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Alpha-D-Mannosidase. Preparazione e proprietà dell'enzima libero e insolubilizzato.Alpha-D-Mannosidase (alpha-D-mannoside mannohydrolase, EC 3.2.1.24) è stato purificato all'omogeneità come dimostrato mediante elettroforesi su gel di poliacrilammide e ultracentrifugazione. Il peso molecolare dell'enzima è di circa 200000, la proteina sembra contenere 4 subunità, con pesi molecolari di 66000 e 44000. L'enzima è stato immobilizzato su Sono stati confrontati Sepharose e le proprietà dell'enzima accoppiato e libero. Entrambi erano stabili fino a 70°C con rapida perdita di attività tra 75-80°C;entrambi mantenevano un'attività del 25-30% in 6 M di urea e del 65% dell'originale l'attività potrebbe essere ripristinata nella preparazione accoppiata rimuovendo l'urea. Il pH massimo di ciascuna forma era approssimativamente lo stesso, con il massimo dell'enzima immobilizzato spostato leggermente a un pH più basso. L'alfa-D-mannosidasi accoppiata presentata in questo rapporto offre la possibilità di digerire substrati ad alto peso molecolare, come le glicoproteine, con i vantaggi di (1) recuperare grandi quantità di substrato digerito; (2) recupero della glicosidasi attiva; e (3) digestione ad alte temperature e in condizioni che denaturano molte proteine.
Cinetica enzimatica allo stato stazionario delle ribonucleasi pancreatiche di cinque specie mannaliane.I parametri cinetici Km, k+2 e k+2/Km di sono state determinate le ribonucleasi pancreatiche (EC 3.1.4.22) da mucca, giraffa, cavallo, ratto e rorqual minore, utilizzando come substrati 2\',3\'-citidina monofosfato e 2\',3\'-cuclic uridina monofosfato. Non sono state riscontrate grandi differenze tra le attività dei cinque enzimi. Le differenze relative tra le attività dei cinque enzimi sono dovute principalmente alle differenze nei tassi di idrolisi e non alle differenze nelle affinità per i substrati.
Una fosfolipasi A2 con attività anticoagulante. II. Inibizione dell'attività fosfolipasi nella coagulazione.Un fattore anticoagulante con attività fosfolipasi A2 è stato isolato da Vipera veleno di berus. L'attività della fosfolipasi è stata studiata sul fosfolipide piastrinico e sulla cefalina cerebrale. Il fattore del veleno ha mostrato una potente attività anticoagulante: 1 tazza ha compromesso la coagulazione di 1 ml di plasma povero di piastrine ricalcificato citrato. L'anticoagulante ha inibito la coagulazione per antagonismo al fosfolipide. costante di antagonismo (Kan = 6.8-10(-9) M) ha dimostrato l'elevata affinità dell'inibitore per il fosfolipide. Come con altre fosfolipasi A2, il fattore del veleno era termoresistente ma molto sensibile alla fotoossidazione. Entrambe le attività (attività anticoagulante e attività fosfolipasi) non erano marcatamente dissociate da processi di denaturazione o neutralizzazione. Curve leggermente diverse di inattivazione foto-ossidativa di entrambe le attività suggerivano il p presenza, sulla molecola, di due siti molto vicini responsabili della fosfolipasi e dell'attività anticoagulante. L'effetto inibitore sulla coagulazione era indipendente dal processo di idrolisi. Infatti, i lisoderivati e gli acidi grassi, risultanti dalla completa idrolisi con il fattore veleno, erano attivi quanto i fosfolipidi nativi. Inoltre la fosfolipasi A2 di altri veleni di viperidi, che non avevano attività anticoagulante, produceva lisoderivati altrettanto attivi. Ciò ha mostrato che la scissione del legame beta-acilico non interferisce con l'attività del fosfolipide. È stato proposto un possibile meccanismo di inibizione della coagulazione da parte del fattore veleno. A causa della sua elevata affinità per i fosfolipidi, l'inibitore complicherebbe il fosfolipide nel suo sito di legame alle proteine, compromettendo la normale disposizione dei fattori proteici della coagulazione e, di conseguenza, la loro attivazione. Le cariche positive dell'inibitore (pI = 9.2) potrebbero legarsi ai gruppi fosforilici o carbossilici del fosfolipide, rendendoli non disponibili per il legame proteico. La formazione del complesso comporta una perdita della capacità dissociante dell'enzima verso il suo substrato. Ciò ha richiesto un'ulteriore interazione dell'inibitore con un fattore proteico della coagulazione. L'inibitore potrebbe essere rimosso dal complesso mediante anticorpi specifici, consentendo il recupero della normale interazione fosfolipide-proteina. Il ruolo del calcio nel complesso non è stato ancora chiarito. Questo fattore veleno offre uno strumento utile per studiare l'interazione tra fosfolipidi e proteine della coagulazione.
Una fosfolipasi A2 con attività anticoagulante. I. Isolamento dal veleno di Vipera berus e proprietà.Una proteina anticoagulante è stata isolata mediante cromatografia su cellulosa DEAE e gel filtrazione dal veleno della Vipera berus orientale (Europa dell'Est). La purificazione è stata completata mediante eluizione su carbossimetilcellulosa con gradiente continuo a pH costante. L'inibitore della coagulazione è stato separato dagli altri enzimi del veleno, ad esempio procoagulante, fibrinogenolitico, aminoesterasi e amino attività dell'acido ossidasi. E 'stato anche separato da altri componenti della fosfolipasi che non erano correlati alla proprietà anticoagulante. L'inibitore si presentava come una singola proteina a catena polipeptidica, formata da 119 residui di amminoacidi, con un peso molecolare di 13400 e un punto isoelettrico di 9,2. A bassa molarità salina, è stata osservata una transizione monomero-trimero di questa proteina. Entrambe le forme avevano la stessa composizione amminoacidica. C'erano sei bri disolfuro dge senza gruppi SH liberi per molecola di fosfolipasi. Privo di qualsiasi attività proteolitica, l'inibitore della coagulazione ha mostrato un'elevata attività fosfolipasi in presenza di calcio. L'attività non è apparsa con il tampone EDTA privato del catione. Le sospensioni micellari finemente disperse sono risultate idonee ad ottenere la massima attività fosfolipasica. L'elevata concentrazione di sodio colato o il solvente metanolo/cloroformio/etere erano efficaci senza perdita di attività enzimatica. Come caratteristica della fosfolipasi A2 (EC 3.1.1.4), i prodotti di degradazione identificati sulla cromatografia su strato sottile hanno indotto l'emolisi degli eritrociti umani. Il valore Km apparente 1,25 - 10(-3) M è stato determinato su fosfatidilcolina isolata da ovolecitina. Questo inibitore del berus purificato sarebbe utile per studiare il coinvolgimento dei fosfolipidi nel meccanismo di coagulazione.
Purificazione e caratterizzazione dell'enzima butirrilcolina da Pseudomonas polycolor.Un enzima butirrilcolina (EC 3.1.1. -) per Pseudomonas polycolor IFO 3918 è stato purificato di circa 9270 volte con un recupero del 9,9% mediante l'uso di tecniche cromatografiche. La preparazione enzimatica è apparsa omogenea quando sottoposta ad analisi elettroforetica e ultracentrifugazione. Il peso molecolare è stato determinato come circa 59000 mediante filtrazione su gel. L'elettroforesi di focalizzazione isoelettrica ha rivelato che l'enzima aveva un punto isoelettrico intorno a pH 5.1. L'enzima catalizzava l'idrolisi della butirrilcolina con l'attività mista tra i vari esteri testati, e scindeva benzoilcolina, propionilcolina e alcuni esteri alifatici, ma non attaccava l'acetilcolina. Il valore stimato di Km a pH 7,5 e 25 gradi C erano 7-10 (-4) M per butirrilcolina L'enzima è stato irreversibilmente inibito da composti organofosforici e carbammato s, come il diisopropilfosfofluoruro e l'eserina. L'enzima è stato inibito da alcuni composti, come l'atropina e la chinidina. I sali di ammonio auaternario hanno mostrato un effetto inibitorio sull'enzima simile all'inibizione cooperativa.
Forme multiple di istone acetiltransferasi nel citosol dell'endometrio di vitello.L'attività dell'istone acetiltransferasi (EC 2.3.1. -) del citosol dell'endometrio di vitello ha sono state separate in tre attività separate mediante cromatografia graduale su DEAE-cellulosa. Oltre all'eluizione differenziale dalla DEAE-cellulosa, le tre attività sono differenziate per il loro pH ottimale, le preferenze per le sottofrazioni istoniche come substrati e la stabilità alla denaturazione al calore. Picco I ha un valore ottimale di pH 8,7 e acetila preferibilmente gli istoni F2b e F3; il picco II ha un valore ottimale di pH 8,5 e acetila preferibilmente l'istone F2al seguito dall'istone F2b; il picco III ha un valore ottimale di pH 9,5 e ha una specificità simile al picco II. Il picco III è sensibilmente più stabile a 60 gradi C rispetto al picco II. Nessuno dei picchi ha trasferito l'acetato ad altre proteine testate o al tRNA. Questi studi suggeriscono la presenza di più istoni acetiltransferasi nei citosol tissutali.
Ossidazione di ipoxantina, xantine, purina-6,8-dioni e dei corrispondenti derivati 6-tiosso-sostituiti N-metile da parte della xantina ossidasi del latte bovino.1. È stata studiata l'ossidazione di sei serie di purine (ipoxantina, xantine, purina-6,8-dioni e i corrispondenti 6-tiosso derivati) da parte di una xantina ossidasi del latte bovino altamente purificato (EC 1.2.3.2), utilizzando un varietà di derivati N-metilici 2. I sostituenti N-metilici possono aumentare o ridurre i tassi enzimatici L'aumento è attribuito al blocco di gruppi che mediano modalità sfavorevoli di legame del substrato all'enzima L'introduzione di gruppi N-metil può anche inibire l'ossidazione enzimatica , sia occludendo gruppi leganti essenziali, sia impedendo processi di tautomerizzazione spontanei o indotti da enzimi, che creano nei substrati opportuni siti di legame 3. In tutte le purine che vengono rapidamente attaccate dalla xantina ossidasi, il corretto attaccamento al centro attivo è mediato dal raggruppamento s (3) NH, (9) N o (3) N, (9) NH. 4. I tassi ridotti di solito esprimono un'affinità del substrato ridotta, che trova la sua espressione in una debole inibizione competitiva dell'ossidazione della xantina.
Studi sull'inosina monofosfato deidrogenasi. Scambio isotopico all'equilibrio.Indagini sul meccanismo dell'IMP deidrogenasi (IMP: NAD+ ossidoriduttasi, EC 1.2.1.14 ) sono state effettuate reazioni a pH 7,0 misurando velocità di scambio isotopico all'equilibrio chimico con K+ mantenuto a concentrazione costante. I risultati sono generalmente in accordo con le conclusioni raggiunte sulla base dei dati cinetici allo stato stazionario ottenuti in precedenza e confermano che c'è un'aggiunta casuale di IMP e NAD all'enzima. I dati indicano anche chiaramente che a pH 7,0 la catalisi è più veloce della velocità di rilascio di IMP e/o XMP che è limitante per la sequenza di reazione. Il legame di IMP all'enzima a pH 8,1 è stato dimostrato che si verifica in assenza sia di K+ che di NAD e id indipendentemente dalla concentrazione di K+.
L'esistenza di tre tipi di acetoidrossiacido sintetasi in un mutante di Aerobacter aerogenes che richiede isoleucina.La sintesi dei tre tipi di acetolattato sintasi ( EC 4.1.3.18) che sono responsabili della biosintesi di os isoleucina e valina, è stata osservata in Aerobacter aerogenes I-12, un mutante che richiede isoleucina, quando cresciuto sui quattro tipi di terreno Quando le cellule sono state coltivate su terreno ricco di isoleucina , si è formata l'acetolattato sintasi sensibile all'inibizione del feedback e avente un pH ottimale a 8,0 Aumentando la quantità di fosfato di potassio nel mezzo, è stata rilasciata la repressione del catabolito dell'enzima avente un pH ottimale a 6,0 e che è insensibile all'inibizione del feedback Al contrario, l'acetolattato sintasi avente un pH ottimale a 8,0 e insensibile all'inibizione del feedback si formava quando l'isoleucina era limitata, indipendentemente dalle concentrazioni di fosfato. Due enzimi insensibili non erano regolati dall'isoleucina, l eucina e valina, sebbene l'enzima sensibile a pH 8.0 sia stato represso da loro. Pertanto, si può presumere che la sintesi dell'enzima insensibile a pH 8.0 sia stata repressa limitando la quantità di isoleucina ancora aperta.
Attività proteolitica endogena e catene polipeptidiche costituenti della tireoglobulina 19 S ovina e suina.Tireoglobuline 19-S suine e ovine preparate da ghiandole congelate in diversi tamponi utilizzando l'estrazione della fetta o l'omogeneizzazione, la precipitazione del solfato di ammonio e la cromatografia con DEAE-cellulosa o la filtrazione su gel di Sepharose 6B sono stati contaminati con attività proteasica di pH ottimale 4.5 e 8.6, come mostrato dall'elettroforesi su gel di poliacrilammide di sodio dodecilsolfato. Le temperature ottimali di autodigestione erano 37 gradi C a pH 4,5 e 25 gradi C a pH 8,6. Le tireoglobuline preparate da ghiandole non congelate pH 7,2 in fosfato di sodio 0,1 M mediante estrazione a fette, precipitazione di solfato di ammonio e filtrazione su gel di Sepharose 6B erano prive di attività proteolitica acida ma sono state comunque sottoposte ad autodigestione a pH 8,6. Il diisopropilfluorofosfato è stato un potente inibitore dell'attività della proteasi alcalina dei preparati di tireoglobulina ovina. In contrasto con la tireoglobulina obt nate da ghiandole congelate, le proteine purificate da ghiandole fresche non congelate a pH 7,2 hanno mostrato solo le specie 19-S e 12-S mediante elettroforesi in gel di poliacrilammide di sodio dodecilsolfato. Erano visibili pochissime bande che migravano più velocemente di 12-S. Dopo la riduzione completa e l'S-alchilazione delle tireoglobuline suine e ovine, non sono state osservate variazioni qualitative nel pattern dell'elettroforesi su gel rispetto alle proteine non modificate. Specie di mol apparente. peso corrispondente al nativo 12 S erano il componente principale, suggerendo fortemente un mol. peso di circa 330.000 per le catene peptidiche elementari delle tireoglobuline suine e ovine.
Il decadimento della fluorescenza dei residui di triptofano nelle proteine native e denaturate.La cinetica del decadimento della fluorescenza a diversi intervalli dello spettro di emissione è riportata per 17 proteine. Su otto proteine contenenti un singolo residuo di triptofano per molecola, sette proteine mostrano una cinetica di decadimento multiesponenziale, suggerendo che per la maggior parte delle proteine può esistere variabilità nella struttura proteica. I residui di triptofano il cui spettro di fluorescenza è spostato verso il rosso possono avere una durata superiore a 7 ns. non sono stati rilevati in nessuna delle proteine denaturate studiate, indicando che nelle proteine native i triptofani con uno spettro spostato verso il rosso sono influenzati dalla struttura terziaria della proteina. La cinetica di decadimento della fluorescenza di dieci proteine denaturate studiate obbedisce a funzioni di decadimento multiesponenziale. si conclude quindi che i residui del triptofano nelle proteine denaturate possono essere raggruppati in due classi: la prima caratterizzata da una relazione vita mediamente lunga di circa 4 ns e la seconda ha una vita breve di circa 1,5 ns. Lo spettro di emissione del gruppo caratterizzato dalla vita più lunga è spostato verso il rosso rispetto allo spettro di emissione del gruppo caratterizzato dalla vita più breve. Un confronto dei dati di decadimento con la resa quantica delle proteine solleva la possibilità che un sottogruppo dei residui di triptofano sia completamente spento. È interessante notare che nonostante questa eterogeneità nell'ambiente dei residui di triptofano in ciascuna proteina denaturata, è stata ottenuta quasi la stessa cinetica di decadimento per tutte le proteine denaturate studiate nonostante le strutture primarie molto diverse. Si conclude quindi che ogni residuo di triptofano interagisce in maniera più o meno casuale con altri gruppi della catena polipeptidica, e che in media i diversi residui di triptofano nelle proteine denaturate hanno un tipo di ambiente simile.
Isolamento, caratterizzazione e sequenza parziale di frammenti di bromuro di cianogeno e peptidi tiolici da D-amminoacido ossidasi di rene di maiale.Una caratterizzazione parziale del primario La struttura della D-amminoacido ossidasi (D-amminoacido:ossigeno ossidoreduttasi (deaminante), EC 1.4.3.3. ) dal rene di maiale è stata ottenuta mediante una scissione CNBr della proteina 14C-carbossimetilata. Quattro frammenti sono stati isolati e purificati e il loro allineamento reso possibile dalla sovrapposizione con peptidi contenenti metionina derivati dalla digestione triptica della proteina carbossimetilata 14C. Un sequenziamento parziale dei frammenti CNBr è stato effettuato mediante la procedura automatizzata di Edman e mediante analisi di sequenza manuale. 5 tioli alchilati dell'enzima monomero (Curti, B. , Ronchi, S. , branzoli, U. , Ferri, G. e Williams, Jr. , CH (1973) Biochim. Biophys. Acta 327, 266-273) sono stati isolati e la loro sequenza determinata. I risultati attuali non mostrano omologie significative con le sequenze note di altre flavoproteine.
Dissociazione protonica legata all'eme dei complessi di monossido di carbonio di mioglobina e perossidasi.Dalla titolazione spettrofotometrica e dalla misurazione del bilancio protonico è stato riscontrato che il valore di pKa di un gruppo di protonazione legato all'eme della ferro-perossidasi C del rafano (donatore: H2O2 ossidoriduttasi, EC 1.11.1.7) è passato da 7,25 a 8,25 in seguito alla combinazione con CO. L'esperimento di titolazione spettrofotometrica con mioglobina ha anche rivelato la presenza di un gruppo di protonazione legato all'eme , il valore pKa è 5,57 nella mioglobina e 5,67 nel complesso CO-mioglobina Si è concluso che il netto spostamento del valore pKa nel caso della perossidasi era attribuibile alla presenza di un legame idrogeno tra il sesto ligando e la base distale. È stata discussa la differenza nella forza di tale legame idrogeno tra perossidasi e mioglobina.
Cromatografia di affinità su gel di idrossialchil metacrilato. III. Adsorbimento di chimotripsina a poli(idrossialchil metacrilati) con benzilossicarbonil-glicil-D-fenilalanina e -D-leucina legati in modo covalente in funzione di pH e forza ionica.La chimotripsina è specificamente adsorbita a bassa forza ionica e pH alcalino su gel di idrossialchil metacrilato con N-benzilossicarbonilglicl-D-fenilalanina o N-benzilossicarbonilglicil-D-leucina attaccata attraverso 1,6-esandiammina La chimotripsina non viene adsorbita né sul gel non modificato (Spheron) né sul gel con annesso l'1,6-esandiammina (NH2-Spheron). L'adsorbimento della chimotripsina su Z-Gly-D-Phe-NH2-Spheron è stato studiato come funzione del pH e della forza ionica La tripsina non viene adsorbita a questo gel La chimotripsina isolata da un estratto pancreatico grezzo mediante cromatografia di affinità su Z-Gly-D-Phe-NH2-Spheron ha avuto la stessa attività dell'enzima isolato su una colonna di Spheron, a cui il naturale-occorrer ng inibitore della tripsina era stato accoppiato.
Sulla separazione dei prodotti di degradazione del fibrinogeno D ed E.La separazione dei prodotti di degradazione del fibrinogeno D ed E mediante cromatografia su gel non può essere ottenuta a neutro pH anche in presenza di elevata forza ionica del tampone di eluizione Si ipotizza che i frammenti D ed E siano legati tra loro in un complesso impedendo la separazione nonostante pesi molecolari differenti di entrambi i componenti Mediante aggiunta di sostanze caotropiche come 1 M Kl al tampone di eluizione è possibile ottenere una netta separazione dei prodotti di degradazione D ed E su colonne Sephadex G-200.
Interazione dell'albumina sierica con le emoglobine normali e falciformi.La stabilità dell'ossiemoglobina S durante l'agitazione meccanica è stata migliorata dall'aggiunta di albumina sierica umana. l'effetto stabilizzante era massimo quando la concentrazione di albumina sierica si avvicinava a quella dell'ossiemoglobina, suggerendo un'interazione a livello molecolare tra di loro. Gli effetti dell'albumina sierica sull'ossiemoglobina A erano essenzialmente simili a quelli sull'ossiemoglobina S. Anche le deossi e le metaemoglobine erano stabilizzate dall'albumina sierica L'aggiunta di albumina sierica umana ad una soluzione contenente ossiemoglobina falciforme formava lentamente un composto che aveva un picco di assorbanza a 620 nm. Dopo purificazione mediante cromatografia su colonna Sephadex G-200, questo composto è stato identificato come metemalbumina. Confronto dei tassi di formazione di metemalbumina dall'emoglobina con vari stati di ligando e dall'albumina sierica umana ha mostrato che il tasso di formazione dall'emicromo era molto più veloce che da met-, ossi- e deossiemoglobina. Circa il 60% dell'eme è stato trasferito dall'emicromo all'albumina quando la miscela è stata tenuta a temperatura ambiente per 5 minuti, in contrasto con solo il 5% dalla metaemoglobina. Questo risultato suggerisce che l'emicromo, piuttosto che la metaemoglobina, è l'intermedio nella formazione di metemoalbumina dall'ossiemoglobina e dall'albumina sierica umana. Questa ipotesi è supportata dalla constatazione che la velocità di formazione della metemalbumina era più rapida a valori di pH alcalino che a valori di pH acido. L'albumina sierica di varie fonti animali ha mostrato diversi effetti stabilizzanti. La formazione di metemalbumina da queste albumine animali era molto inferiore a quella dell'albumina umana.
Reazioni cooperative del complesso poli-L-lisina-eme con ossigeno molecolare, monossido di carbonio o ione cianuro.L'interazione dell'alfa-elica è stato studiato il complesso poli-L-lisina-eme con ossigeno molecolare, monossido di carbonio o ione cianuro. Sono stati determinati la curva di equilibrio di legame e i parametri di attivazione per le reazioni. Sono state osservate risposte sigmoidi per l'assorbimento di ossigeno molecolare o monossido di carbonio da parte del complesso e il parametro cooperativo è risultato essere 2.1. Ciò indicava un'interazione cooperativa tra emi situati su un'alfa-elica cilindrica di poli-L-lisina. Ma quelli di altri complessi polimero-ligando-eme erano 1.0. Il meccanismo di reazione cooperativa, in cui una poli-L-lisina alfa-elica svolge un ruolo importante, è stato suggerito.
Risonanze contact-shifted negli spettri 1H NMR del citocromo b5. Identificazione della risonanza e distribuzione della densità di spin nel gruppo eme.Questo documento descrive l'identificazione di alcune delle risonanze contact-shifted nello spettro 1H NMR del citocromo ferrico b5 a basso spin. In questi esperimenti il confronto con il citocromo b5 che era stato ricostituito con deuteroema IX ha giocato un ruolo importante. Le tecniche NMR utilizzate includono esperimenti di doppia risonanza, analisi della larghezza di linea , e studi sulla dipendenza dal pH degli spostamenti chimici 1H NMR. La struttura elettronica dell'eme derivata da queste assegnazioni di risonanza è caratterizzata da una distribuzione della densità di spin altamente anisotropa. Questa anisotropia si manifesta in modo più sorprendente nelle risonanze dei sostituenti vinilici e dell'acido propionico del protoema IX. Gli esperimenti descritti in questo lavoro hanno ulteriormente rivelato la coesistenza in soluzioni acquose di due diverse specie molecolari di citocromo b 5, che possono essere osservati simultaneamente nelle regioni dello spettro 1H NMR che contengono le risonanze in gran parte spostate per contatto.
Interazioni tra emoglobina e fosfati organici studiate con spettroscopia di risonanza magnetica nucleare 31P e ultrafiltrazione.1. Gli spostamenti chimici (delta) dei fosfati di 2 Il 3-difosfoglicerato e l'adenosina trifosfato (ATP) sono stati determinati mediante spettroscopia di risonanza magnetica nucleare al fosforo (31P NMR) e sono stati trovati spostati verso il basso in seguito all'aggiunta di emoglobina (3 mM) a una soluzione di difosfoglicerato (5 mM) o ATP (1 mM). 2. Il legame di questi composti all'emoglobina è stato determinato anche mediante ultrafiltrazione su membrana. È stata osservata una relazione diretta tra il cambiamento nello spostamento chimico ((delta delta) del 2-P e 3-P del difosfoglicerato e il percentuale di difosfoglicerato legato, quando quest'ultimo è stato variato alterando il pH, lo stato di ossigenazione o la concentrazione totale di difosfoglicerato 3. In studi comparabili con il legame dell'ATP, una relazione lineare tra i valori delta delta di gamma-, beta -, e l'alfa-P dell'ATP e la percentuale di ATP legato non sono stati osservati quando sono stati tracciati i dati di tutti gli esperimenti. I segnali NMR non erano rilevabili nelle soluzioni di deossiemoglobina contenenti 1 mM di ATP, ma sono stati osservati in soluzioni contenenti 3,8 mM di ATP. 4. I risultati indicano che la spettroscopia NMR 31P è uno strumento promettente per studiare le interazioni del fosfato organico con l'emoglobina.
Studi spettroscopici sulla complessa formazione di suramina con albumina sierica bovina e umana.Il legame della suramina all'albumina sierica bovina e umana è stato studiato mediante gel filtrazione e misurazioni spettroscopiche. Oltre ad alcuni siti di legame a bassa affinità, la suramina ha, sulla molecola di albumina sierica bovina uno e sulla molecola di albumina sierica umana due, siti di legame ad alta affinità. Le misurazioni spettroscopiche rivelano che ci sono grandi differenze tra le albumine nel meccanismo di legame ai siti di legame ad alta affinità. Inoltre, si suggerisce che alte concentrazioni di suramina provochino un dispiegamento della molecola di albumina. Per spiegare il comportamento insolito della suramina in relazione allo spostamento di altri ligandi dal legame dell'albumina la sonda a fluorescenza acido 1-anilino-8-naftalensolfonico (ANS) è stata impiegata come molecola del gruppo reporter per misure di fluorescenza e dicroismo circolare. menti si potrebbe dimostrare che la suramina influenza notevolmente la microrganismo di entrambe le molecole di albumina. Nel caso di queste misurazioni sono state riscontrate anche grandi differenze tra albumina sierica bovina e umana.
Uno studio di risonanza paramagnetica elettronica sull'assorbimento di Mn2+ da parte della membrana corioallantoidea del pulcino.Captazione di Mn2+ nella membrana corioallantoidea del pulcino, un tessuto epiteliale embrionale che trasporta Ca2+ in vivo è stato studiato utilizzando la risonanza paramagnetica elettronica (EPR). Mn2+ è stato utilizzato come analogo paramagnetico per Ca2+, poiché vi sono prove che Mn2+ è accumulato dal meccanismo di trasporto del Ca2+. Dopo 1,5 h di assorbimento lo spettro EPR del Mn2+ nella membrana indicava che l'89% di Mn2+ era in una forma di scambio di spin, indicando un impacchettamento ravvicinato di Mn2+. La spaziatura di Mn2+ è stata stimata dalla larghezza della linea a circa 4,7 A. Il restante Mn2+ era molto probabilmente Mn2+ esaidrato. A pH 7,4 lo spin lo spettro di scambio di spin tendeva ad allargarsi quando la captazione era inibita, mentre a pH 5,0 lo spettro di scambio di spin era completamente abolito in presenza di inibitori. Lo spettro EPR di Mn2+ nella membrana corioallantoica aveva una larghezza di riga più ampia di quella di Mn2+ in mitocondri isolati, suggerendo che in questo tessuto i mitocondri non sono direttamente coinvolti nel trasporto di cationi bivalenti. Questi studi EPR supportano il concetto che i cationi bivalenti sono sequestrati in alte concentrazioni dal resto del contenuto cellulare durante il trasporto attivo transcellulare.
La principale sialoglicoproteina della membrana eritrocitaria umana. Rilascio con un detergente non ionico e purificazione.La principale sialoglicoproteina della membrana eritrocitaria umana è stata rilasciata selettivamente dal detergente non ionico Tween 20 e ulteriormente purificata in tamponi privi di detergente mediante cromatografia con idrossiapatite e, infine, mediante cromatografia di interazione idrofobica su pentil-sefarosio. La glicoproteina purificata mostra una zona principale, PAS-1, e fino a tre zone minori dopo la colorazione sia per proteine e carboidrati in elettroforesi su gel di poliacrilammide in presenza di dodecil solfato. Le relative intensità di colorazione dipendono dalla concentrazione. Quando la glicoproteina purificata è stata riscaldata a 100 gradi C in dodecil solfato, più macchie appare nel più rapido zona, PAS-2, e meno nelle zone più lente, indicando una disaggregazione delle forme oligomeriche di questa glicoproteina, incluso un dimero, PAS-1.
Una quantificazione dei fattori che influenzano le attività idrolasi e transgalattosilasi della beta-galattosidasi (E. coli) sul lattosio.È stato implementato uno studio per quantificare le attività idrolasi e transgalattosilasi della beta-galattosidasi (E. coli) con il lattosio come substrato e studiare vari fattori che influenzano queste attività. A basse concentrazioni di lattosio il tasso di produzione di galattosio era uguale al tasso di produzione di glucosio. Il tasso della produzione di galattosio rispetto al glucosio, tuttavia, è diminuita drasticamente a concentrazioni di lattosio superiori a 0,05 M e ha avuto inizio la produzione di trisaccaridi e tetrasaccaridi (rapporti galattosio/glucosio di circa 2:1 e 3:1, rispettivamente, sono stati trovati per questi due tipi di oligosaccaridi Si sono formati almeno cinque diversi trissacharidi e i loro modelli di formazione hanno mostrato che probabilmente utilizzavano sia il lattosio che l'allolattosio come accettori di galattosile. quantità proporzionali al glucosio a tutte le concentrazioni di lattosio (i rapporti allolattosio/glucosio erano circa 0,88). L'analisi di vari dati, inclusa una reazione analizzata in tempi molto precoci, ha mostrato che il principale mezzo di produzione di allolattosio (e l'unico mezzo inizialmente) era il trasferimento enzimatico diretto del galattosio dalla posizione 4 alla posizione 6 della frazione glucosio di lattosio senza precedente rilascio di glucosio dall'enzima. È stato dimostrato, tuttavia, che l'allolattosio potrebbe anche essere formato in quantità significative dal trasferimento del galattosio alla posizione 6 del glucosio libero, e anche dall'idrolisi del trisaccaride preformato. È stato proposto un meccanismo che si adatta ai dati di velocità iniziali in cui i passaggi che comportano la formazione di un complesso enzima-gallattosio-glucosio, la formazione e la rottura dell'allolattosio sull'enzima e il rilascio di glucosio sembrano essere tutti di entità approssimativamente uguale e determinazione del tasso. Vari fattori hanno influenzato le quantità di attività transgalattosilasica e idrolasi che si verificano. Ad alti valori di pH (maggiori di 7,8) il rapporto di attività transgalattosilasi/idroliasi è aumentato drasticamente mentre è diminuito a bassi valori di pH (inferiori a 6,0). A valori di pH medi il rapporto era sostanzialmente costante. L'assenza di Mg2+ ha causato un'ampia diminuzione del rapporto di attività transgalattosilasi/idrolasi mentre l'assenza di quasi tutte le tracce di Na+ o K+ non ha avuto alcun effetto. La configurazione anomerica del lattosio ha alterato i rapporti di attività transgalattosilasi/idrolasi, l'alfa-lattosio ha determinato una diminuzione della produzione di allolattosio (attività transgalattosilasica) rispetto alle attività idrolasi (produzione di glucosio) mentre il beta-lattosio ha avuto l'effetto opposto.
Glucosio-6-fosfato deidrogenasi da lievito di birra\'. Gli effetti del pH e della temperatura sui parametri cinetici allo stato stazionario delle specie proteiche a due catene.È stato effettuato uno studio sistematico della dipendenza dal pH e dalla temperatura dei parametri cinetici allo stato stazionario delle specie enzimatiche stabilizzate a due subunità della glucosio-6-fosfato deidrogenasi, in assenza di reazioni di associazione-dissociazione sovrapposte I dati Vmax(app) ottenuti in più tamponi tra pH 5 e 10 e a 18-32 gradi C portano al postulato che almeno due insiemi di equilibri protonici possono governare la catalisi (uno vicino a pH 5.7 A 25 GRADI C e un altro vicino a pH 9.2); inoltre, sembrano essere necessarie due vie per la formazione del prodotto (vale a dire, due Vmax\') per spiegare la natura bifasica delle curve log Vmax(app) vs. pH, con Vmax(base) maggiore di Vmax( acido + neutro). Dei vari tamponi esplorati, un grado di interazione uniforme o un mi Il grado minimo di interazione delle specie tampone potrebbe essere valutato dalle variazioni di entalpia associate ai valori derivati per le costanti di ionizzazione attribuite agli equilibri protonici nei complessi ternari enzima-substrati per il caso di tamponi Tris-acetato-EDTA, a forza ionica costante. Con la selezione di questo tampone a 0,1 (T/2) e a 25 e 32 gradi C, è emerso un meccanismo cinetico autoconsistente che consente il legame casuale dei due substrati completamente ionizzati all'enzima attraverso due vie principali, e formazione del prodotto sia da EA--B- che da HE-A--B-. Come in precedenza (Kuby et al. Arch. Biochem, Biophys. 165, 153-178, 1974), si presume un quasi-equilibrio, con passaggi limitanti (k + 5 e k + 5\') all'interconversione del complessi ternari. Si potrebbero quindi stimare i valori per i due insiemi di equilibri protonici definiti da questo meccanismo (vale a dire, pKk, pKH2 per le prime ionizzazioni e pKk\', pKH\' per la seconda). Dai loro valori numerici (ad es. a 25 gradi C: pKK = 5.7 PKH2 = 5.2; e pKK\' = 9.1, PKH\' = 8.2) e dai valori per delta H gradi ioniz (ad es. delta H gradi pKK CIRCA 5.1 KCAL/MOL; DELTA H gradi pKK\' CIRCA 11 KCAL/MOL), VIENE PRESENTATO UN POSTULATO CHE ATTRIBUISCE QUESTE Costanti di dissociazione acida rispettivamente a un gruppo imidazolo e epsilon-amino.
Isolamento delle endopeptidasi cerebrali: influenza delle dimensioni e della sequenza dei substrati strutturalmente correlati alla bradichinina.Due endopeptidasi tiolo-attivate con pH ottimale vicino a pH 7,5 sono state isolato dalla frazione surnatante di omogenati di cervello di coniglio mediante cromatografia DEAE-cellulosa, gel filtrazione e isoelettrofocalizzazione L'idrolisi del legame peptidico è stata misurata quantitativamente mediante cromatografia a scambio ionico con un analizzatore di amminoacidi La chininasi cerebrale A idrolizza il legame peptidico Phe5-Ser6 nella bradichinina ( Bk), Arg1-Pro2-Pro3-Gly4-Phe5-Ser6-Pro7-Phe8-Arg9. È isoelettrico vicino a pH 5,2 e ha un peso molecolare di circa 71 000. L'enzima idrolizza anche il legame peptidico Phe-Ser in Lys- Bk, Met-Lys-Bk, des-Arg1-Bk, Lys9-Bk, Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg e Gly-Pro-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg, ma non idrolizzare (0,1%) questo legame in des-Phe8-Arg9-Bk. La chininasi B cerebrale idrolizza il legame peptidico Pro7-Phe8 in Bk. È isoelettrico a pH 4,9 e ha una molec peso ulare di circa 68 000. La chinasi B cerebrale idrolizza anche il legame Pro-Phe in Lys-Bk, Met-Lys-Bk, Lys9-Bk, Ser-Pro-Phe-Arg e Phe-Ser-Pro-Arg. Il pretrattamento del chininogeno denaturato con la chininasi cerebrale A o B non ha ridotto la quantità di Bk rilasciabile dalla tripsina da questa proteina precursore, indicando che la sequenza Bk, quando fa parte di una grande proteina, non è un substrato per nessuno dei due enzimi. Tuttavia, le chinasi A e B idrolizzano l'ottadecapeptide Gly-Leu-Met-Lys-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-Ser-Val-Gin-Val. I dati mostrano che gran parte della porzione C-terminale della bradichinina è importante per l'attività della chinasi A cerebrale e, per entrambi gli enzimi, la dimensione del peptide e presumibilmente i residui adiacenti al legame a forbice sono importanti nel determinare la velocità di idrolisi del legame peptidico da parte di queste endopeptidasi.
Titolazione di ioni idrogeno del ferricitocromo c. di cuore di cavalloCurve di titolazione continua di ioni idrogeno di soluzioni deionizzate di ferricitocromo c di cuore di cavallo sono state ottenute a 25 gradi C. a una forza ionica costante di 0,10 da pH 3,0 a 11,0. La titolazione della proteina ossidata in KCl ha richiesto 28,4 equiv su tale intervallo di pH ed è stata visualizzata una piccola isteresi tra gli arti anteriori e posteriori. L'approssimazione di Linderstrom-Lang, che prende in considerazione delle interazioni elettrostatiche tra gruppi carichi sulla superficie della proteina, è stato utilizzato in un programma di simulazione al computer per analizzare separatamente gli arti anteriori e posteriori della curva di titolazione. I risultati hanno indicato 1 alfa, 12 beta e gamma e 1 eme propionico I residui carbossilici, 1 imidazolo, 1 fenolico e 18 epsilon-ammino sembrano titolare normalmente. Le variazioni del fattore di interazione elettrostatica omega suggeriscono cambiamenti conformazionali nella proteina agli estremi del pH, sebbene t Il rapporto delle variazioni di omega con l'entità dei cambiamenti conformazionali non sembra essere strettamente quantitativo per il citocromo c. Questi risultati mostrano che il comportamento acido-base del citocromo c è di natura complessa e suggeriscono che il modello Lindenstrom-Lang potrebbe non essere adeguato per il citocromo c.
Studi spettroscopici laser Raman sullo sviluppo termico della ribonucleasi A.La denaturazione termica reversibile della ribonucleasi pancreatica bovina A a pH 5 in 0,1 M NaCl su l'intervallo 32-70 gradi C come studiato dalla spettroscopia Raman procede in modo graduale coerente con un processo di dispiegamento graduale piuttosto che come una transizione tra due stati Conversione dei residui dalla geometria elicoidale o pieghettata a una geometria intermedia, come seguita da mezzo delle linee dell'ammide I e III, rivela che quantità sostanziali delle conformazioni elicoidali e pieghettate rimangono a 70 gradi C. I cambiamenti nella forza del legame idrogeno da parte dei residui tirosile sono indicati dal rapporto di intensità del doppietto a 830- 850 cm(-1) e variazioni nella geometria dei ponti disolfuro della frequenza e della semilarghezza della linea Raman vicino a 510 cm(-1) dovute alla vibrazione SS. Vengono utilizzate vibrazioni dei legami CS nelle metionine e nelle cistina monitorare r cambiamenti conformazionali in questi residui. Sebbene ci siano piccole differenze quantitative nella dipendenza dalla temperatura tra queste sonde, tutte concordano nel posizionare la temperatura di malto a o vicino a 62 gradi C. I dati Raman sono quantitativamente coerenti con lo schema a sei fasi di sviluppo di A. W. Burgess e H. A. Scheraga [(1975), J. Theor, Biol. 53, 403], tranne che non si osserva alcun cambiamento nell'ambiente delle tirosine fino a 45 gradi C.
Denaturazione parziale del DNA di topo in gradienti di densità CsCl preparativi a pH alcalino.Una nuova tecnica: denaturazione parziale del DNA in gradienti di densità CsCl all'equilibrio a pH 11,4--viene utilizzato per determinare la distribuzione degli stati intermedi nella fusione del DNA di topo. Quando la tecnica viene applicata nell'ultracentrifuga preparativa, il DNA viene frazionato in base alla stabilità. La neutralizzazione delle frazioni parzialmente denaturate comporta il recupero della maggior parte del DNA nella sua forma nativa. Le singole frazioni sono più omogenee rispetto al DNA totale: hanno eterogeneità di densità ridotta (larghezze di banda inferiori), densità di galleggiamento CsCl neutre diverse dalla media e profili di fusione più omogenei con temperature di fusione diverse dalla media.
Istidina ammoniaca-liasi da fegato di ratto. Purificazione, proprietà e inibizione mediante analoghi del substrato.Istidina ammoniaca-liasi (EC 4.3.1.3) da il fegato di ratto è stato purificato più di 250 volte fino a raggiungere l'omogeneità. Le determinazioni elettroforetiche hanno indicato un peso molecolare nativo di circa 200.000. L'enzima ha un pH ottimale di circa pH 8,5. Il Km minimo per la L-istidina era 0,5 mM a pH 9,0. Il La costante di Michaelis nell'intervallo di pH fisiologico era, tuttavia, superiore a 2,0 mM. L'acido D-alfa-idrazinoimidazolilpropionico è risultato essere un potente inibitore competitivo dell'istidina ammoniaca-liasi epatica (Kis=75 muM); l'enantiomero L di questo composto era meno efficace in questo senso. L'enzima è stato anche inibito in modo competitivo da L-istidina idrossammato (Kis=0.4 mM) e, in misura minore, da L-istidinolo, D-istidina e glicina. analoghi dell'istidina per inibire l'enzima indica sostanzialmente hi gh specificità del sito attivo per L-istidina. Non sono stati identificati substrati alternativi per l'enzima. L'acido DL-alfa-idrazinofenilpropionico, l'analogo alfa-idrazino della fenilalanina, ha dimostrato di essere un inibitore competitivo molto potente di una L-fenilalanina ammoniaca-liasi meccanicamente simile purificata da Rhodotorula glutinis. Le proprietà dell'istidina ammoniaca-liasi del fegato di ratto differiscono significativamente da quelle dell'enzima di Pseudomonas fluorescens che è stato studiato più ampiamente fino ad oggi.
Ruolo dell'intermedio lipidico mannosile nella sintesi delle glicoproteine di Neurospora crassa.Preparazioni di membrane particellari da Neurospora crassa incorporavano mannosio dal mannosio PIL-[14C] in lipidi endogeni e accettori di proteine del particolato La sintesi del lipide mannosile è reversibile in presenza di PIL La caratterizzazione chimica e cromatografica del lipide mannosile suggeriscono che si tratta di un mannosilfosforilpoliisoprenolo L'altro accettore endogeno è stato precipitato dall'acido tricloroacetico Studi di filtrazione su gel ed elettroforesi prima e dopo il trattamento con enzimi proteolitici indicano che il secondo accettore è una glicoproteina beta Studi di eliminazione sulla proteina mannosile formata dal mannosio PIL-[14C] con Mg2+ nella miscela di reazione o formata dal lipide mannosile indicano che con il peptide catena. Diverse linee di evidenza indicano che in Neurospora crassa il lipide mannosile è un intermedio obbligatorio nella in v itromannosilazione della proteina. (a) A 15 gradi C la formazione iniziale del lipide mannosile è più veloce della formazione iniziale della proteina mannosile. (b) Il lipide mannosile esogeno parzialmente purificato può funzionare come donatore di mannosile per la sintesi della proteina mannosile. Questa reazione dipendeva anche da un metallo bivalente. La velocità di questa reazione era ottimale a una concentrazione di Triton X-100 che inibiva efficacemente il trasferimento di mannosio dal mannosio PIL-[14C] a lipidi e proteine, indicando che il mannosio PIL non era un intermedio nel trasferimento di mannosio dai lipidi alle proteine. La proteina mannosile formata in questa reazione era indistinguibile da diversi criteri dalla proteina mannosile formata da mannosio PIL-[14C] e Mg2+. (c) L'effetto di un inseguimento con un eccesso di PIL-mannosio non etichettato sull'incorporazione del mannosio negli accettori endogeni era l'immediata cessazione della sintesi e il successivo ricambio del lipide mannosile; al contrario, tuttavia, l'incorporazione del mannosio nelle proteine è continuata ed è stata proporzionale alla perdita di mannosio dal lipide mannosile.
Nicotinamide adenina dinucleotide fosfato isocitrato deidrogenasi. Attivazione catalitica da parte del prodotto coenzimatico ridotto della reazione.La decarbossilazione ossidativa del D-isocitrato catalizzata da NADP L'isocitrato deidrogenasi legata è attivata da NADPH, il prodotto della reazione. Abbiamo analizzato il comportamento autocatalitico esibito dall'enzima durante la cinetica di stato stazionario. NADP agisce come un inibitore competitivo verso NADPH nell'attivazione catalitica. In un ampio intervallo di concentrazione di i coenzimi ridotti e ossidati, l'attività dell'enzima è proporzionale al rapporto (NADPH)/(NADP). I risultati vengono confrontati con i risultati di esperimenti fatti con altre deidrogenasi decarbossilanti legate a NADP. Vengono presentati due diversi modelli per spiegare il meccanismo d'azione dell'isocitrato deidrogenasi, secondo i nostri dati.
Studi meccanicistici della glutammina sintetasi da Escherichia coli: cinetica del legame dell'ADP e dell'ortofosfato all'enzima non denilato.La cinetica del cambiamento di fluorescenza proteica mostrata dall'ADP o l'aggiunta di ortofosfato alla glutammina sintetasi non denilata attivata da Mg2+ o Mn2+ da Escherichia coli. I modelli cinetici di queste reazioni sono incompatibili con un semplice processo di legame bimolecolare e un meccanismo che richiede l'isomerizzazione delle proteine prima del legame con il substrato. un meccanismo in cui il legame diretto al substrato è seguito da una fase di cambiamento conformazionale indotta dal substrato, ES in equilibrio ES. A pH 7,0 e 15 gradi C, le costanti di associazione per il legame diretto (K1) di ADP a MnE1.0 e di Pi a MnE1.0ADP sono rispettivamente 3,9 X 10(4) e 2,28 X 10(2) M(-1), La costante di associazione per il legame diretto di ADP a MnE1.0Pi è 2,3 X 10(4) M(-1 ) a pH 7,0 e 19 gradi C. Il d I gradi eltaG per la fase conformazionale indotta dal substrato sono -3,5 e -1,3 kcal mol(-1) a causa del legame dell'ADP a MnE1.0Pi e MnE1.0, rispettivamente, e -1,4 kcal mol(-1) a causa del legame di Pi a MnE1.0ADP. Le costanti di velocità, k2 e k(-2) per la fase di isomerizzazione sono: 90 e 9,5 s (-1) per il legame dell'ADP a MnE1.0, 440 e 0,36 s (-1) per il legame dell'ADP a MnE1.0Pi e 216 e 1,8 s(-1) per il legame del Pi a MnE1.0ADP. A causa della bassa affinità del substrato, la costante di associazione per il legame diretto di Pi a MnE1.0 è stata stimata approssimativamente in 230 M(-1) e k2 = 750 s(-1), k(-2) = 250 s(- 1). A 9 gradi C e pH 7,0, le costanti di associazione stimate per l'associazione diretta dell'ADP a MgE1.0 e MgE1.0 Pi sono rispettivamente 1,8 X 10(4) e 1,6 X 10(4) M(-1); e le costanti di velocità per la fase di isomerizzazione associata alla reazione corrispondente sono k2 = 550 s(-1), k(-2) = 500 s(-1) e k2 = 210 s(-1), k (-2) = 100 s(-1). Dall'analisi cinetica è evidente che l'incapacità di Mn2+ di supportare l'attività biosintetica dell'enzima non denilato è dovuta alla lenta velocità di rilascio dell'ADP dal complesso MnE1.0PiADP. Al contrario, il grande k(-2) ottenuto per il rilascio di ADP dal complesso MgE1.0ADP o MgE1.0PiADP indica che questo passaggio non è limitante nella biosintesi della glutammina poiché la catalisi k ottenuta nelle stesse condizioni è 7,2 s(- 1).
Glutamina sintetasi di Bacillus stearothermophilus. Regolazione, interazioni del sito e informazioni funzionali.L'azione di vari modificatori di feedback sulla glutammina sintetasi di Bacillus stearothermophilus è stata studiata dalla cinetica della velocità iniziale, utilizzando il saggio biosintetico stimolato da Mn2+ a 55 gradi C. Gli inibitori più potenti, usati singolarmente, sono AMP, L-glutammina e L-alanina. Altri modificatori significativi includono glicina, CTP, L-istidina, glucosamina 6-fosfato e PIL: si osserva un marcato sinergismo d'azione per l'AMP in presenza di L-glutammina, L-istidina, ADP o glucosamina 6-fosfato (glucosamina-6-P) e per CTP con ADP o PIL L'inibizione da livelli di saturazione di molti modificatori è inferiore al 100%, o non è superata da livelli di substrato elevati, o entrambi. Ciò indica siti di legame del modificatore separati dai siti di substrato, in particolare nei casi di AMP, L-glutammina, glicina , L-alanina, glucosamina-6-P e CTP. G licina e L-alanina sono inibitori Vmax, mentre L-glutammina, glucosamina-6-P, GDP e CTP alterano il legame di L-glutammato. ADP e L-istidina apparentemente possono competere direttamente con MnATP, ma l'AMP altera il legame Mn-ATP da un sito separato. L'azione di diversi modificatori richiede o è potenziata da substrati legati. Si osserva una notevole interazione antagonista negli esperimenti con coppie di modificatori, ma gli inibitori più potenti mostrano interazioni sinergiche o cumulative (indipendenti). Si possono interpretare gli effetti antagonistici come dovuti a (a) domini modificatori sovrapposti, o (b) siti separati ma interagenti in modo antagonistico. Entrambe le interpretazioni portano a uno schema per le interazioni modificatore-substrato e modificatore-sito modificatore in cui l'enzima termofilo deve mantenere e stabilizzare una grande quantità di informazioni funzionali complesse in condizioni ambientali estreme.
D-Mannitolo deidrogenasi da Absidia glauca. Purificazione, ruolo metabolico e interazioni tra subunità.Quando l'Absidia glauca è stata coltivata in terreni minimi con D-mannitolo come unica fonte di carbonio, è stata indotta una D-mannitolo deidrogenasi NAD+ specifica (EC 1.1.1.67) L'estratto grezzo ha anche evidenziato attività di mannitolo chinasi, mannitolo-1-fosfato deidrogenasi, fosfofruttochinasi e L-iditolo deidrogenasi. la preparazione purificata termolabile è stata giudicata enzimaticamente omogenea sulla base di prove derivate da studi di specificità del substrato e colorazione dell'attività, in seguito all'elettroforesi su gel del disco. Il monomero enzimatico, con un peso di circa 67000 dalton, polimerizza lentamente quando conservato a -20 gradi C, dando una molteplicità di bande proteiche sull'elettroforesi distribuite prevalentemente in uno spettro da dimero a pentamero, con attività enzimatica residente prevalentemente in multipli pari del monomero. La depolimerizzazione è avvenuta rapidamente (ore) w Quando una preparazione congelata è stata portata e mantenuta tra 4 e 20 gradi C. La frammentazione dell'aggregato con sodio dodecil solfato ha mostrato una dipendenza dalla temperatura e dal tempo, terminando in una componente di subunità di 13000 dalton. Il pH ottimale per l'ossidazione dei polioli si verifica a 9,6 (tampone NaOH-glicina) mentre la riduzione del chetosio procede più rapidamente a pH 7,0-7,2 (tampone fosfato). Un ruolo regolatore è suggerito per questo enzima basato sull'inibizione senza uscita da parte del mannitolo 1-fosfato, più forme enzimatiche e il suo locus nel sito di inizio per l'utilizzo del mannitolo. Resta da stabilire la rilevanza fisiologica dell'aggregazione a bassa temperatura per il controllo normativo.
Induzione di addotti stabili di proteina-acido desossiribonucleico nella cromatina delle cellule di criceto cinese mediante luce ultravioletta.Formazione di proteine mediata dalla luce ultravioletta (uv)- Gli addotti del DNA nella cromatina delle cellule di criceto cinese sono stati studiati nel tentativo di confrontare le alterazioni della cromatina indotte in vitro con quelle osservate in vivo. Tre metodi di analisi indipendenti hanno indicato associazioni stabili tra proteine e DNA: (1) un test con filtro a membrana che ha trattenuto il DNA sul filtro in presenza di un'elevata quantità di detergente salino; (2) un test su colonna Sepharose 4B in cui la proteina ha eluito l'incidente con il DNA; e (3) un test di equilibrio del gradiente di densità CsCl che ha mostrato sia la proteina che la banda del DNA a densità diverse dalle rispettive densità native Il trattamento della cromatina irradiata con DNasi ha fornito ulteriori prove del fatto che nel test in colonna si osservavano addotti proteina-DNA e non proteina-proteina. Vi è una risposta dipendente dalla fluenza del formato dell'addotto proteina-DNA ione quando la cromatina è irradiata a bassa forza ionica ed è lineare per le proteine nell'intervallo studiato. Quando la cromatina è esposta a diverse condizioni di pH, forza ionica o concentrazione di ioni metallici bivalenti, la quantità di addotto formatosi all'irraggiamento UV varia. La suscettibilità alla formazione di addotti può essere parzialmente spiegata in termini di stato di condensazione della cromatina e altri fattori come riarrangiamento, denaturazione e dissociazione dei componenti della cromatina. Oltre a fornire informazioni sul significato biologico di questi tipi di lesioni indotte dai raggi UV, questa tecnica può essere utile come sonda della struttura della cromatina.
RNA polimerasi DNA-dipendente dal batterio termofilo Caldariella acidophila. Purificazione e proprietà di base dell'enzima.È stata isolata una RNA polimerasi DNA-dipendente da Caldariella acidophila, un batterio termofilo che vive in sorgenti calde acide a temperature comprese tra 63 e 89 gradi C. L'enzima è stato purificato di 180 volte ed è composto da cinque diverse subunità aventi i seguenti pesi molecolari: a = 127000, b = 120000, c = 72000, d = 65000 ed e = 38000. L'enzima viene attivato da Mn2+ e Mg2+ e mostra un'attività ottimale in presenza di 0,5 mM Mn2+ L'attività dipende dalla forza ionica, con un massimo a 0,25 M KCl, e mostra un pH ottimale a 7,8 in presenza di tampone Tris-HCl. L'enzima mostra un alto grado di termofilia, la sua temperatura ottimale è di 80 gradi C nel test in vitro. La termofilia di C. acidophila RNA polimerasi consente studi sul modello enzimatico i interazioni da eseguire in un intervallo di temperatura in cui molti modelli sono vicini alla loro Tm.
Sintesi e proprietà della carbonilbis(metionil)insulina, un analogo della proinsulina che è convertibile in insulina mediante scissione del bromuro di cianogeno.La preparazione e l'uso del carbonilbis (L-metionina p-nitrofenil estere) come reagente reticolante reversibile per insulina sono descritte la reazione di 1 equiv di reagente con zinco insulina in dimetilformammide in presenza di trietilammina rende come uno dei prodotti NalphaA1, NepsilonB29-carbonylbis( metionil)insulina, (CBM-insulina). L'insulina CBM era caratterizzata dall'analisi dei gruppi terminali e dai prodotti formati sulla scissione triptica e chimotriptica. Possedeva il 91% dell'attività immunologica e il 6,5% dell'attività ormonale dell'insulina. L'insulina CBM con bromuro di cianogeno (CNBr) in acido formico al 70% per 1 h ha portato alla rimozione quasi completa del ponte di metionina per produrre insulina. Una piccola quantità di un prodotto secondario è stata rimossa su DEAE-cellulosa a pH 7,2 per dare un recupero di insulina del 70-80%. Le solfitolisi ossidative dell'insulina CBM hanno fornito l'esa(S-solfonato) che è stato ridotto con ditiotreitolo per produrre insulina CBM ridotta. Quest'ultimo composto, contenente 6 sulfidrili, mostrava uno spettro dicroico circolare pH-dipendente. La forma a pH 10 ha mostrato uno spettro tipico di random coil che è stato convertito in una forma a pH 7,8 che è stata caratterizzata da un estremo negativo a 213 nm. La variazione dello spettro a 213 nm con pH è stata caratterizzata da un pKa apparente di 8,5. Sono stati condotti studi sulla riossidazione dell'insulina CBM ridotta a valori di pH compresi tra 7,8 e 10 e a concentrazioni di proteine di 0,01-1 mg/ml. Le migliori rese (ca. 85%) dei legami disolfuro correttamente appaiati sono state ottenute in riossidazioni a pH 9,5-10 a una concentrazione proteica di 0,01-0,1 mg/ml. L'insulina CBM, che era stata isolata dalla riossidazione ad alto pH dell'insulina CBM ridotta, è stata scissa dal CNBr per produrre un'insulina completamente attiva con una resa complessiva del 60% dall'insulina CBM ridotta.
Studi fisici sulle proteine cromosomiche non istoniche HMG-U e HMG-2.Le proteine cromosomiche non istoniche, HMG-1 e HMG-2, hanno una conformazione piegata, con un alto contenuto di alfa-elica, su un ampio intervallo di pH. A valori di pH alti e bassi, le molecole si dispiegano. Entrambe le molecole contengono cisteina e triptofano. I triptofani sembrano essere sepolti nella forma piegata. HMG-1 mostra aggregazione a pH 5,7, così come HMG-2 a pH 9,0. La forma piegata è insensibile alle alte concentrazioni di sale, suggerendo che l'interazione carica-carica non svolge alcun ruolo nella stabilizzazione della struttura terziaria.
Trasporto del glutammato indotto dalla luce nelle vescicole dell'involucro di Halobacterium halobium. II. Prova che la forza trainante è un gradiente di sodio dipendente dalla luce.Illuminazione della cellula le vescicole dell'involucro di H. halobium provocano lo sviluppo della forza protomotrice e stimolano il trasporto in salita del glutammato. Anche se il disaccoppiatore, p-trifluorometossicarbonil cianuro fenilidrazone (FCCP), e il catione permeabile di membrana, trifenilmetilfosfonio (TPMP+), sono inibitori dell'effetto della luce, l'andamento temporale e la cinetica della produzione dello stato energizzato per il trasporto, e il suo tasso di decadimento dopo l'illuminazione, non sono coerenti con l'idea che l'accumulo di glutammato sia guidato direttamente dalla forza protonmotrice. il trasporto del glutammato indotto dal gradiente di Na+ in queste vescicole suggerisce che lo stato energizzato per l'assorbimento degli amminoacidi in entrambi i casi consiste in un gradiente di Na+ transmembrana (Na +out/Na+in maggiore di 1). Il rapido efflusso di 22Na dalle vescicole dell'involucro è indotto dall'illuminazione. FCCP e TPMP+ inibiscono l'efflusso di Na+ indotto dalla luce ma accelerano il rilassamento post-illuminazione del gradiente di Na+ creato, suggerendo l'antiporto elettrogenico del Na+ con un altro catione, o il symport elettrogenico con un anione. La forza protonmotrice indotta dalla luce nelle vescicole dell'involucro delle cellule di H. halobium è così accoppiata all'efflusso di Na+ e quindi indirettamente anche all'assorbimento del glutammato.
Malattia da siero passiva nel topo: il ruolo delle amine vasoattive nella deposizione glomerulare di complessi immuni.Questo articolo riporta uno studio sull'importanza delle sostanze vasoattive ammine nella localizzazione glomerulare di immunocomplessi somministrati passivamente nel topo Sono stati studiati due ceppi di topi, uno sensibile e l'altro relativamente resistente all'effetto anafilattogeno degli immunocomplessi somministrati per via endovenosa L'effetto sulla deposizione glomerulare degli immunocomplessi negli animali di entrambi i ceppi trattati con depletori o antagonisti di ammine vasoattive porta alla conclusione che in questo sistema sperimentale le ammine vasoattive non svolgono un ruolo importante nella localizzazione glomerulare degli immunocomplessi.
L'effetto delle aflatossine sull'incorporazione di RNA e precursori proteici da parte di epatociti isolati.Epatociti preparati con una tecnica enzimatica semplificata erano attivi nell'incorporazione di Precursori di RNA e proteine in materiale insolubile in acido L'incorporazione di precursori di RNA è stata inibita in modo molto marcato da bassi livelli di aflatossine B1 e G1, ma non dalle aflatossine B2 e G2. L'attività delle ossidasi a funzione mista (MFO), il sistema di metabolizzazione dei farmaci del reticolo endoplasmatico, potrebbe essere soppresso in queste cellule da SKF525A o stimolato da NADPH. SKF525A ha causato una riduzione dell'inibizione da parte dell'aflatossina B1 dell'incorporazione del precursore dell'RNA nelle macromolecole. Questa scoperta suggerisce che un metabolita dell'aflatossina B1 è il vero inibitore della sintesi dell'RNA nelle cellule. La misurazione dell'attività della lattato deidrogenasi ha mostrato che queste cellule perdono durante l'incubazione a 37 gradi C e quindi non sono adatte per studi sulla secrezione di proteine.
Attività anti-leucemia come effetto secondario delle reazioni del trapianto contro l'ospite.La produzione di reazioni del trapianto contro l'ospite (GVH) in (PVGc X Wistar) Gli ibridi F1 mediante il trasferimento di cellule della milza PVGc hanno determinato una resistenza significativa di questi riceventi a una successiva sfida con la leucemia PVGc. La protezione era fortemente dipendente dalla dose e dai tempi del trasferimento delle cellule allogeniche ed è stata abrogata dall'irradiazione delle cellule prima del trasferimento. L'attività GVH si è dimostrata un prerequisito per l'induzione dell'effetto protettivo, ma era ugualmente efficace quando prodotta dal trasferimento di cellule della milza Wistar al posto delle cellule PVGc. Questi punti, oltre al fatto che le indagini in vitro su possibili meccanismi immunitari non è riuscito a dimostrare l'immunità citotossica nei ratti trattati, ha suggerito un effetto "astante" non specifico come meccanismo di protezione. Le implicazioni di tale meccanismo sono discusse.
Aminopeptidasi nelle larve di tignola. Proprietà e specificità degli enzimi di massima mobilità elettroforetica.Il gruppo di bande di aminopeptidasi dalle larve di Tineola bisselliella con il più alto livello elettroforetico mobilità in gel di poliacrilammide sono stati ulteriormente purificati e parzialmente separati mediante cromatografia a scambio ionico. Tre bande di aminopeptidasi erano presenti in questo materiale ed erano molto simili per quanto riguarda il loro pH ottimale (7-7), il loro peso molecolare di 94.000, le loro risposte agli ioni metallici e inibitori enzimatici e nei loro requisiti di specificità del substrato. Sono state ottenute costanti cinetiche per l'idrolisi di 17 diverse alfa-aminoacil-beta-naftilammidi da parte di queste aminopeptidasi, i substrati più favoriti sono i derivati di alanina, metionina, prolina, leucina, glicina, glutammico acido, lisina e arginina. Gli enzimi idrolizzano anche ammidi di aminoacidi, dipeptidi, ammidi dipeptidi, tripeptidi e oligopeptidi a livello Estremità N-terminale. Questi enzimi differiscono dagli altri aminopeptidi in T. bisselliella per la capacità di idrolizzare i legami che coinvolgono la prolina.
Proprietà e specificità di una seconda proteinasi sensibile al chelante metallico nelle larve cheratinolitiche della tignola dei tessuti.Le proprietà di un secondo chelante metallico- sono state studiate la proteinasi sensibile (metalloproteinasi 2) dalle larve della tignola dei tessuti, Tineola bisselliella, il pH ottimale per la digestione della caseina era 9-4 e l'enzima ha mostrato un'elevata stabilità tra pH 8 e 11, ma stabilità molto scarsa all'acido pH. La proteinasi è stata inibita dall'EDTA, ma non da un complesso EDTA-calcio. L'inibizione dell'EDTA potrebbe essere invertita con l'aggiunta di un leggero eccesso di ioni calcio o zinco. La specificità di scissione della metalloproteinasi 2 contro le catene A e B di S- carbossimetil insulina era quasi identica a quella trovata in precedenza per la metalloproteinasi 1.
Reattività e costanti di ionizzazione dei residui di lisina in apovitellenin i di lipoproteine a bassa densità di tuorlo d'uovo di emu mediante etichettatura competitiva.Etichettatura competitiva con [14C] l'anidride acetica su un intervallo di valori di pH è stata utilizzata per esplorare la topografia superficiale della porzione apovitellenina I nella lipoproteina a bassa densità del tuorlo d'uovo emu La reazione dei gruppi xi-amminici della lisina con l'anidride acetica è stata correlata al pH in un insieme delle curve di titolazione; da queste sono state determinate le reattività relative all'alanina e le costanti di ionizzazione di tutte le lisine amminoterminali tranne quelle amminoterminali, tutte con valori di pKa pressoché normali intorno a 10, e reattività inferiori alla norma (tranne la lisina amminoterminale). A valori di pH superiori a 10, le curve di titolazione mostrano rotture dove i gruppi epsilon-ammino diventano molto più reattivi, fatta eccezione per la lisina 71 che a questo proposito si comporta come una lisina normalmente ionizzante nel non mostrare discontinuità. residui in questa apoproteina possono presentarsi raggruppati sulla superficie della molecola. Questo spiega meglio le basse reattività e i valori di pKa osservati. Il residuo di lisina ammino terminale è presumibilmente completamente esposto all'ambiente acquoso.
Ph lacrimale umano. Variazioni diurne.Utilizzando un sistema di microelettrodi a camera chiusa, i livelli di pH lacrimale di sedici soggetti sono stati monitorati durante il periodo di veglia di cinque giorni. Oltre alle differenze di pH medie assolute riscontrate tra i soggetti, per la maggior parte è stato possibile identificare modelli diurni di variazione del pH. Le ampiezze e i periodi di questi modelli cicloidi, tuttavia, erano distintivi per ciascun individuo. Inoltre, i livelli di pH lacrimale successivi ai periodi di chiusura prolungata degli occhi sono risultati notevolmente più acidi di quelli associati alle ore di veglia.
Metabolismo e ultrastruttura nelle ovaie di ratti giovani diabetici allossanici.Sono stati condotti test sull'influenza del diabete mellito indotto da allossani sul metabolismo e l'ultrastruttura delle ovaie di ratti giovani. Il diabete mellito ha causato le seguenti modifiche nel metabolismo: riduzione della concentrazione di ATP e NADPH, aumento del quoziente lattato/piruvato a oltre 40, riduzione del quoziente ATP/ADP a meno di 1, riduzione del livello di attività degli enzimi trasportatori di idrogeno G-6-P-deidrogenasi, isocitrato deidrogenasi e malato deidrogenasi, aumento del livello di attività della fosfatasi alcalina, riduzione del contenuto proteico Ultrastruttura: scomparsa quasi completa del reticolo endoplasmatico rugoso, restringimento dei mitocondri, riduzione delle creste e condensazione della matrice Il reticolo endoplasmatico liscio rimane invariato, l'estensione del complesso del Golgi è ridotta Facile rimozione di i depositi lipidici.
Uno studio controllato di amantadina nei disturbi extrapiramidali indotti da farmaci.I farmaci antiparkinsonismo attualmente in commercio sono potenti agenti anticolinergici che, sebbene efficaci nel trattamento dei sintomi extrapiramidali ( EPS), sono anche produttivi o possono esacerbare una serie di effetti collaterali associati ai farmaci psicotropi. Alcuni di questi includono disturbi gastrointestinali, difficoltà visive e discinesia tardiva. È stato condotto uno studio in doppio cieco per valutare l'efficacia (e gli effetti avversi ) di amantadina cloridrato - un agente senza apprezzabile attività anticolinergica - per il trattamento dell'EPS indotto da farmaci. L'amantadina è risultata essere paragonabile in effetti alla benztropina mesilato, ma con minori effetti collaterali. Il ruolo potenziale dell'amantadina potrebbe essere nel trattamento di pazienti con EPS indotto da farmaci per i quali i farmaci con proprietà anticolinergiche sono controindicati.
Interazione del benorilato con indometacina e fenilbutazone.La somministrazione orale simultanea di benorilato (4-(acetamido) fenil 2-acetossibenzoato) con indometacina o fenilbutazone ai ratti affetti da artrite indotta dall'adiuvante di Freund porta ad un effetto antinfiammatorio che è significativamente maggiore dell'effetto degli stessi farmaci somministrati da soli. Tale effetto antinfiammatorio additivo non è evidente quando i metaboliti del benorilato (paracetamolo, acido acetilsalicilico) sono somministrati con indometacina o fenilbutazone. Il paracetamolo non aumenta l'effetto antinfiammatorio dell'indometacina o del fenilbutazone e l'acido acetilsalicilico lo antagonizza chiaramente. La molecola di benorilato è quindi responsabile dell'effetto antinfiammatorio additivo. Tuttavia, se antipiretico viene esaminata l'attività (ipertermia indotta dal lievito) anziché l'attività antinfiammatoria, la somministrazione orale simultanea di th I diversi farmaci producono sempre un effetto additivo. Si conclude che l'antagonismo tra indometacina o fenilbutazone e farmaci antinfiammatori non steroidei diversi dal benorilato è presente in alcuni recettori ma non in tutti. Vengono discusse le implicazioni cliniche dei risultati.
Dirofilaria immitis (dirofilaria del cane) come lesione polmonare nell'uomo.Dirofilaria immitis, la filaria del cane, è stata identificata nei granulomi polmonari di 5 pazienti della grande area di Charleston; questa è la più grande serie di tali casi da un centro medico. I pazienti non avevano sintomi polmonari. Alla radiografia le lesioni erano tutte di circa 2 cm, di opacità alla luce uniforme e localizzate vicino alla superficie pleurica. La toractomia è stata eseguita in ogni caso a causa della possibilità di carcinoma. L'associazione di formazione di granulomi, infarto polmonare e infiltrazione eosinofila ha portato al sospetto di dirofilaria, che è stata confermata in ogni caso.
Rivascolarizzazione del cuore attraverso le vene coronariche.In uno studio sono stati utilizzati 56 cani per valutare la perfusione della vena discendente anteriore sinistra da parte del arteria mammaria interna nei cuori con arterie coronarie normali e in quelli con arterie coronarie discendenti legate. La perfusione del miocardio con sangue arterioso attraverso le vene cardiache offre una protezione immediata minima dall'infarto, come evidenziato da studi di microscopia ottica ed elettronica. Questa protezione è di breve durata a causa di fibrosi intimale e stenosi luminale o ostruzione delle vene perfuse. Diciannove animali in cui la vena coronaria era perfusa e la corrispondente arteria coronaria non era stata legata sono morti entro sessanta ore dal momento dell'operazione. L'esame patologico ha rivelato innesti pervi in tutti gli animali. C'era una marcata congestione del miocardio con emorragie petecchiali sulla superficie del cuore. Non è stata trovata alcuna prova di infarto miocardico.
Effetto del blocco alfa e beta adrenergico sull'insufficienza polmonare indotta dall'adrenalina.Studi recenti hanno dimostrato che l'adrenalina causa uno shunt AV polmonare significativo. Questo studio riporta l'effetto di blocco alfa e beta adrenergico su questo shunt. Sessantatre cani bastardi anestetizzati sono stati ventilati con un respiratore meccanico. Misurazioni di (1) lo shunt polmonare, (2) gittata cardiaca, (3) arteria polmonare media, cuneo capillare polmonare e sistemica pressioni e (4) resistenze vascolari polmonari e sistemiche sono state ottenute a intervalli di 5, 15 e 30 minuti durante la prima ora e ogni ora per 5 ore. Quindici cani non hanno ricevuto alcun trattamento. Tutti gli altri hanno ricevuto epinefrina cloridrato, 2 mug/kg/min per 5 ore. Dieci hanno ricevuto solo epinefrina. Dieci sono stati pretrattati con propranololo cloridrato, 250 mug/kg, 12 con fenossibenzamina, 1 mg/kg e 16 con fenossibenzamina e propranololo. Il propranololo ha ridotto significativamente l'epina shunt polmonare indotto dall'efrina in ogni momento ed era il farmaco più efficace. La fenossibenzamina ha diminuito lo shunt precoce, ma meno del propranololo, e non ha ridotto lo shunt tardivo. Il blocco con propranololo e fenossibenzamina era meno efficace del solo propranololo. Sulla base dei cambiamenti emodinamici osservati, è stato suggerito che il beta-blocco è efficace nel ridurre l'insufficienza polmonare indotta dall'adrenalina alterando favorevolmente il flusso e la distribuzione del flusso sanguigno polmonare che a sua volta riduce le disuguaglianze ventilazione-perfusione indotte dall'adrenalina e l'ipertensione capillare, entrambe le quali provocano lo shunt. . Al contrario, la fenossibenzamina ha un effetto sfavorevole sul flusso polmonare. Questi studi supportano lavori precedenti sugli animali e sull'uomo che hanno dimostrato che la stimolazione beta adrenergica è importante nella patogenesi dell'insufficienza polmonare. Poiché le quantità di adrenalina utilizzate producono livelli ematici osservati nelle malattie critiche, questi studi aggiungono supporto a una relazione tra l'aumento della stimolazione delle catecolamine della malattia critica e l'insufficienza polmonare associata e spesso inspiegabile.
Tossicità acuta del biossido di selenio per i pesci d'acqua dolce.Test di tossicità acuta del biossido di selenio sono stati condotti per 96-336 ore in sistemi di biodosaggio a flusso intermittente utilizzando sei specie di pesci d'acqua dolce. L'ordine decrescente di sensibilità delle specie era: pesciolino testa grassa, pesce bandiera, trota di ruscello, pesce gatto di canale, pesce rosso e persico. Le curve relative alla concentrazione letale mediana al tempo di esposizione per ciascuna specie esposta per più di 168 ore erano sigmoidi in forma e sono stati caratterizzati da un cambiamento di pendenza che indica un tasso di mortalità più rapido dopo l'esposizione a sostanze tossiche da 96 a 168 ore. Le stime di LC50 a 96 ore variavano da 2,9 mg/L di SeO2 per gli avannotti di minnow a 40,0 mg/L per i giovani di bluegill. di breve esposizione a sostanze tossiche (24 ore) su pesciolini e pesci bandiera ha incluso una mortalità ritardata limitata e nessun effetto sulla crescita per un periodo di 28 giorni.
Tossicità delle piretrine naturali e di cinque piretroidi per i pesci.La tossicità delle piretrine naturali e di cinque piretroidi è stata determinata con salmone coho (Oncorhynchus kisutch), steelhead trota (Salmo gairdneri), pesciolino capo (Pimephales promelas), pesce gatto di canale (Icatlurus punctatus), persico trota (Lepomis macrochirus) e pesce persico giallo (Perca flavescens). La LC50\' di 96 ore nei test statici a 12 gradi C variava da Da 24,6 a 114 mug/l di piretrine naturali e da 0,110 a 1.140 mug/l di piretroidi Due piretroidi, RU-11679 e SBP-1382 (R), erano oltre 10 volte più tossici dell'estratto di piretro nei test a flusso continuo. Le specie di pesci di acqua fredda erano più sensibili delle specie di acqua calda a tutti i composti. La temperatura (12-22 gradi C) influenza la tossicità della piretrina naturale e dei piretroidi. La piretrina naturale era più tossica per i pesci a pH 6,5 che in acqua a pH 9,5, ma la tossicità dei piretroidi non è stata influenzata nell'intervallo di pH. I due piretroidi più tossici, RU-11679 e SBP-1382, sono stati disattivati più rapidamente in soluzioni acquose rispetto alle piretrine naturali, S-bioalletrina, dimetrina e d-trans alletrina.
Sopravvivenza e movimento del poliovirus in un suolo forestale sabbioso.Il movimento del poliovirus I (Chat) attraverso campioni di carotaggio non sterile di un suolo forestale sabbioso è stato monitorato, utilizzando diversi regimi di carico con effluente finale declorato proveniente da un impianto di trattamento a fanghi attivi o acqua distillata. È stato dimostrato che cicli stimolati di pioggia e applicazioni di effluenti, con conseguente gradienti ionici, influenzano il movimento del virus. Tali studi indicano che il poliovirus applicato negli effluenti può spostare considerevoli distanze attraverso questo suolo dopo la pioggia. La sopravvivenza del poliovirus nel suolo a 4 e 20 °C è stata monitorata per 84 giorni. Durante questo periodo, la capacità del virus di migrare è invariata.
Manipolazione chimica della resistenza al calore delle spore di Clostridium botulinum.Sono state preparate le forme chimiche di Clostridium botulinum 62A e 213B e sono state determinate le loro resistenze al calore in diversi mezzi di riscaldamento, inclusi alcuni alimenti a bassa acidità. La resistenza al calore delle spore di C. botulinum può essere manipolata su e giù cambiando le forme chimiche tra la forma resistente del calcio e la forma sensibile dell'idrogeno. La forma chimica resistente delle spore di tipo B ha circa tre volte la resistenza classica alla PO4 a 235 F (112,8 C). Come misurato in piselli e asparagi, entrambi i tipi di spore di C. botulinum provenivano direttamente dalla coltura solo per una piccola frazione della potenziale resistenza al calore mostrata dalle stesse spore quando convertita chimicamente nella forma resistente. Le spore resistenti di entrambi i tipi (62A e 213B), quando presenti in un alimento a bassa acidità, possono essere sensibilizzate al riscaldamento al normale pH dell'alimento.
Influenza del tasso di crescita specifico sulla resa della biomassa, sulla produttività e sulla composizione di Candida utilis in coltura batch e continua.Candida utilis è stata coltivata in batch e coltura continua su succo di fico d'india come unica fonte di carbonio ed energia Nella coltura discontinua il tasso di crescita specifico massimo (mamma) e il coefficiente di resa del substrato (Yps) variavano in base alla concentrazione di zucchero Quando la fermentazione veniva condotta con l'1% di zucchero, la mummia e Ys erano rispettivamente di 0,47/h e 42,6%. Le migliori rese si sono verificate in un chemostato con un intervallo di pH compreso tra 3,5 e 4,5 e una temperatura di 30 C. Un effetto benefico su Y è stato osservato quando la velocità di diluizione (D) è stata aumentata. Ad un D di 0,55/h, la produttività era di 2,38 g/litro per h. Il coefficiente di mantenimento ha raggiunto un valore di 0,09 g di zucchero/g di biomassa per h. Aumenti di D hanno prodotto contenuti proteici più elevati della biomassa. Le informazioni ottenute indica che la produzione di proteine con Candida utilis, utilizzando pungente p succo di orecchio, dovrebbe essere effettuato un tasso di diluizione elevato dove anche gli Y e il contenuto proteico della massa cellulare sono più alti.
Metabolismo dell'acido citrico nei batteri lattici etero e omofermentativi.L'effetto del citrato sulla produzione di diacetile e acetoina da parte di quattro ceppi ciascuno di eterofermentativi e sono stati studiati batteri lattici omofermentativi in grado di utilizzare il citrato. L'acetoina era quantitativamente il composto più importante. I batteri eterofermentativi non producevano acetoina o diacetile in assenza di citrato, e due ceppi producevano tracce di acetoina in sua presenza. Il citrato stimolava il tasso di crescita di i lattobacilli eterofermentativi L'acidificazione di tutte le colture eterofermentative con acido citrico ha portato alla produzione di acetoina La distruzione dell'acetoina accumulata sembrava coincidere con la scomparsa del citrato Tutti i batteri omofermentativi hanno prodotto più acetoina e diacetile in presenza di citrato che in sua assenza. è stata iniziata immediatamente dagli streptococchi ma è stata ritardata almeno fino alla metà dell'expo fase finale nel caso dei lattobacilli.
Incidenza comparativa di flebite dovuta a cefalotina tamponata, cefapirina e cefamandolo.Cefamandolo tamponata, cefamandolo e cefapirina sono stati confrontati rispetto alla loro tendenza a produrre flebite Due grammi di ciascun agente sono stati somministrati ogni 6 h per 4 giorni a 12 volontari sani in modo incrociato in doppio cieco Circa il 50% dei siti endovenosi ha sviluppato flebite lieve (grado 1) e il 25% ha sviluppato flebite moderata (grado 2) flebite. La frequenza dell'infiammazione di grado 1 non differiva significativamente tra le tre cefalosporine. La proporzione di individui che alla fine mostravano flebite di grado 2 era più alta con cefamandolo, più bassa con cefalotina (P = 0,07) e intermedia con cefapirina; tuttavia, la cefapirina richiesta un numero sostanzialmente maggiore di dosi per produrre flebite di grado 2. rispetto agli altri due farmaci. Questi risultati, insieme ai risultati di altri rapporti, suggeriscono che l'interpretazione della flebite il potenziale genetico di questi antibiotici deve essere valutato con cautela.
Suscettibilità di pneumococchi e Haemophilus influenzae agli agenti antibatterici.Ceppi di Diplococcus pneumoniae e Haemophilus influenzae sono stati testati per la suscettibilità a numerosi antibiotici mediante una doppia diluizione in agar utilizzando un replicatore di inoculi. Per entrambe le specie sono state utilizzate colture in brodo non diluite e completamente cresciute come inoculi e sono state testate anche colture di pneumococchi diluiti 1:1.000. Gli antibiotici includevano la maggior parte di quelli di uso comune negli Stati Uniti, nonché alcune sostanze chimiche modifiche recentemente approvate e altre in fase di studio. L'aspetto più sorprendente dei risultati è stata la marcata suscettibilità dei pneumococchi a tutti gli antibiotici testati eccetto le polimixine e la maggior parte degli antibiotici aminoglicosidici, sebbene alcuni nuovi aminoglicosidi fossero attivi in concentrazioni piuttosto basse. Alcuni dei ceppi di pneumococchi presentavano una ridotta suscettibilità alla penicillina G (concentrazioni inibitorie minime, da 0,2 a 0,4 mug/ml), ma nessuno era resistente alla tetraciclina, sebbene tali ceppi fossero stati segnalati in precedenza da questo laboratorio. I ceppi di H. influenzae, tutti sierologicamente non tipizzabili, hanno mostrato diversi modelli di suscettibilità ai gruppi di antibiotici ea quelli chimicamente correlati. Nessuno di questi ceppi (isolati all'inizio del 1972) era resistente all'ampicillina. Gli agenti più attivi contro H. influenzae erano: carbenicillina e ampicillina, analoghi correlati a ciascuna di esse, rifampicina, cloramfenicolo e le polimixine. Tuttavia, gli analoghi della tetraciclina diversi dalla tetraciclina, alcuni aminoglicosidi, in particolare tobramicina, kanamicina, gentamicina e verdamicina, eritromicina e alcuni nuovi analoghi della lincomicina, erano attivi anche a basse concentrazioni. Il trimetoprim da solo era altamente attivo e, in combinazione con il sulfametossazolo, era ancora più attivo e sinergico contro i ceppi sia di D. pneumoniae che di H. influenzae.
[Caratteristiche tossicologiche dell'ampicillina].La tossicità dell'ampicillina triidrato è stata studiata in esperimenti acuti e cronici. È stato dimostrato che l'antibiotico aveva una bassa tossicità acuta , non si è accumulato e non ha avuto alcun effetto irritante per la pelle. Alla sua inalazione in concentrazioni di 5 mg/m3 per 4 mesi, l'ampicillina ha indotto l'allergia ai ratti albini, ha diminuito la loro immunità. L'effetto tossico generale del farmaco è stato leggermente pronunciato. Ampicillina in una concentrazione di 0,1 mg/m3 induce tensione della reattività immunologica dell'organismo. Si raccomanda la concentrazione massima ammissibile (MPC) di ampicillina nei locali di lavoro pari a 0,1 mg/m3. Segnare "Allergene" è necessario.
[Analisi dei dati in letteratura sulla sensibilità dei vibrioni del colera alla tetraciclina].Sono stati proposti diagrammi di variazione da utilizzare per l'analisi di i dati pubblicati sullo studio della sensibilità del Vibrio cholerae alla tetraciclina I diagrammi hanno fornito la sistematizzazione dei dati dissimili degli studi sperimentali ed è stato creato un sistema di stima unico L'analisi dei dati sistemati ha fornito la suddivisione dei ceppi di Vibrio cholerae testati in 4 gruppi differenti nei livelli di sensibilità alla tetraciclina. I gruppi erano indipendenti dai biotipi di Vibrio cholerae e dal luogo e periodo di isolamento del ceppo.
[Studio dell'effetto delle condizioni di cristallizzazione dell'ossitetraciclina sugli indici di processo].Fattori quali la velocità delle variazioni di pH, temperatura, velocità del miscelatore e la natura degli anioni presenti nella soluzione ha un effetto significativo sugli indici di cristallizzazione dell'ossitetraciclina diidrato, cioè il contenuto residuo dell'antibiotico nella soluzione madre e la superficie specifica dei cristalli. A questo proposito l'effetto di quanto sopra sono stati studiati i fattori sui principali indici del processo. Sulla base dei dati sperimentali sono state trovate dipendenze che hanno fornito la determinazione delle condizioni di cristallizzazione che assicurano gli indici di processo.
[Proprietà della penicillina amidasi legata covalentemente alle matrici cellulosiche].Sono state studiate le proprietà della penicillinamidasi (PA) legata covalentemente alla matrice cellulosica. L'efficienza del legame dipendeva dal tipo di legame e dalla purezza dell'enzima nativo preso per il legame. La stabilità del PA immobilizzato (IPA) è stata studiata ad ampi intervalli di pH. L'effetto della forza ionica, della concentrazione del substrato e della purezza del PA nativo sulla stabilità di IPA è stato anche studiato. La stabilità massima dell'enzima è stata osservata a pH 6,5-7,0 La stabilità di IPA dipendeva dalla purezza dell'enzima nativo. Quando è stato utilizzato PA dell'etere diazotato di cellulosa contenente gruppi amminici, l'enzima è stato destabilizzato. L'IPA preparato su clortriazinilcellulosa era più stabile del rispettivo PA nativo quasi per ordine.
Un nuovo sguardo alla misurazione e all'interpretazione dei dosaggi enzimatici.Alcuni problemi metodologici nell'enzimologia clinica, inclusa l'instabilità degli enzimi nella miscela di incubazione e requisiti per condizioni di reazione ottimali, viene sottolineata l'importanza di una conoscenza della biochimica e della fisiologia degli enzimi fondamentali come base per la loro applicazione diagnostica e il diverso comportamento di alcuni enzimi epatici, ovvero GOT, GPT, gamma-GT e OCT, in varie condizioni patologiche è riconducibile alle loro caratteristiche proprietà biochimiche e fisiologiche Nel campo degli enzimi urinari la conoscenza dei requisiti ideali per l'indagine enzimatica delle varie funzioni renali e delle proprietà di enzimi potenzialmente preziosi permette una selezione critica di quelli veramente utili.
Microrganismi nell'otite media cronica con versamento.Un totale di 175 versamenti ottenuti da 172 pazienti affetti da otite media cronica con versamento è stato esaminato per striscio batterico e coltura. L'80% ha mostrato striscio batterico positivo, ma solo il 49% ha prodotto coltura batterica positiva. I versamenti mucoidi hanno avuto colture positive solo nel 37%, mentre il tasso di coltura batterica era più alto nei tipi sierosi (59%) e leucocitari (64%). L'isolamento di patogeni comuni rappresentava circa il 50% degli isolati e quelli non patogeni rappresentavano il restante 50% L'elevata incidenza di microrganismi nelle effusioni dell'orecchio medio nella presente serie aumenta la possibilità di contributo batterico in molti casi di OME.
Immunologia e microbiologia nell'otite media acuta.Vari parametri immunologici sono stati misurati nel siero, nel fluido dell'orecchio medio (MEF) e nei linfociti del sangue periferico e MEF di neonati con otite media acuta dovuta a S. pneumoniae o H. influenzae Circa la metà di 131 pazienti presentava anticorpi IgE specifici per il batterio infettante, come determinato dalla tecnica degli anticorpi fluorescenti indiretti (IFA). Il 71% di questi IgE positivi i pazienti avevano anticorpi IgE specifici nel MEF. La concentrazione totale di IgE è risultata essere da una media di 1,5 a 3,0 volte superiore nel MEF rispetto al siero prelevato contemporaneamente. Inoltre, l'anticorpo ai polisaccaridi capsulari pneumococcici e al C-carboidrato pneumococcico è stato dimostrato nel MEF mediante test radioimmunologico. Quando l'anticorpo specifico per il MEF è stato confrontato con l'anticorpo sierico è apparso che l'anticorpo contro il carboidrato C era più concentrato nel MEF. Che questo anticorpo era della classe IgE è stato suggerito da IFA ma non definitivamente dimostrato. Esistono prove che le condizioni per una maggiore sintesi di IgE sono associate contemporaneamente a una diminuzione dell'attività delle cellule T. La funzione delle cellule T nei linfociti derivati dal MEF, determinata dalla formazione di rosette e dalla stimolazione della fitoemoagglutinina (PHA), era circa un decimo di quella dei linfociti del sangue periferico. Tuttavia, che le cellule T possano partecipare alla risposta immunitaria ai polisaccaridi è stato suggerito dall'osservazione che i linfociti del sangue periferico stimolati da polisaccaridi di neonati immunizzati con vaccino capsulare pneumococcico ottavalente sono stati sottoposti a sintesi proteica da due a tre volte quella delle cellule stimolate con PHA. Resta da stabilire il significato clinico di questa scoperta e la natura della cellula responsabile dell'aumento della sintesi proteica. Si ipotizza che l'otite media acuta derivi dalla sintesi locale di anticorpi IgE specifici per i batteri che è potenziata da una scarsità di attività locale delle cellule T.
[Il posto dell'enflurano nella neuroanestesia].Nella neuroanestesia, gli agenti anestetici devono essere conformi a determinati criteri necessari alla conservazione dell'integrità del cervello. Pertanto è in tale prospettiva che abbiamo rivalutato gli effetti dell'enflurano sull'irritabilità corticale, sul metabolismo, sul flusso sanguigno cerebrale e sulla pressione intracranica. Siamo giunti alle seguenti conclusioni: in normocapnia, e con concentrazioni cliniche ottimali , questo farmaco rimane il miglior anestetico in quanto non ha effetti dannosi né sul metabolismo né sul flusso sanguigno cerebrale. Tuttavia, nelle lesioni cerebrali ipertensive, è necessaria cautela e sembra consigliabile combinare l'Enflurano con dosi blande di fentanil. Infine, l'anestesia con enflurano è seguito da un rapido e graduale ritorno alla coscienza, un fattore prezioso in neurochirurgia in cui l'osservazione neurologica postoperatoria è molto importante.
[Uso della dopamina nel trattamento dello shock cardiogeno. Risultati preliminari].Uno studio su sette pazienti, ciascuno dei quali è stato trattato con dopamina entro tre ore dopo aver subito un infarto miocardico. Per quattro di questi è stato effettuato uno studio comparativo con isoproterenolo, glucagone e ouabaina. L'età media dei soggetti era di 72 anni e tutti presentavano notevoli lesioni miocardiche prima dell'inizio del trattamento. Nonostante il miglioramento, in particolare nella diuresi e nella gittata cardiaca, nessuno dei pazienti è sopravvissuto. Gli autori spiegano questi risultati con il fatto che, come tutti i potenti agenti inotropi, la dopamina produce un aumento del consumo di ossigeno del miocardio per le cellule ischemiche situate nella zona contigua alla infarto.
[Uso della dopamina nel disagio cardiovascolare acuto. Il suo posto rispetto all'isoproterenolo].Diciannove pazienti che presentavano disturbi cardiovascolari sono stati trattati con dopamina. Per diciassette di questi, l'incidente è avvenuto subito dopo l'intervento cardiaco. I dosaggi variavano da 1 a 15 mug/kg/min e la durata del trattamento da 10 minuti a tre giorni. L'efficacia del trattamento è stata giudicata in base al miglioramento clinico ed emodinamico della funzione cardio-circolatoria e aumento della diuresi. I risultati favorevoli sono stati 15. Gli effetti positivi della dopamina sembrano essere limitati in alcuni pazienti dalla comparsa di una cianosi che testimonia un aumento delle resistenze vascolari che aumenta la pressione auricolare sinistra e limita l'effetto inotropo. In questi casi, l'isoproterenolo o una combinazione di isoproterenolo e dopamina danno risultati migliori.
[Uso della dopamina nella rianimazione postoperatoria dopo un intervento al cuore. Risultati preliminari].La dopamina è stata utilizzata su dieci pazienti sottoposti a una o più sostituzioni valvolari in circolazione extracorporea. L'indicazione essenziale era la comparsa nel postoperatorio di insufficienza circolatoria più o meno grave. La dopamina veniva somministrata per flebo in dosi di 2,5, 5 o 10 mug/kg/min. Gli effetti sulla frequenza del ritmo cardiaco sono stati moderati. In due casi, l'ipereccitabilità ventricolare indotta dall'isoprenalina è scomparsa sotto la dopamina. Gli effetti principali sono stati un aumento della gittata cardiaca, sotto forma di aumento del volume di eiezione sistolica e abbassamento delle resistenze periferiche. Un aumento costante della gittata urinaria volume ha preceduto il miglioramento dei segni clinici di insufficienza circolatoria.
[Studio emodinamico della dopamina utilizzata nello scompenso cardiaco cronico e nello shock cardiogeno come complicanza dell'infarto miocardico acuto].L'oggetto di questo studio è esaminare le proprietà della dopamina a livello emodinamico e renale in 16 pazienti con cardiopatie croniche scompensate o shock cardiogeno molto grave da infarto miocardico I risultati mostrano un aumento dell'indice cardiaco in 75 p.100 dei casi con diminuzione favorevole della differenza artero-venosa di O2 e delle resistenze arteriose polmonari. L'effetto più evidente e più costante è il recupero e l'aumento della diuresi. Sono stati osservati effetti cronotropi e bathmotropic positivi che hanno reso necessaria la limitazione della prescrizione di dopamina in quei soggetti mostrando segni di disturbi dell'eccitabilità ventricolare.
[Studi sulle variazioni dei valori funzionali renali indotte da dopamina endovenosa].Abbiamo studiato, su sei pazienti, le variazioni dei valori funzionali renali e escrezione urinaria di elettroliti durante la somministrazione endovenosa di dopamina e nelle ore immediatamente successive. Si distinguono due gruppi di pazienti. Nel gruppo I, tutti con valori renali funzionali normali, non si è verificata alcuna modificazione di questi, mentre si sono osservati aumenti della produzione , nell'escrezione di elettroliti e nella clearance dell'acido urico. Nel gruppo II, composto da pazienti con insufficienza renale, le modificazioni sono meno definite ma l'effetto diuretico e saluretico è presente. Gli effetti salidiuretici della dopamina sembrerebbero dissociati dagli effetti cardiovascolari.
[L'effetto della dopamina endovenosa sull'emodinamica del cuore].Lo studio farmacologico della dopamina è stato condotto su 14 pazienti: undici pazienti normali e tre con miocardiopatie incipienti. I dosaggi utilizzati erano 3, 6 e 12 mug/kg/min. Sono state studiate la funzione "pompa", le resistenze periferiche, la contrattilità e la compliance ventricolare. La dopamina è un agente inotropo positivo senza azione cronotropa alle dosi di 6 e 12 mug/kg/min. Agisce aumentando la contrattilità e il ritorno venoso e diminuendo le resistenze periferiche; questo effetto scompare con dosaggi forti.
[Effetto di dosi crescenti di dopamina sulla funzione ventricolare sinistra nel cane].Uno studio su undici cani sugli effetti di dosi crescenti di dopamina sulla funzione ventricolare sinistra. Una descrizione della metodica che consiste in uno shunt venoso collegato ad un circuito extracorporeo e che permette di modificare in modo semplice e rapido lo stato di riempimento vascolare dell'animale. I risultati differiscono a seconda della pressione- livello di riempimento del ventricolo sinistro. A bassa pressione, la dopamina aumenta la pressione arteriosa, la gittata cardiaca e l'attività sistolica del ventricolo sinistro per un ridotto effetto tachicardico. Alle pressioni più alte, la pressione aortica media è solo leggermente aumentata e l'attività sistolica è elevata senza aumento della gittata cardiaca. Questi fatti indicano dopamina in stati di shock con una bassa pressione di ricarica.
[L'utilizzo di EB 51 nell'alimentazione parenterale. Controllo clinico, biologico e anatomopatologico. Studio statistico su 30 pazienti].Due gruppi di pazienti ( coma di origine centrale e grave denutrizione digestiva) sono stati sottoposti ad alimentazione parenterale esclusiva o integrativa per un breve o lungo periodo di tempo complessivo superiore a 500 giorni. Il catetere è stato posto (nell'80 per cento dei casi) in una profonda vena ed è stato tunnellizzato. EB 51 (Trivemil) utilizzato in quei 30 pazienti fornisce aminoacidi, lipidi e glucidi. L'apporto calorico è stato completato dal 30% di soluti di glucosio. Se l'apporto calorico medio è stato di 3.000 calorie al giorno, è stato spesso al di sopra di quella cifra in quanto l'alimentazione è stata abbinata ad una nutrizione enterale nutri-pump per il 60 per cento dei giorni. La tolleranza clinica è stata abbastanza buona. A livello biologico, oltre alle classiche indagini, 40 grafici analitici dei livelli lipidici sono state fatte, così come un'analisi quantitativa di trigliceridi sierosi e lipurie, uno studio di sorbitolo e 500 bilanci di azoto combinato con 150 cromatografie sulla colonna acidaminuria. È stato inoltre effettuato un controllo biologico epatico (amnoniemia, transaminasi) e un'analisi quantitativa di lattati, piruvati e minerali: ferro-fosforo-magnesio. Alcuni dei risultati sono stati controllati da studi statistici. Non è stata rilevata alcuna anomalia grave. Le biopsie polmonari ed epatiche effettuate su 9 pazienti non hanno evidentemente evidenziato alcun sovraccarico lipidico. L'indagine clinica e biologica mostrano che questo nutrimento completo è perfettamente tollerato e assimilato.
[Studio comparativo sul risparmio di azoto durante l'alimentazione enterale e parenterale (Trive 1000)].Attraverso uno studio sui bilanci dell'azoto, gli autori confrontano l'efficacia di un apporto proteico effettuato per os o per via endovenosa. Lo studio ha coinvolto 22 diversi portatori di carcinoma ed è durato 9 giorni durante i quali l'assunzione di Azoto è stata effettuata o per via digerente o per via endovenosa integrata da una sufficiente razione calorica. In quest'ultimo caso, l'assunzione di aminoacidi è stata fornita da Trive 1000 in combinazione con glucidi e lipidi che sono stati poi sottratti quantitativamente all'assunzione enterale. Uno studio dei risultati ha mostrato che l'assimilazione dell'Azoto iniettato per via endovenosa era molto simile a quella ottenuta per via enterale.
[Contributo allo studio di Trive 1000].Un nutrimento composto glucidico-lipidico e proteico: Trive 1000 è stato somministrato a 53 pazienti durante il primo tre giorni postoperatori a dosi variabili: -1.000 ml al giorno a un primo gruppo -1.500 ml al giorno a un secondo gruppo La tolleranza locale è stata abbastanza buona Tuttavia si sono registrati alcuni incidenti di carattere generale: erano dovuti a una in larga misura ad una non osservanza delle regole di conservazione. Uno studio dei glucidi, in forma sorbitolo, ha mostrato una buona assimilazione del substrato. La glicemia rimanendo nella norma, non si osservava glicosuria o chetonuria. L'assimilazione delle proteine sembrava nel complesso soddisfacente. Non si è notato aumento importante dell'urea ematica. I bilanci dell'azoto hanno mostrato che, grazie a questo nutrimento, quasi la metà di essi risultava positiva nel periodo post-aggressivo. Più importante è la dose di Trive 1000, più positiva i bilanci di azoto erano. La somministrazione di lipidi non ha rivelato alcun cambiamento significativo nei lipidi totali, nei trigliceridi o nel colesterolo. Uno studio sulla registrazione grafica dei livelli lipidici ha mostrato due volte i chilomicroni. Al contrario, le lipoproteine sono state difficilmente modificate a parte un significativo in pre-beta lipoproteine. L'analisi quantitativa degli amminoacidi si è rivelata interessante. Uno studio comparativo degli amminoacidi sia nel sangue che nelle urine prima e dopo la somministrazione di Trive 1000 ha mostrato variazioni minime in relazione agli amminoacidi essenziali. Se le proporzioni nel sangue degli aminoacidi non essenziali erano relativamente ma poco modificate prima e dopo il trattamento, al contrario, la clearance urinaria degli stessi aminoacidi dopo il trattamento era molto più variabile e spesso molto importante per quanto per quanto riguarda alcuni amminoacidi.
[Il secondo studio elettromiografico sulla curarizzazione chirurgica con AH.8165, un nuovo derivato pachycurare di azobis-arylimidazo(1-2a) piridinio].Questo secondo studio elettromiografico di AH-8165, un prodotto derivato dall'azobis-arymilidazo-(1-2a) piridinio, effettuato con uno speciale apparato che stimola e registra, specifica le caratteristiche del blocco neuromuscolare indotto da questo nuovo non -sostanza curarizzante di tipo depolarizzante tenendo conto dei consueti fattori di variabilità curarimimetica d'azione Dopo una dose iniziale di 1 mg per kg di peso corporeo, si nota in particolare: -il lasso di tempo necessario per un blocco completo (90 s), la sua intensità e durata (normalmente totale durante almeno un'ora) -la morfologia dell'elettromiogramma durante la curarizzazione e la decurarizzazione sia spontanea che indotta da Neostigmina con in particolare -l'affaticamento muscolare dopo stimolazione ripetuta a seguito di curarizzazione a e soprattutto durante la decurarizzazione, dati cronologici e aspetti elettromiografici che si ritrovano anche dopo una reiniezione di AH-8165 equivalente alla metà della precedente.
[Valutazione clinica del nuovo anestetico "Ethrane"].Settantaquattro pazienti di età compresa tra 14 mesi e 71 anni, classificati come ASA I e II sono stati anestetizzati con Ethrane per interventi chirurgici di durata media 117 minuti. Ad eccezione di 5 pazienti che sono stati anestetizzati direttamente con Ethrane, gli altri hanno ricevuto Ethrane dopo induzione con Penthiobarbitone. Il mantenimento dell'anestesia è stato assicurato da 1 a 4 p. 100 concentrazioni di Etra e 33p.100 ossigeno e 66p.100 protossido di azoto. L'intubazione tracheale è stata facilitata dall'iniezione di 1 mg/kg di succinilcolina. L'induzione con enflurano è rapida senza fenomeni di eccitazione o irritazione delle vie auricolari. L'apparato cardiovascolare è stabile con nessuna aritmia ma un aumento della frequenza cardiaca da 11 a 50p.100 e in 41p.100 dei casi ipotensione di 35p.100 del valore iniziale. Durante la ventilazione spontanea si osserva un tipo di respirazione rapida e superficiale con un volume di flusso di 5,3 ml/kg per una frequenza media di 25/min. I gas del sangue arterioso mostrano una leggera ipercapnia. Il miorilassamento è significativo e migliore di quello ottenuto con l'alotano. Ritrovarsi pone pochi problemi a parte l'agitazione negli adolescenti. La risposta agli ordini semplici appare a 13 minuti. Tremore e rigidità si verificano in 41p. 100 dei casi per 5-30 minuti. Dal punto di vista epatico non sono state notate alterazioni dell'enzima lastina e non è stata dimostrata alcuna tossicità renale. L'etrano sembra essere un buon agente anestetico, ma i pochi vantaggi menzionati significano che non soddisfa le condizioni ideali.
[Arresto circolatorio postoperatorio (a proposito di 37 casi)].Nel giro di cinque anni, gli autori hanno ricevuto 37 pazienti che avevano presentato una cardiopatia postoperatoria arresto. La maggior parte di loro proveniva dal distretto di Bordeaux (dall'ospedale oltre che dal settore pubblico) sebbene non rappresentassero la totalità di tali incidenti. Lo studio si basa prima sui dati relativi ai pazienti, poi sull'intervento chirurgico , la modalità di anestesia e ventilazione, la postura e infine il trattamento. In 10 casi è stato notato, già al momento del ricovero, che il volume sanguigno si sente inferiore al volume sanguigno totale teorico di un litro o più. Gli autori prendono conto di come tracce di affezioni pregresse, la localizzazione in ORL, e, in oftalmologia, un numero importante di errori in anestesia, favoriscano il progredire della genesi dell'incidente.
[Effetto emodinamico dell'enflurano nell'uomo].I seguenti parametri emodinamici: frequenza cardiaca, pressione arteriosa periferica, pressione polmonare e gittata cardiaca sono stati misurati da cateterizzazione diretta, in quanto dai risultati registrati sono state calcolate la resistenza vascolare periferica totale e il volume di eiezione sistolica La frequenza cardiaca e la pressione arteriosa polmonare non sono state praticamente modificate nei nostri pazienti, sebbene abbiamo osservato una diminuzione statisticamente significativa della sistolica (-30p. 100) e diastolica (-27 p. 100). La resistenza vascolare periferica totale mostra una marcata diminuzione (-20 p. 100) dopo aver somministrato Ethrane. per dieci minuti. Se è possibile che una parte, sicuramente importante, del la gittata cardiaca, è preservata in anestesia con Ethrane da una significativa diminuzione della resistenza vascolare periferica totale, una depressione miocardica potrebbe essere messa in dubbio, la diminuzione della gittata cardiaca a 30 minuti essendo più importante della diminuzione della resistenza vascolare periferica totale.
[Trasformazione del sorbitolo in mannitolo quando usato nella somministrazione parenterale].Ciò è stato dimostrato dalla scoperta inaspettata dell'escrezione urinaria di mannitolo quando il sorbitolo urinario venivano misurati i livelli in relazione alla sorveglianza dei pazienti affetti da malnutrizione e trauma cranico e che ricevevano nutrizione parenterale totale: glucosio, sorbitolo, aminoacidi, olio di soia. La presenza di mannitolo nelle urine sembrerebbe derivare da un catabolico secondario attraverso via fisiologica del fruttosio prodotto dal metabolismo di sortibol non metabolizzato durante la glicolisi.
[Un caso di avvelenamento acuto da tabacco da clistere].Gli autori riportano il caso di un bambino di 5 mesi intossicato da nicotina attraverso un clistere. Una madre che desiderava curare il suo bambino per la stitichezza gli aveva somministrato come clistere un decotto di foglie di tabacco verde; 15-20 minuti dopo il clistere, il bambino mostrava diarrea e disturbi respiratori. Gli autori trattavano i disturbi respiratori con la respirazione assistita e bradicardia e diarrea con atropina. Hanno anche causato una diuresi forzata usando una soluzione di glucosio 10 p.100 e Furosemide.
[Impatto dell'anestesia alfatesina sulla pressione del liquido cerebrospinale nell'uomo].Le variazioni di pressione del liquido cerebrospinale sono state studiate in 20 pazienti prima e dopo induzione dell'anestesia con alfatesina (0,1 ml/Kg). 14 pazienti non hanno ricevuto altro farmaco complementare (gruppo 1), negli altri sei casi è stato somministrato 1 g di acido acetilsalicilico come complemento analgesico (gruppo II). i pazienti hanno ventilato spontaneamente una miscela di O2 - N2O 50 p.100. La pressione liquorale è diminuita in media di 39 p.100 (p. inferiore a 0,001) nel gruppo I e non è variata nel gruppo II. Questa caduta è essenzialmente correlata alla vasocostrizione, quindi alla diminuzione del flusso sanguigno cerebrale causata dall'Alfatesina. Nel gruppo II è stata osservata ipercapnia in tutti i pazienti; abolisce la vasocostrizione cerebrale dovuta all'Alfatesina; il flusso sanguigno cerebrale non è diminuito né la pressione liquorale.
[Iskedyl e anestesia generale. Misurazione del volume di eiezione sistolica e della resistenza periferica mediante le curve della pressione arteriosa].ISKEDYL (PF 50), che è venduto come vasoregolatore dell'irrigazione cerebrale, è costituito da una miscela di diidroergocristina e raubasina. Questo lavoro mira a determinare le possibili interazioni tra questo prodotto e alcuni farmaci usati in anestesia dal punto di vista cardiovascolare. ISKEDYL non sembra essere una controindicazione a anestesia del tipo "neurolettico", quando iniettata nel periodo pre, per o post-operatorio Una leggera caduta temporanea e spontaneamente reversibile della pressione arteriosa, che interessa sia la pressione massima che quella minima, insieme a una diminuzione della gittata sistolica e le resistenze periferiche, stimate dallo studio della curva della pressione arteriosa, sembrano indicare che questo prodotto abbia proprietà vasodilatatorie periferiche.
[La scienza dell'informazione nella medicina intensiva. Esempi dell'approccio europeo].Il trattamento moderno dei pazienti in stato precario richiede l'uso di tecniche apparecchi che di giorno in giorno diventano più complessi e numerosi. I dati generati da questi apparecchi, insieme alle misurazioni convenzionali dei parametri fisiologici effettuate dal personale infermieristico durante le cure, ai risultati degli esami di laboratorio e degli esami medico-fisici, rappresentano un materia prima di informazione che tende ad aumentare di anno in anno. La consegna ripetitiva e manoscritta di questi dati, così come la loro tradizionale laboriosa consultazione, non garantisce più oggi l'assunzione di decisioni rapide nei confronti dei pazienti. Ora, questo rapido processo decisionale è a il centro del funzionamento della medicina intensiva attuale, della sorveglianza e del trattamento ottimale dei pazienti, dell'organizzazione funzionale delle uni t, e dell'efficienza "economica" dello sfruttamento. Sembra logico, quindi, volersi avvalere delle risorse fornite dalla scienza dell'informazione per risolvere questi problemi. Lo hanno fatto gli Stati Uniti, il Giappone e alcuni paesi europei. Il nostro scopo è fornire alcuni esempi dell'approccio europeo.
[Ipotermia peroperatoria accidentale durante trasfusione rapida].Sono riportati sei casi di ipotermia grave, insorti durante interventi chirurgici che hanno richiesto una rapida e abbondante trasfusione di sangue mal riscaldato. Il ruolo di fattori favorenti, freddo circostante dovuto all'aria condizionata, anestesia, estensione dell'area di operazione, sembra importante. La sintomatologia permette l'individuazione di una sindrome ipotermica vicina al quadro descritto nelle ipotermie tossiche accidentali. Gli incidenti durante il processo di riscaldamento associano collassi e disturbi della coagulazione, è quindi necessario considerare importanti alcuni segnali di allarme e generalizzare le condizioni per la prevenzione della termolisi in sala operatoria.
Effetto della compressione addominale sulla ventilazione minuto di pazienti con malattia polmonare ostruttiva cronica e asma bronchiale.Gli effetti della compressione manuale dell'addome laterale superiore ( C) di 73 casi di malattia ostruttiva delle vie aeree sono stati studiati rispetto alla variazione della ventilazione minuto (V) 10 minuti dopo l'esecuzione della procedura. Una diminuzione media del 13% di V è stata riscontrata nella maggior parte dei 15 casi di asma bronchiale o bronchite cronica e 43 pazienti con malattia polmonare ostruttiva cronica. L'uso della compressione manuale come misura terapeutica dipende in gran parte dalla brusca riduzione del volume polmonare nei casi di malattia ostruttiva delle vie aeree in cui l'eccessiva inflazione del polmone è presente come una malattia acuta o cronica Il grado e la durata del beneficio clinico, cioè il sollievo dalla dispnea, dipendono da fattori quali il volume di aria intrappolata nei polmoni, la broncocostrizione dovuta a alterazioni patologiche o broncospasmo e la compromissione dell'elasticità rinculo del parenchima polmonare. La diminuzione della V registrata 10 minuti dopo l'esecuzione della C suggerisce che la diminuzione della dispnea è associata a una maggiore efficienza della ventilazione in alcuni soggetti con malattia ostruttiva delle vie aeree, inclusi quelli con asma bronchiale e FREDDO. Viene presentata una breve descrizione di 10 pazienti con FREDDO in cui sono state impiegate la compressione manuale e altre caratteristiche di un programma di riabilitazione. La durata media della vita di cinque soggetti viventi è di 12,6 anni dall'inizio della terapia. La durata media della vita dei cinque deceduti è stata di 10,2 anni dopo l'inizio del trattamento.
[Studi clinici sull'uso del ketalar nell'anestesia ostetrica (autore\'s trad.)].26 donne incinte sane a termine sono state divise in 2 e anestetizzati con 1 mg/kh o 2 mg/kg di ketamina - N20/02 - per il taglio cesareo primario Sono stati misurati i livelli plasmatici di ketamina venosa materna, i livelli plasmatici di ketamina neonatale (arteria ombelicale e vena ombelicale) e l'emogasanalisi. i livelli plasmatici di ketamina nel gruppo I hanno superato quelli nel gruppo II rispettivamente di 2,8 (30-60 secondi dopo l'iniezione) e 2,0 (al momento del parto) Indipendentemente dalla dose utilizzata, i livelli plasmatici di ketamina nell'arteria ombelicale o ombelicale vena sono risultati identici nei due gruppi di neonati I parametri di gas ematici e acido base neonatali non differivano significativamente tra i due gruppi, ad eccezione della tensione di ossigeno nel gruppo II che superava leggermente i valori di PO2 nel gruppo I 15, 60 e 120 min dopo la consegna pH e standard i valori di bicarbonato sono risultati essere più alti (1 e 5 min) in entrambi i gruppi, rispetto al pH e ai livelli standard di bicarbonato in un gruppo di neonati nati spontaneamente. --I risultati di questo studio mostrano: 1. Indipendente da una ketamina bassa o alta dosaggio, la concentrazione ematica neonatale del farmaco rimane bassa, probabilmente a causa di un effetto barriera placentare. --2. Il recupero post partum dei neonati non è stato influenzato né dall'anestesia con ketamina né da diverse dosi di farmaco.
Screening di film da parte di assistenti medici in radiologia diagnostica.Sono presentati dati che indicano che gli studenti ART appositamente selezionati possono essere formati per valutare le radiografie in merito alla presenza o assenza di patologia significativa con un'accuratezza equivalente a quella dei radiologi del personale esperto. I metodi impiegati in questo programma di formazione, vale a dire, sottolineando il riconoscimento percettivo di reperti normali e anormali, possono essere utili nei primi mesi di formazione dei residenti di radiologia diagnostica per accelerare raggiungimento di una prestazione percettiva accettabile. Anche i filmati di prova, utilizzati in questo studio come tecnica di valutazione, possono essere utili per valutare i progressi dei residenti\'.
Secrezione biliare negli elasmobranchi. I. Raccolta e composizione della bile.La composizione e la secrezione della bile sono state studiate in due specie di elasmobranchi, Squalus acanthias (squalo spinoso ) e Raja erinacea (piccola razza), dopo la legatura del dotto comune e l'inserimento di cannule nel lume della cistifellea. I pesci sono stati quindi lasciati nuotare liberamente in grandi pozze e la bile è stata raccolta in palloncini attaccati alle cannule esternalizzate. Entrambe le specie secernono la bile per periodi di 4-7 giorni ad una velocità massima di 1,77 +/- .89 ml/kg per 24 h in Squalus acanthias e 2,66 +/- .89 ml/kg per 24 h in Raja erinacea Confronto della composizione della cannula e la bile della colecisti hanno indicato che la bile epatica potrebbe essere raccolta con questa tecnica in entrambe le specie senza un contatto effettivo con l'epitelio della colecisti. la bile nella cistifellea si è sviluppata all'inizio dell'evoluzione dei vertebrati. Questi risultati indicano che l'incannulazione della cistifellea negli elasmobranchi che nuotano liberamente è una tecnica utile per lo studio della funzione secretoria ed escretrice della bile nelle specie marine.
Effetto del blocco dei recettori beta-adrenergici sul pH del muscolo cardiaco e scheletrico di ratto.L'effetto delle catecolamine sul pH intracellulare del muscolo cardiaco e scheletrico di ratto durante è stato determinato il variare degli stati acido-base extracellulari. Il pH intracellulare (pHi) è stato calcolato dalla distribuzione di [14C]DMO. Disturbi acido-base sono stati prodotti ponendo gli animali in una camera ambientale contenente il 10 o il 20% di CO2 o somministrando HCL o NaHCO3. Due ore dopo gli animali sono stati anestetizzati con sodio pentobarbital e prelevati campioni di sangue e tessuti. In una serie di animali, gli effetti delle catecolamine sono stati attenuati somministrando l'antagonista beta-adrenorecettori MJ 1999 (Sotalolo). In animali che respirano il 20% di CO2 , il pH del muscolo cardiaco era più basso negli animali beta-bloccati rispetto a quelli non bloccati (6,69 vs 6,78). Durante l'acidosi metabolica, il pH del muscolo cardiaco degli animali beta-bloccati era inferiore a quello degli animali non bloccati (6,75 vs 6,84). ip è stato osservato per il muscolo scheletrico durante acidosi metabolica-blocco beta pHi, 6,66; pHi non bloccato, 6.77. Il pHi degli animali beta-bloccati rispetto a quelli non bloccati non era significativamente diverso in normali condizioni acido-base o alcalosi metabolica per il muscolo cardiaco o scheletrico. Il valore tampone effettivo di entrambi i tessuti oltre il normale intervallo acidotico è stato ridotto dall'agente beta-bloccante. Questi risultati indicano che il rilascio di catecolamine che accompagna l'acidosi attenua la variazione del pHI e aumenta il valore tampone effettivo del muscolo cardiaco e scheletrico.
Effetti cardiovascolari della perfusione di ouabaina cerebroventricolare nel cane adulto.La perfusione cerebroventricolare con liquido cerebrospinale artificiale contenente 10(-5) Mouabain è stata eseguita in adulti cani per descrivere il decorso temporale dell'effetto cardiovascolare dell'ouabaina intraventricolare e per valutare i trattamenti per eliminare l'effetto cardiovascolare. L'effetto centrale dell'ouabain ha causato un aumento del 56% della pressione sanguigna sopra i valori di controllo e un aumento del 35% della frequenza cardiaca con varie aritmie cardiache. I farmaci bloccanti sia alfa che beta-adrenergici somministrati per via endovenosa hanno alterato gli effetti sulla pressione e sulla frequenza dell'ouabain, mentre la vagotomia ha attenuato l'effetto.
Tamponamento miocardico di CO2: ruolo del trasporto transmembrana di ioni H+ o HCO3.Cuori di coniglio isolati sono stati perfusi con globuli rossi di coniglio sospesi in una soluzione di Ringer. Un piccolo volume di perfusato è stato fatto ricircolare per 10 min a Pco2 di 33,4 +/- 0,9 o 150,8 +/- 7,5 mmHg. L'ipercapnia ha determinato un aumento della concentrazione di HCO3 del perfusato inferiore a quello osservato quando il perfusato isolato è stato equilibrato in vitro con le stesse tensioni di CO2 (delta HCO-3e = 1,6 mM, P inferiore a 0,01). Questa differenza è coerente con un movimento netto di HCO3- dentro o H+ fuori dalla cellula micardica e non può essere spiegata dalla diluizione di HCO3- nell'interstizio miocardico. Il ricircolo del perfusato attraverso la circolazione coronarica alla normale Pco2 per due periodi consecutivi di 10 minuti non è stato seguito da cambiamenti nella concentrazione di perfusato HCO3- È stato osservato un alto grado di correlazione (r = 0.81) tra HCO- intracellulare 3e concentrazione e corr corrispondente delta HCO-3e in esperimenti individuali. I risultati suggeriscono che lo scambio transmembrana di H+ o HCO3- è un meccanismo tampone per la CO2 nella cellula miocardica.
Ph intracellulare del cervello: alterazioni nell'acidosi respiratoria acuta e alcalosi.Valutare gli adattamenti metabolici del cervello ai disturbi respiratori acuti acido-base, è stato sviluppato un metodo per misurare il pH intracellulare (pHi) nel cervello dei cani in condizioni in cui il pH arterioso viene rapidamente alterato. Il pHi cerebrale è stato determinato misurando la distribuzione del dimethadione marcato con 14C (DMO) nel cervello rispetto al liquido cerebrospinale corticale. lo spazio extracellulare (ECS) è stato valutato come spazio 35SO4 = relativo al liquido cerebrospinale corticale e la Po2 arteriosa è stata mantenuta a 82-110 mmHg Nei cani normali, il pHi cerebrale (corteccia cerebrale) era 7,05 e dopo 1 ora di ipercapnia (arterioso pH = 7,07) è sceso a 6,93. Tuttavia, dopo 3 ore con Pco2 arterioso mantenuto a 85 mmHg il pHi cerebrale era normale (7,06), e durante questo periodo il bicarbonato cerebrale era aumentato da 11,3 a 24,4 meq/kg di H2O.
Risposte plasmatiche di secretina e gastrina a un pasto di carne e acidificazione duodenale nei cani.In cinque cani coscienti con fistola gastrica e due cannule duodenali, RIA plasmatica i livelli di secretina e gastrina sono stati determinati in risposta a 1) infusione di 0,1 N HCl nella cannula duodenale prossimale, 2) ingestione di un pasto e 3) infusione intraduodenale di 0,1 N HCl dopo l'ingestione di un pasto Aumenti significativi della secretina plasmatica RIA livelli si sono verificati durante l'acidificazione duodenale. Tuttavia, non si sono verificati cambiamenti significativi nei livelli di secretina dopo l'ingestione di un pasto, mentre è stato osservato un aumento significativo del livello di gastrina plasmatica. Il pH duodenale postprandiale è rimasto al di sopra di 4,5 per 3 ore.
Risposta elettromiografica dei muscoli respiratori durante il carico elastico.La risposta dei motoneuroni respiratori al carico elastico graduato è stata valutata nei cani anestetizzati registrando l'elettromiogramma ( EMG) dal diaframma (DE) e dal muscolo intercostale (EIC). Sono stati applicati carichi elastici per 1-20 respiri. Gli effetti dei cambiamenti nella PCO2 sulla produzione del motoneurone respiratorio sono stati valutati applicando carichi durante il corso della rirespirazione con CO2. il primo respiro caricato, ED e EIC aumentavano di riflesso principalmente a causa del prolungamento dell'inspirazione. La vagotomia o raffreddamento vagale per bloccare il riflesso di Hering-Breuer eliminava l'aumento di ED e diminuiva l'aumento di EIC. Durante il secondo al quinto respiro, il livello di L'attività EMG era sproporzionatamente alta per il livello di PCO2, suggerendo un'ulteriore componente riflessa oltre all'attività riflessa presente nel primo respiro carico.
Importanza della ventilazione polmonare nel controllo respiratorio nella rana toro.Il consumo polmonare e cutaneo di O2 (Vo2) e la produzione di CO2 (Vco2) sono stati misurati simultaneamente in rane toro Rana catesbeiana a 20 gradi C. I polmoni erano responsabili del 77,3-91,0% del Vo2 totale e del 28,5-74,9% del VCO totale 2. La distribuzione dello scambio totale tra polmoni e pelle dipendeva dal tasso metabolico; i tassi si basavano maggiormente sulla modalità polmonare sia per il Vo2 che per il VCO2. Quando gli è stato impedito di ventilare i polmoni in un ambiente ricco di O2, le rane toro hanno sviluppato una grave acidosi respiratoria, dimostrando l'importanza dello scambio polmonare nel normale equilibrio acido-base. immersa in un mezzo saturo di O2, la Vco2 cutanea è aumentata linearmente fino ad un valore allo stato stazionario che approssima la Vco2 totale preapneica In questi stessi animali, la Pco2 arteriosa è aumentata proporzionalmente all'aumento della Vco2 cutanea, indicando che la capacità di diffusione dei parenti per la CO2 non è stata influenzata. Concludiamo che il controllo della respirazione nella rana toro in risposta ai cambiamenti nel tasso metabolico si basa principalmente sui cambiamenti nella ventilazione polmonare, mentre la pelle svolge un ruolo più passivo.
L'iperinsulinemia nei topi ob/ob causa un tessuto adiposo stimolato dall'insulina?Dopo 1 h di preincubazione per rimuovere l'insulina endogena, il tessuto adiposo di topi obesi (C57BL/L4 ob/ob) avevano un tasso di metabolismo del glucosio inferiore rispetto al tessuto non preincubato, mentre la preincubazione non ha modificato il metabolismo del tessuto adiposo dei topi magri (C57B1/6J +/+). l'effetto è stato abolito nei topi obesi i cui livelli sierici di insulina erano stati ridotti verso la normalità dal trattamento con streptozotocina. rimosso prima dell'iniezione. Nessun tale effetto è stato visto nei topi magri. Questi dati sono coerenti con l'ipotesi che l'iperinsulinemia nei topi obesi provoca uno stato cronico di stimolazione insulinica del loro tessuto adiposo, possibilmente contribuendo ai loro alti tassi di lipogenesi e la loro obesità. Diversi enzimi lipogenici sono stati misurati nel tessuto adiposo di topi sia magri che obesi e non è stata rilevata alcuna singola anomalia enzimatica che potesse spiegare l'iperlipogenesi. La piruvato deidrogenasi e l'acetil-CoA carbossilasi erano entrambi enzimi sensibili all'insulina nei topi magri e obesi.