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Insicurezza alimentare e caratteristiche socio-demografiche in due gruppi etnici del Regno Unito: un'analisi delle donne nella coorte di Born in Bradford.L'uso delle banche del cibo ha è aumentato drasticamente nel Regno Unito; tuttavia, l'epidemiologia dell'insicurezza alimentare nel Regno Unito non è ancora sviluppata. Questo studio contribuisce al campo analizzando i fattori di rischio socio-demografici per l'insicurezza alimentare in una popolazione femminile ed etnicamente diversificata. Dati del Born in Bradford (BiB) La coorte è stata confrontata con i dati sull'insicurezza alimentare dello studio nidificato BiB1000 (N = 1280). La regressione logistica è stata utilizzata per modellare l'insicurezza alimentare in relazione all'etnia e ai fattori socio-demografici. L'insicurezza alimentare, segnalata dal 13,98% del campione, è stata più probabile tra le donne britanniche bianche rispetto alle donne pakistane (rapporto di probabilità greggio (OR) 1,94, IC 95%: 1,37; 2,74, OR corretto 2,37, IC 95%: 1,57; 3,59). di misure socio-economiche, in particolare la ricezione di me benefici testati an (OR aggiustato 2,11, IC 95%: 1,41; 3.15) e percezione dell'insicurezza finanziaria (OR aggiustato 8,91, 95% CI: 4,14; 19,16 per aver trovato difficoltà/molto difficile rispetto a vivere comodamente). La scoperta che la prevalenza dell'insicurezza alimentare può essere maggiore di quanto si pensasse in precedenza e che l'insicurezza alimentare è fortemente associata allo stato socio-economico, in particolare alla ricezione di benefici, è motivo di preoccupazione e richiede una risposta politica urgente.
Il gene MADS-box Agamo-like 11 è essenziale per la morfogenesi dei semi nella vite.Nonostante l'ampio apprezzamento delle uve senza semi, si sa poco i meccanismi molecolari che guidano il fenotipo stenospermocarpico senza semi nella vite Al fine di affrontare i meccanismi molecolari che controllano l'assenza di semi nella vite, il nostro studio mirava a caratterizzare VviAGL11, un gene del fattore di trascrizione MADS-box di classe D che è stato proposto come il principale gene candidato coinvolto nella morfogenesi dei semi di Vitis vinifera. Sono state determinate le variazioni alleliche di VviAGL11 nelle cultivar di vite con e senza semi e sono state studiate le sue correlazioni con i livelli di mRNA allo stato stazionario allele-specifico. L'espressione relativa di VviAGL11 era significativamente più alta nei semi a 2, 4 e 6 settimane dopo l'allegagione, mentre nell'uva senza semi i suoi livelli di trascrizione erano estremamente bassi in tutte le fasi analizzate. L'ibridazione in situ ha rivelato un accumulo di trascritto specifico nel doppio strato endotesta dei semi, responsabile dell'allungamento e dell'aumento del numero di cellule, passaggio necessario per determinare la lignificazione e la dimensione finale del seme. Nessun segnale di ibridazione era visibile nei tessuti della vite senza semi e un'analisi morfoanatomica ha mostrato un'apparente perdita di identità dello strato endotesta delle tracce del seme. L'espressione ectopica di VviAGL11 nel background mutante di Arabidopsis SEEDSTICK ha ripristinato il fenotipo wild-type e ha confermato il ruolo diretto di VviAGL11 nella morfogenesi dei semi, suggerendo che la deplezione della sua espressione è responsabile dello sviluppo errato di uno strato di semi altamente essenziale, che culmina quindi nella tipico fenotipo apirenico.
NGSCheckMate: software per la convalida dell'identità del campione negli studi di sequenziamento di nuova generazione all'interno e tra tipi di dati.In molti studi di sequenziamento di nuova generazione (NGS) , vengono profilati più campioni o tipi di dati per ogni individuo. Un importante passaggio del controllo di qualità (QC) in questi studi è garantire che i set di dati dello stesso soggetto siano correttamente accoppiati. Data l'eterogeneità dei tipi di dati, dei tipi di file e delle profondità di sequenziamento in un studio multidimensionale, sarebbe utile un programma robusto che fornisca una metrica standardizzata per i confronti dei genotipi. Qui, descriviamo NGSCheckMate, un pacchetto software di facile utilizzo per la verifica delle identità dei campioni da file FASTQ, BAM o VCF. Questo strumento utilizza un modello- metodo basato per confrontare le frazioni di lettura alleliche a noti polimorfismi a singolo nucleotide, considerando il comportamento dipendente dalla profondità delle metriche di somiglianza per campioni identici e non correlati. La nostra valutazione mostra che NGSCheckMate è efficace per una varietà di tipi di dati, tra cui sequenziamento dell'esoma, sequenziamento dell'intero genoma, RNA-seq, ChIP-seq, sequenziamento mirato e sequenziamento dell'intero genoma a cellula singola, con un requisito minimo per la profondità di sequenziamento (>0.5X). Un modulo senza allineamento può essere eseguito direttamente sui file FASTQ per un rapido controllo iniziale. Si consiglia di utilizzare questo software come passaggio di controllo qualità negli studi NGS. https://github. com/parklab/NGSCheckMate.
Screening della desomorfina mediante analisi commerciali di immunoassorbimento enzimatico.La desomorfina ("Krokodil") è un oppioide semisintetico che ha attirato l'attenzione come una droga ricreativa, in particolare in Russia, nelle vicine ex repubbliche sovietiche, nell'Europa orientale e centrale. Non ha usi medicinali accettati ed è attualmente una droga di classe I negli Stati Uniti. In ambienti clandestini, la desomorfina viene sintetizzata dalla codeina utilizzando fosforo rosso, iodid acido e benzina. I materiali di partenza residui nelle preparazioni illecite sono stati associati a gravi effetti dermatologici e a un'estesa necrosi tissutale. La desomorfina non è ben studiata e ci sono rapporti limitati riguardanti la sua farmacologia o il rilevamento in matrici biologiche. I test immunologici sono ampiamente utilizzati per entrambi i casi antemortem e screening tossicologico post mortem Sebbene la desomorfina sia un oppioide di tipo fenantrene, la sua capacità di legarsi agli anticorpi oppioidi convenzionali non è stato descritto. In questo rapporto descriviamo la cross-reattività della desomorfina utilizzando sei saggi di immunoassorbimento enzimatico disponibili in commercio (Immunalysis Opiates Direct ELISA, Immunalysis Oxycodone/Oxymorphone Direct ELISA, Randox Opiate ELISA, OraSure Technologies OTI Opiate Micro-plate EIA, Neogen Opiate Group ELISA e Neogen ossicodone/ossimorfone ELISA). Le reattività crociate erano altamente variabili tra i dosaggi, comprese tra 77 e <2,5%. In generale, i test diretti verso la morfina hanno prodotto una maggiore reattività crociata con la desomorfina rispetto a quelli diretti verso l'ossicodone. L'Immunalysis Opiates Direct ELISA ha prodotto la massima reattività crociata, sebbene molti dei test valutati abbiano prodotto una reattività crociata di entità sufficiente per essere efficaci per lo screening della desomorfina.
Inferenza degli effetti epistatici che portano al trinceramento e alla resistenza ai farmaci nella proteasi dell'HIV-1.Comprendere i complessi modelli di mutazione che danno origine a ceppi virali resistenti ai farmaci fornisce una base per lo sviluppo di strategie di trattamento più efficaci per l'HIV / AIDS. Allineamenti di sequenze multiple di sequenze di proteasi HIV-1 sperimentate con farmaci contengono reti di molte correlazioni di coppie che possono essere utilizzate per costruire un modello hamiltoniano (Potts) di questi modelli di mutazione. questo modello hamiltoniano, traduciamo i dati di covariazione della sequenza di proteasi dell'HIV-1 in previsioni quantitative per la probabilità di osservare modelli di mutazione specifici che sono in accordo con le statistiche di sequenza osservate. Troviamo che le energie statistiche del modello di Potts sono correlate con l'idoneità di singole proteine contenenti mutazioni associate alla terapia come stimato da misurazioni in vitro della stabilità proteica e dell'infettività virale Mostriamo che il la penalità per l'acquisizione di mutazioni di resistenza primaria dipende dalle interazioni epistatiche con lo sfondo della sequenza. Le mutazioni primarie che portano alla resistenza ai farmaci possono diventare altamente vantaggiose (o radicate) dai complessi modelli di mutazione che si presentano in risposta alla terapia farmacologica nonostante siano destabilizzanti nello sfondo di tipo selvatico. Anticipare gli effetti epistatici è importante per la progettazione di future terapie con inibitori della proteasi.
L'RNA non codificante può essere associato alla sterilità maschile citoplasmatica nella Silene vulgaris.La sterilità maschile citoplasmatica (CMS) è un fenomeno diffuso nelle piante da fiore causato dai geni mitocondriali (mt). I geni CMS codificano tipicamente nuove proteine che interferiscono con le funzioni mt e possono essere silenziate dai geni che ripristinano la fertilità nucleare. Sebbene le basi molecolari della CMS siano ben stabilite in un certo numero di sistemi di colture, la nostra comprensione di esso in popolazioni naturali è molto più limitato. Per identificare i geni CMS in una pianta ginodioica, Silene vulgaris, abbiamo costruito trascrittomi mt e confrontato i livelli di trascrizione e i modelli di modifica dell'RNA nel tessuto delle gemme floreali da fratelli femminili ed ermafroditi. I trascrittomi da individui femminili ed ermafroditi sono stati molto simile nel complesso per quanto riguarda la variazione dei livelli di abbondanza di trascrizione attraverso il genoma, l'estensione dell'editing dell'RNA e l'ordine in cui l'editing dell'RNA e l'evento di splicing dell'introne si è verificato. Abbiamo trovato solo una singola regione genomica che era altamente sovraespressa e modificata in modo differenziale nelle femmine rispetto agli ermafroditi. Questa regione non si trova vicino ad altri elementi trascritti e manca di una cornice di lettura aperta (ORF) di dimensioni anche moderate. A nostra conoscenza, questa trascrizione rappresenterebbe il primo mt RNA non codificante associato a CMS nelle piante ed è, quindi, un obiettivo importante per futuri studi di validazione funzionale.
La cessazione dell'esposizione durante l'età adulta non ha impedito l'immunotossicità causata dall'esposizione dello sviluppo a basso livello di tricloroetilene nell'acqua potabile.L'esposizione all'inquinante dell'acqua tricloroetilene (TCE) ) può promuovere l'autoimmunità sia nell'uomo che nei roditori. Utilizzando un modello murino abbiamo dimostrato che l'esposizione cronica degli adulti a TCE a 500 μg/ml nell'acqua potabile genera epatite autoimmune in topi MRL+/+ femmine. Vi sono prove crescenti che l'esposizione dello sviluppo a determinati le sostanze chimiche possono essere più tossiche dell'esposizione degli adulti. Questo studio è stato progettato per verificare se l'esposizione a un livello molto più basso di TCE (0,05μg/ml) durante la gestazione, l'allattamento e i primi anni di vita generasse un'autoimmunità simile a quella riscontrata dopo l'esposizione degli adulti a concentrazioni più elevate di TCE. Quando i topi MRL+/+ femmine sono stati esaminati al giorno postnatale (PND) 259 abbiamo scoperto che l'esposizione dello sviluppo/primi anni di vita [dal giorno di gestazione 0 al PND 154] al TCE a una concentrazione 10.000 volte inferiore a quella n quello dimostrato di essere efficace per l'esposizione degli adulti all'epatite autoimmune innescata. Questo effetto è stato osservato nonostante la cessazione dell'esposizione al PND 154. In accordo con la patologia epatica, la femmina MRL+/+ esposta durante lo sviluppo e la prima infanzia a TCE (0,05 o 500 μg/ml) ha generato una gamma di anticorpi antiepatici rilevati mediante Western blotting. Anche l'espressione di citochine proinfiammatorie da parte delle cellule T CD4+ è stata osservata in modo simile al PND 259 nei topi esposti a TCE, indipendentemente dalla concentrazione. Pertanto, l'esposizione a TCE a livelli approssimativamente ambientali dal giorno di gestazione 0 al PND 154 ha generato patologie tissutali e alterazioni delle cellule T CD4+ che richiedevano concentrazioni più elevate se l'esposizione era limitata all'età adulta. La cessazione dell'esposizione al TCE al PND 154 non ha impedito l'immunotossicità.
La cattiva regolazione delle proteine che gestiscono il calcio promuove l'iperattivazione del segnale calcineurina-NFAT nel muscolo scheletrico dei topi DM1.La Distrofia Miotonica di tipo 1 (DM1) è causata da un'espansione delle ripetizioni CUG negli mRNA DMPK. Questa mutazione colpisce lo splicing alternativo attraverso la cattiva regolazione delle proteine leganti l'RNA. Tra i pre-mRNA che sono mal giuntati, diversi codici per proteine coinvolte nell'omeostasi del calcio suggerendo che la gestione e la segnalazione del calcio sono perturbate in DM1. Qui, abbiamo analizzato l'espressione di tali proteine nel muscolo di topo DM1 Abbiamo scoperto che i livelli di diverse proteine del reticolo sarcoplasmatico (SERCA1, sarcolipina e calsequestrina) sono alterati, probabilmente contribuendo a uno squilibrio nell'omeostasi del calcio. Abbiamo anche osservato che la calcineurina (CnA) è iperattivato nel muscolo DM1. In effetti, l'espressione di CnA e l'attività della fosfatasi sono entrambe notevolmente aumentate nel muscolo DM1. Coerentemente con ciò, abbiamo scoperto che gli attivatori della via CnA (MLP, FHL1) sono elevati. Di conseguenza, l'espressione di NFATc1 è aumentata nel muscolo DM1 e si rilocalizza nei mionuclei, insieme ad una up-regolazione dei suoi bersagli trascrizionali (RCAN1.4 e mioglobina). Di conseguenza, i muscoli del topo DM1 mostrano un aumento del metabolismo ossidativo e dell'ipertrofia delle fibre. Per determinare le conseguenze funzionali di questa iperattivazione di CnA, abbiamo somministrato ciclosporina A, un inibitore di CnA, a topi DM1. I muscoli dei topi DM1 trattati hanno mostrato un aumento dei livelli di CUGBP1 e un'esacerbazione degli eventi chiave di splicing alternativi associati a DM1. Infine, l'inibizione del CnA nei mioblasti umani DM1 in coltura ha provocato anche un'esacerbazione dello splicing del recettore dell'insulina. Insieme, questi risultati mostrano per la prima volta che la segnalazione calcio-CnA è iperattivata nel muscolo DM1 e che tale iperattivazione rappresenta un benefico adattamento compensatorio alla malattia.
Screening cromosomico completo e analisi dell'espressione genica dalla stessa biopsia in embrioni umani preimpianto.Lo screening cromosomico completo (CCS) e l'analisi dell'espressione genica possono essere simultanei eseguita sulla stessa biopsia di embrioni umani preimpianto. Per la prima volta, la CCS e l'analisi affidabile dell'espressione genica sono state eseguite sulla stessa biopsia di embrione umano preimpianto. Una singola biopsia del trophectoderm (TE) viene utilizzata abitualmente per molti programmi di fecondazione in vitro che offrono CCS per la selezione di soli embrioni cromosomicamente normali per il trasferimento. Sebbene sia stato descritto il profilo di espressione genica di embrioni umani preimpianto, ad oggi nessun protocollo consente la CCS simultanea e il profilo di espressione genica da una singola biopsia TE. Questa è una prova di concetto e studio di convalida strutturato in due fasi Nella fase 1, le linee cellulari sono state sottoposte a un nuovo protocollo per l'analisi combinata di CCS e di espressione genica in modo da convalidare l'accuratezza e affidabilità del protocollo proposto. Nella fase 2, 20 blastocisti umane donate sono state sottoposte a biopsia e processate con il protocollo proposto al fine di ottenere un risultato CCS accurato e caratterizzare i loro profili di espressione genica utilizzando lo stesso materiale di partenza. Per questo studio è stato progettato un nuovo protocollo di accoppiamento CCS basato su PCR quantitativa in tempo reale e analisi dell'espressione genica mediante RT-PCR. Fase 1: aliquote di sei cellule di linee cellulari di fibroblasti ben caratterizzate (GM00323, 46,XY e GM04435, 48,XY,+16,+21) sono state sottoposte al protocollo proposto. I risultati di CCS sono stati confrontati con i cariotipi noti per coerenza e i livelli di espressione genica sono stati confrontati con i livelli di RNA purificato dalle stesse linee cellulari per la convalida di un profilo di espressione genica affidabile. Fase 2: sono state eseguite quattro biopsie su 20 blastocisti umane congelate precedentemente diagnosticate come trisomia 21 (10 embrioni) e monosomia 21 (10 embrioni) da CCS. Tutti i campioni sono stati elaborati con il protocollo proposto e rivalutati per la concordanza con il risultato CCS originale. I loro profili di espressione genica sono stati caratterizzati ed è stata valutata anche l'espressione genica differenziale tra embrioni e linee cellulari embrionali precoci. I risultati della CCS delle linee cellulari hanno mostrato una coerenza del 100% con i loro cariotipi noti. I valori Ct dell'espressione genica differenziale di quattro geni bersaglio selezionati dalle linee cellulari GM4435 e GM0323 erano comparabili tra aliquote di sei cellule e RNA purificato (Collagene tipo I alfa-1 (COL1A1), P = 0,54; Fattore di crescita dei fibroblasti-5 ( FGF5), P = 0,11; Laminina subunità beta-1 (LAMB1), P = 1.00 e Atlastin-1 (ATL1), P = 0,23). Per quanto riguarda le blastocisti umane, è stata riportata una consistenza del 92% dopo aver confrontato i risultati della CCS embrionale con la diagnosi precedente. Sono stati selezionati un totale di 30 geni da un pannello di pluripotenza di cellule staminali umane per valutare l'espressione genica negli embrioni umani. I coefficienti di correlazione dei profili di espressione da biopsie dello stesso embrione (r = 0,96 ± 0,03 (deviazione standard), n = 45) erano significativamente più alti rispetto a quando sono state valutate biopsie da embrioni non correlati (r = 0,93 ± 0,03, n = 945) (P < 0,0001). Il fattore di differenziazione della crescita 3 (GDF3) è risultato significativamente up-regolato nella massa cellulare interna (ICM), mentre la proteina 2 homebox di tipo caudale (CDX2), la subunità laminina alfa-1 (LAMA1) e la DNA metiltransferasi 3-beta ( DNMT3B) ha mostrato una down-regulation in ICM rispetto a TE. Gli embrioni della trisomia 21 hanno mostrato una significativa up-regolazione dei marcatori della differenziazione cellulare (Cadherin-5 (CDH5) e la subunità gamma-1 della laminina (LAMC1)), mentre le blastocisti della monosomia 21 hanno mostrato una maggiore espressione di geni segnalati per essere espressi in cellule indifferenziate (Gamma- Subunità beta3 del recettore dell'acido aminobutirrico di tipo A (GABRB3) e GDF3). N / A. I profili di espressione genica di embrioni cromosomicamente normali non sono stati valutati a causa dell'accesso restrittivo agli embrioni euploidi per la ricerca. Tuttavia, è stato caratterizzato e confrontato il profilo delle blastocisti con singole aneuploidie. In questo studio sono stati analizzati solo 30 geni bersaglio per l'espressione genica. L'aumento del numero di geni bersaglio fornirà una firma trascrittomica più completa e rivelerà potenziali percorsi fondamentali per la competenza embrionale e il corretto sviluppo. Questa è la prima volta che la CCS e l'analisi dell'espressione genica sono state eseguite sulla stessa biopsia dell'embrione umano preimpianto. L'ulteriore ottimizzazione di questo protocollo con altre piattaforme CCS e l'inclusione di più geni bersaglio fornirà innumerevoli ricerche e applicazioni cliniche, come la scoperta di biomarcatori per il potenziale riproduttivo embrionale e la caratterizzazione delle firme trascrittomiche degli embrioni, consentendo potenzialmente un'ulteriore selezione dell'embrione prima dell'embrione trasferimento e quindi migliorare i risultati. Questo studio è stato finanziato dalla Foundation for Embryonic Competence, Basking Ridge, NJ, USA. Nessun conflitto di interessi dichiarato.
Identification of Unique Metabolites of the Designer Opioid Furanyl Fentanyl.Il mercato dei farmaci illeciti ha visto un aumento degli oppioidi designer, inclusi gli analoghi del fentanil e del metadone, e altri agonisti oppioidi strutturalmente non correlati. L'oppiaceo designer, furanil fentanil, è uno dei tanti analoghi del fentanil sintetizzati clandestinamente per uso ricreativo e contribuisce alla crisi del fentanil e degli oppioidi. È stato sviluppato e convalidato un metodo per l'analisi di furanil fentanil e furanil norfentanil in campioni di urina provenienti da programmi di gestione del dolore Circa il 10% dei campioni di una serie di 500 campioni di urina presunti positivi all'eroina conteneva furanil fentanil, con una concentrazione media di 33,8 ng/mL e un intervallo compreso tra 0,26 e 390 ng/mL È stato osservato poco o nessun furanil norfentanil, pertanto i campioni di furanil fentanil sono stati ulteriormente analizzati mediante spettrometria di massa ad alta risoluzione non mirata per identificare altri metaboliti. Sono stati identificati più metaboliti, tra cui un metabolita diidrodiolo, 4-anilino-N-fenetil-piperidina (4-ANPP) e un metabolita solfato. Lo scopo dello studio presentato era identificare i principali metaboliti del furanil fentanil e stimare le loro concentrazioni ai fini del monitoraggio tossicologico.
Determinazione della morte cellulare indotta da carenza di glucosio dall'omeostasi del protone mitocondriale guidata dalla generazione di ATP.Il glucosio è uno dei principali nutrienti e il suo catabolismo fornisce energia e / o mattoni da costruzione per la proliferazione cellulare. La carenza di glucosio provoca la morte cellulare. Tuttavia, il meccanismo sottostante rimane ancora sfuggente. Utilizzando il nostro metodo recentemente sviluppato per monitorare l'apoptosi e la necrosi cellulare in tempo reale, dimostriamo che la privazione del glucosio può provocare direttamente la necrosi, che è promosso dalla compromissione mitocondriale, a seconda della generazione mitocondriale di adenosina trifosfato (ATP) invece della deplezione di ATP. Dimostriamo che il metabolismo del glucosio è la principale fonte per produrre protoni. La carenza di glucosio porta alla mancanza di fornitura di protoni mentre la catena di trasferimento degli elettroni mitocondriale continua a consumare protoni per generare energia, che provoca un efflusso compensatorio di protoni lisosomiali e il risultante aumento del pH lisosomiale. l'alinizzazione può innescare l'apoptosi o la necrosi a seconda del grado di alcalinizzazione. Presi insieme, i nostri risultati creano una connessione metabolica tra glicolisi, mitocondrio e lisosoma e rivelano un ruolo essenziale del metabolismo del glucosio nel mantenimento dell'omeostasi dei protoni per supportare la sopravvivenza cellulare.
Identificazione e caratterizzazione delle varianti Aurora chinasi B e C associate all'aneuploidia materna.Sono varianti a singolo nucleotide (SNV) nelle chinasi Aurora B e C ( AURKB, AURKC) associati al rischio di concepimento aneuploide. Due SNV sono stati trovati in pazienti con tassi di concepimento aneuploide estremo rispetto alla loro età; una variante, AURKC p. I79V, è benigna, mentre un'altra, AURKB p. L39P, è un potenziale mutante con guadagno di funzione con maggiore efficienza nel promuovere l'allineamento cromosomico. L'età materna non sempre predice il rischio di aneuploidia e rare varianti geniche possono essere fattori di malattia. L'AURKB e l'AURKC regolano la segregazione cromosomica e sono associati a problemi riproduttivi nel topo e umano. È stato eseguito uno schema di selezione del campione di fenotipo estremo per la scoperta di varianti. Novantasei campioni di DNA provenivano da pazienti giovani con tassi di aneuploidia embrionale superiori alla media e altri 96 campioni di DNA provenivano da pazienti più anziani ts con tassi di aneuploidia inferiori alla media. Utilizzando i 192 campioni di DNA, le regioni codificanti di AURKB e AURKC sono state sequenziate utilizzando il sequenziamento di nuova generazione. Per valutare il significato biologico, abbiamo espresso RNA complementare che codifica le varianti umane negli ovociti di topo. Saggi come la determinazione della localizzazione subcellulare e la valutazione dell'attività catalitica sono stati eseguiti per determinare le alterazioni della funzione proteica durante la meiosi. Dieci SNV sono stati identificati utilizzando tre metodi di identificazione delle varianti indipendenti. Due dei SNV (AURKB p. L39P e AURKC p. I79V) erano non sinonimi e identificati da almeno due metodi di identificazione delle varianti. La variante codificante AURKC p. I79V, identificata in una giovane donna con un tasso di embrioni aneuploidi superiore alla media, ha mostrato pattern di localizzazione di tipo selvaggio e attività catalitica. D'altra parte, la variante che codifica per AURKB p. L39P, identificata in una donna anziana con tassi di embrioni aneuploidi inferiori alla media, ha aumentato la capacità della proteina di regolare l'allineamento dei cromosomi sulla piastra metafase. Questi esperimenti sono stati ripetuti tre volte indipendenti utilizzando 2-3 topi per ogni prova. N / A. Il significato biologico delle varianti umane è stato valutato in un modello di ovociti murini in vitro in cui le varianti sono sovraespresse. Pertanto, la proteina umana potrebbe non funzionare in modo identico all'omologo di topo, o allo stesso modo negli ovociti di topo come negli ovociti umani. Inoltre, i livelli di espressione soprafisiologica potrebbero non riflettere accuratamente l'attività endogena. Inoltre, le varianti valutate sono state identificate in un paziente ciascuna e non è stato condotto alcuno studio che collegasse la SNV agli esiti della gravidanza. Infine, i tassi di aneuploidia dei pazienti sono stati stabiliti eseguendo uno screening cromosomico completo nelle blastocisti e, a causa del legame tra l'aneuploidia dei gameti femminili che dà origine agli embrioni aneuploidi, valutiamo il ruolo delle varianti nella meiosi I. Tuttavia, è possibile che il cromosoma errore di segregazione si è verificato durante la meiosi II o nella mitosi nell'embrione preimpianto. Le loro implicazioni nella meiosi femminile umana e nel rischio di aneuploidia restano da determinare. I dati forniscono la prova che esistono varianti genetiche nelle donne riproduttivamente più giovani o di età avanzata che sono predittive del rischio di produrre concetti aneuploidi negli esseri umani. Inoltre, un singolo amminoacido nell'N-terminale di AURKB è un mutante con guadagno di funzione che potrebbe essere protettivo nei confronti dell'euploidia. Questo lavoro è stato sostenuto da una borsa di studio dell'American Society of Reproductive Medicine e dal sostegno del Charles and Johanna Busch Memorial Fund a Rutgers, dalla State University of NJ a K. S. e la Foundation for Embryonic Competence, Inc a N. T. Gli autori non dichiarano conflitti di interesse.
Galleria mellonella come modello in vivo per valutare l'attività protettiva dei probiotici contro i batteri patogeni gastrointestinali.L'attività antagonista contro i batteri patogeni gastrointestinali è un importante proprietà dei batteri probiotici e una caratteristica desiderabile per la preselezione di nuovi ceppi con potenziale probiotico. Il pre-screening dei probiotici candidati per l'attività antibatterica dovrebbe essere basato su test in vitro e in vivo. Questo studio ha valutato se l'attività protettiva dei batteri probiotici contro I patogeni batterici gastrointestinali possono essere valutati utilizzando le larve di Galleria mellonella come modello in vivo. Le larve sono state pre-inoculate con uno dei due batteri probiotici ampiamente utilizzati, Lactobacillus rhamnosus GG o Clostridium butyricum Miyairi 588, e quindi sfidate con Salmonella enterica Typhimurium, Escherichia coli enteropatogeno o Listeria monocytogenes I tassi di sopravvivenza sono aumentati nel pretrattamento probiotico ed larve rispetto alle larve di controllo inoculate solo con agenti patogeni. La densità degli emociti è aumentata anche nelle larve pretrattate con probiotici, indicando che entrambi i probiotici inducono una risposta immunitaria nelle larve. L'attività antibatterica dei probiotici contro i patogeni è stata anche valutata mediante uno spot test in vitro su agar: i risultati sono stati parzialmente coerenti con quelli ottenuti dal test di protezione della G. mellonella. I risultati ottenuti, nel complesso, suggeriscono che le larve di G. mellonella sono un modello in vivo potenzialmente utile che può integrare i test in vitro per il pre-screening dei probiotici candidati.
Coevoluzione antagonista dell'espressione e della funzione della MER tirosin-chinasi.I recettori TYRO3, AXL e MERTK (TAM) sono una famiglia di recettori tirosin chinasi che mantengono l'omeostasi attraverso la clearance delle cellule apoptotiche e, se difettose, contribuiscono a malattie infiammatorie croniche e autoimmuni come l'aterosclerosi, la sclerosi multipla, il lupus eritematoso sistemico, l'artrite reumatoide e il morbo di Crohn. Inoltre, alcuni virus con involucro utilizzano i recettori TAM per il sistema immunitario evasione e ingresso nelle cellule ospiti, con diversi virus che dirottano preferenzialmente MERTK per questi scopi. Nonostante l'importanza biologica dei recettori TAM, si sa poco della loro recente evoluzione e del suo impatto sulla loro funzione. Utilizzando l'analisi evolutiva delle sequenze dei recettori TAM dei primati, abbiamo identificato forte, recente selezione positiva nel peptide segnale MERTK\'s e nel dominio transmembrana che era assente da TYRO3 e AXL. sequenze ancestrali MERTK di inid e primate hanno rivelato tre polimorfismi a singolo nucleotide non sinonimi nel peptide segnale MERTK umano, con una mutazione G14C risultante in un motivo cruciforme di DNA non-B previsto, producendo una significativa diminuzione dell'espressione MERTK senza alcun effetto significativo sul traffico MERTK o metà -vita. La ricostruzione del dominio transmembrana di MERTK\' ha identificato tre sostituzioni di amminoacidi e quattro inserimenti di amminoacidi nell'uomo, che hanno portato a livelli significativamente più elevati di autoaggregazione attraverso la creazione di un nuovo motivo di interazione. Questo raggruppamento ha neutralizzato l'effetto delle mutazioni del peptide segnale migliorando l'avidità di MERTK, mentre l'espressione di MERTK inferiore ha portato a un ridotto legame delle particelle simili al virus Ebola. La ridotta espressione di MERTK controbilanciata da una maggiore avidità è coerente con la coevoluzione antagonista per eludere il dirottamento virale di MERTK.
Il fattore di trascrizione bHLH bHLH115 regola l'omeostasi del ferro nell'Arabidopsis thaliana.La carenza di ferro (Fe) è un fattore limitante per la normale crescita e sviluppo delle piante, e molte specie hanno evoluto sistemi sofisticati per l'adattamento ad ambienti carenti di Fe. Non è ancora chiaro come le piante percepiscano lo stato di Fe e coordinino l'espressione dei geni sensibili alla carenza di Fe. In questo studio, mostriamo che il fattore di trascrizione bHLH bHLH115 è un fattore positivo regolatore della risposta alla carenza di Fe. La perdita di funzione di bHLH115 provoca forti sintomi di carenza di Fe e allevia l'espressione dei geni sensibili alla carenza di Fe, mentre la sua sovraespressione provoca l'effetto opposto. I test di immunoprecipitazione della cromatina hanno confermato che bHLH115 si lega ai promotori di i geni sensibili alla carenza di Fe bHLH38/39/100/101 e POPEYE (PYE), che suggeriscono funzioni molecolari ridondanti con bHLH34, bHLH104 e bHLH105. Ciò è ulteriormente supportato da il fatto che il mutante bhlh115-1 fosse completato dalla sovraespressione di uno qualsiasi di bHLH34, bHLH104, bHLH105 e bHLH115. Ulteriori indagini hanno determinato che bHLH115 potrebbe interagire con se stesso e con bHLH34, bHLH104 e bHLH105. I loro diversi modelli di espressione tessuto-specifici e i gravi sintomi di carenza di Fe di più mutanti hanno supportato le loro funzioni biologiche non ridondanti. L'analisi genetica ha rivelato che bHLH115 è regolato negativamente da BRUTUS (BTS), una ligasi E3 che può interagire con bHLH115. Pertanto, bHLH115 svolge un ruolo chiave nel mantenimento dell'omeostasi del Fe in Arabidopsis thaliana.
Rivisitazione del ciclo dell'epitelio seminifero umano.Tutti i tipi di cellule germinali testicolari possono essere accuratamente identificati mediante tecniche di microscopia e distribuiti in modo univoco nelle fasi del seminifero umano ciclo epiteliale (SEC). Utilizzando un metodo di microscopia ottica ad alta risoluzione (HRLM), che consente una migliore visualizzazione delle caratteristiche morfologiche delle cellule germinali, abbiamo identificato tutte le cellule germinali testicolari nell'epitelio seminifero e le abbiamo raggruppate con precisione in sei SEC ben delimitate stadi, fornendo così una fonte di riferimento affidabile per la stadiazione nell'uomo. La caratterizzazione morfologica delle cellule germinali nell'uomo è stata effettuata decenni fa con l'uso di metodi istologici convenzionali (fissativo a base di formaldeide -Zenker-formale- e inclusione in paraffina). proposto una classificazione della SEC in sei fasi. Tuttavia, l'uso delle fasi come riferimento per le valutazioni morfofunzionali del parenchima testicolare è stato difficile perché di identificazione morfologica incompleta delle cellule germinali e la loro distribuzione casuale nella SEC umana. Il tessuto testicolare di donatori adulti e anziani con spermatogenesi normale secondo i punteggi di Levin\', Johnsen\' e Bergmann\' è stato utilizzato per valutare la morfologia delle cellule germinali e convalidare la loro distribuzione e frequenza nelle fasi durante la spermatogenesi umana. Il tessuto testicolare di pazienti con diagnosi di agenesia bilaterale congenita dei vasi deferenti (n = 3 adulti) o cancro alla prostata (n = 3 anziani) è stato fissato in glutaraldeide e incorporato in resina epossidica aralditica. Le analisi morfologiche sono state eseguite mediante microscopia elettronica sia ottica che a trasmissione. Il metodo HRLM ha consentito un'identificazione morfologica affidabile di tutte le cellule germinali (spermatogoni, spermatociti e spermatidi) sulla base di aspetti ad alta risoluzione di eucromatina, eterocromatina e nucleolo. Inoltre, è stato chiaramente rivelato lo sviluppo acrosomiale degli spermatidi. Complessivamente, i nostri dati hanno ridefinito i limiti di ogni fase portando a una determinazione più affidabile della SEC nell'uomo. Occasionalmente, le cellule germinali possono essere assenti in alcune sezioni tubulari. In questa situazione, deve essere presa in considerazione l'associazione delle cellule germinali proposta nel presente studio per classificare gli stadi. I nostri risultati portano una nuova attenzione sulla morfologia e sullo sviluppo delle cellule germinali durante la SEC nell'uomo. L'applicazione di HRLM può essere uno strumento prezioso per studi di ricerca e andrologia clinica che aiutano a comprendere alcune malattie testicolari e condizioni di infertilità che rimangono irrisolte. Gli esperimenti sono stati parzialmente supportati da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Fundação de Amparo à Pesquisa de Minas Gerais (FAPEMIG) e Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq). Gli autori dichiarano che non vi sono conflitti di interesse. Non applicabile.
Segnalazione dei nitrati e risposte precoci nelle radici di Arabidopsis.L'azoto (N) è un macronutriente essenziale che influisce su molti aspetti della fisiologia, della crescita e dello sviluppo delle piante Oltre al suo ruolo nutrizionale, i nutrienti e i metaboliti dell'N agiscono come molecole di segnalazione che regolano l'espressione di un'ampia gamma di geni e processi biologici. In questa recensione, descriviamo i recenti progressi nella comprensione dei componenti della via di segnalazione dei nitrati. che in una via di segnalazione dei nitrati, il nitrato rilevato da NRT1.1 attiva un'attività della fosfolipasi C necessaria per aumentare i livelli di calcio citosolico. geni di risposta dei nitrati Coerentemente con questo modello, i trattamenti con nitrati provocano cambiamenti a livello di proteoma nei modelli di fosforilazione in un'ampia gamma di proteine, incluso il trasporto rs, enzimi metabolici, chinasi, fosfatasi e altre proteine regolatrici. Identificare e caratterizzare la funzione dei diversi attori coinvolti in questa e in altre vie di segnalazione dei nitrati e le loro relazioni funzionali è il passo successivo per comprendere le risposte dell'N nelle piante.
Preferenza dei predatori per Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) alimentati con Bt: Implicazioni per la gestione della resistenza agli insetti nelle miscele di semi di mais Bt.Comprensione indiretta, Gli effetti a livello trofico delle piante geneticamente modificate, che esprimono proteine insetticide derivate dal batterio Bacillus thuringiensis (Bt), sono essenziali per il processo di valutazione del rischio ecologico In questo studio, esaminiamo i potenziali effetti indiretti a livello trofico delle prede sensibili al Bt utilizzando il predatore, Harmonia axyridis (Pallas), nutrendosi di larve di Spodoptera frugiperda (JE Smith), che avevano uno sviluppo ritardato (massa corporea inferiore) a seguito dell'ingestione di foglie di mais Cry1Ab. Non abbiamo riscontrato effetti negativi sullo sviluppo e sulla sopravvivenza quando le larve di H. axyridis sono stati alimentati con larve di S. frugiperda che si erano nutrite di tessuto di mais Cry1Ab. La presenza di Cry1Ab in H. axyridis è diminuita considerevolmente dopo il passaggio a un'altra dieta entro 48 h. In un test senza scelta, le larve di H. axyridis con hanno assorbito più S. frugiperda nutrito con Bt rispetto alle larve non nutrite con Bt. La preferenza per l'alimentazione di S. frugiperda con mais Bt è stata confermata in successivi saggi di scelta con la predazione di H. axyridis su larve di S. frugiperda alimentate con Bt di 1-5 giorni. Suggeriamo che H. axyridis preferisse le prede, non in base al fatto che si fosse nutrito di mais Bt o non Bt, ma piuttosto sulla massa larvale, e compensavano la carenza nutrizionale delle larve più leggere attraverso un maggiore consumo. Le larve dei parassiti con livelli variabili di resistenza che si sviluppano con una dieta Bt sono spesso rachitiche rispetto alle larve sensibili che si sviluppano con una dieta non Bt. È possibile che tali larve possano essere rimosse preferenzialmente dalle popolazioni di campo locali. Questi risultati possono avere implicazioni per la gestione della resistenza agli insetti e possono essere realizzati in condizioni di campo in cui vengono piantate miscele di semi di ibridi Bt e non Bt.
Specificità di legame di Siglec-8 e Siglec-9 e distribuzione e proprietà dei ligandi delle vie aeree endogeni.I siglec sono proteine leganti sialoglicani transmembrana, la maggior parte delle quali sono espresse su sottoinsiemi di leucociti e hanno motivi inibitori che traducono la legatura della superficie cellulare in soppressione immunitaria. Negli esseri umani, Siglec-8 su eosinofili, mastociti e basofili e Siglec-9 su neutrofili, monociti e alcune cellule T, mediano la morte delle cellule immunitarie, inibizione di rilascio di mediatori immunitari e/o potenziamento del rilascio di mediatori antinfiammatori. Ligandi sialoglicani endogeni nei tessuti, per lo più non caratterizzati, impegnano siglec sui leucociti per inibire l'infiammazione. Le analisi dell'array di glicani hanno dimostrato che Siglec-8, Siglec-9 e le loro controparti di topo Siglec-F e Siglec-E (rispettivamente) hanno specificità di legame con glicani distinte, con Siglec-8 più strutturalmente limitato Poiché i siglec sono coinvolti nell'infiammazione polmonare, abbiamo studiato Siglec-8 e Siglec-9 ligan ds nei polmoni e nelle vie aeree umani. I ligandi Siglec-8 si trovano nelle ghiandole sottomucose tracheali e nella cartilagine, ma non nell'epitelio delle vie aeree o nei tessuti connettivi, mentre i ligandi Siglec-9 sono ampiamente distribuiti. Le vie aeree del topo non hanno ligandi Siglec-8, mentre i ligandi Siglec-9 sono sulle vie aeree di entrambe le specie. L'estrazione delle vie aeree e dei polmoni umani seguita da risoluzione elettroforetica e blotting siglec ha rivelato ligandi Siglec-8 negli estratti di trachea umana e cellule della ghiandola tracheale coltivate, ma non parenchima o cellule epiteliali delle vie aeree coltivate mentre i ligandi Siglec-9 sono stati estratti da tutte le vie aeree e dai tessuti polmonari e cellule testate. I ligandi Siglec-8 e Siglec-9 nelle vie aeree sembrano essere sialoglicoproteine ad alto peso molecolare legate a O. Questi dati rivelano le specificità dei glicani differenziali di Siglec-8, Siglec-9 e delle loro controparti di topo Siglec-F e Siglec-E, e le distribuzioni tissutali e le caratteristiche molecolari dei ligandi sialoglicani Siglec-8 e Siglec-9 sulle vie aeree e sui polmoni umani".
Populus simonii × Populus nigra WRKY70 è coinvolto nelle risposte allo stress salino e alla peronospora.I fattori di trascrizione WRKY (TF) sono importanti regolatori del complesso reti di segnalazione della risposta allo stress nelle piante, ma i meccanismi dettagliati alla base di queste reti regolatorie non sono stati completamente caratterizzati. Nel presente studio, abbiamo identificato un gene WRKY di gruppo III (PsnWRKY70, Potri.016G137900) da Populussimonii × Populusnigra e ne abbiamo esplorato la funzione sotto sale e stress patogeni. La sequenza del promotore che si trova a 2471 bp a monte del codone di inizio (SC) di PsnWRKY70 conteneva molti elementi cis sensibili allo stress. Il test di un ibrido di lievito ha suggerito i regolatori a monte, PsnWRKY70, PsnNAM (Potri.009G141600) , PsnMYB (Potri.006G000800) e PsnGT1 (Potri.010G055000), probabilmente modulano l'espressione del gene PsnWRKY70 legandosi specificamente all'elemento W-box o GT1GMSCAM4 (GT1). l'analisi ha rivelato che HP1 (Potri.004G092100), RRM (Potri.008G146700), Ulp1 (Potri.002G105700) e alcuni membri della cascata della proteina chinasi attivata da mitogeni probabilmente interagiscono con PsnWRKY70 TF alla risposta allo stress salino. Rispetto alle piante non transgeniche (NT), le piante che sovraesprimono PsnWRKY70 (OEX) hanno mostrato una migliore resistenza alla peronospora fogliare, mentre le piante che reprimono PsnWRKY70 (REX) hanno mostrato una maggiore tolleranza allo stress salino. PsnWRKY70, PsnNAM, PsnMYB e PsnGT1 hanno mostrato modelli di espressione simili nell'NT in condizioni di stress da sale e malattie da peronospora. I geni differenzialmente espressi (DEG) di NT vs OEX1 e i DEG di NT vs REX1 hanno mostrato una notevole diversificazione. La maggior parte dei DEG tra NT e OEX1 erano coinvolti nella biosintesi degli amminoacidi aromatici, nel metabolismo secondario, nella morte cellulare programmata, nei perossisomi e nella resistenza alle malattie. La maggior parte dei DEG tra NT e REX1 erano correlati alla risposta di essiccazione, al trasporto transmembrana dell'urea, alla risposta dell'acido abscissico, al trasporto di ioni calcio e al trasporto transmembrana di perossido di idrogeno. I nostri risultati non solo hanno rivelato il percorso di trasduzione del segnale di risposta allo stress da sale di PsnWRKY70, ma hanno anche fornito prove dirette delle funzioni biologiche opposte di PsnWRKY70 TF in risposta allo stress da sale e alla malattia da peronospora in P. simonii × P. nigra.
Severe Parechovirus 3 Infections in Young Infants-Kansas and Missouri, 2014.L'infezione da parechovirus di tipo 3 (PeV3) può causare gravi malattie neurologiche e sepsi- come la malattia nei neonati; le descrizioni cliniche ed epidemiologiche sono state limitate. Abbiamo mirato a caratterizzare la malattia PeV3 ed esplorare i fattori di rischio per l'acquisizione in un gruppo di casi neonatali presso il Children\'s Mercy Hospital di Kansas City, Missouri. I campioni di liquido cerebrospinale sono stati ottenuti da bambini di età compresa tra <180 giorni che sono stati ricoverati in ospedale con malattia simile alla sepsi o meningite tra il 1 giugno e il 1 novembre 2014. I campioni PeV-positivi sono stati sequenziati presso i Centri per il controllo e la prevenzione delle malattie. condotto interviste faccia a faccia con i genitori. Abbiamo analizzato le caratteristiche in base all'età del bambino e allo stato di ricovero in terapia intensiva. Abbiamo identificato 35 casi di infezione da PeV in bambini di età compresa tra 5 e 56 giorni. terapia intensiva richiesta (età media, 11 giorni vs 27 giorni tra coloro che non hanno richiesto terapia intensiva; P = .0044). Sei di questi 7 bambini avevano manifestazioni neurologiche coerenti con convulsioni e tutti e 6 sono stati trattati con aciclovir ma successivamente sono risultati negativi per il virus dell'herpes simplex. Le sequenze virali hanno formato 2 linee, entrambe associate a malattie gravi. È stato riferito che la metà dei bambini aveva contatti familiari che si erano ammalati durante la settimana prima dell'inizio. I neonati di età 7 giorni all'esordio avevano maggiori probabilità di essere stati partoriti nello stesso ospedale. PeV3 può causare gravi malattie neurologiche nei neonati e i bambini più piccoli hanno maggiori probabilità di richiedere cure intensive. PeV3 dovrebbe essere considerato insieme al virus dell'herpes simplex e ad altri agenti patogeni quando si valutano i bambini piccoli con malattia simile alla sepsi o meningite. Test più diffusi per PeV3 ci consentirebbero di acquisire una migliore comprensione dell'ambito clinico e della circolazione di questo virus.
In Synechococcus sp. la competizione per l'energia tra assimilazione e acquisizione di C e quelle di N si verifica solo quando la crescita è limitata alla luce.La concentrazione di carbonio meccanismi (CCM) dei cianobatteri contrastano la bassa affinità CO2 e la selettività CO2:O2 del Rubisco di questi fotolitotrofi e la disponibilità relativamente bassa di CO2 oceanica. I CCM hanno un costo energetico significativo; se la luce è limitante, l'uso di sorgenti di N la cui assimilazione richiede meno energia potrebbe consentire un maggiore investimento di energia nei CCM e nell'assimilazione inorganica del C (Ci). Per testare ciò, abbiamo coltivato Synechococcus sp. UTEX LB 2380 sotto N o limitazione energetica, in presenza di NO3- o NH4+. Quando la crescita è stata le cellule cresciute con NH4+ a energia limitata avevano un tasso di crescita 1,2 volte più alto, un tasso fotosintetico saturo di carbonio inorganico disciolto (DIC) 1,3 volte più alto, un trasferimento di elettroni lineare superiore del 19%, 1/K1/2 (DIC fotosintetico) più alto dell'80% ), 2,0 volte maggiore pendenza della linea ar parte della fotosintesi rispetto alla curva DIC, pool di Ci intracellulare 3,5 volte più grande e quota di Zn 2,3 volte superiore rispetto alle cellule cresciute con NO3. Quando l'energia non limitava la crescita, non c'erano differenze tra cellule NH4+- e NO3--cresciute, ad eccezione di un trasferimento di elettroni lineare più elevato e di un pool di Ci intracellulare più grande. Concludiamo che, quando l'energia limita la crescita, le cellule che utilizzano la fonte di N più economica deviano energia dall'assimilazione di N all'acquisizione e assimilazione di C; questo non accade quando l'energia non è limitante.
Ordine di stabilità per i siti di proteolisi di una proteina batterica simile al collagene.Rispetto a collageni isolati da fonti animali, collagene e collagene ( Le proteine CL) da fonti non animali sono non immunogeniche e quindi promettenti come materiali biomedici. Recentemente, una proteina CL, V-CL, è stata identificata da una fonte batterica, Streptococcus pyogenes. In questo studio è stato utilizzato un metodo di precipitazione acida per isolare V-CL in una fase di purificazione. La spettroscopia di dicroismo circolare è stata utilizzata per esaminare la struttura a tripla elica di V-CL. Gli eventi di proteolisi della tripsina di V-CL sono stati caratterizzati mediante elettroforesi su gel e spettrometria di massa. L'ordine di proteolisi della proteolisi siti di V-CL è stato studiato e confrontato con il profilo di stabilità previsto. L'ordine di proteolisi determinato sperimentalmente concordato con il profilo di stabilità previsto, suggerendo che l'ordine di proteolisi di questi siti di proteolisi è stato determinato dal loro st stabilità strutturale. Questo lavoro è tra gli studi pionieristici sulla creazione di una correlazione tra l'ordine della proteolisi e il profilo di stabilità proteica previsto dei collageni e delle proteine CL. Poiché la digestione del collagene è spesso collegata a stati patologici, questo studio può potenzialmente far luce sul percorso di biodegradazione del collagene e sui relativi modelli di malattia. Inoltre, poiché i collageni sono stati utilizzati nella somministrazione di farmaci, questo lavoro può fornire la base molecolare per la progettazione razionale delle proteine CL con biostabilità varia.
L'attivazione ad alta pressione dell'endonucleasi di restrizione Mrr in Escherichia coli comporta la dissociazione del tetramero.Uno shock da pressione idrostatica (HP) sub-letale di ∼100 MPa provoca una risposta al danno al DNA (SOS) RecA-dipendente in Escherichia coli K-12, nonostante il fatto che la pressione non possa compromettere l'integrità covalente del DNA. I precedenti screening per la resistenza HP hanno identificato Mrr (Metilated adenine Recognition and Restriction), una restrizione di tipo IV endonucleasi (REase), come istigatore per questa enigmatica risposta SOS indotta da HP. Le REasi di tipo IV tendono a colpire i siti di DNA modificati e l'attività di E. coli Mrr è stata precedentemente dimostrata essere suscitata dall'espressione della mettransferasi di tipo II M. HhaII estranea ( MTase), anche. Qui abbiamo misurato la concentrazione e la stechiometria di una proteina di fusione funzionale GFP-Mrr utilizzando la microscopia a fluttuazione di fluorescenza in vivo. I nostri risultati dimostrano che Mrr è un tetramero nelle cellule non sollecitate, ma si sposta in un dimero dopo HP shock o co-espressione con M. HhaII. Sulla base delle differenze nella reversibilità della dissociazione del tetramero osservate per GFP-Mrr wild-type e un mutante catalitico su shock HP rispetto all'espressione di M. HhaII, proponiamo un modello in base al quale (i) HP innesca l'attività Mrr spingendo direttamente i tetrameri Mrr inattivi di dissociarsi in dimeri Mrr attivi, mentre (ii) M. HhaII innesca l'attività di Mrr creando siti bersaglio ad alta affinità sul cromosoma, che portano l'equilibrio da Mrr tetramerico inattivo verso il dimero attivo.
Impatto della biopsia prostatica estesa compresa la regione apicale anteriore per il rilevamento del cancro e la previsione dello stato del margine chirurgico per la prostatectomia radicale.Abbiamo studiato la resa diagnostica della biopsia iniziale e ripetuta biopsia compresi i nuclei apicali Abbiamo studiato 573 uomini consecutivi con PSA di ≤ 20 ng/ml sottoposti a biopsia prostatica tra il 2004 e il 2013. La biopsia iniziale a 14 nuclei consisteva nel tipo sestante, siti laterali alla base e al centro, laterali apici (la) nei siti delle corna anteriori e nei siti apicali anteriori (aa). La biopsia a 18 core ripetuta consisteva nella biopsia iniziale a 14 core con quattro siti della zona di transizione (TZ) alla base (tzb) e al centro (tzm). Il cancro alla prostata è stato diagnosticato in 178 (38,9%) su 458 uomini con la biopsia iniziale a 14 nuclei e 44 (38,3%) su 115 uomini con biopsia ripetuta a 18 nuclei. Nell'impostazione iniziale della biopsia, il tasso di rilevamento del cancro unico era alto nei siti apicali (apice, la e aa: 6,2%, 6,2% e 5,1%, risp attivamente). Nell'impostazione ripetuta, era alto nel sito TZ oltre al sito apicale (apice, la, aa, tzm e tzb: 6,8%, 6,8%, 11,4%, 9,1% e 11,4%, rispettivamente). Il tasso di SM positivo all'apice era più alto nei pazienti il cui cancro è stato rilevato solo in siti diversi dalla regione del sestante rispetto a quelli nella regione del sestante (36,4% contro 14,8%, P = 0,037). Lo schema di biopsia iniziale a 14 core e ripetuto a 18 core, compresi i nuclei apicali anteriori, è fattibile per il rilevamento del cancro alla prostata. Proponiamo che i nuclei della biopsia apicale possano essere utilizzati per prevedere non solo l'esistenza del cancro, ma anche lo stato del margine chirurgico all'apice.
Secrets of succulence.Le piante grasse sono componenti iconiche della flora di molti ecosistemi terrestri, ma nonostante abbiano suscitato per secoli fascino e indagine, esse nascondono ancora molti segreti in termini di funzione fisiologica ed evoluzione. Affrontare questi misteri è importante, in quanto ciò non solo fornirà approfondimenti sulle dinamiche e sui dettagli dell'evoluzione convergente di una grave sindrome adattativa, ma informerà anche gli sforzi per conservare la biodiversità in via di estinzione e utilizzare le caratteristiche fisiologiche uniche delle piante grasse per la produzione di biocarburante e biomassa. Qui esamino i progressi nella filogenesi e nella biologia degli organismi delle piante succulente e discuto come le intuizioni del recente lavoro nei campi più ampi dell'idraulica delle piante e della fisiologia fotosintetica possono riguardare le piante grasse. Il potenziale per l'esplorazione delle relazioni meccanicistiche tra struttura anatomica e funzione fisiologica per migliorare il nostro inde Viene evidenziata la comprensione dei vincoli che hanno plasmato l'evoluzione della succulenza. Infine, si richiama l'attenzione su come le nuove metodologie e tecnologie offrano opportunità entusiasmanti per affrontare l'ampia gamma di questioni in sospeso nella biologia delle piante succulente.
Circolazione cerebrale stimata mediante flowgraphy speckle laser nella perfusione arteriosa femorale retrograda durante la chirurgia cardiaca minimamente invasiva.La flowgraphy speckle laser (LSFG) è una nuova modalità per valutare il flusso sanguigno della testa del nervo ottico (ONH), che è segnalato per essere un marker surrogato del microcircolo cerebrale Abbiamo condotto misurazioni LSFG durante la chirurgia cardiaca minimamente invasiva con perfusione arteriosa femorale retrograda e valutato la sua fattibilità e usabilità come neuromonitor. arruolati 7 pazienti sottoposti a riparazione della valvola mitrale attraverso una minitoracotomia destra con perfusione arteriosa femorale retrograda. L'LSFG è stato utilizzato per analizzare il flusso sanguigno ONH sulla base dell'esame del tasso medio di sfocatura (MBR). L'MBR è stato misurato dopo l'induzione dell'anestesia (tempo 1); dopo l'inizio del bypass cardiopolmonare (tempo 2); durante l'arresto cardiaco (tempo 3) e dopo la conclusione del bypass cardiopolmonare (tempo 4). Al le procedure sono state eseguite con successo e non ci sono state complicanze neurovascolari o decessi. Le misurazioni di LSFG sono state condotte facilmente e senza complicazioni senza alcuna complicazione correlata. L'MBR era 11.2 ± 2.3 al tempo 1, 11.1 ± 1.8 al tempo 2, 11.3 ± 1.7 al tempo 3 e 13.6 ± 3.5 al tempo 4. Statisticamente, l'MBR al tempo 4 era significativamente più alto di quelli a tutti gli altri tempi ( P < 0.05). Le misurazioni di LSFG sono state condotte in sicurezza durante la chirurgia cardiaca minimamente invasiva e hanno valutato quantitativamente il flusso sanguigno ONH. Riteniamo che questa modalità sia facile da manipolare e meno dipendente dall'operatore, con conseguente buona riproducibilità. I risultati sono ben visualizzati e confrontati quantitativamente. Il nostro risultato suggerisce che LSFG potrebbe essere un neuromonitor accurato. Clinicaltrials. gov : 15102-2.
Distorsione e variazione dei modelli nei processi stocastici del sequenziamento di piccoli RNA.L'uso di RNA-seq come metodo preferito per la scoperta e la convalida di piccoli biomarcatori di RNA è stato ostacolato da un'elevata variabilità quantitativa e conteggi di sequenza distorti. In questo articolo sviluppiamo un modello statistico per i conteggi di sequenza che tiene conto del bias della ligasi e della variazione stocastica nei conteggi di sequenza. Questo modello implica una relazione quadratica lineare tra la media e la varianza dei conteggi delle sequenze. Utilizzando un gran numero di set di dati di sequenziamento, dimostriamo come è possibile utilizzare i modelli additivi generalizzati per il framework di regressione distribuzionale di posizione, scala e forma (GAMLSS) per calcolare e applicare fattori di correzione empirici per la distorsione da ligasi. La correzione del bias potrebbe rimuovere di più più del 40% del bias per i miRNA I fattori di correzione del bias empirico sembrano essere quasi costanti su almeno uno e fino a quattro ordini di grandezza dell'input totale di RNA e inde pendente della composizione del campione. Utilizzando miscele sintetiche di composizione nota, dimostriamo che l'approccio GAMLSS può analizzare l'espressione differenziale con maggiore accuratezza, maggiore sensibilità e specificità rispetto a sei algoritmi esistenti (DESeq2, edgeR, EBSeq, limma, DSS, voom) per l'analisi di piccoli RNA-seq dati.
Influenza della diversa disponibilità di nitrati e azoto sul controllo della fioritura in Arabidopsis.L'azoto, un macronutriente essenziale per le piante, regola molti aspetti della crescita e dello sviluppo delle piante Il nitrato è una delle principali forme di azoto assorbito dalle piante dal suolo. È stato riportato che il nitrato e l'azoto regolano la fioritura; mentre alcuni studi hanno dimostrato che una minore quantità di nitrati/azoto favorisce la fioritura, altri hanno riportato la tendenza opposta. in che modo il nitrato/azoto influisce sulla fioritura, abbiamo esaminato la letteratura esistente e condotto esperimenti per esaminare il tempo di fioritura in un'ampia gamma di concentrazioni di nitrati utilizzando due sistemi di crescita. curva di fioritura sagomata, con una concentrazione ottimale di nitrati che facilita la fioritura e concentrazioni al di sopra o al di sotto di questa concentrazione ottimale che ritardano la fioritura. il ruolo del nitrato e dell'azoto nella regolazione della fioritura è stato chiarito da diversi studi trascrittomici e mutanti, che hanno suggerito strette interazioni tra nitrato/azoto, fosfato, l'orologio circadiano, la fotosintesi e, potenzialmente, gli ormoni. Discutiamo diversi possibili meccanismi molecolari alla base della risposta alla fioritura a forma di U.
Gli ibridi di scimmie notturne mostrano alterazioni genomiche e cariotipiche De Novo: il primo caso del genere nei primati.Utilizzando analisi cromosomiche molecolari, abbiamo scoperto ibridi di scimmie notturne prodotti in cattività da accoppiamenti tra una femmina Aotus azarae boliviensis (2n = 50) e un maschio Aotus lemurinus griseimembra (2n = 53). I genitori hanno prodotto sette figli in totale, tra cui un maschio e sei femmine, un modello coerente con Haldane\ 's rule. Gli studi cromosomici sono stati condotti su quattro della prole ibrida. Due di loro hanno mostrato cariotipi misti relativamente "semplici", inclusi diversi numeri di cromosomi (2n = 51, 52), che si sono formati a causa di una coppia di autosomi eteromorfi in il padre (n = 26, 27). Le altre due scimmie ibride hanno mostrato alterazioni genomiche e cariotipiche de novo. L'analisi dettagliata delle alterazioni ha rivelato che un individuo portava un cariotipo misto delle due specie parentali e un cromosoma X e trisomia (53,XXX). Il secondo individuo mostrava trisomia del cromosoma 18 (52,XX,+18) e una traslocazione reciproca tra gli autosomi 21 e 23 (52,XX,+18,t(21;23)). È interessante notare che la seconda scimmia ha mostrato mosaicismo tra le cellule del sangue (mos52,XX,+18[87]/52,XX,+18,t(21;23)[85]), ma solo un singolo cariotipo (52,XX,+ 18) nelle cellule dei fibroblasti cutanei. Le trisomie X e 18 derivano da un raddoppio dei cromosomi della madre nella prima divisione cellulare embrionale e la traslocazione reciproca probabilmente si è sviluppata nel midollo osseo della prole, considerando che è stata osservata solo nelle cellule del sangue. Tale presenza di trisomie negli individui ibridi è una scoperta unica nei mammiferi placentati.
Segnali e attori nella regolazione trascrizionale delle risposte radicali mediante segnalazione di N locale e sistemica in Arabidopsis thaliana.In ambienti naturali, concentrazione di azoto (N) nel suolo è molto variabile ed è spesso limitante per la crescita e lo sviluppo delle piante. La capacità delle piante di rispondere ai cambiamenti nella disponibilità di N è quindi essenziale per l'adattamento. La risposta delle piante alle variazioni di N consiste in particolare nell'aggiustare i sistemi di assorbimento dell'N radicale e Per fare ciò, le piante integrano il rilevamento e la segnalazione locale della disponibilità di N esterno con il rilevamento e la segnalazione sistemici del loro stato di N interno, al fine di sintonizzare le proprietà funzionali e strutturali dell'apparato radicale in conformità con la domanda di N per la crescita del pianta intera La regolazione trascrizionale dell'espressione genica è uno dei processi più importanti utilizzati dalle piante per adattare le proprietà dell'apparato radicale in risposta a N pa locali e a lunga distanza modo. Questa recensione si concentra sui meccanismi che danno origine alle risposte trascrizionali nelle radici di Arabidopsis sotto fluttuazioni di N, con un'enfasi su quelli associati alla regolazione dell'assorbimento dei nitrati e dei sistemi di trasporto. Discutiamo i presunti segnali a lunga distanza che innescano le risposte di espressione genica, così come i giocatori molecolari che inducono localmente cambiamenti trascrizionali. Evidenziamo anche diverse osservazioni che rivelano l'importanza di adottare un approccio integrativo nella regolazione della segnalazione di N.
Efficacia clinica della terapia preventiva con sospensione precoce di posaconazolo nei riceventi di trapianto di polmone: l'esperienza di Alfred.Questo studio descrive i risultati clinici e terapeutici monitoraggio del farmaco (TDM) a seguito di terapia preventiva con sospensione di posaconazolo in riceventi di trapianto di polmone (LTx) Questo era uno studio di coorte retrospettivo a centro singolo che valutava la terapia preventiva con sospensione di posaconazolo in riceventi di LTx tra gennaio 2009 e dicembre 2015. Quarantadue Ai destinatari di LTx è stata prescritta la sospensione di posaconazolo preventivamente. Aspergillus fumigatus era l'organismo fungino più comunemente isolato. Dei pazienti che ricevevano la sospensione di posaconazolo come antimicotico iniziale post-LTx, il 93% ha avuto l'eradicazione della colonizzazione a 6 mesi dopo l'inizio della terapia. Al contrario, solo il 61% ha avuto l'eradicazione della colonizzazione fungina quando la sospensione di posaconazolo è stata somministrata dopo la terapia iniziale con voriconazolo. n sembrava essere ben tollerato, anche se un caso è stato ridotto a causa della preoccupazione per la funzionalità epatica anormale e un altro a causa di nausea/vomito. TDM è stato eseguito in 37 pazienti. La concentrazione plasmatica minima (Cmin) iniziale mediana (IQR) dopo 400 µmg di sospensione di posaconazolo due volte al giorno è stata di 0,78 (0,46-1,19) mg/L. Dosi superiori a 800 µg al giorno non sembrano determinare una C min mediana più elevata. L'inizio precoce della terapia preventiva con sospensione di posaconazolo nei riceventi LTx sembra essere ben tollerato e può potenzialmente offrire esiti clinici favorevoli.
L'ammonio come segnale per le risposte fisiologiche e morfologiche nelle piante.L'ammonio è una delle principali fonti di azoto inorganico per le piante. A bassi apporti esterni, l'ammonio favorisce crescita delle piante, mentre ad elevate forniture esterne provoca tossicità L'ammonio innesca rapidi cambiamenti nel pH citosolico, nell'espressione genica e nelle modificazioni post-traduzionali delle proteine, portando all'acidificazione apoplastica, assorbimento coordinato dell'ammonio, maggiore assimilazione dell'ammonio, alterazione ossidativa e lo stato fito-ormonale e l'architettura del sistema radicale rimodellata. Alcune di queste risposte dipendono dai trasportatori di ammonio di tipo AMT e non sono legate a un effetto nutritivo, indicando che l'ammonio è percepito come una molecola di segnalazione dalle cellule vegetali. Questa recensione riassume le attuali conoscenze di risposte fisiologiche e morfologiche innescate dall'ammonio e mette in evidenza i meccanismi esistenti e presunti che mediano la segnalazione e gli eventi di rilevamento dell'ammonio nelle piante. avanzare l'ipotesi che il rilevamento dell'ammonio avvenga in più fasi lungo i suoi percorsi di trasporto, stoccaggio e assimilazione.
Fondamenti molecolari dell'assorbimento e del trasporto dell'azoto negli alberi.L'azoto (N) è spesso un fattore limitante per la crescita e lo sviluppo degli alberi. Poiché la disponibilità di N è estremamente basso nei suoli forestali, gli alberi hanno evoluto meccanismi per acquisire e trasportare questo nutriente essenziale insieme alle interazioni biotiche per garantire la sua rigorosa economia. Qui esaminiamo i recenti progressi nelle basi molecolari della nutrizione degli alberi N. Le caratteristiche molecolari, la regolazione e il significato biologico delle proteine di membrana coinvolte nell'assorbimento e nel trasporto di N. Vengono inoltre delineati la regolazione dell'assorbimento e del trasporto di N nelle radici micorrizzate e gli studi a livello di trascrittoma sulla nutrizione dell'N. Infine, vengono suggerite diverse aree di ricerca futura.
La treonina 1505 conservata nel dominio catalitico stabilizza la metiltransferasi 1 del DNA murinoNei mammiferi, la DNA metiltransferasi 1 (DNMT1) è responsabile della propagazione della metilazione del DNA pattern nella generazione successiva attraverso la metilazione selettiva del CpG emi-metilato che emerge subito dopo la replicazione, un processo noto come metilazione di mantenimento. Il T1505, che è conservato tra i DNMT1 dei vertebrati, nel dominio catalitico del topo DNMT1 forma il legame idrogeno con il W1512, che è anche conservato tra i vertebrati e uno dei residui essenziali nel riconoscimento della 5-metilcitosina nei CpG emi-metilati. Tuttavia, l'importanza del legame idrogeno tra T1505 e W1512 è sconosciuta. In questo studio, abbiamo determinato la struttura cristallina di topo DNMT1(291-1620) che ha sostituito T1505 con alanina (DNMT1(291-1620)T1505A) ed ha esaminato la sua attività di metilazione del DNA in vitro. Anche se la mutazione ha perso il legame idrogeno tra T1505 e W15 12, la struttura complessiva di DNMT1(291-1620)T1505A è rimasta quasi identica a quella del tipo selvatico. La stabilità strutturale e l'attività di metilazione del DNA di DNMT1(291-1620)T1505A a temperatura fisiologica erano inferiori a quelle di DNMT1(291-1620). T1505 è cruciale per l'attività di metilazione del DNA di DNMT1 attraverso la stabilizzazione della sua struttura durante il ciclo in corso di metilazione del DNA.
Regolazione della stabilità dell'mRNA da parte delle proteine zinc-finger di tipo CCCH nelle cellule immunitarie.Gli studi attuali che utilizzano topi knockout hanno rivelato che alcuni Cys-Cys- Le proteine a dita di zinco di tipo Cys-His (CCCH), vale a dire tristetraprolina (TTP), Roquin e Regnase-1, svolgono un ruolo importante nel sistema immunitario e sono strettamente associate al destino dei loro RNA bersaglio nelle normali risposte immunitarie. Tuttavia, le funzioni di molte proteine leganti l'RNA non sono state caratterizzate con precisione. Per comprendere i meccanismi molecolari del metabolismo dell'RNA nel sistema immunitario, lo studio di TTP/Roquin/Regnase-1 potrebbe fornire nuove conoscenze. In questa recensione, discuteremo l'attuale comprensione di queste proteine nella regolazione immunitaria e nell'omeostasi e discutere il metabolismo dell'RNA nel sistema immunitario.
Ridefinire la leadership della salute pubblica nell'era degli obiettivi di sviluppo sostenibile.Adozione degli obiettivi di sviluppo sostenibile (OSS) da parte degli Stati membri delle Nazioni Unite (ONU ) ha fissato una nuova agenda per l'azione di sanità pubblica a livello nazionale e globale. Il mutato contesto richiede una riformulazione di ciò che costituisce una leadership efficace nella sanità pubblica, attraverso un costrutto che rifletta l'interdipendenza della leadership a più livelli nel sistema sanitario e nei suoi partner in altri settori. Ciò è particolarmente importante nel contesto dei Paesi a basso e medio reddito (LMIC) che stanno affrontando complesse transizioni demografiche ed epidemiologiche. Il sistema sanitario deve esercitare una leadership che mobiliti efficacemente tutte le sue risorse per massimizzare l'impatto sulla salute e canali apprendimento transdisciplinare in un'azione multisettoriale ben coordinata sui più ampi determinanti della salute La leadership è essenziale non solo a livello di ispirazione tutti gli individui che possono creare visione e impegno collettivo, ma anche a livello di istituzioni di supporto situate o allineate al sistema sanitario. A sua volta, il sistema sanitario nel suo insieme deve esercitare una leadership che promuova la salute pubblica nel quadro dello sviluppo sostenibile. Questo commento esamina gli attributi desiderabili di una leadership efficace a ciascuno di questi livelli ed esplora la natura della loro interdipendenza.
NBS1 è regolato da due tipi di meccanismi: formazione di complessi dipendenti da ATM con MRE11 e RAD50 e degradazione delle proteine dipendente dal ciclo cellulare.Nijmegen la sindrome da rottura (NBS), una condizione simile all'atassia-teleangiectasia (AT), è una malattia genetica ipersensibile alle radiazioni che mostra instabilità cromosomica, sintesi del DNA radioresistente, immunodeficienza e predisposizione ai tumori maligni. Il prodotto del gene responsabile, NBS1, forma un complesso con MRE11 e RAD50 (complesso MRN). Il complesso MRN è necessario per l'attivazione di ATM indotta dal danno al DNA. Tuttavia, la regolazione della formazione del complesso MRN non è ancora chiara. Qui, abbiamo studiato i meccanismi regolatori della formazione del complesso MRN Abbiamo utilizzato un test di immunoprecipitazione per determinare se i livelli del complesso MRN fossero aumentati dal danno al DNA indotto dalle radiazioni e abbiamo scoperto che i livelli di queste proteine e dei loro mRNA non aumentavano. tributato alla formazione del complesso MRN indotta dal danno al DNA. Tuttavia, il pretrattamento delle cellule con un inibitore specifico per ATM non ha influenzato la ricombinazione omologa (HR) e la riparazione dell'estremità non omologa (NHEJ). Le cellule in fase G0, diminuendo l'attività di NBS1 e HR ma non di NHEJ, hanno ottenuto un'associazione cromatina correlata a HR di RAD51 mediante sovraespressione di NBS1, suggerendo che la quantità di NBS1 può essere importante per reprimere l'attivazione accidentale di HR. Queste evidenze suggeriscono che NBS1 sia regolato da due tipi di meccanismi: formazione di complessi dipendente da ATM e degradazione proteica mediata da una via sconosciuta resistente a MG132. Tale regolazione di NBS1 può contribuire alle risposte cellulari alle rotture del doppio filamento.
La timectomia toracoscopica è un'alternativa praticabile e meno invasiva per il trattamento chirurgico dei timomi di grandi dimensioni.La chirurgia toracoscopica è ampiamente utilizzata per il trattamento chirurgico del timoma. Tuttavia, i timomi di grandi dimensioni sono tipicamente trattati con chirurgia a cielo aperto. Questo studio ha valutato la fattibilità dell'esecuzione di timectomia toracoscopica (TT) per timoma ≥50 mm. Una revisione retrospettiva è stata condotta su 135 pazienti sottoposti a TT o timectomia aperta (OT) per Masaoka timoma di stadio I-IVa tra il 1996 e il 2014. I pazienti sono stati prima divisi in due gruppi in base alle dimensioni del timoma: gruppi di timoma ≥50 mm e timoma <50 mm Non c'era alcuna differenza significativa nella sopravvivenza libera da malattia a 5 anni (DFS) tra i gruppi ( P = 0.5352). I pazienti nel gruppo timoma ≥50 mm sono stati ulteriormente suddivisi in gruppi TT e OT. La durata della degenza postoperatoria è stata significativamente più breve nel gruppo TT rispetto al gruppo OT (5 vs 14 giorni , P < 0,0001), con un numero significativamente inferiore di complicanze postoperatorie (6 pazienti vs 14 pazienti, P = 0,0008). Non c'era alcuna differenza significativa nella DFS a 5 anni tra i pazienti con timoma ≥50 mm nei gruppi TT e OT ( P = 0,3501). Infine, i pazienti sottoposti a TT sono stati ulteriormente suddivisi in gruppi timoma ≥50 mm e timoma <50 mm e non è stata trovata alcuna differenza significativa nella DFS a 5 anni tra questi gruppi ( P = 0.6661). Gli stadi di Masaoka III-IV, ma non le dimensioni del timoma, erano un fattore prognostico indipendente per la DFS. Questi risultati dimostrano la ridotta invasività e fattibilità del TT per i timomi di grandi dimensioni.
Impatto della sarcopenia sugli esiti della sostituzione elettiva dell'arcata totale nell'anziano†.Lo scopo di questo studio era identificare il valore di cut-off della sarcopenia basata sull'indice dell'area del muscolo psoas e valutare gli esiti precoci e tardivi dopo sostituzione elettiva totale dell'arco negli anziani. La sarcopenia è stata valutata dall'indice dell'area del muscolo psoas [definito come l'area del muscolo psoas a livello L3 sulla tomografia computerizzata (cm 2 )/area di superficie corporea (m 2 )]. Il valore di cut-off per la sarcopenia è stato definito come > 2 deviazioni standard al di sotto del valore medio dell'indice dell'area del muscolo psoas ottenuto da 464 pazienti di controllo normali. Tra ottobre 1999 e luglio 2015, 266 pazienti che erano ≥ 65 anni ed erano stati sottoposti a misurazione dell'indice dell'area del muscolo psoas sono stati sottoposti a sostituzione elettiva dell'arco totale Questi pazienti sono stati classificati nei gruppi sarcopenia (Gruppo S, n = 81) e non sarcopenia (Gruppo N, n = 185). L'età media era di 76,2 ± 5,6 anni nel gruppo S e 75,7 ± 5,7 anni nel gruppo N ( P = 0,553). La mortalità ospedaliera è stata del 3,7% (3/81) nel Gruppo S e del 2,2% (4/185) nel Gruppo N ( P = 0.483). Il follow-up medio è stato di 48,3 ± 38,7 mesi. La sopravvivenza a cinque anni era significativamente peggiore nel gruppo S (S: 63,2 ± 6,6% vs N: 88,7 ± 2,6%, P < 0,001). Un'analisi del rischio proporzionale di Cox multivariabile ha mostrato che la sarcopenia prevedeva significativamente una scarsa sopravvivenza (rapporto di rischio 2,59; intervallo di confidenza al 95% 1,27-5,29; P = 0,011). La sarcopenia non ha predetto la morte ospedaliera dopo la sostituzione totale dell'arcata, ma è stata negativamente associata alla sopravvivenza globale. La sarcopenia può essere un ulteriore fattore di rischio per stimare gli esiti della chirurgia dell'aorta toracica.
Identificazione di pazienti vascolari ad altissimo rischio di eventi cardiovascolari ricorrenti: validazione degli attuali criteri ACC/AHA ad altissimo rischio.Convalidare e valutare prestazioni degli attuali criteri di rischio molto elevato ACC/AHA in pazienti con malattia arteriosa clinicamente manifesta. I dati sono stati utilizzati dallo studio SMART (n = 7216) e dal registro REACH (n = 48 322), due potenziali coorti di pazienti con manifesta arteriopatia aterosclerotica. La prevalenza e i tassi di incidenza degli eventi avversi cardiovascolari maggiori ricorrenti (MACE) sono stati calcolati, secondo i criteri ACC/AHA VHR (malattia cardiovascolare combinata con diabete, fumo, dislipidemia e/o eventi coronarici ricorrenti recenti). i criteri ACC/AHA sono stati confrontati con singoli fattori di rischio molto elevati in termini di statistiche C e indice di riclassificazione Net. Tutti i pazienti erano a VHR secondo le linee guida ESC (l'incidenza di MACE ricorrenti in SMART era 2. 4/100PY, con 95% CI 2,3-2,5/100PY e in REACH 5,1/100PY con 95% CI 5,0-5,3/100PY). Nello SMART il 57% dei pazienti era in VHR secondo i criteri ACC/AHA (incidenza di MACE ricorrente 2,7/100PY, 95% CI 2,5-2,9/100PY) e in REACH questo era del 64% (5,9/100PY, 95% CI 5.7-6.1/100PY). La statistica C per i criteri ACC/AHA VHR era 0,53 in REACH e 0,54 in SMART. Fattori di rischio molto elevati con prestazioni comparabili o leggermente migliori erano eGFR < 45, malattia polivascolare ed età >70 anni. Circa due terzi dei pazienti che soddisfacevano i criteri ACC/AHA VHR avevano un rischio previsto a 10 anni di recidiva di MACE <30%. I criteri ACC/AHA VHR hanno un potere discriminante limitato. L'identificazione di pazienti con malattia arteriosa clinicamente manifesta alla VHR per eventi vascolari ricorrenti utilizzando eGFR <45, malattia polivascolare o età >70 anni si comporta così come i criteri VHR ACC/AHA.
PCA22 agisce come soppressore di atrzf1 per mediare l'accumulo di prolina in risposta allo stress abiotico in Arabidopsis.Il metabolismo della prolina è importante per le risposte ambientali, la crescita delle piante , e lo sviluppo. Tuttavia, i suoi ruoli precisi nella tolleranza allo stress abiotico delle piante non sono ben compresi. I mutanti sono preziosi per l'identificazione di nuovi geni e per chiarire i loro ruoli nei meccanismi fisiologici. Abbiamo applicato un approccio di mutazione soppressore per identificare nuovi geni coinvolti nella regolazione del metabolismo della prolina in Arabidopsis Utilizzando il mutante atrzf1 (Arabidopsis thaliana ring zinc finger 1) come linea parentale per l'attivazione del tagging mutagenesi, abbiamo selezionato diversi mutanti con induzione soppressa dell'accumulo di prolina in condizioni di disidratazione. Uno dei mutanti selezionati [contenuto di prolina alterative 22 (pca22)] sembrava avere un contenuto di prolina ridotto rispetto al mutante atrzf1 sotto stress da siccità. le piante mostravano una soppressa insensibilità atrzf1 alla disidratazione e all'acido abscissico durante la crescita precoce delle piantine. Inoltre, il mutante pca22 ha mostrato una lunghezza del tubo pollinico più corta rispetto alle piante wild-type (WT) e atrzf1. Inoltre, le piante che sovraesprimono PCA22 erano più sensibili allo stress da disidratazione rispetto alle linee WT e RNAi. PCA22 marcato con proteina fluorescente verde è stato localizzato nel citoplasma delle cellule transgeniche di Arabidopsis. Nel loro insieme, questi risultati suggeriscono che pca22 agisce come mutante soppressore dominante di atrzf1 nella risposta allo stress abiotico.
Sviluppo di microsatelliti per le analisi genetiche di popolazione del coleottero Ambrosia granulato (Coleoptera: Curculionidae).Si prevede una dispersione maschile limitata e un accoppiamento locale nei coleotteri ambrosia per provocare consanguineità estreme e popolazioni altamente strutturate. In questo studio, abbiamo sviluppato marcatori microsatelliti per il coleottero ambrosia granulato, Xylosandrus crassiusculus (Motschulsky), da utilizzare in studi futuri sulla struttura della popolazione e della famiglia di questa specie infestante invasiva. Abbiamo impiegato de novo sequenziamento di nuova generazione per generare sequenze shotgun dell'intero genoma per la caratterizzazione di loci microsatelliti Circa il 6% degli 84.024 contigs generati dal sequenziamento Hi-Seq Illumina 2x250bp conteneva microsatelliti con almeno quattro ripetizioni di di-, tri-, tetra-, penta -, e esameri. I primer sono stati sintetizzati per 40 loci microsatelliti con unità di ripetizione trimero. Ventiquattro coppie di primer hanno prodotto prodotti PCR coerenti di loci unici i e sono stati convalidati per l'applicazione genetica di popolazione utilizzando tre gruppi di campioni contenenti ciascuno 20 individui di X. crassiusculus dal Mississippi. Tredici loci sono risultati polimorfici con un massimo di cinque alleli per popolazione. I due gruppi campione di coleotteri della contea di Pearl River (Poplarville e McNeill) appartenevano geneticamente alla stessa popolazione. La popolazione della contea di Lamar (Purvis) era geneticamente distinta, separata da una distanza genetica moderata (FST = 0.11) e cinque alleli unici (con >5% di frequenza). Coerentemente con la struttura di accoppiamento percepita (incesto di femmine con maschi incapaci di volare), le popolazioni hanno mostrato un eccesso di omozigoti nella maggior parte dei loci, come indicato dai coefficienti di consanguineità (FIT = 0.45 e FIS = 0.37) e alta parentela media tra gli individui (r = 0.15).
Un ruolo non catalitico di RecBCD nella riparazione dei gap diretti per omologia e nella sintesi della translesione.Il complesso RecBCD è un fattore chiave nel metabolismo del DNA. Questa proteina complesso ospita una nucleasi processiva e due attività elicasi che gli conferiscono la capacità di elaborare le estremità del DNA duplex. Queste attività enzimatiche rendono RecBCD un attore importante nella riparazione della rottura del doppio filamento, nella ricombinazione coniugale e nella degradazione del DNA lineare. In questo lavoro, sveliamo un nuovo ruolo del complesso RecBCD nell'elaborazione di lacune a singolo filamento di DNA che vengono generate a lesioni che bloccano la replicazione del DNA. Mostriamo che indipendentemente dalle sue attività di nucleasi o elicasi, l'intero complesso RecBCD è necessario per la riparazione ricombinante della lacuna e l'efficiente traslezione Sintesi Poiché nessuna delle funzioni catalitiche di RecBCD è richiesta per quei processi, supponiamo che il complesso agisca come un elemento strutturale che stabilizza la forcella replicativa bloccata, consentendo ent tolleranza al danno del DNA.
Uso dei dati di ricerca su Internet per monitorare l'impatto del vaccino contro i rotavirus negli Stati Uniti, nel Regno Unito e in Messico.Studi precedenti hanno trovato una forte correlazione tra ricerca su Internet e dati di sorveglianza della salute pubblica. Si sa meno su come i dati di ricerca rispondono agli interventi di salute pubblica, come la vaccinazione, e la coerenza delle risposte in diversi paesi. In questo studio, abbiamo mirato a studiare la correlazione tra le ricerche su Internet di " rotavirus" e l'attività della malattia da rotavirus negli Stati Uniti, nel Regno Unito e in Messico prima e dopo l'introduzione del vaccino contro il rotavirus. Abbiamo confrontato serie temporali di ricerche su Internet per "rotavirus" da Google Trends con i rapporti di laboratorio sui rotavirus dagli Stati Uniti e Regno Unito e con ricoveri per gastroenterite acuta negli Stati Uniti e in Messico. Utilizzando parametri di tempo e posizione, Google quantifica una quota di query su Internet (IQS) per misurare la relativa ricerca h volume per termini specifici. Abbiamo analizzato la correlazione tra IQS e dati di laboratorio e ospedalizzazione prima e dopo l'introduzione dei vaccini nazionali. C'era una forte correlazione positiva tra l'IQS del rotavirus e i rapporti di laboratorio negli Stati Uniti (R2 = 0,79) e nel Regno Unito (R2 = 0,60) e tra l'IQS del rotavirus e i ricoveri per gastroenterite acuta negli Stati Uniti (R2 = 0,87 ) e Messico (R2 = 0,69) (P < .0001 per tutte le correlazioni). Le correlazioni erano più forti nel periodo prevaccino rispetto al periodo postvaccino. Dopo l'introduzione del vaccino, l'IQS medio del rotavirus è diminuito del 40% (intervallo di confidenza 95% [CI], 25%-55%) negli Stati Uniti e del 70% (95% CI, 55%-86%) in Messico. Nel Regno Unito si è verificata una perdita di variazione stagionale dopo l'introduzione del vaccino. Le tendenze dei dati di ricerca su Internet del rotavirus rispecchiavano le tendenze dei laboratori nazionali di rotavirus negli Stati Uniti e nel Regno Unito e i dati sui ricoveri per gastroenterite negli Stati Uniti e in Messico; correlazioni inferiori sono state trovate dopo l'introduzione del vaccino contro il rotavirus.
Difetti di PNPLA1 in pazienti con ittiosi congenita autosomica recessiva e topi KO sostengono la funzione insostituibile di PNPLA1 nella sintesi epidermica di omega-O-acilceramide e nella barriera di permeabilità cutanea.L'ittiosi congenita autosomica recessiva (ARCI) è un gruppo eterogeneo di genodermatosi monogeniche che comprende disordini non sindromici della cheratinizzazione. La fisiopatologia dell'ARCI è stata collegata a un disturbo nel metabolismo dei lipidi epidermici che ha compromesso la funzione dello strato corneo, portando a difetti della barriera di permeabilità. La caratterizzazione funzionale di alcuni geni coinvolti nell'ARCI ha contribuito all'identificazione di attori molecolari coinvolti nella sintesi, trasporto o elaborazione dei lipidi epidermici. Recentemente, PNPLA1 è stato identificato come un gene che causa ARCI. Mentre altri membri della famiglia PNPLA sono elementi chiave nel metabolismo lipidico, la funzione di PNPLA1 è rimasta poco chiara Abbiamo identificato 5 nuove mutazioni di PNPLA1 nei pazienti ARCI, principalmente locali ized nel putativo dominio enzimatico attivo di PNPLA1. Per indagare il ruolo biologico di Pnpla1, abbiamo analizzato topi carenti di Pnpla1. I topi KO sono morti subito dopo la nascita per gravi difetti di permeabilità epidermica. La pelle carente di Pnpla1 presentava un'importante compromissione nella composizione e nell'organizzazione dei lipidi epidermici. La quantificazione delle specie di ceramidi epidermiche ha evidenziato un blocco nella produzione di ω-O-acilceramidi con un concomitante accumulo dei loro precursori nel KO. La perdita virtuale di ω-O-acilceramidi nello strato corneo era collegata a una copertura lipidica difettosa del guscio pericellulare resistente che incapsula i corneociti, il cosiddetto involucro cornificato, e molto probabilmente ha disorganizzato la matrice lipidica extracellulare. Infine, questi difetti nella sintesi di ω-O-acilceramidi e nella formazione dell'involucro cornificato sono stati evidenziati anche nello strato corneo di pazienti con mutazione di PNPLA1. Nel complesso, i nostri dati supportano che PNPLA1/Pnpla1 è un attore chiave nella formazione di ω-O-acilceramide, un processo cruciale per la funzione di barriera della permeabilità epidermica.
Tendenze nazionali e variabilità nell'utilizzo del sangue nella cardiochirurgia pediatrica.La trasfusione di globuli rossi è una pratica comune nella cardiochirurgia pediatrica. Trasfusione di sangue rosso cellule hanno dimostrato di essere associate ad un aumento della morbilità nei pazienti pediatrici sottoposti a chirurgia cardiaca. Esiste un'enorme variabilità nella pratica dell'utilizzo del sangue all'interno e tra le diverse pratiche. Lo scopo di questo studio era dimostrare l'attuale variabilità e le tendenze nell'ultimo decennio nell'utilizzo del sangue tra gli ospedali pediatrici che eseguono interventi di cardiochirurgia pediatrica. Abbiamo eseguito uno studio di coorte osservazionale retrospettivo utilizzando il database del Pediatric Health Information System di 43 ospedali pediatrici partecipanti negli Stati Uniti. Tutte le informazioni sulla fatturazione delle dimissioni per i pazienti di età inferiore a 19 anni di età che hanno subito un intervento di cardiochirurgia con bypass cardiopolmonare tra il 2005 e il 2015. Dieci diagnosi indice e le procedure sono state studiate e analizzate, sulla base delle differenze di età e dei punteggi di mortalità della Society of Thoracic Surgeon \& European Association for Cardio-Thoracic Surgery. La nostra principale variabile di esito era l'unità o le unità di globuli rossi omologhi caricati per le prime 24 ore di ricovero per chirurgia cardiaca. C'è stata una variabilità significativa nell'utilizzo dei globuli rossi per una data diagnosi e codice procedurale in tutti i centri nonostante le diverse fasce di età e punteggi di complessità per l'attuale e l'ultimo decennio di pazienti cardiochirurgici pediatrici. Abbiamo riscontrato una variabilità distinguibile nell'attuale pratica dell'utilizzo del sangue per una data procedura nonostante la variabilità nell'età e nella complessità dei pazienti, senza cambiamenti nei modelli di pratica per l'ultimo decennio di cardiochirurgia pediatrica.
Commercializzazione dei sostituti del latte materno in Zambia: valutazione della conformità al codice normativo internazionale.Abbiamo cercato di valutare il livello di non conformità con l'International Code of Marketing sui sostituti del latte materno (BMS) e/o Statutory Instrument (SI) Number 48 del 2006 delle leggi dello Zambia in due periferie, Kalingalinga e Chelstone, in Zambia. Questa è stata un'indagine trasversale. 80), operatori sanitari (8) e madri (214). Sono state osservate etichette e pubblicità BMS (62). L'esito primario era la non conformità media definita come il numero di violazioni dell'articolo diviso per il totale delle violazioni \'ottenibili\'. Il punteggio varia da 0 a 1 con 0 che rappresenta nessuna violazione in tutti gli articoli e uno che rappresenta violazioni in tutti gli articoli. Sono stati valutati un totale di 62 BMS. Il punteggio medio di non conformità da parte dei produttori in termini di violazioni nell'etichettatura del BMS era 0,33 (SD = 0,28; IC 95%: 0,26, 0.40). Queste violazioni erano dovute principalmente a etichette contenenti immagini o grafici che rappresentavano un bambino. Sono stati inoltre valutati 80 negozi con un punteggio medio di non conformità in relazione a violazioni nelle vendite abbinate, esposizione speciale e contatto con le madri presso il negozio stimato pari a 0,14 (SD = 0,14; 95% CI: 0,11, 0,18). Il mancato rispetto del Codice e/o del SI locale è elevato dopo 10 anni di addomesticamento del Codice.
Diversità dei meccanismi di concentrazione di CO2 e risposte alla concentrazione di CO2 nelle diatomee marine e d'acqua dolce.Si ritiene che la presenza di meccanismi di concentrazione di CO2 (CCM) essere una delle caratteristiche che permette alle diatomee di prosperare in molti ambienti e di essere i principali contributori alla produttività globale. Qui, il tipo di CCM e le risposte alla concentrazione variabile di CO2 sono state studiate nelle diatomee marine e d'acqua dolce. A 400 ppm, c'era una grande diversità nei meccanismi fisiologici e biochimici tra le specie, mentre Phaeodactylum tricornutum utilizzava principalmente HCO3-, Thalassiosira pseudonana utilizzava principalmente CO2. Per tutte le specie, a 20.000 ppm, l'affinità per il carbonio inorganico disciolto era inferiore rispetto a 400 ppm di CO2 e la dipendenza dalla CO2 era maggiore Nonostante la differenza nella disponibilità di carbonio inorganico in ma acque dolci e salate, c'erano solo piccole differenze nei CCM tra le specie dei due ambienti, e Navicula pelliculosa si è comportata in modo simile quando è cresciuta nei due ambienti. I risultati suggeriscono che le differenze specie-specifiche sono grandi e più importanti delle differenze ambientali nel determinare la natura e l'efficacia del CCM nelle diatomee.
Attività di cefiderocol (S-649266) contro batteri Gram-negativi resistenti ai carbapenemi raccolti da pazienti ricoverati negli ospedali greci.Cefiderocol (S-649266) , una cefalosporina siderofora, utilizza un nuovo meccanismo di ingresso nello spazio periplasmatico dei batteri Gram-negativi ed è ampiamente stabile alle ESBL e alle carbapenemasi. Una collezione di batteri Gram-negativi resistenti ai carbapenemi isolati da campioni clinici in 18 ospedali greci è stata testata per suscettibilità a cefiderocol, meropenem, ceftazidime, cefepime, ceftazidime/avibactam, ceftolozane/tazobactam, aztreonam, amikacina, ciprofloxacina, colistina e tigeciclina Piastre di brodo di microdiluizione sono state utilizzate per determinare le MIC. baumannii e 82 Pseudomonas aeruginosa) e 282 Enterobacteriaceae (tra cui 244 Klebsiella pneumoniae, 14 Enterobacter cloacae e 11 Providencia stuartii). P. aeruginosa la MIC 90 di cefiderocol era 0,5 μmg/L. Per K. pneumoniae, E. cloacae e P. stuartii la MIC 90 di cefiderocol era rispettivamente di 1, 1 e 0,5 µmg/L. La tigeciclina è stato il secondo antibiotico più attivo, seguito dalla colistina. Cefiderocol ha mostrato una maggiore attività antimicrobica in vitro contro i batteri Gram-negativi resistenti ai carbapenemi rispetto agli antibiotici di confronto.
Generazione e caratterizzazione di una collezione di linee di knock-down per il complesso proteasi Clp del cloroplasto nel tabacco.La degradazione proteica nei cloroplasti è effettuata da un set di proteasi che eliminano le proteine piegate male, danneggiate o superflue. La proteasi caseinolitica ATP-dipendente (Clp) è la proteasi più complessa nei plastidi ed è stata implicata principalmente nella degradazione delle proteine stromali. Al contrario, FtsH, una metalloproteasi associata alla membrana tilacoide , si ritiene che partecipi principalmente alla degradazione delle proteine tilacoidali. Per determinare il ruolo di specifiche subunità Clp e FtsH nella crescita e nello sviluppo delle piante, nel tabacco sono state generate linee di RNAi mirate ad almeno una subunità di ciascun anello Clp e FtsH. Inoltre, mutazione del codone di inizio della traduzione è stata impiegata per down-regolare l'espressione della subunità ClpP1 codificata da plastidi. Queste linee di proteasi coprono un'ampia gamma di riduzioni al livello della trascrizione e della proteina els dei geni mirati. È stato ottenuto un ampio spettro di fenotipi, tra cui carenza di pigmento, alterazioni dello sviluppo fogliare, variegature fogliari e fotosintesi alterata. Quando sono state confrontate le linee di knock-down per le diverse subunità della proteasi, sono stati osservati fenotipi sia comuni che specifici, suggerendo funzioni distinte di almeno alcune subunità. Il nostro lavoro fornisce una raccolta ben caratterizzata di linee di abbattimento per le proteasi plastidi nel tabacco e rivela l'importanza della proteasi Clp nella fisiologia e nello sviluppo delle piante.
Valutazione prospettica del test OKN K-SeT, un nuovo test immunocromatografico multiplex per il rilevamento rapido di carbapenemasi OXA-48-like, KPC e NDM.C'è un urgente bisogno di test diagnostici accurati e veloci in grado di identificare i produttori di carbapenemasi. Qui, abbiamo valutato le prestazioni di un nuovo saggio a flusso laterale multiplex (OKN K-SeT) per la rilevazione rapida di OXA-48-like, KPC e Enterobacteriaceae produttrici di carbapenemasi NDM da colonie di coltura. Duecento isolati di raccolta con contenuto caratterizzato di -lattamasi e 183 isolati consecutivi non duplicati riferiti a due centri di riferimento nazionali per un periodo di 2 mesi nel 2016 sono stati utilizzati per valutare il test OKN K-SeT Il test ha rilevato correttamente tutti i 42 isolati simili a OXA-48, 27 KPC e 30 produttori di NDM dal pannello di raccolta, inclusi 7 isolati che hanno co-prodotto NDM e carbapenemasi OXA-181. Nessuna reattività crociata è stata osservata con non carbapenemasi mirate ( n = 41) o con produttori non carbapenemasi ( n = 60). Prospetticamente, tutti gli isolati di Enterobacteriaceae produttori di carbapenemasi sono stati correttamente rilevati, mentre 11 produttori di carbapenemasi non presi di mira dal test non sono stati rilevati correttamente. [VIM ( n = 8) e OXA-23/OXA-58-like ( n = 3)]. Nel complesso, la sensibilità e la specificità del test sono state del 100%. Il test OKN è efficiente, rapido e facile da implementare nel flusso di lavoro di un laboratorio di microbiologia clinica per la conferma delle carbapenemasi OXA-48, NDM e KPC. Questo test rappresenta un potente strumento diagnostico in quanto consente il rilevamento rapido delle carbapenemasi clinicamente più importanti senza la necessità di test molecolari più costosi e meno frequentemente disponibili.
Modelli di risposta allo stress e tolleranza basati sul profilo del trascrittoma del tessuto della corona di riso in caso di carenza di zinco.La carenza di zinco (Zn) è il disturbo da micronutrienti più diffuso nel riso e porta a uno sviluppo ritardato e a una diminuzione della resa. Diversi studi hanno studiato come le piante di riso rispondono alla carenza di Zn e hanno esaminato le differenze tra i genotipi Zn-efficienti (ZE) e Zn-inefficienti (ZI). I genotipi ZE riallocano più Zn alle radici e sono migliori nel mantenere lo sviluppo della radice della corona rispetto ai genotipi ZI in risposta alla carenza di Zn. Tuttavia, si sa poco sui meccanismi molecolari che controllano queste differenze. Inoltre, il ruolo della corona, la parte dello stelo da cui emergono le radici della corona, è ancora da esaminare. In questo studio mettiamo in evidenza i meccanismi molecolari innescati dalla carenza precoce di Zn nel tessuto della corona attraverso il sequenziamento dell'RNA di due gruppi contrastanti di diversi genotipi ZE e ZI. Questo metodo ci ha permesso di ( i) identificare diversi nuovi e noti trasportatori di Zn coinvolti nella ritraslocazione di Zn dalla corona al germoglio e alle radici in risposta alla carenza di Zn; (ii) determinare che la carenza di Zn innesca la conversione degli zuccheri solubili in amido; e (iii) rilevare diversi geni candidati che potrebbero conferire efficienza allo Zn, tra cui un trasportatore di monosaccaridi, una proteina contenente il dominio del dito Zn, una proteina della famiglia stimolata dalla gibberellina e una proteina della famiglia dei polipeptidi della membrana plasmatica.
L'espressione muscolo-specifica della proteina legante l'RNA Staufen1 induce l'atrofia progressiva del muscolo scheletrico attraverso la regolazione dell'omologo della fosfatasi tensina.Linee di evidenza convergenti hanno ora ha evidenziato il ruolo chiave della regolazione post-trascrizionale nel sistema neuromuscolare. In particolare, è noto che diverse proteine leganti l'RNA sono mal regolate nei disturbi neuromuscolari tra cui la distrofia miotonica di tipo 1, l'atrofia muscolare spinale e la sclerosi laterale amiotrofica. In questo studio, ci siamo concentrati sulla proteina legante l'RNA Staufen1, che assume molteplici funzioni sia nel muscolo scheletrico che nei neuroni Dato il nostro lavoro precedente che ha mostrato un marcato aumento dell'espressione di Staufen1 in varie condizioni fisiologiche e patologiche tra cui il muscolo denervato, nel muscolo scheletrico embrionale e indifferenziato, nei rabdomiosarcomi così come nei campioni muscolari di tipo 1 della distrofia miotonica da entrambi i modelli murini e umani, abbiamo studiato l'impatto di f espressione sostenuta di Staufen1 nel muscolo scheletrico postnatale. A tal fine, abbiamo generato un modello murino transgenico specifico del muscolo scheletrico utilizzando il promotore della creatina chinasi muscolare per guidare l'espressione tessuto-specifica di Staufen1. Segnaliamo che l'espressione sostenuta di Staufen1 nel muscolo scheletrico postnatale provoca una miopatia caratterizzata da significativi deficit morfologici e funzionali. Questi deficit sono accompagnati da un marcato aumento dell'espressione di diversi geni associati all'atrofia e dalla regolazione negativa del segnale PI3K/AKT. Abbiamo anche scoperto che Staufen1 media l'espressione di PTEN attraverso eventi trascrizionali indiretti e post-trascrizionali diretti, fornendo così la prima prova dell'espressione di PTEN regolata da Staufen1. Nel complesso, i nostri dati dimostrano che Staufen1 è un nuovo gene associato all'atrofia ed evidenziano il suo potenziale come biomarcatore e bersaglio terapeutico per i disturbi e le condizioni neuromuscolari.
REEP6 media il traffico di un sottoinsieme di vescicole rivestite di clatrina ed è fondamentale per la funzione e la sopravvivenza dei fotorecettori dei bastoncelli.Nei fotorecettori retinici, trasporto vettoriale di merci è fondamentale per la trasduzione dei segnali visivi e i difetti nel traffico intracellulare possono portare alla degenerazione dei fotorecettori e al deterioramento della vista. Le firme molecolari associate all'instradamento delle vescicole di trasporto nei fotorecettori sono poco conosciute. In precedenza abbiamo riportato l'identificazione di una nuova isoforma specifica del recettore dei fotorecettori a bastoncino Expression Enhancing Protein (REEP) 6, che appartiene a una famiglia di proteine coinvolte nel trasporto intracellulare dei recettori alla membrana plasmatica. Qui mostriamo che la perdita di REEP6 nei topi (Reep6-/-) provoca una degenerazione retinica progressiva. è osservato nei topi Reep6-/- già a partire da un mese di età ed è associato ad un accumulo aberrante di strutture simili a vacuoli a livello apicale segmento interno e riduzione in selezionate proteine di fototrasduzione dei bastoncelli. Dimostriamo che REEP6 viene rilevato in un sottoinsieme di vescicole rivestite di clatrina e interagisce con il t-SNARE, Syntaxin3. In accordo con il fenotipo di degenerazione dei bastoncelli nei topi Reep6-/-, il sequenziamento dell'intero esoma ha identificato la mutazione omozigote di REEP6-E75K in due famiglie di retinite pigmentosa di diverse etnie. I nostri studi suggeriscono una funzione critica di REEP6 nel traffico di merci attraverso un sottoinsieme di vescicole rivestite di clatrina verso siti di membrana selezionati nei fotorecettori dei bastoncelli retinici.
drVM: un nuovo strumento per l'assemblaggio efficiente del genoma di virus eucarioti conosciuti dai metagenomi.La scoperta di virus utilizzando il sequenziamento di nuova generazione ad alto rendimento è diventata più Tuttavia, sebbene l'analisi dei dati di sequenziamento di prossima generazione ci permetta di identificare potenziali agenti patogeni, l'intera procedura analitica richiede competenza nel dominio della bioinformatica, che include l'implementazione di pacchetti software adeguati e la preparazione di database prerequisiti. urgentemente necessario per ottenere sequenze complete del genoma virale dai dati metagenomici. Questo manoscritto presenta una pipeline, drVM (rileva e ricostruisci genomi virali noti dai metagenomi), per una rapida identificazione della lettura virale, partizione di lettura a livello di genere, normalizzazione della lettura, assemblaggio de novo, sequenza annotazione e profilazione della copertura Le prime due procedure e l'annotazione della sequenza si basano su genomi virali noti come database di riferimento e. drVM è stato convalidato tramite l'analisi di oltre 300 corse di sequenziamento generate dalle piattaforme Illumina e Ion Torrent per fornire assemblaggi completi del genoma virale per una varietà di tipi di virus, inclusi virus a DNA, virus a RNA e retrovirus. drVM è disponibile per il download gratuito all'indirizzo: https://sourceforge. net/projects/sb2nhri/files/drVM/ ed è anche assemblato come contenitore Docker, immagine macchina Amazon e macchina virtuale per facilitare la distribuzione senza interruzioni. drVM è stato confrontato con altri strumenti di rilevamento virale per dimostrare i suoi meriti in termini di completezza del genoma virale e tempi di calcolo ridotti. Ciò conferma il potenziale della piattaforma di produrre sequenze di genoma virale tempestive e accurate da campioni clinici.
Aggiornamento del genoma del miglio coda di volpe e mappatura genica di nove tratti agronomici chiave mediante risequenziamento di una popolazione RIL.Il miglio coda di volpe (Setaria italica) fornisce cibo e foraggio in regioni semi-aride e terreni sterili. Il risequencing di 184 linee inbred ricombinanti di miglio di coda di volpe (RIL) è stato effettuato per aiutare la ricerca essenziale sul miglioramento del miglio di coda di volpe. Sono stati determinati un totale di 483 414 polimorfismi a singolo nucleotide. Sono state costruite mappe di bin sulla base dei RIL \' dati di ricombinazione. Sulla base della mappa dei contenitori ad alta densità, abbiamo aggiornato il riferimento Zhanggu con 416 Mb dopo aver aggiunto impalcature non ancorate da 16 Mb e riferimento Yugu con alcune correzioni degli errori di assemblaggio e 3158 lacune riempite. Mappatura quantitativa dei loci dei tratti (QTL) di nove agronomici tratti è stato fatto sulla base di questa popolazione RIL, cinque dei quali erano controllati da un singolo gene. Nel frattempo, sono stati trovati due QTL per l'altezza della pianta e un gene candidato ha mostrato l'89% di identità con il noto gibberellin-syn di riso. tesi gene sd1. Sono stati trovati tre QTL per il tratto della data di intestazione. Il risequenziamento dell'intero genoma e la mappatura del QTL hanno fornito strumenti importanti per la ricerca e l'allevamento del miglio coda di volpe. Il risequenziamento dei RIL potrebbe anche fornire un modo efficace per l'assemblaggio del genoma di alta qualità e l'identificazione dei geni.
Dalle letture alle unità tassonomiche operative: una pipeline di elaborazione di insieme per i dati di sequenziamento degli ampliconi MiSeq.Lo sviluppo di tecnologie di sequenziamento ad alto rendimento ha fornito agli ecologi microbici con un approccio efficiente per valutare la diversità batterica a una profondità invisibile, in particolare con i recenti progressi nella piattaforma di sequenziamento Illumina MiSeq. Tuttavia, l'analisi di tali dati ad alto rendimento sta ponendo importanti sfide computazionali, che richiedono soluzioni bioinformatiche specializzate in diverse fasi durante la pipeline di elaborazione , come l'assemblaggio di letture paired-end, la rimozione di chimere, la correzione degli errori di sequenziamento e il raggruppamento di tali sequenze in unità tassonomiche operative (OTU). Algoritmi individuali alle prese con ciascuna di queste sfide sono stati combinati in varie pipeline bioinformatiche, come mothur , QIIME, LotuS e USEARCH. Utilizzando una serie di finte comunità batteriche ben descritte, pipeli all'avanguardia ni per Illumina MiSeq I dati di sequenziamento degli ampliconi sono confrontati a livello di quantità di sequenze conservate, costo computazionale, tasso di errore e qualità delle OTU. Inoltre, viene introdotta una nuova pipeline chiamata OCToPUS, che sta creando una combinazione ottimale di diversi algoritmi. Si osserva un'enorme variabilità tra le diverse pipeline rispetto ai parametri di prestazione monitorati, dove in generale la quantità di letture mantenute risulta essere inversamente proporzionale alla qualità delle letture. Al contrario, OCToPUS ottiene il tasso di errore più basso, il numero minimo di OTU spurie e la corrispondenza più vicina alla comunità esistente, pur mantenendo la quantità maggiore di letture rispetto ad altre pipeline. La pipeline di nuova introduzione traduce i dati di sequenziamento degli ampliconi Illumina MiSeq in OTU affidabili e di alta qualità, con prestazioni e precisione migliorate rispetto alle pipeline attualmente esistenti.
de novo assembly e indagine genomica di popolazione di isolati di lievito naturale con il sequenziatore Oxford Nanopore MinION.Oxford Nanopore Technologies Ltd (Oxford, UK) ha recentemente commercializzato MinION, un piccolo sequenziatore di nanopori a singola molecola, che offre la possibilità di sequenziare lunghi frammenti di DNA da piccoli genomi in pochi secondi. La tecnologia Oxford Nanopore è davvero dirompente; ha il potenziale per rivoluzionare le applicazioni genomiche grazie alla sua portabilità, basso costo e facilità d'uso rispetto alle tecnologie di sequenziamento delle letture lunghe esistenti. Il sequenziatore MinION consente il sequenziamento rapido di piccoli genomi eucariotici, come il genoma del lievito. In combinazione con gli algoritmi di assemblaggio esistenti, è possibile generare assemblaggi genomici quasi completi e una popolazione completa genomica analisi possono essere eseguite Qui, abbiamo risequenziato il genoma del ceppo Saccharomyces cerevisiae S288C per valutare le prestazioni dell'assemblaggio di soli nanopori eri. Quindi abbiamo sequenziato e assemblato de novo i genomi di 21 isolati rappresentativi della diversità genetica di S. cerevisiae utilizzando la piattaforma MinION. La contiguità dei nostri assemblaggi era 14 volte superiore rispetto agli assemblaggi di soli Illumina e abbiamo ottenuto uno o due contigi lunghi per il 65% dei cromosomi. Questa elevata contiguità ci ha permesso di rilevare con precisione grandi variazioni strutturali attraverso i 21 genomi studiati. A causa dell'elevata completezza degli assemblaggi dei nanopori, siamo stati in grado di produrre una cartografia completa degli inserimenti di elementi trasponibili e di ispezionare le varianti strutturali che generalmente mancano utilizzando una strategia di sequenziamento a lettura breve. Le nostre analisi mostrano che la tecnologia Oxford Nanopore è già utilizzabile per il sequenziamento e l'assemblaggio de novo; tuttavia, errori non casuali negli omopolimeri richiedono la lucidatura del consenso utilizzando una tecnologia di sequenziamento alternativa.
The Healthy Brain Network Serial Scanning Initiative: una risorsa per valutare le differenze interindividuali e la loro affidabilità tra le condizioni di scansione e le sessioni.Anche se tipicamente misurata durante allo stato di riposo, una crescente letteratura sta illustrando la capacità di mappare la connettività intrinseca con la risonanza magnetica funzionale durante il compito e le condizioni di visione naturalistica. Questi paradigmi stanno suscitando entusiasmo per la loro maggiore tollerabilità nelle popolazioni cliniche e in via di sviluppo e perché consentono una gamma più ampia di analisi ( ad esempio, correlazioni tra soggetti). Per essere clinicamente utile, è necessario stabilire l'affidabilità test-retest della connettività misurata durante questi paradigmi. Questa risorsa fornisce dati per valutare l'affidabilità test-retest per i modelli di connettività full-brain rilevati durante ciascuno dei quattro condizioni di scansione che differiscono rispetto al livello di coinvolgimento (riposo, animazioni astratte, filmati, attività di flanker). fornito per 13 partecipanti, ciascuno scansionato in 12 sessioni con 10 minuti per ciascuna scansione delle quattro condizioni. I dati di imaging della curtosi di diffusione sono stati ottenuti anche ad ogni sessione. Le analisi di convalida tecnica e di affidabilità dimostrativa sono state effettuate a livello di connessione utilizzando il coefficiente di correlazione intraclasse e a livello di rete le rappresentazioni dei dati utilizzando il coefficiente di correlazione Image Intraclass. La variazione nella connettività funzionale intrinseca tra le sessioni è risultata generalmente maggiore di quella attribuibile alla condizione di scansione. L'affidabilità tra le condizioni era generalmente elevata, in particolare per le reti frontoparietali e predefinite. L'affidabilità tra le sessioni ottenute separatamente per le diverse condizioni di scansione era comparabile, sebbene notevolmente inferiore all'affidabilità tra le condizioni. Questa risorsa fornisce un banco di prova per quantificare l'affidabilità degli indici di connettività tra soggetti, condizioni e tempo. La risorsa può essere utilizzata per confrontare e ottimizzare diversi framework per misurare la connettività e i parametri di raccolta dati come la lunghezza della scansione. Inoltre, i ricercatori possono esplorare le prospettive uniche dell'architettura funzionale del cervello offerte da ciascuna delle condizioni di scansione.
Tirocinanti di medicina generale\' generazione di domande cliniche in consultazione per risposte successive: prevalenza e associazioni.Oltre a generare domande specifiche per il paziente, le consultazioni dei pazienti sono una ricca fonte di domande relative ai medici\' che necessitano di acquisire o mantenere una conoscenza clinica più ampia. Ciò è particolarmente vero per i tirocinanti GP. Per stabilire la prevalenza e le associazioni dei tirocinanti GP\' generazione di \'obiettivi di apprendimento\' (LG : domande generate durante le consultazioni cliniche per la prevista risposta post-consultazione). Inoltre, per caratterizzare il tipo di obiettivi di apprendimento generati. Un'analisi trasversale (2010-15) di uno studio di coorte in corso di tirocinanti australiani GP\' consultazioni. Una volta ciascuno Periodo di formazione di 6 mesi, i tirocinanti registrano i dati dettagliati di 60 consultazioni consecutive. L'esito primario era la generazione di un LG. L'analisi era a livello di singolo problema/diagnosi gestita. Il secondario risultato erano i problemi/diagnosi a cui si riferivano gli LG. Millecentoventiquattro tirocinanti hanno fornito dati per 154746 consultazioni, inclusi 222307 problemi/diagnosi. Gli LG sono stati generati per il 16,6% [intervallo di confidenza (IC) 95% = 16,4-16,7] di problemi/diagnosi, nel 22,1% (IC 95% = 21,9-22,3%) delle consultazioni. Le associazioni di LG includevano fattori relativi ai pazienti: età più giovane e aver visto il tirocinante in precedenza; fattori del tirocinante: fase di formazione precedente, formazione all'estero e organizzazione di formazione del tirocinante; fattori di consultazione: maggiore durata, affrontare una malattia cronica, indirizzare il paziente, organizzare il follow-up, organizzare indagini e accedere alle informazioni durante la consultazione. I LG sono stati comunemente generati per problemi cutanei (12,9% di tutti gli obiettivi di apprendimento), muscoloscheletrici (12,7%) e respiratori (8,7%). Gli LG sono stati generati per il 31,8% dei genitali maschili, il 27,0% di quelli neurologici e il 23,3% dei problemi agli occhi. I tirocinanti del GP australiano generano spesso domande durante la consultazione da perseguire dopo la consultazione. Prevalenza, \'complessità\' e familiarità dell'area tematica clinica hanno influenzato la generazione di LG.
Destinazione dell'arco aortico dissecato dopo sostituzione ascendente nella dissezione aortica di tipo A†.Valutare il destino di un arco aortico dissecato dopo una riparazione chirurgica limitata di dissezione aortica di tipo A. Dei 271 pazienti operati per dissezione acuta di tipo A tra il 2001 e il 2015, 86 (età 57α 13 anni, 74% uomini) con scansioni tomografiche computerizzate (TC) pre-dimissione avevano una dissezione residua nell'arco. diametri, lunghezze, ellitticità e comunicazioni tra i lumi sono stati valutati utilizzando TC pre-dimissione e follow-up. Il follow-up mediano della TC era di 31 mesi (primo quartile 15, terzo quartile 52). Il più grande aumento del diametro aortico totale al follow-up -up era di 20 mm distalmente all'arteria succlavia sinistra (mediana +4,0 mm; primo quartile +1,5, terzo quartile +9,2 mm; P = 0,004), con un tasso di crescita medio di 1,5 mm/anno (primo quartile 0,6, terzo quartile 3,9 mm). Il diametro reale del lume è rimasto invariato al follow-up. Almeno 1 commu nicazione tra il vero e il falso lumina è stata osservata nell'80% dei pazienti alla TC pre-dimissione e il 70% ha avuto comunicazioni all'anastomosi dell'innesto aortico distale. L'aumento accelerato del diametro dell'aorta sezionata era associato al numero di comunicazioni tra il lume, la comunicazione all'anastomosi distale e la falsa perfusione del lume (tutti, P < 0,001). La dissezione dell'arco aortico residuo porta alla crescita aortica che può provocare un aneurisma che richiede un trattamento. Il numero di comunicazioni tra il lume, la comunicazione all'anastomosi distale e la falsa perfusione del lume sono associati alla crescita aortica accelerata. La riparazione endovascolare può essere difficile a causa del piccolo lume vero e della presenza di molte comunicazioni tra i lumini.
Associazione tra peso alla nascita e successivo indice di massa corporea: un'analisi aggregata su base individuale di 27 coorti gemelle che partecipano al progetto CODATwins.Ci sono prove che Il peso alla nascita è positivamente associato all'indice di massa corporea (BMI) in età avanzata, ma non è chiaro se ciò sia spiegato da fattori genetici o dall'ambiente intrauterino Abbiamo analizzato l'associazione tra peso alla nascita e BMI dall'infanzia all'età adulta all'interno delle coppie gemelle, che fornisce approfondimenti nel ruolo dei fattori genetici e ambientali specifici dell'individuo. Questo studio si basa sui dati di 27 coorti di gemelli in 17 paesi. I dati aggregati includevano 78 642 gemelli (20 635 monozigoti e 18 686 coppie dizigoti dello stesso sesso) con informazioni sul peso alla nascita e un totale di 214-930 misurazioni dell'IMC a un'età compresa tra 1 e 49 anni L'associazione tra peso alla nascita e indice di massa corporea è stata analizzata sia a livello individuale che all'interno della coppia utilizzando analisi di regressione. A livello individuale, un aumento di 1 kg del peso alla nascita è stato associato linearmente a un BMI superiore fino a 0,9 kg/m2 (P < 0,001). All'interno delle coppie gemelle, i coefficienti di regressione erano generalmente maggiori (fino a 1,2 kg/m2 per kg di peso alla nascita, P < 0,001) rispetto a quelli delle analisi a livello individuale. Le associazioni intra-coppia tra peso alla nascita e successivo BMI erano simili in entrambi i gruppi di zigosità e nei sessi ed erano inferiori nell'età adulta. Questi risultati indicano che i fattori ambientali unici per ogni individuo hanno un ruolo importante nell'associazione positiva tra peso alla nascita e successivo indice di massa corporea, almeno fino alla giovane età adulta.
Gestione della malperfusione cerebrale nella riparazione chirurgica della dissezione aortica acuta di tipo A.La malperfusione cerebrale per i pazienti con dissezione aortica acuta di tipo A (AAAD) rimane un problema irrisolto. Il presente studio mirava a valutare la nostra gestione della perfusione cerebrale e identificare i predittori di malperfusione cerebrale perioperatoria in pazienti sottoposti a riparazione chirurgica di AAAD. Tra gennaio 2004 e dicembre 2015, 137 pazienti consecutivi con AAAD sono stati sottoposti a sostituzione aortica presso l'ospedale generale di Tsuchiya. lo stato dei vasi del ramo sopra-aortico (SABV) sezionato è stato classificato come pervio o trombosi mediante angiografia preoperatoria con tomografia computerizzata. La perfusione cerebrale intraoperatoria è stata monitorata mediante ecografia carotidea transcutanea e saturazione di ossigeno regionale. Nei casi con sintomi neurologici o malperfusione cerebrale, perfusione cerebrale rapida è stato immediatamente avviato utilizzando una tecnica di riduzione rapida. Abbiamo valutato i risultati clinici, inclusi mortalità e complicanze e ha analizzato i predittori di mortalità precoce e malperfusione cerebrale. Il tasso di mortalità precoce è stato dell'8,0%. Lesione cerebrale postoperatoria è stata osservata in 4 pazienti (2,9%). Diciannove pazienti avevano malperfusione cerebrale perioperatoria. Non ci sono state lesioni cerebrali postoperatorie nei pazienti in cui è stata corretta la malperfusione cerebrale intraoperatoria. L'analisi multivariata ha rivelato che lo shock preoperatorio (odds ratio [OR] 22,60, P < 0,0001) e l'estensione della dissezione all'aorta addominale (OR 9,31, P = 0,0064) erano fattori di rischio significativi per la mortalità precoce. I sintomi neurologici preoperatori (OR 12.40, P = 0.0006) e la trombosi parziale o completa del SABV (OR 64.10, P < 0.0001) sono stati identificati come predittori indipendenti di malperfusione cerebrale perioperatoria. La perfusione cerebrale perioperatoria deve essere gestita con attenzione, specialmente nei pazienti con sintomi neurologici preoperatori o trombosi parziale o completa del SABV.
Concettualizzare gli impatti sulla salute e sul benessere dell'impresa sociale: uno studio con sede nel Regno Unito.Imprese sociali-imprese che lavorano per benefici sociali piuttosto che per per la massimizzazione dei ritorni finanziari per gli azionisti o i proprietari, potrebbe potenzialmente rivelarsi un modo innovativo e sostenibile di affrontare i determinanti sociali della salute a monte. Tuttavia, il lavoro empirico si concentra su come e in che misura l'attività guidata dall'impresa sociale può avere un impatto sulla salute e sul benessere è ancora relativamente scarso. Questo studio esamina come le imprese sociali descrivono il loro impatto e come tali impatti possono essere considerati in termini di salute e benessere. Attraverso l'analisi dei rapporti di valutazione del lavoro delle imprese sociali in Scozia (n = 17) utilizzando un metodo \'process coding\', indaghiamo sia gli impatti auto-riferiti del lavoro delle imprese sociali sia i meccanismi da cui si dice che questi siano derivati. ettualizzazioni nella letteratura esistente, questo lavoro ci consente di presentare un modello concettuale \'empiricamente informato\' degli impatti sulla salute e sul benessere dell'attività guidata dall'impresa sociale, e presenta quindi un significativo progresso rispetto alle precedenti concettualizzazioni ipotetiche basate sulla teoria. Si ritiene che questi risultati migliorino ulteriormente la nostra conoscenza complessiva dei modi in cui l'impresa sociale e altre parti del terzo settore potrebbero essere considerate attori di salute pubblica potenzialmente preziosi \'non ovvi\'.
Scribble1 svolge un ruolo importante nella patogenesi dei difetti del tubo neurale attraverso il suo effetto di mediazione della localizzazione di Par-3 e Vangl1/2.Scribble1 (Scrib1 ) è un gene oncosoppressore che è stato a lungo stabilito come componente essenziale della polarità apicobasale (ABP). Nei modelli murini, le mutazioni in Scrib1 causano una grave forma di difetti del tubo neurale (NTD) a causa di una polarità planare difettosa delle cellule ( PCP). In questo studio, abbiamo sezionato il ruolo di Scrib1 nella patogenesi dei NTD nel suo mutante Circletail (Crc) di topo, in linee cellulari e in una coorte di NTD umana. Mentre non c'erano difetti evidenti nell'ABP nel gene Scrib1Crc/ Crc neuroepihelial, abbiamo identificato una localizzazione anormale della proteina apicale Par-3 e della proteina PCP Vangl 2. Questi risultati sono stati concordanti con quelli ottenuti a seguito di un parziale knockdown di Scrib1 nelle cellule MDCK II. Par-3 è stato in grado di salvare la localizzazione difetto di Vangl1 (paralogo di Vangl2) causato da parziale atterramento di Scrib1 suggerendo che Scrib1 esercita il suo effetto sulla localizzazione di Vangl1 indirettamente attraverso Par-3. Questa conclusione è supportata dai nostri risultati di un arricchimento apicale di Vangl1 a seguito di un parziale abbattimento di Par-3. L'analisi di risequenziamento di SCRIB1 in 473 pazienti con NTD ha portato all'identificazione di 5 rare mutazioni missenso eterozigoti che si prevedeva fossero patogene. Due di queste mutazioni, p. Gly263Ser e p. Gln808His, e 2 mutazioni NTD murine, p. Ile285Lys e p. Glu814Gly, hanno influenzato la localizzazione della membrana di Scrib1 e il suo ruolo modulatore della localizzazione di Par-3 e Vangl1. Il nostro studio dimostra un ruolo importante di Scrib1 nella patogenesi dei NTD attraverso il suo effetto di mediazione della localizzazione di Par-3 e Vangl1/2 e molto probabilmente indipendentemente dall'ABP.
Efficacia dell'estrazione della lettiera Winkler e delle trappole a caduta nel campionamento di comunità di formiche e gruppi funzionali in una foresta temperata.Selezione di metodi di campionamento adeguati per misurare una comunità di interesse è essenziale sia che gli obiettivi dello studio siano condurre un inventario delle specie, un monitoraggio ambientale o un esperimento manipolativo. Gli studi sulla diversità degli insetti spesso impiegano più metodi di raccolta a spese del tempo e dei finanziamenti del ricercatore. Le formiche (Formicidae) sono ampiamente utilizzate nel monitoraggio ambientale a causa della loro sensibilità ai cambiamenti dell'ecosistema. Quando si campionano comunità di formiche, due tecniche passive sono raccomandate in combinazione: trappole a caduta e estrazione di rifiuti Winkler. Queste raccomandazioni sono spesso basate su studi provenienti da regioni tropicali molto diverse o quando l'obiettivo è un inventario delle specie. nelle regioni temperate spesso si concentrano sulla misurazione della risposta comunitaria coerente lungo i gradienti di disturbo o tra i regimi di gestione mes; pertanto, più metodi di campionamento potrebbero non essere necessari. Abbiamo confrontato l'efficacia delle insidie e dell'estrazione della lettiera Winkler in una foresta temperata orientale per misurare la ricchezza delle specie di formiche, la composizione e la presenza di gruppi funzionali di formiche in risposta a manipolazioni sperimentali di due fattori chiave dell'ecosistema forestale, il cervo dalla coda bianca e un arbusto invasivo ( caprifoglio dell'Amur). Non abbiamo riscontrato alcun effetto significativo del metodo di campionamento sull'esito dell'esperimento ecologico; tuttavia, abbiamo trovato differenze tra i due metodi di campionamento nella ricchezza di specie di formiche risultanti e nella presenza di gruppi funzionali. I campioni di lettiera si avvicinavano alla ricchezza e alla composizione complessive delle specie combinate, ma le insidie erano migliori nel campionamento delle specie di grosso corpo (Camponotus). Concludiamo che l'utilizzo di entrambi i metodi è essenziale solo per gli inventari delle specie o per il monitoraggio delle formiche nel gruppo funzionale Specialisti del clima freddo.
La mancanza di capacità non è un \'spento\' per i diritti e le libertà: Wye Valley Nhs Trust V Mr B (dal suo amico legale, l'avvocato ufficiale) [2015] Ewcop 60.Wye Valley NHS Trust v Mr B [2015] EWCOP 60 illustra fino a che punto i desideri, i sentimenti, le credenze e i valori fortemente espressi da una persona priva di capacità decisionale devono essere pur non spingendosi fino a un modello decisionale supportato, come sancito dalla Convenzione delle Nazioni Unite sui diritti delle persone con disabilità, il caso esemplifica l'ethos partecipativo del Mental Capacity Act 2005 e il requisito che la persona incapace dovrebbe partecipare nel modo più completo possibile a qualsiasi decisione che la riguarda.
La formulazione di cipermetrina (Ustad-10 EC) induce genotossicità tramite apoptosi, influenza la fisiologia nutrizionale e modula la risposta immunitaria nel baco da seta Philosamia ricini (Lepidoptera: Saturniidae)."La cipermetrina è un insetticida piretroide con elevata attività insetticida, bassa tossicità per i mammiferi e biodegradabilità. Il presente studio mirava a determinare la tossicità acuta e valutare gli effetti tossici secondari di una formulazione commerciale di cipermetrina sul baco da seta Philosamia ricini Hutt dell'India nordorientale. La La potenziale genotossicità della cipermetrina sull'emocita del baco da seta è stata esaminata mediante analisi della cometa, attivazione della caspasi e analisi dell'affinità dell'annessina V. È stata valutata l'alterazione della fisiologia nutrizionale e dell'istoarchitettura della regione intestinale. Inoltre, l'effetto immunotossicologico della cipermetrina è stato studiato da fenolo ossidasi (PO), lisozima saggio e abbondanza di emociti circolanti. Il valore LC50 a 24, 48, 72 e 96 ore di esposizione è stato rec ordinati rispettivamente come 185,96, 105,34, 72,42 e 58,41 µg/litro. È stato osservato un aumento di circa sette volte della lunghezza media della coda della cometa a 24 ore dopo il trattamento con concentrazioni subletali di cipermetrina. La cipermetrina ha anche indotto l'apoptosi e attivato la reazione della caspasi negli emociti del baco da seta. Inoltre, è stata osservata una significativa diminuzione dell'attività degli enzimi digestivi a concentrazioni più elevate di cipermetrina. Nei gruppi esposti alla cipermetrina, è stata osservata anche un'alterazione dell'istoarchitettura sotto forma di microvilli rotti e strato mucoso sottile, deformato e fuso. Anche l'attività dell'enzima PO e dell'enzima lisozima è stata alterata con la concentrazione subletale di cipermetrina. La conta totale degli emociti è stata ridotta a 10587,10, 10052,30, 9234,30 e 8842,60 per mm3 con rispettivamente 10, 20, 30 e 40 µg/litro. I risultati offrono nuove informazioni sulle conseguenze negative di concentrazioni molto basse di formulazioni di cipermetrina su bachi da seta non di gelso dell'India nordorientale.
I disturbi XLID correlati a MED12 sono dose-dipendenti dall'espressione dei geni precoci immediati (IEG).Il mediatore occupa un ruolo chiave nell'espressione dei geni che codificano le proteine in mediare i contatti tra fattori specifici del gene e il macchinario di trascrizione basale ma si sa poco sul ruolo di ciascuna subunità mediatrice. Le mutazioni in MED12 sono legate a un ampio spettro di malattie genetiche con disabilità intellettiva legata all'X che sono difficili da classificare come Lujan, Sindromi di Opitz-Kaveggia o Ohdo Qui, abbiamo studiato diverse mutazioni di pazienti MED12 (p. R206Q, p. N898D, p. R961W, p. N1007S, p. R1148H, p. S1165P e p. R1295H) e abbiamo mostrato che ciascuna mutazione di MED12 causa modelli di espressione specifici di JUN, FOS ed EGR1 immediati primi geni (IEG), riflessi dalla presenza o assenza del complesso contenente MED12 nei rispettivi promotori. Inoltre, l'effetto delle mutazioni di MED12 ha specificità di tipo cellulare sull'espressione di IEG. conseguenza, l'espressione di geni reattivi tardivi come la metalloproteinasi-3 della matrice e il fattore di trascrizione silenziante RE1 implicati rispettivamente nella plasticità neurale e l'espressione specifica dei geni neuronali è disturbata come documentato per la mutazione MED12/p. R1295H. In tal caso, JUN e FOS non sono stati adeguatamente reclutati nel loro sito di legame AP1. I nostri risultati suggeriscono che le differenze tra i fenotipi correlati a MED12 sono essenzialmente il risultato di distinti pattern di espressione degli IEG, i successivi che dipendono dall'accurata formazione del complesso di inizio della trascrizione. Ciò potrebbe sfidare i medici a ripensare ai confini delle sindromi tradizionali e ad includere criteri genetici nei pazienti\' diagnostici.
Il cross-talk CD40-CD40L guida l'espressione della fascina nelle cellule dendritiche per una presentazione efficiente dell'antigene alle cellule T CD4+.La fascina è una proteina che lega l'actina , tra le cellule immunitarie, è limitato all'espressione nelle cellule dendritiche (DC). Precedenti rapporti hanno suggerito che la fascina svolge un ruolo importante nel regolare la presentazione dell'antigene DC alle cellule T CD4+. Tuttavia, nessun rapporto ha chiaramente collegato l'impegno recettore-ligando che può regolazione diretta a valle dell'espressione di fascina In questo studio, DC derivate dal midollo osseo da topi C57BL/6 wild-type rispetto a CD40-knockout sono stati utilizzati per chiarire i meccanismi dell'espressione e dell'attività della fascina sull'impegno del ligando CD40-CD40 (CD40L). le indagini ora mostrano che l'impegno del CD40 governa l'espressione della fascina nelle DC per promuovere la produzione di citochine delle cellule CD4+ T. L'assenza di segnalazione CD40 ha provocato una ridotta espressione della fascina nelle DC ed è stata associata a risposte alterate delle cellule CD4+ T. Inoltre, t lo studio ha scoperto che la perdita di impegno CD40-CD40L ha portato a una riduzione dei contatti DC-T-cell. Il salvataggio mediante l'espressione di fascina ectopica nelle DC carenti di CD40 è stato in grado di ristabilire contatti prolungati con le cellule T e ripristinare la produzione di citochine. Presi insieme, questi risultati mostrano che il cross-talk attraverso la segnalazione CD40-CD40L guida un'elevata espressione di fascina nelle DC per supportare l'acquisizione di risposte complete delle cellule T.
Una combinazione di mecillina e amoxicillina/clavulanato può ripristinare la suscettibilità alla mecillina di Escherichia coli che produce TEM-1 di alto livello.La mecillina è raccomandata in Francia come trattamento di prima linea per le infezioni del tratto urinario inferiore, a causa del forte aumento della resistenza di Escherichia coli ad altri trattamenti orali, come il cotrimossazolo o i fluorochinoloni, il suo impatto limitato sul microbiota fecale e la sua stabilità in presenza di numerosi -lattamasi. Tuttavia, abbiamo recentemente identificato diversi isolati di E. coli resistenti alla mecillina con un fenotipo di penicillinasi ad alta espressione (HEP) che meritano ulteriori studi. Abbiamo studiato due isolati clinici isogeni da un paziente (uno suscettibile alla mecillina e uno resistente to mecillinam) da WGS per determinare il meccanismo di resistenza alla mecillina e confrontarlo con altri E. coli resistenti alla mecillina Abbiamo valutato la combinazione sinergica di amoxicillina/clavulanato e mecillina utilizzando un semplice test, adatto alla pratica quotidiana di laboratorio, per determinare la MIC di questa combinazione. Abbiamo dimostrato che la presenza di un SNP nel promotore del gene plasmidico TEM-1 -lattamasi è sufficiente per conferire resistenza alla mecillina. Questo meccanismo era presente nel 67% del fenotipo HEP E. coli testato. La combinazione di mecillinam con amoxicillina/clavulanato ha abolito la resistenza, con una MIC compatibile con l'uso clinico. Questa associazione non era sensibile all'effetto dell'inoculo, contrariamente al solo mecillinam. Un fenotipo HEP può conferire resistenza alla mecillinam in vitro. Questa resistenza viene abolita, indipendentemente dall'inoculo, combinando mecillinam con amoxicillina/clavulanato, e può essere facilmente testata in laboratorio. Questa combinazione può essere utilizzata come trattamento di relè per via orale della pielonefrite non complicata dovuta a ceppi di E. coli multiresistenti.
L'invasione di trofoblasti extravilli dei vasi venosi e linfatici è alterata negli aborti spontanei idiopatici, ricorrenti.I trofoblasti extravilli (EVT) invadono non- vasi arteriosi deciduali nelle gravidanze sane e patologiche. I nostri risultati rivelano che l'invasione del trofoblasto dei vasi venosi e linfatici è un evento frequente durante il primo trimestre di gravidanza ed è compromessa nell'aborto spontaneo ricorrente (RSA). Inoltre, i dati attuali suggeriscono che le EVT popolare i linfonodi regionali durante la gravidanza. I trofoblasti umani rimodellano e invadono le arterie a spirale decidua. Inoltre, un recente rapporto dimostra che i trofoblasti entrano in contatto e invadono le vene deciduali. Campioni di tessuto umano del primo trimestre deciduae basalis (n = 54, 6a-13a settimana di gestazione) ottenuti da interruzioni di gravidanza elettive sono stati utilizzati per studiare l'invasione del trofoblasto nelle vene e nei vasi linfatici, rispetto alle arterie. campioni di tessuto di aborti spontanei idiopatici e ricorrenti (n = 23) sono stati valutati per il numero di cellule di EVT in questi vasi decidui. Inoltre, sono stati analizzati i linfonodi di quattro donne in gravidanza per la presenza di EVT. La localizzazione, la frequenza e il targeting e l'invasione mediati da EVT di vasi arteriosi, venosi e linfatici sono stati determinati nelle sezioni di tessuto basale decidua del primo trimestre utilizzando la colorazione dell'immunofluorescenza con anticorpi contro CD31, CD34, efrina B2 (EFNB2), recettore dell'efrina B4 (EPHB4) , HLA-G, podoplanina, omeobox 1 (Prox-1), alfa-muscolo liscio actina 2 (ATCTA2), fattore von Willebrand (vWF) e proteoglicano 2 (PRG2). Le EVT arteriose, venose e linfatiche sono state ulteriormente caratterizzate in base alla loro posizione nella struttura vascolare e classificate come intramurali (im) o intraluminali (il). Le EVT, che esprimono specificamente PRG2, colpiscono e invadono vene e vasi linfatici nel primo trimestre decidua basalis poiché il trofoblasto HLA-G+ è stato rilevato nella parete vascolare (EVT intramurale, imEVT) e nel lume di questi vasi (EVT intraluminale, ilEVT). In totale sono state analizzate 276 arterie, 793 vene e 113 vasi linfatici. Mentre gli EVT entrano in contatto e invadono le arterie e le vene in misura simile, abbiamo scoperto che i vasi linfatici sono significativamente meno colpiti dagli EVT (P = 0,001). Inoltre, gli ilEVT sono stati rilevati nel lume dei vasi venosi e linfatici, mentre gli ilEVT sono stati trovati solo occasionalmente nel lume delle arterie. È interessante notare che le sezioni di tessuto RSA contenevano significativamente più vasi arteriosi (P = 0,037), venosi (P = 0,002) e linfatici (P < 0,001), rispetto ai controlli sani. Tuttavia, mentre il rimodellamento arterioso associato a RSA è rimasto invariato (P = 0,39), i rapporti di EVT colpiti rispetto al numero totale di vene (P = 0,039) e linfatici (P < 0,001) erano significativamente più bassi in RSA rispetto all'età- sezioni deciduali sane abbinate. Infine, gli HLA-G+/PRG2+/CD45-EVT possono essere rilevati nei linfonodi regionali di donne in gravidanza con diagnosi di cancro cervicale. N / A. In questo studio, sono stati esaminati i tessuti deciduali del primo trimestre provenienti da interruzioni elettive di gravidanze e utilizzati come riferimento per una gravidanza sana. Tuttavia, questo collettivo può includere anche gravidanze che avrebbero sviluppato disturbi placentari più avanti nella gestazione. A causa delle limitazioni nella disponibilità dei tessuti, i nostri risultati di colorazione per l'espressione del marker specifico di EVT nei linfonodi regionali delle donne in gravidanza si basano solo su quattro casi. In questo studio, proponiamo la migrazione delle cellule HLA-G+ nei linfonodi regionali durante la gravidanza, suggerendo che l'EVT umano è in grado di infiltrarsi nei tessuti materni attraverso il flusso sanguigno. Inoltre, la descrizione dell'invasione di EVT compromessa nel sistema vascolare venoso e linfatico in RSA può aiutare a comprendere meglio le caratteristiche patologiche dell'aborto ricorrente idiopatico. Questo studio è stato sostenuto dall'Austrian Science Fund (concessione P-25187-B13 a J. P. e concessione P-28417-B30 a M. K. ). Non ci sono interessi in competizione da dichiarare.
La struttura genetica della popolazione del cactus gigante Echinopsis terscheckii nell'Argentina nordoccidentale è modellata dai modelli di copertura vegetale.Le specie che abitano le zone aride dipendono comunemente dalla vegetazione circostante per il reclutamento in condizioni di stress, mentre la competizione può influenzare le popolazioni in ambienti più umidi. Il nostro obiettivo era di analizzare come diversi climi e vegetazione influenzano la struttura genetica spaziale su scala fine (SGS) del cactus colonnare Echinopsis terscheckii. In 4 siti, abbiamo stimato la copertura vegetale mediante patch digitalizzate e l'indice di vegetazione della differenza normalizzato (NDVI). Abbiamo mappato 30 individui per popolazione e raccolto tessuto per l'elettroforesi isozima utilizzando 15 loci putativi. L'autocorrelazione spaziale tra tutte le possibili coppie di genotipi e il numero di gruppi e famiglie geneticamente omogenei sono stati calcolati per ciascuno popolazione. Maggiore copertura (66%) e valori medi di NDVI sono stati rilevati nell'habitat più umido che c costituito da macchie di vegetazione meno numerose, più grandi e più disperse. Tutte le popolazioni erano geneticamente diverse e mostravano SGS significativi. Sono state trovate correlazioni positive tra la distanza alla quale sono stati raggiunti i valori massimi di autocorrelazione e parentela e l'area di vegetazione e la dimensione del patch. Inoltre, valori NDVI più elevati sono stati associati a un numero inferiore di patch. Le popolazioni esposte a maggiori precipitazioni e copertura vegetale erano costituite da individui sparsi che si raggruppavano a distanze maggiori, mentre macchie di vegetazione in climi aridi producevano gruppi di genotipi strettamente correlati a piccole distanze. Questi risultati supportano l'ipotesi genetica del gradiente di stress. In condizioni di stress idrico, la facilitazione favorisce l'insediamento al di sotto della vegetazione irregolare con conseguente struttura familiare su scala fine. Nelle foreste xerofile più umide, la competizione per le risorse, cioè la luce, si traduce in individui sparsi e quindi in quartieri su scala grossolana. Queste informazioni possono guidare gli sforzi di conservazione e/o restauro, come la scala spaziale da considerare nella raccolta del germoplasma.
Regolazione post-traduzionale dei trasportatori di azoto in piante e microrganismi.Per i microrganismi e le piante, nitrato e ammonio sono le principali fonti di azoto e sono anche importanti molecole segnale che controllano diversi aspetti del metabolismo e dello sviluppo. Negli ultimi dieci anni, numerosi studi hanno rivelato che i trasportatori di azoto sono fortemente regolati a livello trascrizionale. Tuttavia, sempre più rapporti mostrano che i trasportatori di nitrati e ammonio sono anche soggetti a post- regolazioni traslazionali in risposta alla disponibilità di azoto. La fosforilazione è finora la modifica post-traduzionale più studiata per questi trasportatori e influenza sia la regolazione dell'assorbimento dell'azoto che il rilevamento dell'azoto. Ad esempio, in Arabidopsis thaliana, è stato dimostrato che la fosforilazione attiva il rilevamento funzione del trasportatore del nitrato radicale NRT1.1 e per cambiare l'affinità di trasporto. Inoltre, per il trasporto dell'ammonio ter, un meccanismo di attivazione/inattivazione dipendente dalla fosforilazione è stato chiarito negli ultimi anni sia nelle piante che nei microrganismi. Tuttavia, nonostante il fatto che questi meccanismi regolatori stiano iniziando a essere descritti in modo approfondito, le vie di segnalazione coinvolte e la loro azione sui trasportatori di azoto rimangono in gran parte sconosciute. In questa recensione, mettiamo in evidenza i trasportatori di azoto inorganico regolati a livello post-traduzionale e confrontiamo i meccanismi noti nelle piante e nei microrganismi. Quindi discutiamo di come questi meccanismi potrebbero contribuire alla regolazione dell'assorbimento dell'azoto e/o del rilevamento dell'azoto.
Upregulation di un gene della serina proteasi simile alla tripsina in ceppi di Antheraea pernyi (Lepidoptera: Saturniidae) esposti a diversi patogeni.Antheraea pernyi Guérin-Méneville is utilizzato per la produzione della seta e come risorsa alimentare. La sua infezione da agenti patogeni esogeni, inclusi microsporidi, funghi, batteri e virus, può portare a malattie del baco da seta, causando gravi perdite economiche. Un gene della serina proteasi simile alla tripsina (TLS) è stato trovato in Dati del trascrittoma di A. pernyi risultanti da due diversi esperimenti di infezione. La sequenza di cDNA di ApTLS era di 1.020 bp di lunghezza e conteneva un quadro di lettura aperto di 774 bp che codifica per una proteina di 257 aminoacidi (GenBank KF779933). Il presente studio ha studiato i modelli di espressione di ApTLS dopo l'esposizione a diversi agenti patogeni e in quattro diversi ceppi di A. pernyi. La RT-PCR semiquantitativa ha indicato che ApTLS era espresso in tutte le fasi dello sviluppo ed era più espresso nell'intestino medio. PCR quantitativa in tempo reale ha indicato che ApTLS era sovraregolato nell'intestino medio di A. pernyi esposto a infezioni da nucleopoliedrovirus (ApNPV), Nosema pernyi, Enterococcus pernyi e Beauveria bassiana e il livello di espressione genica più elevato è stato trovato sotto l'infezione da ApNPV. Il ceppo Shenhuang n. 2 ha presentato il più basso tasso di infezione e il più alto livello di espressione genica di ApTLS quando esposto ad ApNPV. Quindi, ApTLS sembra essere coinvolto nelle reazioni di difesa innate in A. pernyi.
Primo concorso cinematografico internazionale sulla salute pubblica 2016-riflessioni sullo sviluppo e l'uso dei criteri di valutazione della concorrenza.I concorsi cinematografici possono essere un metodo utile per comprendere i problemi di qualità nei film sulla salute. In questo documento, descriviamo lo sviluppo e l'uso di criteri di qualità espliciti per identificare i film \'migliori\' per il primo concorso internazionale di film sulla salute pubblica. È stato creato un comitato di selezione dei film che comprende una serie di parti interessate. La commissione ha elaborato 10 criteri di qualità espliciti per giudicare i film sulla base dei criteri di selezione di altri festival cinematografici. Questi criteri sono stati quindi applicati a un'ampia gamma di film sulla salute inseriti in un concorso cinematografico per selezionare il miglior film da proiettare. Ottantaquattro film provenienti da 20 paesi diversi sono stati presentati al concorso cinematografico sulla salute pubblica. L'originalità dell'argomento trattato dal film, l'importanza per la salute pubblica del problema e s L'approccio narrativo nel film è risultato essere il criterio più discriminatorio per selezionare i film. La selezione dei film sulla salute per i festival può essere effettuata utilizzando criteri di qualità espliciti. Ci sono una serie di vantaggi in un tale approccio; tuttavia, la selezione esplicita comporta un grande impegno di risorse da parte degli organizzatori di festival cinematografici e sono necessarie ulteriori ricerche per testare la validità dei criteri di qualità applicati ai film sulla salute.
Il sistema CRISPR-Cas9 in Neisseria spp.Batteri e archaea possiedono numerosi sistemi di difesa per combattere le infezioni virali e altri elementi genetici mobili. Unico tra questi , CRISPR-Cas (clustered, regolarmente interspaziate brevi ripetizioni palindromiche-CRISPR associate) fornisce un'interferenza genetica adattativa contro acidi nucleici estranei. Qui esaminiamo i recenti progressi sul sistema CRISPR-Cas9 in Neisseria spp, con particolare attenzione alle sue funzioni biologiche nel trasferimento genetico , le sue caratteristiche meccanicistiche che stabiliscono nuovi paradigmi e le sue applicazioni tecnologiche nell'ingegneria del genoma eucariotico.
Chirurgia elettiva per aneurisma dell'aorta ascendente nell'anziano: dovrebbe esserci un limite di età?L'obiettivo di questo studio è di analizzare retrospettivamente risultati in pazienti di età compresa tra 75 e 79 anni e oltre 80. Tra il 2000 e il 2015, 108 pazienti di età compresa tra 75 e 79 anni (G75, età media 76,9 ± 1,5 anni) e 72 pazienti di età pari o superiore a 80 anni (G80, età media 82,2 ± 2,1 anni) sono stati sottoposti a riparazione elettiva dell'aneurisma. L'esito operatorio e la sopravvivenza sono stati confrontati con 727 coetanei più giovani di età <75 anni (G Ctrl , età media 56,6 α 11,7 anni). Dopo l'intervento, i pazienti con età avanzata hanno mostrato una maggiore incidenza di ventilazione prolungata (G 80 21,4%, G 75 8,4%, G Ctrl 2,9%; P < 0,001), sindrome da bassa gittata cardiaca (G 80 11,4%, G 75 1,9%, G Ctrl 2,2%; P = 0,001), insufficienza multiorgano ( G 80 2,9%, G 75 0%, G Ctrl 0,1%; P = 0,022), emofiltrazione (G 80 8,6%, G 75 0,9%, G Ctrl 0,6%; P < 0,001) e infezione (G 80 10,0 %, G 75 6,5%, G Ctrl 3,5%; P = 0,017). La mortalità operatoria era significativamente aumentata negli anziani (G 80 11,1%, G 75 3,7%, G Ctrl 1,4%; P < 0,001). La sopravvivenza a medio termine differiva significativamente tra i gruppi chirurgici. L'analisi di regressione multivariata escludeva l'età come predittore indipendente di mortalità operatoria. I pazienti anziani hanno mostrato un rischio operatorio più elevato rispetto ai loro coetanei più giovani. Tuttavia, l'età di per sé non è un indicatore adatto del rischio chirurgico e pazienti ben selezionati con grandi aneurismi minacciosi possono trarre beneficio dall'intervento.
Variazione geografica nella resistenza alla fosfina tra le popolazioni nordamericane del coleottero rosso della farina (Coleoptera: Tenebrionidae).Il coleottero rosso della farina, Tribolium castaneum (Herbst ), è un comune parassita del prodotto immagazzinato trovato in tutto il mondo. La fosfina, il fosfuro di idrogeno (PH3), è il fumigante più comunemente usato per i cereali immagazzinati, per il quale è stata registrata una resistenza genetica per diverse specie di parassiti. Questo studio ha valutato la resistenza alla fosfina in 25 Popolazioni di T. castaneum provenienti da tutti gli Stati Uniti e dal Canada utilizzando un dosaggio biologico discriminante. I saggi di mortalità della dose sono stati condotti con adulti di sette di queste popolazioni per classificare i fenotipi di resistenza debole e forte. La resistenza alla fosfina è stata rilevata in 12 delle 25 popolazioni, e la frequenza di resistenza all'interno delle popolazioni variava dal 2% a Victoria, TX, al 100% a Red Level, AL. Due popolazioni resistenti del Kansas che erano state campionate tre anni prima sono state trovate t o hanno frequenze di resistenza simili nello studio attuale. Nessuna delle quattro popolazioni canadesi ha mostrato una resistenza rilevabile tra gli insetti testati. I calcoli del rapporto di resistenza dal valore LC50 nelle popolazioni resistenti rispetto al LC50 per il ceppo suscettibile di laboratorio hanno permesso di assegnare i fenotipi di resistenza come resistenza debole, resistenza da 5 a 26 volte rispetto a suscettibile o resistenza forte da 95- a 127- piega rispetto a suscettibile. Questo studio suggerisce che adeguate tecniche di valutazione della resistenza possono aiutare a determinare la presenza di resistenza alla fosfina nelle popolazioni di T. castaneum e possono ulteriormente caratterizzare la forza della resistenza presente. Questi dati possono essere utilizzati per supportare i programmi di gestione della resistenza che considerano la cessazione o la modifica della fumigazione con fosfina per controllare il T. castaneum.
Nuovi approcci alla progettazione del vaccino Neisseria meningitidis.È disponibile una gamma di vaccini per prevenire malattie potenzialmente letali causate dall'infezione da Neisseria meningitidis (meningococco, Uomini). I vaccini coniugati a capsula polisaccaride (CPS) sono efficaci profilattici per le infezioni di sierogruppo MenA, MenC, MenW e MenY e i vaccini per le vescicole della membrana esterna (OMV) sono stati utilizzati con successo per controllare le infezioni clonali del sierogruppo MenB. Vaccini MenB basati su proteine ricombinanti identificati dagli approcci di vaccinologia inversa (Bexsero™) e di proteomica (Trumenba™) sono stati recentemente autorizzati e Bexsero™ è stato introdotto nel programma di immunizzazione infantile del Regno Unito. In questa recensione, abbiamo tracciato lo sviluppo di questi vaccini autorizzati. Inoltre, discutiamo la pletora di nuovi approcci di vaccinologia che sono stati applicati al meningococco con successo variabile negli studi preclinici, ma che forniscono piattaforme tecnologiche per ap plicazione ad altri patogeni. Queste strategie includono la modifica di CPS, lipooligosaccaride e OMV; l'uso di proteine ricombinanti; approcci di vaccinologia strutturale per la progettazione di vaccini sintetici peptidici/mimetopi, vaccini a DNA e proteine ingegnerizzate; presentazione di epitopi su particelle biologiche e sintetiche; attraverso la vaccinazione con patogeni vivi attenuati, o con batteri eterologhi che esprimono antigeni vaccinali, o all'occupazione competitiva della nicchia nasofaringea da parte di batteri commensali spp. Dopo quasi un secolo di ricerca sui vaccini, è possibile che la malattia meningococcica possa essere aggiunta, a breve, all'elenco delle malattie che sono state debellate in tutto il mondo da rigorose campagne di vaccinazione.
La variazione di lunghezza ripetuta in un gene simile alla sintasi della cellulosa del grano è associata ad alterato numero di timone e composizione della parete delle cellule staminali.Il gene di inibizione del timone ( stagno) che riduce l'accestimento nel grano (Triticum aestivum) è anche associato a grandi spighe, aumento del peso del grano e foglie e steli spessi. In questo studio, il confronto delle linee quasi isogene (NIL) ha rivelato cambiamenti nella morfologia dello stelo, nella composizione della parete cellulare e forza dello stelo. L'analisi microscopica delle sezioni trasversali dello stelo e l'analisi chimica del tessuto dello stelo hanno indicato che le pareti cellulari nelle linee di stagno erano più spesse e più lignificate rispetto ai NIL a coltivazione libera. L'aumento della lignificazione era associato a steli più forti nelle piante di stagno. Un candidato Il gene per lo stagno è stato identificato tramite clonazione basata su mappe ed è stato previsto che codificasse una proteina simile alla cellulosa sintasi (Csl) con omologia con i membri del clade CslA. e è stato associato al numero di timone in diversi germoplasma di grano e legato alle differenze di espressione dei trascritti Csl tra NIL. Proponiamo che la regolazione del trascritto Csl e/o dei livelli proteici influenzi la ripartizione del carbonio in tutta la pianta, che svolge un ruolo chiave nel fenotipo dello stagno.
Finanziamento basato sulle prestazioni: lo stesso è diverso.Sebbene sia sempre più riconosciuto all'interno della comunità di ricerca del finanziamento basato sulle prestazioni (PBF) che PBF è più che semplici pagamenti basati su risultati verificati per la qualità, questa definizione ristretta di PBF è ancora molto presente in molti studi e valutazioni. Questo porta a opportunità mancate, incomprensioni e un dibattito inutile. Pertanto, rafforziamo l'affermazione che PBF dovrebbe essere visto come un pacchetto di riforme incentrato su servizi mirati con molti aspetti diversi che vanno oltre il livello dell'operatore sanitario. Non riconoscere l'importanza dei diversi elementi del PBF influenza negativamente il compito di professionisti, ricercatori e responsabili politici. Dopo aver sostenuto questa definizione più ampia , proponiamo tre percorsi di ricerca (descrizione, comprensione e inquadramento PBF) e diamo un punto di partenza breve e provvisorio per la ricerca futura, lasciando la parola aperta per ulteriori approfondimenti discussioni approfondite. Da questi tre punti di vista sembra che quando si tratta di PBF \' lo stesso sia diverso\'. Nonostante la maggiore complessità dovuta all'uso della definizione più ampia, i progressi su questi tre diversi percorsi di ricerca miglioreranno notevolmente le nostre conoscenze, porteranno a programmi PBF più adattati e creeranno un dibattito più sfumato sul PBF.
Valutazione in vitro di diverse combinazioni antimicrobiche contro la Klebsiella pneumoniae che produce carbapenemasi: l'attività del regime a doppio carbapenemico è correlata al valore della MIC del meropenem.Abbiamo valutato l'attività in vitro di diverse combinazioni antimicrobiche con e senza colistina contro 39 ceppi di Klebsiella pneumoniae (CR-Kp) resistenti ai carbapenemi (colistina + meropenem/doripenem, colistina + tigeciclina, colistina + rifampicina, gentamicina + meropenem, gentamicina e+ il regime a doppio carbapenem meropenem + ertapenem) utilizzando il metodo a scacchiera. È stata testata anche la tripla combinazione colistina + meropenem + tigeciclina. Inoltre, sono stati condotti studi di uccisione per meropenem + ertapenem. Le combinazioni a base di gentamicina hanno mostrato un elevato livello di sinergia. Meropenem + ertapenem è risultato sinergico in 12/39 (30,7%) dei ceppi, mentre sulla base di studi di uccisione 1 × MIC meropenem + 1 × MIC ertapenem e 2 × MIC meropenem + 1 × Le combinazioni di ertapenem MIC erano battericide e sinergiche a 24 h [area media sotto la curva battericida (AUBC) 54,9 α 26,1 e 44,2 α 15,3 rispetto a 1 × meropenem (134,5 α 40, 1) e 2 × meropenem (126,4 α 5, 4), rispettivamente , P < 0.0001]. Quando i risultati sono stati stratificati in base alla MIC di meropenem, abbiamo scoperto che il grado di sinergia aumentava significativamente per gli isolati con MIC di meropenem (e non di ertapenem) inferiori, fino a una MIC di 128 µmg/L. Tra le combinazioni contenenti colistina, è stata osservata sinergia in 18/39 (46,1%), 33/34 (97%), 24/39 (61,5%) e 17/39 (43,5%) dei ceppi per colistina + meropenem, colistina + rifampicina, colistina + tigeciclina e colistina + doripenem, rispettivamente, compresi i ceppi resistenti alla colistina. La colistina + meropenem + tigeciclina a concentrazioni subinibitorie ha determinato l'assenza di crescita di 37/39 ceppi (94,8%). I nostri dati in vitro suggeriscono che la colistina potrebbe essere una valida opzione terapeutica contro CR-Kp, anche in presenza di resistenza alla colistina, mentre il regime a doppio carbapenemico rappresenta un'opzione praticabile quando la colistina non è raccomandata, specialmente se la MIC del meropenem è ≤ 128 mg/l. Poiché i tradizionali rapporti sulla sensibilità agli antimicrobici non sono sufficientemente informativi per i medici, i test di sinergia e l'effettiva valutazione della MIC di meropenem dovrebbero sempre essere eseguiti in caso di infezioni da CR-Kp.
Anastomosi ileale-sacca-anale per displasia o cancro che complica la malattia infiammatoria intestinale: l'escissione totale del mesoretto è sempre obbligatoria? Un'analisi di 36 pazienti consecutivi.Il L'estensione del prelievo linfonodale durante l'intervento chirurgico per neoplasia del colon-retto [displasia e/o cancro] che complica la malattia infiammatoria intestinale [IBD] è oggetto di dibattito. Questo studio mirava a valutare il rischio di cancro del retto invasivo in pazienti sottoposti ad anastomosi ileale tasca-anale [ IPAA] per neoplasia del colon complicante IBD, e quindi per chiarire se un'escissione mesorettale totale sistematica [TME] debba essere sistematicamente eseguita o meno in quei pazienti. Dal 1998 al 2015, sono stati inclusi tutti i pazienti sottoposti a IPAA per tumore del colon-retto complicante IBD Sono stati esclusi i pazienti con cancro del retto noto preoperatorio I risultati patologici sono stati confrontati con i risultati endoscopici preoperatori Un totale di 36 pazienti [età media 49 ± 14 anni], di cui 10 donne [31%] e 26 uomini [69%], sono stati sottoposti a IPAA per neoplasia del colon-retto complicante IBD, con [n = 8; 22%] o senza [n = 28; 78%] TME. Il tasso di cancro del retto nei campioni patologici è stato dello 0% [0/20] nei pazienti con neoplasia nota preoperatoria limitata solo al colon, dello 0% [0/8] tra i pazienti con displasia rettale di basso grado preoperatoria e del 62% [5/8 ] tra i pazienti con displasia di alto grado preoperatoria rettale. Questi risultati non supportano la TME sistematica durante l'IPAA per le neoplasie del colon che complicano l'IBD. Considerando la sua associazione con il disturbo sessuale postoperatorio, la TME dovrebbe essere discussa solo caso per caso.
Ricerca di biomarcatori del disturbo CDKL5: deficit visivo ad esordio precoce nei topi mutanti CDKL5.Il disturbo CDKL5 è un disturbo dello sviluppo neurologico ancora senza una cura. Murine modelli del disturbo CDKL5 sono stati recentemente generati aumentando la possibilità di test preclinici dei trattamenti. Tuttavia, mancano ancora biomarcatori quantitativi imparziali di alto valore traslazionale per monitorare la funzione cerebrale. Inoltre, l'analisi del trattamento è ostacolata dalla sfida di ripetutamente e non -test invasivo della funzione neuronale. Abbiamo analizzato lo sviluppo delle risposte visive in un modello murino di disturbo CDKL5 per introdurre risposte evocate visivamente come metodo quantitativo per valutare la funzione del circuito corticale. Le risposte visive corticali sono state valutate in topi maschi CDKL5 nulli, femmine eterozigoti e i loro rispettivi compagni di controllo wild-type mediante ripetute immagini ottiche transcraniche da P27 a P32. Nessuna differenza tra mic wild-type e mutante e era presente a P25-P26 mentre risposte difettose apparivano da P27-P28 sia in topi mutanti CDKL5 eterozigoti che omozigoti. Questi risultati sono stati confermati dai potenziali evocati visivamente (VEP) registrati dalla corteccia visiva di una coorte diversa. I topi precedentemente ripresi sono stati anche analizzati a P60-80 utilizzando VEP, rivelando una riduzione persistente dell'ampiezza della risposta, una ridotta acuità visiva e una funzione di contrasto difettosa. Il livello di disabilità adulta era significativamente correlato con la riduzione delle risposte visive osservata durante lo sviluppo. Support vector machine ha mostrato che la valutazione visiva multidimensionale può essere utilizzata per classificare automaticamente i topi mutanti e wt con elevata affidabilità. Pertanto, il monitoraggio delle risposte visive rappresenta un biomarcatore promettente per gli studi preclinici e clinici sul disturbo CDKL5.
Riduzioni della densità minerale ossea dopo l'inizio di tenofovir disoproxil fumarato e cambiamenti nella fosfaturia: un'analisi secondaria di ACTG A5224s.Non è noto se le maggiori riduzioni di La densità minerale ossea (BMD) associata all'inizio di tenofovir disoproxil fumarato rispetto ad abacavir in partecipanti con infezione da HIV precedentemente non trattati allo studio clinico ACTG A5224s era associata a un potenziale peggioramento della fosfaturia correlata a tenofovir. Abbiamo correlato i cambiamenti della BMD a livello dell'anca e della colonna vertebrale con cambiamenti nella fosfaturia [riassorbimento transtubulare di fosforo (TRP) e massimo riassorbimento tubulare di fosfato per velocità di filtrazione glomerulare (TmP/GFR)] dall'ingresso fino alla settimana 96 in quelli che iniziano tenofovir ( n = 134) rispetto a abacavir ( n = 135) con efavirenz o atazanavir/ritonavir negli A5224. Abbiamo anche correlato i cambiamenti nella BMD con l'AUC di tenofovir misurata tra le settimane 4 e 24. Cambiamenti in TRP e TmP/GFR fino alla settimana 96 b tra i bracci tenofovir e abacavir non erano significativamente differenti (entrambi P ≥ 0,70) e non differivano con l'uso di efavirenz rispetto ad atazanavir/ritonavir. Non ci sono state correlazioni significative tra le variazioni di TRP o TmP/GFR e con la BMD dell'anca o della colonna vertebrale nei bracci di tenofovir. L'AUC di tenofovir era significativamente correlata con le variazioni della BMD dell'anca, ma non della BMD della colonna vertebrale, alla settimana 24 ( r = -0,22, P = 0,028) e alla settimana 48 ( r = -0,26, P = 0,010), ma non a settimana 96 ( r = -0,14, P = 0,18). I cambiamenti nella fosfaturia non erano differenti tra i bracci tenofovir e abacavir negli A5224. I cambiamenti nella BMD dell'anca e della colonna vertebrale con tenofovir non erano correlati ai cambiamenti nella fosfaturia. Tuttavia, l'esposizione a tenofovir è stata debolmente associata a cambiamenti nella BMD dell'anca fino alla settimana 48.
Diminuzione della sensibilità all'azitromicina degli isolati di Neisseria gonorrhoeae in pazienti recentemente trattati con azitromicina.L'aumento dell'utilizzo e della resistenza all'azitromicina nella Neisseria gonorrhoeae minaccia l'attuale duplice trattamento. Perché l'antimicrobico l'esposizione influenza la resistenza, abbiamo analizzato l'associazione tra esposizione all'azitromicina e ridotta suscettibilità di N. gonorrhoeae Sono stati inclusi isolati di N. gonorrhoeae di pazienti che hanno visitato la clinica STI di Amsterdam tra il 1999 e il 2013 (t0), con un'altra visita nei precedenti 60 giorni (t -1) L'esposizione è stata definita come la prescrizione di azitromicina a t-1. Abbiamo incluso un isolato per paziente. Utilizzando la regressione lineare multivariata abbiamo valutato l'associazione tra esposizione e concentrazione minima inibitoria di azitromicina (MIC). Il sequenziamento dell'intero genoma (WGS) è stato eseguita per produrre una filogenesi, identificare i tipi di sequenza multilocus (MLST), i tipi di sequenza multiantigene (NG-MAST) e i marcatori molecolari o f resistenza all'azitromicina. Abbiamo incluso 323 isolati: 212 non sono stati esposti all'azitromicina, 14 sono stati esposti 30 giorni e 97 sono stati esposti tra 31-60 giorni prima dell'isolamento. La MIC media dell'azitromicina era di 0,28 mg/L (intervallo: <0,016-24 mg/L). La regressione lineare aggiustata per età, etnia, sito di infezione e anno solare ha mostrato un'associazione significativa tra esposizione all'azitromicina 30 giorni e MIC (β: 1,00, 95%-IC: 0,44-1,56, p=0,002). La WGS è stata eseguita su 31 isolati: 14 non esposti, 14 esposti ad azitromicina 30 giorni prima dell'isolamento e tre isolati t-1. L'esposizione all'azitromicina era significativamente associata alle mutazioni A39T o G45D mtrR (p=0.046), ma non ai tipi molecolari MLST o NG-MAST. I risultati suggeriscono che l'uso frequente di azitromicina in popolazioni ad alto rischio di contrarre N. gonorrhoeae induce un aumento della MIC e può provocare resistenza.
Farmacocinetica a dose singola di tenofovir alafenamide e del suo metabolita attivo nei tessuti della mucosa.Tenofovir alafenamide, un profarmaco di tenofovir, produce concentrazioni di PBMC più elevate di tenofovir difosfato (tenofovir-dp) rispetto a tenofovir disoproxil fumarato Per comprendere la distribuzione del tessuto mucosale di tenofovir alafenamide e le sue implicazioni per la profilassi pre-esposizione, abbiamo caratterizzato tenofovir-dp nel tratto genitale femminile (FGT) e nei tessuti gastrointestinali inferiori (GI). Alle donne sieronegative sane sono stati somministrati 5, 10 o 25 mg di tenofovir alafenamide ( n = 8/gruppo). Ogni partecipante ha fornito campioni di plasma, PBMC e tessuto cervicale, vaginale e rettale per 14 giorni. Le concentrazioni di plasma, lisato cellulare e omogenato tissutale sono state analizzato mediante LC-MS/MS. La proporzionalità della dose è stata dichiarata nel plasma e nelle PBMC se l'AUC del log naturale rispetto alla linea di regressione della dose del log naturale del 90% IC era compresa tra 0,57-1,43. La formazione di tenofovir-dp in vitro era asse ssed in PBMC e cellule ectocervicali (Ect1/E6E7) e vaginali (VK2/E6E7) incubate in tenofovir alafenamide o tenofovir 0,5 e 10 μM. Clinicaltrials. gov: NCT02357602. Dopo dosi singole di 5, 10 e 25 mg, l'AUC plasmatica mediana (IQR) di tenofovir 0-14 giorni è stata 52,8 (49,5-59,6), 78,1 (68,2-86,9) e 169,7 (131,2-211,4) ng·h/mL e tenofovir -dp PBMC AUC 0-14 giorni era 2268 (1519-4090), 4584 (3113-5734) e 9306 (6891-10785) fmol·h/10 6 cellule, rispettivamente. Tenofovir era quantificabile nel 52% e nel 92% dei tessuti FGT e GI, mentre tenofovir-dp era quantificabile solo nel 5% e nel 19% dei tessuti FGT e GI, rispettivamente. Tenofovir plasmatico e PBMC tenofovir-dp erano proporzionali alla dose (90% CI = 0,87-1,15 e 0,62-1,02, rispettivamente). In vitro tenofovir-dp era 1,7-17 volte più alto nelle cellule epiteliali rispetto alle PBMC. Dopo la somministrazione di tenofovir alafenamide in vivo, tenofovir-dp non era quantificabile nella maggior parte dei tessuti (91%) sebbene le cellule epiteliali cervicali e vaginali formassero efficacemente tenofovir-dp da tenofovir alafenamide in vitro. Questi risultati giustificano ulteriori indagini sulla farmacologia di tenofovir alafenamide.
Interazioni residuo-residuo che regolano i cambiamenti di conformazione della mano EF indotta da Ca2+ nella calmodulina.Calmodulina (CaM) è una proteina messaggera legante il Ca2+ avente quattro motivi di legame del Ca2+ denominati \'EF-hand\'; i motivi della mano EF subiscono un cambiamento di conformazione indotto dal legame del Ca2+ Per studiare come il legame del Ca2+ induce il cambiamento di conformazione dei motivi della mano EF e quali residui sono coinvolti nella reazione, sono state eseguite indipendentemente due simulazioni MD della durata di 1μ di secondo dall'apo- e olo-CaM e le loro strutture e interazioni sono state confrontate. Il legame Ca2+ indebolisce l'interazione elica-elica in tutte le mani EF, tuttavia, l'olo- CaM MD ha adottato la forma close-like. I coefficienti di correlazione ottenuti dai due MD mostrano che i residui comprendenti interazioni sono coinvolti nei loro cambiamenti di conformazione close-open; la maggior parte di questi residui sono amminoacidi idrofobici ma alcuni di essi sono idrofili (T34, H107 , N111 e Q143). Ci si aspetta che i residui dropilici blocchino le mani EF tramite le loro catene laterali e l'ossigeno carbonilico della catena principale di un altro residuo idrofobo. Inoltre, il modello di interazione di EF-hand3 e 4 è simile tra loro. D'altra parte, il modello di interazione di EF-hand2 è diverso dagli altri; i suoi residui polari dovrebbero svolgere un ruolo importante nella regolazione della conformazione EF-hand2.
Lo studio European Lead Extraction ConTRolled (ELECTRa): un registro dell'European Heart Rhythm Association (EHRA) dei risultati dell'estrazione transvenosa del piombo.The European Lead Extraction ConTRolled Registry (ELECTRa), è un registro prospettico di procedure consecutive di estrazione transvenosa di piombo (TLE) condotte dalla European Heart Rhythm Association (EHRA) al fine di identificare la sicurezza e l'efficacia dell'attuale pratica della TLE. I centri europei che eseguono TLE, invitati dal comitato organizzatore per conto dell'EHRA, ha reclutato prospetticamente tutti i pazienti consecutivi sottoposti a TLE presso il loro istituto. L'endpoint primario era la sicurezza della TLE definita dalle complicanze maggiori correlate alla procedura prima della dimissione, inclusa la morte. Gli endpoint secondari includevano il successo clinico e radiologico e i tassi complessivi di complicanze I risultati sono stati confrontati tra centri a basso volume (LoV) e centri ad alto volume (HiV) (LoV < 30 e HiV ≥ 30 procedure/anno). Un totale di 3555 con pazienti secutive (pts) di cui 3510 sono stati sottoposti a TLE in 73 centri in 19 paesi europei sono stati arruolati tra novembre 2012 e maggio 2014. L'endpoint primario del tasso di complicanze maggiori correlate alla procedura in ospedale era dell'1,7% [IC 95% 1,3-2,1% ] (58/3510 pz) inclusa una mortalità dello 0,5% [IC 95% 0,3-0,8%] (17/3510 pz). Circa due terzi (37/58) di queste complicanze si sono verificati durante la procedura e un terzo (21/58) nel periodo post-operatorio. Le complicanze più comuni correlate alla procedura erano quelle che richiedevano pericardiocentesi o sondino toracico e/o riparazione chirurgica (1,4% [IC 95% 1,0-1,8%]). Le percentuali di successo clinico e radiologico completo sono state rispettivamente del 96,7% [IC al 95% 96,1-97,3%] e del 95,7% [IC al 95% 95,2-96,2%]. Le complicanze e i decessi maggiori in ospedale per tutte le cause erano significativamente inferiori nei centri HiV rispetto ai centri LoV (2,4% [IC 95% 1,9-3,0%] vs 4,1% [IC 95% 2,7-6,0%], P = 0,0146 e 1,2% [IC 95% 0,8-1,6%] vs 2,5% [IC 95% 1,5-4,1%] P = 0,0088), sebbene quelli relativi alla procedura non abbiano raggiunto la significatività statistica. I successi radiologici e clinici erano più frequenti nei centri HiV rispetto a LoV. Lo studio ELECTRa è il più grande registro prospettico sulla TLE e ha confermato la sicurezza e l'efficacia dell'attuale pratica della TLE. L'estrazione dell'elettrocatetere è stata associata a un tasso di successo più elevato con minori complicanze per tutte le cause e tassi di mortalità ad alto volume rispetto ai centri a basso volume.
Effetti delle precipitazioni e della temperatura sulla dinamica delle popolazioni di mosca stabile (Diptera: Muscidae).La dinamica della mosca stabile, Stomoxys calcitrans (L. ), popolazioni relativi alla temperatura e alle precipitazioni sono stati valutati in uno studio di 13 anni nel Nebraska orientale. Durante il corso dello studio, sono stati raccolti >1.7 milioni di mosche stabili su una serie di 25 trappole adesive. Un modello log-normale che utilizza gradi-giorno con una soglia di 15°C e ritardi settimanali 0-4 per la temperatura e 2-7 per le precipitazioni hanno fornito la migliore corrispondenza con i dati osservati. Le relazioni tra temperatura e precipitazioni e catture stabili con trappole per mosche erano entrambe curvilinee, con massimi a 6,6 gradi- giorno-15 (≈22 °C) e 7,4 mm di precipitazioni al giorno, rispettivamente. Il modello di temperatura e precipitazioni ha rappresentato il 72% della variazione nelle catture stagionali con trappole.
Meccanismi molecolari di resistenza agli antibiotici basati su biofilm e tolleranza nei batteri patogeni.I biofilm sono gruppi di cellule microbiche attaccati alla superficie racchiusi in una matrice extracellulare che sono significativamente meno suscettibili agli agenti antimicrobici rispetto alle cellule planctoniche non aderenti. Di conseguenza, le infezioni da biofilm sono estremamente difficili da curare. Un'ampia gamma di meccanismi molecolari contribuisce all'alto grado di recalcitranza caratteristico delle comunità di biofilm. Questi meccanismi includono, tra gli altri, l'interazione degli antimicrobici con i componenti della matrice del biofilm, ridotti tassi di crescita e le varie azioni di specifici determinanti genetici della resistenza e della tolleranza agli antibiotici. Da solo, ciascuno di questi meccanismi spiega solo in parte l'aumento della recalcitranza antimicrobica osservata nei biofilm. Agendo di concerto, però, queste difese aiutano a garantire la sopravvivenza delle cellule del biofilm di fronte anche alle più aggre ssivi regimi di trattamento antimicrobico. Questa recensione riassume i dati scientifici sia storici che recenti a sostegno dei noti meccanismi di resistenza e tolleranza del biofilm. Inoltre, vengono forniti suggerimenti per futuri lavori sul campo.
Dai favori ai diritti: voce e azione della comunità e qualità dei servizi sanitari in Zambia.La responsabilità sociale è sempre più invocata come un modo per migliorare i servizi sanitari. Questo articolo presenta uno studio qualitativo basato sulla teoria del contesto, dei meccanismi e dei risultati di un programma di responsabilità sociale, Citizen Voice and Action (CVA), implementato da World Vision (WV) in Zambia. I dati primari sono stati raccolti tra novembre 2013 e gennaio 2014. Comprendeva interviste approfondite e discussioni di focus group con le parti interessate del programma. I dati secondari sono stati utilizzati in modo iterativo per informare il processo di raccolta dei dati primari, per guidare l'analisi dei dati primari e per contestualizzare i risultati dai dati primari. Il CVA ha avuto un impatto positivo sullo stato, società, relazioni Stato-società e coordinamento dello sviluppo a livello locale. In particolare, miglioramenti sostenuti in alcuni aspetti della reattività del sistema sanitario, responsabilizzazione dei cittadini, miglioramento delle disposizioni n di beni pubblici (servizi sanitari) e un maggiore consenso sui temi dello sviluppo sembravano derivare dal CVA. La sfida centrale descritta dagli intervistati e dai partecipanti alla FGD era l'incapacità del CVA di affrontare i problemi che richiedevano un input a livello centrale. I meccanismi che hanno generato questi risultati includevano una comunicazione produttiva Stato-società, una maggiore fiducia e la coproduzione di priorità tra Stato e società e la fornitura di servizi. Questi meccanismi sono stati attivati nel contesto delle strutture esistenti per l'interazione stato-società, leader politici volenterosi, consenso dei leader tradizionali e forte reputazione e accesso alle risorse di WV\'. La ricerca osservativa prospettica in più contesti getterebbe più luce sul contesto, sui meccanismi e sui risultati dei programmi CVA. Oltre ai risultati intuitivi e ben supportati in letteratura, abbiamo identificato nuove aree che sono aree promettenti per la ricerca futura. Questi includono (1) il contesto della reputazione organizzativa da parte dell'organizzazione o delle organizzazioni che guidano gli sforzi di responsabilità sociale; (2) la potenziale relazione tra gli sforzi in materia di responsabilità sociale e la realizzazione di programmi nazionali ambiziosi operativi in prima linea nel sistema sanitario e (3) la fattibilità dell'ampliamento per determinati tipi di reattività a livello locale.
Sorveglianza basata su WGS di Escherichia coli resistente alle cefalosporine di terza generazione da infezioni del flusso sanguigno in Danimarca.Valutare una sorveglianza basata sul genoma di tutti i danesi Escherichia coli di terza generazione resistente alle cefalosporine (3GC-R Ec ) da infezioni del flusso sanguigno tra il 2014 e il 2015, concentrandosi sui meccanismi di resistenza trasferibili orizzontalmente. Una raccolta di 552 isolati 3GC-R Ec è stata sequenziata dell'intero genoma e caratterizzata utilizzando il batch uploader dal Center for Genomic Epidemiology (CGE) e analizzati automaticamente utilizzando gli strumenti CGE in base al profilo di resistenza, MLST, sierotipo e sottotipo fimH. Inoltre, la relazione filogenetica degli isolati è stata analizzata mediante analisi SNP. La maggior parte dei 552 isolati erano ESBL produttori (89%), con bla CTX-M-15 come gene più diffuso (50%), seguito da bla CTX-M-14 (14%), bla CTX-M-27 (11%) e bla CTX- M-101 (5%). ST131 è stato rilevato nel 50% degli isolati di E. coli es, con i restanti isolati appartenenti ad altri 73 ST, inclusi ST diffusi a livello globale (ad es. ST10, ST38, ST58, ST69 e ST410). Cinque degli isolati del sangue erano produttori di carbapenemasi, portatori di bla OXA-181 (3) e bla OXA-48 (2). L'analisi filogenetica ha rivelato 15 possibili focolai nazionali durante il periodo di 2 anni, uno causato da un nuovo clone ST131/bla CTX-M-101, qui osservato per la prima volta in Danimarca. Inoltre, l'analisi ha rivelato tre casi individuali con possibile persistenza di cloni strettamente correlati raccolti a più di 13 mesi l'uno dall'altro. La sorveglianza nazionale continua di 3GC-R Ec basata su WGS, in combinazione con informazioni epidemiologiche più dettagliate, può migliorare la capacità di seguire la dinamica della popolazione di 3GC-R Ec, consentendo così l'individuazione di potenziali focolai e gli effetti del cambiamento dei regimi di trattamento nel futuro.
Effetti del tasso di azoto sull'espressione di Cry3Bb1 e Cry3Bb1 + Cry34/35Ab1 nelle radici di mais transgenico, conseguente danno alle radici e comparsa di scarafaggi della diabrotica del mais.Azoto ( N) i tassi di applicazione sono stati storicamente raccomandati per la massima resa economica del mais (Zea mays L. ), ma non per l'espressione ottimale o l'impatto delle proteine Cry Bt (Bacillus thuringiensis Berliner) sugli insetti bersaglio. regolare i tassi di N per ottimizzare l'espressione della proteina Bt (Bt-RW) attiva dalla diabrotica del mais in un ibrido a tratto singolo e piramidale e gli impatti risultanti sull'emergenza del coleottero e sulla lesione delle radici, in condizioni di campo. L'esperimento prevedeva un accordo di trattamento fattoriale in un disegno a blocco completo randomizzato a trama divisa con sei tassi N come grafici principali e tre ibridi (MON88017 che esprime Cry3Bb1, MON88017 x DAS-59122 che esprime Cry3Bb1 + Cry34/35Ab1 e un ibrido non-Bt-RW) come sottotrame. Le radici di mais sono state campionate all'inizio di, a e dopo, picco di alimentazione larvale per determinare i livelli di espressione di Bt utilizzando un test di immunoassorbimento enzimatico. I coleotteri sono stati raccolti ogni 2-3 giorni durante l'emergenza utilizzando gabbie di emergenza per piante recise. L'espressione di Cry3Bb1 è stata significativamente ridotta quando è stato applicato poco o nessun N. L'espressione di Cry34Ab1 e Cry35Ab1 era altamente variabile e non influenzata dal tasso di N. L'emergenza del coleottero è aumentata con il tasso di N nell'ibrido non-Bt-RW mentre il danno alla radice è diminuito. A condizione che gli ibridi Bt-RW avessero applicato N sufficiente, il danno alla radice era relativamente basso. I risultati indicano che la gestione dell'N potrebbe influenzare l'espressione di Bt-RW e il successo dei piani di gestione della resistenza agli insetti a condizione che l'N sia applicato a tassi che migliorano la produzione di coleotteri sensibili che emergono dall'ibrido non Bt-RW (rifugio) e raggiungano l'espressione e l'efficacia ottimali di Tratti Bt.
Diversità genetica e struttura della popolazione di Varronia curassavica: una specie poliploide medicinale in un ecosistema minacciato.La Varronia curassavica è un'importante specie medicinale associata al resta , uno degli ecosistemi costieri più minacciati della Foresta Atlantica. Queste circostanze richiedono studi volti a stimare le dimensioni effettive della popolazione e il flusso genico per migliorare gli sforzi di conservazione. Quindi, il presente studio mirava a caratterizzare la diversità genetica, il livello di ploidia e la struttura della popolazione di questa specie in diverse aree di resta utilizzando microsatelliti. Varronia curassavica è stata caratterizzata come un autotetraploide, con elevata variabilità genetica, bassa divergenza e nessun indice di fissazione significativo, indicando l'assenza o la riduzione di consanguineità e deriva genetica nell'area di studio. Circa il 44% degli alleli si è verificato a bassa frequenza negli adulti di tutte le popolazioni e il 41% nelle progenie valutate. Il flusso genico era alto, co nsistente con specie incrociate con elevata capacità di dispersione (Nm = 4,87). I risultati non hanno mostrato alcuna tendenza all'isolamento per distanza. La dimensione effettiva stimata indica che le popolazioni studiate hanno il potenziale per garantire la conservazione della specie a lungo termine. La variabilità genetica e la struttura della popolazione di V. curassavica, come determinato in questo studio, potrebbero costituire la base per attività volte all'uso sostenibile di questa risorsa e alla sua conservazione. Anche se l'ecosistema resta ha subito drastiche riduzioni di area, questo studio fornisce la prova che questa specie è resistente alle minacce antropiche alla sua integrità genetica, poiché è un poliploide con meccanismi di autoincompatibilità che contribuiscono a mantenere un'elevata diversità genetica in un meta panmittico. -popolazione lungo la costa di Santa Catarina.
Costo-efficacia di una campagna di auto-raccolta HPV in Uganda: confronto tra modelli per lo screening del cancro della cervice uterina in un ambiente a basso reddito.Con la disponibilità di un test del DNA dell'HPV a basso costo che può essere somministrato da un operatore sanitario o da una donna stessa, i pianificatori del programma richiedono informazioni sui costi e sull'efficacia in termini di costi dell'implementazione di programmi di screening del cancro cervicale in contesti con risorse limitate con diversi modelli di erogazione dell'assistenza sanitaria Utilizzando i dati del progetto dimostrativo START-UP e un approccio di micro-costo, abbiamo stimato l'impatto sulla salute e l'impatto economico di una campagna di raccolta di HPV una tantum relativa alla raccolta di campioni di HPV in clinica. in Uganda. Abbiamo utilizzato un modello di simulazione Monte Carlo su base individuale della storia naturale dell'HPV e del cancro della cervice uterina per stimare i risultati sanitari ed economici nel corso della vita associati allo screening con il test del DNA dell'HPV una volta nella vita (clinica-base d provider-raccolta vs una campagna di auto-raccolta). Le prestazioni dei test ei dati sui costi sono stati ottenuti dal progetto dimostrativo START-UP utilizzando un approccio di micro-costo. I risultati del modello includevano il rischio a vita di cancro cervicale, i costi totali della vita (in dollari internazionali del 2011 [I$]) e l'aspettativa di vita. I rapporti di costo-efficacia sono stati espressi utilizzando rapporti di costo-efficacia incrementali (ICER). Quando entrambe le strategie hanno raggiunto il 75% di copertura della popolazione, gli ICER erano inferiori al PIL pro capite dell'Uganda (auto-raccolta: I$80 per anno di vita salvata [YLS]; provider-raccolta: I$120 per YLS). Quando la campagna di raccolta automatica ha raggiunto guadagni di copertura del 15-20%, è stata più efficace della raccolta tramite provider e ha avuto un ICER inferiore a meno che la copertura con entrambe le strategie fosse del 50% o meno. I risultati erano sensibili alla compliance alla crioterapia tra le donne positive allo schermo e alle relative prestazioni del test HPV. Il limite principale di questa analisi è che i costi di auto-raccolta si basano su un'ipotetica campagna ma si basano sui costi unitari dell'Uganda. Lo screening irripetibile con l'auto-raccolta dell'HPV può essere molto conveniente e ridurre il rischio di cancro della cervice uterina del > 20% se la copertura è elevata. Saranno necessari progetti dimostrativi per confermare la validità delle nostre ipotesi di logistica, costi e conformità.
La gastrina sierica e la colecistochinina sono associate al successivo sviluppo di cancro gastrico in una potenziale coorte di fumatori finlandesi.Gastrina, che induce la secrezione acida gastrica, e un ormone strutturalmente simile, la colecistochinina (CCK), un potente inibitore dell'acido, può svolgere un ruolo nel cancro gastrico. Tuttavia, pochi studi hanno studiato questa ipotesi nell'uomo. Pertanto abbiamo studiato se le concentrazioni sieriche di gastrina o CCK al basale fossero associate con il incidenza di adenocarcinomi gastrici non cardiaci (GNCA), adenocarcinomi giunzionali esofagogastrici (EGJA) o tumori carcinoidi gastrici oltre 24 anni di follow-up in uno studio inserito nello studio alfa-tocoferolo, beta-carotene Cancer Prevention (ATBC) tutto maschile dei fumatori finlandesi. Nella nostra analisi sono stati inclusi un totale di 283 casi di GNCA incidenti, 96 EGJA e 10 casi di carcinoide gastrico e 778 controlli appaiati. La gastrina e la CCK sono state misurate utilizzando saggi radioimmunologici specifici. s ratio (OR) e intervalli di confidenza al 95% (IC al 95%) sono stati stimati mediante regressione logistica multivariata con aggiustamento per tutti i fattori confondenti noti o sospetti, inclusa la sieropositività per Helicobacter pylori. Quelli con gastrina alta (Q4 vs Q1), avevano un aumentato rischio di GNCA (OR completamente aggiustato: 1,92; 95% CI: 1,21, 3,05) e carcinoidi gastrici, sebbene il piccolo numero di casi di carcinoide significasse che il modello completamente aggiustato era instabile ( modello continuo aggiustato per età OR: 4,67; IC 95%: 2,67, 8,15). La CCK era associata al rischio di GNCA solo per quelli in Q3 rispetto a Q1 (OR: 0,56; 95% CI: 0,33, 0,96) e non è stata osservata alcuna tendenza significativa. I nostri dati suggeriscono che elevate concentrazioni sieriche di gastrina possono essere associate indipendentemente ad un aumentato rischio di cancro gastrico; il ruolo della CCK nel rischio di cancro è meno chiaro.
Disabilità tra le persone di mezza età e anziane con infezione da virus dell'immunodeficienza umana.Gli adulti più anziani con infezione da virus dell'immunodeficienza umana (HIV) possono sperimentare tassi più elevati di fragilità e disabilità rispetto alla popolazione generale. Una migliore comprensione della prevalenza, dei fattori di rischio e dei tipi di disabilità può informare meglio i fornitori e il sistema sanitario. Partecipanti con infezione da HIV all'interno dell'AIDS Clinical Trials Group A5322 Studio HAILO sulla disabilità auto-riferita dal Lawton -Brody Instrumental Activities of Daily Living Questionnaire (IADL). La fragilità è stata misurata da tempo di cammino di 4 m, forza di presa, perdita di peso auto-riferita, esaurimento e bassa attività. I modelli di regressione logistica hanno identificato le caratteristiche associate a qualsiasi compromissione IADL. Accordo tra La compromissione e la fragilità della IADL sono state valutate utilizzando la statistica kappa ponderata. Dei 1015 partecipanti, l'età media era di 51 anni, il 15% aveva un'età ≥ 60 anni, il 19% era di sesso femminile, il 29% di razza nera, un d 20% ispanico. Almeno 1 compromissione della IADL è stata segnalata nel 18% dei partecipanti, più comunemente con le pulizie (48%) e il trasporto (36%) e meno comunemente con la gestione dei farmaci (5%). Nei modelli multivariabili, una maggiore disabilità era significativamente associata a compromissione neurocognitiva, istruzione inferiore, assicurazione Medicare/Medicaid (rispetto a copertura privata/di altro tipo), fumo e bassa attività fisica. Sebbene una percentuale maggiore di partecipanti fragili avesse una compromissione della IADL (52%) rispetto alle persone non fragili (11%), l'accordo era scarso (kappa ponderato <0.18, intervallo di confidenza 95%, 0,13, 0,23). La disabilità da IADL si verifica frequentemente tra gli adulti con infezione da HIV di mezza età e più anziani in terapia antiretrovirale efficace. I fattori di rischio potenzialmente modificabili (fumo, attività fisica) forniscono obiettivi per gli interventi per mantenere una vita indipendente. Il riconoscimento sistematico delle persone a maggior rischio di disabilità può facilitare il collegamento a risorse che possono aiutare a preservare l'indipendenza.