile accade con PGF2a. In conclusione, possono esistere meccanismi di autoregolazione per il rilascio di mediatori delle reazioni anafilattiche. La "perpetuazione" di una reazione asmatica significherebbe un fallimento di questi meccanismi di autoregolazione dovuto, ad esempio, a un blocco temporaneo dei recettori beta-adrenergici, a un'iperstimolazione degli alfa-recettori oa un'insufficiente produzione di PGE o a trasformazione della PGE in PGF.
Indagine citologica sull'infezione da Rickettsia tsutsugamushi di topi con diversa suscettibilità allotipica all'agente.Studi citologici e citochimici su topi bianchi svizzeri e di razza casuale suscettibili all'infezione da Rickettsia tsutsugamushi così come i topi resistenti C57 Black 6 e CBA hanno rivelato una chiara relazione tra la gravità dell'infezione e il modello di reazione dei macrofagi. In topi altamente sensibili l'infezione fatale è stata accompagnata dalla morte dei macrofagi e dalla necrotizzazione del peritoneale cellule di essudato. I topi resistenti non hanno mostrato segni clinici ma hanno sviluppato un'intensa reazione macrofagica e la massa principale delle rickettsie inoculate è morta nel sito di inoculazione, i macrofagi sono rimasti vitali. La fagocitosi e la digestione delle rickettsie sono state accompagnate da un marcato aumento delle attività idrolitiche e enzimi ossidanti-riduttori.
Diversa suscettibilità allotipica dei topi a Rickett-sia tsutsugamushi.Alcune linee di topi e topi allevati in modo casuale mostrano una diversa suscettibilità all'infezione da Rickettsia tsutsugamushi, manifestata principalmente nello sviluppo di un'infezione conclamata. Quest'ultima si manifesta in modo più marcato nei topi allevati casualmente e svizzeri, causando alti tassi di mortalità e un massiccio accumulo di rickettsie nel peritoneo. I topi neri rispondono all'inoculazione con un'infezione asintomatica senza rickettsie rilevabili al microscopio. L'infezione è accompagnata in entrambi i casi dalla risposta immunologica e dalla persistenza dell'agente nei topi. Uno dei meccanismi di resistenza a R. tsutsugamushi in alcune linee di topi è dovuto alla fagocitosi nel sito di inoculazione della massa principale di rickettsie da parte dei macrofagi che digeriscono l'agente e mantenere la loro redditività.
Livelli di immunoglobuline e anticorpi contro l'emoagglutinina e la neuraminidasi del virus dell'influenza nelle secrezioni nasali dopo infezione naturale.Lavaggi nasali (NW) da 16 pazienti affetti da influenza in il corso di un'epidemia nel novembre e dicembre 1974 sono stati esaminati per la presenza di virus influenzale, immunoglobuline (Ig) e titoli di anticorpi inibitori dell'emoagglutinazione (HI) e inibitori della neuraminidasi (NI). Virus influenzale identico a A/Port Chalmers/1 /73 (H3N2), sono stati rilevati livelli aumentati di IgA e occasionalmente IgG e anticorpi specifici nel NW. La dinamica della formazione di anticorpi HI e NI non differiva sostanzialmente, ma c'erano differenze individuali nei titoli e nella persistenza degli anticorpi. conteneva sempre un aumento dei livelli di anticorpi HI e NI. In alcuni casi, i titoli degli anticorpi contro la ribonucleoproteina virale non sono aumentati.
Sieroconversioni associate a virus respiratori in volontari con infezione influenzale sperimentale.Esami sierologici su 573 volontari con infezione influenzale sperimentale lieve e 86 volontari di un gruppo di controllo ricoverato in una clinica speciale ha rivelato un aumento significativo del titolo di anticorpi (sieroconversione) non solo ai virus influenzali A o B utilizzati per l'infezione sperimentale ma nel 23,3-29,8% dei casi anche ad altri virus respiratori. , le sieroconversioni associate sono interpretate come dovute a infezioni miste o sequenziali di diversa eziologia.
Alcune attività biologiche del siero anti-interferone di coniglio.Dopo immunizzazione prolungata di conigli con una preparazione di interferone di topo semipurificato in Freund\'s incompleta o Al- Span-Oil adiuvante, un'immunoglobulina neutralizzante l'interferone specifica è stata ottenuta dall'antisiero con una capacità di neutralizzare circa 49000 unità di interferone di topo per ml L'attività specifica dell'antisiero e dell'immunoglobulina è stata confermata in test in cui l'interazione degli anticorpi con la superficie cellulare L'antisiero (e l'immunoglobulina) neutralizzavano sia l'attività antivirale che quella di inibizione della crescita cellulare dell'interferone. Le frazioni "lenta" e "rapida" dei preparati di interferone purificato erano ugualmente sensibili all'effetto neutralizzante di anticorpi. D'altro canto, la reazione dell'interferone inattivato al calore con l'antisiero non ha diminuito l'attività neutralizzante di quest'ultimo, suggerendo una distruzione dell'interferone antisiero. siti genici.
Inibizione della replicazione del virus della malattia di Newcastle da parte della 6-azauridina. II. Combinazione di derivati della 6-azauridina e dell'adenina.Venticinque metaboliti (purine, pirimidine, nucleosidi e nucleosidi) sono stati testati per la loro azione simultanea con la 6-azauridina (AzUrd) nell'inibizione della replicazione del virus della malattia di Newcastle (NDV). Ad eccezione della deossiadenosina e dell'AMP ciclico, tutti i derivati naturali dell'adenina hanno esercitato un effetto sinergico con AzUrd come l'ATP La glutammina in combinazione con AzUrd non ha inibito la replicazione di NDV. L'effetto inibitorio della combinazione di AzUrd e derivati dell'adenina era reversibile con guanosina, uridina e citidina ma non con acido orotico o acido orotidilico.
L-glutammato-gliossilato aminotransferasi in Lactobacillus plantarum.glutammato-gliossilato aminotransferasi che media la reazione dell'acido gliossilico con l'acido glutammico per produrre glicina e alfa -l'acido ossoglutarico è stato isolato e purificato 84 volte da estratti di Lactobacillus plantarum. L'enzima purificato richiede l'aggiunta di piridossalfosfato e ioni magnesio per la sua attività. Il peso molecolare dell'enzima stimato dalla filtrazione su gel di Sepharose 4B è pari a 37.000. Costanti di Micaelis per gliossilato e glutammato corrispondono rispettivamente a 6,25 X 10 (-3) M e 2,75 X 10 (-3) M. Il pH ottimale nei tamponi fosfato e veronal è 8,0 e la temperatura ottimale 35--37 gradi C.
Studi cinetici sulla produzione di acido citrico da parte di Aspergillus niger. II. Il processo in due fasi.Un processo in due fasi di fermentazione dell'acido citrico sommerso con è stata calcolata la sostituzione del mezzo di crescita con mezzo di fermentazione. Sono stati determinati la composizione ottimale dei nutrienti minerali e il pH del mezzo di fermentazione della seconda fase del processo. Un'aggiunta di 0,5 g/l di NH4NO3 come fonte di azoto e 0,1 g/l l di MgSO4-7H2O come fonte di magnesio garantiva un'efficace conversione del saccarosio in acido citrico. Un'aggiunta a KH2PO4, invece, era decisamente sfavorevole in quanto riduceva notevolmente la resa del prodotto. Il mezzo per la seconda fase di fermentazione doveva essere acidificato a pH 2,2 circa, mentre l'acqua utilizzata per lavare il micelio dai resti del terreno di coltura dovrebbe avere un pH di 2,5--3,5. In queste condizioni, con una concentrazione iniziale di saccarosio di 100 g/l, dopo 132 ore di fermentazione a 26 gradi fino a 90 g/l di citrico si è ottenuto acido, che corrisponde ad una produttività superiore a 16 g/l. giorno. La più alta attività per la formazione di acido citrico è stata trovata nel micelio di tre o quattro giorni.
Microflora del suolo della rizosfera di piante provenienti da diversi habitat nel giardino botanico di Poznań.Sono state stimate l'abbondanza e l'attività di alcuni gruppi di microrganismi del suolo nella rizosfera di 13 piante provenienti da quattro diversi habitat in diverse date. Un ulteriore studio è stato effettuato sulla microflora della rizosfera di Ledum palustre da una torbiera. Sono stati stimati i numeri di batteri proteolitici, assimilatori di nitrati, denitrificanti e cellulolitici. L'intensità di è stata stimata l'ammonificazione, la nitrificazione e la crescita del Clostridium. Gli studi hanno rivelato che l'abbondanza e l'attività di tutti i gruppi di batteri studiati dipendeva dall'habitat. All'interno di un habitat, tuttavia, l'influenza della pianta era talvolta più pronunciata di quella del habitat stesso, in particolare sull'abbondanza di batteri proteolitici (Fig. 1). La data del campionamento ha avuto un effetto molto limitato sull'abbondanza di tutti i gruppi batterici studiati tranne il ce batteri llulolitici.
Proprietà della delta5-3beta-idrossisteroide ossidoreduttasi isolata da Streptomyces griseocarneus.Delta5-3beta-idrossisteroido ossidoriduttasi è stata estratta in tampone Tris contenente magnesio da sonicato Cellule di Streptomyces griseocarneus. L'enzima è stato parzialmente purificato (150 X) mediante cromatografia a scambio ionico e filtrazione su gel dopo frazionamento (NH4)2SO4. Dopo gel filtrazione su Sephadex da G-75 a G-200, la maggior parte dell'attività ha dato un picco di l'intervallo di frazionamento. L'enzima ottenuto dal gel ha prodotto piccole molecole di enzima su cromatografia ripetuta. È stato calcolato un peso molecolare da 32 a 36 000 per l'attività che appare nell'intervallo di frazionamento di Sephadex G-75 a G-200. L'enzima è altamente specifico per l'ossidazione irreversibile del gruppo 3beta-idrossile negli steroidi con un sistema transanellato A : anello B con doppio legame C5 o C6 I delta5-3-chetosteroidi vengono convertiti in delta5-3-chetosteroidi ad un te, ma l'attività dell'isomerasi non può essere separata dall'attività dell'ossidoreduttasi né mediante cromatografia né mediante inattivazione selettiva al calore. NAD, NADP, FMN o FAD non hanno influenzato l'attività, ma l'enzima è inattivo in assenza di ossigeno molecolare.
Proprietà dell'idrossisteroide ossidoreduttasi isolata dal lievito.I lieviti possono essere vantaggiosamente utilizzati per la produzione del 17beta-idrossi-derivato, da 3-metossi- Si formano anche 8,14-seco-1,3,5(10),9(11)-estratetraene-14,17-dione (14,17-dione) mentre si formano 14alfa-idrossi e 14alfa,17beta-diidrossi-derivati. Sono state studiate in dettaglio le proprietà biochimiche dei lieviti\' enzimi responsabili della formazione dei due monoidrossiderivati. Nell'estratto acellulare di Saccharomyces si è potuta rilevare la presenza di due idrossisteroidi ossidoreduttasi. Il primo enzima forma 3beta,17beta- diidrossi-derivato dal 5alfa-androstano-317-dione. Questo enzima è responsabile della formazione del 17beta-idrossi-derivato dal 14,17-dione. Il secondo enzima forma il 3alfa-idrossi-derivato dal 5beta-androstanedione e il 14alfa- idrossi-derivato dal suo 14,17-dione. Il cofattore di entrambi gli enzimi è il nucleotide piridinico. I due enzimi possedere proprietà diverse può essere selettivamente inibito.
Il meccanismo d'azione delle glicosidasi.Sono discussi i fattori che possono contribuire all'aumento della velocità osservato con l'idrolisi enzimatica rispetto a quella non enzimatica dei glicosidi. Viene descritta la natura del sito attivo come dedotta da studi di marcatura con beta-glucosidasi Viene proposto un meccanismo in due fasi che coinvolge uno ione glicosile stabilizzato da un enzima o un intermedio glicosil-enzima covalente Gli esperimenti con una beta-glucosidasi dalle mandorle mostrano che anche con 2-desossi glucosidi con buoni gruppi uscenti come aglicone che vengono idrolizzati 1000 volte più lentamente dei corrispondenti glucosidi, la fase di deglucosilazione è più veloce della scissione del legame glicosidico.
Caratteristiche cliniche negli avvelenamenti da antidepressivi triciclici con particolare riferimento all'ECG.Le variabili cliniche, e in particolare la loro relazione con l'ECG, sono state studiate in 153 casi di avvelenamento da antidepressivi triciclici (TCA). L'età media dei pazienti era di 34 anni. L'avvelenamento da amitriptilina ha rappresentato 112 (73%) dei casi e la dose media ingerita era di circa 1000 mg. Coma era presente in 87 pazienti (57%) e 40 al momento del ricovero (26%) avevano una pressione arteriosa sistolica (PA) inferiore a 100 mmHg. La PA sistolica al momento del ricovero era significativamente inferiore (p inferiore a 0,001) e la frequenza cardiaca (FC) superiore (p inferiore a 0.001) rispetto a quando i pazienti hanno lasciato il reparto. A parte un aumento della FC (maggiore o uguale a 90 battiti/min), che era presente nel 73% dei casi, il cambiamento ECG più caratteristico era un prolungamento del QRS (maggiore o pari a 0,11 sec), che si riscontra nel 42% dei casi. Circa la stessa proporzione ha mostrato un prolungamento del QT e un d Il 28% ha avuto un tempo di PQ prolungato. La media dei tempi QRS è stata di 0,11 sec. A differenza del tempo QT, il tempo QRS non era correlato all'HR. L'analisi statistica del materiale rispetto alle variabili cliniche (dose di TCA, PA, durata del coma, ecc. ) ha mostrato che il tempo QRS era strettamente correlato alla gravità dell'avvelenamento. Cinque pazienti (3) sono morti, tutti già al momento del ricovero hanno mostrato alterazioni avanzate dell'ECG con aritmie e un tempo QRS medio di 0,19 sec. Escludendo gli avvelenamenti da dibenzepina (4 casi, tutti fatali), il tasso di mortalità è stato dello 0,7%. Viene sottolineata l'importanza di un'elevata preparazione iniziale per le complicanze cardiache, così come il valore del tempo QRS come guida alla gravità dell'avvelenamento.
I riflessi vagali nella broncocostrizione che si verificano dopo l'aggregazione piastrinica intravascolare indotta.L'aggregazione piastrinica intravascolare indotta nei gatti da infusioni ev di collagene ha causato un aumento resistenza vascolare (PVR) e nelle resistenze polmonari non elastiche (RL), e una diminuzione transitoria della compliance polmonare dinamica (dyn CL). PVR,dyn CL e aggregazione piastrinica dopo infusioni di collagene non sono stati influenzati dalla vagotomia cervicale bilaterale e dall'atropinizzazione, mentre questi le procedure hanno ridotto l'aumento post-infusione di RL di circa il 50%. La somministrazione di indometacina ha inibito l'aggregazione piastrinica e la broncocostrizione dopo l'infusione di collagene. La presente indagine indica che l'aggregazione piastrinica intravascolare causerà una broncocostrizione riflessa mediata dalle fibre efferenti vagali.
Beta2-adrenocettori che facilitano la secrezione di noradrenalina dai nervi vasocostrittori umani.Esemplari bioptici isolati di vene e arterie periferiche umane, preincubati con 3H-(-)- noradrenalina (NA) per etichettare le riserve neurali di NA, sono stati utilizzati per studiare i beta-adrenocettori precedentemente trovati per aumentare la secrezione di 3H-NA evocata dalla stimolazione del campo elettrico dei nervi adrenergici di questo tessuto. L'aumento della secrezione indotta dalla stimolazione nervosa di 3H-NA causato da 0,04 muM isoprenalina è stato prevenuto da 1 muM propranololo. Questo farmaco beta-bloccante da solo leggermente ma significativamente depresso la secrezione di 3H-NA causata dalla stimolazione nervosa in assenza di isoprenalina. Mentre la secrezione di 3H-NA non è stato influenzato dai beta1-agonisti noti, è stato aumentato in modo dose-dipendente e reversibile da due diversi beta2-agonisti. L'effetto dell'isoprenalina sulla secrezione di 3H-NA non è stato alterato da un beta1-antagonista selettivo, ma fortemente ridotto o abolito da un farmaco beta2-bloccante. I risultati indicano che i beta-adrenocettori coinvolti nel controllo della secrezione di NA dai nervi vasocostrittori dei vasi sanguigni omentali umani sono stimolati solo in minima parte dall'NA secreto dai nervi, e quindi probabilmente non servono principalmente a mediare il feedback positivo locale controllo della secrezione del trasmettitore; i recettori sembrano essere di natura beta2.
Consumo di ossigeno e tensione tissutale di ossigeno durante la stimolazione adrenergica nel tessuto adiposo sottocutaneo canino.L'effetto della stimolazione del nervo simpatico (NS) e della noradenalina iniettata (NA ) o isoprenalina (Iso) su PVO2, VO2 e PtO2 è stato studiato in tessuto adiposo sottocutaneo canino isolato. Questi effetti sono stati confrontati con quelli prodotti dalla riduzione meccanica del flusso sanguigno (clamping). Il VO2 a riposo misurato 13,0 +/- 2,3 mumol X min-1 X 100 g-1 Quando il flusso sanguigno è stato ridotto del 20% o meno, non si è verificata alcuna variazione significativa del VO2 La riduzione del flusso sanguigno al 50% o meno del controllo da parte di NS ha causato una riduzione parallela del VO2, mentre il clampaggio ha ridotto il VO2 significativamente meno. NA ha dato effetti simili a quelli di NS. Dopo NS o NA c'è stato un periodo di iperemia e aumento dell'estrazione di ossigeno che ha più che compensato la diminuzione del VO2 durante la vasocostrizione. Tale aumento netto di VO2 non è stato prodotto dal clampaggio. Media PtO2 di controllo 29+/-2 mmHg. NA ridotto del 70% e il bloccaggio allo stesso livello di flusso sanguigno solo del 14% (p inferiore a 0,01). Pertanto, una semplice riduzione del flusso sanguigno ha scarso effetto sulla PtO2, mentre la riduzione del flusso sanguigno combinata con la ridistribuzione del flusso sanguigno e un aumento della domanda di ossigeno può portare all'ipossia tissutale.
Un complesso protamina-eparina formato in vitro come modello per un deposito a due scomparti per ammine biogene.La capacità di un in vitro- è stato studiato il complesso protamina-eparina (PHC) per immagazzinare cationi inorganici e ammine biogene. Il PHC si comporta come un sistema di stoccaggio a due compartimenti. Un compartimento corrisponde ai gruppi carbossilici terminali liberi della frazione protamina e ha le caratteristiche di uno scambiatore di cationi , con la capacità di legare cationi inorganici e ammine biogene in modo reversibile e piuttosto non selettivo. I cationi e le ammine biogene quindi competono e si spostano a vicenda dai comuni siti di legame ionici. I siti di legame nell'altro compartimento, corrispondenti principalmente al gruppi carbossilici della frazione eparinica, sono smascherati solo ad alte concentrazioni ioniche e mostrano un'affinità specifica per le ammine biogene. Lo stoccaggio delle ammine in questo compartimento del PHC è reversibile ma dipende non solo da sim legame ionico, ma evidentemente anche su altre forze attrattive, come il dipolo e il legame a idrogeno.
Effetto della radiazione ultravioletta sulla pinocitosi in Amoeba proteua.Irradiazione ultravioletta (UV) (4 000-10 000 erg X mm(-2) diminuita potenziale di membrana e resistenza in ingresso di Amoeba proteus e formazione indotta di canali pinocitotici. La pinocitosi submassimale indotta dalla luce UV si additiva alla pinocitosi indotta da K+ o Na+ e stimolata in presenza di EGTA. Non è stata inibita dalla presenza di La+++ o dal pretrattamento con dibucaina. Sotto questi aspetti e rispetto a pH e pCa ottimali, la pinocitosi indotta dai raggi UV. L'accumulo di K+ nella membrana dell'ameba dopo una dose di radiazione può spiegare la somiglianza tra la pinocitosi indotta dalla luce UV e i sali di potassio. Ca++ presente durante il periodo di irradiazione ha inibito l'effetto della luce UV. Invece il Ca++ applicato dopo l'irradiazione (1-20 mM) ha aumentato la formazione di canali. Questo effetto è stato stimolato dalla presenza di farmaci anestetici locali. Si suggerisce che alte dosi di luce UV possono in indurre la formazione di canali rilasciando Ca++ dalla membrana cellulare nella cellula (pinocitosi indotta dai raggi UV). Il Ca++ può essere rilasciato al momento dell'assorbimento della luce UV nella membrana così come durante il periodo di depolarizzazione che segue l'irradiazione. Basse dosi di luce UV possono consentire al Ca++ extracellulare di entrare nella cellula e stimolare la formazione di canali (pinocitosi indotta dal calcio). Il ditiotreitolo (1 mM) applicato dopo l'irradiazione ha depresso sia la pinocitosi indotta dai raggi UV che quella indotta dal calcio, quindi questi possono essere il risultato dello stesso cambiamento strutturale che comporta la formazione di legami disolfuro nella membrana.
L'effetto locale delle variazioni di pH nel liquido cerebrospinale sulle aree ventrolaterali del midollo allungato e sulla superficie del midollo spinale sull'attività dei nervi simpatici cardiaci e vertebrali.L'applicazione di liquido cerebrospinale acido a pH 6.8 alla superficie ventrale del midollo allungato nei gatti ha aumentato la pressione sanguigna arteriosa e l'attività del nervo vertebrale e ha migliorato la modulazione respiratoria dei nervi vertebrali e cardiaci. Liquido cerebrospinale alcalino a pH 7.7 applicato alla superficie ventrale del midollo allungato ha aumentato la pressione sanguigna arteriosa senza cambiamenti nell'attività del nervo simpatico Quando il midollo spinale è stato superfussed con liquido cerebrospinale acido artificiale a livello Th1 l'attività del nervo vertebrale e del nervo cardiaco è aumentata e la aumento della pressione arteriosa Gli autori discutono la possibilità di regolazione dell'attività dei neuroni simpatici nel midollo e nel midollo spinale mediante s di azione diretta di pH e pCO2 sui neuroni, o per effetto indiretto mediato da chemocettori superficiali del midollo allungato. Viene discusso anche il ruolo dei cambiamenti locali del flusso sanguigno cerebrale nel meccanismo di questi risultati.
Cambiamenti del sangue nei ratti privati dell'acqua.Per studiare le variazioni dei costituenti del sangue durante la privazione dell'acqua, i ratti sono stati privati dell'acqua da sei a dodici giorni. Nello studio sono stati inclusi anche animali di controllo e reidratati. Durante l'esperimento è stato osservato un aumento significativo di sodio, cloruro ed ematocrito. Calcio, bicarbonato e PCO2 sono aumentati a 10-11 giorni di trattamento. Potassio, fosforo inorganico, pH, eccesso di basi e la capacità del tampone ematico non è cambiata nel corso dell'esperimento. Gli animali reidratati si sono ripresi per controllare i livelli in tutti i componenti studiati, ad eccezione del pH e dell'eccesso di basi, che sono leggermente aumentati. Le variazioni di volume del plasma potrebbero spiegare solo parzialmente la variazione dell'elettrolito. La "disidratazione reazione" è considerato il principale meccanismo responsabile di questi cambiamenti. I livelli di ematocrito invariati negli animali privati dell'acqua suggeriscono che dopo 6 giorni di privazione dell'acqua non vi è alcuna ulteriore perdita di wat plasmatico. ehm. Le variazioni di bicarbonato e PCO2 hanno mostrato una buona relazione e possono spiegare valori di pH invariati e valori di eccesso di basi.
[Effetti delle variazioni acido-base sulla risposta cronotropa alla noradrenalina (autore\'s trad.)].L'effetto delle variazioni di pH prodotte da La variazione di NaHCO2 a pCO2 costante e la variazione di pCO2 a concentrazione di NaHCO2 costante è stata studiata nell'atrio di ratto battente spontaneo L'alcalosi prodotta sia da variazioni di pCO2 o di concentrazione di NaHCO2 ha aumentato la frequenza cardiaca basale spostando verso l'alto le curve dose-risposta verso la noradrenalina. sono state analizzate le curve di risposta per uno spostamento orizzontale, si è riscontrato che la dose necessaria per produrre un dato effetto era minore nell'alcalosi che nell'acidosi. Questo spostamento era significativo a ED10 e a ED30 quando la pCO2 è stata abbassata e a ED30, ED50 e ED70 quando la concentrazione di NaHCO2 è stata aumentata. Il blocco beta-adrenergico non ha impedito l'effetto di aumento della velocità dell'alcalosi. I nostri risultati suggeriscono che esiste un effetto sensibilizzante alla noradrenalina nell'alcalosi sovrapposto a un effetto diretto o f pH alla frequenza cardiaca.
Poliarterite nodosa associata a nosematosi nelle volpi blu.Le lesioni pato-morfologiche nella nosematosi di volpe (encefalitozoonosi) sono state studiate in un materiale comprendente 150 giovani blu volpi provenienti da 23 allevamenti diversi. La nasomatosi disseminata nei cuccioli di volpe blu era regolarmente accompagnata da una grave vasculite, che interessava le arterie di medio e piccolo calibro in vari organi. Il danno acuto si presenta sotto forma di angioite necrotizzante, con necrosi murale e talvolta trombosi conseguente. l'agente eziologico Nosema cuniculi, è frequentemente presente nelle pareti arteriose appena colpite, sia nelle cellule endoteliali che nelle cellule muscolari lisce mediali. Le lesioni più vecchie comprendono l'ispessimento fibroso nodulare delle pareti arteriose e la proliferazione intimale, a volte con obliterazione del lume. le lesioni arteriose sono morfologicamente equivalenti alla classica poliarterite nodosa.
Fosfatasi alcalina biliare canalicolare e malattia.La reazione della fosfatasi alcalina è normalmente assente nei canalicoli biliari umani, ma è stata trovata in 79 pazienti. Alla ricerca di un fattore causale comune, questi pazienti sono stati ulteriormente esaminati. Trentasette sono stati sottoposti ad autopsia. Le condizioni più comunemente associate al fenomeno erano tumori maligni con o senza coinvolgimento del fegato, malattie del collagene, ostruzione parziale di vecchia data del dotto biliare comune, e varianti genetiche dell'alfa-1-antitripsina. Nessun dato clinico o di laboratorio era comune a tutti i pazienti.
Sindrome di Down\' con mosaicismo X0/XY.Un bambino cinese di 5 mesi con sindrome di Down\' combinata e mosaicismo X0/XY Le caratteristiche fenotipiche del mongolismo sono classiche e non modificate. Gli effetti somatici del mosaicismo X0/XY sono quelli della mascolinizzazione incompleta con fallo corto, ipospadia, scroto bifido, seno urogenitale e testicoli infantili extra-addominali bilaterali. l'assenza di organi interni femminili e i segni della sindrome di Turner in questo paziente sono diversi dai precedenti casi riportati di disgenesia gonadica mista.
Flusso sanguigno cerebrale e scambio di ossigeno, glucosio, corpi chetonici, lattato, piruvato e aminoacidi nei neonati.Flusso sanguigno cerebrale (CBF) e le av-differenze cerebrali di ossigeno e substrati circolanti sono state misurate in neonati normocapnici durante l'anestesia generale prima della chirurgia elettiva per studiare possibili variazioni dipendenti dall'età. Il CBF è stato determinato da una piccola modifica della tecnica Kety-Schmidt dalle curve di desaturazione del protossido di azoto ( N2O) nel sangue venoso arterioso e cerebrale (N2O analizzato mediante gascromatografia su 15 campioni di sangue mul) dopo riduzione dell'N2O inalato dal 75 al 50%. La riproducibilità è stata del +/-4,6%. Lattato, piruvato e ossigeno sono stati determinati nel sangue intero e aminoacidi nel plasma mediante cromatografia a scambio ionico. Differenze av affidabili di glucosio, acetoacetato e D-beta-idrossibutirrato potrebbero essere calcolate dai valori plasmatici e dagli ematocriti. I valori medi di 12 bambini (età 11 giorni-12 mesi) erano: CBF 69 ml /100 g0min-1; captazione cerebrale (in mumole/100 g-min-1): ossigeno 104, glucosio 27, acetoacetato 0,9, D-beta-idrossibutirrato 2,3; rilascio cerebrale: lattato 2,4 e piruvato 0,8. Un assorbimento significativo di aminoacidi è stato riscontrato solo per l'istidina 0,95 e l'arginina 0,7. Sono state trovate correlazioni significative tra concentrazione arteriosa e scambio cerebrale per: ornitina, arginina, fenilalanina, acido aspartico, serina, glutammina e acetoacetato. CBF e lo scambio di substrato non erano correlati all'età all'interno del gruppo. I neonati avevano un CBF medio più alto e un maggiore assorbimento di corpi chetonici rispetto a quanto riportato negli adulti.
[Estrazione e concentrazione di tossine di Clostridium botulinum da campioni (autore\'s trad.)].Al fine di rilevare quantità minime di tossine di Clostridium botulinum in tessuto animale o campioni di cibo è necessario utilizzare un metodo di estrazione che determini la concentrazione delle tossine botuliniche. Negli esami attuali, sono stati utilizzati fagioli in scatola contaminati artificialmente per sviluppare una procedura adatta per l'estrazione e la concentrazione delle tossine botuliniche AE. La procedura consisteva di 4 passaggi: 1. I fagioli in scatola sono stati diluiti 1:2 con tampone fosfato 0,1 m pH 6,0 2. Il materiale diluito è stato omogeneizzato con un omogeneizzatore "Ultra-Turrax" per 20 secondi 3. Il materiale monogenato è stato centrifugato a 4000 rpm per 30 min 4. 15 ml di surnatante sono stati concentrati utilizzando una "camera di ultrafiltrazione Millipore" (con una membrana in grado di escludere tutto il materiale con peso molecolare superiore a 25.000). il volume terminale era di 0,5 ml. Dopo l'estrazione e la concentrazione, i campioni sono stati analizzati per la tossina botulinica nei topi.
Meningite batterica nell'infanzia e nella fanciullezza a Lusaka (Un anno prospettico robusto).In circa 10.000 ricoveri in un periodo di 12 mesi, presso University Teaching Hospital , Lusaka sono stati registrati 85 casi di meningite. I segni e i sintomi in questi pazienti non differiscono molto da altri studi simili in Africa. L'organismo più comune isolato era lo pneumococco. C'era un alto tasso di mortalità che era in larga misura dovuto al fatto che i genitori non portavano i loro figli in ospedale abbastanza presto da poter istituire un trattamento medico. Ciò è confermato dal fatto che il 50% dei bambini con meningite è morto entro le prime 24 ore. La proteina del liquido cerebrospinale e la conta dei globuli bianchi periferici possono avere un valore prognostico. , paralisi dei nervi cranici idrocefalo e versamento subdurale erano le complicanze più comuni.
Studi biochimici e istochimici su fosfomonoesterasi non specifiche del verme renale dei suini Stephanurus dentatus (Diesing, 1839).Studi biochimici e istochimici sono stati effettuati su fosfomonoesterasi acide e alcaline aspecifiche di S. dentatus. Le due forme di fosfomonoesterasi acide sono state trovate attive a pH 4.0 e 6.0. Il pH ottimale per le due forme di fosfomonoesterasi aklaline si trova a 8.0 e 10.0. Studi sulla distribuzione dell'acido e fosfomonoesterasi alcaline in vari tessuti hanno rivelato un'abbondanza di fosfomonoesterasi acida in varie parti del canale alimentare e in vari organi dell'apparato riproduttivo. I dotti escretori mostrano solo attività fosfomonoesterasica alcalina.
Fotoreazioni del citocromo b6 e del citocromo f nei frammenti del fotosistema I dei cloroplasti.I frammenti del fotosistema I sono stati preparati mediante trattamento con digitonina di cloroplasti di spinaci. Il potenziale del punto medio di il citocromo b6 nei frammenti è vicino a 0V, mostrando una transizione di un elettrone. Nessun citocromo b559 è stato rilevabile, né negli spettri di assorbimento della differenza né nelle variazioni di assorbanza indotte dalla luce. In assenza di cofattori aggiunti si può osservare solo la fotoriduzione del citocromo b6. Questo la fotoriduzione è stimolata dalla ferredossina. La ferredossina-NADP+ reduttasi sembra non essere coinvolta nella riduzione del citocromo b6. La fotoossidazione del citocromo b6 dipende dall'aggiunta di plastocianina ed è inibita da DBMIB, un antagonista del plastochinone. L'aggiunta di plastocianina ripristina anche la fotoossidazione del citocromo f, reagendo abbastanza specificamente in concentrazioni circa equimolari per legare il citocromo f. La stimolazione dell'ossidazione del citocromo f è abolita da un anticorpo preparato contro la plastocianina, indicando una posizione superficiale della plastocianina nelle membrane trattate con digitonina. La cinetica bifasica della riduzione del buio del citocromo f da parte dell'ascorbato indica che parte di questo citocromo f è relativamente inaccessibile nella membrana. Dopo la preilluminazione si osserva una riduzione monofasica e la componente lentamente ossidata è assente. L'illuminazione in presenza di plastocianina provoca una rapida e completa riduzione del citocromo f, suggerendo l'equilibrio del citocromo f con l'aggiunta di plastocianina, residente sulla superficie della membrana. Sembra che la luce attinica causi conformazione e/o cambiamenti strutturali nella membrana di questi frammenti di digitonina, influenzando l'asseccibilità del citocromo f.
Sul meccanismo della inattivazione fotodinamica del lisozima sensibilizzata dall'arancia acridina. I. Cinetica di base.La cinetica della disattivazione fotodinamica del lisozima in presenza di l'arancia acridina come sensibilizzante è stata studiata in dettaglio variando ossigeno, proteine, concentrazione di colorante, forza ionica e valore del pH. La cinetica può essere approssimativamente descritta come un processo di velocità di pseudo-primo ordine. Cambiare il solvente da acqua a D2O o da esperimenti di quenching in presenza di ioni azide si potrebbe dimostrare che la disattivazione del lisozima è causata esclusivamente dall'ossigeno singoletto. L'ossigeno eccitato avviene attraverso lo stato di tripletta del colorante con una costante di velocità notevolmente inferiore a quella attesa per un controllo diffusionale reazione L'ossigeno singoletto reagisce chimicamente (disattivazione, k=2.9 X 10(7) m(-1) sec(-1)) e fisicamente (processo di spegnimento, k=4.1 X 10(8) m(-1 ) sec(-1)) con l'enzima. L'analisi cinetica mostra che la reazione chimica aggiuntiva tra ossigeno singoletto e lisozima avrebbe solo poca influenza sulla cinetica della disattivazione fintanto che i loro prodotti sarebbero enzimaticamente attivi e le loro costanti cinetiche sarebbero inferiori a circa 1 X 10(8) m(-1) sec (-1)).
[Esami batteriologici della secrezione bronchiale in bambini con malattia broncopolmonare aspecifica (trad.autore\'s)].Mille campioni di secrezione bronchiale da bambini con malattie respiratorie non specifiche sono stati esaminati batteriologicamente. Nonostante la natura complessa delle malattie respiratorie acute e soprattutto croniche, il ruolo dell'infezione batterica non deve essere sottovalutato. Il trenta per cento dei campioni era sterile. Oltre il 20 per cento delle specie batteriche isolate dalla secrezione bronchiale erano patogene. Relativamente frequente era l'isolamento di E. coli e di stafilococchi patogeni. Quasi il 40 per cento di tutti i batteri isolati erano streptococchi alfa-emolitici. Questi ultimi sono stati riscontrati più frequentemente nei bambini con, rispetto ai bambini senza alterazioni broncologiche. Viene discussa la patogenicità degli streptococchi alfa-emolitici nell'albero bronchiale.
Implicazione della rifampicina-chinone nel legame irreversibile della rifampicina alle macromolecole.1. Quando la [3H]rifampicina viene incubata con microsomi di fegato di ratto o ratto fegato omogenato, quantità minori si legano irreversibilmente alle proteine. Questo effetto non dipende dalla presenza di NAD, NADH, NADP o NADPH. 2. La rifampicina è autoossidata a pH fisiologico. Il prodotto dell'autossidazione, rifampicina-chinone, se incubata con albumina , mostra un legame irreversibile molto maggiore alla proteina rispetto al composto progenitore rifampicina. Quindi si conclude che la rifampicina può legarsi irreversibilmente alle proteine in una reazione non enzimatica dopo l'autossidazione alla rifampicina-chinone 3. La rifampicina-chinone si lega anche irreversibilmente all'RNA e poli-L-lisina, se incubati con questi composti. Ciò suggerisce che nel legame siano coinvolti gruppi amminici liberi di proteine o RNA 4. 48 h dopo il dosaggio di [3H]rifampicina (33 mg/kg) ai ratti, 29 -2 +/- 4-1 (SD) pmol sono legati irreversibilmente t o 1 mg di RNA epatico, da 15,8 +/- 8-1 pmol a 1 mg di proteine epatiche e da 5-0 +/- 0-47 pmol a 1 mg di proteine nel tessuto cerebrale. 5. Microsomiale NADPH-citocromcina-chinone a rifampicina. Il KM di questa reazione è 10(-4) M. L'induzione della NADPH-citocromo c reduttasi mediante pretrattamento di ratti con 20 mg/kg di rifampicina nell'arco di 5 giorni determina un corrispondente aumento dell'aumento della riduzione della rifampicina-chinone. 6. Questi risultati suggeriscono che la NADPH-citocromo c reduttasi microsomiale previene l'accumulo di quantità maggiori di rifampicina-chinone potenzialmente tossici mediante riduzione a rifampicina.
[Terapia infusionale con mif (fattore di inibizione dei melanociti) nella malattia di Parkinson (transl.autore\')].Sulla base dei rapporti in dalla letteratura e dalla nostra stessa esperienza clinica sembra che il fattore di inibizione dei melanociti (MIF) sia un agente terapeutico molto promettente nella gestione del morbo di Parkinson Oltre a considerazioni teoriche relative alla sfera biochimica e fisiopatologica, la questione dell'attuale dosaggio per la clinica l'uso sembra essere della massima importanza. Siamo del parere che il dosaggio attualmente impiegato di 400 mg al giorno sia ancora troppo basso. Pertanto, la presente indagine sarà continuata al fine di stabilire il dosaggio ottimale per il massimo effetto terapeutico.
[Terapia immunosoppressiva nella malattia renale (autore\'s transl)].Poiché è stato scoperto che gli eventi immunologici sono patogeneticamente coinvolti in varie forme di glomerulonefrite, corticosteroidi e farmaci immunosoppressori sono stati introdotti nel trattamento della nefrite. Tuttavia, contrariamente ai risultati nella sindrome nefrosica pediatrica, studi controllati e multicentrici con terapia immunosoppressiva hanno rivelato risultati deludenti nella gestione della malattia renale negli adulti. Risultati significativamente migliori sotto terapia immunosoppressiva , sono stati osservati solo nella sindrome nefrosica basata sulla nefrite cosiddetta "nessuna modifica" o "modifica minima". Nella glomerulonefrite cronica membranosa e proliferativa il decorso clinico nel gruppo trattato non era statisticamente diverso da quello della glomerulonefrite cronica gruppo non trattato In alcuni disturbi del tessuto connettivo, come il lupus eritematoso sistemico, la poliarterite nodosa e la granulomatosi di Wegener\'s, i corticosteroidi e gli agenti immunosoppressivi sembrano esercitare un effetto favorevole sul decorso della malattia renale. Sono stati presentati anche risultati incoraggianti riguardanti l'uso combinato di farmaci immunosoppressori, anticoagulanti e inibitori dell'aggregazione piastrinica nella glomerulonefrite mesangiocapillare (membrano-proliferativa) e nella nefrite rapidamente progressiva. Diversi fattori come l'immunosoppressione incompleta, la tolleranza all'antigene indotta da farmaci e l'aumento della formazione di immunocomplessi come conseguenza dell'inibizione della produzione di anticorpi possono contribuire al fatto che molti pazienti con diverse forme di nefrite non beneficiano della terapia immunosoppressiva a lungo termine.
[Gli effetti del flunitrazepam (rohypnol) sulla respirazione (autore\'s trad.)].Gli effetti del flunitrazepam (0,03 mg/kg somministrato per via endovenosa per un periodo di due minuti) è stato studiato in 11 volontari sani con funzione polmonare normale. I tracciati spirometrici sono stati registrati continuamente dal Siregnost FD 40 e le misurazioni dei gas ematici sono state eseguite dall'analizzatore di gas Harnoncourt AVL. Il flunitrazepam ha prodotto un caratteristico pattern ciclico di ipoventilazione/iperventilazione della durata di 15 min. , seguiti da ritmi di sonno tranquilli. La durata d'azione è stata di 20 min. Si è verificata una diminuzione significativa della PCO2, mentre la tensione di CO2 ha mostrato un aumento significativo. Le variazioni del pH erano in accordo con l'acidosi respiratoria. Non si è verificata apnea dopo la somministrazione di flunitrazepam.
[La diagnosi di colestasi: lipoproteina X (LP-X) (author\'s transl)].La specificità diagnostica di un nuovo metodo per rilevare l'ittero ostruttivo mediante determinazione della lipoproteina X (LP-X) è stato testato in 144 pazienti con diversi tipi di malattie epatiche e confrontato con i consueti test chimici "ittero ostruttivo specifico", come bilirubina, SGOT, SGPT, fosfatasi alcalina, LAP e gamma-GT Il test LP-X è stato eseguito utilizzando il kit di test all-in LP-X Rapidophor" per elettroforesi a bassa tensione di Immuno AG/Wien. I risultati sono stati correlati con la classificazione istologica del campione di biopsia epatica. Nell'82% dei casi istologicamente accertati di ittero ostruttivo l'esito del test LP-X è stato positivo, mentre nel 98,5% dei casi istologicamente negativi l'esito del test LP-X è stato negativo. Quindi, questo metodo LP-X si è dimostrato superiore ai metodi chimici nel fornire una risposta netta positiva o negativa alla presenza di colestasi. Inoltre, il test LP-X era adatto per indagini di follow-up a lungo termine di pazienti con ittero ostruttivo.
[L'equilibrio acido-base nel liquido cerebrospinale dei soggetti normali meccanismi di regolazione (autore\'s trad.)].1. L'equilibrio acido-base (pH, pCO2 e HCO-3) di 23 soggetti normali è stata determinata sia nel sangue capillare arterioso che nel liquido cerebrospinale 2. Sono state riscontrate correlazioni statisticamente significative (determinate mediante correlazione di rango di Spearman) tra: pCO2 nel sangue arterioso e pH del liquido cerebrospinale (Rs=--0.372, p è inferiore a 0,05), pCO2 nel liquido cerebrospinale e pH del liquido cerebrospinale (Rs=--0.421, p è inferiore a 0,05), HCO-3 nel liquido cerebrospinale e nel sangue arterioso ( Rs=0.623, p è inferiore a 0,05), pH del sangue e pH del liquido cerebrospinale (Rs=0.485, p è inferiore a 0,025), pCO2 nel liquido cerebrospinale e HCO-3 nel liquido cerebrospinale (Rs=0.559, p è inferiore a 0,005). 3. Vengono discussi i meccanismi regolatori dell'equilibrio acido-base del liquido cerebrospinale in soggetti normali e anche in pazienti con disturbi extra-neurali o del SNC.
Il pattern elettrolitico della secrezione gastrica della scimmia cercopiteco.La produzione di acido, cloruro, sodio e potassio nei lavaggi gastrici della scimmia cercopiteco sono stati misurati in condizioni basali e stimolando la secrezione con due dosi di pentagastrina (una dose submassimale, l'altra dose sovramassimale). La produzione durante lavaggi con diverse soluzioni elettrolitiche deboli (5 mEq/1 NaC1, KCl o HCl o 0,36 M glicina). I risultati mostrano che la composizione della secrezione era indipendente dalla composizione del liquido di risciacquo nello stomaco, tranne che la glicina stimolava la secrezione acida e di potassio quando la scimmia non era stimolata dalla pentagastrina. Queste osservazioni e la composizione del secrezione gastrica della scimmia Vervet sono discussi alla luce dei modelli "bicomponenti" e "scambio" di secrezione gastrica, e che confrontati con il succo gastrico ottenuto da esseri umani in condizioni simili ns.
[Studio comparativo del valore ottimale del pH della fosfatasi alcalina sierica in varie specie di animali da allevamento].Sono state condotte indagini sulla fosfatasi alcalina in i sieri di bovini, equini, suini, ovini, caprini e polli, il valore del pH del tampone utilizzato è 9,0-9,8-10,0-10,2-10,6 e 11,0 e il metodo applicato è quello di Richterich. è stato riscontrato che la fosfatasi alcalina sierica nei vari animali da allevamento e uccelli era più attiva varia in larga misura. -10,2; cavalli,--9,8; polli,--10,6.
[Valutazione clinica dell'efficacia di diversi interventi chirurgici nell'ulcera peptica].Lo stato clinico, l'attività secretoria e motoria dello stomaco sono stati studiati in 213 pazienti che mostravano malattia ulcerosa prima dell'intervento chirurgico e in 153 pazienti operati. I risultati più favorevoli sono stati osservati dopo la resezione di due terzi dello stomaco nella modifica di Billroth I con conservazione del compressore pilorico. Questi pazienti insieme alla soppressione della formazione di acido hanno mantenuto la normalità evacuazione parziale del contenuto gastrico. La vagotomia selettiva con resezione dell'ulcera e piloroplastica in un certo numero di pazienti non ha prodotto una riduzione considerevole della formazione di acido sia nel primo periodo postoperatorio che in termini successivi.
Stimolazione sperimentale dell'immunità cellulo-mediata senza stimolazione concomitante dell'immunità umorale in topi immunosoppressi del trapianto contro l'ospite.L'effetto immunosoppressivo del trapianto- La reazione versus-host (GVH) è stata studiata in topi CBA XA F1 (CAF1) resi immunologicamente non responsivi dall'iniezione di cellule linfoidi parentali di ceppo A (topi GVH). La soppressione delle risposte immunitarie sia cellulo-mediate che umorali è stata dimostrata da la sopravvivenza prolungata degli allotrapianti cutanei C57BL/6 (B6) e dall'incapacità dei topi GVH di produrre anticorpi rilevabili dopo stimolazione con eritrociti di pecora (SRBC). La stimolazione appropriata dei topi GVH ha indotto reazioni immunitarie cellulo-mediate agli antigeni xeno- e allogenici mentre le risposte immunitarie umorali agli stessi antigeni sono rimaste soppresse. Sfide multiple dei topi GVH con tessuto B6 hanno causato un rapido rigetto dei successivi innesti cutanei B6 ma non sono riuscite a stimolare la produzione di qualsiasi anticorpi rilevabili contro antigeni di allotrapianto B6. La sensibilizzazione dei topi GVH con SRBC nell'adiuvante completo di Freund\' ha stimolato una risposta di ipersensibilità ritardata all'SRBC, sebbene non sia stata rilevata alcuna risposta umorale all'SRBC, anche dopo tre sfide con SRBC. I risultati sperimentali sono discussi in termini di un modello proposto per l'immunosoppressione indotta da GVH.
Considerazioni teoriche sul controllo vettoriale della filariosi.Per assistere nella valutazione dei progressi del controllo vettoriale della filariosi viene costruito un modello teorico, utilizzando la retrospettiva dati sui contagiati portati in una situazione di assenza di vettori. Ciò dimostra che la diminuzione della microfilaremia non è regolare, ma è graduale per i primi 3 anni e poi più rapida, fino a zero intorno ai 10 anni. Viene fatta una stima del livello a cui il vettore deve essere ridotto prima che cessi la trasmissione della filariosi, dimostrando che il grado di efficienza richiesto è notevolmente inferiore a quello della malaria.
Per assistere nella valutazione dei progressi del controllo vettoriale della filariosi viene costruito un modello teorico, utilizzando la retrospettiva dati sui contagiati portati in una situazione di assenza di vettori. Ciò dimostra che la diminuzione della microfilaremia non è regolare, ma è graduale per i primi 3 anni e poi più rapida, fino a zero intorno ai 10 anni. Viene fatta una stima del livello a cui il vettore deve essere ridotto prima che cessi la trasmissione della filariosi, dimostrando che il grado di efficienza richiesto è notevolmente inferiore a quello della malaria.
Tipi sierologici di Diplococcus pneumoniae isolati dal tratto respiratorio di bambini con fibrosi cistica e bambini con altre malattie.La distribuzione dei tipi sierologici di D. pneumoniae è stato studiato in 40 ceppi isolati da 26 bambini con fibrosi cistica e 57 ceppi isolati da 39 bambini con altre malattie. Tutti i ceppi sono stati isolati dall'espettorato o dalla secrezione tracheale. I ceppi di pazienti con fibrosi cistica appartenevano a 14 diversi tipi sierologici, i più prevalenti erano 19F, 19A e 3. I ceppi dell'altro gruppo di bambini appartenevano a 20 diversi tipi sierologici, i più prevalenti erano 23F, 19F e 11A. Le differenze tra i due gruppi di pazienti per quanto riguarda le prevalenze dei tipi erano piccole e si conclude che nessun tipo sierologico speciale di D. pneumoniae è associato alla fibrosi cistica.
Differenziazione eritroide di cellule staminali emopoietiche fetali, neonatali e adulte.La rigenerazione eritroide è stata studiata in topi irradiati letalmente sottoposti a trapianti contenenti un numero equivalente di cellule staminali emopoietiche (cioè CFU) da fegato fetale, midollo neonatale o midollo adulto Il midollo adulto è stato prelevato da topi di controllo normali, le cui CFU per la maggior parte non erano in ciclo cellulare attivo, nonché da gruppi trattati con fenilidrazina le cui CFU erano in condizioni simili di proliferazione (cioè circa il 40-50% nella SINTESI DEL DNA) COME QUELLI DERIVATI DAL FEGATO FETALE E DAL MIDOLLO NEONATALE L'incorporazione del radioferro (59Fe) splenico e femorale è stata misurata ad intervalli dopo il trapianto e si è scoperto che iniziava prima nei topi a cui era stato somministrato fegato fetale, quindi negli animali a cui è stato somministrato midollo neonatale e più tardi nei riceventi di midollo adulto. I reticolociti periferici hanno mostrato un modello di recupero simile. I dati qui riportati suggeriscono che le differenze nella rigenerazione eritroide evocati da trapianti di fegato fetale, midollo neonatale o midollo adulto, non sono attribuiti esclusivamente al grado di proliferazione nel compartimento delle cellule staminali pluripotenziali. Questi dati possono, tuttavia, suggerire un tempo di raddoppio più breve per le cellule che comprendono i compartimenti eritroidi fetali e neonatali.
L'idrolisi e l'assorbimento dei folati coniugati nell'uomo.Dopo l'ingestione di PteGlu3 sintetico in dosi fisiologiche, le forme di folati sono state studiate nel plasma ottenuto da sangue della vena porta. La coniugazione plasmatica è stata inibita dalla rapida denaturazione termica. Le forme di folato sono state saggiate con L. casei e S. faecalis e identificate mediante cromatografia su strato sottile (biautografia). Il folato mono e diglutammico è stato dimostrato nel plasma portale, indicando che l'idrolisi intestinale precede l'assorbimento dei folati coniugati. L'attività pteroilpoliglutammato idrolasi nel tratto gastrointestinale umano è stata studiata. L'attività è stata dimostrata nel succo gastrico, nel succo pancreatico e nella mucosa intestinale. L'attività più alta è stata trovata nel succo pancreatico con un pH -ottimale di 4,5. Nel succo gastrico il pH ottimale per l'enzima era 3 e l'attività metà di quella riscontrata nel succo pancreatico. Tuttavia, in considerazione dei volumi di questi fluidi producono ed ogni giorno, l'attività a pH fisiologico potrebbe essere sufficiente per idrolizzare l'assunzione giornaliera di folati coniugati in quantità di circa 500 mug.
Risposta all'acidificazione del digiuno nell'uomo. I. Cambiamenti nella composizione del perfusato.Lo smaltimento digiunale dell'acido perfuso è stato studiato in 11 soggetti di controllo e 12 pazienti con ulcera duodenale. Si è riscontrato che la capacità di smaltire l'acido era saturabile ed era inferiore al controllo nei pazienti con ulcera duodenale. Quando il carico di acido era piccolo, tutto l'acido scompariva dal digiuno e il bicarbonato di sodio poteva essere aspirato. Durante la perfusione acida si verificava secrezione di acqua ed elettroliti nel digiuno se il carico di acido superava la capacità dissipativa L'infusione endovenosa sovrapposta di secretina e colecistochinina aumentava l'eliminazione dell'acido, in particolare nei pazienti con ulcera duodenale, e aumentava la velocità associata di secrezione di acqua ed elettroliti o cambiato l'assorbimento netto alla secrezione netta. Concludiamo, in primo luogo, che l'acido viene rimosso dal digiuno da bicarbonato secreto, e in secondo luogo che l'intero piccolo superiore inte stinto di pazienti con ulcera duodenale è funzionalmente anormale.
Dipendenza del liquido cerebrospinale dal bicarbonato plasmatico durante l'ipocapnia e l'ipocapnia ipossiemica.In precedenza abbiamo dimostrato che la compensazione del pH è simile nel liquido cerebrospinale e nel sangue arterioso durante l'ipossiemica cronica ipocapnia nell'uomo e nel pony, e postulato che la riduzione compensatoria di CSF [HCO3] dipendesse dai corrispondenti cambiamenti di [HCO3]a Abbiamo testato questa ipotesi in cani anestetizzati e paralizzati determinando gli effetti di 7 o 14 ore di ipocapnia (PaCO2 20 e 30 mm Hg), ipossiemia (PaO2 30, 38 e 48 mm Hg) e ipossiemia ipocapnica sullo stato acido-base del liquido cerebrospinale [hco3]a è stato lasciato scendere normalmente o è stato mantenuto vicino ai livelli di controllo dall'infusione di NaHCO3. e ipocapnia ipossiemica, la diminuzione dell'[HCO3] e la % di compensazione del pH nel liquido cerebrospinale erano inferiori o uguali a quelle del sangue arterioso. La maggior parte (51-89%) della diminuzione compensatoria del liquido cerebrospinale [HCO3] è stata prevenuta prevenendo la corrispondente riduzione in [HCO3]a. Questa dipendenza dei cambiamenti nel liquido cerebrospinale da plasma [HCO3] richiedeva una concomitante diminuzione della PCO2 del liquido cerebrospinale, ma era ampiamente indipendente dalle variazioni del pH plasmatico. Una parte minore ma significativa della diminuzione del liquor [HCO3] è stata ottenuta indipendentemente dalle corrispondenti variazioni di [HCO3]a. Il contributo di questo meccanismo locale alla regolazione del liquor [HCO3] aumenta con l'aumentare della gravità dell'ipocapnia o dell'ipossiemia ed è solitamente associato ad un aumento selettivo del lattato nel liquido cerebrospinale. Si è concluso che la regolazione dell'[HCO3] nel liquido cerebrospinale durante l'ipocapnia ipossiemica era principalmente dipendente, e quindi limitata, dalla concomitante diminuzione del plasma [HCO3].
Composizione acido-base del muscolo cardiaco e scheletrico durante l'acidosi metabolica nei cani.Cani nefrectomizzati a petto aperto sono stati infusi con 25-30 ml. kg( -1) peso corporeo di 0,15 M NaCl (gruppo I), 0,15 MHCl (gruppo II) o 0,3 M di acido lattico (gruppo) III). La ventilazione polmonare è stata mantenuta costante nei tre gruppi. Il pH intracellulare è stato calcolato con il metodo della CO2. Non sono state prodotte significative variazioni acido-base intracellulari o extracellulari nel Gruppo I. Un grado simile di acidosi extracellulare è stato raggiunto nei Gruppi II e III. Nonostante la PCO2 arteriosa costante, la PCO2 del sangue misto, seno coronarico e femorale vano è aumentata moderatamente dopo l'infusione nei gruppi II e III. È stato calcolato che meno della metà dell'acido HCl infuso è rimasto nello spazio extracellulare. Tuttavia, non sono stati osservati cambiamenti significativi nella composizione acido-base del muscolo scheletrico sia nel gruppo II che nel III. della composizione acido-base delle cellule del muscolo cardiaco posizione del gruppo I con quella dei gruppi II e III secondo cui l'acidosi metabolica del grado e della durata prodotta in questi esperimenti non produce acidosi miocardica apprezzabile.
Aspetti comparativi della capacità tampone nei muscoli.Questi risultati sono discussi in relazione alla tesi secondo cui un valore tampone elevato è legato a un'elevata prestazione lavorativa Questa generalizzazione non si estende al muscolo "bianco" del petto di pollo. Il suo alto valore tampone è in parte dovuto a un alto contenuto di dipeptidi carnosina e anserina. Inoltre, è stata avanzata l'ipotesi che il muscolo, ad esempio il muscolo del petto di piccione , può in parte regolare il pH intracellulare modificando le concentrazioni allo stato stazionario degli acidi del ciclo glicolitico e citrico. In particolare, questa forma di regolazione del pH non ha un fabbisogno energetico intrinseco.
Alcune proprietà dell'ornitina decarbossilasi miocardica di ratto e gli effetti in vitro dei nucleotidi.L'ornitina decarbossilasi miocardica sembra avere caratteristiche simili a quelle degli enzimi isolati da altri tessuti L'attività dell'ornitina decarbossilasi è diminuita molto rapidamente dopo la morte dell'animale L'immagazzinamento della frazione di linfa cellulare a 0 gradi C o -15 gradi C, tuttavia, ha portato solo a una piccola diminuzione dell'attività enzimatica fino a 3 giorni dopo la preparazione Il piridossal fosfato a un valore ottimale di 50 muM era essenziale per la piena attività enzimatica. I composti tiolici non aumentavano l'attività dell'enzima ornitina decarbossilasi miocardica. La distribuzione subcellulare dell'enzima nel miocardio è risultata diversa da quella riportata in altri tessuti. A la purificazione parziale dell'enzima è stata possibile utilizzando le proteine precipitate a pH 5 da una frazione solubile in cellule o facendo passare una frazione solubile attraverso una colonna di gel Sephadex G 100. ATP, ADP , e l'AMP ha inibito l'ornitina decarbossilasi ad alte concentrazioni (5 mM), ma GTP, CTP e ITP hanno inibito a una concentrazione di 1 mM e oltre.
Attività della fosfolipasi A e della lipasi acida durante il rilascio di idrolasi lisosomiali.L'idrolisi dei fosfolipidi lisosomiali cardiaci ed epatici da parte della fosfolipasi A endogena si verifica durante l'incubazione a 37 gradi C a pH 5,0 I lisofosfolipidi e gli acidi grassi liberi si accumulano in associazione con il rilascio di idrolasi dai lisosomi nel surnatante Le lipasi lipidiche neutre acido-attive contribuiscono al rilascio di acidi grassi liberi L'albumina inibisce la produzione di questi lipidi tensioattivi come così come il rilascio di idrolasi. La fosfolipasi A solubile è inibita dall'albumina, dalla proteina solubile (citoplasmatica), dall'eparina e dal solfato di protamina. Quindi, l'idrolisi dei lipidi lisosomiali, catalizzata dalle fosfolipasi endogene, nonché dalle lipasi lipidiche neutre acido-attive, può contribuire in modo significativo all'aumento della permeabilità, al gonfiore e alla successiva lisi dei lisosomi. La stabilizzazione della membrana lisosomiale è associata all'integrità della struttura lipidi urali della membrana.
Distribuzione delle popolazioni di lisosomi nel tessuto cardiaco di ratto.La frazione post-nucleare del tessuto cardiaco di ratto è stata frazionata mediante centrifugazione zonale isopicnica in gradienti di saccarosio, seguita mediante centrifugazione differenziale delle frazioni zonali (frazionamento rho-S). La distribuzione di 5 idrolasi acide lisosomiali, una proteasi ad attività neutra e alcalina e numerosi enzimi marker per gli organelli cellulari (catalasi, Ca2+-ATPasi, citocromo ossidasi, glucosio-6- fosfatasi e muramidasi) sono state descritte tre principali popolazioni lisosomiali con densità di equilibrio di 1,09, 1,17 e 1,23 g cc-1 (omega2t = 1,54 X 10 (11) rad2 sec-1) e un continuum delle dimensioni di queste particelle alle tre diverse densità.
Stimolazione muscarinica della guanilato ciclasi cardiaca.I muscoli papillari del gattino ventricolare destro sono stati incubati con dibutirril adenosina 3\',5\'-monofosfato (db- cAMP) a concentrazioni variabili da 1 X 10 (-4) M a 1 X 10 (-3) M. È stato osservato un effetto inotropo positivo con tutte le concentrazioni di db-cAMP Somministrazione concomitante di 5 X 10 (-4) M monobutirrile guanosina 3\',5\'-monofosfato e 1--2 X 10(-4) M db-cAMP non hanno prodotto una risposta inotropa A livello biochimico l'attività della guanil ciclasi cardiaca è aumentata 2-3 volte con acetilcolina e questo miglioramento è completamente bloccato dall'atropina. Questo aumento dell'attività sembra essere il risultato di una diminuzione della costante di Michaelis (Km) per GTP. Il calcio produce anche una significativa attivazione dell'attività della guanil ciclasi.
Cambiamenti precoci nell'ipossia miocardica: relazioni tra funzione meccanica, pH e stati redox intracellulari.Quando i cuori di ratto sono stati sottoposti a ipossia improvvisa, l'insorgenza di I cambiamenti del NADH misurati dalla fluorescenza epicardica e della contrattilità depressa si sono verificati in momenti simili. Le misurazioni dirette dei cambiamenti nel metabolismo dei tessuti sono rimaste indietro rispetto ai cambiamenti nella fluorescenza e nella contrattilità. I rapporti NAD:NADH calcolati si sono ridotti più rapidamente e in misura maggiore nel citoplasma che in i mitocondri, ma non ha necessariamente segnalato maggiori cambiamenti nel NADH totale. Il rilevamento di contrattilità depressa prima di un calo del pH intracellulare o un aumento del lattato intracellulare mette in dubbio il postulato che un aumento degli ioni idrogeno è la causa primaria di insufficienza miocardica ipossica.
Attività lisosomiale e idrolasi neutra durante la regressione dell'ipertrofia cardiaca.L'ipertrofia cardiaca è stata prodotta nei ratti dalla costrizione dell'aorta ascendente. Rimozione della costrizione 10 giorni dopo l'operazione ha determinato un rapido calo del peso ventricolare sinistro (LV) e dell'RNA ventricolare totale. Le attività della RNasi acida e della beta-glucuronidasi sono state elevate 3 giorni dopo la costrizione aortica. Le attività della catepsina D e della RNasi alcalina sono rimaste invariate. Attività della catepsina D e RNasi acida sono rimaste invariate 1 e 3 giorni dopo la rimozione della banda costrittiva. Ca2+-attivata, proteasi neutra (CAF) isolata dal surnatante muscolare postmitocondriale è stata parzialmente purificata e caratterizzata. CAF degrada specificamente l'alfa-actinina quando incubata con miofibrille isolate in presenza di Ca2+.
Reazioni distoniche a seguito di neurolettici: decorso temporale e meccanismi proposti.L'insorgenza di reazioni distoniche acute è stata studiata rispetto ai parametri farmacocinetici del farmaco dopo una singola dose di la fenotiazina, butaperazina. Le distonie si sono verificate per più di un'emivita dai livelli di picco di butaperazina, da 23 a 56 ore dopo la somministrazione del farmaco. Gli autori postulano che la comparsa di distonie al calo delle concentrazioni plasmatiche possa essere dovuta all'interruzione dell'equilibrio dopaminergico-colinergico causata da potenze differenziali antidopaminergiche e anticolinergiche del farmaco.
Anormale ornitina carbamoiltransferasi nei topi con mutazione a pelo sparso.I topi con mutazione cromosomica a pelo rado (spf) hanno frequentemente vescica urinaria pietre composte principalmente da acido orotico, che è stato identificato con i seguenti criteri: assorbimento ultravioletto e infrarosso, spettri, comportamento cromatografico, punto di fusione e reattività in uno specifico test del colore. Questo indizio ha portato alla scoperta che i topi portatori di spf hanno un anormale forma di ornitina carbamoiltransferasi epatica (carbamoilfosfato:L-ornitina carbamoiltransferasi, EC 2.1.3.3). La normale ornitina carbamoiltransferasi ha un'attività massima a pH 7,6-8,0 e l'80% dell'attività massima a pH 10,0.
Endonucleasi indotte dal batteriofago T5 che introducono interruzioni a catena singola sito-specifiche nel DNA duplex.Quattro endodesossiribonucleasi sito-specifiche sono state parzialmente purificate da estratti di Escherichia coli infettato da batteriofago T5 mediante filtrazione su gel e cromatografia di affinità su DNA a singolo e doppio filamento. Gli enzimi sono stati rilevati e caratterizzati mediante elettroforesi su gel di agarosio di prodotti di digestione denaturati con alcali. Nessuno dei quattro si trova in cellule non infette. In la presenza di un catione bivalente, tutte e quattro le endonucleasi producono interruzioni a catena singola riparabili dalla ligasi in siti specifici nel DNA duplex di diversi batteriofagi (lambda, T7 e T5) e un virus di mammifero (adenovirus 2). Queste attività non sono stimolato dall'ATP Nessuno dei quattro è attivo sul DNA a filamento singolo I frammenti prodotti da ciascun enzima dal DNA T5 riparato dalla ligasi non corrispondono a quelli derivati dal DNA T5 maturo Ciascuno degli enzimi è in grado di t o scindere il filamento intatto del DNA T5.
Desensibilizzazione dei recettori beta-adrenergici da parte di agonisti beta-adrenergici in un sistema privo di cellule: risensibilizzazione da parte della guanosina 5\'-(beta, gamma-imino)trifosfato e altre purine nucleotidi.L'incubazione delle membrane degli eritrociti di rana purificati con agonisti beta-adrenergici a 25 gradi produce una desensibilizzazione (inattivazione) relativamente rapida (metà tempo circa 10 min) di circa il 60% dei siti di legame del recettore beta-adrenergico I recettori desensibilizzati non si legano più allo specifico ligando beta-adrenergico (-)[3H]diidroalprenololo. La diminuzione del numero di recettori beta-adrenergici funzionali si manifesta anche come una ridotta capacità dell'isoproterenolo di stimolare l'adenilato ciclasi legata alla membrana.
Risonanza magnetica nucleare 15N su amminoacidi.Risonanza magnetica nucleare 15N su alcuni amminoacidi sono stati effettuati per verificarne l'applicabilità a problemi biologici. Poiché l'abbondanza naturale dell'isotopo 15N non è sufficiente per ottenere spettri leggibili in un tempo ragionevole, per le misurazioni sono stati utilizzati campioni arricchiti con isotopi 15N al 95%. Oltre ai valori di spostamento chimico, le larghezze di riga e la fattori di potenziamento di Overhauser nucleare, tempi di rilassamento del reticolo di spin delle risonanze 15N corrispondenti sono stati misurati in funzione del pH e della temperatura.
Osservazioni e interpretazione dei bordi di assorbimento dei raggi X in composti di ferro e proteine.Gli spettri di assorbimento dei raggi X vicino al bordo di Kalpha sono stati misurati in vari composti del gruppo del ferro che utilizzano l'intensa radiazione di sincrotrone presso lo Stanford Synchrotron Research Project. Nei composti cubici KMF3 dove M = Mn+2, Fe+2, Co+2, Ni+2 e Zn+2, sono state osservate linee ben risolte e assegnato a 1s porta a 3d, 1s porta a 4s e 1s porta a transizioni 4. Le energie osservate concordano piuttosto bene con i livelli di energia spettroscopica dello ione Z + 1 e le intensità sono in accordo con quelle attese sullo base di un elettrone transizioni della forma Z 1s2dn(L,S) porta a (Z + 1)1s2dnn\'l\'(L",S). Le energie degli 1s intensi portano ad un aumento di transizione 4p di circa 5 V passando da KFeF3 a K2NaFeF6, ma solo di circa 1 V da K4Fe(CN)6 a K3Fe(CN)6. Le transizioni confermano che all'ossidazione degli esacianuri la struttura elettronica del ferro cambia appena. Nella proteina ferro-zolfo rubredoxin, dove il ferro è legato a un tetraedro di solfuri, la transizione 1s alla 3d è stata circa sette volte più intensa della stessa transizione in un composto ottaedrico coordinato. Queste intensità sono parallele a quelle osservate nelle transizioni d-d degli spettri ottici, perché in entrambi i tipi di spettri le intensità dipendono dalla miscela 4p. Nella proteina eme citocromo c, dopo l'ossidazione la transizione 1s porta a 4p si sposta solo di circa 1 V a energie più elevate simili agli esacianuri di ferro. Questi risultati sono discussi in termini di legame covalente.
O2\'-Metilinosina, un costituente dell'RNA ribosomiale di Crithidia fasciculata.Un nuovo nucleoside, O2\'-metilinosina (Im), è stato identificato come un costituente dell'RNA ribosomiale di Crithidia fasciculata, un protozoo emoflaggelato. Il nucleoside viene rilasciato come parte di un dinucleotide stabile agli alcali, Im-Up, per idrolisi alcalina di Crithidia rRNA, e come nucleotide 5\' , pIm, mediante idrolisi dello stesso RNA con veleno di serpente. I derivati contenenti Im isolati dall'rRNA di Crithidia sono stati caratterizzati per confronto con composti marcatori preparati mediante deaminazione chimica dei corrispondenti analoghi dell'adenosina. O2\'-Metilinosina preparata da Im-Up naturale o pIm naturale avevano gli stessi spettri di assorbimento ultravioletto e proprietà cromatografiche del marcatore Im. La caratterizzazione dei componenti base e zuccherino di Im come ipoxantina e 2-O-metilribosio, rispettivamente, ha fornito la conferma finale della struttura. abbiamo eliminato la possibilità che Im derivi da O2\'-metiladenosina (Am), un noto costituente dell'RNA ribosomiale, mediante deaminazione chimica o enzimatica durante l'idrolisi dell'rRNA di Crithidia.
Preparazione e proprietà dell'acido poli2\'-O-etilcitidilico.È stato preparato l'acido poli2\'0-etilcitidilico (poli (Ce)) mediante polimerizzazione del 2\'-0-etilcitidina-5\'-pirofosfato con la polinucleotide fosforilasi di Escherichia coli in presenza di Mn++, e le sue proprietà confrontate con quelle di poli (rC), poli (Cm) e poli (dC). forma neutra di pOLY (Ce) presenta proprietà simili a quelle di poly (rC) e poly (Cm). Inoltre forma un'elica a doppio filamento acida con un pH di transizione di 5,9 in 0,1 M NaCl. La forma neutra forma facilmente un doppio -complesso elicoidale a filamento con poli (rI). Rispetto al poli (Cm), la sostituzione del 2\'-0-metile con 2-0-etile porta ad un aumento del miglioramento delle stabilità termiche sia della forma elicoidale acida del poli ( Ce) e il suo complesso con poli (rI).
Analogici nucleosidici pirimidinici.X. 5-sostituiti 1-(1,3-diidrossipropil-2) uracili.Si suggerisce un metodo conveniente per la sintesi di estere dietilico dell'acido uracil-1-malonico mediante alchilazione di 2,4-bis(trimetilsilil) uracile con estere dietilico dell'acido bromo-malonico. Questo composto ha dimostrato di idrolizzare con NaOH producendo uracile o acido uracil-1-acetico, a seconda condizioni di reazione Analogamente, sono stati ottenuti dietil estere dell'acido timina-1-malinico e tetraetil estere dell'acido 5-fluorouracil-1,3-dimalonico. L'1-(1,3-diidrossipropil)uracile è stato ottenuto riducendo l'acido uracil-1-malonico estere dietilico con NaBH4.
Distribuzione degli istoni nella cromatina denaturata con alcali studiata mediante centrifugazione isopicnica in gradienti di densità di metrizamide alcalini.Tre tipi di gradienti di densità: metrizamide neutra, NaOH alcalino -metrizamide e trietanolammina-metrizamide alcalina - sono stati utilizzati per studiare la distribuzione degli istoni tra i due filamenti di DNA nella cromatina denaturata con alcali. È stato trovato possibile evitare sia la ridistribuzione che la dissociazione delle proteine utilizzando gradienti di densità trietanolammina-metrizamide a pH 10,5. queste condizioni una miscela denaturata con alcali di DNA e cromatina è stata ben separata nel DNA originale e DNP. Quando la cromatina nativa o sonicata è stata denaturata a pH 12,2 e centrifugata in un gradiente di densità trietanolammina-metrizamide a pH 10,5 non è apparso alcun picco di DNA libero. Questi risultati mostrano che entrambi i filamenti di DNA rimangono associati alle molecole di istoni dopo la denaturazione alcalina della cromatina.
Conformazione e reattività del DNA nel complesso con proteine. IV. Dicroismo circolare di complessi modello poli-L-istidina con polimeri di DNA e specificità dell'interazione.Lo studio CD del complesso DNA-poli-L-istidina ad alto grado di protonazione ha rivelato che la formazione del complesso è già osservabile a 2 M NaCl. L'influenza del sale insieme all'urea 5 M suggerisce che oltre alle interazioni elettrostatiche probabilmente il legame idrogeno può favorire complessi specifici. L'affinità delle istidine protonate alle regioni ricche di AT è fortemente supportata dai complessi formati con polimeri contenenti (dA. dT). La struttura di tipo psi si verifica con poli(dA-dT)-poli(dA) -dT) mentre poli(dA)-poli(dT) è limitato a formare uno stato psi simile sull'interazione con poli-L-istidina altamente protonata. Differenze nelle proprietà di avvolgimento dell'elica dovute alla variazione nella sequenza sono suggerite come possibile fattore nella formazione dei complessi di tipo psi. Il meccanismo di interazione compreso il legame idrogeno delle catene laterali dell'istidina con una coppia AT ad alto grado di protonazione e con regioni GC a basso grado di protonazione nella struttura polipeptidica.
Effetto dell'escissione della base Y sull'interazione del tRNAPhe (lievito) con la fenillanil-tRNA sintetasi (lievito).L'interazione tra tRNAPhe (lievito), da cui la base Y è stata rimossa mediante trattamento acido, e la fenillanil-tRNA sintetasi (lievito) è stata studiata mediante titolazioni di competizione in fluorescenza e corse di velocità di sedimentazione. I parametri di legame sono dati in varie condizioni ioniche. Il tRNAPhe- Y può ancora occupare i siti di legame specifici sull'enzima. Rispetto al tRNAPhe non modificato, la costante di legame è ridotta di più di un ordine di grandezza. Si può concludere che la base Y non è necessaria per il riconoscimento specifico di tRNAPhe da parte dell'affine sintetasi, piuttosto può rappresentare un punto di attacco per la sintetasi.
Conformazione e reattività del DNA nel complesso con proteine. III. Transizione elicoidale e studi conformazionali di complessi modello di DNA\' con poli-L-istidina.", Differenze nell'interazione della poli-L-istidina con DNA di varia composizione di base sono state dimostrate utilizzando misurazioni di fusione e CD. I due tipi di complessi formati con DNA a valori di pH inferiori al pK di 5,9 e nella regione di pH 6.5 sono molto diverse nelle loro proprietà spettrali CD. Gli effetti di legame con poli-L-istidina altamente protonata sono AT-dipendenti come evidenziato da ampi spettri CD negativi che indicano la formazione di psi-DNA come stato condensato della doppia elica. Il DNA ricco di GC può, tuttavia, anche formare strutture psi-DNA con poli-L-istidina in determinate condizioni. A pH 6,5 la formazione di complessi con il polipeptide debolmente protonato è GC-dipendente. Dai risultati si conclude che il poli-L protonato -istidina interagisce in modo più specifico su AT ba se coppie, probabilmente lungo il piccolo solco mentre la poli-L-istidina debolmente protonata tende ad interagire preferenzialmente con le regioni GC che sembrano verificarsi piuttosto nel solco grande.
Influenza del 2,3-difosfoglicerato sulle proprietà tampone del sangue umano: ruolo della membrana dei globuli rossi.L'effetto della concentrazione di rosso cellulare 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG, 0,5-21 mumoli/g cellule) sulle proprietà tampone e sulla pendenza della relazione tra pH extracellulare ed intracellulare (deltapHi/deltapHe) del sangue umano. i risultati sono stati valutati in connessione con i risultati precedenti riguardanti l'effetto del 2,3-DPG sul rapporto Donnan rH+ = H+e/H+i. deltapHi/deltapHe diminuisce con l'aumento del contenuto di 2,3-DPG eritrogeno, nonché con aumento del pH extracellulare. deltapHi/deltapHe e rH+ possono essere correlati tra loro dall'equazione empirica deltapHi/deltapHe = 1 + log rH+ = 1 + pHi - pHe. La validità di questa equazione sembra essere limitata alle condizioni in cui il Donnan il rapporto rH+ è alterato tra 0,3 e 1 sia da cambiamenti della concentrazione di globuli rossi di anioni tampone come 2,3-DPG o da variazioni del pH extracellulare. Come determinato in sospensioni di globuli rossi con membrane intatte, i cambiamenti indotti da 2,3-DPG e pH di deltapHi/deltapHe portano a cambiamenti proporzionali nel potere tampone dei tamponi non bicarbonati degli eritrociti. Per questo effetto il potere tampone delle sospensioni di cellule contenenti 5 volte la normale concentrazione del tampone 2,3-DPG è inferiore a quello delle cellule con normale contenuto di 2,3-DPG (a valori di pH extracellulari superiori a 7). Questi risultati dimostrano che l'azione dei tamponi intracellulari non bicarbonati nel sangue è efficacemente modulata dalle proprietà fisico-chimiche della membrana dei globuli rossi.
Doppio effetto del 2,3-difosfoglicerato sugli effetti Bohr del sangue umano.L'influenza della concentrazione di globuli rossi del 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG, 0,5-26 mumoli/g eritrociti) sull'"effetto CO2-Bohr" (pH variato da CO2 ad eccesso di basi costante) e sull'"effetto acido-Bohr fisso" (pH variato da acido o base fisso a PCO2) costante è stato studiato nel sangue umano a valori di pH plasmatici compresi tra pH 7,2 e pH 7,6. L'aumento della concentrazione di 2,3-DPG nei globuli rossi porta ad una diminuzione numerica del "coefficiente di CO2-Bohr" riferiti al pH plasmatico. I "coefficienti di Bohr acido fissi" sono numericamente inferiori ai corrispondenti "coefficienti di CO2-Bohr" e mostrano un massimo alle normali concentrazioni di 2,3-DPG di globuli rossi. I coefficienti di Bohr riferiti al pH del plasma il pH cellulare è nettamente superiore a quello del pH plasmatico, soprattutto ad alti livelli di 2,3-DPG, ciò è dovuto da un lato alle proprietà fisico-chimiche della membrana eritrocitaria intatta, e dall'altro ad una diminuzione indotta da 2,3-DPG nel rapporto deltapHcell/deltapHplasma. Dai risultati si conclude che il 2,3-DPG esercita un duplice effetto sui coefficienti di Bohr del sangue intero che è mediato 1. dall'effetto diretto del 2,3-DPG sulle proprietà allosteriche dell'emoglobina (come risulta dalle variazioni di i coefficienti di Bohr riferiti al pH dei globuli rossi), e 2. dall'effetto del 2,3-DPG su deltapHcell/deltapHplasma.
Trasporto dell'ossigeno nelle cardiopatie congenite: influenza dell'emoglobina fetale, del pH dei globuli rossi e del 2,3-difosfoglicerato.In 48 individui (età 1 giorno a 13 anni) con cardiopatia congenita, la funzione di trasporto dell'ossigeno nel sangue è stata studiata per valutare i cambiamenti adattativi nell'ipossiemia da shunt e per studiare la regolazione in vivo della concentrazione di eritrociti 2, 3-difosfoglicerato (RBC 2, 3-DPG) nel presenza di emoglobina fetale (HbF). Sono stati determinati la pO2 arteriosa e il contenuto di ossigeno, la capacità di ossigeno, lo stato acido-base, l'affinità dell'ossigeno, la frazione di HbF, il pH plasmatico, il pH dei globuli rossi e i globuli rossi 2, 3-DPG. Durante i primi 50 giorni di i valori di vita di P50 standard (stdP50) (37, pH 7.4), P50 effettivo in vivo (actP50), RBC 2, 3-DPG, capacità di O2, pH plasmatico arterioso e pH dei globuli rossi erano sparsi intorno all'intervallo normale, sebbene tendessero a valori bassi per stdP50 e pH plasmatico arterioso e a valori elevati per la capacità di O2. Dopo il terzo mese, stdP50 actP50, RBC 2, 3-DP G, la capacità di O2 e il pH dei globuli rossi sono risultati elevati. Il pH plasmatico e l'actP50 erano sparsi nell'intervallo normale (Figg. 1 e 2). Il pH intraeritrocitario nei neonati ipossiemici era aumentato rispetto ai bambini normali quando era correlato al pH plasmatico (Fig. 3). Un pH intraeritrocitario vicino al normale è stato quindi trovato nei bambini ipossiemici con pH plasmatico basso e un pH intraeritrocitario aumentato nei bambini ipossiemici con pH plasmatico normale (Fig. 1). Esiste una significativa correlazione negativa tra lo ione H+ dell'eritrocita e la concentrazione di 2, 3-DPG (Fig. 5); le costanti di regressione derivate dai dati alle frazioni alte (media 47%) e basse (media 9%) di HbF non sono significativamente differenti (Equazioni di Regressione 8 e 11 nella Tabella 1). Pertanto, la nota differenza nel legame del 2, 3-DPG alla deossiemoglobina fetale o adulta non influenza in modo misurabile la concentrazione di 2, 3-DPG negli eritrociti, indicando che in vivo la sintesi del 2, 3-DPG nell'ipossia è virtualmente regolata dal pH degli eritrociti. , che a sua volta è determinato dal pH plasmatico e dallo stato di ossigenazione dell'emoglobina.
Cambiamenti nelle attività della tirosina transaminasi e della fosfoenolpiruvato chinasi durante l'incubazione a breve termine del fegato fetale.L'incubazione del fegato fetale di ratto omogena a 37 gradi per 2-3 h ha aumentato di 5 volte l'attività PEPK nel surnatante 100.000 X g e l'attività TTA 10 volte. Allo stesso tempo, l'attività nel pellet 100.000 X g è diminuita e non è stato osservato alcun cambiamento nell'intero omogenato. Si conclude che durante l'incubazione di pezzi di fegato fetale o omogenati in vitro, si verifica una ridistribuzione degli enzimi tra le particelle cellulari e la linfa cellulare. Si suggerisce che il rilascio dell'enzima nella linfa cellulare possa essere il primo stimolo per la successiva sintesi enzimatica che si verifica dopo la nascita.
Effetto dell'acido clorogenico in una dieta a base di caseina per ratti. Osservazioni nutrizionali e patologiche.Ratti maschi di 3 settimane sono stati nutriti con una dieta a base di caseina contenente l'1% (p/p) di acido clorogenico per verificare se l'ingestione di acido clorogenico può essere associata a un ridotto utilizzo di proteine alimentari o a provocare altri effetti negativi Il rapporto di efficienza proteica, il valore biologico e la digeribilità di questo dieta non differiva da una corrispondente dieta a base di caseina priva di acido clorogenico. Nessuna variazione è stata osservata nel bilancio azotato dei ratti sperimentali. Né i ratti hanno mostrato alcun cambiamento nei valori ematologici o nei volumi e nel pH delle urine. Qualche deviazione è stata notata nel i pesi dei reni e delle ghiandole surrenali della dieta a base di caseina priva di acido clorogenico. I risultati che sono stati fatti erano normali negli esami microscopici di vari organi. L'acido clorogenico non sembrava influenzare l'ultrastruttura del fegato come rivelato dall'elettrone m icroscopia.
Cinetica dei cambiamenti nella conta dei linfociti derivati dal timo nei ratti affetti da reazione del trapianto contro l'ospite.L'effetto del GVHR sui linfociti timo-dipendenti di vari organi linfoidi sono stati seguiti autoradiograficamente e mediante tecnica di scintillazione in dipendenza temporale dall'induzione della reazione. Il GVHR è stato indotto in ratti ibridi (BD X Lw) F1 con cellule di milza parentali (BD). Come marker dei linfociti timo-dipendenti è stata utilizzata l'incorporazione in vitro di uridina 3H. Rispetto alle cellule B, i linfociti T di ratto hanno una maggiore capacità di incorporare uridina marcata. I linfociti T nel sangue periferico e nel dotto toracico hanno raggiunto il loro picco a 3 o 4 giorni dopo l'induzione di GVHR. il quarto giorno, contemporaneamente a un timo alterato da GVH, è stata osservata anche una rapida diminuzione del numero di queste cellule. Una mobilitazione di linfociti T dalla milza e dai linfonodi nella circolazione già nei primi giorni della reazione potrebbe essere responsabile per il picco visto in PBL e TDL. L'alterazione del GVH della durata di 21 giorni ha causato un'evidente riduzione dei linfociti timo-dipendenti in tutti gli organi qui studiati. L'attacco immunologico del GVHR è considerato il principale responsabile dell'esaurimento delle cellule T. La discussione verte sulla possibilità di un'azione più progressiva del GVHR sulla sottopopolazione di linfociti T più matura.
[L'effetto della novocaina sull'attività elettrica dei nodi di Ranvier in soluzioni a pH alto e basso].Le concentrazioni minime di procaina che bloccano il i potenziali d'azione di un singolo nodo di Ranvier sono stati determinati a pH diminuito e aumentato nella soluzione di balneazione. Le variazioni nelle concentrazioni della forma basica [B] e cationica [BH+] della procaina con pH erano di carattere monotonico: [B] gocce e [ BH+] cresce con l'aumento del pH. La dipendenza dell'eccitabilità di membrana (frazione di canali in grado di eccitare) dal pH era non monotona; è bassa sotto pH aumentato e diminuito. Sulla base di questi dati l'ipotesi che la membrana del nodo di Ranvier può interagire con una forma definita di procaina viene rifiutata. L'analisi quantitativa mostra che la membrana interagisce sia con la forma base che con quella cationica della procaina, ma l'efficienza di questa interazione è diversa.
[Trasferimento di massa nella produzione di coprecipitati di proteine del latte].Negli ultimi vent'anni la coagulazione a caldo è diventata una procedura tecnica più importante per l'isolamento di proteine del latte per l'utilizzo molto efficiente della materia prima Vengono riportati esperimenti per ottenere equazioni di approssimazione per il trasferimento di massa nella produzione di coprecipitati di proteine del latte da latte scremato e miscele di latte scremato con caglio e siero acido mediante pianificazione e interpretazione statistica di esperimenti. È stata raggiunta una buona esattezza. I coagula sono costituiti da frazioni di caseina, frazioni di proteine del siero di latte, calcio e fosfati. I prodotti sono termicamente piuttosto stabili, sensorialmente indifferenti e contengono proteine insolubili in acqua. Sono adatti a migliorare il grasso: razione proteica di salsicce, ma anche per l'arricchimento proteico di altri alimenti e per scopi dietetici.
[Direzioni tecnologiche per la trasformazione delle proteine della colza in concentrati e isolati proteici].I semi di colza o la farina di semi di colza sono relativamente economici, ma preziosi crudi materiali per la fabbricazione di concentrati e isolati proteici che possono essere utilizzati come costituenti di alimenti. L'elevato contenuto di fibre grezze e anche di tioglucosidi comporta notevoli difficoltà nello sviluppo di tecniche per la fabbricazione di preparati proteici di alta qualità. procedura, vengono discusse alcune proprietà tecnologiche di produzione delle proteine della colza, come i parametri di estrazione, le condizioni di coagulazione, la temperatura di lavorazione, la quantità di solvente, ecc. Sulla base di questi dati, vengono presentate le seguenti tecniche per la produzione di prodotti proteici della colza: - concentrazione delle proteine mediante il metodo della diffusione dell'acqua - isolamento delle proteine mediante estrazione a uno o più stadi Infine, l'autore riporta un processo di fermentazione dure per la produzione di biomassa proteica da farina di colza grossolana. Inoltre, presenta alcuni dati sul valore nutrizionale delle proteine dello stupro.
[Isolamento di proteine con agenti formanti complessi].Prendendo albumine vegetali per modelli, gli autori riportano le possibilità di isolare proteine (che non possono essere precipitati isoelettricamente) sfruttando la loro proprietà di formare complessi con tannino o polianioni. La precipitazione delle proteine con destrano solfato o polifosfati, che è dovuta all'interazione elettrostatica, dipende dal valore del pH e dal contenuto di elettroliti della soluzione. condizioni, si ottengono rese proteiche del 100%. Per mezzo del tannino, le proteine vengono completamente precipitate in un ampio intervallo di pH. La componente proteica dei complessi contenenti polianioni viene isolata per precipitazione con sale o per coagulazione termica dopo dissoluzione dei complessi. L'isolamento delle proteine dai complessi tannici è preferibilmente realizzato per reazione con la caffeina.
[Interazione tra proteine e polisaccaridi acidi].L'interazione tra proteine e polisaccaridi acidi è di natura elettrostatica e porta alla formazione di cariche solubili e complessi neutri insolubili. La formazione del complesso nel sistema caseina-destrano solfato è seguita mediante titolazione turbidimetrica. Essa dipende dal valore del pH e dalla concentrazione dell'elettrolita. All'elettroforesi libera, i complessi formati al di sotto del punto isoelettrico della proteina mostrano mobilità anodica, considerando che la caseina pura migra al catodo. La proteina nel complesso non è in grado di legare il nero amido. Di conseguenza, non può essere rilevata elettroforeticamente mediante il colorante. I risultati delle misurazioni della viscosità e della diffusione sono indicativi di un aumento del volume idrodinamico dei complessi".
[Effetto dei polisaccaridi acidi sulle proprietà delle proteasi pancreatiche].L'uso di polisaccaridi acidi (alginato di sodio, pectina, carragenina, ecc. ) come agenti gelificanti nella produzione di alimenti artificiali suscita l'interesse per lo studio dei loro effetti sugli enzimi del tratto gastrointestinale. A questo proposito, gli autori hanno studiato l'azione di vari polisaccaridi acidi sulla cinetica dell'idrolisi di basso peso molecolare substrati catalizzati da proteinasi pancreatiche. È stato dimostrato che le interazioni tra polisaccaridi acidi ed enzimi producono effetti che possono essere pienamente spiegati da cambiamenti nelle apparenti costanti di ionizzazione dei gruppi ionogenici che partecipano alla reazione catalitica. L'entità degli effetti osservati in presumibilmente determinato dall'intensità del potenziale elettrostatico generato dai polianioni.
[Isolamento e caratterizzazione delle principali frazioni albuminiche dei semi di girasole (Helianthus annuus L.) e colza (Brassica napus L.)].Il le frazioni principali delle albumine di girasole e di colza (isolate mediante precipitazione con solfato di ammonio o tannino + caffeina e successiva cromatografia su gel) sono proteine a basso peso molecolare, molto basiche, il cui peso molecolare varia da 10.000 a 16.000 e il loro valore isoelettrico punti (determinati mediante focalizzazione isoelettrica ed elettroforesi libera) sono situati a pH maggiore di 10.0 Dal dicroismo circolare nell'intervallo di lunghezze d'onda da 200 a 240 nm si deduce che la frazione principale dell'albumina di colza è una proteina ben strutturata con 40 -46% di alfa-elica in soluzioni acquose e saline La denaturazione per riscaldamento si ottiene solo a temperature di circa 100 gradi C e valori di pH superiori a 9. 20% di alfa-elica vengono lasciati dopo l'azione di 8 M di urea. la stabilità è spiegata d dalla presenza di legami disolfuro nella molecola.
Funzione testicolare dopo orchiopessi per testicolo ritenuto unilateralmente.La funzione testicolare è stata determinata in 29 uomini, di età compresa tra 21 e 35 anni, sottoposti a orchiopessia per unilaterale testicolo ritenuto a 4-12 anni di età. Le concentrazioni sieriche di testosterone e di testosterone dializzabile di questi uomini non erano significativamente differenti da quelle di un gruppo di controllo di 30 uomini normali, e le loro concentrazioni basali di ormone luteinizzante e risposte sieriche di ormone luteinizzante alla gonadotropina sintetica. l'ormone di rilascio erano solo leggermente superiori a quelli degli uomini normali. La densità media di spermatozoi dei pazienti, tuttavia, era solo un terzo di quella degli uomini normali (p inferiore a 0,001). La risposta ormonale follicolo stimolante media ro gonadotropina- L'ormone di rilascio dei pazienti è stato raddoppiato rispetto a quello degli uomini normali (p inferiore a 0.001) I dati indicano che la spermatogenesi può essere anormale dopo l'orchipessi e suggeriscono che gli uomini con unila il testicolo ritenuto completamente può avere un'anomalia testicolare bilaterale.
Mutagenesi dipendente dal cloruro di vinile: effetti degli estratti di fegato e dei radicali liberi.Gli effetti mutageni del cloruro di vinile (VC) sul ceppo di Salmonella typhimurium TA1530 sono migliorati da estratti di fegato di topo o ratto. Gli estratti preparati da topi pretrattati con cloruro di vinile o con l'induttore di enzimi microsomiali, Aroclor 1254, non hanno prodotto una stimolazione maggiore della mutagenesi VC-dipendente rispetto agli estratti di animali non trattati. Questi stessi estratti, tuttavia, differivano marcatamente nella loro capacità di stimolare la mutagenicità della dimetilnitrosamina (DMN), un composto che viene convertito in un mutageno da un'ossidasi a funzione mista microsomiale dipendente da NADPH L'ordine di attività degli estratti con DMN era Aroclor pretrattato è maggiore di non trattato è maggiore di VC pretrattato Inoltre, l'effetto stimolante degli estratti di fegato sulla mutagenesi mediata da VC non richiedeva NADPH ed era ancora evidente negli estratti di fegato in cui la miscela microsomiale ed il sistema ossidasi della funzione era stato inattivato dal calore. È stato anche scoperto che l'attività mutagena della VC è stimolata dalla riboflavina in presenza di luce, suggerendo che i radicali liberi possono essere coinvolti nella mutagenesi dipendente dalla VC.
Cambiamenti conformazionali del citocromo aa3 e dell'ATP sintetasi della membrana mitocondriale e loro ruolo nella trasduzione dell'energia mitocondriale.1. Termodinamica e basi molecolari dell'energia modificazioni conformazionali legate ai complessi del citocromo aa3 e dell'ATP sintetasi della membrana mitocondriale sono stati studiati con tecniche spettrofotometriche e fluorometriche 2. Il citocromo ferrico aa3 esiste in due conformazioni, ad alto spin e a basso spin, l'equilibrio tra questi stati è controllato dal differenza di potenziale elettrico attraverso la membrana mitocondriale. Il cambiamento conformazionale è determinato da un legame guidato dal campo elettrico di un protone per aa3 al complesso. A pH 7,2 la concentrazione delle due conformazioni è uguale a un potenziale di membrana di 170 mV corrispondente a circa 4 kcal/mole 3. La transizione da alto a basso spin in aa3 ferrico è indotta anche dall'idrolisi dell'ATP, nel qual caso due molecole di aa3 sono spostato per molecola di ATP idrolizzata. Ciò è in accordo con la traslocazione di due protoni attraverso la membrana mitocondriale accoppiata all'idrolisi dell'ATP come proposto nella teoria chemiosmotica della fosforilazione ossidativa. 4. La transizione conformazionale nel citocromo aa3 non è un'espressione della formazione di un intermedio \' ad alta energia\' o inversione della via di trasduzione dell'energia della fosforilazione ossidativa, ma è presumibilmente la base del controllo allosterico dell'attività della citocromo ossidasi dallo stato energetico del mitocondrio. Questo controllo è esercitato da un meccanismo di regolazione in cui la differenza di potenziale elettrico controlla la conformazione e le proprietà redox dei centri dell'eme e quindi il tasso di consumo di ossigeno. 5. La sintesi di una molecola di ATP mediante fosforilazione ossidativa è energeticamente equivalente al lavoro svolto nel trasportare due cariche elettriche attraverso l'intera membrana mitocondriale. 6. Le variazioni di fluorescenza dell'aurovertin legato all'ATP sintetasi rivelano che il potenziale elettrico di membrana induce un cambiamento conformazionale nella porzione F1 dell'enzima che è probabilmente associato alla dissociazione della proteina inibitrice naturale di F1. Questo cambiamento conformazionale è energeticamente equivalente al lavoro svolto nel portare una carica elettrica attraverso la membrana mitocondriale. 7. Viene proposto un modello per il meccanismo dei cambiamenti conformazionali indotti dal campo elettrico nei complessi del citocromo aa3 e dell'ATP sintetasi e viene discusso il significato di questi cambiamenti nel meccanismo e nel controllo della conservazione dell'energia mitocondriale.
[Vecchi e nuovi pericoli della trasfusione di sangue (transl.autore\'s)].Il pericolo predominante della trasfusione di sangue, anche dopo la scoperta del sistemi ABO e Rh, è il rischio immunologico. Questo ha portato nel 1940 ad una regolamentazione delle trasfusioni di sangue in Germania mediante linee guida ufficiali che sono state costantemente adeguate alla luce dei nuovi risultati delle ricerche. I pericoli dovuti al deterioramento durante la conservazione ricevono ancora troppo poca attenzione sebbene questi possono essere di maggior pericolo per il paziente rispetto al rischio di immunizzazione. Anche la valutazione di altri problemi medici della trasfusione non è sufficientemente applicata alla routine clinica.
Studio sulle proteine dei ribosomi citoplasmatici di lievito mediante elettroforesi su gel bidimensionale.Le proteine dei ribosomi citoplasmatici di lievito sono state analizzate con due diversi metodi di gel bidimensionale elettroforesi: corsa a pH 8,6 in 1-D1 e a pH 4,6 in 2-D (Metodo A); corsa a pH 5,0 in 1-D e in presenza di sodio dodecilsolfato in 2-D (Metodo B). I numeri di proteine stimate erano 28 (Metodo A) e 29 o 30 (Metodo B) nella subunità piccola 40S e 40 (Metodo A) e 41 (Metodo B) nella subunità grande 60S, rispettivamente. e le subunità grandi sono risultate inferiori rispettivamente a 40.000 e 60.000.
Caratterizzazione delle proteine ribosomiali eucariotiche.Viene descritto un metodo semplice di elettroforesi su gel di poliacrilammide bidimensionale che offre: (1) alta risoluzione di ribosomi eucariotici proteine; (2) buon recupero della proteina nel trasferimento dalla prima alla seconda dimensione; e (3) caratterizzazione delle proteine separate in termini di pesi molecolari e altre proprietà elettroforetiche Usando questo metodo, abbiamo caratterizzato 70 proteine nei ribosomi dei reticolociti di coniglio , 30 dalla subunità piccola e 40 dalla subunità grande. La distribuzione dei pesi molecolari viene confrontata con quelle ottenute da altri autori dopo il frazionamento delle proteine in due dimensioni.
[Indagini sull'attività lipasica di un composto pancreatico (autore\'s transl)].In relazione al processo fisiologico della digestione, i requisiti per un farmaco a base di enzimi. Il rilascio rapido di enzimi altamente attivi nel duodeno è un prerequisito per la stimolazione fisiologica della funzione escretoria pancreatica. La potenza digestiva è considerata un indicatore adatto per confrontare i risultati nella scansione in vitro su larga scala. I nostri studi in vitro e in vivo hanno confermato la possibilità di trasferire i risultati in vitro al valore terapeutico di questo composto. Come dimostrato dalle nostre indagini, il rilascio rapido di enzimi altamente attivi in vitro è accoppiato con un alto grado di biodisponibilità in Fermento duodenale. Di conseguenza, la normalizzazione o la riduzione del contenuto lipidico delle feci - come segno di efficacia terapeutica - è osservata in pazienti con insufficienza escretoria pancreatica. La valutazione statistica ha portato a quanto segue: 1 Un aumento statisticamente significativo (p inferiore allo 0,1%) dell'attività della lipasi nel succo duodenale in vitro dopo l'aggiunta di una capsula di Fermento duodenal. 2. L'attività della lipasi in vivo dopo 15 minuti è significativamente diversa da tutti gli altri valori. 3. Un calo statisticamente significativo (p inferiore all'1%) della quantità e del contenuto lipidico delle feci dopo il trattamento con Fermento duodenal.
Meccanismi difettosi di smaltimento dei lipidi durante l'infezione batterica nelle scimmie rhesus.I meccanismi che producono ipertrigliceridemia durante la sepsi batterica non sono stati ben definiti. In questo studio i meccanismi di smaltimento dei lipidi sono stati valutati in 76 scimmie rhesus maschi infette e 19 di controllo dalla capacità di smaltire i trigliceridi dopo: (1) carico lipidico orale; (2) carico lipidico endovenoso; e (3) mediante test di attività enzimatica lipolitica misurata dall'attività lipolitica post-eparina ( PHLA). Gli studi sono stati condotti sia prima che 48 ore dopo l'inoculazione endovenosa con Salmonella typhimurium o Diplococcus pneumoniae quando la malattia era uniformemente grave e gli aumenti dei trigliceridi sierici a digiuno erano aumentati al massimo. Le scimmie infettate da S. typhimurium hanno dimostrato una significativa ipertrigliceridemia a digiuno (p è inferiore a 0.001), ridotta clearance dei lipidi somministrati per via orale ed endovenosa e marcatamente ridotta PHLA. Durante questa sepsi gram-negativa, lieve le sono stati osservati thargy, lieve diarrea e una mortalità del 2%. Durante la sepsi da D. pneumoniae, le concentrazioni medie di trigliceridi a digiuno erano leggermente, ma non significativamente elevate. Mentre la clearance dei lipidi per via orale era ridotta, la clearance dei lipidi per via endovenosa non era compromessa e il PHLA era leggermente ridotto. Durante questa infezione da Gram-positivi erano presenti marcata letargia, agitazione e una mortalità del 20%. I risultati di questo studio supportano il concetto che una compromissione dei meccanismi di smaltimento dei lipidi, in particolare durante la sepsi gram-negativa con S. typhimurium, può contribuire in modo significativo all'ipertrigliceridemia osservata.
Effetti degli acidi grassi saturi e trans della dieta sulla sintesi e sull'idrolisi degli esteri del colesterolo nei testicoli dei ratti.Sono stati condotti studi sulla sintesi enzimatica e sull'idrolisi di esteri del colesterolo nei testicoli di ratto I ratti svezzati sono stati alimentati per 14 settimane con diete contenenti il 5% in peso di olio di cocco idrogenato (HCO), un concentrato di elaidato di etile e linolelaidato (TRANS), privo di acidi grassi essenziali (EFA), o cartamo olio (SAFF). L'attività esterificante del colesterolo era localizzata nella frazione solubile e l'attività idrolasi del colesterolo estere era distribuita sia nella frazione particolata che in quella solubile ottenuta da omogenati tissutali. Il pH ottimale era 6,0 per l'esterificazione e 6,9-7,0 per l'idrolisi. Né esterificante né l'attività idrolitica è stata influenzata dal congelamento e dallo scongelamento, ma entrambe le reazioni sono state inibite dal calore o dalla sonicazione. Gli animali di entrambi i gruppi HCO e TRANS avevano sviluppato una carenza di EFA prima di essere sacrificati. la carenza prodotta dall'alimentazione con la dieta HCO non ha avuto alcun effetto apparente sulla sintesi e sull'idrolisi degli esteri del colesterolo nei testicoli di ratto. La dieta TRANS ha influenzato lo sviluppo dei testicoli come giudicato dalla loro dimensione, e le attività di esterificazione del colesterolo e di idrolisi del colesterolo estere sono state soppresse nei testicoli degli animali di questo gruppo. Una delle principali differenze negli effetti delle diete HCO e TRANS sui lipidi dei test era la quantità relativamente minore di acido eicosatrienoico (20:3) e l'elevato livello di acido docosapentaenoico (22:5) negli esteri del colesterolo del testicolo lipidi del gruppo TRANS.
Edulcoranti di origine naturale.La dolcezza è un'importante sensazione gustativa per l'uomo. L'assenza di dolcificanti adatti come alternative ai ciclamati e alla saccarina ha portato a un rinnovato interesse per i dolcificanti da fonti naturali. Una breve rassegna della storia dell'uso dei dolcificanti fornisce una base per comprendere il nostro attuale consumo pesante di sostanze dolci. La struttura dei composti naturali che possiedono un gusto dolce varia da zuccheri semplici a complessi, intensamente proteine dolci. I tipi strutturali includono monoterpeni, diterpeni, triterpeni, flavonoidi, saponine steroidee, dipeptidi e proteine. Alcune di queste sostanze non sono, in senso stretto, naturali ma derivano da fonti naturali mediante modificazione chimica relativamente minore. Le proprietà di due sostanze non dolci, miraculin e acido gimnemico, sono incluse a causa della loro stretta relazione con il tema dei dolcificanti. Miraculin fa sì che le sostanze acide ta ste sweet e gymnemic bloccano selettivamente la percezione del gusto dolce. La seconda parte dell'articolo presenta alcuni dei lavori sulla monellina, la proteina intensamente dolce delle "bacche serendipity" (Dioscoreophyllum cumminsii). Gli studi fisico-chimici della monellina forniscono prove convincenti che si tratta, in effetti, di una proteina. Gli studi strutturali che utilizzano denaturanti e specifiche modificazioni chimiche hanno fornito l'inizio della nostra comprensione delle basi molecolari del sapore dolce della monellina.
Biochimica del rame.Il rame, in quanto componente di numerosi cuproenzimi, svolge un ruolo fondamentale in molte funzioni fisiologiche nell'uomo e negli animali. Dallo stand Per la salute umana vi sono almeno tre aree funzionali di primaria importanza: il rame è coinvolto nello sviluppo e nel mantenimento dell'integrità cardiovascolare e scheletrica, della struttura e della funzione del sistema nervoso centrale e della funzione eritropoietica compreso il metabolismo del ferro. diffusa carenza di rame nella popolazione umana, si verifica, a causa di difetti genetici e altri fattori precipitanti. Una chiara comprensione delle funzioni del rame e dei suoi meccanismi d'azione potrebbe rivelarsi molto utile nella soluzione di problemi presenti e imprevisti in medicina".
Gli effetti della dopamina e dell'isoproterenolo sulla circolazione polmonare.La dopamina e l'isoproterenolo, sebbene utilizzati principalmente per i loro effetti inotropi, sono anche potenti sostanze vasoattive. Per determinare i loro effetti sulla circolazione polmonare, abbiamo cannulato il bronco del lobo inferiore sinistro in 20 cani per consentire la ventilazione con aria o una miscela di 95% di azoto e 5% di anidride carbonica; l'ossigenazione sistemica è stata mantenuta ventilando il polmone destro con il 95% ossigeno Il lobo è stato perfuso a una portata controllata e la pressione atriale sinistra è stata mantenuta costante La ventilazione ipossica ha aumentato la resistenza vascolare lobare del 52% (p inferiore a 0,001) Infusione di dopamina (20 mcg per chilogrammo al minuto) durante la ventilazione aerea ha anche aumentato la resistenza vascolare lobare del 50% (p inferiore a 0,001). Durante la ventilazione ipossica, la dopamina ha aumentato la resistenza di un ulteriore 19% (p inferiore a 0,001). Al contrario, l'isoproterenolo (0,2 mcg per chilogrammo al minuto e) ha abolito la risposta pressoria ipossica (p inferiore a 0.001). Il blocco combinato alfa e beta-adrenergico non ha alterato la vasocostrizione indotta dall'ipossia, mentre la fentolamina ha bloccato la risposta della dopamina e il propranololo ha abolito la vasodilatazione indotta dall'isoproterenolo. Questi risultati indicano quanto segue: (1) la risposta pressoria ipossica è indipendente dall'innervazione simpatica; (2) la dopamina nei cani è un vasocostrittore polmonare; e (3) l'isoproterenolo è un vasodilatatore polmonare. Se questi risultati possono essere estrapolati all'uomo, l'isoproterenolo può essere l'agente inotropo preferito nei pazienti con un'elevata resistenza vascolare polmonare.
Rimozione della membrana basale nel seno involutivo.Gli studi morfologici e immunoistochimici mediante microscopia ottica ed elettronica hanno indicato che la membrana basale è stata rimossa durante il processo di involuzione della mammella murina. La rimozione della membrana basale è iniziata 2 giorni dopo lo svezzamento, era massima a 4 giorni e correlata con la degenerazione delle cellule epiteliali. Non c'era evidenza di fagocitosi della membrana basale, quindi la rimozione di questo antigene è stata attribuita all'idrolisi enzimatica Per determinare l'attività dell'omogenato mammario sull'antigene specifico della membrana basale, la membrana basale insolubile incorporata in gel di agarosio è stata incubata con omogenati del fegato e dei reni della mammella. Quando l'antigene della membrana basale è stato dimostrato dall'anticorpo specifico, è stato scoperto che l'omogenato mammario ha solubilizzato il basamento membrana ma fegato e reni non sono riusciti a solubilizzare la membrana basale Per quantificare la reazione e determinare alcune delle caratteristiche tic dell'enzima o degli enzimi responsabili, la membrana basale insolubile è stata marcata con 125I e il rilascio di radioattività nel surnatante dopo l'incubazione con estratti di mammella involuta indicava l'idrolisi della membrana basale. Gli estratti del seno omogenato hanno ampiamente idrolizzato la membrana basale marcata se gli inibitori naturali sono stati rimossi mediante lavaggio precedente, mentre gli estratti di fegato o rene preparati in modo simile erano privi di attività. L'idrolisi della membrana basale era dipendente dal tempo e dalla concentrazione e aveva un pH ottimale. La reazione è stata bloccata mediante riscaldamento preventivo dell'estratto a 100°C per 30 minuti, rimozione dei cationi bivalenti e presenza di diisopropilfluorofosfato (un inibitore specifico della serina esterasi); la dialisi prolungata non è riuscita a rimuovere l'attività idrolitica.