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Il vaccino Macrobrachium rosenbergii nodavirus (MrNV)-CP-RNA-2 a DNA conferisce immunità protettiva al gambero gigante d'acqua dolce Macrobrachium rosenbergii contro l'infezione da MrNV.days post -vaccinazione (dpv) rispettivamente e monitorata per la sopravvivenza. Il M. rosenbergii non vaccinato è deceduto (100%) entro 5 giorni, mentre i gruppi trattati con MrNV-CP-RNA-2-pVAX1 hanno avuto sopravvivenze di 60 e 80 % rispettivamente a 20 e 40 dpv (P≤0,001). Per studiare il livello di infezione da MrNV, è stata eseguita una PCR a doppio passaggio a diversi dpv. I risultati hanno rivelato che nel gruppo da 20 dpv, l'infezione è stata ridotta al 65% e nel gruppo da 40 dpv l'infezione è diminuita al 69% da gamberi alimentati con dieta di controllo (P<0.001). Parametri ematologici come tempo di coagulazione, conteggio totale degli emociti (THC) e livelli di ossiemocianina sono stati eseguiti per il controllo e gamberi vaccinati. La vaccinazione ha contribuito a ridurre il tempo di coagulazione, miglioramento dei livelli di THC e ossiemocianina a livello significativo (p<0.001) rispetto al gruppo non vaccinato. Sono stati anche eseguiti i parametri immunologici come la profenolo ossidasi (ProPO), l'anione superossido e l'attività lisozima intra-agar e i risultati hanno rivelato che il livello di proPO, anione superossido e attività lisozima erano significativamente aumentati (P≤0,05) nei gruppi da 20 e 40 dpv rispettivamente, rispetto ai gruppi non vaccinati. Sulla base delle prove di vaccinazione, il costrutto del vaccino a DNA MrNV-CP-RNA-2-pVAX1 ha efficacemente migliorato la sopravvivenza contro la sfida MrNV, ha contribuito a ridurre la carica virale e ha potenziato il sistema immunitario per proteggere il gambero dall'infezione da MrNV. Questo costrutto vaccinale è molto utile per proteggere il M. rosenbergii dall'infezione da MrNV.
Campionamento della funzione di ingresso arterioso (AIF) dalle arterie periferiche: confronto di un metodo basato su caratteristiche temporospaziali con il metodo manuale convenzionale.Spesso è difficile localizzare accuratamente le piccole arterie nelle immagini degli organi periferici, e ancora di più con le anomalie vascolari vascolari, comprese le arterie collaterali, nella malattia delle arterie periferiche (PAD). Questo pone una sfida per il campionamento manuale della funzione di input arterioso (AIF) nella quantificazione dinamica del contrasto aumentata (DCE) dati MRI degli organi periferici. In questo studio, abbiamo progettato un approccio di screening multi-step che utilizza sia le informazioni temporali che spaziali delle immagini dinamiche ed è presumibilmente adatto per localizzare arterie periferiche piccole e imprevedibili. In 41 DCE MRI set di dati acquisiti dai muscoli del polpaccio umano, il metodo proposto ha impiegato in media <5s per il campionamento di AIF per ciascun caso, molto più efficiente del metodo di campionamento manuale; AIF con i due metodi erano comparabili, con coefficiente di correlazione di Pearson di 0,983±0,004 (valore p<0,01) e differenza relativa di 2,4%±2,6%. In conclusione, il metodo proposto basato sulle caratteristiche temporospaziali consente un campionamento efficiente e accurato dell'AIF dalle arterie periferiche e migliorerebbe la precisione della misurazione e la coerenza tra osservatori per la risonanza magnetica DCE quantitativa dei tessuti periferici.
Previsione del movimento a basso contrasto.Una previsione accurata del movimento è fondamentale per la sopravvivenza. Come si concilia con la nota sottostima della velocità del basso contrasto gli ha effettuato una saccade sulla posizione estrapolata mentalmente di un bersaglio in movimento (condizione dell'immagine). In un secondo esperimento, gli osservatori hanno dovuto prevenire le collisioni tra più bersagli in movimento lanciando loro un'occhiata attraverso un display con lo sguardo fisso o colpendoli con il cursore del touchpad ( condizione di interazione). In entrambi gli esperimenti, il contrasto del bersaglio è stato manipolato. Abbiamo scoperto che, mentre le saccadi sul bersaglio in movimento immaginato erano sistematicamente distorte dal contrasto, l'interazione dello sguardo nce, come misurato dalle collisioni mancate, era generalmente inalterato, anche se i bersagli a basso contrasto sembravano più lenti. Le azioni intercettive sono aumentate a basso contrasto, ma solo quando lo sguardo è stato utilizzato per l'interazione. Pertanto, la sottostima della velocità percettiva si trasferisce alle saccadi effettuate su bersagli immaginati a basso contrasto, senza tuttavia essere necessariamente dannoso per le prestazioni efficaci quando è richiesta l'interazione in tempo reale con più bersagli. Questo effetto differenziale del contrasto dello stimolo suggerisce che in condizioni dinamiche complesse le saccadi sono piuttosto tolleranti ai pregiudizi della velocità visiva.
Carenza di ferro e anemia in pazienti con disturbi emorragici ereditari.I pazienti con disturbi emorragici ereditari sono predisposti a perdite ematiche acute e croniche, il che li pone a alto rischio di anemia sideropenica (IDA). Gli effetti clinici della carenza di ferro (ID) e IDA nella popolazione generale sono significativi e comprendono bassa energia, ridotta salute cardiovascolare, disturbi cognitivi e ridotta qualità della vita correlata alla salute. l'incidenza e l'impatto di ID e IDA in pazienti con disturbi emorragici è in gran parte sconosciuto. Qui esaminiamo il nostro approccio alla diagnosi e alla gestione della carenza di ferro nei pazienti con disturbi emorragici ereditari. Dato il loro rischio di future perdite di ferro, proponiamo un'integrazione di ferro più aggressiva e valori di ferritina target più elevati nei pazienti con ID e sanguinamento in corso.
Relazione tra RNA lunghi non codificanti e malattia di Alzheimer: una revisione sistematica.La malattia di Alzheimer (AD), è una tipica malattia progressiva e distruttiva malattia neurodegenerativa È la principale causa di demenza senile che è rappresentata principalmente come sintomi neurocognitivi, tra cui deterioramento progressivo della memoria, disturbo cognitivo, cambiamento di personalità e barriera del linguaggio, ecc. La patogenesi e la nosogenesi dell'AD non sono state chiaramente spiegate. da placche senili extracellulari (SP) formate da deposizione di beta amiloide (Aβ) e grovigli neurofibrillari in cellule neuronali formati da iperfosforilazione di tau, nonché dalla carenza di neuronale con gliosi. Tuttavia, lo spettro completo dei fattori di regolazione a livello molecolare che influenzano la patogenesi dell'AD non è chiara. Gli RNA lunghi non codificanti (lncRNA) sono coinvolti in numerose malattie neurodegenerative, come il morbo di Parkinson (PD) e l'AD. È sempre più hanno riconosciuto che gli lncRNA sono strettamente correlati alla patogenesi e alla prevenzione e cura dell'AD. Nella revisione, abbiamo evidenziato i ruoli degli lncRNA nei percorsi dell'AD e discusso il crescente interesse per il targeting e la regolazione degli lncRNA per le terapie dell'AD.
Recenti progressi sui biosensori cellulari per l'analisi della sicurezza alimentare e del controllo della qualità.La qualità e la sicurezza degli alimenti è diventata un argomento di grande preoccupazione per le autorità e professionisti della filiera alimentare. I metodi rapidi, in particolare i biosensori, hanno specificità e sensibilità eccezionali, tempi di risposta rapidi, basso costo, dimensioni relativamente compatte e sono di facile utilizzo. I biosensori cellulari sono portatili e forniscono l'attività biologica dell'analita adatto per uno screening iniziale degli alimenti. In questa panoramica, vengono riassunti l'utilizzo di biosensori cellulari per la sicurezza alimentare e analisi di qualità, come il rilevamento di tossine, agenti patogeni di origine alimentare, allergeni e la valutazione della tossicità e della funzione. I nostri risultati saranno promuovere il futuro sviluppo di biosensori cellulari nel campo alimentare.
Aptasensore semplice, a basso costo, sensibile e privo di etichette per il rilevamento della troponina I cardiaca basato su una lamina di titanio modificata con nanoparticelle d'oro.Questo La ricerca ha dimostrato la modifica elettrochimica del substrato metallico di titanio (Ti) a basso costo con nanoparticelle d'oro (AuNPs) per il rilevamento basato su aptameri della troponina cardiaca I (cTnI). Gli AuNP sono stati depositati su fogli di Ti mediante il metodo di deposizione a potenziale densità e omogeneità nonché buona cristallinità. È stato quindi applicato come trasduttore per immobilizzare un aptamero di DNA tiolico-funzionalizzato tramite il meccanismo del monostrato autoassemblato per il legame specifico di cTnI. Ciò è stato verificato mediante analisi elettrochimiche e morfologiche. L'aptasensor potrebbe rilevare cTnI in un intervallo lineare di 1-1100 pM con un limite di rilevamento di circa 0,18 pM. L'aptasensore ha mostrato un'elevata sensibilità e specificità a cTnI rispetto ad altri composti interferenti con buoni recuperi negli esseri umani diluiti campioni di erum.
Una piattaforma versatile per microchip di amplificazione isotermica loop-mediata per il test di Streptococcus pneumoniae e Mycoplasma pneumoniae presso il punto di cura.Polmonite acquisita in comunità (CAP) è la principale causa di mortalità nei bambini al di sotto dei cinque anni, a livello globale. Dato che Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) e Mycoplasma pneumoniae (M. pneumoniae) sono i patogeni più comuni associati a CAP che richiedono il ricovero ospedaliero, un semplice, a basso costo , metodo altamente sensibile è molto necessario per la diagnosi immediata e precoce della CAP. Qui riportiamo una piattaforma di chip microfluidico versatile integrata con amplificazione isotermica mediata da loop (LAMP) per il test simultaneo di S. pneumoniae e M. pneumoniae al punto di cura La piattaforma include un chip microfluidico in polimero/carta e un dispositivo portatile L'estrazione dell'acido nucleico basata su particelle magnetiche su chip viene utilizzata per la concentrazione di agenti patogeni\' DNA genomico ed è seguita da LA parlamentare. Il dispositivo portatile ha la funzione di riscaldare il chip microfluidico, fotografare e trasmettere il risultato a uno smartphone. L'estrazione completa del DNA utilizzando il chip microfluidico ha richiesto ~15 minuti rispetto a >1.5h con un metodo fenolo-cloroformio. La sensibilità analitica del saggio è stata determinata in 20 fg testando diluizioni seriali del DNA bersaglio che vanno da 2 ng a 2 fg per reazione. Abbiamo valutato la sensibilità clinica e la specificità del test IPµchip utilizzando 63 tamponi orofaringei selezionati casualmente e campioni di liquido di lavaggio broncoalveolare prelevati da bambini. Per confronto, questi campioni sono stati anche testati contro il test PCR in tempo reale (M. pneumoniae), il test PCR convenzionale (S. pneumoniae) e i test di coltura (S. pneumoniae). Questi risultati hanno prodotto valori predittivi positivi e negativi per il test di M. pneumoniae con la piattaforma IPµchip rispettivamente del 96,9% e del 100%. Rispetto a S. pneumoniae IPµchip, la sensibilità clinica di S. pneumoniae PCR e test di coltura era rispettivamente del 60% e del 40%, mentre la specificità clinica dei due test era del 100%. Questa versatile piattaforma IPµchip ha un grande potenziale per i test point of care di diversi tipi di agenti patogeni, in particolare per le nazioni in via di sviluppo.
Le cariche biomolecolari influenzano la risposta dei biosensori di risonanza plasmonica di superficie attraverso meccanismi elettronici e ionici.I biosensori di risonanza plasmonica di superficie (SPR) sono diventati un'importante etichetta- tecnologia di rilevamento biomolecolare ottico gratuito e un "gold standard" per il recupero di informazioni sulla cinetica delle interazioni biomolecolari. Anche se le biomolecole in genere contengono un'abbondanza di gruppi chimici facilmente ionizzabili, c'è una lacuna nella comprensione di se (e come) l'elettrostatica La carica di un sistema biomolecolare influenza la risposta del biosensore SPR In questo lavoro mostriamo che la carica statica negativa presente in uno strato biomolecolare sulla superficie di un sensore SPR provoca significativi spostamenti spettrali SPR e identifichiamo due principali meccanismi responsabili di tali spostamenti: 1) la formazione di un doppio strato elettrico (meccanismo ionico) e 2) cambiamenti nella densità elettronica sulla superficie di un metallo (meccanismo elettronico). ow che in condizioni di bassa forza ionica, il meccanismo elettronico è dominante e lo spostamento della lunghezza d'onda SPR è linearmente proporzionale alla concentrazione superficiale di cariche biomolecolari. In condizioni di elevata forza ionica, entrambi i meccanismi elettrici e ionici contribuiscono allo spostamento della lunghezza d'onda SPR. Usando il meccanismo elettronico, abbiamo stimato il pKa dei gruppi carbossilici legati alla superficie e la concentrazione relativa degli alcantioli carbossile-terminati in un monostrato binario autoassemblato di alcantioli. La sensibilità riportata di SPR alla carica superficiale è particolarmente importante nel contesto del rilevamento biomolecolare. Inoltre, fornisce una strada per l'applicazione di sensori SPR per la determinazione rapida e senza etichette della carica netta di un rivestimento biomolecolare, che è di interesse nella scienza dei materiali, nella chimica delle superfici, nell'elettrochimica e in altri campi.
Efficiente simulazione dei primi principi dei fattori di dispersione degli elettroni per la microscopia elettronica a trasmissione.La microscopia elettronica è un potente strumento per studiare le proprietà dei materiali fino al loro atomico struttura. In molti casi, l'interpretazione quantitativa delle immagini richiede simulazioni basate su modelli di struttura atomistica. Questi utilizzano tipicamente l'approssimazione dell'atomo indipendente che trascura gli effetti di legame, che possono, tuttavia, essere misurabili e di interesse fisico. Poiché tutti gli elettroni e i nuclei nucleari contribuiscono al potenziale di dispersione, le simulazioni che vanno oltre questa approssimazione si sono basate su calcoli computazionalmente altamente impegnativi di tutti gli elettroni. Qui, descriviamo un nuovo metodo per generare potenziali elettrostatici ab initio quando si descrivono gli elettroni del nucleo dalle funzioni del proiettore. Combinato con un'interfaccia per simulazioni di immagini quantitative, questa implementazione consente un mezzo facile e veloce per modellare la dispersione di elettroni ng. Confrontiamo immagini di microscopia elettronica a trasmissione simulata e modelli di diffrazione con dati sperimentali, mostrando un'accuratezza equivalente ai precedenti calcoli interamente elettronici a un costo computazionale molto più basso.
Filogenesi della supertribù dei coleotteri Trechitae (Coleoptera: Carabidae): cladi inaspettati, lignaggi isolati e convergenza morfologica.Utilizzo dei dati di due geni ribosomiali nucleari e quattro geni codificanti proteine nucleari, deduciamo una filogenesi ben risolta dei principali lignaggi della supertribù dei coleotteri carabidi Trechitae, basata su un campionamento di 259 specie. Patrobini è il gruppo gemello di Trechitae, ma il genere Lissopogonus sembra essere al di fuori di il clade Patrobini+Trechitae. Troviamo che quattro enigmatici generi di trechite dell'emisfero australe, Bembidarenas, Argentinatachoides, Andinodontis e Tasmanitachoides, formano un clade che è il gruppo gemello di Trechini; descriviamo questo clade come una nuova tribù, Bembidarenini. +Trechini formano il gruppo gemello dei restanti trechiti All'interno di Trechini, la sottotribù Trechodina non è monofiletica, poiché tre generi di trechidi dall'Australia (Trechobembix, Paratrechodes, Cyphotrechodes) sono i gruppo gemello della sottotribù Trechina. Sembra che Trechini abbia avuto origine nei continenti dell'emisfero australe, con quasi tutti i lignaggi dell'emisfero settentrionale che rappresentano una singola radiazione all'interno della sottotribù Trechina. Presentiamo prove moderate che i generi Sinozolus (sei specie nelle montagne della Cina), Chaltenia (una specie in Argentina e Cile) e Phrypeus (una specie nel Nord America occidentale) geograficamente e filogeneticamente isolati formano anche un clade, la tribù Sinozolini. La tribù tradizionalmente riconosciuta Bembidiini sens. il lat. , diagnosticato dalla presenza di un palpomero terminale subulato, si dimostra polifiletico; subulate palpomeres sono sorti cinque volte all'interno di Trechitae. Anillini è monofiletico, e il gruppo gemello di Tachyini+Pogonini+Bembidiini+Zolini+Sinozolini; all'interno delle aniline, confermiamo risultati precedenti che indicavano il genere neozelandese dagli occhi Nesamblyops come sorella del resto. I Pogonini del Nuovo Mondo campionati sono monofiletici, il che rende il genere Pogonus non monofiletico. Tachyina e Xystosomina sono gruppi fratelli. All'interno di Xystosomina, i membri del Nuovo Mondo sono monofiletici e sono fratelli di un clade Australia-Nuova Zelanda. Quest'ultimo è costituito dal genere Philipis e da taxa non precedentemente riconosciuti come xystosomines: Kiwitachys, il gruppo "Tachys" ectromioides e "Tachys" mulwalensis. All'interno di Tachyina, il sottogenere Elaphropus non è strettamente correlato ad altri sottogeneri precedentemente collocati nel genere Elaphropus; spostiamo gli altri sottogeneri nel genere Tachyura. Tachyina con un mento bifoveato non forma un clade; un mento bifoveato si trova infatti in Xystosomina, Sinozolini, Trechini, Trechitae e nel suo gruppo gemello, Patrobini. Un'ampia omoplasia nei caratteri morfologici precedentemente utilizzati come indicatori chiave di relazione è supportata dai nostri risultati: oltre a molteplici origini di palpomeri subulati e menta bifoveate, una tacca protibiale concava è sorta indipendentemente in Anillina, Xystosomina e Tachyina. Filogeneticamente e geograficamente isolati, i lignaggi poveri di specie in Trechini, Bembidarenini e Sinozolini possono essere relitti di faune più diffuse; molti di questi si trovano oggi sulle rive ghiaiose o sabbiose di torrenti e fiumi, che potrebbero essere un habitat ancestrale per porzioni di Trechitae. Oltre alla descrizione di Bembidarenini, presentiamo una diagnosi dei Sinozolini appena delimitati e le chiavi delle tribù di Trechitae.
Biogeografia del viroma nel tratto gastrointestinale inferiore dei macachi rhesus con diarrea cronica.La composizione dei viromi del tratto gastrointestinale è stata associata a molteplici malattie. La nostra comprensione delle comunità virali nel tratto gastrointestinale è ancora molto limitato a causa delle difficoltà nel campionamento da diversi siti gastrointestinali. Qui abbiamo definito i viromi gastrointestinali di 15 macachi rhesus con diarrea cronica. Campioni di contenuto luminale dall'ileo terminale, dal colon prossimale e distale sono stati raccolti alla necroscopia mentre i campioni dal retto sono stati raccolti antemortem utilizzando un'ansa fecale. La composizione e i parametri ecologici associati al viroma dell'ileo terminale erano distinti dai campioni del colon e del retto; queste differenze erano guidate dai batteriofagi piuttosto che dai virus eucarioti. più discriminanti dei viromi erano lontanamente imparentati con batteriofagi di tre diverse famiglie. La nostra analisi ci fornisce supporto campionamento del ciclo fecale del retto come proxy del viroma del colon negli esseri umani.
La somministrazione di probiotici autoctoni ha alterato lo stato di salute della trota iridea giovanile Oncorhynchus mykiss, le prestazioni di crescita e la resistenza a Lactococcus garvieae, un'infezione sperimentale.per 60 giorni. I nostri risultati hanno indicato che i probiotici, in particolare L. acidophilus e L. bulgaricus, sono coinvolti nel miglioramento delle prestazioni di crescita di questa specie rispetto al gruppo di controllo. gruppi rispetto al controllo. Le attività del lisozima sierico e del complemento erano più elevate nei pesci alimentati con probiotici, mentre cambiamenti simili non sono stati osservati nel caso dell'attività battericida e della riduzione del Nitroblue Tetrazolium (NBT). È stata osservata una migliore colonizzazione dei batteri lattici nell'intestino dei pesci in seguito Amministrazioni di L. acidophilus e L. bulgaricus (P<0.001) Attività degli enzimi digestivi dell'intestino, tra cui amilasi, tripsina, lipasi e la fosfatasi alcalina era elevata in modo significativo o insignificante mentre l'attività della proteasi non agiva allo stesso modo. Tutti i trattamenti probiotici hanno portato a un aumento lieve o forte (P<0.001) delle citochine e delle espressioni geniche della crescita dell'intestino rispetto al gruppo di controllo. Attività antagoniste in vitro più elevate di L. acidophilus e L. bulgaricus contro il Lactococcus garvieae sono state coincidenti con il test di provocazione in vivo. La percentuale relativa di sopravvivenza (RPS) è stata ottenuta rispettivamente di 63,71 e 51,56 per L. bulgaricus e L. acidophilus, che erano più alte nei pesci trattati rispetto ai pesci di controllo. I nostri risultati possono suggerire che i probiotici, applicati qui, possono promuovere le prestazioni di crescita migliorando l'attività degli enzimi digestivi, la microflora intestinale e l'espressione genica della crescita. L'aumento delle proteine regolatrici immunitarie può aumentare le risposte immunitarie non specifiche e la resistenza batterica anche in questa specie.
Il dsRNA trascritto in vitro limita l'infezione da virus della setticemia emorragica virale (VHSV)-IVb in una nuova linea cellulare cutanea di pesciolini a testa grossa (Pimephales promelas)./ ml dopo solo 2 giorni. Le cellule FHMskin non sperimentano una morte significativa indotta da dsRNA dopo il trattamento con 50-500ng/mL di dsRNA trascritto in vitro per 48 ore e rispondono al trattamento con dsRNA esprimendo alti livelli di tre geni immunitari innati, viperina, ISG15 e Mx1. Il pretrattamento con dsRNA per 24 ore ha protetto in modo significativo le cellule dalla morte cellulare indotta da VHSV, 500 ng/mL di dsRNA ha ridotto la morte cellulare dal 70% a meno del 15% con una molteplicità di infezione di 0,1. Pertanto, il romanzo la linea cellulare, FHMskin, rappresenta un nuovo metodo per produrre alte gomme di VHSV-IVb in coltura e per studiare le risposte antivirali innate indotte da dsRNA, con future applicazioni in terapie antivirali basate su dsRNA.
Effetti di Bacillus subtilis e alghe Shewanella alimentari nel profilo di espressione di geni immuno-correlati dall'emolinfa di Litopenaeus vannamei sfidato con Vibrio parahaemolyticus.CFU di S. alghe per grammo di mangime commerciale e Controllo (senza aggiunta batterica). Quindi, gli animali sono stati sottoposti ad un challenge di V. parahaemolyticus. A questo scopo sono stati stabiliti quattro trattamenti: Controllo (gamberetti non sottoposti a trattamenti probiotici), Vibrio (Vibrio gamberetto sfidato), Vibrio + Bs (gambero sfidato Bs) e Vibrio + Sa (gambero sfidato Sa). L'emolinfa di gambero è stata campionata 45 giorni dopo l'allevamento e 24 ore dopo la sfida per la quantificazione di profenolossidasi (proPO), lipopolisaccaride e β-1 ,3-glucano-binding protein (LGBP) e trascrizioni di emocianina (HEM) mediante qPCR. Inoltre, sono stati verificati anche il peso finale e la sopravvivenza dei gamberetti. La somministrazione di B. subtilis ha migliorato la crescita dei gamberetti e ha migliorato i livelli di espressione di proPO, LGBP e HEM prima e dopo terza sfida. Dopo 60 giorni di alimentazione, il peso finale di Sa era superiore al controllo, mentre la mortalità cumulativa di Vibrio + Sa dopo 48 h di challenge con Vibrio era inferiore rispetto al gruppo Vibrio. Questi risultati potrebbero essere correlati con la regolazione verso l'alto di proPO e LGBP in Vibrio + Sa rispetto al gruppo Vibrio, proteggendo L. vannamei dall'infezione batterica. Insieme, questi risultati suggeriscono il potenziale probiotico delle alghe B. subtilis e S. nella modulazione dei geni immuno-correlati come strumento per controllare l'infezione da V. parahaemolyticus all'interno dei gamberetti.
Studio comparativo della -timosina in due specie di capesante Argopecten irradians e Chlamys farreri.Le proteine -timosina (Tβ) partecipano a numerosi processi biologici , come la proliferazione e la differenziazione cellulare, il meccanismo antinfiammatorio e antimicrobico. Ad oggi, le proteine Tβ sono state ben studiate nei vertebrati, in particolare nei mammiferi. Mentre negli invertebrati sono state riportate proteine T o simili a Tβ limitate. Inoltre, rare informazioni di Tβ o proteine simili a Tβ è ancora disponibile nelle specie di capesante. Nel presente studio, due omologhi Tβ, AiTβ e CfTβ, sono stati identificati e caratterizzati da due specie di capesante bay capesante Argopecten irradians e Zhikong capesante Chlamys farreri. Erano entrambi 41 aminoacidi peptide e conteneva un dominio THY, un motivo di legame all'actina altamente conservato e due regioni di formazione dell'elica conservate. La distribuzione dei tessuti e i profili di espressione delle loro trascrizioni di mRNA erano approssimativamente simili ma diversi nei dettagli, mentre le loro proteine ricombinanti hanno mostrato una diversa attività di immunomodulazione sui parametri immunitari a valle. Questi risultati indicavano collettivamente che la funzione della famiglia Tβ nella capesante era differenziata dal punto di vista funzionale.
Purezza per progettazione: riduzione delle impurità nella bioproduzione mediante downregulation traduzionale globale controllato da stimolo di proteine non prodotte.Capitalizzare la capacità delle cellule di mammifero di conducono complesse modifiche post-traduzionali, la maggior parte delle proteine terapeutiche sono attualmente prodotte in sistemi di coltura cellulare. L'aggiunta di un peptide segnale alla proteina del prodotto consente il suo accumulo nel surnatante della coltura cellulare, ma la separazione del prodotto dalle proteine secrete endogenamente rimane costosa e richiede manodopera. Abbiamo ritenuto che la downregulation globale della traduzione di proteine non di prodotto sarebbe una strategia efficiente per ridurre al minimo i requisiti di elaborazione a valle. Pertanto, sfruttando la capacità della proteina chinasi R dei mammiferi (PKR) di spegnere la maggior parte dei processi di traduzione cellulare in risposta a infezione da virus, abbiamo fuso un dominio di dimerizzazione inducibile dalla caffeina al dominio catalitico di PKR. Il costrutto s determina l'omodimerizzazione e l'attivazione della PKR, ricablando efficacemente la rapida downregulation traslazionale globale all'aggiunta dello stimolo in modo dose-dipendente. Quindi, per proteggere la traduzione del target terapeutico, abbiamo esaminato i siti di ingresso ribosomiale interno virale e cellulare (IRES) noti o sospettati di essere resistenti allo stress traslazionale indotto da PKR. Dopo aver scelto il miglior IRES del virus della valle di Seneca (SVV), abbiamo inoltre esaminato i fattori di transattivazione IRES (ITAF) e le piccole molecole supplementari per aumentare ulteriormente il titolo di produzione della proteina del prodotto in condizioni di downregulation traslazionale globale. È importante sottolineare che l'attività di traduzione globale residua di circa il 10% in condizioni di massima downregulation è sufficiente per mantenere la vitalità cellulare durante un periodo di produzione di almeno cinque giorni. Linee cellulari aderenti standard utilizzate a livello industriale e adattate alla sospensione trasfettate con questo sistema di produzione proteica R-Enhanced Protein Kinase R-Enhanced Production (PREPP) ispirato alla biologia sintetica potrebbero produrre diverse proteine terapeutiche rilevanti dal punto di vista medico, come il farmaco di successo rituximab, in quantità sostanziali e con purezza significativamente maggiore rispetto alle precedenti tecnologie di coltura. Riteniamo che l'incorporazione di tale tecnologia basata sulla purezza nel processo di produzione allevierà i colli di bottiglia della lavorazione a valle nella futura produzione biofarmaceutica.
Microsistema nanofluidico per la somministrazione intraoculare prolungata di terapie.A livello globale, 145,2 milioni di persone soffrono di disabilità visiva da moderata a grave o cecità a causa di cause prevenibili o curabili Tuttavia, l'aderenza del paziente al trattamento topico o intravitreale è una delle principali cause di scarsi risultati. Per affrontare questo problema, abbiamo progettato un dispositivo impiantabile intraoculare chiamato Nanofluidic Vitreal System for Therapeutic Administration (nViSTA) per il rilascio continuo e controllato del farmaco basato su un nanocanale membrana che elimina la necessità di pompe o attivazione. L'analisi del rilascio in vitro ha dimostrato che il nostro dispositivo raggiunge il rilascio prolungato di bimatoprost (BIM) e desametasone (DEX) a concentrazioni all'interno della finestra terapeutica clinicamente rilevante. In questa prova di studio concettuale, abbiamo costruito un anatomico simile in silico modello di occhio umano per simulare il rilascio di DEX dal nostro impianto e ottenere informazioni sulla farmacocinetica intraoculare profilo cs. Nel complesso, il nostro impianto intraoculare farmaco-agnostico rappresenta una piattaforma potenzialmente praticabile per il trattamento a lungo termine di varie malattie oftalmologiche croniche, tra cui l'edema maculare diabetico e l'uveite.
Il deficit di SIL1 provoca alterazioni degenerative dei nervi periferici e delle giunzioni neuromuscolari nei pesci, nei topi e nell'uomo.La sindrome di Marinesco-Sjögren (MSS) è una rara malattia neuromuscolare condizione causata da mutazioni recessive nel gene SIL1 che determinano l'assenza della proteina SIL1 funzionale, un co-chaperone per il principale chaperone ER, BiP Poiché BiP è decisivo per il corretto trattamento delle proteine, la perdita di SIL1 provoca l'accumulo di proteine deformate. Questo accumulo probabilmente danneggia e distrugge le cellule nei tessuti vulnerabili, portando a cataratta congenita, atassia cerebellare, miopatia vacuolare e altri fenotipi di MSS. Non è stato dimostrato in modo conclusivo se il sistema nervoso periferico (PNS) sia interessato nella MSS. Per studiare la vulnerabilità del SNP nella MSS , fibre nervose intramuscolari da pazienti MSS e da topi SIL1-deficienti (woozy), nonché nervi sciatici e giunzioni neuromuscolari (NMJ) da questi topi sono stati studiati tramite trasmissione di elettroni mi studi croscopici e di immunofluorescenza accompagnati da studi di trascrizione e profili proteomici imparziali. Inoltre, l'integrità di PNS e NMJ è stata analizzata tramite studi di immunofluorescenza in un modello MSS-zebrafish che è stato generato a tale scopo. La microscopia elettronica ha rivelato cambiamenti morfologici indicativi di autofagia alterata e mantenimento mitocondriale negli assoni distali e nelle cellule di Schwann. Inoltre, nei topi storditi sono stati rilevati cambiamenti della morfologia delle NMJ e dei trascritti che codificano per proteine importanti per la funzione NMJ. Questi risultati erano in linea con una struttura grossolanamente anormale di NMJ in embrioni di zebrafish carenti di SIL1. Il profilo del proteoma di campioni di nervo sciatico da topi storditi ha rivelato livelli alterati di proteine implicate nel mantenimento neuronale, suggerendo l'attivazione di meccanismi compensatori. Presi insieme, i nostri dati combinati espandono lo spettro dei tessuti colpiti dalla perdita di SIL1 e suggeriscono che la trasmissione neuromuscolare compromessa potrebbe essere parte della fisiopatologia della MSS.
La dieta ricca di sale migliora le caratteristiche funzionali, elettrofisiologiche e istologiche della polineuropatia autoimmune spontanea murina.NOD), che si traduce nello sviluppo spontaneo di una periferica autoimmune neuropatia simile alla CIDP e ha studiato l'influenza di una dieta ricca di sale su compromissione funzionale, parametri elettrofisiologici, demielinizzazione e neuroinfiammazione in questi topi. I topi NOD sono stati assegnati in modo casuale a una dieta normale o ricca di sale contenente il 4% di cloruro di sodio nel cibo e l'1% in acqua. La dieta è stata continuata per un totale di 30 settimane. I topi con dieta ricca di sale hanno mostrato un'insorgenza ritardata dei sintomi clinici e un decorso della malattia migliorato con un ridotto declino della funzione locomotoria. Inoltre, i parametri elettrofisiologici di neuropatia e demielinizzazione sono stati attenuati in topi con una dieta ricca di sale, che è stata confermata con l'analisi istologica. Inoltre, abbiamo osservato una ridotta infiltrazione delle cellule immunitarie dei nervi sciatici nei topi che avevano ricevuto la dieta ricca di sale. Dimostriamo gli effetti benefici della dieta ricca di sale per quanto riguarda la progressione della malattia, i parametri funzionali, elettrofisiologici e istologici in un modello murino transgenico di neuropatia autoimmune spontanea.
L'estratto etanolico di Cordyceps cicadae esercita un effetto antitumorale sulle cellule del cancro gastrico umano SGC-7901 inducendo apoptosi, arresto del ciclo cellulare e stress del reticolo endoplasmatico.Cordyceps cicadae (Miq. ) Massee è una medicina tradizionale cinese che è stata utilizzata per circa 1600 anni in Cina. C. cicadae, un membro del genere Cordyceps, esercita un effetto terapeutico su molte malattie, come il cancro. Questo studio mirava a valutare l'attività antineoplastica di C. cicadae e per identificare il suo meccanismo molecolare di morte cellulare misurazione mediante citometria a flusso dopo incubazione con sonde fluorescenti Fluo-3AM è stata condotta un'analisi Western blot per quantificare l'espressione di proteine correlate all'apoptosi, al ciclo cellulare e all'endoplasma stress del reticolo L'analisi di cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC) è stata eseguita per analizzare i componenti dell'attività biologica del sovraccarico EEC nel citosol delle cellule SGC-7901. Analisi Western blot dem ha dimostrato che la CEE ha aumentato le attività di Bax, AIF, caspasi-8, caspasi-6 e caspasi-3 e ha diminuito l'attività di Bcl-2. Il rilascio di citocromo c dai mitocondri era associato alla disfunzione mitocondriale, causata dall'attivazione del recettore della superficie cellulare Fas e dalla scissione di PARP. L'arresto della fase S indotto da EEC è stato associato alla sovraregolazione dei livelli di espressione di E2F1, ciclina A2, ciclina E e p53 e alla sottoregolazione dell'espressione di CDK2. Inoltre, l'EEC ha aumentato l'espressione delle proteine legate allo stress del reticolo endoplasmatico, come la calpaina-1, la caspasi-12 e la caspasi-9. I risultati del test HPLC hanno suggerito che EEC conteneva adenina, uridina, adenosina e N6-(2-idrossietil)-adenosina. EEC ha inibito la proliferazione delle cellule SGC-7901 inducendo l'apoptosi caspasi-dipendente, arrestando il ciclo cellulare nella fase S e aumentando lo stress del reticolo endoplasmatico. Questo studio ha rivelato che C. cicadae è una potenziale fonte naturale di farmaci antitumorali.
Prevenzione del danno epatico indotto da paracetamolo mediante alginato.L'intossicazione da paracetamolo (APAP) è una delle principali cause di insufficienza epatica acuta. L'alginato, un polisaccaride anionico , è stato precedentemente dimostrato come un'impalcatura macroporosa, per ridurre l'infiammazione epatica e sostenere la funzione sintetica epatica, quando impiantato sul residuo epatico dopo epatectomia parziale estesa Nel recente studio abbiamo voluto esaminare in un modello di intossicazione APAP il potenziale di un alginato appositamente formulato soluzione per prevenire la tossicità dell'APAP. Sono state esaminate tre soluzioni di alginato da peso molecolare basso (30-50 kDa, VLVG), medio (100 kDa, LVG54) e alto (150 kDa, LVG150). I topi sono stati somministrati per via orale con la soluzione di alginato prima, con e dopo la somministrazione di APAP e sono stati confrontati con topi di controllo che hanno ricevuto solo il veicolo Tutti i topi sono stati soppressi 24 ore dopo la somministrazione di APAP Enzimi epatici, APAP del sangue, IL-6 e istologia epatica inclusa la proliferazione di Ki-67, IgG sono state studiate la necrosi e la colorazione con nitrotirosina. I topi trattati con VLVG presentavano bassi livelli di ALT mentre nei topi di controllo è stato dimostrato un aumento di 20-40 volte. L'effetto delle soluzioni LVG è stato marginale. Di conseguenza, l'istologia epatica era normale senza proliferazione di epatociti nel gruppo VLVG mentre necrosi centrolobulare massiva, aumento della colorazione con nitrotirosina e elevata proliferazione sono apparse nei fegati dei topi di controllo. I livelli ematici di APAP erano comparabili nei due gruppi. Il trattamento con VLVG è stato associato alla prevenzione dell'aumento dei livelli sierici di IL-6. VLVG, una nuova soluzione di alginato, ha alleviato la tossicità epatica e ha inibito la necrosi oncotica e il relativo danno immuno-mediato. Il VLVG può fungere da nuovo epatoprotettore e prevenire il danno epatico indotto da farmaci.
L'analisi cinetica basata su video della calcificazione in colture di cellule staminali embrionali umane osteogeniche rivela l'effetto tossico sullo sviluppo dell'estratto di tabacco di Snus.Studi epidemiologici suggeriscono il tabacco consumo come probabile fattore ambientale per una serie di anomalie congenite, tra cui bassa massa ossea e aumento del rischio di frattura Nonostante le intense iniziative di salute pubblica per pubblicizzare gli effetti dannosi del consumo di tabacco durante la gravidanza, circa il 10-20% delle donne negli Stati Uniti continua a consumano tabacco durante la gravidanza, alcune optano per il cosiddetto tabacco per la riduzione del danno, tra cui lo Snus, un tipo di tabacco da masticare consumato per via orale ma privo di sputi, che si presume esponga gli utenti a meno sostanze chimiche dannose. prospettiva dal momento che lo Snus non ha ridotto il rischio complessivo per la salute dei consumatori e praticamente non si sa se i problemi scheletrici derivanti dall'esposizione intrauterina insorgono nel embrione. Utilizzando un test di calcificazione basato su video di nuova concezione, abbiamo determinato che gli estratti dal tabacco Snus ostacolavano la calcificazione degli osteoblasti derivati da cellule staminali pluripotenti all'inizio della loro differenziazione. La nicotina, uno dei principali componenti dei prodotti del tabacco, non ha avuto effetti misurabili nell'intervallo di concentrazione testato. Tuttavia, attraverso l'estrazione di dati video, abbiamo determinato che la nitrosamina N\'-nitrosonornicotina specifica del tabacco ha causato una riduzione della calcificazione con una cinetica simile a quella dell'estratto di Snus completo. Dalle misurazioni delle effettive concentrazioni di nitrosammina nell'estratto di tabacco Snus concludiamo inoltre che la N\'-nitrosonornicotina ha il potenziale per essere uno dei principali fattori scatenanti dell'osteotossicità dello sviluppo causata dal tabacco Snus.
La demielinizzazione indotta da cuprizone nell'ippocampo del topo è alleviata dal fitoestrogeno genisteina.Uno dei principali ormoni sessuali femminili, gli estrogeni, può influenzare una varietà di stati mentali. Gli individui con sclerosi multipla (SM) spesso soffrono di problemi di salute mentale, che sono correlati con la patologia della materia grigia. In questo studio, abbiamo mirato a chiarire la validità del fitoestrogeno genisteina (GEN) per il trattamento delle lesioni della sostanza grigia in MS utilizzando il modello murino di demielinizzazione indotta da cuprizone (CPZ). In primo luogo, abbiamo confermato che l'intossicazione da CPZ allo 0,2% di 5 settimane induceva la demielinizzazione nell'ippocampo e che la mielinizzazione è stata recuperata con successo da GEN. La perdita di oligodendrociti maturi a seguito di intossicazione da CPZ è stata neutralizzata da GEN. Né CPZ né GEN hanno influenzato la densità delle cellule precursori degli oligodendrociti e degli astrociti. L'attivazione e la proliferazione della microglia indotta da CPZ non sono state inibite da GEN. Upregulation dell'espressione genica della citochina proinfiammatoria, l'interleuchina-1β, nella microglia ordinata da CPZ non è stata inibita nemmeno da GEN. Tuttavia, i livelli di espressione dei geni correlati alla fagocitosi, come il cluster di differenziazione 68 e la proteina 1 di membrana associata ai lisosomi, nella microglia ordinata sono stati elevati da CPZ ma abbassati da GEN. In particolare, il contatto fisico della microglia con la mielina è stato aumentato da CPZ ma diminuito da GEN. I livelli di espressione dei geni correlati alla mielina, come la proteina basica della mielina e la glicoproteina degli oligodendrociti mielinici, nell'intero tessuto dell'ippocampo sono stati diminuiti da CPZ ma recuperati da GEN. Questi risultati mostrano che il GEN può agire sugli oligodendrociti maturi nell'ippocampo promuovendo la loro sopravvivenza e la formazione di mielina e suggeriscono il potenziale terapeutico dei fitoestrogeni per il trattamento di pazienti con SM che soffrono di problemi di salute mentale.
Il silenziamento di TOM7 esacerba il danno da ischemia cerebrale focale nel ratto prendendo di mira l'autofagia mediata da PINK1/Beclin1.L'autofagia attivata è stata intensamente osservata nelle malattie cerebrovascolari, tra cui danno focale da ischemia cerebrale, ma i suoi meccanismi molecolari rimangono poco chiari. TOM7, che è un componente della traslocasi proteica del complesso della membrana mitocondriale esterna (TOM), può modulare l'assemblaggio del complesso TOM. Tuttavia, una comprensione di come TOM7 influisce sull'ischemia cerebrale la lesione è limitata. In questo studio, dimostriamo che l'espressione di TOM7 è up-regolata dopo un modello ischemico cerebrale fototrombotico nei ratti, con un picco ai giorni 3. Inoltre, l'atterramento di TOM7 può aggravare il danno ischemico cerebrale e inibire l'autofagia dopo l'ictus ischemico. Meccanicamente, TOM7 può regolare l'autofagia attraverso il percorso PINK1/Beclin1 dopo un danno da ischemia cerebrale Questi risultati dimostrano che il silenziamento di TOM7 può aggravare l'ischemia cerebrale inj ura attraverso l'inibizione dell'autofagia mediata dalla via PINK1/Beclin1.
Concentrarsi su un'illusione: adattarsi alla profondità percepita?L'accomodamento oculare fornisce potenzialmente informazioni sulla profondità, ma ci sono poche prove che queste informazioni siano utilizzate dal sistema visivo umano. Usiamo l'illusione della faccia cava, un'illusione di inversione della profondità, per indagare se l'accomodamento è collegato alla profondità percepita. Nell'esperimento 1 l'accomodamento, come la convergenza, era di fronte alla superficie fisica della maschera quando la maschera era in posizione verticale e le persone hanno riferito di aver sperimentato l'illusione. L'accomodamento alla faccia illusoria non differiva significativamente dall'accomodamento alla superficie posteriore fisicamente convessa della stessa maschera. Solo l'accomodamento alla maschera capovolta vista come cava era significativamente inferiore e, come la superficie fisica, oltre il piano medio della maschera. L'effetto sull'accomodamento è stato lo stesso per la visione monoculare e binoculare, dimostrando che l'accomodamento non è guidato dalle disparità binoculari attraverso la convergenza, alth ough vergenza volontaria rimane una possibilità. Nell'Esperimento 2 è stato utilizzato un modello di punti casuali proiettati per invertire la percezione tra convesso e concavo in tutte le condizioni di presentazione. La sistemazione era di nuovo davanti alla superficie fisica quando l'illusione fu sperimentata. L'esperimento 3 ha mostrato che i punti proiettati sono più efficaci nel disambiguare l'illusione come concavi quando sono nitidi e forniscono un buon stimolo accomodante rispetto a quando sono oggettivamente sfocati. Interpretiamo gli Esperimenti 1 e 2 come dimostranti che l'accomodamento è legato alla profondità percepita, direttamente o indirettamente, anche in una situazione in cui sono disponibili più indizi di profondità e il feedback non è artificialmente ad anello aperto. L'esperimento 3 è coerente con l'accomodamento che aiuta a disambiguare la profondità senza escludere spiegazioni alternative.
Percepire contorni perpendicolari e paralleli nel piano frontoparallelo.La percezione di una coppia di contorni in un'immagine retinica non può essere compresa semplicemente sommando i percezioni dei singoli contorni, soprattutto quando formano una giunzione perpendicolare, o sono paralleli tra loro. È il rapporto tra i contorni che determina ciò che viene percepito. Si noti che è difficile confrontare effettivamente la percezione di tali configurazioni quantitativamente. è riuscito a farlo testando la percezione di tali configurazioni in tre esperimenti psicofisici in cui la percezione è stata caratterizzata misurando la soglia di orientamento di un singolo contorno. Tale soglia è stata stimata utilizzando un Metodo degli Stimoli Costanti modificato basato sul presupposto che i contorni che si formano una configurazione sono percepite individualmente e che sono integrate linearmente. Questa ipotesi ha reso il confronto quantitativo della configurazione percepita urazioni possibili. Abbiamo scoperto che i cambiamenti della soglia stimata dipendevano dal tipo di configurazione, in particolare le soglie stimate da una giunzione perpendicolare erano sostanzialmente inferiori alle soglie stimate da un singolo contorno o da una giunzione non perpendicolare. Le soglie più basse sono state osservate quando la soglia è stata stimata da una coppia di contorni paralleli. Questi risultati suggeriscono che il sistema visivo è sensibile alle giunzioni perpendicolari e ai contorni paralleli in un'immagine retinica.
pBuzz: Un plasmide criptico rolling-circle da un Escherichia coli commensale ha due oriT orientati inversamente ed è mobilitato da un plasmide B/O.( ampicillina), strA (streptomicina) e sul2 (sulfametossazolo) trasferiti insieme a un plasmide B/O chiamato p838B-R. Tuttavia, tre plasmidi più piccoli di 7kb sono stati trovati anche nei transconiuganti, suggerendo che potrebbero essere mobilitati dal B/O Sono state determinate le sequenze complete di p838B-R e pBuzz, un piccolo plasmide mobilizzato da p838B-R con un'efficienza del 70%. p838B-R è 94.803 bp e contiene un'isola di resistenza di 8400 bp che include i tre geni di resistenza agli antibiotici. Il backbone p838B-R contiene una regione di trasferimento coniugativa completa, incluso un sito oriT a monte di nikAB che assomiglia all'oriT definito sperimentalmente di R64. Il pBuzz 1982bp contiene un gene rep e siti associati alla replicazione che assomigliano a quelli della famiglia pC194/pUB110 rolling -plasmidi circolari Contiene anche t wo, copie orientate inversamente di una sequenza di 84 bp che differisce dalla regione oriT in p838B-R in sole 6 posizioni. Questi siti simili a oriT probabilmente spiegano la capacità di pBuzz di co-trasferirsi con il plasmide B/O utilizzando la relaxasi NikB e la proteina accessoria NikA codificata da p838B-R, ovvero pBuzz utilizza la mobilizzazione trans relaxasi-in. Diversi plasmidi rolling-circle correlati a pBuzz sono stati trovati nel database di nucleotidi non ridondanti di GenBank. Contengono diversi potenziali oriT, comprese sequenze simili a oriT noti trovati in plasmidi coniugativi di tipo I (I1, B/O, K, Z e I2), L o M.
Gli effetti dell'SDS a concentrazioni subsolubilizzanti sulla permeabilità del doppio strato lipidico planare: due tipi di fluttuazioni di corrente.Effetti detergenti sui doppi strati lipidici artificiali e biologici è noto che le membrane a concentrazioni subsolubilizzanti includono la permeabilizzazione della membrana che si manifesta sia attraverso un flip-flop di molecole detergenti dal monostrato esterno al monostrato interno sia la perdita di membrana dei soluti intrappolati. Abbiamo esplorato le fluttuazioni attuali che si verificano nel BLM planare di asolectina in presenza di detergente ionico SDS a concentrazione subsolubilizzante Si possono distinguere due gruppi di fluttuazioni di corrente la cui durata media differisce di due ordini di grandezza Si assume che queste differenze nella durata delle fluttuazioni di corrente siano associate ad un diverso numero di SDS molecole nelle pareti dei presunti pori idrofili toroidali Abbiamo associato brevi impulsi con la formazione di pori idrofili lipidici di breve durata. Impulsi di maggiore durata (passi) sono stati associati alla formazione di pori idrofili, le cui pareti contengono detergente. Tenendo conto delle caratteristiche di questi pori, abbiamo stimato l'energia dei pori, così come l'energia del bordo di questi due tipi di pori. Riteniamo che il flip-flop delle molecole SDS nei liposomi sia fornito da pori di lunga durata e che il contenuto della fuoriuscita di liposomi avvenga attraverso tutti i pori.
Effetto di un precedente esercizio aerobico cronico sull'ipertrofia del muscolo scheletrico indotta da sovraccarico nei topi.Questo studio mirava a esaminare come un regolare allenamento aerobico può influenzare il muscolo ipertrofia indotta da sovraccarico. I topi maschi C57BL/6J sono stati divisi casualmente in tre gruppi: gruppo di riposo, gruppo di esercizi aerobici a bassa intensità e gruppo di esercizi aerobici ad alta intensità. I topi nei gruppi di esercizio sono stati assegnati a correre a una velocità di 10 m /min (bassa intensità) o 25 m/min (alta intensità) per 30 min/giorno, cinque giorni/settimana, per quattro settimane. Quindi, i muscoli gastrocnemio della gamba posteriore destra sono stati rimossi chirurgicamente per sovraccaricare i muscoli plantare e soleo , mentre la gamba posteriore sinistra è stata sottoposta a un'operazione simulata. Sia i muscoli plantari che quelli solei sono cresciuti più grandi nelle gambe sovraccariche rispetto a quelli nelle gambe finte. La crescita muscolare è aumentata nei muscoli plantari nel gruppo di esercizi a bassa intensità rispetto a quello nel resto o esercizio ad alta intensità gruppi a una e due settimane dopo il sovraccarico. Questo miglioramento non è stato osservato nei muscoli solei. Coerentemente, abbiamo osservato cambiamenti nell'espressione delle proteine coinvolte nella segnalazione intracellulare anabolica, tra cui Akt, bersaglio meccanicistico della rapamicina (mTOR) e p70S6K, nei muscoli plantari. I nostri dati hanno mostrato per la prima volta che l'esercizio aerobico cronico a bassa intensità accelera la crescita muscolare indotta da sovraccarico.
Predittori psicologici e genetici della tolleranza al dolore.Studi precedenti hanno mostrato associazioni tra polimorfismi genetici e tolleranza al dolore, ma le valutazioni psicologiche sono raramente misurate. L'obiettivo di questo studio è stato quello di determinare gli effetti indipendenti dei predittori demografici, psicologici e genetici della tolleranza al dolore freddo e nocivo. I soggetti sani (n = 89) hanno completato la scala di catastrofe del dolore (PCS) e il questionario sulla paura del dolore (FPQ-III), sono stati sottoposti a genotipizzazione per candidati polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) e hanno completato un test a pressione fredda in un bagno d'acqua a 1-2 ° C per un massimo di 3 minuti. La misura dell'esito primario era la tolleranza al dolore, definita come la durata massima dei soggetti hanno lasciato la mano non dominante nel bagno di acqua fredda. La regressione dei rischi proporzionali di Cox ha indicato che il sesso femminile, la razza asiatica e l'aumento dei punteggi PCS e FPQ-III erano associati a una minore tolleranza al dolore. significativamente associata alla tolleranza al dolore. I futuri studi genetici dovrebbero includere variabili demografiche e psicologiche come fattori confondenti nei modelli sperimentali del dolore.
La dinamica molecolare a lungo raggio mostra che le forme inattive della proteina chinasi A sono più dinamiche delle forme attive.Molte protein chinasi sono caratterizzate da almeno due forme strutturali corrispondenti al più alto livello di attività (attivo) e attività bassa o nulla, (inattivo). Inoltre, la dinamica delle proteine è una considerazione importante nella comprensione delle basi molecolari e meccanicistiche della funzione enzimatica. In questo lavoro, usiamo la proteina chinasi A (PKA) come sistema modello ed eseguire simulazioni di dinamica molecolare (MD) dell'intervallo di microsecondi su sei varianti che differiscono l'una dall'altra in termini di forma attiva e inattiva, con o senza ligandi legati, coda C-terminale e fosforilazione al ciclo di attivazione. Troviamo che le fluttuazioni quadratiche medie nelle simulazioni MD sono generalmente più elevate per le forme inattive rispetto alle forme attive. Questa differenza è statisticamente significativa. La dinamica più elevata degli stati inattivi ha contributi significativi dall'anello di legame dell'ATP, dall'anello catalitico e dall'elica αG. Le simulazioni con e senza coda C-terminale mostrano anche questa dinamica differenziale, con una dinamica inferiore sia nelle forme attive che inattive se è presente la coda C-terminale. Allo stesso modo, la dinamica associata alla forma inattiva è maggiore indipendentemente dallo stato di fosforilazione di Thr 197. Una statura relativamente stabile delle chinasi attive può essere più adatta per il legame dei substrati e il distacco del prodotto. Inoltre, il trasferimento del gruppo fosforile dall'ATP al fosfosite sul substrato richiede un preciso coordinamento transitorio di entità chimiche da tre diverse molecole, che può essere facilitato dalla maggiore stabilità dello stato attivo.
I fattori di trascrizione coinvolti nell'immunità basale nei mammiferi e nelle piante interagiscono con la stessa sequenza cis sensibile al MAMP di Arabidopsis thaliana.WRKY e NF-κB fattori di trascrizione, coinvolti nell'immunità innata nelle piante e nei mammiferi, interagiscono con la stessa sequenza cis Per l'espressione genica che risponde a flg22 sono necessarie nuove sequenze cis sensibili ai pattern molecolari associati ai microbi (MAMP), denominate WT-box di tipo II nei protoplasti di Arabidopsis thaliana. Mentre le scatole WT di tipo I come TGACTTTT e CGACTTTT interagiscono con i fattori di trascrizione WRKY (TF), rimaneva la domanda su quali TF si legano alle scatole WT di tipo II GGACTTTC, GGACTTTT e GGACTTTG. Sorprendentemente, un'analisi bioinformatica prevede topo (Mus musculus) NF-κB p65 come TF che interagisce con le scatole WT di tipo II. NF-κB p65, come i fattori WRKY nelle piante, gioca un ruolo nell'immunità innata nei mammiferi. Pertanto, l'interazione di NF-κB p65 con le scatole WT di tipo II sono state testate sperimentalmente B p65 richiede le scatole WT GGACTTTC, GGACTTTT e GGACTTTG per l'attivazione dell'espressione del gene reporter nelle cellule vegetali. NF-κB p65 si lega direttamente alla scatola WT contenente promotori sintetici in vitro e richiede la scatola WT per il legame. Studi precedenti indicano che la sequenza GGACTTTC è necessaria anche per l'attivazione del gene reporter mediata da WRKY26. Qui viene mostrato che WRKY26, come NF-κB p65, si lega alla sequenza GGACTTTC. Coerentemente con altri studi recenti, le scatole WT di tipo II sono siti di legame WRKY e la distinzione tra tipo I e tipo II non si applica più.
Analisi completa dell'infiltrazione immunitaria tumorale associata a reti endogene di RNA competitivo nell'adenocarcinoma polmonare.L'immunoterapia contro il cancro ha ottenuto un successo senza precedenti nel trattamento del cancro. Tuttavia , diversi pazienti hanno risposte diverse all'immunoterapia. Sempre più studi hanno dimostrato che l'eterogeneità immunitaria del tumore ha un'influenza importante sulla prognosi del cancro. Pertanto, comprendere l'impatto clinico dell'infiltrazione immunitaria del tumore e il meccanismo di regolazione delle molecole di RNA è fondamentale per esplorare la patogenesi dell'adenocarcinoma polmonare (LUAD) e lo sviluppo di protocolli di immunoterapia. L'ipotesi dell'RNA competitivo endogeno fornisce nuove idee per lo studio dell'eterogeneità immunitaria Pertanto, utilizzando il metodo della genomica immunitaria, questo articolo esplora la relazione tra infiltrazione immunitaria e prognosi dei pazienti con adenocarcinoma polmonare e ha scoperto che l'infiltrazione immunitaria delle cellule B è altamente influenza la sopravvivenza dei pazienti. Attraverso l'analisi differenziale, sono stati estratti mRNA, lncRNA e miRNA differenziali e 318 mRNA differenzialmente espressi correlati all'immunità delle cellule B sono stati esaminati mediante analisi di correlazione ed è stata prevista e analizzata la prognosi dei pazienti con modello di regressione del rischio di COX. Attraverso più ricerche nel database, è stata costruita una rete regolatoria ceRNA correlata al sistema immunitario, contenente 3 mRNA chiave, 4 miRNA e 50 lncRNA. Tre mRNA e la maggior parte dei miRNA, lncRNA, sono significativamente associati alla prognosi LUAD. L'analisi bioinformatica della rete ha mostrato che LINC00337 può sovraregolare l'espressione di PBK e KIF23 attraverso il legame competitivo di has-mir-373 e has-mir-519d. Il legame competitivo di has-mir-373 e has-mir-372 può aumentare l'espressione di SLC7A11. L'interazione tra questi RNA può avere un importante ruolo regolatore nell'infiltrazione immunitaria nell'adenocarcinoma polmonare, influenzando così la prognosi del paziente e l'efficacia dell'immunoterapia.
GuttaFlow Bioseal promuove la differenziazione spontanea delle cellule staminali del legamento parodontale umano in cellule tipo cementoblasto.Valutare in vitro il potenziale cementogenico e gli effetti biologici di GuttaFlow Bioseal, GuttaFlow 2, MTA Fillapex e AH Plus su cellule staminali del legamento parodontale umano (hPDLSC). I saggi di vitalità cellulare, migrazione cellulare e morfologia cellulare sono stati eseguiti utilizzando eluati di ciascun materiale. Per valutare l'adesione cellulare, hPDLSC sono stati seminati direttamente sul materiale e analizzati mediante microscopia elettronica a scansione (SEM). Gli effetti dei sigillanti endodontici sulla proteina 1 del cemento (CEMP1), sulla proteina di attacco derivata dal cemento (CAP), sulla sialoproteina ossea (BSP), sull'ameloblastina (AMBN), sull'amelogenina (AMELX) e sulle L'espressione genica della fosfatasi (ALP) su hPDLSC è stata studiata mediante qPCR e immunofluorescenza (IF). L'analisi statistica è stata eseguita con l'analisi della varianza e post-test Bonferroni o Tukey (α<0.05). n Il 90% delle cellule vitali è stato ottenuto utilizzando estratti di GuttaFlow Bioseal e GuttaFlow2 dopo 72h di coltura. Al contrario, AH Plus e MTA Fillapex hanno indotto livelli significativamente più bassi di vitalità cellulare. GuttaFlow2 e GuttaFlow Bioseal hanno promosso la chiusura della ferita in modo concentrazione-dipendente, paragonabile a quello osservato con gli estratti di controllo (*p<0.05). Tuttavia, con AH Plus e MTA Fillapex, la migrazione cellulare è stata significativamente inferiore rispetto al controllo (***p<0.0001). L'analisi SEM ha indicato un assemblaggio di fibre di stress organizzato e un alto grado di adesione cellulare sui dischi GuttaFlow Bioseal ma tassi bassi su GuttaFlow2, MTA Fillapex e AH Plus. Quando le hPDLSC sono state coltivate con terreni condizionati da GuttaFlow Bioseal, i saggi qPCR e IF hanno mostrato un livello più elevato di espressione di AMELX, AMBN, CEMP1 e CAP rispetto al controllo (*p<0.05)), mentre tale espressione non è stata osservata negli altri sigillanti. I nostri risultati hanno mostrato che i sigillanti GuttaFlow erano più citocompatibili di AH Plus e MTA Fillapex, mentre GuttaFlow Bioseal ha favorito la differenziazione cementoblastica delle hPDLSC in assenza di fattori di crescita.
Tubercolosi ovarica isolata in una donna immunocompetente nel periodo post partum: case report.La tubercolosi pelvica è una rara forma di tubercolosi extrapolmonare. comunemente coinvolge le tube di Falloppio e l'utero da una diffusione linfo-ematogena La presentazione della tubercolosi pelvica come un ascesso ovarico isolato è estremamente rara ed è segnalata solo due volte una madre di 25 anni para III nel periodo post partum sottoposta a laparotomia per sospetto ascesso tuboovarico/tumore ovarico dopo la presentazione con dolore addominale, massa pelvica e febbre Durante l'intervento, è stata rilevata una massa ovarica destra isolata con caseazione nella cavità ma non è stata rilevata alcuna adesione pelvica significativa ed è stata eseguita ovariectomia destra. tubercolosi e la paziente si è ripresa bene dopo il trattamento antitubercolare La tubercolosi ovarica isolata è una forma molto rara di tubercolosi genitale che deve essere sempre considerato nella valutazione di una donna che presenta una massa annessiale in aree altamente prevalenti.
Porta e tubo del bendaggio gastrico conservati 5 anni dopo la rimozione del bendaggio gastrico e il bypass gastrico Roux-en-Y laparoscopico: un caso clinico.Mentre LAGB ha diventato raro nella pratica della chirurgia bariatrica, la rimozione del bendaggio con o senza chirurgia di revisione è ancora comune. Il corpo estraneo postoperatorio ritenuto, di cui le spugne chirurgiche sono le più comuni, è una condizione rara. Segnaliamo un raro caso di porta del bendaggio gastrico ritenuto e la tubo attaccato. Una donna caucasica di 31 anni si è presentata all'ambulatorio, 5 anni dopo il suo ultimo intervento chirurgico, lamentando una massa addominale del quadrante superiore sinistro negli ultimi 2 anni. Aveva una storia di 2 operazioni di perdita di peso. nessuna storia familiare significativa né fumo. La TC dell'addome e della pelvi ha rivelato un corpo estraneo trattenuto. Durante l'esplorazione, è stata trovata la porta con 10 cm del tubo collegato e rimossa attraverso una piccola incisione senza laparotomia. Il paziente ha avuto un recupero tranquillo. A chirurgo bariatrico dovrebbe essere coinvolto nella valutazione di qualsiasi paziente che lamenta dolore addominale e/o massa palpabile se ha una precedente procedura di perdita di peso perché il chirurgo bariatrico è pienamente consapevole delle possibili complicanze degli interventi chirurgici bariatrici.
Biosensori elettrochimici multipli basati su carta origami per il rilevamento di pesticidi.Qui proponiamo il primo dispositivo cartaceo origami tridimensionale per il rilevamento di diverse classi di pesticidi combinando diversi biosensori di inibizione enzimatica. Questo dispositivo è stato sviluppato integrando due diversi elettrodi serigrafati a base di carta da ufficio e più tamponi a base di carta da filtro per caricare enzimi e substrati enzimatici. L'analisi versatile di diversi pesticidi è stata effettuata piegando e dispiegando la struttura a base di carta da filtro, senza alcuna aggiunta di reagenti e alcun trattamento del campione (cioè diluizione, filtrazione, regolazione del pH). La piattaforma a base di carta è stata impiegata per rilevare paraoxon, acido 2,4-diclorofenossiacetico e atrazina sfruttando la capacità di questi diversi tipi di pesticidi (cioè insetticidi organofosforici, erbicidi fenossi-acidi e erbicidi triazinici) di inibire la butirrilcolinesterasi, alcalina p rispettivamente dell'osfatasi e della tirosinasi. Il grado di inibizione correlato alla quantità di pesticidi è stato valutato mediante monitoraggio cronoamperometrico dell'attività enzimatica in assenza e in presenza di pesticidi mediante l'utilizzo di un potenziostato portatile. Per migliorare la sensibilità, gli elettrodi a base di carta sono stati modificati con solo nerofumo nel caso di piattaforme per la rilevazione di acido 2,4-diclorofenossiacetico e atrazina, oppure decorati con nanoparticelle di blu di Prussia per la rilevazione di paraoxon. Il dispositivo cartaceo è stato applicato per la rilevazione di paraoxon, acido 2,4-diclorofenossiacetico e atrazina a livello di ppb sia in soluzioni standard che in campioni di acqua di fiume. L'accuratezza di questo biosensore elettrochimico multiplo basato su carta origami è stata valutata nell'acqua del fiume mediante studi di recupero, ottenendo valori soddisfacenti (ad esempio per paraoxon 90±1% e 88±2%, rispettivamente per 10 e 20 ppb). Il dispositivo di carta per origami tridimensionale proposto consente il rilevamento rapido, conveniente e accurato dei pesticidi nelle acque superficiali grazie alla combinazione di filtri e carte da ufficio, serigrafia, stampa a cera e tecnologia dei nanomateriali.
La glicoproteina D di HSV-1 dipende dalla proteina del tegumento UL16 per il confezionamento e contiene un motivo che è richiesto in modo differenziale per la formazione di sincizi.Glycoprotein D ( gD) del virus dell'herpes simplex di tipo 1 (HSV-1) svolge un ruolo chiave in molteplici eventi durante l'infezione tra cui l'ingresso del virus, la diffusione da cellula a cellula e la formazione di sincizi indotta da virus. Qui, forniamo la prova che un'arginina/lisina cluster situato all'interfaccia transmembrana-citoplasma di gD contribuisce in modo critico alla diffusione virale e alla fusione cellula-cellula. I nostri studi sono iniziati con la scoperta che l'imballaggio di gD nei virioni è quasi completamente bloccato in assenza della proteina tegumentale UL16. Successivamente abbiamo identificato un nuovo , interazione diretta e regolata tra UL16 e gD, ma questo non era importante per la formazione di sincizi. Tuttavia, un'analisi mutazionale dei residui basici prossimali di membrana di gD ha rivelato che sono necessari per il fenotipo gBsyn, fusi indotto da salubrinale su cellule infettate da HSV e diffusione da cellula a cellula. Infine, abbiamo scoperto che questi stessi residui basici della coda di gD non sono necessari per la fusione cellulare indotta da una variante di gKsyn.
Analisi del trascrittoma di geni espressi differenziali nell'epatopancreas di Procambarus clarkii sfidato con peptidoglicano.Procambarus clarkii è una delle specie economicamente più importanti nell'acquacoltura cinese, ed è ampiamente coltivato. L'infezione delle popolazioni di P. clarkii con agenti patogeni batterici provoca un'elevata mortalità e una grande perdita economica, quindi il controllo della malattia è di notevole importanza economica. P. clarkii è un sistema modello per studiare le risposte immunitarie negli invertebrati e il suo sistema immunitario consiste esclusivamente della risposta innata. Nel presente studio, abbiamo esaminato l'espressione genica correlata alla funzione immunitaria in P. clarkii in risposta alla stimolazione del patogeno. Il trascrittoma del tessuto epatopancreatico di P. clarkii sfidato con peptidoclicano (PGN) è stato analizzato e confrontato con il controllo campioni. Dopo il montaggio e l'annotazione, sono stati identificati 48.661 unigeni con una lunghezza media di 671.54 bp. Un totale di 2533 differenzialmente ex sono stati ottenuti geni pressati (DEG), inclusi 765 unigeni significativamente up-regolati e 1757 unigeni significativamente down-regolati. L'analisi dell'ontologia genica (GO) ha dimostrato 19 sottocategorie di processi biologici, 16 sottocategorie di componenti cellulari e 17 sottocategorie di funzioni molecolari che sono state arricchite tra questi DEG. L'analisi dell'arricchimento utilizzando il database dell'Enciclopedia dei geni e dei genomi (KEGG) di Kyoto ha rivelato l'arricchimento tra i percorsi delle risposte immunitarie. Nel loro insieme, questo studio non solo arricchisce il database esistente del trascrittoma di P. clarkii, ma chiarisce anche le risposte immunitarie dei gamberi che vengono attivate in risposta alla sfida PGN.
Un metodo nuovo e semplice per produrre grandi quantità di peptide solubile ricombinante/monomeri del complesso maggiore di istocompatibilità per l'analisi dei recettori dei linfociti T umani antigene-specifici.I tetrameri solubili del peptide/complesso di istocompatibilità maggiore (p/MHC) che si legano direttamente ai recettori delle cellule T (TCR) consentono la quantificazione diretta, la caratterizzazione fenotipica e l'isolamento delle cellule T antigene-specifiche. coli, ma questo metodo richiede il ripiegamento delle proteine ricombinanti. Qui, un metodo nuovo e tecnicamente semplice che non richiede il ripiegamento proteico in vitro è stato sviluppato per la generazione ad alto rendimento di trimero a catena singola p/MHC solubile e funzionale (SCT ) monomeri e tetrameri in un sistema cellulare di mammifero. I tetrameri p/MHC-SCT generati con questo metodo si legano ai corrispondenti TCR antigene-specifici. Inoltre, i monomeri p/MHC-SCT immobilizzati agiscono efficacemente tivate linee cellulari T antigene-specifiche e cellule T primarie in maniera antigene-specifica. Questa tecnica fornisce un robusto miglioramento della tecnologia, in modo tale che monomeri e tetrameri p/MHC solubili ricombinanti possano essere prodotti più facilmente e che ne consenta l'uso nell'analisi delle cellule T antigene-specifiche negli studi di base e clinici.
Quattro tipi di lisato piastrinico umano, incluso uno inattivato viralmente da solvente-detergente, possono essere usati per propagare le cellule stromali mesenchimali della gelatina di Wharton.C'è accumulando prove sperimentali che il lisato piastrinico umano (HPL) prodotto da concentrati piastrinici può sostituire il siero bovino fetale (FBS) come supplemento di grado clinico privo di xeno dei terreni di crescita per espandere le cellule stromali mesenchimali (MSC). Tuttavia, esistono incertezze riguardo a impatti che vari metodi di produzione di HPL possono esercitare sulla capacità di espansione e differenziazione delle MSC In particolare, è necessario valutare la possibilità di implementare un trattamento di inattivazione del virus durante la produzione di HPL per garantire la sicurezza ottimale dei pool di HPL industriali. i concentrati di quattro diversi donatori sono stati raggruppati e sottoposti a cicli di congelamento-scongelamento (-80/+37 °C), seguiti o meno da conversione del siero mediante cloruro di calcio, trattamento termico a 56 °C per 30 min, o inattivazione virale con solvente-detergente (S/D). Sono state caratterizzate le concentrazioni di proteine totali, fattori di crescita e fibrinogeno e le composizioni chimiche degli HPL. L'impatto dell'integrazione di HPL sulla morfologia cellulare, il tempo di raddoppio, l'immunofenotipo e la capacità di differenziazione trilineare delle Wharton Jelly MSC (WJMSC) sono stati confrontati in cinque passaggi, utilizzando FBS come controllo e normalizzando il contenuto proteico. I dati hanno mostrato che le WJMSC si sono espanse ugualmente bene, hanno mostrato una tipica morfologia dei fibroblasti, hanno avuto tempi di raddoppio brevi, hanno mantenuto i loro immunofenotipi e si sono differenziate in linee di condrociti, osteociti e adipociti in tutti i mezzi integrati con HPL, tutti più efficaci dell'FBS. In conclusione, abbiamo riscontrato un impatto minimo rilevabile del processo di produzione dell'HPL, inclusa l'inattivazione del virus S/D, sull'idoneità dell'espansione delle WJMSC in vitro.
Produzione sostenibile di PHA nelle bioraffinerie di lignocellulosa integrate.Nelle bioeconomie emergenti, i biopolimeri compostabili poliidrossialcanoati (PHA) sono prodotti desiderabili per la loro somiglianza con i petropolimeri. Mentre la produzione industriale di PHA è cresciuta rapidamente, ottenere una fonte di carbonio economica e sostenibile è ancora una sfida. Tra le materie prime biobased, la lignocellulosa è una fonte di carbonio economica, abbondante e potenzialmente sostenibile. Tuttavia, a causa della sua recalcitranza, separazione e processi di depolimerizzazione che hanno di solito non hanno raggiunto la maturità industriale. Le bioraffinerie integrate utilizzano un approccio olistico ai processi di conversione per ridurre al minimo il prezzo delle materie prime e massimizzare l'uso delle risorse. Questa revisione esamina la fattibilità tecnica della fusione della produzione di PHA e della bioraffinazione della lignocellulosa in impianti di lavorazione integrati. Tra le materie prime lignocellulosiche, il legno è una promettente fonte di carbonio grazie alla sua matura in infrastrutture industriali. Tra i componenti lignocellulosici, la frazione emicellulosa è la materia prima più promettente per la produzione di PHA poiché è sottoutilizzata e può essere combinata con la produzione di bioetanolo dalla frazione cellulosica. I processi di frazionamento consentono il recupero separato di cellulosa, emicellulosa e lignina, a cui si può aggiungere PHA come coprodotto.
Confronto tra risonanza magnetica dinamica con mezzo di contrasto ed ecografia con mezzo di contrasto per la valutazione degli effetti di sorafenib in un modello di ratto di carcinoma epatocellulare.Confrontare l'accuratezza dell'ecografia con mezzo di contrasto (CEUS) e della risonanza magnetica (MRI) dinamica con mezzo di contrasto (DCE) per la valutazione dei cambiamenti nella vascolarizzazione dei tessuti come risultato del trattamento con sorafenib in un modello di carcinoma epatocellulare (HCC) di ratto. Ratti bufalo maschi con tumori epatici ortotopici trattati quotidianamente con 7,5 mg/kg di sorafenib tramite sonda gastrica per 2 settimane (n=9) sono stati soggetti a DCE-MRI e CEUS 2 settimane dopo l'impianto del tumore - subito prima dell'inizio del trattamento - e anche dopo il trattamento completamento - subito prima della raccolta del tumore. Animali non trattati (n=10) sono stati utilizzati come controllo. Le sezioni di tessuto tumorale sono state colorate per ematossilina-eosina, pimonidazolo e CD34 per la valutazione quantitativa di necrosi, ipossia e tana di microvasi sità (MVD), rispettivamente. con necrosi tissutale istopatologica (r=-0.537, p<0.05) e MVD (r=0.599, p<0.05). È interessante notare che nessuna delle misurazioni CEUS era significativamente diversa tra i gruppi di controllo e di trattamento e non mostrava una correlazione statistica con nessuno dei parametri istopatologici valutati (p>0.05). La riduzione della permeabilità vascolare indotta da sorafenib in questo modello preclinico di HCC viene rilevata in modo più accurato tramite DCE-MRI rispetto alla CEUS e i parametri DCE-MRI sono fortemente correlati con i cambiamenti istopatologici nella vascolarizzazione dei tessuti e nella necrosi dei tessuti.
Riproducibilità del trasferimento di magnetizzazione disomogeneo (ihMT): uno studio test-retest, multi-sito.Il trasferimento di magnetizzazione disomogeneo (ihMT) è stato segnalato a presentano una sensibilità e una specificità superiori per l'imaging della mielina. Tuttavia, la riproducibilità su ihMT è stata finora raramente studiata. Lo scopo del presente studio è valutare la riproducibilità multicentrica e la variabilità test-retest dell'ihMT nel sistema nervoso centrale. 5 volontari sono stati reclutati e scansionati due volte su tre scanner per risonanza magnetica (MRI) 3.0T utilizzando ihMT con parametri di scansione identici. Sono state calcolate le mappe di ihMT quantitativa (qihMT) e del rapporto ihMT (ihMTR) per ciascuna scansione. L'analisi basata su voxel è stata quindi eseguita per generare valori qihMT e ihMTR per le principali fibre di sostanza bianca. L'affidabilità e la riproducibilità intra e inter-scanner sono state valutate con coefficienti di correlazione intraclasse (ICC). Il metodo Bland-Altman è stato utilizzato per mostrare il livello di accordo tra due tipi di misurazione. Sono stati utilizzati anche il test t accoppiato e il test ANOVA a una via per confrontare la differenza tra inter- e intra-scanner, rispettivamente. Nelle 10 aree principali dei tratti di sostanza bianca, gli ICC hanno indicato un'elevata affidabilità e riproducibilità delle misurazioni intra- e inter-scanner. Anche i grafici di Bland-Altman insieme all'intervallo di confidenza (CI) del 95% in tutte le ROI nei cinque volontari hanno dimostrato una buona ripetibilità. Non sono state riscontrate differenze significative tra e intra-scanner nei test t appaiati e nei test ANOVA a una via. In questo studio sono state osservate una buona affidabilità e riproducibilità inter e intra-scanner delle misurazioni ihMT. Questi risultati supportano l'uso delle misurazioni ihMT come biomarcatori in studi multicentrici e/o longitudinali.
Analisi della trama basata sulla risonanza magnetica per classificare i gliomi di basso grado in astrocitoma e oligodendroglioma codificato 1p/19q.L'analisi della trama eseguita su immagini RM può rilevare caratteristiche quantitative che sono impercettibili alla valutazione visiva umana. Lo scopo di questo studio era valutare la fattibilità dell'analisi della trama sulla risonanza magnetica convenzionale preoperatoria per discriminare tra i sottotipi istologici nei gliomi di basso grado (LGG) e per determinare l'utilità dell'analisi della trama rispetto all'analisi dell'istogramma In questo studio sono stati inclusi un totale di 41 pazienti con LGG, 21 astrocitoma e 20 oligodendrogliomi codificati 1p/19q. I pazienti sono stati divisi casualmente in gruppi di allenamento (60%) e test (40%). L'analisi della trama è stata eseguita su risonanza magnetica convenzionale sequenze per ottenere i valori del fattore più discriminante (MDF) sia per i dati di training che di test. Le analisi della curva delle caratteristiche operative del ricevitore (ROC) sono state quindi eseguite utilizzando i valori MDF e 9 parametri dell'istogramma nei dati di allenamento per ottenere valori di cut-off per determinare il corretto tasso di discriminazione tra astrocitoma e oligodendroglioma nei dati di test. Le analisi ROC utilizzando i valori MDF hanno determinato un'area sotto la curva (AUC) di 0,91 (sensibilità 86%, specificità 87%) per T2w FLAIR, 0,94 (87%, 89%) per ADC, 0,98 (93%, 95%) per T1w e 0,88 (78%, 86%) per le sequenze T1w+Gd. Utilizzando i migliori valori di cut-off, MDF ha discriminato correttamente tra i due gruppi rispettivamente nel 94%, 82%, 100% e 88% dei casi nei dati di test. L'MDF ha superato tutti e 9 i parametri dell'istogramma. L'analisi della trama eseguita su immagini MRI preoperatorie convenzionali può prevedere con precisione il sottotipo istologico di LGG, il che avrebbe un impatto sulla gestione clinica.
Valutazione della funzione epatica mediante risonanza magnetica con contrasto dinamico in topi con deficit del recettore della melanocortina 4 come modello di steatoepatite non alcolica.Recettore della melanocortina 4 topi -carenti (MC4R-KO) alimentati con una dieta ricca di grassi (HFD) sviluppano una patologia epatica simile alla steatoepatite non alcolica umana (NASH). Tuttavia, sebbene siano state riportate istologia epatica e biochimica del sangue, la funzione epatica non è stata valutata. presente studio, abbiamo valutato la funzione epatica in topi MC4R-KO alimentati con un HFD utilizzando la risonanza magnetica con contrasto dinamico (DCE-MRI) con acido gadolinio-etossibenzil-dietilentriammina pentaacetico (Gd-EOB-DTPA). ) sono stati calcolati. Analisi istopatologica è stato quindi eseguito. , rho=0.75, P<0.01). I topi MC4R-KO alimentati con un HFD hanno sviluppato obesità e NASH. La cinetica epatica di Gd-EOB-DTPA era significativamente diversa nei topi MC4R-KO alimentati con un HFD da WT topi, e correlato con il his punteggio topatologico. Questi risultati suggeriscono che i topi MC4R-KO alimentati con un HFD imitano la patologia epatica e la funzione epatica della NASH umana, e quindi potrebbero essere utili per lo studio della disfunzione epatica durante la fase fibrotica della NASH.
Acquisizione simultanea dell'elastografia a risonanza magnetica del sovraspinato e dei muscoli trapezio.Abbiamo sviluppato una tecnica di elastografia a risonanza magnetica (MRE) utilizzando una risonanza magnetica convenzionale imaging (MRI), che consente un'elastografia simultanea dei muscoli sovraspinato e trapezio, progettando un nuovo trasduttore d'onda (vibration pad) e ottimizzando la frequenza della vibrazione meccanica. Cinque volontari sani sono stati sottoposti a MRE. Al fine di trasmettere la vibrazione meccanica (pneumatica vibrazione) ai muscoli sovraspinato e trapezio, è stato progettato un nuovo pad vibrante utilizzando una stampante tridimensionale (3D). Il pad vibrante è stato posizionato sulla pelle 2 cm medialmente e 2 cm cranialmente il tubercolo deltoide. L'acquisizione MRE è stata eseguita con un sequenza MR multi-slice di tipo gradient-echo multi-echo, che consente la risonanza magnetica anche in una risonanza magnetica convenzionale; sono state ottenute due immagini assiali oblique dei muscoli sovraspinato e trapezio aneamente. Le frequenze di vibrazione sono state fissate a 50-150Hz, con un passo di 25Hz. La qualità dell'immagine dell'onda in ciascuna frequenza è stata analizzata utilizzando un rapporto fase-rumore (PNR) e la chiarezza dell'onda di propagazione che è stata valutata qualitativamente da due lettori. Nel muscolo sovraspinato, le immagini delle onde erano di buona qualità soprattutto alle frequenze >75Hz. Nel muscolo trapezio, le immagini delle onde erano di migliore qualità alle basse frequenze (50 e 75Hz) rispetto alle alte frequenze (100-150Hz). Il PNR di entrambi i muscoli era più alto alle basse frequenze. La rigidità media nel muscolo trapezio (7,26 ± 2,13 kPa a 75 Hz) era maggiore di quella del muscolo sovraspinato (4,16 ± 0,50 kPa a 75 Hz). I risultati hanno dimostrato che la nostra tecnica MRE consente la valutazione simultanea della rigidità nei muscoli sovraspinato e trapezio utilizzando una risonanza magnetica convenzionale e che la frequenza di vibrazione ottimale per la risonanza magnetica simultanea di questi muscoli è di 75 Hz. Questa tecnica fornisce un nuovo mezzo per la diagnosi precoce di anomalie nella spalla.
La riduzione indotta da clozapina del riassorbimento di l-carnitina tramite inibizione/down-regulation della carnitina renale/trasportatore di cationi organici 2 contribuisce al disordine metabolico dei lipidi epatici nei topi.valore di 1,78 μM. Inoltre, la clozapina riduce significativamente l'assorbimento di L-Car nelle cellule HK-2, nelle cellule del tubolare prossimale coltivate primarie di topo (mPCPT) e nelle cellule HepG2. Acuta (iniezione intraperitoneale) e somministrazione orale successiva di 21 giorni di clozapina a 12,5, 25 e 50 mg/kg nei topi ha determinato un'escrezione renale di L-Car 2-3 volte maggiore rispetto al gruppo del veicolo e la concentrazione di L-Car nel plasma e nel fegato è stata significativamente ridotta. , i livelli di mRNA e proteine di mOctn2 nel rene erano notevolmente ridotti. Inoltre, la somministrazione orale di 28 giorni di clozapina ha indotto un aumento dei livelli di trigliceridi (TG) e colesterolo totale (TCHO) nel fegato di topo, mentre L-Car (40 mg/kg - 1g/kg) TG e TCHO. epatici indotti da clozapina attenuati aumentare in modo dose-dipendente. Questi risultati indicano che la riduzione indotta da clozapina del riassorbimento di L-Car attraverso l'inibizione/down-regulation dell'OCTN2 renale contribuisce al disordine metabolico dei lipidi epatici. L'integrazione di L-Car è probabilmente una strategia efficace per attenuare il metabolismo lipidico anomalo indotto dalla clozapina.
Polimorfismi nei geni correlati all'asse ipotalamo-ipofisi-surrene e risposta antidepressiva - Revisione sistematica.Circa il 50% dei pazienti depressi non risponde a antidepressivi. Evidenze da studi familiari suggeriscono una componente genetica a questo. Questo studio ha studiato se i pazienti con polimorfismi nei geni correlati all'asse ipotalamo-ipofisi-surrene (HPA) avevano meno probabilità di rispondere agli antidepressivi. EMBASE, MEDLINE, PsycINFO e il I criteri di inclusione sono stati: 1) pazienti con depressione, 2) studio dei geni candidati correlati all'asse HPA, 3) almeno quattro settimane di antidepressivi e 4) valutazione dei sintomi depressivi che dividono i pazienti in non-responder e responder Sono stati identificati diciannove studi. Non-responder e responder non differivano nei polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) nei geni che codificano per l'arginina vasopressina. I risultati erano equivoci per quanto riguarda i geni che codificano per FK5 06 proteina legante 5 e recettori glucocorticoidi e mineralcorticoidi. SNP e aplotipi specifici all'interno di geni correlati all'ormone di rilascio della corticotropina (CRHBP, CRHR1) e alle melanocortine (POMC) predicevano lo stato di non risposta. Sono necessari studi di replicazione e ulteriori indagini che esplorano le interazioni gene x ambiente e farmaco x ambiente prima che i trattamenti farmacologici possano essere adattati in base al profilo genetico del paziente.
Biologia dei sistemi e reti di geni nella malattia di Alzheimer.L'estrazione di geni è stata un approccio fruttuoso nello studio della malattia di Alzheimer (AD) Come nuovo punto di partenza per lo studio dell'AD, le indagini genetiche e genomiche si sforzano costantemente di scoprire varianti causali correlate alla fisiopatologia della malattia. Attualmente, gli approcci genetici e genomici hanno identificato numerosi loci. Tuttavia, l'elaborazione del meccanismo dell'AD è rimasta indietro rispetto alla scoperta del gene. L'ampio uso di tecniche di sequenziamento di nuova generazione parallele, ad alto rendimento, ha migliorato la nostra comprensione dei ruoli delle varianti genetiche nel cervello al più alto livello di gerarchia funzionale Evidenziamo tre sistemi molecolari (il trascrittoma, il proteoma e l'epigenoma) in questa recensione per accertare se i metodi utilizzati negli studi di biologia dei sistemi di AD sono utili. Qui, presentiamo molti vantaggi dei metodi molecolari, integrativi e di rete ad alto rendimento, che h può fornire un buon riferimento per studi futuri che impiegano approcci di biologia di rete e grandi set di dati.
Piccole molecole hanno modificato gelatina biomimetica/nanofibre di idrossiapatite che costruiscono un microambiente osteogenico ideale con formazione ossea cranica significativamente migliorata.La riparazione di difetti ossei di dimensioni critiche non consolidati è una sfida clinica significativa in tutto il mondo. La costruzione di un microambiente osteogenico che fornisca segnali osteoconduttivi e osteoinduttivi è una strategia leader. Nel presente studio, l'acido ascorbico (AA) e il -glicerofosfato idrato di sodio (β-GP) hanno modificato la gelatina biomimetica/ Gli scaffold nanofibrosi di idrossiapatite (GH) sono stati sviluppati mediante elettrofilatura, quindi gli scaffold sono stati reticolati mediante N-idrossisulfo-succinimide sale sodico (NHS) e 1-(3-dimetilamminopropil)-3-etilcarbodiimmide cloridrato (EDC). Gli scaffold reticolati e reticolati sono stati valutati mediante microscopio elettronico a scansione (SEM). Per valutare il modello di interazione è stata utilizzata la spettroscopia infrarossa a trasformata di Fourier (FT-IR) b tra le piccole molecole e lo scaffold di GH. Quindi sono stati utilizzati i saggi MTT, Alamar Blue e CCK8 per studiare la biocompatibilità dei vari scaffold reticolati. Successivamente, l'espressione dei geni osteogenici delle cellule stromali del midollo osseo (BMSC) coltivate sugli scaffold è stata rilevata mediante reazione a catena della polimerasi di trascrizione inversa quantitativa (qRT-PCR). Infine, gli scaffold reticolati sono stati impiantati in un modello di difetto cranico di ratto per valutare gli effetti osteogenici in vivo. nei BMSC su scaffold GH/A/B era di circa 3,5 e 1,5 volte, rispettivamente, rispetto a quello del gruppo GH il giorno 7. I risultati hanno anche mostrato che gli scaffold GH modificati con AA e β-GP possono indurre significativamente la maggiore livelli di espressione genica osteogenica in modo temporale specifico. È importante sottolineare che AA e β-GP hanno promosso sinergicamente la differenziazione degli osteoblasti in vitro e hanno indotto drammaticamente la rigenerazione ossea in vivo. Sorprendentemente, l'impalcatura nanofibrosa GH doppiamente modificata AA e β-GP potrebbe fungere da modello per guidare la rigenerazione ossea e i difetti ossei sono stati quasi completamente riparati (94,28% ± 5,00%) a 6 settimane. Inoltre, i singoli scaffold nanofibrosi GH modificati con AA o β-GP potrebbero riparare rispettivamente il 62,95% ± 9,39% e il 66,56% ± 18,45% di difetti ossei a 12 settimane in vivo. Inoltre, AA e β-GP mostrano un effetto antinfiammatorio in vivo. I nostri dati hanno evidenziato che le nanofibre AA, β-GP e GH hanno creato microambienti osteoconduttivi e osteoinduttivi fini per la rigenerazione ossea. Abbiamo dimostrato che la nanofibra di GH doppiamente modificata AA e β-GP è uno scaffold versatile per l'ingegneria del tessuto osseo.
Alterazioni indotte da alcaloidi pirrolizidinici della sintesi dei prostanoidi nelle cellule endoteliali umane.come il principale prostanoide delle cellule endoteliali. Tutti gli effetti si sono verificati solo con in vitro- lasiocarpina e senecionina attivate metabolicamente. Al contrario, non è stato osservato alcun effetto per la PA echimidina, eliotrina, lasiocarpina, senecionina, senkirkina e platifillina in assenza di un sistema di metabolizzazione esterno fino alla massima concentrazione testata di 500 μM. Nel complesso, i nostri risultati confermano la tossicità del PA dipendente dal metabolismo e chiariscono le vie coinvolte, tra cui l'induzione di citochine infiammatorie e la deregolazione della via di sintesi dei prostanoidi nelle cellule endoteliali, collegando per la prima volta i cambiamenti PA-dipendenti nel rilascio di prostanoidi a distinte alterazioni dell'mRNA e livelli proteici degli enzimi della sintesi dei prostanoidi.
Sintesi e caratterizzazione di un supporto poliuretanico utilizzato per un trasferimento transmembrana prolungato di un estratto di peperoncino.I peperoncini rossi sono stati molto apprezzati in gastronomia e medicina tradizionale fin dall'antichità, sembra che non sia solo un ingrediente per il cibo ma anche un buon rimedio per varie condizioni mediche come aumento della pressione sanguigna e alti livelli di trigliceridi e colesterolo nel siero, infarto del miocardio, artrite ed emicrania. di questo studio è la caratterizzazione di un nuovo veicolo utilizzato per l'estratto incapsulato. L'estratto di peperoncino è stato ottenuto ed è stato fisicamente intrappolato all'interno di microparticelle di poliuretano al fine di diminuire il potenziale irritativo di questo estratto. Le particelle sono state valutate mediante misurazioni Zetasizer, neutrone a piccolo angolo scattering e analisi termica, microscopia elettronica a scansione (SEM) e spettroscopia infrarossa a trasformata di Fourier; l'efficacia dell'incapsulamento e la Il profilo di rilascio del farmaco è stato valutato mediante spettroscopia UV-Vis. Sono state eseguite biovalutazioni sulla pelle dei topi per prevedere il potenziale irritativo dei campioni. Sono stati confrontati due diversi tipi di campioni: microparticelle cave di poliuretano vs particelle di poliuretano contenenti l'estratto naturale. Le dimensioni delle particelle erano molto simili, ma il campione contenente l'estratto presenta tre popolazioni di particelle (l'indice di polidispersione aumenta da 0,3 a 0,6 da un campione all'altro). Le misurazioni del potenziale zeta e le immagini SEM indicano una tendenza media a formare cluster, mentre lo studio UV-Vis ha rivelato un'efficacia di incapsulamento di quasi il 70%. I risultati suggeriscono che l'incapsulamento di un estratto di peperoncino all'interno di microparticelle di poliuretano porta a un prodotto non irritante a rilascio prolungato: circa il 30% dell'estratto incapsulato viene rilasciato entro i primi 8 giorni e si raggiunge un massimo del 45% in 2 settimane".
Un nuovo nanocomplesso PAMAM scindibile mediato da legame disolfuro modificato da RGD contenente il segnale di localizzazione nucleare HMGB1 per migliorare l'efficienza della trasfezione genica.dendrimeri di poliammidoammina (PAMAM) modificati da glicole polietilenico (PEG) sono stati spesso studiati come vettore di consegna per la terapia genica. Tuttavia, la modifica di PAMAM con PEG utilizzando il legame covalente riduce significativamente il tasso di assorbimento cellulare e l'efficienza di trasfezione. Come conquistare queste barriere diventa una domanda scottante nel gene Il presente studio ha costruito un efficace sistema di rilascio del gene modificato da RGD scindibile mediato da legame disolfuro per superare le limitazioni di cui sopra. Il legame disolfuro è stato introdotto tra i dendrimeri PAMAM e le catene PEG per realizzare la scissione del PEG dal sistema di trasporto, mentre l'arginina- Ci si aspettava che il peptide glicina-aspartato (RGD) promuovesse il tasso di assorbimento cellulare. Un gruppo ad alta mobilità Box 1 (HMGB1) proteina c Contemporaneamente è stato introdotto il mantenimento del segnale di localizzazione nucleare (NLS) per promuovere ulteriormente l'efficienza dell'espressione genica. Un nanocomplesso pDNA/HMGB1/PAMAM-SS-PEG-RGD (DHP) è stato preparato tramite interazione elettrostatica e caratterizzato. I risultati hanno mostrato che il DHP ha generato piccole particelle ed è stato in grado di condensare e proteggere il pDNA dalla degradazione. Inoltre, il peptide RGD potrebbe promuovere in modo significativo l'assorbimento cellulare di un nanocomplesso. Lo studio del traffico intracellulare e dell'espressione in vitro ha indicato che il nanocomplesso DHP è sfuggito ai lisosomi e che i legami disolfuro tra PAMAM e PEG si sono scissi a causa dell'elevata concentrazione di GSH nel citoplasma, il pDNA di conseguenza è diventato esclusivamente localizzato nel nucleo sotto la guida di HMGB1, quindi promuovere l'espressione della proteina a fluorescenza rossa (RFP). È importante sottolineare che uno studio sull'attività antitumorale in vivo ha dimostrato che il nanocomplesso DHP ha una maggiore attività antitumorale rispetto a qualsiasi altro preparato di riferimento. Tutti questi risultati confermano che la DHP potrebbe essere una nuova strategia per migliorare la trasfezione e l'efficienza di espressione nella consegna genica.
Nanobarre d'oro modificate con radicali di nitrossido per la terapia fototermica del cancro guidata da TC/RM in vivo.Questo articolo presenta un rapporto di sintesi, caratterizzazione , e l'applicazione biomedica di nanotubi d'oro modificati con radicali di nitrossido (Au-TEMPO NR) per la terapia fototermica del cancro guidata dall'immagine. I nanotubi di Au sono stati sintetizzati attraverso il metodo di crescita mediata dai semi, è stato aggiunto 4-Amino-TEMPO e la reazione è proceduta sotto controllo magnetico Con una lunghezza media di 39,2 nm e un rapporto di aspetto medio di circa 3,85, gli Au-TEMPO NR hanno mostrato una buona capacità fototermica quando sono stati irradiati con laser a 808 nm. Gli Au-TEMPO NR possono essere conservati in PBS per più di 1 mese , non ha mostrato citotossicità contro le cellule tumorali e normali a una concentrazione fino a 3 mg/mL e ha funzionato come agente di contrasto a doppia modalità per l'imaging TC/risonanza magnetica (RM) in vitro e in vivo, a causa della loro elevata X -attenuazione dei raggi di Au e buona relassività r1 dei radicali nitrossido. Inoltre, hanno avuto un lungo tempo di ritenzione (~4 ore) negli organi principali, che ha consentito una lunga finestra temporale di imaging TC/RM per la diagnosi. I risultati della biodistribuzione hanno rivelato che questi Au-TEMPO NR si aggregavano passivamente nel fegato e nella milza. Dopo l'irradiazione con laser a 808 nm, i NR Au-TEMPO potrebbero ablare il tumore solido nei topi portatori di tumore 4T1, il che implicava che fossero un potenziale agente teranostico per l'imaging a doppia modalità e la terapia fototermica del cancro. Questo tipo di Au-TEMPO NR con le capacità dell'imaging TC/RM e della terapia fototermica, può svolgere un ruolo attivo nella terapia del cancro fototermica guidata dall'imaging.
Vescicole cationiche per un'efficiente trasfezione di shRNA nella linea cellulare di cancro al seno MCF-7.Soluzioni di somministrazione nuove e sicure per le terapie RNAi sono essenziali per ottenere il pieno potenziale della terapia genica del cancro. In questo studio, il nanocarrier vescicolare cationico è stato applicato per fornire il vettore di espressione di shRNA associato al carcinoma uroteliale 1 (lnc UCA1) alle cellule MCF-7. Le caratteristiche fisico-chimiche, la citotossicità e l'efficienza di trasfezione delle vescicole cationiche preparate da vari rapporti molari di tensioattivo anfifilico Tween 80 (T), squalene (S), lipide a carica cationica didodecildimetilammonio bromuro e polietilenimmina sono state determinate. Le dimensioni delle particelle delle vescicole nell'intervallo nanometrico sono state determinate mediante diffusione dinamica della luce e microscopia elettronica a trasmissione. <0.05) arresto del ciclo cellulare e apoptosi nelle cellule tumorali MCF-7. con 4,3 μg/mL di PEI, potrebbe essere sicuro ed efficiente per la terapia genica del cancro e può essere utilizzato i n ulteriori studi in vitro e in vivo.
SNEDDS solidi caricati con orlistat per una maggiore solubilità, dissoluzione e prestazioni in vivo.Il presente studio mirava a sviluppare auto-caricamenti solidi caricati con orlistat. sistema di rilascio di farmaci nanoemulsionante preconcentrato (SSP) con l'uso minimo di eccipienti lipidici per una maggiore solubilità, dissoluzione in vitro, inibizione della lipasi e prestazioni in vivo Nello screening dei veicoli solubilizzanti, Solutol HS15 e Lauroglicol 90 sono stati selezionati come tensioattivi e fase oleosa, rispettivamente. È stato costruito un diagramma di fase pseudo-ternario composto da Solutol HS15, Lauroglycol 90 e orlistat come agente anti-obesità e componente lipidico, e le regioni SSP sono state confermate in termini di distribuzione granulometrica in acqua, fusione punto mediante calorimetria a scansione differenziale e cristallinità mediante diffrazione dei raggi X. <0.05). In conclusione, la nuova formulazione SSP suggerita sarebbe un candidato efficace e promettente per il trattamento dell'obesità.
Stearil polietilenimina complessato con plasmidi come nucleo di nanoparticelle di albumina sierica umana legate in modo non covalente a plasmidi CRISPR/Cas9 o siRNA per interrompere o silenziare l'espressione di PD-L1 per l'immunoterapia.Nanoparticelle di PEI/HSA con CRISPR/Cas9 o siRNA, che interrompe o silenzia l'espressione del ligando-1 di morte cellulare programmata (PD-L1) per l'immunoterapia. PEI)/plasmidi/nanoparticelle di HSA sono state realizzate con il metodo della doppia emulsione. Sono stati caratterizzati da Dynamic Light Scattering (DLS), microscopio elettronico a trasmissione e valutati anche mediante studio in vitro su cellule CT 26. Le NP PEI/HSA legate in modo non covalente a 1 μg di plasmidi e 0,5 μg di siRNA sono state preparate per fornire contemporaneamente plasmidi e siRNA. Uno studio in vitro ha dimostrato che il siRNA non ha interferito con la trasfezione dei plasmidi e ha mostrato un'elevata efficienza di trasfezione con un effetto sinergico sull'inibizione dell'espressione di PD-L1 del 21,95%. Le NP PEI/HSA potrebbero essere uno strumento promettente per la consegna genica e una migliore immunoterapia.
Impatto polmonare dei nanotubi di biossido di titanio: esame dei polmoni di ratto esposti ai nanorod e delle cellule alveolari umane.Le nanoparticelle di biossido di titanio hanno numerose applicazioni, con conseguente Tuttavia, i dati tossicologici e di sicurezza disponibili sono insufficienti per quanto riguarda le particelle asferiche, come le nanoparticelle a forma di bastoncino. mezzo contenente nanorod, mentre i ratti giovani adulti hanno ricevuto la stessa sostanza per instillazione intratracheale per 28 giorni in 5 e 18 mg/kg di corpo- dosi di peso. L'accumulo di nanoparticelle nei polmoni e il conseguente stress ossidativo, danno cellulare e infiammazione sono stati valutati con metodi biochimici e istopatologici. -i roditori esposti. possono di conseguenza essere più dannosi di quanto generalmente si supponga. Il rischio per la salute sul lavoro suggerito dai risultati chiama per migliorare le misure di sicurezza.
estratto e loro potenziale antitumorale in vitro su cellule di carcinoma rinofaringeo.estratto di foglie (Sx) con metodo di riduzione. La caratterizzazione degli AuNPs sintetizzati è stata effettuata da diverse tecniche come l'assorbimento dello spettro ultravioletto-visibile, la diffrazione dei raggi X, la diffusione dinamica della luce, la spettroscopia infrarossa a trasformata di Fourier, la microscopia elettronica a trasmissione e l'analisi dei raggi X a dispersione di energia. Tutti i risultati hanno mostrato il successo della sintesi verde di AuNPs da Sx, che ha indotto l'apoptosi della linea cellulare C666-1 (linea cellulare NPC). C'è stato un declino sia nella vitalità cellulare che nella formazione di colonie nelle cellule C666-1 dopo il trattamento con Sx-AuNPs. È stato dimostrato che la morte cellulare è causata dall'autofagia e dai mitocondri via apoptotica dipendente. Pertanto, a causa del loro potenziale antitumorale, queste nanoparticelle accoppiate con Sx possono essere utilizzate per applicazioni in vivo e ricerca clinica in futuro.
Le cellule staminali mesenchimali caricate con substrato opale inverso contribuiscono a ridurre il rimodellamento miocardico dopo il trapianto in topi con infarto miocardico acuto.Il metodo di incubazione bidimensionale è ora il metodo più comunemente per la produzione di cellule staminali mesenchimali (MSC), tuttavia, l'espressione genica e la secrezione di fattori di crescita sono relativamente basse, quindi le cellule trapiantate non possono essere utilizzate efficacemente per potenziali applicazioni cliniche dopo infarto miocardico acuto (IMA). indagare se i nostri substrati di nuova realizzazione di opale inverso con microstrutture superficiali specifiche per la coltura di MSC possono aumentare la vitalità delle cellule e possono contribuire alla diminuzione del rimodellamento miocardico dopo il trapianto in topi AMI. La struttura opale inversa è fabbricata dal comodo approccio dal basso verso l'alto di l'autoassemblaggio di nanoparticelle colloidali. Le MSC derivate da topo sono state poi coltivate sui substrati quando espanse in tempi diversi s per studiare lo stato di crescita cellulare inclusa la morfologia. Quindi i substrati opali inversi caricati MSC sono stati trapiantati in topi AMI, l'apoptosi dei cardiomiociti e il rimodellamento del ventricolo sinistro sono stati ulteriormente confrontati. Per esplorare i possibili meccanismi di cura, le secrezioni e la vitalità delle MSC sui substrati sono state determinate utilizzando kit ELISA di topi e kit di analisi del potenziale di membrana mitocondriale JC-1 rispettivamente in condizioni normali e ipossiche. <0.001) sono stati entrambi confermati significativamente superiori a quelli della coltura convenzionale in capsula di Petri. La struttura dell'opale inverso può non solo regolare la disposizione delle MSC, ma anche contribuire alla sua crescita orientata. Il trapianto inverso di MSC con opale caricato ha estremamente frenato il rimodellamento miocardico, i meccanismi sottostanti potrebbero essere l'elevata vitalità e le secrezioni estremamente più elevate di fattori di crescita delle MSC come indicato da questo metodo.
Composito idrogel iniettabile contenente nanoparticelle d'oro modificate: implicazione nella rigenerazione del tessuto osseo.Per un'efficace rigenerazione ossea, è necessario impiantare uno scaffold biocompatibile che sia in grado di indurre la crescita cellulare e la stimolazione osteogenica continua nel sito difettoso. Qui, suggeriamo un sistema di idrogel iniettabile utilizzando gelatina reticolabile enzimatica (Gel) e nanoparticelle d'oro funzionalizzate (GNP). In questo lavoro, la tiramina (Ty) è stata sintetizzata su la spina dorsale di gelatina (Gel-Ty) per consentire una reazione di reticolazione fenolica con perossidasi di rafano (HRP). N-acetilcisteina (NAC) è stata attaccata alla superficie GNPs (G-NAC) per promuovere l'osteodifferenziazione. Gli idrogeli Gel-Ty contenenti G -NAC (Gel-Ty/G-NAC) aveva una resistenza meccanica e una biocompatibilità adeguate per incorporare e supportare la crescita di cellule staminali derivate adipose umane (hASC) durante un test di proliferazione per tre giorni. Inoltre, G-NAC ha promosso l'osteodifferenzia zione sia quando è stato incluso in Gel-Ty sia quando è stato utilizzato direttamente nelle hASC. Gli effetti osteogenici sono stati dimostrati dal test di attività della fosfatasi alcalina (ALP). Questi risultati indicano che la reazione di reticolazione del fenolo è adatta per idrogel iniettabili per la rigenerazione dei tessuti e il G-NAC stimola la rigenerazione ossea. Sulla base dei nostri risultati, suggeriamo che gli idrogel Gel-Ty/G-NAC possono servire sia come materiale di innesto biodegradabile per il trattamento dei difetti ossei sia come un buon modello per applicazioni di ingegneria tissutale come la somministrazione di farmaci, la somministrazione di cellule e vari usi di rigenerazione dei tessuti.
Struttura vascolare nanofibrosa macroporosa con biodegradabilità migliorata e infiltrazione di cellule muscolari lisce preparata mediante tecnica di separazione a doppia fase.La rapida degradazione dell'innesto vascolare e l'infiltrazione di cellule muscolari lisce (SMC) nell'innesto vascolare sono considerate critiche per la rigenerazione dei neo-vasi funzionali. Nel nostro studio precedente, è stata sviluppata una nuova tecnica di separazione a doppia fase per preparare un vaso macroporoso nanofibroso poli (acido L-lattico ) (PLLA)/poli(ε-caprolattone) (PCL) impalcatura vascolare per fase che separa la miscela polimerica immiscibile. Tuttavia, la lenta degradazione dell'infiltrazione cellulare PLLA/PCL limitata. Qui, abbiamo ipotizzato che l'acido poli (lattico-co-glicolico ) (PLGA) sarebbe miscibile con PLLA ma immiscibile con PCL. Quindi, PLGA può essere introdotto nella miscela PLLA/PCL per fabbricare scaffold nanofibrosi macroporosi con una migliore biodegradabilità utilizzando la tecnica di separazione a doppia fase. è stata valutata l'entità di PLGA con PLLA e PCL. Quindi, lo scaffold PLLA/PLGA/PCL è stato preparato mediante tecnica di separazione a doppia fase. Gli scaffold preparati sono stati caratterizzati in termini di morfologia, degradazione in vitro, proprietà meccaniche e infiltrazione di cellule\' e vitalità per le SMC vascolari umane (HVSMC). Infine, il fattore di crescita derivato dalle piastrine-BB (PDGF-BB) è stato immobilizzato sullo scaffold ed è stato studiato il suo effetto sulla bioattività delle HVSMC. PLGA è miscibile con PLLA ma immiscibile con PCL come ipotizzato. L'aggiunta di PLGA ha ampliato la dimensione dei pori e migliorato la biodegradabilità dello scaffold composito. In particolare, l'impalcatura PLLA/PLGA/PCL con il rapporto di miscelazione di 30:40:30 possedeva una migliore interconnettività dei pori per l'infiltrazione di cellule\' e sufficienti proprietà meccaniche. Inoltre, gli HVSMC potrebbero crescere e infiltrarsi in questo scaffold e la modifica della superficie con PDGF-BB sullo scaffold nanofibroso ha potenziato la migrazione e la proliferazione degli HVSMC. Questo studio fornisce una strategia per espandere la tecnica di separazione a doppia fase nell'utilizzo di una miscela polimerica ternaria anche multinaria per fabbricare scaffold nanofibrosi macroporosi con proprietà fisico-chimiche migliorate. Lo scaffold PLLA/PLGA/PCL preparato sarebbe promettente per la rigenerazione dei mezzi di tunica funzionali nell'ingegneria dei tessuti vascolari.
nanoparticelle in ratti Sprague Dawley dopo iniezione endovenosa.NP non è chiaro. Le NP (7-10 nm) sono state valutate in ratti Sprague Dawley dopo uno iniezione endovenosa nella vena della coda. I ratti sani sono stati divisi casualmente in un gruppo di controllo e sei gruppi sperimentali. Trenta giorni dopo il trattamento, i ratti sono stati uccisi, quindi sono stati raccolti campioni di sangue e di tessuto per esami ematologici, biochimici, di contenuto di elementi, istopatologici e occidentali. analisi blot. NP a 30 mg/kg hanno mostrato effetti avversi più gravi. NP nei ratti a 30 mg/kg. Per garantire un uso sicuro di questi Janus NP di nuova concezione nella diagnosi e nella terapia del cancro, sono necessari ulteriori studi sugli animali per valutare a lungo termine bioeffetti.
Nanoparticelle polimeriche fluorescenti nel vicino infrarosso attivate da proteasi caricate con doxorubicina per l'imaging e la terapia del cancro.Nonostante i progressi significativi nel campo dell'oncologia, il cancro rimane una delle principali cause di morte. La chemioterapia è una delle opzioni di trattamento più comuni per i malati di cancro, ma è ben noto che provoca tossicità fuori bersaglio. Le nanomedicine teranostiche che integrano funzioni diagnostiche e terapeutiche all'interno di una piattaforma all-in-one possono aumentare la selettività del tumore per una chemioterapia più efficace e aiutare nella diagnosi e nel monitoraggio delle risposte terapeutiche. -poli (glicole etilenico). La poli-l-lisina nel primo copolimero è stata decorata in modo covalente con molecole fluorescenti nel vicino infrarosso Alexa Fluor 750. Le nanoparticelle sferiche avevano una dimensione media di 60-80 nm Il farmaco chemioterapico doxorubicina è stato incapsulato nel nucleo di nanoparticelle con un carico del 3% (p:p) e rilasciato in modo controllabile per un periodo di 30 giorni. Un aumento di 33 volte della fluorescenza nel vicino infrarosso, mediato dalla scissione mediata dalla proteasi della poli-l-lisina marcata con Alexa Fluor 750 sulla superficie delle nanoparticelle, è stato osservato dopo l'interazione con il modello di proteasi tripsina. La citocompatibilità delle nanoparticelle prive di farmaci e l'inibizione della crescita delle nanoparticelle caricate con il farmaco sulle cellule di cancro al seno MDA-MB-231 sono state studiate con un test di vitalità cellulare a luminescenza. È stato scoperto che le nanoparticelle prive di farmaci causano una tossicità minima, anche ad alte concentrazioni (0,2-2.000 µg/mL), mentre le nanoparticelle caricate con doxorubicina hanno ridotto significativamente la vitalità cellulare a concentrazioni di farmaco >10 µM. Infine, è stata studiata l'interazione delle nanoparticelle con le cellule del cancro al seno utilizzando la microscopia a fluorescenza, dimostrando il potenziale delle nanoparticelle di agire come agenti di imaging ottico a fluorescenza nel vicino infrarosso e vettori di somministrazione di farmaci. Nanoparticelle attivabili enzimaticamente, caricate con doxorubicina, inferiori a 100 nm sono state preparate con successo mediante nanoprecipitazione di miscele di copolimeri. Queste nanoparticelle si sono rivelate adatte come sistemi di somministrazione controllata di farmaci e agenti di contrasto per l'imaging delle cellule tumorali.
Effetti delle nanofibrille di cellulosa dipendenti dalla funzionalità sui meccanismi tollerogenici delle cellule dendritiche umane.Le nanofibrille di cellulosa (CNF) sono nanomateriali attraenti per varie applicazioni biomediche a causa di la loro eccellente biocompatibilità e proprietà biomimetiche. Tuttavia, le loro proprietà immunoregolatrici non sono sufficientemente studiate, soprattutto in relazione alla loro funzionalizzazione, che potrebbe causare problemi durante la loro applicazione clinica. Utilizzando un modello di cellule dendritiche umane (DC), che hanno un ruolo centrale nella regolazione della risposta immunitaria, abbiamo studiato come CNF differenzialmente funzionalizzato, cioè CNF nativo (n), 2,2,6,6-tetrametilpiperidina 1-ossil radicalmente ossidato (c) CNF e acido 3-aminopropilfosforico funzionalizzato (APAc) CNF, influenzano le proprietà delle DC, la loro vitalità, morfologia, potenziale di differenziazione e maturazione e la capacità di regolare la risposta immunitaria mediata dalle cellule T. Cellule T regolatorie nell'indolamina 2 ,modo 3-diossigenasi-1-dipendente. Diverse proprietà tollerogeniche del CNF erano correlate alla loro dimensione e alla funzionalizzazione dell'APA, nonché alla diversa espressione di CD209 e dei fasci di actina nel punto di contatto con il CNF. La capacità di indurre diversi tipi di risposte immunitarie tollerogeniche mediate da DC da parte del CNF funzionalizzato apre nuove prospettive per la loro applicazione come nanomateriali ben tollerati nell'ingegneria dei tessuti e nuove piattaforme per la terapia delle patologie infiammatorie mediate da cellule T.
Nanoparticelle di selenio funzionalizzate per la somministrazione mirata di doxorubicina per migliorare la terapia del cancro del polmone non a piccole cellule.Nanoparticelle di selenio (SeNP) caricate con farmaci chemioterapici forniti una nuova prospettiva per la terapia del cancro. Qui, i SeNP sono stati modificati con il peptide ciclico (Arg-Gly-Asp-d-Phe-Cys [RGDfC]) per fabbricare il vettore di consegna mirato al tumore RGDfC-SeNPs e, quindi, la doxorubicina (DOX) è stata caricato sulla superficie di RGDfC-SeNPs per migliorare l'efficacia antitumorale di DOX nella terapia del carcinoma polmonare non a piccole cellule La caratterizzazione della struttura chimica di RGDfC-Se@DOX ha mostrato che DOX è stato caricato con successo sulla superficie di RGDfC-SeNPs per preparare sistema di rilascio di farmaci antitumorali funzionalizzato RGDfC-Se@DOX. RGDfC-Se@DOX ha mostrato un'efficace captazione cellulare nelle cellule A549 ed è entrato nelle cellule A549 principalmente per via di endocitosi mediata da clatrina. Rispetto a DOX libero o Se@DOX alla dose equivalente di DOX, RGDfC-Se@DOX ha mostrato una maggiore attività per inibire la proliferazione e la migrazione/invasione delle cellule A549\' e indurre l'apoptosi delle cellule A549\'. Ancora più importante, rispetto al sistema di somministrazione di targeting passivo Se@DOX, il sistema di somministrazione di targeting attivo RGDfC-Se@DOX ha mostrato un'efficacia antitumorale più significativa in vivo. Nel loro insieme, RGDfC-Se@DOX potrebbe essere un nuovo promettente farmaco candidato per la terapia del carcinoma polmonare.
Polipeptide modificato con peptide T7 con legami disolfuro per la consegna mirata del DNA plasmidico per la terapia genica del cancro alla prostata.I vettori sono essenziali per la consegna genica di successo. Nel presente studio, un vettore del gene cationico mirato al tumore, noto come peptide acido arginina-aspartico reticolato disolfuro modificato dal peptide HAIYPRH (T7) (CRD-PEG-T7), è stato progettato per la consegna mirata di DNA plasmidico (pDNA ) per la terapia genica del cancro alla prostata (PCa). È stata determinata la struttura di CRD-PEG-T7 e sono stati esaminati l'efficacia di assorbimento cellulare, l'efficacia di trasfezione genica, la citotossicità e l'effetto mirato del complesso CRD-PEG-T7-plasmide DNA I risultati hanno dimostrato che il complesso DNA plasmidico CRD-PEG-T7 era nanodimensionato e aveva una superficie caricata positivamente, una buona efficacia di assorbimento cellulare, citotossicità minima e un effetto a doppio bersaglio rispetto al complesso DNA plasmidico CRD-PEG. Il nuovo sistema di rilascio modificato con peptide T7 è stato in grado di targ et il recettore della transferrina altamente espresso (TfR) sulle cellule tumorali con un'efficienza quattro volte superiore a quella del sistema non modificato. I risultati di cui sopra indicano che il complesso DNA plasmidico CRD-PEG-T7 potrebbe rivelarsi un promettente sistema di trasmissione genica mirato al tumore metastatico osseo.
LED per fotoni, fisiologia e cibo.L'illuminazione basata su diodi a emissione luminosa (LED) non solo è più efficiente dal punto di vista energetico rispetto all'illuminazione tradizionale, ma consente inoltre prestazioni e controllo migliorati. Il colore, l'intensità e la distribuzione della luce possono ora essere controllati con una precisione senza precedenti, consentendo di utilizzare la luce sia come segnale per specifiche risposte fisiologiche nell'uomo e nelle piante, sia come combustibile efficiente per la produzione di alimenti freschi Qui mostriamo come una comprensione ampia e migliorata delle risposte fisiologiche alla luce faciliterà maggiori risparmi energetici e fornirà benefici per la salute e la produttività che non sono stati precedentemente associati all'illuminazione.
Diodi emettitori di luce efficienti basati su radicali con emissione di doppietto., la cui emissione ha origine da un doppietto di spin, piuttosto che da un eccitone singoletto o tripletta. Mentre il processo di emissione è ancora consentito lo spin in questi OLED, i limiti di efficienza imposti dagli eccitoni tripletti vengono aggirati per i doppietti. Utilizzando un emettitore di radicali luminescenti, dimostriamo un OLED con un'efficienza quantica esterna massima del 27% a una lunghezza d'onda di 710 nanometri -il valore più alto riportato per LED rosso intenso e infrarossi. Per un semiconduttore organico standard a guscio chiuso, lacune ed elettroni occupano rispettivamente gli orbitali molecolari più occupati e meno occupati (HOMO e LUMO), e si ricombinano per formare eccitoni singoletto o tripletta Gli emettitori radicali hanno un orbitale molecolare occupato singolarmente (SOMO) nello stato fondamentale, dando un doppietto complessivo di spin 1/2. Se, come previsto su basi energetiche, sia gli elettroni che le lacune occupano questo livello SOMO, ricombinare zione riporta il sistema allo stato fondamentale, senza emissione di luce. Tuttavia, nei nostri OLED molto efficienti, otteniamo l'iniezione selettiva di lacune nell'HOMO e l'iniezione di elettroni nel SOMO per formare lo stato eccitato del doppietto fluorescente con un'efficienza quantistica interna quasi unitaria.
TDP-43 e RNA formano miogranuli simili all'amiloide nel muscolo rigenerante.Una caratteristica istopatologica dominante nelle malattie neuromuscolari, inclusa la sclerosi laterale amiotrofica e miopatia da corpi inclusi, è l'aggregazione citoplasmatica della proteina legante l'RNA TDP-43. Sebbene rare mutazioni in TARDBP, il gene che codifica per TDP-43, che portano a un misfolding proteico spesso causano aggregazione proteica, la maggior parte dei pazienti non ha alcuna mutazione in TARDBP Pertanto, gli aggregati di TDP-43 wild-type si presentano nella maggior parte dei pazienti con un meccanismo sconosciuto. Qui mostriamo che TDP-43 è una proteina essenziale per la normale formazione del muscolo scheletrico che forma inaspettatamente assemblaggi oligomerici citoplasmatici simili all'amiloide, che chiamiamo mio-granuli, durante la rigenerazione del muscolo scheletrico nei topi e nell'uomo. I mio-granuli si legano agli mRNA che codificano per le proteine sarcomeriche e vengono eliminati quando le miofibre maturano. Sebbene i mio-granuli si verifichino durante la normale rigenerazione del muscolo scheletrico, i mio-granuli s possono seminare fibrille amiloidi TDP-43 in vitro e sono aumentate in un modello murino di miopatia da corpi inclusi. Pertanto, l'aumento dell'assemblaggio o la diminuzione della clearance dei miogranuli funzionalmente normali potrebbero essere la fonte degli aggregati citoplasmatici di TDP-43 che si verificano comunemente nelle malattie neuromuscolari.
DYNLL1 si lega a MRE11 per limitare la resezione terminale del DNA nelle cellule carenti di BRCA1.La resezione terminale limitata del DNA è la chiave per alterare la ricombinazione omologa in BRCA1- cellule cancerose mutanti Qui, utilizzando uno schermo CRISPR con perdita di funzione, identifichiamo DYNLL1 come un inibitore della resezione terminale del DNA. La perdita di DYNLL1 consente la resezione terminale del DNA e ripristina la ricombinazione omologa nelle cellule mutanti BRCA1, inducendo così la resistenza al platino farmaci e inibitori della poli (ADP-ribosio) polimerasi. La bassa espressione di BRCA1 è correlata con un aumento delle aberrazioni cromosomiche nei carcinomi ovarici primari e le sequenze di giunzione delle varianti strutturali somatiche indicano una ridotta ricombinazione omologa. Diminuzioni concomitanti nell'espressione di DYNLL1 nei carcinomi con bassa espressione di BRCA1 ridotta alterazioni genomiche e aumento dell'omologia alle lesioni Nelle cellule, DYNLL1 limita la degradazione nucleolitica delle estremità del DNA associandosi al macchinario di resezione terminale del DNA (complesso MRN, B LM elicasi e DNA2 endonucleasi). In vitro, DYNLL1 si lega direttamente a MRE11 per limitare la sua attività di resezione finale. Pertanto, deduciamo che DYNLL1 è un importante fattore anti-resezione che influenza la stabilità genomica e le risposte alla chemioterapia dannosa per il DNA.
I polimorfismi CAV1 rs1049334, rs1049337, rs7804372 potrebbero essere il potenziale rischio di tumorigenicità del cancro urinario: una revisione sistematica e una meta-analisi.Background As an membrana integrale, Caveolin-1 (CAV1), è un componente fondamentale per costituire la proteina caveolae. È stato dimostrato che influenza la tumorigenicità, tra cui il cancro della vescica, del colon, del fegato, dello stomaco, della mammella e del polmone. Diverse pubblicazioni hanno illustrato la relazione tra tra polimorfismo CAV1 e cancro urinario, ma i risultati non sono stati coerenti. Abbiamo eseguito una meta-analisi completa per esplorare le associazioni e rimuovere la nebbia. Materiali e metodi È stato eseguito un ampio recupero in PubMed, Embase, Medline, Web of Science, CNKI, e database Wanfang fino a settembre 2018. Odds ratio (OR) e intervalli di confidenza al 95% (IC) sono stati condotti per valutare la forza complessiva delle associazioni in cinque modelli genetici, nonché in analisi di sottogruppi, stratificate per et hnicità, tipo di cancro o fonte di controllo. Per valutare l'eterogeneità e il bias di pubblicazione sono stati applicati Q-test, Egger\'s test e Begg\'s funnel plot. L'analisi in-silico è stata gestita per dimostrare la relazione tra il polimorfismo e il livello di espressione dell'mRNA di CAV1. Risultati 34 studi caso-controllo con un totale di 13.778 casi di cancro e 20.581 controlli sani sono stati arruolati nella meta-analisi. Il risultato del sondaggio ha mostrato che un aumento del rischio di polimorfismo rs1049334 sul cancro urinario è stato riscontrato nel modello di confronto degli omozigoti (MM vs. WW: OR = 1.240, 95% CI = 1.052-1.462, P = 0.011) e nel modello di confronto recessivo ( MM vs MW + WW: OR = 1.198, 95% CI = 1.018-1.410, P = 0.030). Inoltre, il polimorfismo rs17878467 può svolgere un ruolo protettivo nella tumorigenesi del cancro urinario, mostrato nel modello di confronto eterozigote (MW vs. WW: OR = 0.882, 95% CI = 0.78-0.999, P = 0.048). Per rs7804372, i risultati complessivi aggregati hanno rivelato un rischio di riduzione nel modello di contrasto allelico (M vs. W: OR = 0.734, 95% CI = 0.544-0.99, P = 0.043), modello di confronto omozigote (MM vs. WW: OR = 0.532, 95% CI = 0.313-0.905, P = 0.020) e modello di confronto recessivo (MM vs MW + WW: OR = 0.580, 95% CI = 0.437-0.77, P < 0.001). Nelle analisi stratificate per tipi di cancro, il rischio di PCa viene declassato di rs7804372 in tutti e cinque i modelli genetici. L'analisi GTEx in-silico indica che il polimorfismo di CAV1 influenza la sua espressione di mRNA con un'efficacia dose-dipendente del suo allele mutante. Conclusione Il polimorfismo rs1049334 di CAV1 aumenta il rischio di cancro urinario, mentre i polimorfismi rs1049337 e rs7804372 possono agire come protettore del cancro urinario. Sono necessari ulteriori studi ampi e ben progettati in varie popolazioni per confermare i risultati.
Il ruolo delle fibre della coda laterale durante il ciclo di infezione del fago lambda.Il batteriofago λ è servito come modello importante per la biologia molecolare e diversi processi cellulari negli ultimi decenni. Nel 1992, è stato scoperto che il ceppo fagico utilizzato nella maggior parte dei laboratori di tutto il mondo, pensato come wild type, portava una mutazione nel gene stf che codifica per quattro fibre laterali della coda. Finora, il ruolo delle fibre della coda laterale durante il ciclo di infezione, specialmente a livello di singola cellula, rimane in gran parte sconosciuto. Qui abbiamo utilizzato sistemi reporter fluorescenti per caratterizzare l'effetto delle fibre della coda laterale sull'infezione dei fagi. Abbiamo scoperto che le fibre della coda laterale interferiscono con processo di espulsione del DNA fagico, molto probabilmente attraverso il legame con i loro recettori, OmpC, che porta a un'infezione fallita più frequente. Tuttavia, le fibre della coda laterale non sembrano influenzare il processo decisionale di lisi-lisogenia o il tempo di lisi.
Primo paziente adulto con sindrome TARP: un caso clinico.Sindrome TARP (talipes equinovarus, difetto del setto interatriale, sequenza di Robin e persistenza del vena cava superiore sinistra) è una rara sindrome legata all'X che spesso determina mortalità pre o postnatale nei maschi affetti. Nel 2010, RBM10 è stato identificato come il gene che causa la malattia e descriviamo il primo paziente adulto con sindrome TARP a età 28 anni, ampliando così lo spettro fenotipico. Il nostro paziente aveva sequenza di Robin, difetto del setto interatriale, disabilità intellettiva, scoliosi e altri reperti precedentemente associati alla sindrome TARP. Inoltre, aveva naso prominente e ponte nasale, esotropia, spostamento del punti lacrimali in direzione craniale, denti piccoli e fossetta sul mento, che sono i risultati che non sono stati precedentemente associati alla sindrome TARP. Il nostro paziente è stato trovato portatore di una mutazione emizigote c.273_283delinsA RBM10 nell'esone 4, un esone saltato in tredi cinque trascrizioni codificanti proteine, suggerendo una possibile spiegazione per il nostro paziente che sopravvive fino all'età adulta. Il sequenziamento diretto del DNA materno ha indicato un possibile mosaicismo, confermato da un massiccio sequenziamento parallelo. Una delle due sorelle era eterozigote per la mutazione. Pertanto, raccomandiamo che le sorelle dei pazienti con sindrome TARP vengano testate come portatrici prima della pianificazione familiare, indipendentemente dai risultati del test per portatrici della madre. Sulla base del nostro paziente e dei pazienti precedentemente segnalati, suggeriamo di considerare la sindrome TARP come una possibile diagnosi nei maschi con disabilità intellettiva grave o profonda combinata con difetto cardiaco del setto e sequenza di Robin, micrognazia o palatoschisi.
Paziente giapponese con sindrome di Cole-Carpenter con varianti eterozigoti composte di SEC24D.La sindrome di Cole-Carpenter è una rara displasia scheletrica associata a massa ossea ridotta o una sindrome simile all'osteogenesi imperfetta (OI). Solo 3 e 6 varianti di SEC24D sono state riportate in pazienti con sindrome di Cole-Carpenter di tipo 2 e OI autosomica recessiva, rispettivamente. Descriviamo un ragazzo giapponese di 15 anni con bassa statura del tipo a tronco corto e anomalie craniofacciali tra cui proptosi oculare, marcata protuberanza frontale, ipoplasia mediofacciale e micrognazia. Queste caratteristiche erano coerenti con una diagnosi di sindrome di Cole-Carpenter. Aveva una bassa densità minerale ossea e un'impressione basilare. Sequenziamento dell'intero esoma l'analisi ha identificato varianti bialleliche in SEC24D (p. Arg484* e p. Arg313His) nel paziente. Riporteremo un paziente con varianti eterozigoti composte di SEC24D che causano la sindrome di Cole-Carpenter di tipo 2.
Smascheramento della CPX familiare mediante WES e identificazione di nuovi segni clinici.Le mutazioni nel gene del fattore di trascrizione T-Box TBX22 si trovano nella fessura legata all'X Palato con o senza sindrome da anchilloglossia (sindrome CPX) Oltre all'ereditarietà legata all'X, l'anchiloglossia, presente nella maggior parte dei pazienti con CPX, è un importante marker diagnostico, ma è spesso mancato o non segnalato, in quanto è un "minore "caratteristica ". Altre anomalie descritte includono labioschisi, micro e/o ipodonzia e caratteristiche della sindrome CHARGE. Abbiamo condotto il sequenziamento dell'intero esoma (WES) su 22 individui da 17 labioschisi non sindromica "a priori" e/o Famiglie di palatoschisi (CL/P). Abbiamo filtrato i dati per le varianti patogene eterozigoti all'interno di un set di geni candidati predefiniti. Due mutazioni canoniche del sito di splicing sono state trovate in TBX22. La ri-fenotipizzazione dettagliata dei due probandi e delle loro famiglie ha svelato le caratteristiche orofacciali precedentemente non associato al CPX phe spettro noto: atresia delle coane, sequenza di Pierre-Robin e crescita eccessiva sul bordo posteriore del palato duro, su ciascun lato della linea mediana palatale. Questo studio sottolinea l'importanza dell'analisi WES nei casi familiari di CLP, combinata con la fenotipizzazione profonda (inversa) nelle fessure "a priori" non sindromiche.
Presentazione atipica della RASopatia BRAF pediatrica con encefalopatia acuta.Segnaliamo una bambina di 9 anni con ipotonia, grave ritardo motorio, mancanza di linguaggio, e dismorfismi facciali che hanno sviluppato encefalopatia acuta con grave esito neurologico. L'analisi di sequenziamento dell'intero esoma (WES) basata su trio ha rilevato una mutazione eterozigote de novo nel gene BRAF che porta alla diagnosi di una presentazione atipica della sindrome cardiofaciocutanea (CFC). Questo è il secondo caso di sindrome CFC complicata da encefalopatia acuta riportato in letteratura e supporta l'ipotesi che l'encefalopatia acuta possa essere una delle complicanze della sindrome a causa di una suscettibilità intrinseca a questo evento acuto. Il rapporto evidenzia inoltre il ruolo di WES nel fornire un diagnosi rapida in pazienti in condizioni critiche con presentazione atipica di sindromi genetiche rare.
Rimodellamento metabolico del glucosio, degli acidi grassi e delle vie redox nel cuore di topi diabetici di tipo 2.I cuori di animali diabetici di tipo 2 mostrano perturbazioni nell'eccitazione -accoppiamento della contrazione, compromettendo la contrattilità dei miociti e ritardando il rilassamento, insieme a modelli alterati di consumo del substrato. In condizioni di alta glicemia e stimolazione β-adrenergica, il palmitato può, almeno in parte, compensare la disfunzione del ventricolo sinistro (LV) nei cuori di topi diabetici, migliorando contrattilità e rilassamento ripristinando la pressione di perfusione coronarica Calcoli fluxome del catabolismo centrale nei cuori diabetici mostrano che, in presenza di palmitato, c'è un rimodellamento metabolico che coinvolge il ciclo dell'acido tricarbossilico, le vie del poliolo e del pentoso fosfato, portando a un migliore equilibrio redox nel citoplasma e compartimenti mitocondriali In condizioni di glucosio elevato e aumento della domanda di energia, il reindirizzamento metabolico/flussomico porta al ripristino dell'equilibrio redox impartito dal palmitato aiuta a spiegare la funzione ventricolare sinistra mantenuta e può contribuire alla progettazione di nuovi approcci terapeutici per prevenire la disfunzione cardiaca nei pazienti diabetici. Il diabete di tipo 2 (T2DM) porta a una riduzione delle prestazioni miocardiche e, infine, a insufficienza cardiaca. L'eccessivo accumulo di lipidi e glucosio è fondamentale per la cardiomiopatia T2DM. Dati precedenti hanno mostrato che il palmitato (Palm) o il glutatione preservavano l'energia mitocondriale del cuore/l'equilibrio redox in caso di eccesso di glucosio, salvando l'accoppiamento eccitazione-contrazione cardiaca stimolato da β-adrenergici. Tuttavia, i meccanismi alla base del miglioramento delle prestazioni contrattili di accompagnamento sono stati ampiamente ignorati. Qui esploriamo nel cuore intatto sotto eccesso di substrato il rimodellamento metabolico associato alla funzione cardiaca in topi diabetici db/db sottoposti a stress dato da stimolazione -adrenergica con isoproterenolo e glucosio alto rispetto ai loro controlli non diabetici (+/+, WT) in condizioni euglicemiche. Quando perfusi con Palm, i cuori T2DM hanno mostrato una migliore contrattilità/rilassamento rispetto al WT, accompagnato da un ampio rimodellamento metabolico come dimostrato dalla metabolomica-flussomica combinata con la bioinformatica e la modellazione computazionale. Il metaboloma cardiaco T2DM ha mostrato differenze significative nell'abbondanza di metaboliti nelle vie correlate al glucosio, ai lipidi e al metabolismo redox. Utilizzando un modello computazionale convalidato del catabolismo centrale del cuore, che comprende l'ossidazione del glucosio e degli acidi grassi (FA) nei compartimenti citoplasmatico e mitocondriale, abbiamo stimato che i flussi attraverso le vie di degradazione del glucosio sono ∼2 volte inferiori nel cuore da diabete di tipo 2 rispetto a WT in tutti i casi condizioni studiate. L'aggiunta di palma stimola il miglioramento dello stato redox tramite una maggiore β-ossidazione e una riduzione dell'assorbimento del glucosio, portando al reindirizzamento del flusso lontano dai percorsi che consumano l'ossidoriduzione (ad esempio poliolo) mantenendo il flusso attraverso percorsi che generano ossidoriduzione insieme al rifornimento condiviso di glucosio-FA e \' della fosforilazione ossidativa. Pertanto, gli FA disponibili come Palm possono aiutare a migliorare la funzione attraverso un migliore equilibrio redox nei cuori con diabete di tipo 2 durante i picchi di iperglicemia e l'aumento del carico di lavoro.
Un nuovo approccio alla candidemia? Il ruolo potenziale dell'inibizione del checkpoint.Le infezioni da Candida spp. causano morbilità e mortalità significative nonostante il trattamento intensivo con agenti antifungini Sono urgentemente necessarie nuove opzioni di trattamento. I pazienti prevalentemente immunocompromessi sono colpiti. Ciò garantisce la conclusione che il rafforzamento dell'immunità dell'ospite può avere il potenziale per migliorare i risultati. Studi recenti implicano un potenziale beneficio dell'inibizione del checkpoint che inverte l'iporeattività dell'immunità innata e adattativa durante le infezioni fungine invasive e candidosi invasiva in particolare. Diamo qui una breve panoramica dei primi dati preclinici in vitro e in vivo e delle prove cliniche in casi selezionati.
Percorso di isterectomia: uno studio di coorte retrospettivo negli ospedali del NHS inglesi dal 2011 al 2017.Valutare la variazione nel percorso di isterectomia in 7 anni e per valutare la variazione regionale nella pratica. Studio di coorte retrospettivo. English NHS Hospitals 2011-2017. 230 876 pazienti sottoposti a isterectomia per sei categorie diagnostiche (cancro dell'endometrio, endometriosi e dolore, disturbi mestruali, fibromi, masse annessiali benigne e \'altro\ ') identificato da Hospital Episode Statistics. La proporzione di isterectomie eseguite per ciascuna via è stata calcolata per ogni anno complessivo e per ogni diagnosi primaria per anno. I confronti tra il 2011 e il 2017 sono stati effettuati tramite test chi-quadro. Per valutare i coefficienti di correlazione sono stati calcolati tendenze nel periodo di studio. L'analisi della variazione regionale nella pratica è stata limitata al 2017. È stata eseguita una regressione logistica multivariabile per ottenere probabilità grezze e aggiustate di avere un accesso minimo ss isterectomia. La proporzione di procedure laparoscopiche addominali, vaginali, laparoscopiche e fallite per ciascuna diagnosi primaria per anno di studio. Probabilità di un'isterectomia ad accesso minimo nel 2017. La percentuale di isterectomie eseguite per via laparoscopica è aumentata dal 20,2% nel 2011 al 47,2% nel 2017, così come la percentuale di procedure laparoscopiche fallite; 1,7% nel 2011 al 2,8% nel 2017. La percentuale di isterectomie addominali è diminuita dal 70,4% nel 2011 al 46,5% nel 2017. C'è stata una diminuzione più contenuta delle procedure vaginali dal 7,8% nel 2011 al 3,5% nel 2017. Variazione regionale nel La via dell'isterectomia è stata dimostrata nel 2017, che persisteva quando aggiustata per fattori confondenti. La proporzione di procedure laparoscopiche è aumentata ed è stata la via più comune di isterectomia per questa coorte nel 2017. Nel 2017 sono state rilevate differenze regionali significative nella via di isterectomia. la pratica.
Versatilità strutturale che serve la funzione del motivo HRD nel ciclo catalitico della proteina tirosina chinasi, Src.La mutagenesi sito-diretta è un approccio tradizionale per l'analisi struttura-funzione delle proteine tirosin chinasi e richiede la generazione, l'espressione, la purificazione e l'analisi di ciascun enzima mutante. In questo studio, riportiamo un versatile sistema di screening batterico ad alto rendimento in grado di identificare mutanti chinasi funzionali mediante rilevazione immunologica di fosforilazione della tirosina. Due caratteristiche chiave di questo sistema di screening sono degne di nota. In primo luogo, invece di macchiare le colonie batteriche direttamente dalle piastre di agar alla membrana di nitrocellulosa, le colonie sono state coltivate in piastre da 96 pozzetti e quindi individuate in duplicato sulla membrana con controlli appropriati. Ciò ha reso lo screening molto più affidabile rispetto al trasferimento diretto del colony blotting. Una seconda caratteristica è l'uso parallelo di una proteina tirosina fosfatasi (PTP)-expres sing host e un host che non esprime PTP. Poiché i mutanti Src ad alta attività sono tossici per l'ospite, il sistema PTP ha permesso l'identificazione di mutanti Src con alta attività, mentre il sistema non PTP ha identificato mutanti Src con bassa attività. Questo approccio è stato applicato alle librerie mutanti Src randomizzate nel motivo HRD altamente conservato nel ciclo catalitico e ha rivelato che residui strutturalmente diversi possono sostituire i residui His e Arg, mentre il residuo Asp è insostituibile per l'attività catalitica.
Analisi sistematica dei geni coinvolti nelle metastasi del cancro orale ai linfonodi.Il cancro orale rimane una malattia mortale in tutto il mondo. La metastasi e l'invasione dei linfonodi è una delle le cause di morte per cancro orale Chiarire il meccanismo della metastasi linfonodale del cancro orale e identificare i geni regolatori critici sono importanti per il trattamento di questa malattia Questo studio mirava a identificare i geni differenzialmente espressi (firma genica) e le vie che contribuiscono al cancro orale metastasi ai linfonodi Lo studio associato al GSE70604 ha confrontato i profili genici nei linfonodi con metastasi del cancro orale con quelli dei linfonodi normali Lo studio associato al GSE2280 ha confrontato i profili genici nel tumore primario del cancro orale con metastasi linfonodali a quelli nei tumori senza metastasi linfonodali. Ci sono 28 geni comuni differenzialmente espressi (DEG) che mostrano cambiamenti coerenti in entrambi i set di dati nell'analisi sovrapposta. GO processo biologico e K L'analisi del percorso EGG di questi 28 DEG ha identificato la firma genica CCND1, JUN e SPP1, che sono classificati come geni regolatori chiave coinvolti nel percorso di adesione focale. Il silenziamento dell'espressione di CCND1, JUN e SPP1 nella linea cellulare di cancro orale umano OECM-1 ha confermato che quei geni svolgono ruoli essenziali nell'invasione delle cellule di cancro orale. L'analisi di campioni clinici di cancro orale ha rilevato una forte correlazione di questi geni con una breve sopravvivenza, in particolare l'espressione JUN associata a metastasi. Il nostro studio ha identificato una firma genetica unica - CCND1, JUN e SPP1 - che potrebbe essere coinvolta nelle metastasi linfonodali del cancro orale.
Effetti dell'alta temperatura sulla struttura fine dell'amido durante le fasi di riempimento del chicco nel riso: modellazione matematica e analisi enzimatica integrata.Alta temperatura durante la fase di riempimento del chicco è un fattore importante che può influenzare la qualità del chicco alterando la composizione e la struttura dell'amido nel riso. Pertanto, è importante studiare il meccanismo di regolazione dell'alta temperatura sulla biosintesi dell'amido di riso. Due cultivar japonica, il riso ceroso Taihunuo e Nangeng 5055 non ceroso sono stati utilizzati per esaminare l'effetto dell'alta temperatura sulla struttura fine dell'amido durante la fase di riempimento del grano L'analisi della distribuzione della lunghezza della catena dell'amido ha indicato che l'esposizione a una temperatura elevata aumenta il contenuto di amido catene lunghe e diminuito l'amido con catene corte in entrambe le varietà di riso Le differenze di sintesi dell'amilopectina che rispondono alle alte temperature tra riso ceroso e non ceroso possono gettare luce sull'i interazioni della sintesi di amilosio e amilopectina in condizioni di alta temperatura. Nella varietà non cerosa, la biosintesi dell'amilosio può influenzare la biosintesi dell'amilopectina corta e medio-lunga ad alta temperatura. È stato utilizzato un modello di fitting matematico per interpretare la struttura fine dell'amilopectina e sono stati ottenuti una serie di parametri con significato enzimatico (β e γ). I risultati dell'adattamento hanno mostrato che il riso ceroso e non ceroso ha avuto risposte simili alle alte temperature. Le variazioni della risposta dei parametri alle alte temperature sono state più notevoli a Taihunuo. L'analisi dell'attività degli enzimi correlati alla sintesi dell'amido durante la fase di riempimento dei cereali ha dimostrato l'affidabilità dei risultati dell'adattamento del modello. Le influenze dell'alta temperatura sulla struttura fine dell'amido sono simili tra riso ceroso e non ceroso. La biosintesi dell'amilosio può influenzare la biosintesi dell'amilopectina ad alta temperatura.
DGCNN: una rete neurale convoluzionale su grafici etichettati su larga scala.L'utilizzo di dati strutturati in grafici ha molte applicazioni reali in domini tra cui la semantica del linguaggio naturale, elaborazione del linguaggio di programmazione e analisi del malware. È stata sviluppata una varietà di metodi per gestire tali dati. Tuttavia, l'apprendimento di grafici su larga scala e di forme e dimensioni variabili è una grande sfida per qualsiasi metodo. In questo documento, proponiamo un multi -visualizzare la rete neurale convoluzionale multistrato su grafici diretti etichettati (DGCNN), in cui i filtri convoluzionali sono progettati in modo flessibile per adattarsi alle strutture dinamiche delle regioni locali all'interno dei grafici. I vantaggi di DGCNN sono che non è necessario allineare i vertici tra i grafici, e che DGCNN può elaborare grafici dinamici su larga scala con centinaia di migliaia di nodi. Per verificare l'efficacia di DGCNN, abbiamo condotto esperimenti su due attività: analisi del malware e previsione dei difetti del software. I risultati mostrano che DGCNN outp erforma le linee di base, comprese diverse reti neurali profonde.
Cisti broncogena intratimica un tumore estremamente raro del mediastino anteriore negli adulti.Le cisti broncogene intratimiche sono un'entità rara ma dovrebbero essere considerate in il differenziale di tutte le masse timiche non invasive. Descriviamo un paziente di 50 anni che alla tomografia computerizzata del torace ha riscontrato una massa timica incidentale. Si sospettava un timoma non invasivo ed era stata eseguita una timectomia toracoscopica. Patologia finale ha rivelato una cisti broncogena. Le cisti broncogene intratimiche sono tumori estremamente rari del mediastino anteriore. Dovrebbe essere considerato nella diagnosi differenziale delle masse mediastiniche anteriori.
Equilibrio iniziale nelle posture umane in piedi: ruoli dei meccanismi articolari.Le posture statiche iniziali della stazione eretta prima di applicare le perturbazioni possono influenzare il mantenimento dell'equilibrio posturale L'obiettivo di questo articolo era quello di trovare l'insieme stabile di posture e quindi determinare i ruoli dei meccanismi articolari. L'insieme di postura è stato definito in un modello biomeccanico basato su tre angoli articolari degli arti inferiori. Il metodo ottimizzato della dinamica inversa è stato utilizzato per risolvere per le forze muscolari in un modello preciso del sistema muscolo-scheletrico umano posto in 4096 posizioni statiche utilizzando il software AnyBody. I risultati hanno mostrato che l'attività muscolare complessiva del corpo in posizione eretta è ridotta dalla flessione del ginocchio. Angoli del ginocchio moderati tra 20° e 60° forniti posture più sicure contro possibili perturbazioni a causa dei più elevati livelli di collaborazione dei meccanismi articolari Circa il 36% delle inattuabilità posturali complessive sono state attribuite all'incapacità dei muscoli della caviglia di sostenere maggiormente i carichi esercitati. Sebbene i ruoli dei meccanismi articolari fossero strettamente dipendenti dalle posture, non vi era alcuna relazione diretta tra la cinematica articolare ei livelli di attivazione dei loro muscoli di supporto. I gruppi muscolari degli arti inferiori collaborano per mantenere l'equilibrio in un numero considerevole di posture statiche.
Transizioni da seduto a in piedi e in piedi da seduto nelle persone dopo l'ictus: percorso del centro di massa, carico pelvico e degli arti - Uno studio pilota.Per esplorare i modelli di movimento utilizzati dalle persone dopo l'ictus dalla prospettiva simultanea del carico pelvico e degli arti con il percorso del centro di massa durante le transizioni di movimento da seduto a in piedi e in piedi per sedersi. Uno studio pilota descrittivo in cui sono stati raccolti dati cinetici e cinematici e confrontato tra il contributo apportato dall'arto inferiore e dal tronco meno colpiti rispetto a quelli più colpiti durante la seduta per alzarsi e alzarsi per sedersi dopo l'ictus. di cui quattro presentavano il lato sinistro più colpito e otto erano maschi. Due modelli sono stati dimostrati per il carico pelvico, quattro modelli per il carico degli arti e cinque modelli per la deviazione del centro di massa. Non c'erano p coerenti modalità di movimento dimostrate dipendenti dal lato più o meno colpito. Non c'era una relazione coerente tra carico pelvico e degli arti e deviazione del centro di massa durante le fasi di movimento. In contrasto con le ipotesi spesso fatte riguardo al carico degli arti, abbiamo riscontrato un'ampia variabilità nei modelli di movimento utilizzati dalle persone con una presentazione emiparetica durante la seduta per alzarsi e la alzata per sedersi. I risultati suggeriscono che i problemi di movimento incontrati dalle persone dopo l'ictus sono complessi e identificano i limiti rispetto alle attuali tecniche di misurazione.
Caratterizzazione molecolare del cavalluccio marino panciuto (Hippocamus addominali) arachidonato 5-lipossigenasi (HaALOX5): prima evidenza di un ruolo di difesa immunitaria dallo stress immunologico indotto nei teleostei.Arachidonate 5-lipoxygenase (ALOX5) è un enzima essenziale per la biosintesi dei leucotrieni, che sono mediatori pro-infiammatori e antinfiammatori. In questo studio, il paralogo ALOX5 del cavalluccio marino panciuto (Hippocampus addominali; HaALOX5 ) è stato identificato dal nostro database del trascrittoma e quindi caratterizzato molecolarmente e funzionalmente per determinarne la capacità di ossigenazione e l'espressione sotto stress patogeno. La sequenza codificante di HaALOX5 consisteva di 2025 bp e codificava una proteina di 674 amminoacidi in lunghezza. Sequenza e analisi dell'albero filogenetico di HaALOX5 ha rivelato una stretta relazione con le sue corrispondenti controparti teleostei HaALOX5. La previsione della struttura ha rilevato un dominio regolatorio simile a C2 N-terminale e un gatto C-terminale dominio alitico, che sono i due principali domini funzionali negli enzimi ALOX5. La PCR quantitativa ha mostrato che HaALOX5 è stato espresso in tutti i tessuti analizzati a diverse grandezze. La massima espressione è stata rilevata nell'intestino e nello stomaco. Nelle cellule del sangue, nel fegato e nell'intestino, le trascrizioni di HaALOX5 erano significativamente elevate in molti momenti post-iniezione, quando immunizzati con lipopolisaccaride, acido poliinosinico: policitidilico e Streptococcus iniae, indicando il suo contributo ai meccanismi di difesa immunitaria nel cavalluccio marino.
Simbionti branchiali della cozza Bathymodiolus platifrons: composizione, dipendenza ambientale e controllo immunitario.Le cozze Bathymodiolus di acque profonde dipendono dal carbonio organico forniti dai simbionti all'interno delle loro branchie. In questo studio, sono stati utilizzati metodi ottimizzati di PCR quantitativa in tempo reale e ibridazione in situ a fluorescenza mirata sia all'mRNA che all'rRNA 16S per studiare i simbionti branchiali del mitilo Bathymodiolus platifrons, inclusa la composizione delle specie , dipendenza ambientale e controllo immunitario da parte dell'ospite. I nostri risultati hanno mostrato che i metanotrofi erano i principali batteri simbionti nelle branchie di B. platifrons, mentre i tiotrofi erano scarsi. Nelle cozze appena raccolte dal mare profondo, i metanotrofi erano alloggiati in batteriociti in un modello circolare unico e un gene correlato al lisosoma (VAMP) che codifica per una proteina di membrana associata alla vescicola è stato espresso ad un livello elevato e presentato esattamente dove i metanotrofi si è verificato. Dopo che le cozze sono state allevate per tre mesi in acquari senza metano, l'abbondanza di metanotrofi è diminuita significativamente e il loro schema di distribuzione a forma di cerchio è scomparso; inoltre, l'espressione di VAMP è diminuita significativamente. Questi risultati suggeriscono che la simbiosi tra B. platifrons e metanotrofi è influenzata dall'ambiente e che il sistema lisosomiale svolge un importante ruolo immunitario nel controllare l'abbondanza di endosimbionti nell'ospite. Questo studio fornisce un metodo affidabile per studiare i simbionti nelle cozze di acque profonde e arricchisce le conoscenze sui simbionti in B. platifrons.
Coinvolgimento della via di segnalazione JNK nell'attivazione trascrizionale del complemento C3 indotta da lipopolisaccaridi da amphioxus Branchiostoma belcheri.Il complemento C3 è un componente fondamentale di tre cascate di complemento attivazione. C3 in circolazione è fornito principalmente dal cieco epatico. L'espressione e la secrezione di C3 da parte degli epatociti è aumentata durante l'infiammazione acuta. Le informazioni dettagliate sul meccanismo di regolazione alla base dell'attivazione trascrizionale di C3 sono limitate. Qui, abbiamo caratterizzato il 5\'- regione fiancheggiante del gene anphioxus C3. Per analizzare funzionalmente la regione regolatoria a monte del gene C3, sono stati preparati una serie di costrutti di geni reporter luciferasi contenenti elementi regolatori deleti o mutanti. Utilizzando il test luciferasi, abbiamo rivelato che un potenziale C-JUN-1 i siti di legame all'interno della regione del promotore prossimale erano necessari per la piena attivazione del promotore C3, mentre NF-κB, AP-1, C-JUN-2 e NFAT trascrivono i siti di legame dei fattori di zione hanno giocato un ruolo nel governare l'attività del promotore a livello omeostatico. I nostri dati hanno anche indicato che sp600125, un inibitore della chinasi N-terminale c-Jun (JNK), ha ridotto l'attività del promotore C3 stimolato dal lipopolisaccaride (LPS), l'espressione dell'mRNA e la secrezione di proteine utilizzando il western blotting e l'analisi quantitativa della PCR in tempo reale. Questi risultati hanno dimostrato che la via di segnalazione JNK è coinvolta nella regolazione della trascrizione del gene C3 prendendo di mira i siti di legame del fattore di trascrizione C-JUN nella regione del promotore fiancheggiante 5\', portando all'attivazione di C3 indotta da LPS e quindi fornendo un potenziale bersaglio per la regolazione Espressione C3.
Il monostrato di cellule branchiali in vitro riproduce con successo in vivo le risposte dell'ospite di salmone atlantico all'infezione da Neoparamoeba perurans.a 72h pi). Le osservazioni SEM hanno mostrato amebe- come cellule con pseudopodi corti e una forma malleiforme, o lunghi pseudopodi incorporati all'interno delle cellule branchiali e l'erosione del monostrato cellulare. Per studiare la risposta immunitaria dell'ospite, le cellule branchiali inoculate sono state raccolte da inserti tripli a 0, 1, 3, 6 , 24 e 48h pi, e l'espressione di 12 geni coinvolti nella risposta del salmone atlantico all'AGD è stata confrontata tra cellule infette e non infette e tra cloni amebici. Entrambi i cloni hanno indotto risposte immunitarie simili dell'ospite, con l'aumento della citochina proinfiammatoria IL1β , complemento C3 e recettore cellulare MHC-1. La via Th2 era up-regolata, con un'aumentata espressione genica del fattore di trascrizione GATA3 e le citochine Th2 IL10, IL6 e IL4/13A. Anche PCNA e AG-2 erano up-regolate. Il clone selvatico indu ced un up-regulation significativamente più alto di IL1β, MHC-1, PCNA, lisozima e IL10 rispetto al clone attenuato per almeno alcuni tempi di esposizione, ma l'espressione del gene AG-2 era più alta nelle cellule inoculate con quello attenuato. Un'analisi dei componenti principali ha mostrato che AG-2 e IL10 erano geni chiave nella risposta dell'ospite in vitro a N. perurans. Questo modello in vitro si è dimostrato uno strumento promettente per studiare le risposte dell'ospite alle amebe e può quindi ridurre la necessità di studi in vivo quando si valutano terapeutici alternativi al controllo dell'AGD.
Analisi a livello di trascrittoma di vongole selvatiche Asari (=Manila) colpite dalla malattia del muscolo bruno: eziologia e impatti della malattia.Recentemente, abbiamo ha riportato una patologia emergente denominata Brown Muscle Disease (BMD) che colpisce le vongole Asari che abitano l'area più produttiva per questa specie in Francia, la baia di Arcachon. La principale caratteristica macroscopica della patologia si basa sull'atrofia del muscolo adduttore posteriore, che colpisce la capacità di vongole da seppellire. La ricerca dell'agente eziologico della BMD ha privilegiato un'infezione virale. Contrariamente alle vongole sane, gli animali infetti si trovano sempre sulla superficie del sedimento e presentano particelle virali di 30 nm nelle cellule muscolari, granulocitiche e rettali. In Al fine di ottenere maggiori informazioni sull'eziologia e sugli impatti della BMD sulle vongole, abbiamo approfittato del presente studio sulle tecnologie di sequenziamento di prossima generazione. È stato utilizzato un approccio RNA-Seq (i) per verificare se le sequenze di RNA virale possono essere specificatamente y trovato nel trascrittoma di animali malati e (ii) per identificare i geni che sono regolati in modo differenziale tra vongole malati e sani. Contrariamente agli animali sepolti sani, nelle vongole malate è stata rilevata una sequenza che mostrava estese omologie con geni correlati ai retroviridae. Tra i processi biologici che sono stati colpiti nelle vongole malate, il processo di trasmissione sinaptica era il più rappresentato. Per approfondire questo risultato è stato effettuato un nuovo campionamento ed è stato determinato il livello di trascrizione dei geni coinvolti nella trasmissione sinaptica in vongole sane e malate ma anche in vongole senza segni visibili di patologia ma localizzate alla superficie del sedimento. I nostri risultati suggeriscono che l'atrofia muscolare è un ultimo segno della patologia e che il sistema nervoso potrebbe essere invece un obiettivo primario dell'agente BMD.
Verso una migliore comprensione della risposta allo stress indotta da allotrapianto nell'ostrica perlata Pinctada fucata martensii: approfondimenti dall'analisi proteomica comparativa basata su iTRAQ.Impianto di un nucleo sferico in un'ostrica ricevente è un passaggio fondamentale nella produzione di perle artificiali. È noto che il nucleo impiantato innesca risposte allo stress cellulare a diversi livelli, ma il meccanismo molecolare alla base dell'adattamento fisiologico delle ostriche all'impianto del nucleo è ancora poco compreso. In questo studio, abbiamo sfruttato la proteomica basata su iTRAQ e l'approccio LC-MS/MS per esaminare la regolazione genica indotta da allotrapianto a livello di espressione proteica nell'ostrica perlata Pinctada fucata martensii, per un periodo di 30 giorni dopo l'impianto del nucleo. un'ampia varietà di proteine, incluso un gruppo di proteine immuno-correlate come E3 ubiquitina-ligasi e proteine da shock termico, ha mostrato un'espressione differenziale in risposta al operazione chirurgica. Ulteriori confronti tra diversi punti di campionamento hanno rivelato che i termini GO tra cui "traduzione" e "processo di riduzione dell'ossidazione" e le vie KEGG tra cui "glicolisi/gluconeogenesi" e "metabolismo del piruvato" erano significativamente arricchiti in diversi momenti , indicando i ruoli importanti di questi eventi molecolari nella risposta allo stress delle ostriche perlate all'impianto del nucleo. Inoltre, è stata identificata una notevole discrepanza tra il livello di espressione proteica e l'abbondanza di trascrizione genica, poiché solo pochi geni hanno mostrato cambiamenti di espressione di almeno 2 volte a livello sia proteomico che trascrittomico. Il risultato implica che la regolazione genica post-trascrizionale per le proteine chiave può rappresentare un aspetto importante della risposta allo stress indotta da allotrapianto nelle ostriche perlate. Presi insieme, i dati ottenuti contribuirebbero a una comprensione più profonda dei meccanismi molecolari che consentono l'adattamento allo stress delle ostriche perlate in risposta all'impianto del nucleo.
Distinti cambiamenti subcellulari nell'attività del proteasoma e nella poliubiquitinazione della proteina linkage-specific nell'amigdala durante il consolidamento e il riconsolidamento di un ricordo di paura.Numerosi studi hanno supportato un ruolo critico per il sistema ubiquitina-proteasoma (UPS) nei processi di consolidamento e riconsolidamento della memoria. I bersagli proteici e il ruolo funzionale dell'attività ubiquitina-proteasoma possono variare ampiamente tra i compartimenti cellulari, tuttavia, non è noto come l'attività dell'UPS cambi all'interno del nucleo , regioni citoplasmatiche e sinaptiche in risposta all'apprendimento o al recupero della memoria. Inoltre, mentre studi precedenti si sono concentrati sulla poliubiquitinazione proteica specifica per la degradazione, non è noto come l'apprendimento alteri altri tag di poliubiquitina che non sono presi di mira dal proteasoma. Utilizzando protocolli di frazionamento cellulare in combinazione con anticorpi poliubiquitina specifici per il legame, abbiamo esaminato i cambiamenti subcellulari nell'attivazione dell'ubiquitina-proteasoma ità nell'amigdala durante il consolidamento e il riconsolidamento della memoria. Dopo l'acquisizione della memoria, l'ubiquitinazione proteica complessiva e l'attività del proteasoma sono simultaneamente aumentate nel nucleo e diminuite nelle regioni sinaptiche e citoplasmatiche. Gli aumenti nucleari sono stati associati alla sovraregolazione dei tag di poliubiquitina specifici per la degradazione (K48) e indipendenti dalla degradazione (K63, M1), suggerendo molteplici funzioni per la segnalazione dell'ubiquitina all'interno di questa regione. È interessante notare che il recupero ha indotto un modello molto diverso di attività dell'ubiquitina-proteasoma nell'amigdala, costituito da aumenti dell'ubiquitinazione proteica complessiva e dell'attività del proteasoma e tag di poliubiquitina K48-, K63- e M1 nelle regioni sinaptiche, ma non nucleari o citoplasmatiche. Complessivamente, l'apprendimento e il recupero della memoria alterano dinamicamente e differenzialmente l'attività dell'ubiquitina-proteasoma dipendente dalla degradazione e indipendente dalla degradazione in diversi compartimenti cellulari, suggerendo che l'UPS può svolgere funzioni uniche durante il consolidamento e il riconsolidamento della memoria.
La somministrazione cronica dell'ormone di rilascio delle gonadotropine migliora l'apprendimento nei vecchi ratti gonadectomizzati.Lo scopo di questo studio era determinare se la somministrazione cronica di GnRH migliora le prestazioni di compiti di apprendimento ed espressione della spinofilina nell'ippocampo di ratti anziani gonadectomizzati Sono stati utilizzati ratti Wistar maschi di diciotto mesi e divisi in tre gruppi: controllo (ratti intatti), gonadectomizzati e gonadectomizzati+GnRH. Quest'ultimo gruppo è stato iniettato per via intramuscolare con GnRH (100 nM) due volte al giorno per cinque settimane. I compiti di apprendimento che abbiamo usato erano il nuovo compito di riconoscimento degli oggetti (NOR), il labirinto a T elevato (ETM) e il test di evitamento attivo (AAT). I risultati hanno mostrato che in NOR e ETM compiti di apprendimento, i ratti gonadectomizzati trattati con GnRH hanno avuto prestazioni significativamente migliori rispetto ai ratti gonadectomizzati senza trattamento. I ratti gonadectomizzati trattati con GnRH hanno mostrato prestazioni paragonabili a quelle dei ratti intatti. Inoltre, l'espressione di spino la filina nell'ippocampo di ratti gonadectomizzati trattati con GnRH è aumentata rispetto ai ratti gonadectomizzati non trattati. In conclusione, la somministrazione cronica di GnRH migliora l'apprendimento nei vecchi ratti gonadectomizzati. È possibile che il meccanismo possa coinvolgere un numero maggiore di contatti dendritici associati a una maggiore espressione di spinofilina.
Il blocco del recettore dell'orexina dell'ippocampo ha impedito l'apprendimento sociale indotto dallo stress e i deficit di memoria.Lo stress come sfida omeostatica porta al malfunzionamento dei processi di apprendimento e memoria, cioè apprendimento sociale e memoria. Il sistema oressina è coinvolto nelle risposte allo stress attraverso connessioni all'asse ipotalamo-ipofisi (HPA). Inoltre, l'ippocampo, una struttura vulnerabile ai cambiamenti indotti dallo stress, esprime i recettori orexina 1 e 2 (OXr1 e OXr2) in varie sottoregioni. Il presente studio ha lo scopo di valutare gli effetti del blocco del recettore dell'orexina ippocampale sui disturbi dell'apprendimento sociale e della memoria e sullo sviluppo dell'ansia in seguito a stress. I ratti Wistar maschi (220-250g) sono stati sottoposti a impianto di cannula nell'ippocampo. Sono stati applicati stress acuti (due scariche elettriche lievi, 5,5 mA) e cronici (dieci giorni di contenzione, 6 ore al giorno) con o senza iniezione di antagonisti del recettore dell'orexina (SB-334867 o TCS OX 29). e la novità sociale negli animali sono state valutate in un labirinto sociale a tre camere alla fine dell'applicazione dello stress. L'ansia e il comportamento esplorativo degli animali sono stati quindi esaminati, con intervalli di 20 minuti, utilizzando rispettivamente i test in campo aperto (OF) ed elevato più labirinto (EPM). Il liquido cerebrospinale (CSF) di Cisterna Magna è stato drenato, prima del sacrificio, per il test dell'oressina (OX) e il sangue del tronco è stato raccolto per misurare il corticosterone plasmatico (CRT). Né lo stress acuto né quello cronico potrebbero influenzare la socialità. Lo stress acuto ma non cronico ha impedito all'animale di annusare il familiare topo in gabbia nella sessione di novità, una risposta che è stata invertita in seguito al blocco di entrambi gli OXR. Inoltre, lo stress acuto ma non cronico, ha portato ad un aumento del comportamento di ansia e immobilità che sono stati entrambi ostacolati dal blocco del recettore dell'oressina (OXR). Al contrario, il contenuto di OX nel liquido cerebrospinale è aumentato a causa dello stress da contenzione cronico, un effetto che è stato annullato dal blocco dell'oressina. Infine, è stata registrata una CRT plasmatica elevata in risposta a stress sia acuti che cronici. L'aumento osservato della CRT plasmatica nei ratti con stress cronico è stato abolito in seguito all'inibizione degli OXR, tuttavia un effetto simile non è stato osservato nel gruppo con stress acuto. I nostri risultati identificano gli OXR dell'ippocampo come potenziali candidati in grado di prevenire alterazioni acute indotte dallo stress della novità sociale e del comportamento ansioso e cambiamenti CRT plasmatici e orexina nel liquido cerebrospinale indotti dallo stress cronico. La manipolazione dell'OXR può migliorare l'adattamento alla fisiopatologia dello stress.
PACAP aumenta l'espressione di Arc/Arg 3.1 all'interno dell'amigdala estesa dopo il condizionamento alla paura nei ratti.Il polipeptide attivatore dell'adenilato ciclasi ipofisario correlato allo stress ( PACAP) è implicato nella neuromodulazione dell'apprendimento e della memoria. Il PACAP può alterare la plasticità sinaptica e ha azioni dirette sui neuroni dell'amigdala e dell'ippocampo che potrebbero contribuire ai suoi effetti acuti e persistenti sul consolidamento e sull'espressione della paura condizionata. Recentemente abbiamo dimostrato che intracerebroventricolare (ICV) l'infusione di PACAP prima del condizionamento alla paura (FC) determina effetti iniziali di tipo amnesico seguiti da iperespressione del congelamento condizionato con test ripetuti e analisi dell'espressione genica precoce immediata di c-Fos hanno suggerito che il nucleo centrale del amigdala (CeA), ma non l'amigdala laterale/basolaterale (LA/BLA) o ippocampo, sono coinvolti in questi effetti PACAP. Qui, estendiamo tale lavoro esaminando l'espressi sulla proteina associata al citoscheletro regolata dall'attività del marker di plasticità sinaptica (Arc/Arg 3.1) dopo somministrazione di PACAP e FC. Ratti maschi Sprague-Dawley sono stati impiantati con cannula per l'infusione ICV di PACAP-38 (1,5 µg) o veicolo seguito da FC e test per il congelamento condizionato. Un'ora dopo la FC, l'espressione della proteina Arc era significativamente elevata nel CeA e nel nucleo del letto della stria terminalis (BNST), strutture interconnesse che sono elementi chiave dell'amigdala estesa, nei ratti che hanno ricevuto la combinazione di PACAP + FC. Al contrario, l'espressione dell'arco all'interno delle suddivisioni dell'ippocampo, o LA/BLA, è rimasta invariata. Una sottopopolazione di cellule Arc-positive sia nel CeA che nel BNST esprime anche PKCdelta, un marcatore intracellulare che è stato utilizzato per identificare i microcircuiti che bloccano la paura condizionata nel CeA. Coerentemente con i nostri risultati precedenti, il giorno successivo il comportamento di congelamento condizionato è stato ridotto nei ratti a cui era stata somministrata la combinazione di PACAP + FC - un effetto simile all'amnestico - e i livelli di espressione di Arc erano tornati alla linea di base. Dato il ruolo stabilito di Arc nel modificare la plasticità sinaptica e la formazione della memoria, i nostri risultati suggeriscono che la sovraespressione di Arc indotta da PACAP a seguito del condizionamento alla paura può interrompere i cambiamenti neuroplastici all'interno delle popolazioni di neuroni CeA e BNST normalmente responsabili della codifica di segnali correlati alla paura che, in questo caso, si traduce in un alterato consolidamento della memoria della paura. Quindi, i sistemi PACAP possono rappresentare un asse su cui lo stress e la neurotrasmissione guidata dall'esperienza convergono per alterare la memoria emotiva e mediare patologie che sono caratteristiche di malattie psichiatriche come il disturbo da stress post-traumatico.
Potenziale terapeutico del vischio nei disturbi neurologici correlati al SNC e nella composizione chimica delle specie Viscum.Viscum album L. , comunemente noto come vischio, ha utilizzato da secoli nella medicina tradizionale per il trattamento di varie malattie neurologiche, tra cui epilessia, isteria, nervosismo, psicosi isterica, vertigini e mal di testa. Lo scopo di questa revisione è riassumere le prove esistenti che confermano l'influenza del vischio sul sistema nervoso centrale e indagare i composti che possono essere responsabili di questa attività Le informazioni disponibili da studi di varie specie del genere Viscum L. sono state raccolte da riviste scientifiche, libri e rapporti tramite una biblioteca e una ricerca elettronica di dati (Elsevier, Google Scholar, PubMed, Springer , Science Direct, ResearchGate e ACS). I principali costituenti chimici delle specie Viscum L. sono viscotossine, lectine, flavonoidi, acidi fenolici, terpenoidi, steroli, fenilpropanoidi, e alcaloidi. Vari estratti di Viscum album L. hanno mostrato attività sul sistema nervoso centrale, inclusi effetti antiepilettici, sedativi, antipsicotici, ansiolitici, antidepressivi e antinocicettivi nei topi e nei ratti. Inoltre, gli estratti hanno aumentato il livello di fattore neurotrofico derivato dal cervello, prevenuto la morte neuronale apoptotica indotta dall'amiloide e debolmente inibito l'attività della colinesterasi. Numerosi riferimenti storici descrivono l'uso del vischio per il trattamento dei disturbi del sistema nervoso centrale. Negli ultimi anni sono stati avviati studi per confermare gli effetti antiepilettici, antipsicotici, sedativi e antinocicettivi del vischio. Inoltre, il vischio può essere utilizzato come trattamento complementare per il morbo di Alzheimer. L'effetto terapeutico del vischio potrebbe essere il risultato delle interazioni sinergiche di vari metaboliti secondari, comprese le lectine specifiche del vischio. Sono necessari ulteriori studi sulla composizione chimica e sull'attività del SNC del vischio. Devono essere studiati anche i meccanismi d'azione, i siti bersaglio, la farmacocinetica, i meccanismi metabolici, gli effetti avversi e le interazioni del vischio con altri farmaci.