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10,812 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | As Análises Clínicas representam uma importante ferramenta para o diagnóstico e seguimento de muitas patologias. Vários estudos internacionais apontam que setenta por cento (70%) da tomada da decisão clínica médica está dependente de, ou é confirmada por, resultados de testes médicos laboratoriais. Apesar de toda a componente teórica inerente a este tema, a aplicação dos conceitos a nível prático tem extrema importância. O objetivo deste relatório é documentar o estágio curricular do Mestrado em Análises Clínicas. Este estágio foi realizado no Laboratório S. José, durante um período de seis meses. Os objetivos do estágio curricular são não só aprofundar os conceitos teóricos adquiridos ao longo do primeiro ano do mestrado como também adquirir novas competências a nível prático. As Análises Clínicas podem ser divididas em quatro valências major: Hematologia, Imunologia, Bioquímica e Microbiologia. Durante o estágio, tomei contacto com todas as quatro, ainda que se tenham evidenciado os trabalhos realizados na Hematologia e na Imunologia durante a elaboração deste relatório. As principais partes constituintes deste documento são uma breve introdução, a descrição do funcionamento do Laboratório S. José, a apresentação das duas valências escolhidas e uma breve conclusão. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,814 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | Hoje em dia, o laboratório tem um importante papel na saúde da população geral e a decisão médica baseia-se, em grande parte, nos resultados obtidos nas análises clínicas, é por isso importante o rigor, a constante atualização dos conhecimentos, sentido de responsabilidade e a interdisciplinaridade dos profissionais nesta área. No presente relatório é descrito o trabalho que acompanhei no Laboratório de Análises Clínicas Dr. Joaquim Chaves Algarve, onde decorreu o meu estágio curricular integrado no Mestrado de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra, descrevendo os pontos fundamentais das fases pré-analítica, analítica e pós-analítica e, referindo em mais detalhe as valências de Bioquímica Clínica e Hematologia, pretendendo-se transmitir sobretudo a aplicabilidade destas áreas na clínica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,816 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | O Mestrado em Análises Clinicas da FFUC integra um estágio curricular em ambiente laboratorial, de forma a permitir aos discentes um contacto próximo com a realidade encontrada na rotina laboratorial. Possibilitando desta forma aplicar o conhecimento teórico obtido, através da manipulação de equipamentos automatizados, implementação de técnicas manuais, e manuseamento de amostras biológicas, tendo em conta a garantia de qualidade nos procedimentos. O presente relatório tem como objetivo final uma breve descrição das atividades desenvolvidas, ao longo do estágio realizado no Laboratório de Análises Clínicas do Centro de Saúde Militar de Coimbra. Será atribuído particular enfase às valências Bioquímica e Hematologia, referindo os fundamentos analíticos nos parâmetros abordados e a sua importância fisiopatológica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,819 | Caraterização do perfil genómico do carcinoma pulmonar | Neoplasias do pulmão,Adenocarcinoma,Carcinoma pulmonar de células não pequenas,Genómica,Métodos | O carcinoma pulmonar (CP) é a neoplasia mais comum em todo o mundo, e também a principal causa de morte por cancro. Aproximadamente 85% dos tumores do pulmão diagnosticados correspondem a carcinomas de não pequenas células (CPNPC) e destes, aproximadamente, 30% são carcinomas de células escamosas (CPCE), e 50% adenocarcinomas (ADC). A deteção destes tumores em estadios iniciais e a identificação de alterações associadas a um elevado risco de recidiva, ou que permitam prever a progressão clínica, permanecem como questões desafiantes na prática clínica. Deste modo, pretendeu-se com este estudo caracterizar o perfil genómico do CP, de forma a contribuir nomeadamente para o desenvolvimento de soluções de diagnóstico, direccionamento e personalização do tratamento, procurando reduzir o número de mortes por CP e os custos de saúde associados a esta doença. Neste estudo foram identificadas diversas alterações genómicas concordantes com as alterações descritas na literatura como associadas ao CP, bem como algumas regiões cromossómicas e/ou genes com forte possibilidade de estarem envolvidos na carcinogénese pulmonar. Por aCGH, embora os ADC não tenham revelado correspondência em termos de alterações genómicas nos diferentes estadios TNM, nos CPCE foram detectadas alterações concordantes em ganho em 3q, 5p, 7, 8q, 12, 15q, 17q, 19, 20 e 22q e, em perda, em 3p, 4p, 5q, 8p, 9p, Xp e Y, que poderão ter potencial para diagnóstico. Os genes PIK3CA, SOX2 e MYC revelaram, por aCGH, ser os genes mais alterados em CP. Os resultados obtidos com a técnica de MLPA permitiram, na generalidade, comprovar os resultados obtidos por aCGH. Foram identificadas alterações em elevado número de cópias nos genes PIK3CA, FGFR1 e PTEN, por MLPA, no CPCE. Para além disso, o gene FKBP8 apresentou a percentagem de alteração mais elevada, por MLPA, revelando ter potencial como um futuro biomarcador no CP. A análise, através destas duas metodologias, permitiu diferenciar ADC de CPCE, exibindo este último um maior número de alterações. Alterações em ganho e em perda dos genes PIK3CA e PTEN, respectivamente, parecem ser caraterísticas de CPCE. A estratégia direcionada de Touch FISH permitiu validar o aCGH e o MLPA, revelando ser eficaz na deteção de regiões específicas associadas ao CP. O conhecimento prévio do perfil metabonómico dos tipos histológicos analisados foi correlacionado de forma exploratória com o perfil genómico obtido neste estudo, destes mesmos tumores. A sobre-expressão aumentada dos oncogenes MYC, PIK3CA e AKT1 parece estar envolvida na glicólise e glutaminólise, dado o aumento de lactato e glutamina verificados previamente nestes casos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,822 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | O presente relatório tem por objetivo descrever e consolidar as atividades realizadas no decorrer do estágio no Laboratório Aeminium, Lda. no período de 1 de dezembro de 2015 a 30 de junho de 2016. Mais do que uma descrição das atividades clínicas desenvolvidas durante o estágio, o relatório mostra, na globalidade, a rotina do laboratório, as metodologias e parâmetros determinados, e ainda o controlo de qualidade inerente à prática laboratorial. É importante referir que a área das Análises Clínicas tem um grande relevo no diagnóstico médico e revela-se uma ferramenta fundamental como exame complementar de diagnóstico. É através das análises que conseguimos fazer a interpretação de casos clínicos que aparecem diariamente no laboratório, de forma a alcançar um diagnóstico diferencial e ter espírito crítico no tratamento e interpretação das amostras e dos seus resultados. Neste relatório são destacadas as áreas de Imunologia e Microbiologia, não só pela sua importância no Laboratório de Análises Clínicas, mas também porque fazem parte das minhas preferências pessoais. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,823 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | Os laboratórios de análises clínicas fornecem um excelente apoio ao diagnóstico clínico ajudando na caracterização de patologias e a acompanhar o estado de saúde dos doentes. Este relatório é fruto do trabalho desenvolvido entre os meses de janeiro e julho de 2016 no Serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra, no âmbito do estágio curricular integrado no plano de estudos do mestrado de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. Nele será apresentado o laboratório no seu todo, bem como a sua organização por setores de trabalho. O trabalho realizado nos setores de Imunologia e de Hematologia será apresentado com mais detalhe, pois estes correspondem às duas áreas de trabalho exigidas, seleccionadas por mim. Relativamente ao trabalho desenvolvido nos setores de Bioquímica e de Microbiologia será apresentado apenas um breve resumo, embora o estágio tenha sido igualmente distribuído pelas diferentes áreas de trabalho. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,824 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | O presente relatório do estágio curricular do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra pretende relatar todas as atividades em que estive envolvida durante o estágio efetuado na Unidade Hospitalar de Tomar do Centro Hospitalar Médio Tejo, nas áreas de Microbiologia, Hematologia, Bioquímica e Imunologia, dando ênfase às primeiras duas. Após uma breve caracterização do Centro Hospitalar, são mencionadas as atividades desenvolvidas em cada um dos setores, com o devido enquadramento teórico, desde a pré analítica até à pós analítica. São também referidos os equipamentos presentes no Serviço de Patologia e é feita uma breve descrição do Controlo de Qualidade Interno e Externo. Na conclusão do relatório é apresentada uma apreciação geral ao estágio. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,827 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | As análises clínicas são uma ferramenta fundamental no rastreio, diagnóstico e seguimento de pacientes. No Instituto Português de Oncologia adquirem maior importância, uma vez que este é um hospital especializado na doença oncológica. O principal propósito deste relatório é a descrição das atividades desenvolvidas durante os seis meses de Estágio que passei neste serviço. Durante este período de tempo, tive a oportunidade de integrar a rotina dos diferentes setores que constituem o Serviço de Patologia Clínica: Bioquímica Clínica, Hematologia, Imunologia/Hormonologia e Microbiologia. Foi-me possível adquirir conhecimentos práticos, que me permitiram ampliar os conhecimentos teóricos da minha formação académica. Tive a oportunidade de trabalhar a par com profissionais muito experientes e competentes e de aplicar o meu conhecimento à prática da realidade quotidiana. Neste relatório são aprofundadas as áreas da Hematologia e da Microbiologia, pela sua importância a nível clínico e pelo interesse que me despertaram. É também efetuada uma breve descrição dos setores da Bioquímica Clínica e da Imunologia/Hormonologia. É ainda abordado o controlo de qualidade implementado em todos os setores do Serviço de Patologia Clínica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,831 | Estudo comparativo do enquadramento regulamentar na aprovação de dispositivos médicos combinados nos EUA e na UE : estudo de caso | Equipamentos e provisões,Aprovação de equipamentos,legislação e jurisprudência,Estados Unidos,Europa | O setor dos dispositivos médicos tem vindo a crescer consideravelmente nos últimos anos, sendo os dispositivos médicos combinados uma categoria de dispositivos que se tem destacado pela sua complexidade e inovação. Este rápido crescimento do setor tem colocado grandes desafios ao quadro regulamentar envolvido nos processos de aprovação e vigilância do mercado. Este trabalho pretende comparar o ambiente regulamentar relativo ao processo de aprovação de dispositivos médicos combinados, nos EUA e na União Europeia, sendo abordado um estudo de caso, sobre um stent farmacológico, Absorb GT1™BVS, de forma a demonstrar o ambiente regulamentar e suas divergências nestas duas regiões. Na UE, o processo regulamentar dos dispositivos médicos tem sofrido melhorias conceituais que reforçam a segurança na utilização dos mesmos. O conceito de “Nova Abordagem” veio harmonizar e normalizar tecnicamente, o setor industrial, por forma a assegurar uma otimizada atuação de todos os intervenientes no processo de aprovação de um dispositivo médico. Este processo conta com a intervenção da Comissão Europeia, Autoridades Competentes, fabricantes e Organismos Notificados. São estes últimos que asseguram a conformidade dos dispositivos médicos, assim como a sua certificação, com a marcação de “Conformidade Europeia”. Recentemente, foi redigido, a 27 de junho de 2016, pelo Conselho da União Europeia, um draft do novo Regulamento dos Dispositivos Médicos, que assegura uma melhor atuação de todos os intervenientes do processo de aprovação, da cadeia de distribuição e ainda mais exigência ao nível da investigação clínica. Nos EUA, a entidade que assegura o processo regulamentar é a Food and Drug Administration, que tem vindo igualmente a consolidar algumas necessidades do setor, como por exemplo, a implementação do Office of Combination Products, que garante um melhor apoio, acompanhamento e vigilância dos dispositivos médicos combinados no mercado. Apesar de os dois sistemas de aprovação e vigilância serem semelhantes, ainda diferem em algumas atuações, o que tem criado desafios para ambas as entidades, que tentam encontrar uma regulamentação que faça frente às necessidades de um mercado cada vez mais exigente. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,836 | Avaliação do potencial antimicrobiano e síntese de glucosilglicerato em streptacidiphilus jiangxiensis sob diferentes condições de stress | Streptomycetaceae,Antibióticos,Glucosídeos,Ácidos glicéricos,Glucosilglicerol | Os antibióticos tiveram uma enorme relevância na modernização da medicina, sendo hoje difícil imaginar a prática da medicina sem eles. Contudo, a resistência a estes compostos antimicrobianos tornou-se um problema de saúde pública que ameaça o controlo das doenças infeciosas bacterianas. A descoberta sistemática de antibióticos deveu-se a estudos de análise da atividade antimicrobiana de culturas de organismos de solos, tais como fungos (p. ex. do género Penicillium) e bactérias (p. ex. do género Streptomyces), importantes produtores de antibióticos (Arias & Murray, 2015; Ikeda et al., 1999). Sendo os antibióticos “armas” químicas utilizadas por microrganismos para a sua defesa, estes metabolitos secundários são muitas vezes produzidos em condições específicas de stress (Rutledge & Challis, 2015). A produção de certos metabolitos como o soluto orgânico glucosilglicerato (GG) está também relacionado com determinadas condições de stress, nomeadamente limitação de azoto ou stress osmótico, sendo que, nas micobactérias, este metabolito seja o precursor essencial de um lipopolissacárido de metilglucose implicado na resposta a stress térmico (Kaur et al., 2009). Nestas condições a via biossintética de GG, liderada pela enzima responsável pelo primeiro passo de síntese deste metabolito (GpgS), pode também estar ativa. Algumas actinobactérias contêm no seu genoma um operão raro que inclui genes com homologia com outros envolvidos na biossíntese de antibióticos. Um dos objetivos deste trabalho visa uma avaliação preliminar de potenciais propriedades antimicrobianas de Streptacidiphilus jiangxiensis isolado de solo (Huang et al., 2004), através de estudos experimentais de competição inter-específica (co-culturas bactéria-bactéria e bactéria-fungo) em condições definidas e exposição de bactérias tipo selecionadas a extratos de S. jiangxiensis. Um segundo objectivo deste trabalho é a caracterização da atividade da glucosil-3- fosfoglicerato sintase (GpgS) de S. jiangxiensis, uma enzima envolvida na síntese de GG cuja função em alguns microrganismos está associada à resposta a diferentes tipos de stress (Empadinhas & Da Costa, 2011). Neste trabalho foi clonado o gene que codifica a GpgS de S. jiangxiensis e a enzima recombinante responsável pela produção de GPG, o metabolito intermediário do soluto GG, foi produzida, purificada e as suas propriedades determinadas, permitindo concluir que é uma GpgS típica de actinobactérias. Nas condições de stress testadas não foi detetada a acumulação de GG por S. jiangxiensis. Os ensaios para avaliação do potencial antimicrobiano de S. jiangxiensis nas condições testadas não confirmaram a hipótese, possivelmente devido ao número insuficiente de parâmetros de crescimentos selecionados e condições de stress testadas. A elucidação da fisiologia e metabolismo de microrganismos pouco explorados como Streptacidiphilus jiangxiensis, especialmente das vias de produção de metabolitos secundários de interesse biomédico, pode contribuir para o combate a doenças infeciosas, de relevância acrescida num momento em que a Humanidade enfrenta um aumento significativo de fenómenos de resistência aos antibióticos disponíveis. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,837 | Análise de fitoquímicos em geranium robertianum l. | Plantas medicinais,Geranium,Química,Fitoquímica,Compostos fitoquímicos | Introdução: As plantas medicinais têm vindo a ser reconhecidas e utilizadas ao longo da história da humanidade pelos seus efeitos terapêuticos e curativos. Estas plantas conseguem sintetizar uma grande variedade de fitoquímicos biologicamente ativos, dos quais se podem destacar os compostos fenólicos. O interesse no estudo destes metabolitos tem aumentado exponencialmente nestes últimos anos, uma vez que se pensa que estejam intimamente associados a diversas propriedades benéficas para a saúde, entre as quais a capacidade antioxidante e anti-inflamatória. Geranium robertianum é uma espécie de planta que tem sido muito utilizada na medicina tradicional devido as suas propriedades benéficas. Esta planta é vulgarmente utilizada na forma de infusões ou pastas, atuando como agente anti-inflamatório, antioxidante, anti-hepatotóxico, diurético e antidiabético. Com base nestes alegados benefícios, existem atualmente no mercado diversos suplementos alimentares à base de extratos de G. robertianum L. Neste trabalho pretendeu-se caracterizar os extratos etanólicos de G. robertianum, tendo-se para tal recorrido ao seu fracionamento sequencial com diferentes solventes orgânicos. Este fracionamento tem como objetivo a obtenção de frações enriquecidas em diversos compostos, por forma a isolar e caraterizar compostos através da espectroscopia de ressonância magnética nuclear. Por outro lado, o conhecimento dos extratos etanólicos permite também conhecer melhor a composição fitoquímica da planta, percebendo se existe potencial para que esta possa vir a ser explorada com fins terapêuticos ou como formulações para nutracêuticos. Métodos: A composição fitoquímica dos extratos etanólicos foi conseguida pela análise destas e/ou de frações obtidas por solubilização sequencial a quente com n-hexano, diclorometano, acetato de etilo, acetona e metanol (frações EtOH1_Hex e EtOH2_Hex, EtOH1_Dic e EthOH2_Dic, respetivamente). A caraterização dos componentes voláteis e fenólicos dos extratos e frações foi efetuada com recurso à análise de GC-MS e/ou UHPLCDAD- ESI/MSn, tendo-se ainda procedido ao isolamento por HPLC de dois compostos e efetuado análise de 1H RMN, com a finalidade de elucidar a sua estrutura. Adicionalmente, as atividades antioxidante e anti-inflamatória dos extratos etanólicos e respetivas frações foram avaliadas pelo método de Folin-Ciocalteu e de captação de NO•, respetivamente. Resultados: Os extratos etanólicos de G. robertianum analisados em GC-MS, mostraram na sua composição, álcoois, monossacarídeos, ácidos carboxílicos e ácidos II gordos, sendo os ácidos gordos palmítico e linoleíco os elementos predominantes nas análises efetuadas. Por sua vez, a análise dos extratos etanólicos e respetivas frações efetuada por UHPLC-DAD-ESI/MSn permitiu concluir que os compostos fenólicos predominantes correspondem à hidroxidifenilenogaloil-hexosídeo (corilagina), brevifolina, ácido elágico e ao composto desconhecido [M-H] ¯= m/z 319. O ácido galoil-quínico , ácido dicafeoil-quínico e a flavona luteolina também foram identificados, embora com menor intensidade. Adicionalmente, a análise de 1H RMN dos compostos, hidroxidifenilenogaloilhexosídeo e o composto com [M-H]¯= m/z 319 permtiu identificar alguns dos seus sinais característicos, muito embora não tenha permitido elucidar toda a estrutura destes compostos. No que diz respeito ao composto [M-H]¯= m/z 319, foi possível observar a presença de sinais na zona dos aromáticos assim como na zona alifática do espetro. Relativamente à atividade antioxidante dos extratos etanólicos e frações, EtOH2 mostrou melhor resultado (190 μg±3 GAE/mg extrato), seguindo-se das frações de acetato de etilo e acetona (EtOH2_Acett, EtOH1_Acetn e EtOH2_Acetn, com 148±6 μg GAE/mg extrato, 178±1 μg GAE/mg extrato e 170±0,7 μg GAE/mg extrato, respetivamente). Relativamente à capacidade de captação de NO•, a amostra que mostrou um menor IC50 foi EtOH2_Acett com 0,09±0,02 mg/mL, seguindo-se as amostras de EtOH1 e EtOH2 com um IC50 de 0,14±0,01 mg/mL e 0,14±0,03 mg/mL, respetivamente. Conclusões: Este estudo contribuiu para o conhecimento fitoquímico dos extratos etanólicos de G. robertianum. Relativamente às atividades biológicas, os extratos etanólicos mostraram resultados promissores para atividades antioxidantes, além disso também revelaram ser eficazes na captação de NO•. A vasta gama de compostos identificados em cada extrato analisado, assim como as proeminentes atividades biológicas, são claramente um contributo para a valorização de G. robertianum. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,838 | Preparação e avaliação da atividade anti-inflamatória de novos derivados polifenólicos glicosilados | Inflamação,Anti-inflamatórios,Polifenóis,Glicosídeos,Flavonóides,Rutina,Flavanonas | Os compostos polifenólicos glicosilados possuem diversas atividades fisiológicas de grande interesse, entre as quais se destacam a atividade anti-inflamatória. Devido à elevada prevalência e intensidade de seus sinais e sintomas, a inflamação é um dos mais antigos problemas de saúde documentados (ROCK et al., 2010). A inflamação pode ser definida como um mecanismo de resposta à perda de homeostasia tecidual e celular, apresentando papéis fisiológicos como defesa do hospedeiro, remodelação tecidual e regulação do metabolismo (MEDZHITOV et al., 2009). Macrófagos e outras células imunes ativadas por citocinas, produtos microbianos ou ambos, induzem a transcrição da isoforma indutível da enzima sintase do óxido nítrico (iNOS) e consequentemente a produção do mediador pró-inflamatório óxido nítrico (NO) (BOGDAN, 2001). Em células ativadas por lipopolissacarídeo (LPS), a indução da iNOS ocorre principalmente pela via de sinalização intracelular do fator nuclear de transcrição kappa B (NF-kB) (GUZIK et al., 2003). Neste sentido, compostos que têm como alvo intracelular a via de transdução de sinal NF-kB e que interrompem a cascata de produção de mediadores inflamatórios como o NO possuem um elevado potencial anti-inflamatório. O objetivo deste trabalho consiste em preparar novos derivados polifenólicos glicosilados por meio de reações biocatalíticas e estudar a sua atividade anti-inflamatória, nomeadamente na produção de óxido nítrico, induzida por LPS, numa linha celular de macrófagos de ratinho. Dessa forma, esta investigação permitiu identificar a atividade anti-inflamatória das moléculas testadas, e indicar os mecanismos de acção na via do NF-kB ou na produção de NO catalisada pela iNOS. Os novos compostos testados como anti-inflamatórios foram obtidos por semi-síntese a partir dos polifenóis naringina, rutina e polidatina, através de reações de acilação catalisadas por enzimas. A acilação enzimática constitui uma ferramenta poderosa para obter novos derivados de forma regiosseletiva sob condições reacionais suaves. Relativamente à naringina, os seus derivados acilados apresentaram melhor atividade na inibição da produção de óxido nítrico estimulada por LPS em macrófagos. Contrariamente, as acilações da rutina não alteraram significativamente a atividade da mesma. Por outro lado, as experiências realizadas com SNAP, um doador de NO, indicam que a atividade da rutina e derivados decorre de sua capacidade de “captar” NO (atividade antioxidante). As alterações físico-químicas geradas pelas acilações da polidatina, tornaram essas moléculas citotóxicas, sugerindo o seu potencial anti-tumoral, a ser futuramente investigado. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,839 | Terapia fotodinâmica em combinação com quimioterapia : uma opção no osteossarcoma | Osteossarcoma,Quimioterapia,Fotoquimioterapia,Terapia combinada | O osteossarcoma é o tipo de sarcoma mais comum e corresponde acerca de 45% de todos os cancros ósseos. A toxicidade dos fármacos antineoplásicos convencionalmente utilizados no seu tratamento é muitas vezes limitante da dose aplicada ou até mesmo a razão para a interrupção da quimioterapia, sendo por isso emergente a necessidade de novas terapias e estratégias para o combate do osteossarcoma, particularmente os casos de doença irressecável. Este projeto surge no sentido de responder a esta necessidade, já abordada em trabalhos prévios a esta dissertação, de ampliar a utilização da terapia fotodinâmica em oncologia com a combinação com outras estratégias terapêuticas como a quimioterapia. Neste trabalho, pretendeu-se estudar a terapia fotodinâmica com base no fotossensibilizador BBr2HPP, tendo em conta os conhecimentos já adquiridos por este grupo de investigação nesta área. Relativamente aos estudos in vitro, o ensaio MTT permitiu verificar o efeito citotóxico que três dos fármacos mais usados de quimioterapia têm na inibição da proliferação celular tendo-se verificado que são dependentes da concentração em que estão presentes. A linha tumoral MNNG-HOS, demonstrou ser sensível ao efeito dos três fármacos quimioterapêuticos estudados. Sabendo que determinados fotossensibilizadores exibem uma elevada seletividade para as células tumorais, estudou-se também o efeito da terapia de combinação numa linha não tumoral, a linha humana de fibroblastos HFF1, não se verificando diferenças estatisticamente significativas. A associação da terapia fotodinâmica com a quimioterapia diminuiu significativamente a atividade metabólica das células tumorais, bem como a viabilidade celular, de forma dependente da concentração de fotossensibilizador e da concentração e do tempo de administração, levando a um efeito sinérgico em combinação com a doxorrubicina e a cisplatina. Demonstrou-se que o decréscimo da atividade metabólica, nas células submetidas à combinação entre a PDT e a doxorrubicina, está relacionado com os mecanismos de morte celular, a apoptose e a necrose, associados a disfunção mitocondrial, a produção intracelular de espécies reativas de oxigénio, e a danos no DNA. XIV Paralelamente, nos estudos in vivo verificou-se que a taxa de crescimento tumoral foi inferior quando os ratinhos foram submetidos à combinação entre a PDT e a doxorrubicina. Foi possível também verificar o sucesso da terapia de combinação sem a penalização do bem-estar dos ratinhos, reforçando mais uma vez o potencial terapêutico. Os estudos de histologia vieram confirmar os resultados promissores obtidos in vitro., os quais mostraram haver uma percentagem necrose superior na terapia fotodinâmica e na terapia combinada do que na terapia apenas com doxorrubicina. Assim, foi possível com este projeto verificar que a terapia fotodinâmica em combinação com a quimioterapia constitui uma modalidade terapêutica com efeito sinérgico que poderá fazer diferença no tratamento do osteossarcoma. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,840 | Colesterol oxidase, hormonas sexuais e suscetibilidade à tuberculose : um estudo exploratório | Mycobacterium tuberculosis,Tuberculose,Colesterol oxidase,Oxirredutases,Esteróis | A Tuberculose (TB) infecta cerca de um terço da população mundial e é responsável por mais de 1,5 milhões de mortes por ano. O seu agente etiológico, Mycobacterium tuberculosis (Mtb) é facilmente disseminado quando pessoas infetadas tossem e libertam gotículas transportando bacilos que são inalados por pessoas não infetadas. Os obstáculos ao controle da TB manifestamse na dificuldade do tratamento de pacientes em países em desenvolvimento, na sinergia com VIH e doenças crónicas como a diabetes e na emergência de resistências a diversos antibióticos em uso há décadas. A incidência de TB é em média 2-3 vezes mais elevada em homens do que em mulheres (Neyrolles & Quintana-Murci, 2009). Os fatores socioeconómicos e culturais podem criar barreiras no acesso a cuidados de saúde, particularmente nos países em desenvolvimento, levando a um menor número de diagnósticos nas mulheres. No entanto, alguns mecanismos biológicos podem ser responsáveis por uma parte significativa dessa diferença entre sexos. O papel do género foi investigado em algumas doenças infeciosas e não infeciosas, mas há ainda pouca informação sobre a influência biológica do género na TB. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar o papel de hormonas sexuais, estrogénios e seus análogos, na inibição da enzima colesterol oxidase de M. tuberculosis uma enzima considerada crucial para sua a patogénese (Klink et al., 2013). Dos 250 genes anotados em Mtb como envolvidos no metabolismo de lípidos e ácidos gordos (Wipperman et al., 2014) foram selecionados para este trabalho dois genes que codificam proteínas anotadas como sendo responsáveis pela oxidação de colesterol: colesterol oxidase/ChoD (Rv3409c) e colesterol desidrogenase/3ß-HSD (Rv1106c). A função do gene Rv3409c está possivelmente mal anotada, não tendo sido detetada atividade de colesterol oxidase, sendo que o seu substrato fisiológico permanece um mistério. Estudos anteriores concluíram que 3ß-HSD é a única enzima de Mtb que oxida colesterol. Entre vários compostos esteróides testados como possíveis substratos de 3ß-HSD apenas colesterol, 16α- hidroxipregnenolona, pregnenolona e DHEA (desidroepiandrosterona) foram oxidados, mas com eficiência decrescente e apenas finasterida e colestanotriol inibiam ligeiramente a atividade nas condições testadas, e nenhuma das hormonas sexuais testadas inibiu a atividade de 3ß-HSD. Este estudo desvenda novos dados sobre uma enzima essencial ao metabolismo de colesterol em Mtb, o que poderá levar ao desenvolvimento de novas estratégias de intervenção terapêutica, Colesterol Oxidase, Hormonas Sexuais e Suscetibilidade à colocando-nos mais próximos de desvendar novas pistas que possam ajudar a compreender a distribuição desequilibrada de TB entre os géneros masculino e feminino. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,841 | Derivados semissintéticos de compostos naturais monoterpénicos : preparação e avaliação da citotoxicidade | Monoterpenos,Química farmacêutica,Carvona | A pesquisa de produtos naturais continua a explorar uma grande quantidade de compostos lead que podem ser utilizados para o desenvolvimento de novos medicamentos pela indústria farmacêutica. Existe uma imensa e variada quantidade de compostos monoterpénicos que já deram provas dos seus efeitos biológicos, atuando como agentes bacterianos, sedativos, antitumorais e anti-inflamatórios. A carvona é um composto monoterpénico, encontrado naturalmente em diversos óleos essenciais de plantas, sendo abundante em plantas como a alcaravia (Carumcarvi), o endro (Anethumgraveolens) e a hortelã (MenthaSpicata). Este monoterpeno aparece na natureza sob as suas formas enantioméricas: a R-(-)-carvona e a S-(+)-carvona. A carvona já deu provas dos seus potenciais efeitos farmacológicos, bem como alguns dos seus derivados semissintéticos. Contudo, alguns dos compostos que mostram potencial em atuar farmacologicamente, principalmente na modulação de mecanismos de inflamação, apresentam uma elevada toxicidade, o que muitas vezes anula o seu potencial terapêutico. Considerando isto, a avaliação da citotoxicidade de compostos é uma prioridade e um ensaio prévio necessário para que a partir deste se possam selecionar os compostos sintetizados para avaliação do potencial farmacológico. Neste trabalho, procedeu-se à síntese de derivados semissintéticos da carvona (isómero R e S), utilizando métodos já usados pelo grupo de Química Farmacêutica da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra, local onde se desenvolveu também este projeto. Numa primeira fase, obtiveram-se derivados epoxidados (resultantes da epoxidação na dupla ligação exocíclica ou na cetona α,β-insaturada) de ambos os isómeros da carvona, seguidos da abertura do epóxido, tanto redutiva, como por meio de nucleófilos. Obtiveramse vários derivados com a função epóxido, a função álcool e a função éter, além das funções cetona e dupla ligação existentes nos enantiómeros da carvona. Na segunda parte deste trabalho realizada no grupo de “Inflamação e controlo de qualidade celular no envelhecimento da cartilagem e na osteoartrite” do Centro de Neurociências e Biologia Celular, procedeu-se à avaliação da citotoxicidade dos derivados semissintéticos da carvona obtidos. Para isso, foi cultivada uma linha celular de macrófagos murinos, a linha RAW 264.7, na presença dos vários compostos teste em diferentes concentrações e a viabilidade celular das células foi avaliada pelo método da redução da resazurina. Os resultados obtidos foram usados para estabelecer uma correlação estruturaatividade dos compostos derivados da carvona obtidos e a sua capacidade para pôr em causa a viabilidade celular. Foi observado que os compostos que possuem o grupo epóxido na sua estrutura apresentam citotoxicidade na concentração mais alta em estudo, e que todos os outros compostos testados ou não apresentam citotoxicidade em nenhuma das concentrações estudadas ou apresentam citotoxicidade muito perto do valor de corte, para a concentração mais alta em estudo. Estes resultados permitem estabelecer a base necessária para o futuro estudo de relação estrutura-atividade, quer para a atividade anti-inflamatória, quer para outros efeitos farmacológicos que venham a ser considerados pertinentes. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,842 | Desenvolvimento de uma técnica de HPLC para a quantificação de colistina em plasma humano e a sua monitorização sérica em doentes internados no CHUC | Colistina,Farmacologia,Cromatografia líquida de alta pressão,Monitorização medicamentosa,Farmacocinética | A Colistina é um antibiótico catiónico polipeptídico constituído por pelo menos 30 componentes, dos quais se destacam a Colistina A e a Colistina B, e possui 5 grupos amina primários que lhe conferem características básicas. Na prática clínica é administrada como tratamento de última linha para infeções por bactérias Gram-negativo multirresistentes, sob a forma de colistimetato de sódio, um profármaco aniónico e instável, que é rapidamente hidrolisado em Colistina, o metabolito farmacologicamente ativo. Hoje em dia, o desenvolvimento de resistência bacteriana à Colistina é uma realidade, principalmente pelas bactérias Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Klebsiella pneumoneae. Deste modo, é de extrema importância a monitorização terapêutica da Colistina, não só pelo aumento constante das resistências antibacterianas, como também pela toxicidade desencadeada por este fármaco que, desde cedo, suscitou preocupação pelos profissionais de saúde. No Centro Hospitalar da Universidade de Coimbra, E. P. E. (CHUC, E. P. E.), a utilização deste fármaco tem vindo a crescer novamente, sendo que para a sua monitorização no plasma, é necessário recorrer a uma técnica sensível e seletiva, que atualmente ainda não se encontra disponível. O objetivo principal do presente trabalho consistiu em desenvolver e validar uma técnica de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) que quantificasse, com exatidão e precisão, a Colistina em plasma humano, sendo posteriormente utilizada na monitorização sérica do mesmo fármaco em doentes internados no CHUC, E. P. E.. Deste modo, com esta técnica poder-se-á, no futuro, determinar as concentrações séricas de cada doente e a cinética da Colistina para individualizar o seu regime posológico, visando aumentar a eficácia e segurança do tratamento das infeções, ao mesmo tempo que se combate as resistências hospitalares. A separação cromatográfica da Colistina A e B e do padrão interno (PI; cloridrato de anfetamina) foi alcançada em menos de 17 minutos, com recurso a uma coluna C18 de fase reversa a 30°C pela aplicação de um programa de eluição por gradiente utilizando uma fase móvel constituída por acetonitrilo (A) e água ultrapura (B). A deteção foi feita nos comprimentos de onda de excitação/emissão de 343/500 nm. A curva de calibração foi linear (r2=0,993) na gama de concentrações de 0,09-9,0 μg/mL e o limite de quantificação foi definido como sendo 0,09 μg/mL. A precisão global não ultrapassou os 13,85% e a exatidão variou entre os -3,83 e 14,49%. 14 A técnica de HPLC desenvolvida e apresentada nesta dissertação, permitiu a quantificação da Colistina em amostras plasmáticas de doentes, sem interferência dos fármacos concomitantemente administrados. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,844 | Investigação clínica com nutracêuticos | Suplementos dietéticos,Brassica | evolução que acompanhou os últimos anos veio confirmar algo que já se afirmava há vários séculos: existe uma relação evidente entre a nossa alimentação e o nosso estado de saúde. Vivemos num mundo em que nos preocupamos cada vez mais com o nosso estado de saúde e a utilização de medicamentos é cada vez maior, particularmente a automedicação, o que se pode tornar num problema de saúde pública. Paralelamente, a nossa dieta também tem sido alvo de alterações, devido ao estilo de vida cada vez mais agitado e stressante. Muitas vezes surge a necessidade de compensar erros que cometemos ou suprir necessidades, aumentando também o recurso a suplementos alimentares, alimentos funcionais e nutracêuticos, agentes que vou definir e diferenciar ao longo deste trabalho. A emergência dos nutracêuticos surgiu assim num ambiente proporcionado por diversos fatores, que quando adotados em conjunto tornam-no atraente e convidativo para novos produtos que solucionem questões relacionadas com a saúde. O primeiro fator, já anteriormente referido, relaciona-se com os avanços na compreensão da relação entre nutrição e saúde, também a nível molecular, que conduziu a novas abordagens. Consequentemente, a preocupação crescente dos consumidores com a saúde, bem como o aumento da sua credibilidade para com estes novos agentes, constitui o segundo fator. Depois, a oportunidade de regulamentação de novos produtos de saúde e por último, mas não menos importante, o interesse crescente de empresas alimentícias, farmacêuticas e de biotecnologia que procuram novas oportunidades de crescimento. Os Nutracêuticos representam uma área onde a pesquisa biomédica tem crescido bastante. Um nutracêutico pode ser resumidamente definido como uma substância que possui benefício fisiológico ou fornece proteção contra doenças crónicas. Possuem múltiplas propriedades terapêuticas, podendo ser utilizados para melhorar a saúde, retardar o processo de envelhecimento, prevenir doenças crónicas, aumentar a esperança de vida, ou suportar a estrutura ou função do corpo humano. É uma categoria de produtos pouca regulamentada, com definições não consensuais, mas que tem sido alvo de grande pesquisa, representando um segmento de mercado com rápido crescimento. Os nutracêuticos não se inserem facilmente nas categorias jurídicas de alimentos ou medicamentos, e por isso, muitas vezes acabam por cair numa espécie de buraco negro entre ambos. As suas propriedades funcionais e capacidade de contribuir na prevenção e/ou tratamento de uma determinada doença (benefícios fisiológicos), bem como na redução do aparecimento de doenças crónicas, fazem 9 com que sejam um alvo apetecível para novos estudos. Apesar de se terem registado muitos avanços nos últimos anos, há ainda muito mais por descobrir. Por essa razão, neste trabalho proponho-me a fazer uma abordagem sobre o estado de arte da investigação clinica com nutracêuticos, começando com uma referência aos pontos que os distinguem quer dos suplementos alimentares, quer dos alimentos funcionais. A lista de nutracêuticos que está a ser estudada está continuamente a mudar, refletindo a evolução do mercado, da investigação e o aumento do interesse do consumidor. É absolutamente imperativo que se realizem mais estudos para justificar o uso seguro e eficaz dos nutracêuticos. Nesse sentido, o meu principal objetivo é responder como se pode fazer um estudo clínico com um nutracêutico. No meu trabalho, irei abordar particularmente um estudo, resultado de uma parceria entre a Universidade de Aveiro e Universidade de Coimbra, denominado Brassica. O termo representa uma espécie de plantas que inclui vários vegetais como couves brancas e vermelhas, brócolos, couve-flor ou couves de Bruxelas, com teores elevados de uma grande gama de compostos bioativos (CB). O cultivo e processamento industrial destas plantas produz uma elevada quantidade de resíduos orgânicos, em particular no caso dos brócolos e couve-flor, visto que só uma pequena parte é utilizada. O principal objetivo do projeto é agregar valor à produção de culturas de Brassica e explorar formas de valorização das partes não utilizada, nomeadamente raízes, caules e folhas, convertendo-os em produtos de valor. Simultaneamente, iremos estar a contribuir para a redução da pegada ecológica e da descarga de resíduos em aterros. Como tal, este projeto apresenta-se também como uma mais-valia em termos de proteção ambiental. O que se pretende é então aproveitar as partes não utilizadas destas espécies de plantas e delas extrair os compostos bioativos passíveis de exercerem ação. Posteriormente, desenvolver-se-á um produto nutracêutico, com potencial para ser utilizado em doentes dislipidémicos devido à capacidade de reduzir os níveis de colesterol nestes doentes. A eficácia e segurança deste produto terão de ser devidamente avaliadas num estudo clínico com um design apropriado. Brassica será o meu estudo de caso, e o resultado a apresentar será um protocolo de estudo, definindo como se pode fazer a investigação clínica dos componentes do estudo Brassica, tendo em vista testar a sua eficácia, mas também a sua segurança. O meu trabalho irá também tentar descrever como deverão ser estudados este tipo de compostos, tentando responder qual o estudo clínico que será mais indicado para testar extratos de alimentos. Como deverão os extratos de alimentos, que também são 10 nutracêuticos, ser estudados no Homem? Quando deixam de ser considerados nutracêuticos e passam a ser considerados medicamentos? Estas são algumas das questões que irei tentar responder, tendo em conta as considerações éticas aplicáveis a esta situação. A fraca regulamentação na área, contrastante com a forte permeabilidade entre estas diferentes categorias são fatores limitativos na pesquisa realizada com nutracêuticos e na sua colocação no mercado com uma determinada alegação de saúde. Todas estas condições fazem dos nutracêuticos e da investigação clínica que os visa, um tema atual com elevado interesse e grandes perspetivas no futuro. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,849 | Relatório de estágio: mestrado em análises clínicas | Relatório,Técnicas e métodos de laboratório | O presente relatório refere-se ao estágio realizado no Centro Hospitalar São João do Porto, no âmbito das análises clínicas. O estágio teve como principal objectivo a minha integração no Serviço de Patologia Clínica do hospital, proporcionando-me a aquisição de habilidades práticas na execução das técnicas laboratoriais, sempre associadas a uma aplicação teórica dos conhecimentos adquiridos durante o mestrado, que me permita fazer a avaliação e interpretação dos resultados. As áreas aprofundadas neste relatório são a Bioquímica Clínica e a Imunologia | Ciências Médicas e da Saúde |
10,850 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | Com o presente relatório de estágio realizado, no âmbito do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra, nos Serviços de Patologia Clínica (SPC) do Hospital Sousa Martins – Unidade Local de Saúde (ULS) da Guarda e Centro Hospitalar Médio Tejo (CHMT) – Unidade Hospitalar de Tomar, pretende-se descrever todas as atividades desenvolvidas. Após uma breve introdução às instituições de acolhimento e descrição dos objetivos, será realizada a caracterização do SPC do CHMT, onde tive a oportunidade de colocar em prática, desenvolver e aprofundar, os saberes e conhecimentos adquiridos durante a frequência do mestrado. O Estágio englobou as diferentes áreas laboratoriais, nomeadamente a Hematologia, Microbiologia, Bioquímica e Imunologia. Em termos estruturais, será caracterizada a organização e funcionamento do Serviço, os equipamentos existentes e os princípios das metodologias utilizadas. Serão descritas com maior pormenor as atividades desenvolvidas e parâmetros analíticos executados nas áreas da Microbiologia e Imunologia. Será ainda descrito o controlo de qualidade realizado nestes setores, uma atividade que contribui para garantir que as determinações realizadas sejam credíveis e fiáveis. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,851 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico,Anemia,Tromboembolia venosa,Neoplasias | As complicações associadas ao doente oncológico em tratamento são comuns e preocupantes, exigindo uma gestão e acompanhamento clínico por forma a manter a sustentabilidade e eficácia do plano terapêutico oncológico e a qualidade de vida do doente. A neutropenia febril, a anemia e a trombose estão entre as condições mais prevalentes e exigem particular atenção, por colocarem em risco a vida do doente. O risco de neutropenia febril em doentes sob tratamento oncológico depende de múltiplos fatores como idade do doente, comorbilidades, tipo de tumor e regimes de quimioterapia utilizados. Tendo em conta que em situação de neutropenia as infeções se desenvolvem mais rapidamente, está preconizada a avaliação laboratorial o mais precocemente possível para o esclarecimento das causas para a febre (infeção, a própria doença, fármacos ou trombose venosa profunda). A anemia no doente com cancro é muitas vezes multifatorial e pode ser atribuída às comorbilidades subjacentes ou ao cancro per si, como fator precipitante ou agravante da anemia. O efeito mielossupressor da quimioterapia sobre a medula óssea contribui significativamente para a anemia, assim como a radioterapia. Os doentes com cancro estão em alto risco de desenvolver acidentes tromboembólicos e são também mais suscetíveis a desenvolver complicações relativamente ao tratamento anticoagulante. O cancro, só por si, condiciona um estado pró-trombótico, havendo necessidade comprovada de seguimento do doente com parâmetros laboratoriais. Neste trabalho procura-se desenvolver cada um destes temas na perspetiva de quem trabalha no laboratório, enquadrando as situações e a sua tradução nos resultados laboratoriais. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,852 | Relatório de estágio no Serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar S. João, Porto | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | O presente relatório de estágio, no âmbito do Mestrado em Análises Clínicas, contém informação relativa às atividades desenvolvidas durante o estágio no Serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar S. João (CHSJ), decorrido entre 16 de Dezembro de 2015 e 27 de Maio de 2016. Após uma breve introdução sobre o Serviço de Patologia Clínica, apresenta-se uma descrição mais detalhada das áreas de Microbiologia e Hematologia Clínicas: equipamentos, princípios das metodologias utilizadas e abordagem a alguns dos principais parâmetros laboratoriais com o respetivo enquadramento teórico e importância clínica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,853 | Relatório de estágio realizado no âmbito do Mestrado de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | O presente relatório tem como objetivo expor as atividades desenvolvidas no estágio realizado no serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra, integrado no Mestrado de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. Microbiologia e Hematologia são as áreas laboratoriais descritas mais pormenorizadamente, apesar do estágio ter incluído outras áreas - Bioquímica e Imunologia. Serão abordadas as metodologias utilizadas e a interpretação de resultados, acompanhados de um enquadramento teórico. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,854 | Avaliação da resistência antimicrobiana de Aeromonas sp. e Enterobacteriaceae em robalo e dourada provenientes de sistemas de aquacultura | Peixes,Farmacorresistência bacteriana,Resistência microbiana aos medicamentos,Dourada,Robalo | Durante muitos anos, os antibióticos foram utilizados para assegurar a saúde dos animais e, assim, prevenir doenças. A administração de antibióticos tem impacto sobre o ambiente e pode conduzir ao aparecimento de resistência antimicrobiana, tanto em bactérias comensais intestinais humanas como em bactérias de peixe e no meio ambiente, com a possível propagação de genes de resistência nas populações bacterianas. Assim, o principal objectivo deste projecto foi avaliar a susceptibilidade aos antimicrobianos em bactérias potencialmente patogénicas para os seres humanos, particularmente em Aeromonas sp. e enterobactérias isoladas de robalo e dourada, a partir de sistemas adquiridos no comércio regional de aquacultura. O conteúdo intestinal e branquias foram colectados de oito robalo e seis douradas com origem em sistemas de aquacultura de Portugal, Grécia e Espanha. Inicialmente, 151 colónias fenotipicamente diversas foram colectadas a partir de meios selectivos para bactérias Gramnegativas (MacConkey e Aeromonas agar), e testados para susceptibilidade antimicrobiana contra cinco antibióticos representantes de diferentes famílias de antimicrobianos pelo método de difusão em disco. A maioria das bactérias são susceptíveis (72%) para os antibióticos testados. Só 43 bactérias mostraram resistência a um ou mais antibióticos. A maioria das bactérias Gramnegativas mostrou resistência a amoxicilina (86%), seguido de trimetoprim (58%), ácido nalidíxico (23%), cloranfenicol (21%) e trimetoprim / sulfametoxazol (7%). Todas as bactérias foram susceptíveis à tetraciclina. Estas bactérias foram presumivelmente identificados pelos métodos fenotípicos e, em seguida, por meio da amplificação de 16S rDNA e sequenciação. Para além da identificação de Aeromonas sp. e Enterobacteriaceae, foi possível encontrar outras bactérias que cresceram nos meios anteriores. A resistência foi observada em 30% das Aeromonas sp., 23% Stenotrophomonas sp., 19% de Enterobacteriaceae (Pantoea sp., Buttiauxella sp., Klebsiella sp. e Erwinia sp.), 16% de Pseudomonas sp., 5% de Acetobacter sp., 5% de Achromobacter sp. e 2% em Vibrio sp.. As -lactamases TEM e SHV foram rastreadas por PCR nos isolados resistentes à amoxicilina, mostrando que 26 das estirpes produzem uma enzima do tipo blaTEM, associada à resistência à penicilina. Foi também isolado o plasmídeo com um comprimento> 10 Kb, em uma Aeromonas sp. resistente a amoxicilina e trimetoprim, mas não foi possível observar a sua transferência para a Escherichia coli J53 receptora (azida resistente) por meio de ensaios vii de conjugação. Em conclusão, o robalo e dourada disponíveis ao consumidor final não contêm bactérias com uma alta taxa de resistência aos antibióticos, o que pode indicar uma entrega sábia e controlada dos antibióticos a peixes de aquacultura. No entanto, deve notar-se a importância da monitorização contínua da administração de antibióticos a animais para o consumo humano, bem como estudos para avaliar o potencial de resistência das bactérias patogénicas e a eventual transferência de determinantes de resistência em bactérias humanas, animais e ambientais. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,858 | Custo-efetividade da utilização de um teste farmacogenético para o Alopurinol em doentes portugueses diagnosticados com gota | Gota,Alopurinol,Análise custo-benefício,Teste farmacogenético | Introdução: Nos últimos anos, fruto dos recentes avanços realizados ao nível da farmacogenética, foi identificado em indivíduos portadores do alelo HLA-B*5801 um risco acrescido de ocorrência de reações de Síndrome de Stevens-Johnson/Necrólise Epidérmica Tóxica (SSJ/NET) quando tratados com alopurinol. Tendo em conta o papel fundamental do alopurinol no tratamento hipouricemiante de doentes diagnosticados com Gota, vários autores têm proposto a utilização de um teste farmacogenético para este medicamento. Objetivos: Avaliar a relação custo-efetividade da utilização de um teste farmacogenético para o alopurinol em doentes portugueses de origem caucasiana diagnosticados com Gota, face à sua não utilização. Complementarmente, pretendeu-se estimar um custo máximo de comercialização para o teste e avaliar o impacto da sua introdução generalizada sobre o orçamento anual do SNS. Métodos: Todas as sequências de eventos, relacionadas com as alternativas em análise, foram estruturadas num modelo analítico sob a forma de uma árvore de decisão, para um horizonte temporal de três meses. Este estudo foi realizado para a perspetiva dos pagadores e para a perspetiva do Serviço Nacional de Saúde (SNS), considerada como entidade financiadora. Os dados de efetividade foram estimados a partir de estudos publicados e sempre que possível foram utilizados dados relativos à população portuguesa. As relações de custo-efetividade para cada alternativa foram comparadas através do cálculo da razão incremental de custo-efetividade (RICE), cujo valor traduz o custo adicional por cada reação de SSJ/NET evitada. A incerteza associada aos parâmetros utilizados foi avaliada através de análise de sensibilidade univariada. Resultados: A utilização do teste foi associada a uma diminuição de 0,00125 reações de SSJ/NET por cada doente tratado com alopurinol comparativamente à alternativa base. Foram estimados custos diretos de tratamento de 11,50€ e 53,84€ para a perspetiva dos pagadores e de 9,55€ e 51,81€ para a perspetiva do SNS. A conjugação destes resultados permitiu calcular uma razão incremental de custo-efetividade de 33.872€/reação evitada para a perspetiva dos pagadores e de 33.808€/reação evitada para a perspetiva do SNS. Considerando que o SNS poderá estar disposto a financiar o teste até ao ponto em que o custo suportado pela intervenção seja igual ao do tratamento de uma reação de NET foi 10 estimado um preço máximo de comercialização para o teste de 8,82€. Ao preço unitário de 45,30€, a implementação generalizada do teste seria responsável por um impacto sobre o orçamento anual do SNS de +419.243,04€. Considerando o valor do preço máximo estimado, o impacto orçamental foi avaliado em apenas +55.792,80€. Conclusões: De acordo com os valores de custo incremental obtidos para ambas as perspetivas, não será de prever que, ao preço atual de 45,30€, o SNS tome uma decisão no sentido de considerar a utilização do teste como uma opção custo-efetiva. Para além disso, a implementação generalizada desta tecnologia seria responsável por uma alocação significativa de recursos do SNS. No entanto, admite-se que a utilização do teste poderá ser considerada pelo SNS como uma alternativa vantajosa sempre que os custos a financiar por cada intervenção não ultrapassem o valor máximo de 8,82€. A realização deste trabalho permitiu, ainda, identificar importantes lacunas de informação, principalmente relacionadas com a escassez de dados clínicos referentes à incidência das reações de SSJ/NET em doentes tratados com alopurinol e com o impacto deste tipo de reações adversas sobre a qualidade de vida dos doentes. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,868 | Análise comparativa dos perfis morfológicos e de libertação em implantes oculares de acetazolamida praparados por electrospinning | Implantes de medicamentos,Acetazolamida,Implantes absorvíveis,Administração oftálmica,Sistemas de libertação de medicamentos,Tecnologia farmacêutica | A deficiência visual que muitas vezes leva à cegueira está entre as doenças que causam maior taxa de morbidade. Os erros refrativos, o glaucoma, as cataratas e as infeções são alguns exemplos. O objetivo deste trabalho é criar um implante biodegradável obtido a partir de fibras coaxiais contendo o fármaco disperso – acetazolamida. O implante será inserido no segmento posterior do globo ocular do doente em contexto de cirurgia de ambulatório e o fármaco será libertado gradualmente, não necessitando de injeções periódicas, ao contrário das injeções intravítreas de esteroides. Durante este trabalho desenvolveram-se, em primeiro lugar, implantes sem revestimento, compostos por membranas fibrosas produzidas por electrospinning e enroladas na forma de pequenos cilindros. O fármaco foi imobilizado no interior das fibras durante a sua preparação, sendo estas fibras compostas por PCL (policaprolactona) e lutrol F127 (poli (oxietileno-b-oxipropileno-b-oxietileno)). Produziram-se fibras com uma estrutura uniaxial (compostas pela mistura de PCL, lutrol F127 e acetazolamida) e com uma estrutura coaxial (com um núcleo de lutrol F127 com acetazolamida e um revestimento de PCL). Os implantes preparados apresentaram uma velocidade de libertação de fármaco muito rápida, o que levou à preparação de novos implantes, incorporando as mesmas formulações que os primeiros, mas com a adição de um filme de revestimento, preparado por solvent casting e composto por PCL e lutrol F127 ou por PCL e luwax EVA 3 (poli (etileno-co-acetato de vinilo)). Os implantes e os seus constituintes (membranas fibrosas e filmes de revestimento) foram caracterizados por várias técnicas, tais como: SEM, FTIR-ATR, análise térmica simultânea e determinação de ângulos de contacto. Adicionalmente, procedeu-se à obtenção dos perfis de libertação in vitro da acetazolamida, em PBS e a 37ºC, utilizando um método espetrofotométrico para quantificar o fármaco libertado ao longo do tempo. Os resultados mostraram que o perfil de libertação da acetazolamida a partir dos implantes com revestimento é consideravelmente mais lenta e gradual, dado que estes sistemas apresentam uma barreira adicional à difusão do fármaco. No caso do revestimento contendo lutrol F127, polímero hidrofílico, ocorreu intumescimento do revestimento diminuindo a taxa de libertação do fármaco. No que se refere ao revestimento contendo luwax EVA 3, polímero hidrofóbico, a sua degradação por erosão permitiu diminuir a taxa de libertação do fármaco. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,873 | Relatório de Estágio em Análises Clínicas | Técnicas e métodos de laboratório | O presente relatório tem como objetivo relatar as atividades desenvolvidas durante o estágio realizado no âmbito do Mestrado de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O estágio decorreu no Serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar de São João (CHSJ), no Porto e foi realizado em várias áreas, nomeadamente Microbiologia, Hematologia Laboratorial, Química Clínica e Imunologia. O relatório aborda as áreas de Microbiologia e Hematologia Laboratorial, realçando a importância das diferentes análises, os equipamentos e metodologias utilizadas e a respetiva interpretação e validação dos resultados, referindo a importância da realização do controlo de qualidade. Foi possível integrar uma rotina normal de trabalho aplicando vários conhecimentos e adquirir uma visão global relativamente à aplicabilidade clínica de um laboratório de análises clínicas inserido num hospital de referência como é o CHSJ | Ciências Médicas e da Saúde |
10,874 | Preparação de triterpenóides e avaliação da atividade antiparasitária em tripanossomatídeo Leishmania infantum | Leishmanias,Leishmaniose | A leishmaniose é uma doença infeciosa parasitária endémica em 98 países, predominantemente em regiões tropicais e subtropicais, onde afeta cerca de 12 milhões e coloca em risco mais de 350 milhões de pessoas. O agente etiológico é o tripanossomatídeo do género Leishmania e sua a transmissão ocorre através da picada do flebótomo. Durante o ciclo de vida os parasitas são digenéticos e expostos a diferentes ambientes: um extracelular dentro do hospedeiro invertebrado e um intracelular dentro do hospedeiro vertebrado. Consequentemente, como estratégia de sobrevivência, a Leishmania adota dois estádios morfologicamente distintos: o promastigota e o amastigota. A virulência da Leishmania spp. que causa a infeção e a resposta originada pelo sistema imunitário do hospedeiro são fatores determinantes na manifestação clínica da parasitose: leishmaniose cutânea, leishmaniose mucocutânea e leishmaniose visceral. Segundo a OMS a leishmaniose visceral tem vindo a surgir como uma complicação associada a doenças que comprometem o sistema imunitário, como o VIH, alterando os padrões tradicionais epidemiológicos da transmissão de Leishmania. Os fármacos utilizados possuem limitações nomeadamente o preço, níveis de toxicidade, sucesso reduzido e devido à monoterapia estão associados ao desenvolvimento de resistência. É, portanto, necessário desenvolver terapias alternativas e caracterizar novos alvos terapêuticos para obter tratamentos mais eficientes, específicos e menos tóxicos. Na literatura são encontrados alguns estudos que relatam a atividade anti-Leishmania de triterpenos derivados da betulina e do ácido betulínico. Idealmente, a modificação química destes produtos naturais pode melhorar significativamente a sua atividade e manter os níveis de toxicidade geralmente baixos, sendo por isso uma área de interesse crescente na descoberta de novos compostos com atividade anti-Leishmania. Com o objetivo de estudar a atividade leishmanicida dos derivados da betulina e do ácido betulínico, foram realizados ensaios de viabilidade celular em Leishmania infantum. Entre os 20 compostos testados, três compostos apresentaram elevada atividade anti-Leishmania (CI50<100 μM), seis atividade moderada (100 <CI50> 200 μM) e onze não apresentaram atividade biológica significativa (CI50> 200 μM), A análise da estrutura/atividade dos derivado da betulina indicou que geralmente a carbamoilação das posições C3 e/ou C28 com a inserção do grupo 1,2,4-triazole nessas posições resulta num aumento da atividade leishmanicida, enquanto as mesmas modificações ii realizadas com a adição do grupo 2-metilimidazole conduz à diminuição da atividade, demonstrando-se, assim, a importância do grupo triazole na atividade destes compostos. Os resultados obtidos sugerem que as modificações em C20 e C29 têm um impacto positivo na atividade anti-leishmanicida dos derivados da betulina e que a acetilação das posições C3 e/ou C28 diminui a atividade biológica dos derivados. Nos derivados do ácido betulínico a esterificação dos grupos hidroxilos em C3 e C28 na maioria dos casos reteve a atividade leishmanicida e a oxidação do grupo hidroxilo secundário em C3 aumentou a ação antiparasitária. Os compostos mais ativos, ou seja, que induziram a redução do número de promastigotas sob menor concentração, foram o derivado da betulina 24 (CI50 de 48,68 μM) e o derivado do ácido betulínico 31 (CI50 de 37,54 μM). Foi também objetivo estudar os mecanismos de ação farmacológica dos compostos mais ativos de forma a elucidar possíveis alvos moleculares de atividade anti-Leishmania. Deste modo, estudaram-se os efeitos dos derivados 24 e 31 no ciclo celular e na morfologia do parasita. Os resultados obtidos por citometria de fluxo indicam que os derivados betulínicos testados não alteram de forma significativa o ciclo celular. Deste modo, tudo indica que o mecanismo de ação principal dos derivados betulínicos testados não deverá estar relacionado com a inibição das topoisomerases, enzimas descritas como potenciais alvos celulares. As alterações morfológicas induzidas pelo composto 31, nomeadamente células arredondadas, mais pequenas e com flagelos mais curtos, sugerem que o mecanismo de ação possa estar relacionado com alterações no citoesqueleto, na permeabilidade membranar e/ou na atividade mitocondrial. Em conclusão, os resultados demonstraram a atividade leishmanicida dos derivados betulínicos e permitiram identificar os grupos funcionais mais importantes para a obtenção dessa atividade biológica. As modificações no grupo hidroxilo secundário da posição C3, na porção de alceno da posição C20 e no grupo hidroxilo primário da posição C28 conduziram à obtenção de diversos derivados betulínicos com atividades anti-Leishmania distintas. É de destacar que a adição de grupos triazóis aumenta o potencial dos derivados da betulina contra a Leishmania | Ciências Médicas e da Saúde |
10,877 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | Este relatório de estágio tem como finalidade descrever a minha experiencia no Laboratório Arunce, na Lousã, desenvolvendo, de um modo geral, todas as valências de um laboratório de análises clínicas, nomeadamente Microbiologia/Parasitologia, Endocrinologia, Imunologia mas destacando e aprofundando as áreas de Hematologia e Bioquímica. Apesar dos inúmeros parâmetros determinados neste laboratório, não são abordados todos, sendo referidos apenas os que são determinados com mais frequência na rotina. Em particular, são discutidos os mais relacionados com as áreas aprofundadas. A componente analítica subjacente aos estudos quantitativos realizados é devidamente descrita em termos das metodologias e fundamentos das técnicas utilizadas na determinação de parâmetros, bem como fundamentação teórica fundamental para a interpretação de resultados. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,881 | Novos processos de fluoração em química farmacêutica industrial | Flúor,Halogenação,Métodos,Química farmacêutica | O reconhecimento da importância da química organofluorada no âmbito da química medicinal tem sido evidente nas últimas décadas. As substâncias-ativas fluoradas disponíveis no mercado e prescritas na prática clínica, bem como o número crescente de publicações sobre este assunto podem, de facto, comprová-lo. A compreensão dos processos biológicos e o conhecimento dos efeitos do flúor na estrutura e na reatividade das moléculas têm desempenhado um papel muito importante para a utilização do flúor no desenvolvimento de novas moléculas biologicamente ativas. Devido à elevada eletronegatividade deste halogéneo, a introdução estratégica de flúor numa molécula altera geralmente as suas propriedades físico-químicas. Esta dissertação teve, assim, como objetivo a caracterização do estado da arte na química organofluorada, designadamente no contexto da química farmacêutica e medicinal, com destaque para os principais processos de fluoração com interesse a nível industrial. Assim, a formação de uma ligação C-F pode ser efetuada recorrendo aos métodos químicos ou aos métodos eletroquímicos. Dentro dos métodos químicos incluem-se o método de fluoração com compostos já fluorados (construção de blocos) e o método de fluoração direta, que envolve a substituição direta do hidrogénio pelo flúor. O último método foi o preferencialmente abordado neste trabalho e requer a utilização de reagentes de fluoração eletrofílicos ou nucleofílicos. Estes reagentes são ambos categorizados em diferentes classes de acordo com a sua natureza química. Na fluoração eletrofílica o flúor atua sobretudo como um eletrófilo ocorrendo transferência da espécie “F+” do reagente para um centro rico em eletrões (átomo de carbono do substrato que se pretende fluorar). Os reagentes F-TEDA-BF4 e NFTh (sais de N-Fluorquinuclídinio) foram desenvolvidos na década de 90 e encontram-se entre os melhores agentes de fluoração eletrofílica seletiva. São bastante estáveis e fáceis de utilizar na fluoração de diversas classes de compostos, tais como, aromáticos, esteróides, compostos carbonílicos, entre outros. Nas reações de fluoração nucleofílica o flúor atua como um nucleófilo ocorrendo transferência da espécie “F-” do reagente para o substrato eletrófilo. Destaca-se o reagente Trifluoreto de enxofre (dietilamina) (1975), que marcou uma nova era nos reagentes de fluoração e conduziu ao desenvolvimento de outros reagentes pertencentes à mesma classe, com reatividades semelhantes mas com melhores propriedades físico-químicas, como por exemplo, o Trifluoreto de enxofre bis(2-metoxietil)amina (1999), o Trifluoreto de enxofre 4-terc-butil- 2,6-dimetilfenilo (2010), os sais de aminodifluorsulfínio (2010), os derivados arílicos do pentafluoreto de enxofre (2010). Estes reagentes mostraram-se eficazes na fluoração de diversas classes de compostos, tais como, álcoois, compostos carbonílicos, epóxidos, ácidos carboxílicos, entre outros. Tendo em consideração a importância da quiralidade em moléculas bioativas, foi efetuada uma abordagem sucinta a algumas das metodologias utilizadas na síntese enantiosseletiva de moléculas fluoradas. Verificou-se, deste modo, que o controlo de reagentes quirais N-F (sultamas quirais, sulfonamidas quirais, reagentes derivados alcalóides de Cinchona) está, por exemplo, a ser complementado pelo controlo de catalisadores organometálicos (complexos quirais modificados de Dicloro Titânio, de Paládio, entre outros). O presente trabalho resultou de uma pesquisa bibliográfica efetuada entre 04/02/2012 e 30/06/2013, principalmente na base de dados científica b-ON, com os seguintes termos de pesquisa: fluorine, role, medicinal chemistry, fluorination methods, electrophilic fluorination, nucleophilic fluorination e enantioselective fluorination. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,882 | Avaliação da eficácia de desinfetantes e produtos de limpeza de superfícies usados em restaurantes em Portugal em biofilmes de Salmonella enterica | Desinfectantes,Salmonella enterica,Biofilmes,Portugal | Salmonella enterica é um microrganismo patogénico com grande expressão a nível mundial, tanto em países em desenvolvimento como industrializados. É responsável por inúmeros surtos de infeções intestinais, e é transmitido através de alimentos, especialmente de origem animal. O intestino de animais constitui o principal reservatório. S. enterica possui a capacidade de formar biofilmes, que lhe permite sobreviver a ambientes adversos. Os biofilmes podem ser encontrados na maioria dos ambientes, inclusivamente nos ambientes de processamento de alimentos, aumentando a probabilidade de contaminação dos mesmos e prejudicando a segurança dos produtos. Além disso, podem provocar outros problemas como bloqueios nas tubagens e degradação dos materiais. Devido à adesão às superfícies, são resistentes face a produtos antimicrobianos, dificultando o processo de limpeza e desinfeção e constituindo uma contínua fonte de contaminação dos alimentos. O principal objetivo deste trabalho foi avaliar a formação de biofilmes de diferentes serotipos de salmonela e diferentes isolados do serotipo Typhimurium, e determinar a sua resistência a desinfetantes, nomeadamente etanol 70 % e hipoclorito 12-16 %, e dois produtos de limpeza de superfícies usados em Portugal em restaurantes, designadamente o DMP-30 e o DLL-B ambos diluídos para 5 % em água estéril. A formação de biofilme foi avaliada recorrendo ao método de cristal de violeta em microplacas de 96 poços, e a relação genética dos isolados de S. Typhimurium foi determinada por electroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Os resultados mostraram que a capacidade de formação de biofilme varia não só entre os diferentes serotipos estudados, mas também entre isolados do mesmo serotipo. Quanto à resistência aos produtos testados, observou-se que na generalidade o produto mais eficaz é o hipoclorito 12-16 % e o menos eficaz é o etanol 70 %, embora haja variações consoante as estirpes da bactéria. Além disso, a idade dos biofilmes influencia a eficácia dos desinfetantes. Os biofilmes com maior idade (48 h) parecem apresentar uma maior resistência aos produtos aplicados. O tempo de atuação do desinfetante revelou-se importante, quer com biofilmes de 24 h quer de 48 h. Os produtos foram mais eficazes quando aplicados durante mais tempo (30 min versus 5 min). Os resultados sugerem a necessidade de otimizar um protocolo de avaliação da atuação de desinfetantes em biofilmes de S. enterica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,883 | Probióticos e extratos de plantas medicinais na infecção por Helicobacter pylori | Probióticos,Helicobacter pylori,Lactobacillus rhamnosus,Bifidobacterium breve,Agrimonia eupatoria | O Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria gram negativa e microaerofílica, que coloniza o epitélio gástrico humano. Estima-se que cerca de metade da população mundial se encontre infetada. As principais vias de transmissão são oral-oral e fecal-oral, e a sua prevalência aumenta com a idade e é maior nos países em desenvolvimento. A infeção por H. pylori pode progredir para vários estados patológicos, incluindo gastrite, úlcera péptica, e cancro gástrico. De acordo com o Relatório de Consenso de Maastricht III, a terapia convencional de erradicação de H. pylori, consiste numa terapia tripla que inclui a combinação de dois antibióticos e um inibidor da bomba de protões (PPI) ou sais de bismuto. Nos últimos anos tem-se assistido a um preocupante aumento da resistência deste microrganismo aos regimes terapêuticos, para além de que os antibióticos têm custos elevados e efeitos secundários indesejáveis. A tentativa de manter a eficácia dos regimes anti-H. pylori, e o objetivo de minimizar os seus efeitos secundários, conduziu à pesquisa de terapêuticas adjuvantes, nomeadamente o uso de probióticos e de plantas medicinais. Os probióticos são suplementos alimentares, constituídos por bactérias vivas, que podem produzir efeitos benéficos à saúde humana, podendo melhorar os sintomas da infeção por H. pylori, através de vários mecanismos. As plantas medicinais são utilizadas há muito tempo no tratamento de diversas doenças e uma grande variedade de extratos de plantas medicinais têm sido testados para avaliar o seu potencial efeito anti-H. pylori. O objetivo deste trabalho de investigação foi avaliar o efeito de probióticos e de extratos de plantas medicinais no crescimento de isolados clínicos de H. pylori. Foram utilizados neste estudo 21 isolados clínicos de H. pylori. As estirpes de probióticos testadas foram o Lactobacillus rhamnosus e o Bifidobacterium breve. Avaliou-se o efeito de culturas puras de probióticos e de extratos brutos preparados a partir dessas culturas, no crescimento de 18 isolados H. pylori. O efeito dos extratos de plantas medicinais, Fragaria vesca e Agrimonia eupatoria L., no crescimento de Helicobacter pylori foi estudado em 12 isolados de H. pylori diferentes. Verificou-se que ambos os extratos possuem atividade anti-H. pylori, avaliada através do método de difusão em disco e por ensaio de microdiluição, determinando as CMIs. O extrato Fv possui maior efeito inibitório sobre o H. pylori que o extrato AgC. Não se detectou atividade anti-H. pylori para os probióticos estudados. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,884 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | As Análises Clínicas atualmente encaradas como método de diagnóstico auxiliar da medicina são, hoje em dia, fulcrais para a investigação de casos clínicos os quais são muitas vezes verdadeiros “enigmas”. No entanto, tal só se tem tornado possível devido à grande tecnologia existente hoje num laboratório de análises clínicas, facilitando assim todo o processo analítico bem como tornando-o mais rápido e eficiente. A qualidade tem de estar presente em todas as etapas do processo analítico, desde a Préanalítica, à Analítica e até Pós-analítica. Só desta forma é possível que o resultado final seja confiável. As Análises Clínicas, com o decorrer dos tempos, tornaram-se indispensáveis na rotina hospitalar como meio auxiliar de diagnóstico, bem como na monitorização da doença. O serviço de Patologia Clínica (SPC) dos Hospitais da Universidade de Coimbra – Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra (HUC-CHUC) é um ótimo exemplo do que é a rotina laboratorial num Hospital central, participando no diagnóstico e monitorização clínica dos seus doentes/utentes de todas a especialidades aqui existentes. Este é um serviço onde está implementada alta tecnologia e onde a qualidade de serviço é palavra de ordem, sendo necessária a aplicação de modelos de qualidade. O SPC dos HUC-CHUC está dividido em alguns setores tais como Urgência, Bioquímica, Microbiologia, Imunoserologia, Hormonologia e Virologia, onde todos trabalham em equipa e em benefício de quem está por detrás da amostra biológica que lhes chega para estudar. Neste relatório serão aprofundadas duas das áreas deste serviço, Bioquímica e Imunoserologia, mais especificamente o campo da serologia, com o objetivo de dar a conhecer um pouco do que faz parte da rotina de uma laboratório como o do SPC. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,885 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | Num laboratório de análises clínicas é possível, a partir de uma amostra clínica, obter valiosas informações que ajudam no diagnóstico, prognóstico, terapêutica, e prevenção da doença no paciente. As análises clínicas são um verdadeiro mundo, sendo hoje em dia possível realizar muitas análises diferentes, a partir de muitos tipos de amostra. O objetivo final é sempre ajudar o doente, e para isso é necessário compreender e conhecer os passos envolvidos na análise de uma amostra, bem como saber interpretar os respetivos resultados e participar ativamente no controlo de qualidade laboratorial. O Serviço de Patologia Clínica (SPC) do Instituto Português de Oncologia (IPO) de Coimbra não foge a esta rotina, e foi o local aonde tive a oportunidade de desenvolver e consolidar conhecimentos na área das análises clínicas. No presente relatório dou a conhecer os diversos setores do SPC – Hematologia, Microbiologia, Química Clínica e Endocrinologia/Imunologia – e aprofundo posteriormente as atividades nas quais tive a oportunidade de participar nos setores de Microbiologia e de Hematologia. Também é descrito o processo de controlo da qualidade nestes setores, salientando a sua importância na validação de resultados no SPC do IPO de Coimbra. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,887 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Testes de química clínica,Técnicas de laboratório clínico | A citogenética emerge como uma área essencial para o estudo de anomalias cromossómicas em diagnóstico pré-natal, pós-natal e cancro. Dado o desenvolvimento tecnológico dos últimos anos, surgiram novas técnicas para o estudo do genoma, tornando mais abrangentes e sensíveis os estudos efetuados nos laboratórios de citogenética. Deste modo, além de um diagnóstico mais preciso, existe também a possibilidade de detetar novas alterações cromossómicas e estabelecer novas relações genótipo-fenótipo. Estas relações são cruciais, tanto no campo da investigação científica, permitindo a descoberta de novas síndromes, como para o doente e para os seus familiares de modo a estabelecer riscos de recorrência e determinar as suas opções reprodutivas. O principal objetivo deste trabalho é analisar alguns casos clínicos, através de diferentes tecnologias, de forma a estabelecer a relação genótipo-fenótipo e compreender as dificuldades inerentes a esse processo. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,888 | Factores de risco identificáveis numa revisão da medicação em idosos numa farmácia comunitária | Polimedicação,Idoso,Farmácias,Farmacêuticos,Revisão de uso de medicamentos | O fenómeno do crescimento demográfico tem-se refletido num aumento acentuado da população idosa. O envelhecimento progressivo da população, processo inevitável, constitui uma nova problemática, caracterizada pelo declínio das funções fisiológicas e uma diminuição da facilidade que o indivíduo possui em se adaptar a alterações externas. Cada vez mais os idosos sofrem de múltiplas doenças, muitas delas crónicas e, associadas a estas, surge muitas vezes a polimedicação, com os seus riscos inerentes. A polimedicação no idoso aumenta o risco de reações adversas, interações e uso incorrecto dos medicamentos. Nos idosos é bastante prevalente, potenciando ainda mais os problemas relacionados com os medicamentos com o consequente aumento de resultados clínicos negativos. Cabe ao farmacêutico promover o uso correcto dos medicamentos e maximizar os seus benefícios, assegurando que os objectivos terapêuticos são cumpridos e desta forma minimizar os desperdícios e os custos associados aos medicamentos e respetivos resultados negativos da medicação. A revisão da medicação consiste numa análise crítica e estruturada da medicação de cada doente, permitindo a detecção destes mesmos factores indutores de resultados clínicos negativos. Com o objectivo de identificar factores de riscos que possam vir a ocasionar resultados clínicos negativos da medicação, foi efectuada uma análise sistematizada de toda a medicação de cada um dos 43 idosos, numa farmácia comunitária, na tentativa de se identificarem situações de utilização incorrecta dessa terapêutica, através de uma revisão da medicação. O estudo decorreu de Janeiro a Dezembro de 2012 e os doentes foram selecionados entre os clientes habituais da farmácia. Para a Revisão da Medicação recorremos aos critérios do National Health Service (NHS) do Reino Unido (Task Force on Medicines Partnership and The National Collaborative Medicines Management Services Programme 2002). A população em estudo apresentou uma média de idade de 78,4 anos (DP=6,1), com uma média de medicamentos tomados de 10,2 (DP=3,7). Em todos os doentes estudados foi encontrado pelo menos um achado, tendo sido obtido um total de 603 achados. O achado mais prevalente foi risco de interacção (58,2 %); seguindo-se discrepâncias nas doses (9,1%), reacções advsersas (7,0%) e uso de medicamentos inapropriados, de acordo com os critérios de Beers (6,6%). vi Da revisão da medicação resultaram um total de 638 recomendações. Cento e oitenta e seis destas recomendações realizaram-se no decurso da entrevista/consulta, sendo a recomendação mais prevalente a adesão à terapêutica. Verificou-se que o número de recomendações efectuadas ao doente se relaciona negativamente com as crenças na terapêutica, o que confirma o seu factor preditivo na identificação de factores de risco, de resultados clínicos negativos com a medicação. Relativamente às recomendações a sugerir ao médico, reuniram-se 452, tendo sido as mais frequentes a necessidadede monitorização, a educação do doente e a revisão da terapêutica. Os resultados mostram haver uma crença positiva sobre a medicação, uma vez que a aplicação do teste BMQ (Beliefs about medicines questionnaire), mostrou uma boa percepção da necessidade e da preocupação com mesma. Verificou-se, igualmente uma correlação positiva entre os resultados do BMQ e os resultados do MAT (Medida de Adesão aos Tratamentos), o que é indicativo de que o BMQ pode ser usado como ferramenta preditiva da adesão à terapêutica. A revisão da medicação da população estudada permitiu a identificação dos parâmetros, que constituem factores de risco de resultados clínicos negativos no processo do uso dos medicamentos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,889 | MDMA e seus metabolitos : efeito vascular e toxicidade | N-Metil-3,4-Metilenodioxianfetamina,Toxicidade,Serotonina,Artérias mamárias | A 3,4 – Metilenodioximetanfetamina (MDMA), comumente designada por ecstasy, é uma droga sintética, ilegal e de elevado potencial de abuso. O seu consumo está particularmente associado a ambientes nocturnos, festas e conceitos musicais específicos, como a música eletrónica ou a cultura dance, numa população essencialmente jovem, com o intuito de aumentar a energia, performance física e anímica, e portanto o prazer. A sensação de bem-estar, a felicidade, a euforia, a desinibição, a alteração da percepção sensorial são alguns dos efeitos psicológicos do ecstasy. No entanto, com o seu uso estão relacionados diversos mecanismos de toxicidade: eventos cardiovasculares, nomeadamente, aumento da pressão arterial, taquicardia, arritmia, vasoconstrição ou mesmo enfarte agudo do miocárdio ou morte súbita; a hipertermia, rabdomiólise e hepatotoxicidade; a neurotoxicidade, por acção da serotonina, a noradrenalina ou a dopamina; perturbações psicológicas são efeitos comuns que podem surgir a longo prazo, tais como alucinações, delírios, ataques de pânico, alterações comportamentais e cognitivas, depressão ou mesmo o suicídio. Uma particularidade do MDMA reside no facto de os seus produtos da metabolização hepática serem mais tóxicos do que a própria molécula. A sua metabolização envolve um primeiro passo de N-demetilação, originando a 3,4 – Metilenodioxianfetamina (MDA). A MDMA e este produto, por sua vez sofrem O-demetilação, formando-se respetivamente N-Metil-α-Metildopamina (N-Me-α-MeDA) e α-Metildopamina (α-MeDA). Estes dois produtos podem sofrer reação de oxidação, formando-se quinonas, que na presença de glutationa (GSH) dão origem a conjugados glutationil o 5-(GSH)-N-Me-α-MeDA e 5-(GSH)-α-MeDA, que já demonstraram toxicidade superior ao próprio MDMA. Assim, o objectivo deste estudo é avaliar contratilidade vascular ao MDMA e seus metabolitos a 37ºC, tendo como base o mecanismo fisiológico de contracção vascular à serotonina (5-HT). Para a realização deste estudo ex vivo seleccionámos a artéria mamária interna humana (AMIH), como modelo vascular, artéria amplamente utilizada, actualmente, como enxerto em cirurgia de bypass coronário. Os resultados mostraram haver resposta contráctil da AMIH tanto ao MDMA, como aos metabolitos α-MeDA e N-Me-α-MeDA. Estes dois metabolitos provocaram alteração da curva concentração-resposta (controlo), produzindo um desvio da curva da 5-HT para a direita, indicando tratar-se de agonismo parcial. Os metabolitos 5-(GSH)-N-Me-α-MeDA e IV 5-(GSH)-α-MeDA não provocaram contracção arterial, no entanto o comportamento de ambas sugere tratar-se de substâncias antagonistas. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,893 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Relatório,Técnicas e métodos de laboratório | O presente trabalho apresenta as atividades desenvolvidas no âmbito do estágio curricular, inserido no Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O referido estágio realizou-se no Laboratório de Análises Clínicas do Centro de Saúde Militar de Coimbra, de Dezembro de 2014 a Maio de 2015, sob a orientação do Dr. Mário João Roque. Neste relatório serão apresentados os métodos usados na execução das análises, a sua importância clínica, a organização diária e o sistema de gestão de qualidade implementado no laboratório. Serão desenvolvidos de modo mais detalhado os sectores de hematologia e bioquímica | Ciências Médicas e da Saúde |
10,894 | Farmacogenómica/farmacogenética : realidades e perspectivas na prática clínica | Farmacogenética,Farmacogenómica,Varfarina | A saúde pública abrange várias preocupações actuais, entre elas, o uso racional do medicamento com a consequente optimização das terapêuticas. Esta optimização assenta em dois grandes focos: a segurança e a efectividade, sendo intervenções prioritárias a anulação de problemas relacionados com a segurança (reacções adversas) e a maximização de questões relacionadas com a efectividade. Neste contexto, a Farmacogenómica é hoje uma área em expansão e poderá deter as ferramentas necessárias que possibilitam a construção de respostas terapêuticas dirigidas ao perfil genético dos indivíduos, permitindo respeitar a variabilidade intra e inter-individual. Este trabalho tem como objectivos: avaliar a utilização da Farmacogenómica na prática clínica hospitalar em Portugal Continental; identificar as competências necessárias a desenvolver para aplicação de técnicas de Farmacogenómica - Médico/Farmacêutico; analisar quais as futuras áreas potenciais de aplicação da Farmacogenómica na prática clínica. Para dar resposta aos objectivos definidos foram realizados dois sub-estudos distintos. O sub-estudo 1, um estudo transversal descritivo, cuja informação foi recolhida junto de serviços hospitalares previamente definidos; e o sub-estudo 2, que se baseou numa técnica de consenso – Painel Delphi. No sub-estudo 1 obteve-se informação de 4 serviços do IPO de Lisboa, 1 serviço do IPO do Coimbra e 4 serviços do IPO do Porto, e nestes serviços maioritariamente a utilização da genética nas decisões terapêuticas, quando se verifica, não é numa perspectiva farmacogenómica, mas sim numa perspectiva de caracterização da doença ou do seu estadio. No sub-estudo 2, das instituições identificadas para a indicação dos peritos, as poucas respostas recepcionadas foram maioritariamente via telefone, (uma vez que foi feito um reforço telefónico para maior brevidade na resposta), foram todas negativas, argumentando que não havia peritos na área de estudo identificada. Da pesquisa e das informações recolhidas a farmacogenómica/farmacogenética parece ser um campo de investigação que apresenta ainda algumas fragilidades. Podem ser identificados nichos de potencial interesse na utilização da Farmacogenómica, nomeadamente nas áreas da genética, oncologia e doenças infecciosas, em que os fármacos manuseados são aqueles que se encaixam exactamente na utilidade da farmacogenómica/farmacogenética: fármacos com margem terapêutica estreita. Na perspectiva de concretizar o estado da arte da utilização da farmacogenómica/farmacogenética numa área clínica em particular optou-se por realizar uma revisão bibliográfica sobre esta matéria em doentes que fazem terapêutica com varfarina. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,895 | Efeito da ciclosporina A na via da L-arginina:NO:GMPc vascular e plaquetar num modelo animal experimental | Ciclosporina,Ratos,Arginina,Farmacologia | A CsA foi introduzida como fármaco imunossupressor na década de 70 em trans-plantes renais humanos e ainda hoje é aceite como um dos fármacos de eleição no trans-plante de orgãos e no tratamento de algumas doenças auto-imunes. Esta possui uma potente acção imunossupressora selectiva nos linfócitos e não apresenta actividade citostática relevante. Contudo, o seu uso terapêutico tem estado associado ao aparecimento de efeitos secundários graves, como a nefrotoxicidade, o desenvolvimento de hipertensão e o aumen-to do risco de complicações tromboembólicas. Apesar da intensa investigação que tem ocorrido ao longo dos anos, o mecanismo fisiopatológico subjacente à resposta hipertensora que ocorre tanto em doentes como em modelos animais experimentais tratados com a CsA continua por esclarecer, pelo menos na sua totalidade. Contudo, têm sido desenvolvidos esforços substanciais para tentar com-preender estes efeitos e têm sido propostos variados mecanismos. Mas, a identificação dos mediadores biológicos responsáveis pelo aumento da pressão sanguínea e a precisa impli-cação de alguns destes mediadores continua em aberto. Além disso, continua o debate em relação à relativa contribuição de diferentes tecidos alvo para a patogénese da hipertensão induzida pela CsA. Têm sido implicados mecanismos renais, vasculares e neuroniais e estes não são mutuamente exclusivos. A contribuição relativa de cada um destes deve variar consideravelmente dependendo de variados factores, incluindo a espécie, a dose e a dura-ção do tratamento. Em relação aos mecanismos vasculares, hoje está estabelecido que a CsA pode inibir as vias vasodilatadoras e/ou activar as vias vasoconstrictoras. Um dado consensual é o aumento da vasoconstrição e têm sido propostos variados mecanismos para explicar essa vasoconstrição induzida pela CsA, nomeadamente: um efeito directo sobre a contractilida-de do músculo liso vascular, através do aumento da concentração do cálcio livre intracelu-lar; um efeito indirecto através da potenciação da resposta contráctil a certos agentes vaso-constrictores como a noradrenalina e a angiotensina II; uma interferência com a produção local de substâncias hemodinâmicas vasoactivas, nomeadamente o aumento da vasocons-trictores e/ou a diminuição de vasodilatadores e um aumento da actividade do sistema ner-voso simpático e/ou da libertação de neurotransmissores das terminações nervosas do mús-culo liso vascular. Variados estudos clínicos sugerem que a patologia cardiovascular estará associada, entre outras, a disfunções no sistema L-arginina:NO:GMPc. Assim, as alterações nesta via poderão ser uma das principais causas do aumento da reactividade vascular e plaquetar associada à hipertensão arterial induzida pelo tratamento com a CsA. Assim, com este trabalho pretendeu-se avaliar qual ou quais as alterações que podem ocorrer nos mecanismos vasodilatadores, em especial na via da L-arginina:NO:GMPc, visto ser o monóxido de azoto o principal factor relaxante derivado do endotélio e o GMPc o seu principal sistema efector. Fomos também estudar as alterações que a PGI2 poderia apresentar quer a nível vascular quer a nível plasmático, uma vez que esta é também um importante factor vasodilatador derivado do endotélio e um potente inibidor da activação plaquetar, contribuindo assim igualmente para a fisiologia e fisiopatologia cardiovascular. Uma vez que existe a possibilidade das plaquetas estarem também envolvidas no aumento da pressão arterial induzida pela CsA, com base nos variados mecanismos pro-postos para o aumento da vasoconstrição e visto que as plaquetas também possuem uma via da L-arginina:NO que regula a sua agregabilidade, fomos também estudar se estaria alterada a via da L-arginina:NO:GMPc das plaquetas. Nos estudos realizados em trabalhos anteriores verificou-se que no nosso modelo experimental a lesão morfológica arterial ainda insipiente, já comprometia, sobretudo a camada da íntima (edema endotelial, esporões, ruptura da lâmina elástica), cujas lesões atingiam essencialmente as células endoteliais e não o músculo liso vascular. Apesar disso, nós encontrámos um aumento da síntese de colagénio. Nos estudos morfológicos das pla-quetas identificaram-se alguns sinais, como a formação de pseudópodos, a alteração da forma e a modificação da estrutura membranar, que sugerem uma activação plaquetar nos ratos tratados com CsA (estudos realizados em trabalhos anteriores). Apesar de discretas, tais alterações são relevantes porque são acompanhadas por evidentes distúrbios da pressão arterial e por nítidas alterações bioquímicas. De facto, a administração de CsA, na dose de 5 mg/Kg/dia, induziu hipertensão arterial no nosso modelo animal experimental, reproduzindo o que sucede em doentes sujeitos ao tratamento clínico com a CsA. Tal hipertensão arterial caracteriza-se por um aumento da pressão arterial média, mas também da sistólica e diastólica, sem alteração da frequência cardíaca. Tais factos deixam antever alterações na resistência vascular periférica e, consequentemente, na reactividade vascular. A CsA actua sobre a via da L-Arg:NO:GMPc já que se constatou que a nível arterial o tratamento com a CsA levou a um decréscimo de cerca de 30% no conteúdo de NO acompanhado de uma diminuição mais elevada, de cerca de 66% no conteúdo de GMPc. Tal facto deverá ser devido a um efeito combinado da CsA nos processos de síntese no endotélio e nos processos de formação de GMPc a partir de NO, contribuindo para a eleva-da perda de GMPc a nível arterial. Assim, a CsA actuará quer a nível endotelial quer a nível do músculo liso vascular. A diminuição de NO e de GMPc a nível vascular deverá con-tribuir para o aumento da resistência vascular periférica encontrada no nosso modelo. Estas alterações foram acompanhadas por uma diminuição do teor de PGI2 a nível arterial, o que também deverá contribuir de forma efectiva para o aumento da resistência vascular periférica que caracteriza o nosso modelo experimental. Nos estudos bioquímicos das plaquetas dos ratos tratados com CsA encontramos um aumento do conteúdo de NO e de GMPc plaquetar o que provavelmente lhes induz um estado não reactivo ou “antihiperreactivo”. De facto, nas condições de disfunção endote-lial, como as por nós verificadas, a própria produção de NO pelas plaquetas pode tornar-se importante na regulação da resposta das plaquetas, nomeadamente na modulação e inibição da sua activação. O aumento do NO e consequentemente o do GMPc encontrado irá levar à diminuição dos níveis de Ca2+ intracelular e assim actuar como mecanismo de retrocontro-lo negativo intraplaquetar que previne a activação e agregação excessiva das plaquetas. O aumento da concentração de PGI2 plasmática poderá também actuar na contrare-gulação do estado hiperactivo das plaquetas. A administração conjunta de L-arginina e CsA apesar de prevenir as alterações relacionadas com os níveis de NO e de GMPc não preveniu o desenvolvimento da hiper-tensão arterial, o que sugere o envolvimento de outras alterações a nível da via NO-GMPc, que deverão também ser avaliadas. Além disso, a simples administração de L-arginina não parece constituir a solução para tais alterações e outras estratégias clínicas poderão ser equacionadas, nomeadamente o recurso a dadores de NO com outras propriedades que não apenas o de substrato da NOS, como o é a L-arginina. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,897 | Detecção electroquímica de óxido nítrico em fatias de hipocampo de rato com micoeléctrodos de fibra de carbono | Electroquímica,Óxido nítrico,Animais de laboratório,Farmacologia | Na década de 80 o óxido nítrico (˙NO) foi identificado como o factor de relaxamento do endotélio (EDRF) e, desde então, tem havido um grande esforço no sentido de esclarecer a química, biologia e acções farmacológicas desta molécula. O ˙NO é um gás hidrofóbico de natureza radicalar e com curto tempo de vida, que se difunde rapidamente no meio celular. As características físico-químicas desta molécula permitem que seja considerado um mensageiro intercelular atípico, nomeadamente o facto de a informação que veicula estar associada à dinâmica de concentração no tempo e no espaço de um modo independente da interacção com receptores membranares específicos. O ˙NO é produzido por via enzimática pela enzima óxido nítrico sintase (NOS) cuja activação leva à conversão da L-arginina em óxido nítrico e L-citrulina e está envolvido numa miríade de processos fisiológicos que incluem, entre outros, a vasodilatação, o relaxamento muscular liso, a resposta imune, inibição da agregação plaquetar, estando também envolvido a nível cerebral em fenómenos de neurotransmissão e neurodegenerescência. Enquanto neuromodulador, o ˙NO possui propriedades muito especiais, uma vez que não é armazenado em vesículas e se difunde rapidamente através das células onde é produzido para as células vizinhas, actuando assim numa área localizada do sistema nervoso central. A nível neuronal, a produção de ˙NO ocorre via activação do receptor NMDA do glutamato, que inicia uma cascata de eventos intracelulares que modulam a plasticidade sináptica, o desenvolvimento, a aprendizagem e a memória de acordo com os modelos de potenciação e inibição de longo prazo. A activação excessiva destes receptores está na base do desenvolvimento de processos patológicos conducentes a fenómenos neurodegenerativos, como por exemplo a doença de Parkinson ou Alzheimer. Um dos principais problemas no estudo da actividade biológica do ˙NO é a determinação da sua concentração in vivo. A falta de dados quantitativos robustos levou à formulação simplista do dogma segundo o qual o ˙NO é uma toxina para elevadas concentrações e um modulador fisiológico para baixas concentrações. No entanto não se conhece com rigor a concentração de ˙NO nos tecidos e em particular no cérebro. Portanto, o desenvolvimento de metodologias analíticas para a medição do ˙NO in vivo é de uma grande relevância biológica e biomédica. A maioria das metodologias são indirectas, quantificando produtos de oxidação ou decomposição do ˙NO (e.g. espectrofotometria, colorimetria). As técnicas 4 Resumo electroquímicas permitem a medição directa em tempo real e com a utilização de microeléctrodos alia-se a resolução temporal a uma elevada resolução espacial. Este trabalho teve como objectivo principal o desenvolvimento e caracterização de microeléctrodos de fibra de carbono modificados quimicamente com Nafion® e orto-fenilenodiamina (o-PD). Depois da sua construção, procedeu-se a uma avaliação sistemática das suas características analíticas. Assim, o potencial de oxidação do ˙NO (+ 0,78 ± 0,02 V) foi determinado por voltametria de onda quadrada. Os microeléctrodos foram posteriormente calibrados por amperometria a + 0,9 V, obtendo-se um valor médio de sensibilidade de 954 ± 217 pA/μM ˙NO. Foram ainda caracterizados no que diz respeito ao limite de detecção (6 ± 2 nM ˙NO), tempo de resposta (t50% 1,9 ± 0,1 s) e selectividade contra potenciais interferentes com a sua detecção. Esta primeira parte do trabalho serviu de base para a realização de estudos posteriores que envolveram a medição em tempo real da dinâmica de produção e decaimento de ˙NO em fatias de hipocampo de rato. Neste âmbito, foram delineados três tipos de experiências: em primeiro lugar foi estimulada a produção de ˙NO através da activação do receptor NMDA do glutamato com diferentes estímulos, tendo sido calculada uma carga total média de 95 ± 8 nC, n=4 para os estímulos com 5 mM de L-glutamato e de 197 ± 38 nC, n=3 para os estíumulos com 10 μM de NMDA. De seguida, foi avaliada a intensidade da resposta em função da concentração de estímulo utilizada (800 ± 100 nM de DETA/NO para o estímulo de 10 μM de NMDA, 6,7 ± 2,0 μM de DETA/NO para o estímulo de 25 μM de NMDA e 13,0 ± 3,0 μM de DETA/NO para o estímulo de 50 μM de NMDA. O terceiro conjunto de experiências teve como objectivo a avaliação do perfil de resposta após estímulos consecutivos da mesma fatia de hipocampo (o primeiro estímulo produziu uma carga total de 41 nC enquanto que o segundo produziu uma carga total de 4,5 nC), ocorrendo um decaimento da intensidade do sinal de 80 ± 10% do primeiro para o segundo estímulo, em termos de carga total. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,899 | Agrimonia eupatoria L. e Equisetum telmateia Ehrh.: perfil polifenólico e capacidade de captação de espécies reactivas de oxigénio | Agrimonia eupatoria,Polifenóis,Antioxidantes,Radicais livres | A Agrimonia!eupatoria!L.!(Rosaceae) e o Equisetum!telmateia!Ehrh.!(Equisetaceae) são duas plantas usadas na medicina tradicional, pelas suas propriedades anti-inflamatórias, sob a forma de extractos hidro-alcoólico e aquoso, respectivamente. Em situações inflamatórias, as células fagocíticas activadas, formam e libertam quantidades elevadas de espécies reactivas de oxigénio!(ROS), que protegem o organismo contra agentes nocivos. No entanto, o excesso de ROS é responsável pela destruição celular e tecidular, que pode ocorrer por acção directa, por degradação oxidativa de componentes celulares essenciais; ou por acção indirecta, por alteração do equilíbrio normal proteases/antiproteases. É sabido que, compostos com actividade antioxidante, nomeadamente, os polifenóis, captam as espécies reactivas de oxigénio e reduzem, deste modo, o stresse oxidativo responsável pela destruição celular, podendo contribuir para a prevenção ou retardamento das situações inflamatórias. Os polifenóis estão presentes em muitas plantas superiores, mas a sua estrutura molecular influencia marcadamente as diversas actividades farmacológicas que lhe têm sido atribuídas. O objectivo do presente estudo, foi verificar se a actividade anti-inflamatória atribuída à agrimónia e ao equisetum estaria relacionada com a sua capacidade de captar espécies reactivas de oxigénio, envolvidas em processos inflamatórios, e tentar estabelecer uma relação entre a composição polifenólica e a actividade antioxidante. Assim, prepararam-se fracções de acetato de etilo, a partir dos respectivos extractos, que foram quimicamente caracterizadas, por cromatografia líquida de alta resolução!(HPLC) acoplada a detecção por díodos!(DAD), a espectrometria de massa!(MS) e com detecção, “on-line”, após reacção química com o p-dimetilaminocinamaldeído!(DMACA). A análise por HPLC/DAD/ESI-MS permitiu concluir que a Agrimonia!eupatoria!L. é constituída, essencialmente, por catequina, procianidinas diméricas!(B1, B2, B3, B6, B7), triméricas!(EEC, C1, C2) e algumas tetraméricas; por glicosilflavonóis derivados da quercetina!(quercetina 3-O-glucósido, quercetina 3-O-galactósido) e do canferol!(canferol 3-O-glucósido), assim como por um derivado acetilado do canferol![canferol 3-O-(6’’-p -cumaroíl)glucósido]; por C-glicosilflavonas, nomeadamente a isovitexina!(6–C–glucosilapigenina); e por ácidos fenólicos!(ácido protocatéquico e ácido p-cumárico). A identificação das procianidinas foi confirmada por reacção química pós-coluna, com o DMACA. No Equisetum!telmateia!Ehrh., a análise por HPLC/DAD/ESI-MS permitiu associar os principais polifenóis presentes a proantocianidinas do tipo!A, derivados da (epi)afzelequina, procianidinas B2 e C1; e a derivados do canferol!(canferol acetil-di-hexose, canferol ramnósido-glucósido, canferol 3-O-glucósido, canferol 3-O-acetilglucósido e canferol acetilglucósido-ramnósido). Paralelamente, os extractos e as fracções foram testados relativamente à sua capacidade de captar espécies reactivas de oxigénio. Ambos, extractos e fracções, apresentaram um elevado potencial antioxidante, como demonstrado pela capacidade de reduzir o radical livre DPPH. Posteriormente, verificou-se que possuíam capacidade para reagir com o O2˙¯, ˙OH, H2O2, HOCl, ONOO¯ e ROO˙, tal como foi avaliado pela inibição da redução do azul de nitrotetrazolio, diminuição da degradação da desoxi-ribose, diminuição da formação do tetraguaiacol, pela protecção da actividade da elastase e pela diminuição da oxidação da di-hidro-rodamina e da R-ficoeritrina, respectivamente. Adicionalmente, inibiram a peroxidação lipídica, como demonstrado pela inibição da formação dos dienos conjugados. De um modo geral, as fracções exibiram actividades significativamente superiores à dos respectivos extractos, apontando para um potencial antioxidante superior. As diferenças de actividades entre extractos e fracções sugerem um envolvimento, dos polifenóis presentes nas fracções, na captação das espécies reactivas, o que nos leva a sugerir que a actividade anti-inflamatória proposta para a Agrimonia!eupatoria!L. e para o Equisetum!telmateia!Ehrh. se deve, pelo menos em parte, à presença de compostos, com significativa actividade antioxidante, como aqueles identificados neste trabalho. No entanto, trabalhos futuros, realizados in!vitro e in!vivo, são necessários para confirmar a actividade antioxidante como mecanismo de protecção dos processos inflamatórios | Ciências Médicas e da Saúde |
10,900 | Cardiotoxicidade e hepatotoxicidade da "Ecstasy" e "Flatliner": efeitos na bioenergética e permeabilidade transitória mitocondrial | Drogas ilícitas,Fígado,Mitocôndria,Bioquímica,Metabolismo energético | O consumo crescente de substancias ilegais, como a 3,4- metilenodioximetanfetamina (MDMA) na forma de pastilhas, constitui uma situação preocupante, com repercussão na saúde pública e na própria sociedade. Este tipo de droga recreacional, vulgarmente conhecida por ecstasy, é considerada pelos consumidores como uma droga inócua e dai o seu elevado consumo. Todavia, há inúmeras descrições de mortes relacionadas com a sua ingestão e do aparecimento, a curto e médio prazo, de distúrbios psíquicos e neuropsiquiátricos, hipertermia, falência hepática e renal aguda, rabdomiólise, hiponatrémia e outras complicações cardiovasculares. Contudo e à semelhança de outras drogas clandestinas, muitos destes efeitos tóxicos podem dever-se a diferentes contaminantes presentes nas pastilhas de ecstasy. De entre os diferentes contaminantes destaca-se a 4-metiltioanfetamina (MTA), um derivado anfetamínico recentemente introduzido no mercado e potencialmente tóxico, o qual é também comercializado sob a designação de ecstasy e de flatliner. Os mecanismos de neurotoxicidade da ecstasy têm sido alvos de inúmeros estudos. Porém, e à semelhança dos mecanismos responsáveis pela sua hepatotoxicidade e cardiotoxicidade, bem como os mecanismos responsáveis pela hipertermia, uma complicação frequentemente observada em jovens após o consumo das pastilhas de ecstasy, não estão ainda esclarecidos. Por outro lado, muito pouco se sabe também acerca dos efeitos tóxicos da MTA. A mitocôndria pela sua actividade multifacetada fundamental à viabilidade celular é um alvo primário da toxicidade celular. Além da sua função bioenergética, a mitocôndria têm funções relevantes na regulação osmótica, no estado redox, no desenrolar da morte celular por apoptose e por necrose e na regulação celular de Ca2+. Assim, a interferência de um composto nas múltiplas funções da mitocôndria pode conduzir a uma alteração celular ou, consequentemente, determinar a morte da célula. De facto, nos últimos anos verificou-se que compostos que alteram a permeabilidade transitória mitocondrial (MPT) podem por mecanismos diferentes conduzir à morte da celular por apoptose ou necrose. Assim, o objectivo deste trabalho foi estudar os efeitos da MDMA e da MTA na mitocôndria, nomeadamente na sua função bioenergética e na MPT, no sentido de esclarecer alguns dos possíveis mecanismos envolvidos na hepatotoxicidade, cardiotoxicidade e hipertermia induzida nos consumidores de ecstasy. Os estudos foram realizados em mitocôndrias de fígado e de coração de rato, tendo sido avaliados os efeitos da MDMA e da MTA na bioenergética mitocondrial, nomeadamente, na cadeia respiratória, no potencial de membrana (ΔΨ), no sistema de fosforilação Resumo 3 oxidativa e na cadeia respiratória dissociada do sistema fosforilativo. No sentido de clarificar os mecanismos responsáveis por alguns efeitos das drogas estudámos também a sua acção na integridade das membranas mitocondriais. A MDMA pré-incubada em diferentes concentrações com as mitocôndrias de fígado e de coração não afecta significativamente os parâmetros mitocondrais relacionados com a sua função bioenergética, sugerindo que a ecstasy em mitocôndrias energizadas com succinato não altera os níveis energéticos da célula. A MTA, ao contrário da MDMA, causa despolarização do ΔΨ, estimula o estado 4 e diminui o estado 3 da respiração, significando que a MTA tém um efeito dissociador da cadeia respiratória mitocondrial e do sistema fosforilativo. A eficiência fosforilativa da mitocôndria na presença de MTA é claramente afectada como se pode concluir pelo decréscimo do ICR e do ADP/O, bem como pelas alterações nas flutuações associadas ao ciclo fosforilativo induzido pelo ADP. Deste modo, para além dos efeitos da MTA na cadeia respiratória, esta anfetamina afecta a síntese de ATP como consequência da despolarização do ΔΨ, possivelmente devida a um aumento da permeabilidade da membrana mitocondrial a protões. Estes resultados demonstram que a MTA ao diminuir os níveis de ATP na célula, provavelmente devido à indução de alterações na integridade da membrana mitocondrial, poderá contribuir para a morte das células e para a hipertermia e rabdomiólise desenvolvida após o consumo deste tipo de drogas. Assim, a MDMA não tem efeito dissociador nas mitocôndrias e por conseguinte não induz alterações significativas na carga energética celular quando comparada com a MTA. Por outro lado, a hipertermia induzida pela ecstasy não será devida a um efeito dissociador com dissipação de ΔΨ na forma de calor, mas à presença de contaminantes, ou os seus efeitos in vivo poderão resultar da acção dos seus metabolitos, nomeadamente a N-metil-α-metildopamina (N-Me-α-MeDa) e α-metildopamina (α- MeDa). Em adição aos estudos na bioenergética mitocondrial, estudámos também os efeitos da MDMA e da MTA na MPT dado as suas múltiplas funções nos processos de regulação do Ca2+ celular, defesa da célula e regulação da morte celular. Verificámos que a MDMA, à semelhança do observado com a MTA, previne o intumescimento mitocondrial dependente de Ca2+, a despolarização do ΔΨ e a libertação do Ca2+ acumulado quando a MPT foi induzida in vitro por Ca2+ e fosfato inorgânico (Pi). Adicionalmente, a MDMA e a MTA quando adicionadas no decorrer destes processos, conferem às mitocôndrias a capacidade para inibirem a progressão do intumescimento mitocondrial, recuperarem o ΔΨ e reacumularem o Ca2+ libertado em consequência da indução de MPT, de modo idêntico ao observado com a ciclosporina A (CyA), um potente e especifico inibidor da MPT. A MPT induzida por Ca2+ na presença de um prooxidante como o hidroperóxido de tertResumo 4 butilo (t-BuOOH), um análogo de cadeia curta dos hidroperóxidos lipídicos formados durante peroxidação lipídica, é também inibida pela MDMA e MTA dado que inibem a libertação de Ca2+, a despolarização do ΔΨ e o intumescimento mitocondriais associados à indução de MPT. Uma vez que ambas as drogas revertem o efluxo de Ca2+ e o ΔΨ associados à indução da MPT, a sua inibição por estas drogas não é devida a alterações no sistema de transporte de electrões ou no uniporta de Ca2+ mas sim a efeitos nos constituintes do poro de MPT. Adicionalmente, a oxidação dos nucleótidos NAD(P)H mitocondriais associada à indução de MPT é também inibida por incubação das mitocôndrias com MDMA e com a MTA, embora e à semelhança do observado na prevenção da MPT, a MTA apresenta uma maior capacidade de inibição da MPT e de inibição da oxidação do NAD(P)H. Assim, estes resultados sugerem que a MTA pode induzir alterações significativas na carga energética celular como consequência da dissociação da cadeia respiratória e do sistema fosforilativo, tormando as mitocôndrias incapazes de responder às necessidades energéticas da célula, devido a a alterações na membrana mitocondrial interna, contribuindo deste modo para os mecanismos de morte celular de hepatotoxicidade e cardiotoxicidade. Por outro lado, a MTA ao dissociar a cadeia respiratória mitocondrial do sistema fosforilativo pode provocar a dissipação do gradiente electroquímico de H+ (ΔμH+) sob a forma de calor e contribuir para os mecanismos responsáveis pela hipertermia, rabdomiólise e morte celular observada nos consumidores de pastilhas de ecstasy. Dado que a MPT tem sido implicada na homeostase mitocondrial e celular do Ca2+, na defesa celular e nos mecanismos de toxicidade, a inibição de uma das funções da MPT poderá estar na base da morte celular induzida pelo consumo de pastilhas de ecstasy contendo MDMA ou MTA. Considerando que aberturas reversíveis parciais do poro de MPT nas células podem desempenhar um papel essencial na sua actividade vital, a inibição da MPT pela MDMA e mais fortemente pela MTA poderá estar implicada nos seus mecanismos de morte celular por necrose e apoptose e contribuir para a hepatotoxicidade e cardiotoxicidade provocada pelo consumo destas drogas. Por outro lado, a MDMA e MTA ao inibirem a MPT levam à perda da homeostase celular do cálcio, uma vez que causam distúrbios nas interacções de Ca2+ entre retículo endoplasmático e a mitocôndria. Este desequilíbrio entre os mecanismos de influxo e efluxo de Ca2+ mitocondrial poderá causar toda uma série de alterações ao nível mitocondrial com consequente libertação do Ca2+ para o citosol. Como a regulação dos níveis de Ca2+ celular e a manutenção os níveis de ATP é essencial para o funcionamento normal da célula, nomeadamente do miocárdio, as alterações na homeostase deste ião podem explicar as arritmias e as paragens cardíacas que têm Resumo 5 sido associadas ao consumo de pastilhas de ecstasy. Contudo, o estudo dos efeitos dos principais metabolitos da MDMA, a N-metil-α-metildopamina (N-Me-α-MeDa) e a α-metildopamina (α-MeDa) ao nível mitocondrial será essencial para o esclarecimento dos efeitos da ecstasy in vivo e constituem uma perspectiva futura na continuação deste trabalho. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,901 | Nanopartículas poliméricas coloidais como meios de contraste em imagiologia por ressonância magnética: síntese de quelatos de Gd (III), preparação, caracterização físico-química e eficácia in vitro | Imagiologia,Meios de contraste | A maioria dos meios de contraste utilizados na prática clínica para Imageologia por Ressonância Magnética são quelatos de Gd(III) de baixo peso molecular. Estes agentes de contraste são caracterizados por inespecíficidade tecidular e baixa relaxividade T1, o que implica a administração de doses elevadas e limita a sensibilidade desta técnica de diagnóstico. O objectivo principal deste trabalho foi, pois, testar a hipótese de que a encapsulação de quelatos de Gd(III) em nanopartículas poliméricas coloidais aumentaria a sua relaxividade, sugerindo a possibilidade deste tipo de formulações poder ser utilizado no desenvolvimento de meios de contraste vectorizados para populações celulares específicas. Para testar esta hipótese, recorreu-se aos poli (α-hidroxiácidos) PLA (ácido poli-láctico) e PLGA (ácido poli(láctico-co-glicólico)), dois tipos de polímeros biodegradáveis e autorizados para administração endovenosa. Foram ainda realizados alguns estudos com o polímero poli (ε- caprolactona). Os quelatos de Gd(III) utilizados incluíram cinco Gd(DTPA-bisalquilamídas), três das quais foram sintetizadas no âmbito deste trabalho e possuem cadeias laterais alquílicas saturadas de hidrofobicidade crescente. A formulação mais promissora foi avaliada por relaxometria a campo fixo (9 MHz) e a 20ºC, obtendo-se a sua relaxividade T1. A encapsulação dos quelatos de Gd(III) com hidrofobicidade crescente em nanopartículas não se traduziu num aumento linear da eficácia de encapsulação e teor de quelato associado. No entanto, a interacção do quelato GdDTPA-bisestearilamída com PLA 90 traduziu-se numa eficácia de encapsulação de 38.9%, indiciando a potencialidade para estudos futuros. Os príncipais resultados obtidos com o quelato GdDTPA-bismorfolinoetilamída indicam que a sua encapsulação em nanopartículas de poliésteres é beneficiada pela presença de polímeros de baixo peso molecular (PM=6000) em associação com polímeros de elevado peso molecular (PM=63600). A utilização conjunta destes polímeros de PLGA permitiu encapsular eficazmente 45% do quelato, evitando as elevadas perdas de quelato registadas com outras formulações de poliésteres. Esta formulação permitiu aumentar a relaxividade do quelato 7 vezes, obtendo-se um valor médio de r1 médio de 37.1 s-1mM-1. Os resultados obtidos foram descritos estatisticamente pelos parâmetros média e desvio padrão. Os resultados aqui apresentados indiciam o potencial de sistemas nanopartículares de poliésteres como meios de contraste em IRM. As suas características de relaxividade e o seu potencial para vectorização cito-específica tornam este sistema coloidal muito promissor para o desenvolvimento de meios de contraste mais eficazes, mais sensíveis e com características farmacocinéticas moduláveis. Estas características permitiriam obter um diagnóstico mais precoce e com informação imageológica mais detalhada, aumentando a probabilidade de sobrevivência e/ou tratamento mais eficaz. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,902 | Estudo piloto para a avaliação da influência de diferentes veículos e formulações na biodisponibilidade da lamotrigina | Anticonvulsivos,Biodisponibilidade | A epilepsia é uma patologia de enorme prevalência, conhecida desde os tempos remotos, cujas alternativas terapêuticas surgem de forma consistente apenas na década de 70 do século XX. Os denominados antiepilépticos clássicos incluem: a Carbamazepina (CBZ), a Fenitoína (PHE), o Fenobarbital (PB) e o Ácido Valpróico (VPA). Estes medicamentos de 1ª geração têm associados a si uma fraca tolerabilidade, na maioria das vezes motivada pela própria existência de interacções entre eles, como resultado da frequente associação farmacológica no controlo das crises epilépticas. A necessidade de melhorar a qualidade de vida de doentes que padecem desta doença originou que surgissem novos fármacos, entre os quais a Lamotrigina (LTG). A Lamotrigina é um antiepiléptico de nova geração que apresenta um vasto espectro de eficácia, nomeadamente na abordagem de crises parciais com ou sem generalização secundária, de crises tónico-clónicas primariamente generalizadas, de crises de ausência e de crises atónicas. Embora na prática clínica a Lamotrigina seja razoavelmente bem tolerada pelos doentes, a dificuldade que existe no estabelecimento de uma relação bem definida entre os níveis plasmáticos obtidos e a resposta farmacológica desencadeada faz com que, actualmente, seja ainda difícil determinar o valor clínico deste antiepiléptico. Partindo do princípio que a interpretação dos níveis plasmáticos da Lamotrigina reflectem as concentrações atingidas no local de acção (cérebro), não é surpreendente o facto da caracterização do perfil neurofarmacocinético da Lamotrigina estar na origem de um aprofundar do conhecimento existente quanto à forma como este fármaco actua a nível central. Por razões de ordem ética e logística, tal estudo só poderá ser realizado em animais de laboratório, sendo necessário para o efeito que, numa primeira fase, se proceda à selecção da formulação galénica a utilizar na execução do protocolo experimental. Uma vez seleccionada a via intraperitoneal, a Lamotrigina, pelas suas características lipofílicas, pode ser administrada sob a forma de diferentes formulações galénicas que, neste trabalho, se reportam a uma solução aquosa de isotionato de Lamotrigina, a uma solução lipofílica de Lamotrigina em propilenoglicol a 50% e a uma suspensão de Lamotrigina em metilcelulose a 0,25%. Deste modo, neste estudo piloto avalia-se o comportamento cinético das diferentes formulações, comparando os diferentes perfis plasmáticos versus cerebrais, tendo sido possível concluir que, pelas características demonstradas quanto à sua biodisponibilidade e reprodutibilidade, a solução aquosa corresponde à melhor opção para alcançar os objectivos pretendidos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,903 | Perfil anticonvulsivante da lamotrigina em ratos | Anticonvulsivos,Epilepsia,Ratos | A lamotrigina (LTG) pertence à nova geração de fármacos antiepilépticos. É um derivado feniltriazínico que não está relacionado, nem química nem farmacologicamente, com os antiepilépticos correntemente utilizados para o controlo da epilepsia e que apresenta um vasto espectro de eficácia. De facto, revela-se eficaz nas crises parciais, com ou sem generalização secundária, nas crises tónico-clónicas primariamente generalizadas, nas crises de ausência e nas crises atónicas. Embora na prática clínica a lamotrigina seja bem tolerada pelos doentes, a relação existente entre os níveis plasmáticos e a resposta farmacológica encontra-se ainda por definir. Assim, após estudos prévios que visaram a caracterização neurofarmacocinética da lamotrigina em ratos, o presente trabalho de investigação tem por objecto a caracterização do seu perfil anticonvulsivante e o estabelecimento de uma relação entre os dados cinéticos previamente obtidos e a resposta farmacodinâmica agora registada. Para o efeito foi desenvolvido e validado um protocolo experimental, no qual foi usado como modelo experimental o teste do electrochoque máximo (MES). O perfil anticonvulsivante da lamotrigina foi caracterizado durante um período de 48 horas (0,25-48 horas) após a administração intraperitoneal do fármaco a ratos, em dose única de 10 mg/kg. Procedeu-se em seguida a uma modelização farmacodinâmica, combinando os valores preliminares das concentrações registadas no plasma e cérebro dos ratos, com o efeito anticonvulsivante (traduzido pela percentagem de ratos protegidos contra o electrochoque máximo) em modelos matemáticos devidamente seleccionados. A potência anticonvulsivante foi avaliada através da determinação da dose ED50 (dose susceptível de proteger das crises tónicas 50 % dos animais da experiência) para o que se recorreu à administração de 5 doses diferentes de lamotrigina, sendo os ratos testados no pico da sua actividade anticonvulsivante (2 horas após a administração). Os resultados obtidos confirmaram a eficácia clínica da lamotrigina em crises generalizadas tónico-clónicas, para além deste se revelar um antiepiléptico de rápido início e longa duração de acção. Tanto no plasma como no cérebro, o modelo farmacodinâmico que melhor pareceu descrever a relação concentração-efeito foi o modelo sigmoidal Emax. Da análise de regressão efectuada resultou uma linearidade entre os níveis cerebrais de LTG e o seu efeito anticonvulsivante no intervalo compreendido entre as 0,25-48 horas pós-dose. A relação entre os níveis plasmáticos e o correspondente efeito anticonvulsivante mostrou ser também linear a partir do momento em que o sistema atingiu o equilíbrio (1 hora pós-dose); deste modo, os níveis plasmáticos de lamotrigina revelaram-se bons indicadores dos níveis do fármaco no local de acção e, consequentemente, encontram-se fortemente correlacionados com o efeito anticonvulsivante deste fármaco. Todavia, até ao momento, não existe uma cabal evidência clínica desta relação de proporcionalidade directa entre a dose de lamotrigina administrada e a resposta terapêutica obtida, razão pela qual será de supor que existam condicionalismos individuais cuja identificação e caracterização permitirá uma maior racionalização da utilização da lamotrigina na prática clínica | Ciências Médicas e da Saúde |
10,904 | Activação das células dendríticas da pele por alergenos e citocinas epidérmicas | Pele,Alergenos,Células dendríticas,Citocinas | As células dendríticas da pele (células de Langerhans) apresentam a capacidade de captar antigénios de contacto e activar os linfócitos T, desencadeando uma resposta imunológica específica. Neste processo, estão envolvidos mecanismos celulares complexos, que se iniciam com a captação e degradação intracelular dos antigénios de contacto. Os pequenos peptídeos resultantes desta degradação proteolítica são exocitados juntamente com as moléculas do complexo major de histocompatibilidade e apresentados na superfície membranar. Esta cascata de eventos intracelulares é acompanhada de modificações morfológicas e fenotípicas, que caracterizam o processo de maturação das células dendríticas, e do qual resulta, designadamente, a alteração da expressão de moléculas de superfície. Este trabalho teve como objectivo identificar alterações do padrão de proteínas induzidas por antigénios de contacto e por uma citocina epidérmica, designada por factor estimulante de colónias de granulócitos e macrófagos (GM-CSF), e conhecer o efeito desta citocina na sinalização intracelular em células dendríticas da pele. Para a realização deste estudo, utilizou-se como modelo experimental uma linha celular dendrítica (FSDC), obtida a partir da pele de feto de rato e modificada por um vector retroviral. Os resultados do trabalho experimental realizado apresentam-se em duas partes: 1) Na primeira parte, incluem-se os resultados dos efeitos de dois antigénios de contacto, e de um composto não-sensibilizador, na indução de modificações na expressão de proteínas membranares. 2) Na segunda parte, apresentam-se os resultados da acção da citocina epidérmica GM-CSF, na activação do factor nuclear de transcrição kappa B (NF-kB) e na expressão de uma proteína envolvida em processos inflamatórios, a isoforma indutível da sintase do óxido nítrico (iNOS). Uma vez que a dexametasona é um fármaco glucocorticóide com reconhecida actividade anti-inflamatória e imunossupressora, nesta parte do trabalho apresenta-se, também, o efeito deste fármaco nos referidos processos. Neste trabalho foram avaliadas as modificações induzidas por dois antigénios de contacto, o 2,4-dinitrofluorobenzeno (DNFB) e o sulfato de níquel (NiSO4), e por um composto não-sensibilizador, o 2,4-dicloronitrobenzeno (DCNB), na composição celular de proteínas membranares, envolvidas na apresentação antigénica pelas células dendríticas: o CD40 e o receptor de interleucina-12 (IL-12R). Os resultados demostraram um aumento da expressão de CD40 e IL-12R após exposição ao DNFB e ao NiSO4. O DNFB provocou um aumento mais significativo na expressão destas proteínas. Pelo contrário, o DCNB, utilizado como controlo negativo, não provocou alteração na expressão das proteínas CD40 e IL-12R. A estimulação com GM-CSF aumentou a expressão de ambas as proteínas, ainda que de uma forma não significativa. Contudo, observou-se um efeito aditivo quando esta citocina epidérmica foi testada juntamente com os antigénios de contacto. Os resultados destes estudos demonstraram que os antigénios de contacto DNFB e NiSO4, e a citocina epidérmica GM-CSF, alteraram a composição celular dos marcadores de superfície na linha celular FSDC, sugerindo que este tipo de alterações pode ocorrer durante a fase inicial de sensibilização da dermatite de contacto alérgica. Evidências recentes demonstram que o óxido nítrico (NO) está envolvido em doenças inflamatórias da pele, designadamente na dermatite de contacto alérgica. Nesta patologia, são largamente utilizados com fins terapêuticos os glucocorticóides, fármacos com acção imunossupressora e anti-inflamatória. Neste trabalho, estudou-se o efeito do glucocorticóide dexametasona na activação do NF-B, na expressão da iNOS e na produção de NO, induzidas pela citocina epidérmica GM-CSF. A citocina GM-CSF levou à activação do factor de transcrição NF-kB e induziu a expressão da iNOS e a produção de NO. A dexametasona inibiu, de modo dependente da concentração, a produção de NO induzida pelo GM-CSF. A adição de dexametasona à cultura de células, 30 minutos antes da estimulação com GM-CSF, inibiu de modo estatisticamente significativo, a expressão celular da iNOS. A nível intracelular, a dexametasona impediu o decréscimo dos níveis de IkB-a o que resultou no bloqueio da migração do NF-kB para o núcleo, impedindo assim a sua ligação ao ADN e, consequentemente, a transcrição genética. Estes resultados permitiram concluir que, nas células estimuladas com GM-CSF, a dexametasona inibiu a activação do factor de transcrição NF-kB e bloqueou a expressão da iNOS e, consequentemente, a produção de NO. Em suma, estes resultados sugerem que, nas células dendríticas da pele, a dexametasona é um potente inibidor dos eventos intracelulares envolvidos na síntese de NO. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,905 | Síndroma de transfusão feto-fetal | Transfusão feto-fetal,Complicações da gravidez | A Síndrome de Transfusão Feto-Fetal é uma complicação grave das gestações gemelares monocoriónicas, estando na maioria dos casos associada a um prognóstico pouco favorável. A patologia surge como consequência de alterações no fluxo sanguíneo placentário, tendo as anastomoses vasculares placentárias inter-fetais um papel preponderante. Estas alterações levam a uma discrepância na volémia dos fetos e a um conjunto de manifestações daí decorrentes, podendo ir desde uma simples discrepância de crescimento até à morte in utero de um ou de ambos os fetos. O diagnóstico da Síndrome de Transfusão Feto-Fetal exige uma grande acuidade clínica, baseando-se principalmente em critérios ultrasonográficos. As modalidades terapêuticas mais aconselhadas são a coagulação laser de anastomoses e a amniodrenagem que, apesar de apresentarem ainda limitações importantes, podem contribuir fortemente na melhoria do prognóstico fetal. O presente trabalho tem como objectivo proceder à exposição de um caso clínico ilustrativo da Síndrome de Transfusão Feto-Fetal e efectuar uma revisão da literatura sobre esta patologia, de forma a permitir o enquadramento do caso no conhecimento actual, principalmente no que diz respeito à abordagem diagnóstica e terapêutica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,906 | Alterações cognitivas e demência na doença de Parkinson | Doença de Parkinson,Demência | Na Doença de Parkinson (DP), mesmo nos seus estádios iniciais, vários domínios cognitivos estão alterados, incluindo funções executivas, funções visuo-espaciais, memória e linguagem. O risco de um doente de Parkinson desenvolver demência é cerca de seis vezes superior ao da população em geral, e esse risco aumenta com a progressão da doença. Clinicamente, a demência na doença Parkinson (DDP) caracteriza-se por um declínio cognitivo lento e progressivo, dominado por um síndrome disexecutivo frequentemente acompanhado de alterações comportamentais, depressão, ansiedade e alucinações visuais. Os mecanismos fisiopatológicos subjacentes à DDP ainda não estão completamente esclarecidos. Pensa-se que o envolvimento das estruturas subcorticais e corticais por Corpos de Lewy, tranças neurofibrilares e placas senis típicas da Doença de Alzheimer (DA), bem como a degenerescência de diversos sistemas de neurotransmissores, incluindo o dopaminérgico e o colinérgico, estejam implicados no seu desenvolvimento. O tratamento das alterações cognitivas e da demência associada à DP continua a ser sintomático. Evidências recentes sugerem que os inibidores da acetilcolinesterase são fármacos de primeira linha, com relativa ausência de efeitos colaterais. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,908 | Desenvolvimento de uma vacina oral contra giarda lamblia | Giardia lamblia,infeção,nanopartículas,quitosano,intestino,IgA. | Giardia lamblia é o parasita mais comum em todo mundo, responsável por vários distúrbios intestinais, principalmente diarreia e síndrome de má absorção. A infeção por Giardia tem um impacto adverso sobre o crescimento infantil e desenvolvimento psicomotor. Dado ser uma infeção que afeta a população a nível mundial, a comunidade científica tem apostado no desenvolvimento de uma vacina que previna esta doença, de modo a diminuir a sua incidência e proteger a população. Desta forma, com este projeto pretendeu-se desenvolver uma vacina oral baseada na encapsulação de um antigénio deste parasita, β-giardina, em nanopartículas de quitosano revestidas por alginato de sódio de forma a torná-las resistentes à sua passagem pelo estômago e, assim, chegarem ao seu alvo intactas. A primeira parte do trabalho consistiu na preparação das nanopartículas e sua caracterização. Numa segunda fase, as nanopartículas carregadas com o antigénio foram administradas a murganhos fêmea e pesquisaram-se os níveis de anticorpos totais e específicos no soro, lavagens intestinais, lavagens vaginais e fezes. Os efeitos in vitro dos lavados intestinais e do soro na aderência e morfologia do parasita foram também avaliados. Neste trabalho obteve-se uma eficácia de encapsulamento do antigénio de β-giardina de 100 %. Através do método de ELISA verificou-se a presença de IgG específica anti-β-giardina no soro e aumento do seu título após reforços. Observou-se igualmente uma concentração de IgA total maior nos animais imunizados que no grupo controlo. Nos lavados intestinais detetaram-se concentrações elevadas de IgA total, no entanto não foi possível detectar IgG e IgA específicas anti-β-giardina. Relativamente aos estudos in vitro, os lavados intestinais inibiram a aderência do parasita em 7 %. A vacina desenvolvida, baseada em nanopartículas de quitosano revestidas com alginato e carregadas de antigénio β-giardina, induziu uma resposta imunológica adaptativa nos animais em estudo. Houve produção de anticorpos ao nível da mucosa intestinal e no soro, nomeadamente IgA e IgG. Os resultados obtidos nos testes de aderência indicam uma inibição da aderência do parasita potencialmente devido aos anticorpos presentes nos lavados intestinais | Ciências Médicas e da Saúde |
10,909 | Relatório de estágio: mestrado em análises clínicas | Técnicas e métodos de laboratório,Relatório | Este relatório tem como objetivo descrever as atividades desenvolvidas durante o estágio curricular do último ano do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O estágio incluiu a integração nos serviços de Hematologia Laboratorial, Imunologia, Química Clínica e Microbiologia do Centro Hospitalar do Porto, estando este relatório centrado nas áreas de Hematologia Laboratorial e Imunologia. É apresentada uma descrição detalhada destas duas valências, onde são referidos todos os parâmetros determinados e metodologias utilizadas, assim como a interpretação dos resultados laboratoriais e sua importância clínica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,910 | Novos sistemas para penetração da barreira hematoencefálica : das microbolhas à focagem de ultrassons | Focagem de ultra-sons,Microbolhas,Tumores cerebrais | O cérebro é um órgão bastante complexo nos diversos seres humanos e organismos existentes, na qual a sua estrutura ainda permanece largamente desconhecida, sendo um dos grandes objetivos mais desafiadoresde esclarecer. Na sua composição existem diversos componentes como neurónios, células glias, vasos sanguíneos que formam redes neurovasculares extremamente complexassendo fundamental para as funções neurais avançadas. Para o proteger e manter a homeostase cerebral existe um sistema biológico altamente seletivo denominado de barreira hematoencefálica (BHE). Na composição da BHE existem quatro elementos celulares fundamentais: células endoteliais, astrócitos, pericitos e células da microglia permitindo assim que esta possua uma serie de características fundamentais como a sua impermeabilidade e seletividade. A sua disfunção provoca uma alteração da homeostasia cerebral podendo levar a progressão de várias doenças do Sistema Nervoso Central (SNC). Os tumores cerebrais afetam cada vez mais a população em todo mundo a cada ano, sendo um dos principais problemas de saúde pública podendo ter efeitos letais. Atualmente um dos grandes objetivos é provocar a abertura da BHE para que se seja possível tratar este tipo de tumores evitando recorrer à cirurgia e eventualmente a tratamentos pouco específicos. Inicialmente eram utilizados sistemas convencionais não específicos para permeabilizar a BHE, mas estes tinham uma limitação, a falta de alvos específicos na BHE. Assim com o aparecimento da Técnica de Focagem de Ultrassons (FU) juntamente com as microbolhas, é possível provocar a abertura da BHE cerca de 4-6 horas, de uma forma não invasiva e reversível com a aplicação transcraniana de ondas de ultrassom de baixa frequência, resultando assim numa entrega mais eficiente de agentes terapêuticos nas diferentes regiões cerebrais. A FU permite realizar a entrega cerebral de anticorpos, agentes quimioterápicos, nanopartículas e genes específicos, que permite tratar doenças neurodegenerativas e essencialmente diferentes tumores cerebrais, na qual representa uma grande promessa no futuro | Ciências Médicas e da Saúde |
10,914 | Impacto de uma nova estratégia nanoterapêutica em células estaminais tumorais de cancro do pulmão | Cancro do pulmão de não-pequenas células,Nanotecnologia,Lipossomas,Células estaminais tumorais | O cancro do pulmão é a principal causa de morte a nível mundial, sendo o cancro do pulmão de não pequenas células o subtipo mais comum, representando cerca de 85 % do total de casos diagnosticados. Apesar dos progressos consideráveis em termos de diagnóstico e tratamento, não se verifica um aumento significativo de sobrevivência nestes doentes. As estratégias terapêuticas tradicionais (quimioterapia e radioterapia), assim como as terapias direcionadas, tais como as terapias anti-VEGF e anti-EGF, têm sido associadas ao desenvolvimento de resistência e, por isso, ao insucesso terapêutico das mesmas em doentes com cancro do pulmão de não pequenas células. Vários estudos suportam o conceito de que as células estaminais tumorais são uma população de células indiferenciadas, responsáveis pela iniciação, progressão e metastização tumoral. Adicionalmente, evidências suportam também o papel fundamental desta população celular no desenvolvimento de resistência às terapias em diferentes tipos de cancro, incluindo o cancro do pulmão. Assim, torna-se crucial o desenvolvimento de novas e mais eficazes estratégias terapêuticas, no sentido de ultrapassar os problemas encontrados atualmente na clínica. Neste contexto, as plataformas nanotecnológicas, nomeadamente os lipossomas, representam uma atrativa estratégia terapêutica para a entrega de fármacos com uma significativa redução dos efeitos colaterais associados à quimioterapia convencional, como a elevada cardiotoxicidade. Adicionalmente, a vetorização da superfície dos lipossomas com um ligando que seja direcionado para o microambiente tumoral, permite um tratamento específico, possibilitando a entrega de elevadas dosagens de fármaco diretamente no tumor. Desta forma, fomos avaliar o impacto de uma nova estratégia nanoterapêutica direcionada especificamente para a nucleolina, uma proteína sobre-expressa em diferentes populações do microambiente tumoral, contra células estaminais tumorais de cancro do pulmão de não pequenas células. Neste estudo, foi demonstrado que lipossomas PEGuilados, encapsulando doxorrubicina e direcionados com o peptídeo F3, foram internalizados por células estaminais tumorais (ALDH+/CD44+) e também por células cancerígenas não estaminais (ALDH-/CD44-) de forma específica. Este resultado justifica, assim, a elevada morte celular induzida pela nanopartícula, em ambas as populações celulares. Por contraste, os inibidores de tirosina cinase testados, vandetanib e erlotinib, demonstraram uma baixa eficácia citotóxica tanto na população de células estaminais tumorais, como não estaminais, quando comparado com os resultados obtidos com a nanopartícula. xiii Esta nova estratégia nanoterapêutica, sendo direcionada para a nucleolina, um recetor sobre-expresso à superfície de diferentes células tumorais, demonstrou potencial para aceder a vários componentes do microambiente tumoral de forma específica, incluindo as células estaminais tumorais (ALDH+/CD44+) e não estaminais (ALDH-/CD44-), permitindo assim atingir uma maior eficácia anti-tumoral. Desta forma, esta estratégia terapêutica poderá revelar um elevado potencial clinico, traduzido numa redução dos efeitos devastadores associados às terapias atualmente disponíveis e, potencialmente, bloqueando alguns mecanismos de resistência | Ciências Médicas e da Saúde |
10,915 | Desenvolvimento de metodologias de biologia molecular para a deteção de Cynara scolymus e Silybum marianum em suplementos alimentares à base de plantas | Alcachofra,Cardo mariano,Suplementos alimentares | As plantas Cynara scolymus L. (Alcachofra) e a Silybum marianum (L.) Gaertn (Cardo mariano) têm sido frequentemente incluídas em suplementos alimentares devido às suas propriedades benéficas para a saúde. De acordo com a Diretiva 2002/46/CE, os suplementos alimentares são considerados alimentos, não sendo por isso sujeitos a qualquer avaliação de segurança, qualidade ou eficácia antes da sua comercialização. Esta limitação no seu controlo pode facilitar potenciais adulterações, como a troca intencional ou acidental de material vegetal. Deste modo, metodologias analíticas específicas, tais como as baseadas na análise de ADN constituem ferramentas fundamentais para a avaliação da autenticidade destes produtos. Assim, o objetivo deste trabalho consistiu na deteção de alcachofra e cardo mariano em suplementos alimentares para a perda de peso, usando as técnicas de PCR qualitativa e PCR em tempo real com análise por high resolution melting (HRM). Para tal, foram utilizadas sementes destas plantas, catalogadas por bancos de germoplasma (nacional e internacionais), e de espécies filogeneticamente próximas a estas, totalizando 43 espécies de plantas medicinais, e 17 suplementos alimentares contendo alcachofra e/ou cardo mariano. Os extratos de ADN de todas as amostras de plantas e suplementos alimentares foram amplificados por PCR qualitativa, tendo como alvo regiões nucleares (18S rRNA) e dois genes cloroplastidiais (rbcL e matK). Os primers EG-F/EG-R desenhados na região nuclear foram os que apresentaram maior universalidade e capacidade de amplificação do ADN das amostras de suplementos. A especificidade dos primers com alvo numa região genómica da C. scolymus foi testada por PCR qualitativa, verificando-se que estes permitiam a amplificação de diferentes espécies do género Cynara. A aplicação do método possibilitou a deteção de Cynara spp. em algumas das amostras de suplementos alimentares. O desenvolvimento de um sistema de PCR em tempo real com análise HRM permitiu discriminar a C. scolymus das restantes espécies, com um nível de confiança acima de 99,4% e, ainda, confirmar a presença inequívoca de C. scolymus nos suplementos testados (nível de confiança >98,8%). Para a deteção de S. marianum, conseguiu-se desenvolver um método de PCR qualitativa específico para a espécie, mas a sua aplicação não permitiu detetar a presença de cardo mariano nos suplementos alimentares analisados | Ciências Médicas e da Saúde |
10,916 | Qualidade microbiológica e físico : química de queijo fresco de leite de cabra produzido em Cabo Verde | Queijo, fabrico, Cabo Verde,Segurança alimenta | A Segurança Alimentar tem assumido uma importância cada vez maior a nível mundial, devido essencialmente ao aumento das trocas internacionais de alimentos e da consciencialização dos consumidores face ao direito de obter alimentos seguros. Tendo em conta este panorama, diversos países encaram a Segurança Alimentar como uma prioridade a nível de gestão governamental, onde se destaca os países em vias de desenvolvimento, como é o caso de Cabo Verde. No domínio do setor de produção de alimentos, têm sido implementadas ações que visam, principalmente, o aumento da qualidade. Em Cabo Verde existe uma grande tradição relacionada com a produção e consumo de queijo, sendo esta atividade possivelmente herdada dos antepassados coloniais. A maioria do queijo comercializado provém de fabricação artesanal e sua quantificação não consta em estatísticas oficiais, embora seja conhecida a existência de unidades de produção caseira e unidades semi-industriais. O presente trabalho, afeto ao curso de Mestrado em Segurança Alimentar da Faculdade de Farmácia – Universidade de Coimbra, teve como objetivo avaliar as condições sanitárias de produção e a qualidade microbiológica e físico-química de queijo fresco de leite de cabra produzidos em Cabo Verde. No total foram analisados 60 amostras de queijo, sob o ponto de vista microbiológico (30 amostras) e sob o ponto de vista físico-químico (30 amostras). Da avaliação sanitária conclui-se que ainda persistem algumas deficiências, como por exemplo, a realização de ordenha de forma inadequada e a produção de queijo sem tratamento térmico do leite. De acordo com os resultados microbiológicos, constataram-se elevadas contagens de microrganismos a 30ºC, na totalidade das amostras, e de E. coli, em 73% das amostras. Não se encontraram amostras positivas à presença de L. monocytogenes e Salmonella spp. As análises físico-químicas apresentaram teores médios, por 100g de produto, de 53% de humidade, 24% de matéria-gorda, 19% de proteína bruta, 3% de cinzas, 1,5% de açúcares (lactose) e 1,4% de sal, conduzindo a teores médios de 69% de humidade no queijo isento de matéria-gorda e de 51% de matéria gorda no resíduo-seco; o pH médio foi de 5,88 e o aw médio situou-se em 0,847. Foram identificadas variações inter-ilhas, a nível dos X parâmetros analisados, embora não muito marcantes, mas suficientes para conduzir a alguma diferenciação em função da proveniência. Recomendou-se o uso contínuo das boas práticas de higiene e fabrico na elaboração dos queijos, com o objetivo de melhorar a qualidade sanitária da produção e dos produtos finais | Ciências Médicas e da Saúde |
10,917 | Virtual screening e avaliação biológica de novos inibidores do proteassoma | via ubiquitina-proteassoma,proteassoma,inibidores do proteassoma | A via ubiquitina-proteassoma desempenha um papel importante na homeostase celular, exercendo também um papel relevante na regulação de diversas vias celulares, incluindo no crescimento e na proliferação celular, na apoptose, na reparação do ADN, na transcrição e na resposta imune. O proteassoma é um complexo multienzimático que contém vários centros ativos, sendo a sua função principal degradar proteínas desnecessárias ou danificadas. Algumas patologias humanas devem-se a alterações nesta via. Como tal, a inibição da via ubiquitina-proteassoma por inibidores do proteassoma pode ser uma abordagem terapêutica racional para várias doenças, tais como o cancro e doenças inflamatórias. Com o objetivo de obter novos inibidores do proteassoma para o local ativo CT-L, foram utilizados os seguintes métodos computacionais: modelação por homologia, farmacóforos, docking e virtual screening. Foi desenvolvido e validado um modelo de homologia para o local ativo CT-L que teve como base o código PDB 3UN8. Na modelação farmacofórica, obtivemos e validámos dois modelos farmacofóricos: um modelo com base na estrutura de inibidores conhecidos do local ativo β5c e um modelo com base na estrutura do recetor. Na etapa de virtual screening foi efetuado o docking molecular tendo como base a estrutura de ligandos (no qual se utilizou o modelo farmacofórico obtido com base na estrutura de ligandos) e tendo como base a estrutura do recetor (sem a utilização de farmacóforos como filtro). Os resultados foram analisados de modo a selecionarmos potenciais compostos hit | Ciências Médicas e da Saúde |
10,918 | Relatório de estágio em análises clínicas | Técnicas e métodos de laboratório,Controlo de qualidade | O presente relatório apresenta uma descrição geral das actividades desenvolvidas ao longo do estágio, realizado no laboratório do Hospital Militar Regional 2 de Coimbra ou Centro de Saúde Militar de Coimbra, no âmbito do estágio curricular do curso de Mestrado em Análises Clínicas, da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O estágio correspondeu a uma carga horária de 600 horas, que possibilitou trabalhar em diferentes sectores nomeadamente Bioquímica Clínica, Toxicologia, Microbiologia que serão abordados neste relatório de maneira breve e concisa. Por outro lado, os sectores de Hematologia, Imunologia e Endocrinologia são apresentados de forma mais aprofundada, evidenciando as metodologias e fundamento dos equipamentos e ensaios efectuados nestes serviços, bem como a importância clínica dos parâmetros determinados e a interpretação laboratorial de um caso clínico. Para além da abordagem técnica realizada nestes sectores, será também descrita a rotina laboratorial, que inclui as fases Pré-Analítica, Analítica, e Pós-Analítica, o sistema de gestão de qualidade (Controlo de Qualidade Interno e Externo) | Ciências Médicas e da Saúde |
10,921 | Ocorrência de histamina em produtos alimentares disponíveis no mercado : qual o risco do seu consumo? | Histamina,Conservas de peixe,Patês de peixe,Intoxicação alimentar | A alimentação assume um papel determinante na qualidade de vida do ser humano. Com o crescente aumento do aparecimento de novos produtos no mercado, fruto da globalização, é importante e necessário que haja um rigoroso controlo de qualidade e segurança de cada produto. Atualmente existem várias organizações nacionais, europeias e também mundiais que têm como principal objetivo regulamentar e controlar vários parâmetros (biológico, químico, físico e organolético) que garantam que o alimento é seguro para o consumidor. A histamina foi descoberta em 1910 por Dale e Laidlaw, posteriormente, em 1932, foi identificado como um mediador de reações anafiláticas. A histamina (2-[4- imidazolil]etilamina) é uma amina biogénica, sendo sintetizada através do aminoácido histidina, sob ação da L-histidina descarboxilase. Importa referir que a histamina é bastante estável ao calor, o que faz com que a confeção normal dos peixes ou outros alimentos, e mesmo a sua esterilização no caso das conservas de peixe não seja suficiente para a sua eliminação. A problemática da histamina prende-se com os possíveis riscos para a saúde do consumidor. Nesse sentido o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial risco para o consumidor de produtos alimentares, neste caso conservas e patês de peixe, da ocorrência de histamina. Não foi detetada em nenhuma das 40 amostras analisadas | Ciências Médicas e da Saúde |
10,922 | Deteção e quantificação de soja geneticamente modificada em alimentos por técnicas baseadas na reação em cadeia da polimerase | Organismos geneticamente modificados,Soja,Reacção em cadeia da polimerase | Desde que se iniciou o cultivo de plantas transgénicas, a soja tem sido a principal cultura a nível global. A linhagem de soja GTS 40-3-2 autorizada pela União Europeia (UE) e comercializada com o nome de soja Roundup Ready™ (RR) foi desenvolvida pela empresa Monsanto para permitir a sua tolerância ao glifosato, o ingrediente ativo do herbicida RR. Desde a entrada de organismos geneticamente modificados (OGM) na cadeia alimentar têm surgido várias preocupações, quer a nível do público em geral, quer a nível científico, relativamente à sua segurança. Por este motivo, a UE tem dedicado uma atenção especial à legislação relativa à presença de OGM, obrigando à rotulagem da presença acidental ou inevitável de OGM na proporção acima de 0,9%, por considerar necessário garantir a informação completa e fiável dos consumidores. Tal facto, torna a necessária a verificação da conformidade da rotulagem através de metodologias analíticas adequadas. Os métodos baseados no ADN, nomeadamente a reação em cadeia da polimerase (PCR), têm-se mostrado os mais adequados para a detecção e quantificação de OGM. O objetivo deste trabalho consistiu em detetar e quantificar a presença do evento RR da soja em alimentos à base de soja disponíveis no mercado, com diferentes níveis de processamento. Quatro fases experimentais foram então realizadas: (i) extração do ADN; (ii) amplificação do gene da lectina; (iii) deteção de soja RR; e (iv) Quantificação do evento soja RR. Primers específicos para o evento RR da soja foram usadas para amplificar um fragmento esperado de 103 pb utilizando materiais de referência certificados, contendo 0%, 0,1%, 1%, 5% e 10%. Para a confirmação e quantificação do evento, foi utilizada a técnica de PCR em tempo real com sondas fluorescentes de hidrólise do tipo TaqMan. A amplificação por PCR do gene de lectina da soja mostrou que foi possível obter ADN amplificável de soja em 80% das 91 amostras comerciais, apesar do elevado nível de processamento da grande maioria dos alimentos. A aplicação do ensaio de PCR em tempo real permitiu confirmar os 6 resultados positivos para a soja RR, mostrando que uma das amostras continha 21% de soja RR sem estar rotulada, enquanto as restantes apresentavam teores deste evento que variaram entre os 0,01% e os 0,39%. Assim, uma das amostras não se apresentava conforme a rotulagem obrigatória quanto à presença de OGM. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,923 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Técnicas e métodos de laboratório,Relatório | As análises clínicas são um meio complementar de diagnóstico que consiste em exames laboratoriais realizados a pedido do médico, com o objetivo de diagnosticar, confirmar ou monitorizar uma patologia. Para a monitorização destas análises é fundamental a aquisição de conhecimentos sólidos que abrangem as diferentes áreas das ciências da saúde e o conhecimento da importância do laboratório no diagnóstico, tratamento, monitorização e prevenção da doença, na epidemiologia e no conhecimento das boas práticas laboratoriais e das questões éticas e legais. Este relatório de estágio descreve as análises realizadas nas cinco valências principais do Serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar do Alto Ave – Unidade de Guimarães com especial incidência na Microbiologia e Hematologia, dado terem sido as áreas que me despertaram mais interesse. A Microbiologia por ser uma área de trabalho mais prático e que sempre me fascinou em todos os seus ramos, nomeadamente a bacteriologia que é mais comum na clínica mas também a parasitologia, micologia e virologia, e a Hematologia devido às diferentes células do sangue e patologias que envolve. Além disso é feita uma breve descrição deste serviço, que inclui os profissionais que lá trabalham, o seu horário de funcionamento, o responsável, o fluxo e tipo de amostras e os espaços e salas de trabalho. O relatório contempla também o tema do Controlo de Qualidade efetuado neste laboratório. O seu cumprimento e vigilância têm ganho cada vez mais importância e preocupação, uma vez que é a ferramenta que permite ao laboratório garantir a exatidão e precisão dos resultados que apresenta aos seus doentes e respetivos médicos | Ciências Médicas e da Saúde |
10,924 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Técnicas e métodos de laboratório.,Relatório | Este relatório de estágio curricular, realizado no âmbito do Mestrado em Análises Clinicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra, tem como objetivo descrever a minha passagem pelo Serviço de Patologia na Unidade Local de Saúde do Alto Minho (ULSAM) no Hospital de Santa Luzia de Viana do Castelo. Desta forma, pretendo demonstrar a minha presença na atividade laboratorial diária nos setores que passei ao longo do estágio, destacando o procedimento, métodos e parâmetros analíticos e interpretação clínica dos resultados obtidos. Decidi explorar mais aprofundadamente os conhecimentos que adquiri nos setores de Hematologia e Microbiologia, destacando-as pelo interesse pessoal nas duas áreas nunca deixando de dar valor às restantes | Ciências Médicas e da Saúde |
10,925 | Relatório de estágio em análises clínicas | Relatório,Técnicas e métodos de laboratório | O presente trabalho tem como objetivo abordar as atividades desenvolvidas pelo aluno ao longo de seis meses, no Serviço de Patologia Clínica do Centro Hospitalar do Baixo Vouga. Durante o estágio o estagiário teve a oportunidade de contactar com todas as áreas de trabalho do laboratório de análises clínicas do Serviço de Patologia Clínica, nomeadamente, Bioquímica, Imunologia, Hematologia e Microbiologia. Ao longo do relatório será caracterizada a organização e funcionamento do laboratório e descritas as atividades desenvolvidas, destacando os parâmetros analíticos efetuados, os aparelhos utilizados, o fundamento dos métodos, o controlo de qualidade e a interpretação de dados laboratoriais. Serão abordados, de forma genérica, todos os Sectores do Serviço de Patologia Clínica, contudo, o Sector de Hematologia e o Sector de Química Clínica e Imunoquímica foram os sectores elegidos para uma maior abordagem | Ciências Médicas e da Saúde |
10,928 | Prevalência do S. aureus resistente à meticilina numa superfície alimentar da Guarda | Staphylococcus aureus resistentes à meticilina,Intoxicação alimentar | O Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) é uma das principais causas de infeção no Ser Humano, e está bem comprovado o poder de virulência desta bactéria em acometer tanto indivíduos imunodeprimidos como indivíduos imunocompetentes. Para além da associação imediata com o ambiente hospitalar, o MRSA tem sido frequentemente isolado de superfícies de serviços alimentares e associado a graves surtos de intoxicações alimentares. Neste trabalho foi realizado um estudo microbiológico que permitiu compilar e determinar a prevalência de MRSA dentro de uma superfície alimentar da zona da Guarda, através da análise aos manipuladores, das bancadas de manipulação alimentar e ainda de diferentes produtos alimentares. A taxa de prevalência de S. aureus entre os manipuladores apresentou-se razoavelmente elevada (30,8%) contudo todos os indivíduos colonizados pela bactéria eram sensíveis à ação da oxacilina. Nas amostras realizadas às bancadas obtiveram-se como resultados não satisfatórios (>100ufc/cm2), 50% das amostras para a pesquisa do S. aureus nas bancadas da secção do talho, as restantes 50% mostraram-se como satisfatórias, assim como todas as amostras da secção das hortofrutícolas e do pescado, com contagens médias de 8,5x10ufc/cm2 para a secção do talho, de 0,1x10ufc/cm2 para a secção do pescado, e contagens <1x10ufc/cm2 na secção das hortofrutícolas. Em relação às amostras recolhidas dos géneros alimentícios, os resultados apresentaram- se como não satisfatórios para 50% das amostras e potencialmente perigosos para as restantes 50% da secção do talho. A secção do pescado apresentou resultados muito alarmantes, com 100% das amostras obtidas como potencialmente perigosos, e por último a seção das hortofrutícolas exibiu 100% das amostras como não satisfatórias. As contagens médias de cada sector expuseram-nos 8,8x102ufc/g para o setor do talho, 4,9x104 para o setor do pescado, e por último, 9,9x102ufc/g na secção das hortofrutícolas. Os testes de sensibilidade à meticilina indicaram-nos que existem efetivamente MRSA tanto nas superfícies como nos géneros alimentícios, o perfil resistente foi encontrado na perca do nilo, na carne de suíno moída e ainda na bancada de corte da carne, o que nos indica que a bancada de corte pode funcionar como foco de disseminação da bactéria e das suas IV resistências. A baixa prevalência de S. aureus entre as bancadas das diferentes secções alimentares traduz-nos que existem efetivamente boas práticas de higiene e desinfeção por parte dos manipuladores. Contudo é necessário realizar estudos longitudinais ao longo de toda a cadeia alimentar, de produção até ao consumo, para conhecer as rotas de transmissão e propagação da bactéria e das suas resistências | Ciências Médicas e da Saúde |
10,929 | Ocorrência de zearalenona em águas de superfície em Portugal | micotoxinas,fusarium,zearalenona,água de superfície | As micotoxinas são metabolitos secundários tóxicos de ocorrência natural, produzidas por espécies fúngicas como Aspergillus spp., Fusarium spp., e Penicillium ssp. A contaminação de alimentos e produtos agrícolas por fungos capazes de produzir estas toxinas pode ocorrer no campo, antes e/ou após a colheita, e durante o transporte e armazenamento do produto. A zearalenona (ZEA) é uma micotoxina estrogénica não esteróide produzida por diversas espécies de fungos do género Fusarium. A toxicidade de ZEA está relacionada com a estrutura química desta micotoxina estrogénica, semelhante ao estrogénio de ocorrência natural. Atualmente há uma crescente conscientização sobre a importância dos fungos e micotoxinas na água. Assim, considerou-se essencial determinar a concentração de ZEA nas águas de superfície, em Portugal. As amostras foram colhidas em dois períodos, ou seja, entre setembro a novembro de 2014 e fevereiro a abril de 2015. A metodologia analítica baseada na extração/purificação da amostra, com recurso a filtração e purificação com colunas IAC, bem como à para deteção e quantificação por cromatografia líquida com deteção por massa em tandem (LC-MS/MS), foi validada com a finalidade de avaliar a ZEA, em águas de superfície. A linearidade da ZEA, em fase móvel, entre 2,5 ng/mL e 50 ng/mL, R2=0,9997, e na matriz, preparada entre 5 e 100 ng/L, R2=0,9999, foram adequadas. O efeito de matriz obtido foi de 100,05%. As recuperações variaram entre 85,22% e 100,30% e a repetibilidade intra-dia entre 0,54% e 1,73% e inter-dia entre 0,49% e 3,67%. O LOD e o LOQ foram 1,82 e 5,53 ng/L, respetivamente. Foi avaliado o teor em ZEA em 38 amostras. Nove amostras (23,68%) estavam contaminadas, com teores que oscilaram entre 5,59 e 82,56 ng/L, sendo o teor médio de 16,77 ng/L. Umas das amostras, especificamente do rio Xarrama, em Évora, revelou uma concentração considerável de ZEA, 82,56 ng/L, o valor mais alto detetado e conhecido até ao momento. Entre os dois períodos analisados, outono e primavera, não se verificou a existência de diferenças significativas, P=0,09. A incidência de amostras positivas (23,68%), indica que esta micotoxina pode ser um contaminante relativamente frequente na água de superfície | Ciências Médicas e da Saúde |
10,930 | Relatório de estágio em análises clínicas | Relatório,Técnicas e métodos de laboratório | No presente relatório são descritas as atividades realizadas no estágio, no âmbito do Mestrado em Análises Clínicas, da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. O estágio teve lugar no Hospital Amato Lusitano, na cidade de Castelo Branco, onde tive a oportunidade de integrar a rotina normal de funcionamento do laboratório, nas áreas de Hematologia, Microbiologia, Bioquímica e Imunologia. Neste relatório é feita uma caracterização geral do Serviço de Patologia Clínica e da sua dinâmica de funcionamento, e uma breve descrição das atividades realizadas nos setores de Hematologia e Microbiologia. Mais detalhadamente, são discutidas as secções de Bioquímica e Imunologia, dando algum ênfase ao diagnóstico laboratorial de hepatites virais, uma área de particular interesse | Ciências Médicas e da Saúde |
10,935 | O impacto da experiência nas atitudes e comportamentos face à marca | Marketing,Experiência de marca,Afeto à marca,Prazer com a marca,Satisfação,Amor à marca,Lealdade,Passa-a-palavra positivo | Ao longo dos tempos, o conceito de marketing tem adquirido uma importância cada vez maior e expressiva. Perante este cenário, as marcas e as relações que estas estabelecem com os consumidores têm ganho cada vez mais importância. Segundo Chernatony e Riley (1998), a marca poderá ser concebida como um instrumento legal, como um logo, como uma companhia, como um nome, como redutor de riscos, como sistema de identidade, como imagem na mente do consumidor, como sistema de valor, como uma personalidade, como um relacionamento, como um valor agregado e como a evolução de uma entidade. Assim, com o passar do tempo, para além de se preocupar em definir o que é uma marca, o marketing passou a dar importância à relação entre o consumidor e a empresa, surgindo assim o marketing relacional. Schmitt (1999) levou este conceito mais longe e fala-nos sobre marketing experiencial, onde explicou que os sentimentos e as emoções dos consumidores não estavam a ter o devido aproveitamento como lembranças e recordações agradáveis positivas e memoráveis para o futuro. O objetivo deste estudo é o de identificar o impacto que a experiência da marca causa no consumidor, assim como as suas atitudes e comportamentos, nomeadamente a lealdade e o consequente passa-a-palavra positivo. Pretendeu-se, assim, averiguar se através das variáveis mediadoras, afeto à marca, prazer com a marca e satisfação pela marca, o consumidor sinta amor à marca e isto o faça leal e consequentemente realize um passa-a-palavra positivo (positive word of mouth). Este estudo possui um caráter quantitativo pelo que os dados foram recolhidos através da aplicação de inquéritos a 400 indivíduos, com mais de 18 anos, de ambos os sexos, e de nacionalidade portuguesa. Esta investigação determinou o impacto da Experiência da marca no Amor à Marca, na Lealdade e no Passa-a-palavra positivo, reforçando os estudos apresentados pela literatura. É possível, através destas conclusões, fornecer um conjunto de orientações para que as empresas foquem as suas atenções, principalmente, nas relações emocionais e simbólicas entre a marca e consumidor. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,936 | Estudo sistemático da formação de estrutura em processos de microencapsulação por evaporação de solvente | Química farmacêutica,Microencapsulação | O processo de microencapsulação pela técnica de evaporação de solvente tem sido amplamente utilizado na área farmacêutica devido, principalmente, à sua simplicidade. O objectivo deste trabalho é desenvolver um estudo, de forma sistemática, da formação de microcápsulas pela técnica de microencapsulação por evaporação de solvente, em função da formulação inicial e das condições do processo de fabrico. Este trabalho insere-se num objectivo mais amplo, que é compreender a gama de microestruturas que é possível fabricar, e assim poder desenvolver novas formulações de forma mais sustentada e eficiente. Numa primeira fase, estabeleceu-se um caso de estudo (encapsulação de aspirina em etilcelulose, usando acetato de etilo como solvente e partindo de uma emulsão do tipo o/w), respectiva formulação de base e procedimento detalhado de fabrico laboratorial. Seleccionou-se ainda um conjunto de técnicas de análise da composição e microestrutura das microcápsulas produzidas. Numa segunda fase, foram efectuados diversos testes, variando a formulação inicial do produto e condições do processo de fabrico. A análise das microcápsulas produzidas revelou resultados importantes, principalmente quanto a características de superfície das partículas e à importância de algumas técnicas de análise para um estudo sistemático de formação de microcápsulas. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,937 | Monitorização farmacocinética da digoxina em doentes internados no CHUC, E.P.E. | Digoxina | O envelhecimento compreende alterações fisiológicas, metabólicas e funcionais que condicionam a farmacocinética e a farmacodinâmica no doente idoso. Tendo em conta as diferenças inter e intra-individuais e o grau de envelhecimento fisiológico e patológico de cada indíviduo, a comunidade médica e farmacêutica defende que os tratamentos devem ser individualizados, adaptando-se o fármaco, a dose e o regime posológico a cada indíviduo com o máximo rigor de acordo com as suas próprias caraterísticas. As conclusões de ensaios clínicos em larga escala, especialmente em doentes com disfunção sistólica deram origem a orientações práticas baseadas na evidência para o tratamento dos doentes com insuficiência cardíaca, atribuindo aos medicamentos a melhoria da função miocárdica a longo prazo. O tratamento clínico dos doentes com fibrilhação auricular tem como objetivos fundamentais a prevenção do tromboembolismo, o alívio dos sintomas, o tratamento otimizado da doença cardiovascular concomitante e o controlo da frequência e do ritmo. De acordo com os critérios de Beers adaptados em 2012 em Portugal, a digoxina numa dose superior a 0,125 mg/dia deve evitar-se, uma vez que é um cardiotónico digitálico que devido à redução da depuração renal no idoso pode acumular-se no organismo, aumentando o risco de toxicidade. A digoxina melhora os sintomas da insuficiência cardíaca, aumenta a tolerância ao exercício, ao mesmo tempo que reduz o número de hospitalizações relacionadas com exacerbações agudas da doença. No presente trabalho procedemos à caraterização do perfil cinético da digoxina em idosos utilizando para o efeito informação proveniente da monitorização de digoxina na prática clínica. A par disso procedemos à avaliação da capacidade preditiva demonstrada por diferentes conjuntos de parâmetros farmacocinéticos populacionais descritos na bibliografia, seguindo-se a determinação dos parâmetros farmacocinéticos da nossa população, investigando as variáveis capazes de influenciar os respetivos parâmetros de modo a controlar tanto quanto possível as fontes de variabilidade inter e intra-individual. Os resultados obtidos permitem-nos afirmar que o peso corporal ideal, a altura e a clearance da creatinina são variáveis capazes de explicar alguma da variabilidade no comportamento cinético dos nossos doentes. Verificamos também que o método de Jelliffe revelou ser o menos exato e menos preciso, sendo o método de Konishi o mais exato e mais preciso, apresentando também o melhor perfil de aceitabilidade clínica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,938 | A hipótese do citocromo P450 na etiologia do suicídio | Suicídio,Citocromo P450,CYP1A2,CYP2E1,polimorfismo | O comportamento suicida é um grave problema de saúde pública e uma das principais causas de morte em todo o mundo. É considerado uma doença complexa e heterogénea estando associado a doenças psiquiátricas, estimando-se que entre 10% a 15% da população em geral sofre um episódio depressivo clínico durante a sua vida. Os genes da família do citocromo P450 estão envolvidos no metabolismo e eliminação de uma variedade de xenobióticos, carcinogénios e fármacos utilizados na prática clínica para o tratamento de doenças do foro psiquiátrico. Alterações nos genes que codificam as enzimas responsáveis pela metabolização dos fármacos podem afetar a resposta terapêutica. Antipsicóticos atípicos têm contribuído para diminuir o risco de suicídio em indivíduos com doenças psiquiátricas. Assim, estudou-se o envolvimento de SNPs dos genes CYP1A2 (C734A) e CYP2E1 (-1053C>T e 7632T>A) na etiopatogenia do suicídio numa amostra da população Portuguesa. Para a realização deste estudo utilizou-se amostras de vítimas de suicídio da população Portuguesa obtidas no decorrer de autópsias Médico-Legais, realizadas nos Gabinetes e Delegações do Instituto Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses. Os polimorfismos genéticos dos genes CYP1A2 e CYP2E1 foram analisados por PCR-RFLP. Os resultados obtidos para as frequências genotípicas (χ2=1,24; df=2; p=0,54) e alélicas (χ2=0,93; df=1; p=0,33) do gene CYP1A2 não revelaram associação entre o polimorfismo C734A e o suicídio. No gene CYP2E1 estudaram-se dois polimorfismos genéticos, o -1053C>T localizado na região reguladora 5’ e o 7632T>A presente no intrão 6 e não foi observada associação entre estes e o suicídio [(distribuição genotípica para o polimorfismo -1053C>T: χ2=0,226; df=2; p=0,634; distribuição alélica para o polimorfismo -1053C>T: χ2=0,219; df=1; p=0,639); (distribuição genotípica para o polimorfismo 7632T>A : χ2=0,065; df=2; p=0,968; distribuição alélica para o polimorfismo7632T>A: χ2=0,004; df=1; p=0,952)]. No seu conjunto, os nossos resultados não revelaram associação entre os polimorfismos dos genes do sistema do citocromo P450 estudados e o suicídio. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,940 | Medicina baseada na evidência e o relato de casos: estudo de um método otimizado para a exposição materna a medicamentos | Preparações farmacêuticas,Exposição materna,Medicina baseada na evidência | Introdução O relato de casos clínicos e as séries de casos são uma fonte de evidência científica amplamente utilizada. Apesar de usualmente associados a uma baixa força de evidência, são ideais para narrar acontecimentos observados no decorrer da prática clínica. Por outro lado, a lacuna existente na literatura científica relativa à exposição materna a medicamentos, devido às complexas questões práticas e éticas inerentes a esta população, justifica o recurso a relatos de casos e séries de casos como método para a geração de evidência que sustente a utilização de medicamentos ao longo da gravidez. Objetivos Com este estudo pretendeu-se elaborar um método otimizado para o relato de casos e as séries de casos de exposição materna a medicamentos, com o objetivo de aumentar a força de evidência associada a estas fontes. Métodos Numa primeira fase, efetuou-se uma pesquisa em bases de dados de evidência científica, orientações de grupos de trabalho e websites de revistas científicas, com o objetivo de analisar e compilar diretrizes para a escrita de relatos de casos e de séries de casos. Numa segunda fase, analisaram-se casos de grávidas expostas a medicamentos disponibilizados pelo Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra. A partir destes casos identificou-se a informação mais relevante que devem conter os processos clínicos, que permita a posterior publicação desses mesmo casos sob a forma de relatos ou séries de casos. Resultados Obtiveram-se diversas diretrizes para a publicação de relatos de casos, consideravelmente heterogéneas, que permitiram a elaboração de um modelo de relato. Como parte desse modelo constam os dados clínicos e farmacológicos mais relevantes para o relato de casos de exposição materna. O modelo foi aplicado a casos clínicos de grávidas diagnosticadas com depressão e expostas a antidepressores durante a gravidez. Conclusão Existe uma lacuna na evidência científica relacionada com a exposição a medicamentos na gravidez que não pode ser ignorada. A análise dos processos clínicos demonstrou a ausência de informação relevante para a construção de um relato. Pretende-se que o recurso a este método direcione não só a publicação de informação, mas também a sua recolha sistematizada, que permita a elaboração de relatos de casos com qualidade e força de evidência. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,944 | Análise da interacção entre a lamotrigina e a oxcarbazepina recorrendo ao método isobolográfico | Interacções de medicamentos,Lamotrigina,Oxcarbazepina,Epilepsia,Isobolograma | Historicamente, o controlo das crises epilépticas envolveu a utilização conjunta de vários fármacos, situação a que se dá o nome de politerapia. O conceito de monoterapia no tratamento da epilepsia é relativamente recente, tendo surgido apenas em meados dos anos 70. Mais recentemente, com o desenvolvimento da fisiopatologia e da farmacologia, bem como o aumento do número de doentes refractários que não respondem à monoterapia (aproximadamente 1/3), chegou-se ao conceito de “politerapia racional” em epilepsia, sendo esta definida como a combinação mínima de fármacos que potencia a acção antiepiléptica sem contudo aumentar os efeitos adversos relativos a cada fármaco; tal requer um extenso conhecimento dos mecanismos de acção dos fármacos, efeitos adversos, interacções fármacofármaco e índice terapêutico (IT). Em geral, se a monoterapia é possível, esta constitui o tratamento preferido, porém, para formas mais severas de epilepsia a politerapia torna-se necessária. O aumento do número de fármacos antiepilépticos (FAEs) disponíveis levou a uma vasta possibilidade de combinações farmacológicas, razão pela qual o presente trabalho de investigação teve por objectivo a avaliação da utilização conjunta de dois fármacos antiepilépticos de nova geração. A lamotrigina (LTG) apresenta um vasto espectro de eficácia, nomeadamente na abordagem de crises parciais com ou sem generalização secundária, de crises tónico-clónicas primariamente generalizadas, de crises de ausência e de crises atónicas. A oxcarbazepina (OXC) é um derivado da carbamazepina com eficácia similar contra as crises parciais com ou sem generalização secundária e generalizadas tónico-clónicas, mas com um perfil farmacocinético menos complexo. A avaliação da interacção entre estas duas moléculas foi efectuada através do método isobolográfico, considerado como método padrão para a detecção de interacções fármacofármaco em modelos animais. De facto, este método experimental permite a avaliação da influência mútua de FAEs administrados em doses efectivas, contribuindo para a construção de hipóteses que poderão depois ser testadas na prática clínica. Assim, procedeu-se à avaliação da potência anticonvulsivante de cada um dos fármacos isoladamente pela determinação da dose eficaz a 50% (DE50) e posterior avaliação do efeito anticonvulsivante das combinações de lamotrigina:oxcarbazepina nas razões fixas de 1:3, 1:1 e 3:1 através do teste do electrochoque máximo. Os resultados obtidos revelaram a existência de um efeito aditivo para a utilização conjunta da lamotrigina com a oxcarbazepina, levando-nos a concluir que os benefícios da utilização clínica desta associação parecem estar apenas dependentes dos efeitos secundários resultantes, supostamente mais ligeiros dada a diminuição das doses a utilizar por comparação com a monoterapia. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,945 | Avaliação da utilização de albumina humana em doentes queimados | Albuminas,Queimaduras,Avaliação | Uma queimadura é uma destruição mais ou menos extensa e profunda da pele, em que ocorre uma necrose tecidular massiva, formação de produtos de degradação tecidular e aparecimento de uma solução de continuidade do envelope protector do corpo. Entre as alterações fisiopatológicas que ocorrem num doente queimado destacam-se o edema, hemorragias e o choque hipovolémico. A restituição do volume vascular, assim como, a oxigenação, a sedação e o aquecimento, constituem o principal objectivo terapêutico na fase inicial de uma queimadura. O tipo de soluto a utilizar na ressuscitação imediata de um queimado é algo bastante controverso e que gera discussão há alguns anos. A utilização de albumina humana no tratamento desta patologia é, portanto, assunto de bastante debate. Há autores que preconizam a utilização de albumina humana depois das primeiras 6 a 8 horas após o acidente, no entanto, outros são de opinião que a sua utilização só deverá ocorrer passadas 24 a 48 horas, sob risco de complicações pulmonares e agravamento do estado geral do doente. Contudo, não se encontra estabelecida para esta situação clínica, a dose a administrar de albumina. Este desconhecimento, leva a que as prescrições sejam efectuadas sem suporte científico, dependendo da sensibilidade e da experiência dos clínicos. Este trabalho pretende avaliar a influência da dose de albumina humana administrada, na variação do valor sérico de albumina de doentes queimados, tendo em conta as perdas de albumina quantificáveis, com o objectivo de contribuir para uma utilização mais racional do fármaco no tratamento desta patologia. Os resultados obtidos demonstraram que a administração de albumina humana, no tratamento da hipoalbuminémia associada às queimaduras, provoca um incremento do valor sérico da proteína na maioria dos doentes da população estudada. Apesar do aumento do valor sérico, em consequência da administração do fármaco, não foi conseguida uma relação causal entre a dose administrada por peso corporal ou por superfície corporal dos doentes e a variação de albuminémia obtida, assim como, com a superfície corporal queimada. As prescrições efectuadas aos doentes da população estudada não previam a excreção de albumina pelas lesões cutâneas provocadas pelas queimaduras, facto que se demonstrou importante para a previsão da dose a administrar a cada doente. Foi também demonstrado, que a população estudada, excreta aproximadamente o dobro da quantidade de proteínas, a nível das lesões cutâneas, quando comparada com as populações referenciadas na literatura. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,947 | Relatório de estágio: mestrado em Análises Clínicas | Laboratórios,Testes de química clínica | No âmbito do Mestrado em Análises Clínicas, o presente relatório reporta o estágio decorrido no Centro Hospitalar de Leiria, EPE. O Serviço de Patologia Clínica responde a diversas áreas do hospital, auxiliando no diagnóstico clínico. Desse modo, o Serviço desenvolve as suas atividades em todas as áreas, respeitando uma política de qualidade ao longo de todo o processo analítico (fase pré-analítica, analítica e pós-analítica). O diagnóstico laboratorial é sempre efetuado num sentido crítico, pelo que, a comunicação entre o laboratório e o médico vem sendo construída, não apenas perante resultados críticos, mas de forma a prestar um serviço de qualidade ao doente. No presente relatório, pretendo referenciar o trabalho desenvolvido ao longo do estágio e evidenciar a utilidade das análises efetuadas no diagnóstico clínico, centrando-me essencialmente nas áreas da Imunologia e da Bioquímica, que serão abordadas detalhadamente. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,948 | Metodologia 4Choice4A® para atendimento em MNSRM: um contributo para a sua validação | Critério de Qualidade,metodologia 4Choice4A®,Automedicação | Contexto: A evolução da automedicação, levantou necessidades formativas enquadráveis em padrões de qualidade, referenciados nas Boas Práticas de Farmácia, nas exigências dos utentes, das associações de doentes e de defesa do consumidor. Existe em vários estudos evidência de aconselhamentos desadequados em automedicação por parte de muitos profissionais farmacêuticos, que levantam questões relativamente à necessidade, segurança e eficácia das soluções terapêuticas propostas aos seus doentes. O crescente alargamento do arsenal terapêutico de MNSRM e a necessidade de elevar os níveis de desempenho profissional nesta área, para uma escala mais alargada e abrangente, encontrará na Metodologia 4Choice4A® uma ferramenta facilitadora e adequada às práticas atuais? Objetivo: Contribuir para o desenvolvimento e validação da metodologia 4Choice4A®, numa medida multidimensional da perceção de critérios de qualidade na dispensa de MNSRM, reportando a apreciação de um painel de peritos, sobre essa metodologia. Método: Para a validação formal de face e de conteúdo deste estudo, optou-se por um método Delphi em duas rondas, recorrendo a um grupo de 30 peritos representantes das várias interfaces relacionadas com o estudo (Farmacêuticos, Médicos, Psicólogos, diretamente envolvidos ou representando instituições académicas, associações profissionais, de doentes, consumidores, indústria farmacêutica, qualidade, comunicação e informação). Foi adotado um questionário auto-administrado constituído por 34 itens referentes aos 32 critérios de qualidade da metodologia4Choice4A® na dispensa de MNSRM mais 2 itens referentes à sua relevância e exaustividade, avaliados numa escala Likert. Na análise dos dados utilizou-se o software SPSS, versão 21. Resultados: O painel Delphi validou 29 dos 32 critérios de qualidade da metodologia 4Choice4A®, validando ainda a sua relevância mas sem consenso sobre a sua exaustividade. Conclusão: A metodologia 4Choice4A®, mostrou-se relevante para atendimento de MNSRM, podendo ser uma ferramenta útil na melhoria do desempenho profissional no atendimento em MNSRM. Contudo foi evidenciada a margem de progressão para o seu aperfeiçoamento no que diz respeito à identificação do doente, à seleção terapêutica, ao seguimento do doente e à redução da sua exaustividade. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,949 | A intervenção do farmacêutico na avaliação da função respiratória | Espirometria,Doença pulmonar | Introdução: As doenças respiratórias são uma das principais causas de morbilidade e mortalidade em Portugal, prevendo-se o aumento da sua prevalência nos próximos anos, contrariamente ao que se verifica com outras patologias, designadamente as cardiovasculares. Objetivos: Este estudo pretendeu verificar se se justifica a realização de espirometria como técnica de rastreio de doenças pulmonares em indivíduos assintomáticos e avaliar a possibilidade de se estabelecer, em farmácia comunitária, um protocolo de atuação com vista à deteção precoce de alterações da função pulmonar. Metodologia: O estudo decorreu na Farmácia Saúde, Figueira da Foz, entre janeiro e julho de 2012, e consistiu na realização do teste da espirometria, precedido de um questionário para recolha de dados sobre a história clínica e tabágica, terapêuticas concomitantes e sintomas respiratórios de cada participante. As espirometrias foram realizadas com o aparelho Vitalograph COPD-6, tendo-se determinado os parâmetros da função pulmonar FEV1, FEV6 e FEV1/FEV6 pré-broncodilatação. Os indivíduos com alterações do padrão normal da função pulmonar foram referenciados ao médico. Resultados: Dos 122 utentes em estudo, 18 apresentaram alteração ao padrão respiratório normal, sendo que 4 já se encontravam em acompanhamento médico. Os restantes 14 foram contactados no sentido de se repetir o teste: 2 não compareceram e 4 apresentaram valores dentro do padrão normal. Dos restantes 8, 2 obtiveram diagnóstico de DPOC e iniciaram medicação adequada, 2 aguardam o resultado da prova funcional respiratória com broncodilatação requisitada pelo médico, 3 aguardam a consulta médica e a 1 não foi diagnosticada doença respiratória. Conclusão: O farmacêutico comunitário dispõe de instrumentos que lhe permitem identificar precocemente alterações da função respiratória dos utentes. Esta deteção precoce de alterações da função pulmonar pode contribuir para a melhoria da qualidade de vida dos utentes na medida em que possibilita um tratamento médico numa fase mais inicial da doença. A análise da amostra em estudo sugere que se justifica a realização da espirometria em indivíduos que apresentem um ou mais sintomas respiratórios, história tabágica positiva ou exposição a substâncias tóxicas. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,953 | Iatrogenia de medicamentos biológicos indicados no tratamento da artrite reumatóide : análise de notificações espontâneas de suspeitas de reações adversas em Portugal | Agentes biológicos -- efeitos adversos,Artrite reumatóide -- terapia | Introdução Os medicamentos biológicos cujas indicações terapêuticas incluem o tratamento da artrite reumatoide (AR) tem sido associados a suspeitas de reações adversas a medicamentos (RAM) graves, incluindo o desenvolvimento ou reativação de infeções graves, reações relacionadas com a infusão, doenças malignas, entre outras. Objetivos Os objetivos deste trabalho são: 1) identificar os medicamentos biológicos indicados no tratamento da AR autorizados em Portugal; 2) identificar a sua exposição populacional; 3) identificar e caracterizar as suspeitas de reações adversas a esses medicamentos; e 4) identificar a prevalência da iatrogenia notificada e comparar com a prevalência da iatrogenia descrita. Métodos O estudo incluiu as notificações espontâneas de suspeitas de RAM a medicamentos biológicos indicados no tratamento da AR enviadas ao Sistema Nacional de Farmacovigilância (SNF) entre janeiro de 2009 e dezembro de 2011, inclusive. O consumo de cada medicamento foi estimado em dose diária definida (DDD) por mil habitantes por dia (DDD/1000 habitantes/dia). A prevalência da iatrogenia notificada foi calculada como a razão entre o número de suspeitas de RAM notificadas a cada medicamento e a estimativa do número de doentes expostos a cada medicamento. A estimativa de prevalência notificada foi comparada com a prevalência descrita no RCM de cada medicamento. Resultados Identificaram-se 9 medicamentos biológicos com indicação terapêutica no tratamento da AR: abatacept, adalimumab, anacinra, certolizumab pegol, etanercept, golimumab, infliximab, rituximab e tocilizumab. O SNF recebeu 451 notificações espontâneas (NE) de suspeitas de RAM: 1, 98, 81, 8, 186, 71 e 6 ao abatacept, adalimumab, etanercept, golimumab, infliximab, rituximab e tocilizumab, respetivamente. O anacinra e o certolizumab pegol não foram objeto de NE. As NE incluíam 3, 207, 199, 25, 586, 173 e 9 suspeitas de RAM ao abatacept, adalimumab, etanercept, golimumab, infliximab, rituximab e tocilizumab, respetivamente. Das 1202 suspeitas de RAM aos medicamentos biológicos, 1082 (90,0%) foram graves. Mais de metade (56,1%) das suspeitas de RAM aos medicamentos biológicos esteve relacionada com “perturbações gerais e alterações no local de administração”, “infeções e infestações”, “afeções dos tecidos cutâneos e subcutâneos” e a “doenças respiratórias, torácicas e do mediastino”. “Reação associada a infusão intravenosa”, “dispneia” e “eritema” foram as três suspeitas de RAM mais frequentes. Entre 2009 e 2011, foram consumidos em Portugal 0,0045, 0,41, 0,55, 0,012, 0,91 e 00095 DDD/1000 habitantes/dia de abatacept, adalimumab, etanercept, golimumab, infliximab e tocilizumab, respetivamente. O anacinra e o certolizumab pegol não foram consumidos. A taxa de notificação de suspeitas de RAM foi 666,67, 504,88, 361,82, 2083,33, 643,96 e 9473,68 no caso do abatacept, adalimumab, etanercept, golimumab, infliximab e tocilizumab, respetivamente. A prevalência de iatrogenia notificada foi na maioria dos casos inferior à prevalência descrita nos RCM dos medicamentos biológicos. Conclusões A prevalência de notificação de suspeitas de RAM aos medicamentos biológicos indicados na AR foi inferior à esperada. A presumível existência de subnotificação de acontecimentos adversos sugere que a monitorização de segurança destes medicamentos pode não estar a ser adequada, tendo em conta o estatuto legal de receita médica restrita dos medicamentos biológicos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,954 | Estudo observacional do perfil de reações adversas à agomelatina | Agomelatina,Medicamento -- efeito adverso | A depressão major é a forma mais grave de depressão e é um problema de saúde altamente incapacitante. Os fármacos antidepressivos constituem a forma de tratamento dominante, mas associam-se a um leque variável de reações adversas que podem comprometer uma boa adesão à terapêutica e consequente levar a um maior risco de recaída ou recorrência da doença depressiva. A agomelatina distingue-se das outras classes de fármacos antidepressivos pelo seu mecanismo de ação único que parece conferir-lhe um bom perfil de aceitabilidade e segurança. É, porém, necessário obter mais informação sobre o perfil de tolerabilidade da agomelatina, especialmente no contexto da utilização clínica alargada a doentes com características muito díspares quer quanto a comorbilidades quer a outras terapêuticas concomitantes. Neste contexto, procurámos realizar um estudo observacional em doentes previamente tratados ou sob tratamento com agomelatina com o objetivo de avaliar a prevalência de efeitos adversos e a forma como a sua manifestação influencia a adesão à terapêutica. Para a realização deste estudo foram entrevistados 25 utentes da Farmácia Luciano e Matos, em Coimbra, que adquiriram a agomelatina no período de Agosto de 2010 a Agosto de 2012. Para identificar as reações adversas ao fármaco em estudo e a forma como a sua ocorrência influenciou a adesão a terapêutica, foi aplicado um questionário especificamente desenvolvido para este efeito. O reduzido número de indivíduos que foi possível incluir neste estudo constituiu uma limitação muito importante com repercussões diretas na análise que foi possível fazer das respostas obtidas. Apesar disto, a análise das respostas recolhidas mostrou que noventa e dois por cento dos inquiridos sentiram efeitos secundários após o início do tratamento com a agomelatina. Não foram reportados efeitos graves, tendo sido os mais referidos a sonolência, dificuldade em adormecer, fadiga, pesadelos/sonhos fora do normal, sensação de aperto no peito, aumento de peso e acordar durante a noite sem conseguir adormecer de novo, todos com uma frequência superior a 30%. Esta elevada prevalência não se refletiu na adesão à terapêutica, uma vez que apenas uma pequena percentagem dos doentes abandonou a terapêutica em consequência da ocorrência de efeitos adversos. O número de efeitos adversos sinalizados foi superior nos elementos de sexo feminino (6,17 6,051 vs. 1,43 0,976, P=0,004), sendo a sensação de aperto no peito a única a ser reportada com uma frequência significativamente superior nas mulheres (100% vs. 0%, P=0,027). Cerca de 61% dos indivíduos consideraram que os efeitos adversos melhoraram ao longo do decorrer do tratamento, independentemente da dose diária de agomelatina. Não foi observada relação entre a interrupção da terapêutica motivada por reações adversas e a dose diária de agomelatina. Nos participantes do estudo que concluíram ou interromperam o tratamento por qualquer motivo, os sintomas de descontinuação manifestaram-se de forma pouco significativa. Apesar das limitações referidas, os resultados deste estudo estão de acordo com os estudos reportados na literatura e sugerem que a agomelatina pode ser uma alternativa útil no tratamento da depressão major, graças ao seu perfil de tolerabilidade, mas justifica-se avaliar a prevalência de efeitos secundários e a taxa de adesão à terapêutica através da realização de mais estudos em doentes com comorbilidades e variados perfis farmacoterapêuticos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,956 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Análises clínicas,Marcadores tumorais | Encarando o organismo como uma caixa negra de um avião, onde todas as informações do que se passa se encerram, as análises clínicas vão funcionar como um descodificador dos sinais e dos sintomas que essa caixa emite, separam o ruído do sinal e dão significado ao sinal. A interpretação de processos fisiológicos , associados à mais alta tecnologia, ajudam a perceber os processos . Esta é a pedra angular das análises clínicas, entre a vida e o tubo de ensaio. O estudo de uma pequena amostra de sangue, pode inferir sobre o estado de saúde do organismo de onde provêm. As análises clínicas, tornaram-se fundamentais na rotina hospitalar, no apoio ao diagnóstico e monitorização de doentes/utentes. O Serviço de Patologia Clínica (SPC) do Instituto Português de Oncologia (IPO) de Coimbra, não foge a esta rotina, dando apoio às mais diversas especialidades, no que toca ao diagnóstico e acompanhamento do doente oncológico. Um laboratório equipado com a melhor tecnologia, divide-se em quatro áreas principais: Hematologia, Química Clínica, Microbiologia e Imunologia Este trabalho, pretende dar a conhecer um pouco do que se faz em Química Clínica e em Imunologia no campo dos Marcadores Tumorais: as rotinas, a tecnologia e a qualidade com que se trabalha para chegar a um resultado no SPC do IPO Coimbra. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,957 | Relatório de estágio do mestrado de análises clínicas | Análises clínicas | Este relatório de estágio do Mestrado de Análises Clínicas pretende descrever todas as atividades nas quais estive envolvida durante o período de estágio no Laboratório de Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. Desta forma, vão ser descritos os métodos usados na execução de análises nas áreas do laboratório em que mais trabalhei hematologia e bioquímica e a respetiva interpretação de resultados. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,958 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Análises clínicas | As Análises Clínicas englobam aquilo que se conhece por meios complementares de diagnóstico, no entanto têm muito mais importância que o adjectivo “complementar” sugere, porque muitas vezes são mais determinantes para o diagnóstico de uma doença do que os exames médicos normais. Um laboratório de Análises Clínicas deve, com os meios à sua disposição, executar as análises sempre com base nas regras da Qualidade, de modo a reduzir ao mínimo a probabilidade de erros e a dar os resultados com a maior confiança possível. É fundamental o controlo rigoroso de cada uma das fases de um processo analítico (pré-analítica, analítica e pós-analítica), desde que se recebe uma requisição médica até ao relatório final da análise. O laboratório deve trabalhar em sintonia com os médicos: ao laboratório cabe obter resultados com qualidade e ao médico cabe saber interpretá-los bem de modo a melhorar a qualidade de vida dos utentes. Neste relatório irei falar um pouco sobre como funciona um laboratório de Análises Clínicas e enfocar-me nas duas áreas de trabalho às quais dediquei mais tempo durante o estágio. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,959 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Análises clínicas | O presente relatório refere-se ao estágio realizado no Instituto Português de Oncologia de Coimbra Francisco Gentil E.P.E (IPOCFG E.P.E), no âmbito das análises clínicas. O estágio teve como principal objectivo a minha integração no Serviço de Patologia Clínica do IPOCFG E.P.E, proporcionando-me a aquisição de habilidades práticas na execução das técnicas laboratoriais, sempre associadas a um conhecimento teórico que me permita fazer a interpretação dos resultados. As áreas aprofundadas neste relatório são a Imunologia e a Hematologia, sendo feita apenas uma referência genérica à Bioquímica e à Microbiologia. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,960 | Relatório de estágio do mestrado de análises clínicas | Análises clínicas | Este relatório tem como objetivo descrever o estágio de caráter profissional do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra, efetuado no Laboratório de Análises Clínicas de Mangualde. Pretendo mostrar a minha atividade laboratorial, em particular na área de Hematologia e Imunologia, e a sua relação com os conhecimentos adquiridos na formação curricular. Apresento uma descrição detalhada destas duas valências, onde faço referência a todos os parâmetros determinados, os respetivos métodos utilizados, a interpretação dos resultados laboratoriais e a sua importância clínica. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,961 | Relatório de estágio : mestrado em análises clínicas | Análises clínicas | O presente relatório descreve todas as atividades nas quais estive envolvida, no âmbito da realização do estágio curricular do curso de Mestrado de Análises Clínicas, da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra. As áreas de Hematologia e de Imunologia, aqui abordadas, foram descritas de forma sintética, embora suficientemente explícita, tendo o cuidado em manter uma certa coerência entre os temas desenvolvidos. De igual modo, foi realizada a respetiva interpretação dos dados laboratoriais. Para além da abordagem às técnicas por mim desempenhadas, foram também descritas a organização diária e o sistema de gestão de qualidade implementados no laboratório, bem como as condicionantes de natureza económica, ambiental, de recursos humanos e de segurança que caraterizam o exercício da profissão. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,965 | Caraterização estrutural de novos triterpenóides pentacíclicos | Ácido oleanólico .,Ácido ursólico,Triterpenóides | Os triterpenos pentacíclicos pertencem ao grupo dos terpenos e, devido às suas diversas atividades farmacológicas, relacionadas com os seus efeitos hepatoprotetores, anti-oxidante, anti-inflamatório e antitumoral, têm sido alvo de um grande interesse científico. Contudo, os resultados apresentados na avaliação biológica de alguns dos triterpenos pentacílcios isolados a partir de produtos naturais, como é o caso do ácido oleanólico e ursólico, têm demonstrado algumas limitações do seu potencial terapêutico. Sendo assim, paralelamente a esta linha de investigação tem existido um crescente interesse, como se pode verificar no volume dos trabalhos recentes, na semi-síntese de derivados, particularmente do ácido oleanólico e ursólico, que tenham um incremento significativo no seu potencial biológico. Desta forma, a elucidação estrutural deste tipo de compostos, principalmente pela utilização da espetrometria de massa e ressonância magnética nuclear devido à valiosa e fácil informação que fornecem sobre a estrutura, tem tido um importante papel na atualidade científica. Neste trabalho pretende-se fazer uma análise estrutural, pela caraterização através da espetrometria de massa e espetroscopia de ressonância magnética nuclear, de dezasseis novos derivados semi-sintéticos dos ácidos oleanólico e ursólico. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,966 | Acompanhamento farmacoterapêutico a doentes com diabetes mellitus numa Unidade de Cuidados de Saúde Primários | Diabetes melittus | Introdução: A diabetes é uma das principais causas de morbilidade crónica e de perda de qualidade de vida, estando previsto o seu aumento nas próximas décadas. A prevalência total da diabetes no nosso país em 2010, segundo o último relatório do Observatório Nacional da Diabetes, foi de 12,4%, o que corresponde a um total de aproximadamente 991 mil indivíduos com idades compreendidas entre os 20 e os 79 anos. O nível de controlo da diabetes mellitus, avaliado pela hemoglobina A1c influencia o risco a longo prazo de complicações macrovasculares e microvasculares. Dada a frequente associação da diabetes com hipertensão arterial/ dislipidémia/ excesso de peso, o controlo destes factores de risco faz parte integrante do controlo da própria diabetes. Objectivo: Avaliar o impacto de um programa de Acompanhamento Farmacoterapêutico a doentes com diabetes mellitus numa unidade de Cuidados de Saúde Primários, mediante a avaliação de resultados clínicos. Métodos: O estudo decorreu de Outubro de 2011 a Junho de 2012 na extensão de Saúde de Alviobeira (Tomar). Cinquenta e oito doentes com diagnóstico de diabetes foram aleatoriamente contactados telefonicamente. Durante este período foram efectuadas entrevistas/consultas farmacêuticas que permitiram a caracterização sócio-demográfica, comorbilidades e estilos de vida da amostra, e avaliados parâmetros fisiológicos/bioquímicos, como a glicemia de jejum, a hemoglobina glicosilada, a pressão arterial e o colesterol total. Para avaliação dos conhecimentos sobre a doença aplicámos à nossa amostra o questionário de Berbés. A qualidade de vida foi avaliada pela aplicação de um questionário de Avaliação da Qualidade de Vida de um doente diabético (DQOL). Foi, igualmente calculado o custo diário da terapêutica/doente. Os parâmetros fisiológicos/bioquímicos e os questionários efectuados na 1ªentrevista/consulta foram repetidos na última entrevista/consulta. Resultados: Dos 58 doentes contactados, apenas 22 doentes aceitaram participar no estudo. Os restantes 36 recusaram ou foi impossível o contacto. Todos os doentes que aceitaram participar eram diabéticos tipo 2. A idade média dos doentes foi de 70,4±7,4 (Média±DP). A altura média de 163,3±10,8 cm. A média do peso registado foi de 77,3±15,8 Kg, a média do perímetro abdominal de 106,7±8,9 cm e o valor médio do IMC foi de 28,9±4,9 Kg/m2. Relativamente a comorbilidades, 100% dos doentes eram hipertensos e mais de metade (59,1%) tinham hipercolesterolemia. Foram realizadas várias intervenções ao longo de todo o processo de Acompanhamento Farmacoterapêutico, tendo-se registado xi uma média de 2,6±0,7 (Média±DP) por doente na 1ªentrevista/consulta, de 1,2±1,0 na 2ª entrevista/consulta, de 2,1±1,1 na 3ª de 0,6±0,8 nas 3ª e 4ª entrevista/consulta, respectivamente. O sucesso das intervenções realizadas rondou os 60% nas 3 primeiras entrevistas/consultas e de 80% na 4ªentrevista/consulta. Analisando as diferenças das variáveis no início e no fim de estudo, verificamos que apresentaram significado estatístico, os conhecimentos sobre a doença, a glicemia de jejum, a hemoglobina glicosilada A1c e a pressão arterial sistólica. A pressão arterial diastólica aproximou-se à significância. Na última entrevista o valor médio de HbA1c foi de 6,6±0,8 (Média±DP). Conclusões: o processo de Acompanhamento Farmacoterapêutico aos doentes diabéticos incluídos neste estudo melhorou o controlo da sua doença, através da melhoria dos seus conhecimentos, da optimização da sua terapêutica e da diminuição dos resultados clínicos negativos, resultando num valor médio final de HbA1c muito próximo do recomendado (HbA1c < 6,5%). | Ciências Médicas e da Saúde |
10,967 | Modificações estruturais de compostos polifenólicos glicosilados e modulação das suas actividades antioxidantes | Estilbenos,Biocatálise | Os compostos polifenólicos glicosilados são largamente distribuídos na Natureza, sendo compostos biologicamente activos e, ainda, apresentam outras propriedades interessantes. Em particular, os estilbenos glicosilados, como a polidatina (substrato objecto de estudo neste presente trabalho), exercem inúmeras actividades biológicas, sendo utilizados em preparações alimentares, farmacêuticas e cosméticas. A modificação de um dos grupos funcionais, em específico, destes compostos polifenólicos glicosilados por métodos químicos revela ser uma tarefa complexa, por isso, neste trabalho, métodos enzimáticos foram empregues. Efectivamente, estes últimos fornecem um processo eficaz para obter derivados mono- e diacilados com bons rendimentos. Além disso, a crescente procura de processos químicos mais aceitáveis de um ponto de visto ambiental e económico tornou a biocatálise uma ferramenta tecnológica atractiva. Assim, a catálise biológica é muitas vezes referida como um “pilar” da Química Verde. Adicionalmente, a catálise enzimática apresenta inúmeras vantagens que superam, muitas vezes, as suas desvantagens. Daí a sua utilização cada vez mais relevante em diversas áreas, nomeadamente na Indústria Farmacêutica. Este trabalho tem como objectivo geral estudar modificações estruturais de um estilbeno glicosilado, através da biocatálise, de modo a melhorar as suas propriedades biológicas e farmacológicas. Verificou-se que as duas lipases testadas, a lipase B de Candida antarctica e a lipase de Pseudomonas cepacia, aceitam a polidatina como substrato. Deste modo, a acilação enzimática regiosselectiva da polidatina por estes dois biocatalisadores, em solventes orgânicos adequados e utilizando diversos dadores de acilo, deu origem não só a derivados monoacilados, principalmente, mas também a derivados diacilados. Com efeito, os resultados obtidos indicam que tanto a CAL-B como a lipase PS possuem a capacidade de esterificar, selectivamente, um ou vários grupos hidroxilo da porção glicosilada da polidatina, originando mono- e diésteres com razoável regiosselectividade e bons rendimentos. A partir da análise dos espectros de Ressonância Magnética Nuclear bem como dos espectros de Infravermelho, foi possível verificar se os novos derivados sintetizados eram os pretendidos e localizar as posições de acilação na polidatina. Na verdade, os resultados confirmam que tanto a CAL-B como a lipase PS dirigem preferencialmente a acilação na porção glicosídica da polidatina. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,968 | Marcadores de neoplasia e de infeção por vírus JC em cólon humano | Neoplasias colorrectais,Poliomavirus JC humano | Introdução - O cancro colo-retal (CCR) é o segundo tipo de cancro mais prevalente em Portugal, em ambos os sexos e o terceiro a nível mundial, apenas no sexo masculino. Julga-se que a infeção pelo poliomavírus humano JC (JCV) estimula o desenvolvimento tanto de CCR como de outros tipos de cancro. Esta infeção surge na infância, podendo persistir durante toda a vida do indivíduo. A medula óssea é um reservatório bastante importante do JCV e é o local mais provável da transformação neurotrópica deste (Tan et al., 2009). A expressão do genoma do JCV, em diversos ensaios com animais, resultou na indução de vários tumores. O antigénio-T (Ag-T) e a agnoproteína, proteínas virais, cooperam juntas para a oncogénese do JCV. A maioria dos adenocarcinomas do cólon expressa proteínas virais (Del Valle & Khalili, 2010). As mutações no genoma da p53 são das alterações genéticas mais comuns no desenvolvimento do CCR (Iacopetta, 2003). Objetivos - Estudar polimorfismos da p53 em CCR com JCV e tentar relacionar lesão e vírus. Material e métodos - Em amostras de tecido fresco de CCR e de mucosa adjacente e não adjacente a este (n=66) (grupo de estudo) e de mucosa normal (n=21) (grupo controlo), avaliou-se a presença de sequências de DNA do JCV, pela técnica de Nested-PCR e estudaram-se polimorfismos da p53, pelas técnicas de PCR, purificação e sequenciação. Resultados e discussão - A estimativa de um maior “risco” de sequências de DNA do JCV ocorre: em adenocarcinoma (RC=14.40; IC95%=3.286-63.11), em mucosa adjacente (RC=6.857; IC95%=1.265-6.481) e em mucosa não adjacente (RC=4.333; IC95%=1.155- 16.25) versus mucosa normal (grupo-controlo); tendencialmente, em adenocarcinoma e em mucosas, adjacente e não adjacente, mais do que em mucosa normal. Conclusões - Na mucosa colo-retal, a presença de JCV é a exceção em grupo-controlo e a regra em grupo com adenocarcinoma, parecendo haver tropismo do vírus JC por esta lesão. Ao confirmar-se a tendência para um maior número de mutações da p53 em adenocarcinoma e em mucosas, adjacente e não adjacente a esta lesão, as terapias génicas profiláticas, moduladoras e curativas podem ser muito importantes. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,973 | Avaliação da viabilidade económico-financeira de equipamentos com tecnologias SAW | Projetos de investimento,Análise estratégica,Plano de negócios,Análise da rendibilidade,Critério de avaliação | O presente relatório pretende apresentar o trabalho desenvolvido durante o estágio curricular integrado no Mestrado em Gestão da Faculdade de Economia da Universidade de Coimbra. O estágio decorreu na área da ISA Academy na empresa ISA - Intelligent Sensing Anywhere, S.A., de 10 de Fevereiro a 20 de Junho de 2014. Começa-se por se expor uma breve revisão das principais metodologias de elaboração e avaliação económica e financeira de projeto. Tendo como base as tarefas realizadas durante o Estágio, apresenta-se a avaliação da rendibilidade de um projeto de investimento específico, nomeadamente o SeeSAW, dando especial destaque a consideração dos seus critérios de avaliação, terminando-se com algumas considerações finais acerca da respetiva viabilidade. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,974 | Relatório de estágio: mestrado em Análises Clínicas | Análises clínicas | O documento pretende abordar de forma estruturada, todos os aspectos inerentes à realização do estágio curricular em análises clínicas no âmbito do Mestrado em Análises Clínicas. O estágio decorreu no Serviço Sangue e Medicina Transfusional do Centro Hospitalar Universitário de Coimbra. Pretende elucidar sobre aspectos técnico-científicos, realçando a importância da aplicação dos conhecimentos teóricos nas diversas situações prácticas que surgem diariamente nas rotinas laboratoriais. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,975 | Relatório de estágio: mestrado em Análises Clínicas | Análises clínicas | Os testes laboratoriais têm vindo a ganhar cada vez mais importância no apoio ao diagnóstico clínico. Atualmente, os laboratórios servem-se de equipamentos automatizados para processar um maior número de amostras de uma forma mais rápida, com menos custos e menos erros laboratoriais associados. O mestrado em Análises Clínicas culmina com a realização de um estágio de caráter profissional com o objetivo de proporcionar um primeiro contacto com a organização do trabalho diário e as suas condicionantes num laboratório de análises clínicas. A elaboração deste relatório resulta da realização do estágio no Laboratório de Análises Clínicas Silva & Monteiro e tem como intuito demonstrar o fluxo de trabalho nas diferentes valências deste laboratório e a aplicação e importância das análises realizadas nas áreas da bioquímica e da imunologia no diagnóstico e monitorização de diversas patologias. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,977 | Desenvolvimento de nanopartículas para o tratamento do cancro | Neoplasias,Quimioterapia,Sistemas de distribuição de medicamentos,Nanopartículas | O cancro é uma das doenças mais emergentes do século XXI, manifestando-se principalmente nos países desenvolvidos. As terapias de eleição para o tratamento do cancro têm sido a quimioterapia, a radioterapia ou a cirurgia, estando estas associadas a uma taxa reduzida de sobrevivência e a efeitos secundários significativos. Para além disso, é com frequência que a quimioterapia e a radioterapia, não são suficientemente eficazes na eliminação do tumor, muitas vezes devido ao desenvolvimento de resistência aos agentes quimioterapêuticos e à radioterapia. De forma a superar tal problema, a combinação de fármacos tem sido prosseguida como estratégia para inibir simultaneamente múltiplas vias que regulam processos subjacentes à resistência e à progressão do tumor, tendo como objetivo final a redução das doses empregadas, minimizando os efeitos secundários graves associados à quimioterapia. No entanto, o sucesso é muito dependente de estratégias que permitam a entrega da combinação de fármacos no local de uma forma específica. As plataformas nanotecnológicas para a entrega de fármacos, como é o caso dos lipossomas, oferecem uma abordagem interessante. Estes nanossistemas permitem o controlo adequado da farmacocinética e biodistribuição, essencial para garantir que os fármacos alcançam o local do tumor simultaneamente, prevenindo, ao mesmo tempo, uma elevada toxicidade sistémica. No presente trabalho, foram propostas duas nanopartículas PEGuiladas de base lipídica, para a entrega direcionada de combinações de fármacos. Após várias alterações, uma combinação de um cistostático com um dos lípidos bioativos, foi encapsulada em nanopartículas. Como prova de princípio, as propriedades dos nanosistemas desenvolvidos foram avaliadas, através da determinação do tamanho, eficiência de encapsulação, e retenção do fármaco em diferentes condições, como medida de estabilidade. Além disso, a entrega e o potencial citotóxico foram avaliados utilizando uma linha de cancro da mama triplo negativa, MDAMB- 231, e uma outra linha celular, as MDA-MB-435S. Os resultados demonstraram que as formulações desenvolvidas contendo a combinação do agente quimioterapêutico com o lípido 1 ou lípido 2, partilham uma estabilidade semelhante, embora ligeiramente mais baixa que a formulação contendo apenas o citostático. De salientar, a presença dos lípidos bioativos não interfere com a entrega intracelular, como foi avaliado através de lipossomas encapsulando calceína. Além disso, foi demonstrado que a eficácia citotóxica aumenta para os lipossomas contendo a combinação, comparativamente com o agente citostático lipossomal, uma característica dependente do tempo de incubação, IX permitindo uma morte celular acima dos 90% num período de 24h de incubação. No entanto, foi demonstrado que lipossomas com o lípido 1, co-encapsulando metade da quantidade de agente citostático, apresentam um efeito semelhante ao dos controlos encapsulando o dobro da dose do mesmo agente. Isto é importante na medida em que se pode reduzir a dose do agente quimioterapêutico administrado, conduzindo a uma redução da toxicidade sistémica, comprometendo minimamente a sua eficácia. Em conclusão, os resultados deste projeto representam uma importante contribuição para o desenvolvimento de combinações de fármacos direcionados utilizando nanosistemas à base de lípidos. Para além disso, estes desvendam o caminho para uma entrega direcionada de lípidos bioativos em combinação com fármacos quimioterapêuticos de baixo peso molecular. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,978 | Células estaminais pluripotentes induzidas no estudo de mecanismos de doença e avaliação de novas terapias | Células estaminais | A obtenção de células estaminais pluripotentes induzidas (piscas) a partir da reprogramação directa de células somáticas foi um dos avanços mais importantes da biologia, nos últimos anos. As iPSCs são células somáticas que foram reprogramadas para um estado de pluripotência através da introdução de um conjunto de factores específicos. Podem ser obtidas a partir de diferentes tipos de células, como os fibroblastos, queratinócitos, hepatócitos e células do sangue. As iPSCs são similares às células estaminais embrionárias, quer na morfologia e na expressão de marcadores de pluripotência, como também na capacidade de desenvolver teratomas. Como células estaminais pluripotentes podem diferenciar-se em todas as linhagens celulares, incluindo neurónios, células do sangue e células cardíacas. O progresso da investigação no domínio das iPSCs veio demonstrar o seu enorme potencial e adquiriu uma considerável relevância científica, social e económica por contribuir para o conhecimento dos processos do desenvolvimento dos organismos vivos e os mecanismos de regeneração, e potencialmente vir a permitir transplante celular, a descoberta de novos fármacos, a identificação dos mecanismos de doenças e seu tratamento. Apesar dos imensos problemas técnicos que ainda têm que ser ultrapassados, nomeadamente no que diz respeito à segurança e eficácia destas células, espera-se que a sua utilização venha a trazer benefícios inimagináveis, em medicina humana. Nesta dissertação faz-se uma revisão da literatura sobre os diferentes tipos de células estaminais e as suas características específicas, focando-se nas células estaminais pluripotentes induzidas. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,981 | Preparação de novos derivados esteroides via reações de cicloadições dipolares | Medicamentos,Esteróides | O trabalho apresentado teve por objetivo principal a síntese de novos esteroides pentacíclicos através de reações de cicloadição 1.3-dipolar e 1,7-dipolar. Para alcançar este objetivo, foram estudadas reações de cicloadição de aziridinas, alenos e iões metil diazafulvénio com o 16-DPA. Em primeiro lugar realizaram-se reações com as aziridinas usando metil vinil cetona como dipolarófilo por esta ser semelhante à zona onde queríamos realizar a cicloadição no esteroide, servindo, por isso, de modelo para as reações das aziridinas com o 16-DPA. Assim as melhores condições encontradas para o modelo foram estudadas usando o 16- DPA como dipolarófilo. Estas reações não foram bem-sucedidas pois nunca se obteve um produto apesar das evidências de reação observadas. Procedeu-se também a realização de uma reação com um aleno, o buta-2,3-dienoato de benzilo, com a metil vinil cetona, uma reação já descrita, que serviria também como modelo para a reação deste aleno com o 16-DPA. A reação do esteroide com o aleno foi efetuada, mas não houve evidências de reação neste caso. Por fim procedeu-se a reação de iões metil diazafulvénio com o esteroide, através de uma reação de cicloadição do tipo [8π+2π], tipo de cicloadição já descrita entre estes iões e porfirinas. Obteve-se uma nova classe de esteroides por via da cicloadição 1,7-dipolar, uma via nunca antes utilizada com esteroides. A reação efetuada foi regio- e diastereosseletiva, obtendo-se um único produto com elevados rendimentos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,983 | Avaliação da conformidade de prescrição de antibióticos em doentes com pneumonia adquirida na comunidade face às directrizes da Sociedade Portuguesa de Pneumologia: protocolos de antibioterapia a adoptar | Pneumonia,Terapia por medicamentos,Antibióticos | A pneumonia continua a ser umas das patologias respiratórias mais relevantes com uma taxa crescente de internamento desde 2002 e representa a primeira causa de morte em Portugal. Foram elaboradas orientações clínicas para o tratamento de pneumonia pelas sociedades científicas internacionais e em Portugal pela Sociedade Portuguesa de Pneumologia, tendo em conta a prevalência dos agentes patogénicos. Com este estudo pretendeu-se avaliar a conformidade de prescrições a doentes internados com diagnóstico de pneumonia de acordo com as orientações clínicas nacionais bem como o custo da antibioterapia. Foram estudados 50 doentes internados no serviço de Medicina do Hospital da Horta entre Janeiro 2012 e Dezembro de 2012. Consoante o tipo de pneumonia diagnosticado foi adoptado tratamento em monoterapia ou antibioterapia combinada. O maior número de internamentos situou-se na faixa etária de mais de 80 anos e o tempo mínimo de internamento foi de 3 dias e o máximo de 58 dias. A amoxicilina+ácido clavulânico foi o antibiótico mais prescrito tanto em monoterapia como em terapia combinada. O tempo mínimo de tratamento, com evolução clínica favorável, em monoterapia foi de 3 dias e o máximo de 14 dias, e em terapia combinada, o tempo mínimo de tratamento foi de 5 dias e a máximo de 26 dias. Em monoterapia, apenas 4 doentes efectuaram a mudança da via de administração endovenosa para a via oral, enquanto em terapia combinada foram 9 doentes. Não houve conformidade nas prescrições, sobretudo em monoterapia, e na escolha da via de administração para início de antibioterapia. Todavia, verificou-se que a duração média do tratamento está em conformidade com as linhas orientadoras da SPP. Após análise dos dados relativos a este estudo retrospectivo, propõem-se medidas que visam racionalizar a antibioterapia no doente diagnosticado com PAC. Os resultados identificaram a necessidade de elaborar linhas orientadoras de tratamento adoptadas à realidade local, de modo a melhorar os resultados clínicos, a evitar o aumento de tempo de internamento e também com a perspectiva da minimização de custos com antibióticos. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,985 | Barreiras e limitações de uma unidade de farmacocinética clínica | Farmacocinética,monitorização de medicamentos | Objectivo: Identificar os fatores que limitam e constituem uma barreira na unidade de farmacocinética clínica hospitalar. Métodos: Foi realizada pesquisa em literatura especializada e entrevistas a profissionais de saúde hospitalares. Resultados: Os diferentes fatores que limitam ou impedem o uso da farmacocinética na monitorização terapêutica de medicamentos (TDM) na prática clínica podem ser distribuídos por quatro categorias: tecnologia, ambiente, economia e doente. De acordo com a bibliografia e com a opinião dos peritos entrevistados, existem várias estratégias para melhorar o acesso e o uso racional da monitorização farmacocinética em função dos desafios encontrados em cada categoria. Em equipas multidisciplinares e com funções polivalentes nem sempre é fácil implementar boas práticas. Não depende apenas da motivação do farmacêutico e dos restantes profissionais de saúde, mas depende também de ações de carácter financeiro e político das várias instituições, como os hospitais, as universidades e as entidades que regulam os serviços de saúde. É preciso conhecimentos especializados e competências para executar fiavelmente o ajuste farmacocinético da dose As mais-valias da TDM para os doentes e para o hospital foram salientadas durante a elaboração da pressente dissertação e são confirmadas pelo elevado nível de aceitação depois de implementar a TDM e a boa relação obtida nos estudos de custo-benéfico, sendo ambas boas razões para implementar o processo com sucesso. Conclusão: Os limites e as barreiras podem surgir em qualquer uma das três fases do processo de TDM: pré-analítica, analítica e pós-analítica, sendo esta última a que requer mais atenção por envolver necessariamente recursos humanos qualificados e devidamente treinados. Palavras–chave: Farmacocinética clínica; Monitorização terapêutica dos medicamentos; Farmacêutico clínico; Processo de monitorização farmacocinética. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,987 | Derivatização de esteróides assistida por micro-ondas | Esteróides | O acetato de 16-desidropregnenolona (16-DPA) é um esteroide que apresenta um esqueleto muito versátil, que permitiu a síntese de diferentes fármacos esteróides, tais como dexametasona, betametasona e inibidores da 5α-redutase. Existem poucos exemplos na literatura científica da reação de Diels-Alder envolvendo este composto como dieno ou como dienófilo, utilizando irradiação de micro-ondas (MO). Com o objetivo de sintetizar novos derivados do acetato de 16-desidropregnenolona utilizaram-se 1,3-diarilpropenonas e o 1- acetilciclopenteno como modelo de reatividade e foram exploradas as suas capacidades, como dieno ou como dienófilo, na reação de Diels-Alder sob condições de reação diferentes. A influência do solvente e dos catalisadores foram estudados sob aquecimento convencional e sob irradiação de micro-ondas. Após a realização do estudo das condições de reação utilizouse o esteroide 16-DPA como dienófilo e o ciclopentadieno, ou o 2,3-dimetil-1,3-butadieno como dienos. As suas estruturas dos produtos obtidos foram elucidadas por análise comparativa com o reagente utilizando ressonância magnética nuclear de protão e espectrometria de massa. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,988 | Semi-síntese de novos derivados flavonóides bioactivos: estudo de reações de acilação e desacilação regiosselectivas recorrendo a lipases como catalisadores | Polifenóis,Lipases | Os compostos polifenólicos são importantes entre os produtos naturais pois possuem várias atividades biológicas, principalmente atividade antioxidante. No entanto, a sua baixa estabilidade e solubilidade em meio lipofílico, dificulta o seu uso na indústria farmacêutica. A acilação enzimática regiosselectiva usando lipases tem sido sugerida como um caminho interessante e promissor para melhorar as propriedades dos compostos polifenólicos porque não altera a sua atividade biológica. Neste trabalho realizou-se a semi-síntese de novos derivados bioativos através de reações de acilação e desacilação regiosselectivas recorrendo a lipases como catalisadores. Foi possível observar que a seletividade e a velocidade da reação são dependentes da estrutura do substrato, do solvente e da enzima. Após otimização das condições reacionais, foram isolados derivados acilados do resveratrol, da naringenina e do seu derivado glicosilado, a naringina. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,989 | Preparação de novos derivados flavonóides com potencial atividade biológica | Flavonas,Quercetina | Os flavonóides são uma das mais importantes famílias de compostos fenólicos presentes na natureza, não só pela sua abundância no reino vegetal, mas também pelo amplo conjunto de atividades biológicas que lhes têm sido atribuídas. Deste modo, a síntese de novos derivados flavonóides continua a ser alvo de intensas pesquisas, com o intuito de se sintetizarem moléculas com potencial aplicação industrial, nomeadamente para a indústria farmacêutica. A 3, 3`,4`,5,7-penta-hidroxiflavona (quercetina) pertencente ao grupo dos flavonóis tem vindo a cativar o interesse dos químicos orgânicos devido ao seu grande potencial antioxidante, estando, no entanto, associada a uma escassa biodisponibilidade. Tal razão, tem levado à síntese de moléculas derivadas da quercetina que conservem o mesmo potencial biológico, mas aumentem a sua biodisponibilidade. Contribuir para tornar a molécula da quercetina mais biodisponível, modificando, quimicamente, os diferentes grupos hidroxilo de forma a promover a sua acetilação e desacetilação seletivas, foi o objetivo principal deste trabalho. Nessa perspectiva, esta dissertação foi dividida em cinco capítulos. Nos dois primeiros é feita uma revisão bibliográfica. No primeiro referem-se os produtos naturais na terapêutica, dando-se especial atenção aos flavonóides. O segundo capítulo versa a ação biológica específica dos flavonóides. No terceiro é feita uma breve revisão sobre o composto em estudo, quercetina, e é estudada a sua modificação química por acetilação e desacetilação seletivas. O quarto capítulo é consagrado às conclusões e, finalmente, no quinto capítulo é descrita a parte experimental. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,994 | Desenvolvimento e caracterização de uma formulação para administração tópica de anestésicos locais | Anestésicos locais,Administração tópica | Os anestésicos tópicos são muito importantes para tratamento da dor local em procedimentos cirúrgicos e cosméticos. No entanto, de forma a produzirem o seu efeito terapêutico estes têm que ser veiculados numa formulação apropriada que permita a sua administração e a sua chegada ao local de ação na dose certa. Por este motivo, o principal objetivo desta tese é o desenvolvimento e caracterização de uma formulação tópica de dois anestésicos locais com recurso a um método estatístico, o desenho de experiências. Foram testados diversos fatores (% de gelificante, % de neutralizante e presença das substâncias ativas) e foi determinada a sua influência na viscosidade, pH e condutividade das duas formulações estudadas, bem como na libertação inicial e final de lidocaína e prilocaína a partir dessas formulações. Através do desenho de experiências foi possível estudar vários fatores em simultâneo e respetivas interações, bem como otimizar as formulações, obtendo modelos estatísticos robustos. Os estudos realizados permitiram alcançar formulações que preenchessem os requisitos que foram definidos inicialmente no Target Product Profile. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,995 | Determinação de fluoroquinolonas em tecido muscular de aves | Aves,Fluoroquinolonas,Análise de alimentos,Resíduos de medicamentos,Medicamentos de uso veterinário | O objetivo deste estudo foi avaliar a contaminação de antibióticos do grupo das fluoroquinolonas (FQs), nomeadamente a norfloxacina (NOR), a ciprofloxacina (CIP) e a enrofloxacina (ENR) em 88 amostras de frango e 12 amostras de peru à venda em Portugal continental, em talhos e pequenas e grandes superfícies comerciais. Foram recolhidas amostras para analisar em vários distritos do país, Aveiro, Beja, Bragança, Castelo Branco, Coimbra, Évora, Faro, Leiria, Lisboa, Porto, Santarém, Setúbal e Viseu, de forma a obter uma amostra representativa. No caso dos frangos, 72 (81,8%) amostras estavam contaminadas. Dentro das quais, 24 (33,3%) estavam contaminadas com CIP, 16 (22,3%) com ENR e 32 (44,4%) com CIP e ENR. Das 88 amostras de frango, 3 excediam o limite máximo de resíduo, 100 μg/Kg, tendo em conta que este valor é estipulado através da soma da CIP com a ENR. Nenhuma das amostras estava contaminada com NOR. Das 12 amostras de peru analisadas, 11 (91,6%) estavam contaminadas; dentro das amostras contaminadas, 6 (54,5%) continham CIP, 2 (18,1%) continham ENR e 3 (27,3%) continham CIP e ENR. Os resultados deste estudo demonstraram que os antibióticos continuam a ser usados por parte dos produtores de forma indiscriminada, levando a graves problemas de saúde pública. | Ciências Médicas e da Saúde |
10,997 | Monitorização da segurança dos medicamentos biológicos oftálmicos | Preparações farmacêuticas,Avaliação de medicamento,Oftalmologia,Doenças do olho,Terapêutica por medicamentos,Produtos biológicos | Introdução Os medicamentos biológicos têm características distintas dos restantes medicamentos que tornam o seu perfil de segurança único, requerendo diferentes necessidades de monitorização. Recentemente, três medicamentos biológicos foram aprovados na área da oftalmologia. Objetivo O objetivo deste estudo é monitorizar a segurança dos medicamentos biológicos oftálmicos através da identificação e caracterização dos medicamentos biológicos; caracterização do alvo terapêutico e indicações terapêuticas para as quais estão indicados; identificação da iatrogenia medicamentosa associada; e identificação dos indicadores de segurança que permitam monitorizar a segurança do tratamento na prática clínica. Métodos A identificação dos medicamentos biológicos foi feita a partir da base de dados Infomed. A caracterização dos medicamentos e das respetivas indicações terapêuticas foi baseada no respetivo resumo das características do medicamento (RCM). O estudo da iatrogenia medicamentosa foi dividido em dois períodos: pré e pós-comercialização. No período précomercialização foram revistos os ensaios clínicos aleatorizados e controlados (RCT) de fase III. No período pós-comercialização foram revistos os RCT e os casos de reações adversas descritos na literatura e analisaram-se as notificações espontâneas suspeitas europeias desde a data de aprovação de cada medicamento até 31 de maio de 2013. Resultados Identificaram-se três medicamentos biológicos indicados em oftalmologia: pegaptanib, ranibizumab e VEGF Trap-eye. Estes são inibidores do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e estão indicados no tratamento da degenerescência macular relacionada com a idade (DMI) neovascular, edema macular diabético (EDM) e edema macular secundário de oclusão do ramo da veia central da retina (ORVCR) e oclusão da veia central da retina (OVCR). A percentagem de doentes que sofreu um evento adverso foi elevada. Porém, a proporção de eventos adversos graves foi baixa. Os eventos adversos oculares foram os mais frequentes, sendo os mais significativos flocos vítreos, hemorragia ocular, pressão intraocular (PIO) aumentada, dor ocular e opacidade do vítreo. Eventos adversos como endoftalmite foram associados ao procedimento de injeção. Não foram identificados eventos adversos sistémicos significativos. Os eventos adversos tromboembólicos e os relacionados com a iv inibição sistémica do VEGF (hipertensão e hemorragia não-ocular) foram numericamente superiores nos grupos de doentes tratados com os medicamentos em estudo, contudo não foram significativos. O estudo dos dados pós-comercialização confirmou a incidência de eventos como PIO aumentada, dor ocular, hemorragia ocular e endoftalmite; e identificou novos riscos como rasgaduras do epitélio pigmentado da retina (EPR) e reações de hipersensibilidade. Parece existir uma relação entre a incidência de alguns efeitos adversos com fatores intrínsecos ao doente. Não existem dados que avaliem a incidência de eventos adversos tromboembólicos e os relacionados com a inibição sistémica do VEGF na prática clínica, nem o impacto desta terapêutica em longo tempo de latência. Não foram identificadas orientações sobre monitorização da segurança do tratamento com estes medicamentos. Conclusões Existem efeitos adversos associados ao tratamento com os medicamentos biológicos oftálmicos que devem ser monitorizados na prática clínica. Devido à falta de orientações na prática clínica que permitam monitorizar estes, deve ser elaborado um plano de monitorização da segurança durante o tratamento | Ciências Médicas e da Saúde |
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