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Prende di mira il PDK1 con dicloroacetofenone per inibire la crescita delle cellule della leucemia mieloide acuta (AML).Piruvato deidrogenasi chinasi-1 (PDK1), un enzima metabolico chiave coinvolto nella glicolisi aerobica, è altamente espresso in molti tumori solidi. Il composto di piccole molecole DAP (2,2-dicloroacetofenone) è un potente inibitore di PDK1. In questo studio, abbiamo valutato l'effetto dell'inibizione di PDK1 con DAP sulla crescita cellulare, apoptosi e sopravvivenza nelle cellule AML e identificato i meccanismi sottostanti. Abbiamo scoperto che il trattamento con DAP ha inibito significativamente la proliferazione cellulare, aumentato l'induzione dell'apoptosi e soppresso l'autofagia nelle cellule AML in vitro e inibito la crescita tumorale in un modello murino AML in vivo. Abbiamo anche dimostrato che l'inibizione di PDK1 con DAP aumenta la scissione delle proteine pro-apoptotiche (PARP e Caspase 3) e diminuisce l'espressione dell'anti proteine -apoptotiche (BCL-xL e BCL-2) e regolatori dell'autofagia (ULK1, Beclin-1 e Atg). Inoltre, abbiamo scoperto che DAP ha inibito la via di segnalazione PI3K/Akt. Inoltre, abbiamo dimostrato che PDK1 ha interagito con ULK1, BCL-xL ed E3 ligasi CBL-b nelle cellule AML e il trattamento con DPA potrebbe inibire le interazioni. Nel complesso, i nostri risultati hanno indicato che prendere di mira PDK1 con DAP ha inibito la crescita delle cellule AML attraverso molteplici percorsi di segnalazione e suggeriscono che prendere di mira PDK1 potrebbe essere una strategia terapeutica promettente per le AML.
Composti fenolici, volatili e caratteristiche sensoriali di dodici cultivar di ciliegio dolce (Prunus avium L.) coltivate in Turchia.Il documento riporta il fenolico, antociani, composti volatili e caratteristiche sensoriali di 12 cultivar di ciliegie dolci tra cui le cv Belge, Bing, Dalbasti, Durona di Cesena, Lambert, Merton Late, Starks Gold, Summit, Sweetheart, Van, Vista e 0-900 Ziraat. i singoli composti fenolici sono stati determinati con il metodo HPLC-DAD. Tra queste ciliegie, cvs. Bing, Durona di Cesena e Lambert contenevano livelli più elevati di singoli composti fenolici totali rispetto alle altre cultivar. Sei antociani sono stati rilevati nelle ciliegie e nella cianidina-3- L'O-rutinoside era il principale ed era il livello più alto nella cv. Bing. I principali volatili trovati erano 1-esanolo, (E)-2-esen-1-olo, alcool benzilico, esenale, (E)-2-esenale e benzaldeide La valutazione sensoriale delle ciliegie ha mostrato che le cv. Belge, Bing, Dalbasti e Summit hanno e punteggi più alti di consistenza e sapore rispetto ad altri. Si è concluso che gli stessi composti per i profili fenolici o volatili delle ciliegie dolci erano simili in termini qualitativi; tuttavia, sono state osservate differenze quantitative in queste cultivar.
Cromatografia di riconoscimento molecolare sensibile alla temperatura utilizzando fenilalanina e perle di silice modificata con polimero derivato dal triptofano.I polimeri sensibili alla temperatura che incorporano siti di riconoscimento molecolare sono stati sviluppati come stazionari fasi per cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC). Le fasi stazionarie innestate erano costituite da copolimeri funzionali composti da N-isopropilacrilammide (NIPAAm) e esteri metilici di N-acriloil aminoacidi aromatici, cioè fenilalanina e esteri metilici del triptofano (Phe-OMe e Trp -OMe). Sono stati sintetizzati tre nuovi polimeri termosensibili, P(NIPAAm-co-Phe-OMe5), P(NIPAAm-co-Phe-OMe10) e P(NIPAAm-co-Trp-OMe5). Questi copolimeri hanno mostrato una transizione di fase idrofila/idrofobica reversibile alle loro temperature di soluzione critiche inferiori (LCST). I polimeri sono stati innestati su silice amminopropilica utilizzando un metodo di accoppiamento estere-ammina attivato e sono stati impaccati in una colonna di acciaio inossidabile, che è stata collegata ad un sistema HPLC. La cromatografia termosensibile è stata condotta utilizzando l'acqua come unica fase mobile. Più analiti idrofobici sono stati mantenuti più a lungo e i tempi di ritenzione degli steroidi aromatici e degli amminoacidi aromatici sono stati notevolmente aumentati. Ciò indicava che si verificavano interazioni π-π tra le porzioni fenile o indolo di fenilalanina o triptofano, rispettivamente, e i composti aromatici. Inoltre, i tempi di ritenzione dei composti con accettori di legami idrogeno erano più alti con P(NIPAAm-co-Trp-OMe5), che conteneva indolo come donatore di legami idrogeno, rispetto a P(NIPAAm-co-Phe-OMe5). Ciò indicava che si verificava un legame idrogeno tra la fase stazionaria e gli analiti. Questi risultati indicano che le interazioni idrofobiche, π-π e dei legami idrogeno hanno tutte influenzato la modalità di separazione della cromatografia sensibile alla temperatura e hanno portato alla separazione selettiva con riconoscimento molecolare. Sia la risposta alla temperatura che le caratteristiche di riconoscimento molecolare sono presenti nel sistema di separazione proposto che utilizza un polimero sensibile alla temperatura contenente derivati di amminoacidi aromatici.
Il metabolismo e la disposizione di GSK2140944 in soggetti umani sani.1. GSK2140944 è un nuovo inibitore della topoisomerasi batterica in fase di sviluppo per il trattamento delle infezioni batteriche. È stato studiato il metabolismo e la disposizione in soggetti umani sani.2. Sei soggetti maschi hanno ricevuto [(14)C] GSK2140944 per via orale (2000 mg) e come singola infusione ev di 2 ore (1000 mg). L'eliminazione urinaria (59%) è stata major per via endovenosa, mentre predominava l'eliminazione fecale (53%) per via orale. Per l'analisi di campioni di plasma e bile è stata utilizzata la spettrometria di massa con acceleratore (AMS) a causa del basso livello di radioattività nei campioni (bassa attività specifica delle dosi). GSK2140944 invariato era il componente circolante predominante (>60% DRM), con il principale metabolita circolante M4 formato dall'ossidazione della frazione triazaacenaftilene che rappresentava il 10,8% (considerato maggiore) e l'8,6% di materiale correlato al farmaco per via orale e iv percorso, rispettivamente. Circa il 50% della dose orale è stato assorbito ed eliminato principalmente come GSK2140944 immodificato nelle urine (∼ 20% della dose). L'eliminazione tramite metabolismo (∼13% della dose) è stata relativamente minore. Si credeva che la facile ossidazione di GSK2140944 al metabolita M4 fosse il risultato dell'attivazione da parte di gruppi di prelievo di elettroni adiacenti. 3. Questo studio dimostra l'uso di AMS per superare le sfide di radioprofilazione presentate da una bassa attività specifica risultante dalla somministrazione di dosi elevate.
Botrydial e botcinine prodotte da Botrytis cinerea regolano l'espressione dei geni di Trichoderma arundinaceum coinvolti nella biosintesi del tricoteceni.Trichoderma arundinaceum IBT 40837 (Ta37) e Botrytis cinerea producono i sesquiterpeni harzianum A (HA) e botrydial (BOT), rispettivamente, e anche i polychetidi aspinolides e botcinins (Botc), rispettivamente Abbiamo analizzato il ruolo di BOT e Botc nell'interazione Ta37-B. cinerea, compresi i cambiamenti trascrittomici nei geni coinvolti nella biosintesi di HA (tri) ed ergosterolo, nonché cambiamenti nel livello di HA e squalene-ergosterolo Abbiamo scoperto che, quando confrontati con B. cinerea, i geni tri biosintetici erano up-regolati in tutte le colture duali analizzato, ma a livelli più alti quando Ta37 è stato confrontato con il mutante BOT non produttore bcbot2Δ. La produzione di HA era anche maggiore nell'area di interazione con questo mutante. Negli esperimenti di confronto Ta37-bcbot2Δ, l'espressione del Anche il gene hmgR, che codifica per la 3-idrossi-3-metilglutaril coenzima A reduttasi, che è il primo enzima della via biosintetica dei terpeni, è stato up-regolato, determinando un aumento della produzione di squalene rispetto al confronto con B. cinerea B05. 10. Botcs ha avuto un effetto up-regolatorio sui geni tri biosintetici, con BotcA che ha avuto un effetto più forte di BotcB. I risultati indicano che l'interazione tra Ta37 e B. cinerea esercita un effetto stimolante sull'espressione dei geni tri biosintetici, che, nella zona di interazione, possono essere attenuati dal BOT prodotto da B. cinerea B05.10. Il presente lavoro fornisce prove di un dialogo metabolico tra T. arundinaceum e B. cinerea che è mediato da sesquiterpeni e polichetidi e che influenza l'esito dell'interazione di questi funghi tra loro e con il loro ambiente.
Rs219780 SNP del gene Claudin 14 non è correlato all'espressione clinica nell'iperparatiroidismo primario.Il gene CLDN14 codifica per una proteina coinvolta nella regolazione della permeabilità paracellulare o trasporto di ioni alle giunzioni strette epiteliali come nel nefrone L'allele C dell'rs219780 SNP (polimorfismo a singolo nucleotide) di CLDN14 è stato associato a litiasi renale, alti livelli di paratormone (PTH) e bassa densità minerale ossea (BMD) in donne sane. Il nostro obiettivo è studiare la relazione tra rs219780 SNP di CLDN14 e litiasi renale, fratture e BMD in pazienti con iperparatiroidismo primario (PHPT). Abbiamo arruolato 298 pazienti caucasici con PHPT e 328 volontari sani in uno studio trasversale Abbiamo analizzato i dati antropometrici, la storia di fratture o calcoli renali, i parametri biochimici inclusi i marcatori per il rimodellamento osseo, l'ecografia addominale e la BMD e la genotipizzazione per l'SNP rs219780 di CLDN14. ny differenza nella frequenza di fratture o litiasi renale tra i gruppi genotipici nei pazienti PHPT. Inoltre, non abbiamo trovato alcuna relazione tra gli alleli T o C e BMD o parametri biochimici. rs219780 SNP di CLDN14 non sembra essere un fattore di rischio per lo sviluppo di PHPT né sembra influenzare l'espressione clinica di PHPT.
Fenilpropanoidi bioattivi, acido fenolico e fitosterolo da Landolphia owariensis P. Beauv polpa di semi filamentosi.Landolphia owariensis P. Beauv è economicamente importante per lattice/gomma e medicina popolare. La sua polpa di semi filamentosi è liberamente mangiata da esseri umani e animali. Pertanto, la polpa di semi filamentosi di L. owariensis è stata estratta in serie con esano e acetone per isolare e caratterizzare i suoi ingredienti farmaceutici attivi. La partizione solvente/solvente e le separazioni cromatografiche hanno fornito quattro bioattivi composti, acido (E)-3-(3,4-diidrossilcinnamoil)chinico [(E)-acido clorogenico], I;estere metilico dell'acido (E)-3-(3,4-diidrossilcinnamoil)chinico [(E)- Metil estere dell'acido clorogenico], II, acido 3,4-diidrossilbenzoico, (acido protocatechuico), III e 22,23-diidrostigmaster-3β-olo (3β-sitosterolo) (IV). Le strutture di I, II e III sono state assegnate mediante combinazioni di cromatografia liquida ad alte prestazioni-spettroscopia ultravioletta-visibile, risoluzione magnetica nucleare 1D e 2D spettroscopia onance, cromatografia liquida-spettrometria di massa ad alte prestazioni e riferimenti a pubblicazioni pubblicate, mentre il composto IV è stato identificato con metodi chimici e gascromatografia-spettrometria di massa. I fenilpropanoidi e l'acido fenolico (composti I, II e III) sono notevoli antiossidanti standard con attività epatoprotettiva confermata e altre interessanti attività biologiche. È stato riportato che il Composto IV possiede attività antinfiammatoria, azione anti-cancro del colon e un effetto ipocolesterolemizzante. I composti descritti sono importanti costituenti medicinali della polpa di semi filamentosi di L. owariensis, e questo è il primo importante rapporto sulla fitochimica di L. owariensis P. Beauv.
IL-4 protegge i mitocondri dall'insulto indotto da TNFα e IFNγ durante la clearance dell'infezione da Citrobacter rodentium ed Escherichia coli.Citrobacter rodentium è un patogeno murino che funge da modello per l'infezione da Escherichia coli enteropatogeno. L'infezione da C. rodentium ha ridotto la quantità e l'attività dei complessi respiratori mitocondriali I e IV, nonché la capacità di fosforilazione, il potenziale transmembrana mitocondriale e la generazione di ATP al giorno 10, 14 e 19 dopo l'infezione. La quantificazione dell'mRNA ha mostrato livelli aumentati di IFNγ, TNFα, IL-4, IL-6 e IL-12 durante l'infezione. Gli effetti dell'aggiunta di queste citochine, C. rodentium ed E. coli sono stati quindi chiariti utilizzando una mucosa del colon in vitro. infezione e TNFa, singolarmente e combinati con IFNγ, hanno ridotto i livelli di enzimi del complesso I e IV e la funzione mitocondriale. Tuttavia, IL-4 ha invertito questi effetti e IL-6 ha protetto contro la perdita del complesso IV. Sia in vivo che in vitro, la disfunzione è apparsa causata dalla generazione di ossido nitrico ed è stata alleviata da un antiossidante mirato ai mitocondri. I topi IFNγ -/-, contenenti un carico patogeno simile ma IL-4 e IL-6 più elevati, non hanno mostrato alcuna perdita di nessuno dei quattro complessi. Pertanto, l'ambiente delle citochine sembra essere un determinante più importante della funzione mitocondriale rispetto alle azioni dirette dell'agente patogeno. Poiché i livelli di IFNγ e TNFα aumentano durante la clearance dell'infezione, il concomitante aumento di IL-4 e IL-6 protegge la funzione mitocondriale.
Rivestimenti antimicrobici ad alta durabilità e bassa tossicità fabbricati da copolimeri di ammonio silano quaternario.L'adesione e la successiva crescita di microrganismi sulle superfici dei materiali sono una delle principali preoccupazioni in molti applicazioni biomediche. Attualmente, vari polimeri sono immobilizzati sulle superfici dei materiali per prevenire la colonizzazione microbica. Tuttavia, ci sono diverse sfide per quanto riguarda i materiali di rivestimento, inclusa la loro incapacità di uccidere i microrganismi, la complessità dell'innesto superficiale, la durata limitata e la tossicità nei confronti dell'uomo. affrontare queste sfide, sintetizziamo un nuovo copolimero antimicrobico di ammonio silano quaternario (QAS) per conferire l'effetto antimicrobico tramite un semplice processo di rivestimento a polimerizzazione termica. I copolimeri QAS erano meno tossici per 3 linee cellulari umane rispetto a un agente monomerico QAS antimicrobico commerciale, vale a dire , dimetilottadecil[3-(trimetossisilil)propil]ammonio cloruro (DTPAC). Inoltre, i rivestimenti QAS hanno dimostrato sup maggiore efficacia antimicrobica e durata rispetto a quelle dei rivestimenti DTPAC. In conclusione, i nuovi copolimeri QAS sono utili per prevenire substrati da infezioni microbiche, ma con bassa tossicità per l'uomo e lunga durata. Inoltre, il processo sintetico è potenzialmente scalabile per applicazioni industriali.
Refractance Window™ essiccamento delle bacche di haskap--risultati preliminari sulla ritenzione di antociani e sulle proprietà fisico-chimiche.L'obiettivo di questo lavoro era determinare la ritenzione di antociani e fisico-chimiche della polvere di haskap preparata mediante essiccamento con Refractance Window™ (RW). In generale, le particelle di polvere essiccate con RW avevano una superficie liscia con uno spessore simile, coerente con il metodo di preparazione, e avevano una solubilità del 75,63% in acqua. La polvere essiccata RW (costituita dal 98% di bacche di haskap) ha mantenuto circa il 93,8% di antociani dai frutti congelati originali, come valutato con il metodo del pH differenziale. Questo risultato è in buon accordo con l'analisi HPLC che indicava una ritenzione del 92,9%. sono stati identificati nelle bacche congelate e nella polvere essiccata RW: cianidina 3-glucoside, cianidina 3-rutinoside e peonidina 3-glucoside. Sorprendentemente, la cianidina 3-rutinoside ha mostrato la ritenzione più bassa.
Screening della composizione chimica e della bioattività dell'olio essenziale di Waldheimia glabra (Decne.) Regel.Questa ricerca mirava a migliorare le conoscenze sulla composizione chimica e le attività antibatteriche e antitumorali dell'olio essenziale di Waldheimia glabra, una pianta selvatica delle montagne dell'Himalaya. I risultati ottenuti da GC-MS hanno mostrato che spathulenol, 9-tetradecenolo, tujopsene, α-tujone, alcool santolina e terpinen- Il 4-olo era il costituente principale dell'olio essenziale di Waldheimia glabra. Questi risultati sono stati confermati dall'analisi HS-SPME GC-MS che ha riportato anche elevate quantità di alcol artemisia e canfora. Il saggio di diffusione del disco ha suggerito una lieve attività antibatterica sia contro Escherichia coli che contro Staphylococcus aureus. Infine, è stata osservata una correlazione dose-risposta tra la concentrazione di olio essenziale di Waldhemia glabra e la vitalità delle cellule di adenocarcinoma mammario umano MDA-MB-231 e MCF-7. Insieme al metodo GC-MS, HS-SP ME GC-MS si è rivelata una tecnica affidabile per caratterizzare la composizione chimica dell'olio essenziale ottenuto da piante aromatiche. Ulteriori studi si concentreranno sui fitochimici di W. glabra e sulla loro attività biologica, al fine di supportare gli usi tradizionali della pianta.
Indagine spettroscopica sull'interazione del 3,7-diidrossiflavone con diversi isomeri dell'albumina sierica umana.Il meccanismo di interazione del 3,7-diidrossiflavone ( 3,7-diHF) e albumina sierica umana (HSA) è stata studiata mediante estinzione della fluorescenza, miglioramento della fluorescenza, emissione di fluorescenza allo stato stazionario e risolta nel tempo e spettrometria di assorbimento UV-vis. Il sito di legame del 3,7-diHF sulla proteina è stato determinati studiando le proprietà spettroscopiche del complesso 3,7-diHF-HSA a pH 7,4 e pH 3,5 individualmente e confermati dagli esperimenti competitivi del marcatore del sito. I parametri di legame del complesso 3,7-diHF-HSA sono stati stimati mediante esperimenti di estinzione della fluorescenza , e i dati erano in buon accordo con i risultati ottenuti dalle misurazioni di miglioramento della fluorescenza. Un notevole aumento dei valori di anisotropia di fluorescenza ha suggerito che il 3,7-diHF si legava a una tasca ristretta in movimento su HSA. I risultati indicavano che il 3,7-diHF , in forma anionica, era legato all'interno delle tasche idrofobiche del sottodominio IIA di HSA (sito I), e stabilizzato principalmente dalla forza elettrostatica e dalle interazioni ioniche. La modalità di legame della proteina farmaco è stata discussa sulla base dei risultati sperimentali di cui sopra.
L'analisi del metaboloma rivela l'effetto del controllo dei cataboliti di carbonio sulla biosintesi del poli(γ-glutammico) del Bacillus licheniformis ATCC 9945.Poly(γ- acido glutammico) (PGA) è un polimero composto da acidi L- e/o D-glutammico prodotto da Bacillus sp. Poiché il polimero ha varie caratteristiche come solubile in acqua, commestibile, non tossico e così via, ha attirato l'attenzione come candidato per molte applicazioni come alimenti, cosmetici e così via. Tuttavia, sebbene sia noto che il metabolismo intracellulare di Bacillus sp. è principalmente regolato dal controllo dei cataboliti, l'effetto del controllo dei cataboliti sul Bacillus sp. è in gran parte sconosciuto Questo studio è il primo rapporto dell'analisi del metaboloma sul Bacillus sp. mostrato in alto er produzione di PGA rispetto alle cellule in mezzo contenente glucosio. Inoltre, l'analisi del metaboloma ha rivelato che gli attivatori di CcpA e CodY, proteine regolatrici globali del metabolismo intracellulare, si accumulavano nelle cellule coltivate rispettivamente in terreno contenente glicerolo e glucosio, con CodY che apparentemente inibiva la produzione di PGA. Inoltre, le cellule sembravano produrre glutammato da citrato e ammonio usando glutammina sintetasi/glutammato sintasi. L'aggiunta pulsata di di-ammonio idrogeno citrato, come suggerito dal risultato del metaboloma, è stata in grado di raggiungere il valore più alto finora per la produzione di PGA in B. licheniformis.
Recettore nucleare orfano correlato agli estrogeni γ (ERRγ) svolge un ruolo chiave nell'induzione mediata dal recettore dei cannabinoidi epatici di tipo 1 dell'espressione del gene CYP7A1.Gli acidi biliari sono principalmente sintetizzati dal colesterolo nel fegato e hanno ruoli importanti nell'assorbimento dei lipidi nella dieta e nell'omeostasi del colesterolo Ruoli dettagliati dei recettori nucleari orfani che regolano il colesterolo 7α-idrossilasi (CYP7A1), l'enzima limitante nella sintesi degli acidi biliari, non hanno ancora stato completamente chiarito. Nel presente studio, riportiamo che il recettore correlato agli estrogeni (ERRγ) è un nuovo regolatore trascrizionale dell'espressione del CYP7A1. La sovraespressione di ERRγ ha aumentato l'espressione del CYP7A1 in vitro e in vivo, mentre il knockdown di ERRγ ha attenuato l'espressione del CYP7A1. sito di ricerca sul promotore del gene CYP7A1. Il piccolo partner eterodimero (SHP) ha inibito l'attività trascrizionale di ERRγ e quindi ha regolato l'espressione del CYP7A1. La sovraespressione di ERRγ ha portato ad un aumento dei livelli di acidi biliari, mentre un agonista inverso di ERRγ, GSK5182, ha ridotto l'espressione del CYP7A1 e la sintesi degli acidi biliari. Infine, GSK5182 ha ridotto significativamente l'induzione mediata dal recettore CB1 epatico dell'espressione del CYP7A1 e della sintesi degli acidi biliari nei topi trattati con alcol. Questi risultati forniscono il meccanismo molecolare che collega ERRγ e il metabolismo degli acidi biliari.
Valutazione della distribuzione di composti fenolici e contributo all'attività antiossidante in foglie, frutti, bucce e polpa di fico tunisino mediante analisi basata sulla spettrometria di massa.La composizione fenolica di foglie, frutti, bucce e polpa di due cultivar di F. carica, \'Temri\' e \'Soltani\', è stata studiata per comprenderne il contributo all'attività antiossidante. Sono stati caratterizzati in totale 116 composti in base sui risultati ottenuti dalla cromatografia liquida ad altissime prestazioni in fase inversa accoppiata al rilevamento di array di diodi e spettrometria di massa. In generale, le foglie di entrambe le cultivar e la buccia di \'Soltani\' hanno presentato profili qualitativi più ricchi rispetto alle altre parti della pianta. Utilizzando la modalità di ionizzazione negativa, i profili qualitativi della stessa parte dei fichi studiati erano simili. A questo proposito, la rutina era il principale composto in frutti, bucce e foglie, ma con quantità relative diverse. In alternativa, un isomero della prenilidrossigenisteina era il composto principale nelle polpe. Nella modalità di ionizzazione positiva, 9 antociani sono stati caratterizzati nella pelle \'Soltani\', di cui solo due presenti anche nella cultivar verde \'Temri\'. I principali antociani erano la cianidina 3-rutinoside e la cianidina 3,5-diglucoside, a seconda della cultivar e della parte del frutto. In questa modalità di ionizzazione, sono state rilevate anche 15 furanocumarine nelle foglie di entrambe le cultivar studiate, con metossipsoralene e psoralene relativamente abbondanti. Inoltre, i nostri risultati hanno mostrato una buona correlazione tra l'attività antiossidante, il contenuto totale di fenoli e l'abbondanza di alcune sottofamiglie fenoliche come acidi idrossibenzoici, flavonoli, flavoni, idrossicumarine e furanocumarine con r > 0,97.
Prendere di mira la sintesi del peptidoglicano della parete cellulare batterica mediante inibizione dell'attività della glicosiltransferasi.La sintesi del peptidoglicano della parete cellulare batterica richiede enzimi glicosiltransferasici che trasferiscono il peptide disaccaride dal lipide II sulla catena di glicani in crescita. La polimerizzazione della catena di glicani precede la reticolazione da parte delle proteine che legano la penicillina ed è essenziale per la crescita di patogeni batterici chiave. Pertanto, le glicosiltransferasi della parete cellulare batterica sono un obiettivo interessante per la scoperta di farmaci antibiotici. sfide significative per lo sviluppo di inibitori per questi bersagli includono lo sviluppo di saggi adatti e materia chimica adatta alla natura del sito di legame Abbiamo sviluppato l'attività enzimatica della glicosiltransferasi e saggi di legame utilizzando i prodotti naturali moenomicina e vancomicina come inibitori modello. inoltre, abbiamo progettato una libreria di composti disaccaridi basati sulla moenomicina minima frammento con attività inibitoria del peptidoglicano glicosiltransferasi e basato su un blocco costitutivo disaccaride più simile a un farmaco e sinteticamente versatile. Un sottoinsieme di questi composti disaccaridi ha legato e inibito gli enzimi glicosiltransferasi e questi composti potrebbero fungere da punti di ingresso chimici per lo sviluppo di antibiotici.
Cabozantinib e Tivantinib, ma non INC280, inducono effetti antiproliferativi e antimigratori nelle cellule tumorali neuroendocrine umane in vitro: evidenza di effetti \' fuori bersaglio\' non mediati da c-Met Inhibition.Il fattore di crescita degli epatociti/recettore transmembrana tirosina chinasi c-Met è stato definito come un potenziale bersaglio nel trattamento antitumorale di vari carcinomi. Abbiamo mirato a studiare l'effetto diretto dell'inibizione di c-Met sul tumore neuroendocrino Gli effetti degli inibitori multi-tirosin chinasi cabozantinib e tivantinib e dell'inibitore altamente specifico c-Met INC280 sono stati studiati in cellule neuroendocrine pancreatiche umane BON1, broncopolmonari NCI-H727 e GOT1 dell'intestino medio in vitro. INC280, cabozantinib e tivantinib hanno inibito rispettivamente la fosforilazione di c-Met. Tuttavia, mentre le concentrazioni equimolari (10 μM) di cabozantinib e tivantinib hanno inibito la vitalità cellulare e la migrazione cellulare, INC280 non ha avuto inibizione effetto ry. Anche gli esperimenti di knockdown con c-Met siRNA non hanno dimostrato effetti sulla vitalità cellulare. Cabozantinib e tivantinib hanno causato un arresto G2 nelle cellule tumorali neuroendocrine. I nostri dati in vitro suggeriscono che l'inibizione di c-Met da sola non è sufficiente per esercitare effetti antitumorali o antimigratori diretti nelle cellule tumorali neuroendocrine. Gli inibitori multi-tirosin chinasi cabozantinib e tivantinib mostrano promettenti effetti antitumorali e antimigratori nelle cellule tumorali neuroendocrine, che sono molto probabilmente effetti \'fuori bersaglio\', non mediati da c-Met.
Il blocco di GPR55 nello striato dorsolaterale compromette le prestazioni dei ratti in un paradigma T-maze.Indagare il ruolo dei recettori GPR55, che sono espressi nello striato umano e di ratto (una struttura che regola la memoria procedurale), i ratti Wistar hanno ricevuto cinque sessioni di addestramento (10 prove/sessione, 1 sessione/giorno) per risolvere un paradigma del labirinto a T. Da questi dati, abbiamo costruito curve di apprendimento in seguito a manipolazione farmacologica di GPR55. Cinque minuti prima di ogni sessione, gli animali hanno ricevuto iniezioni bilaterali intradorsolaterali nello striato di noladin-etere (3,1 nmol/l; agonista endogeno dei recettori GPR55 e CB1), CID16020036 (5,6 nmol/l; antagonista GPR55), AM251 (5,6 nmol/ l; CB1 antagonista), o una combinazione di noladin-etere con ciascun antagonista. Il noladin-etere di per sé non ha indotto cambiamenti significativi nella curva di apprendimento. Tuttavia, bloccando contemporaneamente i recettori CB1 (con AM251), il noladin-etere ha migliorato l'acquisizione. In contrasto, mentre si blocco multiplo di GPR55 (con CID16020036), acquisizione indebolita da noladin-etere. CID16020036 da solo ha compromesso l'apprendimento, mentre AM251 da solo ha ridotto l'efficienza del compito. Non c'erano differenze tra i gruppi nella latenza per raggiungere le braccia dal punto di partenza; quindi, nessun disturbo della coordinazione motoria ha interferito con questo compito. Questi risultati suggeriscono fortemente un ruolo di GPR55 nella memoria procedurale e costituiscono la prima prova che indica che questo recettore regola i processi cognitivi.
Fattori che regolano le interazioni farmaco-farmaco mediate dalla glicoproteina-P alla barriera emato-encefalica misurati con la tomografia a emissione di positroni.La cassetta legante l'adenosina trifosfato il trasportatore P-glicoproteina (ABCB1/Abcb1a) limita alla barriera emato-encefalica (BBB) la distribuzione cerebrale di molti farmaci ABCB1 può essere coinvolto nelle interazioni farmacologiche (DDI) alla BBB, che possono portare a cambiamenti nella distribuzione cerebrale e effetti collaterali dei farmaci sul sistema nervoso centrale La tomografia a emissione di positroni (PET) con i substrati ABCB1 (R)-[(11)C]verapamil e [(11)C]-N-desmetil-loperamide e l'inibitore ABCB1 tariquidar ha consentito confronto di DDI mediati da ABCB1 al BBB roditore e umano In questo lavoro abbiamo valutato diversi fattori che potrebbero influenzare l'entità dell'interazione tra tariquidar e (R)-[(11)C]verapamil o [(11)C]- N-desmetil-loperamide alla BBB e quindi contribuisce alle differenze di specie osservate in precedenza tra roditori e umani. Abbiamo eseguito esperimenti di trasporto in vitro con [(3)H]verapamil e [(3)H]-N-desmetil-loperamide in linee cellulari che sovraesprimono ABCB1 e Abcb1a. Inoltre abbiamo condotto esperimenti PET in vivo e studi di biodistribuzione con (R)-[(11)C]verapamil e [(11)C]-N-desmetil-loperamide in topi wild-type senza e con pretrattamento con tariquidar e in omozigoti Abcb1a/ 1b((-/-)) e topi eterozigoti Abcb1a/1b((+/-)). Non abbiamo trovato differenze per il trasporto in vitro di [(3)H]verapamil e [(3)H]-N-desmetil-loperamide da ABCB1 e Abcb1a e la sua inibizione da parte di tariquidar. [(3)H]-N-desmetil-loperamide è stato trasportato con un rapporto di trasporto da 5 a 9 volte superiore rispetto a [(3)H]verapamil nelle cellule trasfettate con ABCB1 e Abcb1a. In vivo, le concentrazioni di radioattività cerebrale erano inferiori per [(11)C]-N-desmetil-loperamide rispetto a (R)-[(11)C]verapamil. Entrambi i radiotraccianti hanno mostrato aumenti dose-dipendenti di tariquidar nella distribuzione cerebrale con concentrazioni inibitorie dimezzate di tariquidar (IC50) di 1052 nM (IC dell'intervallo di confidenza al 95%: 930-1189) per (R)-[(11)C]verapamil e 1329 nM ( 95% CI: 980-1801) per [(11)C]-N-desmetil-loperamide. Nei topi omozigoti Abcb1a/1b((-/-)) la distribuzione della radioattività cerebrale è stata aumentata di 3,9 e 2,8 volte e nei topi eterozigoti Abcb1a/1b((+/-)) di 1,5 e 1,1 volte, per (R )-[(11)C]verapamil e [(11)C]-N-desmetil-loperamide, rispettivamente, rispetto ai topi wild-type. Per entrambi i radiotraccianti sono stati rilevati metaboliti radiomarcati nel plasma e nel cervello. Quando le concentrazioni di radioattività cerebrale e plasmatica sono state corrette per i metaboliti radiomarcati, la distribuzione cerebrale di (R)-[(11)C]verapamil e [(11)C]-N-desmetil-loperamide è stata aumentata nei pazienti trattati con tariquidar (15 mg/kg). animali di 14,1 e 18,3 volte, rispettivamente, rispetto al gruppo di veicoli. L'anestesia con isoflurano ha alterato il metabolismo del [(11)C]-N-desmetil-loperamide ma non (R)-[(11)C]verapamil, e questo ha avuto un effetto diretto sull'entità dell'aumento della distribuzione cerebrale dopo l'inibizione di ABCB1. I nostri dati suggeriscono inoltre che in assenza della funzione ABCB1 la distribuzione cerebrale di [(11)C]-N-desmetil-loperamide ma non (R)-[(11)C]verapamil può dipendere dal flusso sanguigno cerebrale. In conclusione, abbiamo identificato una serie di fattori importanti, ovvero l'affinità del substrato per ABCB1, l'assorbimento cerebrale di metaboliti radiomarcati, l'anestesia e il flusso sanguigno cerebrale, che possono influenzare direttamente l'entità dei DDI mediati da ABCB1 al BBB e dovrebbero quindi essere presi in considerazione quando si interpretano i risultati della PET.
Confronti multipli dei meccanismi di attivazione della glucochinasi di cinque ingredienti bioattivi di gelso negli epatociti.Attività della glucochinasi (GK), che è rapidamente regolata dalla proteina regolatrice della glucochinasi ( GKRP) nel fegato, è cruciale per l'omeostasi della glicemia. In questo documento, i meccanismi di attivazione di GK di 1-deossinojrimicina (DNJ), resveratrolo (RES), ossiresveratrolo (OXY), cianidina-3-glucoside (C3G) e cianidina Sono stati confrontati -3-rutinoside (C3R). I risultati hanno rivelato che DNJ, RES, C3G e C3R potrebbero migliorare in modo diverso il consumo di glucosio e aumentare le attività intracellulari di GK. DNJ e RES hanno promosso significativamente la traslocazione di GK a 12,5 μM, mentre altri ingredienti hanno mostrato effetti moderati DNJ, C3G e C3R potrebbero rompere i legami idrogeno intramolecolari di GK per accelerare la sua attivazione allosterica nella fase iniziale. RES e OXY potrebbero legarsi a una "tasca idrofobica" su GK per stabilizzare il GK attivo nella fase finale. Altrimenti, RES, OXY, C3G e C3R potrebbe interagire con GKRP nel sito di legame di F1P per promuovere la dissociazione e la traslocazione di GK. Il test enzimatico ha mostrato che RES (15-50 μM) e OXY (25-50 μM) potrebbero migliorare significativamente le attività GK, causate dalle loro proprietà di legame con GK. Inoltre, gli effetti di up-regulation più drammatici sull'espressione di GK sono stati osservati nei gruppi C3G e C3R. Questo lavoro ha esposto le differenze tra i meccanismi di attivazione di GK e le nuove scoperte aiuterebbero a sviluppare nuovi attivatori di GK.
Strutture di carboidrati come inibitori della glicosiltransferasi con attività antibatterica in vivo.Il rapido aumento dei batteri multiresistenti è una crisi sanitaria globale e una nuova gli antibiotici sono urgentemente necessari, specialmente quelli con modalità d'azione che hanno un potenziale di bassa resistenza. Un promettente vantaggio è l'antibiotico liposaccaride moenomicina che inibisce le glicosiltransferasi batteriche, che sono essenziali per la polimerizzazione del peptidoglicano, mentre mostra un basso tasso di resistenza. Purtroppo, la lipofilia della moenomicina porta a proprietà farmacocinetiche sfavorevoli che la rendono inadatta alla somministrazione sistemica. In questo studio, dimostriamo che utilizzando la moenomicina e altri inibitori della glicosiltransferasi come modelli, siamo stati in grado di sintetizzare librerie di composti basate sulla nuova chimica dello scaffold del piranosio, con attività simile alla moenomicina , ma con proprietà farmacologiche migliorate. I nuovi composti esibiscono un'inibizione in vitro com parabola alla moenomicina, con bassa tossicità e buona efficacia in diversi modelli di infezione in vivo. Questo approccio basato su scaffold di carboidrati non planari offre una nuova opportunità per sviluppare nuovi antibiotici con una bassa propensione all'induzione di resistenza.
Ispirato e stabilizzato dalla natura: sintesi ribosomiale del canale ionico con controllo del voltaggio umano (VDAC) in interfacce lipidiche legate alla proteina 2D.Vi presentiamo un elegante approccio di sintesi e ricostituzione per studi funzionali di proteine di membrana voltaggio responsive. Per tali studi, proponiamo un'architettura planare di una membrana lipidica supportata dallo strato S come matrice adatta per presentare specie proteiche di membrana non modificate, e qui ci concentriamo sulla canale anionico voltaggio-dipendente (VDAC) dai mitocondri umani. La strategia cell-free presentata, in cui le proteine VDAC sono sintetizzate nel lisato cellulare batterico, in una struttura a membrana, offre un grande vantaggio nello studio di tali sottili proteine di membrana rispetto al convenzionale , approccio di sintesi cellulare in termini di riproducibilità. La combinazione materiale-saggio è superiore rispetto agli approcci di sintesi e purificazione correlati alla coltura cellulare poiché qui si bypassa con una procedura di sintesi in un unico passaggio t La complessa coltura cellulare, l'espressione e la purificazione, e, inoltre, la proteina di interesse non deve mai essere solubilizzata con un detergente ed è stata sintetizzata de novo. Forniamo qui una descrizione dettagliata della procedura all-over e dei nostri primi risultati, descrivendo in dettaglio la sintesi priva di cellule e la robustezza di una tale combinazione di materiale-saggio: specie proteiche VDAC funzionali incorporate in un'architettura a membrana planare e pronte per la caratterizzazione elettrochimica.
L'antiossidante MitoQ mirato ai mitocondri riduce il danno da ischemia-riperfusione in un modello murino di trapianto cardiaco singenico.Produzione di radicali liberi e disfunzione mitocondriale durante il cuore La riperfusione dell'innesto è un fattore importante nel danno da ischemia-riperfusione (IR) post-trapianto, un'importante causa alla base della disfunzione dell'innesto primario Abbiamo quindi valutato l'efficacia dell'anti-ossidante MitoQ mirato ai mitocondri nel ridurre il danno IR in un cardiopatico eterotopico murino modello di trapianto Cuori di topi donatori C57BL/6 sono stati lavati con la sola soluzione di conservazione, una soluzione contenente l'antiossidante MitoQ o una soluzione contenente il controllo non antiossidante del deciltrifenilfosfonio ed esposti a breve (30 minuti) o prolungato (4 ore) conservazione a freddo prima del trapianto Gli innesti sono stati trapiantati in riceventi C57BL/6 e analizzati per la produzione di specie reattive dell'ossigeno mitocondriale, danno ossidativo, troponina sierica, punteggio di battito, e marcatori infiammatori 120 minuti o 24 ore dopo il trapianto. MitoQ è stato assorbito dal cuore durante la conservazione a freddo. La conservazione a freddo prolungata dei cuori dei donatori prima che l'IR aumentasse il danno IR (troponina I, punteggio battente) e le specie reattive dell'ossigeno mitocondriale, il danno al DNA mitocondriale, i carbonili proteici e il rilascio di citochine pro-infiammatorie 24 ore dopo il trapianto. La somministrazione di MitoQ al cuore del donatore nella soluzione di conservazione ha protetto contro questa lesione IR bloccando il danno ossidativo dell'innesto e attenuando la risposta proinfiammatoria precoce nel ricevente. L'IR dopo il trapianto di cuore provoca un danno ossidativo mitocondriale che è potenziato dall'ischemia da freddo. L'integrazione della perfusione dell'innesto del donatore con l'antiossidante MitoQ prima del trapianto dovrebbe essere studiata ulteriormente per ridurre la produzione di radicali liberi correlata all'IR, la risposta immunitaria innata al danno da IR e il successivo danno cardiaco del donatore.
Bioconversione di Cyanidin-3-Rutinoside in Cyanidin-3-Glucoside in Black Raspberry da parte dell'α-L-Rhamnosidase grezza da Aspergillus Species.Cyanidin- Il 3-glucoside (C3G) è noto per essere più biodisponibile della cianidina-3-rutinoside (C3R), l'antocianina più abbondante nel lampone nero (Rubus occidentalis). Lo scopo di questo studio era migliorare la biodisponibilità degli antociani nel lampone nero scindendo L-ramnosio in C3R utilizzando estratti enzimatici grezzi (CEE) da Aspergillus usamii KCTC 6956, A. awamori KCTC 60380, A. niger KCCM 11724, A. oryzae KCCM 12698 e A. kawachii KCCM 32819. Le attività enzimatiche del Le CEE sono state determinate con un metodo spettrofotometrico utilizzando rho-nitrofenil-ramnopiranoside e rho-nitrofenil-glucopiranoside. La CEE di A. usamii aveva la più alta attività α-L-ramnosidasi con 2,73 U/ml a 60°C, seguita da quelle di A. . awamori e A. niger. Quando la bioconversione di C3R in C3G nel lampone nero è stata analizzata mediante HPLC- DAD, i CEE di A. usamii e A. awamori hanno idrolizzato il 95,7% e il 95,6% di C3R a C3G, rispettivamente, dopo 2 ore di incubazione. I CEE di A. kawachii e A. oryzae non hanno convertito C3R in C3G nel lampone nero.
Polimorfismi nei geni CaSR e CLDN14 associati ad un aumento del rischio di calcoli renali in pazienti della parte orientale dell'India.Malattia dei calcoli renali (KSD) è un grave problema clinico che impone un grande onere sia per l'assistenza sanitaria che per l'economia a livello globale. In India, la prevalenza della malattia da calcoli renali è in rapido aumento. Questo studio mirava a valutare l'associazione tra difetti genetici nel recettore della vitamina D (VDR), recettore sensibile al calcio (CaSR) e claudina 14 (CLDN14) e calcoli renali in pazienti dell'India orientale Sono stati arruolati 200 pazienti con calcoli renali consecutivi (età 18-60 anni) (casi) e il loro sesso ed età corrispondenti corrispondevano a 200 individui normali (controlli) Per identificare le varianti genetiche responsabili di KSD, abbiamo eseguito l'analisi della sequenza dei geni VDR, CaSR e CLDN14. Quattro non sinonimi (rs1801725, rs1042636, rs1801726 e rs2228570), uno sinonimo (rs219780) e tre polimorfismi intronici a singolo nucleotide s (SNP) (rs731236, rs219777 e rs219778) sono stati identificati. L'analisi del genotipo e della frequenza allelica di questi SNP ha rivelato che rs1801725 (Ala986Ser), rs1042636 (Arg990Gly) del gene CaSR e rs219778, rs219780 (Thr229Thr) del gene CLDN14 erano significativamente associati a KSD. I livelli sierici di calcio erano significativamente più alti nei soggetti portatori dell'allele 986Ser e l'escrezione di calcio era maggiore nei soggetti portatori dell'allele 990Gly. In conclusione, gli SNP rs1801725, rs1042636, rs219778 e rs219780 sono stati associati al rischio di calcoli renali in pazienti della parte orientale dell'India.
Monitoraggio dei bisfenoli nelle conserve di tonno dai mercati italiani.Il monitoraggio della contaminazione alimentare da bisfenoli è un processo necessario per la valutazione del rischio dei consumatori\'. A metodo per l'analisi quali-quantitativa di Bisfenolo A (BPA), Bisfenolo B (BPB), Bisfenolo A Diglicidil Etere (BADGE) e Bisfenolo F Diglicidil Etere (BFDGE), mediante cromatografia liquida con rivelazione a fluorescenza (LC-FD), è stato eseguiti e convalidati per la loro determinazione in 33 campioni di tonno, in scatola in olio o in mezzo acquoso. I campioni sono stati raccolti nei mercati italiani. Il tonno e il relativo mezzo di conservazione sono stati analizzati separatamente. I livelli di bisfenoli rilevati variavano da 19,1 a 187,0 ng/g in matrice di tonno e da 6,3 a 66,9 ng/mL in mezzo oleoso Non sono stati trovati bisfenoli in mezzo acquoso Almeno uno degli analiti è stato trovato nell'83% dei campioni di tonno in mezzo oleoso, mentre i campioni di tonno in mezzo acquoso hanno mostrato BPA da solo nel 67% dei campioni.21 La % dei campioni di terreno oleoso è risultata positiva per almeno un bisfenolo. Sulla base delle concentrazioni misurate e del tasso di ingestione giornaliera generale di tonno in scatola, è stata calcolata la probabile assunzione giornaliera di BPA per la popolazione italiana.
Struttura e attività citotossica di esteri glicosidici sesquiterpenici da Calendula officinalis L.: Studi sulla conformazione del viridiflorol.Applicazioni topiche di Calendula officinalis L. lipofila gli estratti sono utilizzati in fitoterapia per alleviare le condizioni infiammatorie della pelle mentre gli infusi sono usati come rimedio per i disturbi gastrici. Un utilizzo così diverso potrebbe essere spiegato da una certa citotossicità degli estratti lipofili a livello gastrico ma poco si sa su questo. Pertanto, abbiamo esaminato il CH2Cl2 estratto dai fiori di C. officinalis mediante saggi MTT e LDH in cellule gastriche epiteliali umane AGS. Questo approccio orientato al biodosaggio ha portato all'isolamento di diversi glicosidi sesquiterpenici che erano strutturalmente caratterizzati da misurazioni spettroscopiche, reazioni chimiche e calcoli MM. Le preferenze conformazionali di viridiflorol fucoside sono stati stabiliti ed è stata rivista una stereochimica precedentemente assegnata. I composti 1a, 2a a nd 3f ha mostrato una citotossicità relativamente elevata nei test MTT, mentre l'effetto sul rilascio di LDH era inferiore. Il nostro studio fornisce nuove informazioni sulla composizione degli estratti di C. officinalis di media polarità e identifica i principali composti che potrebbero essere responsabili di effetti citotossici a livello gastrico.
Gli effetti della lavorazione del succo sugli antiossidanti del gelso nero.Il frutto del gelso nero viene trasformato in succo su scala significativa in Turchia. L'effetto della produzione su scala industriale la produzione di succo sugli antiossidanti del gelso nero è stata valutata utilizzando campioni raccolti dalle principali fasi di lavorazione, tra cui la selezione dei frutti, il lavaggio, la macinazione meccanica, l'ammostamento, la spremitura a freddo, la pastorizzazione e il riempimento-imballaggio. e cianidina-3-rutinoside), due acidi fenolici (acido 3- e caffeilchinico) e 3 flavonoli (rutina, quercetina-3-glucoside e quercetina-malonil-glucoside) sono stati identificati mediante LC-QTOF-MS e quantificati mediante HPLC Circa il 60-70% degli antociani della frutta sono stati trattenuti nel succo finale, che conteneva anche alti livelli di acidi caffeilchinici, rispetto al frutto. La schiacciatura e la pressatura erano le fasi efficaci per il recupero dei polifenoli della frutta nel succo FR azione. Inoltre, un modello di digestione gastrointestinale in vitro, applicato per determinare l'effetto dell'elaborazione sulla biodisponibilità degli antiossidanti del gelso, ha indicato una maggiore biodisponibilità di antociani per la matrice del frutto rispetto alla matrice del succo.
Effetti del butafosfan con o senza cianocobalamina sul metabolismo delle vacche in lattazione precoce con chetosi subclinica.Cinquantuno vacche da latte con chetosi subclinica sono state utilizzate per studiare gli effetti del butafosfan da solo o in combinazione con cianocobalamina sul metabolismo I trattamenti includevano l'iniezione ev di 10 ml/100 kg di peso corporeo con butafosfan (BUT) o cianocobalamina combinata con butafosfan (BUTCO) a una concentrazione simile a quella di Catosal (®). Le vacche di controllo (CON) hanno ricevuto una soluzione salina allo 0,9%. Le vacche sono state iniettate nei giorni 1-3 a 22,3 ± 0,7 giorni dopo il parto. La produzione e la composizione del latte non sono state influenzate dai trattamenti. Nel plasma, le vacche CON avevano un significativamente più alto concentrazione plasmatica NEFA (0,59 ± 0,03 mm) durante il periodo di studio rispetto alle vacche BUTCO (p < 0,05; 0,42 ± 0,03 mm), mentre la concentrazione plasmatica NEFA di BUT era intermedia (0,52 ± 0,03 mm) ma non significativamente diversa da CON. Sia le vacche BUTCO che BUT avevano l ower (p < 0,05) concentrazioni plasmatiche di BHBA (1,02 ± 0,06 mm e 1,21 ± 0,06 mm, rispettivamente) durante il periodo di studio rispetto a CON (1,34 ± 0,06 mm). Il glucosio plasmatico non era diverso tra i trattamenti, ma le concentrazioni plasmatiche di glucagone erano costantemente elevate in BUT rispetto a BUTCO e CON. I livelli più bassi di glucagone post-trattamento sono stati osservati in BUTCO. L'abbondanza di mRNA epatico del recettore X del fegato α, una proteina del recettore nucleare coinvolta nel metabolismo lipidico, era più alta in BUTCO rispetto a BUT e CON (p < 0,05) il giorno 7. Inoltre, il giorno 7, l'abbondanza di mRNA di beta-idrossibutirrato deidrogenasi 2 era più alta in BUTCO rispetto a BUT e CON (p < 0,01). In conclusione, le iniezioni di cianocobalamina combinata con butafosfan post-partum nelle vacche da latte chetosiche all'inizio della lattazione agiscono sul metabolismo lipidico con effetti sui metaboliti plasmatici, molto probabilmente mediati dall'attività modificata di fattori chiave nel fegato. I risultati indicano che l'applicazione di butafosfan solo in combinazione con cianocobalamina mostra gli effetti positivi attesi sul metabolismo.
Inibizione della catechina della neuraminidasi influenzale e sue basi molecolari con spettrometria di massa.La base molecolare per le proprietà inibitorie antivirali di tre catechine epigallocatechina gallato, epicatechina gallato e catechina-5-gallato derivato dal tè verde è stato valutato in termini di capacità di interazione con la neuraminidasi influenzale. Questo è stato studiato utilizzando un approccio di spettrometria di massa MALDI a base molecolare in combinazione con saggi di inibizione associati che impiegano la microscopia confocale. Insieme al docking molecolare computazionale, è stato scoperto che tutte e tre le catechine si legano alla neuraminidasi influenzale in prossimità di una cavità strutturalmente conservata adiacente al residuo 430 che è stato suggerito essere un sito secondario di legame dell'acido sialico. virus della progenie da cellule ospiti a concentrazioni di inibitori (valori IC50) comprese tra 100 e 173 μM. i loro diversi profili di legame evitano le limitazioni degli inibitori della neuraminidasi esistenti manifestate dall'evoluzione dei ceppi di resistenza antivirale.
Effetti del mitochinone antiossidante mirato ai mitocondri nella pancreatite acuta murina.Sebbene lo stress ossidativo sia stato fortemente implicato nello sviluppo della pancreatite acuta (AP) , la terapia antiossidante nei pazienti è stata finora scoraggiante. Lo scopo di questo studio era di valutare i potenziali effetti protettivi di un antiossidante mirato ai mitocondri, MitoQ, in AP sperimentali utilizzando approcci in vitro e in vivo. MitoQ ha bloccato le risposte ROS intracellulari indotte da H2O2 nelle cellule acinose pancreatiche murine, un'azione non condivisa dall'analogo di controllo dTPP. MitoQ non ha ridotto la depolarizzazione mitocondriale indotta da colecistochinina (CCK) o acido biliare TLCS, e a 10 μM ha causato la depolarizzazione di per sé. Sia MitoQ che dTPP hanno aumentato la base e Morte cellulare indotta da CCK in un test con lettore di piastre. In un modello AP indotto da TLCS, il trattamento con MitoQ non era protettivo. In AP indotto da iperstimolazione della caeruleina (CER-AP), MitoQ ha esercitato effetti misti. Pertanto, p è stato osservato un miglioramento artiale dei punteggi istopatologici, azioni condivise da dTPP, ma senza riduzione dei marker biochimici tripsina pancreatica o amilasi sierica. È interessante notare che la mieloperossidasi polmonare e l'interleuchina-6 sono state aumentate contemporaneamente da MitoQ in CER-AP. MitoQ ha causato effetti bifasici sulla produzione di ROS in leucociti polimorfonucleati isolati, inibendo un aumento acuto ma elevando i livelli successivi. I nostri risultati suggeriscono che MitoQ sarebbe inappropriato per la terapia AP, in linea con le precedenti valutazioni antiossidanti in questa malattia.
[Costituenti chimici della Ligularia songarica].Per studiare i costituenti chimici della Ligularia songarica. L'isolamento e la purificazione sono stati eseguiti su cromatografia ripetuta su colonna di gel di silice Le strutture dei composti sono state identificate mediante proprietà fisico-chimiche e analisi spettrali. Dieci composti sono stati isolati e identificati come benzofuranoeremophil-2-ene (1), 6-angeloilossi-1,10-epossi-euriopsina (2), 2-idrossiplatifillide ( 3), 1β-idrossi-6,9-dien-8-ossoeremofia-11-nor-11-chetone (4), 2-isopropenil-6-acetil-8-metossi-13-benzodiossina-4-one (5) , 1β-idrossi-6,9-dien-8-osso-11-nor-11-idrossieremofilano (6), isopetasina (7), 6β,10α-diidrossi-1-ossoeremofila-7 (11), 8(9) -diene-8,12-olide (8), 10α-idrossi-1-osso-eremophila-7 (11), 8(9)-diene-8,12-olide (9) e 6β-angeloilossi-1β,10β -epoxy-9-oxo-furaneremophilane (10). I composti 2-9 sono ottenuti da questa pianta per la prima volta.
Nootropi Unifi dal laboratorio al web: una storia di carenze accademiche (e industriali).Questo articolo è una recensione del lavoro del mio ex gruppo accademico di ricerca degli ultimi 15 anni, nel campo dei potenziatori cognitivi (detti anche nootropi) che ha individuato due molecole molto potenti: Unifiram e Sunifiram che per una serie di motivi non erano protette da brevetto. divulgazione (2000) Ho scoperto casualmente che sul web c'erano dozzine di siti che offrivano Unifiram e Sunifiram come farmaci che migliorano la cognizione in individui sani anche se sono stati fatti solo pochi studi preclinici e la loro tossicità a lungo termine era sconosciuta.
Piperazine sostituite come agenti nootropici: 2- o 3-fenil derivati strutturalmente correlati al potenziatore cognitivo DM235.Una serie di 2-fenil- o 3-fenil piperazine, strutturalmente correlate a DM235 e DM232, due potenti agenti nootropici, sono stati preparati e testati nel test di evitamento passivo del topo, per valutare la loro capacità di invertire l'amnesia indotta dalla scopolamina. Anche se le molecole appena sintetizzate erano meno potenti rispetto ai composti progenitori, alcune informazioni utili sono state ottenute dalle relazioni struttura-attività. È stata trovata una piccola ma significativa enantioselettività per il composto più potente 5a.
Verificare l'utilità delle ricombinasi sito-specifiche per la manipolazione del genoma del produttore di moenomicina Streptomyces ghanaensis ATCC14672.Streptomyces ghanaensis ATCC14672 è il produttore di antibiotici fosfoglicolipidi moenomicine che per quasi 40 anni sono stati utilizzati in tutto il mondo come additivo per mangimi animali. Man mano che l'uso di moenomicine si restringe (a causa dei divieti nell'UE e in alcuni altri paesi), si apre l'opportunità di sviluppare antibiotici tanto necessari contro i patogeni umani Gram-positivi , come i cocchi. È desiderabile sviluppare ceppi ATCC14672 che accumulano solo alcuni membri della famiglia moenomicina che faciliterebbero la loro purificazione, analisi e/o modifica chimica. Qui abbiamo testato ricombinasi sito-specifiche (SSR) come strumento per manipolare il genoma di ATCC14672 e per raggiungere gli obiettivi di cui sopra. Mostriamo che di tre SSR testati - Cre, Dre e Flp - le prime due reazioni di ricombinazione efficacemente catalizzate, mentre Flp non ha mostrato un attività nelle cellule ATCC14672. Cre ricombinasi può essere riutilizzato almeno tre volte per modificare il genoma ATCC14672 senza effetti dannosi, come inversioni o delezioni su larga scala. Vengono discusse le proprietà dei ceppi generati e degli SSR.
Separazione rapida di cianidina-3-glucoside e cianidina-3-rutinoside dall'estratto grezzo di gelso mediante cromatografia controcorrente ad alte prestazioni e definizione di un processo di ingrandimento volumetrico.", Questo studio descrive la rapida separazione degli antociani di gelso; vale a dire, cianidina-3-glucoside e cianidina-3-rutinoside, utilizzando una cromatografia controcorrente ad alte prestazioni e l'istituzione di un processo di scale-up volumetrico da semi-preparativo per la scala preparativa. Per ottimizzare i parametri di separazione, sono stati valutati sistemi solventi bifasici composti da tert-butil metil etere/n-butanolo/acetonitrile/0,01% di acido trifluoroacetico, portata, quantità di campione e velocità di rotazione per la scala semi-preparativa cromatografia in controcorrente ad alte prestazioni I parametri di cromatografia in controcorrente ad alte prestazioni su scala semi-preparativa ottimizzata (tert-butil metil etere/n-butanolo/acetonitrile/0,01% di acido trifluoroacetico, 1:3:1:5, v/v; flusso R mangiato, 4,0 ml/min; quantità del campione, 200-1000 mg; velocità di rotazione, 1600 rpm) sono stati trasferiti direttamente su una scala preparativa (tert-butil metil etere/n-butanolo/acetonitrile/0,01% acido trifluoroacetico, 1:3:1:5, v/v; portata, 28 mL/ min; quantità del campione, 5,0-10,0 g; velocità di rotazione, 1400 giri/min) per ottenere risultati di separazione identici a cianidina-3-glucoside e cianidina-3-rutinoside. In questo rapporto è stata affrontata per la prima volta la separazione degli antociani di gelso mediante cromatografia controcorrente semipreparativa ad alte prestazioni e la sua scala volumetrica fino a scala preparativa.
Effetti inibitori struttura-dipendenti delle catechine del tè verde sulla secrezione di insulina dalle cellule β pancreatiche.Gli effetti delle catechine del tè verde sull'insulina stimolata dal glucosio secrezione (GSIS) sono stati studiati nella linea di cellule β INS-1D. L'epigallocatechina gallato (EGCG) a 10 µM o il gallato di gallocatechina (GCG) a 30 µM ha causato significativi effetti inibitori su GSIS e ciascuno di questi a 100 µM lo ha quasi abolito Al contrario, l'epicatechina (EC) o la catechina (CA) non hanno avuto alcun effetto sul GSIS a concentrazioni fino a 100 µM. Abbiamo quindi studiato la relazione struttura-attività utilizzando l'epigallocatechina (EGC) e la gallocatechina (GC) contenente un gruppo triidrossilico nel B-ring e epicatechina gallato (ECG) e catechina gallato (CG) contenenti la frazione di gallato. EGC, GC ed ECG hanno causato un'inibizione di GSIS, sebbene effetti significativi siano stati ottenuti solo a 100 μM. A questa concentrazione, l'EGC ha quasi abolito GSIS, mentre GC ed ECG lo hanno parzialmente inibito al contrario, CG non ha influenzato GSIS a concentrazioni fino a 100μM. EGCG ha anche abolito la secrezione di insulina indotta da tolbutamide, un bloccante del canale K(+) sensibile all'ATP e parzialmente inibito quella indotta da 30 mM K(+). Inoltre, EGCG, ma non CE, ha inibito l'oscillazione della concentrazione intracellulare di Ca(2+) indotta dal glucosio 11.1 mM. Questi risultati suggeriscono che alcune catechine a concentrazioni sovrafisiologiche hanno effetti inibitori sul GSIS, la cui potenza dipende dalla loro struttura; l'ordine di potenza era EGCG>GCG>EGC>GC≈ECG. Gli effetti inibitori sembrano essere mediati dall'inibizione dei canali Ca(2+) voltaggio-dipendenti, che è causata, almeno in parte, dall'iperpolarizzazione della membrana risultante dall'attivazione dei canali K(+).
[Geni per la biosintesi di molecole di segnalazione simili al butenolide in Streptomyces ghanaensis, il loro ruolo nella produzione di moenomicina].Moenomicine (Mm)--composti fosfoglicolipidi prodotti da Streptomyces ghanaensis ATCC14672--sono considerati un modello promettente per lo sviluppo di una nuova classe di antibiotici. A questo proposito è importante generare ceppi di Mm in sovrapproduzione che sarebbero una base per la produzione economicamente giustificata di questo antibiotico. In questo lavoro una serie di sono stati descritti i geni per la sintesi e la ricezione di molecole di segnalazione a basso peso molecolare (LSM) in ATCC14672 ed è stato studiato il loro significato per la produzione di Mm. Il genoma ATCC 14672 contiene geni strutturali e regolatori per la produzione di LSM delle famiglie avenolide e γ-butirrolacone. copie dei geni biosintetici LSM ssfg_07848 e ssfg_07725 non hanno alterato il livello di produzione di Mm. ATCC14672 Gli LSM non sono in grado di ripristinare la sporulazione del butirrolattone non pro- ucing mutante di S. griseo. Allo stesso modo, mentre l'ospite eterologo S. lividans 1326 produceva Mm, il suo mutante M707 (carente del gene della butirrolattone sintasi scbA) no. Pertanto, mentre il livello naturale di produzione di LSM da parte dell'ATCC 14672 non limita la sintesi di Mm, il primo è essenziale per la sintesi di moenomicine.
[Generazione e studio dei ceppi di streptomiceti--ospiti eterologhi per la produzione di moenomicina].In questo articolo, riportiamo la generazione di una serie di nuovi ospiti eterologhi di streptomiceti che producono nosokomicina A2 (uno dei membri della famiglia Mm) e determinano il loro potenziale per la produzione di antibiotici La mutazione puntiforme rpoB nel ceppo modello di Streptomyces coelicolor (ceppo M1152) ha migliorato significativamente la produzione di nosokomicina A2 rispetto a quella dei genitori ceppi (M145 e M512), mentre la doppia mutazione rpoBrpsL nella stessa specie (ceppo M1154) lo ha diminuito. I nostri risultati indicano le interazioni epistatiche precedentemente impreviste tra mutazioni che individualmente sono note per essere altamente benefiche per la produzione di antibiotici. Abbiamo anche dimostrato per il prima volta che lo streptomicete chemolitotrofico facoltativo S. thermospinosisporus e il produttore di cloramfenicolo S. venezuelae possono essere utilizzati come ospiti per i geni moe.
Effetti protettivi del cianidina-3-rutinoside contro la glicazione e l'ossidazione delle proteine indotte dai monosaccaridi.Cyanidin-3-rutinoside (C3R), un antocianina, è presente in vari frutti e verdure come colorante. C3R è stato ben caratterizzato e ha dimostrato una serie di attività biologiche attribuite alle sue proprietà antiossidanti. Il presente studio ha confrontato l'efficacia di C3R contro la glicazione e l'ossidazione delle proteine indotte dai monosaccaridi in vitro utilizzando albumina sierica bovina (BSA). I risultati hanno dimostrato che C3R (0,125-1,00 mM) inibisce la formazione di AGE fluorescenti in BSA glicata da ribosio (2-52%), BSA glicata da fruttosio (81-93%), glicata da glucosio BSA (30-74%) e BSA glicata da galattosio (6-79%). Di conseguenza, C3R (1,00 mM) ha ridotto il livello di N(ɛ)-(carbossimetil) lisina (56-86%) nella glicazione indotta da monosaccaridi in BSA. C3R ha anche ridotto il livello di fruttosamina, struttura incrociata β-amiloide, proteina carbonile contenuto così come l'esaurimento del tiolo nel sistema BSA/monosaccaride. In sintesi, C3R potrebbe offrire un nuovo promettente agente antiglicazione per la prevenzione delle complicanze diabetiche inibendo la formazione di AGE e il danno proteico dipendente dall'ossidazione.
Presenza e accumulo diffusi di bisfenolo A diglicidil etere (BADGE), bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE) e loro derivati nel sangue umano e grasso adiposo.Nonostante l'uso diffuso del bisfenolo A diglicidil etere (BADGE) e del bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE) in vari prodotti di consumo, gli studi sull'esposizione umana a questi composti sono scarsi. In questo studio, BADGE, BFDGE e sette dei loro derivati sono stati determinato in campioni di grasso adiposo umano e plasma sanguigno raccolti da New York City, NY. Il bisfenolo A bis (2,3-diidrossipropil) etere [BADGE·2H2O] è stato il principale derivato del BADGE trovato nel 60% dei campioni adiposi e nel 70% dei campioni di plasma analizzati. Alte concentrazioni e frequenze di rilevamento di BFDGE sono state riscontrate sia nei campioni adiposi che in quelli di plasma. Le concentrazioni di BFDGE nel grasso adiposo variavano da 19,1 a 4500 ng/g di peso umido. Una correlazione significativa tra BADGE o BFDGE e i loro derivati nel grasso adiposo e plasma campioni hanno suggerito l'idratazione di questi composti reattivi nell'uomo. Esisteva una significativa correlazione positiva tra i BADGE (cioè la somma di BADGE e dei suoi cinque derivati) e i BFDGE nei campioni adiposi, il che suggeriva fonti e percorsi di esposizione simili per questi composti nell'uomo. Anche il bisfenolo A (BPA) è stato analizzato nel grasso adiposo e nel plasma e le sue concentrazioni sono state correlate positivamente con quelle dei BADGE, il che ha confermato la coesposizione di BADGE e BPA nell'uomo.
[Effetto dell'autofagia e del coenzima Q mitocondriale sulla funzione esocrina del pancreas nei ratti con sepsi acuta].Indagare gli effetti dell'autofagia sulla funzione esocrina del pancreas in ratti con sepsi acuta e per determinare se il coenzima mitocondriale Q (Mito Q) può prevenire la disfunzione esocrina del pancreas mediata dall'autofagia Esperimento I: 30 ratti Sprague-Dawley (SD) sono stati divisi casualmente in tre gruppi, con 10 ratti in ciascun gruppo A tutti i ratti sono stati somministrati lipopolisaccaride (LPS, 10 mg/kg) per via intraperitoneale e Wortmannin (2 mg/kg), l'inibitore specifico dell'autofagia (gruppo LPS + Wortmannin), Mito Q (6,5 μmol/kg, Gruppo LPS + Mito Q), o lo stesso volume di soluzione salina normale (gruppo LPS) è stato iniettato rispettivamente attraverso la vena caudale 1 ora dopo. Il tasso di sopravvivenza è stato valutato entro 12 ore dall'iniezione di LPS. Esperimento II: altri 100 ratti SD maschi sono stati randomizzati diviso in dieci gruppi con 10 ratti in ciascun gruppo: vale a dire controllo 4, 6 an d gruppi di 12 ore, gruppi di 4, 6 e 12 ore di LPS e gruppo di 4 ore di LPS + Wortmannin, gruppo di 4 ore di Wortmannin, gruppo di 6 ore di LPS + Mito Q e gruppo di 6 ore di Mito Q. I protocolli di riproduzione del modello e di somministrazione del farmaco erano gli stessi dell'esperimento I. I campioni di sangue sono stati raccolti in ogni momento e il contenuto di amilasi è stato determinato con il metodo della velocità. I livelli di specie reattive dell'ossigeno (ROS) nei pancreas sono stati misurati con il saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). L'espressione della proteina correlata all'autofagia LC3 è stata determinata con Western Blot. I cambiamenti patologici nel pancreas sono stati osservati al microscopio. (1) Il tempo di sopravvivenza nel gruppo LPS + Wortmannin era significativamente più breve di quello nel gruppo LPS (ore: 7,50±0,64 vs 11,90±0,13, (2) = 19,847, P = 0,001). Non c'era alcuna differenza significativa nel tempo di sopravvivenza tra i gruppi LPS + Mito Q e LPS (ore: 11,60±0,24 vs 11,90±0,13, χ (2) = 1.055, P = 0,137). (2) L'amilasi sierica nei gruppi LPS 6 ore, LPS + Wortmannin 4 ore e LPS + Mito Q 6 ore era significativamente più alta di quella del gruppo di controllo agli stessi punti temporali (U/L: 2 881.00±550.12 vs. 2 099,20 ± 249,57, 3 672,00 ± 779,24 contro 2 081,36 ± 245,18, 2 975,20 ± 687,03 contro 2 099,20 ± 249,57, tutti P < 0,05) e sono stati significativamente ridotti nel gruppo LPS 12 ore (U/L: 794,00 ±218,71 contro 2 086,80±261,75, P < 0,01). I ROS pancreatici nei gruppi LPS 6 ore e 12 ore, LPS + Wortmannin 4 ore e LPS + Mito Q 6 ore erano significativamente più alti di quelli del gruppo di controllo negli stessi punti temporali (kU/L: 3,18 ± 1,06). contro 1,78±0,37, 3,63±1,08 contro 1,85±0,41, 3,14±0,98 contro 1,65±0,34, 3,17±1,03 contro 1,78±0,37, tutti P < 0,05). L'amilasi sierica e i ROS pancreatici nel gruppo LPS + Wortmannin 4 ore erano significativamente più alti di quelli del gruppo LPS negli stessi punti temporali (U/L: 3 672,00±779,24 vs. 2 432,20±442,85, kU/L: 3,14±0,98 vs. 1,87±0,42, entrambi P < 0,05), ma non ci sono state differenze nei due parametri precedenti tra il gruppo LPS + Mito Q 6 ore e il gruppo LPS (U/L: 2 975,20±687.03 vs. 2 881,00±550,12, kU /L: 3,17±1,03 rispetto a 3,18±1,06, entrambi P > 0,05). La microscopia ottica ha mostrato che evidenti cambiamenti patologici sono stati trovati nel pancreas nei gruppi LPS 6 ore e 12 ore, LPS + Wortmannin 4 ore e LPS + Mito Q 6 ore. La microscopia elettronica ha mostrato che il numero di vacuoli autofagici è aumentato 6 ore dopo la somministrazione di LPS. Non c'era alcuna differenza in qualsiasi momento nel numero di vacuoli autofagici tra il gruppo LPS + Mito Q 6 ore e il gruppo LPS 6 ore, e i vacuoli autofagici non sono stati trovati dopo l'intervento di Wortmannin. È stato dimostrato da Western Blot che i livelli di proteina LC3 nei gruppi LPS 6 ore e 12 ore e nel gruppo LPS + Mito Q 6 ore erano significativamente più alti di quelli del gruppo di controllo negli stessi punti temporali (valore A: 0,34± 0,02 contro 0,17±0,02, 0,37±0,03 contro 0,18±0,04, 0,36±0,02 contro 0,17±0,02, tutto P < 0,05), ma non ci sono state differenze tra il gruppo LPS 12 ore o il gruppo LPS + Mito Q 6 ore e gruppo LPS 6 ore (entrambi P > 0.05). L'autofagia previene la disfunzione esocrina del pancreas nei ratti settici e la capacità autofagica o il tasso di formazione dell'autofagosoma possono determinare lo sviluppo della disfunzione pancreatica esocrina. L'antiossidante Mito Q mirato ai mitocondri non previene la disfunzione esocrina del pancreas.
[Derivati dell'acido caffeilchinico da steli di Akebia trifoliata].Per studiare i costituenti chimici da steli di Akebia trifoliata. I composti sono stati isolati e purificati mediante colonna cromatografia, e le loro strutture sono state determinate attraverso tecniche spettroscopiche e proprietà fisico-chimiche. Sei composti sono stati isolati dagli steli di Akebia trifolita e identificati come estere metilico dell'acido criptoclorogenico (1), estere metilico dell'acido neoclorogenico (2), estere metilico dell'acido clorogenico (3) , metil 3,5-di-O-caffeoil chinato (4), metil 3,4-di-O-caffeil chinato (5) e metil 4,5-di-O-caffeil chinato (6). Tutti i composti sono isolati dal genere Akebia per la prima volta. I composti 1,5 e 6 mostrano evidenti attività inibitorie contro l'α-glucosidasi.
Valutazione del potenziale di membrana mitocondriale in cellule HEI-OC1 e LLC-PK1 trattate con gentamicina e mitochinone.Per determinare gli effetti del trattamento concomitante con gentamicina e il mitochinone antiossidante mirato ai mitocondri (MitoQ; che può prevenire l'ototossicità della gentamicina) sul cambiamento del potenziale di membrana mitocondriale (Δψ(m)), un precursore dell'apoptosi. Prospettico e controllato. Laboratorio di ricerca accademico. LLC-PK1 (Lilly Laboratories Culture -Pig Kidney Type 1) e cellule HEI-OC1 (House Ear Institute Organ of Corti 1) - linee cellulari renali e uditive, rispettivamente - sono state utilizzate in questo studio. (m) è stato valutato mediante citometria a flusso attraverso il MitoProbe JC-1 Kit per citometria a flusso in cellule LLC-PK1 e HEI-OC1 non trattate e cellule esposte a gentamicina a bassa (100µM) o alta (2000µM) dose per 24 ore, con e senza 0,5µM ciascuno di MitoQ o idebenone (IDB; un ubichinone). (m) non era diverso nelle cellule LLC-PK1 non trattate e cel è coincubato con gentamicina a basso dosaggio e MitoQ o IDB (P > .05). Nelle cellule HEI-OC1, la co-incubazione con gentamicina a basso dosaggio e MitoQ è diminuita Δψ(m) (P = .002). Coincubazione di cellule LLC-PK1 con gentamicina ad alte dosi e DMSO, MitoQ o IDB depolarizzato Δψ(m) (P < .0001), con MitoQ che depolarizza Δψ(m) in misura maggiore rispetto a quello di IDB (P \ = .03). Al contrario, le cellule HEI-OC1 hanno dimostrato un Δψ(m) iperpolarizzato quando coincubate con gentamicina ad alte dosi e DMSO, MitoQ o IDB (P < .001). La combinazione di gentamicina e MitoQ ha il potenziale per interrompere (m). Ciò suggerisce una maggiore necessità di monitorare la tossicità nei pazienti che ricevono entrambi gli agenti.
Stabilità che indica lo sviluppo e la convalida del metodo RP-HPLC per la determinazione simultanea di aminexil e minoxidil in forma farmaceutica.L'obiettivo del presente lavoro è per sviluppare la stabilità che indica un metodo cromatografico liquido ad alte prestazioni per la determinazione simultanea di amminexil e minoxidil in forma farmaceutica La separazione cromatografica è stata ottenuta con la colonna BDS Hypersil C18 (250 mm × 4,6 mm × 5 μ) come fase stazionaria e tampone fosfato e acetonitrile (78:22) come fase mobile. Il metodo è stato impiegato utilizzando una velocità di flusso di 1,1 mL/min mantenuta a 30 ° C. La lunghezza d'onda di rilevamento è stata mantenuta a 238 nm utilizzando un rivelatore a matrice di fotodiodi. I tempi di ritenzione di l'aminexil e il minoxidil sono risultati essere rispettivamente di 2,3 min e 3,9 min Il metodo sviluppato è stato convalidato in conformità con le linee guida ICH per quanto riguarda la stabilità che indica la capacità del metodo inclusa l'idoneità del sistema, un accuratezza, precisione, linearità, range, limite di rilevabilità, limite di quantificazione e robustezza. Le risposte di linearità di aminexil e minoxidil sono risultate negli intervalli di concentrazione di 18,75-112,5 μg/mL e 25-150 μg/mL, rispettivamente. I valori LOD e LOQ per l'aminexil sono risultati essere 0,31 e 0,92 μg/mL e il minoxidil è risultato essere rispettivamente di 0,03 e 0,10 μg/mL. Le percentuali di recupero per entrambi i farmaci sono state riscontrate nell'intervallo 98-101%. Questo metodo è accurato, preciso e sensibile; quindi, può essere impiegato per il controllo di qualità di routine dell'aminexil e del minoxidil nelle industrie farmaceutiche e nei laboratori di test antidroga.
Nefrolitiasi calcica idiopatica: una rassegna dei meccanismi patogenetici alla luce di studi genetici.La nefrolitiasi calcica è una malattia multifattoriale con un ambiente poligenico. Studi di associazione identificato polimorfismi genetici potenzialmente implicati nella patogenesi della nefrolitiasi di calcio. Il presente articolo esamina i meccanismi di formazione di calcoli di calcio e il potenziale contributo dei polimorfismi genici ai meccanismi litogenici. Le osservazioni endoscopiche hanno suggerito che la precipitazione dell'ossalato di calcio sulla placca di Randall a livello del La superficie della papilla può causare calcoli idiopatici di ossalato di calcio. La placca di Randall è un deposito di idrossiapatite nell'interstizio del midollo renale, che assomiglia a una calcificazione dei tessuti molli. Al contrario, i calcoli di fosfato di calcio possono svilupparsi da depositi cristallini situati sulla punta del il dotto di Bellini Polimorfismi di undici geni sono stati associati a calcoli nell'asino genomico studi di associazione e studi di associazione di geni candidati replicati: geni VDR, SLC34A1, SLC34A4, CLDN14 e CaSR che codificano per proteine che regolano il fosfato tubulare e il riassorbimento del calcio; geni CaSR, MGP, OPN, PLAU e UMOD che codificano per proteine che impediscono la precipitazione dei sali di calcio; Gene AQP1 che codifica per un canale d'acqua nel tubulo prossimale. L'attività renale dell'ultimo gene, DGKH, è sconosciuta. I polimorfismi in questi geni possono predisporre a calcoli di ossalato e fosfato di calcio aumentando il rischio di precipitazione di fosfato di calcio nel fluido tubulare. Messaggi chiave: i risultati genetici suggeriscono che la sovrasaturazione del fluido tubulare rispetto al calcio e al fosfato predispone ai calcoli di ossalato di calcio innescando meccanismi cellulari che portano alla formazione della placca di Randall.
Una maggiore inibizione della permeabilità-glicoproteina alla barriera ematoencefalica umana può essere ottenuta in sicurezza eseguendo la PET durante le concentrazioni plasmatiche di picco di tariquidar.La permeabilità- il trasportatore di efflusso della glicoproteina (P-gp) è densamente espresso nella barriera emato-encefalica e la sua capacità di riserva risultante richiede un blocco sostanziale per aumentare l'assorbimento di substrati avidi, attenuando la capacità dei ricercatori di misurare alterazioni clinicamente significative nella funzione della P-gp. Questo studio, condotto nell'uomo, ha esaminato 2 inibitori della P-gp (tariquidar, un noto inibitore e disulfiram, un presunto inibitore) e 2 vie di somministrazione (per via endovenosa e orale) per aumentare al massimo l'assorbimento cerebrale dell'avida e selettiva P-gp substrato (11)CN-desmetil-loperamide (dLop) evitando gli effetti collaterali associati ad alte dosi di tariquidar. Quarantadue (11)C-dLop scansioni PET sono state ottenute da 37 volontari sani. La PET è stata eseguita con (11)C- dLop unde r le seguenti 5 condizioni: iniettato in condizioni basali senza inibizione della P-gp, iniettato 1 h dopo l'infusione endovenosa di tariquidar, iniettato durante l'infusione endovenosa di tariquidar, iniettato dopo tariquidar orale e iniettato dopo disulfiram. (11) L'assorbimento di C-dLop è stato quantificato con modelli cinetici utilizzando la funzione di input arteriosa corretta dal metabolita o misurando l'area sotto la curva tempo-attività nel cervello da 10 a 30 min. Né il tariquidar orale né il disulfiram orale hanno aumentato l'assorbimento cerebrale di (11) C-dLop. L'iniezione di (11)C-dLop durante l'infusione di tariquidar, quando le concentrazioni plasmatiche di tariquidar raggiungono il loro picco, ha determinato una captazione cerebrale del radioligando circa 5 volte maggiore rispetto al basale. L'assorbimento cerebrale era simile con 2 e 4 mg di tariquidar per via endovenosa per chilogrammo; tuttavia, la dose più bassa è stata meglio tollerata. Anche l'iniezione di (11)C-dLop dopo l'infusione di tariquidar ha aumentato l'assorbimento cerebrale, sebbene fossero necessarie dosi più elevate (fino a 6 mg/kg). L'assorbimento cerebrale di (11)C-dLop è aumentato in modo abbastanza lineare con l'aumento delle concentrazioni plasmatiche di tariquidar, ma non siamo sicuri se sia stato raggiunto il massimo assorbimento. Abbiamo cercato di aumentare la gamma dinamica della funzione P-gp misurata dopo il blocco. L'esecuzione di (11)C-dLop PET durante le concentrazioni plasmatiche di picco di tariquidar, ottenute con la somministrazione concomitante di tariquidar per via endovenosa, ha determinato una maggiore inibizione della P-gp a livello della barriera emato-encefalica umana rispetto alla somministrazione ritardata e ha consentito l'uso di un più basso, più tollerabile dose di tariquidar. Sulla base di precedenti studi sulle scimmie, sospettiamo che le concentrazioni plasmatiche di tariquidar non abbiano bloccato completamente la P-gp; tuttavia, dosi più elevate di tariquidar sarebbero probabilmente associate a effetti collaterali inaccettabili.
Un nuovo capitolo nella storia del bisfenolo A: il bisfenolo S e il bisfenolo F non sono alternative sicure a questo composto.Il bisfenolo A (BPA) è un ampiamente studiato tipico interferente endocrino, e uno dei principali nuovi problemi è la sostituzione sicura di questo composto comunemente usato. Il bisfenolo S (BPS) e il bisfenolo F (BPF) sono già o sono pianificati per essere utilizzati come alternative al BPA. uso di un sistema di coltura che abbiamo sviluppato (test del testicolo fetale [FeTA]), abbiamo precedentemente dimostrato che 10 nmol/L BPA riduce la secrezione basale di testosterone degli espianti di testicolo fetale umano e che la suscettibilità al BPA è almeno 100 volte inferiore nel ratto e testicoli fetali di topo. Qui, mostriamo che l'aggiunta di LH nel sistema FeTA migliora considerevolmente la concentrazione minima efficace di BPA nel topo e nell'uomo ma non nei testicoli fetali di ratto. Quindi, utilizzando il sistema FeTA senza LH (le condizioni sperimentali in cui topo e i testicoli fetali umani sono più sensibili al BPA), abbiamo scoperto che, come per il BPA, 10 nmol/L BPS o BPF sono sufficienti per diminuire la secrezione basale di testosterone da parte dei testicoli fetali umani con curve dose-risposta spesso non monotone. Nei testicoli fetali di topo, le curve dose-risposta erano per lo più monotone e le concentrazioni minime efficaci erano 1.000 nmol/L per BPA e BPF e 100 nmol/L per BPS. Infine, 10.000 nmol/L BPA, BPS o BPF hanno ridotto l'espressione di Insl3 nei testicoli fetali di topo in coltura. Questo è il primo rapporto che descrive gli effetti negativi di BPS e BPF su una funzione fisiologica nell'uomo e nei roditori.
Bisfenolo diglicidil eteri e bisfenolo A e loro idrolisi nell'acqua potabile.I rivestimenti epossidici sono comunemente usati per proteggere le superfici interne (ed esterne) dell'acqua condutture e serbatoi di stoccaggio e può essere utilizzato sulle superfici interne dei tubi dell'acqua in case, ospedali, hotel e altri edifici. I componenti principali comuni degli epossidici includono i bisfenoli, come il bisfenolo A (BPA) o il bisfenolo F (BPF), e i loro prepolimeri reattivi, rispettivamente bisfenolo A diglicidil etere (BADGE) e bisfenolo F diglicidil etere (BFDGE). Attualmente ci sono preoccupazioni per la salute sulla sicurezza di BPA e BPF a causa di noti effetti estrogenici. Determinazione dei percolati chiave di bisfenolo, sviluppo di un modello di idrolisi e l'identificazione di prodotti di idrolisi stabili aiuterà nella valutazione dell'esposizione umana al bisfenolo attraverso l'ingestione di acqua potabile. Per la quantificazione degli analiti chiave è stata utilizzata la cromatografia liquida/spettrometria di massa (LC/MS/MS) e una pseudo-prima per la modellizzazione è stato utilizzato l'approccio cinetico dell'ordine. Negli studi di riempimento e scarico su campioni di tubi rivestiti con resina epossidica, BADGE e un composto simile al BPA sono stati identificati come percolati. Il modello di idrolisi di BADGE prevede che le emivite di BADGE a pH 7 e 15, 25, 35 e 40 °C siano rispettivamente di 11, 4,6, 2,0 e 1,4 giorni; l'emivita del BFDGE era di 5 giorni a pH 7 e 25 °C. I due prodotti di idrolisi BADGE identificati sono BADGE-H2O e BADGE 2H2O, con BADGE 2H2O che è il prodotto finale nelle condizioni studiate.
Estratto supercritico di CO₂ e olio essenziale di parte aerea di Ledum palustre L.--Composizione chimica e attività antinfiammatoria.L'attività antinfiammatoria di due estratti dalle parti aeree di Ledum palustre. L'olio volatile è stato ottenuto per estrazione con fluido supercritico (SFE) e l'olio essenziale per idrodistillazione (HD). Gli oli sono stati analizzati mediante gascromatografia-spettrometria di massa per monitorarne la composizione Entrambi gli estratti hanno condiviso come composto principale (41,0-43,4%) ledol (23,3-26,7%) e ascarididolo (15,1-4,5%). L'attività antinfiammatoria è stata valutata dall'edema della zampa posteriore indotto dall'iniezione sottocutanea di carragenina. ricevuto olio essenziale (SFE e HD), il gruppo di riferimento ha ricevuto ketoprofene o piroxicam e il gruppo di controllo ha ricevuto NaCl 0,9%. Un'analisi statistica è stata eseguita dal test t di Student. I risultati mostrano che l'olio essenziale di L. palustre ha potenziato una significativa inibizione di edema (50-73%) per l'olio HD e (52-80%) per l'olio SFE. Questi risultati erano simili a quelli ottenuti con piroxicam (70%) e ketoprofene (55%).
Imbrunimento enzimatico e attività antiossidanti nei frutti di litchi raccolti influenzati dai polifenoli della mela.\'Guiwei\' i frutti di litchi sono stati trattati con 5 ga. i. L(-1) polifenoli della mela (APP) e poi conservati a 25°C per studiare gli effetti sull'imbrunimento del pericarpo. Il trattamento con APP ha ridotto efficacemente l'imbrunimento del pericarpo e ritardato la perdita del colore rosso. I frutti trattati con APP hanno mostrato livelli più elevati di antociani e cianidina -3-rutinoside, correlato alla soppressione dell'attività antocianasica. Il trattamento con APP ha anche mantenuto l'integrità della membrana e ridotto il danno ossidativo, come indicato da un tasso di perdita relativo inferiore, contenuto di malondialdeide e generazione di specie reattive dell'ossigeno (ROS). I dati suggeriscono che la decompartimentazione di è stata ridotta la perossidasi e la polifenolossidasi e i rispettivi substrati di imbrunimento. Inoltre, il trattamento con APP ha potenziato le attività degli enzimi antiossidanti (superossido dismutasi, catalasi, ascorbato perossidasi e gl utathione reduttasi), così come la capacità antiossidante non enzimatica (attività di radical-scavenging di DPPH e potere riducente), che potrebbe essere utile nello scavenging dei ROS. Proponiamo che il trattamento con APP sia una strategia sicura e promettente per controllare l'imbrunimento post-raccolta dei frutti di litchi.
Effetti inibitori di cedrol, β-cedrene e tujopsene sulle attività enzimatiche del citocromo P450 nei microsomi epatici umani.Cedrol, β-cedrene e tujopsene sono sesquiterpeni bioattivi presenti nell'olio essenziale di cedro ed esercitano attività antisettiche, antinfiammatorie, antispasmodiche, toniche, astringenti, diuretiche, sedative, insetticide e antimicotiche. Questi composti sono utilizzati a livello globale nella medicina tradizionale e nella cosmesi. Lo scopo di questo studio era di studiare gli effetti inibitori di cedrol, β-cedrene e tujopsene sulle attività di otto principali enzimi del citocromo P-450 umano (CYP) utilizzando microsomi epatici umani per valutare potenziali interazioni farmacologiche β-cedrene, cedrol e tujopsene. , -cedrene e tujopsene sono risultati potenti inibitori competitivi della bupropione idrossilasi mediata dal CYP2B6 con valori della costante di inibizione (Ki) di 0,9, 1,6 e 0,8 μM, rispettivamente, paragonabili a quelli di un inibitore selettivo del CYP2B6, thioTEPA (K io, 2,9 μM). Cedrol ha anche inibito notevolmente l'idrossilazione del midazolam mediata dal CYP3A4 con un valore di Ki di 3,4 μM, mentre il -cedrene e il tujopsene hanno bloccato moderatamente il CYP3A4. Cedrol, β-cedrene e tujopsene a 100 μM hanno inibito in modo trascurabile le attività di CYP1A2, CYP2A6 e CYP2D6. Solo tujopsene è risultato essere un inibitore basato sul meccanismo di CYP2C8, CYP2C9 e CYP2C19. Cedrol e tujopsene hanno debolmente inibito le attività di CYP2C8, CYP2C9 e CYP2C19, ma non il β-cedrene. Questi risultati in vitro indicano che cedrol, β-cedrene e tujopsene devono essere esaminati per potenziali interazioni farmacocinetiche in vivo a causa della loro potente inibizione di CYP2B6 e CYP3A4.
Un analogo del coenzima q mirato ai mitocondri previene l'aumento di peso e migliora la disfunzione epatica nei topi ad alto contenuto di grassi.Abbiamo ipotizzato che il mitocondrio mirato antiossidante, il mitochinone (mitoQ), noto per le sue proprietà di disaccoppiamento mitocondriale, potrebbe prevenire lo sviluppo dell'obesità e mitigare la disfunzione epatica aumentando il dispendio energetico, invece di ridurre l'assunzione di energia Abbiamo somministrato mitoQ o veicolo (etanolo) a C57BL / incline all'obesità. 6 topi alimentati con diete ad alto contenuto di grassi (HF) o normali (NF). MitoQ (500 µM) o veicolo (etanolo) è stato aggiunto all'acqua da bere per 28 settimane. MitoQ ha ridotto significativamente la massa corporea totale e la massa grassa nell'HF topi alimentati con HF ma non ha avuto alcun effetto su questi parametri nei topi NF L'assunzione di cibo è stata ridotta da mitoQ nei topi alimentati con HF ma non nei topi alimentati con NF L'assunzione giornaliera media di acqua è stata ridotta da mitoQ sia nei topi NF- che HF- topi nutriti Espressione ipotalamica del neuropeptide Y, del peptide correlato all'agouti e del long forma del recettore della leptina sono stati ridotti nell'HF ma non nei topi NF. Il contenuto epatico totale di grassi e trigliceridi non differiva tra i topi trattati con mitoQ e quelli di controllo alimentati con HF. Tuttavia, mitoQ ha ridotto notevolmente gli idroperossidi lipidici epatici e ridotto l'alanina aminotransferasi circolante, un marker della funzionalità epatica. MitoQ non ha alterato il consumo di ossigeno dell'intero corpo o l'utilizzo dell'ossigeno mitocondriale nel fegato, il potenziale di membrana, la produzione di ATP o la produzione di specie reattive dell'ossigeno. In sintesi, mitoQ aggiunto all'acqua potabile ha mitigato lo sviluppo dell'obesità. Contrariamente alla nostra ipotesi, il meccanismo implicava una diminuzione dell'apporto energetico probabilmente mediata a livello ipotalamico. MitoQ ha anche migliorato la disfunzione epatica indotta da HF in virtù delle sue proprietà antiossidanti senza alterare il grasso epatico o la bioenergetica mitocondriale.
Confronto tra aceti tradizionali e commerciali in base al profilo dei metaboliti e all'attività antiossidante.I profili dei metaboliti di sette aceti commerciali e due aceti tradizionali sono stati eseguiti mediante gascromatografia spettrometria di massa a tempo di volo con analisi statistica multivariata. Durante la fermentazione alcolica, lievito, nuruk e koji sono stati utilizzati come zuccheri per i nutrienti e come substrati di fermentazione. Aceti commerciali e tradizionali sono stati significativamente separati nell'analisi dei componenti principali e nei minimi quadrati parziali ortogonali analisi discriminante. Sei zuccheri e alcoli di zucchero, tre acidi organici e altri due componenti sono stati selezionati come metaboliti diversi. Analisi del target mediante cromatografia liquida ultra-prestazioni spettrometria di massa a quadruplo tempo di volo e cromatografia liquida spettrometria di massa trap-spettrometria di massa sono stati utilizzati per rilevare diversi metaboliti aventi attività antiossidante, come la cianidina-3-xilosilrut inoside, cianidina-3-rutinoside e quercetina, che sono stati rilevati principalmente nell'aceto di lampone nero coreano rurale (RKB). Questi metaboliti hanno contribuito alla più alta attività antiossidante misurata in RKB tra i nove aceti. Questo studio ha rivelato che il profilo dei metaboliti basato sulla SM è stato utile per aiutare a comprendere le differenze di metaboliti tra aceti commerciali e tradizionali e per valutare l'associazione tra i composti attivi dell'aceto e l'attività antiossidante.
Saggio cromatografico liquido basato sulla microestrazione mediante adsorbente confezionato per il monitoraggio terapeutico di carbamazepina, lamotrigina, oxcarbazepina, fenobarbital, fenitoina e dei metaboliti attivi carbamazepina-10,11-epossido e libbazepina .In questo documento viene presentato per la prima volta un nuovo, sensibile e veloce test di rivelazione su cromatografia liquida-diodo-array ad alte prestazioni basato sulla microestrazione mediante sorbente impaccato (MEPS/HPLC-DAD), per quantificare simultaneamente carbamazepina (CBZ), lamotrigina (LTG), oxcarbazepina (OXC), fenobarbital (PB), fenitoina (PHT) e i metaboliti attivi carbamazepina-10,11-epossido (CBZ-E) e libbazepina (LIC) nel plasma umano. La separazione cromatografica degli analiti e del ketoprofene, utilizzato come standard interno (IS), è stata ottenuta in meno di 15 minuti su una colonna C18, a 35°C, utilizzando acetonitrile (6%) e una miscela (94%) di acqua-metanolo- trietilammina (73,2:26,5:0,3, v/v/v; pH 6,5) pompata a 1 ml/min. Gli analiti e I S sono stati rilevati a 215, 237 o 280 nm. Il metodo si è dimostrato selettivo, accurato [bias ±14,8% (o ±17,8% nel limite inferiore di quantificazione)], preciso [variazione del coefficiente ≤9,7% (o ≤17,7% nel limite inferiore di quantificazione)] e lineare ( r(2)≥0.9946) negli intervalli di concentrazione di 0,1-15μg/mL per CBZ; 0,1-20μg/mL per LTG; 0,1-5μg/mL per OXC e CBZ-E; 0,2-40μg/mL per PB; 0,3-30μg/mL per PHT; e 0,4-40 μg/mL per LIC. Il recupero assoluto dell'estrazione degli analiti variava dal 57,8 al 98,1% e la loro stabilità è stata dimostrata nelle condizioni studiate. Questo test MEPS/HPLC-DAD è stato applicato con successo a campioni di plasma reali di pazienti, rivelandosi uno strumento conveniente per il monitoraggio terapeutico di routine di CBZ, LTG, OXC, PB e/o PHT.
Efficacia diagnostica dei livelli di adenosina deaminasi nel liquido cerebrospinale in pazienti con meningite tubercolare: confronto con la PCR per Mycobacterium Tuberculosis.La diagnosi rapida della meningite tubercolare (TBM) è fondamentale per l'esito clinico. La chiave per la diagnosi risiede nell'analisi del liquido cerebrospinale (CSF) e nelle indagini radiologiche. Ci sono numerose lacune nella conferma della diagnosi di TBM da CSF. Lo scopo del presente studio era confrontare l'efficacia di I test del livello di adenosina deaminasi (ADA) nel liquido cerebrospinale e la reazione a catena della polimerasi (PCR) per Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) nella diagnosi di TBM. Cinquantaquattro pazienti adulti con sospetta TBM e 37 controlli sono stati inclusi nello studio e il liquor è stato analizzato per ADA e PCR per M. tuberculosis. I casi sono stati suddivisi in definito (5), altamente probabile (22), probabile (22) e possibile TBM (5) secondo criteri precedentemente convalidati. I primi due sono stati raggruppati come "most likel y" TBM (27) e le ultime due come TBM "non confermate" (27). L'ADA media della TBM "più probabile" era 29±24, quella della TBM "non confermata" era 21±15 e i controlli erano 4,8±2,2 U/L. I livelli di ADA erano correlati alle proteine del liquido cerebrospinale, alla conta linfocitaria assoluta e alla stadiazione della malattia. Utilizzando un livello di cut-off di >L10 U/L, CSF ADA aveva una sensibilità del 92,5% e una specificità del 97%. La PCR per M. tuberculosis è risultata positiva in 12 casi su 27 di TBM "più probabile", 5 su 27 casi di TBM "non confermati" e 3 su 37 controlli. La PCR per M. tuberculosis ha avuto una sensibilità del 44,5% e una specificità del 92% nei casi di TBM "più probabili". L'ADA è un test rapido, poco costoso e sensibile nella diagnosi della TBM. È più sensibile dello striscio e della coltura dell'AFB. La PCR è un altro test rapido nella diagnosi di TBM con una buona specificità, anche in quei pazienti già in presunto trattamento antitubercolare. Tuttavia, nonostante la sensibilità e la specificità di CSF ADA, dovrebbe essere corroborato dallo striscio AFB e dalla PCR CSF.
Uno studio su Internet sulle esperienze degli utenti del catinone sintetico 4-metiletcatinone (4-MEC).textUn catinone sintetico chiamato 4-metiletcatinone (4-MEC) è emerso online nel 2010 ed è stato commercializzato in modo informatico per sostituire il mefedrone. Lo studio mirava a presentare le esperienze degli utenti di 4-MEC riportate su Internet, con particolare attenzione ai profili degli utenti, all'approvvigionamento e alle caratteristiche del prodotto , vie di somministrazione, dosaggio, effetti positivi e indesiderati e confronti con mefedrone. Ventitre rapporti di viaggio individuali e anonimi del solo uso di 4-MEC e 112 schermate di forum di discussione utente 4-MEC generali, sono stati presi da un campione mirato di siti pubblici relativi alla droga. È stata condotta un'analisi testuale del contenuto sulle informazioni qualitative estratte e ha prodotto 41 categorie raccolte in cinque temi generali: "Tipo di utente 4-MEC"; "Sourcing, processo decisionale informato, caratteristiche del prodotto e garanzia di qualità"; "Ro modalità di somministrazione, misurazione del dosaggio e consumo di altri farmaci"; "Effetti e risultati del corso del tempo"; e "Confronti con mefedrone. " 4-MEC è venduto come perline bianche, frammenti cristallini o palline verdi. Le motivazioni degli utenti erano incentrate sulla curiosità, sui prezzi e sulla facilità di approvvigionamento web. Sono state descritte le vie di somministrazione orale, nasale, per iniezione, bulbo oculare e rettale. I test per la purezza, i "test allergici" e la misurazione del dosaggio erano comuni. Gli utenti hanno descritto effetti euforici ma di breve durata, con piccoli ritorni. La ricerca continua è vitale per informare la riduzione del danno.
La regolazione temporale e spaziale della biosintesi degli antociani fornisce diverse intensità di colore e pattern dei fiori nell'orchidea Cymbidium.Questo studio ha confermato i profili dei pigmenti in diversi gruppi di colori, isolati geni chiave della biosintesi degli antociani e ha stabilito una base per esaminare la regolazione del patterning del colore nei fiori dell'orchidea Cymbidium L'orchidea Cymbidium (Cymbidium hybrida) ha una gamma di colori dei fiori, spesso classificati in quattro gruppi di colori: rosa, bianco, giallo e verde. In questo studio sono state studiate le basi biochimiche e molecolari per i diversi tipi di colore e sono stati identificati e caratterizzati i geni coinvolti nella sintesi di flavonoidi/antocianine L'analisi dei pigmenti su cultivar selezionate ha confermato che la cianidina 3-O-rutinoside e la peonidina 3-O-rutinoside sono i principali antociani rilevati; i flavonoli quercetina e kaempferol rutinoside e robinoside erano presenti anche nel tessuto dei petali. Il β-carotene era il principale carotenoide i n le cultivar gialle, mentre le feofitine erano i maggiori pigmenti clorofilliani nelle cultivar verdi. I pigmenti antociani erano importanti in tutte e otto le cultivar perché gli antociani si accumulavano nel labello del fiore, anche se non negli altri petali/sepali. I geni che codificano per gli enzimi della via biosintetica dei flavonoidi calcone sintasi, flavonolo sintasi, flavonoide 3\' idrossilasi (F3\'H), diidroflavonolo 4-reduttasi (DFR) e antocianidina sintasi (ANS) sono stati isolati dal tessuto dei petali di una cultivar di Cymbidium. L'espressione di questi geni flavonoidi è stata monitorata durante lo sviluppo dei boccioli di fiori in ciascuna cultivar, confermando che DFR e ANS erano espressi solo nei tessuti in cui si accumulavano gli antociani. L'analisi filogenetica ha suggerito una sequenza del citocromo P450 come quella del Cymbidium F3\'H, coerente con l'accumulo di antociani e flavonoli di-idrossilati nel tessuto dei fiori. Una polichetide sintasi separata, identificata come bibenzil sintasi, è stata isolata dal tessuto dei petali ma non è stata associata all'accumulo di pigmento. Le nostre analisi mostrano che la diversità nel colore dei fiori dell'orchidea Cymbidium non deriva da diversi pigmenti individuali ma da sottili variazioni nella concentrazione e nel modello di accumulo di pigmenti.
Tè Labrador--la bevanda aromatica e spezia: una revisione dell'origine, della lavorazione e della sicurezza.Il tè Labrador è un nome per le foglie essiccate di Rhododendron groenlandicum, R. tomentosum o R. neoglandulosum (famiglia Ericaceae, in precedenza genere Ledum) nonché per la bevanda originaria del Nord America, che se ne ricava, le specie sopra indicate sono ricche dell'olio essenziale, che conferisce un aroma di conifera alla tisana. Il tè Labrador è una preziosa fonte di acido ascorbico, tonico, migliora la digestione e l'attività rilassante. Tuttavia, questa bevanda non deve essere bevuta più di una volta al giorno a causa della tossicità del ledol e della grayanotossina. La ricetta comune per fare il tè Labrador consiste nell'aggiungere un cucchiaino di foglie essiccate a una tazza di acqua bollente e in infusione per 5 min. Spesso viene addolcito o arricchito con altri aromi. Inoltre, le foglie essiccate del tè Labrador vengono utilizzate per aromatizzare carne, zuppe, salse, insalate, birra , dolci e altri piatti In agricoltura, è i le proprietà insetticide possono essere utili per controllare i parassiti.
PIXSIC, una sonda pixellata β⁺-sensibile per indagini radiofarmacologiche nel cervello di ratto: studi di legame con [¹⁸F]MPPF.Lo scopo di questo lavoro era quello di dimostrare il potenziale farmacocinetico di una sonda wireless pixelata β(+)-sensibile (PIXSIC). Il legame di 2\'-metossifenil-(N-2\'-piridinil)-p-[(18)F]fluoro- la benzamidoetilpiperazina ([(18)F]MPPF), un radiofarmaco per il recettore della serotonina 5-HT1A, è stata misurata in ratti anestetizzati e confrontata con i dati di microPET. Gli effetti di un'iniezione di antagonista 5-HT1A sul legame in vivo di [(18)F]MPPF sono stati monitorati da PIXSIC. PIXSIC ha permesso di differenziare la cinetica radioattiva in base alla posizione dei suoi pixel nell'ippocampo, nella corteccia, nel corpo calloso e nel cervelletto. Il dispositivo ha rilevato accuratamente i cambiamenti nel legame [(18)F]MPPF, dopo 5-HT1A blocco antagonista Le curve tempo-attività erano riproducibili e coerenti con la cinetica ottenuta simultaneamente con una telecamera microPET. Questi risultati dimostrano la capacità del dispositivo PIXSIC di registrare in modo affidabile il legame dei ligandi PET, con un'elevata risoluzione spazio-temporale nei roditori anestetizzati. Questi primi risultati in vivo sono una tappa fondamentale nel percorso verso la sua implementazione in animali svegli che si muovono liberamente.
Regolazione epigenetica dei microRNA che controllano l'espressione di CLDN14 come meccanismo per la gestione del calcio renale.Il rene ha un ruolo importante nell'omeostasi del calcio extracellulare. Legame genetico multiplo e studi di associazione hanno identificato tre geni a giunzione stretta del rene - claudina-14, -16 e -19 - come critici per le malattie da squilibrio del calcio Nonostante l'evidenza biologica convincente che le proteine claudina-14/16/19 formano un via paracellulare per il riassorbimento del calcio, gli approcci per regolare questa via di trasporto sono in gran parte non disponibili, ostacolando lo sviluppo di terapie per correggere le anomalie del trasporto del calcio. Qui, riportiamo che il trattamento con inibitori dell'istone deacetilasi (HDAC) sottoregola l'mRNA renale di CLDN14 e riduce drasticamente l'escrezione urinaria di calcio nei topi Inoltre, il trattamento dei topi con inibitori HDAC ha stimolato la trascrizione dei geni renali microRNA-9 (miR-9) e miR-374, che hanno dimostrato t o reprimere l'espressione di claudina-14, il regolatore negativo della via paracellulare. Con le tecniche di clearance renale e perfusione tubulo, abbiamo dimostrato che gli inibitori HDAC aumentano transitoriamente la conduttanza cationica paracellulare nell'arto ascendente spesso. L'ablazione genetica di claudina-14 o l'uso di un diuretico dell'ansa nei topi ha abrogato l'ipocalciuria indotta da inibitori dell'HDAC. Le mutazioni genetiche nel recettore sensibile al calcio da pazienti con ipocalcemia autosomica dominante (ADH) hanno represso la trascrizione dei geni miR-9 e miR-374 e il trattamento con un inibitore dell'HDAC ha salvato i fenotipi di modelli cellulari e animali di ADH. Inoltre, il trattamento sistemico dei topi con antagomiR contro questi miR ha alleviato il silenziamento del gene della claudina-14 e ha causato un fenotipo simile all'ADH. Insieme, i nostri risultati forniscono la prova del concetto per un nuovo principio terapeutico sulla base della regolazione epigenetica dei miR renali per il trattamento delle malattie ipercalciuriche.
Conformazione ad anello A di aconina e pseudaconina in CDCl3.Sulla base di un'interpretazione intensiva dei dati spettroscopici 1H NMR, la conformazione ad anello A di aconina (1) è stato ipotizzato come twist boat in CDCl3 e come chair o twist boat in acetone-d6 e piridina-d5 L'anello A della pseudaconina (2) adotta la conformazione a sedia in CDCl3, acetone-d6 e piridina-ds. Di conseguenza, dovrebbe essere rivista la conformazione a barchetta dell'anello A in questi due alcaloidi diterpenoidi in CDCl3 riportata in letteratura [1]. La differenza nei dati 13C NMR per lo stesso composto (1 o 2) in due diversi solventi (CDCl3, piridina- d5) può essere attribuito a effetti solventi.
Valutazione dei marcatori apoptotici nelle cellule HEI-OC1 trattate con gentamicina con e senza il mitochinone antiossidante mirato ai mitocondri.Il mitochinone (MitoQ) attenua l'aminoglicoside ( sovraregolazione indotta da AG) delle molecole proapoptotiche Bak e harakiri (Hrk) e diminuzione della percentuale di cellule apoptotiche House Ear Institute Organ of Corti 1 (HEI-OC1) Il meccanismo principale dell'ototossicità dell'AG è la formazione di specie reattive dell'ossigeno, che porta alla morte delle cellule ciliate attraverso percorsi apoptotici e non apoptotici. È stato dimostrato che gli antiossidanti proteggono dall'ototossicità da AG. Il mitochinone è un derivato mirato ai mitocondri dell'antiossidante ubichinone. Pertanto, MitoQ può essere più efficace nel prevenire l'ototossicità da AG rispetto agli antiossidanti non mirati. Ribonucleico acido da cellule HEI-OC1 non trattate e cellule esposte a gentamicina con e senza preincubazione con MitoQ, idebenone (IDB, un ubichinone non mirato) o decilTPP (controllo positivo ) sono stati utilizzati per valutare l'espressione genica di Bak e Hrk utilizzando la reazione a catena della polimerasi in tempo reale. L'espressione proteica di Bak e Hrk è stata determinata mediante Western blotting. Il dosaggio dell'annessina V mediante citometria a flusso è stato eseguito per valutare la percentuale di cellule HEI-OC1 apoptotiche trattate con gentamicina con e senza preincubazione con MitoQ, decilTPP o IDB. La preincubazione delle cellule HEI-OC1 con MitoQ ha ridotto significativamente la sovraregolazione indotta dalla gentamicina del gene Bak (p = 0,03) ma non la preincubazione con IDB (p = 0,87). I livelli di Harakiri erano molto bassi e non è stato possibile effettuare una quantificazione relativa. I livelli proteici di Bak e Hrk non erano diversi tra i trattamenti. Il test dell'annessina V ha mostrato che la gentamicina ha aumentato la percentuale di cellule apoptotiche (p < 0,05) rispetto al controllo. Tuttavia, le percentuali di cellule apoptotiche nelle cellule trattate con gentamicina e nelle cellule pretrattate con gli antiossidanti MitoQ o IDB non erano diverse. Il mitochinone ha attenuato la sovraregolazione indotta dalla gentamicina del gene Bak, ma non il suo prodotto, la molecola proapoptotica Bak, e MitoQ non ha ridotto significativamente l'apoptosi cellulare indotta dalla gentamicina in vitro. Sono necessari ulteriori studi in vivo per valutare il significato clinico di questi risultati.
Il mitochinone ripristina la produzione di piastrine nella trombocitopenia indotta da irradiazione.Le sindromi mielodisplastiche (MDS) sono caratterizzate da citopenia e displasia delle cellule ematopoietiche, spesso accompagnate da mitocondri disfunzione e aumento delle specie reattive dell'ossigeno (ROS) all'interno delle cellule colpite. Tuttavia, non è noto se l'aumento della produzione di ROS sia un istigatore o un sottoprodotto della malattia. La presente indagine mostra che i topi mancano del gene X-1 reattivo immediato (IEX-1) mostrano aumenti specifici del lignaggio nella produzione di ROS e citologia anormale dopo radiazioni nei tipi di cellule del sangue comunemente identificati nella sindrome mielodisplastica. Questi lignaggi cellulari affetti hanno principalmente il midollo osseo come sito primario di differenziazione e maturazione, mentre le cellule con differenziazione extramidollare e la maturazione come le cellule B e T rimangono inalterate. È probabile che l'aumento della produzione di ROS contribuisca in modo significativo alla trombocitopenia indotta da irradiazione in l'assenza di IEX-1 come dimostrato dall'efficace inversione del disturbo dopo il trattamento con mitochinone (MitoQ), un antiossidante specifico dei mitocondri. MitoQ ha ridotto la produzione intracellulare di ROS all'interno dei megacariociti e delle piastrine. Ha inoltre normalizzato il potenziale di membrana mitocondriale e la produzione di superossido nelle piastrine in topi irradiati con deficit di IEX-1. Gli effetti specifici del lignaggio dei ROS mitocondriali possono aiutarci a comprendere l'eziologia della trombocitopenia in associazione con la sindrome mielodisplastica in un sottogruppo di pazienti.
Identificazione di sballi legali - modelli alcaloidi dell'ergot in due prodotti di Argyreia nervosa.Oggi piante psicoattive commercializzate come "sballi legali" o " gli effetti a base di erbe" aumentano di popolarità. Un popolare "sballo legale" sono i semi dell'Hawaiian baby woodrose Argyreia nervosa (Sinonimo: Argyreia speciosa, Convolvolus speciosus). Al momento non esiste uno studio sui semi o sui prodotti di A. nervosa, che vengono utilizzati dai consumatori. La qualità dei semi o dei prodotti di A. nervosa disponibili in commercio è completamente sconosciuta. Nel presente studio, una raccolta di semi disponibile in commercio (cinque semi etichettati "flash of inspiration", FOI) è stata analizzata per gli alcaloidi dell'ergot insieme ad un prodotto di A. nervosa (due preparati in forma di capsule, "druids fantasy", DF). A tale scopo è stata impiegata la tecnica di cromatografia liquida ad alta risoluzione e spettrometria di massa tandem ad alta risoluzione (HPLC-HRMS/MS). Oltre alle principali ingredienti come l'ammide dell'acido lisergico (LSA) e ergometrina i ben noti composti di A. nervosa lisergol/elymoclavina/setoclavina, chanoclavina ei rispettivi stereoisomeri sono stati rilevati in DF, mentre solo LSA ed ergometrina sono stati trovati in FOI. Inoltre, nel DF è stato trovato acido lisergico, che non è stato ancora segnalato come ingrediente di A. nervosa. In entrambi i prodotti, DF e FOI, gli isomeri LSA/LSA erano dominanti con l'83-84%, seguiti dall'ergometrina/ergometrinina con il 10-17%. Pertanto, si potrebbe confermare che l'LSA, seguito da ergometrina/ergometrinina, sono i principali alcaloidi dell'ergot presenti nei semi/prodotti di A. nervosa mentre gli altri alcaloidi dell'ergot sembravano di minore importanza (meno del 6,1% in DF). Le quantità totali di alcaloidi dell'ergot variavano considerevolmente tra DF e FOI di un fattore di 8,6 e la concentrazione di LSA variava da 3 μg (quantità minima in un seme FOI) a circa 34 μg (quantità massima in una capsula DF). Tra i semi FOI, la concentrazione di LSA variava da circa 3-15 μg per seme. Pertanto, la qualità/potenza dei semi/preparati dipende dalla quantità di alcaloidi dell'ergot e l'intensità di un viaggio previsto è totalmente imprevedibile.
Claudine e rene.Le claudine sono proteine di membrana a giunzione stretta che funzionano sia come pori che come barriere nella via paracellulare nelle cellule epiteliali. rene, le claudine determinano la permeabilità e la selettività dei diversi segmenti del nefrone lungo il tubulo renale. Nel tubulo prossimale, le claudine hanno un ruolo nel riassorbimento di massa di sale e acqua. Nell'arto ascendente spesso, le claudine sono importanti per il riassorbimento di calcio e magnesio e sono strettamente regolati dal recettore sensibile al calcio. Nel nefrone distale, le claudine devono formare barriere cationiche e pori di cloruro per facilitare il riassorbimento elettrogeno di sodio e la secrezione di potassio e acido. Aldosterone e le proteine senza-lisina (WNK) probabilmente regolano le claudine per mettere a punto il trasporto distale del sale del nefrone Le mutazioni genetiche in claudina-16 e -19 causano ipercalciuria ipomagnesemica familiare con nefrocalcinosi, mentre i polimorfismi in claudina-14 sono asino ocio con rischio di calcoli renali. È probabile che i ruoli aggiuntivi delle claudine nella patogenesi di altri tipi di malattie renali debbano ancora essere scoperti.
Non parlare male? La coscienza e il dovere di informare, riferire o trasferire le cure.Questo documento sostiene che il tipo di dichiarazioni di coscienza fatte nell'ultimo decennio L'ondata di casi che coinvolgono farmacisti obiezioni al riempimento di prescrizioni anticoncezionali e casi come Ms. Means e Mercy Health Partners del Michigan, e persino l'Affordable Care Act e le Little Sisters of the Poor, per quanto diversi possano sembrare l'uno dall'altro, condividono un elemento comune che li lega insieme e li rende fondamentalmente diversi nel genere dalle tradizionali rivendicazioni di coscienza su cui è emerso un consenso pratico negli anni '80 e '90. Questa differenza di genere è profondamente significativa; tanto, sosteniamo , che li mette in primo luogo in contrasto con la base normativa per proteggere le rivendicazioni di coscienza negli ambienti sanitari degli Stati Uniti, rendendoli illegittimi. Infine, sosteniamo che, data l'illegittimità di queste rivendicazioni contemporanee di mento, i medici e gli altri operatori sanitari devono onorare i loro consolidati obblighi permanenti di fornire un consenso informato e inviare o trasferire le cure anche se il servizio richiesto o necessario è in contrasto con le proprie convinzioni morali fondamentali, un requisito che è in linea con il suddetto consenso pratico sulle affermazioni tradizionali della coscienza.
Un nuovo metodo CE enantioselettivo per la determinazione di oxcarbazepina e libbazepina dopo biotrasformazione fungina.Il presente lavoro descrive, per la prima volta, la separazione simultanea di oxcarbazepina (OXC) e il suo metabolita attivo 10-idrossi-10,11-diidrocarbamazepina (licarbazepina, Lic) mediante CE chirale. Il metodo sviluppato è stato impiegato per monitorare la biotrasformazione enantioselettiva di OXC nel suo metabolita attivo da parte dei funghi. Le separazioni elettroforetiche sono state eseguite utilizzando 10 mmol/L di una soluzione tampone Tris-fosfato (pH 2,5) contenente l'1% p/v di -CD fosfato sale sodico (P-β-CD) come elettrolita di corsa, -20 kV di tensione applicata e 15° temperatura capillare C. Il metodo era lineare nell'intervallo di concentrazione di 1000-30 000 ng/mL per OXC e 75-900 ng/mL per ciascun enantiomero Lic (r ≥ 0,9952). Precisione e accuratezza nell'arco della giornata valutate mediante RSD e relativa gli errori, rispettivamente, erano inferiori al 15% per tutti gli analiti metodo è stato utilizzato per valutare la biotrasformazione enantioselettiva di OXC, mediata da funghi, nel suo metabolita attivo Lic. Questo studio ha mostrato che i funghi Glomerella cingulata (VA1) e Beuveria bassiana erano in grado di metabolizzare enantioselettivamente l'OXC in Lic dopo 360 h di incubazione. La biotrasformazione da parte del fungo Beuveria bassiana ha mostrato un eccesso enantiomerico del 79% per (S)-(+)-Lic, mentre VA1 ha dato un eccesso enantiomerico del 100% per (S)-(+)-Lic. Questo studio apre una nuova via al farmaco (S)-(+)-licarbazepina.
L'endocannabinoide 2-AG controlla la differenziazione delle cellule muscolari scheletriche tramite l'inibizione dei canali Kv7 dipendente dal recettore CB1.Si sa poco del coinvolgimento degli endocannabinoidi e recettori dei cannabinoidi nel differenziamento delle cellule muscolari scheletriche Segnaliamo che, a causa di cambiamenti nell'espressione di geni coinvolti nel suo metabolismo, i livelli dell'endocannabinoide 2-arachidonoilglicerolo (2-AG) sono diminuiti sia durante la formazione di miotubi in vitro da mioblasti murini C2C12 e durante la crescita muscolare del topo in vivo. L'endocannabinoide, così come l'agonista CB1 arachidonoil-2-cloroetilamide, prevengono la formazione di miotubi in un modo antagonizzato dal knockdown CB1 e dagli antagonisti CB1, che, di per sé, stimolano invece la differenziazione. -AG inibisce anche la differenziazione delle cellule satellite umane primarie. I fasci muscolari degli embrioni knockout CB1 contengono più fibre muscolari e i topi postnatali mostrano fibre muscolari di un diametro maggiore re lativa di cucciolate di tipo selvatico. L'inibizione dell'attività del canale Kv7.4, che svolge un ruolo permissivo nella miogenesi e dipende dal fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2), è alla base degli effetti del 2-AG. Troviamo che la stimolazione CB1 riduce i livelli di PIP2 sia totali che legati a Kv7.4 nelle cellule C2C12 e inibisce le correnti Kv7.4 nelle cellule CHO trasfettate. Suggeriamo che 2-AG sia un repressore endogeno della differenziazione dei mioblasti tramite l'inibizione mediata da CB1 dei canali Kv7.4.
Commutazione della serotonina cerebrale con l'ossitocina.La serotonina (5-HT) e l'ossitocina (OXT) sono due neuromodulatori coinvolti nell'affetto e nella socialità umana e nei disturbi come la depressione e l'autismo Abbiamo chiesto se questi messaggeri chimici interagiscono nella regolazione del comportamento basato sulle emozioni somministrando OXT o placebo a 24 soggetti sani e mappando il sistema cerebrale 5-HT utilizzando 2\'-metossifenil-(N-2\' -piridinil)-p-[(18)F]fluoro-benzamidoetilpiperazina ([(18)F]MPPF), un antagonista dei recettori 5-HT1A. OXT ha aumentato il potenziale di legame non spostabile del [(18)F]MPPF (BPND) nel nucleo del rafe dorsale (DRN), l'area centrale della sintesi di 5-HT, e nel complesso amigdala/ippocampo, insula e corteccia orbitofrontale È importante sottolineare che l'amigdala appare centrale nella regolazione della 5-HT da parte di OXT: [(18) F]MPPF I cambiamenti BPND nel DRN erano correlati con i cambiamenti nell'amigdala destra, che erano a loro volta correlati con i cambiamenti nell'ippocampo, nell'insula, nel subgenuale e corteccia orbitofrontale, un circuito implicato nel controllo dello stress, dell'umore e dei comportamenti sociali. È noto che la somministrazione di OXT inibisce l'attività dell'amigdala e determina una diminuzione dell'ansia, mentre un'elevata attività dell'amigdala e la disregolazione della 5-HT sono state associate a un aumento dell'ansia. Il presente studio rivela una forma di interazione precedentemente non identificata tra questi due sistemi nel cervello umano, ovvero il ruolo di OXT nella regolazione inibitoria della segnalazione 5-HT, che potrebbe portare a nuove strategie terapeutiche per i disturbi mentali.
Nuovi aspetti funzionali del recettore sensibile al calcio extracellulare.Le variazioni del livello di calcio extracellulare hanno un grande impatto sulla funzione renale. La maggior parte degli effetti osservati sono attribuiti al recettore sensibile al calcio (CaSR), una proteina di superficie cellulare accoppiata alla proteina G ampiamente espressa con un'importante funzione nell'omeostasi minerale ossea. Lo scopo di questa recensione è ricapitolare i nuovi aspetti funzionali del CaSR. modelli dimostrano importanti funzioni per CaSR in vari tessuti Nel rene, il ruolo principale di CaSR è la regolazione del riassorbimento del calcio nell'arto ascendente spesso, indipendentemente dal suo ruolo sulla secrezione dell'ormone paratiroideo Il CaSR modula la claudina 14, il gatekeeper dello ione paracellulare trasporto nell'arto ascendente spesso che è associato all'escrezione urinaria di calcio. Una via di segnalazione intracellulare attraverso la quale il CaSR altera la permeabilità della giunzione stretta è la calcineurina-NFAT1c-microRNA-cla asse udin14. La funzione principale del CaSR nel rene è la regolazione dell'escrezione di calcio nell'arto ascendente spesso, indipendentemente dall'ormone paratiroideo. CaSR modula il trasporto di cationi paracellulari alterando l'espressione della proteina di giunzione stretta claudina 14. È necessario ancora più lavoro per comprendere appieno tutte le funzioni di CaSR nel rene. Devono essere studiati percorsi alternativi di \'sensing\' del calcio nel rene.
Nuova produzione di aspinolide da parte di Trichoderma arundinaceum con un potenziale ruolo nell'attività antagonista di Botrytis cinerea e nell'innesco di difesa delle piante.Harzianum A (HA), un tricotecene prodotto da Trichoderma arundinaceum, è stato recentemente descritto per avere attività antagonista contro i patogeni fungini delle piante e per indurre geni di difesa delle piante. Nel presente lavoro, abbiamo dimostrato che un mutante alterato dal gene tri5 che manca di produzione di HA sovraproduce due polichetidi, aspinolidi B e C , che non sono stati rilevati nel ceppo selvatico. Inoltre, sono stati caratterizzati quattro nuovi aspinolidi (DG). Questi composti confermano che esiste un cross-pathway terpene-polichetide in T. arundinaceum e possono essere responsabili dell'attività antimicotica e l'effetto di sensibilizzazione delle piante osservato con il mutante tri5-disrupted Inoltre, i cambiamenti molecolari che coinvolgono i fattori di virulenza nel fungo fitopatogeno Botrytis cinerea 98 (Bc98) durante l'interazione con T. arundinaceum sono stati studiati. L'espressione di geni coinvolti nella produzione di botrydial da parte di Bc98 è stata relativamente repressa da HA, mentre altri geni di virulenza di questo patogeno sono stati indotti dalla presenza di T. arundinaceum, ad esempio atrB e pg1 che codificano rispettivamente per un trasportatore ABC e per l'endopoligalacturonasi 1. Inoltre, l'interazione con Bc98 ha significativamente represso la produzione di HA da parte di T. arundinaceum, indicando che tra questi due funghi antagonisti si stabilisce una regolazione trascrizionale bidirezionale.
Meccanismo d'azione ed epitopi dell'anticorpo neutralizzante la tossina B di Clostridium difficile, bezlotoxumab, rivelato dalla cristallografia a raggi X.I sintomi delle infezioni da Clostridium difficile sono causati da due esotossine, TcdA e TcdB, che colpiscono i colonociti dell'ospite legandosi a recettori sconosciuti sulla superficie cellulare, almeno in parte attraverso i loro domini combinati di oligopeptidi ripetitivi (CROP). Una combinazione dell'anticorpo anti-TcdA actoxumab e dell'anticorpo anti-TcdB bezlotoxumab è attualmente in fase di sviluppo per la prevenzione delle infezioni ricorrenti da C. difficile. Dimostriamo qui attraverso vari approcci biofisici che bezlotoxumab si lega a regioni specifiche all'interno della metà N-terminale del dominio CROP TcdB. Sulla base di queste informazioni, abbiamo risolto la radiografia struttura della metà N-terminale del dominio TcdB CROP legata ai frammenti Fab di bezlotoxumab La struttura rivela che il dominio TcdB CROP adotta una piega β-solenoide costituita da una lunga e una corta si ripete e che bezlotoxumab si lega a due siti omologhi all'interno del dominio CROP, occludendo parzialmente due delle quattro tasche presunte di legame dei carboidrati situate in TcdB. Mostriamo anche che bezlotoxumab neutralizza TcdB bloccando il legame di TcdB alle cellule di mammifero. Nel complesso, i nostri dati sono coerenti con un modello in cui una singola molecola di bezlotoxumab neutralizza TcdB legandosi tramite le sue due regioni Fab a due epitopi all'interno della metà N-terminale del dominio TcdB CROP, bloccando parzialmente le tasche di legame dei carboidrati della tossina e prevenendo le tossine si legano alle cellule ospiti.
Il legame del recettore 5-HT1A dell'ippocampo è correlato alla memoria della posizione dell'oggetto nell'uomo.Studi sugli animali suggeriscono che la serotonina, mediata dal recettore 5-HT1A , svolge un ruolo chiave nell'apprendimento spaziale e nella memoria. Il ruolo della serotonina nella memoria spaziale negli esseri umani, tuttavia, è stato studiato meno bene. Questo studio ha esaminato la relazione tra la densità del recettore della serotonina nel cervello umano e l'apprendimento spaziale e la memoria utilizzando il 5 Ligando del recettore -HT1A (18)F-4-(2\'-metossifenil)-1-[2\'-(N-2-piridinil)-p-fluorobenzamido]-etil-piperazina ([(18)F] MPPF ) e tomografia a emissione di positroni (PET). Dieci individui neurologicamente sani sono stati sottoposti a due scansioni PET [(18)F] MPPF, una durante l'esecuzione di un compito che prevede l'elaborazione di informazioni spaziali di alto livello (\'house scan\') e una mentre eseguire un'attività che prevede l'elaborazione di informazioni spaziali di basso livello (\'tunnel scan\') Navigazione, richiamo di associazioni arbitrarie tra n oggetti e la loro posizione spaziale e la capacità di disegnare un piano dell'ambiente sono stati testati dopo la scansione della casa. Il legame del recettore 5-HT1A non differiva in modo significativo tra l'elaborazione di livelli alti e bassi di informazioni spaziali. L'asimmetria dell'ippocampo nel legame MPPF [(18)F], tuttavia, era associata alla memoria per le associazioni oggetto-locazione; il potenziale di legame dell'ippocampo inferiore destro rispetto a quello sinistro (BPND) era correlato a migliori prestazioni della memoria. Concludiamo che la funzione serotoninergica dell'ippocampo gioca un ruolo in una componente fondamentale della memoria spaziale umana, la capacità di ricordare la posizione degli oggetti incontrati.
L'alfa-idrossiglicinamide agente del virus dell'immunodeficienza umana di tipo 1 entra nelle cellule bersaglio tramite un meccanismo di diffusione passiva.Alfa-idrossiglicinamide (αHGA ) è il metabolita antivirale attivo del tri-peptide glicil-prolil-glicina-ammide (GPG-NH2). L'αHGA inibisce la replicazione dell'HIV-1 in vitro interferendo con la formazione del capside. Ha anche un effetto sulla proteina dell'involucro virale gp160 Poiché il trasporto del farmaco è un aspetto importante della funzione del farmaco, abbiamo studiato il meccanismo di assorbimento di [(14) C] αHGA da parte di una linea di cellule T umane. Le cellule H9 sono state incubate con quantità definite di αHGA radiomarcato per periodi di tempo definiti. cellule e la rimozione del materiale radiomarcato, è stata analizzata la radioattività associata alle cellule. Sono stati inoltre progettati esperimenti per affrontare l'effetto di inibitori metabolici, temperatura e composti extra non etichettati come potenziale concorrente sull'assorbimento cellulare di αHGA. Le cellule H9 erano dipendenti dal tempo e dalla dose. Le proprietà di assorbimento hanno mostrato una dipendenza dalla bassa temperatura (Q10 < 2). Inoltre l'assorbimento non è stato inibito dall'aumento delle concentrazioni di concorrenti del freddo. Non vi è stato alcun effetto sull'assorbimento cellulare di αHGA da parte di noti inibitori metabolici, NaN3 e NaF. L'analisi cinetica dell'assorbimento del composto, gli studi di inibizione metabolica, gli studi di saturazione e il valore Q10 dell'assorbimento di αHGA indicano che il composto entra nelle cellule H9 tramite un meccanismo di diffusione passiva.
Mitocondri mirati per la cardioprotezione: esame dei benefici per i pazienti.I mitocondri sono fondamentali per sostenere la vita, non solo come centrali elettriche essenziali delle cellule, ma anche come critici mediatori della sopravvivenza e della morte cellulare. La disfunzione mitocondriale è stata identificata come una perturbazione chiave alla base di numerose patologie tra cui il danno da ischemia-riperfusione miocardica e il successivo sviluppo di compromissione della funzione sistolica ventricolare sinistra e ipertrofia cardiaca compensatoria. Questo articolo delinea il ruolo della disfunzione mitocondriale in questi importanti patologie cardiache e mette in evidenza le attuali strategie cardioprotettive e la loro efficacia clinica nei pazienti con infarto miocardico acuto e insufficienza cardiaca. Infine, esploriamo nuovi bersagli mitocondriali e valutiamo la loro potenziale traduzione futura per la cardioprotezione clinica.
Analisi genetica dei geni correlati alla funzione delle giunzioni strette nella popolazione coreana con ipoacusia non sindromica.Le giunzioni strette (TJ) sono componenti essenziali di cellule eucariotiche e fungono da barriere paracellulari e cerniere tra i tessuti adiacenti. Le TJ sono fondamentali per il normale funzionamento dell'organo del Corti, una parte dell'orecchio interno che provoca la perdita dell'udito neurosensoriale quando danneggiato. Per indagare sulla relazione tra i geni coinvolti nella TJ funzione e la perdita ereditaria dell'udito neurosensoriale nella popolazione coreana, abbiamo selezionato i geni TJP2 e CLDN14 come candidati per lo screening genetico di individui coreani 135. Il gene TJP2, la cui mutazione causa la perdita dell'udito non sindromica autosomica dominante (ADNSHL), si trova a il locus DFNA51 sul cromosoma 9. Il gene CLDN14, la cui mutazione causa la perdita dell'udito non sindromica autosomica recessiva (ARNSHL), si trova nel locus DFNB29 sul cromosoma 21. Nel presente studio, abbiamo condotto geneti c analisi dei geni TJP2 e CLDN14 in 87 pazienti non imparentati con ADNSHL e 48 pazienti non imparentati con ARNSHL o ipoacusia potenzialmente sporadica. Abbiamo identificato due variazioni patogene, c.334G>A (p. A112T) e c.3562A>G (p. T1188A), e dieci polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) nel gene TJP2. Abbiamo trovato otto variazioni non patogene nel gene CLDN14. Questi risultati indicano che, mentre la mutazione del gene TJP2 potrebbe causare ADNSHL, CLDN14 non è un gene causale principale per ARNSHL nella popolazione coreana studiata. I nostri risultati potrebbero migliorare la comprensione della causa genetica dell'ipoacusia non sindromica nella popolazione coreana.
L'autofagia dipendente da Atg7 e Keap1 protegge le linee cellulari del cancro al seno dallo stress ossidativo indotto dal mitochinone.L'interazione tra stress ossidativo e autofagia è fondamentale per determinare il destino delle cellule tumorali esposte ad agenti chemioterapici redox-attivi e citotossici. Il mitochinone (MitoQ), un coniugato di ubichinone redox-attivo mirato ai mitocondri, uccide selettivamente le cellule del cancro al seno rispetto alle cellule epiteliali mammarie sane. Abbiamo riportato in precedenza che MitoQ, sebbene un derivato dell'antiossidante ubichinone, può generare un eccesso di ROS e innescare la risposta antiossidante Keap1-Nrf2 nella linea cellulare MDA-MB-231. Dopo il trattamento con MitoQ, un numero maggiore di cellule ha subito l'autofagia rispetto all'apoptosi. Tuttavia, la relazione tra MitoQ-indotta lo stress ossidativo e l'autofagia come risposta cellulare primaria non erano chiari. In questo rapporto, dimostriamo che MitoQ induce il gene correlato all'autofagia 7 (Atg7)-dipendente, ma indipendente da Beclin-1 dent, autofagia caratterizzata da un aumento di LC3-II. Sia le cellule MDA-MB-231 umane con deficit di ATG7 che i fibroblasti embrionali di topo knockout Atg7 hanno mostrato livelli inferiori di autofagia dopo il trattamento con MitoQ rispetto alle rispettive controparti wild-type. L'aumento dell'apoptosi è stato confermato in queste coppie di linee cellulari isogeniche carenti di autofagia, indicando che l'autofagia è stata tentata per la sopravvivenza in linee cellulari di tipo selvaggio. Inoltre, abbiamo osservato livelli più elevati di ROS nelle cellule carenti di Atg7, come misurato dall'ossidazione dell'idroetidina. Nelle cellule carenti di Atg7, la degradazione di Keap1 sensibile al redox è diminuita, suggerendo una degradazione di Keap1 dipendente dall'autofagia e da Atg7. Al contrario, la downregulation di Keap1 ha diminuito i livelli di autofagia, aumentato l'attivazione di Nrf2, sovraregolata l'espressione del gene antiossidante citoprotettivo e causato l'accumulo di p62, suggerendo un ciclo di feedback tra Keap1-Nrf2 regolato da ROS e autofagia regolata da Atg7. I nostri dati indicano che un eccesso di ROS provoca l'aumento dell'autofagia e l'autofagia agisce come una risposta di feedback antiossidante innescata dai livelli citotossici di MitoQ.
Composizione dell'olio essenziale di Rhododendron tomentosum Harmaja dall'Estonia.I germogli selvatici di Rhododendron tomentosum Harmaja sono stati raccolti da quattro località dell'Estonia. Oli essenziali, isolati da campioni essiccati mediante simultanea distillazione ed estrazione, sono stati analizzati mediante metodi GC-FID e Gascromatografia-Spettrometria di massa. Le rese degli oli sono state comprese nell'intervallo 0,14-0,87%. Un totale di 72 costituenti, pari a oltre il 95% del resa totale in olio, sono stati identificati I componenti principali in tutti e quattro gli oli studiati erano palustrolo (15,9-53,5%), ledol (11,8-18,3%), γ-terpineolo (0-31,2%), p-cimene (0,1-13,9 %), lepalone (0,7-6,5%), lepalolo (1,0-6,5%) e ciclocolorenone (1,0-6,4%). In Estonia sono stati trovati due diversi chemiotipi di R. tomentosum e uno di essi era ricco di palustrolo (41,0-53,5 %) e ledol (14,6-18,3%). Il secondo chemiotipo, per la prima volta, era ricco di γ-terpineolo (24,7-31,2%) e conteneva meno palustlo (15,9-1 6,7%) e ledol (11,8-12,8%), ma più p-cimene (12,5-13,9%). Inoltre, il γ-terpineolo è stato identificato per la prima volta negli oli di R. tomentosum.
Screening contatto occupazionale allergia al bisfenolo F resina epossidica.", resine epossidiche basate su diglicidil etere di bisfenolo F (DGEBF) sono ampiamente utilizzati come tali in applicazioni richiedono resistenza chimica, e anche insieme con diglicidiletere di bisfenolo a resina (DGEBA-R). le reazioni patch test concomitanti per DGEBA-R e resina DGEBF (DGEBF-R) sono comuni. studi precedenti hanno dato risultati contrastanti sulla frequenza di indipendente DGEBF-R allergie da contatto. Per segnalare i risultati di oltre 11 anni di screening con DGEBF-R. Una sostanza di prova interno di DGEBF-R (Epikote 862) è stata testata in serie per patch test basale, prima al 1% e successivamente al 0,25%. i file di test sono stati sottoposti a screening per reazioni allergiche a DGEBF-R e DGEBA-R, e le cartelle cliniche dei pazienti che reagiscono positivamente sono stati analizzati per l'occupazione e l'esposizione. Tra 1972 pazienti, 66 (3,3%) hanno reagito al DGEBF-R e 96 (4,9%) per DGEBA-R. indipendenti allergie DGEBF-R sono stati osservati in 5 pazienti s soltanto, e indipendenti allergie DGEBA-R a 35. specifica esposizione al DGEBF-R è stato trovato in 26 pazienti. I principali campi di lavoro sono stati l'industria aeronautica, l'industria apparecchiature elettriche e lo sport, la costruzione della barca, rivestimento pittura / piano, impostazione di piastrelle, e tubo ribasatura. allergie da contatto indipendenti a DGEBF-R erano rari, e lo screening con esso non è stato trovato per essere utile.
Biogenesi mitocondriale indotta da perossinitrito in seguito al knockdown di MnSOD in normali cellule renali di ratto (NRK).Il superossido è ampiamente considerato come la specie reattiva primaria dell'ossigeno (ROS) che avvia lo stress ossidativo a valle. L'aumento dello stress ossidativo contribuisce, in parte, a molte condizioni patologiche come cancro, aterosclerosi, ischemia/riperfusione, diabete, invecchiamento e neurodegenerazione. La superossido dismutasi di manganese (MnSOD) catalizza la dismutazione del superossido in perossido di idrogeno che può quindi essere ulteriormente disintossicato da altri enzimi antiossidanti. MnSOD è fondamentale per mantenere la normale funzione dei mitocondri, quindi si pensa che la sua inattivazione porti a mitocondri compromessi. In precedenza, il nostro laboratorio ha osservato un aumento della biogenesi mitocondriale in un nuovo topo knockout MnSOD specifico per il rene. L'attuale studio ha utilizzato il knockdown transitorio di MnSOD mediato da siRNA di cellule normali di rene di ratto (NRK) come modello in vitro e ha confermato d biogenesi mitocondriale funzionale evidenziata da un aumento dell'espressione di PGC1α, numero di copie e integrità del DNA mitocondriale, proteina della catena di trasporto degli elettroni CORE II, massa mitocondriale, tasso di consumo di ossigeno e produzione complessiva di ATP. Ulteriori studi meccanicistici utilizzando il mitochinone (MitoQ), un antiossidante mirato ai mitocondri e L-NAME, un inibitore dell'ossido nitrico sintasi (NOS) hanno dimostrato che il perossinitrito (a bassi livelli micromolari) induce la biogenesi mitocondriale. Questi risultati forniscono la prima prova che bassi livelli di perossinitrito possono avviare una cascata di segnalazione protettiva che coinvolge la biogenesi mitocondriale che può aiutare a ripristinare la funzione mitocondriale dopo l'inattivazione transitoria di MnSOD.
Degradazione della cianidina-3-rutinoside e formazione di estere metilico dell'acido protocatechuico in soluzione di metanolo mediante irradiazione gamma.Le antocianine sono composti fenolici presenti in natura con ampie attività biologiche tra cui antimutagenesi e anticancerogenesi Abbiamo studiato gli effetti e i meccanismi di degradazione del tipo più comune di antociani, la cianidina-3-rutinoside (cya-3-rut), utilizzando raggi gamma. in metanolo (1mg/ml) è stato esposto a raggi gamma da 1 a 10kGy Abbiamo scoperto che il colore rossastro di cya-3-rut nel metanolo è scomparso gradualmente in modo dose-dipendente ed è effettivamente scomparso (>97%) a 10kGy di raggi gamma. Contemporaneamente, un nuovo composto fenolico è stato generato e identificato come estere metilico dell'acido protocatecuico mediante cromatografia liquida, (1) H e (13) C NMR. La formazione di estere metilico dell'acido protocatecuico è aumentata con l'aumentare dell'irradiazione e della quantità di estere metilico dell'acido protocatechuico formato dalla decomposizione di cya-3-rut (20μg) a 10kGy di raggi gamma era 1,95μg. Inoltre, le attività di eliminazione dei radicali non sono state influenzate dall'irradiazione gamma.
La timidina fosforilasi influenza l'assorbimento della [(18)F]fluorotimidina nelle cellule tumorali e nei pazienti con carcinoma polmonare non a piccole cellule.Timidina fosforilasi (TP) , un enzima chiave nella via di salvataggio dei nucleosidi pirimidinici, catalizza la fosforilazione reversibile della timidina, generando così timina e 2-desossi-D-ribosio-1-fosfato. Regolando i livelli di timidina endogena, la TP può influenzare [(18)F Captazione di ]fluorotimidina ([(18)F]FLT). Abbiamo studiato l'effetto dell'attività di TP sulla captazione di [(18)F]FLT da parte dei tumori. Captazione di [(3)H]FLT e [(3)H]timidina ( [(3)H]Thd) e le attività di TP, timidina chinasi 1 (TK1) e trasportatore nucleosidico equilibrativo 1 (ENT1) sono state determinate in cellule A431, A549, HT29, HOP92, ACHN e SKOV3 a crescita esponenziale in presenza o assenza di tipiracil cloridrato, un inibitore della TP Ottantacinque tessuti di carcinoma polmonare non a piccole cellule da una coorte di pazienti che è stata precedentemente studiata con [(18)F]FLT emissi di positroni su tomografia (PET) sono stati recuperati e sottoposti ad analisi immunoistochimica dell'espressione di TP. I fattori che hanno influenzato il valore massimo di assorbimento standardizzato (SUVmax) di [(18)F]FLT-PET sono stati identificati mediante analisi di regressione lineare multipla. Le cellule A431 avevano la più alta attività TP; Le cellule A549 e HT29 avevano una moderata attività TP; e le cellule ACHN, SKOV3 e HOP92 avevano poca attività TP rilevabile. Le linee cellulari con elevata attività TP hanno occupato più [(3)H]FLT rispetto a [(3)H]Thd, mentre le cellule con poca attività TP hanno assunto più [(3)H]Thd rispetto a [(3)H]FLT. Nelle cellule con elevata attività di TP, l'inibizione di TP ha diminuito l'assorbimento di [(3)H]FLT e aumentato l'assorbimento di [(3)H]Thd. Tuttavia, l'inibizione di TP non ha avuto effetto sulle cellule ACHN, SKOV3 e HOP92. L'inibizione di TP non ha modificato l'attività di TK1 o ENT1, ma ha aumentato il livello intracellulare di timidina. Il SUVmax di [(18)F]FLT è stato influenzato da tre fattori indipendenti: espressione Ki-67 (P < 0.001), punteggio TP immunoistochimico (P < 0.001) e dimensione del tumore (P = 0.015). L'attività di TP influenza l'assorbimento di [(18)F]FLT e può spiegare l'assorbimento preferenziale di [(18)F]FLT rispetto a [(3)H]Thd. Questi risultati forniscono importanti informazioni sulla biologia di [(18)F]FLT come marker di proliferazione.
L'antiossidante mirato ai mitocondri MitoQ riduce l'ototossicità indotta da gentamicina.L'integrazione orale con mitochinone (MitoQ) previene l'ototossicità indotta da gentamicina nelle cavie. Gli antiossidanti hanno dimostrato di proteggere contro l'ototossicità indotta da aminoglicosidi (AG). MitoQ, un derivato mirato ai mitocondri dell'antiossidante ubichinone, è attaccato a un catione lipofilo trifenilfosfonio (TPP), che consente il suo accumulo all'interno dei mitocondri diverse centinaia di volte rispetto al catione non mirato antiossidante. MitoQ ha migliorato la biodisponibilità e può raggiungere la maggior parte dei tessuti ed è stato utilizzato negli studi umani sul morbo di Parkinson e sull'epatite C, che hanno dimostrato che MitoQ può essere utilizzato in sicurezza negli esseri umani. Pertanto, MitoQ è un nuovo approccio terapeutico promettente per la protezione contro l'AG -ototossicità indotta Alle cavie trattate con gentamicina è stata fornita solo acqua (controllo), decil-TPP (controllo positivo) o acqua da bere integrata con MitoQ. la funzione itoria è stata valutata dalla risposta uditiva del tronco encefalico. Il danno cocleare è stato valutato mediante microscopia elettronica a scansione. Il western blotting è stato eseguito per valutare i cambiamenti nelle proteine correlate all'apoptosi e al danno ossidativo nella coclea. Gli spostamenti della soglia a 4 e 8 kHz a 4 e 7 settimane dopo il trattamento con gentamicina erano inferiori negli animali trattati con MitoQ rispetto a quelli negli animali trattati con controllo e decil-TPP (p < 0,05). I carbonili proteici e i livelli della proteina proapoptotica Bak erano più bassi (p < 0,05 e p = 0,008, rispettivamente), mentre il livello dell'enzima antiossidante manganese superossido dismutasi era più alto (p = 0,01) nella coclea di MitoQ trattata animali. L'espressione di 3-nitrotirosina e Hrk non era diversa tra i gruppi (p > 0,05). L'integrazione orale con MitoQ ha attenuato il danno cocleare indotto dalla gentamicina e la perdita dell'udito nelle cavie. MitoQ è promettente come mezzo per la protezione contro l'ototossicità da AG.
Diramazione dal catione bisabolil. Vie meccaniche unificanti per barbatene, bazzanene, camigrene, chamipinene, cumacrene, cuprenene, dunniene, isobazzanene, iso-γ-bisabolene, isochamigrene, laurene , microbiotene, sesquithujene, sesquisabinene, tujopsene, tricodiene e widdradiene sesquiterpeni.Calcoli chimici quantistici sulla trasformazione del catione bisabolil in una serie di sesquiterpeni (iso-γ-bisabolene, tricodiene, cuprenene, laurene, sono descritti isochamigrene, camigrene, chamipinene, sesquithujene, sesquisabinene, microbiotene, dunniene, cumacrene, isobazzanene, bazzanene, barbatene, widdradiene e tujopsene). architetture molecolari presenti in un gran numero di sesquiterpenoidi della natura. I risultati dei calcoli della chimica quantistica sulla moltitudine di riarrangiamenti qui descritti forniscono risposte ragionevoli a diverse domande meccanicistiche persistenti nel mondo della biosintesi dei terpeni e forniscono anche esempi di principi generali di reattività per i riarrangiamenti dei carbocationi che formano i terpeni (e altri).
Sintesi dell'acido 1-O-metilclorogenico: riassegnazione della struttura per MCGA3 isolato da foglie di bambù (Phyllostachys edulis).La prima sintesi di 1- Viene descritto l'acido O-metilclorogenico. La sintesi breve ed efficiente di questo composto fornisce quantità su scala di laboratorio del materiale per studiarne le proprietà biologiche. La sintesi comporta l'alchilazione C-1 del noto lattone dell'acido (-)-4,5-cicloesildenequinico seguita dall'apertura del metossido all'estere idrossile. L'acilazione del gruppo idrossile C-5 seguita dalla rimozione sequenziale dei gruppi protettivi ha fornito l'acido 1-O-metilclorogenico. Le caratteristiche spettroscopiche NMR di questo composto non coincidono con quelle riportate per l'isolamento originale da foglie di bambù (Phyllostachys edulis) del composto denominato MCGA3 Confronto dei dati spettroscopici pubblicati riportati per MCGA3, sia con i valori di letteratura riportati sia con i dati spettroscopici ottenuti da un campione, porta alla conclusione che il composto isolato dalle foglie di bambù (Phyllostachys edulis) è invece metil clorogenato.
Claudina-14 è alla base del metabolismo del Ca⁺⁺ mediato dal recettore sensibile al Ca⁺⁺ tramite meccanismi basati su NFAT-microRNA.Disregolazione patologica del calcio extracellulare Il metabolismo è difficile da correggere. Il recettore extracellulare Ca(++)-sensing (CaSR), un recettore accoppiato a proteine G che regola la gestione renale del Ca(++) attraverso cambiamenti nella permeabilità del canale paracellulare nell'arto ascendente spesso, è emerso come un candidato farmacologico efficace per la gestione del metabolismo del calcio. Tuttavia, la manipolazione del CaSR a livello sistemico provoca effetti promiscui nelle ghiandole paratiroidi, nei reni e in altri tessuti, e i meccanismi con cui il CaSR regola il trasporto paracellulare nel rene rimangono sconosciuti. Qui, noi descrivere una via di segnalazione CaSR-NFATc1-microRNA-claudin-14 nel rene che è alla base del riassorbimento paracellulare di Ca(++) attraverso la giunzione stretta. Con reagenti farmacologici specifici per CaSR, mostriamo che l'espressione genica in vivo di claud in-14 è regolato attraverso un meccanismo trascrizionale mediato da NFATc1-microRNA e dal rimodellamento della cromatina associato. Gli approcci transgenici knockout e sovraespressione hanno mostrato che la claudina-14 è necessaria per il metabolismo renale Ca(++) regolato da CaSR. Insieme, i nostri risultati definiscono un'importante cascata di segnali che, se disregolata, può mediare lo squilibrio di Ca(++) attraverso cambiamenti nella permeabilità della giunzione stretta.
Effetti antivirali del succo di gelso (Morus alba) e delle sue frazioni sui surrogati virali di origine alimentare.L'infezione da Norovirus è una delle principali cause di epidemie di origine alimentare non batterica in tutto il mondo, ma non sono ancora disponibili trattamenti specifici. In questo studio, abbiamo studiato l'attività antivirale del succo di gelso (Morus alba, Ma) e delle sue frazioni su norovirus-1 murino (MNV-1) e calicivirus-F9 felino (FCV-F9) come surrogati del norovirus umano utilizzando l'inibizione dell'effetto citopatico, la riduzione della placca e i saggi di espressione dell'RNA. Negli esperimenti sul tempo di aggiunta, il succo di Ma si è dimostrato efficace nel ridurre l'infettività di MNV-1 e FCV-F9 nel pre e co- La concentrazione effettiva per la riduzione del 50% era di circa lo 0,005% di succo (rispetto al 100% di succo naturale) e lo 0,25% di succo per MNV-1 e FCV-F9, rispettivamente. Il succo di Ma allo 0,1% ha mostrato una riduzione di circa il 60% del MNV -1 espressione del gene della polimerasi, confermando l'inibizione della replicazione virale un tentativo di identificare i componenti attivi con attività antivirali, sono stati esaminati Ma-F1 (<3 kDa) e Ma-F2 (>3 kDa) per dimostrare che Ma-F2 era più efficace di Ma-F1 in tutte le modalità, ad eccezione della pre- trattamento del virus. Tuttavia, due principali composti polifenolici del succo di Ma, cianidina-3-glucoside e cianidina-3-rutinoside, hanno mostrato attività antivirale nella modalità di co-trattamento. I nostri risultati suggeriscono che il succo di Ma e le sue frazioni possono inibire l'internalizzazione e la replicazione di MNV-1, mentre può influenzare l'aderenza o l'internalizzazione dei virioni FCV-F9. Il succo di Ma può rivelarsi utile nella prevenzione delle infezioni virali di origine alimentare.
I modelli di espressione distinti di claudina-10, -14, -17 ed E-caderina tra tessuti adiacenti non neoplastici e tessuti del cancro gastrico.Dati recenti indicano che le proteine di adesione cellulare sono regolate in modo anomalo in diversi tumori umani e l'espressione delle proteine di adesione cellulare E-caderina e proteine claudina è coinvolta nell'eziologia e nella progressione del cancro È chiaro che queste proteine rappresentano bersagli promettenti per il cancro rilevamento, diagnosi e terapia Per esplorare la distinzione di espressione delle proteine di adesione cellulare claudina-10,-14,-17 ed E-caderina nei tessuti non neoplastici adiacenti e nei tessuti del cancro gastrico, 50 tessuti del cancro gastrico e 50 campioni di tessuti adiacenti non neoplastici adiacenti ai tumori sono stati esaminati per l'espressione di claudina-10,-14,-17 e caderina E mediante metodo di colorazione immunoistochimica streptavidina-perosidasi. I tassi di espressione positiva di caderina E nei tessuti del cancro gastrico e adj acent i tessuti non neoplastici erano rispettivamente del 32% e del 74% (P < 0.01). I tassi di espressione positiva di claudina-10 nei tessuti del cancro gastrico e nei tessuti adiacenti non neoplastici erano rispettivamente del 24% e del 72% (P < 0.01). I tassi di espressione positiva di claudina-17 nei tessuti del cancro gastrico e nei tessuti non neoplastici adiacenti erano del 18% e del 70% (P < 0,01). Al contrario, i tassi di espressione positiva di claudina-14 nei tessuti del cancro gastrico e nei tessuti non neoplastici adiacenti erano rispettivamente del 58% e del 24% (P = 0.015 < 0.05) Pertanto, nel nostro studio, l'espressione di E-caderina, claudina -10 e la claudina-17 era down-regolata nel tessuto del cancro gastrico mentre l'espressione della claudina-14 era up-regolata. Sono state osservate correlazioni tra claudine ed espressione di caderina E con metastasi linfatiche. Il nostro studio rivela che l'espressione di E-caderina, claudina-10 e claudina-17 era down-regolata nel tessuto del cancro gastrico mentre l'espressione di claudina-14 era up-regolata e la correlazione tra claudina ed espressione di E-caderina con metastasi linfatiche sono stati osservati. Le diapositive virtuali di questo articolo sono disponibili qui: http://www. diagnosticpathology. diagnomx. eu/vs/1475928069111326.
Approccio computerizzato per accedere all'attività anti-influenzale dei costituenti della liquirizia.La neuraminidasi (NA), un enzima chiave nella replicazione virale, è il bersaglio farmacologico di prima linea per combattere l'influenza Sulla base di uno screening virtuale incentrato sulla forma, le radici di Glycyrrhiza glabra (liquirizia) sono state identificate come specie vegetali con un accumulo di costituenti che mostrano somiglianze 3D con noti inibitori della NA dell'influenza (NAI) L'indagine fitochimica ha rivelato 12 costituenti identificati come (E)-1-[2,4-diidrossi-3-(3-metil-2-butenil)fenil]-3-(8-idrossi-2,2-dimetil-2H- 1-benzopiran-6-il)-2-propen-1-one (1), 3,4-diidro-8,8-dimetil-2H,8H-benzo[1,2-b:3,4-b\ ']dipiran-3-olo (2), biocanina B (3), glabrol (4), glabrone (5), ispaglabridina B (6), licoflavone B (7), glicoside di liquirizia B (8), glicoside di liquirizia E ( 9), liquiritigenina (10), liquiritina (11) e prunina (12). Undici di questi costituenti hanno mostrato una significativa inibizione del virus dell'influenza NA in un saggio basato sulla chemiluminescenza (CL). Test aggiuntivi, tra cui (i) un test di inibizione dell'effetto citopatico cellulare (attività antivirale generale), (ii) la valutazione della citotossicità, (iii) l'inibizione dell'NA di Clostridium perfringens (basato su CL e fluorescenza (FL) saggio) e (iv) la determinazione dell'autofluorescenza e dell'estinzione, ha fornito un'ulteriore prospettiva sul loro potenziale di virus anti-influenzale, rivelando possibili problemi di interferenza del saggio e risultati falsi positivi. I composti 1, 3, 5 e 6 hanno mostrato attività antivirale, molto probabilmente causata dall'inibizione della NA. Di questi, i composti 1, 3 e 6 erano altamente classificati nello screening virtuale incentrato sulla forma.
Meta-analisi di associazione genome-wide multistadio hanno identificato due nuovi loci per la densità minerale ossea.Con l'obiettivo di identificare nuove varianti genetiche e confermare genetiche precedentemente identificate varianti associate alla densità minerale ossea (BMD), abbiamo condotto una meta-analisi di associazione genome-wide (GWA) in tre fasi in soggetti dello studio 27 061. Meta-analisi di fase 1 sette campioni GWA e 11 140 soggetti per BMD alla colonna lombare , dell'anca e del collo femorale, seguita da una replicazione in silico di 33 SNP di stadio 2 in 9258 soggetti e da una convalida de novo di tre SNP in 6663 soggetti in fase 3. Combinando le prove di tutti gli stadi, abbiamo identificato due nuovi loci che non sono stati riportati in precedenza a livello di significatività genomica (GWS; 5,0 × 10(-8)): 14q24.2 (rs227425, valore P 3,98 × 10(-13), SMOC1) nel campione combinato di maschi e femmine e 21q22.13 (rs170183, valore P 4.15 × 10(-9), CLDN14) nel campione specifico per le femmine. gli SNP tificati erano significativi anche nei risultati di sintesi del consorzio Fattori genetici per l'osteoporosi (GEFOS, n = 32 960). Abbiamo anche confermato in modo indipendente 13 loci precedentemente riportati a livello GWS: 1p36.12 (ZBTB40), 1p31.3 (GPR177), 4p16.3 (FGFRL1), 4q22.1 (MEPE), 5q14.3 (MEF2C), 6q25 .1 (C6orf97, ESR1), 7q21.3 (FLJ42280, SHFM1), 7q31.31 (FAM3C, WNT16), 8q24.12 (TNFRSF11B), 11p15.3 (SOX6), 11q13.4 (LRP5), 13q14.11 (AKAP11) e 16q24 (FOXL1). L'analisi dell'espressione genica nelle cellule osteogeniche ha implicato una potenziale associazione funzionale dei due geni candidati (SMOC1 e CLDN14) nel metabolismo osseo. I nostri risultati confermano in modo indipendente i percorsi biologici precedentemente identificati alla base del metabolismo osseo e contribuiscono alla scoperta di nuovi percorsi, fornendo così preziose informazioni sull'intervento e il trattamento dell'osteoporosi.
Le mutazioni della resistenza alla moenomicina nello Staphylococcus aureus riducono la lunghezza della catena del peptidoglicano e causano una divisione cellulare aberrante.Staphylococcus aureus è un patogeno Gram-positivo con una modalità insolita di divisione cellulare in quanto si divide in piani ortogonali piuttosto che paralleli. Attraverso la selezione mediante moenomicina, un antibiotico proposto per colpire le glicosiltransferasi peptidoglicano (PGT), abbiamo generato mutanti resistenti contenenti una mutazione puntiforme nel sito attivo del dominio PGT di un essenziale enzima biosintetico del peptidoglicano (PG), PBP2. Utilizzando saggi di polimerizzazione senza cellule, dimostriamo che questa mutazione altera l'attività del PGT in modo che vengano prodotte catene di PG molto più corte. La stessa mutazione in un altro S. aureus PGT, SgtB, ha un effetto simile sul glicano I ceppi di S. aureus resistenti alla monomicina contenenti PGT mutati che producono solo brevi polimeri di glicani mostrano importanti difetti di divisione cellulare, che implicano la lunghezza della catena del PG nel determinare morfologia delle cellule batteriche e posizionamento del sito di divisione.
Miglioramento mitocondriale per i disturbi del movimento neurodegenerativi: una revisione sistematica di studi che coinvolgono creatina, coenzima Q10, idebenone e mitochinone.I disturbi del movimento neurodegenerativi includono principalmente il Parkinson\ 's (PD), parkinsonismi atipici, Huntington\'s (HD) e atassia di Friedreich\'s (FA). Con disfunzione mitocondriale osservata in queste malattie, potenziamento mitocondriale come creatina, coenzima Q10 (CoQ10) e suoi analoghi (idebenone e mitochinone) è stato considerato come un potenziale trattamento. In questo articolo, abbiamo analizzato e riassunto sistematicamente l'efficacia del potenziamento mitocondriale nel migliorare i sintomi motori e di altro tipo nei disturbi del movimento neurodegenerativi. Abbiamo cercato nei database elettronici PubMed, EMBASE, CINAHL, Cochrane Library e China National Knowledge Infrastructure fino a settembre 2013 per studi randomizzati controllati (RCT) eleggibili, nonché studi non pubblicati e in corso. Abbiamo calcolato le differenze medie per i dati continui con intervalli di confidenza del 95% e abbiamo raggruppato i risultati utilizzando un modello a effetti fissi, se non è stata trovata alcuna eterogeneità statistica significativa (I(2) < 50%). Abbiamo incluso 16 studi con 1.557 pazienti randomizzati, che hanno confrontato creatina, CoQ10 o suoi analoghi con placebo nei sintomi motori e di altro tipo. Non sono stati riscontrati miglioramenti significativi nei sintomi motori di PD, parkinsonismi atipici o pazienti con MH, mentre solo l'alta dose di idebenone sembra essere promettente per il miglioramento motorio nell'AF. Alcuni benefici si trovano in altri sintomi. Non ci sono prove sufficienti per supportare l'uso del potenziamento mitocondriale in pazienti con disturbi del movimento neurodegenerativi. Per ulteriori conferme sono necessari RCT più ben progettati con campioni di grandi dimensioni.
I geni regolatori pleiotropici bldA, adpA e absB sono implicati nella produzione dell'antibiotico fosfoglicolipide moenomicina.A differenza della maggior parte delle vie metaboliche secondarie degli actinomiceti, la biosintesi di l'inibitore del peptidoglicano glicosiltransferasi moenomycin in Streptomyces ghanaensis non coinvolge alcun regolatore situato in cluster (CSR). Ciò solleva interrogativi sui segnali regolatori che avviano e sostengono la produzione di moenomicina. Ora mostriamo che tre geni regolatori pleiotropici per Streptomyces morfogenesi e produzione di antibiotici-boldA, adpA e absB esercitano un controllo multistrato sulla biosintesi della moenomicina nei produttori nativi ed eterologhi Il gene bldA per tRNA(Leu)UAA è necessario per la traduzione di rari codoni UUA all'interno di due geni chiave della biosintesi della moenomicina (moe), moeO5 e moeE5. Inoltre influenza indirettamente la produzione di moenomicina controllando la traduzione dell'adpA contenente UUA e, probabilmente, altri ancora -gene(i) repressore(i) sconosciuto(i). AdpA lega i promotori di moe chiave e li attiva. Inoltre, AdpA interagisce con il promotore bldA, influenzando così la traduzione di mRNA dipendenti da bldA, quello di adpA e diversi geni moe. Sia l'espressione di adpA che la produzione di moenomicina sono aumentate in uno sfondo carente di absB, molto probabilmente perché AbsB normalmente limita l'abbondanza di mRNA di adpA attraverso la scissione ribonucleolitica. Il nostro lavoro evidenzia una strategia sottovalutata per la regolazione del metabolismo secondario, in cui l'interazione tra geni strutturali e regolatori pleiotropici non è mediata dai CSR. Questa strategia potrebbe essere rilevante per un numero crescente di cluster di geni privi di CSR scoperti durante l'estrazione del genoma di actinomiceti.
L'estratto di bacche di Açaí (Euterpe oleraceae Mart.) esercita effetti neuroprotettivi contro l'esposizione all'amiloide β in vitro.La bacca di açaí di palma originaria del Sud America (Euterpe oleraceae Mart. ) ha alti livelli di polifenoli e antiossidanti. Questo studio ha esaminato se l'estratto di bacche di açaí offrisse protezione contro la perdita di vitalità cellulare mediata da -amiloide (Aβ) e lo stress ossidativo associato agli effetti anti-fibrillari. Le cellule PC12 sono state esposte a Aβ1 -42, Aβ25-35 o tert butil idroperossido (t-BHP), da solo o in presenza di estratto di açaí (0,5-50 μg/ml). Il saggio di legame della tioflavina T (ThT) e la microscopia elettronica a trasmissione sono stati utilizzati per determinare gli effetti dell'acai estratto sulla morfologia delle fibrille Aβ1-42 e confrontato con acido gallico fenolico açaí, cianidina rutinoside e cianidina glucoside. L'esposizione ad Aβ1-42, Aβ25-35 o t-BHP ha diminuito la vitalità cellulare PC12. Il pretrattamento con estratto di açaí ha migliorato significativamente la vitalità cellulare dopo Aβ1- 42 esposizione, comunque A La perdita di vitalità mediata da β25-35 o t-BHP è rimasta inalterata. L'estratto di Açaí ha inibito la fluorescenza di ThT e ha interrotto la fibrillazione Aβ1-42 e la morfologia degli aggregati. Rispetto ad altri fenoli, l'açaí è risultato più efficace nell'inibire l'aggregazione di Aβ1-42. L'inibizione dell'aggregazione della β-amiloide può essere alla base di un effetto neuroprotettivo dell'açaí.
Livelli cerebrali del metabolita neurotossico piridinio HPP+ e sintomi extrapiramidali nei topi trattati con aloperidolo.Il tipico aloperidolo antipsicotico è un trattamento altamente efficace per la schizofrenia, ma il suo utilizzo è limitato da una serie di effetti collaterali motori gravi e spesso irreversibili. Queste reazioni avverse da farmaci, chiamate sindromi extrapiramidali (EPS), derivano da un meccanismo fisiopatologico sconosciuto. Una teoria si riferisce all'osservazione che il metabolita aloperidolo HPP+ (4 -(4-clorofenil)-1-[4-(4-fluorofenil)-4-ossobutil]-piridinio) è strutturalmente simile a MPP+ (1-metil-4-fenilpiridinio), una neurotossina responsabile di una condizione neurodegenerativa irreversibile simile a Malattia di Parkinson. Per determinare se HPP+ contribuisce all'EPS indotto da aloperidolo, abbiamo misurato i livelli di HPP+ e di aloperidolo cerebrale in ceppi di topi ad alta (C57BL/6J e NZO/HILtJ) e bassa (BALB/cByJ e PWK/PhJ) responsabilità indotta da aloperidolo EPS dopo trattamento cronico (7-10 topi maschi adulti per ceppo). I livelli cerebrali di HPP+ e il rapporto tra HPP+ e aloperidolo non erano significativamente differenti tra i gruppi di ceppi sensibili all'aloperidolo e quelli resistenti all'aloperidolo (P=0.50). All'interno di ciascun gruppo, tuttavia, sono state osservate differenze di ceppo (P<0.01), indicando che esiste una variazione genetica che regola i livelli di HPP+ allo stato stazionario. Poiché i livelli di HPP+ che abbiamo osservato nel cervello di topo si sovrappongono alla gamma di quelli rilevati nel cervello umano post-mortem dopo il trattamento cronico con aloperidolo, i risultati di questo studio sono fisiologicamente rilevanti per l'uomo. I risultati suggeriscono che le differenze di ceppo nei livelli di HPP+ allo stato stazionario non spiegano la sensibilità all'EPS indotta da aloperidolo nei topi che abbiamo studiato.
Determinazione UHPLC delle catechine per il controllo della qualità del tè verde.È stata sviluppata una cromatografia liquida ad altissime prestazioni (UHPLC) con metodo di rilevamento UV per la rapida quantificazione delle catechine e della caffeina del tè verde più rappresentate e biologicamente importanti. Il sistema UHPLC è stato dotato di colonna analitica C18 (50 mm × 2,1 mm, 1,8 μm), utilizzando una fase mobile composta da tampone fosfato di trietanolammina a pH 2,5 (0,1 M) e acetonitrile in una modalità di eluizione in gradiente; in queste condizioni sei principali catechine e caffeina sono state separate in una corsa di 3 minuti. Il metodo è stato completamente convalidato in termini di precisione, limiti di rilevazione e quantificazione, linearità, accuratezza ed è stato applicato all'identificazione e quantificazione di catechine e caffeina presenti negli infusi di tè verde. In particolare, per la preparazione degli infusi sono stati utilizzati campioni di foglie di tè verde di diversa origine geografica (Sencha, Ceylon Green e Lung Ching) disponibili in commercio. zioni (acqua a 85°C per 15min). La selettività del metodo UHPLC sviluppato è stata confermata dal confronto con l'analisi UHPLC-MS/MS. Il recupero delle sei principali catechine e della caffeina sui tre campioni di tè commerciali analizzati variava dal 94 al 108% (n=3). I limiti di rilevamento (LOD) erano compresi nell'intervallo 0,1-0,4 μgmL(-1). Un metodo elettrocinetico micellare ortogonale (MEKC) è stato applicato a fini comparativi su selettività e dati quantitativi. L'uso combinato dei risultati ottenuti dalle due tecniche ha consentito una rapida conferma sulla caratterizzazione quantitativa dei campioni commerciali.
Frequenza di rara variazione allelica nei geni candidati tra individui con bassa e alta escrezione urinaria di calcio.Il nostro studio ha studiato l'associazione di varianti alleliche rare con estremi dell'escrezione urinaria di calcio nelle 24 ore perché una maggiore escrezione urinaria di calcio è un fattore di rischio dominante per la formazione di calcoli renali a base di calcio. Abbiamo risequenziato 40 geni candidati potenzialmente correlati all'escrezione urinaria di calcio in individui dagli studi Nurses\' Health Studies I e II e lo studio di follow-up dei professionisti della salute. Un totale di 960 partecipanti sono stati selezionati in base alla disponibilità di dati sulla raccolta delle urine delle 24 ore e al livello di escrezione urinaria di calcio (basso vs alto). Abbiamo utilizzato il pooling di campioni di DNA, l'arricchimento del gene bersaglio basato su goccioline , multiplexing e sequenziamento ad alta produttività. Circa il 64% dei campioni (n = 615) ha mostrato sia l'arricchimento del target di successo che i dati di sequenziamento con una copertura profonda >20 volte. Un totale di 259 no sono state identificate varianti vel alleliche. Nessuna delle varianti genetiche rare (frequenze alleliche <2%) è stata trovata con maggiore frequenza nei gruppi di calcio urinario basso e alto; la maggior parte di queste varianti è stata osservata solo in singoli individui. L'analisi non aggiustata delle varianti con frequenze alleliche ≥ 2% ha suggerito un'associazione di Claudin14 SNP rs113831133 con una minore escrezione urinaria di calcio (aplotipi 6/520 contro 29/710, valore P = 0,003). I nostri dati, insieme a precedenti studi sull'uomo e sugli animali, suggeriscono un possibile ruolo di Claudin14 nell'escrezione urinaria di calcio. Saranno necessari studi di convalida genetica in set di campioni più ampi per confermare i nostri risultati per rs113831133. Nell'insieme testato di geni candidati, rare varianti alleliche non sembrano contribuire in modo significativo alle differenze nell'escrezione urinaria di calcio tra gli individui.
Enantioseparation e determinazione degli enantiomeri del fungicida chirale furametpyr in riso, suolo e acqua mediante cromatografia liquida ad alte prestazioni.Il fungicida chirale furametpyr è ampiamente utilizzato in risaia per controllare la peronospora della guaina del riso; tuttavia, gli enantiomeri furametpyr sono trattati come un solo composto nell'analisi achirale tradizionale, che fornisce solo informazioni parziali. Un metodo analitico chirale efficace è stato sviluppato per la risoluzione e la determinazione degli enantiomeri furametpyr fungicidi in campioni di riso, suolo e acqua Gli enantiomeri del furametpyr sono stati separati e determinati in modo eccellente su una colonna Chiralpak AD-H con n-esano/etanolo (90:10, v/v) come fase mobile a una portata di 0,8 µmL min(- 1) con rivelazione UV a 220 nm. La risoluzione era fino a 8,85. Il primo enantiomero eluito era (+)-furametpyr e il secondo eluito era (-)-furametpyr. Gli effetti della composizione della fase mobile e della temperatura della colonna sul enantioseparato ione sono stati valutati. Il metodo è stato convalidato per linearità, ripetibilità, accuratezza, limite di rilevazione (LOD) e limite di quantificazione LOQ. LOD era 2,0 µg kg(-1) in acqua, 0,02 mg kg(-1) nel suolo e 0,07 mg kg(-1) nel riso con un LOQ di 6,7 µg kg(-1) in acqua, 0,07 mg kg( -1) nel suolo e 0,23 mg kg(-1) nel riso. I recuperi medi del pesticida in tutte le matrici variavano dal 73,1 al 101,8% per tutti i livelli di fortificazione. I valori di precisione associati al metodo analitico, espressi come valori di deviazione standard relativa (RSD), erano inferiori al 14,0% in tutte le matrici. La metodologia è stata applicata con successo per l'analisi enantioselettiva degli enantiomeri del furametpyr in campioni reali.
Una via ad alto rendimento per sintetizzare il radioligando P-glicoproteina [11C]N-desmetil-loperamide e il suo radioligando genitore [11C]loperamide.N-desmetil-loperamide e loperamide sono state sintetizzate da α,α-difenil-γ-butirrolattone e 4-(4-clorofenil)-4-idrossipiperidina in cinque e quattro passaggi con una resa complessiva rispettivamente dell'8% e del 16%. è stato sintetizzato da 4-bromo-2,2-difenilbutirronitrile e 4-(4-clorofenil)-4-idrossipiperidina in 2 passaggi con una resa complessiva del 21-57%. [(11)C]N-desmetil-loperamide e [(11) )C]loperamide sono stati preparati dal loro precursore ammidico corrispondente e N-desmetil-loperamide con [(11)C]CH3OTf attraverso N-[(11)C]metilazione e isolati mediante HPLC combinati con estrazione in fase solida (SPE) in 20 Resa radiochimica del -30% e del 10-15%, rispettivamente, basata su [(11)C]CO2 e decadimento corretto alla fine del bombardamento (EOB), con attività specifica di 370-740 GBq/μmol all'EOB.